Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Симпатические холинергические влияния на работоспособность и кровоснабжение скелетных мышц

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Симпатические холинергические влияния на работоспособность и кровоснабжение скелетных мышц"

V 'О -V

МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ М. В. ЛОМОНОСОВА

Биологический факультет

На правах рукописи

МЕДВЕДЕВА Наталия Александровна

УДК 612.133 : 612.18 : 612.817

СИМПАТИЧЕСКИЕ ХОЛИНЕРГИЧЕСКИЕ ВЛИЯНИЯ НА РАБОТОСПОСОБНОСТЬ И КРОВОСНАБЖЕНИЕ СКЕЛЕТНЫХ МЫШЦ

03.00.13 — физиология человека и животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени дсктсра биологических наук

Мсск'-а —

! 989

Работа выполнена на кафедре физиологии человека и Биологического факультета ИГУ им . И.В.Ломоносова.

зивотныз

Официальные оппоненты:

доктор медицинских паук, профессор , член-корреспондент АП СССР и АНН СССР

В.И.МЕДВЕДЕВ

доктор биологических паук, профессор Е.П.НАПУХИН

доктор биологических паук, профессор В.С.КУЛАЕВ

Ведущая организация : кафедри физиологии человека и животт Киояогического факультета Ябнипградекого государственного университета,

Зацита состоится, Ï7 амд 1989 г. в У . J часов на заседании специализированного Совета Д 053.05.35. по присуждение ученой степени доктора биологяЧескианаук в Московском государственной университете ни. H .В .Ломоносова но адресу: 115099-, г. Носква, Ленинские горы, биологические

факультет нгу. ' '

1

С диссертацией полно ознакомиться в библиотеке биологического факультета ИГУ .

/< уул/'у/т

Автореферат разослан ' [. trlCC'/Ji ¿'С{У[ 1?в9 г.

Ученый секретарь специализированного Совета, н.Б.федотова

кандидат биологических наук

1ШЕДКЦИК

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОВЛЕ1Ш. Одной из важнейших и в то же время трудно решаемых проблем физиологии кровообращения является организация центральных механизмов, регулирующих деятельность сердечно-сосудистой системы. Сложная система регуляторных механизмов определяет в каждый момент оптимальные соотношении между производительностью сердца, просветом сосудистого русла, объемом циркулирующем крови. Постоянный нериний и гуморальный контроль, под которым находится сердечно-сосудистая система организма, обеспечивает в изменяющихся условиях среды и активности, поддержание адекватного кровоснабжения всех органов (Хаютин, Конради, 19В6; Теплое, 19S6; Демченко, 19S6, ВицлеО, 19В6; Когпег, 1971; Rowell, 1974; Smith, 1974).

Ьопрос адекватности кровоснабжения тканей и органов их функциональному состоянию является одним из главных вопросов физиологии кровообращения. Исследование механизмов

гемодииамических сдвигов при различного рода поведенческих и эмоциональных реакциях, а также участие их в реакциях сомато-вегегатианого сопряжения рассматривается как актуальное и перспективное направление в области центральной регуляции кровообращения (Ткаченко и ар. 1937). Одной из реакций сердечнососудистой ■ системы, обеспечивающих адекватное вегетативное обеспечение эмоционального поведения, является реакция холинергической uiзодилятации. Эта расширительная реакция возникнет в сосудах' скелетных мышц животных и ' человека при различного рода эмоцпональио-поведенческих реакциях, известных под названием реакции "защиты", и является проявлением активации симпатической системы в этих условиях (Abrahams, Hilton, 19S8; Uvnas, 1960, 196Ь; Родионов, 1979; Bell, 19U3). Механизм реализации этой реакции остается неясен. Известно, что кроме сосудистой реакции симпатические холинергические влияния вызывают изменение метаболизма поперечно-полосатых мышечных колокол, окружающих сосуд ( Ленькона и яр., ¡969; Бердина, Родионов, 197 3). Имеются данные о взаимосвязи сосудистой и метаболической реакции, ко механизм их сопряжения остается неизвестным, функциональное значен!!!? изменения метаболизма и кропотска, виячиаемнг холн.чергическими симпатическими воздействиями, остается малопонятным.

- г

lJHJJb РАБОТЫ состояла в изучении механизма реализации расширительной реакции, возникающей в скелетных мыпцах млекопитающих живбтных и человека поп действием холинергических симпатических ' влияний активируемых в ходе эмоционально-поведенческих реакций, типа реакции "защиты"! в изучении взаимосвязи сосудистой и метаболической реакций, вызываемых этим воздействием; а также в исследовании функционального значения обеих реакций.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи :

1. Исследовать изменение работоспособности скелетных мысщ человека и животных при воздействиях, вызывающих в неработаюиих скелетных мышцах активацию анаэробного метаболизма и холинергический расширительный эффект в сосудах атмх мышц.

г. Изучить взаимосвязь мешу изменение!! метаболизма и кровотоком в скелетных мыицах, вызываемых симпатическими холннергическими воздействиями.

3, Проанализировать возможный вклад местных механизмов регуляции сосудистого тонуса в механизм реализации холпиергической вазо/цшятации.

4, Исследовать возможность проявления пряного нейрогенного холинергнческого влия1 ия на сосудистый тонус.

5, Оценить участие зндотелия сосудов .в нейрогенном холинергическом расширении . * .

Настоящее исследование выполнено в соответствии с Государственным * планом (тема ,Н 01в700371Ч6) и заданием Государственного, Комитета по науке и техника при Совете Министров СССР (H Û.69.01:01.03.01.Н.). •

ВАУЧНАЯ ЙОВИЗПА. При изучений холшгергического

симпатического расширительного »ффекта, являювдх'ося компонентом вегетативного сопровождения эмоционального поведения, выявлен (ложный механизм его реализации. Один из компонентов реакции связан с прямым нервным влиянием на сосудистый тонус. Впервые экспериментально доказана в опытах In vitro на изолированных препаратах артериальных сосудов, выделенных из скелетных мышц, nosj'oiHocTb проявления нейрогенного холнкергкческого расширения. Этот эффект опосред)ется, ио-еккихочу, активностью М-ис/.инородгптсроЕ, расположенных в гладкой ыысце со;.уса . Участия ярссннлптйч^счлх и зиаотглиальных Н-холинорсцэптарол в гезкиэяции f пин<>ргичсс1"ч с- пейрэгйинсГ'О расширительного эффекта выявить я:

удалось.

Доказано, что другой компонент холинергической вазодилятлиии реализуется при участии местных механизмов регуляции сосудистого тонуса и отражает изменение метаболизма скелетных мышц, вызываемого симпатическими холинергическими влияниями.

Экспериментально показано, что фактором, подстраивающим кровоток скелетных мышц к измененному обмену является осмотическое давление межтканеэой жидкости. Гииеросмолярность возникает за счет увеличения концентрации ионов натрия, калия и молочной кислоты .

Впервые сонаружено увеличение работоспособности скелетных мышц при воздействиях, вызывающих в неработающих мышцах холинергическуы вазодилятацию. Эффект не зависит от кровотока и центральной "моторной команды", а обусловлен, по-видимому, метаболическими изменениями в работающих мышечных волокон.

На основании собственных и литературных данных предложена схема реализации симпатических холинергических влияний на уровень метаболизма и кровоснабжение скелетных мышц. ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНЕСЕННЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1 .Холинергическая симпатическая расширительная реакция, возникающая в скелетных мышцах при эмоционально-поведенческих реакциях типа реакции "защиты", реализуется при участии нейрогенных и местных механизмов регуляции сосудистого тонуса.'

2 .Нейрогенный холинергический расширительный эффект опосредуется, по-видимому,- активностью Н-холинорецеаторов, расположенных на гладкой мышце сосуда. Возможность выявления ... нейрогенного холинергического расширения может рассматриваться как физиологическое доказательство существования холинергической расширительной иннервации артериальных сосудов скелетных мышц.

3.Участие местных мехлниэмоя в реализации холинергической дилятации опосредуется включением гиперосмотического фактора, отражающего изменение метаболизма окружающего сосуд поперечнополосатого мышечного полокна .

4. Холинергическое увеличение работоспособности скелетных мышц является одной из форм проявления регуляторного симпатического влияния на работоспособность мышечного волокна, т.е. представляет собоГ! ранее неизэгстчую форму проявления феномена Орбели-Гинецинского.

5.??ч"!!илиазнлчг!!'.'.(- ^оппясргичеокнх симпатическая илнянсй со г!''!!1 в г 'л ■<-' ^ г-.-.;- ..'-и! -- 11 м к пт работе г}":?!!

изменения метаболизма поперечно-полосатого мышечного волокна и расширения сосудистого русла . НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ.

Полученные ■ в настоящем исследовании результаты расширяют существующие представления об адаптивных механизмах эмоционально -соматических реакций. Активация симпатической системы сопровождающая реакции "защиты" вызывает наряду с уменьшением сосудистого сопротивления в скелетных мышцах увеличение их работоспособности путем изменения обмена. Подобное состояние возникает у людей в различных ситуациях и, в частности, оно характерно для предстартовой реакции спортсменов. В этом случае, эмоциональное напряжение имеет, по-видимому, адаптивное значение, так как оно подготавливает организм и, в частности, двигательный аппарат к выполнению работы, путем изменения метаболизма скелетных мышц и расширительной реакции в них, что реализуется в возрастании выносливости работающих мыиц. Адаптивное понимание предстартовой реакции было отражено в рекомендациях по повышению работоспособности, выпускаемых Государственном Центральным институтом физической культуры.

Результаты диссертационной работы во изучению механизма реализации симпатической колинергнческой расширительной реакции, Функциональному..значению сосудистой и ыетаболической реакций, вызываемых: холинергическими симпатическими слияниями, а также неизвестной ранее форме проявления феномена »Орбели-Гинецинского включены 8 программу лекций на кафедрах физиологии человека и

йипстпыз Биологического ф-та ЛГУ им. И.В.Ломоносова, Киевского

*

Государственного Университета и Государственного Централъногб t

ордена Ленина института физической культуры.

Разработанные новые методы перфузии и фиэиологическрго анализа изолированны*'препаратов артериальных сосудов внедрены в лаборатории кровообращения Института физиологии им. И.П.Павлова, лаборатории патоанатомии НИИ педиатрии АНН CCCf. Апробация работы. Материалы диссертации доложены к обсуждены на заседаниях Московского общества физиологов (г.Иосква,19Т». i960), 111,1V,У Всесоюзном симпозиуме по физиологии вегетативной iippmi^ft системы (Ереван, 1971, 1982, 1986), IV,У Всесоюзном cbhiicjkj'M! "Медиаторы п норне и патологии" (Казаль, 1979, 1 984), Hpjrtj-п.чродном конгрессе по физиологии (Будапешт, 1900), У111 Гн-сл-,1 -чой конференции п_> биохимии нервной системы (Иинск, i960), X ! Г'.,;Р'.ОЮЗНОЛ конференции по физиологии и патолог ии кортико-

висцеральных взаимоотношений (Ленинград, 19Ö1), ll.lll.tV.V Всесозных конференциях по центральной регуляции кровообращения (Киев,1 973, Волгоград , 1 977 , Тернополь , 1 9£И , Ростов-на-Дону,1984 ) , 111, 1У Всесоюзных симпозиумах "Кровоток в скелетных мышцах" (Рига, ■ 1962, 1986), Всесоюзной конференции по проблемам нейрогуморальной регуляции деятельности висцеральных систем (Ленинград, 1987), XV Съезде Всесоюзного физиологического общества им. И.П.Павлова (Кишинев, 1986 ).

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам исследования опубликовано 43

работу. Из них 2 6 журнальных статей и 17 рабе г в тезисах. СТРУКТУРА И ОБЪЕИ ДИССЕГТАЦИИ. Диссертация их-лохена на 273 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания методой исследования, изложения результатов экспериментов и их обсуждения, заключения и выводов. В диссертации 45 рисунков и 17 таблиц. Список цитированной литературы включает 402 источника, из чих 69 отечественных И 333 зарубежных.

НАТЕРИАЛЫ Н НЕТОДЦ ИССЛЕДОВАНИЯ.

В ходе выполнения настоящей .работы проведено 62 исследования на 21 испытуемом, 540 острых экспериментов на кошках, и 9В экспериментов на изолированных препаратах каудалыюй бедренной дртерии кСгаки (In vitro).

ИССЛЕДОВАНИЯ НА ИСПЫТУЕМЫХ. Объемную скорость кровотока в предплечье определяли методом венозной окклюзиокной

плетизмографии (Орлов, 1961; Greenfield st al. , 1963; Gral, 1964; Тхорепский', 1968). Запись кривых артериального притока производили периодически с интервалом 15-20 с. Путем усреднения мгновенных значений скорости кровотока за определенный момент времени (шаг 10-20с) определяли среднюю объемную скорость кровотока, которая приведена в таблицах и рисунках.

Работоспособность скелетных мышц определяли при произвольной статической работе нышц предплечья и их тетаническои сокращении, вызванном электрическим раздражением двигательного нерва. Для произвольной активации мышц предплечья использовали сжатие ручек кистевого динамометра (Тхорезский , Разиков, 1972 ). Испытуемым предлагали удерживать нагрузку равную 30* от максимального произвольного усилия (301НПУ) как можно дольпе [до отказа). Основнын экспериментам предиествовала тренировка| которзч продолжалась во тех пор, пока вариации времени работы до отказа у каждого испытуемого не превышали J ' 5*. Тетаническое

сокращение мышц предплечья вызывали электрическим раздражением мерса па медиальной поверхности плеча с параметрами : длительность импульса - 1мс, частота - 50 ими./с, сила раздражения подбиралась таким образом, чтобы сила. вызванного сокращения составляла зох от максимального вызнанного сокращения (ЗОИНВС). Кишечную работоспособность определяли по общему количеству совершенной работы, которую оценивали, измеряя площадь под динаграммой вызванного изометрического сокращения мышц предплечья.

Ограничение кровоснабжения работающих мышц предплечья до уросня покоя выполняли с помощью пальцевого поджатия плечевой артерии (a .brachialis) несколько выше локтевого сгиба (Blair et

al., 1 959; Lind, McHicol, 1967). Атропин вводили в плечевую артерию в количестве 0,4-0,5мг (Barcroft et al. , 1960). Ионофорез адреналина, позволяющий прекратить кровоток в кожных сосудах, осуществляли по методу Cooper (Cooper et al., 1954,1955).

Для создания эмоционального напряжения испытуемых просили складывать и вычитать многозначные числа на Фоне отвлекающих звуковых и световых помех, создавали экзаменационную ситуацию (Barcroft et al. , 1956, 1960; Blair et al., 1959).

ОСТРЫЕ ОПЫТЫ НА ЖИВОТНЫХ. Эксперименты выполнены на кошках обоего пола | весом 2,5J4кг, наркотизированных уретаном (0,9 - 1 г/кг внутривенно) после предварительного эфирного оглушения. Артериальное давление измеряли в аорте или сонной _ артерии злектроманометром типа' ЕНТ-35 (Elema-SctiorTander, Швеция).

Кровоток через заднюю конечность или m triceps surae задней конечности регистриронали в бедренной сене капельным методом с использованием • (фотоэлемента (Llntlgreen, Uvnes, 1954). Для регистрации использовали иитервалограф. Для регистрации кровотока or трехглавой мышцы голени перевязывали боковпе ветви каудалнюй бедренной артерии и вены, соединяющих сосудистое русло га triceps с сосудами соседних мышц, коаи, кссти и жира. В общей сложности перевязывали 18 -20 сосудистых пучков. О вазомоторых ремкцияя судили по изменению проводимости сосудов (отношение кроготок/давлгние). Холинергичгскую вазодилятацию вызывали стимуляцией "зоны защиты" гипоталамуса или симпатической цепочки га «¡one действия а льфа -блокатора. Стимуляцию гипоталамуса производили ирг помощи униполярного стального электрода диаметром

, который р годили с.тереотаксичееки г. координатами А = 11 -1 £ . ) si ,г, 11 г - з -(-Dl, сопасно атласу мозга кеяки (Sr.i'Jer, Kiener, ijfl; АЪгаНлг.» ft al . , 19»Ь: Schraao , Bignall, 1971). Для

стимуляции использовали иряноуголъние импульсы анплитудой 3-7в, длительностью 0,5-1,5мс и частотой 80/с. Время раздражения составляло I минуту.

Раздражение симпатической цепочки производили на уровне L4-L5 при помощи погружных серебряных электродов, которые накладывали на ее перерезанный периферический конец (Janlg, 1986). Амплитуда стимула составляла 4-6 в, длительность 0,3-1,5мс, частота 15-25/с. Бремя раздражения составляло 60 -90с. В качестве альфа-Олокаторов использовали дигидроэрготоксин ("Спофа", ЧССР) и фентоламин ("Sigma", СИА) в дозе 0,1 - 1,0 мг/кг веса животного. Холинергическую природу расширительных эффектов контролировали введением атропина в дозе 0,1 мг/кг.

Для изучения работоспособности скелетных мышц кошки проводили регистрацию сокращений трехглавой мышцы <ш. triceps surat) обеих задних конечностей в статическом режиме. Выделение и закрепление иная проводили по методу В .А .Хорунжего ( 1966). Исходное растяжение мышц составляло 200г. Сокращения регистрировали с помощью тензсдатчика и записывали на потенциометре КСП-4. Сокращения мышц вызывали раздражением седалищного нерза в дистальяой части бедра прямоугольными импульсами с параметрами: частота 50/с, длительность гомкс, амплитуда суоранахсинальная, что позволяло раздражать только моторные волокна, не затрагивая симпатических. Длительность раздражения моторного нерва составляла во всех опытах 90с с интервалом между раздражениями 30 мин.

Для определения осмотического давления,- концентрации ионов На Г I * ciсодержания молочной кислоты, неорганического фосфата И общего белка производили забор проб артериальной и венозной крови. Забор крови производили через анастомозы в бедренной артерии и бедренной вене. Пробы забирали одновременно в объеме 1нл в течение 10с. Интервал времени между последовательными заборами был не менее Юс. Пробы центрифугировали Т мин при £000 об/мин. Определение осмотического давления плазмы крови производили на осмометре "Knauer" (Зап. Берлин). Конечное изменение осмолярнЬсти кровй рассчитывали как разницу в величинах артерио-венозной осмолярност-и в опыте и контроле. Определение концентрации ионов к^ На Г са?Ь плазме крови производили на автоматической пламенном Фотометре ЧЬ ЧЬЗ' (СНА) н автоматическом анализаторе Са "Corning". Определение общего белка, неорганического фосфата и концентрации молочной кислоты

проводили при помощи • стандартных наборов для биохимического микроанализа "Baehringer Mannheim" (ФРГ) с использованием спектрофотометра "Spectronlc TIO".

Для Фармакологического анализа сосудистых реакций

использовал« внутрпартериальное введение с достояна <й скоростью

-6 -7

0,1-0,5 нл/мии растворов ацетилхолина (1x10 -1x10 г/нл), адреналина (Ixto-6 uio г/ил), папаверина (1х10~г/мл). Блокатор активного транспорта ионов Ка - уабаин вводили с дозе 0,0Т мг/кг (0,5 нл/ыни, конц 1x10 ® г/мл} (Toda, I960), блокатор гликолиза -

-А

моноиодацетат в дозе 25 мр/кг (0,5 кг/мин, концентрации 1x10 г/мл).

Для проведения экспериментов на изолированных сегментах артериальных сосудов в условиях in vitro использовали препараты каудалыюй бедренной артерии кошки (а .2uralis s. feaoralls caudalis), которая распологается между латеральной и медиальной головками икроножной Мышцы голени (и íastrocnealus) задней ' конечности (Ноздрачев, 1973). Участок сосуда, выбранный для работи, отделяли от окружающей ткани, а затеи вырезали сегмент -длиной 10-15 мн, диаметром от 200 до 400 мкм. Изолированный сегмент помещали в раствор КреСса-Хенселяйта (Blattnsr, 19тв) , где инкубировали- его о течение 40 иин При £р-1СРс. Лослй этого сосуд преяоеили. В терностатируемую (37° С)., аэрируемую 52 карбогеном камеру. Для перфузии проксинадьныя.. конец изучаемого артериального сегмента• надевали иа металлическую ' канюлю (нержавеющая сталь i наружный диаметр 400 -ЬООмкН), дисталышй

конец оставался ейободным, так что перфузирующий раствор поступал

»

в инкубационную камеру (режим свободной перфузии). Подачу Физиологического^ раствора н сосуд осуществляли с помочь» роликового насоса фирмы LKB (Швеция). Перфузию осуществляли с постоянным расходом, 'равным 0,Г -0,8 мл/мин.

О реакциях изолированного сосудистого препарата судили по изменению перфузионяого давления, которое измеряли

электронаяометром Фирмы "Stathaa" (СИА) и записывали на потенциометре КСП-4. Б экспериментах использовали два типа воздействия на сосудистый препарат: фармакологическое и »лектрическую стимуляцию стенки сосуда. '

Транемуральиую электрическую стимуляцию осуществляли парой электродов, один из которых вводился внутрь сосуда .и являлся одновременно и перфуэионной канюлей. Второй электрод в виде незамкнутого кольца (золото 563 ) охватывал, сосуд сверху.

Стимуляцию осуществляли импульсами переменной полярности с параметрами: напряжение J5 -5ов, длительность импульса 0,1 -

0.16нс, частота 2 -16/с, ток 0,4 -0,6а. Интервал времени между последовательными стимуляциями препарата составлял не менее 10 мин.

Эндотелий внутри сосуда сникали пропусканием через него струи воздуха в течение 30с под давлением, под которым сосуд перфугировали в течение опыта (Spokas, 19S'¡). Снятие эндотелия контролировали Физиологически (отсутствие реакции на ацетплхолин) и гистологически. гистологический контроль степени снятия эндотелия производили на сканирующем электронном микроскопе по общепринятой методике (Говырин, 1936). В работе использовали следующие Фармакологические вещества: норапреналин битартрат "Signa" J С И А), атропин сульфат "Sigma" (США), ацетнлхолим хлорид "Signa" (СПА), гуанетидия Egyt (ВИР), Фентоланип "Signa" (СИА), кзинакрин "Serva" (ФРГ), метиленоная синь (отеч.).

Статистическая обработка результатов экспериментов по всей сериям опытоз производилась с использованием "t" -критерия Стъюдеита для парных выборок. При р < 0,05 различия считались достозерпшш.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУКДЕППН. •

1.ВЯЗЯНЕИ ЭНОЦНОНЛЛЬПОГО НАПРЯХЕИИЯ, ВМЭЗЛППОГО ИИТЕЯСИВПШ1 СЧЕТОМ О УПВ ПЛ КРОВОСИЛПХЕПИЕ 3 ГЛПОТОСПССОШЮСТЬ С1ГЕЯЕТЕЦХ 1ШЗЦ В ПССЛ2Д013А1П1..Х-ПЛ людях.

1.1. Влияние нятспспппого счета st укг за ^кровосца<5жепие

пеработагзс$я* скгаетяих ¿шац. У 9 кспитуеинх из U интенсивный

счет в уме вызывал попищеште обьгипой скорости кровотока. Средняя

объемная скорость кровотока' з предплечье, составlutRnjaя з условиях

покоя 3,3£0,2 ма/ЮОнл/иия (пределы г,? - 4,0 нл/100мл/нин), яо

время иптененвного счета а уне возрастала на 65Х (пределы 50 -

120*. р< 0,05). Измерение кроаямого давления до, во время и novas

счета в унэ показало, что систопичосксе давление увеличивается е

среднем по в опытам па П- (продели: 10 - 12*, р<0,05К), а

дизстоличеекоэ - па 13* (преггям 9 - 15*. Р<0,05>. Частота пульба .

в среднем по 7 опытам возрастила на 15% (пределы 12

Р<0,05). ',,.'".

Для оценки вклзаа кожного кропотекз. а изучаемую реак>\к»

провопили выключение кожного кровотока с помощью ионо{-оре.?я.

t

адреналина (¿опыта). В атих условиях ссч-енная скорость кровоток?, в покое уменьшалась ка 30-'.3*. Овяако, авеваютмая геличипй'' ,

прибавки кровотока при эмоциональном напряжении существенно не изменилась. Эти данные позволили заключить, что увеличение объемной скорости кровотока при интенсивном счете в уме осуществляется' главный образон за счет расширения мышечных сосудов. Наши данные подтверждают результаты прежних исследований (Wltklns, Elchna, 1941; Blair et al., 1959).

У двух испытуемых из 11 интенсивный счет в уме не вызывал ни увеличения скорости кровотока в скелетных мышцах, ни учащения пульса. Ножно думать, что у этих испытуемых интенсивный счет в уме не вызывал по какии-то причинам эмоционального напряжения к сопутствующих вегетативных сдвигов.

1.2.Влияпае интенсивного счета в уме на произвольную статическую работоспособность и кровоснабжение работающих мышц. Средняя продолжительность произвольной статической работы ЗОШПУ составила по данным 9 опытов 171±16с, что совпадает с Санными, полученными другими исследователями (Lind, 1969). Во время работы кровоток постепенно увеличивался и достигал максимальной величины к концу удержания нагрузки. В среднем по 9 опытам при ЗОХНПУ статической работы до отказа кровоток предплечья возрастал . с 3,310,2 до 4,310,4 ыд/100мд/нип, что составляет 30* "по отношению к кровотоку в покое. После прекращения работы наблюдалось значительное увеличение кровотока - постконтракциониая гиперемия, что отражает недостаточность кровоснабжения работающей мышцы, несмотря на увеличение кровотока во врем* удержания усилия 30*НПУ.

Во время работы наблюдались^подъем артериального давления и учащепие пульса. Превышение систолического 'артериального давления пап уровнем по/соя в средней по давним 9 опытов за все время работы составило гтх (пределы 21' - 30*,р<0,001), а диастолического давления - 33* ( пределы: 29 - «3*, р<0,001). Учащение пульса составило »1* (31 - 46*, р<0,001).

При выполнении произвольной статической работы ЗО'НПУ на Фойе эмоционального напряжения, создаваемого интенсивным счетом в уме, предельное вреня работы г Оольаинства испытуемых значительно увеличивалось. В среднем, в 9 опытах из 10, выполненных с участием Т испытуемых вреня удержания' статического усилия вспросло с 171 + 1$ с до 235119 с. Прибавка' Во времени удержания составляла 4Ь* (р<0,001). Средняя скорость кровотока о предплечье' при выполнении работы на фоне эмоционального напряжения возросла на 11» по сравнению с работой, выполняемой без эмоционального

напряжения (рс0,01). У одш.го испытуемого, у которого иитенсиьниЛ счет в уме не вызывал расширительной реакции в неработающих мышцах, не било и увеличения продолжительности работы при счете.

Итак, при сочетании удержания усилия ЗОРИНУ с воздействием, вызывающим и неработающей конечности значительный расширительный эффект, наблюдается увеличение времена удержания нагрузки, сопровождаемое приростом объемной скорости кровотока во время работы. Эти данные позволяют предположить, что оба исследуемых эффекта - пазодилятация в неработающих мыацах и увеличение работоспособности при интенсивном счете з уме либо зависят дгуг от друга, либо вызываются какой-то общей причиной. Нслн справедливо первое предположение, то по-вндинону, возможно объяснить "эмоциональный" прирост работоспособности увеличен,:".') кровоснабжения работающих мышц, вызываемому интенсивном счетом в уме. Для проверки этого предположения били проведены опиты с искусственным ограничением кровотока.

Стабилизация кровотока проводилась подасатнеи пле'-счой артерии пальцем на уровне близком к уровню покоя. В среднем по трем опытам время работы ЗОЯИПУ до отказа в услознях стабилизации кровотока уменьшилось на 9* и составило 150+5 с (пределы -

159с) Длительность работы ЗО'/НПУ при интенсивном счет? в уме в условиях стабилизации кровотока увеличилось- в среднем по 3 опытам на 43* (р<0,001), в то время как в опытах без стабилигчгпш кроаотока длительность работы увеличивалась на 46'.. Дэниг'е :-той серии опытов свидетельствуют о независимости увеличения работоспосЬбности гри эмоциональном напряжение от уровня кровоснабжения работающих мышц. Этот вывод был подтвержден и дальнейпих исследованиях О.Л.Виноградовой} где было показано, что прибавка в работоспособности при интенсивном счете в уме наблюдается и в условиях полной ишемии работающей конечности (Виноградова и др., 1973).

Итак, "эмоциональный" прирост работоспособности на Снедаете я при тех яе воздействиях, что н расширительный э-Цект в ссгупчг неработающих ммиц, но при этом не реализуется сан а расширительная реакция. Естественно предположить в таком случае, что оба эффекта вызываются одной причиной, а именно возникают п результате активации симпатической системы. Согласно литературным данным симпатический расгакрителышА эЦект, Наблюдаемый в скелетных мыздззе человека при яюциокальпон напряжении является по своей природе холяпергическик, т.г.

M -

медиатор эффекта - дцетилгшшн (Uvnas, 19й7; BLur et a!., V)':'Jj. Эффект хслинергической ваэоднлятации блокируется атропш-оы. Будет ли атропин влиять на увеличение работоспособности, вызываемое интенсивным счетом в уме?

1.3.Влияние местной атропдиизащш па пазидилята'див в неработающих мышцах И па увеличение работоспособности при эмоциональном напряжении. Местная атронинизация предплечья человека вызывала существенно ослабление расширительной реакции, позникающей при эмоциональном напряжения испытуемых. По средним ланлын, полученным на трех испытуемых, атропин уменьшал прибавку кровотока при эмоциональном наиряхеннн с 05Х до 16*, что соответствует данным других исследователей (L'ialr et al., 1959Ь, 19fc0j Bifcroft et al., i960). Атропин в выбранной конасптращш Ht1 влиял на продолжительность произвольной статической работы, производимой в обычных условиях (без счета), гас она составляла 117с. В то же время, он заметно укорачивал "¿моциона льну с" прибавку работоспособности, вызываемую интенсивном счетом с уме. Село до атропина прибавка работоспособности составляла 49*, то на фоне его действия - 19'-

Таким образом, tатропин на . 61% снимает удлинение времени удержания нагрузки при одновременном ечгте в'уме., что указывает на ведущую роль nej лферичеекпх механизмов о реализации этого аффекта, т.к. атропин, вводимый виутриартериально_ в концентрации, вызывающей блокаду М-'холннорецепторов, действует местно, на уровне работа »щей конечности. Одкгко, атроптшеация конечности не полностью снимает прибавку работоспособности, цоатсму возникает вопрос об участии других (не холинерШческпх) моханизмов в увеличении работоспособности. Возможно, что оиоционгльлое напряжение усиливает центральную мотсраую' команду к работающим мытдан. Возможно, Также, что испытуемый во срени интенсивного пчета п уме отвлекается от неприятии/, ощущений в работающей конечности, что также voxeт приводить к угеличоиию длительности удержания нагрузки.

(.Ч.Нямияие эмоционального напряжения «а работоспособность гчелетиыг мивц человека прв пызпапиом сокращении. При ¡мггэяенпн кнпц, вызванном непрямым электрическим раздраженней, фкггируется моторная команда к 'работающие мышцам îlf ^допжителыюсть удержания вызванного усилии 30*Hi!C в среднем ко (, (.питай составила 73 + в с. При сочетании вызванного усилия с .-ч.оипт.кальным напряжением наблюдался прирост времени удержания

усилил ;;з Г53* (прев* ли: - 19««, р<0,001). Площадь,

ограниченная кривой удержания усилия и хшраЕЗЮщая общее количество ныпечиой работ и, возросла на Фоне эмоционального !мпр?.1е!шя на 1 В? х (р<0,001). Количество совершаемой работы увеличилось за счет замедления спада силы сокращения, а не за счет увеличения максимальной амплитуды сокращения.

Настоящие данные, полученные при стабилизированной моторной команде, свидетельствуют о нсзаписимсстн "эмоциональной" прибавки работоспособности от усиления центрально!'! команды I? работающим мнпцам. Отвлечение испытуемого от непрятнмх ощущений в работающей предплечье, которое нокет происходить но время эмоционального напряжения не влияет на прибавку работоспособности, так как эффект проявляется и при вызванном сокращении скелетных мышц человека. О.Л.Виноградова, продолжая исследование влияния эмоционального напряжения на вызванное сокращение мпшц .предплечья, показала, что эффект увеличения работоспособности наблюдается и при максимальном вызванном сокращении (Виноградова, 1974). Наиболее вероятной причиной повышения работоспособности в этом случае являются, по-видимому, изменения, происходящие в самих мышечных волокнах. К такому же выводу ми пришли по результатам экспериментов, где была показана независимость увеличения .работоспособности от уровня кровоснабжения мыяц и значительное ослабление его при местной атропинизации конечности.

Согласно нашим и литературным данным расширительный эффект, возникающий при эмоциональном напряжении у человека, имеет сложную природу^ В зависимости от индивидуальных особенностей реагирования испытуемых на эмоциональную нагручку, холинергически'1 компонент реакции составляет от 60 до 907. расширительной реакции (К о ] й о чг et а!., 1983), На экспериментальных животных при стимуляции гипоталамуса или симпатической цепочки можно получить расширительную реакцию, которая имеет только холинерглческую природу. Исходя из этого, представлялось интересным изучить эффект синпатических холинеггичгских «лиямий на работоспособность скелетных ныиц, сокраяаппиисч в статическом режим», в острых опытах на кошках.

мтпиинтав кгопотока я г л потоспоссттттост и сккякттшх нннц злднах

КОППЧПОСТКП гоига ПГП ГГГИПУЛЯЦПЛ "ЗОЯЦ ЗАПИТII* ГПНОТДЛАНУСА.

Дпч вручения влияиия "з"НН защиты" гипоталамуса н»

. работоспособность скелетных мыщц в острых опытах на койках проводилась регистрация изометрического сокращения трехглавых мняц голени при • сочетании их со стимуляцией гипоталамуса, вызывающей в неработающих конечностях значительный расширительный эффект холинергической природы. При • раздражений зоны холинергической вазодилятации гипоталамуса скорость кровотока в сосудах трехглавой мыицц голени. возрастала на 168112'. (р<0,001; п = 1!). При втон среднее артериальное давление увеличивалось на 35+4Х (п=11; р<0,01). Известно, что кроме увеличения артериального давления возможен вклад в наблюдаемую расширительную реакцию адреналина, который Выбрасывается из надпочечников при стимуляции гипоталамуса (Ь1пс1ггееп е1 а!., 1Гэ9).

Для разделения холинергических симпатических влиянии нервной прнгоды на сосудистое сопротивление от гуморальных влияний катехоланиноЕ и реакции на увеличение системного артериального давления, изучали эффект стимуляции Гипоталамуса на кровоток в трехглавой мыице голени с сохраненной симпатической иннервацией сосудов ("опытная мышца") и в контролатеральной мышце с перерезанным седалищным нервом ("контрольная типца"/, В последнем случае сосуды трехглавой нншцы голени лирены нисходящих вазомоторных влипни"» нервной природы, так -как икнерпирукицие сосуды симпатические волокна проходят о составе двигательного нерва. После денервации' скорость кровотока в.»"контрольной" мышце возрастала, но через 1-1,5 часа тонус сосудов восстанавливался и кровоток в денер'зированвой конечности не отличался от кровотока в "опытной" мыице, что соответствует литературным данным (Конраци, .1973), Стимул1ция гипоталамуса на 'Фоне восстановленного сосудистого тонуса с "контрольной" конечноеги вызывала унсличецие кровотока на 52+6* (р<0,5). Дпя изучения природы расииритедьных эффектов, наблюдаемых ври стимуляции гииоталануса в "опытной" и "контрольной" мыоцах, был проведен Фармакологический анализ наблюдаемых; реакций. Результат« этой серии опытов г.рИБед?кы в таблице 1. Н-юлинолитик атропин вызывал значительное снижение расширительного эффекта в "опытной" конечности, не влияй на увеличение кровотока г. "контрольной* конечности, бета-авк-ке.-штик - пропрлпэлол в одинаковой степени ослаблял, дилятади» р о5еит конечностях.

Таблица 1. Влитие атропина и нропраио.чола на 1>ас1аирителы170 реакции, наблюдаемую и сосудах "опытной" я "контрольной" пДг1сер$ зигае кошки при стимуляции "зоны" иаинтн гипоталамуса.

Измеряемый Конеч- Стимуляция "зоны защити" гипоталамуса показатель ность

без доиолнитель- после атропина после атропина нцх воздействий 0,1мг/кг и пропраиолола

1 ИГ/КГ'

Прибавка "Опытная" 16В + 12 «« 56 ± 6 « 12+2

кровотока -------------------------------------------------------

В г к "Контроль- 52+0» 53+5» 10 $ 3

норме ная"

Примечания: «« - рсО, 01; » - р<0,05.

Таким образом, а "опытной" конечности расширительная реакция в основном опосредуется активацией Н-холинорецепторов (активный нейрогенный компонент реакции). Незначительный вклад вносят катехоламины, активируя бета-адренорецепторы (гуморальный компонент реакции) и повышение артериального давления (пассивный компонент).- В "контрольной" конечности нейрогенного холинергического расширения не выявляется. Наблюдаемая дилятация возникает, по-видимому, за счет действия катехоламинов и повышения артериального давления. Настоящие данные совпадают с результатами работ других исследователей' (ГоШо» ег а 1., 1961; и*паз )961, 1966).

Изучение работоспособности скелетных мыац задних конечностей кошек проводили, регистрируя сокращения трехглавых мышц голени обеих задних конечностей наркотизированных животных в статическом режиме. Нетод выделения, закрепления и регистрации сокращений описан в разделе 'методы исследований".

Сокращения вызывали стимуляцией седалищного перяа с параметрами, активирующими только моторные волокна л гре затрагивающими симпатические волокна, проходящие в составе седалищного нерва. Для изучения влияния рагпражения гипоталамуса ва сокращения скелетных мииц использовался тот же подход, что и при анализе раевпрптельпой реакции, На одной конечности сепалипиий перв оставался интактным ("опытная кояечтость"), а яа

npyroCi oil перерезался проксимальнее места развращении Г'контрольная конечность"). Перед изучением возможного влияния "зоны защиты" гипоталамуса на работоспособность скелетных мышц проводилось сравнение сокращений, развиваемых "опытной" и "контрольной" мышцами по основным характеристикам (длительность сокращения, максимальная амплитуда, < динамика развития утомления мышцы).

Проведенный анализ показал, что сокращения, развиваемые га. triceps surae левой и правой конечностей сравнивать непосредственно по абсолютным величинам выполненной работы не корректно, т.к. невозможно точно выдержать одинаковую исходную величину растяжений обеих мышц, возможны также смещения мышцы относительно датчика. Динамика и амплитуда трек последовательных сокращений одной и той же мыацц, воспроизводимых с интервалом Зй минут также. оказалась неодинаковыми, т.к. амплитуда последующего сокращения была всегда меньше предыдущего. С уменьшением максимальной величины амплитуды уменьшается и площадь под кривой сокращения, чнсленно равная работе, что сделало невозможным сравненне величины работы, выполненной при последовательных сокращениях на одной, конечности, по абсолютной величине.

Для сравнения динамики изменения трех последовательных сокращений е. triceps sur-ae одной конечности длительностью 90с с 30 минутным интервалом между ними, >: серии этих сокращений па левой и правой конечностях максимальную анплюгуд? каждого из них принимали за looz, а затеи измеряли амплитуду сокращений через каждые 5 с и выражали ее в процента;: к максимальной. По ррпультатам каждого подсчета строили кривые, которые описьшали динамику расслабления мышцы а ход? ее утомления. Благодаря такому подсчету, мы имели возможность сравнивать шшаиику спала тетамических сокращений, отличающихся по селичмке максимальной лннлитуан. Для количественной оценки динамики наступления утомления трех последовательных сокращений трехглавых иывц голени разных конечностей был введен коэффициент, чнсленно раьный отношению площади, заключенной между кривыми второго и третьего сл-глпешш, к площади и»жлу кривм»»* первег- и второго сокращении, т.-;

К = (3n-S3)/(Sl-S2) и*' : si - нлсллп) под кривой I -гп сокращения:

Г? - nj,о-.".:гь пег vpH'Kji' г-ro hj трех носл^п'чительнпх ссч'р.итгнни:

ЭЗ - площадь под кривой 3-го сокращения; В серии контрольны.* опытов, где производились г последовательных сокращения т гпсерз зигае обеих конечностей 6« каких-либо дополнительных воздействий значение К для "опытнт. мышцы было равно О,В ± 0,2 (пределы: 0,5 - 1,7), а дл.< "контрольной" - 1,0 ± 0,2 (пределы: 0,6 - 1,6), различии статистически недостоверны (р>0,05, п=8).

При сочетании раздражения "зоны защиты" гипоталамуса со вторым сокращением трехглавых мышц голени задних конечностей наблюдалось изменение динамики уменьшения количества работы, совершаемой тремя последовательными сокращениями для "опытной" мышцы по сравнению с "контрольной". При этом происходит замедление скорости наступления утомления (замедление спада кривой) второго сокращения "опытной" мышцы по сравнению с "контрольной", что приводит к увеличению количества совершаемой работы в течение этого сокращения (си. рис.1).

©

£> во ы

♦—»—• I ССКШЩВ ео

( \ о— О—О 3 сскрашез

з оедавдсз

к

иагголь

Г и с:. 1 Три последовательных сокращения трехглавых ныац голени задних конечностей колки.

Максимальные амплитуды приняты за 100», остальные точки кривых перечислены в * к максимальной. Одновременно с началом второго сокращенна сочеталось раадраяепие гипоталамуса.

Значение коэффициента "К" для "опытной" мышцы было равно 4.3 + 1,6 (пределы 0,в - 19,8), а для контрольной - 0,8 ♦ О,!'

(пределы 0,5 - г,1). Различия статистически достоверны (р<0,001, п -11). Л тропи}! практически полностью снимал увеличение работоспособности скелетных мышц, вызываемое стимуляцией гипоталамуса. ' Значение "К" длг. "опытной" мышцы в этой серии экспериментов было равно 1,2 + 0,4 (пределы: 0,3 - 2,4), ' а для "контрольной" - 1,1 + 0,3 (пределы: 0,5 - 3,2). Различил статистически недостоверны: р>0,05 , при п=6.

Таким образом, стимуляция "зоны защиты" гипоталамуса вызывает увеличение работоспособности тетанически сокращающихся скелетных мышц. Эффект имеет холннергическую природу. Необходимо заметить, что прибавка в работе выявлялась линь в тон случае, если стимуляция гипоталамуса была приурочена к началу разлракенля моторного нерва или на несколько секунд опережала его.

Настоящие данные, полученные в острых опытах на кошках подтверждают результаты исследования, проведенные на лидях. Незасисимо от способа возбуждения холинергических симпатических слияний (стимуляц-ля "зоны защиты" у наркотизированных кошек или эмоциональное напряжение у людей) при сочетании их со статической работой, они вызывают замедление динамики развития утомления, что в конечном итоге ведет к увеличению работоспособности скелетных мышц. Прибавка, .работы не зависит от кровотока и от центральной моторной команды. По-видимому, механизм увеличения работоспособности связан с изменением метаболизма поперечнополосатого мыпечного волокна, вызываемого симпатическими холивергическин»! влияниями.

В исследованиях на неработающей конечности была показана активация анаэробного метаболизма п скелетных мышцах при стимуляции "зоны запиты" гипоталамуса у наркотизированных кошек (Ленькова и др., '1968, Бердпна, 1'оямонов, 19ТЗ; Вег<31«г, ^¡Иопоу, 1976; Родионов, 1979). В условиях статического сокращения мыещ, когда кровоток в них ограничен из-за повышенного внутримыпЕчного давления, активация гликолиза, которая вы-гнвается у.олпнергкческимн симпатическими влияниями, иохет играть роль пополнительного источника макроэргов. Известно, такле, что анаэро<51ше процессы необходимы для краткосрочного снабкепая энергией не только при непродог.-дктелькон' физическом усилии, но и г! начале длительной мышечной деятельности, потону что требуется некоторое время на тс. чтобы приспособить уровень окислительного

метаболизма к возросшим требованиям. Пока не наступит новое стационарное состояние росинтез АТф происходит за счет процессов гликолиза (Walsh et at., 1981; Рюэгг, 19S5; Dobson et al., I9S7). Поэтому, активация анаэробного метаболизма, запускаемая при стимуляции "зоны зашиты" гипоталануса представляет собой, вероятно, активную реакцию, направленную на подготовку скелетной мышцы к предстоящей работе, путем перестройки ее обмена, которая может опережать во времени начало работы и способствовать, таким образом, увеличению работоспособности. По-видииому, именно этим объясняется тот факт, что эффект увеличения работоспособности выявляется только в том случае, если воздействия, приводящие к активации симпатических холинергических влияний сочетаются с началом работы или немного опережают ее.

В диссертации приводится обсуждение возножного механизма изменения метаболизма скелетных мышц при действии холинергических симпатических влияний. Согласно предложенной схеме активация симпатических холинергических нервов, иннервирующих

интрафузальные мышечные волокна (Вагпег, Salto, 1961) приводит к выделению ацетилхолина, который при участии Н1-холинорецептора вызывает активацию фосфоинозитидного обмена, вторичные мессенджеры которого с одной стороны стимулируют освобождение кальция из. внутриклеточных депо, а с другой стороны активируют гликолиз в ткани скелетных мышц (Berrldge, 1983; Berrldge, Irvln, 1934; Votpe' et al., 1985; Abdel-Latif, 1986;). Оба процесса реализуются • в эффект увеличения работоспособности . сокращающихся скелетных ' мышц.

Таким образом, холинергические симпатические влияния в условиях сокращения скелетных мышц йриводят к увеличению их работоспособности, путем изменения метаболизма поперечнополосатого мыоечного волокна. В неработающих конечностях те же самые воздействия приводят к значительной расширительной реакции сосудов скелетных мышц. Имеются данные о взаимосвязи активации анаэробного обмена в скелетных мышцах и холинергической расширительной реакции. Показано, что метаболические сдвиги сопровождают развитие вазодилятации и пахе немного опережают ее развитие во времени (Берлина, Родионов, 1973). Кроме того, в опытах In vitro была показана способность ацетилхолина активировать гликолиз и в гомогенате скелетных мышц (Вердина и пр.,-1973). 13се эти панике позволили высказать гипот^У. согласно которой, «олинергическая расширительная реакция, наблюдаемая в

неработающих конечностях при стимуляции "зоны защиты" гипоталамуса, рассматривается как ответ сосудистой системы на изменение метаболизма поперечно-полосатого мышечного волокна. В такой случае, холикергическая вазодилятация должна рассматриваться, как сосудистая реакция, реализуемая с помощью местных механизмов регуляции сосудистого тонуса. Соответствие кровотока метаболическому статусу органа осуществляется с помощью вазоактивных метаболитов, поступающих в кровь из окружающей сосуд ткани. Среди большого количества нетаболитов, образующихся при сдвиге метаболизма скелетных мышц, можно выделить следующие агенты, обладающие вазомоторной активностью, которые имеют сигнальное значение для изменения кровотока: молочная кислота, ггшкоэа, ионы натрия, калия, кальция, неорганический фосфат, повыпенное осмотическое давление плазмы крови (Левтов, 1967; Конради, 1973; Хаютин, 1979; Ьипс11ю!;п, Ц-1,ипг1{1о1а, 1962, 1963; ЬипауаН а!.. 1965; ИеПашЗег ег а!., 1967; Ие'Напаег, 1971).

Среди перечисленных агентов гипероснолярность является интегративныи показателем изменения метаболизма скелетных нышц. С одной стороны, в увеличение осмотического давления могут вносить вклад многие ион:; я метаболиты, обладающие ' собственной вазодилятатрной активностью. С другой сторона, гиперосмолярность является "неспецифическим" Фактором, который обладает собственной вазодилятаторной активностью и может, таким образом, суммировать те изменения концентраций различных агентов, Которые сами по себе недостаточны для вызова вазомоторной реакции (11е11ап<!ег е1, а1., 1967; 1.ипс)уа11, *197г). Исходя >13 вышеизложенного, изучение периферического механизма реализации ' холинергической

Ызодилятации С>ыло начато с изучения изменения осмотического давления плазмы крови ири этой реакции.

3. ИЗУЧЕПИЕ ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО ПКХАПНЗИД РЕАЛИЗАЦИЯ СШШЛТНЧКСКОГО ХОЛЯВЕРГИЧПСКОГО РАСШИРИТЕЛЬНОГО ОМ>ЕКТЛ В ГХГУПАХ СКЕЛЕТНЫХ КИЕВ КОПКЯ.

з.ЬЛиалиэ изкеаеяяя осмотического даилеяия крови ири гойнкергической вазодилятация в скелетных мыяцах копки. "о.'7!!Н?ргическаи расширительная реакцпч в сосудах скелетных кысц воспроизводилась двумя способами: стимуляцией "зоны защиты" гипоталамуса и стимуляцией симпатической цепочки га Фоне действия зль$а-адргноблокатора.

Ври стимуляция "зовы защиты" гипоталамуса коики, вызывавшей

увеличение проводимое "И сосудов и. triceps surae задней конечности с (l,7 + 0,l)xlir 2 ил/мин/ммИе в покое до (5,3+1,5)х 1С- ■ нл/мин/ммНе в интервале 50-70с с начала стимуляции (пгв, р < 0,001), в крови, оттекающей от этой мышцы, было зарегистрировано увеличение осмотического давления плазмы крови (рис.2, I). В покое осмотическое давление артериальной и венозной

крови

была, равным

МОСМ/Л (П-25).

гз to со

I f.

и

x и в ao a to to гао го to со га I Ж Ж

вреня л с.

Ряс 2. Увеличение проводимости сосудов гуморадьпо изолировалвой трехглавой иыпцы гояепи коакл (А) п осмолярности, оттекаоцей от лее крови (Б) в холе стпыуляцйи пентромеднального ядра гипоталамуса без Фармакологических воздействий (1), на фопе действия атропина (II), на фоне действия атропина rt вропраяолояа (Ш).

Время стимуляция tOc, аачало стимуляции совпадает с О точкой ва оси абсцисс.

Максимальной величины осмотический отеет достигал на 30-».Рс стимуляции, когда прирост осмотического дз"лекия состя.чил 9,9 мОс*/л (пгв; р<0.00().

Введение атропина частично снимало оба эффекта (рис. 2, II): вазодилятаторный эффект уменьшался атропином на 76*, "остаточное" увеличение осмолярности., равное 5,1+1,9 мОсм/л (п=8, р<0,001) наблюдалось на 50 -бос. Остаточное увеличение кровотока и осмолярности полностью снимались бета-блокатором - пропранололом (рис 2, III), что в совокупности с данными литературы позволяет предположить участие катехоламинов надпочечников в реализации холинергической вазодилятации на позднем этапе ее развития (Grant, 196ч; Lundholm, et al., 1966). Для исследования осмотических эффектов, связанных с развитием только холинергического расширительного эффекта была использована стимуляция симпатической цепочки.

Раздражение симпатической цепочки па фопе действия аиьфа-

адреиобяокатора, вызывавшее увеличение проводимости сосудов т.

-2 -2 triceps suràe с (1,2±0,1)х10 мл/мин/MMHg в покое no (2,5 + 0,2)х10

ил/мин/MMHg на 40 -60с стимуляции, когда наблюдается максимальная

расширительная реакция, приводило к возрастанию оснотического

Давлений оттекающей крови. Увеличение осмолярности достигало на

30 -40с величины 10,111,9 мОсм/л (п=8, р<0,01) (рис.3).

Рис.3 Уве л'и ч е н и е проводимости codynou задней конечности кошки (пуиктир) в ос-иолярпости опекающей крони (сплошная лв-вкя) при стимуляции симпатической цепочки на фоне действия альфа-бяокаторз без кополнн-тплмшх воздействий (1) с na fose действия атропина {0,1 мг/кг -til.

10 20 JO tó 50 60 70

время с.

200

ISO V

tea 15

8

140 1

110 1

100 к

Й

во Ы

60 с- ЕЗ ш

40

20

со

Сосудорасширительный и осмотический эффекты полностью блокировались атропином, что указывало на их холинергическую природу. Внутриартериальное введение ацетилхолина (lxlô^ г/мл) вызывало наряду с увеличение проводимости сосудов конечности и возрастание осмотического давления плазмы крови. Из 50 -60с с начала введения раствора ацетилхолина проводимость увеличивалась на 127 + 14* (р<0,001), а абсолютная прибавка осмолярности состазила 9,5+1,6 мосм/л (р<0,01). £<нутривенное введение атропина в дозе 0,1 мг/кг веса животного предотвращало развитие, как сосудорасширителыюго, так и осмотического эффектов.

Таким образом, внутриартериальное введение ацетилхолина вызывает как расширительный эффект, так и осмотический. О связи двух этих явлений говорить сложно, так как Известно, что ацетилхолин при введении в артериальное русло вызывает расширительный эффект, зависимый от присутствия эндотелия (An«iis et al., 1983). Однако, важно отметить, что наряду с расширительным эффектом регистрируется увеличение осмотического п? плгиий плазмы крови, свидетельствующее о том, что внутриартериальное введения ацетилхолина воспроизводит оба эффекта, наблюдаемых в неработающей трехглавой мышцы голени при стимуляции "зоны защиты" гипоталамуса или симпатической цепочки. Эти данные, наряду с блокирующим эффектом атропина, мояио рассматривать, как 'доказательства холинергйческой природм осмотического эффекта, сочетающегося с развитием холинергичесмой иазодклятации.

Как уже говорилось, гипероснолярность является интегрирующим вазоднлятаторнын фактором, отрааающим изменение тканевого метаболизма. Возможно, анализ структуры этой реакции, т.е. выявление ионов и кэтаболитоп, увеличение содержания которых приводит к возрастанию осмотического давления плазмы крови, 0уг.ет способствовать пониманию тех процессов, которые происходят ü сквлет.чия иыпдзх я отражением которым является развитие эффект гипзросмолярности.

З.Н. Анализ состава олэзмм кропи п ходе развития коякпергачгекзя раегзпритеаьяоя реакции, вызываемой стимуляцией ся«ш1тячеспоН цепочки. В пробах кпзей, езр.тых в ходе разгитич хопииергической вазолияятацяи, вызываемой стимуляцией симпатической цепочки на фо!'е действия альфа-б.юкаторов, уаьюсь зыят'ить уп»лич«?ние содержания иоиоо н/, К4 и лактата (рис. 1). Содррианис Cl' фосфора Ht орг., обпего Селка a гягкозн й йог.™

развития холинергического расширения оставались неизменными. Наксииадьное увеличение концентрации ионов На* и К^приюдилось на

.ь

ю

а 8

Ж

о к

Ы

4>

R

У

\

са и и я id аз

И |Ю

К 8 И

a с

§ 6

Na*§ i,

«

£ 2

20 40 60 go

■Urj ' ■ ■ ■ ' • ■

ВЕЕШ С

о ет P>

!ac

20 40 60

Рис.* Увеличение оснолярности крови, оттекающей от задней конечности кошки, а также параллельные изменения содержания в крови ионов натрия, калия и лактата во Время сосу-дорасширительиой реакции, вызванной стимуляцией симпатической цепочки ва фоне действия альфа-блокаторов.

30 -40с развития вазодилятации и совпадало с пиком осмотического

эффекта (п:6, р<0,05). Расчет доказывает, что с увеличением +

содержания ионов На можно связать 74» общего прироста ♦

оснолярности, ионов t - 13*, вклад молочной кислоты может составлять в*. Ясно, что подобный расчет является скорее качественной оценкой вклада отдельных компонентов плазмы в общее увеличение оснолярности. Однако, на его основании ми можем сделать заключение о ведущей роли возрастающей концентрации ионов Нд + в осмотическом аффекте. Возпикает вопрос, что являете* источником избытка ионов На? Для ответа на этот вопрос был проведен расчет соотношения обьемов гладкой мышцы стенки сосуда и собственно ткани скелетной мышцы, в которой расположены эти сосуды. Исходными данными послужили результаты работ Burton и ErlJtson (Burton, 1962; ErlXsjon • et it, 1972). Расчет показал, что гладкая мышца стенки сосудов составляет не боле» 0,3* от объема

ткани скелетной мышцы. Такой объем ткани ни при каких условиях не в состоянии обеспечить продукцию ионов НаГ регистрируемую а ход? развития холинергической вазодилятацин. Этот вывод дает основание

предполагать, что основным источником поступления в кровь ионов +

11а являются поперечно-полосатые волокна скелетной мышцы. Выход ионоз натрия из ткани неработающей скелетной мышцы возможен только с участием механизмов активного мембранного транспорта натрия или натриевого насоса (Clausen, 1966). Работа натрнспого насоса в поперечно-полосатом мышечном волокне иохет быть активироиана избытком макроэргнческих соединений (Bronner, 'Klelmeller, 1933).

Известно, что процесс гликолиза и работа натрий-калиевой ЛТф-азы могут быть сопряжены (Richard et al., 1979!. Показано, что ацетилхолпн способен активировать натриевый насос э скелетной мышце. Этот эффект снмнается уабаинои и атропином (Dtouha et л!.. 1^79; Платонова и др., 1966). Для проверки но чожиого участия натриевого насоса в генеэе холииергической Вазодилятацин ¿или проведены опыты с блокаторои натриевого насоса -уабзиноч, а также исследовано возможное участие в этом процессе анаэробного обмена.

з.З.Пякянйе уабапва я нопоиодацетата па хояпиергпческое рзсинревпц сосудов скеаетцых иняц. Уабанй s дозе 0,07 мг/кг через час после впутряпенного введения на 74+5* (n=7, p<f),0'i) уменьшал расширительный эффект, вызываемый стимуляцией симпатической цепочки на фоне действия альфа-блокаторп (рис. 5,1), при этом он ne елняя па кокетрикця^ сосудоо, вызываемую стинУллцигЛ симпатической пепо.чки па фопе действия атропина (р)'С 5,П) и на дкл.чтацис при внутривенном врепеиии папаверина. Dri данные позволяют заключить, что уабаин пя-Ляет не на провесепге возбуждения по симпатическим волокнам, не на способность сосудов к любому расширению, а только на ыехакичм реализации толипергичесгой ваэопиаятапип, т.е. уменьшение ¡габтяоч расширительной реакции, обусловлено дсйствисч его иа урпине скелетных мыая.

Влиячир блокатора анаэробного обнеиа - момоиоаацетата н,1 раэв.чтвг холянергического расширения такче исследовалось » эксиеричевтгх со стимуляцией симпатической целсч;«!. Чер«-э час сосп? гмгутряпрняого ввеаент чоиоияаапетата в позъ ?5 чглкг, no'inrtcr^n блокировал ьассл! pif тел ь чф^лкт. гсы эыглсм.чК

- гь -

стимуляцией симпатической цепочки на фоне действия альфа-бдокатора и внутриартериального введения ацетилхолина, не влияя при атом на расширительный эффект папаверина. Кроме этого моноиодацетат практически полностью снимал прирост осмотического давления, который сопровождал холинергическу ю вазодилятацию, вызываемую стимуляцией симпатической цепочки.

Рис 5. Влияние уа баива на холинер-гическус вазодидя-тацию, вызываемую стимуляцией симпатической цепочки па фоне альфа-бло-катора (1) н на сосудосуживающий эффект ври раздражении симпатической цевочки на фоне действия атропина (II). а-иорма, 6-30, в-60 минут с момента введения уабаипа. III - изменение проводимости сосудов трехглавой мышцы голени в течение часа действия уабаииа.

Полученные данные свидетельствуют об участиц процессов гликолиза и, возможно, сопряженной с ними активации} натриевого васоса мембраны поперечно-полосатых мышечных волокон в реализации ■ холинергической симпатической расширительной реакции. В качестве ♦актора сопряжения между интенсификацией анаэробного обмена и вазодилятацией выступает осмотическое давление плазмы крови, которое возрастает в основном за счет увеличения концентрации ионов На. • Увеличение осмотического давления, имеющее холинергическую природу наблюдается в первую минуту развития холинергической вазодилятации. Па атой стадии расширительной ре'акции гипероснотичесхий фактор играет, по-видимому, важную роль

d развитии расширительной резкими. В первые зос. расширения осмотический эффект достигает величин достаточных для проявления своего вазоднлятаторного действия. Но даже на ?той стадии развития сосудистого эффекта с действием гиперосмолярносги удается с уверенностью связать около полонины наблюдаемого сосудорлстиритель.чого эффекта (Lundvali, i 9Т г).

Какие те факторы, помимо гиперосмолярности могут обеспечивать развитие холинергичесного расширения? Среди них мо п но уз-лзать на яазодилчтаторный эффект адреналина, который гыбрасипается надпочечниками при стимуляции "зоны защиты" гипоталамуса. Однако, при стимуляции симпатической цепочки этот Фактор в механизм реализации расширительной реакции не включается. При обсуждении и^ллшияз редлиз.гцин холииергичесноп вазодилятацли о&рляает на себя внимание короткий латентный период возникновения расширения. ЭФФ»кт возникает через 3-Г>с после начала стимуляции. Быстрое развитие сосудистой реакции, по-бидимому, трудно 'езязать с течением метаболических процессов. Так р. зирителышй эффект адреналина, который по своей природе также яелччтея метаболический, только и 20с с начала внутри?, ртери.5 льного введения аостига0т го-25х максимальной величины пилятацин, которая проявляется на 35 - 40с (Lundholis, 1956; U'jndholT ft al„ 15i>6; Сергеев, 1934). Homo предположить, что быстрое развитие' холинергической плэоднлятацин опосредовано прямым действием холииергических симпатических волокон на гладкую •«иену сосуда. Для изучения возможного симпатического холинергического злияни.ч, адресованного непосредственно сосудистой системе скелетных миац-Сыла приведена серия работ на изолированных препаратах артериальных сосудов п опытах In vitro.

ВЗУТКЗВЙ ГЯАКЦВП ПЗОЯПРОВЛЯПОГО ПРЕПАРАТА КАУДАИЬНОП ВЕДРЕЯПОП ЛРГКРПЯ КОПГЯ ПА ЭЯЙХТГПЧЕСХУS3 СТПИУЛЯППП

йггавлехуяярянх вгрэтга сояокоя я эгявдпзпгаго лщггедхопкил.

Дал изумгннч реакция изолировяг.них артериальннх сосудистых npsr.ip'jTon sa стимуляцию п»рийас.чуляр:№х нервный волокон и зт(зоге:п:ь:Л зцетиихопия б «ля иибраяз каудэльная бедренная артер-ип Ii. л: rails j. Isaorall» caudalu). распояагавгаяс? ммз} ЯлТерзлы-ой л иегпапьиой гопогязми икроножной инпты голени *-ояви |'Псяп?1"гг!, 1'373). "лот сосуд спзб-глст кропью трегглапу^ ни тли-голени и участвует и реализации с.чкнати чргкой холмя»ргкч»с»»о?1 гаейиритечьпой р*чкцич. Оогчзсно фиэизвогич?с кии пяними

холинергическое расширение проявляется на участке сосудистого русла диаметром от 70 - 300 икм ¡Folkow et al., 1SG1). Именно в сосудах этого калибра находят ацетилхолинэстеразу, что дает основании считать, что они иннервируются симпатическими холинергическими волокнами (Bolme et al., 1970; SchenK, Badawi, 1966). Учитывая эти данные, для исследования возможности проявления нейрогенных холинергических расширительных реакции в опытах In vitro использовали сегменты каудальной бедренной артерии кошки с диаметром проксимального конца от 150 до 300 мкм. 9.1.Анализ реакций изолированного сегмента каудальной Ьедреиной артерии кошки иа трансмуральную стимуляции иерниых волокон проводили на фоне исходного сосудистого тонуса, создаваемого введением в перфузионный раствор норадреналина в диапазоне концентраций от 10"^ - 10"^ г/мл, что вызыьало увеличение перфузионного давления из 60 - 80 мм.Не. При длительной перфузии препарата раствором норадреналина давление в сосуде оставалось без изменений в течение нескольких часов. В некоторых сериях экспериментов для создании исходного тонуса использовали и другие сосудосуживающие агенты: простагландин FiU или вазопрессин. Параметры электрической стимуляции препарата подбирались таким образом, чтобы в реакции вовлекались только нервные волокна, расположенные в стенке сосуда, не вызывая прямого ответа гладких мышц сосудов (Медведева и др., 198В).

Стимуляция сегмента каудальной бедренной артерии кошки импульсами различной частоты на фоне исходного тонуса вызывала разнонаправленные вазомоторные peaKifim или не влияла на тонус препарата (рис. 6). Видно, что расширительные реакции наиболее часто проявлялись при частотах стимуляции 4-6 имп/с, а суживающие - при 16 имп/с. Необходимо отметить, что в обработку включены результаты только тех опытов, где на одном препарате наблюдались как расширительные, так и суживающие ответы.

Был проведен фармакологический анализ природы наблюдаемых аффектов. фентоламии в концентрации 10"6г/мл практически полностью блокировал суживающий эффект, полученный в диапазоне частот стимуляции 4-16 им/с. В среднем яо 6 опытам прирост перфузионного давления на нейрогенное возцействие составлял S3 f 19* во отношению к величине тонуса, создаваемого простагландинон Т1А. фентоламин уменьшал суживающий нейрогенный эффект на 9S12* (р<0,01). Расширительная нейрогенная реакция практически полностью блокировалась атропином в концентрации 10 г/кл. В

средней ко данным 6 опытов, и которых регистрировтлось расширение, падение перфузпонного давления составило Ы + 13* (пределы: 3; -80Х) от величины тонуса, созданного норадреналмном. Атропин уменьшал нейрогенлнй расширительный эффект на 93 • 10* (р<о,сШ1). Полученные результаты позволяет говорить о разной природе наблюдаемых сосудистых зффектоп: суживающие реакции опосредованы активностью а-ль^а-адренорецелторов, в то время как растирительянй Н-холинорецептораии. Следовательно, наблюдаемая нейрсгениач рлсвирительная реакция имеет холннергическую природу.

: .с?)тл стппнпии ..Ся 0,2ис 0,6о ВОТ П71Ш ОСТЬ (L/ МЕШ %

СЛЕ •ИЗ псслгаи К ОГСЯСТКШ

2 ГЦ 27 н ад

't ГЦ 27 su 19

Я ГЦ 27 71 г

15 га 75 В 7

Г~~) - суяокиэ ГПЗ -расгар-эиие

' гга %

2 «мл/о

-OTCJtCrBKO Эчф,

<» гая/о

я еип/о 16 куп/о

Гис.Ь. Гистограмма встречаемости разных тпноп сосудястмх ответов гз иер^узируемой каудальиой бедренной артерии копки s завнспиостп от частоты стимуляции препарата. tia 100« прмнчт» сумка псрц тчисн отиотоп ¡4дн их отсутстнпг IIрп данной частоте стимуляции. Но ос;! абсцисс частота стпиуляции. По оси ординат процент [встречаемости того или иного ответа Параметры «п имуляциг«; ялпряггпп' 50 I!, длит, стпву.п 0,1-0,? мс, сила ТОК". 0,1(1,'. *1.

ОГРагНО Ur0HrTan.n?ÍUIPM г у тг у ~ Г И ' Г " ! > Л Í " ^

- JO -

точек приложении дейотьи» ацетилхолима. Имеются данные об участии эндотелиалышх И-холииорецепторов в нейропенноИ регуляции сосудистого тонуса (Frank, Bevan, 1У83; Kitasava et а!., 1987; Bassenst, Вчле, 1ч6в). Существуют пресинаптические тормозные Н-холинорецепторы, при активации которых уменьшается выброс иорадреналина из симпатических окончании, что приводит к расширению сосуда (Stiepiierd, Vanhoutte, 19В1; Uurlyœa, SujuKl, 1981; Rand et al,, 1987). И, наконец, существуют нос тс и на il т и ч e с кие H-холинорецепторы, расположенные на мембране гладких мышц сосудов.

Для реиения вопроса о том, через какой М-холинорецептор реализуется ньйрогениое расширение, наблюдаемое ъ перфузируемом сегменте каудальньи бедренной артерии кошки, были поставлены следующие серии опытов. Известно, что гуанетидин в концентрации 5х10"5г/ил блокирует выброс норадреналина из симпатических окончаний. Изучение действия гуанетидина на проявление пейрогенных реакций сосудов при траксмуральной стимуляции позволяет решить вопрос об участии адренергических волокон в расширительной реакции. Если наблюдаемая вазодилятацИя реализуется при участии пресннаптических М-холинорецепторов, то гуанетидин, наряду с суживающей реакцией, должен снять и расширительный ответ. Экспериментальная проверка показала, что гуанетидин в концентрации ю"^ г/мл блокирует проявление суживающего эффекта, увеличивая при этом, частоту встречаемости расширительных реакций. На рисунке 7 показано, что при частоте 4 имп/с встречаемость расширительных Цветов возрасла в Z . раза (п*9), при В имп/с - в г,S раза (п=8). При 16 имп/с до введения гуанетидина расширение практически не проявлялось, на фоне его действия вазодилятаторные реакции встречались в 50* случаев.

Приведенные давпые свидетельствуют о том, что иейрогениые холинергические расширительные эффекты, наблюдаемые в каудалыюй бедренной артерии кошки, потеииинруются при блокаде «иреиергических влияний. Это позволяет сделать вывод о тон, что изучаемый эффект ne опосредуется вресинаптическими н-колннорецепторамп, п, по-вицииои7, в норме ааренергические суживающие влияния маскируют проявление холинергнческого расширения.

Возникает вопрос о существовании пресииаятическиЕ Н-жолииорецепторов в каудалыюй бедренной артерии кошка. Ряд авторов " питался объяснить происхождение голпнергической

газоцилятации, наблюдаемой в сосудах скелетных Н'.юч ut>". стимуляции симпатической систем«, через активацию тормоз mix Н-.•^олииорецепторов (Vanlioutte et а 1., 1931).

РЗ

0

Н

1

о м

ВО

60

40

20

i

IG

2

?нс.7 . Ллвевпс гуапетядпнгг г/мл) па прояяпеяпе

расят1рптелы.ого ответа при разных частотах траясмуральяои сч-януяиции. Яо осп ордипат: г встречаемости эффекта, по оси Абсцисс - частота стимуляции. *Черпис* столбпкя - процент г.стрепасиосг;! рзевнрптельпой реакции до действия гуапетпдпиа, беяна - поеяе ei'O применения.

С другой стороны, в литературе имеются данные о гетерогенности распространения пресинаптических И -

Кслинорецептороя, которая определяется типон сосуда и видом оргмиа (Rand et з)., 19ЭТ). Наличие этого типа пресииаытических. ргцептороо к кэудлльиой бедренной артерии не исследовалось. и связи с этим, в отдельной серии экспериментов изучалось влияние экзогенного ацетилюлиня нз величину суживающего • эффект.), вызчряечого трамемуральной стимуляций изолированного сегмента кзуг.а.'п.ноЛ бедренной артери-,'. хсчзки. Нч г одном из ¿5 ?!'cnnp:'Mf>HTC4 не удалось гмяпит"- изненеиич в«пнтл>тм нэйрегрнног о

су »'.иг.лю^рго ory.^T.i -при fl<it>à г.лг-тш и и ■■■ г<\ л ;<-.м ; '. r;i г.

диаииаоне ;;онцентраций от 1СГ^о КГ^г/ил. На другом i'.f.u-ij i'rc- -сегменте хвостовой артерии крысы ацетилхолин и таких у г условиях опита вызывал значительное уменьшение сократптеяыюг о j ; ! возникающего в результате траксмуралыюй стимуляцкн препарата. Таким образом, отсутстзие холинергической hoj.v .ши выоросг нсрадреналина из симпатические нервных окончании ь ¡-мудаг.ьниЛ бедренной артерии кошки можно связать с отсутствием II-хояинорецепторов на пресинаптических окончаниях. По-г;идиному, с механизма реализация холинергической пазодилятаци.?, наблюдаемой при стимуляция "зоны защиты" гипоталамуса, иресинаг:тич^ск:1Р М-холинорецепторы не участвуют, так как их не удапс; îimuiîть и сосудах, в которых этот эффект проявляется.

Возможность участия эн дотелиалышк И-kojiîiii.jï .ецепторов с холинергическом расширении препарата каудальной бедр.мшой артерий ковки, вызываемом электрической стимуляцией, . изучали i; серии экспериментов с удалением эндотелия или применением специфического блокатора гндотелийзасисимых реакций квинакрина. Добавление в перфузирувщий раствор кыинакрина в концентрации 5х1(Г^ r/ил не ьызывало достоверных изменений холинергического нейрогенного расширения ( табл. 2). В серии опытов со снятием эндотелия сосудов нейрогенный расширительный эффект составлял 33+9* (пределы: 19 - 66*), по отношению к активному тонусу, созданному норадреналинои. После снятия эндотелия величина расширительного эффекта составляла го+тх (пределы: 12 -36*). Различия в величинах расширительных эффектов, наблюдаемых при трансиуральной стимуляции сосудистого препарата до и после снятия эндотелия недостоверны (р>0,05; си. табл. 2). Однако, необходимо отметить, что в 3 опытах из 5 в з-гой серии экспериментов расширение после удаления эндотелия было несколько меныае по величине, чем до удаления. Недостоверность полученных данных не дает возможности говорить об участии эндотелиальныг Н-холинореценторов в реализации нейрогенного расширительного эффекта. Однако, некоторое уменьшение его в сосудах со снятый эндотелием оставляют вопрос о частичном участии энлотелиалышх Н-холинорецепторов в реализации Нейрогенного холинергического расширения открытым. Исходя из этого изучение свойств Н-холинорецепторов, расположенных па эндотелии каудальной Оедреиной артерии копки представлялось Интересным.

4.2.Анализ эвдотел пйэависиньах реакций каудальной бадреппой

;i p г ри !■ :-олпмт на а ц е ти л х ол и и. Для исследования

•»irtc-i г п;' '•лг!1с:'.'1н?: расоирительных ответов на ацетилхолин и а

in:"!!;■ гг^олиропанного сегмента каудальиой бедренной артерии

•■соки с. j/Татли активное тоническое напряжение гладкие книц

с'.'о'дс:;. /'ля этого, т<зк*е как и п предыдущих сериях, использовали

р л створ ноодлреналинл. в средней по 5 опытах иораяреналнн я

концонтрацпи 10 ' -10" р/ил вызывал увеличение перфузионногс

давлен'.*". ::< т + 7 мм Hg (пределы: 60 "95 мм Hg). Добавление к

-9 -6

пер$у:.-гу 1 ц^тилхолина в концентрации 10 -10 г/мл пизмоало

до.7о-2зе:!г.гмое уненьгзение сосудистого тонуса. Эффект, ка«

-9 -3

прчснлс. .'ычлнл.л проявляться при концентрации ¡0 -10 г/мл п

-7 -6

цсстгга 1 максимума при концентрации 10 - 10 г/мл. В среднем по б опытам с-лпхзпие перф у знойного давления составило 1SJ-2 мм Hg (иреие,чп: 15 - 25 мм Hg), что в процентах к сосудистому том/су, со1ЯД!!з?.Н';.".у нораяреналином, составляет 25+4'/. (пределы: 17 - je"/, см. табл. .?). ДальнеЛпее увеличение концентрации ацетилголина приводило :*. извращению сосу порасширителыюй реакции я

с.1 -удосу хи к л тзпу ю. Необходимо отметить, что концентрации

/

ацот-.глхолияа, ' которые яизнвают расаиреиие бедренной артерии stcijitii, -ü' ä-'H? рльио низе: (примерно на два порядка) концентраций, которые зь-.ч'илот лолой.чцп яе эффект на других сосудистых: препаратах, ~з частности d naaeft работе на хвостовой артерии крысы (Ео-Тует-Чк.Ч!, п яр.,' 1407),

Л я я анализа механизма действия экзогенного ацетилколина было паст-аг-лапо несколько серий опытоз. Атропин, вводимы» :i парфуз:!ру^ц:ч) раствор в концентрации' Ю"6- 1о"5г/мл снимал ргсхмричьяъныл зф}ект экзогеаног'в аце-пуиолина на 00 t 12'< (прег.елк: -100^1, что свидетельствует о том, что наблюдаемый расЕ!!?итег.ьный эффект практически колкость» реализуется через М-холииор^цептпрч. Специфический блокатор эндотелийзазг.симогз рзсиирешгя - кзинакрин в концентрации 5x10^ г/Мл достоверно блокировал расширительный эффект экзогенного ацстилхояпяз (см. тгбп. с). Учятывап тот Факт, что квинакрнп в используемой концтчтрацли немного умем.ьппл суяиоак'ЩИй эффект норадрен-члин.!, а Sf.'üi'HHu у:<дотелийзаяисииого распиритяльного эффекта ззписнт <;v р?личи1": ясхопчого тонуса, Сила поставлена серия экспериментов, о kotcj:;:: лэучглс.ч эффект тс:;р. ацетмлхолнпа из сосудах со

сигт'.'й эчзс.телием. Смяо покалане, что после кеэндотт.иззпчч п бо.-.ь viHCT»e случаен (г 4 из :) ак«тилаолин емзыпзл на раеппргиив,

ц сужение сосудов.- В среднем по 5 опытам атом серии регистрировалось увеличение перфузионного давления на 10/.. Известно, что эндоте.'шйзависииое расширение можно заблокировать И на уровне гладкой мышцы сосуда (РеасГ», 1935). Показано, что вазодилятаторныи фактор, выделяющийся из эндотелия при действии на гладкую мышцу сосуда, активирует в ней растворимую Фракцию гуанилатциклазы.

Таблица 'В. Анализ расширительных эффектов при действии экзогенного ацетилхолина (АЦХ) и трансмуральной стимуляции в изолированном сегиеие каудальной бедренной артерии кошки, предварительно активированном норадреналином (НА ).

Вид воздействия

НА

Перфузионпое давление мм. рт . ст.

НА ♦ АЦХ НА НА + Стии.

Контроль

После деэндотели-«изации воздухом

74+7 56+7«

п = 5

ьг+а

66+8

Контроль

50+4

П = 6

Нетиле^овая синь 52+6

(5x10 Г/мл)

40 + 4«

О

49+6

60+4 <ице<<

п : 5

50+6

36+6»

Контроль 63+5 49+7» 65+10 21+1»*«

п 5 5 ' п : 5

Квинакрин (5х 10" 5-/МЛ) 46+6 45+7 69+ 13 30+ 12««

7217 56+8«

п = 5 78+12 55+13«

Контроль

50+4

Атропин (10~бг/мл) 52+3

п = 4

40+4« 47+5

65+10 21+ 1 1««»

п -- 5 64+10 59+9

» - р<0,05; »» - р<0,01; ««« - р<0,001 по отношению к тонусу, созданному норадреналинои .

активному

Активация этого фермента приводит к увеличению содержания ЦГНф и уменьшению содержания свободного Са* внутри гладкомышечных клеток (Вегг1с1(е, 1985). Специфическим блокатором растворимой фракции гуанйлатциклазы является иетиленовая синь. При добавлении нетилеяовой сини к перфузируьщему раствору в концентрации 5x10 гумя наблюдалась блокада расширительного действия экзогенного ацетилхолина.

Такин образом, экзогенный ацетилхолин вызывает расаиреяие изолированного перфорируемого сегмента каудальной бедренной артерии кошки. Этот эффект опосредуется 11-холинорецепторами. расположенными на эндотелии сосудов. Анализ механизм.! действия экзогенного ацетилхолияа в исследуемом сосуде свидетельствует о том, что он реализуется так же. как и в других сосудах. Отмечается высокая чувствительность эндотелиальных Н-холинорецепторов к аяетилхолину, что может иметь больное значение для местной регуляции кровотока, так как локально действующие с^ стороны кроготока концентрации ацетилхолияа не могут быть Сольсими и связи с его быстрой деградацией ацетилхолинзстерззой [Нихельсон, Зеймаль, 19Т0).

ЗАЯЛтЕПИЕ.

В ходе выполнения настоящей работы было выявлено два ззаииосзязанных эффекта, вызываемых холинергическйми

ci шатическпми влияниями на скелетные иыпцы: трофический эффект, выражающийся в активации анаэробного метаболизма поперечнополосатого мыяечного полскпа и сосудистый эффект, имеющий елоянуг природу.

Изучение холинергпческой симпатической расширительной реакции позволяет гоггоритЬ о существовании нескольких компонентов в механизме ее реализации. Один из пнх связан с прямим нервным влияписи па сосудистый тонус. Этот эффект опосредуется, по-видимому, активностью Н-холянсредепторов, расположенных в гладкой ныпце сосуда. Участия пресиналт«ческиха и зндотелиальных И-голинорецепторсв в реализации голянергпческого нейрогенясго расширительного эффекта выявить не удалось. Яругой компонент холизергической вазедилятацип является по своей природ* метаболическим. Он отражает изменение метаболизма поперечнополосатого мывечного волокна, вызываемого холинергическиии симпатическими слияниями на скелетные кывци. флктпрсм. подстраипающим кровоток скелетных мыпц к измененному обмену являете* осмотическое давление кежткапезой жидкости. Показано, что гичеросмолярносгь возникает за счет увеличения конпентряаиг" канон натрия, калия н молочной кислоты. Основной вплад в узелосмотического давления плазмы креги ансскт возрастали» концентрации ионов TSa* (окояо Т4*).

Изменение метаболизма скелетных яыпц, которое отражает

гнперосмотический эффект, изучены нами ранее. Было показано, что в ходе развития холинергического расширительного эффекта, вызываемого стимуляцией гипоталамуса или симпатической цепочки, наблюдается активация анаэробного метаболизма в скелетных иыпцах. Эффект имеет холинергическую природу (Нердина, Родионов, 1973; Бердина и др., 1973). Трофические влияния, которые проявляются в неработающей мышце в виде расширительной реакции, ври сокращении скелетных мышц реализуются в увеличении их работоспособности. Анализ аффекта увеличения работоспособности, вызываемого стимуляцией "зоны защиты" гипоталамуса, показал, что он не зависит от кровотока и от центральной "моторной команды", а обусловлен, по-видимому, Метаболическими изменениями в работающих иывечных волокнах.

На основании своих и литературных давних предложена гипотетическая схема реализации симпатических холинергических влияний на обмен и кровообращение скелетных мышц (рис. В). Стимуляция "зоны защити" гипоталамуса вызывает возбуждение симпатических холинергических волокон, которые шшерзируют как волокна скелетных иишц, так и сосуды, расположенные в их ткани. Этот вывод основывается на данных фармакологических и физиологических экспериментов {Folio», Uvnas, 1948; u*na t, I960, 1966; Родионов, 1979; Bell, 1983). Морфологические доказательства существования холинергической иннервации сосудов скелетных иыиц в настоящее время отсутствуют. С помощью гистохимических, методов исследования было выявлено наличие ацетилхолинэстераза в стенке артериальных сосудов диаметром от 7<Р до 300 мкН, что позволило' высказать предположении öS иннервации . сосудоз этого калибра холинергическими волокнами (Bolne, Fuxe, 1970).

Ходинергическая симпатическая иннервация кнтрафузальных волокон скелетной „ мывцы кошки показана с помощью эпектронномикроскопических методов исследования (BirKer, Salto, 1961). Возбуждение холинергических симпатических волокон приводи* к выделению из их окончаний ацетилхолина, который действует на Н-хояинорецепторы, расволоженкые на нембраяе поперечко-цояосатоГо мывечного волокна и на Н-холинорецепторы, расположенные на мембране гладких нывц сосудов. Доказательства мускаринсвой природы холинорецепторов основывается на данных фармакологических экспериментов (Burn, ' 1938; Uvnas, 1960, 1566; Родионов, 1979). Трофическое влияние ка скелетные мышцы, по-видимому, может реализоваться через активацию Hl-холииорецепторов, что вызывает

гидролиз фосфониозмтидовг (Ber-ridgi, Irvin, Wl; AMel-Lallf, 1986 ). Этот процесс, стимулируя освобождение ионов кальци* из саркоплазматического 'ретнкулуиа с одной стороны может .способствовать увеличению работоспособности скелетных мыиц, а с другой стороны, активиродать анаэробный метаболизм, что также может реализоватся в прибавке работоспособности. В неработающей конечности активация анаэробного метаболизма скелетных мышц может приводить к увеличенному поступлению молочной кислоты в кровь. Имеются данные в пользу того, что этот процесс сопряжен с активацией На/С насоса, в результате чего содержание ионов натрия

/

в плазне крови может увеличиваться (Dloufia et al., 197Э; Платонова и др., 19S6). Возрастание в плазне крови концентрации молочной кислоты и ионов натрия, приводит к подъему осмотического давления. Гиперосмолярность вызывает расииреняе сосудов.

Одновременно с влиянием на обиен поперечно-полосатл* мышечных аолокон могут реализоватся нейрогеняио хопннергические влияния на токус сосудов. В этом случае активация Н-xi линорецепторра, расположенных, на мембране гладких мыяц сосудой возможно при ' участии ГТФ-связаииого белка, ножет привести к откритик> калиевых АТфгзавйсимих каналов, что реализуется р. гидерволяризации гладких ныиц я расвирении сосудов (Tajlaa, et af., 19Э7; СооК, 1938). Вероятно, в результате этого процесса иожет происходить увеличение содержания иопоп ¡^ в плазне кроз»; что также мояет вносить вклад я усглгченне осмотического давления плазиы jiponti.

Возникает вопрос о взаимосвязи двух иехаиязиов реализация ходинергической вазодияятации: Heilporeimgro и метаболического, Bup.isaßqercca через увеличенное осмотическое давление пдазны крови. По-вндимсму, они разнесены по году сосудистого русл&.

• По данным Физиологических и гистохишгческих ексяеринеигос нейрогенная пазоаилятадия выявляется в сосудах яианетрсм от 100 до 303 якН, При действии же метаболических факторов расширяются терминальные артериолм, которые, по-вндимоиу, не имеют «оляяергической иннервации (Meilander et al., 1967; Scott et al.t 1970! FolKovf et al., 1971). Иояно думать, что нейрогенный и игегсболическиЯ нгзсгнизнк обуславливает разные фазы вазодияятации. Нгйрогепимй эффект, вероятно, играет запускающую роль, oiecue-шзая быстрее ( патентный перед 2-5с) и стремительное развитие яилятации, в то время, как местные механизмы обеспечивает стабилизации кровотока и медленного коэиращеиия

к норме. К сожалению, в нашей работе нам не удалось достоверно оцгнить вклад нейрогеииого и метаболического механизмов в структуру холинергической расширительной реакции.

Гас.0 Схеиа реализации скипатическЕХ ховжнергическпх вгпдд»» ва обмел и к ровоО ращение скелетных кыкц.

Оценка, проведенная по возможному вкладу осмотического Фактора отводит ва метаболический эффект около подовяяы регистрируемого увеличения проводимости сосудистого русла скелетных мыса ори хояивергических воздействиях. Однако, оаа носит оцепочвый характер и указывает на то, что определенная часть наблюдаемого холянергического расширения определяется воздействием па сосуды повышенного осмотического давления крови и мнтерстиянаяшой

ЖИДКОСТИ. ;

Попытки проанализировать структуру (олияергаческого расширения с помощью специфических Олокатороя анаэробного метаболизма и На/1 гасоса ве вали ояяоэяачного ответа.

Мсноиодацетат полностью блокировал развитие холинеррнческоЛ вазодилятации, что могло поставить под сомнение существование нейрогенной фазы или ее значение в проявлении этой расширительной реакции в опытах ш Я1и. Однако, ионоиояацетат вводился животному системно и в одинаково!'! степени но г ингибирон.зть процессы гликолиза как в скелетной мышце, так и в гладкой иышде сосудов, где он также может играть ключевую роль в механизме возникновения нейрогенного расширения (см. рис. 8).

Обсуждая вопрос о функциональном значении холинергиччеки* симпатических влияний на метаболизм скелетных мышц можно сказан, следующее: холинергическое увеличение работоспособности, вневные описанное в напей работе, можно рассматривать, как Фог-му проявления регуляторного симпатического влияния на работоспособность мыпечного волокна, т.е. он представляет сойой одну из Форм (ранее неизвестную) проявления Феномена Орбели-Гинецинского. Как же можно представить себе реализацию холинергического ' увеличения работоспособности в естественных ус !опиях? Известно, что холинергическая вазоднлятация возникает у человека при'' эмоциональном напряжении. Подобное состояние возникает у людей в различных ситуациях и, в частности, о нехарактерно для предстартовой реакции спортсменов ( Ниссюро и др., 1954). Отмечено, что у спортсменов в предстартовом состоянии увеличивается количество молочной кислоты в крови, что отражает активацию анаэробного метаболизма ( Яковлев, 1954, 1955 ). По-видимому, в этом случае, эмоциональное напряжение имеет положительное, адаптивное значение, так как оно подготавливаем организм, и , в частности, двигательный аппарат к выполнении работы _ путем изменения метаболизма скелетных мышц, что реапизуетсч в возрастании выносливости работающих мышц. Таким образом, выявление холинергического увеличения работоспособности, сопровождающее состояния эмоционального напряжения, расширило существующее понимание адаптивных механизмов эмоцнональнг ■• соматических реакций.

Итак, функциональное значение трофического

холинергического симпатического влияния и?, сксл^тиме нкяии состоит в увеличении их работоспособности. Эффект не зависит от ировстскл. Каково яе, в тэком случае, функциональное лначеми» сосудистой реакции ? По-тш/шмому. хс линергичог^ое расширение • •охот й"«-ть сигчальчое значение, учитыва» чег.лвно открытое сг". о 'I с т II о лртеиианьяых сосудов регу лирч'ззть спои про'.иет к

соответствии со скоростью движения крови, что позволяет поддерживать высокую эффективность их приводящей функции (Нелкуиянц и др., 1961 SmesKo, et al., .1937; Хаютин, 19B7 ). Усиление эффективности проводящей Функции сосудистой системы в условиях предстоящей физической работы, можно рассматривать как одну из форм подготовки сосудистой системы к работе. Возможно, в запуске этих реакций и состоит функциональное значение холинергической симпатической расширительной реакции.

ОШЮДЫ:

I. Активация симпатических холинергических влияний вызывает значительный расширительный эффект в сосудах скелетных мышц и изменение метаболизма поперечно-полосатого мышечного волокна 8. Холинергическая симпатическая сосудорасширительная реакция, имеет сложный механизм возникновения. Экспериментально доказано участие нейрогенных и местных реакций в реализации этого эффекта. 3. Нейрогенный холингргический расширительный эффект выявлен в опытах in vitro на препаратах изолированных сегментов артериальных сосудов, участвующих в реализации хояинергического симпатического расширения в условиях In vivo. Эндотелиальные и пресинаптические Н-холинорецспторы п реализации этого эффекта участия не принимают. Полученные экспериментальные данные можно рассматривать как физиологическое доказательство существования холинергической расширительной иннервации артериальных сосудов скелетных мышц кошки.

1. Участие местных механизмов регуляции сосудистого тонуса обусловлено изменением метаболизма скелетных иыиц, активируемого холинергическими симпатическими воздействиями. фактором сопряжения между уровнем обмена и кровотоком при холинергической вазодилятации выступает повышенное осмотическое давление межтканевой жидкости. Гиперосмолярность возникает в результате повышения концентрации ионов натрия, калия и молочной кислоты. Увеличение концентрации ионов натрия, которое вносит основной вклад в осмотический эффект (74*), связаио, по-еи димому, с интенсификацией активного мембранного транспорта ' натрия в Волокиаг скелетных мышц. Возрастание концентрации молочной ь1йисйоты отражает активацию аваяробного метаболизма поверечно-• волосатого мывечвого воло»лна. :

5. функционально'; значение холипергмческого симпатического расширительного эффекта состоит в подготовке скелетных мыац к Предстоящей работе, путей усиления эффективности проводчщей функции сосудистой системы по механизму потоко-зависимой дилятации.

6. Симпатические холикергические влияния вызывают увеличение работоспособности скелетных мышц. Прибавка работоспособности п? зависит от кровоснабжения скелетных мыпц и. центральной моторной команды. По-видимому, увеличение работоспособности происходит п результате метаболических изменений , вызываемых симпатическими холинергическимя влияниями. Предложена теоретическая схема механизма метаболических изменений, которые могут приаестн к возрастанию работоспособности скелетных мышц при симпатическом холинергическом эффекте.

7. Холинергическое увеличение работоспособности скелетных иагац представляет собой одну из форм проявления регуляторного симпатического влияния па работоспособность мыпечного волокна, т опо представляет собой ранее неизвестную форму проявлейия феномена Орбеля-Гинецинского. Эта форма увеличения работоспособности сопровождает состояние эмоционального напряжения, что распирает суцествующее представление об адаптивных механизмах эмоционально-соматических реакций. Спнсои работ, оауОлпковапнмх по гене диссертации:

1.0 Функциональном значении симпатического расширительного эффекта п сосудах скелетных ныгац./ДАН СССР.-19Т1.-Т.197.-0.1213 -1221 (в соавт. с О.Я.Колепко, Й.И.Родионбвнн, В.И.Тхорсвским). г.Работоспособпость я кровоснаЗнеяие ^скелетных иыпц прч эмоциональном напрчаенни, вызванном счетом в уме./фиэиол.ж.ссхт.-1971.-Т.57,-С.516-555.(в соазт. с О.Л.Коленко, Я.Н.Коцсц, С.П.куэяецовни и др.).

3.Ths raise oí efficlcncls In the Jlteletal nujcie of raan durln* «notional {tress./ Circuí. Яез.- 19Тг.-У.30.-р.ЬЧг-650. (In -.nil. O.L.KoienRo, S.P.KusneJov., A.P.Savchenío et al.,). <.Влияипе симпатической системы на метаболизм, кропоснаб.*г-н>и и работоспособность скелетных мыиц./В хм.'.Материалы з Ьсппю-ыпи конференция по Физиологии вегетативной нервной сиг темы.- Среяэг'.-1971.-С.26. (в соавт. с О.Л.Колеико, С.П.Куэнепоппм, й.М.Йоием и пр.).

5.0 независимости "эмоционального" повыаячич работоспособности i-r величин;! кровоснабжения работа од их мн:лп./ Слэионег.*.''ССГ

»97 3.-T.b9.-C.Tti-Ti.CT.. I. и 'i. .v.is.-«-- ЛХ {«ewp^utw. JL ;f..M-ttC«s*.»«.

Ь.И.Тхсревскии).

6.Холинергические трофические влияния симпатической системы на скилетную мышцу и их функциональное значение./ В кн: "Центральная регуляция кровообращения"- Материалы i Всесоюзного симпозиума.-Кпс-в.- 1973,- С.39-40. (в соавт. 0. Л.Виноградовой, Я.Н.Коцем, И.Н.Родионовым).

7.Влияние симпатической системы на метаболизн, кровоснабжение и работоспособность скелетных мышц./ В кн. Центральные и периферические механизмы вегетативной нервной системы.- Ереван.-197 5.- С.44-47. (в соавт. с О.Л.Коленко, Я.Н.Коцем, С.II.Кузнецовым и др.).

Ч.Activation of anaerobic metabolism in cat skeletal muscle during choline r g l с vasodilatation./ Pflug.Arch.- 1976.-V.367.-P.37-иг. ( in coll. I.M.Rodionov).

9.0 Функциональном значении холинергических влияний синпатической системы на скелетную мышцу./ В кн: 3 Всесоюзный симпозиум до Центральной регуляции кровобращения,- Волгоград.- 1977.-С.36. (в соавт. с О.Л.Винограговой, Я.Н.Коцем, И.Н.Родионовым и др.). Ю.Холинергическая ; вазодилятация и работоспособность скелетных мьшц ./В кн.: Современные проблемы регуляции кровобращения.-Киев.Наука думка.- 1976.- С.19-24. ( . в соавт. с О.Л.Виноградовой, Я.Н.Коцем, И. Н. Родионовым и др.).

И.Холинергические влияния, вызванные стимуляцией переднего гипоталамуса на работоспособность скелетных мышц./ Научные доклады выспей школы.- Биологический науки.- 197в.-!!7-С.77-01. (в соавт. с О.Л.Виноградовой, Я.Н.Коцем, И.Н.Родионовым). 12.0 функциональном значении холинергической вазодилятации./ физиологии человека.- 1976.-Т. 4.-С. 461-467. (в соавт.с

0.Л.Виноградовой, Я.Н.Коцем, И.Н.Родионовым и др.). 13.0hollnergic and adrenergic Influences upon cat skeletal muscle performance Induced by stimulation of the anterior hypothalamus./ Pflug.Arch.- 1976.-V.378.- P.149-154. ( In coll. J.H.Koti,

1.M.Rodionov, V.I.Tchorevsky et al.,).

14.Неханизмы реализации симпатических холинергических влияний на скелетные мыщцы./В кн: 4 Всесоюзный симпозиум Медиаторы ti норме и патологии,- Казань.- 1979.- С.14. ( в соавт. с И.Н.Родионовым). lb.The content of cyclic nucleotides {3,5-cGMT and 3,5-сАНУ) in cat sKeletal muscle during г/ в p a t li 111 i: cholinergic vasodilatation./ Pflug.Arch.- »980.-7.363 - Г .?<; r--? 4 S ( is- oil

I.M.Rsdionov).

16. The functional sljnlilcanse oí cholinergic va«o<Hlat ion./ Proc. of the Int.Union of Physiol.Set.- • Dudapeit.- I'.IOO.-P.665.-H293&. ( In coll. O.L'.Vlnogradova, J.M.Eot» et al,}.

17.Холинергические симпатические влияния на кровоток и содержание циклических нуклеотидов о скелетных мышцах.// фиэиол. журнал СССР.- 1980.- 1П.- С.1070-1074.(совмест.с Родионовым И.И.).

18.К вопросу о второй медиаторной функции ацетилхоляня ни поперечно-полосатом мышечном волокне.// Тезисы докладов 3-ей Конференции по физиологии и биохимии медиаторных процессов.-Казань.- 19С0.- С.гь (совместно с Сергеевым И.Ю., Родионовым H.H.).

19.Изменение осмолярности крови, оттекаюдей от скелетных мигай котки при полинергическон расширительном эффекте, пызпанком раздражением гипоталамуса.// физиолог.журнал СССР.- 1981,- C.Sßy-г93. (совмест. с Родионовым И.И., Сергеевым И.Ю.).

£0. Вторая медпаторная функция ацетидхолияа в скелетных MuraiMï не.гторых оидрв млекопитающих и человека.// В сб. Восьмая всесоюзная конференция по биохимии нервной системы. - Нинск.-5960.- С.10Ь-107. (совместяо с Родионовым И.Н.).

21.Холмиергические и адренергические влияния на кровоток И работоспособность скелетных мышц.// В сб. Регуляция кровообрапеняя s скелетных мышцах.- Рига.'Эипатяе" - 19SO.-C.15-it. (совместно с Випневецкой H.A., Родионовым И.Н. и др.). гг.Изменение состава плазмы, приводящие к увеличении} осмотического давления венозной крови при холинергическом расширительном зф$екте.// физиолог, яурнзя СССР.- 1931.- Т.67,-!111,- ' С.16Ч7-1651. (совнестяо с Родионовым В.И., Сергеевым tj.ru. гЗ.Гипотаяамяческие влияния па обмен п работоспоссбнрсть скелетных ныпц, реализуемые через холинергическне симпатические волокна.// В сб. 9 Всесоюзная конференция по физиологии il патофизиологии кортико-внсыеральных пзаиноотноаеиий- Ленингр.щ,-1981,- C.61-6?. (совместно с Родионозыи Я.Н., Сергеевым îl.li.y 2*.Increase of osmolality of venous blood fron skeletal misclr during chMlnerjlc vasodilatation.// Ffluij. Arch.- 1<39г,- V.39.?.-P.39 4-39". (in coll. üodlonov I.H.).

* »

23.Роль осмолярности крови и состояние ныпечного метаболизм в проявлении центральных влияний, вызызарщих яолииергическуп зазояиячтаппг»// Ь сб. я ВсесчззишЧ симпозиум по и^нтряльч-.'И регуляции кровообращения.- Т^рнозсль.- 1981.- C.í'1-i'i (гогм.с

Сергеевым И.Ю.).

ib.Периферические механизмы регуляции симпатического

холинергического расширительного аффекта.// Материалы 5 всесоюзной конференции по физиологии вегетативной нервной системы.- Ереван.- 1982.- С.277. (соамест. с Родионовым U.M., Сергеевым И.Ю.).

? Т. Влияние ииноиодацетата и уабаина на холинергический расширительный эффект в сосудах скелетных мышц кошки.// физиолог, журнал СССР,- 1983.- Т.69." N 10,- С.1313-1319. (сонм.с Михайловой И.Л., Родионовым И.М. и др.).

сб.Периферические механизмы реализации синнатических

холинергических сосудорасширительных в скелетных мышцах кошки.// Материалы 5 Всесоюзного симпозиума по физиологии медиаторов. Периферический синапс.- Казань.- IVB1«.- С.165-156.(совм. с Сергеевым И.Ю., Родионовым И.М.).

29. Механизм сопряжения холинергическои вазодилятации с изменениями метаболизма скелетных мышц кошки.// В сб. Всесоюзный симпозиум "Кровообращение в скелетных мышцах".- Рига,- 19В2.-С.20-22 (совместно с Сергеевым И.Ю.).

30. Изучение осмолярности артериальной крови при интенсивной мышечной работе.// Физиолог, журнал СССР,- 1984,- Т.70,- N6,-C.61Ö-821. ( совм. с Костенко Т.П., .Сергеевым И.Ю. и др.).

31.о механизме реализации симпатического холинергического сосудорасширительного эффекта в скелетных мышцах кошки.// В' сб. 5 Всесоюзный симпозиум по "Центральной регуляции кровообращения".-Ростов-на-Дону.- 1984.- С.И6. ( совнес.н. с Родионовым И.П.).

32. Периферические механизмы реализации холинергической иазодилятации.// Центральные и периферические механизмы вегетативной нервной системы,- Изд-во AI! АССР, Ереван,- 1963.-C.42-4S. (совмест. с Родионовым И.М., Сергеевым И.Ю.).

33.Влияние экзогенного ацетилхолина на реакции хвостоиой артерии крысы.// В сб. 1 Всесоюзная конференция "физиология и биохимия медиаторных процессов".-Москва.- 19а5.-С.70. (сони. с Во-Тует-Чинь, Сергеевым И.ю. и др.).

34.Блокада посттетанической гиперемии в скелетных мышцах коаки кыинакринои.// ДАН СССР,- 1986.-T.2S7.-Ü2.- С.476 -Ч7й.|сог<м. с Сергеевым И.о., Родионовым И.Н.).

55. Нейрогенное расширгние холинергической природы, наблеласиое п изолированных сосудах скелетных мы uи кошки.// Гвяи. эксвер,биолог, и мед.- 1957- Н5-С.517-520. (соки, с Во Тует - 'И'кь,

1i> -

Сергеевым !!.D. и др.).

36.Влияние ацетилхолина на реакции хвостовой артерии крысн.// Еюлл.экспер.биолог. и мед.- 198&.-Ü7.-C.3-4 (совм. с Во-Тует-Чинь, Сергеевым И.Ю. и др.).

37.Изучение нейрогенных реакций изолированных артериальних сосудов скелетных мыац кошки.// В сб. "Кровообращение в скелетных мышцах". Тезисы докладов 4 Всесоюзного симпозиума.- 1966,- С.7'3. (совм. с Во-Тует-Чинь, Сергеевым И.Ю. и др.).

38.Исследование точек приложения действия >ндогенного и экзогенного ацетилхолина в стенке артериального сосуда.// 6 Всесоюзная конференция по физиологии вегетативной нервной системы. Тезисы докладов,- Дилижан.- 1966,- С. . ( совм. с Bt.-Тует-Чинь, Сергеевыи И.О.).

39.Исследование нейрогуморального влияния ацетилхолина яа сосудистый тонус в опытах на изолированных препаратах.// Тезисы докладов Всесоюзной конференции "Проблемы нейрогуморальной регуляции деятельности висцеральных систем".- Ленинград.- 1987.-С.б . (совместно с Во-Тует-Чинь, Сергеевым И.о. и др),

40.функциональные и структурные механизмы регуляции сопротивления сосудов.//Тезисы докладов 15 съезда Всесоюзного физиологического общества им. И.П.Павлов».- Л.'Наука".- 1987.-Т.2.- С.392. (совм. с "Родионовым И.Н., Копелевым В.В.).

«.Анализ механизма хо'линергическиж влияний На тонус сосудов в опытах In vitro.// Сб. Нервная система.-Йзд-во ЛГУ.- 198В.-С. (совм. с Во-Тует-Чинь, Сергеевыи Й.Ю. и др.)

42.Влияние зкзогенпого и эндогенного ацетилхолина мл изолированный препарат каудальноЛ бедренрой артерии ttonRii.// физиолог. яурнат. - 1988,- T.34.-U2.-C.20-26.(COBM. С Ьо-ТУет-Чинь, Сергеевым И.».).

43.фармакология эи дотелийзависииых реакцМй.//Фармакология и токсикология.- 1985.- 115.- С.92-101. (совм. с Медведевым o.e.).