Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Санитарно-бактериологический мониторинг биотопов объектов животноводства

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Санитарно-бактериологический мониторинг биотопов объектов животноводства"

На правах рукописи

Метлсва Анастасия Сергеевна

САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ БИОТОПОВ ОБЪЕКТОВ ЖИВОТНОВОДСТВА

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотокснкологией и иммунология.

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

МИГ ¿Ь ¡1

Омск 2012

005020573

005020573

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Омский государственный аграрный университет имени ПЛ. Столыпина»

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

Колычев Николай Матвеевич, заслуженный деятель науки РФ, доктор ветеринарных наук, профессор

Сидоров Геннадий Николаевич доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры зоологии и физиологии, ГОУ ВПО «Омский государственный педаго-гический~университет» Кисленко Виктор Никифорович, доктор ветеринарных наук,"профессор, _ • профессор кафедры эпизоотологии и микробиологии, ФГБОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет» ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана»

Защита состоится <$£)> апреля 2012 г. JO @Рв часов на заседании диссертационно совета Д. 220.050.03 при ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрнь университет имени ПЛ. Столыпина» в Институте ветеринарной медицины биотехнологии по адресу: 644008, г. Омск, Институтская площадь, тел. (3812) 24-15-35, факс (3812) 24-39-63, e-mail: lescheva@list.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института ветеринарной медицины и биотехнологии ФГБОУ ВПО ОмГАУ имени П.А. Столыпина.

Автореферат разослан ^¿¿clfiS&a?, 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета канд. ветеринар, наук, доцент

Лещева Н.А.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Животноводческие комплексы и фермы являются крупными источниками загрязнения биотопов окружающей среды. С увеличением объема необеззараженных отходов их утилизация естественным способом становится непосильной для водных, воздушных и почвенных экосистем (Р. Ю. Андреев, 2008).

Загрязнение окружающей среды сопровождается дегенеративными процессами, в т.ч. нарушением процессов самоочищения. В результате, нарушается нормальный, эволюционно сложившийся микробиоценоз атмосферного воздуха, водного бассейна, почвы по качественным и количественным показателям. Нормальная микрофлора замещается чужеродной (Ю.А. Макаров, 2007). Вместе с необеззараженным навозом и сточными водами в питьевую воду, воздух, почву, на поверхность оборудования, инвентаря животноводческих ферм и комплексов попадают антибиотико-резистентные микроорганизмы, способные сохраняться там длительное время. Резистентные микроорганизмы передаются животным через корм и воду, воздух помещений, объекты производственного назначения, способствуя заболеваемости поголовья (A.C. Санников, 1998; Н.М. Колычев, 2009; С. Nováis, 2005).

Одним из самых ярких примеров антибиотико-резистентных бактерий, вызывающих заболевания являются ванкомицин-резистентные энтерококки (VRE) (В. М. Бондаренко, 1997; Н. М. Колычев, М. И. Петрова, 2009; К. Hudson, 2002). Энтерококки, широко распространен во внешней среде, обладают факторами вирулентности (цитолизин), устойчивы к подавляющему большинству антибактериальных препаратов, действию физических, химических и биологических факторов (Ю.И. Ворошилов, 1979).

В России исследования по проблеме обсеменения энтерококками биотопов окружающей среды и пищевых продуктов малочисленны (С. В. Сидоренко, 2004; С. А. Шевелева, 2007). А необходимость нормирования уровня бактериального загрязнения пищевого сырья вызвана практически тотальным (93.4 %) несоответствием условий производства сельхозпродукции санитарным правилам, установленным в РФ. (С. А. Шевелева, 2007).

В настоящее время в ветеринарной микробиологии изучению санитарного состояния биотопов животноводческих объектов, в т.ч. наличию на них и в пищевом сырье энтерококков не уделяется должное внимание, что и определило выбор темы и направление наших исследований.

Цель исследования и задачи. Изучить санитарно-бактериологическое состояние биотопов объектов животноводства и сырья животного происхождения, для разработки объективных показателей их санитарно-бактериологического качества.

Задачи:

1. Изучить качественный и количественный состав микрофлоры почвы на территории животноводческих ферм и комплексов; питьевой воды; воздуха помещений; объектов производственного назначения, с определением доминирующих популяций микроорганизмов.

2. Изучить распространение микроорганизмов рода Е^егососсиБ в окружающей среде на животноводческих объектах.

3. Изучить биологические свойства микрофлоры, контаминирую-щей биотопы животноводческих объектов.

4. Изучить распространение, количество, биологические свойства загрязнителей, в т.ч. микроорганизмов рода ЕтегососсиБ, в сыром молоке, парном и охлажденном мясе, определить доминирующие популяции.

Научная новизна. Получены новые данные о видовом составе, биологических свойствах условно-патогенной микрофлоры биотопов животноводческих объектов: почвы, воды, воздуха, объектов производственного назначения; сырого молока и охлажденного мяса. Представлены доминирующие популяции микроорганизмов на изучаемых объектах.

Определена распространенность микроорганизмов рода ЕШегососсиз с гемолитическими и антибиотико-резистентными свойствами на биотопах окружающей среды, в сыром молоке, парном и охлажденном мясе.

Усовершенствована система микробиологического мониторинга санитар-но1 о качества питьевой воды, поступающей на животноводческие комплексы.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Результаты санитарно-микробиологического исследования биотопов окружающей среды, свидетельствуют о неудовлетворительном санитарно-гигиеническом состоянии на животноводческих фермах и комплексах Омской области. Объекты внешней среды (почва, вода, воздух, объекты производственного назначения), а так же сырое молоко и охлажденное мясо обсеменены микроорганизмами рода ЕгПегососсиз с гемолитическими свойствами, резистентные к большинству антибиотиков, применяемых в исследовательской работе. Результаты микробиологических исследований позволяют определить дополнительные санитарно-показательные микроорганизмы мониторинга объектов внешней среды животноводческих комплексов и пищевого сырья полученного с перерабатывающих предприятий.

Материал, изложенный в диссертации, может быть использован при составлении соответствующих разделов учебников и руководств по санитарной микробиологии и гигиене сельскохозяйственных животных.

Внедрение результатов исследований. Отдельные положения диссертационной работы используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсу ветеринарной микробиологии на факультетах ветеринарной медицины Омского ГАУ им. П. А. Столыпина, Красноярского ГАУ, Башкирского ГАУ, Казанской ГАВМ, Новосибирского ГАУ, Дальневосточного ГАУ.

На основании полученных научных данных, разработаны и утверждены методические указания для специалистов ветеринарной службы «Бактериоло-

гический контроль санитарного качества питьевой воды, поступающей на животноводческие фермы, комплексы, крестьянские и фермерские хозяйства» (утв. Ученым советом ГНУ Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии, 2011 г.).

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы инновационного развития ветеринарной науки и практики", посвященную 105-летию КазНИВИ 16-17 сентября 2010 г. (Алматы, 2010); Международной научно-практической конференции, посвященной 85-летию со дня рождения члена-корреспондента РАСХН, д.в.н., профессора М. М. Джамбула-това «Современные проблемы, перспективы и инновационные тенденции развития аграрной науки» 25-26 ноября 2010 г. (Махачкала, 2010); Международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию СибНИВИ-ВНИИБТЖ «Инфекционная патология животных» 22 - 25 ноября 2011 г (Омск, 2011).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, том числе одна в издании, рекомендованном ВАК Минобразования Российской Федерации.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 121 страницах машинописного текста, содержит 8 таблиц, 20 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Список литературы содержит 138 источников литературы, в том числе 54 иностранных авторов. •

Автор искренне благодарен коллективу лаборатории диагностики бактериальных и вирусных инфекций ИВМиБ ОмГАУ им. П.А. Столыпина, а именно Марине Ивановне Петровой, Маргите Яковлевне Домрачевой, Татьяне Анатольевне Цупиковой, за предоставленную тему, и неоценимую помощь в реализации микробиологических исследований.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Биотопы окружающей среды животноводческих объектов и продуктов животного происхождения обсеменены условно-патогенной микрофлорой с антибиотико-резистентными и гемолитическими свойствами, при этом доминирующими популяциями являются бактерии рода ЕгНегососсиз Брр. (43,8%).

2. Наличие патогенных и резистентных энтерококков в окружающей среде, сыром молоке и охлажденном мясе обусловливает необходимость учета его в качестве санитарно-показательного микроорганизма в СанПиНах.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований

Собственные исследования проведены в период с 2008 по 2011 гг. на базе лаборатории диагностики бактериальных и вирусных инфекций института ветеринарной медицины и биотехнологии ФГБОУ ВПО ОмГАУ им. П.А. Столыпина, в 26 животноводческих хозяйствах Омской области.

За период исследований было отобрано и исследовано бактериологическим методом: 87 проб почвы с территорий животноводческих комплексов и ферм; 44 питьевой воды; 32 воздуха животноводческих помещений; 276 смывов с объектов производственного назначения; 30 сырого молока; 29 парного и 35 охлажденного мяса, с перерабатывающих предприятий Омской области.

Пробы почвы отбирали с поверхности, глубины 5 и 25 см и исследовали согласно ГОСТу 17.4.4.02-84 «Охрана природы. Почвы. Методы отбора и подготовки проб для химического, бактериологического, гельминтологического анализа».

Пробы воды исследовали согласно МУКу 4.2.1018-01 «Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды» методом мембранной фильтрации. Нормирование качества воды проводили согласно СанПиНу 2.1.4.2580-10. «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества» и СанПиНу 2.1.4.1175 -02 «Гигиенические требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Санитарная охрана источников». В качестве дополнительного показателя загрязнения воды исследовали наличие энтерококка, для этого фильтры помещали на среду Энтерококкагар.

Пробы воздуха исследовали седиментационным методом Коха (для ориентировочной оценки санитарного состояния) и аспирационным методом с применением аспиратора ПУ-1Б, с использованием мясопептонного агара (МПА) (для определения общего микробного числа (ОМЧ)), желточно-молочно-солевого агара (ЖМСА) (для определения S.aureus), Энтерококкагара (для определения энтерококков).

Смывы с объектов производственного назначения пересевали со среды накопления (1%-ый глюкозный мясопептонный бульон (МПБ)) на среды: Эндо, Энтерококкагар, ЖМСА, Плоскирева, кровяной агар (КА), висмут-сульфит агар (ВСА).

Исследование сырого молока проводили в соответствии с Федеральным законом (ФЗ) Российской Федерации от 12 июня № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию», где определяли КМАМФАнМ и бактерии рода Salmonella (ГОСТ Р 52814-2007 «Продукты пищевые». Также в сыром молоке определяли: БГКП (по ГОСТу 9225-84); S.aureus (ГОСТ 10444.294 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества S.aureus»); Метод выявления бактерий рода Salmonella»); энтерококки (ГОСТ 28566-90 «Продукты пищевые. Метод выявления и определения количества энтерококков»).

Исследование парного и охлажденного мяса проводили согласно ГОСТу 2123 - 75 «Мясо. Методы бактериологического анализа». Для определения наличия энтерококков из каждого разведения делали высев в среду накопления (1%-ый глюкозный МПБ), инкубировали при 37 °С, 18-24 ч., затем делали высев из каждого разведения на Энтерококкагар.

Определение родовой и видовой принадлежности выделенных микроорганизмов проводили согласно общепринятых методик (В.И. Поповский, 1999).

Гемолитические свойства определяли с использованием КА. Антибиотико-резистентные свойства на среде АГВ диско-диффузионным методом согласно МУКу 4.2.1890-04. «Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам».

Полученные данные обрабатывали статистически с использованием компьютерной программы Microsoft Office Excel 2003; достоверность среднеарифметических величин оценивали по критериям Стьюдента.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Микрофлора почвы с территорий животноводческих ферм и комплексов Омской области

Из почвы выделили 277 культур, из них 95 (34,2 %) выделили из проб с поверхности; 81 (29,2 %) с глубины 5 см; 101 (36,4 %) с глубины 25 см.

В почве, преобладали микроорганизмы видов: E.coli 62 культур (21 %), в т.ч. 24 (38,7 %) обладали гемолитическими свойствами; K.pneumoniae 30 (15,5 %), в т.ч. 18 (41,8 %) обладали гемолитическими свойствами; E.faecium 68 (29,9 %); в т.ч. 38 (55,8 %) обладали гемолитическими свойствами; E.faecalis 43 (18,9 %), в т.ч. 19 (44,1 %) обладали гемолитическими свойствами. Качественный состав и соотношение микрофлоры почвы на разных слоях не имеет существенных различий.

Степень загрязнения почвы выражали в индексах БПСП и энтерококков. Преобладала «чрезвычайно опасная» степень эпидемической опасности: по индексу БГКП 36 Проб (41.3 %) И по индексу энтерококков 34 (39 %).

Культуры E.faecium обладали резистентностью к ванкомицину (10,5 %): цефуроксиму (36,7 %); гентамицину (21 %); бензшшенициллину (28,9 %); тетрациклину (2,6 %); эритромицину (5,2 %); ципрофлоксацину (13 %). E.faecalis к ванкомицину (6,6 %); цефуроксиму (23,2 %); гентамицину (10,5 %); бензшшенициллину (33,3 %); тетрациклину (6,6 %); эритромицину (6,6 %); ципрофлоксацину (6,6 %); ампициллину (3,3 %).

Культуры E.coli обладали резистентностью к цефуроксиму (6,0 %); гентамицину (3,0 %), ампициллин (3,0 %). K.pneumoniae к цефуроксиму, ампициллину, канамицину (46 %).

Почва на территории животноводческих ферм и комплексов обсеменена условно-патогенными микроорганизмами, что представляет потенциальную опасность для заражения людей и животных. Необходим контроль за сани-

тарно-мжробиологическим состоянием почвы на территории животноводческих ферм и комплексов.

3.2. Микрофлора воды, поступающей на животноводческие фермы и

комплексы

Установили превышение предельно допустимых норм общего микробного числа (ОМЧ) в 12 пробах (27,2 %); общих колиформных бактерий (ОКБ) в 28 пробах (63,6 %); термотолерантных колиформных бактерий (ТКБ) в 13 пробах (29,5 %). Энтерококки обнаружили в 33 пробах (75 %). Требованиям СанПиН 2.1.4.1175-02 не соответствовали 28 проб воды (63,6 %).

Выделили 100 культур условно-патогенной микрофлоры, из них 23 E.coli (23 %), в т.ч. 7 (30,4 %) обладали гемолитическими свойствами; E.cloacae 9 (9 %), в т.ч. 3 культуры (33,3 %) обладали гемолитическими свойствами; 11 E.faecium (11 %), в т.ч. 6 (54,5 %) обладали гемолитическими свойствами; 32 E.faecalis (32 %), в т.ч. 19 (59,3 %) обладали гемолитическими свойствами; K.pneumoniae 4 (4 %), в т.ч. 3 (75 %) обладали гемолитическими свойствами; P.morganii - 2 (2 %); P.mirabilis 4 (4 %), E.aerogenes - 1 (1%), C.freundii - 5 (5 %), P.vulgaris - 2 (2 %); НФГО - 7 (7 %).

При изучении чувствительности выделенных культур установлено, что E.faecalis обладали резистентностью к ванкомицину (26,8 %); бензилпеницил-лину (15,3 %); тетрациклину (16,9 %); эритромицину (30,7 %); амоксициллину (7,6 %); цефуроксиму (30,7 %). E.faecium к ванкомицину (54 %); тетрациклину (18,1 %); ципрофлоксацину (45,4 %).

Культуры K.pneumoniae обладали резистентностью к амоксициллину и стрептомицину (50 %); E.coli к амикацину (50 %); амоксициллину (25 %); ле-вомицетину (25 %). P.mirabilis к цефуроксиму и амикацину (50 %); E.cloacae к ампициллину и канамицину (100 %); C.freundii к амикацину, стрептомицину, карбенициллину (100%).

Питьевая вода, поступающая на животноводческие комплексы для выпаивания животным, мойки доильного молочного оборудования, содержит условно-патогенные микроорганизмы с патогенными и резистентными свойствами, что представляет потенциальную опасность для обсеменения сырого молока. Преобладание энтерококков, с патогенными и резистентными свойствами в воде обусловливает необходимость введения его в качестве санитар-но-показательного в СанПиНы.

3.3 Микрофлора воздуха животноводческих помещений

При исследовании микрофлоры воздуха седиментационным методом среднее количество нормируемых показателей в родильных отделениях составляло: ОМЧ - 1,8±0,9*104 КОЕ/м3 (Р>0,95); стафилококков - 1,36±0,63" 104 КОЕ/м3 (Р>0,95); энтерококков - 14,2±11,1« 103 КОЕ/м3. В помещениях для содержания телят разных возрастов: ОМЧ - 4,8±4,1»104 КОЕ/м3 (Р>0,95); стафилококков -2,0±1,2*104 КОЕ/м3 (Р>0,99); энтерококков - 2,2± 1,7*104 КОЕ/м3 (Р>0,99). В помещениях для содержания дойных коров: ОМЧ - 2,3±0,7*10 КОЕ/м

(Р>0,95); стафилококков - 3,8±2,9*104 КОЕ/м3 (Р>0,95); энтерококков -

3,2±2,7* 104 КОЕ/м3.

При исследовании микрофлоры воздуха асиирационным методом с использованием аспиратора ПУ-1Б среднее количество нормируемых показателей в родильных отделениях составляло: ОМЧ - подсчету не подлежит, сплошной рост споровой микрофлоры; стафилококков - 5,9*10 КОЕ/м ; энтерококков -5,5« 102 КОЕ/м3. В помещениях для содержания телят разных возрастов: ОМЧ -2,4*1,46* 103 КОЕ/м3 (Р>0,99); стафилококков - 5,58±5,34«103 КОЕ/м3 (Р>0,95); энтерококков - 1,6±0,8*104 КОЕ/м3 (Р>0,99). В помещениях для содержания дойных коров: ОМЧ - 7,0±0,2*103 КОЕ/м3 (Р>0,95); стафилококков - 1,7*10 КОЕ/м3; энтерококков-6,22±5,4*103 КОЕ/м3 (Р<0,95).

Из воздуха было изолировано 80 культур микроорганизмов: 8.ер1с1еггшс118 17 (21,25 %); Б.аигеш 2 (2,5 %); Б.заргорЬуйсш 18 (22.5 %); Е^аесаНБ 28 (35 %), в т.ч. 18 (51,4 %) с гемолитическими свойствами; Е^аесшт 15 (18,75 %), в т.ч. 3 (20 %) с гемолитическими свойствами. '

Культуры Б.ер^скпшсНз обладали резистентностью к тетрациклину (50 %); эритромицину (66,6 %); линкомицин (33,3 %); бензилпенициллину (50 %); ампициллину и оксациллину (16,6%). Б.БаргорЬуНсиз к линкомицину, бензилпенициллину, ампициллину (35,7 %); эритромицину (28 %); оксациллину (14,2 %). З.аигеиБ к тетрациклину, линкомицину, цефазолину, эритромицину (100 %); бензилпепициллину (50 %).

Культуры Е1аесаНз обладали резистентностью к ванкомицину (3,8 %); тетрациклину (23 %); ампициллину (38,4 %); эритромицину (46,1%); цефтриак-сону (19,1 %); амикацину (34,6 %); гентамицину (3,8 %). Е.Гаесшт к ванкомицину (10 %); к тетрациклину (30%); бензилпенициллину (20 %); ампициллину (40 %); гентамицину (10 %); амикацину (60 %); эритромицину (30 %).

Воздух животноводческих помещений содержит кокковую микрофлору с патогенными свойствами, способную вызывать заболевания животных с поражением органов дыхания. Энтерококки и стафилококки, в т.ч. Б.аигеш, необходимо использовать в качестве СПМО при санитарно-микробиологическом исследовании воздуха животноводческих помещений.

3.4. Микрофлора объектов производственного назначения

С объектов внешней среды было отобрано 276 смывов, из которых выделили 693 культуры микроорганизмов: Е1аесаНз 230 (33,1 %); Е^аесшт 68 (9,8 %); Е.соН 132 (19 %); Р.уи^апз 13 (1,8 %); РлшгаЫНз 9 (1,2 %); Р.тогБаш 1 (0,1 %); С.ЕгешкШ 7 (1,0 %); Е.аепщепев 9 (1,2 %); Е.с1оасае 25 (3 %); К.рпеитопте 32 (4.6 %); К.огаепае 3 (0,4 %); К.охуЮса 9 (1,2 %); Б^ёетпсПз 68 (9.8 %); Б.аигеиз 41 (5,9 %); 8.заргорЬу11сиз 16 (2,0 %); Р.аеп^тоэа 21 (3.0 %); АстеЮЬайег эрр. 6 (0.8 %); Ака^епет эрр. 6 (0,8 %).

Микрофлоры не обнаружено в 4 пробах (1,4 %).

ЕЛаесаНБ 150 культур (65,2 %) и Е.1аесшт 24 (35,2 %) обладали гемолитическими свойствами.

Культуры Е.ГаесаПэ обладали резистентностью к ванкомицину (30,7 %); к тетрациклину (34,5 %); бензилпениллину (14 %); ципрофлоксацину (1,2 %);

гентамицину (2,5 %); амоксициллину (12,7 %). E.faecium к цефуроксиму (25 %); тетрациклину (50 %).

Культуры S.aureus обладали резистентностью к тетрациклину (22,2 %); бензилпенициллину (71,1 %); левомицетину (5,5 %); оксациллину (49,9 %); цефазолину и ампициллину (11 %); амикацину и амоксициллину (5,5 %); к лин-комицину (11,1 %). S.epidermidis к тетрациклину (36 %); безилпенициллину (68 %); левомицетину (28 %); оксациллину (44 %); ампициллину (12 %); амикацину (4 %). S.saprophyticus к бензилпенициллину (83,2 %); оксациллину и линкоми-цину (50 %); тетрациклину и амоксициллину (33,3 %); эритромицину и ампициллину (16,6 %).

E.coli обладали резистентностью к тетрациклину (23 %); левомицетину (15,3 %); цефуроксиму (7,6 %). К.рпешпошае тетрациклину (13,3 %); левомицетину (6,6 %); ампициллину (46,6 %); амоксициллину (20 %); цефуроксиму (13,3 %); амикацину (6,6 %); Р.vulgaris к тетрациклину (16,6 %); левомицетину (33,3 %); амоксициллину (33,3 %); цефуроксиму (16,6 %); C.freundii к тетрациклину (66,6 %); E.cloacae к левомицетину (27,2 %); ампициллину и амикацину (9 %); тетрациклину и амоксициллину (18,1 %). P.aeruginosa к левомицетину (28,5 %); амоксициллину, ампициллину и амикацину (14,2 %); к цефуроксиму (57,1 %); ципрофлоксацину (14,2 %); тетрациклину (28,4 %).

На объектах производственного назначения присутствуют микроорганизмы, способные вызвать заболевания у людей и животных или/и ухудшить состояние продовольственного сырья, получаемого от животных (молоко). Для контроля над санитарным состоянием на животноводческих фермах и комплексах необходимо помимо БГКПучитывать наличие энтерококков, стафилококков, а так же микроорганизмов рода Pseudomonas. При проведении контроля качества мойки доильного молочного оборудования и дезинфекции на фермах и комплексах нужно контролировать отсутствие всех трех групп микроорганизмов.

3.5. Микрофлора сырого молока с молокоперерабатывакнцих предприятий Омской области

Исследовали 30 проб сырого молока. Выделили 92 культуры микроорганизмов: E.faecalis 24 (26%), в т.ч. 9 (37,5%) обладали гемолитическими свойствами; E.faecium 3 (3,2%), в т.ч. 2 (75%) обладали гемолитическими свойствами; S.aureus 19 (20,6%); S.epidermidis 9 (9,7%); P.vulgaris 13 (14,1%); E.coli 7 (7,6%); P.mirabilis и P.aeruginosa по 5 (5,4%); C.freundii и K.pneumoniae по 3 (3,2%).

Средняя арифметаческая КМАМФАнМ составила 2,69±0,93«105 (Р>0,999). Показатели контаминации сырого молока МАМФАнМ, стафилококками, энтерококками в таблице 2.

В сыром молоке обнаружили БГКП, стафилококки, энтерококки в 27 пробах (90% от числа исследуемых проб). Из БГКП преобладает P.vulgaris - представитель гнилостной микрофлоры и возбудитель пищевых токсикоинфекций (ПТИ). В 18 (60 %) пробах обнаружен S.aureus.

Таблица 1.

Микрофлора сырого молока

ю о са а Число находок (абс.) и %% обнаружения к количеству проб

с о са h о О К ч о * Кол-во ИЗОЛЯТ' Е. coli C.freundii Proteus spp. К.pneumoniae Р.aeruginosa S.aureus S.epidermidis ! Enterococcus spp.

г о о) с- го го СЧ г- 3(10) 1 18 (60) 3(10) 5 (16,6) 18 (60) 9 (30) 27 (90)

Показатели контаминашш сырого молока МЛМФЛиМ, стафилококками, тгсроксжками.

№ п/п

МАМФАнМ

Стафилококки__

Энтерококки БГКП

Количество проб содержащих _контаминант Абс.

30

27

27 27

100

90

90 90

Содержание КОЕ/г

Мт

Мах

6,0* 10J

~2,0><101

1,0x10'

1,0x10' 1,2x104

Таблица 2.

Me

Обильный рост

З,0х103

1,0x10*

3,7x10-

Частое обнаружение в сыром молоке микроорганизмов рода Емегососсю зрр. с патогенными свойствами обусловливает введение этих микроорганизмов, в качестве санитары о-показательных, в микробиологический контроль пастеризованного молока и готовой молочной продукции, с целыо определения эффективности их термической обработки.

3.6. Микрофлора парного и охлажденного мяса крупного рогатого скота

В партии № 1, состоящей из 14 проб охлажденного мяса, средняя арифметическая величина КМАМФАнМ составляла 3,5±2,2х102 КОЕ/О, 1г (Р>0,999) . Максимальное значение КМАМФАнМ составляло 3,7х 102, минимальное -1,1х102, медиана - 3,05хЮ2. КМАМФАнМ обнаружили во всех исследуемых пробах. БГКП не обнаружили. Энтерококки - в четырех пробах (28,5 %).

В партии № 2, из 11 проб охлажденного мяса, минимальное значение КМАМФАнМ составляла 2*10', максимальное - 1,4х104, медиана - бхЮ1. МАМФАнМ обнаружили в 5 пробах (45,4 %). БГКП обнаружили в 10 пробах (90,9 %). Энтерококки обнаружили в четырех пробах (36,3 %).

В партии № 3, из 10 проб охлажденного мяса, минимальное значение КМАМФАнМ - 6x101, максимальное - 7,0x105, медиана - 4,5x102. МАМФАнМ обнаружили во всех пробах. БГК-П-не обнаружили. Энтерококки обнаружили в двух пробах (20 %).

В партии № 4, из 13 проб парного мяса, средняя арифметическая КМАМФАнМ составляла 2,6±0,5х10б КОЕ/1,0 г (Р>0,999). Максимальное значение КМАМФАнМ - 3,6x10б , минимальное - 1,6x106, медиана - 2,5Х106. МАМФАнМ обнаружили во всех исследуемых пробах. БГКП обнаружили в шести пробах (46,1 %). Энтерококки обнаружили в 12 пробах (92,3 %).

В партии № 5, из 16 проб парного мяса, средняя арифметическая КМАМФАнМ составляла 2,1±0,4хЮ6 КОЕ/1,0 г (Р>0,999). Максимальное - 2,8x106, минимальное - 1х10', медиана - 9*10'. МАМФАнМ обнаружили в 12 пробах (75%). БГКП обнаружили в 15 пробах (93,7%). Энтерококки обнаружили в 15 пробах (93,7%). КМАМФАнМ в пробах парного и охлажденного мяса указаны в таблице 3.

Таблица 3.

Показатели контаминации парного и охлажденного мяса МАМФАнМ_

№ партии мяса Количество проб содержащих контаминант Содержание КОЕ/г

Абс. %% Мт Мах Ме

1 (охлажден ное) 14 100 1,1хЮ2 3,7x102 3,05хЮ2

2(охлажден ное) 5 45,4 2,0x10' 1,4x104 "б^То1

3(охлажден ное) 10 100 6,0x10' 7,0х105 4,5x102

4(парное) 13 100 1,1хЮ2 3,6хЮ6 2,5х106

5(парное) 8 6,6 1,0x10' 2,8хЮ6 1,9x105

В 35 пробах охлажденного мяса обнаружили 20 изолятов УПМ: БГКП и ЕщегососсиБ Брр. по 10 (28,5%); а из 29 проб парного мяса изолировали 21 культуру БГКП

(72,4 %) и 27 (93,1 %) энтерококков. У ЕгПегососсиэ эрр. идентифицировали виды: Е.ГаесаНз 32 (86,4 %), в т.ч. 19 с гемолитическими свойствами (59,3 %); Е/аесшт 5 (13,5 %), в т.ч. два с гемолитическими свойствами (40%). Патогенные микроорганизмы не обнаружили. Количество микроорганизмов из парного и охлажденного мяса указаны в таблице 4.

Таблица 4.

Количество микроорганизмов парного и охлажденного мяса_

Продукт Кол-во проб Кол-во изо-лягов Число находок (абс.) и %% обнаружения к количеству проб

БГКП Enterococeusspp.

Охлажденное мясо 35 20 10(28,5) 10(28,5)

Парное мясо 29 48 21 (72,4) 27(93,1)

Культуры E.faecalis обладали резистентностью к амикацину (45,4 %); тетрациклину, эритромицину, стрептомицину (36,3 %); ванкомицину (18,1%); пенициллину и левомицетину (9 %).

В связи с обнаруженными у энтерококков патогенными свойствами, а так же их количественного преобладания над Б ГШ, их необходимо вкчючитъ в микробиологический контроль санитарного качества парного или охлажденного мяса.

4. Выводы

1. Микробиоценозы животноводческих объектов представлены различными видами условно-патогенных микроорганизмов, в основном: E.faecium; E.coli; E.faecalis; S.saprophyticus; S.epidermidis.

2. Соотношения выделенных микроорганизмов на биотопах объектов животноводства имеют различия: в почве E.faecium - 29,9 %, E.coli - 21 %, E.faecalis - 18,9 %; в воде 11 %, 23 %, 32 % соответственно; в воздухе E.faecium

- 18,75 %, E.faecalis - 35 %, S.epidermidis - 21,25 %; S.saprophyticus - 22,5 %; на объектах производственного назначения 9,8 %, 33,1%, 9,8 %, 2 % соответственно.

3. Из числа выделенных культур с объектов животноводства патогенными свойствами обладают E.faecalis - 64,8 %, E.faecium - 43,8 %; E.coli - 36,4 %.

4. Микрофлора сырого молока представлена в основном видами: E.faecalis

- 26 %; S.aureus - 20,6 %, и родом Proteus spp. - 19,5 %. Патогенными свойствами обладают E.faecalis - 37,5 %, E.faecium - 75 %.

5. Микрофлора парного и охлажденного мяса представлена в основном видами: E.faecalis - 57 %, E.faecium - 8,1 %. Патогенными свойствами обладают E.faecalis - 54,2 %, E.faecium - 40 %. Энтерококки, выделенные из охлажденного мяса резистентны к амикацину, тетрациклину, эритромицину, стрептомицину, пенициллину, левомицетину, ванкомицину.

5. Микрофлора парного и охлажденного мяса представлена в основном видами: Е.ГаесаНз - 57 %, Е.Гаесшт - 8,1 %. Патогенными свойствами обладают Е.ГаесаПБ - 54,2 %, ЕТаесшт - 40 %. Энтерококки, выделенные из охлажденного мяса резистентны к амикацину, тетрациклину, эритромицину, стрептомицину, пенициллину, левомицетину, ванкомицину.

6. Выделенные с биотопов объектов животноводства энтерококки резистентны к бензилпенициллину, гентамицину, цефуроксиму, ципрофлоксацину, эритромицину, тетрациклину, амоксициллину, ванкомицину; энтеробактерии к ампициллину, амикацину, левомицетину и цефуроксиму; стафилококки к окса-циллину линкомицину, ампициллину, эритромицину, тетрациклину, бензилпенициллину, амикацину.

7. Наличие патогенных энтерококков в питьевой воде, воздухе, объектах производственного назначения животноводческих ферм и комплексов, а так же в сыром молоке и мясе обусловливает применение этих микроорганизмов в качестве санитарно-показательных при микробиологическом контроле качества этих объектов.

5. Практические предложения

1. На основании проведенных исследований разработаны Методические указания «Бактериологический контроль за санитарным состоянием питьевой воды, поступающей на животноводческие фермы, комплексы, крестьянские и фермерские хозяйства», (утв. Ученым советом ГНУ Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии, 27 декабря 2011 г.).

2. Предлагаем руководству природоохранной прокуратуры, ветеринарно-санитарной службы, Центра гигиены и эпидемиологии Омского района и главному управлению ветеринарии Омской области обратить внимание на результаты наших исследований и принять необходимые меры. Мы со своей стороны, готовы оказать необходимую научно-методическую помощь по исследованию микрофлоры биотопов среды обитания животных и пищевого сырья, производимого на территории Омского района.

3. Материал, изложенный в диссертации, может быть использован при составлении соответствующих разделов учебников и руководств по ветеринарной микробиологии.

6. Список опубликованных работ

1. Егорова* А. С. Санитарная оценка почвы, отобранной с территории животноводческих ферм Омской области / А. С. Егорова, Н. М. Колычев, М. И. Петрова// Актуальные проблемы инновационного развития ветеринарной науки и практики: сб. науч. тр./ Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт. - Алматы, 2010.-С.210-215.

3. Егорова* А. С. Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды из разводящей сети децентрализованных водоисточников животноводческих ферм Омской области / Егорова А. С., Колычев H. М., Петрова М. И.// Вестник ОмГАУ. - № 3. - 2011. - С. 72 - 74.

4. Егорова* А. С. Санитарно-микробиологическая оценка воды, поступающей на животноводческие фермы и комплексы, почвы на территориях животноводческих ферм, комплексов Омской области / А. С. Егорова, H. М. Колычев // Материалы международной научно-практической конференци, посвященной 90-летиб СибНИВИ-ВНИИБТЖ "Инфекционная патология животных" -Омск,2011.-С. 273-276.

5. Егорова* А. С. Санитарная оценка проб воздуха и смывов с различных объектов внешней среды, отобранных на животноводческих фермах Омской области. / А. С. Егорова, М. И. Петрова// Материалы научно-практической конференции, посвященной 85-летию со дня рождения члена-корреспондента РАСХН, д.в.н., профессора M. М. Джамбулатова «Современные проблемы, перспективы и инновационные тенденции развития-аграрной науки». - Махачкала, 2010. -С. 274 - 279. - •

6. Егорова* А. С.' Санитарная оценка проб почвы и воды, отобранных на животноводческих фермах Омской области. / А. С. Егорова, М. И. Петрова// Материалы научно-практической конференции, посвященной 85-летию со дня рождения члена-корреспондента РАСХН, д.в.н., профессора M. М. Джамбулатова «Современные проблемы, перспективы и инновационные тенденции развития аграрной науки». - Махачкала, 2010. - С. 279 - 285.

7. Егорова* А. С. Микробиоценоз верхних дыхательных путей у телят с клиническими признаками бронхопневмонии и микрофлора воздуха животноводческих помещений / А. С. Егорова, В. И. Плешакова, Т. В. Ермакова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана - Т.210. - 2012. - С. 149-154.

* - в связи с вступлением в брак фамилия сменена на Метлеву.

Подписано к печати 16.03.2012. Формат бумаги 60«84,1/16. Печать оперативная. Гарнитура Times New Roman.

Усл. печ. л. 1,0 Тираж 100 экз. Отпечатано в редакционно-лолшрафическом отделе Издательство ФГБОУ ВПО ОмГАУ имени ПЛ. Столыпина при институте ветеринарной медицины и биотехнологии 644122, г. Омск, Октябрьская, 92.

Текст научной работыДиссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Метлева, Анастасия Сергеевна, Омск

61 12-16/80

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ

ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ОМСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ П.А. СТОЛЫПИНА»

САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ БИОТОПОВ ОБЪЕКТОВ ЖИВОТНОВОДСТВА

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и

иммунология

На правах рукописи

Метлева Анастасия Сергеевна

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Научный руководитель

доктор ветеринарных наук, профессор,

Колычев Николай Матвеевич

Омск 2012

Список сокращений:

здравоохранения;

ЖМСА - желточно-молочно-

ВОЗ - всемирная организация

VRE - ванкомицин-резистентный энтерококк;

солевой агар;

КМАМФАнМ - количество ме-

MRSA - метицилен-резистентный Staphylococcus aureus;

зофильныз аэробных и факультативно анаэробных микроорганиз-

GRE - гликопептид-резистентный энтерококк.

мов;

ЛПС - лактозо-пептонная среда;

МПА - мясопептонный агар;

МПБ - мясопептонный бульон;

НГОБ - неферментирующие грамотрицательные бактерии;

ОКИ - острые кишечные инфекции;

ПАВ - поверхностно-активное вещество;

ПТИ - пищевые токсикоинфек-

ции;

СПМО - санитарно-показательные микроорганизмы;

УПМ - условно-патогенная микрофлора;

ФАО - продовольственная и сельскохозяйственны организация объедененных наций;

Содержание

Введение........................................................................................5

1. Обзор литературы

1.1 Из истории развития санитарной микробиологии.................................9

1.2 Значение санитарно-бактериологической оценки биотопов окружающей среды и пищевого сырья для благополучия сельского хозяйства и населения.........................................................................................................................13

1.3 Микрофлора почвы на территориях животноводческих ферм и комплексов........................................................................................................................19

1.4 Микрофлора воды, поступающей на животноводческие фермы и комплексы.......................................................................................................25

1.5 Микрофлора воздуха в помещениях животноводческих ферм и комплексов.............................................................................................33

1.6 Микрофлора сырого коровьего молока.................................................40

1.7 Микрофлора мяса............................................................................44

II. Собственные исследования

2. Материалы и методы исследования................................................48

2.1 Материалы и методы исследования микрофлоры почвы....................48

2.2 Материалы и методы исследования микрофлоры питьевой воды.........50

2.3 Материалы и методы исследования микрофлоры воздуха животноводческих помещений..........................................................................53

2.4 Материалы и методы исследования микрофлоры объектов производственного назначения........................................................................55

2.5 Материалы и методы исследования микрофлоры сырого молока.........56

2.6 Материалы и методы исследования микрофлоры парного и охлажденного мяса........................................................................................59

2.7 Материалы и методы исследования патогенных свойств микроорганиз-

мов.............................................................................................61

2.8 Статистическая обработка данных................................................62

3. Собственные исследования...................... ..................................63

3.1 Микрофлоры почвы с территорий животноводческих ферм и комплексов Омской области............................................................................63

3.2 Микрофлора воды, поступающей на животноводческие фермы и комплексы........................................................................................70

3.3 Микрофлора воздуха животноводческих помещений........................75

3.4 Микрофлора объектов производственного назначения.......................80

3.5 Микрофлора сырого молока с молокоперерабатывающих предприятий Омской области.............................................................................85

3.6 Микрофлора парного и охлажденного мяса крупного рогатого скота....87

III. Обсуждение результатов исследования................. .........................90

IV. Выводы.................................................................................102

V. Практические предложения.........................................................103

VI. Список литературы........................... .......................................104

Приложения

Введение

Животноводческие комплексы и фермы являются крупными источниками загрязнения биотопов окружающей среды. С увеличением объема необеззараженных отходов их утилизация естественным способом становится непосильной для водных, воздушных и почвенных экосистем (Р. Ю. Андреев, 2008).

Загрязнение окружающей среды сопровождается дегенеративными процессами, в т.ч. нарушением процессов самоочищения. В результате, нарушается нормальный, эволюционно сложившийся микробиоценоз атмосферного воздуха, водного бассейна, почвы по качественным и количественным показателям. Нормальная микрофлора замещается чужеродной (Ю.А. Макаров, 2007). Вместе с необеззараженным навозом и сточными водами в питьевую воду, воздух, почву, на поверхность оборудования, инвентаря животноводческих ферм и комплексов попадают антибиотико-резистентные микроорганизмы, способные сохраняться там длительное время. Резистентные микроорганизмы передаются животным через корм и воду, воздух помещений, объекты производственного назначения, способствуя заболеваемости поголовья (A.C. Санников, 1998; Н.М. Колычев, 2009; С. Nováis, 2005).

Одним из самых ярких примеров антибиотико-резистентных бактерий, вызывающих заболевания являются ванкомицин-резистентные энтерококки (VRE) (Н. М. Колычев, М. И. Петрова, 2009; К. Hudson, 2002). Энтерококки, широко распространены во внешней среде, обладают факторами вирулентности (цитолизин), устойчивы к подавляющему большинству антибактериальных препаратов, действию физических, химических и биологических факторов (Ю.И. Ворошилов, 1979).

В России исследования по проблеме обсеменения энтерококками биотопов окружающей среды и пищевых продуктов малочисленны (С. В. Сидоренко, 2004; С. А. Шевелева, 2007).

Необходимость нормирования уровня бактериального загрязнения пищевого сырья вызвана практически тотальным (93.4 %) несоответствием условий производства сельхозпродукции санитарным правилам, установленным в РФ. (С. А. Шевелева, 2007).

В настоящее время в ветеринарной микробиологии изучению энтерококков на животноводческих объектах и в пищевом сырье не уделяется должное внимание, что и определило выбор темы и направление наших исследований.

Цель исследования: Изучить санитарно-бактериологическое состояние биотопов объектов животноводства и сырья животного происхождения для разработки объективных показателей их санитарно-бактериологического качества.

Задачи:

1. Изучить качественный и количественный состав микрофлоры почвы на территории животноводческих ферм и комплексов; питьевой воды; воздуха помещений; объектов производственного назначения, с определением доминирующих популяций микроорганизмов.

2. Изучить распространение микроорганизмов рода ЕМегососсш в биотопах животноводческих объектов.

3. Изучить биологические свойства микрофлоры, контаминирую-щей биотопы животноводческих объектов.

4. Изучить распространение, количество, биологические свойства загрязнителей, в т.ч. микроорганизмов рода ЕЩегососсиз, сырого молока и мяса, определить доминирующие популяции.

Научная новизна. Получены новые данные о видовом составе, биологических свойствах условно-патогенной микрофлоры биотопов животноводческих объектов: почвы, воды, воздуха, объектов производственного назначения; сырого молока, парного и охлажденного мяса. Представлены доминирующие популяции микроорганизмов на изучаемых объектах.

Определена распространенность микроорганизмов рода ЕиЛегососсиБ с гемолитическими и антибиотико-резистентными свойствами в биотопах окружающей среды, сыром молоке, парном и охлажденном мясе.

Усовершенствована система микробиологического мониторинга санитарного качества питьевой воды, поступающей на животноводческие комплексы.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Результаты санитарно-микробиологического исследования биотопов окружающей среды свидетельствуют о неудовлетворительном санитарно-гигиеническом состоянии животноводческих ферм и комплексов Омской области. Объекты внешней среды (почва, вода, воздух, объекты производственного назначения), а так же сырое молоко, парное и охлажденное мясо обсеменены микроорганизмами рода ЕЩегососсш с гемолитическими свойствами, резистентные к большинству антибиотиков. Результаты микробиологических исследований позволяют определить дополнительные санитарно-показательные микроорганизмы мониторинга объектов внешней среды животноводческих комплексов и пищевого сырья полученного с перерабатывающих предприятий.

Материал, изложенный в диссертации, может быть использован при составлении соответствующих разделов учебников и руководств по санитарной микробиологии и гигиене сельскохозяйственных животных.

Внедрение результатов исследований. Отдельные положения диссертационной работы используются при чтении лекций и проведении лабора-торно-практических занятий по курсу ветеринарной микробиологии на факультетах ветеринарной медицины Омского ГАУ им. П. А. Столыпина, Красноярского ГАУ, Башкирского ГАУ, Казанской ГАВМ, Новосибирского ГАУ, Дальневосточного ГАУ.

На основании полученных научных данных, разработаны и утверждены методические указания для специалистов ветеринарной службы «Бактерио-

и »-» ^

логическим контроль санитарного качества питьевои воды, поступающей на животноводческие фермы, комплексы, крестьянские и фермерские хозяйства» (утв. Ученым советом ГНУ Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии, 2011 г.).

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы инновационного развития ветеринарной науки и практики", посвященную 105-летию КазНИВИ 16-17 сентября 2010 г. (Алматы, 2010); Международной научно-практической конференции, посвященной 85-летию со дня рождения члена-корреспондента РАСХН, д.в.н., профессора М. М. Джамбулатова «Современные проблемы, перспективы и инновационные тенденции развития аграрной науки» 25-26 ноября 2010 г. (Махачкала, 2010); Международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию СибНИВИ-ВНИИБТЖ «Инфекционная патология животных» 22 - 25 ноября 2011 г (Омск, 2011).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, том числе одна в издании, рекомендованном ВАК Минобразования Российской Федерации.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 121 страницах машинописного текста, содержит 8 таблиц, 20 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Список литературы содержит 138 источника литературы, в том числе 54 иностранных авторов.

Автор искренне благодарна коллективу лаборатории диагностики бактериальных и вирусных инфекций ИВМиБ ОмГАУ им. П.А. Столыпина, а именно Марине Ивановне Петровой, Маргите Яковлевне Домрачевой, Татьяне Анатольевне Цупиковой за предоставленную тему и неоценимую помощь в реализации микробиологических исследований.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Биотопы окружающей среды животноводческих объектов и продуктов животного происхождения обсеменены условно-патогенной микрофлорой с антибиотико-резистентными и гемолитическими свойствами, при этом доминирующими популяциями являются бактерии рода ЕгЛегосос-сш Брр. (43,8 %).

2. Наличие патогенных и резистентных энтерококков в окружающей среде, сыром молоке и мясе обусловливает необходимость учета его в качестве санитарно-показательного микроорганизма в СанПиНах.

I. Обзор литературы 1.1. Из истории развития санитарной микробиологии Человечество озаботилось проблемами загрязнения окружающей среды ещё за 3-4 тыс. лет до нашей эры. Тогда были сформированы основные гигиенические правила, которые стали частью национальных обычаев, религии и светских законов. Жители древнего Вавилона, а позже египтяне вели борьбу с загрязнением окружающей среды, что выражалось в обязательной очистке жилых помещений и улиц от мусора, удалении нечистот, устройстве водопроводов и т.п. Официальное отражение эти предписания нашли в медицинском кодексе, включенном в свод вавилонского царя Хаммурапи. Так, рекомендовалось изолировать заразных больных, одежду больных некоторыми заболеваниями сжигать, охранять от загрязнения колодезную воду и почву, немедленно уничтожать нечистоты. Основатель клинической медицины Гиппократ (около 460-377 гг. до н. э.) считал, что окружающая среда играет важную роль в возникновении и распространении заболеваний людей. Знаменитый врач Гален (II в.) во многих своих работах («Гигиена» и др.) указывал на тесную взаимосвязь между состоянием окружающей среды и возникновением эпидемий. Абу Али Ибн Сина (Авиценна, 980-1037) высказал предположение, что ряд болезней передается через воду или воздух и причиной их возникновения являются невидимые для глаза мельчайшие живые существа.

Известно, что во времена Ибн Сины в Бухаре, Самарканде и Багдаде широко применялись общественные меры, препятствующие возникновению и распространению эпидемий (четко регламентировались порядок убоя скота, правила продажи мяса и рыбы, питьевой воды, молока и т.п.). Средние века в Европе характеризовались очень низким уровнем гигиены как личной, так и коммунальной. Все это неизбежно приводило к возникновению частых эпидемий среди городского населения. Такое положение продолжалось достаточно долго (в Италии лишь в конце XIV в. было запрещено выбрасывать фекалии на улицу, в Париже систематическая борьба с нечистотами на улицах началась в 1780 г, а в Вене вплоть до середины XIX в. содержимое клозетов вместе с дождевыми водами текло по городу в открытых стоках). Все это неизбежно приводило к возникновению частых эпидемий среди городского населения. В XV - XVI вв. появилось представление о микроорганизмах, опирающееся на экспериментальные данные. О том, что почва, вода и гниющие материалы кишат мельчайшими живыми существами, сообщил Афанасий Кирхер уже в 1671 г. Значительные усилия по улучшению санитарного состояния городов в Европе стали предпринимать лишь во второй половине XIX в. В XIX столетии начинают развиваться научные представления в области гигиены (Р.П. Венцель, 2004; A.C. Лабинская, 2008).

В России лаборатория при Московском университете, позднее превращенного в Гигиенический институт (1890), стала Московской санитарной станцией (1891). Ф. Ф. Эрисман - русско-швейцарский врач-гигиенист, создатель основополагающих принципов общественной гигиены и социально-гигиенического направления медицины, пионер гигиены в России, автор «Курса гигиены» (1887), занимался вопросами водоснабжения и канализации Москвы, разработал первые принципы санитарной экспертизы пищевых продуктов и методы этой экспертизы. Развитию санитарного контроля пищевых продуктов активно способствовал Г. В. Хлопин (1863-1929). Хлопин — создатель руководства по методам санитарных исследований, которое долгие

годы являлось основным пособием для всех санитарных лабораторий России. Началом развития санитарной микробиологии можно считать 1888 год, когда впервые французский ученый Mace предложил считать кишечную палочку показателем фекального загрязнения воды. Он установил, что исследования воды в целях обнаружения в ней возбудителей (брюшного тифа) связаны с большими трудностями и всегда сопровождаются выделением большого количества кишечных палочек. Поэтому он предложил исследовать воду на наличие кишечной палочки (E.coli), как индикатора фекального загрязнения воды вместо возбудителя брюшного тифа (S.typhi). Позже, в качестве индикаторных микроорганизмов, было предложено использовать представителей семейства Enterobacteriaceae, морфологически подобных E.coli. Эта группа микроорганизмов в зарубежной литературе получила название «coliform», что обозначает бактерии группы кишечной палочки. Однако в зарубежной и отечественной литературе стали появляться сообщения, в которых предлагались в качестве санитарно-показательных и другие микроорганизмы. В 1895 г. Клейн предложил в качестве СПМО Clostridium perfringens - споровый анаэробный микроорганизм, выделенный из кишечника человека. А в 1902 г. Гордон расширил рамки применения СПМО, указав, что они могут быть не только показателями фекального загрязнения, но и свидетельствовать о загрязнении внешней среды, преимущественно воздуха, выделениями верхних дыхательных путей человека. Показателями такого загрязнения стали считать гемолитические и зеленящие стрептококки и золотистые стафилококки, являющиеся постоянными обитателями слизистой оболочки рта и носоглотки. В 1910 г. Хоустон предложил в качестве показателя фекального загрязнения использовать энтер