Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Роль липопротеинов высокой плотности в развитии и предупреждении дислипопротеинемий свободно-радикального и стрессового генеза

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Роль липопротеинов высокой плотности в развитии и предупреждении дислипопротеинемий свободно-радикального и стрессового генеза"

РГ 6 ОД

Мй&йё'1'&Й%УДОБОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННА МВДЦИНСйШ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

САРАЕВ Вркй Владимирович

РОЛЬ ЛИПОПРОТЕИНОВ ВЫСОКОЙ ПЛОТНОСТИ 3 РАЗБИТИИ II хТЩУПРНДЗШ ДЕСЛШМПРОШНЕМйЗ СЗОБОДНО-РАДИКАДЪНОГО ¡1 СТРЕССОВОГО ГЕНЕЗА

03.00.0^ - биохимия

Автореферат

диссертация на сслоглняз учёно,! сгепани каядпдага кедпцннсяях наук

Кинов - 1993

Работа выполнена на кафедра биохимии Витебского, ордена Дружбы народов медицинского института Республики Беларусь.

Научный руководитель - доктор бцслогических наук»

профессор Чаркий А.А.

Официальные оппоненты - доктор биологических кзук»

профессор Пикулев А»Т.

- доктор медицинских ндук» доцент Таг&вдзич. А..д»

Ведущая организация: Смоленский государственный медицинский ицституг»

Защита состоится " ¥ " \аА{)ЫХг-_1393г.. в час.

на заседании Специализированного совета К.077.0Х.02 по присуждению ученой степени кандидата медицинских наук в Минском ордена Трудового Красного Знамени медицинском институте (220116, г. Минск, проспект Дзержинского, 63).

С диссертацией ыокно ознакомиться в библиотеке Минского ордена Трудового Красного Знамени государственного медицинского института.

Автореферат разослан "3 " » /¿ЛЛ-_ЬШг.

Учёный секретарь Специализированного совета, кандидат биологических наук,

старший научный сотрудник • Д.А.МШНТОВИЧ

ОЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

Актуальность проблемы: Липопротеины высокой плотности (ЛПВП) 1гравт важную роль в механизмах обратного транспорта холестерина [А.Н.Климов и соавт., 1975-1992; Н.В.Перова и-соавт., 1^79-1992; ?.З.Меерсон, М.Г.Пшенникова, I960; Е. L. Biermcm ,J.F. Oram .987; P. J. Nestel , 1У67; E. A. Nikk'« A.M. Scan« » I9Ö7 и др.). Первичные и вторичныэ нарушения :истемы обратного транспорта холестерина ведут к развитии дис-¡ипопротеинэмий (ДЛП) атерогенного характера (В.Г.Колб, В.С.Ка-шшников, I9ÖG-I99I; Ю.М.Лопухин и соавт., I9bJ; B.C.Репин и со-вт., 1975-19*2; З.И.Чазов и соавт., 1966-19*2 а др.). Различные изические, химические и стрессовые факторы способны индуциро-агь вторичные ДЛИ посредством изменения биосинтеза, виутрисосу-истой трансформации и катаболизма ЛПВП (В.Н.Гуркн, 1966; В.Я. взрдохлиб, 1991; П.С.Хомуло, 1963-1974). Сочетанию действие адиационно-экологических и стрессовых факторов в постчернобыль-ком периоде вызывает развитие радиационно-индуцированных ДЛП, ежащих в основе ускоренного развития атеросклероза (П.Л.Чаяло соавт., I9bö-I9*2; А.А.Чиркнн и соавт., I9Öb-lJ92). В связи с тим актуальной проблемой является исследование механизмов нару-ения липидтранспортной системы' и научное обоснование путей их оррекции при воспроизведении атероген^нх типов ДЛП радиационны-и, гзпатогоксичэскими и стрессовыми ^акторами. Центральные волосы этой проблемы касаются роли ЛШП в генезе радиационно-эко-огических и стрессовых дЛП, а также в механизмах защитного дейст-м . корректоров ДЛП и гепатопротекторов.

Цель si задачи работы. Целью исследования было изучение содер-шия бэлково-липидного состава и ¡росфолипидного спектра ЛПВП гл радиационном воздействии, иммобилизационном стрессе, острой ггоксикации тетрахлорметаном и их сочетаниях, а также оценка Смежности фармакологической коррекции выявленных изменений хи-¡ческого состава ЛПВП. В соответствии с этой целью в диссерта-юнной работе поставлены следуощие задачи: Изучить влияние внешнего гамма-облучения, иммобилизационного стресса и острой интоксикации тетрахлорметаном на динамику изменений, содержания и химического состава ЛПВП.

ч

Z. Исследовать влияние риполипидемических и гепауепроуекторных препаратов на развитие, дислилопротеинемий, индущрсдаанкых гамма-облучением, иммобидизационным стрессом и введением тетрахлорметана.

3. Оценить наличие и выраженность коррзгирувдего действт гипот-липидемических и гепатолротекторних препаратов на содержание и состав ЛПВП в условиях сочетанного действия гамма^об*-лучения, иммобилизационного стресса а тетрахлорметана.

Научная новизна результатов. Впервые приведены доказательства универсальной роли и высокой информативной-значимости изменений количества, белково-липидного и фоафолипвдного состава ЛПВП в развитии и предупреждении транзиторных дислипопротеикемий, вызванных «[.¡мобилизационным стрессом, внешним гамма-облучением и введением гепатотоксического яда - тетрахлорметана. Описан ряд новых неизвестных ранее фактов:

- выявлены разные изменения показателей липидтранспоргной системы после однократного гамма-облучения в дозах 0,25-5,0 Гр; (¿аза развития радиационно-индуцировакной ДЛП (10-17 суток)характе~ ризуется уменьшением абсолютного содержания ЛПВП и разнонаправленными сдвигами уровней $рос<ратидидхсшша и лизо^осфатидил-холика;

- выявлены разные изменения содеркания 11-оксикортикосгероидов

и глюкокортикоидчувствитедьных ферментов С?руктозо-1,б-бксфос-шатаза, ^ос^о-^руктокиназа) при иммобилизационном стрессе у крыс, причем в »¿¡азах острого стресса и адаптационных изменений (до 15 суток) уменьшено содержание ЛЛВЛ, характеризующихся сниженным холестерин-оосфолнпидным соотношением! включение ■^С-ацетата снижено в фосфатидилхолин и фосыатидияэтаноламин, а также повышено в лизофосфатидилхолин ЛПВП; - '

- острая интоквикация тетрахлорметаном ведет к транзиторной ги~ перхолестеринемии,. сопровождаемой изменением химического состава ЛШШ (уменьшение содержания белков, общих фосфолипидов, ли-зо^ос^атидилхолина и повышение уровня фосдатидклхолина;;

- предварительное облучение крыс модифицирует действие иммобилизационного стресса и тетрахлорметана на показатели количественного содержания и химического состава ЛПВП.

йпервае проведена сравнительная оценка'эффективности влияния природных и синтетических гиполипидеыических и гепатопротекторных

препаратов на количественное содержание и химический состав ЛПВП в периоде развития гранзиторной радиационно-индуцироганной дис-липопротеинемшь Новыми являются данные об особенностях реактивности системы обратного транспорта холестерина при введении гигсо-липидзмичеоких и гзпатопротекторных препаратов в условиях соче-тайного действия гамма-облучения, иммобилизационного стресса и тетрахлорметаиа.

Теоретическая и практическая значимость работы. Показано, что количественные и качественные изменения ЛПВП играют ведущую роль в развитии транзиторных дислипопротеинемий стрессового и свободно-радикального генеза. Для ранних этапов повреждения печени стрессового и свободно-радикального генеза характерно выделение з кровь ЛПВП, состав которых напоминает насцентные ЛПВП. Влияние изолированных радиационного, стрессового и гепатотоксического факторов на количество и химический состав ЛПВП отличается от действия сочетания этих ^акторов на класс липопротеинов высокой плотности. Эти теоретические положения следует учитывать при разработке концепций ускоренного развития атеросклероза у лиц, подвергшихся действию радиационно-экологических и стрессовых факторов в постчернобыльском периоде.

Практическая значимость работы определяется следувщими фактическими данными и обобщениями:

- Оценена эффективность защитного действия по отношению к содержании и химическому составу ЛПВП на этапе развития радиационно-индуцированной ДМ ряда препаратов, которые распределились в последовательности "эссенциальные" цюсфолипиды - метадоксил -флакозид - танафлон - пасэнин - пробукол.

- Определены наиболее чувствительные к действию дислипопротеино-гзнких факторов и лекарственных препаратов компоненты химического состава ЛПВП, которые распределились в последовательности обиие фосфолипиды - фосфагидилхолин - лизофосфатвдилхолин - фос-фатидилхолин/сфингомиелин - холестерин - холестерик/фосфолипиды -апопротеина - полиглицерофосгааты - фосфатидилэтаноламин - апопро-теины/липиди. Это может служить основанием для ранжирования лабо-раторно-диагностической значимости этих показателей ЛПВП. Оптимальный выбор гиполипидзмических препаратов с учетом их влияния на обратный транспорт холестерина должен учитывать характер повреждающего дислипопротенногенного фактора или сочетания таких факторов. Представленные экспериментальные данные обосновывают необходимость разработки дифференцированных ахея даег^от-

венной коррекции дипидтранспортной системы- при ЛЯП, индуцированной различными радиационными, экологическими, стрессовыми ф&кго* рами и их сочетаниями.

Основные положенияг внноокмне на публичную защиту»

1. Этап развития транзиторкых радиационись, стресс- и тетрахлор-метан-икдуцированных дисдипопрстеинемий сопряжен с уменьшением количества и изменением химического состава ЛПВП.

2. 9осфолипвдный состав ЛПВП наиболее чувствителен к действии дисдипопротеиногенных факторов и.гипадшшдемических препаратов.

3. Предварительное гамка-облучение модифицирует действие иммобили-зационного стресса и тзтрахлорметана на обратный транспорт холестерина, а также гиподитщеиических препаратов на количество и состав ЛПВП.

Апробация работы. Результаты проведенных исследований и положений диссертация докладывались и обсуждались на внутриинституг-ских конференциях молодых специалистов (Витебск, 1990,.19У1, 1У92, 1993), Республиканской объединенной научной конференции патофизиологов, врачей спортивной медицины,и 1«К (Минск, 19а5), Всесоюзной конференции "Радиобиологические последствия аварии на Чернобыльской АЭС" (Минск, 1*91), Республиканском съезде специалистов по клинической лабораторной диагностике (Гродно, 1992), Всесоюзной научной конференции "Ускоренное старение, связь с возрастной патологией" (Киев, Ь92), Международном - симпозиуме исследователей лк-■ постабила (Москва, 1992)-

По материалам диссертаций опубликовано.14 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 193 страницах мапинописи и состоит из введения, аналитического обзора литературы, методической главы, Ц гаав изложения подученшх результатов, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций и литературного указателя. Работа содержит 40 таблиц и Ъ рисунков. Список цитируемой литература включает библиографических наименований.

Объекты и методы исследований.

Работа выполнена на 726 беспородных крысах-самцахсо средней массой тела 160 г, Внесшее гамма-облучениа животных производили на установке УГУ-420 с мощностью дозы 2,7«10"*^Гр/с и фокусным расстоянием 3 м в дозах 0,25; 0,5; 1,0 ш 5,0 Гр. Хронические им-

мобилизационный стрэсс моделировали путей ограничения подвижности крыс, помещая их в индивидуальные зажимные клетки. Острув интоксикацию тетрахлорметаном (четыреххлорисгый углерод) вызывали трехкратным введением в желудок через зонд в смеси с оливковым маслом (1:1) в дозе 0,7 мл на крысу массой £ООг с интервалом 48 ч между введениями, В специальных сериях экспериментов крыс, предварительно облучэйных в дозе 1,0 Гр, спустя 10 суток после гамма-облучения помещали в индивидуальные зажимные клетки сроком на 17 суток или трехкратно вводили тетрахяорметан и на 8-е сутки после третьего введения исследовали содержание и химический состав ЛПВЛ. Препарат 3'¿1 ("эссенциальные" фос$олипиды фирмы Рсн-Пуленк-Рорер, Германия, серия 0207500) вводили внутрижелудочна в дозах 300 и бООмг/кг в виде водной эмульсии. Препараты флакозид, танафлон, пасенин разработаны в-ВИР и любезно представлены проср. С.Л.Соколовым. Флако-зид - индивидуальный флавоноидкай гликозид из листьев бархата амурского и листьев бархата Лаваля семейства рутовых вводился внутрижелудочна в дозе 100 мг/кг. Танафлон - экстракт пижмы сухой, содержащий флавоноиды и фзнилкарбоновые кислот (аналог - танацехол, регистрационный номер 87/ILU/6) вводился внутрижелудочна в дозе 50 мг/кг. Пасенин - растительный гиполипидемический препарат вводился внутржселудочно- в дозе 50 мг/кг. Метадоксил (5-оксо-2-пирро-лидинкарбоксилат-З-гидрокси-б-метил-^.^-пиридиндиметанол, фирма ''Балдачи", Италия) является синтетическим гепатопрогекторным пре-чаратом и вводился внутрижелудочна в дозе J0 мг/кг. Пробукол - гя-юлипндеглический препарат антиоксидаатного действия (синтезирован v ВНййБйЛВ и любезно представлен проф. Л.Д.Смирновым) вводился )нутршдалудочно в дозе 100 мг/кг. •

В сыворотке крови арыс определяли содержание триацилглицери-юв с помощью наборов фирмы "Лахема" (ЧСФР), холестерина по Абелв. ,ля выделения' ЛПВП использовали метод химической преципитации апо-¡-содержащих липопротеинов гепарином в присутствии ионов марганца .Б.Г.Колб, В.С.Камышников, НЬЧ; Н.В.Перова, Ь83). Содержание елков ЛПВЛ определяли спектрофотометрически при 275 и 295 нм Н.П.Антонов и соавт., 1уЬ6), а количество липидов ЛПВП - с помощью абороэ ^ирмы "Лахема" (ЧСФР).. Содержание холестерина сыворотки, ЛВП, триацилглицериков сыворотки выражали ъ ммоль/л, количество елков и липидов ЛПВП выражали в г/л. Индекс* агерогэнностя рассчи-ывали по формуле А..Н.Клш*ава. Общее содержанка фосфолипидов ЛПВП предвляди по Сеенбергу и Свеннерходьму (даадь/л), a фосфолипидны.'1 остав ЛШП (/О оценивали методом двухмерной тонкослойной хро'мато-

график.. Содержадаэ еаадого Е«асеа.фосфедид5шо&,пафос* фору, используя реактив Вао-ькоаского- В качеств аредао^вшашса'.. биосинтеза фосфолкпадоа применяла даорнГжФодаз

подкожно из расчета 30 мкКи на 100г мае. с к. sa 2 час© до. ззбяя.* После выделения ЛПВЯ й разделения фосфоляпидов методом тош&оояо.й-ной хроматографии каздув из фракций перэаесидк. so :|яакош: со ещиа-тилляционной кидкостьс IC-8 к измерял«'.радиоактивность на счо-гчи-ке БЗТА-2. Удельную радиоактивность фосфаяшйдннх фращий шража~ ли в кмп/мкг P/IÛG о. -

Для характеристики етреес~ре&ецй15,в сыворотке' крови' определяли содержание Ц-о-ксикортикостеройдов Су криз арекыущзсЕвоаво . кортивосtepos) спектрофсгсофАыориыетргцесБйи методом в nponiipsî И.Е.Уоватовой и Ш.А.Ианкова (1568), атакса'глюкоза'унифицировав ным глюкозооксидазшш методом.-В ткан« печени сценкьада содержание, гликогена антроновым методой по НДДбдуяяаезу ,'(1368). В гоморё* натах печени определяли.айтиввосгь.:фосфофруктйкаыази (AHi тозо~6-фосфа?-£~фоофотрансфэраза, К§ 2*7» 1ЛЮ я фрр:тоао~£*б-бисфосшатазы С^-Фрук^ез<>1,б^дафосфаач1«;фосфогйдролаза» К§ J.I. -J .11) по А.м.йуликошй,' Ь66 к-Wcfeer Çontsno-.A.»' 1959, Ак-» тивность фосфофрукгокиназа.выра&али в мвмоль дио^сизцетока/Х г на I мии (37°С), а фруктозо->1,б-бисфосфатазн в мкмсш» за

X мин (Л°С). Содержание суммарных белков:печени,определяли после растворения обезжиренного трихяоруксусного осадка.ткани в 1н раствора КОЯ по Лоури. Рассчитывали удельнув авт.йвност.ь ферментов.

Цифровой материал. обработан статистически по Стьйденту-^йиеру с использованием специального шкета прог.рймк 1Ш-*206»

оснозшв PsayibîAîa йсщБдошйй а их онадшв.-

После однократного ввезшего гамма-об л;уче.да .крыс в ж>зах. 0„25-0,5-1,0-5,0 Гр выделено четыре фазы иэмеазний. параметровяйпид-гранспортной системы.

Первая (раза* (стресс-реакция,..-J сутки после облучешш) :харак-_ теризуегоя гипорхолесгеринемией к оовшедакиадекса атзрогзаноста (0,25 - 5,0 Гр), увеличением содержания обадх- дш'вдов» уркацид-глицеринов, холестерина; ЛПОНП (0,5. * 5,Q Гр)>. ЦщцвлШ дозз облучения (0,25 Гр) выявлено уменьшает,содержания/обш-ix■•дапидед,' цкдглкцерадов и холестерина ЛЛОЩ,-' 6 при дозе обдуче~

ник (5,0 Гр) - 'достоверное уманыпевко уровня теогеркаа изменения укладававтса в'рамав прздстззкзцьй об свобэдаобжях' 'с$цзв липидов при развитии стресс-рзакцки разцоа. сïenàea сцрггоаасоти ■

(Г.Е.Данилов. Л.Д.Йбагоз. 1991; Н.В.Гуляева, 1990; Mcrsbock О, v/o0f-S W., I939;8cbu<a.P>, et al, 1969). По откоаешш к диапазо-

О

iy доз облучения выявлены дозозавнсимыо эффекты для изменений со~ юржания триацилглнцоринов, холестерина ЛПВП и ЛПОНП. Вторая фаза иаптационных сдвигов (10 сутки) характеризуется увеличением со-(ержания холестерина ЛПВП на фоне сохранившейся гиперхолестерике-1ии. Третья фаза транзиторной радиационной дислипопротеинемш [рослеживается в интервале 17—.J0 сутки после облучения крыс: ги-:ерхолестеринемия, повышение содержания холестерина ЛПНП и уяэнь-енио уровня холестерина ЛПВП. Четвзртая фаза возрастных и радиа-ионно-индуцированных изменений липидтранспортной системы вклпчазт акопление триацилглицеринов,(30 сутки при 0,25 и 0,5 Гр; 7 неся-ев при 0,5 и 1,0 Гр). Поскольку в генезэ транзиторной радиацион-о-индуцированной дислипопротекнемки (Рй ДМ) ведущее место запп-авт изменения количества холестерина ЛПВП, в дальнейших исследо-анкях детальному изучешга был подвергнут химический состав этого ласса липопротеинов.

Установлено, что в первую, фазу РН ДЛП в состазз ЛПВП уменьшаюсь доля лппидного компонента на 24-46;? и соответственно увзлк-шались значения белок-липидного соотношения ЛПВП на (0,25Гр), '.0% (0,5 Гр), II2I (1,0 Гр) к 201% (5,0 Гр). Во второй фазе РИ 1П поАышенкое на 20,® содержание'яидидов ЛПВП было отмечено в дна-13оне доз 0,5 - 5,0 Гр. При этом величина белково-липидцого от- . 'иения повысилась на 25$ при дозе облучения 0,25 Гр. и снизилась 20-2U при относительно высоких дозах 1,0 и 5,0 Гр. В третьей зе РИ -ДЛП содержание липидоз в составе ЛПВП либо нормализовыва-сь, либо уменьшалось по сравнении с исходными значениями (0,5Гр). четвертой фазе РЦ ДЛП содержание липидяого компонента ЛПВП вновь выкалось на JS-62;» у всех облученных крыс. На фоне четко варенных фазних изменений содержание липидиого компонента ЛПВП у лученных крыс, изменение содэржания белкового компонента были нее закономерными. Удалось выявить лишь стойкий эффект повышения 33ня белкоз з ЛПВП на 22-45$ а интервале 10-30 сутки наблиденчя ibKo у крыс, облученных в дозз 0»25Гр. Возможно, этот эффект !зан с накоплением в составе ЛПВП так называемого сызороточцого 1Л0ИДН0Г0 белка (Erikser» N., Bcn<dvtL ЕР , I9Ô4:/V\ocm ЕД cl, 1984).

В первую фазу Pli ДЛП умеиьпэниз доли липздного компонента Д связано с падением содержаний фосфолгщмдоз на 32-415?. Уроззг

Ю

холестерина ЛПВП соответствовал исходная значениям (0,25-1„0Гр) и уменьшался на.265? у крыс» облученных в дозе 5,0 Гр. В состаге фосфолипидов ЛПВП уыеньвалрсь содержание ф осф ат идилх о дина на II-251 и увеличивалось количество лизо^осфатидилхолкна на 15-3*$. Можно предположить, что в периоде стресс-реакцки количество цир-кулируииих ДПВП не изменено, но за счет стимуляции процессов свободно-радикального окисления липидов создаются предпосылки для нарушения биосинтеза фосфолипидов, их деградации и дкскоординации их фракционного состава (Л.В.Юшина, I9Ь9; Б.ГЛяпков и соавт., I966;tljburg L.B.M. '«fc о\. , I9b9;U>duc R. «t «Л.» I9S7). При атом изменяются физико-химические свойства за счет относительного преобладания сфингомиелина над фосфатидилхолином к холестерина над фосфолапидами ЛПВП. .j

Во второй фазе Рй ДЛИ увеличение доли липидного компонента ЛПВП следует связать, правде всего, с повышенным содержанием холестерина 1IEÍI на 33-41$ (0,5-5,0 Гр). Коэффициент холестсркн/фос-фолипиды оказался увэлкченш-i у всех групп облученных крас на II-62;L В спектре фосфолипидов ЛПВП выявлена умеиьгзные содержания фосфатидилхолина на 7-25/1 (0,25-5,0 Гр) и величины t~»осфат-,щилхо-лин-сфингомиелинового соотношения на 15-36,? (0,25-1,0 Гр). Возможно, в этом периоде в крови циркулирует повышенное количество обогащенных холестерином ЛПВП, что кокет рассматриваться как стимуляция обратного транспорта холестерина в печень.

В третьей фазе Píí illíl содержание липидного компонента ЛПВП нормализовалось, но достоверно уменьшилось как содержанке холестерина на так и фосфолипидов на 35-64$. Это несоответствие мояно объяснить накоплением в состава ШБИ триацклглицеринов (a-.bbons V.£>,Ваv.c,r.-\-'V.r.c F.C., 1983 В спектре фосфолипидов ЛПВП облученных крас сохранилось сниженное содержание фос^атидилхолнна на 16-39! и увеличенный уровень лиэо-фос^атидадхолица на 20-51,«, Кроме того уменьшились величине соотношения фосфатидилхолин-сфикгомкедин ЛПВП на 14-51$ у всех групп облученных животных. По вссй видимости, в этой периоде в крови циркулирует уменьшенное количество ЛПВП,. но каждая частица ЛПВП перегружена холестерином и, возможно, траацйдглицзрпнами. При зге изменения фосфолипидного спектра ДПВП могут свидетельствовать о и достаточности ЛХАТ-реакцЕй.

В четвертой фазе Pií ДЛИ содэраание липидного,компонента Ж вновь повысилось. При этом количество фосфолипидов ЛПВП норкалигс

валось, а уровень холестерина ЛЛВП оставался сниженным на Такие изменения можно объяснить, если допустить, что в составе ЛПВП увеличивается содержание триацилглицеринов. В спектре фос-(ролипидов не было найдено закономерных изменений. Можно думать, что спустя месяц посла облучения в крови крас циркулирует уменьшенное количество ЛПВП, в составе которых фосфолипидн преобладают над холестерином (уменьшение величии холестерин-фосфолипидного коэффициента на J5-4ÖI).

Итак,в интервале 10-17 сутки после облучения крыс нарастает выраженность радиационно-индуцированной дислипопротеинемии. Можно предполагать в этом периоде снижение антиокислительной активности ЛПВП (Т.Я.Нздирова и соавт.,. 1967; А.Н.Климов и соавт., 1у67). Исходя из вышеизложенного, интервал ГО-17 сутки после облучения крыс следует'рассматривать как оптимальный период для испытания лекарственных препаратов, препятствующих развитию или коррегируо-щих дислипопротеинемии.

В этом периоде животные, предварительно облученные в дозах 0,25; 0,5; 1,0; и 5,0 Гр, внутрюкелудочно получали препараты эссвн-циальные фосфолипидн (З&Л) в дозах J00 и 600 мг, танафлон, флако-зид, пасенин, нетадоксил и пробукол. При анализе действия этих препаратов на белково-липидный состав ЛПВП сыворотки крови облученных крыс установлено следующее:

- Доза 0,25 Гр. Препараты Э9Л (>00 мг), танафлон, метадоксил и пробукол оказывали нормализующее действие на содержание белкового компонента ЛПВП.

- Доза 0,5 Гр. Препараты Э4Л (600 мг), танафлон, фдакозид и пасе-нин повышали содержание белков в ЛПВП.

- Доза 1,0 Гр. Препараты Э$Л, флакозид, пасенин и пробукол приводили к относительному преобладанию белкового компонента над липидным в составе ЛПВП.

- Доза 5,0 Гр. Препараты ЗФЛ ООО мг), танафлон и метадоксил снижали содержание белков в ЛПВП.

Испытанные- препараты не оказали закономерного влияния на содержание липидов ЛПВП у облученных крыс. Можно лишь отметить, что у животных, облученных в дозе 1,0 Гр, четыре препарата (ЭФЛ, танафлон, пасенин и пробукол) уменьшали содержание ляпидного компонента ЛПВП.

Действие препаратов на холестврин-фосфолипидноэ отношение ЛПВП зависело от дозы предшествующего гамма-облучения:

_ Доза 0,25 Гр. Вое препарата, исключая пробукол, повивали содержание фосфолкпидов на 120-176^ в снижала величину'коэффициента холестерин-фосфолипиды на 46-83$, Препараты Эй, такафлон, фяа-козид и пасенин уменьшали содержание холестерина ЛПВП на 32-6.3$.

- Доза 0,5 Гр. Общих эффектов для действия препаратов на выявлено. Препарат Эй в дозе 300 мг полностью нормализовал холестбрин-фосфолипидное соотношение, а в дозе 600 мг увеличивал содержание фосфолипидов на 70$ и уменьшал содержание холестерина на 39% и величину коэффициента холестерин/фосфолипиды на 64$ по сравнению с контролем. Танафдон и улакозид повышали, содержание холестерина на 21 и 65$ соответственно. Пасенин нормализовал величину холестерин-фосфолипвдного соотношения.

- Доза 1,0 Гр. Бее препараты, исклачзя пробукол, повысили содержание фосфолипидов на 22$ (пасенин) - 87$ (3•¿Л в дозе 600 мг). Отдельные препараты повысили та&аа содержание холестерина (3<й[

- 300 мг на 38$, фдакозкд на 65$ и пробукол на 34$).

- Доза 5,0 Гр. Все препараты, исключая пробукол, повысили сод ер-» кание фосфолкпидов на 42-62$ в уменьшили величина коэффициента холестерин/фосфодиакды на 20-35$. Препараты 3íJI. флакозвд и ■ пасенин, как и при доза 1,0 Гр, повысили содержание холестерина на 36-41$.

Итак, среди испытанных препаратов только пробукол.либо не оказывал действия на холэстеркн-фосфолипкдное соотвоиение ЛПВП (0,25 Гр-0,5Гр), либо приводил к увеличении холестерина ЛПВП и резкому повышении величин коэффициента холестерин/фосфодипиды.на 139% (1,0 Гр) или 69$ (5,0 Гр) по сравнении' с контролем.

Учитывая, что ¡наиболее общие эффекта в действии испытанных препаратов у предварительно облученных крыс связаны с изменением содержания (росфодипидов ЛПВП, было предпринято исследование их фракционного состава:

- Доза 0,25 Гр. Все препараты, нсклочая пробукол, нормализовали содержание лизофосаатидилхолина, уменьшая его количество на 2036$. Все препараты, исключая пробукол и метадоксил повывали содержание фосфэтидилходина на 12-301. Гепатотролные препараты (длакозид, пасенин и мзтадоксил) повыпали содержание фосфатидил-этаноламина на 117-226,2 и полиглицерофосфатов на 86-1323," вероятно, усиливая их биосинтез в печени. Метадоксил и прабукод ухудшали физико-химические свойства ЛПВП, что подтверждает уиень-иение величин коэффициента ¡¿осфатидилхолин/сфвдгймиелив на 31% и

2б£ соответственно*

Доза 0,5 Гр* Закономерных общих эффектов в действии препаратов нэ выявлено. Нормализующий эффект оказал только препарат ЭФЛ в дозе 600 мг (снижение содержания лизофосфатидилхолина на 19%, повышение содержания фос$атвдидхолина на 22* и вэличинн фосфа-тидилхолиц-саингомивлинового соотношения на 36%). Доза 1,0 Гр. Препараты ЗуЛ, танафлон, пасенин и метадоксил снизили содержание лизофосфатидилхолина на и повысили содержание фоодатидидхолинв на 15-00/2. Пробукол усугубил действие облучения на фосфсшшидный состав ЛЛЗП (повышение уровня лизо-фосфагидилхолина ка А», снижение уровня фосфагидилхолнна на и величины коэффициента фосфатидилхолан/с$ингомиелан на 43i). Такие изменения могли привести к повреждению уосфолипидных слоев липопротеиноя и мембран, в частности, к гемолитическому действии (Suzuki А., Kawaka-rrV, /И,

£,оза 5,0 Гр. Общие эцкоекти препаратов такие же, как при дозе £,0 Гр, Все препараты повысили величины соотношения фосфатидил-сояий/сфийгймиелпи«

Приступая к исследования химического состава ЛЛВП при стрессе, )бходш«о бцдо охарактеризовать избраннуо экспериментальную модель [лителькуа иммобилизации ;лгаогнвх в индивидуальных пеналах. На !тяженяи 60-суточной иммобилизации крас были выявлены 4 фазы стресс-

Первая фаза ~ острый ишобилизационный стресс (5 сутки) -актеризовалась возрастанием количества кортикостерона сыворотки ви на• -Л Л и теоретически ожидаемыми сдвигами з активности гор-ально чувствительных ферментов яэчени: увеличением активности ктозо-1„0-бисфОсфатази на 2$%, уменьшением активности фосфофрук-ииазц на б0£ и величина соотношения удельной активности этих чентов на Во второй фазе адаптационных изменений (15 сутки; зржание кортикоствронз снижалось до верхней границы контрольных 1ений, а отношение удельной-активности фос^офруктокиназы и удель-активности ¡урукт030-1,б-бисф0с^атаэы увеличивалось на JJI. Это сетельствовало, вероятно, об активации превращений гликозы в спе-'ческом пути катаболизма с целью восполнения энергетических ре-:ов клеток печени, В третьей фазе развития хронического иммоби-.ционного стресса (J0-^5 сутки) происходило повторное увеличение ржания кортикостероца в сыворотке крови до b5,i с соответствующим вниеи величины коэффициента аосфофруктокшгаз1!,/фру1сгозо~1,6-б:г-

(¿¡осфатаза на 55-38;?. В четвертой фаза выхода ферментативных систем печени из под строгого гормонального контроля (60 сутки) на фоне поваленного на 51,1 содержаний кортикостерона.наблюдалось двухкратное повышение активности фосфофруктокиназы и увеличение величины соотношения удельных активностей ^осфофруктокиназы и çpysT030-I,6-бисфосфатазы на

Анализируя эти результаты, следует предположить? что оптимальными для изучения состава ЛПВП периодами является первая и вторая фазы имиобилизационного стресса. Это связано с наличием адекватной гормональной регуляции метаболизма печени и, вероятно, метаболизме Jhffiíl. Установлено, что в фазе острой стрессовой реакции (3 сутки) достоверно увеличилось содержание в сыворотке крови общего холесте рина, холестерина ДПШ1 и значение коэффициента обаий холестерин/ общие цюсфолипиды. На.10-е сутки гипокинезии было обнаружено умен! шение содержания общего холестерина, но индекс атерогенности суиес венно гшысился. Спустя 17 суток к этим изменениям добавилось увеличение уровня гриацилглицаринов и холестерина ЛПОНП. В интервале 10-17 сутки обездвиживания животных развивалась устойчивая дисли-попротеинемия, в генезе которой ведущую роль играли изменения кож чества и состава ЛПВП: последовательное уменьшение белкового компонента на 22~'J5¡¿, липидного компонента на 19%, холестерина на 6Э-66,2, фосдолииидов на 36-34^ и величины холестерин-фосфолипидного соотношения на 52-4&I. Изменения в состава фосфолипидов ЛПБП были незначительными; на 10 и 17 сутки.гипокинезии уменьиалось содержание лизофосфагвдилхолина на 9-I0X по сравнений с вонгсролвм. Все э' изменения можно расценить.как уменьшение количества циркулирующих ЛПВП (снижение интенсивности обратного транспорта холестерина), в. ¿¡оятко, в результате захвата их кортикостероид-продуцируадими кле вами. При этом ЛПВП выполняют функцию "челнока", доставлявдего эф pu холестерина к месту-синтеза стероидных гормонов (Leduc R.,I98 Включение ^С-ацетата в лизофосфатидилхолин было повышено на 3, I и 17 сутки гипокинезии соответственно на Ш, 5I;¿ и Ш. Удельная активность фос^атидилхолина и фосфатидилэганоламина была снижена на j сутки гипокинезии на 29# и 27,U и на 17 сутки гипокинезии на и 23,5. Следовательно, можно предположить, что на 17~е сутки гипокинетического стресса, т.е. в периоде развития иммобилизацией иол дислипопрогеинемии, замедлен синтез (¿¡осфатидилэтаколамика и ¡i ^атидилхолина на фоне повышенного обмена лизофосфатидилхолика. 3ï данные позволили обосновать применение гепатопротзкторных и гипо-липиденических препаратов в интервале 10-17 сутки пшокинетическс

стресса.

Сеникратное введение четырех препаратов (Э£Л, танафлон, мага-докснл и пробу кол; в интервале 10-17 сутки гипокинетического стресса дало следующие результаты:.

- Bes препараты нэ оказали существенного влияния на содержание общего холестерина, шосфолипидоз и соотношение шракций ^осфолипидов

limn.

- препараты ЗзЛ, танафлон и иотадоксил увеличивали удельнуо активность фос;р&тидилэтацолам1ша соответственно на 32%,63% и 189$, а такие ^осфатадилхолияа на 76$, 51$ и 25$ соответственно.

- Препараты 3'±?Л и танафлон уменьшали удэльнуа активность сфинго-ияелина на 49$ и 53$.

• Танафлон повышая удельнуо активность лизофосаатидилхолина на 53$ и полигляцзрофосаатов ка 127$..

Можно полагать, что препараты 3§Л, танафлон и нотадоксил усиливав? биосинтез предшественника фосфатидилхолина фос.ватид;1лэтанода~ мина и его превращение с помоцью изглзтранешеразн в фосфатндилхо-дин в клетках, продуцпрузщих ЛПБП. Кроме того„ танафлон, вероятно, оказывает активирующее влияние, ка фосфодвдтазу Ag в этих клетках, обеспечивая повышенное образование лизофоесратидилхолина из фосфа-тидилхолина.

Таким образом, испытанный лекарственные препараты не оказывали влияния на содержание п химический состав ДПЗП в периоде развития шкобйлизацаонноз'дисляпопротеянемки. Положительное действие их появляется при исследовании удельной активности фракций росфолипи-íq3 ПВО. Лоскольку биосинтез шосфояипядов ЛЯВП в основное! ссуде-)твдяетс.; в печени, дальнейшие исследования были проведены на мотеля поражения печена тетрахлорметаяом.

После введения татрзхлорметана крысам развивается непродолш-•ельная транзиторная дисяшопротеинемия (Н.Ю.Коневалова, А.Л.Чиркин, уо7; Чиркан A.A., Кокеваяова H.ü., 1уЬ7). Хотя методика воспроиз-здеяия острой интоксикации тетрахдориетаном в настоящей исследова-ии отличалась, были получены близкие результаты, характеризующие остояние липидтракспортной систем,и у затравленных кивотних. Через суток после введения тетрахдорметзна з сыворотке крови кнвотных овивались содзрааниэ общего холестерина на 33%, фос$атидилхолина ПВП ка 16$ и величина фоС'Ьат-идплкояин-о^пнгоыиелинового отношения а 73$, а такие уиеиьвалось количество белкового компонента ЛПБП а, 2Ö4, величины коэффициента белки/липиды ЛПБП на 2г!$, холестерина Ф о ев о л и п ид оз ЛЛВП на 13$ и 32$ соответственно, с|кнгоивэяииа ЛОЛ

на 'Щ и фосфатидилэтааоламина ЛПВП на 44%. Гепатогропные препараты танафлон и-флакозид (троекратное введение после затравки) нормализовали содержание общего холестерина сыворотки крови. Действие препаратов на уровень триацилглицеринов сыворотки крови было противоположным: танафлон уменьшал количество триацилглицеринов на 35^8 а флакозид - увеличивал на 95% по сравнении с контролем. Оба препарата достоверно повышали содержание белкового компонента ЛПВП (танафлон на 116$, флакозид на 39Л, но по разному влияли на содержание липидного компонанта (танафлон вызывал уменьшение на 11%, а флакозид - повышение на 40/?). Оба препарата снижали уровень холестерина ЛПВП на 34$ и 48$, и повышали количество фосфолипидов ЛПВП на 64% и 66$. При этом танафлон нормализовал содержание сфингомиелина,фос-фатидилхолина и их соотношение, а флакозид уменьшал количество ли» зофосфатидилхолика ЛПВП на 15Д по сравнению с контролем. Таким образом, танафлон и флакозид при трехкратном применении препятствовали развитию тетрахлормеган-индуцировакной гиперхолестеринемки, повывали содержание белков к фосфолипидов в составе ЛПВП. При этом уровень холестерина ЛПВП уменьшался. Мокко предположить, что в этих условиях уменьшается количество циркулирувдих частиц ЛПВП и они по своему составу напоминают насцеитние ЛПВП (HarmVLon P..L.с'сс.1, Г3с>5; Vance D.E.st сЛ4 1984}McCaVs МД. <гЫ1р 19йй). -

Через 6 суток после введения тетрахлормегана сохранилось повышенное содержание холестерина в сыворотке крови (на 39$), сниженное количество белков и фосфолипидов в ЛПВП. Кроме этого б составе ЛПВП увеличивалось содержание липидов на 14$ и холестерина на 33$. В спектре фосфолипидов ЛПВП отмечено снижение содержания фосфати-дилэтаноламина на Ь% и дизо^атидилатаноламкна на 11%, а также повышение уровня фосфатидилхолина на 19$ , и величины отношения фосфа-тидилходин/сфингомиелин на 30,2. Эти изменения связаны с имеющимся повреждением печени. Еарущение фосфазздилхолин-лизофосфатидилхоли-нового отношения сигнализирует о недостаточности ЛХАТ-рзакции. Снижение уровня фосфатидилэтаноламина мокет объясняться активацией метилтрансферазной реакции или нарушением синтеза фосфагидклзтано-ламина. По имеющимся данным невозможно дать однозначного ответа на причина изменений соотношения фракций фосфолипидов ЛПВП. При-семидневном применении танафлон не оказал влияния на уровень гкперхо-лестеринемии, а флакозид достоверно снизил содержание холестерина в сыворотке крови на 36,?. Оба препарата повысили содержание .белков в ЛПВП на Uoi> и снизили содержание липидов в ЛПВП. на 24!, в том числе и холестерина (танафлон на 24£, а флакозид на 54/0- На содер-

ШВЙ8 фосфоякпйдсз о-ба препарата из оказали существенного влияния» Зо «анзфяои нормализовал соотношение лиэо$осфатадилхолина и фосфа-гидилхолиноц а флакозид привал к достоверному уменьшению содержание ;фш1Гомиэлина на' J!t;í и соответственно к повышению величин« отноие-П1я. фосфатидилхолин/сфинромиэлин на 50.«. Следовательно, семикратное фймзнениа препаратов частично препятствует развития тетрахлорме~ :ак-индуцированной днслипопротеикешм. Для циркулирующих ЛПВП сох-(анялиоь признаки, характерные.для насцентннх ЛПВП, но количество IX уменьшалось. При этом -ганафлон и илакозид уменьшали значения ко,-хоявстерин/фесфаяипиди т 2бЖ и 53$ соответственна,, чжа ожно косвенно характеризовать относительное усиление обратного ранспорта холестерина, Клйчзвнм.моментом обратного транспорта «в-яется процесс эстерй5икащге холестерина в кровеносном' русла, ката-изируоный ЛХАТ (Н,Ю,Коновалова, А.А.Чяркян, 1^67; А.АЛиркин, Н.Ю. опзваяова, 1357)., ídósao предположить, что гепататропные препараты анафлон я флакозид нормализует баоспцтзэ я экспорт в кровеносное уело фермента.ЛХАТ и/или аполипоиротеина А~1. Эту точку зрения одтзеркдает «акт нормализации препаратами соотношения субстрата продукта ЛХАТ-реакции в ЛШП - лйзофо'сфатидилхолина-и фосфатидил-злика. Огс'адз.'нокйо' зайлачить,- что гепатогропниз препараты флако-ид п танафлон обзепечизаот, ёэроягно,. более быстрое восстановление злокойнтезнруюгцей и экспортной функций лэчеии в условиях острой «оксикации- тетрахлорматаном./

Поскольку а -аостчэрнобыльском периоде на- жителей загрязненных »диоиукяадаиа районов действует сумма радиационных, стрессовых и жойкоикологических факторов, а'последуицнх исследованиях был ¡учзн состав ЛПВП-при действии кмиобилизационного стресса и инток-гкации тетрзхлормётаном у предварительно облученных крыс в дозе О Гр. Исследования были спланирован« так, чтобы 17-оуточноо обэз-¡тшлаяие гкивогпнх приходилось на период развития радиационной аизигйрной диедшопротзкнемип. ймнобилизациошшй стресс у предва-тельно облученных.«плогних дал следущяо новые аффекта:

- } сутк»-гипокинезия. Tpsxoyточная иммобилизация облученных зотйых привела к- дополни?ольноиу'сягаезния' количества триацмгяи-рщов пз 26,1, иоряадизашш'бзлкозо-лппидного соотцосшикя ЛПВЩ знькешз количества ходзетор'пга ЛГОП на 'й- фосфояшшдоэ Ш

stwmbjmwy- иааупешв шосфолкпядног'скспекяра. ДПВЦ- (укезь-няс*. оолор-тагптя, .тазкгюофатвдшолица па 'ф.осфажад,илагб!?ала«а-и й.олигдйцорофосфатоз на а 5Ь%, а гзкае- к ^аджада ида» зтзза шосфатадилхоякна на и отношения ■фося&жжхъ'УхЫъ^&о*

миелин на 97,1), Зти изменения можно рассматривать как признаки существенного поражения биосинтетической функции печени (возможная дискоординацкя ферментативных систем биосинтеза фосфодипидов, экспорта МШИ и ШТ).

- ю сутки гипокинезии. Десятисуточная иммобилизация облученных крис привела к дополнительному уменьшению содержания общего холестерина сыворотки крови на Що и холестерина ЛПВП на 26;?, повыиекию количества липидов в ЛПЗЛ на 46$, в том числе фосфодипидов на 51%', в составе ЛИВЛ содержание лизофосфагидилхолина снижено на 22*, а фосфатидилхолина - повышено на 19%. При этом циркулирующие ЛПВЛ перегружена фосуолипидами, т.к. величина отношения холестеринДюсфо-липиды ДЦВП уменьшена по сравнение с контролем на 5'М. Можно предполагать, что при 10~суточноы инмобилизационном стрессе у облученнь крыс транспорт и использование холестерина периферическими тканями (например, глюкокортикоидпродуцирувдими клетками эндокринных келез> не компенсируется соответствующим биосинтезом и экспортом ЛПВП из печени. Кроме того в этом периоде сохраняются признаки недостаточности ЛХАТ-реакции.

- 17 сутки гипокинезии. Лри 17-суточной гипокинезии облученных животных сохранились гипохолестеринемия, выявленная в предшествующе сроке наблюдения (снижение уровня холестерина в сыворотке крови на

уменьшенное (на Щ') содержание белков, холестерина (на 41,») ФОсфолипидов(на 26,а) в составе ЛПВЛ. Б составе фосфолипидов ЛПВП повышено содержание сфингомиелина на 26» и фосфатидияэтанолашна ш

и снижено содержание фосфатидилхолина на 12$. По всей видим оси при 17-суточной гипокинезии сохраняются изменения» выявленные в предшествующем сроке наблюдения. В крови циркулирует уменьшенное по сравнений с контролем количество ЛПВП, относительно обогащенных фосфолипидами.и имеются признаки нарушения синтеза фосфатидидхолиш в ыетилтрансдеразной реакции клеток, продуцирующих Л1ВП. У этих животных фосфолипидный спектр ЛПВП приближался к таковому у интактны крыс.

В интервале 10-17 сутки при гипокинезии облученных в дозе 1,0 крыс вводили внутрижелудочно препараты ЭМ (Х)0 мг), танафлоа, ыет доксил и пробукол. Танафлон и метадоксил усиливали на 15-16$ гипо-холестеринемическое действие гипокинезии. Бее четыре препарата существенно повышали содержание фосфодиледов ЛПВП (ЭФЛ на танафлон на 9Ц, метадоксил на Я,а и пробукол на 56%). Кроме того тана ■.,лон увеличивал количество аполипопопратеинов ЛПВП на Ч6$. Спектр фосфолипидов ЛПВП полностью нормализовал метадоксил. Остальные пре

шаги оказали дискоординатное действие на фосфолипидный состав ЛПВП. 1эдовательяо, гипокинетический стресс у предварительно облученных шогных изменяет ^армакодинамику использованных препаратов по сравнив с действием их при гамма-облучении.

3 последующих исследованиях воспроизводили острую интоксикаций ¡трахлорметаном у животных, облученных в дозе 1,0 Гр, в периоде 13ВИТИЯ гранзиторной радиационно-индуцироЕанной дислипопротеинемии .7-30 сутки). На протяжении первых четырех суток интоксикация тет-.хяорметаном было выявлено снижение уровня холестерина сыворотки юви на 21-24^. Спустя о суток после введения тетрахлорметана в югаза ЛПВЛ найдено по сравнению с контролем уменьшение доли белового компонента на 53Д и увеличение дипидного компонента на 70,1!, том числе фссфолипидоз-на 16$. В спектрэ ашешолклидов ЛП311 най-íHO поЕыизние уровня уосфатиднлэтанолакина на 35$, а также сшпда-э содержания фосфатидилхолина на I0$ и величины эосфатидилхолин-1ННГСМИ0ЛИНОВОГО отношения на 26%. Следовательно, можно предпола-.ть, что дополнительная к облучение интоксикация тетрахлорметаном меняет бэлково-дипвдннй состав. ИБП, обогацает их фссфолигшдана. и этом спектр фосдолипидов ЛПБД приближается к картине, характер-й для кнтакгных арыс. 13 целом следует отметить, что спустя 8 суток слэ введения тетрахлорметана» основные параметры ЛПВП соответствен-ли контрольным уровням. Это принципиально важно для понимания то, что дакз ара относительно высокой дозе облучения (1,0 Гр) сохранится потенциальные возможности для компенсации действия гепато-опного яда. Интересно, что препараты 3£Л, танафлон и пробукол, одимые 7 раз в париоде тетрахлорметановой интоксикации, нэ оказа-- существенного влияния на основные показатели химического состава БП. И только, при "исследовании фракционного состава фосфолипидов БП показано, что всо три препарата усугубляли действие.гепаготроп-го яда: увеличивал» содержанке фосфатидилхолина на 15-23,?, умень-ля содержание лизофосфатидилхолина на 13-24,Í, фосцщтидилэтаналами-(ЭМ на.43.1, пробукол на 5I;í) и полиглицерофосдагов (на 51-66^). и этом эссонциальные фосфолипиды и пробукол увеличивали отноаэние сфатвдилхолина к с^ингемиели'ну на h¡$ и 26% соответственно.

Заключая обсуждение полученных результатов, следует отметить, о влияние испытанных препаратов на показатэди химического состава ВЦ но равнозначна при действии изолированных повреждающих факторов амма-облучениэ, гипокинезия и введение тетрахлорметана) по сравнив с их сочетании» действие:*. ¡[сотому при разработке рациональных зм лечения-больных, подвергшихся действию радиационно-экодогичесхих

и стрессовых факторов, необходимо учитывать экспериментальные данные о молекулярных особенностях реактивности липидтранспортной системы в условиях сочетанного действия повреждающих агентов, а также введения фармакологических препаратов.

ВЫВОДЫ

1. В динамике изменений показателей липидтранспортной системы после однократного гамма-облучения крыс в дозах 0,25-5,0 Гр выявлены четыре фазы:стресс-реакция (3 сутки), фаза адаптационных сдвиго: (10 сутки), фаза транзиторной радиационно-индуцированной дислипо-протеинемии (17-30 сутки), фаза возрастных а радиадаонно-индуциро-ваннах изменений (1-7 мес).

2. Абсолютное и относительное содержание, ^осфодипидав 1ПВП снижено в интервале 3-17 сутки после облучения у большинства групп ж» вотных. На высоте транзиторной радиационной дислшапротеищзмш выявлены разнонаправленные изменения содержания фосфатидилхолина и лизофос^атидилхолина у облученных крыс,

2. Обдии анализ действия гепатопрогекторных и гиполищдемическ препаратов на химический состав ЛЛВП в периоде максимального разви тия транзиторной радиационно-индуцированной дислипопротеинемии (10-17 сутки после облучения) показал:

~ по сумме нормализующих эффектов (СНЭ) препараты располагайте в последовательности З&З > мегадоксил, флакозвд > танафлон, пасв-нин> пробукол;

- эффективность испытанных препаратов зависит от дозы гамма-облучения в последовательности СНЭ при 5,0 Гр > СНЭ при 0,25 Гр> СНЗ при 1,0 Гр> СНЗ при 0,5 Гр;

- испытанные препараты оказывают нормализующее действие на параметры ЛИШ в последовательности общие уосфолипиды > фосфатидилхо-лин, лизо^осфатидилхолин > коэффициент фocфaтидилxoлин/cфингoмиeл^

> холестерин > коэффициент холестерин/цюсфодипиды > бедки, поли-глицеро^ос^аты> сфингомиелин, ^осфагидилэтаноламин > дипиды, коэффициент белки/липкды.

4, ао динамике содержания И-оксикортикостероидов в сыворотке крови и активности фос^офруктокиназы и фруктозо-1,б~бисфосфатазы выявлены четыре ^азы иммобилизационного стресса у крыс; острый иыг билпзацконный стресс (5 сутки), адаптационные изменения (15 сутки, хрон»:чзскиЛ иммобилнзационный стресс (30-45 сутки) и выход ферментативных систем из-под строгого гормонального контроля (60 сутки)

5. !> первой и второй ¡¿азах иммобилизационного стресса уменыие: содержание ЛПБП в сыворотке крови, ¿ля ЛГВП характерно сниженное

холестеринг-фосфолипидное соотнесение., В конце второй фазы иммоби-лизационного стресса уменьшено включение ^С-ацетата в фосфатйдил-этаноламин и фосфатидилхолИн и повышена удельная активность лизо-фосфятидилхолина, Препараты ЗфЛ, ганафлон и мвтадокс^л не влияли на содержание и химический состав ЛПВП, но увеличивал.!! удельную агс-тиЕнроть фосуатидилотаноламина и фосфатидилхолина ЛПВП. ,

6, В периода развития тетрахлорметан-индуцированной гипзрхо-лестеринемии в составе циркулирующих ЛПВП уменьшено содержание белков, фосфолипидоз и лизофосфатидилхолина и повышено содернание ¡роо-аатидилхолина. Кратковременное (трехкратное) применение танафлона

I флакоэида препятствует развитие) гиперхолесгеринемии и повышает удержание белков и фосфолипидов в ЛПВЛ. При семикратном примэнег^ия фепа^атоз в составз ЛПВЛ сохранено повышенное содержание белков ! снижено количество общих липидов и холестерина. Танафлон нормдда-,ует соотношение лизофосфатидилхолина и фосфатидилхолина ЛЩШ,

7, Иммобилизация облученных животных приводит к развитей гвд(ь олестеринемии. В крови циркулирует уменьшенное количество ЛЛЭП* тносительно обогащенных шосшолшидами с измененным фракционным оставом и сниженным содержанием аполипопротеинов. Препараты Э'1Л, анафлон, мегадоксил и пробукол обеспечивают дальнейшее повышение одернания фосфолипидов в ЛПВП и изменение их фракционного состава,

8,- Лри воспроизведении интоксикации тетрахлорметаном у предва-ятельно облученных в дозе 1,0 Гр крыс найдено более выраженное 1рушение химического состава ЛПВЛ на протяжении первых 4-х сууо$| 6-м суткам наблюдения дополнительные эффекты, индуцированное вде=-жнем т^трахлормзтана, исчезали. Препараты ЗфЛ, танафлон и пробу=->л не оказывают существенного влияния на уровень холестеринемии бзлково-липидный состав ЛПВП, но усугубляют действие тетрахлорме*-■на на фосфолипидный спектр ЛПВП.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

В рамках концепции о радиационно-индуцировакных дислипопротеи-миях, лежащих в основе ускоренного развития атеросклероза, покойна важная роль изменений химического состава ЛПВЛ и эксперимедтзль-обоснована следующие рекомендации.

1. Для контроля развития и коррекции радиационно-индуцированных злипопротеинемий следует определять нз только содержание альфа-иестэрина, но также содержание фосфолипидов ЛПВП и их фракционный ;тав.

2. Для коррекции нарушений химического состава ЛПВП при разгтгии

радиационно-индуцированных дислипопротеинемий рекомендуется применение эссенциальных фос^олипидов, а также гепатопротекторных препаратов.

J. Яри обосновании рациональных схем коррекции радиационно-индуцированных дислипопротеинемий следует учитывать отсутствие линейной зависимости между фармакодинамикой препаратов и дозой облучения.

Ц, При сочетанном действии гамма-облучения и других повреждающих ^акторов следует окидать снижения эффективности гепатопротектор-ных и гиполипидемических препаратов,•а также изменения их ^армако-динамики.

СПИСОК РАБОТ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Еараыев А.Л.,. Сараев tí.Б., Мардашева Л.Г., Болдинз A.B. Стрессовы' явления при моделировании гипокинезии крас различными способами / Актуальные вопросы теоретической и клинической медицины. Сб.научн ст.студентов. - Рига, 1963. - С.20-21,

2. Сараев В.В., Барышев А.П. Динамическая и статистическая выносливость крыс в условиях длительной гипокинезии // Теоретические

и практические вопросы в медицине. Сб.научн.ст.студентов. - Тарту, - о9 с. J. Кузнецов В.И., Сараев ¡G.B. Возрастные изменения массы сердца и тела крыс в условиях гипокинезии //Механизмы адаптации и компенсации, методы их тренировки, контроля и стимуляции. Тез. докл. Респ.объединенной научн.конф. патофизиологов, врачей спорт.медицины и Л^К. - Минск, I9Ö5. -k. Кузнецов В.И., Сараев и.Б. 'Статическая выносливость кивотны . с изменяющейся массой в процессе хронического опыта // Деи. в ВИШИ 14.07.85, te 4Ь2-АЬ5.

5. Кузнецов В.Й., Сараев В.В., Чиркин A.A. Активация гликолиза, снижение гликогенного резерва и отсутствие глюкокортикоидного контроля ферментов углеводного обмена в печени крыс при длительном гипокинетическом стрессе // цат.ушзиол. и экспер.тер. - I9Ö9. -

i k. - С.56-5*.

6. Коноваловы Н.Ю., Осочук С.С., Сараев Ю.В. Состояние липидтранспо] ной системы при репаративной и патологически измененной печени Физиологические и биохимические аспекты патологических процессов Сб.научн.трудов. - Витебск: ЬШ, Ъ»ЭО. - C.77-OI.

7. Сараев Ю.В., Детинвин К.Г. яосфолипидный состав ИБП при ишемиче; кой болезни сердца // Деп. в ВЛШ1ТИ 21.06.90, té 4735-В^О.

. Сараев З.Б.» Детинкиа К.Г., Летраго И.И. «оофолипвдный состав ЛЛВП при. экспериментальном радиационном поранении // Деп. в ВИНИТИ 27.06.91, £ i580~B9l. . Сараев й»Б», Лнущевсвий" Д.С., Дегинкин К.Г. а др. Фармакологическая коррекция фосфодипидаого состава_ЛПВП при транзиторной радиационной дисляпопротеинемии // Радиобиологические последствия аварии на Чернобыльской АЭС. Тез. докл. Всесовз.конф. - Минск,1991. - С.124.

.Стзпаненхо Н.И., Чиркин А.А., Лекторов В.Я., Сараев Ю.В.и др. Опыт организации работы яипидного центра // Тез.докл. 4-го съезда специалистов по клинической лабораторной диагностике Республики Беларусь. - Гродно, 1992. -.С.23-26.

.Дзеянке пол1кенасычанага $осфагыдылхал1ну на паказчык1 л1п1дтран~ спартнай с1стэми сыварагв1 крыв1 апранзненнх пацукоу / Чнрк1н А.А., | Янушэуск1 Д.С., Боранау Г.Г., Канявалава Н.Ю., Сарвеу Й.У., Ка- > капля Л.*. // Весц! АН Беларусь - 1992. - i М. - С.50-55. .Карыг1рувчае дзеянна метадаксГлу пры экспериментальной радаяцый-най дысл1папратэ1нэы11 / Кааарля Я.#., Чырк1а А.А., Канявалава Н.Ю., Воранау Г.Г., Януазуск! Д.С., Сараеу В.7., Бэларусау О.Б. // ВэсцГАН Беларус1. - 1992. - ГМ. - С.55-59. Чиркин А.А.» Азаренок К.К., Гребенников Й.Н., Сараев Ю.В. и др. ' Действие гамма-облучения и его сочетания с гопатотокснческшш и стрессовыми ^акторама на состояние лкпидтрансяортной системы // Ускоренное старение, связь с возрастной патологией. Тез.докл. сесовз.конр. - Киев, 19*2. - СЛЪ7.

Radiation-induced dislipoproteinenia and S.P.I. / Chlrkin A.A., Danchenko Б.0,, Grebsnnikov Yanushersky D.S., JConevalo-

va IT.Yu., Kulikov V.A., Orlova L.G., Oaochuk S.S., Saraev Yu.V., Shirkina I.A., Voronov G.G. // Lipostabil investigators meeting, Ib3tract3. - Kosqow, 1992. - P. 13.