Полиморфные маркеры ряда генов системы гемостаза и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших острый коронарный синдром

Пушков, Александр Алексеевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Полиморфные маркеры ряда генов системы гемостаза и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших острый коронарный синдром
ВАК РФ 03.01.03, Молекулярная биология

Автореферат диссертации по теме "Полиморфные маркеры ряда генов системы гемостаза и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших острый коронарный синдром"

005004072

ПУШКОВ АЛЕКСАНДР АЛЕКСЕЕВИЧ

ПОЛИМОРФНЫЕ МАРКЕРЫ РЯДА ГЕНОВ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА И ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К НЕБЛАГОПРИЯТНОМУ ТЕЧЕНИЮ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА У БОЛЬНЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОСТРЫЙ КОРОНАРНЫЙ СИНДРОМ.

03.01.03 - молекулярная биология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва-2011 - 1 ДЕК 2011

005004072

Работа выполнена в лаборатории молекулярной диагностики и геномной дактилоскопии ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов» (ФГУП «ГосНИИ генетика»).

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор ФГУП «ГосНИИ генетика», г. Москва

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук, профессор Институт молекулярной генетики РАН, г. Москва Доктор медицинских наук, ФГУ НИИ физико-химической медицины ФМБА, г. Москва

Ведущая организация Институт молекулярной биологии

им. В.А. Энгельгардга РАН, г.Москва

Защита состоится «2а декабря 2011 г. в 14 часов на заседании Диссертационного совета Д.217.013.01 при ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов» по адресу: 117545, Москва, 1-й Дорожный проезд, д. 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУП «ГосНИИ генетика». Реферат разослан «/¿>» ноября 2011 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета, кандидат химических наук

Носиков Валерий Вячеславович

Сломинский Петр Андреевич

Явелов Игорь Семенович

"".....

Т. Л. Воюшина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы.

Ишемическая болезнь сердца (ИБС) — полигенное, многофакгорное заболевание, являющееся наиболее частой причиной смерти среди мужчин старше 45 лет и женщин старше 65 лет во многих странах Европы, в том числе и в России. Больной, перенесший обострение ИБС, попадает в группу высокого риска повторения эпизода обострения. Предотвращение этих заболеваний представляет одну из основных задач, как практической медицины, так и медицинской науки (Оганов и соавт., 2008).

Известно, что сердечно-сосудистые патологии - многофакторные заболевания с многочисленными звеньями патогенеза. Для таких заболеваний характерен сложный механизм формирования фенотипа, в основе которого лежит взаимодействие генетических факторов с факторами внешней среды. При этом для каждого конкретного заболевания можно выделить группу, так называемых, генов-кандидатов, продукты которых могут бьггь прямо или косвенно вовлечены в развитие данной патологии (Goldbourt et al., 1994).

Генетическую предрасположенность к тому или иному заболеванию чаще всего изучают по принципу "случай-контроль". Однако для многих исследований этого типа достаточно сложно бывает подобрать правильную контрольную группу, поскольку, во-первых, невозможно бывает выявить доклинические формы проявления заболевания, а во-вторых, учитывать всех умерших к моменту начала обследования. Этих недостатков лишены так называемые проспективные исследования, в которых осуществляется длительное наблюдение за большими группами лиц, входящих в группу риска, с регистрацией «конечных точек» исхода заболевания.

Поскольку нарушения функции системы гемостаза, приводящие к тромбообразованию, являются важным звеном в формировании патогенеза ишемической болезни сердца (Сидоренко и соавт., 2008), гены, кодирующие белковые компоненты этой системы, можно рассматривать как гены-кандидаты, ассоциированные с обострением ИБС, и эти гены совершенно необходимо включать в проспективные исследования.

Установление ассоциации гена с заболеванием и последующая оценка индивидуального генетического риска имеют важное значение для разработки дифференцированного подхода к профилактике и лечению данной патологии и ее осложнений в зависимости от наследственной предрасположенности конкретного пациента. Подобные исследования позволяют точнее и надежнее оценивать генетический риск развития заболевания и прогнозировать его течение (Gibbons et al., 2004).

Цель и задачи работы. Целью данной работы было изучение ассоциации полиморфных маркеров генов-кандидатов, продукты которых являются белковыми

компонентами системы гемостаза, с неблагоприятным исходом у больных, перенесших острый коронарный синдром. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить аллели и генотипы полиморфных маркеров генов, кодирующих факторы свертывания крови V (Р5) и VII (Р7), белок С (РЛОС), тромбомодулин (ТНВй) и ингибитор активатора плазминогена типа 1 (Р£ЛЛ№).

2. Провести сравнительный анализ времени дожития до конечных точек у больных, перенесших острый коронарный синдром, - носителей различных генотипов полиморфных маркеров выбранных генов-кандидатов для выявления вклада генетических факторов в развитие неблагоприятных исходов.

Научная новизна работы.

• В данной работе впервые исследована ассоциация полиморфных маркеров Агг506С1п и С5393А гена А^ЗЗЗЫп гена /7, С(-2676)Т гена РКОС, А1а455Уа1 гена ТНВВ и 40(-675)50 гена Р1АШ1 с развитием острого коронарного синдрома

• Обнаружена ассоциация полиморфного маркера С5393А гена FS с повышенным риском развития неблагоприятного исхода в группе женщин, перенесших острый коронарный синдром. Установлено, что носительство генотипов вА и АА полиморфного маркера й5393А гена Р5 независимо связано с наступлением таких неблагоприятных исходов как нефатальный и фатальный инфаркт миокарда (ИМ), а также нефатальный и фатальный инсульт.

• Обнаружена сочетанная ассоциация комбинации генотипов полиморфного маркера А^353ап гена /7 и А1а455Уа1 гена ТНВй с повышенным риском развития неблагоприятного исхода в группе женщин, перенесших острый коронарный синдром.

Практическая ценность работы. Выявление ассоциации полиморфных маркеров генов с развитием острого коронарного синдрома (ОКС) открывает новые перспективы в выделении групп пациентов с высоким риском развития патологии. Полученные данные об ассоциации полиморфных маркеров С5393А гена Б5, А^35301п гена и А1а455Уа1 гена ТШЮ с повышенным риском развития неблагоприятного исхода в группе женщин, перенесших эпизод обострения ИБС, позволяют внедрить генетическое тестирование больных ИБС для выделения лиц, имеющих максимальную предрасположенность к развитию неблагоприятных исходов, и указывают на возможное направление разработки новых лекарственных средств.

Апробация работы. Диссертационная работа была апробирована на заседании Секции молекулярной биологии Ученого Совета ФГУП «ГосНИИ генетика» 26 октября 2011 г. Материалы работы были представлены на Х-ой ежегодной

международной молодежной конференции ИБХФ РАН - ВУЗЫ «Биохимическая физика» (г. Москва, Россия, 8-10 ноября 2010 г); 79-ом съезде Европейского Атеросклеротического общества (г. Гетеборг, Швеция, 26-29 июня 2011); И-ой международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых (г. Донецк, Украина, 19-22 сентября 2011 г).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ, включая 3 статьи, а также материалы конференций.

Структура диссертации. Диссертация состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, описание использованных материалов и методов, результаты и их обсуждение, выводы и список литературы. Материалы диссертации изложены н^Ьтраницах машинописного текста и содержат £ таблиц [^"рисунков. В работе процитированы/<5$зарубежный »¿^отечественных литературных источника.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1.1. Формирование групп больных. Характеристика и критерии включения.

В исследовании приняло участие 16 медицинских центров из семи городов России (Москва, Казань, Пермь, Челябинск, Ставрополь, Ростов-на-Дону, Санкт-Петербург), исследование проводилось с декабря 2004 г. по август 2010 г. В исследование включены больные (всего 1145 человек), поступившие в стационар в связи с развитием ОКС (Табл. 1). Больные, у которых в результате ОКС не сформировался инфаркт миокарда с зубцом С2, должны были поступить в стационар не позднее 72 ч от момента начала заболевания и иметь хотя бы один из следующих дополнительных критериев:

• депрессия сегмента БТ крайней мере на 1 мм в двух соседних отведениях;

• инверсия зубца Т не менее 3 мм;

• транзиторный подъем сегмента ЭТ;

• повышение уровня кардиоспецифических ферментов в крови (сердечная фосфокиназакреатинина, тропонины).

Идентификацию аллелей полиморфных маркеров проводили с помощью гибридизационно-флуоресцентного анализа (TaqMan® анализ)

Таблица 1.

Характеристика группы больных, перенесших острый коронарный синдром.

Показатель Группа больных

Пол (М/Ж) 717/428

Конечные точки 452

Возраст, лет* 61,36 ± 11,70

Курящие 467

Нестабильная стенокардия/инфаркт миокарда без зубца 0 663

Инфаркт миокарда с зубцом 0 550

Рецидив инфаркта во время госпитализации 21

Эпизоды тяжелой ишемии во время госпитализации 158

Новые ишемические изменения на электрокардиограме во время госпитализации 46

* Средний возраст ± стандартное отклонение.

1.2. Исследование ассоциации полиморфных маркеров ряда генов-кандидатов с острым коронарным синдромом (ОКС).

1.2.1. Исследование ассоциации полиморфного маркера Arg506Gln гена FS с ОКС.

Фактор свертывания крови V является независимым от витамина К гликопротеином и играет ключевую роль в коагуляционном каскаде. Активация фактора V происходит за счет его специфичного расщепления тромбином с образованием фактора Va (Mann and Kalafatis, 2003), активность которого ингибируется в свою очередь за счет ограниченного протеолиза тяжелой цепи фактора Va активированным белком С, выполняющем роль антикоагулянта (Dahlbäck and Villoutreix, 2005). Протеолиз фактора Va начинается с расщепления по остатку Arg в положении 506, затем по остаткам Arg в положениях 306 и 679. Инактивация наступает после расщепления по остатку Arg в положении 306 (на этой стадии утрачивается до 90% активности), при этом белок S, выступающий в роли кофактора активированного белка С, значительно ускоряет скорость данной реакции (Norstram et al., 2003). Таким образом, какие либо изменения в области этих участков расщепления, происходящие в том числе и на генетическом уровне, могут играть ключевую роль в регуляции процессов гемостаза.

Ген фактора V расположен на хромосоме lq23. В настоящее время в гене фактора V обнаружен целый ряд функционально значимых полиморфных маркеров.

Как было показано в ряде работ, причиной устойчивости к действию активированного белка С может бьггь однонуклеотидный полиморфизм G/A в положении 1691 в гене F5 (Bertina et al., 1994). Данному полиморфному маркеру, получившему название "Лейденовская мутация", соответствует аминокислотная замена Arg—>Gln в положении 506 полипептидной цепи. Частота данной мутации составляет от 1 до 7% в европейской популяции. Около 95% пациентов с устойчивостью к действию активированного белка С - это носители "Лейденовской мутации" (Tsongalis and Rezuke, 1997), однако, согласно недавно проведенным исследованиям, в европейкой популяции имеется достаточно большой процент людей, устойчивых к действию активированного белка С, у которых данная мутация не выявлена (Tosetto et al., 2004).

Накоплено большое количество данных по ассоциации "Лейденовской мутации" с венозными тромбозами (Tans et al., 2003). Однако работ, посвященных ассоциации данного полиморфного маркера с развитием артериальных тромбозов и других сердечно-сосудистых патологий, имеется значительно меньшее количество, а их результаты носят противоречивый характер (Ridker et al., 1995; Mannucci et al., 2010).

Кроме того, большинство работ до настоящего времени проводилось с использованием подхода «случай-контроль», который имеет определенные ограничения при формировании контрольных групп пациентов. Таким образом, основываясь на имеющихся результатах, можно сделать вывод о необходимости проведения длительного проспективного исследования для выяснения индивидуальной роли данного полиморфного маркера в патогенезе сердечнососудистых заболеваний.

Нами были определены частоты генотипов полиморфного маркера Arg506Gln гена F5 у всех пациентов (Табл. 2).

Таблица 2.

Частоты генотипов полиморфного маркера Arg506Gln гена F5 у больных, перенесших

ОКС.

Генотип Число пациентов Частота, %

Arg/Arg 1069 93,4

Arg/Gin 76 6,6

Gln/Gln 0 0

Всего 1145 100

Частоты аллелей в изучаемой нами группе больных были близки к частотам, наблюдаемым у европейцев. Среди исследуемых пациентов нами не было обнаружено ни одного носителя «Лейденовской мутации» в гомозиготной форме. Проведенный

нами анализ выживаемости пациентов показал, что риск развития неблагоприятного исхода после перенесенного острого коронарного синдрома не зависит от генотипов полиморфного маркера Arg506Gln гена F5. Эти результаты можно объяснить малым числом пациентов, носителей аллеля Gin, и отсутствием пациентов с генотипом Gln/Gln. Можно предположить, что носители данного генотипа не попали в нашу выборку по причине наступления неблагоприятного исхода еще до начала исследования. У тех же носителей «Лейденовской» мутации, которые были включены в наше исследование, развитие неблагоприятных исходов связано с другими патофизиологическими механизмами.

1.2.2. Исследование ассоциации полиморфного маркера G5393A гена FS с ОКС.

Полиморфный маркер G5393A (rs7542281) расположен в интроне 3 гена F5. Ранее была показана ассоциация данного полиморфного маркера с неблагоприятным течением ИБС на популяции финнов (Auro et al., 2007).

Частоты генотипов полиморфного маркера G5393A гена F5 были определены нами у всех пациентов (Табл. 3). Ассоциации с развитием неблагоприятных исходов у больных, перенесших ОКС, обнаружено не было.

Таблица 3.

Частота генотипов полиморфного маркера G5393A гена F5 у больных, перенесших

ОКС.

Генотип Число пациентов Частота, %

GG 576 50,4

GA 480 41,9

АА 89 7,8

Всего 1145 100

При проведении проспективных исследований с использованием «конечных точек» необходимо учитывать влияние полового диморфизма на патогенез развития заболевания (8Иапс1ег е1 а1., 2008). Так, в проведенном нами ранее проспективном исследовании, была выявлена ассоциация полиморфного маркера С(-1654)Т гена РИОС с неблагоприятными исходами в группе больных, перенесших острый коронарный синдром, при этом более сильная ассоциация наблюдалась в группе мужчин (Агапкина и соавт., 2010).

Принимая во внимание данные результаты, дальнейшее исследование ассоциации полиморфного маркера й5393А гена Р5 с риском развития ПИ проводили с разделением пациентов на группы по половому признаку.

р-0,045

Генотяп

-n GA+AA

v^-í GG

п 24 36 48 50 62 Время наблюдения, ммиаы

Рис. 1. График Каплана-Майера. Доля неблагоприятных исходов у женщин носителей генотипов йй и йА+АА полиморфного маркера й5393А гена /""5 в зависимости от времени, прошедшего после ОКС.

Анализ времени дожития до конечной точки у носителей различных генотипов полиморфного маркера G5393A гена F5 показал, что в группе женщин носителей генотипов GA и АА за период наблюдения чаще наблюдался неблагоприятный исход (фатальный и нефатапьный ИМ, фатальный и нефатальный инсульт), чем в группе гомозиготных носителей аллеля G. Время дожития до конечной точки составило 42,7 месяцев (95% CI 38,0-47,5) против 49,5 месяцев (95% CI 45,1-53,9) (х2 = 4.15р = 0.045) (Рис. 1). В группе мужчин данной ассоциации обнаружено не было, у носителей разных генотипов частоты развития неблагоприятных исходов не отличались.

Таким образом, полученные нами данные об ассоциации полиморфного маркера G5393A гена F5 с риском развития НИ в группе женщин, перенесших ОКС, согласуются с данными европейских исследований и подтверждают важную роль полового диморфизма в патогенезе развития ИБС, а также свидетельствуют в пользу необходимости внедрения генетического тестирования больных ИБС для выявления лиц, имеющих максимальную предрасположенность к развитию неблагоприятных исходов.

1.2.3. Исследование ассоциации полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 с ОКС.

Фактор VII (проконвертин) представляет собой гликопротеин, зависимый от витамина К. Активная форма фактора VII - это сериновая протеаза, первый фермент в каскаде свёртывания крови по «внутреннему пути» (Долгов и Свирин, 2005). Активация данного пути играет ключевую роль в процессе гемостаза, в связи с чем,

повышенная концентрация фактора VII может способствовать развитию тромботических событий (Зубаиров и соавт., 2000), при этом на концентрацию фактора VII в крови влияют как генетические факторы, так и приобретённые состояния.

Ген F7, кодирующий фактор свертывания VII, расположен на хромосоме 13q34. Проведены обширные исследования по выяснению роли гена F7 в патогенезе ИБС. Обнаружена ассоциация нескольких полиморфных маркеров гена F7 с уровнем фактора VII в плазме крови. Из них наиболее изучен полиморфный маркер G/A в положении 10976 (rs6046), которому соответствует аминокислотный полиморфизм Arg/Gin в положении 353 полипептидной цепи. Этот полиморфный маркер расположен в области, кодирующей каталитический домен фактора VII, и, по некоторым данным, у носителей аллеля Girt ниже риск развития неблагоприятного течения ИБС. Тем не менее, проведенные на различных популяциях исследования возможной ассоциации данного полиморфного маркера с сердечно-сосудистыми заболеваниями носят противоречивый характер. Так, Джирелли с соавт. (2000) было обнаружено, что аллель Gin ассоциирован с уменьшением риска развития ИМ. В китайской популяции при сравнении группы больных ИБС с контрольной группой ассоциация данного полиморфного маркера с ИБС не была обнаружена, в том числе и при разбиении групп по половому признаку. Частота аллеля Gin была выше в группе больных ИБС по сравнению с группой больных с ИБС и ИМ (Xu et al., 2003). Однако, при исследовании небольшой выборки пожилых пациентов с ИБС и контрольной здоровой группы было показано, что уровень фактора VII в плазме крови достоверно различался между двумя группами. При этом он был значительно ниже у носителей аллеля Gin (Lu et al., 2005). Среди 139 семей с ИБС в анамнезе, проживающих на территории Индии, пониженный уровень фактора VII в плазме крови положительно коррелировал с носительством аллеля Gin (Shanker et al., 2009) Такие же данные были получены среди новорожденных детей в нескольких популяциях, проживающих в Сингапуре (Quek et al., 2006).

Частоты генотипов полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 были определены нами у всех пациентов (Табл. 4). Ассоциации с развитием неблагоприятных исходов у больных, перенесших ОКС, обнаружено не было. Принимая во внимание Половой диморфизм подверженности ИБС, дальнейшее исследование проводили с разделением пациентов на группы по половому признаку. При этом в группе женщин нами была выявлена тенденция к увеличению числа неблагоприятных исходов у носителей генотипа Arg/Arg полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 (р = 0,215) (Рис. 2). В группе мужчин подобной тенденции не наблюдалось, у носителей разных генотипов частоты развития неблагоприятных исходов не отличались. Эти данные подтверждают полученные ранее результаты об ассоциации аллеля Gin полиморфного маркера Arg3S3Gln гена F7 с пониженным риском развития неблагоприятного течения ИБС (Girelli et al., 2000; Lane et al., 1996).

Возможно, у носителей аллеля Gin понижен уровень удельной активности фактора VII в плазме крови, а также имеет место некоторое снижение его секреции, что было обнаружено в ряде исследований (Ghaddar et al., ¡998; Kathiresan et al., 2006).

Таблица 4.

Частота генотипов полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 у больных, перенесших

ОКС.

Генотип Число пациентов Частота, %

Arg/Arg 887 77,5

Arg/Gin 238 20,8

Gln/Gln 19 1,7

Всего 1145 100

ч® h §

ч р = 0,215

^Vhh,

Генотипы

_п Arg/Arg

..г Alg/Gta + CIll/Clll

и 24 36 48 50 Время наблюдения, мссяцы

Рис. 2. График Каплана-Майера. Доля неблагоприятных исходов у женщин носителей генотипов Arg/Arg и Arg/Gln+Gln/Gln полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 в зависимости от времени, прошедшего после ОКС.

1,2.4. Исследование ассоциации полиморфного маркера А1а455Уа1 гена THBD с ОКС.

Тромбомодулин - интегральный гликопротеин мембран клеток, участвующий в связывании тромбина. Тромбомодулин является ключевым звеном серии реакций, регулирующих направление и скорость процессов гемостаза (Dittman and Majerus, 1990).

Ген тромбомодулина расположен на хромосоме 20р 11.2. Обнаружена ассоциация нескольких полиморфных маркеров гена THBD с развитием сердечнососудистых заболеваний. Одним из них является полиморфный маркер С/Т в положении 1578 (rsl042579), которому соответствует аминокислотный полиморфизм Ala/Va! в положении 455 полипептидной цепи. Данные об ассоциации этого полиморфного маркера с развитием ИБС, имеющиеся в настоящее время, неоднозначны (Wu et al., 2001; Сидоренко и соавт., 2006). Ряд исследований, проведенных по типу случай-контроль, выявили ассоциацию аллеля Val с ИМ, в том числе и его манифестацией в раннем возрасте, при этом генетическая составляющая вносила наибольший вклад в случае пациентов-курильщиков, а также в группе афроамериканцев (Konstantoulas et al., 2004).

Однако функциональное значение данного полиморфизма остается не до конца ясным, поскольку он не влияет на уровень тромбомодулина в плазме крови, что было показано в исследованиях в условиях in vivo (Nakabayashi et al., 1999). Возможно, наличие остатков аланина или валина в положении 455 полипептидной цепи молекулы тромбомодулина, в домене EGF-6, непосредственно связывающем тромбин, приводит к различиям в пространственной ориентации последнего на поверхности эндотелия, что в свою очередь изменяет скорость активации белка С (Aleksic et al., 2003; Yanget al., 2003).

Нами были определены частоты генотипов полиморфного маркера Ala455Val гена THBD у всех пациентов (Табл. 5).

Таблица 5.

Частоты генотипов полиморфного маркера Ala455Val гена THBD у больных, перенесших ОКС.

Генотип Число пациентов Частота, %

Ala/Ala 740 64,6

Ala/Val 365 31,9

Val/Val 40 3,5

Всего 1145 100

Проведенный анализ выживаемости пациентов показал, что риск развития неблагоприятного исхода после перенесенного острого коронарного синдрома не зависит от генотипов полиморфного маркера Ala455Val гена THBD. Кривые выживаемости больных с различными генотипами полиморфного маркера Ala455Val гена THBD существенно не различались (Рис. 3). При разделении пациентов на группы по половому признаку, в группе женщин наблюдалась слабая тенденция к увеличению числа НИ у носителей аллеля Val.

Полученные нами данные об отсутствии статистически значимой ассоциации генотипов полиморфного маркера А1а455Уа1 гена ТНВО с риском развития НИ согласуются с данными, полученными в ряде европейских проспективных исследований (Аиго е! а!., 2007). Исходя из этого, можно сделать вывод о том, что полиморфный маркер А1а455Уа1 гена ТНВй не имеет индивидуального прогностического значения в оценке риска развития неблагоприятных исходов у больных, перенесших обострение ИБС. Для проведения дальнейших исследований наиболее целесообразен комплексный подход с использованием комбинации генотипов других полиморфных маркеров гена ТНВР.

р = 0,783

Генотипы

_п А1а/А1а

А1а/Уа1

Уа1ЛЫ

Время наблюдения, месяцы

Рис.3. График Каплана-Майера. Доля неблагоприятных исходов у носителей различных генотипов полиморфного маркера А1а455Уа1 гена ТНВй в зависимости от времени, прошедшего после ОКС.

1.2.5. Исследование сочетанной ассоциации полиморфного маркера А1а455Уа1 гена ТНВГ) и полиморфного маркера Аг«353С1н гена F7 с ОКС.

Важную прогностическую роль в проспективных исследованиях с использованием «конечных точек» может играть изучение совместного влияния комбинации генотипов нескольких полиморфных маркеров. Данный подход широко применяется как в современных зарубежных исследованиях (Аиго е1 а!., 2007), так и в России. Наши последние данные, полученные в результате длительного проспективного исследования на группе больных, перенесших обострение ИБС, выявили значительную сочетанную ассоциацию комбинаций генотипов полиморфных

маркеров генов, продукты которых участвуют в регуляции воспаления, с развитием НИ (Благодатских и соавт., 2011).

Основываясь на этих данных, в проведенном нами многоцентровом проспективном исследовании был применен комплексный подход с использованием комбинаций генотипов исследуемых полиморфных маркеров. Поскольку тенденция к изменению числа НИ в зависимости от генотипов как полиморфного маркера Arg353Gln гена F7, так и полиморфного маркера Ala4SSVal гена THBD наблюдалась нами только в группе женщин, дальнейшее исследование проводили, учитывая эти результаты. Исследовалось две группы женщин. В первую были включены носители генотипов Ala/Val и Val/Val полиморфного маркера AIa455Val гена THBD и генотипа Arg/Arg полиморфного маркера Arg353Gln гена F7, во вторую группу носители генотипа Ala/Ala полиморфного маркера Ala455Val гена THBD и генотипов Arg/Gin и Gln/Gln полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 (Табл. 6).

Таблица 6.

Характеристика групп больных, перенесших острый коронарный синдром, при исследовании совместного влияния полиморфных маркеров генов THBD и F7

(Х^ = 4,15,/7 = 0,042).

Генотипы полиморфных Время

Название маркеров Число дожития,

группы Ala455Val гена Arg353Gln гена пациентов месяцы

THBD F7 (95% CI)

Г1 Ala/Val Val/Val Arg/Arg 95 40.5 (33,5-47,6)

Г2 Ala/Ala Arg/Gin Gln/Gln 50 51.6(45.0-58.1)

В первой группе чаще наблюдался неблагоприятный исход (нефатальный и фатальный инфаркт миокарда, нефатальный и фатальный инсульт) по сравнению со второй группой. Время дожития до конечной точки в первой группе составило 40.5 месяцев (95% CI 33,5-47,6) против 51.6 месяцев (95% CI 45.0-58.1) во второй группе (X2 = 4.15 р = 0.042) (Рис.4).

Полученные нами результаты в группе женщин, перенесших обострение ИБС, подтверждают целесообразность использования такого подхода. Меньшее время дожития до конечной точки и увеличение числа неблагоприятных исходов у пациентов первой группы, возможно, связаны как с более высоким уровнем активности фактора VII у носителей генотипа Arg/Arg гена F7, так и с влиянием аллеля Val гена THBD на скорость активации белка С. Носительство аллеля Gin гена F7 и генотипа Ala/Ala гена THBD приводят, в свою очередь, к статистически достоверному уменьшению числа НИ во второй группе.

р = 0,042

Группы

_ПГ1

Г2

о -

0 12 24 38 48 50 62 Время наблюдения, месяцы

Рис. 4. График Каплана-Майера. Доля неблагоприятных исходов у женщин носителей различных генотипов полиморфных маркеров Ala455 Val гена THBD и Arg353Gln гена F7, в зависимости от времени, прошедшего после ОКС.

1.2.6. Исследование ассоциации полиморфного маркера С(-2676)Т гена PROC с ОКС.

Белок С является предшественником сериновой протеиназы. Активированный белок С выполняет функции антикоагулянта. Он инактивирует факторы свертывания Va и Villa путем их ограниченного протеолиза и таким образом подавляет образование тромбов и воспалительные реакции. Важная роль белка С в регуляции гемостаза подтверждается множеством клинических наблюдений, свидетельствующих о том, что его наследственный дефицит ведет к развитию тромбозов различной степени тяжести уже в молодом возрасте (Folsom et al., 2002).

Также показано, что белок С вызывает увеличение концентрации тканевого активатора плазминогена, за счет нейтрализации его ингибитора. Таким образом, под действием белка С происходит сдвиг равновесия между тканевым активатором плазминогена и ингибитором активатора плазминогена типа 1 в сторону активатора, что приводит к увеличению фибринолитической активности крови (Сидоркина, 2001). Кроме того, активированный белок С участвует в регуляции воспалительного процесса, ингибируя продукцию цитокинов макрофагами, а так же оказывает цитопротективный эффект (Моэтег е1 а1, 2007). Эти данные подтверждают исключительно важную роль белка С в регуляции гемостаза.

В промоторной области, кодирующего белок С гена РЯОС, расположенного на хромосоме 2qlЗ-ql4, обнаружено несколько полиморфных маркеров: С(-1654)Т, А(-1641)0, А(-1476)Т и С(-2б7б)Г. Данных об ассоциации этих полиморфных маркеров

гена PROC с развитием ИБС в литературе совсем немного. Впервые они были изучены Спеком и соавт. в 1995 году, при этом все исследования за последние 10 лет проводились по принципу «случай-контроль» на выборках сравнительно небольшого объема (Aiach et al., 1999; Mahmoodi et al., 2008). Минорный аллель С полиморфного маркера С(-2676)Т, как было показано в недавно проведенном крупном исследовании, был ассоциирован с пониженным уровнем белка С, однако при этом не влиял на неблагоприятное течение ИБС в группе исследуемых пациентов (Reiner et al., 2008).

Принимая во внимание полученные нами ранее результаты об ассоциации полиморфного маркера С(-1654)Т, расположенного в промоторной области гена PROC, с повышенным риском развития неблагоприятного исхода в группе больных, перенесших эпизод обострения ИБС (Агапкина и соавт., 2010), для изучения ассоциации гена PROC с развитием неблагоприятных исходов нами был выбран другой полиморфный маркер этого гена— С(-2676)Т.

Нами были определены частоты генотипов полиморфного маркера С(-2676)Т гена PROC у всех пациентов (Табл. 7).

Таблица 7.

Частоты генотипов полиморфного маркера С(-2676)Т гена PROC у больных, перенесших ОКС.

Генотип Число пациентов Частота, %

ТТ 430 37,6

ТС 517 45,1

сс 198 17,3

Всего 1145 100

Эти данные свидетельствуют о том, что полиморфный маркер С(-2676)Т гена PROC не ассоциирован с развитием неблагоприятного исхода у больных, перенесших ОКС.

'V ■Ч 1ц р- 0.639 и

Генотип -пТГ л ТС

.12

Время наблюдения, месяцы

Рис.5. График Каплана-Майера. Доля неблагоприятных исходов у носителей различных генотипов полиморфного маркера С(-2676) гена РЯОС в зависимости от времени, прошедшего после ОКС.

1.2.7. Исследование ассоциации полиморфного маркера 4С(-675)5С гена РЬАИШ с ОКС.

Ингибитор активатора плазминогена типа 1 (РАМ) является главным физиологическим ингибитором активатора плазминогена тканевого типа (1-РА). Биологическая система активатор плазминогена/плазмин является фибринолитической системой, основная функция которой - запуск защитных механизмов, предотвращающих образование тромба. Активность этой системы зависит от уровня специфичной протеазы, плазмина, который образуется из неактивного предшественника плазминогена под действием его активаторов. Активация плазминогена, в свою очередь, регулируется посредством присутствующих в плазме крови специфичных ингибиторов активатора плазминогена. Наиболее значимым из таких ингибиторов является ингибитор активатора плазминогена типа 1 (УашатоЮ й а1., 2005). РА1-1 секретируется в кровь эндотелием сосудов и является ингибитором ЬРА и урокиназы. Принято считать, что повышенная концентрация РА1-1 ассоциирована с неблагоприятным течением атеротромбоза (5оЬе1 & а!., 2003).

В гене РЬАЫН!, кодирующем РАМ, обнаружен полиморфный маркер 4й/5С в положении -675 (гз 1799762). Данный полиморфный маркер расположен в промоторной области гена в районе участка связывания белка — активатора транскрипции и, по некоторым данным, у носителей аллеля 40 повышен риск

развития сердечно-сосудистых заболеваний (Ьое\у е1 а!., 2006). К настоящему моменту проведены достаточно обширные исследования по выяснению роли гена РЬАЫШ в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний в различных популяциях. Однако, данные об ассоциации полиморфного маркера 4С(-675)50 гена РЬАЫШ с риском развития ИБС являются крайне противоречивыми (Затейщиков и соавт., 2002).

Частоты генотипов полиморфного маркера 4С(-675)50 гена РЬАЫН! были определены у всех пациентов (Табл. 8). Частоты аллелей в изучаемой нами группе больных были близки к частотам, наблюдаемым у европейцев (Яовзаак й а1., 2000).

Проведенный анализ выживаемости пациентов показал, что риск развития неблагоприятного исхода после перенесенного острого коронарного синдрома не зависит от генотипов полиморфного маркера 40(-675)5С гена РЬАМИ! (р = 0,604) (Рис. 6). При разделении нами исследуемой выборки на мужчин и женщин ассоциация с неблагоприятными исходами также не была обнаружена.

Таблица 8.

Частоты генотипов полиморфного маркера 4С(-675)50 гена Р1АК!1П у больных, перенесших обострение ИБС.

Генотип Число пациентов Частота, %

4G4G 378 33

4G5G 550 48

5G5G 217 19

Всего 1145 100

По данным, полученным разными исследователями, уровень PAI-1 примерно на 25% выше у носителей генотипа 4G/4G, по сравнению с носителями генотипа 5G/5G (Lane and Grant, 2000). В течение последних лет в большинстве исследований обнаружено наличие повышенного уровня PAI-1 в плазме крови у пациентов с ИБС, особенно улиц, перенесших ИМ (Sabino et al., 2011).

Отсутствие ассоциации генотипов полиморфного маркера 4G(-675)5G гена PLANH1 с развитием неблагоприятных исходов в группе больных ИБС, перенесших острый коронарный синдром, согласуется с данными, полученными в крупномасштабных исследованиях последних лет (Koch et al., 2010) и говорит об отсутствии индивидуальной прогностической значимости данного полиморфного маркера.

р - 0,604

Генотипы

-1-14G4G

J-4CSG 5С$С

-1-1-1-(-1-r~

0 12 24 36 48 50 62

Время на&дюяення, месяцы

Рис. 6. График Каплана-Майера. Доля неблагоприятных исходов у носителей различных генотипов полиморфного маркера 4G(-675)5G гена PLANHI в зависимости от времени, прошедшего после ОКС.

Работы, обнаружившие ассоциацию данного полиморфного маркера и риска развития ИМ, в основном проводились на небольших группах (Corsetti et al., 2008) и, возможно, полученные ими результаты связаны с недостаточной величиной выборки. Также, можно предположить, что аллель 4G является фактором риска развития ИМ только в молодом возрасте, в то время как средний возраст пациентов, исследуемых в нашей выборке, был старше 50 лет. Так, впервые ассоциация аллеля 4G гена PLANHI с более высоким риском инфаркта миокарда была выявлена на шведской популяции у молодых мужчин (35 - 45 лет) (Ericsson et al., 1995), и в то же время, на больших группах пожилых пациентов ассоциация не наблюдалась. Об этом свидетельствует также достоверно более низкое число гомозиготных носителей аллеля 4G среди выживших пациентов, которые перенесли ИМ в возрасте до 35 лет (Rallidis et al., 2010). Кроме того, в нескольких более ранних работах не были обнаружены не только ассоциация данного полиморфного маркера с ИМ, но и его корреляция с уровнем PAI-1 (Doggen et al., 1999).

Таким образом, можно сделать вывод, что данный полиморфный маркер не ассоциирован с выживаемостью больных, перенесших ОКС.

выводы.

1. Определены частоты аллелей и генотипов полиморфных маркеров Arg506Gln и G5393A гена F5, Arg353G!n гена F7, С(-2676) Т гена PROC, Ala455 Val гена THBD и 4G(-675)5G гена PLANH1 в группе больных, перенесших острый коронарный синдром.

2. Для полиморфных маркеров Arg506Gln гена F5, Arg353Gln гена F7, С(-2676)Т гена PROC, Ala455Val гена THBD и 4G(-675)5G гена PLANH1 показано отсутствие ассоциации с развитием неблагоприятных исходов после эпизода ОКС.

3. Обнаружена ассоциация полиморфного маркера G5393A гена F5 с повышенным риском развития неблагоприятного исхода (фатальный и нефатальный инфаркт миокарда, фатальный и нефатальный инсульт) в группе женщин, перенесших эпизод обострения ИБС.

4. При изучении комбинации генотипов полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 и Ala455Val гена THBD обнаружена их сочетанная ассоциация с повышенным риском развития неблагоприятного исхода (фатальный и нефатальный инфаркт миокарда, фатальный и нефатальный инсульт) в группе женщин, перенесших эпизод обострения ИБС.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Агапкина, Ю.В., Никитин, А.Г., Бровкин, А.Н., Пушков. A.A.. Евдокимова, М.А., Кудряшова, О. Ю., Осмоловская, B.C., Минушкина, JI.O., Кочкина, М.С., Селезнева, Н.Д., Данковцева, E.H., Чумакова, О.С., Бакланова, Т.Н., Талызин, П.А., Резниченко, Н.Е., Донецкая, О.П., Терещенко, С.Н., Красильникова, Е.С., Джаиани, H.A., Акатова, Е.В., Глезер, М.Г., Галявич, A.C., Закирова, В.Б., Казиолова, H.A., Тимофеева, И.В., Ягода, A.B., Боева, О.И., Кательницкая, Л.И., Хоролец, Е.В., Шлык, C.B., Волкова, Э.Г., Маргарян, М.П., Гузь, И.О., Константинов, В.О., Тимофеева, И.В., Сидоренко, Б.А., Затейщиков, ДА., Носиков, В.В. Полиморфные маркеры G(~455)A гена FGB и С(-1654)Т гена PROC и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших острый коронарный синдром. Молекулярная биология,-2010.-Т. 44, № 4.-С. 613-619

2. A.A. Пушков. К.А. Благодатских, А.Г. Никитин, Ю.В. Агапкина, А.Н. Бровкин, Д.А.Чудакова, MA. Евдокимова, О.Ю. Асейчева, B.C. Осмоловская, Л.О. Минушкина, Т.Н. Бакланова, П.А. Талызин, О.П. Донецкая, С.Н. Терещенко, H.A. Джаиани, Е.В. Акатова, М.Г. Глезер, A.C. Галявич, В.Б. Закирова, H.A. Козиолова, А.В.Ягода, О.И. Боева, Е.В. Хоролец, C.B. Шлык, Э.Г. Волкова, М.П. Маргарян, И.О. Гузь, В.О. Константинов, Б.А. Сидоренко, Д.А. Затейщиков, В.В. Носиков. Полиморфные маркеры Ala455Val гена THBD и Arg3S3Gln гена F7 и осложнения атеросклероза у больных, перенесших острый коронарный синдром. Генетика.-2й\ 1, Т. 47, № 10, С. 101-107

3. A.A. Пушков. О.В. Разуваева, К.А. Благодатских, A.M. Бурденный, А.Г. Никитин, АН. Бровкин, Д.АЧудакова, М.А. Евдокимова, О.Ю. Асейчева, B.C. Осмоловская, Л.О. Минушкина, Т.Н. Бакланова, П.А. Талызин, О.П. Донецкая, С.Н. Терещенко, H.A. Джаиани, Е.В. Акатова, М.Г. Глезер, A.C. Галявич, В.Б. Закирова, H.A. Козиолова, А.В.Ягода, О.И. Боева, Е.В. Хоролец, C.B. Шлык, Э.Г. Волкова, М.П. Маргарян, И.О. Гузь, В.О. Константинов, Б.А. Сидоренко, Д.А. Затейщиков, В.В. Носиков. Полиморфный маркер 4G(-675)5G гена PLANH1 не ассоциирован с осложнениями атеросклероза у больных, перенесших обострение ишемической болезни сердца. Медицинская генетика,-2011.-№.11.-С.-16-21.

4. A.A. Pushkoy. К. A. Blagodatskikh, A. G. Nikitin, D. A. Zateyshchikov, V. V. Nosikov. Polimorphic markers of THBD and PROC genes and genetic predisposition to unfavourable outcomes in patients after acute coronary syndrome. 79 EAS Congress. Atherosclerosis Supplements.-2011.-Vol.12, №1.-P. 134-135, Gothenburg, Sweden (26-29 июня 2011 г.).

5. A.A. Пушков, К. А. Благодатских, А. Г. Никитин, М. А. Евдокимова, В. С. Осмоловская, Д. А. Затейщиков, В. В. Носиков. Полиморфные маркеры

Ala455Val гена THBD и С(-267б)Т гена PROC и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших острый коронарный синдром. Материалы Х-ой ежегодной международной молодежной конференции ИБХФ РАН - ВУЗы «Биохимическая физика».-2011.-стр.203-204, г. Москва, Россия, (8-10 ноября 2010 г).

6. A.A. Пушков. А.Г. Никитин, В.В. Носиков, Д А. Затейщиков. Полиморфные маркеры Ala455Val гена THBD и Arg353Gln гена F7 и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших обострение ИБС. Материалы II международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых.-2011.-Стр. 232-233, г. Донецк, Украина, (19-22 сентября 2011 г).

Подписано в печать:

17.11.2011

Заказ № 6291 Тираж - 100 экз. Печать трафаретная. Типография «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36 (499) 788-78-56 www.autoreferat.ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Пушков, Александр Алексеевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Полиморфные маркеры.

1.1.1. Типы полиморфизмов и методы их исследования.

1.1.2. Использование полиморфных маркеров в исследовании генетики многофакторных заболеваний.

1.2. Ишемическая болезнь сердца и острый коронарный синдром.

1.2.1. Основные аспекты этиологии и патогенеза ишемической болезни сердца.

1.2.2. Генетические факторы риска развития ишемической болезни сердца.

1.2.3. Острый коронарный синдром.

1.3. Система гемостаза.

1.3.1. Система свертывания крови.

1.3.1.1. Факторы системы свертывания.

1.3.1.2. Коагуляционный каскад. v.

1.3.1.3. Факторы, противодействующие тромбоооразованию. Антикоагулянтная система крови.

1.3.2. Система фибринолиза.

1.3.2.1. Плазминоген.

1.3.2.2. Активаторы плазминогена.

1.3.2.3. Пути активации фибринолиза.

1.3.2.4. Ингибиторы фибринолиза.

1.3.3. Каскадно-матричная теория свертывания крови.

1.4. Характеристика исследованных в работе генов и полиморфных маркеров.

1.4.1. Фактор свертывания крови V. Ген F5. Полиморфные маркеры гена и их ассоциация с ИБС.

1.4.2. Фактор свертывания крови VII. Ген F7. Полиморфные маркеры гена и их ассоциация с ИБС.

1.4.3. Тромбомодулин. Ген THBD. Полиморфные маркеры гена и их ассоциация с ИБС.

1.4.4. Белок С. Ген PROC. Полиморфные маркеры гена и их ассоциация с ИБС.

1.4.5. Ингибитор активатора плазминогена типа 1. Ген PLANH1. Полиморфные маркеры гена и их ассоциация с ИБС.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Объект исследования. Критерии включения пациентов в исследование.

2.2. Реактивы и ферменты.

2.3. Выделение геномной ДНК.

2.4. Амплификация ДНК.

2.5. Статистическая обработка результатов.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Исследование ассоциации полиморфных маркеров с ОКС.

3.1.1. Исследование ассоциации полиморфного маркера Arg506Gln гена F5 с

3.1.2. Исследование ассоциации полиморфного маркера G5393A гена F5 с

3.1.3. Исследование ассоциации полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 с

3.1.4. Исследование ассоциации полиморфного маркера Ala455Val гена THBD с ОКС.

3.1.5. Исследование сочетанной ассоциации полиморфного маркера Ala455Val гена THBD и полиморфного маркера Arg353Gln гена F7 с ОКС.

3.1.6. Исследование ассоциации полиморфного маркера С(-2б7б)Т гена PROC с ОКС.

3.1.7. Исследование ассоциации полиморфного маркера 4G(-675)5G гена PLANH1 с ОКС.

4. ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Полиморфные маркеры ряда генов системы гемостаза и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших острый коронарный синдром"

Ишемическая болезнь сердца (ИБС) — полигенное, многофакторное заболевание, являющееся наиболее частой причиной смерти среди мужчин старше 45 лет и женщин старше 65 лет во многих странах Европы, в том числе и в России. В Российской Федерации за последние 20 лет в целом заболеваемость ИБС возросла на 24%, заболеваемость стенокардией - на 41%, острым инфарктом миокарда - почти на 16%. Больной, перенесший обострение ИБС, попадает в группу высокого риска повторения эпизода обострения. Предотвращение этих заболеваний представляет одну из основных задач, как практической медицины, так и медицинской науки (Оганов и соавт., 2008).

Известно, что данные сердечно-сосудистые патологии — многофакторные заболевания с многочисленными звеньями патогенеза. Для таких заболеваний характерен сложный механизм формирования фенотипа, в основе которого лежит взаимодействие генетических факторов с факторами внешней среды (СаШоп а1, 1995). При этом для каждого конкретного заболевания можно выделить группу, так называемых, генов-кандидатов, продукты которых могут быть прямо или косвенно вовлечены в развитие данной патологии.

Этих недостатков лишены так называемые проспективные исследования, в которых осуществляется длительное наблюдение за большими группами лиц, входящих в группу риска, с регистрацией «конечных точек» исхода заболевания.

Поскольку нарушения функции системы гемостаза, приводящие к тромбообразованию, являются важным звеном в формировании патогенеза 6 ишемической болезни сердца (Сидоренко и соавт., 2008; Арутюнов, 2004), гены, кодирующие белковые компоненты этой системы, можно рассматривать как гены-кандидаты, ассоциированные с обострением ИБС, и эти гены совершенно необходимо включать в проспективные исследования (Damani and Topol, 2007; Ye et al., 2006).

Установление ассоциации гена с заболеванием и последующая оценка индивидуального генетического риска имеют исключительно важное значение для разработки дифференцированного подхода к профилактике и лечению данной патологии и ее осложнений в зависимости от наследственной предрасположенности конкретного пациента Подобные исследования позволяют точнее и надежнее оценивать генетический риск развития заболевания и прогнозировать его течение (Оганов и соавт., 2008).

Целью данной работы было изучение ассоциации полиморфных маркеров генов-кандидатов, продукты которых являются белковыми компонентами системы гемостаза, с неблагоприятным исходом у больных, перенесших острый коронарный синдром. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить аллели и генотипы полиморфных маркеров генов, кодирующих факторы свертывания крови V (F5) и VII (F7), белок С (PROC), тромбомодулин (THBD) и ингибитор активатора плазминогена типа 1 (PLANH1).

2. Провести сравнительный анализ времени дожития до конечных точек у больных, перенесших острый коронарный синдром, - носителей различных генотипов полиморфных маркеров выбранных генов кандидатов для выявления вклада генетических факторов в развитие неблагоприятных исходов.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Пушков, Александр Алексеевич

4. ВЫВОДЫ.

1. Определены частоты аллелей и генотипов полиморфных маркеров Arg506Gln и G5393A гена F5, Arg353Gln гена F7, С(-2676)Т гена PROC, Ala455Val гена THBD и 4G(-675)5G гена PLANH1 в группе больных, перенесших острый коронарный синдром.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Пушков, Александр Алексеевич, Москва

1. Аасрум M., Придз X., Избирательное выключение генов тканевого фактора, фактора X и фактора VII у мышей: участие этих факторов в эмбриональном развитии // Биохимия. 2002. Т. 67, С. 30-39.

2. Алтухов Ю.П., Салменкова Е.А. Полиморфизм ДНК в популяционной генетике // Генетика. 2002. Т. 38. №(9). С. 1173-1195.

3. Арутюнов Г.П. Коронарный атеротромбоз. Новые данные для нового взгляда на вечную проблему // Сердце. 2004. № 4. С. 12-15.

4. Баринов В.Г., Кудряшова О.Ю., Цимбалова Т.Е., Затейщиков Д.А. Эндотелиальная регуляция гемостаза: система тромбомодулина // Клиническая лаборатория. 2001. №4, С.27-30.

5. Баркаган З.С. Гемостаз. Раздел в кн. : Руководство по гематологии // Под ред. Воробьева А.И., 3-е изд., перераб. И доп. М.: Ньюдиамед. 2005; т. 3, стр. 9-147.

6. Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза. М., Тверь: ООО «Издательство триада», 2005. 227 с.

7. Затейщиков Д.А., Зотова И.В., Данковцева E.H., Сидоренко Б.А. Тромбозы и антитромботическая терапия при аритмиях.-М., «Практика», 2011.-264 с.

8. Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свёртывания крови и тромбообразования. Казань. Фэн. 2000. 364 ст.

9. Иванов В.И., Геномика медицине под ред. В.И. Иванова и Л.Л. Киселева. 2005, М.: Академкнига. 392 с.

10. Карпов P.C., Дудко В.А., Атеросклероз: патогенез, клиника, функциональная диагностика, лечение. Томск, STT, 1998, 656 с.

11. Офозу Ф.А. Тромбоциты как модель регуляции свертывания крови на клеточных мембранах и ее значение // Биохимия. 2002. Т. 67. С. 56-65.

12. Панченко Е.П., Добровольский А.Б. Тромбозы в кардиологии. Механизмы развития и возможности терапии. М.: Издательство «Спорт и культура». 1999.464 с.1*4.

13. Патрушев JI.И. Генетические механизмы наследственных нарушений гемостаза // Биохимия 2002. № 67. С. 40-55.

14. Сидоренко Б.А., Затейщиков Д.А., Данковцева Е.Н. Полиморфизм генов факторов гемостаза у пациентов с ранним развитием ишемической болезни сердца // Кардиология. 2006. №2. С. 56-65.

15. Сидоренко Б.А., Затейщиков Д.А., Зотова И.В. Предикторы внутрисердечного тромбоза у больных с мерцательной аритмией: факторы гемостаза, маркеры воспалений и генетические факторы // Кардиология. 2008.-№ 2.-С.36-40.

16. Сидоркина А.Н., Сидоркин В.Г. Преснякова М.В. Биохимические основы гемостаза и дессиминированное внутрисосудистое свертывание крови. Н. Новгород: ННИИТО, 2001. 92 с.

17. Шевченко О.П., Мишнев О.Д. Ишемическая болезнь сердца. М.: Реафарм. 2005,416 с.

18. Adams Т.Е., Huntington J.A. Thrombin-cofactor interactions: structural insights into regulatory mechanisms // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2006. V. 26. № (8). P. 1738-45.

19. Aiach M., Nicaud V., Gelas M.A., et al. Complex Association of Protein С Gene Promoter Polymorphism With Circulating Protein С Levels and Thrombotic Risk // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1999. V.19. P. 15731576

20. Aleksic N., Folsom A.R., Cushman M., et al. Prospective study of the A455V polymorphism in the thrombomodulin gene, plasma thrombomodulin, and incidence venous thromboemolism: the LITE Study // J. Thromb. Haemost. 2003. V.l. № l.P. 88-94.

21. Alessi M.C., Bastelica D., Morange P., et al. Plasminogen activator inhibitor 1, transforming growth factor-betal, and BMI are closely associated in human adipose tissue during morbid obesity // Diabetes. 2000. V.49. P. 1374-80.

22. Alhenc-Gelas M., Gandrille S., Aubry M.L., Aiach M. Thirty-three novel mutations in the protein C gene. French INSERM network on molecular abnormalities responsible for protein C and protein S // Thromb Haemost. 2000. V.83. № (1). P. 86-92.

23. Andersen H.R., Nielsen T.T, Rasmussen K., et al. A comparison of coronary angioplasty with fibrinolytic therapy in acute myocardial infarction // N. Engl. J. Med. 2003. V. 349. P. 733-742.

24. Antman E.M., Anbe DT, Armstrong PW et al. ACC/AHA Guidelines for the management of patients with ST-elevation myocardial infarction. Circulation. 2004. V.l 10. № 9.-P. 282-292

25. Auro K., Alanne M., Kristiansson K., et al. Combined effects of thrombosis pathway gene variants predict cardiovascular events // PLoS Genet. 2007. V. 3 №. 7.

26. Bafunno V., Margaglione M. Genetic basis of thrombosis // Clin Chem Lab Med. 2010. V. 48 №1. P. 41-51.

27. Bajaj S.P., Rapaport S.I., Brown S.F. Isolation and characterization of human factor VII. Activation of factor VII by factor X // J. Biol. Chem. 1981. V. 256. P. 253-259.

28. Belmont J.W., Gibbs R.A. Genome-wide linkage disequilibrium and haplotype maps // Am J Pharmacogenomics. 2004. V. 4. P. 253-62.

29. Bertina R.M. Molecular risk factors for thrombosis // Thromb. Haemost. 1999. V. 82. P. 601-609.

30. Bertina R.M., Koeleman B.P.C., Koster T., Mutation in blood coagulation factor V associated with resistance to activated protein C // Nature 1994. 369. 64-67.

31. Brookes A J., The essence of SNP // Gene. 1999. V. 234. P. 177-186.

32. Camire R. and Bosj A. The molecular basis of factor V and VIII procofactor activation//Thromb Haemost. 2009. V. 7. № (12). P. 1951-1961.

33. Cesarman-Maus G., Hajjar K.A. Molecular mechanisms of fibrinolysis // Br J Haematol. 2005. V.129. № (3). P. 307-21.

34. Chan W.P., Lee C.K., Kwong. Y.L., et al. A novel mutation of Arg 306 of factor V gene in Hong Kong Chinese // Blood. 1998. V. 91. P. 1135-1139.

35. Charlesworth C., Sniegovski P., Stephan W., The evolutionary dynamics of repetitive DNA in eukaryotes // Nature. 1994. V.371. P. 215-220.

36. Corsetti J.P., Ryan D., Moss A.J., et al Plasminogen activator inhibitor-1 polymorphism (4G/5G) predicts recurrence in nonhyperlipidemicpostinfarction patients // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2008. V.28. № (3). P. 548-54.

37. Cortellaro M., Cofrancesco E., Boschetti C., Mussoni L. Increased fibrin turnover and high PAI-1 activity as predictors of ischemic events in atherosclerotic patients: a case-control study // Arterioscler. Thromb. 1993. V.13. P. 1412-7.

38. Cox N.J., Bell G.I. Disease associations, chance artifactors susceptibility genes? //Diabetes. 1989. V. 38. P. 947-950.

39. Crawley J., Lupu F., Westmuckett A.D., et al. Expression, localization, and activity of tissue factor pathway inhibitor in normal and atherosclerotic human vessels // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2000. V. 20. № (5). P. 1362-73.

40. Crawley J.T., Lane D.A. The haemostatic role of tissue factor pathway inhibitor // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2008. V.28. C (2). P. 233-42.

41. Dahlback B., Carlsson M., Svensson P.J. Familial thrombophilia due to a previously unrecognized mechanism characterized by poor anticoagulant response to activated protein C // Proc Natl Acad Sci U S A 1993. V. 90. P. 1004-1008.

42. Dahlback B., Villoutreix B.O. Regulation of blood coagulation by the protein C anticoagulant pathway: novel insights into structure-function relationships and molecular recognition // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2005. V.25. № (7). P. 1311-20.

43. Delias C., Loskutoff D.J. Historical analysis of PAI-1 from its discovery to its potential role in cell motility and disease // Thromb Haemost. 2005. V. 93. № (4). P. 631-40.

44. Dittman W.A., Majerus P.W., Structure and function of thrombomodulin: a natural anticoagulant//Blood. 1990. V. 75. P. 329-36.

45. Dowaidar M., Settin A. Risk of myocardial infarction related to factor V Leiden mutation: a meta-analysis // Genet Test Mol Biomarkers. 2010. V. 14. № (4). P. 493-8.

46. Drenos F., Talmud P.J., Casas J.P., et al. Integrated associations of genotypes with multiple blood biomarkers linked to coronary heart disease risk // Hum Mol Genet. 2009. V. 18. № (12). P. 2305-16.

47. Drobnic K., Budowle B. The analysis of three short tandem repeat (STR) loci in the Slovene population by multiplex PCR // J Forensic Sci. 2000. V. 45. № (4). P. 893-5.

48. Dugan T.A., Yang V.W., McQuillan D.J., Hook M. Decorin modulates fibrin assembly and structure // J Biol Chem. 2006. V. 281. № (50). P. 38208-16.

49. Edwards A., Hammond H.A., Jin L., et al. DNA typing and genetic mapping with trimeric and tetrameric tandem repeats // Am. J. Hum Genet. 1991. V.49. P. 746-756.

50. Elahi E., Kumm J., Ronaghi M. Global genetic analysis // J Biochem Mol Biol. 2004. V. 37. № (1). P. 11-27.

51. Eren M., Painter C.A., Atkinson J.B., et al. Age-dependent spontaneous coronary arterial thrombosis in transgenic mice that express a stable form of human plasminogen activator inhibitor-1 // Circulation. 2002. V. 106. № (4). P. 491-6.

52. Ericsson P., Kallin B., van't Hooft F.M., et al. Allele-specific increase in basal transcription of the plasminogen activator inhibitor-1 gene is associated with myocardial infarction // Proc. Natl. Acad. Sci. 1995. V. 92. P. 1851-1856.

53. Esmon C.T. Protein C anticoagulant system-anti-inflammatory effects. Semin Immunopathol. 2011. Aug 6. Epub ahead of print.

54. Esmon C.T. The impact of the inflammatory response on coagulation. Thromb Res. 2004. V.l 14. P. 321-7.

55. Estelles A., Tormo G., Aznar J., Reduced fibrinolytic activity in coronary heart disease in basal conditions and after exercise // Thromb. Res. 1985. V. 40. P. 373-383.

56. Evans A., Van Baal G.C., McCarron P, et al. The genetics of coronary heart disease: the contribution of twin studies // Twin Res. 2003. V. 6. № (5). P. 432-41.

57. Fay W.P., Garg N., Sunkar M. Vascular functions of the plasminogen activation system // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2007. V. 27. № (6). P. 1231-7.

58. Folsom A.R., Aleksic N., Wang L., et al. Protein C, antithrombin, and venous thromboembolism incidence: A prospective population-based study // Arterioscler Thromb Vase Biol 2002. V. 22. P. 1018-22.

59. Folsom A.R., Ohira T., Yamagishi K., Cushman M. Low protein C and incidence of ischemic stroke and coronary heart disease: the Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) Study // J Thromb Haemost 2009. V. 7. № (11). P. 1774-8.

60. Fuentes-Prior P., Iwanaga Y., Hub.er R., et al. Structural basis for the anticoagulant activity of the thrombin- thrombomodulin complex // Nature. 2000. V. 404. P. 518-25.

61. Furberg C.D. Secondary prevention trials after acute myocardial infarction // The American Journal of Cardiology. 1987. V. 60. P. 28-32.

62. Gale A.J., Xu X., Pellequer J.L., et al. Interdomain engineered disulfide bond permitting elucidation of mechanisms of inactivation of coagulation factor Vaby activated protein C // Protein Sci. 2002. v. 11. № (9). p. 2091-101.

63. Galtion D., Gavanna J., Kay A., Zhang Q. Coronary artery disease in Europe: what are the genetic risk factors? // J. of the Royal College of Physicians in London. 1995. V. 29. P. 429-430.

64. Ghaddar H.M., Folsom A.R., Aleksic N., et al. Correlation of factor Vila values with factor VII gene polymorphism, fasting and postprandial triglyceride levels, and subclinical carotid atherosclerosis // Circulation. 1998. V. 98. № 25. P. 2815-2821.

65. Gils A., Declerck P.J. The structural basis for the pathophysiological relevance of PAI-1 in cardiovascular diseases and the development of potential PAI-1 inhibitors. Thromb Haemost // 2004. V. 91. P. 425- 437.

66. Guyer M.S., Collins F.S. How is the Human genome project doing, and what have we learned so far? // Proc. Natl. Acad. Sci. Usa. 1995. V. 92, P. 1084110848.

67. Haapaniemi E., Helenius J., Jakovljevic D., et al. Ischaemic stroke patients with heterozygous factor V Leiden present with multiple brain infarctions and widespread atherothrombotic disease // Thromb Haemost. 2009. V. 101(1). P. 145-50.

68. Hamada H., Petrino M., Kakunaga T., et al. Characterization of genomic Poly(dT-dG) Poly(dC-dA) sequences: structure, organization and conformation//Mol. Cell. Biol. 1984. V. 4, P. 2610-2621.

69. Hamm C.W. Anaesthesist. Paradigms in treatment of myocardial infarction. 2004. V. 53. № (5). P. 409-410.

70. Hamsten A., Wiman B., De Faire U., Blombaeck M. Increased plasma levels of a rapid inhibitor of tissue plasminogen activator in young survivors of myocardial infarction // New England Journal of Medicine. 1985. V. 313. P. 1557-1563.

71. Heeb M., Kojima Y., Greengard J., Griffin J. Activated protein C resistance: Molecular mechanisms based on studies using purified Gln506-factor V // Blood. 1995. V. 85. P. 3405-5.

72. Heid C.A. Real-time quantitative PCR. // Genome Res.-1996. № 6.-P. 986994.

73. Henry M., Chomiki N., Scarabin P., et al. Five Frequent Polymorphisms of the PAI-1 Gene // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1997. V. 17. P. 851858.

74. Heras M. Reduction in Acute Myocardial Infarction Mortality Over a Five-Year Period // The American Journal of Cardiology. 2001. V. 3. P. 200-208.

75. Hersi A., Fu Y., Wong B. Does the discharge ECG provide additional prognostic insights in non-ST elevation ACS patients from that acquired on admission? // E. Heart Journal. 2003. V. 24. № (6). P. 522-531.

76. Hoffman M., Monroe D.M. Coagulation 2006: a modern view of hemostasis // Hematol Oncol Clin North Am. 2007. V. 21. № (1). P. 1-11

77. Hoshi S., Hijikata M., Togashi Y., et al. Yamaguchi T. Protein C deficiency in a family with thromboembolism and identified gene mutations // Intern Med. 2007. V. 46. P. 997-1003.

78. Iacoviello L., Di Castelnuovo A., de Knijff P., et al. Polymorphisms in the coagulation factor VII gene and the risk of myocardial infarction // N. Engl. J. Med. 1998. V. 338. P. 79-85.

79. Jeffreys A.J., Wilson V., Thein S.L. Hyper variable "minisatellite" regions in human DNA // Nature. 1985. V. 316. P. 76-79.

80. Jeimy SB, Quinn-Allen MA, Fuller N, et al. Location of the multimerin 1 binding site in coagulation factor V: an update // Thromb Res. 2008. V. 123. № (2). P. 352-4.

81. Jelinek W., Schmid C. Repetitive sequences in eukaryotic DNA and their expression. Ann. Rev//Biochem. 1982. V. 51. P. 813-844

82. Kalafatis M, Mann K.G. The role of the membrane in the inactivation of factor va by plasmin. Amino acid region 307-348 of factor V plays a critical role in factor Va cofactor function // J Biol Chem. 2001. V. 276. № (21). P. 18614-23.

83. Kathiresan S., Yang Q., Larson M.G., et al. Common genetic variation in five thrombosis genes and relations to plasma hemostatic protein level and cardiovascular disease risk // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2006. V. 26. P. 1405-1412.

84. Keavney B. Genetic epidemiological studies of coronary heart disease // Internal Journal of Epidemiology. 2002. V. 31. № (4). P. 730-736.

85. Keeley E.C., Boura J.A., Grines C.L. Primary angioplasty versus intravenous thrombolytic therapy for acute myocardial infarction: A quantitative review of 23 randomised trials //Lancet. 2003. 361, 13-20.

86. Kemkes-Matthes B., Matthes K.J. Protein Z // Semin Thromb Hemost. 2001. V. 27. №(5). P. 551-6.

87. Koch W., Schrempf M., Erl A., et al. 4G/5G polymorphism and haplotypes of SERPINE1 in atherosclerotic diseases of coronary arteries // Thromb Haemost. 2010. V. 103. № (6). P. 1170-80.

88. Kofoed S.C., Wittrup H.H., Sillesen H., Nordestgaard B.G. Fibrinogen predicts ischemic stroke and advanced atherosclerosis but not echo lucent, rupture-prone carotid plaques // E. Heart Journal. 2003. V.24. № (6). P. 567576.

89. Kohler H.P., Grant P.J. Plasminogen-activator inhibitor type 1 and coronary artery disease // N Engl J Med 2000. V. 342. P. 1792-801.

90. Kovar D., Cannon C.P., Bentley J.H., et al. Does initial and delayed heart rate predict mortality in patients with acute coronary syndromes? // Clin Cardiol. 2004. V. 27. № (2). P. 80-6.

91. Kromhout D. Epidemiology of cardiovascular diseases in Europe // Public Health Nutr. 2001. V.4. P. 441-57.

92. Kubista M., Andrade J.M., Bengtsson M., et al. The real-time polymerase chain reaction // Mol Aspects Med. 2006. V. 27. P. 95-125.

93. Kunz G., Ohlin A.K., Adami A., et al. Naturally occurring mutations in the thrombomodulin gene leading to impaired expression and function // Blood. 2002. V.99. P. 3646-53

94. Lane D.A., Grant P.J., Role of hemostatic gene polymorphisms in venous and arterial thrombotic disease // Blood. 2000. V. 95. P. 1517-1532.

95. Le Cam-Duchez V., Chrétien M.H., Saugier-Veber P., Borg J.Y. Factor V Cambridge mutation and activated protein C resistance assays. Thromb Haemost. 2006. V. 95. № (3). P. 581-3.

96. Leurs J., Hendriks D. Carboxypeptidase U (TAFIa): a metallocarboxypeptidase with a distinct role in haemostasis and a possible risk factor for thrombotic disease // Thromb Haemost. 2005. V. 94. № (3). P. 471-87.

97. Li H., Gyllensten U.B., Gui X., et al. Amplification and analysis of DNA sequences in single human sperm and diploid cells // Nature. 1988. V. 335. P. 414-417.

98. Li Y.H., Chen C.H., Yeh P.S., et al Functional mutation in the promoter region of thrombomodulin gene in relation to carotid atherosclerosis // Atherosclerosis. 2001. V. 154. № (3). P. 713-9.

99. Liang R., Lee C.K., Wat M.S., Kwong Y.L., Clinical Significance of Arg306 Mutations of Factor V Gene // Blood. 1998. V. 92. P. 2599-2600.

100. Loew M., Hoffmann M.M., Hahmann H Genotype combinations of plasminogen activator inhibitor-1 and angiotensin-converting enzyme genes and risk for early onset of coronary heart disease // Eur J Cardiovasc Prev Rehabil. 2006. V. 13. № (3). P. 449-56.

101. Lu Q.H., Du Y.M., Dong Z.Q., et al. Plasma activated coagulation factor VII and Msp I polymorphism in elderly patients with coronary heart disease // Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi. 2005. V. 22. № (6). P. 691-3.

102. Lucotte G., Mercier G. Population genetics of factor V Leiden in Europe // Blood Cells Mol Dis. 2001. V. 27. № (2). P. 362-7.

103. Mackman N., Tilley R.E, Key N.S. Role of the extrinsic pathway of blood coagulation in hemostasis and thrombosis //. Arterioscler Thromb Vase Biol. 2007. V. 27. №(8). P. 1687-93.

104. Mann K.G., Butenas S., Brummel K. The dynamics of thrombin formation // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2003. V. 23. № (1). P. 17-25.

105. Mann K.G., Kalafatis M. Factor V: a combination of Dr Jekyll and Mr Hyde //Blood. 2003. V. 101. № (1). P. 20-30.

106. Mannucci P.M., Asselta R., Duga S., et al. The association of factor V Leiden with myocardial infarction is replicated in 1880 patients with premature disease // J Thromb Haemost. 2010. V. 8. № (10). P. 2116-21.

107. Marras S.A., Tyagi S., Kramer F.R. Real-time assays with molecular beacons and other fluorescent nucleic acid hybridization probes // Clin Chim Acta. 2006. V. 363. № (1-2). P. 48-60.

108. Maryama I., Recombinant Thrombomodulin and Activated Protein C in the Treatment of Dissiminated Intravascular Coagulation // Thromb. Haemostas. 1999. V. 82. P. 718-721.

109. Mathew C.G.P. The Isolation of High Molecular Weight Eukaryotic DNA // Nucleic Acids. 1984. V. 2. P. 31-34.

110. Meade T.W., Mellows S.; Brozovic M., et al. Haemostatic function and ischaemic heart disease: principal results of the Northwick Park Heart Study //Lancet. 1986. V. 2. P. 533-7.

111. Mehilli J., Kastrati A., Dirschinger J., et al. Differences in prognostic factors and outcomes between women and men undergoing coronary artery stenting //JAMA. 2000. V. 284. P. 1799-805.

112. Mehta R., Shapiro A.D. Plasminogen activator inhibitor type 1 deficiency // Haemophilia. 2008. V. № (6). P. 1255-60.

113. Miesfield R., Krystal M., Arnheim N. A member of new repeated sequence family which is conserved eucaryotic evolution is found between the human delta- and beta-globin genes //Nicleic Acids Res. 1981. V. 9. P. 5931-5947.

114. Miles L.A., Castellino F.J., Gong Y. Critical role for conversion of glu-plasminogen to Lys-plasminogen for optimal stimulation of plasminogen activation on cell surfaces // Trends Cardiovasc Med. 2003. V. 13. № (1). P. 21-30.

115. Mosnier L.O., Elisen M.G., Bouma BN, Meijers J.C. Protein C inhibitor regulates the thrombin-thrombomodulin complex in the up- and down regulation of TAFI activation // Thromb Haemost. 2001. V. 86. № (4). P. 1057-64.

116. Mosnier L.O., Zlokovic B.V., Griffin J.H. The cytoprotective protein C patheway// Blood. 2007. V. 109. P. 3161-3172

117. Myohanen H., Vaheri A. Regulation and interactions in the activation of cell-associated plasminogen // Cell Mol Life Sci. 2004. V. 61. № (22). P. 284058.

118. Nakabayashi M., Yamamoto S., Suzuki K., Analysis of thrombomodulin gene polymorphism in women with severe early-onset preeclampsia // Semin. Thromb. Hemost. 1999. V. 25. P. 473-9.

119. Nesheim M. Thrombin and fibrinolysis // Chest. 2003. V. 124. № (3). P. 3339.

120. Ngo I.S.L., Pace R., Richard M.V. Methods for analysis of multiple cystic fybrosis mutations//Hum.Genet. 1991. V. 87. P. 613-617

121. Nicolaes GA, Tans G, Thomassen MC, et al. Peptide bond cleavages and loss of functional activity during inactivation of factor Va and factor Va R506Q by activated protein C // J Biol Chem. 1995. V. 270. № (36). P. 21158-66.

122. Norlund L., Holm J., Zoller B., Ohlin A.K. The Ala25-Thr mutation in the thrombomodulin gene is not frequent in Swedish patients suffering from ischemic heart disease // Thromb. Haemost. 1999. V. 82. P. 1367-8.

123. Norlund L., Holm J., Zoller B., Ohlin A.K., A common thrombomodulin amino acid dimorphism is associated with myocardial infarction // Thromb. Haemost. 1997. V. 77. P. 248-51.

124. Norstrom E, Thorelli E, Dahlback B. Functional characterization of recombinant FV Hong Kong and FV Cambridge // Blood. 2002. V. 100. № (2). P. 524-30.

125. Norstram EA, Steen M, Tran S, Dahlback B Importance of protein S and phospholipid for activated protein C-mediated cleavages in factor Va // J Biol Chem. 2003. V. 278. № (27). P. 24904-11.

126. Ny T., Sawdey M., Lawrence D., et al. Cloning and sequence of cDNA coding for the human ^-migrating endothelial-cell-type plasminogen activator inhibitor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. V. 83. P. 6776-6780.

127. Ohlin A.K., Holm J., Hillarp A. Genetic variation in the human thrombomodulin promoter locus and prognosis after acute coronary syndrome//Thromb. Res. 2004. V. 113. № 5. P. 319-326.

128. Ohnishi Y., Tanaka T., Yamada R., et al. Identification of 187 single nucleotide polymorphisms (SNPs) among 41 candidate genes for ischemic heart disease in the Japanese population // Hum. Genet. 2000. V. 106. P. 288-92.

129. Oliver J.J, Webb D.J., Newby D.E. Stimulated tissue plasminogen activator release as a marker of endothelial function in humans // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2005. V. 25. № (12). P. 2470-9.

130. Olson S.T., Bjork I., Bock S.C. Identification of critical molecular interactions mediating heparin activation of antithrombin: implications for the design of improved heparin anticoagulants // Trends Cardiovasc Med. 2002. V. 12. № (5). P. 198-205.

131. Onalan O., Balta G., Oto A., et al.Plasminogen activator inhibitor-1 4G4G genotype is associated with myocardial infarction but not with stable coronary artery disease // J Thromb Thrombolysis. 2008. V. 26, № 3. P. 211217.

132. Pitsavos C., Kourlaba G., Panagiotakos D.B., Stefanadis C., Factors associated with delay in seeking health care for hospitalized patients with acute coronary syndromes: the GREECS study // Hellenic J Cardiol. 2006. V. 47. № (6). P. 329-36.

133. Quek S.C., Low P.S., Saha N., Heng C.K. The effects of three factor VII polymorphisms on factor VII coagulant levels in healthy Singaporean Chinese, Malay and Indian newborns // Ann Hum Genet. 2006. V. 70. P. 951-7.

134. Radovanovic D., Erne P., Urban P., et al. Gender differences in management and outcomes in patients with acute coronary syndromes: results on 20,290 patients from the AMIS Plus Registry // Heart. 2007. V. 93. № (11). P. 136975.

135. Rallidis L.S., Gialeraki A., Merkouri E., et al. Reduced carriership of 4G allele of plasminogen activator inhibitor-1 4G/5G polymorphism in very young survivors of myocardial infarction // J Thromb Thrombolysis. 2010. V. 29. № (4). P. 497-502.

136. Reppert S.M. Cellular and molecular basis of circadian timing in mammals // Semin Perinatol 2000. V. 24. P. 243-6.

137. Roest M., Van der Schouw, Banga J.D. et al. Plasminogen Activator Inhibitor 4G Polymorphism Is Associated With Decreased Risk of Cerebrovascular Mortality in Older Women // Circulation. 2000. V. 101. P. 67-70.

138. Rossaak J.I., van Rij A.M., Jones G.T., Harris E.L. Association of the 4G/5G polymorphism in the promoter region of plasminogen activator inhibitor-1 and abdominal aortic aneurysms // J. Vase. Surgery. 2000. V. 31. P. 10261031.

139. Rowold D.J., Herrera R.J. Alu elements and the human genome // Genetica. 2000. V. 108. № (1). P. 57-72.

140. Sadler J.E., Thrombomodulin structure and function // Thromb. Haemost. 1997. V. 78. P. 392-5.

141. Saiki R., Scharf S., Faloona F., et al. Enzymatic amplification of p-globin genomic gene sequence and restriction site analysis for diagnosis of stickle cell anaemia// Science. 1985. V. 230. IP. 350-1354.

142. Schumm J.W., Knowlton R.G., Braman J.C., et al. Identification of more than 500 RFLPs by screening random genomic clones. Am. J. Hum. Genet. 1988. 42,143-159.

143. Shanker J., Perumal G., Maitra A. et al. Genotype-phenotype relationship of F7 R353Q polymorphism and plasma factor VII coagulant activity in Asian Indian families predisposed to coronary artery disease // J Genet. 2009. V. 88. №(3). P. 291-7.

144. Silveira J.R., Kalafatis M., Tracy P.B. Carbohydrate Moietis on the Procofactor Factor V, but Not the Derived Cafactor Factor Va, Regulate its Inactivation by Activated Proteein C // Biochemistry. 2002. V. 41. P. 16721680.

145. Simpson H.C., Meade T.W., Stirling Y., et al., Hypertriglyceridaemia and hypercoagulability//Lancet. 1983. V. 2. P. 786-790.

146. Singer M. Highly repeated sequences in mammalian genomes // Int. Rev. Cytol. 1982. V. 76. P. 67-112.

147. Smith A., Patterson C., Yarnell J., et al. Which hemostatic markers add to the predictive value of conventional risk factors for coronary heart disease and ischemic stroke? The Caerphilly Study // Circulation.2005. V. 112. P. 30803087.

148. Smith L.H., Coats S.R., Qin H., et al. Differential and opposing regulation of PAI-1 promoter activity by estrogen receptor a and estrogen receptor b in endothelial cells // Circ Res 2004. V. 95. P. 269-75.

149. Sobel B.E., Taatjes D.J., Schneider D.J. Intramural plasminogen activator inhibitor type-1 and coronary atherosclerosis // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2003. V. 23. № (ll). p. 1979-89.

150. Soeki T., Tamura Y., Fukuda N., Ito SPlasma and platelet plasminogen activator inhibitor-1 in patients with acute myocardial infarction // Jpn Circ J. 2000. V. 64. № (8). P. 547-53.

151. Solymoss B.C., Bourassa M.G., Lesperance J., et al. Incidence and clinical characteristics of the metabolic syndrome in patients with coronary artery disease // Coron Artery Dis 2003. V. 14. P. 207 212.

152. Spek C.A., Koster T., Rosendaal F.R. Genotypic Variation in the Promoter Region of the Protein C Gene Is Associated With Plasma Protein C Levels and Thrombotic Risk//Arterioscler. Thromb.Vasc. Biol. 1995.V. 15. P. 214218.

153. Springer T.A., Zhu J., Xiao T. Structural basis for distinctive recognition of fibrinogen gammaC peptide by the platelet integrin alphallbbeta3 // J Cell Biol. 2008. V. 182. № (4). p. 791-800.

154. Steen M., Norstram E.A., Tholander A.L., et al. Functional characterization of factor Y-Ile359Thr: a novel mutation associated with thrombosis // Blood. 2004. V. 103. №(9). P. 3381-7.

155. Subauste A.R., Burant C.F. Role of FoxOl in FFA-induced oxidative stress in adipocytes // Am J Physiol Endocrinol Metab. 2007. V. 293. P. 159-164.

156. Sugano T., Tsuji H., Masuda H., et al. Plasminogen activator inhibitor-1 promoter 4G/5G genotype is not a risk factor for myocardial infarction in a Japanese population//Blood. Coagul. Fibrinolysis. 1998. V. 9. P. 201^.

157. Sunyaev S., Ramensky V., Koch I. Prediction of deleterious human alleles // Hum Mol Genet. 2001. V. 10. № (6). P. 591-7.

158. Suzuki H., Shima M., Nogami K., et al. Factor V C2 domain contains a major thrombin-binding site responsible for thrombin-catalyzed factor V activation // J Thromb Haemost. 2006. V. 4. № (6). P. 1354-1360.

159. Tamaki S., Iwai N., Nakamura Y., et al. Variation of the factor VII gene and ischemic heart disease in Japanese subjects // Coron. Artery. Dis. 1999. V. 10. P. 601-6.

160. Tans G., van Hylckama Vlieg A., et al. Activated protein C resistance determined with a thrombin generation-based test predicts for venous thrombosis in men and women // Br J Haematol. 2003. V. 122. № (3). P. 465-70.

161. Tiong I.Y., Alkotob M.L., Ghaffari S. Protein C deficiency manifesting as an acute myocardial infarction and ischaemic stroke // Heart 2003. V. 89: e7.

162. Tosetto A., Simioni M., Madeo D., Rodeghiero F. Intraindividual consistency of the activated protein C resistance phenotype // Br J Haematol. 2004. V. 126. № (3). P. 405-9.

163. Tsongalis G.J., Rezuke W.N., Molecular genetics and factor V Leiden mutation analysis // Biotechnol. Intl. 1997. V. 1. P. 73-77.

164. Van de Wouwer M., Collen D., Conway E.M. Thrombomodulin-protein C-EPCR system: integrated to regulate coagulation and inflammation // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2004. V. 24. № (8). P. 1374-83.

165. Van de Wouwer M., Conway E.M. Novel functions of thrombomodulin in inflammation // Crit Care Med. 2004. V. 32. № (5). P. 254-61.

166. Van der Velden P.A., Krommenhoek-Van Es.T., Allaart C.F., A frequent thrombomodulin amino acid diamorphism is not associated with thrombophilia//Thromb. Haemost. 1991. V. 65. P. 511-5.

167. Van der Werf F. Bax J., Betriu A., et al. Management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation // G. Ital. Cardiol. (Rome). 2009. V. 10. № (7). P. 450-489.

168. Varga-Szabo D., Pleines I., Nieswandt B. Cell adhesion mechanisms in platelets // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2008. V. 28. № (3). P. 403-12.

169. Vine A.K. Recent advances in haemostasis and thrombosis // Retina. 2009. V. 29. №(1). P. 1-7.

170. Wang D.G., Fan J.-B., Siao C.J., et al. Large-scale identification, mapping and genotyping of single-nucleotide polymorphism in the human genome // Science. 1998. V. 280. P. 1077-1082.

171. Wang X.L., Wang J., McCredie R.M., et al. Polymorphisms of factor V, factor VII, and fibrinogen genes: relevance to severity of coronary artery disease //Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1997. V. 17. P. 246-251.

172. Weiler H., Isermann B.H., Thrombomodulin // J. Thromb. Haemost. 2003. V. l.P. 1515-1531.

173. Weischer M., Juul K., Zacho J., et al. Prothrombin and risk of venous thromboembolism, ischemic heart disease and ischemic cerebrovascular disease in the general population // Atherosclerosis. 2010. V. 208. № (2). P. 480-3.

174. Weissenbach J., Gyapay G., Dib C. et al. A second-generation linkage map of the human genome // Nature. 1992. V. 359. P. 794-801.

175. Wittwer C.T., Herrmann M.G., Gundry C.N. et al., Real-time multiplex PCR assays // Methods. 2001. V. 25. № (4). P. 430-42.

176. Wu A.H., Tsongalis G.J. Correlation of polymorphisms to coagulation and biochemical risk factors for cardiovascular diseases // Am. J. Cardiol. 2001. V. 87. №12. P. 1361-1366.

177. Wu K.K., Aleksic N., Ahn C., et al. Atherosclerosis Risk in Communities Study (ARIC) Thrombomodulin Ala455Val polymorphism and risk of coronary heart disease // Circulation. 2001. V. 103. P. 1386-9.

178. Xu G., Jin G., Fu G., et al. Polymorphisms in the coagulation factor VII gene and the risk of myocardial infarction in patients undergoing coronary angiography // Chin. Med. J. Engl. 2003. V. 116. P. 1194-7.

179. Yamamoto K., Takeshita K., Kojima T., et al. Aging and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) regulation: implication in the pathogenesis of thrombotic disorders in the elderly // Cardiovasc Res. 2005. V. 66. № (2). P. 276-85.

180. Ye Z, Liu E.H., Higgins J.P., et al. Seven haemostatic gene polymorphisms in coronary disease: meta-analysis of 66,155 cases and 91,307 controls. // Lancet. 2006. V. 367. P. 651-8.

181. Zietz B., Buechler C., Drobnik W., et al. Allelic frequency of the PAI-1 4G/5G promoter polymorphism in patients with type 2 diabetes mellitus and lack of association with PAI-1 plasma levels // Endocr Res. 2004. V. 30. № (3). P. 443-53.

182. Zorio E., Gilabert-Estelles J., Espana F., et al. Fibrinolysis: the key to new pathogenetic mechanisms // Curr Med Chem. 2008. V. 15. № (9). P. 923-9.

Информация о работе

Пушков, Александр Алексеевич
кандидата биологических наук
Москва, 2011
ВАК 03.01.03

Диссертация

Полиморфные маркеры ряда генов системы гемостаза и генетическая предрасположенность к неблагоприятному течению ишемической болезни сердца у больных, перенесших острый коронарный синдром - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы