Полиморфизм генов цитокинов и его вклад в вариабельность количественного содержания мембранных белков эритроцитов человека

Белугин, Дмитрий Александрович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Полиморфизм генов цитокинов и его вклад в вариабельность количественного содержания мембранных белков эритроцитов человека
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Полиморфизм генов цитокинов и его вклад в вариабельность количественного содержания мембранных белков эритроцитов человека"

На правах, рукописи

БЕЛУГИ К Дмитрий Александрович

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ И ЕГО ВКЛАД В ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОДЕРЖАНИЯ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ ЭРИТРОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА

03.00.15 — генетика

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2006

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный университет» и Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и соцразвитию»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Иванов Владимир Петрович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Асанов Алий Юрьевич

доктор биологических наук, профессор Спицын Виктор Алексеевич

Ведущая организация:

Российский государственный медицинский университет

часов на

Защита диссертации состоится <Л°и> 2006 г. в «

заседании диссертационного совета Д 212.203.05 при ГОУ ВПО Российский университет дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 8.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского университета дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6.

Автореферат разослан «_»__2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент

О. Б. Гигани

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Цитокины являются полипотентными веществами белковой природы, обладающими множественными биологическими эффектами. Они представляют собой трансмиттеры межклеточных взаимодействий, с их помощью осуществляется контроль большинства физиологических процессов (Cohen М.С., Cohen S., 1996; Кашкин К.П., 1998). Обладая значительной вариабельностью, гены цитокинов характеризуются наличием однонуклеотидных полиморфизмов, ассоциированных с изменением синтеза биохимических продуктов (Коненков В.И., Смольникова М.В., 2003). Данные полиморфизмы представляют собой удобный объект исследований, позволяющий выявить связь генов, в которых они локализованы, с регуляцией тех или иных физиологических процессов (Авдошина В.В., Коненков В.И., 2004).

В последнее время является общепризнанной роль цитокинов в регуляции пролиферации и дифференциации эритроидных клеток-предшественниц (Smithgall Т.Е., 1998; Гольдберг E.Ä., с соавт., 2001). В процессе эритропоэза формируется специфическая структура эритроцитарной мембраны, которая является одним из главнейших критериев зрелости эритроидных клеток, от нее во многом зависит нормальное функционирование циркулирующих эритроцитов (Сторожок С.А., с соавт., 1997). Сложная структурная организация цитоплазматических мембран эритроцитов во многом определяются белковыми молекулами, являющимися их важнейшими компонентами (Артюхов В. Г., Наквасила М. А. 2000; Иванов В.П., с соавт., 2004). Будучи тесно связанными друг с другом в структуре мембраны, белки демонстрируют взаимозависимость их количественного содержания (Иванов В.П., с соавт., 2004). Это приводит к тому, что в ответ на изменение продукции одного белка может наблюдаться изменение содержания в мембране целого ряда других белков, и, как следствие, - нарушение выполнения своих функций как мембраной, так и всей клеткой, что, в свою очередь, может быть причиной развития патологических состояний. Изложенное подтверждается результатами исследований вовлеченности клеточных мембран в патогенез ряда наследственных заболеваний (Прахин Е.И., с соавт., 1997; Гейчеико В.П., с соавт., 2001). В этой связи представляется важным изучение генетического контроля за формированием белковых структур мембран эритроцитов, который осуществляется не только конкретными генами, кодирующими определенные мембранные белки, но и включает в себя массу факторов, регулирующих их экспрессию, посттрансляционную модификацию, а также процесс включения белков в состав мембраны (Laurence H.J., et al., 1994; Gallagher P.G., et al., 1998; Takakuwa Y., 2000; Jourdi П., et al., 2005; Manno S., et al., 2005).

1998; Захаров Ю.М., Рассохин А.Г., 2002). Однако этот аспект их влияния на эритропоэз еще не получил должного освещения, что и определило проведение настоящего исследования.

Цель исследования. Целью настоящей работы являлось изучение популяционных особенностей распределения полиморфизма генов цитокинов и оценка его вклада в вариабельность количественного содержания основных белков мембран эритроцитов человека.

Задачи исследования.

1. Исследовать распределение однонуклеотидных полиморфизмов шести генов цитокинов по одиннадцати точечным заменам (-511 С/Т IL-Iß; S27P и -16Т/С IL-3\ -174G/C lL-6\ T113M IL-9; L10P, R25P и -509C/T TGb'ßl* -308G/A, -238G/A и -863C/A TNFa) среди населения Курской области и сопоставить его с распределением одноименных полиморфизмов среди других российских и мировых популяций;

2. Изучить количественное содержание основных белков. мембран эритроцитов у человека и особенности их вариабельности у мужчин и женщин;

3. Выявить ассоциации отдельных ДНК-полиморфизмов генов цитокинов с особенностями количественного содержания мембранных белков эритроцитов;

4. Провести анализ взаимосвязи полиморфных вариантов генов цитокинов с характером взаимного варьирования количественного содержания компонентов белкового спектра мембран эритроцитов;

5. Оценить степень генетической детерминации количественного содержания фракций исследуемых белков мембран эритроцитов;

6. Определить вклад аллелыюго полиморфизма генов цитокинов в формирование фенотип и чес кой вариабельности количественного содержания белков эритроцитарных мембран.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование 11 полиморфизмов 6 генов цитокинов, вовлеченных в регуляцию эритропоэза у человека. В результате исследования получены новые данные о влиянии полиморфизмов генов цитокинов на формирование количественной представительности основных белков мембран эритроцитов человека. Оценен вклад аллельных вариантов в формирование общей фенотипической и генетически обусловленной дисперсии количественной представительности отдельных белковых фракций эритроцитарых мембран. Установлена связь отдельных полиморфных вариантов генов цитокинов с количественным содержанием основных белковых продуктов, входящих в состав мембран эритроцитов. Полученные данные о сопряженности генетического полиморфизма цитокинов с характером взаимною варьирования количественного содержания мембранных белков эритроцитов расширяют представления о роли генетических факторов в формировании белковой структуры эритроцитарных мембран.

Научно-практическое -значение. Результаты работы представляют практический интерес для клеточной биологии, цитологии, молекулярной,

клеточной и популяционной генетики, биоинформатики, нормальной физиологии человека, биохимии, гематологии и других научных дисциплинах. Они могут быть использованы в учебных процессах в высших учебных заведениях на соответствующих кафедрах.

Полученные данные создают основу для более глубокого понимания молекулярно-генетических механизмов регуляции биосинтеза белков мембран эритроцитов и открывают перспективы для разработки методов управления экспрессией их генов при различных заболеваниях человека. Результаты исследования могут найти применение в цитокиновой VI антицитокиновой терапии, расширяя представления о вероятных побочных эффектах названных методов лечения.

Положения, выносимые на защиту.

1. В популяции Курской области гены цитокинов характеризуются значительной вариабельностью: оценки частот аллелей рассмотренных генных вариантов лежат в пределах от 2.4% для -238С/А до 44% для -174С/С, что позволяет рассматривать изменчивость названных генов как полиморфизм, а не мутации.

2. Частоты аллелей и генотипов исследованных полиморфных вариантов генов цитокинов в популяции Курской области отличаются от частот соответствующих аллелей и генотипов в других российских и мировых популяциях и этнических группах.

3. Индивиды, обладающие разными полиморфными вариантами генов цитокинов, характеризуются определенными различиями в количественном содержании и фенотип ической вариабельности основных мембранных белков эритроцитов.

4. Носители разных полиморфных вариантов генов цитокинов отличаются особенностями взаимного варьирования у них количественного содержания основных мембранных белков эритроцитов.

5. Полиморфизм генов цитокинов вносит вклад в формирование вариабельности количественного содержания основных мембранных белков эритроцитов, определяя от 0,45% дисперсии 2.3-анкирина до 6.91% дисперсии АТБ.

Апробация работы и публикации. Результаты работы представлены на 70-й и 71-й итоговых научных конференциях КГМУ и сессиях Центрально-Черноземного научного центра РАМН (Курск, 2005, 2006), XII международной научной конференции студетчэв, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2005» (Москва, 2005), V съезде Российского общества медицинских генетиков (Уфа, 2005), научных конференциях студентов и молодых ученых КГМУ (Курск, 2005, 2006), Всероссийском научном симпозиуме с международным участием «Цитокины. Стволовая клетка. Иммунитет» (Новосибирск, 2005), IV международной научно-практической конференции «Динамика научных достижений — 2005» (Днепропетровск,

2005), Российской научной конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск,

2006), научной конференции «Интеграция медицины и образования» (Курск,

2006), V Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине (Тула, 2006). По материалам исследования опубликовано 19 работ.

Объем II структура диссертации. Работа изложена на 163 страницах машинописного текста, включает в себя 12 таблиц, 6 рисунков. Состоит из списка сокращений, введения, 6 глав, заключения, выводов и 12 приложений. Библиографический список включает 360 источников, из них 94 отечественных и 266 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Материал исследования. Материалом настоящего исследования в рамках популяционного анализа послужила случайная выборка из жителей Курской области, представленная 340 добровольцами. Количественное содержание мембранных белков эритроцитов определялось у 182 человек. Основными критериями при формировании выборки были: отсутствие у обследованных клинических проявлений соматопатологий, русская национальность, отсутствие родства между индивидами. Кроме того, для расчета коэффициента наследуемости были взяты образцы крови 47 родственников I степени родства.

Исследовали 11 полиморфных вариантов 6 генов цитокинов: интерлейкинов (1Ь) -1р, -3, -6, -9, трансформирующего фактора роста (ТР'Ср!), фактора некроза опухоли а (7'Л7<'а) (таблица 1).

Методы исследования. Мо.чекулярио-геиепшчсскгю методы. Выделение ДНК производили стандартным методом фенол-хлороформной экстракции из замороженной венозной крови (Маниатис Т., с соавт., 1984). Амплификацию фрагментов ДНК осуществляли методом полимеразной цепной реакции. Генотйпирование продуктов амплификации путем ПДРФ-анализа проводили с использованием опубликованных методик или методик, разработанных на кафедре медицинской биологии, генетики и экологии

Таблица 1

Исследованные полиморфизмы генов цитокинов_______

Название гена Хромосомная локализация Полиморфизм Локализация в гене

1Ь-1Р 2Ч14 -511 С/Т 5'ШЯ

1Ь-3 5qЗ\Л Б27Р I экзон

-16С/Т 5'ШТ1

1Ь-6 7р21 -174 С/С 5'иТЯ

1Ь-9 5с\3\Л Т113М 5 экзон

Ы0Р 1 экзон

ТСРР1 19(113.1 -509С/Т

1*25Р 1 экзон

-308 О/А 5*1Ш1

ТОТа 6р21.3 -863 С/А 5'1ГП1

-238 в/А з'итя

КГМУ.

Биохимические методы. Эритроциты получали из венозной крови традиционным методом Beutler Е., et а! (1976) с незначительной модификацией. С целью выделения мембран производили гемолиз эритроцитов осмотическим шоком по методу Dodge G.T., et al (1964). Фракционирование мембранных белков осуществляли с помощью одномерного градиентныого электрофореза в ПААГ по модифицированному методу Laemmeli U.K. (1970). Идентификация 16 мембранных белков осуществлялась согласно классификации Fairbanks G., et al (1971) с использованием аналитического пакета OncDScan 1.3.

Статистические методы. Формирование базы данных осуществлялось с использованием программы Statistica 5.5. Обработка данных осуществлялась по стандартным методикам вариационной статистики (Урбах В.Ю., 1975). Математические расчеты проводились с помощью пакетов прикладных программ Statistica 5.5, Excel, а также программы GENI, разработанной д.б.н. Трубниковым В.И. (Трубников В.И., 1980, 1992). Полученные результаты проверяли на нормальность распределения с помощью критерия Колмогорова-Смирнова (Урбах В.Ю., 1975; Лакин Г.Ф., 1990). Тестирование распределений генотипов на соответствие равновесию Харди-Вайнберга в выборке и сравнение с частотами аллелей и генотипов разных популяций проводили с помощью критерия х2- Проверка на неравновесие по сцеплению между парами ДНК-маркеров проводилась по Hill W.G., 1974. Оценку связей полиморфизмов генов цитокинов с количественными характеристиками БСМЭ проводили с помощью критериев Стыодента и Фишера, дискриминантного, кластерного, корреляционного анализов, а также рассчитывая эффекты аллелей и доли дисперсии количественного содержания белков, объясненной изменчивостью по исследуемым локусам (Sing С.F., Davignon J., 1985).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 1. Полиморфизм генов цитокинов в популяциях человека.

Скрининг полиморфизма генов цитокинов среди жителей Курской области и последующий сравнительный анализ с данными, полученными на других выборках, подтвердили наличие специфики распространения аллелей генов цитокинов в разных популяциях и этнических групп. Распределения генотипов в курской популяции не отличались от ожидаемых при равновесии Харди-Вайнберга, о чем свидетельствовало значение р>0.05 для частот всех исследуемых полиморфизмов (таблица 2). Низкий уровень аллельного разнообразия был характерен для полиморфизмов Т113М 11.-9, R25P TGl^ßl, и для всех трех полиморфизмов TNb'a: -30SG/A, -238G/A, -863С/А. Наблюдаемая гетерозиготность по ним варьировала от 0.047 до 0.268. Однако частоты редких аллелей для этих вариантов в популяции превышали 2%, что свидетельствует в пользу их принадлежности к полиморфизмам, а не мутациям. Максимальное разнообразие по локусам, оцененное по величине фактической гетерозиготности, было характерно для -174G/C IL-6 (0.532),

Таблица 2.

Распространенность полиморфизмов генов цитокинов среди жителей

Ген Полиморфизм Распределение аллелей Распределение генотипов (%)* П„ Не

1ЫР -511 С/Т С и т СС ст ТТ 0.396 0.425

0.694 0.306 49.6 39.6 10.8

Э27Р Б р §§ ЭР РР 0.377 0.397

1ЬЗ 0.727 0273 53.8 37.6 8.5

-16Т/С Т С тт ТС СС 0.379 0.396

0.728 0.272 Г 53.8 37.9 8.2

1Ь6 -174С/С С 0^560 ~ С 0.440 ОС " 29.4 вс 53.2 сс """17.4 .. . 0.532 0.493

1Ь9 ТИЗМ Т М ТТ тм ММ 0.268 0.281

0.831 0.169 69.7 26.8 3.5

Ы0Р 1. Р IX ЬР РР 0.447 0.479

0.603 0.397 1 37.9 44.7 17.4

ТСРр Я25Р а | Р КК ЯР ,_РР ..... 0.126 (.„.. .„..... 0.128

0.93 Г ' 0.069 86.8 12 6 0 6

-509С/Т С 0.671..... Т " 0.329 СС 45.3 * и СТ__ 43.5 ТТ ~ 11.2 0.435 0.441

-308С/А в А вв вА АА 0.218 0.217

0.877 0.123 76.8 21.7 1.5

Т^а -238С/А С А во Г (ЗА АА 0.047 0.046

0.977 0.024 95.3 !_ 0.0

-863С/А .......... С А СС СА АА 0.053 ..... 0.052 1 ____ . !

0.974 0.027 94.7 ! 5.3 0.0

Примечание: *-достигнутый уровень значимости для теста на равновесие Харди-Вайнберга р>0.05 для частот всех исследованных полиморфизмов; Н0, - наблюдаемая и ожидаемая гетерозиготиость соответственно.

ПОР (0.447) и С-509Т (0.435) ТС,¡'(II. Также оно было достаточно значительным для -511 С/Т 11,-1 р (0.396), Б27Р (0.377) и -16Т/С (0.379) 11,-3. Для сравнения частот исследованных полиморфизмов, полученных в курской популяции, с данными по другим российским и мировым популяциям из доступной литературы были привлечены результаты генотипирования выборок неродственных здоровых субъектов разных народов, анализ которых свидетельствует в пользу существенных межпопуляционных различий в распространенности исследованных полиморфных вариантов генов цитокинов (рисунок 1). Так, распространенность частого аллеля С полиморфизма -5ИС/Т /Л-//? у курян была выше, чем у белгородцев и итальянцев, но ниже, чем у финнов. По частоте аллелей Т и Р полиморфизмов -16Т/С и 527Р И.-З куряне превосходили японцев. По -1740/С 11,-6 куряне, не отличались от других выборок, в то время как аллель Т по Т113М 11,-9 у них был более распространен, чем у таджиков, менее, чем у бурят и не отличался по распространенности среди русских жителей Томска. Частота аллеля Ь по полиморфизму Ы0Р 7Г?/'/?/ у курян была ниже, чем у финнов, но выше, чем у итальянцев и не отличалась от таковой у

Лет брод !-511 СУП

Финны ...........

Итальянцы

Кзрск ! Э27Р __

Япогаы ¡в^стжагЩ

Курск Япони»!

Курск Англичане Шведы Немцы

Курск Томск Таджики Буряты

Курск Финны Шотландцы Итальянцы

Курск | К25Р Испанцы Немцы Шотлавдцы

Курск Г5о9СЛП

Финны > Итальянцы {. Англичане I

Белгород I -ЗОШ/А Уфа Шведы

Курск 1 -238а'А Голландцы США Еплтгяне ,_

Курск Шведы ( -863С/А

р=0,00^ р=0,008 Р=0,<Щ

1 83,1% ; 85.6%

; 95,?%. р=0,014 74,2%; р=0,001

' 93,1%

1 95,4% 91,7% ! 83,8%; р-0,024

87,7%. 89,0%;

82,8«/!); р=0.032 80,3%; р=0,001

97,7% 95.3%

94,2%, р=0.001 84.9%; р<0.001

97.4%

86, Н-о, Р--0.001

Рисунок 1. Сравнительный анализ частот аллелей полиморфизмов генов цитокинов в популяции Курской области с другими популяциями мира. Приведены значения р для популяций, статистически значимо отличавшихся от курской по частотам соответствующих аллелей.

шотландцев, тогда как аллель К по 1125 Р ГС/7/?/ встречался чаще, чем в шотландской выборке, но с той же частотой, что у испанцев и немцев. По частоте аллеля С полиморфизма -509С/Т ТСГ/11 куряне уступали финнам, превосходили итальянцев и не отличались . статистически значимо от англичан. Распространенность аллеля в по -3080/А ТИРа в курской популяции была такой же, как и в белгородской но выше, чем у жителей Уфы и шведов, распространенность аллеля С по полиморфизму -238С/А TNFa была такой же, как у голландцев, выше, чем у белых

американцев и египтян, и частота аллеля С по -863С/А ТЫ Ра также

была выше, чем у шведов. Проверка

полиморфизмов на

неравновесие по

сцеплению обнаружила существенную тенденцию к совместному

наследованию ЫОР и -509С/Т ТС'Рр1 (В=0.186; х =222.10; р<0.001), а также наличие полного неравновесия по сцеплению между -16Т/С и Б27Р /¿-5 (0=0.198; х,2=337.49; р<0.001), что исключило разделение их эффектов на последующих этапах исследования.

Таким образом, полученные данные продемонстрировали особенности распространенности полиморфных вариантов генов цитокинов в различных популяциях и народах, что указывает на присутствие генетической гетерогенности разных народов по исследованным локусам, и может быть

связано с имеющими место межпопуляционными различиями в распространенности многих мультифакториальных заболеваний (МФЗ), в развитии которых существенную роль играет система цитокинов.

2. Белки клеточных мембран эритроцитов у человека.

В результате исследования количественного содержания основных белков было выявлено, что наиболее представленными белками в мембранах являлись АТБ, белок 4.5, а- и р-спектрины (таблица 3). В меньшем количестве присутствовали белки 4.1, 4.2, 4.5.1, 5. Еще меньше 2.1-анкирина, белков 4.9, 7.1, ГАФД, ГБТ. Наименьшим количеством отличались 2.2- и 2.3-спектрины, а также р-тропомиозин. Самым значительным уровнем дисперсии характеризовались спектрины, АТБ и белок 4.5.

Таблица 3

Количественные характеристики белков мембран эритроцитов человека в

Мембранные белк-и

а-спектрин Р-спектрин

2.1-анкирин

2.2-анкирин

2.3-анкирин Белок 3 (АТБ) Белок 4.1

Белок 4.2 (паллидин) Белок 4.5.1 Белок 4.5 (ГТ) Белок 4.9 (дематии) Белок 5 (актин) Белок 6 (ГАФД) Белок 7.1 (а-тропомйозин) Белок 7.2 (Р-тропомпознн) Белок 8 (ГУГ)________

М * Ш .... ^ ..... 1 "

" 118.13*2.4.............. 1047.96 8.9

112.90*2.4 1021.84 9.1

31.48*0.9 138.00 4.4

17.88*0.7 88.29 4.9

13.57*0.5 48,80 3.6

194.29*2.8 1441.04 7.4

47.89*0.9 137.22 2.9

57.54*1.1 219.36 3.8

56.79*1.3 324.92 5.7

140.65*2.6 1247 78 8 9

28.23*0.6 76.69 2.7

53.11*0.8 108.97 2.1

37.02*0.9 136.42 3.7

25.41*0.6 73.07 2.9

18.37Ю.6 74.60 4.1

22.99*0.9 150.52 6.5 !

Результаты сравнительного анализа количественной

представительности и вариабельности основных компонентов белкового спектра мембран эритроцитов (БСМЭ) среди лиц мужского и женского пола не обнаружили статистически значимых различий между рассмотренными белковыми фракциями.

В целях установления особенностей взаимного варьирования количественного содержания основных мембранных белков между собой был проведен корреляционный и кластерный анализы. Их результаты показали, что структуры взаимосвязей между количественными характеристиками мембранных белков в группах мужчин и женщин существенно не отличаются между собой. Проведенный дискриминантный анализ, не выявил статистически значимых различий (К=1.18; р>0.05).

Отсутствие статистически значимых различий в количественных характеристиках отдельных фракций белков между выборками мужчин и женщин, а также в структуре корреляционных взаимосвязей между белками,

отражающих их интеграцию в пределах клеточной мембраны, позволили в дальнейшем рассматривать выборки мужчин и женщин анализе как единую статистическую совокупность.

3. Полиморфизм генов цитокинов и количественные характеристики

мембранных белков эритроцитов

Сравнительный анализ количественного содержания мембранных белков эритроцитов с помощью критерия Стьюдента в группах лиц с различными полиморфными вариантами генов цитокинов позволил выявить статистически значимое изменение количественной представительности 10 мембранных белков в зависимости от 9 полиморфизмов (таблица 4). Так, альтернативные гомозиготы СС и РР по полиморфизмам -16 Т/С и Б27Р гена 1Ь-3 отличались повышенным содержанием р-тропомиозина по сравнению с частыми гомо- и гетерозиготами. Для носителей генотипа СС по -174С/С 11,-6 было характерно повышенное содержание 2.3-анкирина. Обладатели аллеля М по полиморфизму Т113М 11,-9 отличались повышенным содержанием обеих фракций спектринов, носители альтернативного аллеля Р по Я25Р 71С7/7/?/ характеризовались более низкой представительностью Р-спеюрина и 2.1-анкирина по сравнению с индивидами, у которых этот аллель отсутствовал. Гомозиготы РР но ЫОР и ТТ по -509С/Т гена Ч'СП'/И отличались повышенным содержанием дематина, а носители аллеля А по -308С/А ТЫНа — увеличением представительности белков 4.1 и 4.5.1. Наличие аллеля А по замене -863С/А ТЫ На сопровождалось увеличением содержания белков 6 и 7.1 Также с генетической вариабельностью исследованных локусов были связаны показатели фенотипической дисперсии мембранных белков. Генотипспецифические изменения наблюдались в дисперсиях всех белков, кроме ГБТ.

В связи с тем, что функции плазматических мембран зависят не только от количественной представительности отдельных белковых фракций, но и от характера их взаимного варьирования между собой, нами был проведен многомерный анализ этих взаимосвязей в группах лиц, сформированных по наличию того или иного генотипа по каждому полиморфизму. Кластерный анализ установил, что изменчивость по исследуемым локусам связана с изменением силы и структуры корреляционных взаимосвязей между количественным содержанием белков. Наличие генотипсиецифических изменений количественных взаимосвязей белков мембран подтвердил сравнительный анализ матриц фспотииических корреляций количественного содержания мембранных белков с использованием ЛДФ (таблица 5). Из 11 полиморфизмов 10 проявили связь с особенностями взаимного варьирования мембранных белков эритроцитов, исключение составил -863С/А ТЫНа. Это говорит о том, что генетическая вариабельность цитокинов может оказывать влияние на определенные перестройки в белковой структуре эритроцитарных мембран.

Таким образом, полученные данные дают основание полагать, что исследованные нами однонуклеотидные полиморфизмы играют

Таблица 4

Сравнительный анализ количественного содержания основных мембранных белков эритроцитов в зависимости от полиморфизма генов цитокинов___

Мембранные белки, М*т Полиморфизмы, генотипы Группы сравнений, значение t-критерня

S27P 113 SS-SP SP-PP SS-PP

SS (п=99) SP (n=65) | PP(n=18)

Белок 7.2 18.47*0.87 17*0.88 23.58*2.82 1.14 2.23* 2.17*

-16Т/С из TT-TC TC-CC TT-CC

TT (п=99) TC (n=66) CC (n=17)

Белок 7.2 18.47*0.87 16.93*0.87 24.26*2.90 1.20 2.42* 2.15*

-174G/C 11.6 GG-GC GC-CC GG-CC

GG (п=53) GC (n=96) CC (n=33)

2.3-анкирин 13.03*0.86 12.76*0.64 16.51*1.62 1.14 2.23* 2.17*

T113М IL9 TT-(TMi MM))

TT (п=124) TM (n~50)+MM (n=8)

а-спектрин 109.37*3.01 120.48*3.99 2.15*

ß-спектрин 108.98*2.94 i 120.17*3.89 2.22*

L10P TGFßl LL-LP LP-PP 1 LL-PP

LL (п=71) LP (n=76) PP(n=35)

Белок 4.9 28.38*1.09 26.56*0.90 30.95*1.56 1.29 2.59* 1.35

R25P TGF/H RR-RP

RR (n=157) RP (n=25)

ß-спектрин 114.36*2.52 101.18*2.52 1.99*

2.1-анкирин 31.99*0.93 27.1*0.93 2.00*

509C/T TGlßl CC-CT CT-TT CC-TT

CC (n=82) j С'Г (n--77) | TT (n=23)

Белок 4.9 27 68*0.98 26.99*0.91 33.44*1.98 0.51 3.24* 2.72*

-308G/A TNFa GG-(GA*AA)

GG (n~137) GA (n-41 )+AA (n=4)

Белок 4.1 47.35*0.98 62.37*1.89 2.17*

Белок 4.5.1 55.37*1.49 61.75*2.86 2.07*

-863C/A IN!■'<*. CC-CA

CC (n=173) CA (n-9)

Белок 6 36.56*0.88 47.89*3.42 2.88*

Белок 7.1 25.08*0.62 33.44*4.03 2.91* .

Примечание: * - р<0.05

определенную роль в формировании характерной структуры мембраны и могут отражаться на ее свойствах. Фенотипически это проявляется в статистически значимом изменении количественного содержания и

Таблица 5

Величина Р-отношения, полученного при сравнении матриц фенотипических корреляций белков эритроцитов в группах лиц с различными генотипами по __ _ ___исследуемым полиморфизмам _

Ген Полиморфизм С сравниваемые группы

ILlp -511С/Т сс-ст ст-тт сс-тт

F-отношепие 1,42 4,02* 3,98*

-16 Т/С тт-тс тс-сс СС-ТТ

IL3 F-отношение 2,67* 6,64* 4,69*

S27P SS-SP SP-PP SS-PP

F-отношение 2,63* 6,72* 4,69*

IL6 -174G/C GG-GC GC-CC GG-CC

F-отношение 2,37* 4,60* 1,50

IL9 Т113М ТТ-(ТМ+ММ) — —

F-отношение 2,21* — —

L10P LL-LP LP-PP LL-PP

F-отношение 1,67 3,54* 4,01*

TGFP1 R25P RR-RP —

F-отношение h 2,92* —

-509С/Т СС-СТ СТ-ТТ СС-ТТ

F-отношение 1,41 ! 4,39* 4,80*

-308G/A GG-[GAfAA] —

F-отношение 3,39* — —

TNFa -238G/A GG-GA — — 1

F-отношение . 1,14 — —

-863С/А СС-СА 1 — —

F-отношение 2,61* —

Примечание: * - р<0.05

дисперсии ее основных белковых фракций, а также в особенностях их взаимного варьирования, которые, возможно, отражают определенные изменения архитектоники эритроцитарных мембран.

4. Вклад генетического полиморфизма в количественную вариабельность белков эритроцигарных мембран

Исследование комплексной роли полиморфизма генов цитокинов в определении изменчивости количественного содержания белков мембран эритроцитов также оценивали, определяя эффекты влияния отдельных аллелей на содержание белков (отклонение количественного содержания белка от среднего в популяции значения, связанное с носительством того или иного аллеля) и долю фепотипической дисперсии их количественного содержания, обусловленную генетической изменчивостью отдельных генных локусов цитокинов и их совокупности по алгоритму, предложенному Sing и Davignon (Sing C.F., Davignon J., 1985).

Расчет эффектов аллелей показал, что практически все исследованные полиморфизмы в той или иной степени влияют на варьирование количественного содержания изученных белков, что отражает роль

цитокинов в осуществлении контроля над формированием количественной представительности БСМЭ. Для большей части изученных полиморфизмов наиболее существенные эффекты аллелей прослеживались в отношении АТБ и ß-спектрина.

Результаты расчета доли общей фенотипической изменчивости количественного содержания мембранных белков эритроцитов полиморфизма генов цитокинов, объясненной различиями генотипов по отдельным исследуемым локусам, показали, что вклад полиморфизмов в формирование общей фенотипической вариансы варьировал в пределах от отсутствия эффекта (R25P TGFß] по актину и ß-тропомиозину, -238G/A TNFa по ß-тропомизипу и -863С/А TNFa по 2.1- и 2.3-анкиринам и дематину) до 15,3% (-308G/A TNFa по АТБ). Величина вклада более 10% была характерна для дисперсии ß-спектрииа по полиморфизмам Т113М IL-9 и -238G/A TNFa, а также для АТБ по -511 ОТ !L-lß и -863С/А TNFa. Таким образом, вклад отдельных полиморфизмов в формирование количественной вариабельности мембранных белков эритроцитов был достаточно выраженным.

Доля суммарного вклада генетического полиморфизма совокупности исследованных локусов в формирование общей фенотипической дисперсии количественного содержания белковых фракций мембран эритроцитов оценивалась как средневзвешенное значение соответствующих величин вкладов отдельных полиморфизмов. Минимальное значение фенотипической дисперсии, связанной совокупностью вариабельности генов цитокинов, было характерно для 2.3-анкирина (0,45%), максимальное значение отмечено для АТБ (6,91%) (таблица 6). Оценку доли генетически обусловленной дисперсии мембранных белков эритроцитов, сформированной совокупностью исследованных полиморфизмов, рассчитывали как процентное отношение усредненной величины доли общей фенотипической дисперсии, к коэффициентам наследуемости, приведенным в таблице 6. Наибольшая доля генетически обусловленной дисперсии была сформирована совокупностью полиморфизмов у ß-спектрина (Gpg=12,30%), а-спектрина (Gpg=ll,12), АТБ (Gj,о=9,69). Минимальные величины вклада отмечены для2.2- и 2.3-анкиринов (GI,g=:0,77% и Gpg=0,81%, соответственно) и для актина (Gp„=0,94%).

Таким образом, полученные результаты свидетельствую! в пользу того, что исследованные полиморфизмы генов цитокинов влияют па количественную вариабельность компонентов БСМЭ, что в свою очередь может отражаться на свойствах клеточных мембран. По-видимому, в основе обнаруженных фактов лежат функциональные свойства генов цитокинов, являющихся важными гемопоэтинами, способными регулировать экспрессию генов мембранных белков, чьи фенотипические эффекты сохраняются у эритроцитов, вышедших в кровяное русло.

Таблица 6

Доля общей фенотипической и генетически обусловленной дисперсий количественного содержания мембранных белков (в %), обусловленная

Компоненты Мембранные белки

дисперсии а-сп р-сп 2.1 1 2.2 1 2.3 3 4.1 4.2

в 5,16 6,27 1,08 0,52 0,45 6,61 0,91 1,31

А 3,92 4,20 0,67 0,41 0,26 5,21 0.42 0.75

Б 1,24 2.07 0.41 0.08 0.19 1.40 0.49 0.56

11,12 12,30 1,82 0,77 0,81 9,69 1,54 1,79

н2, % 45,12 53,22 59,55 67,26 55,68 68,22 59,01 73,12

Компоненты Мембранные белки !

дисперсии 4.5.1 4.5 4.9 5 6 7.1 7.2 8

в 2,50 4,73 1,05 0,65 1,11 0,79 1,41 0,85

А 1,77 3,11 0,31 0,30 0,68 0,58 0,52 0,58

Э 0.83 1.62 0.74 0.35 0.43 0.21 0.89 0.27 !

СР2 4,26 6,21 1,94 0,94 2,02 1,27 2,87 1,38

н\ % 58,70 50,11 54,04 ..... 69,22 54,82 62,24 49,13 61,41

Примечание. О - доля общей фенотипической дисперсии, объясненная генотипичсскими различиями по совокупности локусов; А, О - аддитивная и доминантная компоненты в соответственно; Ь2 - коэффициент наследуемости количественного содержания мембранных белков; Срц — вклад генотипичсской варнансы совокупности исследуемых локусов в генегически обусловленную дисперсию признака.

ВЫВОДЫ

1. Исследованные 11 полиморфных вариантов 6 генов цитокинов среди жителей Курской области характеризуются широкой вариабельностью популяционных частот от 2,4% (аллель А по полиморфизму -2380/А) до 44% (аллель С по полиморфизму -1740/С). При этом частоты 10 полиморфизмов (кроме -174С/С) статистически значимо отличались от частот соответствующих аллелей в ряде других популяций.

2. Полученные в настоящем исследовании данные о количественной представительности основных мембранных белков эритроцитов и их корреляционных взаимосвязях между собой согласуются с данными ранее опубликованных исследований и свидетельствуют о приоритетной представленности анионтранспортного белка, белка 4.5, а- и р-спектринов.

3. Белковые фракции мембран эритроцитов у человека характеризуются выраженной фенотипической изменчивостью, при этом ее величина была наиболее высокой для а- и Р-спектринов, анионтранспортного белка, белка 4.5.

4. Количественное содержание основных мембранных белков человека в норме находится под выраженным генетическим контролем. Наименьшая генетическая детерминированность количественного содержания была установлена для а-спектрина (0,45), наибольшая - для паллидина (0,73).

5. Полиморфизм генов цитокинов оказывает влияние на формирование фенотипических дисперсий исследованных мембранных белков и их количественного содержания по 10 белковым фракциям, а также способствует изменениям характера корреляционных взаимосвязей между отдельными белковыми фракциями в пределах клеточных мембран.

6. Доля вклада совокупности полиморфизмов генов цитокинов в формирование фенотипических дисперсий количественного содержания белковых фракций мембран эритроцитов варьировала от 0,45% (для 2.3-анкирина) до 6,91% (для анионтранспортного белка). Величина вклада изученных локусов в полигенно обусловленную дисперсию количественного содержания мембранных белков составляла ог 0,77% для 2.2-анкирина и до 12,3% у р-спектрина.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АТБ — анионтранспортный белок

БСМЭ — белковый спектр мембран эрироцитов

ГАФД - глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа

TST - глутатион-Б-трапсфераза

ГТ - глюкозный транспортер

МФЗ — мулътифакториальные заболевания

ПААГ - полиакриламидный гель

IL - интерлейкин (interleukin)

TGF - трансформирующий фактор роста (transforming growth factor) TNF - фактор некроза опухоли (tumor necrosis factor)

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Иванов, В.Г1. Частота мутации LeulOPro гена трансформирующего фактора роста pi в курской популяции / В.П. Иванов, А.В. Полоников, Д.А. Белугин // Естествознание и гуманизм: сб. науч. работ. - Томск, 2004. - Т.1, №2.-С. 6.

2. Иванов, В.П. Регуляторные эффекты цитокинов в процессе созревания и дифференцировки эритроцитов / В.П. Иванов, Д.А. Белугин // Университетская наука: взгляд в будущее: сб. тр. юбил. науч. конф. КГМУ и сес. Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН, посвящ. 70-летию КГМУ. - Т.1. -Курск: Курский гос мед ун-т, 2005. - С. 172-173.

3. Лемешко, С.С. Актуальность изучения вклада генетического полиморфизма цитокинов в формирование белкового скелета клеточных мембран эритроцитов / С?С. Лемешко, Д.А. Белугин // Молодежная наука и современность: юбил. межвузов, науч. конф. студентов и молодых ученых, посвящ. 70-летию КГМУ. - Курск: Курский гос мед ун-т, 2005,- С. 64-65.

4. Белугин, Д.А. Анализ частоты полиморфизма Arg25—»Pro гена TGFßl среди жителей Центрально-Черноземного района Российской Федерации / Д.А. Белугин, A.B. Полоников // Сб. работ XII междунар. науч. конф. студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2005». — М.: МГУ, 2005.-С. 419-420.

5. Частота однонуклеотидного полиморфизма -511 С/Т в промоторной области гена IL-lß среди жителей Курской области и перспективы ее изучения при мультифакториальных заболеваниях / Д.А. Белугин, В.П. Иванов, A.B. Полоников, М.А. Солодилова // Мед. генетика. - 2005. - №4. -С. 157-158.

6. Структурно-функциональная организация клеточных мембран и ее изменения при мультифакториальных заболеваниях / В.П. Иванов, A.B. Полоников, М.А. Солодилова и др. // Инновационные методы в образовании, науке и медицине: сб. науч. тр. - Курск, 2005. - С. 40 -44.

7. Иванов, В.П. К вопросу о регуляции пролиферации и дифференцировки клеток эритроидного ряда / В.И. Иванов, Д.А. Белугин, A.B. Полоников // Материалы IV междунар. науч.-практ. конф. «Динамика научных достижений - 2005». - Т. 1.Биология. - Днепропетровск, 2005 -С. 1821.

8. Модифицирующий эффект полиморфизма -511С/Т гена И,Iß на количественную вариабельность белков цитоскелета эритроцитов / 13.Г1. Иванов, Д.А. Белугин, A.B. Полоников и др. // Цитокины и воспаление. -2005-. -Т. 4, №2.-С..80.

9. Association of a promoter -511 С/Т polymorphism of the interlenkin-lß gene with susceptibility to duodenal ulcer disease in Russians of Central-Chernozem region of Russia / V.P. Ivanov, A V. Polonikov, D.A. Belugin et al. // HGVS scientific meeting (Kyoto (Japan), April 2005). - Kyoto, 2005. - P. 124. -ABSTRACT

10.Белугин, Д.А. Популяционная распространенность полиморфизма 174G/C гена IL6 среди жителей курской области / Д.А. Белугин, В.П. Иванов,

A.B. Полоников И Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии: материалы рос. науч. конф. с междунар. участием. В 2-х т. - Т. 1. - Курск: КГМУ, 2006. - С. 15-18

11.Белугин, Д.А. Влияние трансформирующего фактора роста в на некоторые физиологические процессы в норме и при патологии / Д.А. Белугин, В.П. Иванов, A.B. Полоников // Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии: материалы рос. науч. конф. с междунар. участием. В 2-х т. - Т. 1. - Курск: Курский гос. мед. ун-т, 2006. - С. 241-245.

12.Вклад полиморфизма Leu'1'—»Pro гена TGFßl в количественную вариабельность мембранных белков эритроцитов человека / Д.А. Белугин,

B.П. Иванов, A.B. Полоников, И.В. Хорошая // Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии: материалы рос. науч. конф. с междунар. участием. В 2-х т. - Т. I. - Курск: Курский гос. мед. ун-т, 2006. -

C. 422-425.

13.Влияние полиморфизма генов цитокинов на фенотипическую вариабельность количественного содержания цитоскелетных белков эритроцитов человека / Д.Л. Белугин, В.П. Иванов, A.B. Полоников, И.В. Хорошая // Интеграция медицины и образования: сб. материалов, науч. конф. - Курск: Изд-во КГУ, 2006. - С. 6-9.

14.Белугин, Д.А. Распространенность мажорного полиморфизма -509С/Т в 5'-фланкирующем регионе гена TGFßl среди жителей Центральночерноземного района / Д.А. Белугин, В.П. Иванов, A.B. Полоников // Университетская наука: взгляд в будущее: сб. тр. 71-й науч. конф. КГМУ и сес. Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. В 2-х т. - Курск: Курский гос. мед. ун-т, 2006. - Т. 1. - С. 144 - 145.

15.Белугин, Д.А. Анализ ассоциации генетического полиморфизма интерлейкина-lß с количественной вариабельностью мембранных белков эритроцитов / Д.А. Белугин // Молодежная наука и современность: 71-я итог, межвузов, конф. студентов и молодых ученых. - Курск: Курский гос. мед. унт, 2006.-Ч. 1.-С. 52.

16.Белугин, Д.А. Влияние полиморфных вариантов гена TGFßl на количественную вариабельность белков цитоскелета эритроцитов / Д.А. Белугин // Молодежная наука и современность: 71-я итог, межвузов, конф. студентов и молодых ученых. - Курск: Курский гос. мед. vh-t, 2006. - Ч. 1. -С. 53.

17.Шибаев, П.В. Полиморфизм гена фактора некроза опухоли а: популяционная распространенность / П.В. Шибаев, Д.А. Белугин // Молодежная наука и современность: 71 -я итог, межвузов, конф. студентов и молодых ученых. — Курск: Курский гос. мед. ун-т, 2006. - Ч. 1. — С. 86.

18.Влияние генетического полиморфизма интерлейкина 6 на количественную представительность мембранных белков эритроцитов / Д.А. Белугин, В.П. Иванов, A.B. Полоников, И.В. Хорошая // V Всероссийская университетская научно-практическая конф. молодых ученых и студентов по медицине: Сб. материалов. - Тула. 2006. - С. 31 - 32.

19. Analysis of common transforming growth factor bcta-1 gene polymorphisms in gastric and duodenal nicer disease: Pilot study / A.V.Polonikov, V.P.Ivanov, D.A.Belugin et al. // Journal of Gastroenterology and Hepatology. -2006. - doi: 10.111 l/j.l440-1746.2006.04542.x.

Белуги« Дмитрий Александрович (Россия)

Полиморфизм генов цитокинов и его вклад в вариабельность количественного содержания мембранных белков эритроцитов человека

Исследована популяционная распространенность 11 полиморфизмов 6 генов цитокинов (у 340 чел.) и определено количественное содержание 16 основных мембранных белков эритроциов (у 182 чел) в группе неродственных здоровых индивидов русской национальности, постоянно проживающих на территории Курской области. Отмечена специфика распространенности исследованных полиморфизмов в курской популяции по сравнению с другими российским и мировыми популяциями и этническим группами. Выявлена связь данных полиморфных вариантов с изменением количественного содержания 10 и фенотипической вариабельности 15 мембранных белков эритроцитов. Обнаружена специфика взаимного варьирования мембранных белков эритроцитов у носителей различных полиморфных вариантов, отражающая возможные перестройки архитектоники эритроцитарной мембраны в зависимости от комбинации аллелей цитокинов. Определена доля вклада изученных полиморфизмов в формирование обшей фенотипической и полигенно-обусловленной дисперсии количественного содержания мембранных белков эритроцитов. Полученные данные свидетельствуют о влиянии полиморфизмов генов цитокинов на количественные характеристики эритроцитарных мембран.

Belugin Dmitriy Aleksandrovich (Russia) Polymorphism of cytokine genes and its contribution to the quantitative variability of erythrocyte membrane proteins in human

Frequency of 11 polymorphisms of 6 cytokine genes (in 340 individuals) and quantitative variability of 16 basic erythrocyte membrane proteins (in 182 individuals) in unrelated healthy Russian individuals of Kursk region has been investigated by author. This data reveals specific features of investigated polymorphism frequency in Kursk population in comparison with other Russian and foreign populations and ethnic groups. Correlation between these SNP and quantitative changes of 10 erythrocyte membrane proteins and phenotypic variability of 15 proteins has been revealed. The author shows specific intervariation of erythrocyte membrane proteins depending on the different polymorphic variants. This proves that special features of erythrocyte membrane cytoskeleton depend on the cytokine alleles combination. The percentage of polymorphisms contribution into the total phenotypical and polygenic dispersion of erythrocyte membrane proteins quantitative variability has been investigated. These data elucidated the connection between cytokine genes polymorphism and quantitative variability of erythrocyte membrane proteins.

Отпечатано в ООО «Оргсервис—2000» Подписано в печать 05.10.06 Объем 1,25 п.л. Формат 60x90/16. Тираж 100 экз. Заказ № 27/09— 115419, Москва, Орджоникидзе, 3

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Белугин, Дмитрий Александрович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. Обзор литературы.

§1.1. Цитокины, их функциональные свойства и роль в пролиферации и дифференцировке гемопоэтических клеток-предшественников.

§ 1.2. Характеристика биологических свойств цитокинов, регулирующих пролиферацию и дифференцировку клеток эритроидного ряда.

§ 1.3, Аллельный полиморфизм генов цитокинов.

§ 1.4. Организация клеточных мембран.

§ 1.5. Характеристика основных мембранных белков эритроцитов.

ГЛАВА II. Материалы и методы.

§ II. 1. Материал исследования.

§ II.2. Молекулярно-генетические методы.

§ II.3. Биохимические методы.

§ II.4. Статистические методы.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА III. Полиморфизм генов цитокинов в популяциях человека.

§ III. 1. Распространенность полиморфных вариантов генов цитокинов в различных популяциях мира.

§ III.2. Распространенность полиморфных вариантов генов цитокинов в популяции Курской области.

§ III.3. Сравнительный анализ популяционной распространенности полиморфизма генов цитокинов среди жителей Курской области и других популяций мира.

§ III.4. Анализ неравновесия по сцеплению между полиморфизмами генов цитокинов.

§ III.5. Обсуждение.

ГЛАВА IV. Белки клеточных мембран эритроцитов у человека.

§ IV. 1. Количественное содержание основных белков клеточных мембран эритроцитов и их сравнительный анализ в выборках мужчин и женщин.

§ IV. 2. Корреляционные взаимосвязи количественного содержания белковых фракций клеточных мембран в выборках мужчин и женщин и их сравнительный анализ.

§ IV.3. Обсуждение.

ГЛАВА V. Полиморфизм генов цитокинов и количественные характеристики мембранных белков эритроцитов.

§ V. 1. Сравнительный анализ количественных характеристик $ основных мембранных белков эритроцитов у лиц с различными полиморфными вариантами генов цитокинов.

§ V.2. Многомерный статистический анализ связи ДНК-полиморфизма генов цитокинов с количественными характеристиками основных белковых фракций эритроцитов.

§ V.3. Обсуждение.

ГЛАВА VI. Вклад полиморфизма генов цитокинов в количественную вариабельность белков эритроцитарных мембран.

§ VI. 1. Проявление фенотипических эффектов аллелей генов цитокинов в количественной вариабельности основных мембранных белков эритроцитов.

§ VI.2. Оценка вклада генотипических различий по исследуемым локусам в дисперсию количественного содержания мембранных белков.

§ VI.3. Обсуждение.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Полиморфизм генов цитокинов и его вклад в вариабельность количественного содержания мембранных белков эритроцитов человека"

Актуальность

Цитокины являются полипотентными веществами белковой природы, обладающими множественными биологическими эффектами. Они представляют собой трансмиттеры межклеточных взаимодействий, с их помощью осуществляется контроль большинства физиологических процессов [40, 150]. Обладая значительной вариабельностью, гены цитокинов характеризуются наличием однонуклеотидных полиморфизмов, ассоциированных с изменением синтеза биохимических продуктов [44]. Данные полиморфизмы представляют собой удобный объект исследований, позволяющий выявить связь генов, в которых они локализованы, с регуляцией тех или иных физиологических процессов [1].

В последнее время является общепризнанной роль цитокинов в регуляции пролиферации и дифференциации эритроидных клеток-предшественниц [17, 301]. В процессе эритропоэза формируется специфическая структура эритроцитарной мембраны, которая является одним из главнейших критериев зрелости эритроидных клеток, от нее во многом зависит нормальное функционирование циркулирующих эритроцитов [75]. Сложная структурная организация цитоплазматических мембран эритроцитов во многом определяются белковыми молекулами, являющимися их важнейшими компонентами [4, 32]. Будучи тесно связанными друг с другом в структуре мембраны, белки демонстрируют взаимозависимость их количественного содержания [32]. Это приводит к тому, что в ответ на изменение продукции одного белка может наблюдаться изменение содержания в мембране целого ряда других белков, и, как следствие, - нарушение выполнения своих функций как мембраной, так и всей клеткой, что, в свою очередь, может быть причиной развития патологических состояний. Изложенное подтверждается результатами исследований вовлеченности клеточных мембран в патогенез ряда наследственных заболеваний [33, 69]. В этой связи представляется важным изучение генетического контроля за формированием белковых структур мембран эритроцитов, который осуществляется не только конкретными генами, кодирующими определенные мембранные белки, но и включает в себя массу факторов, регулирующих их экспрессию, посттрансляционную модификацию, а также процесс включения белков в состав мембраны [190, 312,326].

Одними из наиболее вероятностных факторов, участвующих в регуляции формирования белковой структуры клеточных мембран, представляются цитокины, проявляющие свои свойства на всех этапах созревания эритроидных клеток [31, 161, 301]. Однако этот аспект их влияния на эритропоэз еще не получил должного освещения, что и определило проведение настоящего исследования.

Цель.

Целью настоящей работы являлось изучение популяционных особенностей распределения полиморфизма генов цитокинов и оценка его вклада в вариабельность количественного содержания основных белков мембран эритроцитов человека. i'

Задачи.

1. Исследовать распределение однонуклеотидных полиморфизмов шести генов цитокинов по одиннадцати точечным заменам (-511 С/Т IL-lfr, S27P и -16Т/СIL-3; -174G/C IL-&, Т113МIL-9; L10P, R25P и -509С/Т TGF01; -308G/A, -238G/A и -863С/А TNFa) среди населения Курской области и сопоставить его с распределением одноименных полиморфизмов среди других российских и мировых популяций;

2. Изучить количественное содержание основных белков мембран ^ эритроцитов у человека и особенности их вариабельности у мужчин и женщин;

6. Определить вклад аллельного полиморфизма генов цитокинов в формирование фенотипической вариабельности количественного содержания белков эритроцитарных мембран.

Научная новизна работы.

Впервые проведено комплексное исследование 11 полиморфизмов 6 генов цитокинов, вовлеченных в регуляцию эритропоэза у человека. В результате исследования получены новые данные о влиянии полиморфизмов генов цитокинов на формирование количественной представительности основных белков мембран эритроцитов человека. Оценен вклад аллельных вариантов в формирование общей фенотипической и генетически обусловленной дисперсии количественной представительности отдельных белковых фракций эритроцитарых мембран. Установлена связь отдельных полиморфных вариантов генов цитокинов с количественным содержанием основных белковых продуктов, входящих в состав мембран эритроцитов. Полученные данные о сопряженности генетического полиморфизма цитокинов с характером взаимного варьирования количественного содержания мембранных белков эритроцитов расширяют представления о роли генетических факторов в формировании белковой структуры эритроцитарных мембран.

Научно-практическое значение работы.

Результаты работы представляют практический интерес для клеточной биологии, цитологии, молекулярной, клеточной и популяционной генетики, биоинформатики, нормальной физиологии человека, биохимии, гематологии и других научных дисциплинах. Они могут быть использованы в учебных процессах в высших учебных заведениях на соответствующих кафедрах.

Полученные данные создают основу для более глубокого понимания молекулярно-генетических механизмов регуляции биосинтеза белков мембран эритроцитов и открывают перспективы для разработки методов управления экспрессией их генов при различных заболеваниях человека. Результаты исследования могут найти применение в цитокиновой и антицитокиновой терапии, расширяя представления о вероятных побочных эффектах названных методов лечения.

Положения, выносимые на защиту.

1. В популяции Курской области гены цитокинов характеризуются значительной вариабельностью: оценки частот аллелей рассмотренных генных вариантов лежат в пределах от 2.4% для -238G/A до 44% для -174G/C, что позволяет рассматривать изменчивость названных генов как полиморфизм, а не мутации.

3. Индивиды, обладающие разными полиморфными вариантами генов цитокинов, характеризуются определенными различиями в количественном содержании и фенотипической вариабельности основных мембранных белков эритроцитов.

Полиморфизм генов цитокинов вносит вклад в формирование вариабельности количественного содержания основных мембранных белков эритроцитов, определяя от 0,45% дисперсии 2.3-анкирина до 6.91% дисперсии АТБ.

Апробация работы и публикации.

Результаты работы представлены на 70-й и 71-й итоговых научных конференциях КГМУ и сессиях Центрально-Черноземного научного центра РАМН (Курск, 2005, 2006), XII международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2005» (Москва, 2005), V съезде Российского общества медицинских генетиков (Уфа, 2005), научных конференциях студентов и молодых ученых КГМУ (Курск, 2005, 2006), Всероссийском научном симпозиуме с международным участием «Цитокины. Стволовая клетка. Иммунитет» (Новосибирск, 2005), IV международной научно-практической конференции «Динамика научных достижений - 2005» (Днепропетровск, 2005), Российской научной конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2006), научной конференции «Интеграция медицины и образования» (Курск, 2006), V Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине (Тула, 2006). По материалам исследования опубликовано 19 работ.

Объем и структура диссертации.

Работа изложена на 163 страницах машинописного текста, включает в себя 12 таблиц, 6 рисунков. Состоит из списка сокращений, введения, 6 глав, заключения, выводов и 12 приложений. Библиографический список включает 360 источников, из них 94 отечественных и 266 иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Белугин, Дмитрий Александрович

126 ВЫВОДЫ

1. Исследованные 11 полиморфных вариантов 6 генов цитокинов среди жителей Курской области характеризуются широкой вариабельностью популяционных частот от 2,4% (аллель А по полиморфизму -238G/A) до 44% (аллель С по полиморфизму -174G/C). При этом частоты 10 полиморфизмов (кроме -174G/C) статистически значимо отличались от частот соответствующих аллелей в ряде других популяций.

3. Белковые фракции мембран эритроцитов у человека характеризуются выраженной фенотипической изменчивостью, при этом ее величина была наиболее высокой для а- и (3-спектринов, анионтранспортного белка, белка 4.5.

0,45%) (для 2.3-анкирина) до 6,91% (для анионтранспортного белка).

Величина вклада изученных локусов в полигенно обусловленную дисперсию количественного содержания мембранных белков составляла от 0,77% для 2.2-анкирина и до 12,3% у (3-спектрина.

128

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Целью настоящей работы являлось изучение популяционной распространенности генетического полиморфизма цитокинов и его вклада в вариабельность количественного содержания основных мембранных белков эритроцитов человека. Для этого проводили анализ ассоциации особенностей количественного состава БСМЭ как с различными генотипами, так и с отдельными аллелями.

Установленные популяционные частоты 11 исследованных полиморфных вариантов генов цитокинов указывают на высокую степень аллельного разнообразия выборки по исследуемым маркерам, кроме -238G/A и -863С/А. Высокие частоты полиморфных вариантов могут быть одной из причин межиндивидуальных различий в характере течения физиологических процессов, контролируемых генами, в которых исследуемые полиморфизмы локализованы. Последнее, в свою очередь, может быть связано с межиндивидуальными различиями в предрасположенности к некоторым мультифакториальным заболеваниям, вариабельностью их клинической картины и может влиять на определение стратегии лечения [21, 34, 65, 66].

Анализ литературных данных по генотипированию изученных полиморфизмов и их сравнение с собственными результатами позволил установить как специфичность распределения полиморфных вариантов генов цитокинов в мировых этнических группах (исключением был -174G/C), так и определенные отличия в частотах их аллелей и генотипов популяции Курской области по сравнению с другими этносами [39, 97, 98, 112, 236, 246]. В наименьшей степени курская популяция отличалась от других групп по полиморфизмам -174G/C и R25P. Специфичность популяционной распространенности большинства полиморфизмов говорит о наличии генетической подразделенности населения Европы (взятые для сравнения данные были в большинстве случаев по европейским популяциям) и отражает формирование своеобразия популяций на уровне ДНК в процессе этногенеза, в результате которого в каждой популяции формируется характерный лишь для нее «генетический профиль». Это важно в той связи, что существуют множество результатов исследований, освещающих особенности распространения МФЗ в различных популяциях, что может иметь одной из причин именно межпопу ляционные различия в распространении полиморфных вариантов определенных патогенетически значимых генов [21, 34, 65, 70].

На следующем этапе было проведено изучение представительности основных мембранных белков в общей выборке здоровых индивидов. В результате чего был выявлен высокий уровень дисперсии в целом для всех белковых фракций, что не противоречит проведенным ранее исследованиям [32]. Это может быть объяснено тем, что количественное содержание основных белковых фракций эритроцитарных мембран отражает фенотипическое проявление не только экспрессии генов, кодирующих непосредственно сами мембранные белки, но и также генов, чьи белковые продукты участвуют в осуществлении контроля за формированием БСМЭ. В настоящее время в литературе описано большое количество факторов регуляции эритропоэза, которые потенциально могут быть вовлечены в дифференцировку эритроцитарных мембран [89, 135, 159, 181, 209, 214, 301]. Значительное количество регулирующих факторов, по всей видимости, и приводит к значительной межиндивидуальной вариабельности количественного содержания мембранных белков. По количественному содержанию наиболее представленными белками в мембранах являлись АТБ, белок 4.5, а- и [3-спектрины, наименее представленными - 2.2- и 2.3-анкирины, а также (3-тропомиозин. Сравнительный анализ количественного содержания мембранных белков в группах мужчин и женщин не выявил различий ни по средним значениям признаков в группах, ни по дисперсиям, ни по особенностям взаимного варьирования. В этой связи можно полагать, что половая принадлежность не оказывает существенного влияния на количественное содержание основных мембранных белков эритроцитов человека, что не противоречит литературным данным [32] и позволяет рассматривать исследуемую выборку как единую статистическую закономерность.

Важным элементом проведенной работы было изучение взаимосвязи генетического полиморфизма исследуемых цитокинов с особенностями количественной представительности мембранных белков эритроцитов. Нами установлено, что вариабельность изученных генов была связана со статистически значимыми изменениями количественного содержания целого ряда как периферических цитоскелетных, так и интегральных белков. Полиморфизмы -16Т/С и S27P гена IL3 были ассоциированы с изменением количественного содержания белка Р-тропомиозина в группах гомозигот, СС и РР, по сравнению с редкими гомозиготами, СС и РР и с гетерозиготами, СТ и SP. Обнаружено увеличение среднего содержания 2.3-анкирина у редких гомозигот (СС) по полиморфизму -174G/C гена IL6, которое носило значимый характер по сравнению с GC-гетерозиготами. Наличие у индивидов мутантного аллеля М по полиморфизму Т113М гена IL9 ассоциировалось со статистически значимым увеличением среднего значения количественного содержания а- и p-спектринов. Полиморфизмы L10P и -509С/Т гена TGFfil были связаны со статистически значимым увеличением среднего значения количественного содержания дематина у лиц, несущих мутантные аллели Р и Т. Наличие редкого Р-аллеля полиморфизма R25P того же гена TGFfil было связано со статистически значимым снижением количественного содержания p-спектрина и 2.1-анкирина. Полиморфизм -308G/A гена TNFa отражался на увеличении количественного содержания белков 4.5.1 и 4.1, в то время как носители аллеля А по -863С/А того же гена отличались увеличенным содержанием ГАФД и Р-тропомиозина. Кроме того, все полиморфизмы, кроме -238G/A, демонстрировали связи с изменением к; дисперсии количественного содержания мембранных белков, что подтверждает их участие в формировании БСМЭ. Подобные изменения количественной представительности мембранных белков могут отражаться на механических свойствах мембраны и характере трансмембранного переноса ионов, на интенсивности проходящих в клетке биохимических процессов, обеспечиваемых мембранассоциированными ферментами [75, 95, 108, 201, 279, 297] и, в целом, согласуются с характерными для гемопоэтических цитокинов биологическими свойствами по отношению к регуляции созревания клеток эритроидной линии [89, 135, 159, 181, 209, 214, 301].

Механизмы, лежащие в основе обнаруженных ассоциаций, могут быть связаны с особенностями связи полиморфизма генов цитокинов с уровнем биосинтеза биохимических продуктов, которых они кодируют, что, в свою очередь, может сказываться на регулируемых цитокинами физиологических процессах, в том числе на созревании эритроидных клеток, в ходе которого происходит формирование специфических структур плазматической мембраны эритроцита [75]. По всей видимости мы и обнаруживаем изменения количественных характеристик, которые образовались еще во время эритропоэза и сохранились у зрелых эритроцитов.

Изменения количественных характеристик мембран эритроцитов в связи с носительством определенных генотипов касались также и некоторых перестроек архитектоники БСМЭ. В первую очередь претерпевала изменения группа сопряжения, включающая в себя а- и (З-тропомиозины, ГАФД и FST, которая в большинстве случаев и определяла специфичность взаимного варьирования количественного содержания мембранных белков у обладателей разных генотипов. Отличия в дендрограммах, построенных по результатам кластерного анализа для обладателей разных генотипов, касались также варьирования степени сопряженности количественной вариабельности мембранных белков, что в совокупности с обнаруженными перестройками архитектоники мембраны, вполне может приводить к межиндивидуальным различиям в физико-механических свойствах эритроцитарных мембран [32]. Однако сохранность большинства основных кластеров и групп сопряжения мембранных белков, наводит на мысль, что эти возможные изменения свойств мембран не носят критический характер. Хотя, вполне вероятно, что при определенной комбинации полиморфных вариантов генов гемопоэтических цитокинов подобные изменения содержания компонентов эритроцитарных мембран могут носить более выраженный характер. Это может проявляться в существенном дисбалансе основных связующих и функциональных элементов мембран, наблюдаемом при ряде заболеваний мультифакториальной природы [33, 68, 69].

Анализ вклада генетического полиморфизма цитокинов количественную вариабельность мембранных белков позволил установить, что роль отдельных полиморфизмов в формировании общей фенотипической дисперсии основных белковых фракций находится в достаточно широких пределах от 0% (R25P по актину и (3-тропомиозину, -238G/A по (3-тропомизину и -863С/А по 2.1- и 2.3-анкиринам и дематину) до 15,3% (-308G/A по АТБ). Доля вклада генетического полиморфизма совокупности анализированных маркеров в формирование общей фенотипической дисперсии количественного содержания белковых фракций мембран эритроцитов варьировала от 0,45% (2.3-анкирин) до 6,91% (АТБ). Величина вклада изученных локусов в полигенно обусловленную дисперсию количественного содержания мембранных белков составила от 0,77% у 2.2-анкирина и до 12,3% у [3-спектрина. Приведенные значения свидетельствует в пользу того, что исследованные полиморфизмы генов цитокинов, обладая собственным эффектом в формировании количественной вариабельности большинства мембранных белков, являются частью обширной группы факторов, обусловливающих изменчивость фенотипической дисперсии белковых фракций, что согласуется с наличием большого количества регуляторов созревания и дифференцировки эритроидных клеток-предшественников [89,135,159,181, 209, 214, 301].

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Белугин, Дмитрий Александрович, Курск

1. Авдошина, В.В. Ал дельный полиморфизм генов цитокинов при хроническом вирусном гепатите С / В.В. Авдошина, В.И. Коненков // Система цитокинов: теоретические и клинические аспекты. -Новосибирск: Наука, 2004. 324.

2. Андерсен, Л. Клеточный иммунный ответ на инфекцию Н. pylori / Л. Андерсен, А. Норгард, М. Беннедсен // Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии. М., 1999. - С. 46 - 53.

3. Арефьев, В.А. Англо-русский толковый словарь генетических терминов / В.А.Арефьев, Л.А.Лисовенко. М.: ВНИРО, 1995. - 407 с.

4. Артюхов, В. Г. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами: учеб. пособие / В.Г. Артюхов, М.А. Наквасина. Воронеж: Изд-во Воронежского гос. унта, 2000.-296 с.

5. Баркова, Э.Н. Ультраструктура эритрона / Э.Н. Баркова // Физиология системы крови. Физиология эритропоэза. Л., 1979. - С. 41 - 71.

6. Болдырев, А. А. Биологические мембраны и транспорт ионов: учеб. пособие / А.А. Болдырев. М.: Изд-во МГУ, 1985. - 208 с.

7. Болдырев, А. А. Матриксная функция биологических мембран / А.А. Болдырев // Соросов, образоват. журн. 2001. - № 7. - С. 2 - 8.

8. Болдырев, А. А. Строение и функции биологических мембран / А.А. Болдырев. -М.: Знание, 1987. 125 с.

9. Буеверов, А.О. Медиаторы воспаления и поражения поджелудочной железы / А.О. Буеверов // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. 1999. - № 4. - С. 15-18.

10. Ю.Введение в молекулярную медицину / под ред. М.А.Пальцева. М.: Медицина, 2004. - 496 с.

11. Ветра, Я.Я. Цитокины / Я.Я. Ветра, Л.В. Иванова, И.Э. Крейле // Гематология и трансфузиология. 2000. - Т. 45. № 4. - С. 45-49.

12. Геннис, Р. Биомембраны: Молекулярная структура и функции / Р. Геннис. -М.: Мир, 1997.-624 с.

13. Геномная энциклопедия человека. Каталог-справочник картированных генов / Вестн. Ком. СССР по науке и технике АНСССР. М., 1991.- 443 с.

14. Гиндилис, В. М. Некоторые аспекты генетического анализа полигенных признаков человека на основе семейных корреляций / В.М. Гиндилис, С.

15. A. Финогенова, Л. А. Животовский // Проблемы генетической психофизиологии человека. М.: Медицина, 1978. - С. 196 - 221.

16. Гольдберг, Е.А. Динамическая теория кроветворения и роль цитокинов в регуляции гемопоэза / Е.А. Гольдберг, Е.М. Дыгай, В.З. Жданов // Мед. иммунология. 2001. - Т. 3, № 4. - С. 487.

17. Гольдберг, Е.А. Механизмы локальной регуляции кроветворения / Е.А. Гольдберг, A.M. Дыгай, Е.Ю. Шерстобоев. Томск: SST, 2000. - 148 с.

18. Гончарова, Е.И. Белки цитоскелета эритроцитов / Е.И. Гончарова, Г.П. Пинаев // Цитология. 1988. - Т.ЗО, №1. - С. 5 -18.

19. Горбу нов, Н. В. Влияние структурных модификаций мембранных белков на липид-белковое взаимодействие в мембране эритроцитов человека / Н.

20. B. Горбунов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993. - Т. CXVI, № 11.-С. 488-491.

21. Громова, А.Ю. Полиморфизм генов семейства IL-1 человека / А.Ю. Громова, А.С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 2.1. C. 3-12.

22. Гудкова, Р.Б. Сывороточные цитокины при глютеновой энтеропатии / Р.Б. Гудкова, С.Г. Жукова, Л.М. Крумс // Рос. гастроэнтеролог, журн. 2001.2. -С. 121.

23. Гусев, Н. Б. Движение немышечных клеток и реорганизация актиновых микрофиламентов / Н.В. Гусев // Соросов, образоват. журн. 2001. - № 7. -С. 9-16.

24. Дерябин, В. Е. Многомерная биометрия для антропологов / В.Е. Дерябин. М.: Изд-во МГУ, 1983. - 227 с.

25. Дубцова, Е.А. Содержание цитокинов при часто рецидивирующей форме язвенной болезни двенадцатиперстной кишки / Е.А. Дубцова, Г.Н. Соколова, И.Е. Трубицына // Мед. иммунология. 2002. - Т. 4, № 2. - С. 148.

26. Дюран, Б. Кластерный анализ / Б. Дюран, П. Одел. М.: Статистика, 1977. -С. 38.

27. Елкманн, В. Ингибирование продукции эритропоэтина провоспалительными цитокинами / В. Елкманн, Я. Фандрей, X. Пагел // Гематология и трансфузиология. 1997. - Т.42, №1. - С. 16 - 19.

28. Иванов, В. П. Белки клеточных мембран и сосудистые дистонии у человека / В. П. Иванов, А. В. Полоников, М. А. Солодилова. Курск: КГМУ,КМИ, 2004.-280 с.

29. Изменения состава мембран эритроцитов и гормонального профиля наэтапах развития гипертонической болезни у больных молодого возраста / В.П. Гейченко, А.В. Курята, К.Г. Карапетян, И.В. Куделя// Врачебное дело. -2001. -№5.-С. 140-141.

30. Имангулова, М.М. Полиморфизм кластера гена интерлейкина 1 у больных туберкулезом легких / М.М. Имангулова, А.Р. Бикмаева, Э.К. Хуснутдинова и др. // Цитокины и воспаление. 2005. - № 1. - С. 36 - 41.

31. Использование модели осложненного течения раневого процесса для изучения возможности местного применения провоспалительных цитокинов / М.А. Анциферова, Г.А. Александров, А.А. Казаков и др. // Мед. иммунология. 2002. - Т. 4, №2. - С. 346 - 347.

32. Казаков, А.А. Влияние IL-1 на функциональную активность фагоцитов / А.А. Казаков, М.А. Анциферова // Мед. иммунология. 2002. - Т. 4, № 2. -С. 122-123.

33. Казеннов, A.M. Роль белков мембранного скелета безъядерных эритроцитов в функционировании мембранных ферментов / A.M. Казеннов, М.Н. Маслова, А.Д. Шагабодов // Докл. АН СССР. 1990 -Т.312, №1. - С. 223-226.

34. Казеннов, A.M. Структурно биохимические свойства мембраны безъядерных эритроцитов / A.M. Казеннов, М.Н. Маслова // Физиолог, журн. СССР им. И.М. Сеченова. - 1987. - Т.73, №12. - С. 1587 - 1594.

35. Кашкин, К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность / К.П. Кашкин // Клинич. лаб. диагностика. 1998. - №11. - С. 21-32.

36. Кендалл, М. Д. Статистические выводы и связи / М.Д. Кендалл, A.M. Стьюарт. -М., 1973.-С. 415-416.

37. Кендалл, М. Д. Теория распределений / М.Д. Кендалл, A.M. Стьюарт. -М.: Наука, 1966.-С. 323.

38. Клячко, Н. Л. Биологическая подвижность и полимеризация актина / Н.Л. Клячко // Соросов, образоват. журн. 2000. - № 10. - С. 5 - 9.

39. Коненков, В.И. Структурные основы и функциональная значимость аллельного полиморфизма генов цитокинов человека и их рецепторов / В.И. Коненков, М.В. Смольникова // Мед. иммунология. 2003. - Т.5, №1-2.-С. 11-28.

40. Кулинский, В.И. Биологическая роль глутатиона / В.И. Кулинский, Л.С. Колесниченко // Успехи соврем, биологии. 1990. - Т. 110, вып. 1(4). - С. 20-33.

41. Лакин, Г.Ф. Биометрия: учеб. пособие для биол. специальностей вузов / Г.Ф. Лакин. 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Высш. школа, 1990. - 352 с.

42. Лильин, Е. Т. Введение в современную фармакогенетику / Е. Т. Лильин, В. И. Трубников, М. М. Ванюков. М.: Медицина, 1984. - С. 106 - 146.

43. Лось, Д. А. Восприятие сигналов биологическими мембранами: сенсорные белки и экспрессия генов / Д. А. Лось // Соросов, образоват. журн. 2001. -№9.-С. 14-22.

44. Ляшенко, А.А. Цитокины и факторы роста: вопросы классификации / А.А. Ляшенко, В.Ю. Уваров // Доказательная медицина: молекулярная терапия в клинике внутренних болезней. М., 1999. - С. 150 - 168.

45. Мазо, В. К. Глутатион как компонент антиоксидантной системы желудочно-кишечного тракта / В.К. Мазо // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 1. - С. 47 - 53.

46. Маниатис, Т. Методы генной инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Д. Сэмбрук. М.: Мир, 1984. - 480 с.

47. Медуницын, Н.В. Медиаторы иммунной системы / Н.В. Медуницын // Рос. иммунология. 1999. - № 4. - С. 234 - 236.

48. Мембраны и болезнь: пер. с англ. / под ред. Л. Болис, Д.Ф. Хоффман, А. Лифа. -М.: Мир, 1980. 408 с.

49. Моршакова, Е.В. Эритропоэз и его регуляция в эмбриональном, фетальном и неонатальном периодах / Е.В. Моршакова, А.Д. Павлов, А.Г. Румянцев // Рос. вестн. перинатологии и педиатрии. ~ 1999. Т.44, №3. -С. 12-16.

50. Мушкамбаров, Н. Н. Молекулярная биология: учеб. пособие для студентов мед. вузов / Н. Н. Мушкамбаров, С. Л. Кузнецов. М.: Мед. информ. агентство, 2003. - 544 с.

51. Особенности иммунного ответа у больных хроническим вирусным гепатитом С / В.Т. Ивашкин, С.Н. Мамаев, Е.А. Лукина и др. // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2002. - Т. 11. № 3. -С. 24 - 29.

52. Павлов, А.Д. Молекулярная структура регуляции эритрона / А.Д. Павлов // Гематология и трансфузиология. 1988. - Т.ЗЗ, №5. - С. 12-14.

53. Павлов, А.Д. Регуляция эритропоэза: физиологические и клинические аспекты / А.Д. Павлов М.: Медицина, 1987. - 272 с.

54. Павлов, А.Д. Эритропоэтин: достижения и перспективы / А.Д. Павлов // Гематология и трансфузиология. 1997. - №1. - С. 25 - 29.

55. Пальцев, М.А. Межклеточные взаимодействия / М.А. Пальцев, А.А. Иванов, С.Е. Северин. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2003. -288 с.

56. Парфенов, А.И. Энтерология / А.И. Парфенов. М., 2002. - С. 380 - 412.

57. Повещенко, А.Ф. Биология эритропоэтина и его функции в лимфоидной и нервной ткани / А.Ф. Повещенко, В.В. Абрамов, В.А. Козлов // Успехи соврем, биологии. 2002. - Т. 122, №5. - С. 480 - 488.

58. Полиморфизм генов IL1B (+3957) и TNFA (-308) в патогенезеревматоидного артрита / О.А. Герцог, С.В. Сенников, Л.П. Коненкова и др. // Цитокины и воспаление. 2005. - № 1. - С. 52 - 56.

59. Полиморфизм генов интерлейкинов и их рецепторов: популяционная распространенность и связь с атопической бронхиальной астмой / М.Б. Фрейдин, В.П. Пузырев, Л.М. Огородова и др. // Генетика. 2002. - Т.38, №12.-С. 1-9.

60. Полиморфизм фактора некроза опухоли а у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом / Т.А. Хабелова, В.А. Вахитов, Д.Х. Хунафина и др. // Мед. генетика. 2005. - Т.4. №6. - С. 282.

61. Постнов, Ю.В. Первичная гипертензия как патология клеточных мембран /Ю.В. Постнов, С.Н. Орлов. -М.: Медицина, 1987. 190 с.

62. Прахин, Е.И. Роль структурно-функционального состояния плазматических мембран в патогенезе различных нозологических форм атопических заболеваний у детей / Е.И. Прахин, В.И. Прохоренков, С.Ю. Терещенко // Педиатрия. 1997. - № 2. - С. 14 - 19.

63. Пузырев, В.П. Состояние и перспективы геномных исследований в генетической кардиологии / В.П. Пузырев // Вестн. РАМН. 2000. - №7. -С. 28-33.

64. Пустыльник, Е.И. Статистические методы анализа и обработки наблюдений / Е.И. Пустыльник. М.: Наука, 2001. - 288 с.

65. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. М., МедиаСфера, 2003. - 312 с.

66. Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. М.: Мир, 2000.-С. 169- 175.

67. Рябов, С.И. Молекулярно-генетические аспекты эритропоэза / С.И. Рябов, Г.Д. Шостка. М., 1973. - 280 с.

68. Сторожок, С.А. Молекулярная структура мембран эритроцитов и их механические свойства / С.А. Сторожок, А.Г. Санников, Ю.М. Захаров. -Тюмень: Изд-во Тюменского гос. ун-та, 1997. 140 с.

69. Ткачук, В. А. Мембранные рецепторы и внутриклеточный кальций / В.А. Ткачук // Соросов, образоват. журн. 2001. - № 1. - С. 10-15.

70. Трубников, В. И. Многомерный генетический анализ антропометрических показателей. Сообщ. 1. Генетическая корреляция между признаками / В.И. Трубников, В.М. Гиндилис // Вопросы антропологии. М.: Медицина, 1980.-Вып. 64.-С. 94- 106.

71. Трубников, В. И. Прикладная генетика психических болезней: дис. . д-ра биол. наук / В.И. Трубников. М., 1992. - 233 с.

72. Труфакин, В.А. Цитокины и биоритмы / В.А. Труфакин, А.В. Шурлыгина // Мед. иммунология. 2001. - № 4. - С. 477 - 486.

73. Урбах, В. Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В.Ю. Урбах. М.: Медицина, 1975. - 295 с.

74. Фаллер, Д.М. Молекулярная биология клетки: рук-во для врачей / Д.М. Фаллер, Д. Шилдс. М.: БИНОМ-Пресс, 2003. - 272 с.

75. Фрейдлин, И.С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуляционной сети / И.С. Фрейдлин // Иммунология. 1995. - №3. - С. 44 -48.

76. Фрейдлин, И.С. Регуляторные функции првоспалительных цитокинов и острофазных белков / И.С. Фрейдлин, П.Г. Назаров // Вестн. РАМН. -1999.-№5.-С. 28-33.

77. Хаитов, P.M. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. М.: Медицина, 2000. - 432 с.

78. Царегородцева, Т.М. Цитокины в гастроэнтерологии / Т.М. Царегородцева, Т.И. Серова. М.: Анахарсис, 2003. - 96 с.

79. Цитокины и иммунный ответ на вакцины против вирусных гепатитов / Ж.И. Авдеева, Н.А. Алпатова, Н.В. Медуницын и др. // Мед. иммунология. -2002. Т. 4, №2. - С. 225.

80. Ченцов, Ю. С. Введение в клеточную биологию: учебник для вузов / Ю.С.

81. Ченцов. М.: Академкнига, 2004. - 495 с. 88.Чернух, A.M. Микроциркуляция / A.M. Чернух, П.Н. Александров, О.В.

82. Алексеев. 2-е изд., стереотип. - М.: Медицина, 1985. - 432 с. 89.Чертков, И.Л. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение / И.Л.

83. Ярилин, А.А. Иммунологические функции тимуса / А.А. Ярилин, И.В. Мирошниченко, В.П. Шичкин // Итоги науки и техники / ВНИИТИ. Сер.: Иммунология. 1990. - Т 23. - 192 с.

84. Ярилин, А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии / А.А. Ярилин // Иммунология. 1997. - № 5. - С. 7 -13.

85. A band 3-based macrocomplex of integral and peripheral proteins in the RBC membrane / L. J. Bruce, R. Beckmann, M. L. Ribeiro et al. // Blood. 2003. -Vol. 101, № 10.-P. 4180 -4188.

86. A common IL-1 complex haplotype is associated with an increased risk of atopy / T. Pessi, J. Karjalainen, J. Hulkkonen et al. // Journal of Medical Genetics. 2003. - Vol. 40. - P. 66-69

87. A Gain of Function TGFB1 Polymorphism May Be Associated With Late Stage Prostate Cancer / A. Ewart-Toland, J.M. Chan, J. Yuan et al. // Cancer Epidemiology Biomarkers & Prevention. 2004. - Vol. 13. - P. 759-764.

88. A Transforming Growth Factor|31 Signal Peptide Variant Increases Secretion in Vitro and Is Associated with Increased Incidence of Invasive Breast Cancer / A.M. Dunning, P.D. Ellis, S. McBride et al. //Cancer Research. 2003. - Vol. 63.-P. 2610-2615.

89. Aaronson, D.S. A road map for those who don't know JAK-STAT / D.S Aaronson, C.M. Horvath // Science. 2002. - Vol. 296. - P. 1653 - 1655.

90. Abbas, A.K. Cellular and molecular immunology / A.K. Abbas. -Philadelphia: W.B. Saunders, 2000.

91. Active and inactive protein kinases: Structural basis for regulation / L.N. Johnson, M.E.M. Noble, D. Owen // Cell. 1996. -Vol. 85. - P. 149-158.

92. Active TGF-b in wound repair / L. Yang, C.X. Qiu, A. Ludlow et al. // Amer. J. Pathol.-1999.-Vol. 154.-P. 105 111.

93. Aggarwal, E.B.B. Human cytokines: their role in disease and therapy / E.B.B. Aggarwal, R.K. Puri. -N.Y.: Blackwell Science, 1995. 736 p.

94. Allele associations reveal four prominent haplotypes at the human interleukin-6 (IL-6) locus / N. Jordanides, J. Eskdale, R. Stuart, G. Gallagher // Gen. Immun. 2000. - Vol. 1 - P. 451 -455.

95. Alphall-spectrin is an in vitro target for caspase-2, and its cleavage is regulated by calmodulin binding / B. Rotter, Y. Kroviarski, G. Nicolas et al. // Biochem J. -2004.- Vol.378, N15(Pt 1).-P. 161-168.

96. An, X.L. Modulation of band 3-ankyrin interection by protein 4.1. Functional implications in regulation of erythrocyte membrane mechanical properties / X.L. An, Y. Takakuwa, Nunomura. // Biol. Chem. 1996. ~ Vol.271,N52.-P. 33187-33191.

97. Analysis of integral membrane protein contributions to the deformability and stability of the human erythrocyte membrane / H. M. Van Dort, D. W. Knowles, J. A. Chasis et al II J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276, № 50. - P.46968 46974.

98. Analysis of polymorphic TGFB1 codons 10, 25, and 263 in a German patient group with non-syndromic cleft lip, alveolus, and palate compared with healthy adults / C. Stoll, S. Mengsteab, D. Stoll et al. // BMC Med Genet. -2004.-Vol. 5.-P. 15-20.

99. Analysis of transforming growth factor J31 gene polymorphisms in patients with systemic sclerosis / A. Crilly, J. Hamilton, C.J. Clark et al. // Annals of the Rheumatic Diseases. 2002. - Vol. 61.-P. 678-681.

100. Ankyrins, multifunctional proteins involved in many cellular pathways / A. Hryniewicz-Jankowska, A. Czogalla, E. Bok, A.F. Sikorsk // Folia Histochem. Cytobiol. 2002. - Vol.40, N3. - P. 239-249.

101. Association between transforming growth factor betal gene polymorphisms and IgA nephropathy / S. Carturan, D. Roccatello, E. Menegatti et al. // J Nephrol. 2004. - Vol. 17. - P. 786-793.

102. Association of a T29C polymorphism of the transforming growth factor-pi gene with genetic susceptibility to myocardial infarction in japanese / M. Yokota, S. Ichihara, T.-L. Lin et al. // Circulation. 2000. - Vol. 101. - P. 2783.

103. Association study of three polymorphisms of TGF-|31 gene with Alzheimer's disease / L. Araria-Goumidi, J.C. Lambert, D.M.A. Mann et al. // Journal of Neurology Neurosurgery and Psychiatry. 2002. - Vol.73. - P. 6264.

104. Autoantibodies to cytokines friends or foes? / K. Bendtzen, M. Stevenson, V. Jonsson, E. Hippe // Immunol. Today. - 1990. - Vol. 11. - P. 167- 169.

105. Bailly, S. Polymorphic tandem repeat region in interleukin-1 alpha intron 6 / S.Bailly, F.S.de Giovine, G.W.Duff// Hum. Genet. 1993. - Vol.91. - P. 8586.

106. Balkwill, F.R. The cytokine network / F.R. Balkwill, F. Burke // Immunology Today. 1989. - N10. - P. 299-304.

107. Band-3 protein function in human erythrocytes: effect of oxygenation-deoxygenation / A. Galtieri, E. Tellone, L. Romano et al. // Biochim. Biophys. Acta.-2002.-Vol. 1564, № 1.-P. 214 218.

108. Bencsath, M. Biomolecular Cytokine Therapy / M. Bencsath, A. Blaskovits, J. Borvendeg // Pathology Oncology Research. 2003. - Vol. 9, N l.-P. 24-29.

109. Bennett, V. Brain adducin: a protein kinase С substrate that may mediate site-directed assembly at the specrin-actin junction / V. Bennett, K. Gardner, J. Steiner // J. Biol. Chem. 1988. - Vol. 263. - P. 6424 - 6432.

110. Bennett, V. Spectrin and ankyrin-based pathways: metazoan inventions for integrating cells into tissues / V. Bennett, A. J. Baines // Physiol. Rev. 2001. Vol. 81, № 3. - P. 1353 - 1392.

111. Bennett, V. Spectrin-based membranes skeleton: a multipotential adaptor between plasma membrane and cytoplasm / V. Bennett // Physiological Reviews. 1990. - Vol. 70. - P. 1029-1065.

112. Bennett, V. The human erythrocyte membrane, as a model system for understanding membrane cytoskeleton interaction in cell membranes / V. Bennett // Cell membranes. Methods and reviews. N. Y.,1983. - Vol. 2. - P. 149- 195.

113. Bennett, V. The membrane skeleton of human erythrocytes and its implications for more complex cells / V. Bennett // Annu. Rev. Biochem. -1985.-Vol. 54.-P. 273-304.

114. Berglung, A. The 240-kDa subunit of human srectrin binds calmodulin at micromolar calcium concentrations / A. Berglung, L. Backman, V. Shanbhag // FESB Lett. 1986. - Vol. 201. - P. 306 - 310.

115. Berstein, В. Tropomiosin binding to F-actin protects F-actin from disassembly by brain actin-depolymerizing factor (ADF) / B. Berstein, J.R. Bamburg // Cell. Motil. 1982. - Vol. 2. - P. 1 - 8.

116. Bertanpetit, J. Human mitochondrial DNA variation and the origin of the Basques / J. Bertanpetit, J. Sala, F. Calafell // Ann. J. Hum. Cenet. 1995. -Vol. 59.-P. 63-81.

117. Beutler, E. Removal of leukocytes and platelets from whole blood / E. Beutler, C. West, R.G. Blume // J. Lab. Clin. Med. 1976. - Vol. 88. - P. 328 -333.

118. Biology of multifunctional cytokines: IL-6 and related molecules (IL-1 and TNF) / S. Akira, T. Hirano, T. Tago, T. Kishimoto // FASEB J. 1990. - Vol.4.-P. 2860-2867.

119. Bodine, D.M. Stem cell factor increases colony-forming unit-spleen number in vitro in synergy with interleukin-6, and in vivo in Sl/Sld mice as a single factor / D.M. Bodine, D. Orlic, N.C. Birkett // Blood. 1992. - Vol. 79, №4.-P. 913-919.

120. Boivin, P. Is spectrin a calmodulin-binding protein? / P. Boivin, C. Galand // Biochem. Int. 1984. - Vol. 8. - P. 231 - 236.

121. Broderick, M.J. Spectrin, alpha-Actinin, and Dystrophin / M.J. Broderick,

122. J. Winder // Adv Protein Chem. 2005. - Vol. 70. - P. 203-246.

123. Brooks, N.H. A novel polymorphism of the gene encoding furin, a TGF-betal activator, and the influence on cardiac allograft vasculopathy formation / C.G. Densem, A.S. Mutlak, V. Pravica et al. // Transpl Immunol. 2004. -Vol. 13, N3,-P. 185-190.

124. Broudy, V.C. Stem cell factor and hematopoiesis / V.C. Broudy // Blood. -1997.-Vol. 90, №4.-P. 1345- 1364.

125. Broxmeyer, H.E. Supressors cytokines and regulation of myelopoiesis / H.E. Broxmeyer // Am. J. Ped. Hematol. Oncol. 1992. - Vol.14. - P. 22 - 23.

126. Burns, N.R. Interaction of calmodulin with red cell and its membrane skeleton and with spectrin / N.R. Burns, W.B. Gratzer // Biochemistry. 1985.-Vol. 24.-P. 3070-3074.

127. Byers, T.J. Visualisation of protein associations in the erythrocyte membrane skeleton / T.J. Byers, D. Branton // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.1985.-Vol.82, N18.-P. 6153-6157.

128. Calcium-dependent human erythrocyte cytoskeleton stability analysis through atomic force microscopy / F. Liu, H. Mizukami, S. Sarnaik, A. Ostafin // J Struct. Biol. 2005. - Vol. 150, N2. - P. 200-210.

129. Campanella, M. E. Assembly and regulation of a glycolytic enzyme complex on the human erythrocyte membrane / M. E. Campanella, H. Chu, P. S. Low // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. - Vol. 102, № 7. - P. 2402 -2407.

130. Cellular and molecular mechanisms of cytokine networking / S. Kunkel, T. Standiford, S.W. Chensue et al. // Agents And Actions. Supplements. 1991. -Vol.32.-P. 205-218.

131. Chen, G. TNF-R1 signaling: a beautiful pathway / G. Chen, D.V. Goeddel // Science. -2002. Vol. 296. - P. 1634 - 1635.

132. Chromosomal assignment of the human erythropoietin gene and its DNA polymorphism / M.L. Law, G.-Y. Cai, F.-K. Lin et al. // Proc. Nat. Acad. Sci.1986.-Vol. 83.-P. 6920-6924.

133. Chung, K.F. Cytokines in asthma / K.F. Chung, P.J. Barnes // Thorax. -1999.-Vol.54.-P. 825-857.

134. Cianci, C.D. Phosphorylation of ankyrin downregulates its cooperativeinteraction with spectrin and protein 3 / C.D. Cianci, M. Giorgi, J.S. Morrow // J. Cell. Biochem. 1993. - Vol.215, №3. - p. 711 - 718.

135. Cloning and characterization of 4.1G (EPB41L2), a new member of the skeletal protein 4.1 (EPB41) gene family / M. Parra, P. Gascard, L.D. Walensky et al. // Genomics. 1998. - Vol. 49, № 2. - P. 298 - 306.

136. Cohen, J.J. Apoptosis: the physiologic: the physiologic pathway of cell death / J.J. Cohen // Hosp. Pract. 1993. - Vol. 28, N 12. - P. 35 - 43.

137. Cohen, M.C. Cytokine function / M.C. Cohen, S. Cohen // Amer. J. Clin. Pathol. 1996. - Vol. 105. - P. 589 - 598.

138. Common polymorphisms in the coding part of the IL4-receptor gene / K. Deichmann, J. Bardutzky, J. Foster et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1997.-Vol.231.-P.696-697.

139. Common polymorphisms in the coding part of the IL4-receptor gene / К/ Deichmann, J. Bardutzky, J. Foster et al. // Biochem. Biophis. Res. Commun.- 1997. Vol. 231. - P. 696 - 697.

140. Control of band 3 lateral and rotational mobility by band 4.2 in intact erythrocyte: release of band 3 oligomers from low-affinity binding sites / D. E. Golan, J. D. Corbett, C. Korsgren et al. // Biophys. J. 1996. - Vol. 70, № 3. -P. 1534- 1542.

141. Crystallographic structure and functional interpretation of the cytoplasmic domain of erythrocyte membrane band 3 / D. Zhang, A. Kiyatkin, J. T. Bolin, P.S. Low // Blood. 2000. - Vol. 96, № 9. - P. 2925 - 2933.

142. Cuturi, M.C. Independent regulation of tumor necrosis factor and lymphotoxin production by human peripheral blood lymphocytes / M.C. Cuturi, Y. Murphy, M.P. Costa-Gioni.// J. Exp. Med. 1987. - Vol. 165. - P. 1581 -1594.

143. Cytokine appearance in human endotoxemia and primate bacteremia / D.G. Hesse, K.J. Tracey, Y. Fong et al. // Surg Gynecol Obstet. 1988. - Vol. 166. -P. 147- 153.

144. Cytokine receptor signal transduction and the control of hematopoietic cell development / S.S. Watowich, H. Wu, M. Socolovsky et al. // Ann. Rev. Cell. Dev. Biol. 1996. - Vol.12. - P. 91-128.

145. Cytokine-induced macrophage differentiation / B. Winston, P. Krein, C. Mowat et al. // Clin, and Invest. Med. 1999. - Vol. 22, №6. - P. 236 - 255.

146. Cytokines in hematopoiesis: specificity and redundancy in receptor function / M. Socolovsky, S.N. Constantinescu, S. Bergelson et al. // Adv Protein Chem. 1998. - Vol. 52. - P. 141 - 198.

147. Cytolitic mechanisms of intraepithelial lymphocytes in celiac disease / R. Ciccocioppo, M. Cifone, R. Parroni et al. // Clin. Exper. Immunol. 2000. - T. 120, №2.-P. 235-240.

148. Daimark, N.A. Workshop summary: inhibitors of erythropoiesis / N.A Daimark, A. Najman // Annals N.Y. Acad. Sci. 1991. - Vol. 628. - P. 258 -261.

149. Delaunay, J. Molecular pathology of the erythrocyte membrane / J. Delaunay//Rev. Prat.- 1993.-Vol. 43,№ 11.-P. 1392- 1396.

150. Differentiation and erythropoietin receptor gene expression in human erythroid progenitor cells / A. Wickrema, S.B. Krantz, J.C. Winkelmann et al.// Blood. 1992. Vol. 80, № 8. - P. 1940 - 1949.

151. Dinarello, C.A. Inflammatory cytokines: interleukin-1 and tumor necrosis factor as effector molecules in autoimmune diseases / C.A. Dinarello // Cur. Opin. Immunol. 1991. - Vol.3. - P. 941 - 948.

152. Dinarello, C.A., Thompson R.C. Blocking IL-1: interleukin 1 receptorantagonist in vivo and in vitro / C.A. Dinarello // Immunol. Today. — 1991. — Vol. 12.-P. 404-410.

153. Dinarello, C.A. The Role of Interleukin-1 in Disease / C.A. Dinarello, S.M. Wolff // N. Engl. J. Med. 1993. - Vol.328, N2. - P.743 - 747.

154. Discher, D. E. New insights into red cell network structure, elasticity, and spectrin unfolding-a current review / D. E. Discher, P. Carl // Cell. Mol. Biol. Lett. 2001. - Vol. 6, № 3. - P. 593 - 606.

155. Dodge, G.T. The preparation and chemical characteristics of hemoglobin free ghosts of human erythrocytes / G.T. Dodge, C. Mitchell, D.J. Hanahan // Arch. Biochem. Biophys. 1963.-Vol. 100.-P. 119-130.

156. Donor and recipient-transforming growth factor-beta 1 polymorphism and cardiac transplant-related coronary artery disease / C.G. Densem, I.V. Hutchinson, N. Yonan, N.H. Brooks // Transpl Immunol. 2004. - Vol. 13, N3. -P. 211-217.

157. Dose-effects of recombinant human interleukin-6 on pituitary hormone secretion and energy expenditure / C. Tsigos, D.A. Papanicolaou, R. Defensor et al. // Neuroendocrinology. 1997. - Vol. 66. - P. 54 - 62.

158. Ebert, B.L. Regulation of the erythropoietin gene / B.L. Ebert, H.F. Bunn // Blood. 1999. - Vol. 94, №6. - P. 1864 - 1877.

159. Eder, M. IL-3 in the Clinic / M. Eder, G. Geissler, A. Ganser // Stem Cells. 1997.-Vol. 15, N5.-P. 327-333.

160. Effects of erythropoietin on neuronal activity / K. Koshimura, Y. Murakami, M. Sohmiya et al. // J. Neurochem. 1999. - Vol. 72, № 6. - P. 2565-2572.

161. Elias, J.A. Cytokine-cytokine interactions in the context of cytokine networking / J.A. Elias, R.J. Zitnik // Am J Respirat. Cell Molecul. Biol. -1992. -N7.-P. 365-367.

162. Endothelial cell in physiology and in the pathophysiology of vascular diseases / D.B. Cines, E.S. Pollak, C.A. Buck et al. // Blood. 1998. - Vol. 91. -P. 3527-3561.

163. Erythropoietin modulates calcium influx through TRPC2 / X. Chu, J.Y Cheung, D.L. Barber et al. // J. Biol. Chem. 2002. - Vol. 277, № 37 - P. 34375-34382.

164. Erythropoietin receptor characteristics on primary human erythroid cells / V.C. Broudy, N. Lin, M. Brice et al. // Blood. 1991. - Vol. 77, № 12. - P. 2583 -2590.

165. Evans, S.W. The Cytokines: physiological and pathological aspects / S.W. Evans, J.T. Whicher // Adv. Clin. Chem. 1993. - Vol. 30. - P. 1 - 88.

166. Evolutionarily conserved alternative pre-mRNA splicing regulates structure and function of the spectrin-actin binding domain of erythriod protein 4.1 / R. Winardi, D. Discher, C. Kelley et al. // Blood. 1995. - Vol. 86, №11. -P. 4315-4322.

167. Experimental endotoxemia in humans: analysis of cytokine release and coagulation, fibrinolytic, and complement pathways / S.J. Van Deventer, H.R. Buller, J.W. ten Gate et al. // Blood. 1990. - Vol. 76. - P. 2520 - 2526.

168. Expression and purification of recombinant cytoplasmic domain of human erythrocyte band 3 with hexahistidine tag or chitin-binding tag in Escherichia coli / Y. Ding, W. Jiang, Y. Su et al. // Protein Expr Purif. 2004. - Vol. 34, N2.-P. 167-175.

169. Fairbanks, G. Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane / G. Fairbanks, T.L. Steck, D.F.H. Wallach // Biochemistry. 1971. - Vol.l 0. - P. 2607 - 2617.

170. Feldman, L. B-limphocyte-derived burst-promoting activity in pleiotropic erythroid colony-stimulatinf factor, E-CSF / L. Feldman, J.J. Fraizier, A.J.

171. Sytkowski // Exp. Hematol. 1992. - Vol. 20, N10. - P. 1223 - 1228.

172. Fowler, V. M. Erythrocyte membrane tropomyosin. Purification andproperties / V. M. Fowler, V. Bennett // J. Biol. Chem. 1984. - Vol. 259, № 9. -P. 5978 - 5989

173. Fraser, J.K. The biology of the cytokine sequence cascade /J.K. Fraser, M.C. bill, R.A. Figlin // Seminars in Oncology. 1996. - Vol. 23. - P. 2-8.

174. Functional characterization of spectrin-actin-binding domains in 4.1 family of proteins / J. A. Gimm, X. An, W. Nunomura, N. Mohandas // Biochemistry. 2002. - Vol. 41, № 23. - P. 7275 - 7282.

175. Gallagher, P.G. An alternate promoter directs expression of a truncated, muscle-specific isoform of the humane ankyrin 1 gene / P.G. Gallagher, B.G. Forget // Biol. Chem. 1998. - Vol.273, №3. - P. 1339 - 1348.

176. Gallagher, P.G. Hereditary elliptocytosis: spectrin and protein 4.1R / P.G. Gallagher // Semin. Hematol. 2004. - Vol. 41, № 2. - P. 142 - 164.

177. Genetic control of serum IgE levels and asthma: linkage and linkage disequilibrium studies in an isolated population / T. Laitinen, P. Kauppi, J. Ignatius et al. // Human Molecular Genetics. 1997. - Vol. 6, N12. - P. 2069 -2076.

178. Genetic control of the circulating concentration of transforming growth factor type 3. / D.J. Grainger, K. Heathcote, M. Chiano et al. // Hum. Mol. Genet. 1999. - Vol.8. - P. 93 - 97.

179. Genetic susceptibility in Dupuytren's disease. TGF-bI Polymorphisms and Dupuytren's Disease / A. Bayat, J.S. Watson, J.K. Stanley et al. // J Bone Joint Surg. Br.-2002.-Vol. 84.-P. 211-215.

180. Genomic organization of mouse and human erythrocyte tropomodulin genes encoding the pointed end capping protein for the actin filaments / X. Chu, D. Thompson, L. J. Yee, L. A. Sung // Gene. 2000. - Vol. 256, № 1-2. - P. 271 -281.

181. Ghezzi, P. Erythropoietin as an antiapoptotic, tissue-protective cytokine / P. Ghezzi, M. Brines // Cell Death and Differentiation. 2004. - Vol. 11. - P. 37-44.

182. Glutathione protects chemokine-scavenging and antioxidative defense functions in human RBCs / U. J. Dumaswala, L. Zhuo, S. Mahajan et al. // Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 2001. - Vol. 280, № 4. - P. 867 - 73.

183. Greenfield, N.J. Tropomyosin requires an intact N-terminal coiled coil to interact with tropomodulin / N.J. Greenfield, V.M. Fowler // Biophys. J. 2002. -Vol. 82,№5.-P. 2580-2591.

184. Gurniak, C.B. Murine JAK3 is preferentially expressed in hematopoietic tissues and lymphocyte precursor cells / C.B. Gurniak, L.J. Berg // Blood. -1987.-P. 3151-3160

185. H. Effect on Glucose Transport and Anion Exchange in Human Erythrocytes by Mechanical Force Factors / Y. Z. Li, H. Q. Zhou, F. Peng, Z. Zhang // Sheng. Wu. Hua. Xue. Yu. Wu. Li. Xue. Bao. (Shanghai). 2001. -Vol. 33, №5.-P. 489 -496.

186. Hall, T.G. Regulatory domains of erythrocyte ankyrin / T.G. Hall, V. Bennet // J. Biol. Chem. 1987. - Vol. 262. - P. 10537 - 10545.

187. Hardy, B. The role of spectrin in erythrocyte ghost endosytosis / B. Hardy, S.L. Schrier // Biochim. Biophys. Res. Commun. 1978. - Vol.81, №4. -P.l 153-1161.

188. Headpiece domain of dematin is required for the stability of the erythrocyte membrane / R. Khanna, S.H. Chang, S. Andrabi et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. - Vol. 99, № 10. - P. 6637 - 6642.

189. Heinrich, P.C. Interleukin-6 and the acute phase response / P.C. Heinrich., J.V. Castell, T. Andus // Biochem. J. 1990. - Vol. 265. - P. 621 - 636.

190. Hiebl-Dirschmied, С. M. Isolation and partial characterization of the human erythrocyte band 7 integral membrane protein / С. M. Hiebl-Dirschmied, G. R. Adolf, R. Prohaska // Biochim. Biophys. Acta. 1991. - № 6.-P. 195-202.

191. Hoover, К. B. The genetics of the protein 4.1 family: organizers of the membrane and cytoskeleton / К. B. Hoover, P. J. Bryant // Curr. Opin. Cell. Biol. 2000. - Vol. 12, № 2. - P. 229 - 234.

192. Hopkins, S.J. The pathophysiological role of cytokines / S.J. Hopkins // Leg. Med. 2003. - Vol.5, N1. - P. 45-57

193. Hurme, M. IL-1 receptor antagonist (IL-IRa) plasma levels are co-ordinately regulated by both IL-IRa and IL-1(3 genes / M. Hurme, S. Santtila // Eur. J Immunol. 1998. - Vol.28. - P. 2598-2602.

194. Husain, A. The interaction of calmodulin with erythrocyte membrane proteins / A. Husain, G. Howlett, W. Sawyer //Biochem. Int. 1985. - Vol. 10. -P. 1-12.

195. Husain, A. The interaction of calmodulin with human and avian spectrin / A. Husain, G. Howlett, W. Sawyer // Biochem. Biophis. Res. Commun. 1984. -Vol. 122.-P. 1194- 1200.

196. Identification of the membrane attachment sites for protein 4.1 in the human erythrocyte / N.J. Hemming, D.J. Anstee, M.A. Staricoff et al. // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270, N10. - P. 5360-5366.

197. Ihle, J.N. Signaling by the cytokine receptor superfamily in normal and transformed hematopoietic cells / J.N. Ihle // Adv. Cancer. Res. 1996. - Vol. 68.-P. 23 -65.

198. In vitro production of IFN-gamma correlates with CA repeat polymorphism in the human IFN-gamma gene / V. Pravica, A. Asderakis, C. Perrey et al. // Eur. J. Immunogenet. 1999. - Vol. 26, № 1. - P. 1 - 3.

199. Inaba, M. Band 3: expanding knowledge on its functions / M. Inaba // Seikagaku.-2001.-Vol. 73, №12.-P. 1431 1435.

200. Interaction of membrane skeletal proteins with membrane lipid domain /

201. A. F. Sikorski, В. Hanus-Lorenz, A. Jezierski, A. R. Dluzewski // Acta. Biochim. Pol. 2000. - Vol. 47, № 3. - P. 565 - 578.

202. Interleukin 9: a candidate gene for asthma / N.C. Nicolaides, K.J. Holroyd, S.L. Ewart et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol. 94, № 24. - P. 13175-13180

203. Interleukin-1 polymorphisms associated with increased risk of gastric cancer / E. El-Omar, M. Carrington, C. Wong-Ho et al. // Nature. 2000. - Vol. 404.-P. 398-402

204. Interleukin-6 family of cytokines and gpl30 / Т.К. Kishimoto, S. Akira, M. Narazaki, T. Taga // Blood. 1995. - Vol. 86. - P. 1243 - 1254.

205. Interleukin-6 promoter polymorphism (-174 G/C) in Caucasian German patients with systemic lupus erythematosus / H. Schotte, B. Schluter, S. Rust et al. // Rheumatology. 2001. - Vol. 40. - P. 393-400.

206. Interleukin-6 stimulates the secretion of adrenocorticotropic hormone in conscious, freely-moving rats / Y. Naitoh, J. Fukata, T. Tominaga et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1988. - Vol. 155. - P. 1459 - 1463.

207. Interleukine-1 receptor antagonist: role in biology / W.P. Arend, M. Malyak., C.J. Guthridge, C. Gabay // Ann. Rev. Immunol. 1998. - Vol. 16. -P. 27-56.

208. Is the sensitivity of cells for FGF-1 and FGF-2 regulated by cell surface heparin sulfate proteoglicans? / F.-Yu Zhou, R.T. Owens, J. Hermonen, et al. // Europ. J. Cell. Biol. 1997. - Vol. 73. - P. 3127 - 3139.

209. Jacobson, M.D. Apoptosis: Bcl-2 related get connected / M.D. Jacobson // Current Biology. - 1996. - Vol. 7. - P. 277 - 281.

210. Jeong, M.C. Limited allelic polymorphism in the human interleukin-3 gene / M.C. Jeong, A. Navani, J.R. Oksenberg // Mol. Cell. Probes. 1998. - Vol.12. -P. 49-53

211. Jimenes, B. Mechanistic insights on the inhibition of tumor angiogenesis /

212. B. Jimenes, O.V. Volpert // J. Mol. Med. 2001. - Vol. 78. - P. 663 - 672.

213. Jinbu, Y. The role of ankyrin in shape and deformability change of humanerythrocyte ghosts / Y. Jinbu, S. Sato, T. Nakao // Biochim. Biophis. Acta. -1984. Vol.773, N2. - P. 237 - 245.

214. Jons, T. Identification of the binding interface involved in linkage of cytoskeletal protein 4.1 to the erythrocyte anion exchanger / T. Jons, D. Drenckhahn // EMBO J. 1992. - Vol. 11, № 8. - P. 2863 - 2867.

215. Kay, M. M. Band 3 and its alterations in health and disease / M.M. Kay // Cell. Mol. Biol. (Noisy-le-grand). 2004. - Vol. 50, № 2. - P. 117 -138.

216. Keller, J.R. Transforming growth factor-beta directly regulates primitive murine hemopoietic cell proliferation /J.R. Keller, I.K. McNiece, K.T. Sill // Blood. 1990. - Vol. 75. - P. 596 - 603.

217. Kishimoto, Т.К. The biology of interleukin-6 / Т.К. Kishimoto // Blood. -1989. Vol. 74.-P. 1 - 10.

218. Kitamura, M. TGF-|3 and glomerulonephritis: anti-inflammatory versus prosclerotic actions / M. Kitamura, T.S. Suto // Nephrol. Dial. Transplant. -1997.-Vol. 12.-P. 669-679.

219. Korsgren, C. Purification and properties erythrocyte band 4.2. Association with the cytoplasmic domain of band 3 / C. Korsgren, C.M. Cohen // J. Biol. Chem. 1986. - Vol. 261, N12. - P. 5536 - 5543.

220. Kurtz, A. A new candidate for the regulation of erythropoiesis insulinlike-growth factor-1 / A. Kurtz, W. Jelman, C. Bauer // FEBS Lett. - 1982. -Vol. 149.-P. 105- 107.

221. Lack of association between IL-1A and IL-1B promoter polymorphisms and multiple sclerosis / C. Ferri, F.L. Sciacca, L.M.E. Grimaldi et al. // J Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 2000. -Vol.69. - P. 564-565.

222. Lacombe, C. The molecular biology of erythropoietin / C. Lacombe, P. Mayeux // Nephrol. Dial. Transplant. 1999. - Vol. 14, N 2. - P. 22 - 28.

223. Late expression of red cell membrane protein 4.2 in normal human erythroid maturation with seven isoforms of the protein 4.2 gene / H. Wada, A. Kanzaki, A. Yawata et al. // Exp. Hematol. 1999. - Vol. 27, № 1. - P. 54 - 62.

224. Learmonth, R.P. Rotational dynamics of erythrocyte spectrin / R.P. Learmonth, A.G. Woodhouse, W.H. Sawyer // Biochim. Biophys. Acta. 1989.- 1989. Vol.987, N1. - P. 124-128.

225. Leonardo, M.J. NK-kB: pleiotropic mediator of inducible and tissue-specific gene control / M.J. Leonardo, D. Baltimore // Cell. 1989. - Vol. 58. -P. - 227 - 229.

226. Lewontin, R.C. On measures of gametic disequilibrium / RC. Lewontin // Genetics.- 1988.-Vol.120.-P. 849-852.

227. Linkage map of the human histocompatibility complex including the tumor necrosis factor genes / M.C. Carroll, P. Katzman, E.M. Alicot et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - Vol. 84. - P. 8535 - 8539.

228. Localization of protein 4.1 binding site on human erythrocyte glycophorins С and D / N. J. Hemming, D. J. Anstee, W. J. Mawby et al. // Biochem. J. - 1994.-Vol.299, № 1.-P. 191 - 196.

229. Lu, P.W. Phosphorylation of ankyrin decrease its affinity for spectrin tetramer / P.W. Lu, C.J. Soong, M.Tao // J. Biol. Chem. 1985. - Vol.260, №28.-P. 14958- 14964.

230. Lyn tyrosine kinase is essential for erythropoietin-induced differentiation of J2E erythroid cells / P.A. Tilbrook, E. Ingley, J.H. Williams et al. // EMBO J.- 1996.-Vol.16.-P. 1610-1619.

231. Lyson, К. The effect of interleukin-6 on pituitary hormone release in vivo and in vitro / K. Lyson, S.M. McCann // Neuroendocrinology. 1991. - Vol. 54.-P. 262-266.

232. Malik, S. A role for band 4.2 in human erythrocyte band 3 mediated anion transport / S. Malik, M. Sami, A. Watts // Biochemistry. 1993. - Vol. 32, № 38.-P. 10078- 10084.

233. Mandal, D. Mapping of a spectrin-binding domain of human erythrocyte membrane protein 4.2 / D. Mandal, P. K. Moitra, J. Basu // Biochem. J. 2002. -Vol. 364, №3.- P. 841 -847.

234. Manno, S. Modulation of erythrocyte membrane mechanical function by protein 4.1 phosphorylation / S. Manno, Y. Takakuwa, N. Mohandas // J. Biol. Chem. 2005. - Vol. 280, № 9. - P. 7581 - 7587.

235. Mantovani, A. Cytokine regulation of endothelial cell function: from molecular level to the bedside / A. Mantovani, F. Bussolino, M. Introna // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18, N 5. - P. 231 -240.

236. Matrix, tumor necrosis factor and multiple sclerosis: an overview / S. Chandler, K.M. Miller, J.M. Clements et al. // J. Neuroimmunol. 1997. - Vol. 72.-P. 155-161.

237. McDevit,t H.O., Duff G.W. Effect of a polymorphism in the tumor necrosis factor-alpha promoter on transcriptional activation / A.G. Wilson, J.A. Symons, T.L. McDowell // Pnas. 1997. - Vol. 94. - P. 3195 - 3199.

238. Molecular cloning of the interleukin-1 gene cluster: construction of an integrated YAC/PAC contig and a partial transcriptional map in the region of chromosome 2ql3 / H.G. Nothwang, B. Strahm, D. Denich et al. // Genomics. -1997.-Vol. 41.-P. 370-378.

239. Morton, N.E. Significance levels in complex inheritance / N.E. Morton //

240. Am. J. Hum. Genet. 1998. - Vol. 62. - P. 1597-1600.

241. Muegge, K. Cytokines and transcription factors / K. Muegge, S.K. Durum // Cytokine. 1990. - Vol. 2. - P. 1 - 8.

242. Murphy, M. Effects of recombinant TNF, lymphotoxin and immune interferon on proliferation of enriched precursor cells / M. Murphy, B. Perussa, G. Trinchcri // Exp. Hematol. 1988. - Vol. 16. - P. 131 - 138.

243. Nelms, K. The IL-4 receptor / K. Nelms, J. Ryan, W. Paul // Ann. Rev. Immunology. 1999. - № 17. - P. 701 - 738.

244. Nelson, W.J. Ankyrin binding to Na/K-ATPase and implications in polarized cells / W.J. Nelson, P.J. Veshnock // Nature. 1987. - Vol. 328. - P. 533-536.

245. Neurochemical, electrophysiological and immunocytochemical evidence for a noradrenergic link between the sympathetic nervous system and thymocytes / E.S. Vizi, E. Orso, O.N. Osipenko et al. // Neuroscience. 1995. -Vol. 68.-P. 1263- 1276.

246. Newton, A.C. Protein kinase C: structure, function and regulation / A.C. Newton // J Biol. Chem. 1995. - Vol. 270. - P. 28495-28498

247. No independent association between a TNF-a promoter region polymorphism and insulin-dependent diabetes mellitus / F. Pociot, A.G. Wilson, J. Nerup, G.W. Duff// Eur. J. Immunol. 1993. - Vol. 23. - P. 3043 -3049.

248. Olsson, I. The cytokine network /1. Olsson // J Intern. Med. 1993. - Vol. 233.-P. 103-105.

249. Oppenheim, J.J. Pathophysiological roles of cytokines in. development, immunity, and inflammation / J.J. Oppenheim, R. Neta // The FASEB Journal.-1994.-Vol. 8.-P. 158- 162.

250. Orlic, D. Molecular mechanism for the inhibitory action of interferon on hematopoiesis / D. Orlic, R. Gill // Annals N.Y. Acad. Sci. 1989. - Vol. 554. -P. 36-48.

251. Ozaki, K. Cytokine and cytokine receptor pleiotropy and redundancy / K.

252. Ozaki, WJ. Leonard // J. Biol. Chem. 2002. - Vol. 277, N 33. - P. 29355 -29358.

253. Picart, C. Actin protofilament orientation in deformation of the erythrocyte membrane skeleton / C. Picart, P. Dalhaimer, D. E. Discher // Biophys. J. -2000. Vol. 79, № 6. - P. 2987 - 3000.

254. Polymorphism in transforming growth factor-beta 1 gene and its correlation to TGF-beta 1 production, allograft fibrosis and fibrotic lung diseases / M.R. Award, A. El Gamel, P. Hasleton et al. // Eur. J. Immunogenet. 1998.-Vol. 25.-P. 70.

255. Polymorphisms of the IL-4, TNF-alpha, and Fcepsilon RIbeta genes and the risk of allergic disorders in at-risk infants / S. Zhu, M. Chan-Yeung, A.B. Becker et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 161, № 5. - P. 1655 - 1659.

256. Principles of interleukin (IL)-6-type cytokine signalling and its regulation / P.C. Heinrich, I. Behrmann, S. Haan et al. // Biochem. J. 2003. - Vol. 374. -P. 1-20.

257. Progressive liver injury in chronic hepatitis С infection correlates with increasase infrahepatic expression of Thl associated cytokines / J. Napoli, G.A. Bishop, P.H. Mc Guinness et al. // Hepatology. 1996. - №24. - P. 759 - 767.

258. Protein and lipid oxidation of banked human erythrocytes: role of glutathione / U. J. Dumaswala, L. Zhuo, D. W. Jacobsen et al. // Free Radic. Biol. Med.- 1999.-Vol. 27, №9-10.-P. 1041 1049.

259. Purification and characterization of the human erythrocyte band 3 protein C-terminal domain / G. Fu, T. Wang, B. Yang et al. // Biochemistry. 2004. -Vol. 43, №6.-P. 1633 - 1638.

260. Radiolabel-transfer cross-demonstrates that protein 4.1 bind to the N-terminal region of beta spectrin and to actin in binary interactions / P.S. Becker, M.A. Schwartz, J.S. Morrow et al. // Eur. J. Biochem. 1990. - Vol. 193, N3. -P. 827-836.

261. Recombinant interleukin-6 effects on pituitary secretion in humans

262. Abstract. / D.A. Papanicolaou, C. Tsigos, D.J. Torpy et al. // J. Invest. Med. -1996.-Vol. 44.-P. 266.

263. Red blood cell membranes / ed. S.B. Shohet, N. Mohandas. N. Y., 1988. - 328 p.

264. Red blood cell membranes. Structure, function, clinical implications / ed. P. Agre, J.C. Parker. -N. Y., 1989. 733 p.

265. Red-cell glycophorin A-band 3 interactions associated with the movement of band 3 to the cell surface / M. T. Young, R. Beckmann, A. M. Toye, M. Tanner J. // Biochem. J. 2000. - Vol. 350, № 1. - P. 53 - 60.

266. Regulation of band 3 rotational mobility by ankyrin in intact human red cells / M. R. Cho, S. W. Eber, S. C. Liu et al. // Biochemistry. 1998. - Vol. 37, №51.-P. 17828 - 17835.

267. Rink, L. Recent progress in the tumor necrosis factor-a field / L. Rink, H. Kirchner // Int. Arch. Allergy Immunol. 1996. - Vol. 111. - P. 199 - 209.

268. Robbins, R.B. Some applications of mathematics to breeding problems / R.B. Robbins // III Genet. 1918. - N3. - P. 375-389.

269. Roberts, A.B. TGF-(3: regulation of extracellular matrix / A.B. Roberts, B.K. McCune, M.B. Sporn // Kidney Int. 1992. - Vol. 41. - P. 557 - 559.

270. Role of elevated plasma TGF-f3i levels in wound healing / M. Shah, D. Revis, S. Herrick et al. //Amer. J. Path. 1999. - Vol. 154. - P. 1115 - 1124.

271. Role of pertussis toxin-sensitive guanosine triphosphate-binding proteins in the response of eiythroblasts to erythropoietin / B.A. Miller, K. Foster, J.D. Robishaw et al. // Blood. 1991. - Vol. 77, № 3. - P. 486 - 492.

272. Ruggieri, L. Cytokine-dependent ex vivo expansion of early subsets of CD34+ cord blood myeloid progenitors is enhanced by cord blood plasma, but expansion of the more mature subsets of progenitors is favored / L. Ruggieri, S.

273. Heimfeld, H.E. Broxmeyer // Blood Cells. 1994. - Vol. 20, № 2-3. - P. 436 -454.

274. Ruoslahti, E. Fibronectin and its receptors / E. Ruoslahti // Ann. Rev. Biochem. 1998. - Vol. 57. - P. 375 - 413.

275. Scott, C. Properties of the C-terminal domain of 4.1 proteins / C. Scott, G. W. Phillips, A. J. Baines // Eur. J. Biochem. 2001. - Vol. 268, № 13. - P. 3709 -3717.

276. Secretion of tumour necrosis factor alpha and lymphotoxin alpha in relation to polymorphisms in the THF genes and HLA-DR alleles, relevance for inflammatory bowel disease / G. Bouma, J.B. Crusius, P.M. Oudkerk et al. //

277. Scand. J. Immunol. 1996. - Vol. 43. - P. 456 - 463.1

278. Seidler, N.W. Ca transport activities of inside-out vesicles prepared from density-separated erythrocyte from rat and human / N.W. Seidler, N.I. Swisloki // Molec. Cell. Biochem. 1991. - Vol. 105. - P. 159 - 169.

279. Shchall, T.J. Biology of the RANTESS/SYS cytokine family / T.J. Shchall // Cytokine. 1991. - Vol. 3. - P. 165 - 183.

280. Shen, B.W. Ultrastructure of unit fragment of the skeleton of the human erythrocyte membrane / B.W. Shen, R. Josephs, T.L. Steck // Cell. Biol. 1984 -Vol.99, N3.-P. 810-821.

281. Shohet, S.B. Red Cell Membranes / S.B.Shohet, N.Mohandas. N. Y., 1988.- 328 p.

282. Simpson, K.J. Cytokines, for better or worse? / K.J. Simpson // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 1999. - Vol. 11, № 9. - P. 957 - 966.

283. Sing, C. F. Role of the apolipoprotein E polyporphism in determining normal plasma lipid and lipoprotein variation / C. F. Sing, J. Davignon // American Journal of Human Genetics. 1985. - Vol. 37. - P. 268-285.

284. Singer, A.J. Cutaneous wound healing / A.J. Singer, R.A.F. Clark // New Engl. J. Med. 1999. - Vol. 341. - P. 738 - 746.

285. Smithgall, Т.Е. Signal transduction pathways regulating hematopoietic differentiation / Т.Е. Smithgall // Pharmacol. Rev. Vol. 50, Issue 1. - P. 1-20, 1998.

286. Spivak, J.L. IL-3 promotes the in vivo proliferation of murine pluripotent hematopietic stem cells / J.L. Spivak, R.R. Smith, J.N. Ihle // J. Clin. Invest. -1985.-Vol. 76.-P. 1613.

287. Sporn, M.B. The importance of context in cytokine action / M.B. Sporn // Kidney Int.- 1997 -Vol. 51.-P. 1352- 1354.

288. Steck, T. The organization of proteins in the human red cell membrane / T. Steck // J. Cell Biol. 1974. - Vol. 62. - P. 1 - 19.

289. Stetler-Stevenson, W.G. Matrix metalloproteinases in angiogenesis: a moving target for therapeutic intervention / W.G. Stetler-Stevenson // J. Clin. Invest.-1999.-Vol. 103.-P. 1237- 1241.

290. Stokke, B.T. Spectrin, human erythrocyte shapes, and mechanochemical properties / B.T. Stokke, A. Mikkelsen, A. Elgaeter // Biophys. J. 1986. -Vol.49,N1.-P. 319-327.

291. Structural domain mapping and phosphorylation of human erythrocyte pallidin (band 4.2) / E. Dotimas, D.W. Speicher, R.B. Gupta et al. // Biochem. Biophis. Acta. 1993. - Vol. 1148, N1. - P. 19-29.

292. Suppression of the Human Erythropoietin Gene Expression by the TR2 Orphan Receptor, a Member of the Steroid Receptor Superfamily / H.-J. Lee., W.-J. Young, C.C.-Y. Charles Shih, C. Chang//JBS. 1996. -Vol. 271, № 17. -P. 10405- 10412.

293. Sykes, B. The molecular genetic of European ancestry / B. Sykes // Philos.

294. Trans. R. Soc. LongB. Biol. Sci. 1999. - Vol. 354. - P. 131 - 138.

295. Synergism between IL-6 and IL-3 in supporting proliferation of human hematopoietic stem cell: comparison with IL-1 / A.G. Leary, K. Ikebuchi, Y. Hirai et al. // Blood. 1985. - Vol. 66. - P. 327 - 332.

296. Takakuwa, Y. Protein 4.1, a multifunctional protein of the erythrocyte membrane skeleton: structure and functions in erythrocytes and nonerythroid cells / Y. Takakuwa // Int. J. Hematol. 2000. - Vol. 72, № 3. - P. 298 - 309.

297. Takakuwa, Y. Structure of erythrocyte membrane skeleton / Y. Takakuwa, S.Manno // Nippon. Rinsho. 1996. - Vol. 54, № 9. p. 2341 - 2347.

298. Tavassoli, M. Absence of tight junctions in endothelium of marrow sinuses: possible significance for marrow cell egress / M. Tavassoli, M. Shaklai // Br. J. Haematol. 1979 - Vol. 41. - P. 303 - 307.

299. Terada, N. Three-dimensional ultrastructure of in situ membrane skeletons in human erythrocytes by quick-freezing and deep-etching method / N. Terada, Y. Fujii, S. Ohno // Histol. Histopatol. 1996. - Vol.11, N3. - P.787-800.

300. Terry, C.F. Cooperative influence of genetic polymorphisms on interleukin 6 transcriptional regulation / C.F. Terry, V. Loukaci, F.R. Green // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275. - P. 18138-18144.

301. Tgansforming growth factor-p gene family members and bone / M. Centrella, M.C. Horowitz, J.M. Wozney, T.L. McCarthy // Endocr. Rev. -1994.-Vol. 15, N1.-P. 27-39.

302. The human "interferon-beta 2/hepatocyte stimulating factor/interleukin-6" gene: DNA polymorphism. Genomics studies and localization to chromosome 7p21 / A.M. Bowcock, J.R. Kidd, G.M. Lathrop et al. // Genomics. 1988. -Vol.3.-P. 8-16.

303. The human ankyrin-1 gene is selectively transcribed in erythroid cell lines despite the presence of a housekeeping-like promoter / P.G. Gallagher, M. Romana, W.T. Tse et al. // Blood. 2000. - Vol. 96, № 3. - P. 1136 - 1143.

304. The lens membrane skeleton contains structures preferentially enriched in spectrin-actin or tropomodulin-actin complexes / M. K. Woo, A. Lee, R. S. Fischer et al. // Cell. Motil. Cytoskeleton. 2000. - Vol. 46, № 4. - P. 257 -268.

305. The NMR structure of dematin headpiece reveals a dynamic loop that is conformationally altered upon phosphorylation at a distal site / B. S. Frank, D. Vardar, A. H. Chishti, C.J. McKnight et al. // J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279, №9.-P. 7909-7916.

306. The pathophysiologic roles of interleukin-6 in human disease / D.A. Papanicolaou, R.L. Wilder, S.C. Manolagas, G.P. Chrousos // Ann. Intern. Med. 1998. - Vol. 128. -P. 127-137.

307. The structural organization of skeletal proteins influences lipid translocation across erythrocyte membrane / N.Mohandas, M.Rossi, S.Bernstein et al. // Biol. Chem. 1985. - Vol.260, №26. - P. 14264 - 14268.

308. Thomson, A.W. The Cytokine / A. W. Thomson. London, 1994. - 615 p.

309. TNF-a gene polymorphism and plasma TNF-a levels are related to lumbarspine bone area in healthy female Caucasian adolescents / P. Wennberg, P. Nordstrom, R. Lorentzon et al. // European Journal of Endocrinology. 2002. -Vol.146.-P. 629-634.

310. Transcriptional regulation of endothelial cell adhesion molecules: NF-kB and cytokine-inducible enhancers / T. Collins, M.A. Read, A.S. Neish et al. // FASEB J. 1995. - Vol. 9. - P. 899 - 909.

311. Transforming growth factor (3 gene maps to human chromosome 19 long arm and to mouse chromosome 7 / D. Fujii, J.E. Brissenden, R. Derynck et al. // Somat. Cell. Mol. Genet. 1986. - Vol. 12. - P. 281 -288.

312. Transforming growth factor-beta 1 gene polymorphisms and coronary artery disease / P. Syrris, N.D. Carter, J.C. Metcalfe et al. // Clin. Sci. 1998. -Vol. 95.-P. 659-667.

313. Transforming growth factor-(3i hyperexpression in African-American hypertensives: A novel mediator of hypertension and/or target organ damage / M. Suthanthiran, B. Li, J.O. Song et al. // PNAS. 2000. - Vol. 97, № 7. - P. 3479-3484.

314. Transforming growth factor-|3i promoter polymorphism C-509T is associated with asthma / E.S. Silverman, L.J. Palmer, V. Subramaniam et al. // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 2004. - Vol. 169.-P. 214-219.

315. Trofta, P.P. Cytokines: an overview / P.P. Trofta // Amer. J. Reprod. Immunol. 1991. - Vol.25. - P. 131 - 141.

316. Tumor necrosis factor gene polymorphisms and clearance or progression of hepatitis В virus infection / G.A. Niro, R. Fontana, D. Gioffreda et al. // Liver Int. 2005. - Vol. 25, № 6. - P. 1175 - 1181.

317. Tumor necrosis factor-a-238 and -308 polymorphisms do not associatewith traits related to obesity and insulin resistance / J. Walston, M. Seibert, J. Ch.Yen et al. // Diabetes. 1999. - Vol.48. - P. 2096-2098.

318. Tumour Necrosis Factor a Gene Polymorphisms in Rheumatoid Arthritis: Association with Susceptibility to, or Severity of, Disease? / B.M.N. Brinkman, T.M.J. Huizinga, S.S. Kurban et al. // British Journal of Rheumatology. 1997. -Vol. 36.-P. 516-521.

319. Two polymorphisms within interleukin-3 (IL3) gene detected by mismatch PCR/RFLP / H. Nakashima, T. Otsuka, Y. Ohba et al. // Genes Immun. 1999. -Vol. 1,-P. 156-158.

320. Udupa, K.B. Studies on the kinetics of the erythroid colony forming / K.B. Udupa, D.A. Lipschitz // Brit. J. Haematol. 1988. - Vol.69, N2.

321. Ursitti, J. A. Immunolocalization of tropomodulin, tropomyosin and actin in spread human erythrocyte skeletons / J. A. Ursitti, V. M. Fowler // J. Cell. Sci.-1994.-Vol. 107, №6.-P. 1633 1639.

322. Vaday, G.G. Extracellular matrix moieties, cytokines, and enzymes: dynamic effects on immune cells behaviour and inflammation / G.G. Vaday, 0. Lider // J. Leuk. Biol. 2000. - Vol. 67. - P. 59 - 64.

323. Vandenbroeck, K. Cytokine gene polymorphisms in multifactorial diseases: gateways to novel targets for immunotherapy? / K. Vandenbroeck, A. Goris // Trends in Pharmacological Sciences. 2003. - Vol. 24, N 6. - P. 284289

324. Vilcek, J. Immunology of cytokines: an introduction // The Cytokine Handbook / J. Vilcek, J. Le; ed. A.W. Thomson. -N.Y.: Academic Press, 1994. -P. 1-19.

325. Vosshenrich, C.A. Interleukin signaling / C.A. Vosshenrich, J.P. Di Santo // Curr. Biol. 2002. - Vol. 12 № 22. - P. 760 - 763.

326. Wahl, S.B. Transforming growth factor-(3: The good, the bad and the ugly / S.B. Wahl//J. Exp. Med.- 1994.-Vol. 180.-P. 1587- 1590.

327. Wajant, H. The Fas signalling pathway: more than a paradigm / H. Wajant // Science. 2002. - Vol. 296. - P. 1635 - 1636.

328. Weber, R.L. The cytokines: a review of interleukins / R.L. Weber, VJ. Iacono // Periodontal. Clin. Investig. 1997. - Vol. 19, № 1. - P. 17-22.

329. Wegner, A. Kinetic analysis of actin assembly suggest that tropomyosin inhibits spontaneous fragmentation of actin filaments / A. Wegner // J. Mol. Biol.- 1982.-Vol. 161.-P. 217-227.

330. Wickrema, A. Changes in cytoskeletal proteins and their mRNAs during maturation of human erythroid progenitor cells / A. Wickrema, S.T. Koury, C.H. Dai // Cell. Physiol. 1994. - Vol.160, №3. - P.417 - 426.

331. Workman, R. F. Biochemical analysis of potential sites for protein 4.1-mediated anchoring of the spectrin-actin skeleton to the erythrocyte membrane / R. F. Workman, P. S. Low // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273, № 11. - P. 6171-6176.

332. Wyatt, K. Both ankyrin and band 4.1 are required to restrict the rotational mobility of band 3 in the human erythrocyte membrane / K. Wyatt, R.J. Cherry //Biochim. Biophys. Acta. 1992. - Vol.1103, №2. - P. 327 - 330.

333. Yawata, Y. Integral proteins of red cell membranes: their genetic and phenotypic expressions / Y. Yawata // Nippon Rinsho. 1996. - Vol. 54, № 9. -P. 2348-2363.

334. Yin, H. DNA mutilation represses the expression of the human erythropoietin gene by two different mechanisms / H. Yin, K.L. Blanchard // Blood. 2000. - Vol. 95, №1. - P. 111 - 119.

335. Yu, A.W. Detection of functional and dimeric Activin A in human marrow microenvironment / A.W. Yu, S. Li, N.L. Frigon // Annals N. Y. Acad. Sci. -1994-Vol. 718.-P. 285-299.

336. Zhou, J. Characterization of the reversible conformational equilibrium in the cytoplasmic domain of human erythrocyte membrane band 3 / J. Zhou, P.S.1.w // J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276, № 41. - P. 38147 - 38151.

Информация о работе

Белугин, Дмитрий Александрович
кандидата биологических наук
Курск, 2006
ВАК 03.00.15

Диссертация

Полиморфизм генов цитокинов и его вклад в вариабельность количественного содержания мембранных белков эритроцитов человека - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Полиморфизм генов цитокинов и его вклад в вариабельность количественного содержания мембранных белков эритроцитов человека - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы