Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Оценка эффективности применения биопрепаратов и фитомелиорантов в биоремедиации нефтезагрязненных почв
ВАК РФ 03.01.06, Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

Автореферат диссертации по теме "Оценка эффективности применения биопрепаратов и фитомелиорантов в биоремедиации нефтезагрязненных почв"

004613806

ГРИГОРИАДИ АННА СЕРГЕЕВНА

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ И ФИТОМЕЛИОРАНТОВ В БИОРЕМЕДИАЦИИ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ПОЧВ

03.01.06 - биотехнология 03.02.08 - экология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

а

£ 5 НОЯ 2010

Уфа-2010

004613806

Работа выполнена на кафедре биохимии и биотехнологии ГОУ ВПО «Башкирский государственный университет»

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор

Киреева Наиля Ахняфовна кандидат биологических наук, ст. науч. сотр.

Галнмзянова Наиля Фауатовиа

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Кураков Александр Васильевич

Ведущая организация: Учреждение Российской академии наук Институт

биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН (г. Саратов)

Защита диссертации состоится 3 декабря 2010 г. в 16-00 часов на заседании Регионального диссертационного совета ДМ 002.136.01 при Учреждении Российской академии наук Институте биологии Уфимского научного центра Российской академии наук по адресу: 450054, г. Уфа, пр. Октября, д. 69, тел.: 235-53-62, e-mail: ib@anrb.ru.

С диссертацией можно познакомиться в библиотеке Уфимского научного центра Российской академии наук и на официальном сайте http://www.anrb.ru/inbio/dissovet/mdex/htm

Автореферат разослан « 30 » октября 2010 г.

доктор биологических наук, профессор Габбасова Илюся Масгутовна

Ученый секретарь Регионального диссертационного совета, кандидат биологических наук

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. В условиях неуклонно возрастающего антропогенного давления на окружающую среду ее защита от техногенного загрязнения является одной из серьезных задач экологии.

Нефть и нефтепродукты, поступая в окружающую среду, оказывают негативное влияние на все компоненты экосистем. Углеводороды являются постоянным источником канцерогенного и мутагенного воздействия. Нефтяное загрязнение почв приводит к выведению обширных территорий из сельскохозяйственного использования.

Исследованиями многих авторов доказано, что естественное восстановление плодородия почв, загрязненных нефтяными углеводородами, занимает длительный период (Хазиев, Фатхиев, 1981; Ма^еэш е1а1., 1999; Логинов и др., 2000; Габбасова, 2004; Маганов и др., 2006; Кураков и др., 2006). Попытки рекультивации нарушенных почв только физико-химическими методами зачастую не дают желаемых результатов (Суржко и др., 1995; Алексеева и др., 2000; Давыдова, Тагасов, 2006; Мельников и др., 2007). В настоящее время наиболее перспективным считается комплексный подход к био-ремедиации (Исмаилов, Пиковский, 1988; Бельков, 1995; Логинов и др., 2000; Карасева и др., 2005; Середина и др., 2008). Еще большую популярность приобретают методы, основанные на использовании объединенного метаболического потенциала микроорганизмов и растений (Турковская, Муратова, 2005). В связи с этим весьма актуальным является изучение процессов восстановления нефтезагрязненных почв с использованием различных методов и приемов рекультивации.

Цель диссертационной работы - оценка эффективности микробных препаратов разнонаправленного действия и фитомелиорантов при рекультивации нефтезагрязненных почв по биологическим показателям.

Основные задачи исследований:

1. Выявить изменение биологической активности нефтезагрязненной серой лесной почвы при стимулировании аборигенной микробиоты внесением углеводно-минеральной добавки, являющейся отходом целлюлозно-бумажного производства;

2. Изучить влияние неспецифических микробных препаратов (Азолен, Белвитамил, Елена) на восстановление серой лесной почвы после нефтяного загрязнения;

3. Оценить по биологическим показателям эффективность применения препаратов, основанных на специализированных углеводородокисляющих группах микроорганизмов (Ленойл, Универсал), для восстановления разных типов почв

4. Исследовать возможность использования дягиля лекарственного (Archangelica officinalis L.) и бархатцев прямостоячих (Tagetes erecta L.) для фиторемедиации нефтезагрязненной серой лесной почвы.

Научная новизна работы. Впервые было проведено исследование влияния биопрепарата Универсал на типы почв, характерных для умеренных и южных широт России и рассмотрен комплекс микроскопических грибов при рекультивации препаратом. Впервые была предложена углеводно-минеральная добавка, являющаяся отходом целлюлозно-бумажного производства, для рекультивации нефтезагрязненной почвы. Получены новые данные по использованию дягиля лекарственного (.Archangelica officinalis) для фиторемедиации почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами. Впервые проведена оценка влияния дягиля на биологические свойства нарушенных почв, а также исследована его устойчивость к действию различных пол-лютантов.

Практическая значимость. Полученные данные могут быть использованы при выборе методов биоремедиации в зависимости от типа почвы и степени ее загрязнения в условиях разных климатических зон России. Для внедрения в практику биоремедиации был предложен дягиль лекарственный в качестве фитомелиоранта. Результаты исследований могут быть применены в учебном процессе в рамках дисциплин «Рекультивация нарушенных земель», «Экология микроорганизмов», «Биоиндикация и биомониторинг» и «Техногенные системы и экориск».

Результаты исследований были апробированы в ССП «НИПИ Нефтегаз» (Акт о внедрении прилагается).

Личное, участие автора. Автором написан аналитический обзор литературы, получена основная часть фактических данных, проведена их интерпретация и подготовка научных публикаций.

Обоснованность выводов и достоверность результатов работы обеспечены большим объемом лабораторных и полевых экспериментов с применением современных математических методов обработки, анализа и оценки полученных результатов.

Апробация работы. Основные положения и результаты диссертационной работы были представлены на Международных конференциях «Ломо-носов-2006» (Москва, 2006), «Экология и биология почв» (Ростов на Дону, 2007), «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2007, 2009, 2010), «Актуальные аспекты современной микробиологии» (Москва, 2007, 2008, 2010), «Мировые инновационные технологии восстановления нарушенных и загрязненных техногенных регионов» (Кемерово, 2008), «Актуальные проблемы биоэкологии и биотехнологии» (Москва, 2008; Казань,.2008; Саранск, 2008; Тамбов, 2009, 2010), «Адаптация биологических систем к естественным и экстремальным факторам среды» (Челябинск, 2008), «Экология России и сопредельных территорий» (Новосибирск, 2008, 2009), «Фундамен-

тальные и прикладные исследования в биологии» (Донецк, 2009), «Инновационные процессы в АПК» (Москва, 2009), «Современные проблемы загрязнения почв» (Москва, 2010), «Биотехнология начала III тысячелетия» (Саранск, 2010), на Всероссийских конференциях и сг>ездах «Актуальные проблемы биологии и экологии» (Сыктывкар, 2007), «Фундаментальные достижения в почвоведении, экологии, сельском хозяйстве на пути к инно-ьаииям» (Москва, 2008; Санкт-Петербург, 2008), «Инновационные подходы к естественнонаучным исследованиям и образованию» (Казань, 2009), «Устойчивость организмов к неблагоприятным факторам внешней среды» (Иркутск, 2009), «Экоаналитика-2009» (Йошкар-Ола, 2009), «Экотоксикология -2009» (Пущино, 2009), «Окружающая среда и проблемы устойчивого развития регионов» (Казань, 2009; Киров, 2008, 2009), «Актуальные проблемы сохранения биоразнообразия» (Апатиты, 2009; Уфа, 2010; Оренбург, 2010). На конкурсе научных работ студентов вузов Республики Башкортостан в 2007 г работа была отмечена дипломом I степени.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 24 научные работы, в том числе в 11 журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 367 источников, в том числе 106 на иностранных языках, и 4 приложения. Работа содержит 209 страниц основного текста, 19 страниц приложений, иллюстрирована 37 рисунками и включает 16 таблиц.

Благодарности. Автор выражает искреннюю благодарность и признательность за неоценимую помощь и поддержку научным руководителям проф. д.б.н. Киреевой H.A. и к.б.н. Галимзяновой Н.Ф., к.б.н. Башировой

P.M., к.б.н. Бакаевой М.Д., к.б.н. Юмагужину М.С. за активное участие

в обсуждении результатов, к.б.н. Г.Ф. Рафиковой за помощь в определении микроскопических грибов, д.б.н. Логинову О.Н. и к.б.н. Маркаровой М.Ю. за любезно предоставленные биопрепараты, а также всем коллегам и соавторам публикаций.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. Влияние нефтяного загрязнения и ремедиации на биологические свойства почвы (обзор литературы)

Дана общая характеристика йефтяных углеводородов как Одного из приоритетных поллютантов окружающей среды. Описано влияние нефти и нефтепродуктов на компоненты почвенной экосистемы. Рассмотрены основные методы восстановления и освещены проблемы, связанные с рекультивацией загрязненных почв.

Глава 2. Объекты и методы исследований

Объектами исследований были серая лесная почва (республика Башкортостан) и чернозем обыкновенный (Краснодарский край), загрязненные нефтью и нефтепродуктами, а так же растения дягиля лекарственного и бархатцев прямостоячих в качестве фитомелиорантов. В лабораторных и полевых условиях изучалось изменение биологической активности нефтезагрязнен-ных и рекультивируемых почв (серая лесная почва и чернозем обыкновенный). Для биоремедиации были использованы: 1) УМД (углеводно-минеральная добавка), образующаяся при производстве целлюлозы из древесины сульфитным способом. Основными компонентами этой добавки являются моносахариды (28-32%); 2) Белвитамил - готовая смесь промышленной ассоциации аэробно-анаэробных микроорганизмов активного ила очистных сооружений целлюлозо-бумажного производства; 3) Азолен -биоудобрение, разработанное на основе штамма Azotobacter vinelandii (Пат. 2224791 РФ); 4)Биофунгицид Елена, основу которого составляет культу-ральная жидкость нового штамма-антагониста фитопатогенных грибов Pseudomonas aureofaciens ИБ 51 (Логинов и др., 2003); 5) Ленойл - препарат для рекультивации нефтезагрязненных почв и водных объектов, основу которого составляет природный консорциум микроорганизмов нефтедеструк-торов Bacillus brevis и Arlhrobacler sp. (Логинов и др., 2004); 6) Универсал -бакпрепарат, разработанный на основе нефтеокисляющих бактерий Rodo-cocciis equi, выделенных из загрязненных нефтью почв Усинского и Ухтинского районов Республики Коми (Маркарова, 2004).

Оценка биологической активности почвы осуществлялась по следующим параметрам: ферментативная активность, численность различных эко-лого-трофических групп микроорганизмов и фитотоксичность. Каталазная активность определялась газометрическим методом, пероксидазная, поли-фенолоксидазная и дегидрогеназная - спектроскопическими методами (Ха-зиев, 2005). Определение численности микроорганизмов почвы и ризосферы растений проводили в соответствии с общепринятыми методами посева (Методы почвенной ..., 1991). Идентификацию видов микромицетов проводили по определителям (Литвинов, 1967; Пидопличко, 1972; Билай, 1977; Егорова, 1986; Билай, 1988; Raper, Fennel, 1965; Raper, Thom, 1968; Watanabe, 2000). Видовые названия грибов уточняли по пополняемым спискам опубликованных видов в базе данных «Index fungorum» (www.indexfungorum.org). Оценку степени фитотоксичности почвы проводили по Гродзинскому (1991) биотестами с помощью проростков редиса (Raphanus salivus), сорт Красный с белым кончиком.

Определение содержания остаточных нефтепродуктов в почве проводили горячей экстракцией хлористым метиленом (McGill, Rowell, 1980). Содержание бенз(а)пирена - спектрофлуориметрическим способом (Трубникова и др., 2006). Пигменты растений экстрагировали метанолом и аце-

тоном и снимали спектры поглощения на приборе иУ-2401 РС БЫп^ги. Микроскопические исследования корневой системы растений проводили на люминесцентном микроскопе марки ЛОМО Микромед-2 (Россия), степень микотрофности корней рассчитывали методом Травло (Методы исследования..., 1992).

Статистическую обработку результатов производили с применением пакета прикладных программ Б^йвйса V 6.0., Ехсе1-2003. При оценке статистической достоверности средних полученных данных использовали I -критерий Стьюдента на 5% уровне значимости.

Глава 3. Использование углеводно-минеральной добавки для стимулирования аборигенной микробиоты при восстановлении нефтезагрязненной почвы

Действие УМД основано на стимуляции аборигенной микробиоты нефтезагрязненной почвы. Использование добавки оказало положительное

контроль нефть 1%

нефть нефть 4% 1%+УМД

нефть нефть 8% нефть 4%+УМД 8%+УУД

□ микрооргани! ы, испопьзукмц ие органические формы азота а микроорганизму испоюьзукнчиеминерапьные формы азота Ш цетяолозоршрушающие микроорганизмы

нефть 8%*УВД нефть 8% нефть 4%*УМЦ И9 нефть 4%

нефть 1%»У1ЦД Цр нефть 1% контроль Р

40 60 80 100 120 140 160 180 Численность УОМ, п*10а КЮВг почвы

: О 3 сут в 30 сут ш 90 сут |

Рис.1. Динамика численности целлюлозоразрушающих (А) и углеводородокисляющих (Б) микроорганизмов в нефтезагрязненной и рекультивируемой УМД почве

влияние на численность микроорганизмов, использующих органические и минеральные формы азота, целлюлозолитиков (рис.1 А), значительно стимулировало активность каталазы (рис.2).

14

12

10

Ä в

11 6

о 4

ç ?

0

котроль не4*ь 1'Я'

нефть 1%+УМД

нефть 4%

нефп! 4%+УМД

нефть 8%+УВД

□ 3 сут о 30 сут □ 90 сут

Рис. 2. Динамика каталазной активности нефтезагрязненной и рекультивируемой почвы

Внесение УМД в нефтезагрязненную почву способствовало развитию углеводородокисляющих микроорганизмов (рис. 1Ь). Очевидно, благодаря этому деградации при использовании УМД подверглось до 61% углеводородов (при начальной концентрации нефти 8%).

Внесение УМД привело к перестройке микологического сообщества серой лесной почвы (табл.1). Во всех вариантах опыта с применением добавки происходило усиленное развитие видов рода Fusarium и Aspergillus. Для сильнозагрязненной почвы (8%) характерно преобладание представителей р. Fusarium (F. javanicum, F. martii, F. merismoides, F. oxyspontm).

Таблица 1

Доминирующие и типично частые виды, выделенные из серой

Незагрязненная почва Почва, загрязненная нефтью Почва, обработанная УМД

Pénicillium corylophylum, P. funiculosum, P. vehilinum, Talaromvces fl avus Aspergillus Candidus, A. niger, P. atrovirens, Р. p игр иrogen u т A. us lus, P. atrovirens, P. funiculosum, виды рода Fusarium

Однако обработка УМД не приводила к уменьшению токсичности почвы для растений. Даже через 90 суток всхожесть редиса составляла всего лишь 15, 11 и 7% для проб с 1,4 и 8%-ной концентрацией поллютанта соот-

ветственно. Это связано с тем, что УМД стимулировала развитие микроми-цетов, обладающих фитотоксическими свойствами (рис.3).

-—

........

контроль нефть 1% нефть нефть 4% нефть нефть 8% нефть 1%+УМД 4%+УМД 8%+УМД

Рис.3. Доля фитотоксичных грибов, выделенных из нефтезагряз-ненной и обработанной УМД серой лесной почве

Глава 4. Влияние внесения неспецифических микробных препаратов на биологическую активность нефтезагрязнеиной почвы

Поскольку другие показатели биологической активности свидетельствуют об оптимизации условий жизнедеятельности микробиоты при внесении УМД, то ее применение в технологиях биорекультивации оправдано в сочетании с фунгицидными биопрепаратами (такими как, Елена и т.п.).

Биопрепараты Азолен, Белвитамил и Елена не содержат в своем составе специализированных углеводородокисляющих микроорганизмов, однако бактерии, составляющие их основу, могут стимулировать биологическую активность нефтезагрязнеиной почвы (Градова, 2003; Логинов, 2005; Муратова и др., 2005; Онегова, 2006).

Использование каждого из биопрепаратов оказывало положительное влияние на микробиоту нефтезагрязнеиной серой лесной почвы, однако степень выраженности воздействия была неодинаковой для разных групп микроорганизмов. Белвтамил активнее, чем Азолен и Елена стимулировал развитие УОМ, в том числе и за счет микроорганизмов активного ила, способных разлагать углеводороды (рис. 4).

Аналогичные данные были получены и для группы целлюлозоразла-гающих микроорганизмов, весьма чувствительных к загрязнению углеводородами и способных чутко реагировать на изменения условий обитания (Киреева, 1994) (рис. 5).

Активность почвенных ферментов, во многом определяет эффективность процесса биорекультивации. Оценка активности каталазы показала, что выраженное стимулирующее влияние на этот показатель оказывало внесение Белвитамила (рис. 6)

-П Л) 140

3

с: 1?0

О 100

У

о 80

« Г7

60

о

40

£

?0

X

ф с 0

V

т

без обратобки

Велвктамип

Ааолен

Еяена

□ неф«ъ 1% и неф|Ь 4% в нефш 8%

Рис. 4. Численность углеводородокисляющих микроорганизмов нефтезагрязненной серой лесной почвы при использовании биопрепаратов Белвитаил, Азолен, Елена (90 сутки)

о ¡5

о X

£ §

<В рэ

■=; о

и 5

? О

'.(Г. .

: - -

без обработки

.«Ж

•5- -V

ш

Щ

Белвитвмил

|и неф">

ЩШ

У'

;

Ж

Азолен

1% ш нефп> 4% н неф|ь 8%

¡в!

Елена

Рис. 5. Численность целлюлозоразлагающих микроорганизмов нефтезагрязненной серой лесной почвы при использовании биопрепаратов Белвитаил, Азолен, Елена(90 сутки)

По эффективности снижения содержания углеводородов биопрепараты распределились следующим образом, в зависимости от начальной концентрации нефти: 1% - Б > А> Е; 4% - Б> Е> А, 8% - Б> А > Е. Белвитамил оказался наиболее активным при высокой степени загрязнения - под его влиянием разложилось до 63,7% углеводородов, а при внесении Азолена или Елены 46,3% и 32,5% соответственно.

з

2,5 2 1,5 1

0,5 0

нефть 1%

нефть 4%

нефть 8%

□ Белвитамил ¡3 Азолен в Елена

Рис. 6. Относительная активность каталазы при внесении Белви-тамила, Азолена, Елены в нефтезагрязненную серую лесную почву через 90 суток (мл 02/г в нефтезагрязненной почве/ мл 02/г почвы при биоремедиации)

120

я- 100

0 X

1 80

X

I 60

О

& 40

без сбраттобки Белвитамил Азолен Елена

□ неф|ъ 1% в нефПэ 4% а нефп> 8%

Рис. 7. Всхожесть семян редиса в нефтезагрязненной серой лесной почве при использовании для биоремедиации препаратов Азолен, Белвитамил, Елена(90 сутки)

Одним из важных показателей степени восстановленности рекультивируемых почв является их токсичность по отношению к растениям. Известно, что в нефтезагрязненных почвах токсичность вызвана не только прямым действием углеводородов, но и развитием фитотоксичных видов микроми-цетов (Киреева и др., 2003). Азолен и Елена, в большей степени, чем Белви-тамил способствовали снижению плотности популяций микроскопических грибов в пефтезагрязненной почве, уменьшению доли фитотоксичных видов, что явилось одной из предпосылок к устранению токсичности почвы по отношению к тест-растению при 1% загрязнении и значительному снижению при 4% и 8% (рис. 7)

Глава 5. Влияние специализированных препаратов на основе углеводородокисляющих микроорганизмов на биологическую активность пефтезагрязненной почвы

Ленойл и Универсал представляют собой специализированные препараты нефтеокисляющего действия. В автореферате представлены данные, полученные при исследовании Универсала.

Внесение Универсала приводило к увеличению численности УОМ , максимальное их количество наблюдалось в почве загрязненной 10% неф-ти(полевой опыт - до 160*10' КОЕ/г почвы), что указывает на активное протекание процессов деградации углеводородов. Сходные данные получены в модельных экспериментах при рекультивации серой лесной почвы и чернозема обыкновенного (рис. 8).

Применение Универсала способствовало изменению видового состава комплекса микромицетов рекультивируемой почвы. Внесение биопрепарата в загрязненную почву приводило к возрастанию видового богатства, способствовало изменению обилия типичных видов (табл. 2).В чистой почве преобладал P. lanosum, внесение Универсала увеличило обилие этого вида. При низкой концентрации нефти максимальное обилие было характерно для Aspergillus niger, применение биопрепарата приводило к преобладанию Ре-nicillium canescens. В сильнозагрязненной почве доминировал P. madriti, обработка Универсалом приводила к смене доминанты.

Важным критерием оценки почвы в отношении ее самоочищающей способности от нефтяных углеводородов, является активность дегидрогеназы. Внесение нефти и нефтепродуктов оказало ингибирующее влияние на активность дегидрогеназы в начале эксперимента. В дальнейшем активность процессов анаэробного дегидрогенирования возрастала, видимо, в результате адаптации микробного сообщества к экстремальным условиям и началом процессов самоочищения почвы (рис. 9).

Применение Универсала не оказало явного стимулирующего влияния на дегидрогеназную активность серой лесной почвы, загрязненной нефтью.

Таблица 2

Обилие микромицетов при биоремедиации серой лесной почвы, _ загрязненной нефтью (полевой опыт)_

Виды микромицетов Обилие, %

контроль контроль +У 6,4% нефти 6,4% нефти+У 10%неф ти 10% +У

Aliernaria tenuis-sima (Kunze) Wiltshire - - - - 0,84 2,44

*Aspergillus fu-migatus Fresen. - ■ 6,52 - 4,0 - 3,05

*A. niger van Tiegh. 5,19 4,35 30,56 1,33 - 1,83

* Penicillium canescens Sopp - - 8,33 48 5,49 4,88

*P. citrinum Thom 1,29 - - 12 - 1,22

*P. chrysogenum var. chrysogenum Thom - - - - 4,64 -

P. coeruleoviride G. Sm. 1,29 - - - - 1,22

P. commune Thom 6,49 - - - - -

P. decumbens Thom 9,09 - 8,33 6,67 4,22 4,27

P. glauco-cinerascens Cha-lab - - - - 14,35 67,6 8

P. griseoroseum Dierckx 2,59 19,57 - - - -

*P. lanosum Westling 45,45 56,52 19,44 9,33 2,5 -

*P. madriti G. Sm. - - - - 62,87 -

*P. raperi G. Sm. 5,19 - 11,11 1,33 - -

*Trichoderma viride Pers. - - - - 1,69 1,22

Micelia sterili а (white) - 2,17 - 16,0 0,84 2,44

Примечание: У- Универсал; « - » - вид не обнаружен; * - фитотоксичный вид

180 160 140 120 100 80 60 40 20 0

без обработки

обработка Универсалом

серая лесная почва

без обработки

чернозем обыкновенный

обработка Универсалом

Ш контроль ш нефш 1% р не4*и 4% и нефш 8%

Рис. 8. Динамика численности углеводородокисляющих микроорганизмов в нефтезагрязненной и рекультивируемой Универсалом серой лесной почве и черноземе обыкновенном (90 суток)

При обработке биопрепаратом нефтезагрязненного чернозема обыкновенного отмечалось значительное возрастание активности дегидрогеназы в соответствии с увеличением концентрации поллютанта (рис. 9). Этот факт, возможно, объясняется тем, что черноземы обладают большим потенциалом биологической активности, чем серая лесная почва умеренной полосы.

Таблица 3

Деградация углеводородов в загрязненной серой лесной почве при рекультивации различными биопрепаратами (% , 90 суток)

Концентрация нефти, % Без обработки Белвита-мил УМД Азолен Елена Ленойл Универсал

1 67 81 83 79 77 93 90

4 21,8 52,5 50 43,5 47,3 64,3 69,7

8 22 63,7 61,3 46,3 32,5 66,6 68

Б

Рис. 9. Динамика дегидрогеназной активности чернозема обыкновенного (А) и серой лесной почвы (Б), загрязненных нефтью

Применение Универсала и Ленойла способствовало максимальной деградации углеводородов (табл. 3).

Глава 6. Фиторемедиация нефтезагрязненной почвы с использованием Archangelica officinalis и Tageies erecta

Технологии фиторемедиации более эффективны по сравнению с традиционными инженерными технологиями на стадии доочистки загрязненных почв. При совершенствовании этого метода основное внимание уделяется отбору растений, способных трансформировать совместно с симбиотиче-

□ коктропь а нефт 1% в нефго 4% □ нефти 8%

SE 2,5

" I га <" 2

® S

О , 1,5

С га

d а t

ч аз Ху 0,5

< 0

Зсут

без обработки

90 сут обработка Универсалом

скими микроорганизмами токсичную часть поллютантов, переводя их в менее подвижную и активную форму. Перспективными для внедрения в практику биоремедиации, с нашей точки зрения, являются дягиль лекарственный Archangelica officinalis (syn. A. archangelica) и бархатцы прямостоячие (Та-getes erect a L.).

Оценка воздействия на растения нефти и нефтепродуктов показала, что у них изменялся ряд морфологических и физиологических характеристик. Влияние минимальной концентрации нефти (1%) незначительно отразилось на морфологических параметрах дягиля и бархатцев. В ходе микроскопических исследований корней дягиля были обнаружены бурые включения, которые, возможно являются компонентами нефти, поступившими в корневую систему в результате процесса фитоэкстракции (рис.10).

Рис. 10. Влияние нефтяного загрязнения почвы на кории дягиля (А - контроль, Б - нефтяное загрязнение) (400")

Изучение препаратов корешков интактного и подверженного воздействию нефти растения показало, что при воздействии этого поллютанта активизируются процессы дегликозилирования фенолокислот, приводящие к накоплению в клетках флуоресцирующих кумаринов, при этом обнаруживалась яркая флуоресценция (рис. 11). Кумарины в норме не присутствуют в клетках растений, их появление свидетельствует о деструктивных процессах в клетках.

Ткань корней дягиля под действием нефти Рис. 11. Препарат корешков растений дягиля при 6%-ном нефтяном загрязнении через 30 суток воздействия (400х)

Как известно, хлорофилл, находящийся в фотосинтетических мембранах, служит своего рода детектором состояния клеток растений. Через 30 суток культивирования дягиля на нефтезагрязненной почве отмечено угнетение фотосинтеза в варианте с 1%-ым загрязнением. Максимальное содержание хлорофиллов на протяжении всего опыта было отмечено при воздействии нефти в концентрации 3%, в первую очередь это коснулось хлорофилла б, более устойчивого к действию стрессоров (рис. 12). Аналогичные данные были получены при оценке влияния нефти и нефтепродуктов на фотосинтетическую систему бархатцев: на долю хлорофилла 6 приходилось 38,7% при 6%-ном загрязнении, в сравнении с 27,9% - при 3%-ном.

Оценка содержания бенз(а)пирена в тканях дягиля и бархатцев показала, что с ростом концентрации нефти наблюдалось увеличение содержания БП в растительной массе бархатцев и дягиля. Полученные данные свидетельствуют о способности бархатцев и дягиля к гипераккумуляции ПАУ, причем дягиль обладает более высоким потенциалом за счет большей биомассы растения (табл. 4).

Под посевами дягиля и бархатцев уменьшалось содержание остаточных углеводородов. Отмечено, что под посевом дягиля произошла деградация около 40% углеводородов при начальной концентрации загрязнителя в почве 1-3% и 20% - при 6% спустя 60 суток с начала эксперимента.

|июнтроль внеф!ь1% внеф!ьЗ% шнефсь6% j

Рис. 12. Изменения содержания хлорофилла а и б в листьях Archangelica officinalis на 3,30 и 60 сутки после внесения нефти

В почве под посевами дягиля и бархатцев наблюдалось стимулирование развития УОМ, увеличение численности микроорганизмов, использующих

минеральные и органические формы азота, целлюлозолитиков, азотфикса-торов, усиливалась ферментативная активность почвы (табл. 5).

Таблица 4

Содержание бенз(а)пирена в растениях, выращенных на нефтезаг-рязненных почвах (нг/г)

Растение Концентрация нефти, %

0 1 3 6

Бархатцы 12,3±3,0 49,1 ±2,5 110,0±5,0 270,0±10,0

Дягиль 28±1,3 66,2±3,3 150,2±6,8 670±33,0

Таблица 5

Влияние нефтяного загрязнения на некоторые группы микроорганизмов ризосферы дягиля и бархатцев

Группы микроорганизмов (КОЕ/г почвы) Концентрация нефти, % Дягиль Бархатцы

30 суток 60 суток 30 суток 60 суток

Микроорганизмы, на КАА,х105 0 65,0±9,7 116,7±6,3 54,2±2,0 53,3±4,0

1 91,7±3,5 237,5±14,7 44,2±2,0 95,7±5,5

3 73,0±3,2 241,7±16,5 27,0±0,75 172,5±12,0

6 201 ±24,7 217,8±5,3 99,0±3,5 144,7±9,0

Азотфикса- торы, хЮ5 0 41,7±8,5 64,0±3,5 19,0±0,75 14,7±0,5

1 57,5±14,8 155,5±14,6 11,8±0,5 6,3±0,5

3 96,0±7,1 182±9,2 6,3±0,25 7,75±0,25

6 27,5±3,7 66,5±3,75 11,5±0,75 12,0±0,75

Целлюло-золитики, хЮ4 0 13,75±0,45 21,7±0,97 11,0±0,9 13,1±1,0

1 10,0±0,75 20,7±0,7 4,3±0,1 12,5±0,7

3 8,1 ±0,52 5,75±0,32 6,5±0,2 7,9±0,5

6 4,37±0,22 5,0±0,2 2,75±0,1 7,1 ±0,2

УОМ, хЮ3 0 4,5±0,23 4,5±0,23 3,5±0,14 4,0±1,18

1 16,5±0,82 75,0±3,7 20,0±0,82 45,0±2,3

3 20,0±0,09 140,0±7,05 16,5±1,2 70,0±3,6

6 45,0±2,25 160,0±8,5 25,0±1,2 110±5,5

Микориза - широко распространенная форма микробно-растительного симбиоза, способствующая выживанию растений при неблагоприятных условиях окружающей среды (Селиванов, 1981; Широких, 2008). В корнях дягиля лекарственного было выявлено наличие везикулярно-арбускулярной

микоризы. Исследования показали, что встречаемость микоризной инфекции в интактных растениях дягиля составляла 62,6%, интенсивность мико-ризации - 19,8%. Нефтяное загрязнение стимулировало развитие микоризы в корнях дягиля. В почве с содержанием нефти до 3% встречаемость микоризной инфекции возрастала, при дальнейшем увеличении концентрации поллютанта отмечалось снижение этого показателя (рис. 13).Интенсивность

100 90 80 -70 -60 ; 50 -40 -30 20 -10 0 -

Концентрация нефти,%

. Встречаемость микоризной инфекции —*—Интенсивность микоризной инфекции |

Рнс. 13. Встречаемость микоризной инфекции и ее интенсивность в корневой системе дягиля лекарственного при загрязнении нефтью

микоризной инфекции при 1%-ном загрязнении нефтью была выше, чем в инт;.:стном растении. Далее наблюдалась регрессирующая динамика, степень ингибирующего влияния нефтяных углеводородов составила 61% от контрольного показателя при максимальной концентрации поллютанта.

ВЫВОДЫ

1. Проведена оценка эффективности применения биопрепаратов разнонаправленного действия и растений для ремедиации почв, загрязненных нефтью. Показано, что исследованные препараты при рекультивации серой лесной почвы по степени снижения содержания остаточных углеводородов располагаются в ряду Универсал-* Ленойл—* Белвита-мил^ УМД—► Лзолен—* ЁЛеИа; СйижеИие фитотоксичноСти поЧвь: при биоремедиаци происходило в ряду Ленойл—► Азолен—» Елена—► Универсал—» Белвитамил—> УМД.

2. Выявлено, что применение УМД стимулировало увеличение численности УОМ (в 3-10 раз), целлюлозоразлагающих микроорганизмов (в 10-25 раз), микроорганизмов цикла азота (в 1,5-10 раз). Внесение УМД

привело к перестройке комплекса микромицетов нефтезагрязненной серой лесной почвы, способствующей усилению ее фитотоксичности.

3. Показано, что использование Белвитамила стимулировало рост численности УОМ, активность каталазы в большей степени, чем Азолен и Елена. Внесение Азолена и Елены приводило к уменьшению доли фитоток-сичных видов в составе комплекса микромицетов нефтезагрязненной серой лесной почвы .

4. Установлено, что Универсал и Ленойл способствуют восстановлению микробоценоза нефтезагрязненной серой лесной почвы, стимулируют активность ферментов. Показано, что биопрепарат Универсал может быть использован для биоремедиаци серой лесной почвы и чернозема обыкновенного, загрязненных нефтью.

5. Показано, что дягиль лекарственный и бархатцы прямостоячие являются перспективными растениями для фиторемедиации нефтезагрязнен-ных почв. Установлено, что корневая система и фотосинтетический аппарат дягиля и бархатцев устойчивы к воздействию нефтяных углеводородов. В ризосфере растений увеличивалась численность УОМ, усиливалась ферментативная активность почвы. Загрязнение нефтью (3%) стимулировало микоризную инфекцию на корнях дягиля лекарственного. Посевы дягиля и бархатцев способствовали снижению содержания нефти на 40% - 55%. Показано, что данные растения способны к гипераккумуляции бенз(а)пирена.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Киреева H.A., Водопьянов В.В., Рафикова Г.Ф., Кабиров Т.Р., Григо-риади A.C. Мониторинг токсичности нефтезагрязненных почв по микробиологическим показателям // Вестник Оренбургского государственного университета. — 2007. -№ 75. - С. 158-161.

2. Киреева H.A., Онегова Т.С., Григориади A.C. Характеристика Белвитамила, используемого для рекультивации нефтезагрязненных природных объектов. // Вестник Башкирского университета. - 2008. - Т. 13, №2.-С. 279-281.

3. Киреева H.A., Шамаева A.A., Григориади A.C., Новоселова Е.И. Изучение возможности утилизации отходов деревопереработки для биологической очистки и детоксикации нефтешламов // Теоретическая и прикладная экология. - 2008. - №3. - С. 81-85.

4. Киреева H.A., Бакаева М.Д.. Климина И.П., Григориади A.C., Рафикова Г.Ф. Накопление оппортунистических грибов во внешней среде города с развитой нефтеперерабатывающей промышленностью. // Иммунопатология, Аллергология, Инфектология. - 2009. -№2. - С. 48-49.

5. Григориади А.С., Новоселова Е.И., Киреева Н.А. Фиторемедиация как способ очистки и повышения биологической активности нефтезагряз-ненных почв // Аграрная Россия. - 2009. - Спецвыпуск. - С. 30-31.

6. Киреева Н.А., Новоселова Е.И., Шамаева А.А., Григориади А.С. Биологическая активность чернозема выщелоченного, загрязненного продуктами сгорания попутного нефтяного газа, и возможности ее восстановления при фиторемедиации // Почвоведение. - 2009. - №4. -С. 498-503.

7. Баширова P.M., Григориади А.С., Киреева Н.А., Юмагужин М.С., Тимербаева Г.Р., Долотовская J1.3. Влияние загрязнения почвы нефтью на некоторые физиологические показатели дягиля лекарственного Archangelica officinalis // Аграрная Россия. - 2009. - №2. - С. 42-44.

8. Киреева Н.А., Рафикова Г.Ф., Григориади А.С., Гапимзянова Н.Ф., Логинов О.Н. Влияние биопрепарата Азолен на комплекс микромицетов нефтезагрязненной серой лесной почвы // Микология и фитопатология. -2009,-№2.-С. 142-150.

9. Киреева Н.А., Новоселова Е.И., Григориади А.С. Влияние загрязнения почв нефтью на некоторые физиологические показатели растений и ризосферную микробиоту // Агрохимия. -2009. -№7. - С. 71-80.

10. Киреева Н.А., Новоселова Е.И., Ерохина Н.И., Григориади А.С. Накопление бенз(а)пирена в системе «почва-растение» при загрязнении нефтью и внесении активного ила // Вестник Оренбургского государственного университета. —2009. - №6. - С. 579-581.

11. Водопьянов В.В., Киреева Н.А., Григориади А.С., Якупова А.Б. Влияние нефтяного загрязнения почвы на ризосферную микробиоту и моделирование процессов биодеградации // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2009. - №6. - С. 545-547.

12. Киреева Н.А., Климина И.П., Григориади А.С., Якупова А.Б. Микромицеты как биодеструкторы углеводородов и потенциальные возбудители микозов в нефтезагрязненных регионах // Проблемы медицинской микологии. - 2009. - №2. - С. 79.

13. Киреева Н.А., Дубовик И.Е., Григориади А.С., Кабиров Т.Р. Оценка фитотоксичности нарушенных почв по показателям альгомикологического комплекса // Агрохимия. - 2009. - №11. - С. 4349.

14. Киреева Н.А., Григориади А.С., Щемелинина Т.Н., Гареева А.Р., Якупова А.Б. Оценка эффективности биоремедиации нефтезагрязненных почв с использованием бакпрепарата Универсал // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2009, -Октябрь. - Спецвыпуск. - С. 454-455.

15. Водопьянов В.В., Киреева Н.А., Григориади А.С., Баширова P.M., Гареева А.Р., Шпилева У.Ю. Мониторинг растений-фиторемедиантов

нефтезагрязненных почв по аллометрическим и физиолого-биохимическим показателям роста // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2009. — Октябрь. — Спецвыпуск. - С. 543-544.

16. Киреева H.A., Шамаева A.A., Григориади A.C., Водопьянов В.В., Новоселова Е.И. Биоремедиация и детоксикация нефтешлама // Защита окружающей среды в нефтегазовом комплексе. - 2009. - №3. - С. 43-47.

17. Киреева H.A., Новоселова Е.И., Григориади A.C. Оценка нарушенно-сти лесных почв, загрязненных нефтепродуктами по показателям ферментативной активности // Аграрная Россия - 2009. - Спецвыпуск. Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы дендроэкологии и адаптации растений». - С. 183-184.

18. Киреева H.A., Григориади A.C., Хайбуллина Е.Ф. Ассоциации углеводородокисляющих микроорганизмов для биоремедиации нефтезагрязненных почв // Вестник Башкирского университета. - 2009. -Т. 14, №2.-С. 391-394.

19. Kireeva N.A., Vodopyanov V.V., Shamaeva A.A., Grigoriadi A.S. Dynamics of phytoremediation the soils, contaminated with oil // Soil remediation / ed. L.Aachen , P .Eichmann. N-Y.: Nova Science Publishers, 2009. - P. 369-377.

20. Киреева H.A., Рафикова Г.Ф., Галимзянова Н.Ф., Логинов О.Н., Григориади A.C., Якупова А.Б. Влияние биофунгицида Елена на комплексы микромицетов нефтезагрязненных почв различных типов при биореме-диаци // Микология и фитопатология. - 2010. - Т. 44, Вып. 1. - С. 53-62.

21. Киреева H.A., Водопьянов В.В., Григориади A.C., Новоселова Е.И., Багаутдинова Г.Г., Гареева А.Р., Лобастова Е.Ю. Эффективность применения биопрепаратов для восстановления плодородия техногенно-загрязненных почв // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. - 2010. - № 1(4). - С. 1023-1026.

22. Киреева H.A., Григориади A.C., Климина И.П. Микромицеты -биодеструкторы нефтяных углеводородов в загрязненных и рекультивируемых почвах // Проблемы медицинской микологии. -2010.

- №2. - С. 97.

23. Киреева H.A., Григориади A.C., Гареева А.Р. Влияние загрязнения нефтяными углеводородами на ризосферную микробиоту растений-фиторемедиантов // Сборник матер. III Междунар. научной конф. «Современные проблемы загрязнения почв» - Москва, 24-28 мая, 2010г.

- Москва, 2010. - С. 222-225.

24. Киреева H.A., Водопьянов В.В., Григориади A.C., Гареева А.Р., Атепаева О.С. Мониторинг биоремедиаци нефтезагрязненных почв по показателям биологической активности // Матер, докладов Междунар. научно-практ. конф. «Экологическое нормирование, сертификация и

паспортизация почв как научная основа рационального землепользования». - Москва, 30 сентября-1 октября 2010г. - Москва, 2010.-С. 89-91.

ГРИГОРИАДИ Анна Сергеевна

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ И ФИТОМЕЛИОРАНТОВ В БИОРЕМЕДИАЦИИ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ПОЧВ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

Лицензия на издательскую деятельность ЛРN2 021319 от 05.01.99 г.

Подписано в печать 27.09.2010 г. Формат 60x84/16. Усл. печ. л. 1,38. Уч.-изд. л. 1,66. Тираж 100 экз. Заказ 797.

Редакционно-издательский центр Башкирского государственного университета 450074, РБ, г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32.

Отпечатано на множительном участке Башкирского государственного университета 450074, РБ, г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Григориади, Анна Сергеевна

Введение.

Глава 1. Влияние нефтяного загрязнения и ремедиации на биологические свойства почвы обзор литературы).

1.1. Нефть и нефтепродукты как источник антропогенного загрязнения почвенной экосистемы.

1.2. Экологические последствия загрязнения нефтью и нефтепродуктами.

1.2.1. Влияние нефтяного загрязнения на биологическую активность почвы.

1.2.2. Фитотоксичность нефтезагрязненных почв.

1.3. Естественная деградация нефтяных углеводородов в почве.^

1.4. Биоремедиация нефтезагрязненных почв.

1.4.1. Методы стимуляции аборигенной микробиоты нефтезагрязненной почвы.

1.4.2. Применение бактериальных препаратов.

1.4.3. Фиторемедиация нефтезагрязненной почвы.

Глава 2. Объекты и методы исследований.

2.1. Характеристика районов исследования.5 ^

2.2. Постановка полевых и лабораторных экспериментов.^ |

2.2.1. Лабораторные исследования.5 ^

2.2.2. Полевые исследования.

2.2.3. Характеристика нефти и нефтепродуктов.

2.2.4. Характеристика биопрепаратов, использованных в работе.

2.3. Методы исследований.5^

2.3.1. Методика отбора почвенных проб.5^

2.3.2. Методика определения содержания остаточных нефтепродуктов

2.3.3. Методы определения ферментативной активности почвы.

2.3.4 Методы посева и учета почвенных микроорганизмов.

2.3.5 Методы изучения структуры комплекса микромицетов.

2.3.6 Определение фитотоксичности почвы.^

2.3.7 Методика определения содержания хлорофилла в растительном сырье. ^

2.3.8 Методы исследования корневой системы растений. ^

2.3.9 Спектрофлуориметрический способ определения содержания бенз(а)пирена.

2.3.10. Методика определения тяжелых металлов в растительном сырье ^

2.3.11. Методика определения тяжелых металлов в почве. ^

2.3.12. Статистическая обработка результатов. ^

Глава 3. Использование углеводно-минеральной добавки для стимулирования аборигенной микробиоты при восстановлении нефте-загрязненной почвы.

3.1. Влияние УМД на динамику численности некоторых эколого-трофических групп микроорганизмов нефтезагрязненной почвы.

3.2. Влияние углеводно-минеральной добавки на комплекс микромицетов нефтезагрязненной серой лесной почвы.

3.3. Влияние УМД на фитотоксичность нефтезагрязненной серой лесной почвы.

3.4. Влияние УМД на каталазную активность нефтезагрязненной серой лесной почвы.

3.5. Деградация углеводородов при использовании УМД для рекультивации нефтезагрязненной серой лесной почвы.

Глава 4. Влияние неспецифических микробных препаратов на биологические параметры нефтезагрязненной почвы.

4.1. Оценка влияния биопрепарата Белвитамил на биологическую активность нефтезагрязненной серой лесной почвы.

4.1.1. Влияние биопрепарата Белвитамил на динамику численности некоторых эколого-трофических групп микроорганизмов нефтезагрязненной почвы.

4.1.2. Влияние биопрепарата Белвитамил на комплекс микромицетов нефтезагрязненной серой лесной почвы.

4.1.3. Влияние биопрепарата Белвитамил на фитотоксичность нефтезагрязненной серой лесной почвы.

4.1.4. Влияние биопрепарата Белвитамил на каталазную активность нефтезагрязненной серой лесной почвы. ^

4.1.5. Деградация углеводородов при использовании Белвитамила для рекультивации нефтезагрязненной серой лесной почвы. ду

4.2. Изучение влияния препарата Азолен на микробиологическую активность нефтезагрязненной почвы.

4.2.1. Изучение влияния препарата Азолен на ферментативную активность нефтезагрязненной почвы.

4.2.2. Изучение влияния препарата Азолен на фитотоксичность и динамику численности некоторых эколого-трофических групп микроорганизмов нефтезагрязненной почвы.

4.3 . Изучение влияния препарата Елена на микробиологическую активность загрязненной почвы. ЮО

Глава 5. Влияние специализированных препаратов на основе угле-водородокисляющих микроорганизмов на биологическую активность нефтезагрязненной почвы. Ю

5.1. Изучение влияния препарата Ленойл на микробиологическую активность загрязненной почвы.

5.2. Использование биопрепарата Универсал для рекультивации почвы, нефтезагрязненной почвы в полевых условиях. ИЗ

5.2.1. Изучение влияния препарата Универсал на ферментативную активность загрязненной почвы (полевой опыт). ИЗ

5.2.2. Изучение влияния препарата Универсал на микробиологическую активность загрязненной почвы (полевой опыт).

5.2.3. Изучение влияния препарата Универсал на структуру комплекса микромицетов загрязненной почвы (полевой опыт).

5.2.4. Изменение фитотоксичности почвы, загрязненной нефтью при рекультивации биопрепаратом Универсал.

5.3. Использование биопрепарата Универсал для рекультивации различных типов почв, загрязненных нефтью.

5.3.1. Изучение влияния препарата Универсал на ферментативную активность нефтезагрязненной серой лесной почвы и чернозема обыкновенного (модельный опыт).

5.3.2. Изучение влияния препарата Универсал на численность некоторых эколого-трофических групп микроорганизмов нефтезагрязненной серой лесной почвы и чернозема обыкновенного (модельный опыт).

5.3.3. Изучение влияния препарата Универсал на фитотоксичность нефтезагрязненной серой лесной почвы и чернозема обыкновенного (модельный опыт).

Глава 6. Использование дягиля лекарственного (Archangelica officinalis) и бархатцев прямостоячих (Tagetes erecta) для фиторемедиа-ции нефтезагрязненных почв.

6.1. Оценка реакции Archangelica officinalis на нефтяное загрязнение по эколого-физиологическим параметрам.

6.2. Влияние нефти на активность почвенной дегидрогеназы, каталазы и фенолоксидаз под посевами Archangelica officinalis.

6.3. Микробные комплексы ризосферы Archangelica officinalis при нефтяном загрязнении почв.

6.4. Оценка реакции Tagetes erecta на загрязнение нефтью и нефтепродуктами по эколого-физиологическим параметрам.

6.5. Влияние нефти и нефтепродуктов на активность почвенной дегидрогеназы, каталазы и фенолоксидаз под посевами Tagetes erecta.

6.6. Микробные комплексы ризосферы Tagetes erecta при нефтяном загрязнении почв.

6.7. Численность углеводородокисляющих микроорганизмов, содержание остаточных нефтепродуктов и других токсических веществ в загрязненной почве при фиторекультивации.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Оценка эффективности применения биопрепаратов и фитомелиорантов в биоремедиации нефтезагрязненных почв"

Актуальность исследования. В условиях неуклонно возрастающего антропогенного давления на окружающую среду ее защита от техногенного загрязнения является одной из серьезных задач экологии.

В результате нефтяного загрязнения значительные территории становятся непригодными для сельскохозяйственного использования. Нефть и нефтепродукты, поступая в окружающую среду, оказывают негативное влияние на природные компоненты экосистемы. Они являются постоянным источником канцерогенного и мутагенного загрязнения. Нефтяное загрязнение почв наблюдается в районах добычи, транспортировки, хранения и переработки нефти. Оно происходит в основном из-за утечек нефти, связанных с несоблюдением правил ее добычи, изношенностью оборудования, нарушениями при проектировании, несанкционированными врезками в действующие нефтепроводы.

Исследованиями многих авторов доказано, что естественное восстановления плодородия почв, загрязненных нефтяными углеводородами, занимает длительный период (Хазиев, Фатхиев, 1981; Мащеэт е1 а1., 1999; Логинов и др., 2000; Габбасова, 2004; Маганов и др., 2006; Кураков и др., 2006). Попытки рекультивации нарушенных почв только физико-химическими методами зачастую не дают желаемых результатов (Суржко и др., 1995; Алексеева и др., 2000; Давыдова, Тагасов, 2006; Мельников и др., 2007). В настоящее время наиболее перспективным считается комплексный подход к биоремедиации (Исмаилов, Пиковский, 1988; Бельков, 1995; Логинов и др., 2000; Карасева и др., 2005; Середина и др., 2008). Еще большую популярность приобретают методы, основанные на использовании объединенного метаболического потенциала микроорганизмов и растений (Турковская, Муратова, 2005). В связи с этим весьма актуальным является изучение процессов восстановления нефтезагрязненных почв с использованием различных методов и приемов рекультивации.

Цель диссертационной работы — оценка эффективности микробных препаратов разнонаправленного действия и фитомелиорантов при рекультивации нефтезагрязненных почв по биологическим показателям.

Основные задачи исследований:

1. Выявить изменения биологической активности нефтезагрязненной серой лесной почвы при стимулировании аборигенной микробиоты внесением углеводно-минеральной добавки, являющейся отходом целлюлозно-бумажного производства;

2. Изучить влияние неспецифических микробных препаратов (Азолен, Бел-витамил, Елена) на восстановление серой лесной почвы после нефтяного загрязнения;

3. Оценить по биологическим показателям эффективность применения препаратов, основанных на специализированных углеводородокисляющих группах микроорганизмов (Ленойл, Универсал), для восстановления разных типов почв в процессе ремедиации;

4. Исследовать возможность использования дягиля лекарственного (Аг-changelica officinalis L.) и бархатцев прямостоячих (Tagetes erecta L.) для ремедиации нефтезагрязненной серой лесной почвы.

Научная новизна работы. Впервые было проведено исследование влияния биопрепарата Универсал на типы почв, характерных для умеренных и южных широт России и рассмотрен комплекс микроскопических грибов при рекультивации препаратом. Впервые была предложена углеводно-минеральная добавка, являющаяся отходом целлюлозно-бумажного производства, для рекультивации нефтезагрязненной почвы. Получены новые данные при использовании растений дягиля лекарственного (Archangelica qffici-nali) для фиторемедиации почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами. Впервые проведена оценка влияния растения-фиторемедианта на биологические свойства нарушенных почв, а также исследована устойчивость дягиля к действию поллютанов и степень деградации нефтяных углеводородов под его посевами.

Практическая значимость. Полученные данные могут быть использованы при выборе методов биоремедиации в зависимости от типа почвы и степени ее загрязнения в условиях разных климатических зон России. Было предложено использовать дягиль лекарственный в качестве растения-фиторемедианта нефтезагрязненной почвы. Результаты исследований могут быть использованы в учебном процессе в рамках дисциплин «Рекультивация нарушенных земель», «Экология микроорганизмов», «Биоиндикация и биомониторинг» и «Техногенные системы и экориск».

Результаты исследований были апробированы в ССП «НИПИ Нефте-газ» (Акт о внедрении представлен в Приложении I).

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)", Григориади, Анна Сергеевна

выводы

1. Проведена оценка эффективности применения биопрепаратов разнонаправленного действия и растений для ремедиации почв, загрязненных нефтью. Показано, что исследованные препараты при рекультивации серой лесной почвы по степени снижения содержания остаточных углеводородов располагаются в ряду Универсал—> Ленойл—> Белвитамил—» УМД—> Азолен—> Елена. Снижение фитотоксичности почвы при биореме-диаци происходило в ряду Ленойл—> Азолен—> Елена—> Универсал—> Белвитамил—» УМД.

2. Выявлено, что применение УМД стимулировало увеличение численности УОМ (в 3-10 раз), целлюлозоразлагающих микроорганизмов (в 10-25 раз), микроорганизмов цикла азота (в 1,5-10 раз). Внесение УМД привело к перестройке комплекса микромицетов нефтезагрязненной серой лесной почвы, способствующей усилению ее фитотоксичности.

3. Показано, что использование Белвитамила стимулировало рост численности УОМ, активность каталазы в большей степени, чем Азолен и Елена. Внесение Азолена и Елены приводило к уменьшению доли фито-токсичных видов в составе комплекса микромицетов нефтезагрязненной серой лесной почвы (по сравнению с Белвитамилом).

4. Установлено, что Универсал и Ленойл способствуют восстановлению микробоценоза нефтезагрязненной серой лесной почвы, стимулируют активность ферментов. Показано, что биопрепарат Универсал может быть использован для биоремедиаци серой лесной почвы и чернозема обыкновенного, загрязненных нефтью.

5. Показано, что дягиль лекарственный и бархатцы прямостоячие являются перспективными растениями для фиторемедиации нефтезагрязненных почв. Установлено, что корневая система и фотосинтетический аппарат дягиля и бархатцев устойчивы к воздействию нефтяных углеводородов. В ризосфере растений увеличивалась численность УОМ, усиливалась ферментативная активность почвы. Загрязнение нефтью (3%) стимулировало микоризную инфекцию на корнях дягиля лекарственного. Посевы дягиля и бархатцев ускоряли снижению содержания нефти на 40% - 55%. Показано, что данные растения способны к гипераккумуляции бенз(а)пирена.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Первоочередной задачей природоохранной деятельности в районах нефтедобычи и нефтепереработки является совершенствование существующих технологий рекультивации нефтезагрязненных почв. Потребность в этом особо остро ощущается в связи с постоянно возрастающими требованиями к качеству окружающей природной среды.

Многообразие предлагаемых методов не дает исчерпывающих данных о преимуществах того или иного метода в связи необходимостью учета всех экологических особенностей того типа почвы, на восстановление которого направлены рекультивационные мероприятия. В последние годы для биоре-медиации нефтезагрязненных почв стали применяться различные биопрепараты и биостимуляторы. В связи с этим возникает необходимость изучения их влияния на почвенную микробиоту. Функциональная активность последней является одним из главнейших условий биологического очищения почв от нефтяных углеводородов.

В настоящей работе рассмотрено влияние основных подходов и приемов биоремедиаци на параметры, характеризующие восстановление функциональной активности нефтезагрязненной почвы (численность микроорганизмов, активность каталазы, фитотоксичность, степень деградации углеводородов). В качестве индикаторной группы при оценке эффективности способов биоремедиации были выбраны целлюлозоразлагающие микроорганизмы. Эта группа высокочувствительна к ксенобиотикам и чутко реагирует на улучшение условий обитания при биоремедиации. В качестве биостимулятора аборигенной микробиоты выбрана углеводно-минеральная добавка, в качестве препаратов неспецифического биодополнения применяли Белвита-мил, биоудобрение Азолен и биофунгицид Елена, для ускорения деградации углеводородов использовали специализированные биопрепараты Универсал и Ленойл. Для изучения фиторемедиации было выбраны растения дягиля лекарственного {Archangelica officinalis) и бархатцев прямостоячих (Tagetes erectci).

В настоящее время развивается тенденция рационального использования отходов производства, которые нуждаются в утилизации. Если они не проявляют токсических свойств, то могут быть использованы для восстановления загрязненных почв. Углеводно-минеральную добавку можно отнести к препаратам такого действия.

Внесение УМД ускорило снижение содержания остаточных нефтепродуктов в почве, оказало положительное влияние на основные показатели биологической активности почвы - численность целлюлозоразрушающих микроорганизмов, микроорганизмов, использующих минеральные формы азота, и микромицетов, способствовало росту каталазной активность почвы. Однако внесение отходов производства не приводило к снижению фитоток-сичности почвы, что проявилось в отсутствии стимуляции роста растений. Последнее связано со значительным стимулированием роста и развития уг-леводородокисляющих микромицетов, являющихся, в большинстве своем, фитотоксичными. Таким образом, при использовании УМД необходимо последующее внесение фунгицидных препаратов для снижения доли фитоток-сичных микромицетов после достижения допустимого уровня остаточных нефтепродуктов в почве.

Ко второй группе рассматриваемых биопрепаратов можно отнести биоудобрение Азолен, биофунгицид Елена и Белвитамил. При внесении данных биопрепаратов в нефтезагрязненную почву возрастала численность У ОМ, микроорганизмов, использующих минеральные и органические формы азота, азотфиксирующих микроорганизмов. Использование Азолена и Елены приводило к быстрому снижению фитотоксичности рекультивируемой почвы. В рекультивируемых почвах, загрязненных нефтью в концентрации до 4%, поддерживался высокий уровень активности ферментов.

Особенностью Белвитамила по сравнению с остальными биопрепаратами является то, что в него входят различные группы микроорганизмов активного ила. Это повышает биодеструктивную активность Белвитамила, поэтому он не только активизирует аборигенную микробиоту почв, но и достаточно активно разрушает нефть за счет собственных нефтедеструкторов.

Снижение токсичности почвы, рекультивируемой при внесении Азоле-на и Елены, очевидно, обусловлено деградацией нефти под воздействием аборигенных углеводородокисляющих микроорганизмов, развитие которых стимулируется при использовании данных биопрепаратов.

Использование специализированных биопрепаратов, таких как Ленойл и Универсал, приводило к максимальному снижению концентрации остаточных нефтяных углеводородов в почве. Специализированные препараты оказывали положительное влияние на другие микробиологические и ферментативные показатели восстанавливаемой почвы.

Внесение биопрепаратов Ленойл, Универсал, Азолен, Елена, Белвита-мил, УМД в загрязненную нефтью почву приводило к значительному снижению содержания остаточных углеводородов. Через 90 сут для образцов с концентрацией поллютанта 8% показатель составил: при использовании Ле-нойла - до 67%, Универсала - до 70%; Азолена - до 45%, Елены - до 35%; Белвитамила - до 64%; УМД - до 60%.

На рисунке 36 представлена схема, обобщающая результаты эффективности различных методов ремедиации серой лесной почвы по содержанию остаточных нефтепродуктов и степени фитотоксчности.

Степень деградации остаточных углеводородов

Снижение фитоток-сичности почвы

Рис. 36. Эффективность применения различных биопрепаратов для ремедиации нефтезагрязненных почв

Исследуемые препараты оказали неодинаковое влияние на показатели численности индикаторных групп микроорганизмов. Применение УМД зна

Л>А>Е>У>БВ> УМД чительнее остальных препаратов стимулировало ферментативную активность нефтезагрязненной почвы. Увеличение численности целлюлозоразрушающих микроорганизмов при внесении Белвитамила закономерно, т.к. в составе активного ила целлюлозно-бумажного комбината их количество велико.

Как видно из рис. 36 и 37 комплекс использованных параметров позволяет всесторонне оценить эффективность каждого препарата.

БВ > Л > Е > УМД > У > А

Относительная численность целлюло-зо-разрушающих микроорганизмов

Относительная активность каталазы О

УМД > БВ >Л>А>У>Е

Рис. 37. Эффективность различных препаратов по показателям активности каталазы и численности целлюлозоразлагающих микроорганизмов

В настоящее время показано (Иларионов, 2004; Киреева, Бакаева, 2005; Шестибратов, 2008), что на заключительной стадии рекультивации (доочист-ке) более эффективны оказались технологии фиторемедиации по сравнению с традиционными инженерными приемами. Применение фитомелиорантов для восстановления нефтезагрязненных почв обусловлено их взаимовыгодным сосуществованием с микробным сообществом прикорневой зоны, что способствует их выживанию в неблагоприятных условиях окружающей среды (Турковская, Муратов, 2005). Этот процесс обусловлен не только повышением толерантности к ксенобиотикам, но и активным удалением токсикантов из сферы обитания за счет ризодеградации (Евдокимова и др., 2007).

Для максимального эффекта неоходимо применять растения-фиторемедианты, являющиеся аборигенными видами для местности, где планируется проведение рекультивационных работ. Бархатец прямостоячий, являющийся видом космополитом, и дягиль лекарственный, широко распространенный в северных и умеренных регионах европейской части России, хорошо подходят для фиторемедиации этих территорий, т.к. именно там пролегают основные нефте- и газопроводы, а также предприятия по добыче и переработке нефтяного сырья.

Предлагаемые фиторемедианты следует высаживать в местах хронического загрязнения (промышленные зоны нефтеперерабатывающих и нефтедобывающих предприятий и примыкающие территории, на которые может распространиться влияние предприятия), а также в местах возможных нефтяных аварий и разливов (вдоль трубопроводов и на нефтяных качалках). Это своего рода превентивная мера от возможного загрязнения нефтяными углеводородами, к тому же растения способны поглощать тяжелые металлы.

Одним из критериев оценки влияния среды на растения было выбрано изменение в их пигментной системе. Фотосинтетический аппарат у дягиля и бархатцев оказался устойчивым к нефтяному стрессу. Максимальное содержание хлорофилла было отмечено в варианте с внесением нефти в концентрации до 3% во все сроки экспериментов. Внесение нефти в дозах >3-6% вызывало менее выраженную стимуляцию биосинтеза хлорофилла. Изменения коснулись и соотношения хлорофилла а и б. Под воздействием нефтяных углеводородов увеличивалась доля хлорофилла б, что свидетельствует о преобладании той формы пигмента, которая более устойчива к воздействию стрессовых факторов.

Под воздействием поллютанта в концентрации до 6% происходила стимуляция жизнедеятельности ризосферных микроорганизмов и, соответственно, процессов деградации поллютанта. В ризосфере исследуемых растений значительно увеличивалась как общая численность, так и углеводородо-кисляющих микроорганизмов. Под посевами фиторемедиантов отмечалась деградация нефтяных углеводородов до 40%. Проведенные исследования позволяют рассматривать дягиль и бархатцы как растения, устойчивые к действию нефти. По устойчивости к нефти дягиль близок к такому фитомелиоран-ту как подсолнечник Helianthus annuus L., переносящему загрязнение почвы в дозе 7% (Yang et al., 2002). Кроме того было показано, что бархатцы являются аккумуляторами тяжелых металлов.

Таким образом, проведенные исследования показывают, что совершенствование технологий биоремедиации, способствующее не только очистке загрязненной почвы от углеводородов, но и восстановлению ее биологических функций, заключается в обоснованном сочетании различных биопрепаратов и растений-фитомелиорантов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Григориади, Анна Сергеевна, Уфа

1. Алексеева, Т.П. Перспективы использования торфа для очистки нефтезагрязненных почв /Т.П. Алексеева, Т.И. Бурмистрова, H.H. Терещенко, Л.Д. Стахина, И.И. Панова // Биотехнология. 2000. — №1. — С.58-64.

2. Алиев, С.А. Влияние загрязнения нефтяным органическим веществом на активность биологических процессов почв / С.А. Алиев, Д.А. Гаджиев // Изв. АН АзССР. Сер. Биологические науки. 1977. -№> 2. - С. 46-49.

3. Андреева, И.С. Штамм Alcaligenes sp., el 135 для биоремедиации нефтезагрязненных объектов окружающей среды / И.С. Андреева, Е.К. Емельянова, В.Е. Репин // Патент 2271390 РФ. Бюлл. изобр. - 2006, №7.

4. Андресон, Р.К. Борьба с загрязнениями почвогрунтов нефтью / Р.К. Анд-ресон, Ф.Х. Хазиев // Обзорная информация. Серия «Коррозия и защита в нефтегазовой промышленности». М.: ВНИИОЭНТ, 1981. - 46с.

5. Андресон, Р.К. Применение бактериального препарата для рекультивации нефтезагрязненных почв / Р.К. Андресон, Т.Ф. Бойко, Ф.Я. Багаутдинов, Е.И. Новоселова, Ф.Х. Хазиев // Вопросы биотехнологии: Межвузовский науч. сб. Уфа: БашГУ, 1995. - С. 9-14.

6. Андресон, Р.К. Экологические последствия загрязнения нефтью / Р.К. Андресон, А.Х. Мукатанов, Т.Ф. Бойко // Экология. 1980. - № 6. - С. 21-25

7. Ю.Архипченко, И.А. Очистка нефтезагрязненных почв с помощью биопрепаратов на основе микробных удобрений / И.А. Архипченко, В.К. За-гвоздкин, Г.Н. Ерцев // Экология и промышленность России. — 2004. -Спецвыпуск. С. 16-18.

8. Атлас Краснодарского края. — Краснодар: Комитет по земельным ресурсам и землеустройству Краснодарского края, 1999. 95 с.

9. Ахмедов, В.А. Приемы рекультивации нефтезагрязненных земель / В.А. Ахмедов, JI.A. Байрамова, Т.Б. Кахрамова, Я.А. Кулиева // Проблемы рекультивации нарушенных земель: Тезисы докл. V Уральского совещания. -Свердловск, 1988.-С. 137.

10. Бабьева, И.П. Биология почв / И.П. Бабьева, Г.М. Зенова. М: МГУ, 1989. -336 с.

11. Баландина, Л.П. Оценка качества рекультивации нефтезагрязненных почв методом биотестирования / Л.П. Баландина, A.B. Шабанова // Экология и промышленность. 2007. - Ноябрь — С. 46-47.

12. Балтренас, П.Б. Натуральное сырье для производства сорбента нефтепродуктов / П.Б. Балтренас, В.И. Вайшис, И.А. Бабелите // Экология и промышленность России. 2004. - Май. - С. 36-39.

13. Бензапирен / Под ред. Н.Ф. Измерова. М.: ГКНТ, Центр международных проектов, 1983.- Вып. 43. - 31 с.

14. Биккинина, А.Г. Разработка технологии рекультивации нефтезагрязненных объектов с использованием комплекса микробиологических препаратов: автореф. дис. . канд. биол. наук. — Уфа: ИБ УНЦ РАН, 2007. 23 с.

15. Биккинина, А.Г. Фиторемедиация отработанной отбеливающей земли, загрязненной нефтепродуктами, с помощью суданской травы / А.Г. Биккинина, О.Н. Логинов, М.Д. Бакаева, H.H. Силищева // Нефтяное хозяйство. 2007. — № 3. — С. 115-116.

16. Билай, В.И. Рост грибов на углеводородах нефти. / В.И. Билай, Э.З. Коваль. Киев, Наук, думка. 1980. - 340 с.

17. Билай, В.И. Аспергиллы / В.И. Билай, Э.З. Коваль. Киев: Наук, думка, 1988.-204с.

18. Билай, В.И. Определитель токсинобразующих микромицетов / В.И. Билай, З.А. Курбацкая Киев: Наук, думка, 1990. - 234с.

19. Бордунов, В.В. Очистка воды от нефти и нефтепродуктов / В.В. Бордунов, C.B. Бордунов, В.В. Леоненко // Экология и промышленность России. -2005.-Август.-С. 8-10.

20. Борзенков, И.А. Консорциум микроорганизмов, используемых для очистки почвенных солоноватоводных экосистем от загрязнения нефтепродуктами / И.А. Борзенков, Е.И. Милехина, С.С. Беляев, М.В. Иванов // Патент №2023686 РФ. Бюлл.изобр. - 1994, №22.

21. Воронин, A.M. Ризосферные бактерии рода Pseudomonas, способствующие росту и развитию растений / A.M. Воронин // Соросовский образовательный журнал. 1998. -№10. - С. 25-31.

22. Вальков, В.Ф. Экология почв. Часть 3. Загрязнение почв: Учеб. пособие / В.Ф. Вальков, К.Ш. Казеев, С.И. Колесников. Ростов-на-Дону: Изд-во РГУ, 2004. - 54 с.

23. Велиев, М.Г. Биодеградация бакинской нефти и углеводородов микроми-цетами / М.Г. Велиев, Б. Даниелссон, М.А. Салманов, С.Р. Алиева, Н.Р. Бекташи //Нефтехимия. -2008. -№ 1. С. 55-61.

24. Вельков, В.В. Биоремедиация: принципы, проблемы, подходы / В.В. Бельков // Биотехнология. 1995. -№ 3-4. - С. 20-27.

25. Вельков, В.В. Стандартизация формата описаний промышленных технологий биоремедиаци / В.В. Вельков // Биотехнология. 2001. — №2. — С. 70-76.

26. Веселкин, Д.В. Возможность использования эктомикоризного симбиоза в биологической рекультивации / Д.В. Веселкин // Биологическая рекультивация нарушенных земель: Материалы Между нар. совещания. Екатеринбург: УрО РАН, 2003. - С. 31-38.

27. Власов, С.А. Штамм Rhodococcas erythropolis для разложения нефти и нефтепродуктов / С.А. Власов, В.И. Сафарова, A.M. Сафаров, Т.К. Крашенинникова, Н.В. Краснопевцева // Патент 2257409 РФ. Бюлл. изобр. -№ 21, 2005.

28. Волченко, H.H. Скрининг углеводородокисляющих бактерий продуцентов ПАВ биологичекой природы и их применение в опыте по ремедиации нефтезагрязненной почвы и нефтешлама / H.H. Волченко, Э.В. Карасева // Биотехнология. - 2006. - № 2 - С.57-62.

29. Габбасова, И.М. Деградация и рекультивация почв Башкортостана / И.М. Габбасова / Под ред. Ф.Х. Хазиева. Уфа: Гилем, 2004. - 284с.

30. Габбасова, И.М. Изменение свойств почв и состава грунтовых вод при загрязнении нефтью и нефтепромысловыми сточными водами в Башкортостане / И.М. Габбасова, Р.Ф. Абдрахманов, И.К. Хабиров, Ф.Х. Хазиев // Почвоведение. 1997.-№11.-С. 1362-1372.

31. Гайворонский, В.Г. Моделирование загрязнения почв мазутом с целью установления его экологически безопасной концентрации / В.Г. Гайворон-ский, С.И. Колесников // Известия вузов. Северо-Кавказский регион. -2008.-№4. -С. 86-88.

32. Галстян, А.Ш. Ферментативная активность почв Армении / А.Ш. Галстян. Ереван: Айастан, 1974. - 260 с.

33. Гвоздецкий, Н. А. Физическая география Кавказа / H.A. Гвоздецкий. М.: Изд-во МГУ, 1958. - 208с.

34. Гецен, М.В. Программный проект «Экология и охрана восточно-европейскх тундр» / М.В. Гецен, Б.И. Груздев. Сыкывкар, 1992. - 32с.

35. Гилязов, М.Ю. Изменение некоторых агрохимических свойств выщелоченного чернозема и примеры их рекультивации в условиях Закамья Татарстана: автореферат дис. д.с-х.н. — Саратов: СГАУ, 1999. 44 с.

36. ГН 2.1.7.2041-06. Предельно допустимые концентрации (ПДК) химических веществ в почве: гигиенические нормативы. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2006.

37. Головченко, A.B. Влияние нефти на численность, биомассу и жизнеспособность грибов в верховых торфяниках / A.B. Головченко, JI.M. Полянская //Микробиология. 2001. -№1. - С. 111-117.

38. Голодяев, Г.П. Эколого-микробиологические основы нефтезагрязненных почв морских побережий юга Дальнего Востока / Г.П. Голодяев // Нефтяное хозяйство. 2008.-№ 1. - С. 114-115.

39. ГОСТ 30692-2000 «Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Атомно-абсорбционный метод определения содержания меди, свинца, цинка и кадмия».

40. Государственный доклад "О состоянии природных ресурсов и об охране окружающей среды Республики Башкортостан в 2006 году". Уфа, 2007.

41. Градова, Н.Б. Биоремедиация / Н.Б. Градова // Пленарный доклад на конференции "Проблемы биодеструкции техногенных загрязнителей окружающей среды". — Саратов, 2005.

42. Градова, Н.Б. Использование бактерий рода Azotobacter при биоремедиаци нефтезагрязненных почв / Н.Б. Градова, И.Б. Горнова, Р. Эддауди, Р.Н. Салина // Прикл. Биохимия и микробиология. 2003. - Т. 39, № 3. - С. 318-321.

43. Грищенко, О.М. Ботанические аномалии как поисково-разведочный критерий нефтегазоносности / О.М. Грищенко // Экология. 1982. — №1. - С. 18-22.

44. Гродзинский, A.M. Аллелопатия растений и почвоутомление / A.M. Грод-зинский. Киев: Наук, думка, 1991. - 429 с.

45. Гулько, А.Е. Фенолоксидазы почв: продуцирование, иммобилизация, активность / А.Е. Гулько, Ф.Х. Хазиев // Почвоведение. 1992. - № 11. - С. 55-67.

46. Гуральчук, Ж.З. Роль арбускулярных микориз в питании растений и устойчивости к тяжелым металлам / Ж.З. Гуральчук // Физиология и биохимия культурных растений. 2004. - Т. 36. - №3. - С. 217-228.

47. Давыдова, C.JI. Загрязнение окружающей среды нефтью и нефтепродуктами: Учеб. пособие / С.Л. Давыдова, В.И. Тагасов. М.: Изд-во РУДН, 2006.- 156 с.

48. Давыдова, С.Л. Тяжелые металлы как супертоксиканты XXI века: Учеб. пособие / С.Л. Давыдова, В.И. Тагасов. -М.: Изд-во РУДН, 2002. 140с.

49. Девятова, Т.А. Биодиагностика техногенного загрязнения почв / Т.А. Де-вятова // Экология и промышленность России 2006. - Январь. - С. 36-37.

50. Демидиенко, О.Я. Пути восстановления нефтезагрязненных почв черноземной зоны Украины / О.Я. Демидиенко, В.М. Демурджан // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. — М.: Наука, 1988. — С. 197-206.

51. Демин, Д.В. Фиторемедиация как способ доочистки почв от полихлориро-ванных бифенилов (ПХБ) / Д.В. Демин, С.М. Севостьянов, Н.Ф. Деева, A.A. Ильина // Вестник Оренбургского государственного университета. — 2009. Октябрь. - С. 555-558.

52. Евдокимова, Г.А. Воздействие загрязнения почв дизельным топливом на растения и ризосферную микробиоту на Кольском Севере / Г.А. Евдокимова, Н.П. Мозгова, М.В. Корнейкова, Е.М. Ахтулова, И.В. Михайлова // Агрохимия. 2007. - №12. - С. 49-55.

53. Евдокимова, Г.А. Пути биодеградации нефти в водоемах высоких широт / Г.А. Евдокимова, С.П. Месяц, Н.П. Мозгова // Интродукция микроорганизмов в окружающую среду: Тезисы докл. конференции. М.: ПНЦ РАН, 1994.-С. 33-34.

54. Евдокимова, Г.А., Способы биоремедиации почв Кольского Севера при загрязнении дизельным топливом / Г.А. Евдокимова, Н.П. Мозгова, И.В Михайлова // Агрохимия. 2009. - №6. - С. 61-66.

55. Иларионов С.А. Экологические аспекты восстановления нефтезагрязнен-ных почв / С.А. Иларионов. Екатеринбург: УрО РАН, 2004. - 194с.

56. Исаев, А.У. Влияние различных фракций нефти на морфологические параметры растений / А.У. Исаев, A.A. Ешибаев, А.К. Саданов, JI.A. Акыно-ва // Теоретическая и прикладная экология. 2007. — № 2. — С. 51-54.

57. Исмаилов, Н.И. Современное состояние методов рекультивации нефтезаг-рязненных земель / Н.И. Исмаилов, Ю.И. Пиковский // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем М.: Наука, 1988. - С. 222-236.

58. Исмаилов, Н.М. Влияние нефтяного загрязнения на круговорот азота в почве / Н.М. Исмаилов // Микробиология. 1983. - № 6. - С. 1003-1007.

59. Кабиров, Т.Р. Использование многоуровневой системы индикации биологической активности почв для оценки эффективности методов биорекультивации нефтезагрязненных территорий: автореф. дис. . канд. биол. наук. Уфа: БашГУ, 2009. - 23с.

60. Казеев, К.Ш. Биология почв Юга России / К.Ш. Казеев, С.И. Колесников, В.Ф. Вальков. Ростов-на-Дону: Изд-во ЦВВР, 2004. - 350с.

61. Кайгородова, С.Ю. Биологическая активность нефтезагрязненных болотных почв Тюменской области / С.Ю. Кайгородова // Тезисы Национальной конф. Ин-та Биологии. Сыктывкар, 1996. - С. 56.

62. Калюжин, В.А. Совместное влияние на растительность нефтяного загрязнения и засоленности почвы / В.А. Калюжин, Е.В. Князева // Химия нефти и газа: Материалы IV Междунар. конференции. Тюмень, 1999. - С.204-206.

63. Карасева, Э.В. Биоремедиация черноземной почвы, загрязненной нефтью / Э.В. Карасева, И.Е. Гирич, A.A. Худокормов, Н.Ю. Алешина, С.Г. Карасев // Биотехнология. 2005. - №2. - С. 67-72.

64. Каратыгин И.В. Коэволюция грибов и растений / И.В. Каратыгин. СПб: Гидрометеоиздат, 1993. - 115с.

65. Карпенко, Е.В. Перспективы использования бактерий рода Rhodococcus и микробных поверхностно-активных веществ для деградации нефтяных загрязнений / Е.В. Карпенко, Р.И. Вильданова-Марцишин, Н.С. Щеглова,

66. Т.П. Пирог, И.Н. Волошина // Прикладная биохимия и микробиология. — 2006.-Т. 42.-№2.-С. 175-179.

67. Квасников, Е.И. Микроорганизмы деструкторы нефти в водных бассейнах / Е.И. Квасников, Т.М. Клюшникова. - Киев: Наук, думка, 1981.-е. 132.

68. Киреева, H.A. Биологическая активность нефтезагрязненных почв / H.A. Киреева, В.В. Водопьянов, A.M. Мифтахова. Уфа: Гилем, 2001. - 376 с.

69. Киреева, H.A. Влияние загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами на численность и видовой состав микромицетов / H.A. Киреева, Н.Ф Галим-зянова // Почвоведение. 1995. -№ 2. - С. 211-216.

70. Киреева, H.A. Влияние загрязнения почвы нефтью и нефтепродуктами на активность липазы / H.A. Киреева, Е.М. Тарасенко, A.A. Шамаева, Е.И. Новоселова//Почвоведение.-2006.-№ 8.-С. 1005-1011.

71. Киреева, H.A. Комплексы почвенных микромицетов в условиях техноге-неза / H.A. Киреева, A.M. Мифтахова, М.Д. Бакаева, В.В. Водопьянов. -Уфа: Гилем, 2005. 360 с.

72. Киреева, H.A. Микробиологическая активность загрязненных нефтепродуктами лесных почв / H.A. Киреева, Г.Ф. Рафикова, Г.Г. Кузяхметов // Лесоведение. 2009. - № 3. - С. 52-58.

73. Киреева, H.A. Микробиологические процессы в нефтезагрязненных почвах / H.A. Киреева. Уфа: БашГУ, 1994. - 172с.

74. Киреева, H.A. Мониторинг растений, используемых для фиторемедиа-ции нефтезагрязненных почв / H.A. Киреева, В.В. Водопьянов // Экология и промышленность России. 2007. - сентябрь. - С. 46-47.

75. Киреева, H.A. Рекультивация нарушенных земель: Учеб. пособие / H.A. Киреева, М.Д. Бакаева. Уфа: РИО БашГУ, 2005. - 208с.

76. Киреева, H.A. Фитотоксичность антопогенно-загрязненных почв / H.A. Киреева, Г.Г. Кузяхметов, A.M. Мифтахова, В.В. Водопьянов. Уфа: Ги-лем, 2003.-266 с.

77. Кирцидели, И.Ю. Влияние промышленного загрязнения на сообщества почвенных микромицетов лесотундры полуострова Таймыр / И.Ю. Кирцидели, Н.И. Воробьева, О.М. Терешенкова // Микология и фитопатология. 1995. - №4.-С. 12-19.

78. Кисин, Д.В. Препараты серии «Биодеструктор» эффективные средства для ликвидации нефтяных загрязнений / Д.В. Кисин, А.И. Колесов // Нефтяное хозяйство. — 1995. -№5-6. - С. 83-85.

79. Ковальская, Т.В. Характеристика методов рекультивации нефтезагряз-нения / Т.В. Ковальская, Е.В. Нуянзина // Экология России: на пути к инновациям: Межвуз. сборник научных трудов. Астрахань, 2009. - С. 196200.

80. Кожанова, Г.А. Препарат для сорбцп i деструкци вуглеводшв нафти / Г.А. Кожанова // Патент № 59337. Украша. - 2003.

81. Козловская, И.В. Трансформация почвы и травяного покрова под влиянием пластовых минерализованных вод при нефтедобыче в условиях Удмуртии: автореф. дисс. канд. биол. наук. Пермь: ПТУ, 2001. — 16 с.

82. Колесников, С.И. Биодиагностика экологического состояния почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами / С.И. Колесников, К.Ш. Казеев, В.Ф. Вальков, Д.К. Азнаурьян, М.Г. Жаркова. — Ростов-на-Дону: Изд-во ЗАО Ростиздат, 2007. 192 с.

83. Колесников, С.И. Экологическое состояние и функции почв в условиях химического загрязнения / С.И. Колесников, К.Ш. Казеев, B.C. Валысов-Ростов-на-Дону: Изд-во Ростиздат, 2006. — 385с.

84. Коронелли, Т.В. Интродукция бактерий рода Rhodococcus в тундровую почву, загрязненную нефтью / Т.В. Коронелли, Т.И. Комарова, В.В. Ильинский, Е.И. Кузьмин, Н.Б. Кирсанов, A.C. Яненко // Прикладная биохимия и микробиология. 1997. — № 2. - С. 198-201.

85. Коронелли, Т.В. Поверхностно-активные свойства некоторых штаммов углеводородокисляющих бактерий / Коронелли Т.В., С.Г. Юферова // Вестник Московского университета. Сер. 16, Биология. — 1990. — №1. С. 14-18.

86. Коронелли, Т.В. Принципы и методы интенсификации биологического разрушения углеводородов в окружающей среде / Т.В. Коронелли // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т. 32. - №6. - С. 578-585.

87. Краснова, Н.М. Ферментативная активность как биоиндикатор загрязнения почв тяжелыми металлами: автореф. дис. . канд. с.-х. наук. М., 1982.-25с.

88. Кузяхметов, Г.Г. Практикум по почвоведению: учебное пособие. / Г.Г. Кузяхметов, A.M. Мифтахова, H.A. Киреева, Е.И. Новоселова. Уфа: РИО БашГУ, 2004. - 120 с.

89. Куликова, И.Ю. Микробиологические способы ликвидации последствий аварийных разливов в море / И.Ю. Куликова, И.С. Дзержинская // Защита окружающей среды в нефтегазовом комплексе. 2008. - №5. - С.24-29.

90. Куличевская, И.С. Популяционная динамика углеводородокисляющих дрожжей в нефтезагрязненной почве / И.С. Куличевская, B.C. Гузев, Н.С. Паников // Микробиология. 1995. - Т. 64. - № 5. - С. 668-673.

91. Кураков, A.B. Биоиндикация и реабилитация экосистем при нефтяных загрязнениях / A.B. Кураков, В.В. Ильинский, C.B. Котелевцев, А.П. Садчиков. — М.: Графикон, 2006. 336с.

92. Кураков, A.B. Методы выделения и характеристики комплексов микроскопических грибов наземных экосистем / A.B. Кураков. М.: Макс Пресс, 2001.-92 с.

93. Курочкина, Г.Н. Влияние нового биопрепарата на ремедиацию нефтезагрязненной серой лесной почвы / Г.Н. Курочкина, А.Н. Шкидченко, A.A. Амелин // Почвоведение. 2004. - №10. - С. 1241-1249.

94. Кутузова, A.A. Травосмеси для биологической рекультивации земель, нарушенных при добыче нефти и газа по зонам страны / A.A. Кутузова,

95. К.Н. Привалова, Д.М. Тебердиев // Аграрная Россия. 2008. - №6. - С. 49.

96. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. — М.: Высшая школа, 1990. 352с.

97. Ларионова Н.Л. Устойчивость растений к загрязнению почвы углеводородами и эффект фиторемедиации: автореф. дисс.канд биол. н. Казань: КГУ, 2005. - 22с

98. Лебедева, Е.В. Микромицеты индикаторы техногенного загрязнения почв / Е.В. Лебедева // Микология и криптогамная ботаника в России: традиции и современность: Тр. междунар. конф. — СПб.: СПбХФА, 2000. — С. 173-176.

99. Лебедева, Е.В. Микромицеты почв, подверженных влиянию отходов горно-металлургического комбината / Е.В. Лебедева, Т.В. Канивец // Микология и фитопатология. 1991. -Т. 25. —Вып. 2. - С. 16-19.

100. Лебедева, Ж.Д. Влияние металлов на липолитическую активность Mycobacterium rubus и Actinomyces streptomycini / Ж.Д. Лебедева, И.М. Волкова, Е.М. Рубан // Микробиология. 1976. - №4. - С. 104-109.

101. Линдиман, А.В. Фиторемедиация почв, содержащих тяжелые металлы / А.В. Линдиман, Л.В. Шведова, Н.В. Тукумова, А.В. Невский // Экология и промышленность России. 2008. - Сентябрь. - С. 45-47.

102. Лисовицкая, О.В. Углеводородное загрязнение почв в условиях комплексного техногенного воздействия: автореф. дис. . канд. биол. наук. -М.: МГУ, 2008.-27с.

103. Литвинов, М.А. Определитель микроскопических грибов / М.А. Литвинов.-Л., 1967.-303с.

104. Лиханова, И.А. Характеристика растительности и почв, рекультивируемых песчаных пустошей Усинского нефтяного месторождения (Коми) / И.А. Лиханова, Ф.М. Хабибуллина, A.B. Кураков // Почвоведение. -2008.- №9. -С. 1101-1112.

105. Лобанов, Н.В. Микотрофность древесных растений / Н.В. Лобанов. -М.: Лесная промышленность, 1971. — 216с.

106. Логинов, О.Н. Бактерии Pseudomonas и Azotobacter как объекты сельскохозяйственной биотехнологии / О.Н. Логинов М.: Наука, 2005. - 166 с.

107. Логинов, О.Н. Биорекультивация: микробиологические технологии очистки нетфезагрязненных почв и техногенных отходов / О.Н. Логинов, H.H. Силищев, Т.Ф. Бойко, Н.Ф. Галимзянова. М.: Наука, 2009. - 112с.

108. Логинов, О.Н. Биотехнологические методы очистки окружающей среды от техногенных загрязнений / О.Н. Логинов, H.H. Силищев, Н.Ф. Бойко, Н.Ф. Галимзянова. Уфа: "Реактив", 2000. - 100 с.

109. Логинов, О.Н. Оценка эффективности нового биопрепарата «Ленойл» для ремедиации нефтезагрязненных почв / О.Н. Логинов, Л.А. Нуртдино-ва, Т.Ф. Бойко, С.П. Четвериков, H.H. Силищев // Биотехнология. 2004. — №1. - С.77-82. (б)

110. Лутова, Л.А. Генетика развития растений / Л.А. Лутова, H.A. Проворов, О.Н. Тиходеев, И.А. Тихонович, Л.Т. Ходжайова, С.О. Шишкова. СПб.: Наука, 2000. - С. 344-384.

111. Максименко, А.П. Оценка загрязнителей почв нефтешламовых амбаров / А.П. Максименко, В.А. Герш // ArpoXXI. - 2006. - №7-9.

112. Маркарова, М.Ю. Опыт применения биопрепарата "Универсал" для рекультивации нефтезагрязненных земель /М.Ю. Маркарова // www.ib.komisc.r/t/ru/ic/vt/04-84/06.html Вест. Института Биологии Коми НЦТУрО РАН.- 2004. - №84.

113. Марфенина, O.E. Антропогенная экология почвенных грибов / O.E. Марфенина. М.: Медицина для всех, 2005. - 196 с.

114. Медведева, Е.И. Биологическая активность нефтезагрязненных почв в условиях Среднего Поволжья: автореф. дис. . канд. биол. наук. Тольятти, 2002.-18 с.

115. Мерц, Р.Х. Плавающий углеродный сорбент для поглощения нефтепродуктов на воде / Р.Х. Мерц, К.Ф. Косыгина, В.Б. Боксер // Химия и технология воды. 1998. - Т. 20. - № 3. - С. 301-305.

116. Методика количественного химического анализа. Определение As, Cd, Со, Cr, Си, Hg, Mn, Ni, Pb, Sb, Sn, Zn (кислоторастворимые формы) в почвах и донных отлодениях атомно-адсорбционным методом. М02-902-125-2005. Санкт-Петербург, 2005. - 26 с.

117. Методы исследования грибов, образующих с растениями микоризу ар-бускулярно-везикулярного типа / Под ред. Н.В. Зольниковой, Н.И Воробьева. СПб.: ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии, 1992. - 44с.

118. Методы почвенной микробиологии и биохимии / Под. ред. Д.Г.Звягинцева. М.: МГУ, 1991. - 304с.

119. Мирчинк, Т.Г. Почвенная микология / Т.Г. Мирчинк. М.:Изд-во МГУ, 1988.-220 с.

120. Мишустин, E.H. Ценозы почвенных микроорганизмов / E.H. Мишустин // Почвенные организмы как компоненты биогеоценоза. М.: Наука, 1984. - С. 5-24.

121. Мокроносов, А.Т. Фотосинтез. Физиолого-биохимические аспекты / А.Т. Мокроносов, В.Ф. Гавриленко, Т.В. Жигалова. М.: Издательский центр «Академия», 2006. - 448с.

122. Молотков, И.В. Фиторемедиация / И.В. Молотков, В.А. Касьяненко // НефтьГазПромышленность. 2005. - №1 (13). - С. 15-19.

123. Мукатанов, А.Х. Влияние нефти на свойства почв / А.Х. Мукатанов, П.Р. Ривкин // Нефтяное хозяйство. 1980. - № 10. - С. 53-54.

124. Муратова, А.Ю. Использование люцерны и тростника для фитореме-диации загрязненного углеводородами грунта / А.Ю. Муратова, О.В. Тур-ковская, Т. Хюбнер, П. Кушк // Прикл. биохимия и микробиология. — 2003. Т.39. - №6. - С. 681-688.

125. Муратова, А.Ю. Микробиологическая очистка в защите окружающей среды от нефтяных загрязнений / А.Ю. Муратова, Е.В. Плешакова // Проблемы изучения биосферы: Тезисы докл. Всерос. науч. конференции. -Саратов, 1996.-С. 107-108.

126. Муромцев, Г.С. Влияние эндомикоризного гриба на продуктивность, азотное, фосфорное и калийное питание вики и овса на рекультивированном грунте / Г.С. Муромцев, Е.Г. Гусева, Н.В. Зольникова // Агрохимия. -1988.-№6.-С. 83-92.

127. Мухин, В.А. Адаптивное значение эндомикориз травянистых растений / В.А. Мухин, A.A. Бетехтина // Экология. 2006. - №1. - С. 3-8.

128. Назаров, A.B. Влияние нефтяного загрязнения почвы на растения / A.B. Назаров // Вестник Пермского университета. 2007. - № 5(10). - С. 134141.

129. Назаров, A.B. Изучение причин фитотоксичности нефтезагрязненных почв / A.B. Назаров, С.А. Иларионов // Альтернативная энергетика и экология. 2005. - №1. - С.60-65.

130. Назарюк, В.М. Роль минерального питания в повышении продуктивности растений и регулировании пищевого режима почвы, загрязненной нефтью / В.М. Назарюк, М.И. Кленова, Ф.Р. Калимуллина // Агрохимия. -2007.-№7.-С. 64-73.

131. Научно-прикладной справочник по климату СССР. Л., 1989. - 483 с.

132. Непотребный, А.И. Мониторинг содержания тяжелых металлов в почвах нефтяных месторождений южной тайги и Томской области / А.И, Непотребный // Вестник Томского государственного университета. 2009. -№318. - Январь. - С.215-220.

133. Нечаева, И.А. Психротрофные микроорганизмы для биоремедиации нефтяных загрязнений в условиях холодного климата / И.А. Нечаева, А.Е. Филонов // Экотоксикология-2009: Сборник статей Всеросс. конференции. Пущино-Тула, 2009. - С. 56.

134. Никитина, Е.В. Токсикологические аспекты изучения нефтешламов / Е.В. Никитина, О.И. Якушева, Р.П. Наумова // Современные аспекты экологии и экологического образования: Материалы Всеросс. конференции. -Казань, 2005. С. 466-467.

135. Новоселова, Е.И. Использование активного ила для ускорения биодеструкции нефти в почве / Е.И. Новоселова // Биология почв антропогенных ландшафтов: Тезисы докладов I Всесоюз. науч. конференции. Днепропетровск: Изд-во ДГУ, 1995. - С.57.

136. Новоселова, Е.И. Экологические аспекты трансформации ферментативного пула почвы при нефтяном загрязнении и рекультивации: автореф. дис. . док. биол. наук. Воронеж: ВГУ, 2008. — 42 с.

137. Оборин, A.A. Биологическая рекультивация нефтезагрязненных земель в условиях таежной зоны / A.A. Оборин, И.Г. Калачникова, Т.А. Масливец и др. // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988.-С. 140-159.

138. Орлов, Д.С. Методы контроля почв, загрязненных нефтепродуктами / Д.С. Орлов, Я.М. Аммосова // Почвенно-экологический мониторинг. М., 1994.-С. 219-231.

139. Орлов, Д.С. Химическое загрязнение почв и их охрана. Словарь- справочник / Д.С. Орлов, М.С. Малинина, Г.В. Мотузова и др. М.: Агро-промиздат, 1991.-303с.

140. Орлова, Е.Е. Деградация гумуса почв при нефтезагрязнении / Е.Е. Орлова, Л.Г. Бакина // Проблемы антропогенного почвообразования: Тезисы докл. Междунар. конференции. Москва, 1997. — Т. 2. — С. 175-176.

141. Останин А. Биоремедиация нарушенных почв, нефтезагрязненной земли. Тактика использования технологий / www.biotehnologya.narod.ru

142. Павликова, Т.А. Роль консорциума углеводородокисляющих микроорганизмов в деградации нефти в почве / Т.А. Павликова // Доклады ТСХА. Вып. 276.-М.: Изд-во МСХА, 2004. С. 196-299.

143. Пархоменко, А.Н. Влияние загрязняющих веществ нефтегазового комплекса на структуру и численность микробных сообществ почв Нижнего Поволжья / А.Н. Пархоменко, О.Б. Сопрунова // Защита окружающей среды в нефтегазовом комплексе. — 2008. №5. - С.42-46.

144. Пидопличко, Н.М. Пенициллин (Ключи для определения видов) / Н.М. Пидопличко. Киев: Наук, думка, 1972. - 220с.

145. Пиковский, Ю.И. Природные и техногенные потоки углеводородов в окружающей среде / Ю.И. Пиковский. М.: Изд-во МГУ, 1993 - 280 с.

146. Пиковский, Ю.И. Трансформация техногенных потоков нефти в почвенных экосистема / Ю.И. Пиковский // Восстановление нефтезагрязнен-ных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. - С. 7-22.

147. Пинтус, И.Ф. Выделение и характеристика микроорганизмов-деструкторов полициклических ароматических углеводородов / И.Ф. Пинтус, А.Е. Филонов, И.А. Кошелева, P.P. Гаязов, A.B. Карпов, A.M. Воронин // Микробиология. 1997. - Т. 66. - № 2. - С. 269-272.

148. Плешакова, E.B. Приемы стимуляции аборигенной нефтеокисляющей микрофлоры / Е. В. Плешакова, Е.В. Дубровская, О.В. Турковская // Биотехнология. 2005. - № 1. - С. 42-50.

149. Позднякова, H.H. Биоремедиация нефтезагрязненной почвы комплексом гриб Pleurotus ostreatus почвенная микрофлора / H.H. Позднякова, В.Е. Никитина, О.В. Турковская // Прикладная биохимия и микробиология. - 2008. - № 1. - С. 69-75.

150. Постехногенные экосистемы Севера / Под ред. И.Б. Арчеговой, Л.П. Капелькиной. СПб.: Наука, 2002. - 159с.

151. Пырченкова, И.А. Выбор и характеристика активных психротрофных микроорганизмов-деструкторов нефти / И.А. Пырченкова, А.Б. Гафаров, Пинтус И.Ф., А.Е. Филонов, A.M. Воронин // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. - № 3. - С. 298-305.

152. Раменский, Л.Г. Экологическая оценка кормовых угодий по растительному покрову / Л.Г. Раменский, И.А. Цаценкин, О.Н. Чижиков, H.A. Антипин. — М.: Сельхозгиз, 1956. 470 с.

153. Рахимова, Э.Р. Биологическая активность нефтезагрязненной почвы при засолении / Э.Р. Рахимова, A.B. Гарусов, С.К. Зарипова // Почвоведение. 2005. -№ 4. - С. 481-485.

154. Русанов, A.M. Динамика биохимических процессов в почвах при нефтяном загрязнении / A.M. Русанов, Т.С. Шорина // Вестник Оренбургского государственного университета. — 2009. — Октябрь. С. 600-603.

155. Рыбак, В.Н. Микофлора почвы, загрязненной нефтью / В.Н. Рыбак, E.H. Овчарова, Э.З. Коваль // Микробиологический журнал. 1984. - №4. - С. 29-32.

156. Саксонов, М.Н. Экологический мониторинг нефтегазовой отрасли. Физико-химические и биологические методы: учеб. пособие / М.Н. Саксонов, А.Д. Абалаков, Л.В. Данько, O.A. Бархатова, А.Э. Балаян, Д.И. Стом. -Иркутск: Иркут. ун-т, 2007. 114с.

157. Салангинас, Л.А. Изменение свойств почв под воздействием нефти и разработка системы мер по их реабилитации / Л.А. Салангинас. Екатеринбург: Элита-Комплекс, 2003. - 412с.

158. Сваровская, Л.И. Активность почвенной микрофлоры в условиях нефтяных загрязнений / Л.И. Сваровская, Л.К. Алтунина // Биотехнология. — 2004.-№3.-С. 63-69.

159. Сваровская, Л.И. Полимерные материалы для фотолюминесцентной активации аборигенной микрофлоры нефтезагрязненных почв / Л.И. Сваровская, Л.К. Алтунина, Д.А. Филатов // Прикладная биохимия и микробиология. 2008. - Т. 44. - № 6. - С. 647-652.

160. Седых, В.Н. Влияние отходов бурения и нефти на физиологическое состояние растений / В.Н. Седых, Л.А. Игнатьев // Сибирский экологический журнал. 2002. - № 1. - С. 47-53

161. Селиванов, И. А. Микосимбиотрофизм как форма консортивных связей в растительном покрове Советского Союза / И.А. Селиванов. М.: Наука, 1981.-232 с.

162. Селивановская, С.Ю. Природные и антропогенные факторы формирования фитотоксичности осадков сточных вод / С.Ю. Селивановская, В.З. Латыпова, Ф.К. Алимова // Токсикологический вестник. 1999. — № 5. — С.14-17.

163. Середина, В.П. Нефтезагрязненные почвы: свойства и рекультивация / В.П. Середина, Т.А. Андреева, Т.П. Алексеева, Т.И. Бурмистрова, H.H. Терещенко. Томск: Изд-во Томский политехнический ун-т, 2006. — 268с.

164. Скрябин, Г.К. Использование микроорганизмов в органическом синтезе / Г.К. Скрябин, Л.А. Головлева. М.: Наука, 1976. - 332 с.

165. Смирнов, В.В. Бактерии рода Pseudomonas / B.B. Смирнов, Е.А. Ки-приянова. Киев: Наук, думка, 1990. - 264 с.

166. Собгайда, H.A. Использование отходов производства в качестве сорбентов нефтепродуктов / H.A. Собгайда, Л.Н. Ольшанская, К.Н. Кутукова, Ю.А. Маркарова // Экология и промышленность России. 2009. — Январь. -С. 36-38

167. Солнцева, Н.П. Добыча нефти и геохимия природных ландшафтов /Н.П. Солнцева. М.: Изд-во МГУ, 1998. - 376с.

168. Солнцева, Н.П. Моделирование процессов миграции нефти и нефтепродуктов в почвах тундры / Н.П. Солнцева, O.A. Гусева, C.B. Горячкин // Вестник Моск. ун-та. Сер. 17, Почвоведение. 1996. - №2. - С. 10-17.

169. Солнцева, Н.П. Особенности загрязнения почв при нефтедобыче / Н.П. Солнцева, Ю.И. Пиковский // Миграция загрязняющих веществ в почвах и сопредельных средах. — Ленинград: Гидрометеоиздат, 1980. С. 76 - 82.

170. Стабникова, Е.В. Применение биопрепарата "Лестан" для очистки почвы от углеводородов нефти / Е.В. Стабникова, М.В. Селезнева, А.Н. Дуль-геров, В.Н. Иванов // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - № 2.-С. 219-223.

171. Сулейманов, P.P. Изменение свойств нефтезагрязненной серой лесной почвы в роцессе биологической рекультивации / P.P. Сулейманов, И.М. Габбасова, Р.Н. Ситдиков // Известия РАН. Сер. Биологическая. 2005. -№ 1.-С. 109-115.

172. Суржко, Л.Ф. Утилизация нефти в почве и воде микробными клетками / Л.Ф. Суржко, З.И. Финкелыптейн, Б.П. Баскунов, М.И. Янкевич, В.И. Яковлев, Л.А. Головлева // Микробиология. 1995. - Т.64. - №3. - С.393-398.

173. Сухоносова, А.Н. Очистка почв от нефтяного загрязнения и оценка ее эффективности /А.Н. Сухоносова, В.А. Бурлака, Д.Е. Быков, И.В. Бурлака, Н.В. Бурлака // Экология и промышленность России. 2009. - октябрь. -С. 18-20.

174. Суюндуков, Я.Т. Роль фитомелиорации в воспроизводстве плодородия черноземов Зауралья (Башкирия) / Я.Т. Суюндуков, Б.М. Миркин, Ш.Р. Абдуллин, Г.Р. Хасанова, Э.Ф. Сальманова // Почвоведение. 2007. — №10.-С. 1217-1225.

175. Теппер, Е.З. Практикум по микробиологии / Е.З. Теппер, В.К. Шильни-кова, Г.И. Переверзева // Под ред. В.К. Шильниковой. М.: Дрофа, 2004. -256 с.

176. Терехова, В.А. Микромицеты в экологической оценке водных и наземных экосистем / В.А. Терехова. М.: Наука, 2007. — 215 с.

177. Терещенко, H.H. Биологическая азотфиксация как фактор ускорения микробной деструкции нефтяных углеводородов в почве и способы ее стимулирования / H.H. Терещенко, С.В. Лушников, Е.В. Пышьева // Биотехнология. 2004. - № 5. - С. 69-79.

178. Тихановский, А.Н. Особенности озеленения городов и поселков Крайнего Севере / А.Н. Тихановский // Научные основы экологии, мелиорации и эстетики ландшафтов: Материалы Всероссийской научной конференции.-М., 2010. С. 154-158.

179. Тонкопий, H.H. К вопросу о накоплении бенз(а)пирена в почве / Н.И. Тонкопий, В.Я. Розанова, И.М. Минц // Гигиена и санитария. 1973. -№4.-С. 112-113.

180. Трофимов, С.Я. Фитодиагностика нефтяного загрязнения чернозема выщелоченного в условиях модельного эксперимента / С.Я. Трофимов, А.Д. Фокин, Е.И. Дорофеева, Ю.П. Кошелева // Вестник Моск. ун-та. -2008. Сер. 17, Почвоведение. - №1. - С. 29-32.

181. Трубникова, Л.И. Способ экстракции полиароматических углеводородов из объектов с органической и органоминеральной матрицей / Л.И. Трубникова, Н.И. Трубникова, А.Б. Бакиров // Пат. 2281480, РФ. Бюл. Изобр. - 2006, №22.

182. Тупицына, JI.C. Параметры для эколого-генетического скрининга и мониторинга организмов в условиях нефтяного загрязнения / JI.C. Тупицына // Сибирский экологический журнал. 2008. - №6. — С. 889-899.

183. Турковская, О.В. Биодеградация органических поллютантов в корневой зоне растений / О.В. Турковская, А.Ю. Муратова // Молекулярные основы взаимоотношений ассоциированных микроорганизмов с растениями. — М.: Наука, 2005. С. 180-208.

184. Угрехелидзе, Д.Ш. Поступление и детоксикация органических ксенобиотиков в растениях / Д.Ш. Угрехелидзе, C.B. Дурмишидзе // Под ред. Т.Н. Митайшвили. Тбилиси: Мецниереба, 1984. - С. 260 с.

185. Физико-географическое районирование Башкирской АССР. Уфа, 2005.-212 с.

186. Финкелыитейн, З.И. Микробная деградация нефти и нефтепродуктов / З.И. Финкелыптейн, Б.П. Баскунов, Р.Н. Алиева // Биотехнология защиты окружающей среды. Пущино, 1994. - С.5-6.

187. Хабиров, И.К. Устойчивость почвенных процессов / И.К. Хабиров, И.М. Габбасова, Ф.Х. Хазиев // Под ред. В.Д. Недорезкова. Уфа: БГАУ, 2001.-327с.

188. Хазиев, Ф.Х. Влияние нефтяного загрязнения на некоторые компоненты агроэкосистемы / Ф.Х. Хазиев, Е.И. Тишкина, H.A. Киреева, Г.Г. Ку-зяхметов // Агрохимия. 1988. - № 2. - С.56-61.

189. Хазиев, Ф.Х. Изменение биохимических процессов в почвах при нефтяном загрязнении и активизация разложения нефти / Ф.Х. Хазиев, Ф.Ф. Фатхиев // Агрохимия. 1981. - № 10. - С. 102-111.

190. Хазиев, Ф.Х. Методы почвенной энзимологии / Ф.Х. Хазиев. М.: Наука, 2005. - 252 с.

191. Хазиев, Ф.Х. Почвы Башкортостана / Ф.Х. Хазиев, Г.А. Кольцова, Р.Я. Рамазанов, А.Х. Мукатанов, И.М. Габбасова, М.М. Хамидуллин, И.К. Хабиров — Уфа: Гилем, 1997. — Т.2. — 327 с.

192. Хазиев, Ф.Х. Почвы Башкортостана: Эколого-генетическая и агро-производственная характеристика / Ф.Х. Хазиев, А.Х. Мукатанов, И.К. Хабиров, Г.А. Кольцова, И.М. Габбасова, Р.Я. Рамазанов // Под. ред. Ф.Х. Хазиева. Уфа: Гилем, 1995. - Т. 1. - 384 с.

193. Хазиев, Ф.Х. Системно-экологический анализ ферментативной активности почв / Ф.Х. Хазиев. М.: Наука, 1982. - 204 с.

194. Халилова, А.Ф. Биодеградация углеводородов в почве с различной кислотностью и оценка способов ее стимуляции / А.Ф. Халилова, А.П. Денисова // Экология России: на пути к инновациям: Межвуз. сборник научных трудов. Астрахань, 2009. - С. 210-214.

195. Хлесткин, Р.Н. О ликвидации разливов нефти при помощи растительных отходов / Р.Н. Хлесткин, H.A. Самойлов // Нефтяное хозяйство. -2000.-№7.-С. 84-85.

196. Цуцаева, В.В. Текстильный горошек эффективный сорбент для ликвидации разливов нефтью / В.В. Цуцаева, М.Н. Пуговкин, М.Ю. Савуш-кина // Нефтяное хозяйство. — 1991. - № 8. - С. 33-34.

197. Чижов, Б.Е. Растения-мелиоранты для рекультивации нефтезагрязнен-ных почв / Б.Е. Чижов, А.И. Захарова, A.M. Шишкин // Леса и лесное хозяйство Западной Сибири. Вып.7. Тюмень: Изд-во Тюменского государственного университета, 2006. - С. 221-229.

198. Чупахина, Г.Н. Адаптация растений к нефтяному стрессу. / Г.Н. Чупа-хина, П.В. Масленников // Экология. 2004. - № 5. - С. 330-335.

199. Шестибратов, К.А. Лесная биотехнология: методы, технологии, перспективы / К.А. Шестибратов, В.Г. Лебедев, А.И. Мирошников // Биотехнология. 2008. - №5. - С. 3-22.

200. Шилова, И.И. Биологическая рекультивация нефтезагрязненных земель в условиях таежной зоны / И.И. Шилова // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. — С. 159-168.

201. Широких, A.A. Совместная эволюция растений и микроорганизмов / A.A. Широких // Теоретическая и прикладная экология России. — 2008. — №2.-С. 4-15.

202. Широких, A.A. Грибы в биомониторинге наземных экосистем / A.A. Широких, A.B. Колупаев // Теоретическая и прикладная экология. 2009. -№ 3. - С. 4-14.

203. Шкидченко, А.Н. Биодеградация нефтешламов аборигенными и интро-дуцированными микроорганизмами-нефтедеструкторами в открытой проточной системе / А.Н. Шкидченко, А.Б. Гафаров, Е.С. Иванова, Т.З. Еси-кова // Биотехнология. 2007. - № 6. - С. 55-59.

204. Шорина, Т.С. Влияние нефтяного загрязнения на биологическую активность черноземов Оренбургской области / Т.С. Шорина // Вестник Оренбургского государственного университета. — 2009. — №6. — С. 651653.

205. Щеблыкин, И.И. Биовосстановление загрязненной нефтью почвы при ликвидации последствий аварии на магистральном нефтепроводе Лиси-чанск-Техорецк / И.И. Щеблыкин, М.Б. Битеева, В.В. Бирюков, М.И. Ян-кевич // Охрана окружающей среды. 1995. — С. 19-28.

206. Щемелинина Т.С. Биологическая активность нефтезагрязненных почв Крайнего севера на разных стадиях их восстановления и при рекультивации (на примере Усинского района Республики Коми): автореф. дис. . канд. биол. наук. Воронеж: ВГУ, 2008. - 24 с.

207. Ягафарова, Г.Г. Новый нефтеокисляющий штамм бактерий Rhodococ-cus erithropolis / Г.Г. Ягафарова, И.Н. Скворцова // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т. 32. - №2. - С. 224-227.

208. Якушева, О.И. Новый подход к обезвреживанию нефтешлама с целью последующей фиторемедиации / О.И. Якушева, Т.В. Григорьева, P.A. Галиев, А.А. Несмелов, Р.З. Юсупов, Р.П. Наумова. — Казань: Казанск. гос. ун-т, 2006. 16 с.

209. Янышева, Н.Я. Онкологические аспекты регламентирования бенз(а)пирена в продуктах питания / Н.Я. Янышева, И.А. Черниченко, Н.В. Баленко // Гигиена и санитария. — 2001. — №2. — С. 67-70.

210. Allard, A.S. Bioremediation of organic waste sites: a critical review of microbiological aspects / A.S. Allard, A.H. Neilson // Int. Biodeterioration Biodegradation. 1997. - V. 39. - P. 253-285.

211. Anderson, T.A. Bioremediation in the rhizosphere / T.A. Anderson, E.A. Guthtie, B.T. Walton // Environ. Sci. Technol. 1993. - V. 27, № 13. - P. 2630-2636.

212. Atlas, R.M. Microbial ecology: fundamentals and applications / R.M. Atlas, R. Bartha. California: Cummings, 1997. - 153 p.

213. Ayotamuno, J. Biostimulation supplemented with phytoremediationin the reclamation of a petroleum contaminated soil / J. Ayotamuno, R. Kogbara, O. Agoro // World J Microbiol. Biotechnol. 2009. - № 25. - C. 1567-1572.

214. Bacraff P. Bioremediation of contaminated land / P. Bacraff // Biochemist. -1992.-V. 14. -№ 2. — P.9-11.

215. Bailey, V.L. Carbon transformation by indigenous microdes in four hydrocarbon-contaminated soils under static remediation conditions / V.L. Bailey, W.B. McGill // Canada. J. Soil Sc. 2001. - V. 81. - №2. - P. 193-204.

216. Bertin, C. The role of root exudates and allelochemicals in the rhizosphere. / C. Bertin, X. Yang, L. Weston // Plant and Soil. 2003. - V. 256. - P.67-83.

217. Bingyun, W. Growth and water relations of P. tabitlaeformis seedlings inoculated with ectomycorrhizal fungi / W. Bingyun, I. Nioh // Microb. and Environ. 1997. - V. 12. - № 3. - P. 69-74.

218. Bizilli, S.P. Phytodetoxification of hazardous orgsnomercurialis by genetically engineered plants / S.P. Bizilli, C.L. Rugh, R.B. Meagher // Nat. Biotech-nol. 2000. - № 18. — P.213-217.

219. Brohon, B. Influence of soil microbial activity level on the determination of contaminated soil toxicity using Lumistox and MetPate bioassays / B. Brohon, R. Gourdon // Soil Biol. Biochem. 2000. - V. 32. - P. 83-857.

220. Carlile, M.J. The Fungi. 2nd ed. / M.J. Carlile, S.C. Watkinson, G.W. Goo-day. -New York, Boston: Acad, press, 2001. 588 p.

221. Cooney, J.J. Hydrocarbon-using microorganisms in three freshwater ecosystems / J.J. Cooney, R.J. Summers // Proc. Third Inter. Biodégradation Symp. -London, 1976.-P. 141-156.

222. Criquet, S. Anthracene and mycorrhiza affect the activity of oxidoreductases in the roots and the rhizosphere of lucerne {Medicago sativa L.) / S. Criquet // Biotechnology Letters. 2000. - № 22. - P. 1733-1737.

223. Dakora, F.D. Root exudates as mediators of mineral acquisition in low-nutrient environments / F.D. Dakora, D.A. Phillips // Plant and Soil. 2002. -V. 245. - P.35-47.

224. Del Rio, L.A. Iron deficiency in pea plants effect on catalase, peroxidase, chlorophyll and proteins of leaves / L.A. Del Rio, M. Gomez, J. Yanez, A. Leal, J.L. Gorge // Plant and Soil. 1978. - Vol. 49. - P. 343-353.

225. Deni, J. Nitrification and autotrophic nitrifying bacteria in a hydrocarbon-polluted soil / J. Deni, M.J. Pennincks // Appl. Environ. Microbiol. 1999. - V. 65.-№4.-P. 4008-4013.

226. Ekundayo, E.G. Effects of an oil spill on soil physico-chemical properties of a spill site in a Typic Paleudult of midwestern Nigeria / E.G. Ekundayo, C.O. Obuekwe // Environ. Monit. And Assess. 1997. - V. 45. - №2. - P. 209-221.

227. Ellis, R. Contamination of soils by petroleum hydrocarbons / R. Ellis, R.S. Adams//AdV, Argon.-1961.-V. 13.-P. 197.

228. El-Sharouny, H. Toxity of heavy metals to egiptan soil fungi / H. El-Sharouny, M. Bagy, A. Shanawany // International biodeterioration. 1988. -V. 24.-P. 49-64.

229. Ernst, W.H.O. Bioavailability of heavy metals and decontamination of soils by plants / W.H.O. Ernst // Appl Geochem. 1996. - V. 11. - P. 163-167.

230. Faw, G.M. The bacterial of an active oil field in the Northwestern Gulf of Mexico / Faw G.M., S.L. Holloway, R.C. Sizemore // Abstr. 79th Annu. meet. Amer. Soc. Microbiol. Los Angeles: Cal., 1979. - P. 192.

231. Fedorac, P.M. Degradation of aromatics and saturated in crude oil by soil enrichments / P.M. Fedorac, D.W.S. Westlake // Water Air Soil Pollut. 1984. -V.16.-P. 367-375.

232. France, R.C. Interaction of nitrogen and carbon in the physiology of ecto-mycorrhizae / R.C. France, C.P.P. Reid // Can. J. Bot. 1983. - V. 61. - № 3. -P. 964-984.

233. Frankenberg, W.T. Influence of crude oil and refined petroleum products on oil dehydrogenase activity / W.T. Frankenberg, J.B. Johanson // J. Environ. Qual.- 1982. -№ 11.-P. 602-607.

234. Griffin, L.F. Toxic effect in water-soluble fractions of crude, refined and weathered oils on the growth of a marine bacterium / L.F. Griffin, G.A. Calder // Appl. Environ. Microbiol. 1977. - V. 33. - № 5. - P. 1092-1101.

235. Günter, T. Effect of ryegrass on biodégradation of hydrocarbons in soil / T. Günter, U. Dornberger, W. Fritsche // Chemosphere. 1996. - V.33. - P. 203215.

236. Hadden, W.L. Carotenoid composition of marigold (Tagetes erecta) flower extract used as nutritional supplement / W.L. Hadden, R.H. Watkins, L.W. Levy // J-Agric-Food-Chem. 1999. - Vol. 47(10). - P. 4189-4194.

237. Heath, J.S. Review of chemical, physical and toxicologic properties of components of total petroleum hydrocarbons / J.S. Heath // Jornal of Soil Contaminations. 1993. - №2 - P. 548-611.

238. Huisman, O.C. Conversion of o-(ß- -glucosyloxy)-cinnamic acid to o-(ß-glucosyloxy)-hydrocinnamic acid in Melilotus alba / O.C. Huisman, T. Kosuge // Phytochemistry. 1970. -V. 9. -№ 1. - P. 131-137.

239. Hutchinson, S.L. Biodegradation of petroleum hydrocarbons in the rhizos-phere / S.L. Hutchinson, A.P. Schwab, M.K. Banks // Phytoremediation, Series of Texts and Monographs. 2004. - Vol. - P.355-365

240. Jacobs, J. Thiophene synthesis and distribution in young developing plants of Tagetes patula and Tagetes erecta / J. Jacobs, A. Engelberts, A.F. Croes, G. J. Wullems // J. of Experimental Botany. 1994. - Vol. 45. - № 10. - P. 14591466.

241. Janke, S. Beeingflussung der bodenbiologishen Aktivität durch Heizöl (Effects of hearting oil on the soil biological activity) / S. Janke, H.Schamber, C. Kunze // Angewandte botanik. 1992. - V. 66. - P. 42-45.

242. Jeffrey, S.W. New spectrophotometric equations for determining chlorophylls a, b, C. and c2 in higher plants, algae and natural phytoplankton / S.W. Jeffrey, G.R. Humphrey // Biochem. Physiol. Pflanzen Bd. 1975. - Vol. 167. -P. 191-194.

243. John, T.V. The role of mycorrhizae in plant ecology / T.V. John, D.C. Coleman // Can.J. Bot. 1983. - V. 61. - P. 1005-1014.

244. Joner, E.J. Nutritional constraints to degradation of PAN in a simulated rhi-zosphere / E.J. Joner, S.C. Corgie, N. Amellal, C. Leyval // Soil Biol. Biochem. 2002. - V.34. - N6. - P. 859-864.

245. Jones, R. Phytoremediation of petroleum hydrocarbons in tropical coastal soils. II. Microbial response to plant roots and contaminant / R. Jones, W. Sun, C.S. Tang, F.M. Robert // Environ Sei. Pollut. Research. 2004. - V. 11. - P. 340-346.

246. Kechavarzi, C. Root establishment of perennial ryegrass (L. perenne) in diesel contaminated surface soil layers / C. Kechavarzi, K. Pettersson, P. Leeds-Harrison, L. Ritchie, S. Ledin // Environ. Pollut. 2007. - V. 145. - № 1. - P. 68-74.

247. Kirk, J. The effects of perennial ryegrass and al-falfa on microbial abundance and diversity in petroleum contaminated soil / J. Kirk, J. Klironomos, H. Lee, J.T. Trevors // Environ Pollut. 2005. - V. 133. - P. 455-465.

248. Kiss, S. Advances in soil enzymology (Part I-III) / S. Kiss // Studia Univer-sitates Bades, Bolyai Biologia. 2001. - № 1. - P. 3-48.

249. Kiss, S. Enzymology of disturbed soils / S. Kiss, D. Pascf, M. Dragan-Bularda. — Amsterdam, 1998. 62 p.

250. Klein J. Microbiologische Methoden zur Sanierung mineralolkontaminierter Boden / J. Klein // Mineralol. 1992. - V. 40. - S. 209-217.

251. Knudson, L. Measurement of Ozone Injury by Determination of Leaf Chlorophyll Concentration / L. Knudson // Plant Physiol. — 1977. Vol. 60. - P. 606-608.

252. Kopp-Holtwiesche, B. Biocrac / B.Kopp-Holtwiesche // BFE (Biotech. Forum Eur). 1992. -V. 9. -N 6. - P. 366-368.

253. Koziol, A.G. Tracing the evolution of the light-harvesting antennae in chlorophyll a/b-containing organisms / A.G. Koziol, T. Borza, K-I. Ishida, P. Keeling, R.W. Lee, D.G. Durnford // Plant Physiology. 2007. - Vol. 143. - P. 1802-1816.

254. Kramer, U. The use of transgenic plants in the bioremediation of soils contaminated by trace elements / U. Kramer, A.N. Chardonnens // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001. - №55. - P.661-672.

255. Lee, E. Bioremediation of petroleum contaminated soil using vegetation a microbial study / E. Lee, M.K. Banks // J. Environ. Sci. Health. 1993. - V. 28. -№10.-P. 2187-2198.

256. Lehtomaki, M. Improving microbial degradation of oil in soil / M. Lehto-maki, S. Anelia // AMBIO. 1975. - V.4. - № 3. - P. 126-129.

257. Linkis, A.E. Effect of surface-applied prudhoe bay crude oil in vegetation and soil process in tussock tundra / A.E. Linkis, N. Fetcher // Perma frost: Materials of 4th Int. conf. Washington D.C., 1983. - P. 723-728.

258. Mac Cormak, W.P. Characterization of a hydrocarbon degrading psychro-trophic Antarctic bacterium / W.P. Mac Cormak, E.R. Fraile // Antarct. Sci. -1997. V. 9. - № 2. - P. 150-155.

259. Malarkodi, M. Phytoextraction of Nickel Contaminated Soil Using Castor Phytoextractor. / M. Malarkodi, R. Krishnasamy, T. Chitdeshwari // Journal of Plant Nutrition. 2008. - Vol. 31. - № 2. - P. 219-229.

260. Margesin, R. Soil lipase a useful indicator of oil bioremediation / R. Mar-gesin, A. Zimmerbauer, F. Schinner // Biotechnology Techniques. - 1999. -Vol. 13.-P. 859-863.

261. McCutcheon, S.C. Overview of phytotransformation and control of wastes / S.C. McCutcheon, J.L. Schnoor // Phytoremediation: transformation and control of contaminants. New York: John Wiley, 2003. - P.3-58.

262. Mc Gill, W.W. Determination of oil content of oil contaminated soil / W.W. Mc Gill, M.J. Rowell // Sci. Tot. Environ. 1980. - V. 14. - №3. - P. 245-253.

263. Medina, V.F. Plant tolerances to contaminants / V.F. Medina, M. Marmiroli, A.C. Dietz, S.C. McCutcheon // Phytoremediation: transformation and control of contaminants. New York: John Wiley, 2003. - P. 189-232.

264. Menghini, A. Accrescimento e differenziazione biometrica di piante di Angelica archangelica L. incoltura idroponica / A. Menghini, N. Pocceschi, G. Venanzi, G. Milletti // Annali Fac. Agr. Univ. Perugia. 1988. - V. 42. -P.755-760.

265. Merkl, N. Phytoremediation in the tropics influence of heavy crude oil on root morphological characteristics of graminoids / N. Merkl, R.Schultze-Kraft, C. Infante // Environ. Pollut. - 2005. - V. 138. - № 1. - P. 86-91.

266. Morales, F. Photosystem II efficiency and mechanisms of energy dissipation in ron-deficient, field-grown pear trees (Pyrus communis L.) / F. Morales, R. Belkhodja, A. Abadia, J. Abadia // Photosynthesis research. 2000. - Vol. 63. -P. 9-21.

267. Newman, L. Uptake and biotransformation of trichloroethylene by hybrid poplars / L. Newman, S. Strand, N. Choe, J. Duffy, G. Ekuan, M. Ruszaj, B.

268. ShurtlefF, J. Wilmoth, P. Heilman, M. Gordon // Environ Sci Tech. 1997. -V. 31.-P. 1062-1067.

269. Nichols, T.D. Rhizosphere microbial populations in contaminated soils / T.D. Nichols, D.C. Wolf, H.B. Rogers // Water Air Soil Pollution. 1997. -№95.-P. 165-178.

270. Odu, C.T.J. The effect of nutrient application and aeration on oil degradation in soil / C.T.J. Odu // Environment Pollution. 1978. - V. 15. - № 3. - P. 235240.

271. Peer, W.A. Phytoremediation and hyperaccumulator plants / W.A. Peer, I.R. Baxter, E.L. Richards, J.L. Freeman, A.S. Murphy // Molecular Biology of Metal Homeostasis and Detoxification. Berlin Heidelberg, Springer-Verlag, 2005.-P. 299-340.

272. Perry, J.J. Microbial metabolism of cyclic alkanes / J.J. Perry // Petroleum microbiology / Eds. by R. M. Atlas New York: Macmillan Publishing Co., 1984.-P. 61-98.

273. Peuke, A. Tree transgenesis recent developments / A. Peuke, H. Rennenberg / Eds. M. Fladung, D. Ewald. - Heidelberg: Springer Publ., 2006. - P. 137-155.

274. Pigott, C.D. Survival of mycorrhiza formed by Cenococcum geophilum Fr. in dry soils / C.D. Pigott // New Phytol. 1982. - V. 92. - № 4. - P. 501-512.

275. Pilon-Smits, E.A.N. Phytoremediation / E.A.N. Pilon-Smits, M. Pilon // An-nu Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. V. 6. - P. 15-39.

276. Popa, A. Activitatea dehidrogenazica in sol ca test ecotoxicologic pentru po-luanti anorganici si organic! / A. Popa // Stud. Univ. Babes-Doliai. Biol. 2000. -№45.-P. 129-138.

277. Poulton, J.E. Intracellular localization of two enzymes involved in coumarin biosynthesis in Melilotus alba / J.E. Poulton, D.E. McREa, E.E. Conn // Plant Physiology. 1980-V. 65-№ 2. - P. 171-175.

278. Radwan, S. Oil biodégradation around roots / S. Radwan, N. Sorkhoh, I. El-Nemr // Nature. 1995. - Vol. 376, №7. - P. 302.

279. Raper, B. A manual of Penicillia / B. Raper, C. Thom. New York; London: Hafner Publishing Company, 1968.-875p.

280. Raper, B. The genus Aspergillus / B. Raper, D.I. Fennell. — Baltimore: The Williams and Wilkins Co, 1965. 686 p.

281. Reviere, J. Evolution de ia microflore dun sol imprégné hydrocarbures / J. Reviere, Gateliier C. // Ann. Agron. 1976. - V. 27, №1. - P. 85-99.

282. Riser-Roberts, E. Remediation of Petroleum Contaminated Soils / E. Riser-Roberts. Boca Raton, FL.: CRC Press, 1998. - 542p.

283. Riviere, J. Evalution de la microflore d'un sol empregne d'hydrocar-bures / J. Riviere, C. Gatellier // Ann. Agron. 1976. - V.27, №1. - P. 85-99.

284. Salzer, P. Hydrogen peroxide accumulation in Medicago truncatula roots colonized by the arbuscular mycorrhiza-forming fungus Glomus intraradices / P. Salzer, H. Corbere, T. Boiler // Planta. 1999. - V. 208. - P. 319-325.

285. Schnoor, J. Technology Evaluation Report: Phytoremediation / J. Schnoor / http://www.gwrtac.org- 1997.

286. Schnoor, J.E. Phytoremediation of organic and nutrient contaminants / J.E. Schnoor, L.A. Licht, S.C. McCutcheon, N.L. Wolfe, E.H. Carreira // Environ. Sei. Technol. 1995. - V. 29. - № 7. - P. 318-323.

287. Schubert, I. Are SCE frequencies indicatives of adaptive response of plant cells? / I. Schubert, K. Heindorff// Mutât. Res. 1989. - V. 211. - №2. - P. 301-306.

288. Schusler, H. Saniering kontaminierter boden durch mikroorganismen: gefundenes fressen / H. Schusler // Entsorga. 1986. - V.5. — № 4. - P. 12-13.

289. Sextone, A.J. Response of microbial populations in Arctic tundra soils to crude oil / A.J. Sextone, R.M. Atlas // Canad. J. Microbiol. 1977. - V. 23, №10.-P. 1327-1333.

290. Staff, C.P. Mutant bacteria decontaminates spilled crud oil site / C.P. Staff // Chem. Process. (USA). 1982. - V. 45. - № 14. - P. 96-101.

291. Stirling, L.A. Microbial metabolism of alicyclic hydrocarbons: Isolation and properties of cyclohexanedegrading bacterium / L.A. Stirling, R.J. Watkinson, I.J. Higgins // J. Gen. Microbiol. 1997. - V. XL. - № 1-2. - P. 119-125.

292. Suresh, B. Phytoremediation a novel and promising approach for environmental clean-up / B. Suresh, G. Ravishankar // Crit Rev Biotech - 2004. - V. 24.-P. 97-124.

293. Sveum, P. Enhanced biological degradation of crude oil in a Spitsbergen tundra site / Sveum P., L.-G. Faksness // Proc. 16th Arct. and Mar. Oilspill Program Techn. Semin., Calgary, 1993. - P. 377-391.

294. Terry, N. Can plants solve the selenium problem / N. Terry, A. Zayed, E. Pi-lon-Smits, D. Hansen // Proc. 14th Ann. Symp. Columbia, 1995. - P.63-64.

295. Udo, E.J. The effect of oil pollution of soil on generation, growth and nutrient upteke of corn / E.J. Udo, A. A. Fayemi //J. Environ. Quality. 1975. - V. 4. - №4 - P. 537-540.

296. Vodnik, D. Growth response of ectomycorrhizal Norway spruce seedlings transplanted on lead-polluted soil / D. Vodnik, M. Bozic, N. Gogala, K. Gab-rovsek // Phyton. 1996. - V. 36. - № 3. - P. 77-80.

297. Wang Jing, Zhang Zhongzhi, Su Youming, He Wei, He Feng, Song Hong-guang Phytoremediation of petroleum polluted soil // Pet Sci. 2008. - V. 5. -P. 167-171.

298. Watanabe, T. Pictorial atlas of soil and seed fungi: Morphologies of cultured fungi and key to spesies / T. Watanabe. Boca Raton: CRC Press, Inc. 2000. -411 p.

299. Wellman, D.E. Animal waste-enhanced degradation of hydrocarbon-contaminated soil / D.E. Wellman, A.L. Ulery, M.P. Barcellona, S. Duerr-Auster // Soil and Sediment Contamination. 2001. - № 10(5). - P. 511-523.

300. Whyte, L.G. Assessment of the biodégradation potential of psychrotrophic microorganisms / L.G. Whyte, C.M. Green, W.E. Inniss // Can. J. Microbiol. — 1996. V. 42. - № 2. - P. 99-106.

301. Wigger, J.W. Petroleum hydrocarbon fingerprinting numerical interpretation developments / J.W. Wigger, B.E. Torkelson //Environmental Geosciences. - 2002. — V.6. — № 3. - P. 155-156.

302. Wyszkowska, J. Correlation between number of microbes and degree of soil contamination by petrol / J. Wyszkowska, J. Kucharski // Polish Journal of Environmental Studies. 2001. - № 3. - P. 175-181.

303. Yamasaki, H. Flavonoid-peroxidase reaction as a detoxification mechanism of plant cells against H2O2. / H. Yamasaki, Y. Sakihama, N. Ikehara // Plant Physiol. 1997.-Vol. 1.-P.1405-1412.

304. Yang C.-M., Effects of three allelopathic phenolics on chlorophyll accumulation of rice (Oryza sativa) seedlings: Inhibition of supply-orientation / C.-M. Yang, Ing-Feng Chang, S.-J. Lin, C.-H. Chou // Bot. Bull. Acad. Sin. 2002. -V. 43.-P. 299-304.n

305. Yevdokimov, I. Microbial immobilization of C rhizoposits in rhizosphere and root-free soil under continuous 13C labeling of oats / I. Yevdokimov, R. Ruser, F. Buegger, M. Marx, J.C. Munch // Soil. Biol, and Biochem. 2006. -V. 38.-P.1202-1211.

306. Young, R.N. Natural Attenuation of Contaminants in Soils / R.N. Young, C.N. Mulligan. Boca Raton, FL.: CRC Press, 2004. - 384 p.