Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Особенности метаболизма у коровы и ее плода в течение беременности
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия
Автореферат диссертации по теме "Особенности метаболизма у коровы и ее плода в течение беременности"
¡2.7. л ■ л,
государственный агропромышленный комитет
СССР
МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ имени К. И. СКРЯБИНА
На правах рукописи
ПАПИН Николай Ефимович
УДК 577.1 +591.3]:636.2
ОСОБЕННОСТИ МЕТАБОЛИЗМА У КОРОВЫ И ЕЕ ПЛОДА ВТЕЧЕНИЕ БЕРЕМЕННОСТИ
03.00.04 — биохимия
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук
москва—1988
Работа выполнена в Воронежском сельскоховяйственноы институте имени К.Д.Глишш
Официальные оппоненты :
Доктор биологических наук, профессор ХОЛОД В.М. Член-корреспондент ВАСХНИЛ,
доктор биологических наук, профессор САМОХИН Б.Т.
Доктор биологических наук, профессор ГЕРАСИМЕНКО В.Г.
Ведущая организация - Харьковский аооветеринарный
институт имени Н.М. Борисенко
А 1 ,
Защита диссертации .состоится " " f'b I 198^ г.
б (/0 часов на заседании .специализированного совета
Д-120.36.05 по защите диссертации на соискание ученой степени-доктора наук при Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им.К.И.Скрябина по адресу: 109472, г.Ыосква, ул.Акедеиика Скрябина, д.23, тел. 377-33-83.
С диссертацией шашо овнакошться в библиотеке академии. Автореферат разослан
Ученый секретарь специализированного совета Сафонов H.A.
ОВЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
; . Актуальность темы. Для выполнения Продовольственной программы и познания сущности физиологических процессов в метках, тканях и органа* и умения управлять ими большая роль принадлежит.биохимии и молекулярной биологии, на важность которых указывалось в материалах ХХУП съезда КПСС и постановлении ЦК КПСС и Совета Министров СССР "О совершенствовании научного обеспечения развития агропромышленного комплекса страны" (1987).
Ряд вопросов биологии й биохимии связал с актуальной проблемой изучения обмена веществ между матерью, и плодом. В животно во дет не эта задача имеет важное значение потому, что в настоящее время падеж животных, особенно молодняка от незаразных болезней занимает большое место и наносит значительный экономический ущерб. Существенными причинами гибели молодняка и снижения продуктивности взрослых животных являются заболевши:, связанные с нарушением метаболизма, основы которого закладываются в утробный период. Поэтов, несмотря На большое значение исследований этого периода (С.И.Трусов, 1951} В.П.радчонкое, 1965; Л.И»Сологуб, 1965$ В.П.Шишков, .1966» А,Г.Савойский, 1966» Ж.В.Шишкова, 1966| Г.М.Удовии, 1966} С.И.Кусень, 1966} К.В.Ха-лилов, 1966} С.И.Вишняков, 1972{ Я.Р.Коваленко, Ю.Н.Федоров, 1973} в<УьЬ(И' , 1974} 1.К.Эрнст, В.Н.Лимонов, 1976} В.И.Го-оргиевский, Б.Н.Анненков, В.Т.Сомохнн, 1979% Л, Д^о.тТС сЬ а(.., 1982} Б.Д.Кальницкий и др., 1983} Р.Х.КармолисБ, 1984; Б.П.Рад-чонков и др., 1965), их еще недостаточно для окончательного решения теоретических и прикладных вопросов животноводства, раскрытие которых существенно расширит представления о биохимических процессах в организма и будет способствовать получению жизнеспособного приплода.
Поскольку "организм матери и плода - единое целое* (В.М.Королев, Н.М. Носков, 1966), то изучение обмена веществ у матери связано с исследованием его плода. Такой подход позволяет выявить особенности взаимосвязей плода и матери, установить биохимические и физиологические особенности функционирования органов и тканей в эмбриональном и постэмбриональном периодах онтогенеза, определить отдельные функций организма в связи с внешней средой, проследить и сопоставить показатели интенсивности метаболизма матери, плода, новорожденного, молодого и взрослого *и-
г
вотного. Однако большинство работ в ветеринарии и медицине направлено на исследование крови матери, реже - плода и еще режа -их органов и тканей.' При этой одновременные исследования: у матери и (иода единичны. Установление же биохимических взаимоотношений в систем? мать-плод и выяснение особенностей обмена у новорожденных и молодых животных имвет важное теоретическое и практическое значение для биологии, животноводства и медицину.
Научная гипотеза. В настоящее время ничего неизвестно о степени готовности различных органов плода к выполнению биохими-чесиах фикций г^осле рождения. Очень мало сведений о влиянии бе-ре! !знности на химическиепроцассы органов и тканей матери и они не раскрывают механизма ее адаптации к етому физиологическому состоянию. Практически нет данных по одновременному анализу одноцыеШ)их биохимических показателей, то есть исходного физиологического фот органов и ггжеЦ матери и плода коровы в течение (JepeuewwcTH в сравнении с половозрелой небервмеинюш животными. Недостаточно исследований об участии плацент»! и {йодных жидкостей в обеспечении нормального течения беременности, а также по с^внительной биохимииплодирго периода поввононных.
Следует исходить из того, что включение клеток, тканей, . органов и систем плода в действие и формирование их физиалрго-бкохимичаских функций происходит по мере срабатываний в хронологическом порядке (pro генетической информации и развития. Предполагается, что эти процессы связаны с насыщением клеток; метаболитами, наличием и активностью в них ферментов. Можно предполагать, что при реализации наследственной программы р пернув очередь синтезируются белки-ферменты, иогоруе способствуют превращению.а&родьша р плод, новорожденное, молодое и половозрелое животное. Кроме того, вещества, посту^шющие от матери к вмбриоцу и тшоду и образующиеся в организме последних, накапливаются в их клетках и при определенной концентрации возбуждая? соответствующие участки ДШ, генный аппарат и .способствует последовательной реализации генетической программы, в виде живого организма. Можно допустить проявление новой роли веществ и других дугой их превращении в эмбрионе и плоде в отличие ог организма взросл)«; животных. Предполагается, «то в биохимии плодного и постнатального периодов могут быть элементы сходстве, характерные как для стадии деления клеток, развитии тканей, органон и организма, так и превращения вецеств, отражающие определемн^ю эволюционную зокономврност h проявления ин-
тенсивности и направленности обмена веществ.
Цель и задата исследований. Целью работы было изучение метаболизма в органах и тканях коровы, ее Плода и выяснение его особенностей в течение беременности. Биохимия плодного периода крупного рогатого скота может быть испольоована в сравнительном аспекте для других видов животных и человека.
В связи с изложенный нами решалась следующие задачи!
1. Определение активности энзимов* количества белков, их метаболитов, аминов, водорастворимых витаминов, моносахаридов
в органах и тканях небеременных коров и тёлок (симменталы, черно-пестрые и их помеси) разного возраста.
2. Изучение влияния стельности на биохимические показатели симментальских коров и определение га физиологического состояния в течение беременности.
3. Установление биохимических показателей органов И тканей при развитии плода и сопоставление их с аналогичными даннши матери, небеременных коров й телок после рождения.
4. Исследование биохимических показателей плаценты.
5. Определение физико-химических свойств и биохимических показателей мочи и околоплоддех жидкостей коров.
6. Выявление критических периодов в обмене веществ между ' матерью и плодом.
7. Анализ активности ферментов, особенно гепатоспецифиче-ских, а также содержания связанных с ними метаболитов у других животных (овец, человека - беременные жонщины, птиц - эмбрионы кур) на предмет сравнения с одкоименньми показателями крупного рогатого скота..
8. Исследование влияния физико-химических факторов на активность ферментов и концентрацию метаболитов в печени эмбриона.
Работа выполнялась по госбюджетной теме 7 "Разработать и усовершенствовать научно обоснованную технологию ведения скотоводства, основы современных методов профилактики болезней обмена веществ, борьбы с бесплодием и болезнями молочной железы у крупного рогатого скота в условиях промывленнкх комплексов ЦЧЗ", К! государственной регистрации 81070674»
Научная новизна. Впервые установлено, что сорбитолде-гидрогеназа (СоДГ), гистидин-аммиак-лиаза (ГАЛ) и уроканиназа у крупного рогатого скота являются гепатоспецифическими энзимами. Получены данные по активности этих и ддггих ферментов
(липаза, катализа, <=С- и ^-амилаза, ацегилхолинэстерааа - АХЭ, аспартаттранеоминаза - АСТ), количеству общего и водорастворимого бедка» гиетндпна, аневрина, уроканиновой кислоты, колашша, ацетилходина, витаминов (Вт , б, холина), глюкозы и фруктозы в органах к тканях коров и их плодов в течение беременности, а также определены физико-химические сво!^тва (рН, плотность, поверхностное натяжение, вязкость) и биохимические показателе (активность АСТ, содержание остаточного азота, ыочзвины, креатина, крзагшшна, хлора) мочи и плодник вод. При этом установлены изменения, происходящие в организма матеря, особенности ее адаптации во время стельности и критический период в обмена вещаете между матерью и плодом коровы. Показана активная роль плаценты в синтезе и распределении веществ (фруктоза, урокалиновая кислота и др.) в системе мать-плод. При атом ьпершз установлена непроходдаость ансеркна от матери.к плоду, способность плода по осуществлению реакции окисления сорбдта, внутримолекулярного дезаминирования гистидина, утилизации урокани-новой кислоти, а также по синтезу и накоплению холина, ацетил-ходшт, карнитина, ансерина, колпшна,. аскорбиновой кислоты, гидролизу лшшдов, ацотилхолина и полисахаридов. Установлена активная роль лигшдсвяэеннога карнитина для развития плода и, что аневрин синтезируется в его печени. Представлены норио дан-низ «о концентрации азотистых веществ, хлора, свойствам плодных вод и мочи стельных коров. Раскрыта роль плодаьк вод в становлении пищеварительной, сократительной и выделительной функции соответственно пищеварительного тракта, ышпц и мочерццели-тальиой системы плода; Установлена связь меж^у количеством веществ у плода и животных после рождения. Дана оценка одноименных показателей крови в связи с породой и возрастом телок после рокдения. Обосновали сходные данные по сравнительной биохимии, в том числе плодного периода, различных позвоночных (корова, человек, птица) и показана, реакция печени эмбриона на физико-химические действия. Дяя получения точных результатов и ускорения анализов предложен метод одновременного определения активности СоДГ и содержания фруктозы в одной пробе цельной крови.
' . Научное и практическое значение диссертации. Материалы исследований могут быть использованы в научном обосновании . течения беременности и постнатальиого периода.роста и разви-
тип организма крупного рогатого скота, в решении некоторых вопросов сравнительной и эволюционной биохимии. Показана роль плаценты в синтезе, транспорте и распределении веществ в системе мать-плод и значение плодных вод для развития плода. Показатели крови, органов, тканей и мочи коров могут быть использованы для контроля точения беременности, г клинической диагностике и терапии животных. Данные по гепатоспецифнческим ферментам могут бьггь использованы для исследования функционального состояния паренхимы печени и диагностики ев поражения при действиях факторов среды на этот орган. Химический состав и свойства , амниотической жидкости найдут применение для составления физиологических сред г> работе с эмбрионами. Материалы диссертации можно использовать в учебном процессе по эмбриологии, нормальной и патологической физиология, биохимии, клинической диагностике, внутренним незаразным болезням и акушерству.
Реализация результатов исследований. Основные результаты исследований включены в такие документы: I. Папин Н.Е. Нормативы биохимических показателей у норовы л ее плода в течение беременности. Методич.учазания. - Воронеж, СХИ. - 1988. - 17 с. Одобрены секцией "Биология, иммунология и биотехнология В ветеринарии" отделения ветеринарии ВАСХМИ (протокол 3 3 от 24.11. 87 г.). 2. Папин Н.Е., Кузьмичева В.Н. Методические указания к выполнению лабораторных работ по курсу "Биохимия с основами физической и коллоидной химии" для студентов ветеринарного и зооинжпнерного факультетов. -- Воронеж, СХИ. - 1984. - 48 с. 3. Малахов А.Г., Баранова B.C., Моисеева Н.5., Папин Н.Е., Ва-лова Л.В., Разумовская Л.М., Курдумянова О.И., Хрунэва И.В. Энзимология. Мотодич.указания. - М.: ММ, 1987. - 36 с.
В лабораторную практику внедрен метод одновременного определения активности СоДГ и содержания фруктозы в одной пробе цельной крови (Лабор.дело, 1983. - № 3, - С.57).
Материалы диссертации внедрены в учебный процесс по биохимии животных в Воронежском сельскохозяйственном институте им. К.Д.Глинки, Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им. К.И.Скрябина, Курском сельскохозяйственном институте им. профессора И.И.Иванова, Витебском ордена "Знак Почета" ветеринарном институте им. Октябрьской революции, Белоцерковском сельскохозяйственном институте, Семипалатинском зооветеринарном институте.
Апробация работ». Основные положения диссертации довожены и обсуждены не; отчетных неучних конференциях Воронежского СХИ П972-1987), конференции по проблеме "Адаптация системы мать-плод" (Новосибирск, 1975), Воронежском и Московском отделениях Всесоюзного биохимического общества (1976, 1980, 1987), комиссиях зооинжеиер{>ака Воронежского СХИ по рассмотрении материалов диссертации (1980, 1985), Всесоюзных семинарах-совещаниях заведующих кафедрами биохимии с.-х. вузов (Москва, МВД, 1980; Бе-лад Церковь, СХИ, 1985), Всесоюзном симпозиуме по биохимии с.-х. животных (Витебск, 1982), заседании кафедры органической и физической химии {1985) и кафедры нормальной и патологической физиологии и биохимии (1988) Воронежского СХИ, кафедры органической и биологической химии МВА и межкафедральных заседаниях.в ИНА (1987, 1988), Всесоюзной научной конференции "Проблемы диагностики, терапии и профилактики незаразных болезней сельскохозяйственных животных в промышленном животноводства(Вороная, 1986), секции "Биология, иммунология и биотехнология в ветери» н&рин* отделений ветеринарии ВАСХШЛ (1987),
Обгем и стщктура диссертации. Работа изложена на 359 страницах машинописи. Состоит из введения, обзора литературы, экспериментальных исследований, обсуждения результатов,:заключена, выводов и предложений практике. Работа иллюстрирована 37 таблицами и 38 рисунками. Список литературы содержит 241 отечественный и 612 зарубежных источников.
ЭКСПЕРИШШЬШЕИССЛЕДОВАНИЯ
Объекты, материал и-методы исследований
Основным объектом исследований были стельные (с 3-го по 9-й месяц) коровы и их плоды симментальской породы, у которых в крови, ее сыворотке и клетках, печени, плаценте, скелетных ышцах, амниотической (АМЖ) и аллантоисной (АЛЕ) жидкостях, моче, поджелудочной железе, Надпочечниках, почках, сердце, селезенке, продолговатом мозге, двенадцатиперстной кишке, слизистой оболочке матки определяли 28 показателей. Для этого в хозяйствах Воронежской области от клинически здоровых стельных и небвременных коров, подобранных по принципу аналогов, брали кровь . Ее показатели были основным .физиологическим фоном в "
опытах с животными, от' которых материал получали в условиях мясокомбината, куда животные поступали после откорма и имели хорощую упитанность. Взятие материала от животных на мясокомбинат о производилось во время убоя и ветеринарно-спнитарноР экспертизы их внутренних органов и тугаи. Пробы брали только в случае отрицательного.заключения на заболевания животных и поражения их органов. Для более полного и глубокого контроля состояния нормы у нйх исследовали кровь, основные показатели которой (белок, сахар, резервная щелочь, ферменты Й т.д.) сравнивали с аналогичными данными животных из хозяйств области. Пробы брали в основном в латне-эсенний период.
Для связи с плодным периодом и в плане сравнительной биохимии исследовали кровь симментапьских, черно-пестрых и помесных 2-3-, 4-5-, 18-месячных телок и первотелок, которые были подобраны в группы по принципу аналогов и находились в одинаковых условиях кормления и содержания.
Кромо того, с цельп выяснения особенностей метаболизма и нахождения возможных сходных его элементов исследовали материалов том числе в плодакй период, от других животных (овцы, человек, птицы). Для этого брали кровь иебвременных овец острогожской породной группы, а в роддоме f? 4 г. Воронежа брали кровь в период родов от матери и новорожденного и детскую плаценту. Эксперименты с эмбрионами кур проводили совместно с заведующим кпф°дрой нормальной анатомии Воронежского СХИ, профессором Я.И.Шнейбергом. При этом определяли влияние физико-химических факторов на активность ферментов и концентрацию метаболитов в их печени. Бее яйца, отобранные для инкубации, обрабатывали по принятой методике парами формалина и делили на 3 группы. Яйца 1-й группы использовали и качестве контроля, а 2-й и 3-й - перед инкубацией промывали 0,8 56 раствором хлорной извести. Яйца 1-й и 2-Й групп инкубировали в обычном, а 3-й--в барохамврном инкубаторе, в котором на 17 й день инкубации эмбрионы подвергали глубинной обработке аэрозолем с йовшинным содержанием кислорода. Затем из каждой группы от эмбрионов брали почень для химических анализов. .
Определение веществ И физико-химических показателей осуществляли следующими методами! СоДГ и фруктозу - соответственно по JA. i-.lotJaiek (1961) и Rot -Шерлан (B.C. Асатиани, 1949) в Пашей модификации (Н.Е.Папин, 1983), ГАЛ,
уроканиназу, урокшшиовую кислоту по М.ТаЫ , д.Н (1955) в иодификапи С.Р.Ыардашера ц В.А.Буробшш (19'72), аш-лазу, гллкозу, цаталазу, остаточный ааот, витамине, резервную щелочность - соответственно по Вольгецуту, Хагедорн-Иенсену, Баху, Несслйру, реактивом Тилыланса, Квсодову (С.Д.Баяахорский, И.С.Бадаховский, 1953), ДХЭ - по 1.1.15.8(1 долькам (1963), липазу -по В.11.Сазонову (1961), АСТ - по Т.С.Пасхиной (1961), ацатил-холин - по Л.Я.Лшшц, В.И.Рубиц/ (1961), белок - по 0.£ищ%у-
0^.(1951), ансорин - по Н.А!.Юдоет^г (1949), гистидин - по 'Г,С, Пьсхкной (1264) и с помощью аминокислотного анализатора 1-339 (ЧССР), холча и колашн - по С. КайЬше, (1 СЛспуц// (1951), карпетки - по (1944), мочевину - по С.Г.Гасано-
ьу (1961), креатин и креатинед - по Т.Я.Балаба и др. (1961), реакция сридц - с псмощье рП~метра, хлор - по А.Й.Алътгауаен (19Ь6), плотность, относительное поверхностное патогенно и относительную вязкость - соответственно ареометром, сталагмометром и вискозиметром Ш.М.Маршев, 1954} А.Я.Альтгиуэен,1956). Для измерения оптической плотности растворов использовали £ЭК-Ц, С31С-Н-М, 01-10 и С&-16.
В опытах била «спользорена 501 голова крупного рогатого скота, и том числе 1й животных помесных и 25 черно-пестрой породы, а также 8 орец, 10 беременных кенщин и 35 плодов кур. Из 466 животных симмеитальной породы было 330 стельны* корчв, от которых испопъэовали 210 плодов. Всего выполнено 8853 анализа, из которых 91,2 % на крупном рогатоц скоте, а остальные на других видах кивотных.
Полученные данные обработаны статистически (В.С.Асатиани, 1965).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Энаимы - распределение в организме и динамика активности в плоданй и постнаТальНый периоды у симментальского рогатого скота
В активности ьнаимов обнаружены определенные особенности в сьяэи с беременностью. Они васаютс» также распределения ферментов в организме и активности в зависимости от стадии
развития плода и возраста животного после рождения. Установлено, что у коров характерен свой оптимум рН для действия СоДГ и ГМ , равны?! соотеэтст вошю 8,8 и 9,0-9,4. Активность СоДГ на БО % угнетается цитратом й оксалатсм натрия, на 100 % - фторидом натрия, о гепарин не оказывает на ное слияния. Пртт изучении распределения активности СоДР, ГМ и у^хженинаэн оказалось, что наибольшая их величина находится в яечэнй коров (табл. ).
Таблица
Относительная активность СоДГ, ГЛЛ и уроканиназы У коровы,
Материал СоДГ ГМ Урокштнвзп
Печень ТОО 100 100
Надпочечник ' 23,19 0,00 0,00
Почки 20,87 0,00 0,00
Двенадцатиперстная кишка 4,15 0,00 0,00
Лимфоузел 3,52 0,00 0,00
Поджелудотшоя железа , 2,16 0>00 0,00
Сердце 2,07 0,22 0,13
Скелетные мышцы 0,91 0,00 0,00
Селезенка 0,74 0,22 0,11
Кровь 0,20 1,61 1,94
Сыгоротка крови 0,14 0,82 1,18
Клетки.крови 0,05 0,79 0,76
Слизистая оболочка матки - 0,00 0,00
Из данных приведенной таблицы следует, что указанные ферменты можно отнести к разряду гепатоспепифических. При этом наибольшей органной специфичностью обладают ГА31 и уроканинаэа.
С 3-го по 9-й месяц беременности на фоне постоянного действия уроканиназы в печени матерей окисление сорбита усиливается я 6-чу месяцу, а внутримолекулярнс дезаминирование гистнди-на к 7-му месяцу стельности. Затем активность СоДГ и ГАЛ снижается до их величин у небеременных коров.
Что касается печени плодов; то в ней активность ГАЛ равна показателю взрослых животных на 3-м месяце беременности а но 7-м месяца даже превышает таковбй но к концу эмбриогенеза возвращается к первоначальному значению. Б:то же время СоДГ и
уроканинаае, обнаруживаемые в печени 3-месячных плодов, имеют активность слабее, чем у взрослых животных. В течение эмбриогенеза да католическая сила увеличивается и к концу его достигает величин небеременных коров.
Особенностью плодного периода является проявление действия ук&ашшых ферлентов в плацентомах, что свидетельствует о вкладе плаценты в биохимические процессы печени в связи с возросшей нагрузкой на последнюю. Однако в плаценте матерей и плодов активность СоДГ, ГАЯ и уроканиназы значительно ниже, чем в их печени, но вдае, чем в крови. При этом окисление сорбита в плацентомах повышается с 3-го 6-ну месяцу стельности и уменьшается к концу ее до первоначальных величин. В котелидонах СоДГ работает в предеаах верхней границы активности фермента в карункуяах. ГШ в котелидонах-до 6-го месяца беременности удерживается в пределах высшей активности фермента в «арункулах, а затем интеп-сквность дезашнирования гистидийа в плацентомах уменьшается, но в котелидонах этот процесс до конца стельности протекает более активно, чем в карун^улах. Что касается уроканиназы, то при достоверной разнице.в 3 месяца беременности ее действие в ка-рункулах до 6-го месяца стельности происходит на уровне верхнего, а после 7-го месяца беременности в.пределах нижнего показателя ее активности в котелидонах. Вместе с тем активность уроканиназы в обоих частях плаценты увеличивается до 6-го ыесяод беременности и остается на атом уровне до ее окончания. Следует добавить, что изменение активности СоДГ, ГАЛ и уроканиназы в керункулах соответствует таковому в потел и донах.
В крови 3-месячных плодов активность СоДГ вше, а ГАД и уроканиназы ниже, чем у матерей, к кош^ развития:.активность СоДГ в крови плодов уменьшается, а ГАЯ и уроканиназы повивается. Вследствие этого активность указанных ферментов выравнивается с их показателями для небеременных коров и остается на -этом уровне у телок после рождения, аа исключением цуть меньшего значения СоДГ у 1В-меслчннх телок.Я ГАЯ у первотелок. Однако, несмотря на изменение активности.СоДГ, ГАЛ и уроканиназы в печени матерей и плодов и даже проявление активности ферментов в плаценте, ее величина в крови матерей остается в пределах показателей для Пеберемыних коров.
Об изменении интенсивности окислительных процессов в плодный период свидетельствует и катал аза, активность которой.
в печени коров и их плодов выше, чем в кровн. При отом в крови матерей действие фермента к 6 месяцам беременности несколько уменьшается, а к 8 - усиливается, но еще не достигает показателя небеременных коров. В то же время в печени матерей активность каталаэы постоянна, а в крови и печени плодов к В месяцам их развития увеличивается, но проявляется ниже аналогичных величин коров.
Исследования AJO показали, что в процессе индивидуального развития имеются определенные особенности в ее активности в органах и тканях крупного рогатого скота. В частности, наибольшая активность АХЭ наблюдается у нсберемешнх коров в крови (37.I9Í 2,34 ВД/мл), меньше в мозге (11,12 - 0,92 ЕД/с), еще меньше в печени (7,99 ± 0,50.ВД/г) и мышцах (7,11 ± 0,50 ВД/г). Эта же закономерность в основном характерна и для стельных животных, хотя у них ее активность в течение беременности имеет выраженные особенности. Так, на фоне постоянной активности в мозге матерей в их крови на 4-м и в печени на 4-м и 6-м месяцах беременности активность фермента уменьшается. В то же время в мда-цах матерей на 5-м и 8-м месяцах стельности каталитическая сила АХЭ увеличивается.
У 4-месячных плодов активность энзяма в Мозге и мышцах вмпе, в'крови равна, а в печени ниже по'сравнению с небеременными коровами. К 8 месяцам развития плодов действие АХЭ усиливается и превосходит показатели взрослых животных,
В плацентомах обнаружена самая низкая активность (от 2,800,84 до 7,57 ± 2,16 ЕД/г) АХЭ, которая работает в течение эмбриогенеза на одном уровне, но на 4-м месяце беременности в ка-рункулах она действует•чуть активнее, чем в котелидонах, а в остальные месяцы стельности в обоих частях плаценты функционирует- в одних пределах.•
Беременность сопровождается сдвигами активности иаоформ амилаз, которые в большей степени наблюдаются у плодов и меньше у матерей. Установлено, что амилазы работают во всех исследованных объектах, за исключением скелетных мшц 3-месячных плодов. Вместе с тем активность- у —амилазы в мышцах 6-месяч-них плодов коровы очень низкая и остается без изменений до рождения. В детской плаценте величина активности J-амилаза равна' ее показатели в скелетных мышцах плодов и остается постоянной в течение эмбриогенеза.
В материнской плацента ^-ащдааа гидррлизует гликоген в 2-4 раза интенсивнее, чзы в котелндонах, одаачо действие еа в карункулах на 9-м насада Gвременности ^ендаетса. В организма матерей на фойе постоянной антитосщ <£~анущэы в подиэду- . дачной железе и двонидцатщшрстиий щшке действие ^-аыидазы в скелетных адыщазс на 3-й и:9-м москцах баремэннйсуи уменьшается , а в печени после уеаяичзшш активности в 6 ыеся^д стельности возвращается к aoitvy эмбриогенеза. а врвдщи активное?^. 3-го . месяца беременности, У 3-месячньк Плодов наряду сотсуг'стии.аи . емилолигицаокой активности ы^вд, каталитическая сила амилазы в других ткелях значительна и»«:«?, чем у' коров, В ТО аа йр&д,*? В печени, поджалудощюй аедеэе и двенадцатиперстной кишка развивающихся плодов действие «шилааы усиливается, но к моменту их рождения активность анзиыа только в лечвИИ достигаа? пйн&зйто-кя активности у коров, а в яодаелудочдой )волезо' и' двенадгатя-пврстной кивке она еще ниже, чам у них на 32 % п 1В % соответственно,
С поведением амилазу р дванедцадирерстной, тшса есть сходство в действии находящейся s этой кивке липазы, активность которой у матербй но отличается от показателя иеверенениык коров, а у плодов с 3-го к 8-му месяцу развития заметно повышается, но еще составляет около 65 % ot волищиш бе активности у коров.
Кроме указанного вызе шявдена также учлсиш плаценты и околоплодных жидкостей (ашиотичзскай и аллантоисной) в пере-амшшрований и синтезе через этот процесс глютоминовой кислоты, При о том инт енсивность реакции с участием ACT в плацент оме значительно выше, чем в АШ н АйЙ. В последних действие транс-шлшазы незначительно. В кар/нкулах ЛСТ работает несколько быстрее, чем в котслидонах* На 6-6 месяцах беременности отмечается пик активности ACT в детской и. материнской плаценте и околоплодных тдхостнх. .
Изменения количества белков, и их метаболитов в связи с беременностью и в постиатальныЕ! период у крупного рогатого скота симментальской породы
При определении общего ¿елка в цельной крбви и водорастворимого белка в печени и плаценте показано, что На фоне постоянного содержания водорастворимого белка и печени и плацан-
те матерей количество общего белка в их крови снижается до 223,00 ± 4,44 мг/мл против 244,41 ^ 3,37 мг/мл у небеременных коров. Вместе с тем у 3-месячных плодов количество общего белка в их цельной крови и водорастворимого в печени меньше, чем в аналогичных объектах матерей, а в котелидонах равно показателю водорастворимого белка в Карункулах. К 9-ыу месяцу развития плодов содержание водорастворимого белка в их печени и плаценте увеличивается и выравнивается с величинами матерей, но в печени и цельной крови (общий беЯон) остается ниже, чем у небеременных коров.
В крови телок до 18-месячного возраста количество общего белка повьиается, но остается еще ниже, чем у небёременных коров, а у первотелок оно достигает показателей последних.
К 6 месяцам беременности отмечается уменьшение свободного гистидина в печени и скелетных мыпцах матерей, а к 9-му месяцу-в их крови, но в 8 месяцев стельности содержание аминокислоты в мшцах и печени возвращается в исходное положение, то есть показатель 3-го месяца эмбриогенеза. В то же время в мшцах 3-месячнкх плодов гистидина обнаружено как и у небоременнг< коров, а в печени плодов меньше, чем у них. К 8 месяцам развития плодов концентрация этой незаменимой аминокислоты в их мъицах уменьшается, но остается в пределах ее величины У Небеременных коров, а в печени плодов выравнивается с показателями последних. В плаценте обнаружена более высокая концентрация гистидина, чем в печени и мышцах. До 6-го месяца беременности содержание аминокислоты в котелидонах находится несколько вше (причем в 3 месяца стельности существенно), чем в карунцулах, а затем это различие исчезает. К концу беременности содержание гистидина в пла-центомах уменьшается.
Что касается ансерина, то самоэ большое его количество обнаружено в скелетных мыицах коров - 4,96 - 0,43 мкМУг. Затем в порядке уменьшения содержания вещества следуют - кровь, печень и плацента. У стельных коров его количество постоянно. У плодов ансерин появляется лишь на 5-м месяце развития в печени (в большем количестве) и крови, а на 6-м месяце беременности -в плаценте и мыпцах. Его уровень у плодов (за исключением ко-телидонов, где он остается постоянные, самъм низким и рвзнда с содержанием в карункулах) увеличивается, но только в печени и крови соответственно 6- и 9-месячных плодов он выравнивается
О таковци нвооременншс коров. В мышцах ко даже после рождения у 8-днещ1ык телят ансерина р 1,9 раза меньше, «ем у корОв.
Уроканиновой кислотой больше всего насинена плацента, особенно ее плодовая часть. В- котелидонах и карункулах содержание атой кислоты увеличивается соответственно к 4 и б месяцам бере-нзнности, а к концу ее падает нижа первоначальных величин, то есть показателя 3-го месяца стельности.
В печени матерей количество уроканиновой кислоты к 4-цу месяцу бореманности поьи^аатса, на 7-8-ц месяце уменьшаете^ и ¡¡а 9-и месяце стельности находится »« уровна неберёменных коров, у которых яда равно 3,68 * 0,17 икМ/г. В печени 3-4-ыееяч-нцх плодов концентрации вделоти равна. на ьничинню у матерей, 5-м ^еслце разйнвд плодов онд превышает ату вошчшу'для матерей, а к 9-цу мзе^цу эмбриогенеза падает ииЯе аналогичного показателя небьремеших коров.
Количество уроканиновой кислоты в крови меньше, чем в печени и миацах. При этой концентрация ее в крови цатерей в таяэ->цш беремишосги. протошша. У плодов ее содержится, больие, чем ' у коров, прЕшавтед к 6-л*у месяц/. беременности, к 9-иу месяцу. . падает, ИР остается еце выше величины ва^сдщ ж^ео^ны?, а у.' 2-3-месячных те»$к количество уроканииорой кислоты в крОвв выращивается с показателями нёбероиенных воров,
емюшв и водорастворимых витамянов в орфизме КОрав, их' плодов .'и ноиорокденньа те'лш симментальской породы
Настоящий раздел содержит мытщшоли НО изменению в ткан#х и орга|}ах: отыполамини,' ещотнлхамна, вит.аышшБ - АпрниТкШа .■■'. (Вт),. С и хОЛииа.
..Определено, что. количество коламина в.крови коров в 3 щ ыеНьве, чем в печени и тзицае. .В крови и печени матерей со- . держание (шиноспнрт{1 к 8 мвеырм беременности несколько увеличивается, а в ммдцах остается без изменений. В крови, миьцахи " печени 4-чесячнюг плодов кояамина меньше, чем у небеременних' коров, а к 8-ку месяцу и* развита* количество атого амина,до- .. стигает''показателей ко^юв (0,88 ± 0,06' цкМ/мд, 2,64 * О,0Э " • ыкМ/г .и 2,66 ^ 0,00 миУ./г ссютвотстьонно). .и остается и отих же пределах и у б-даевних телят. В плаценте матерей, н плодов -об- '
наряжено постоянное содержание этанЬлпмина,. которое колеблется в границах его показателя в печени и мышцах коров, но величина коламина р каруняулах Держится в пределах его верхней Границы в котелидонах.
Следовательно, наиболее вироженнив изменения количества . этаноламина наблюдаются 8 Кропи й печени матерей и плодов и несколько мпньие в мышцах последних.
В отношении холина выяснено, что самая большая его koíi-центрадил наблюдается в печени (23,OS i 1,53 мкМ/г) у неберемен-imx коров,-а в мьтадах и крови eró значительно меньше - 4,24 -0,34 тН/г и 0,96 - 0,05 мкМ/мл соответственно.
На фоне постоялкой величины хояйна в мышцах матерей его содержание в печени на 4-м и 8-м меейцах беременности уменьшается, ft в крови к 6 месяцам стельности увеличивается.
В крови, мдацах «печени. 4-месячных плодов холина обнаружено значительно меньше, чем-у коров. G райвитием плодов содержание в>линоспирта увеличивается, но даже после рождений у 8-дневных телят оно eil\B меньше, чем у коров,, aá исключением мдац, в которых величина холина выравнивается с его количеством у коров.
. . В плаценте матерей и 8-месячных плодов холина содержится несколько больше, чем в их скелетных мышах. При этом, концентрация его i) котплидонах 4-месячних животных меньше, чем в соответствующих квруикуяах. С точением беремвннаети количество холима в котелидонах поддастся и на 9-м месяце эмбриогенеза выравнивается с <?fo концентрацией в карункулах. В плаценте матерей и плодов холина соответственно в 6 и II раз больше, чем в их крови.
В связи со стадией развития, физиологическим состоянием организма, отмечаются изменения в содержании пцотилхояина. Самая большая концентрация ацетилхолина; обнаруженная в печени, предполагает его синтез в этом органе i последующий выход 8 кровяное русло и поглощение клетками тканей и органов 8 соответствии с их функциями.
В мышцах матерей п течение? беременности содержание ацетил-холина остается без изменений. В их iiavnim и крор.и оно к 6 месяцам стельности уменьшается-, а в продолговатом мозге увеличивается, но К ß месяцам амбриогеиеза количество поэдетеа возвращается в пределы небеременных коров, у которых в этих объектах
оно равно 82,24 ± 1,24 мкМ/г, 58,61 ± 2,28 мкЫ/мл и 16,18 ± 1,17 икМ/г соответственно.
В тканях ц органах 4-месячных плодов ацетилхолина обнаружено значительно меньше, чем у коров. К 8 месяцам развития плодов количество этого медиатора увеличивается, но только в мозге достигает аналогичной величины норов, л в печени, крови и мышцах оно еще ниже, чем у них.
Для плаценты характерен самый низкий показатель ацетилхолина и незначительное повышение его в котелидонах до пределов содержания в кирункулах, где он в период 4-8 месяца беременности остается без существенных изменений.
В процессе онтогенеза ткани матери, плода и новорожденного теленка отличаются по количеству карнитина, Так, в мышцах и крови матерей количество етого витамина в течение беременности Но изменяете*?, а в их печени и 6 месяцам стельности увеличивается, но в 8 месяцев беременности содержание его становится таким т, что у в пачани небеременных коров (4,17 - 0,24 мкИ/г). В то же вреад у 4-месячных плодов карнитина содержится меньше, чем у коров, и, хотя с развитием плодов количество витамина возрастает, оно только в их крови на.8-м месяце беременности достигает величины небереыенных коров (0,62 t 0,07 мкМ/ыд), а в печени и мышцах даке у 8-дневных телят карштина меньше, чем у нестельных животных,
В плаценте наибольшее количество карштина приходится на 6-й месяц беременности, и 8-му месяцу оно уменьшается и выравнивается в обоях ее частях. В 4 и & ыеслЦев стельности в карун-кула,. витамина больше, чем в котелидонах, что, очевидао, связано со спецификой их функции..
В течение беременности отмечается увеличение содержания яипидеаязанкей фор/и кашитина по сравнению с его свободной формой в печени матерей и плодов соответственно в 2,4 и 2 раза и мдоцах плодов на 46 %,.но отсутствие таких, изменений в мцш-' цах матерей и плацентомах.
Что касается аскорбиновой кислоты, то в крови матерей и плодов ее содержится иеньие, Чем в печени и плаценте. При этом в плаценте, крови и печени 3-месячных плодов витамина С несколько больше, чем у коров. С развитием беременности содержание ас-корбинопой кислоты в печени матерей не изменяется, а в крови к 9 ыег.яцам стельности уменьшается. В печени 6-месячных плодов
количество витамина С выравнивается с показателем неберамениих коров, у которых он составляет 24,67 £ 1,97 мг$, а в кроен плодов остается еще больше, чей в организме настольных животных.
В плаценте в течение беременности концентрация аскорбиновой кислоты находится в пределах ее величины в пичени. При зтом в когелидонах 3-мэгячнцх плодов концентрация витамина 0 несколько больше, чем в каруннулах, но вследствие уменьшения количества аскорбиновой кислоты в котелидонах еа уровень в них с 6 месяцев беременности выравнивается с величиной витамина в карунку-лах.
Следовательно, к концу оыбрионального периода только кровь Плодов По количеству аскорбиновой кислоты отличается от кроьи коров, а показатели витамина в их печет равные.
Динамика моносахаридов в системе мать-плод коровы во время беременности и у телок симментальской породы в связи с возрастом
Глюкоза - один из главных метаболитов углеводного обмена клеток. Однако й подавляющем большинстве исследований ее опре-деягот в крови. Ни яэ наряду с кровьи исследовали еа количество в других тквнях у стельных коров и их плодов-
Показано, что в печени и крови матерей к 3 месяцам беременности содеряшше глюкозы увеличивается, а к концу плодаого периода в .печени уменьшается до величины неберемеиных коров, у ко-торцх она ратей 10,IQ - 1,67 икМ/г, а в крови и мшцах еще ни-ао,чеы У нагельных рвотных.
В кроьи 3-месячных плодов количество сахара равно, а в его мшц4х и печени содержится больше, чем у небеременных коров. К & ыеспцам развития плодов концентрация гяюкоян в их крови увеличивается до 7,63 t 0,05 uxti/m против 4,61 - 0,23 мкМ/ил у небеременнш коров,- $ и печени и мшцах плодов уменьшается до показателя нест'ельных животных.
Наибольшее количество глюкозы в котелидонах наблюдается в 3 месяца беременности, а в карункулах возрастает к 6-цу месяцу стельности, но к концу этого состояния организма конценг-рация сахара 6 обоих частях плаценты уменьшаете)« и выравнива-ётся в этих временных морфологических образованиях.
Таким образом* во времй беременности проявляются заметные
изменения содержания глюкозы в печени и плаценте. Уменьшение количества моносахарида в печени матерей к 6 месяцам беременности согласуется с увеличением его в плаценте с последующим переходом в кровь плодов, где к 9 месяцам стельности концентрация глюкозы возрастает.
Наряду с глюкозой важное значение в метаболизме клеток имеет фруктоза, которую также определяли помимо крови и в других тканях.
Установлено, что в крови матерей в течение беременности содержание фруктозы незначительно снижается, а в печени.к 4 месяцам. стельности концентрация ее возрастает, но к 9 месяцам уменьшается до 2,80 £ 0,44 мкМ/г по сравнению с небеременными коровами (4,49 0,37 мкМ/г).
В кропи 3-месячных плодов фруктозы больше, чем у'матерей, а с их развитием количество ее уменьшается, но после рождения у 2-З-мйсячных телочек оно выравнивается с величиной коров-матерей, В почени плодов к 7-му месяцу развития концентрация фруктозы по сравнению с ее ярличиной у небеременных коров увеличивается, а к 9 месяцу стельности снижается до показателя последних.
В плаценте матерой и плодов фруктозы больше, чем в их.печени, а к 9-му месяцу беременности ее концентрация в плаценте умоношаетсл почти в 3 раза. На 5-м месяце стельности н детской плаценте фруктозы больше, чем в материнской, но в Другие мебя- -цы беременности (с 3-го по "3-й) количество фруктозы в котелидо-нах обнаруживалось в пределах верхней границы ее показателя в карункулах.
Згиэико-хшические свойства и биохимические показатели . мочи и околопйодньк жидкостей коровы
Установили, что в период с 4-го по 8-й месяц беременности изменяются свойства и состав мочи и плодных вод. Так, в моче стельных коров увеличивается содержание остаточного азота, в том числе, существенно за счет мочевины, повивается вязкость, но уменьшается количество хлора. Вместе с тем остаятся постоянными показатели плотности, поверхностного натяжения и концентрация креатина. Ее реакция становится более гндроксидной и рН саствмяет 7,95 * 0,09, а у небеременных коров 7,?0 - 0,06.
s
АЛШ - sto моча плода, однако она отличается от мочи взрослых иивогных (стельных и небеременньк коров). В AM обнаружен креатин. Она слабокислой реакции (рН 6,41 i 0,09), ослше вязкая, содержит больше креатинина, чем моча, но имеет по сравнению с последней меньшие показатели остаточного азота, мочевины, поверхностного натяжения, плотности и хлора.
В АШ во время развития плода, которое, как установлено, происходит при постоянном значении рН, равном 6,Ь5 - 0,25, незначительно накапливается остаточный азот, мочевина, креатин и креатииин. То жа седое, но только на более высоком уровне, особенно по остаточному азоту, наблюдается я в АЛЖ во время бсро-мзнности.'Исключение составляет крэатин, концентрация которого а ДЛЙ после пика в б месяцев стельности к 8 месяцам стельности уменьшается до показателей 4-го месяца беременности. В АДМ к концу плодного периода увеличивается плотность и поверхностное на^лаенио, а в AMI заметно возрастает вязкость. Содержание хлора в Afffi и Ш остается постоянным, но в АШ его, в 2 раза больше, чем в1 АЛ а.
. Сравнительной биохшическио исследования активности гепатосг.ецифическнх и других ферментов Н их метаболитов в различные периоды жизни жиьотных
■ Показа^ что в цельной крови небеременных коров н овец активность ГМ одинаковая (1,24 - 0,14 ЕД/мл и 1,2В ± 0,05 ЩД/ мл соответственно), а остальные величины (активность СоДГ, со-даркание общего белка, УроканинороЙ кислоты и фруктозы) существенна различаются.
• В крови коров и женщин на 9-м месяце беременности нашли одинаковое количество общего белка (223,00 $ 4,44 мг/мл и 239,47 ~ 14,28 мгУмл соответственно)а в плаценте и крови их плодов количество водорастворимого белка (60,37 £ 5^3 ыг/г и 69,08 ¿ 5,91.мг/г соответственно) и урокашновой кислоты (0,51 £ 0,05 ыкМ/мл и 0,77 1 0,09 мкМ/мл соответственно), В тожё время показатели активности СоДГ, Г'АЛ и уроканшшзы в крбвя и плаценте, а также содержание белка в крови и фруктозы в-'плаценте разные.
.. Что касается печени плодов коровы и эмбрионов кур, то в •
ней количество уроканиновой кислоты было одинаковое и составляло 6,50 ¿ 0,73 мкМ/г и 5,79 - 0,85 мкМ/г соответственно, а также фруктозы (2,51 - 0,24 мкМ/г и 2,85 * 0,18 мкМ/г соответственно), но вместе с тем были различия по активности СоДГ, ГАЛ, уро-конинапы, наталазы, амилазы и содержанию водорастворимого белка.
В цельной крови телок разных пород в связи с возрастом установлены равные величины активности некоторых ферментов и содержания метаболитов. Так, в 2-3-месячном возрасте у симменталов содержится меньше общего белка, чем у черно-пестрых, а остальные показатели (активность СоДГ, ГАЛ, уроканиназы, количество уроканиновой кислоты и фруктозы) одинаковые. Б »о же время у симменталов и "их помесей равные величины фруктозы и активность уроканиназы, а остальные данные различные, У 4-5-Месячных симментальских и черно-пестрых телок разная активность СоДГ и ГАЛ, а у симментальских и помесных - содержешие белка и фруктозы, остальные показатели одинаковые. У 18-месячных черно-пестрых и симментальских телок содержится поровну фруктозы, но величины других веществ имеют отличия. Что касается первотелок, то у симменталов по сравнению с. черно-пестрыми несколько больше белка, а остальные показатели между породами не отличались..
Исследование чувствительности печени эмбриона к действию некоторых физико-химических факторов
Эксперименты выполнены на трех группах куриных эмбрионов. Сравнение данных по контрольной группе эмбрионов кур с тало-гичньми показателями плодов коров позволило найти сходные элементы в биохимии их печени, что было отправной точкой в исследовании реакции органа на физико-химические воздействия. Опыты показали, что в печени -эмбрионов кур 2-Й группы, зародьши которых подвергались обработке хлорной известью, наблюдается некоторое снижение содержания фруктозы, уменьшение активности ГАЛ и каталазы, но незначительное увеличение количества уроканиновой кислоты. Вместе с тем в каталитическом действии СоДГ, уро-каниназы, амилазы и содержании водорастворимого белна различий не установлено.
Глубинная обработка эмбрионов 3-й группы аэрозолем с повышении* содержанием кислорода ускоряла в их печени гидролиз
полисахаридов, активировала окисление сорбита и незначительно увегощаваиа ¿азлсаениз перекиси водорода. Действие ГАЗ! возвращалось а исхрдноа положение и немного повышалось количество уроканинозой киалоты, а концентрация фруктозы возрастала до ypQEiis. контрольной групп« и несколько активировалась уроканина-за. В.печени такйа увеличивалось содержание водорастворимого белка.
Наиболее чувствительными к действия аэроаохя оказались фор/.гшты(СоДГ и'амилаза)и, судя по изменению количества белка, актийировалас^'биоксинтез'ирудцая система гепатоцитоп.
Вызлйасдшеть эмбрионов в 3-Й группе повысилась на 3-5 % по сравнению 6 эмбрионами 1-й и 2-й группы.
ВЫВОДЫ
1. Установлены индивидуальные и общие различия ак: юности ферментов, содержания веществ» физико-химических показателей
у 1с$гпного рогатого скота в связи с возрастом, породой и фиэяо-логическш состоянием организма. Наибольшие изменения отмечаются, во премп беременности у матери и плода. Наблюдаются они у етаотних » после рождения.
2. Впврмю обнарушено и доказано наличие у крупного рогатого скота гепатоспец$ф«вских ферментов - СоДГ, ГАЯ и. урока-;г,".!ази. Остановлено, что наибольшая активность СоДГ проявляется npt рН- 8,8, а ВД Увеличение активности СоДГ я Ш . п'пепени.матери происходит на фоне их постоянства в ее крови, 'проявление'активности енаимов s плаценте свидетельствует о со-прягедаостн ее "функций в печенью, ' СоДГ плаценты участвуем в механизме переноса моносахаридйв(фруктозы к сорбита) от матери к'Шгаду, Действие ГАИ й урок&шказы в йистеме мать-плод направлено на поддержание определенной концентрации уроканиновой кислоты,- большее содержания которой, у плоДа по сравнений с матерые на фоне постоянного, количества этого вещества в ее крови свидетельствует о том, что этот метаболит играет.определенную (возможно через уроканилхолин) роль в эмбриогенезе. Динамика гйстиднна в плаценте гедеот прякув ейяэь с изменениями уроканиновой кислоты. Биохимическая функция печени плода, связанная с работой СоДГ, ГАЛ и уроканиназы к моменту его рондо-Ния уже сформирована.
3. Реакция печени эмбриона на действие аэрозоля с повышенным содержанием кислорода проявляется увеличением активности СоДГ, амилазы, количества водорастворимого белка и уроканиновой кислоты. Другие показатели (активность ГАД, уроканиназы, катала-эы и содержание фруктозы) оставались без изменений.
4. Организм плода коровы может синтезировать такие биоактивные вещества, как этаноламин, витамин С, карнитин, холин, аце-тилхолин и ансприн. Обнаружение этих веществ {кроме ацетилхоли-на и ансерина) в заметном количестве в плаценте указывает на возможность их поступления через нее от матери к плоду и образования в ней.
5. Плацента синтезирует аминокислоты, что подтверждается . высокой активностью в ной ACT.
6. Плацента, особенно плодовая, способна концентрировать значительное количество веществ в организме плода, что согласуется с большим содержанием у него по сравнению с маторью гисти-дина в мышцах и печени, уроканиновой кислоты и глюкозы в крови, витамина С и фруктозы в. крови и печени.
7. Основное место синтеза холина печень, но поглощается
он преимущественно мищами, отчего его количество в них у 8-месячного плода наравне со взрослыми, а в печени меньше последних. Уменьшение холина в печени матери на фоне относительно стабильного его содержания в ее крови и увеличение у плода свидетельствует о перемещении аминоспирта через плаценту к шюду в связи с потребностью в нем последнего и недостаточностью холин-синтезирующей функция его"печени.
8. Выраженные изменения в количестве этаноламина наблюдаются в крови и печени матери и плода, а несколько меньше они проявляются в его мышцах. Плод по содержания аминоспирта в крови на 6-м, а в печени и мышцах на 8-м месяце развития выравнивает ся с небеременной коровой.
9. Распределение ацетилхояина в системе мать-плод показывает, что он образуется отдельно в организме матери и плода, о чем свидетельствует очень малое содержание его в плаценте по сравнению со значительным количеством в их крови, печени, мда-цах и мозге. Это указывает на то, что он в плаценте не синтезируется и, видимо, не проходит через нее. Меньшее содержание ацегилхолина и более высокая активность АХЭ у плода по сравне-
ншо с матерью способствуют сохранению режима его максимального покоя. Изменение активности А.ХЭ в мозге и мышцах есть яслгнио отработки реакций проведения и реализации импульсов. Ацетилхо- . линэстеразная ф/нкция крори, печени, мышц и мозга плода к его рсядению уже сфордирована.
10. До 6-го месяца беременности отмечается накопление кар-нитина у матери, а к концу со происходит снижение ого концентрации в ее почеНн и плаценте до первоначальных величин. С развитием плода содержание витамина Вт в крови, мшцах и печени увеличивается. В плаценте увеличение карнитина происходит только до 6-го месяца стельности, а'затем его количество уменьшается. V новорожденных телят показатель витамина Вт только в кропи одинаков, с таковда. взрослых особей, а в их печени и мшцах он ниже, чем у них. Существенное увеличение липидсвязанного к&рни-тш!а особенно у плода, свидетельствует о его большой метаболической. активности по сравнению со свободной формой витамина.
11. В крови, печени и плаценте плода содержится больше аскорбиновой кислоты, чем у матери. К 9 месяц/ стельности ее количество у него уменьшается, достигая в печени величины небе-ремешшх коров, а в крови оставаясь еще ниже, чем у них. 11а фоне постоянного содержания витамина С в печени мвтери его количество в ее крови и плаценте к концу беременности снижается.
12. У стельной короЕЫ липолитичэская активность слизистой оболочки тонкого кишечника с 4-го по 8-й месяц беременности колеблется в пределах показателя небеременной коровы. Активность липазы у плода с его развитием стремительно увеличивается, но
в 8-месячном возрасте она у него еще на 35 % Ниже, чем у коровы.
■ 13. В крови- матери выявлено уменьшение активности катала-зы, чего не отмечается в ее печени, где активность фермента значительно виге, но колеблется в пределах показателя небеременных коров. Активность каталазы в крови плоде» с 4-го по 8-й месяц беременности увеличивается, но остается еще несколько ниже ее величины у коров.
14. В мышцах, печени, поджелудочной железе л двенадцатиперстной кишке плода обнаружена амилаза. Ее активность у чего значительно шике, чем у матери. Особенно это касается мьшц, где дате на 9-м месяце его развития очень слабая активность
фермента. Такая же активность амилазы выявлена в гшацентомах, при этом к концу беременности в карункулах она уменьшается в 2 раза. С развитием плода активность амилазы в его подаелудоч-иой железе и.в двенадцатиперстной кишке увеличивается и на 9-м месяце стельности по интенсивности действия приближается соответственно на 68 % и 62 %- ко взрослым животным. К моменту рождения у плода сформирована амилолктическая функция печени.
15. Количество глюкозы в.крови и Иечени стельных коров к 3-му месяцу беременности попытается, но.к концу ее уменьшается только в крови и мышцах, а в печени находится в пределах нижней границы »^беременных коров. Содержание фруктозы в.крови и печени матери с развитием беременности, уменьшается. Для крови плода характерен высокий показатель фруктозы й более низкое содержание глюкозы, а для печени наоборот.' К-месяцу развития плода отмечается увеличение глюкозы В крови, и снижение в мыяцах и печени до показателей нестелышх коров, Концентрация фруктозы
с развитием плода уменьшается и достигает в печени к родам величины небёремениых коров, а ь крови находится выше, чем у последних. В кро)аи. Телочек после роу пения количество фруктозы уменьшается, а глюкозы достигает показателя-;Неберемеиных коров, в крови которых находится весьма мало фруктозы по сравнения с глюкозой. Таким образом, фруктоза больше используется для развития плода, а глюкоза в период после рождения.
16. С развитие;.! беременности у матери уменьшается содержание общего белка в цельной крови, но не. изменяется количество водорастворимого белка в печен«, В крови и печени плода количество белка увеличивается, но у 9-месячного плода оно еще меньше,.чем у нэбеременной коровы. У первотёлок его величина в крови выравнивается с Показателем нестельных коров.
17. Содержание &нсерина в течение беременности коров постоянное. Самое большое его количество обнаружено в мышцах, значительно меньше - в печени, крови и плаценте.- От матери к плоду он Не проходит, о чем свидетельствует нахождение его в карункулах и отсутствие До 6-го Месяца стельности в котелидо-нах. Дипепгвд впервые появляется в печеш 5-месячного плода, иэ чего следует, что он синтезируется в•этом органе,' Интенсивность образования рчеерина в печени 8-месячного плода выравнивается с показателей коровы. Кровь транспортирует это веществ
во, которое из нее поглощается мышцами плода, где содержание его заметно повышается, но у 8-дневного теленка его еще в 1,9 раза меньше, чем у взрослых животных. Мышцы плода используют ансе-рин с 6-го месяца беременности, а биохимической зрелости в связи с ним достигают после перила новорожденности.
18. Физико-химические свойства и биохимические показатели плодных вод и мочи коров имеют элементы сходства и различия. Так, при слабокислой, но равной по величине реакции АЛЖ отличается от АММ большими величинами плотности, поверхностного натя-яения, остаточного азота, мочевины, креатина и креатшшна, но меньшими значениями вязкости и хлора. При равензтве плотности, поверхностного натяжения й креатинина моча стельных по сравнена с мочей несовременных коров более гидроксидная, содержит больше остаточного азота, мочевины, но меньше хлорн. АЛЖ отличается от моч|1 небеременных ко pop наличием креатина, меньшей величиной рН, плотности, поверхностного натяжения, остаточного азота, мочевины и хлора, но большей величиной вязкости и креа- -тинина. К концу беременности в плодных водах увеличивается содержание азотистых веществ, разно возрастает вязкость АМН, в меньшей степени - поверхностное натдаение МЖ н незначительно
ее плотность. Alffi используется плодом для отработки пищеварительной и двигательной функции, а АЛЖ - для отработки функции мочэвьделительной системы и частичного хранения конечных продуктов метаболизма.
19. С 4-го по б-Й месяц беременности у коров происходят наибольшие колебания многих показателей, особенно в тканях и органах, что свидетельствует о наличии в обмене веществ в системе мап плод ''критического периода", обусловленного переходом основных метаболических функций от матнри и плаценты к плоду. Нормальное точение беременности и получение .-кизниспособно-го приплода возможно при обеспечении необходимого уровня и соотношений веществ в организме матери и плода.
20. Различий по активности СоДГ, ГАД, количеству общего белка, уроканннозой кислоты и фруктозы .в цельной крови симментальских, черно-пссгрых и поыасных телок проявляются до 18-месячного возраста, а по уроканиназе только у 18-месячных телок. У первотелок по г<5пато;=нэимам и урокашноьой кислоте они стираются, а остается лишь незначительная разница в содержании
белка у черно-пестрых и поместных и фруктозы - у черно-пестрых и симмснталов.
Установлен равный показатель ГАЛ в крови небеременных коров и oten, белка в крови матерей и плацентах плодов и урокани-новой кислоты в крови плодов коровы й человека, фруктозы и уро-каниновпй кислоты в печени эмбрйонов кур и плодов коров. В то же гремя в крови небеременных коров й овец есть разница по ак-тирностн СоДГ, содержании белка, уроканиновой кислоты и фруктозы, в крови матерей и плацентах плодов коровы и человека на Э-м месяце беременности - по активности СоДГ, ГАЛ, уроканинаэы, количеству уроконинобой кислоты и фруктозы, в крови 9-месячных плодов коровы и человека по активности СсДГ, ГАЛ, уроканинаэы, концентрации белка и фруктозы, в печени 17-дневиьос эмбрионов кур и О-месячных плодов коровы - по активности СоДГ, ГАЛ, урокониназы, амилазы, каталазы и содержанию белка.
Указанные сходства й различия необходимы для эмбриональной, эволюционной и клинической биохимии, а по.животньм к тому же - в их биохимической характеристике и зоотехнической оценке.
■ ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРВДИОЖЕШ
1. "Нормативы биохимических показателей у коровы и ее плода в течение беременности", одобренные секцией "Биология, имцунслогия и биотехнология в ветеринарии" отделения ветеринарии ВЛСХШ (протокол К' 3 о.т 24 ноября 1967 г.), рекомендуются для контроля за физиологическим состоянием животных с 3-го по 9-Й месяц стельности.
2. Определение активности гепатоспецифйческих энзимов (СоДГ, ГАЛ, уроканиназа) предлагается для-установления у крупного рогатого скота, функционального состояния паренхимы печени и диагностики ее поражения при изучении степени действия различных физико-химических и биологических факторов на этот орган.
3. Данные по рН,.плотности, повертностноцу натяжению, вязкости, остаточное азоту, мочевине, креатину, креатинину и хлору амниотической жидкости могут быть использованы в составлении новых физиологических сред для работы с эмбрионами.
4. С целью быстрого получения более точных результатов
предлагается метод одновременного определения активности СоДГ и количества фруктозы а одной пробе цельной крови {Лабор,дело, 1963, 13. - С.67).
б. Результаты исследований, изложенные в диссертации, рекомендуются для использования в учебном процесса по инбриолйгии, нормальной и патологической физиологии, биохимии, клинической диагностике, внутренним незаразны! болезням и акушерству.
. список работ, опшиковаших по теме диссертации
1. Трусов О.И., Папин Н.Е. Глугамико-аспарагиновая траис-аминаза в амниотической и аллантоисной жидкостях, детской и материнской плаценте крупного рогатого скота /Записки Воронежского СХИ. - 1970. - Т.38. - С.297-300.
2. Папин Н.Е. Мочавина аллантоисной и амниотической жид-касте? крупного рогатого скота /Записки Воронежского СХИ. -1970. - Т.38. - С.301-303.
3. Пелевин А,Д., Трусов С.И., Папин Н.Е. Биохимическое изучение околоплодных жидкостей и плаценты коровы /Записки Воронежского СХИ. - 1972. - Т.47. - С.121-124.
4. Папин Н.Е., Пелевин А.Д. Этаноламин в тканях стельной коровы, ее плода и новорожденного теленка /Воронежский СХИ. -Воронеж, 1974. - 6 с. - Деп. ВИНИТИ. П 115-74. - Опубл. в Р1 "Б^ол.химия''. - 1974, 10, 3021190.
б. Папин Н.Е., Пелевин А.Д. К вмбриохимии кариитина у крупного рогатого скота /Воронежский СХИ. - Воронеж, 1974. -6 е. - Деп, ВИНИТИ, № 114-74. - Опубл. в РЖ "Животноводство и ветеринария". - 1974.5.58,383.
6. Папин Н.Е, Кишечная липаза матери.и плода коровы /Воронежский СХИ. - Бороне«, 1975. - 6 с. - Деп. ВИНИТИ, 15 129875. - Опубл. в РЕ "Животноводство и. ветеринария". - 1975. -8.58.208.
7. Папий Н.Е. О происхождении сорбитолдегилрогеназн сыворотки крови коров и ее гепатоспецифичности /Воронежский СХИ. -Воронеж, 1978. - 5 с. - Деп. ВИНИТИ, )? 860-78. - Опубл. в Библиограф, указ. ВИНИТИ. - 1978. - » 8. - б/о 46.
8. Папин Н.Е. Значение определения и содержание фруктозы в крови, сыпороткз и печени коров /Воронежский СХИ. - Воронеж, 1978. - б с. - Доп. ВИНИТИ, N 061-78. - Опубл. в Библио1раф. указ. ВИНИТИ. - 1978. - ft 8. - б/о 42.
9. Папин Н.Е. Об определении.белка в сыворотке крови коров рефрактометром и по методу Лоури /Воронежский СХИ. - Воронеж, 1978. - 5 с. - Деп. ВИНИТИ, » 862-78. - Опубл. в Библиограф, указ. ВИНИТИ. - 1978. № В. ~ б/о 47.
10. Папин Н.Е, Использование цельной крови вместо сыворотки при определении активности сорбитолдегидрогеназы //Набор.дело. - 1978. - № 4. - С.224-226.
11. Папкн Н.Е. Активность гистидин-амшак-лйазы в печени стельных и небеременных коров /Воронежский СХИ. - Воронеж, 1978. - 7 с. - Деп. ВИНИТИ, » 2091-78. - Опубл. в Библиограф, указ. ВИНИТИ. - 197В. - Л> II. - б/о 7.
. 12. Папин Н.Е. Уроканиназа в крови, ее сыворотке и печени коров //Ветеринария. - 1979. -»8. - С.71-72.
13. Папин Н.Е. К энзимологии печени и плаценты коровы и ее плода //Научн.тр. /Воронежский СХИ. - 1979. - Т.106. - С.147-151.
14. Папин Н.Е. Общий белок в цельной крови и водорастворимый белок в печени коров //Науч.тр. /Воронежский СХИ. - 1979,-T.I06. - С.152-154.
15. Папин Н,Е., Пелевин А.Д. Гпстидин в тканях коровы и ее плода /Воронежский СУМ. - Воронеж, i960. - 7 с. - Деп. ВИНИТИ, * 2351-80. - Оцубл. в Библиограф.указ. ВИНИТИ. - 1980. - (? 10.-б/о 63.
16. Пшшн Н.Е. Распределение гепатоспецифических ферментов в крови овец /Воронежский СХИ. - Воронеж, 1980. - 7 с. - Деп. ВИНИТИ, J? 2352-80. - Опубл. в Библиограф.указ. ВИНИТИ. - 1980.» 10. - б/о 72.
17. Папин Н.Е. Активность сорбитолдегидрогеназы и содержание фруктозы в крови //Ветеринария. - 1980. - » 7. - С.64-65.
18. Папин Н.Е. Поведение энзимов в эмбриональной печени // Тезисы Всесоюзн.биохим.симпозиума, - Витебск, 1982. - С.112—113.
19. Папин U.E. Определенна активности сорбитолдегидрогена-зы и содержания фруктозы в одной пробе крови //Набор.дело. -1983. - » 3. - С. 67.
20. Папин Н.Е, Активность ферментов в крови крупного рогатого скота симментальской я черно-пестрой пород в зависимости от возраста //Науч.тр. /ВороненскиИ СХИ. - 1983. - С.45-50,
21. Шнейберг Я.И., Папин Н.Е. Влияние глубинной обработки инкубируемнх яиц аэрозолем с повшеннш содержанием кислорода на ферменты'печени эмбрионов кур//С.-х.биология. - 1963. -
И 2. - СД27-129.
22. Папин Н.Е. Распределение сорбитолдегидрогеназы у норови /Воронежский СХИ. - Bopoiiпи, I9B5. - 5 с. - Деп. ВШИТЭИСХ, ¡} I54-E5. - Опубл. в РЙ "Животноводство". -'1985. - !.« 7. - С.5.
23. Пашш U.E. Гепатоспецифнчэскце энзимы у норов н их плодов //Тазиеи Всесоюзного биохин, cmmoaifynii Биохимия а Продовольственная nporpsfffiia. - Ташкент, 19Ё5. - С.III—112.
24. Папин Н,Е. Пистиднидазаминаэа э нрови крупного рогатого скота в селзи с породой и возрастом //Нэуч.тр. /Воронежский СХИ. - 1Ш. - С.92-94.
25. Папцн Н.Е. ДвЯствие et- и ^'-ймцлаз у коров и их плодов в течение'берЕЬ'еннбсти /Воронечсп?5Й СХИ. - Воронеж, I9Ö7, - 7 с. - Доп.' ВНИИКШагропрои.' - Й 422 I3G-07.
.".• 26. Папан U.E. Гистндинадезшжназа у коров и их плодов // Тезисы Всесоюзной научной конференции. - Воронеж, 1906. -С.44-45.
27. Папин Н.Е. Поведение сорбитолдегидрогеназн в онтогенезе крупного рогатого скота //Сб.научн.тр* /Воронежский СХИ. -198?. - G.90-93.
ЛЕ 01Н0.9 Попгасапо.в печать 2.09.88г. Формат бумаги 60\8-).0бгс-м 2 п.л. Тираж 10Q э*э. Змаз 3337ф-88г.
Воронен тл.'Транспорт' Улрйвпинвя и.чдзгвл' та полиграфии я книжной торговли.
- Папин, Николай Ефимович
- доктора биологических наук
- Москва, 1988
- ВАК 03.00.04
- Физиологические основы профилактики гипоксии плода и асфиксии новорожденных телят
- Влияние гипокинезии в период беременности на гормональные взаимодействия в системе мать-плод и эндокринную функцию плода в раннем постанатальном онтогенезе
- Влияние эндогенного карбоксигемоглобина на метаболизм липидов в системе мать-плод
- Особенности адипокинового профиля и метаболизма коллагена при различных вариантах течения беременности
- ВИТАМИН А В РЕГУЛЯЦИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ У КОРОВ