Оксид азота в механизмах регуляции насосной функции сердца крыс

Насырова, Аида Гайдаровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Оксид азота в механизмах регуляции насосной функции сердца крыс
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Оксид азота в механизмах регуляции насосной функции сердца крыс"

На правах рукописи

Насыровя Аида Гайдаровна

ОКСИД АЗОТА В МЕХАНИЗМАХ РЕГУЛЯЦИИ НАСОСНОЙ ФУНКЦИИ СЕРДЦА КРЫС

03.00.13- физиология

Автореферат диссертации ял соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Казань- 2004

Работа выполнена в ГОУ ВПО Казанском государственном медицинском университете

Научный руководитель: доктор биологических наук,

доцент Нигматуллина Разина Рамазановна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Абзалов Ринат Абзалович

доктор медицинских наук, профессор Аухадеев Эрик Ильясович

Ведущая организация - Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, Москва

Защита состоится года в на заседании

диссертационного совета Д 208.034.01 ^Казанского государственного медицинского университета (420012, Казань, ул. Бутлерова, 49).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Казанского государственного медицинского университета (420012, Казань, ул. Бутлерова, 49, корпус Б).

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

А.П.Киясов

S ,

Общая характеристика работы

Актуальность исследования. Оксид азота (N0) участвует в функционировании разнообразных систем организма и представляет исключительный интерес в связи с влиянием на ионные каналы (Уразаев, Зефиров, 1999), секрецию медиатора, обмен ионов кальция (Зефиров, 1999) Наиболее изученным является действие оксида азота на сосуды Показано, что нормальный уровень артериального давления поддерживается постоянной фоновой активностью системы L-аргинин - NO-сингаза - оксид азота (Calver et al, 1993; Moneada, Higgs, 1993, Star, 1993). При сердечно-сосудистой патологии используются препараты, эффект которых основан на высвобождении NO и расширении коронарных сосудов Однако механизм действия доноров оксида азота на сердце, особенно при сочетанном применении с адреноблокаторами, до конца не исследован.

Известно, что источниками оксида азота могут быть коронарный эндотелий, эндокард и кардиомиоциты (Kojda, Kottenberg, 1999, Martin et al, 1997) Открытие NO-синтаз в разных структурах сердца (Han et al ,1996; Klimaschevski et al, 1992) привлекло внимание к исследованию роли оксида азота в регуляции насосной функции сердца, основными показателями которой являются ударный объем крови, частота сердечных сокращений, минутный объем кровообращения, артериальное давление, мощность сердечных сокращений Выявлены эффекты N0 на изолированные кардиомиоциты (Massion, 2003), показано увеличение силы сокращения кардиомиоцитов при небольших концентрациях N0 и угнетение при ее повышении (Mohan et al., 1995; Kojda et al., 1999) Однако в условиях in vivo изучение влияния N0 на сердце не проводилось

Модуляции оксидом азота адренергических и холинергических влияний на сердце посвящены исследования Massion, 2003; Lewis et al, 1994; Welch et al, 1994, Dawson, 1994, Schuman et al., 1994 В связи с этим можно ожидать эффектов экзогенных доноров N0 и блокады NO-синтаз на насосную функцию сердца, связанных с изменением ее регуляции через адренорецепторы (АР) и холинорецепгоры (ХР) Однако рецепторные механизмы, опосредующие эффекты оксида азота на сердце, не изучены.

Исследованию механизмов адренергической и холинергической регуляции сердца посвящены работы Абзалова, 1986; Нигматуллиной, 1991; Гильмутдиновой, 1991, Свяговой, 1997; Ситдикова, 1998; Зефирова, 1999, Ferrari, 1993. Установлено, что регуляция хронотроп-ной и инотропной функций сердца крыс в основном реализуется через (3-, ai-адренорецепторы и м-холинорецепторы В кардиомиоцигах желудочков крыс преобладают pi-AP (Kuzne-tsov et al, 1995; Juberg et al., 1985; Liang et al, 1985, Lemoine et al., 1991), которые модулируют сократимость миокарда исключительно через цАМФ-зависимый механизм С другой стороны в регуляции сердца важны ai-AP (Нигматуллина, 1999), т к реализация их эффектов осуществляется другими внутриклеточными посредниками

Отсутствие комплексного изучения механизмов регуляции оксидом азота частоты сердечных сокращений, ударного объема крови, артериального давления, фазовой структуры сердечного цикла в условиях in vivo делает данную работу актуальной

Цель исследования - изучение механизмов регуляции насосной функции сердца оксидом азота.

Задачи исследования:

1. Определить влияние доноров оксида азота - нитроглицерина и нитропруссида натрия на насосную функцию сердца крыс.

2 Исследовать влияние субстрата синтеза N0 L-аргинина и правовращающего изомера D-аргинина на насосную функцию сердца крыс.

3 Изучить влияние блокады NO-синтаз хроническим введением L-NAME на насосную функцию сердца крыс.

4. Изучить влияние различных доз нитроглицерина и нитропруссида натрия на показатели насосной функции сердца крыс в условиях блокады Р-адренорецепторов и м-холинорецепторов.

5 Оценить влияние последовательной

бяеоаяОДЮдаЛВДДЯфХР на выражен-БИБЛИОТЕКА 1 CDCTcriCTrV/,, I

О»

к — ---- £,. ш .,» { I

T&pHl i

ность эффектов нитроглицерина на насосную функцию сердца крыс

Научная новизна

Новыми являются данные о том, что механизмы отрицательного хронотропного действия доноров N0 нитроглицерина и нитропруссида натрия различны Отрицательный хронотропный эффект нитроглицерина не проявляется после введения обзидана, следовательно, он связан с угнетением Р-адренергических влияний Влияние нитропруссида натрия на частоту сердечных сокращений не зависит от блокады p-адренорецепторов обзиданом, снижается при блокаде м-холинорецепторов атропином, следовательно связано с усилением холинергических влияний.

Приоритетными являются данные о том, что субстрат синтеза оксида азота L-аргинин оказывает влияние на показатели насосной функции сердца крыс L-аргинин обладает двухфазным действием на инотропную и хронотропную функции сердца. Вместе с тем, неактивный изомер L-аргинина D-аргинин вызывает сходные изменения показателей насосной функции сердца крыс, но влияние L-аргинина более выражено Оба изомера аргинина обладают гипотензивным действием.

Впервые установлено, что механизмы отрицательного инотропного и хронотропного действия нитроглицерина на сердце реализуются как через Pi-, Р2-, так и ai-адренорецепторы Эти данные позволяют сделать предположение, что оксид азота реализует влияние на функции сердца через модулирование различных внутриклеточных сигнальных систем, те цГМФ, цАМФ, инозитол-три-фосфат и диацилглицерол

Научно-практическая значимость

Полученные результаты позволяют расширить представление о роли оксида азота в регуляции сердечно-сосудистой системы, уточнить механизмы влияния N0 на хронотропную, инотропную функции сердца, фазовую структуру сердечного цикла, а также раскрыть роль адренорецепторов и холинорецепторов в опосредовании эффектов оксида азота на сердце Полученные результаты свидетельствуют о том, что доноры N0, блокатор синтеза NO L-NAME, применяемые совместно с адреноблокаторами оказывают выраженное влияние на хронотропную и инотропную функции сердца, а не только на артериальное давление крови и коронарное кровообращение, что необходимо учитывать в кардиологической практике

Полученные результаты представляют интерес для специалистов по физиологии, фармакологии и кардиологии.

Основные положения, выносимые на защиту

1 Оксид азота обладает выраженным влиянием на сердце, вызывая уменьшение частоты сердечных сокращений, ударного объема крови, увеличение длительности интервала PQ и периода изгнания крови.

2. Отрицательное инотропное и хронотропное действие оксида азота на сердце осуществляется через модуляцию адренергических и холинергических влияний, реализуемых Pi-AP, Рг-АР, ai-АР и м-ХР.

3. Субстрат синтеза N0 L-аргинин и стереоизомер D-аргинин вызывают сходные изменения показателей насосной функции сердца крыс, эффекты L-аргинина более выражены по сравнению с D-аргинином. Предполагается, что аргинин обладает собственным, не связанным с метаболизмом оксида азота, действием на функции сердца

Апробация работы. Результаты исследований, выполненных по теме диссертации, доложены на XVIII съезде физиологического общества им И.П Павлова (Казань, 2001), VII Всероссийской школе молодых ученых "Актуальные проблемы нейробиологии" (Казань,

2001), Российском национальном конгрессе кардиологов (Санкт-Петербург, 2002), VI Всероссийском симпозиуме "Растущий организм адаптация к физической и умственной нагрузке" (Казань, 2002), VII Научно-практической конференции молодых ученых (Казань,

2002), международной конференции "Рецепция и внутриклеточная сигнализация" (Пущино,

2003), Всероссийской конференции, посвященной 100-летию профессора ОДКурмаева "Нейрогуморальные механизмы регуляции сердца" (Казань, 2004), на заседании кафедры нормальной физиологиаКазанского государственного медицинского университета (2004)

ivtf

Публикации По материалам диссертации опубликовано 42 научные работы Объем и структура диссертации

Диссертация объемом 178 страниц, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов В работе имеется список литературы, содержащий 408 источников, из них 392 иностранных авторов Диссертация иллюстрирована 38 рисунками и 37 таблицами.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проведены на 135 половозрелых белых беспородных крысах - самцах в возрасте 4-6 месяцев, массой 180-220 г Для наркоза использовали 25% раствор хлоралгидрата, который вводили внугрибрюшинно в дозе 4 г/кг Для введения фармакологических агентов проводили катетеризацию бедренной вены С целью прямой регистрации артериального давления вводили катетер в бедренную артерию Для заполнения и промывания катетеров использовали гепарин отечественного производства (500 Ед/мл)

В качестве фармакологических агентов в первой серии экспериментов использовали доноры NO нитроглицерин (1% водный раствор отечественного производства) в дозах 0,2 мг/кг, 0,4 мг/кг, 0,8 мг/кг; 1 мг/кг и нитропруссид натрия (Sigma, USA) в дозе 1 мг/кг

Во второй серии экспериментов применяли субстрат синтеза оксида азота L-аргинин (L-Arginine hydrochloride, Sigma, USA) в дозах 50 мг/кг, 100 мг/кг и 200 мг/кг и правовращающий стереоизомер D-аргинин (D-Arginine hydrochloride, Sigma, USA) в дозе 200 мг/кг

В третьей серии экспериментов для исследования модулирования эффектов NO на насосную функцию сердца крыс антагонистами ß-адренорецегтгоров (АР) и м-холинорецепто-ров (м-ХР) использовали 0,1% раствор обзидана в дозе 0,8 мг/кг, 0,1% раствор атропина в дозе 1 мг/кг В качестве доноров NO использовали нитроглицерин (НГ) в дозах 0,2 мг/кг, 0,4 мг/кг; 0,8 мг/кг, 1 мг/кг и нитропруссид натрия (hilf) в дозе 1 мг/кг

Эксперименты проводили по следующей схеме- вводили блокатор, на фоне наиболее выраженного изменения ЧСС вводили донор NO и после прохождения его эффекта - следующий блокатор.

В четвертой серии экспериментов исследовали влияние последовательной блокады ßi-АР атенололом, ai-AP празозином и mj-XP галамином на эффекты донора оксида азота нитроглицерина. Атенолол вводился в дозе 2 мг/кг, празозин - 2 мг/кг, галамин - 2 мг/кг (селективные блокаторы рецепторов, Sigma, USA) Снижение синтеза NO у животных вызывали блокатором NO-синтаз L-NAME (L-NG-nitro L-arginine methyl ester, Sigma, USA), который вводили внугрибрюшинно в течение 4 дней по 100 мг/кг Донором NO являлся нитроглицерин в дозе 0,4 мг/кг Исследование проводили на трех группах крыс 1) Контроль + физ раствор (ФР) - животным вводили блокаторы и 0,9% физиологический раствор вместо нитроглицерина; 2) Контроль + НГ - вводили блокаторы и нитроглицерин; 3) L-NAME + НГ -предварительно блокировали NO-сингазы введением L-NAME, а затем вводили блокаторы и нитроглицерин.

Артериальное давление (АД) определяли прямым способом. Артериальный катетер присоединяли к электроманометрическому датчику давления (датчик MLT 0698, ADInstm-ments) Непрерывно регистрировали систолическое (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) синхронно с электрокардиограммой (ЭКГ) и реограммой Регистрация ЭКГ осуществлялась электрокардиографом ЭК1Т- ОЗМ Для определения ударного объема крови применяли метод тетраполярной реографии (Абзалов и др, 1985, Нигматуллина и др, 1988) Запись реограммы проводили реографом Р4-02 с использованием АЦП и компьютерного сопровождения Регистрацию и обработку экспериментальных данных проводили с помощью оригинального программного обеспечения. Для расчета УОК использовали формулу (Kubichek et al, 1966, 1970)- УОК = L2/R2*Ad*tu*p, где УОК - величина ударного объема крови, см3; р - удельное сопротивление крови, Ом*см, L - расстояние между токоизмеряю-щими электродами, см; R - межэлектродный импеданс, Ом, Ad - амплитуда дифференцированной реограммы, Ом*с; tu - период изгнания крови, с.

Рассчитывали временные характеристики дифференцированной реограммы, позволяющие судить о фазовой структуре сердечного цикла' период изгнания крови из желудочков сердца (tu), фазы быстрого (а) и медленного изгнания крови (Ь)

Минутный объем кровообращения (МОК) рассчитывался как произведение УОК и частоты сердечных сокращений (ЧСС) (МОК=УОК*ЧСС) ОПСС=(Рср*1330*бО)/МОК, где ОПСС - общее периферическое сопротивление сосудов, дин*с*см~5; Рср - среднее гемодина-мическое давление, мм рт ст, Уе=УОКЛи, где Ve - объемная скорость изгнания крови, мл/с, W=Ve*Pcp*133*10'<, где W - мощность сердечных сокращений, Вт/л, P3=(W*tu*4CC)/MOK, где Рэ - расход энергии на перемещение 1 литра минутного объема крови, Вт/л

Статистическая обработка результатов экспериментов проводилась на компьютере с использованием программы Microcoft Excel, достоверность различий определялась по t-кри-терию Стьюдекга

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Влияние доноров NO - нитроглицерина и нитропруссида натрия на частоту сердечных сокращений и артериальное давление крови крыс

Установлено, что НГ в дозе 0,2 мг/кг не оказывает влияния на хронотропную функцию сердца, а повышение дозы с 0,4 мг/кг до 0,8 мг/кг приводит к выраженному урежению ЧСС (на 29 и 48 уд/мин соответственно) Максимальное урежение ЧСС на 13,6% (р<0,05) выявлено при введении НГ в дозе 0,8 мг/кг, а при большей дозе препарата эффект снизился до 6,4% (р<0,05) Самые низкие величины ЧСС зарегистрированы после введения НПР в дозе 1 мг/кг, отрицательная хронотропная реакция составляет 27% (р<0,001) Сопоставляя эффекты одинаковых доз нитропруссида натрия и нитроглицерина отмечено, что максимальный отрицательный хронотропный эффект НПР почти в 4 раза больше Из вводимых доз НГ наибольший отрицательный хронотропный эффект вызывает доза 0,8 мг/кг, однако и в этом случае реакция в 2 раза меньше, чем на нитропруссид натрия

Длительность интервала PQ характеризует время предсердно-желудочкового проведения возбуждения Установлено дозозависимое увеличение длительности интервала PQ на нитроглицерин в дозах от 0,2 до 0,8 мг/кг на 16,2% и 20,7% (р<0,05), однако, дальнейшее повышение дозы НГ до 1 мг/кг приводит к существенному снижению его влияния на проведение возбуждения в сердце Более выраженное увеличение длительности йнтервала PQ выявлено после введения НПР - на 24,7% и максимальное - на 29,7% (р<0,05)

Гипотензивное действие доноров NO проявляется уже через 30 секунд после введения как нитроглицерина, так и нитропруссида натрия Снижение САД носит дозозависимый характер при увеличении дозы НГ от 0,2 мг/кг до 1 мг/кг реакция увеличивается с 16,4 до 28,5% (р<0,05) Нитропруссид натрия обладает гораздо более выраженным влиянием на САД, вызывая его снижение на 57% (р<0,01) Выявлено снижение ДАД после введения повышающихся доз НГ, реакция составляет от 15,5% до 24,2% (р<0,05) После введения НПР ДАД снижается на 60% (р<0,05) Следовательно, НГ обладает наибольшим гипотензивным эффектом в дозе 1 мг/кг, а НПР в той же дозе приводит к более выраженному и продолжительному снижению АД Доза НГ 0,4 мг/кг оказалась минимальной действующей дозой с выраженным и быстропреходящим гипотензивным и отрицательным хронотропным эффектом и использовалась в дальнейших опытах.

Таким образом, доноры NO нитроглицерин и нитропруссид натрия вызывают дозозависимый отрицательный хронотропный эффект, увеличивают время предсердно-желудочкового проведения возбуждения, т е оказывают непосредственное влияние не только на атипические кардиомиоциты синусового узла, но и влияют на кардиомиоциты проводящей системы сердца крыс Следует отметить, что под влиянием небольших доз НГ происходит кратковременное снижение АД, а урежение ЧСС и увеличение длительности интервала PQ наступают после восстановления АД до исходного уровня Полученные результаты позволяют сделать предположение о том, что имеются различные и независимые друг от друга механизмы влияния доноров NO на сосуды и сердце

Влияние Ь-аргинина и О-аргинина на насосную функцию сердца крыс Известно, что в организме N0 образуется из аминокислоты Ь-аргинина в результате реакции, которая катализируется ферментом ГТО-синтазой В данной серии экспериментов исследовали показатели насосной функции сердца крыс в течение часа после внутривенного введения субстрата синтеза оксида азота - Ь-аргинина и стереоизомера И-аргинина

Выявлено, что изменение частоты сердечных сокращений носит двухфазный характер Ь-аргинин вызывает дозозависимое снижение ЧСС, которое сменяется повышением Под влиянием Е)-аргинина в дозе 200 мг/кг, также как и на введение Ь-аргинина в той же дозе наблюдается двухфазный хронотропный эффект Установив наличие двухфазного характера реакции ЧСС на аргинин, мы проанализировали максимальные изменения ЧСС при воздействии различных доз Ь- аргинина и И-аргинина (табл. 1)

Таблица 1.

Влияние аргинина на частоту сердечных сокращений (уд/мин) крыс_

Ь-аргинин - 50 Ь-аргинин -100 Ь-аргинин -200 О-аргинин -200

исходные 388,84±9,49 397,50+8,10 385,65±14,89 411,7316,09

снижение 305,99+7,39*** 300,30114,70*** 291,10±16,92*** 343,01115,22***#

исходные 381,45+10,35 388,41±19,11 359,78±16,65 409,35121,09

повышение 443,77114,60** 445,74±7,31* 435,14±16,42* 462,68116,05*

Примечание' В названии столбцов Ь-аргинин - 50, 100 и 200 - дозы Ь-аргинина и Б-аргинина (мг/кг) * - достоверность различий по сравнению с исходными величинами

(* - Р<0,05, ** - Р<0,01, *** - Р<0,001) #- достоверность различий между группами Ь-аргишш -200/ О-аргинин -200 (#- Р<0,05).

Сопоставление эффектов одинаковых доз Ь-аргинина и И-аргинина свидетельствует о том, что урежение ЧСС происходит в обоих случаях Следует отметить, что на введение Ь-аргинина ЧСС снижается на 24%, а Б-аргинина - на 16,6% Максимальный положительный хронотропный эффект Ь-аргинина в дозах 50 и 100 мг/кг одинаков (16,4% и 16,6%) Введение О-аргинина вызывает положительный хронотропный эффект с максимальной реакцией 14%, что ниже положительной хронотропной реакции той же дозы Ь-аргинина - 22,5% Следовательно, как положительный, так и отрицательный хронотропные эффекты Ь-аргинина более выражены по сравнению с О-аргинином, что позволяет предполагать наличие как зависимых от образования N0, так и независимых от N0 механизмов влияния на частоту сердцебиений

Ударный объем крови при введении Ь-аргинина изменяется двухфазно уменьшается в зависимости от дозы, затем увеличивается выше исходных показателей

Анализ максимальных и минимальных показателей УОК свидетельствует о том, что при введении Ь-аргинина в дозах 50 и 100 мг/кг происходит снижение УОК на 26,6% и 27% (табл 2), а увеличение - соответственно на 20% и 34% Значительное уменьшение УОК выявлено

Таблица 2

Ь-аргинин - 50 Ь-аргинин -100 Ь-аргинин -200 О-аргинин -200

исходные 0,27110,019 0,27410,017 0,31210,019 0,269Ю,011

снижение 0,200Ю,019*## 0,203+0,015**# 0,26010,017* 0,222Ю,012**

исходные 0,29110,020 0,26310,013 0,303Ю,020 0,282+0,017

повышение 0,348Ю,020* 0,35810,027** 0,382+0,018** 0,42510,034**

Примечание * - достоверность различий по сравнению с исходными величинами (* - Р<0,05, ** - Р<0,01) #- достоверность различий между группами Ь-аргинин - 100/ Ь-аргинин -200, ## - достоверность различий между группами Ь-аргинин - 50/ Ь-аргинин -200 (#- Р<0,05, ## -Р<0,01)

при введении как L-аргинина, так и D-аргинина в дозах 200 мг/кг, реакции примерно равны и соответственно составляют 16,4% и 17,7%, а положительная инотропная реакция L-аргинина в дозе 200 мг/кг составляет 27,8%, что значительно ниже эффекта D-аргинина в той же дозе, который приводит к увеличению УОК на 49,2% Следует отметить, что положительные ино-тропные эффекты как L-аргинина в дозе 200 мг/кг, так и D-аргинина значительно выше их отрицательных инотропных эффектов Положительные и отрицательные инотропные эффекты L-аргинина в дозах 50 мг/кг и 100 мг/кг выражены в равной мере

L-аргинин в дозах 50 и 100 мг/кг обладает выраженным в равной мере гипотензивным действием, систолическое давление снижается на 28 - 28,5% (рис 1)

Систолическое давление крови (Л)

Артериальное давление крови (Б)

1^50 L-100

-•— исходные

Рис 1 Максимальное гипотензивное действие аргинина (А) и дозо - зависимое снижение систолического и диастолического артериального давления (Б) Примечание- * - достоверность различий по сравнению с исходными величинами (* - Р<0,05, ** - Р<0,01; *** - Р<0,001)

Наиболее выраженным гипотензивным действием обладает L-аргинин в дозе 200 мг/кг, снижая СД на 43,4% D-аргинин также оказывает выраженное влияние на артериальное давление, вызывая снижение СД на 30,6%, что на 13% меньше по сравнению с D-аргинином Обращает внимание, что с увеличением дозы L-аргинина его гипотензивное действие начинает проявляться быстрее

Длительность периода изгнания крови из левого желудочка сердца (tu) при введении L-и D-аргинина изменяется также двухфазно - увеличивается на первых минутах после введения, а затем происходит ее уменьшение Установлено дозозависимое изменение tu, наиболее значительное увеличение tu на 25% происходит после введения L-аргинина в дозе 200 мг/кг

tu (А)

tu (Б)

0,09 0,08 0,07

0,06 0,05 0,04

*ф *

** . ф*

♦* *

L-50 -а

L-100

L-200 -•-al

D-200

L-50

L-100 L-200 •-Ь

D-200

Рис 2 Максимальные и минимальные показатели периода изгнания крови (Ш) при введении аргинина (А) и дозо-зависимые реакции ш (Б)

Примечание, а- исходный Ш; с- уменьшение Ш, а! - исходный т; Ь- увеличение Ш.

Такая же доза Б-аргинина увеличивает Ш на 17,5%, что свидетельствует о том, что увеличение Ш выражено в равной мере как на Ь-аргинин, так и на Б-аргинин (рис 2)

Сопоставляя выраженность эффектов аргинина при увеличении и уменьшении длительности периода изгнания крови можно отметить, что реакция увеличения Ш (18,3%) преобладает над ее уменьшением (8,3%) при введении только Ь-аргинина в дозе 50 мг/кг

Следовательно, в наших исследованиях установлено двухфазное действие обоих изомеров Ь-аргинина и О-аргинина на хронотропную, инотропную функции сердца и фазовую структуру сердечного цикла Причем эффекты аргинина на ЧСС и УОК могут иметь два механизма реализации - его непосредственное влияние на сердце, а также за счет увеличения выработки N0 Влияние как Ь-аргинина, так и О-аргинина на артериальное давление однонаправленное, вызывает его снижение Эти результаты свидетельствуют еще раз о том, что эффект действия N0 зависит от его количества и может обладать как положительным, так и отрицательным влиянием на насосную функцию сердца.

Влияние блокады Р-АР и м-ХР на реакцию насосной функции сердца крыс при введении нитроглицерина и нитропруссида натрия

В первой серии исследований мы выявили дозозависимые эффекты НГ на ЧСС, интервал Р(5 и АД в диапазоне доз 0,2 - 1,0 мг/кг и провели сравнительные исследования максимальных доз (1 мг/кг) НГ и НПР Для изучения роли Р-АР и м-ХР в регуляции показателей функций сердца оксидом азота после введения НГ в дозах 0,2 - 1 мг/кг и НПР в дозе 1 мг/кг блокировали соответствующие рецепторы, на фоне которых вводили НГ или НПР

Установлено, что отрицательное хронотропное действие НГ в диапазоне доз от 0,2 мг/кг до 1 мг/кг не проявляется в условиях блокады Р-АР (рис 3) Полученные данные свидетельствуют об угнетении оксидом азота р-адренергических влияний в регуляции частоты сердечных сокращений. При блокаде м-ХР атропином у крыс, которым вводились повышающиеся дозы НГ на фоне блокады Р-АР, не выявлено значимых изменений ЧСС, и последующее введение НГ не вызывало отрицательного хронотропного действия Однако, блокада Р-АР не оказывает влияния на выраженность отрицательного хронотропного действия НПР, а после восстановления до исходной величины последующее введение атропина увеличивает ЧСС на 10,2% (р<0,05) В условиях блокады Р-АР и м-ХР введение НПР в дозе 1 мг/кг продолжает оказывать отрицательное хронотропное действие, но реакция ЧСС меньше и составляет 17,2% (р<0,01) Это позволяет сделать вывод, что отрицательное хронотропное действие НПР, в отличие от нитроглицерина, основано на угнетении адренергических влияний, реализуемых через р-АР и усилении холинергических, реализуемых через м-ХР Следует отметить, что угнетающее действие на р-адренергическую регуляцию у НПР выше, чем у НГ

НТО,2 НТО,4 НТО,8 НГ 1 НПР 1 □N01 Вобзидан II N02 Ш атропин ИШЗ

Рис 3 Влияние блокады Р-АР и м-ХР на реакцию частоты сердцебиений при введении доноров оксида азота Примечание: * - достоверность изменения по сравнению с исходными перед каждым введением величинами (* - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001)

В первой серии исследований было показано увеличение длительности интервала РО на введение доноров N0 Введение НГ в дозах 0,2 мг/кг и 1 мг/кг как в условиях блокады ß-АР, так и без блокады, не вызвало изменений длительности интервала PQ, в то же время, блокада ß-AP не устранила влияния НГ в дозах 0,4 мг/кг и 0,8 мг/кг на данный показатель, который увеличился соответственно на 20,2% и 23,4% (р<0,05) Сравнивая эффекты одинаковых доз НГ и НПР (1 мг/кг), установлено, что увеличение длительности интервала PQ на введение НПР после блокады ß-AP сохраняется и реакция составляет 22,1% (р<0,05), в отличие от НГ, который не вызвал изменений Независимо от блокады ß-AP или м-ХР нитропруссид натрия увеличивает длительность интервала PQ, чего не наблюдается при введении нитроглицерина, следовательно, оказывает влияние непосредственно на клетки проводящей системы сердца крыс

Выявлено гипотензивное действие всех доз НГ и НПР Блокада ß-AP и м-ХР вызывала кратковременное снижение АД Установлено, что гипотензивное действие как нитроглицерина, так и нитропруссида натрия не зависит от блокады ß-AP или м-ХР Сравнивая одинаковые дозы НГ и НПР (1 мг/кг) следует отметить, что независимо от блокады ß-AP или м-ХР гипотензивный эффект нитропруссида натрия в 2 раза выше, чем НГ

Таким образом, нами установлено, что блокада ß-AP влияет на выраженность отрицательного хронотропного действия доноров NO нитроглицерина и нитропруссида натрия Известно, что в сердце крыс примерно 80% ß-AP принадлежат к семейству ßi-AP (Lemoine et al, 1991) Вместе с тем показано участие и ai-AP в регуляции функций сердца крыс (Миннибаев, 1996) В реализации холинергических влияний на сердце крыс наиболее значителен вклад м^-ХР (Зефиров, 1999) Установлено, что активность eNOS влияет на выраженность холинергических влияний в регуляции функций сердца (Massion, 2003) Полученные экспериментальные результаты и литературные данные вызвали необходимость исследования влияния селективного блокатора ßi-AP атенолола, ai-AP празозина и м2-ХР галамина на эффекты донора оксида азота нитроглицерина как при интактных, так и блокированных введением L-NAME NO-синтазах

Модуляция эффектов NO на насосную функцию сердца крыс антагонистами ßi, ar адренорецепторов и М2-холинорецепторов в условиях предварительной блокады

NO-синтаз

Частота сердечных сокращений у крыс с блокадой синтеза оксида азота на 7,4% ниже по сравнению с группой контроль+НГ (р<0,05) (табл 3) Введение НГ вызвало снижение ЧСС у крыс в группах контроль+НГ и L-NAME+НГ, но блокада NO-синтаз увеличивает выраженность отрицательного хронотропного эффекта донора NO нитроглицерина с 18% до 32,7% (р<0,01), что выше на 14,8% (р<0,05) по сравнению с группой контроль+НГ (рис 4)

В условиях блокады ßi-AP атенололом самые низкие величины ЧСС выявлены у крыс с блокадой NO-синтаз. Установлено, что блокада ßi-AP привела к снижению реакции ЧСС на НГ в группе контроль+НГ с 17,9% до 10,0% (р<0,05) и в группе L-NAME+НГ с 32,7% до 6,0% (р<0,001) Следовательно, блокада адренергических влияний, реализуемых ßi-AP существенно снижает реакцию ЧСС на НГ и данный эффект наиболее выражен у крыс с блокадой NO-синтаз

Воздействие НГ после блокады ai-AP празозином, введенным на фоне блокады ßi-AP, не вызвало изменений ЧСС во всех группах животных Это свидетельствует о том, что отрицательный хронотропный эффект нитроглицерина связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых ßi-AP и ai-AP

Нитроглицерин, введенный после блокады M2-XP галамином в условиях блокады ßi-АР и ai-AP, не повлиял на показатели ЧСС ни в одной из групп крыс. Установлено, что под влиянием L-NAME происходит увеличение холинергических влияний на ЧСС, реакция на блокаду м2-ХР составила 9,9% (р<0,05) и отсутствовала в группе контроль+НГ Следует отметить, что у крыс группы контроль+физраствор, которым не вводился нитроглицерин, показатели ЧСС были значительно выше на протяжении всего эксперимента

Таблица 3

Модуляция эффектов нитроглицерина на частоту сердечных сокращений и ударный объем крови последовательной блокадой адренорецепторов и холинорецепторов

Вводимые препараты Частота сердечных сокращений, уд/мин Ударный объем крови, мл

Контроль + физраствор Контроль + НГ Ь-ЫАМЕ+ НГ Контроль + физраствор Контроль + НГ Ь-КАМЕ+ НГ

НГ исходные 430,01±10,53 425,71110,32 394,18110,25# 0,378±0,009 0,377±0,010 0,338+0,010##

эффект 436,53+16,45 370,48119,04* 321,63±17,87** 0,365±0,011 0,321±0,007*** 0,251±0,012**#

атенолол исходные 430,41±10,69 369,92±9,74 330,40±13,25# 0,368+0,013 0,385+0,016 0,35010,014

эффект 351,7919,87*** 298,0318,19*** 278,69+17,49* 0,315±0,016* 0,325±0,016* 0,29210,013**

НГ исходные 348,50±10,44 297,93±11,08 279,1618,64 0,347±0,013 0,38810,016 0,36310,010

эффект 337,76+12,17 280,6318,59 266,14±14,31 0,343+0,013 0,312±0,015** 0,33110,002**

празозин исходные 343,86±10,50 281,81±8,80 267,06±6,78 0,358±0,017 0,425±0,019 0,35510,014##

эффект 311,73111,33* 263,02±11,32 261,14113,10 0,285±0,012** 0,335±0,020** 0,306+0,009*

НГ исходные 309,58±11,47 265,02±11,02 264,3016,95 0,342+0,008 0,438±0,020 0,34510,007#

эффект 310,16±13,28 266,57±11,15 258,74±13,80 0,354±0,011 0,391±0,022 0,322+0,006*#

галамин исходные 309,68±10,72 268,90±10,75 265,62±7,65 0,369±0,016 0,445±0,030 0,35510,010#

эффект 315,51+14,80 274,65±13,62 280,56±13,40 0,427±0,012** 0,549±0,032* 0,45310,023***#

НГ исходные 317,60+11,31 276,51110,77 281,63+7,60 0,408+0,016 0,482+0,029 0,42610,022

эффект 321,24±15,48 272,53112,33 279,94±14,88 0,394±0,015 0,42410,030 0,373+0,020

Примечание * - достоверность различий по сравнению с исходными величинами

(* - Р<0,05, ** - Р<0,01, *** - Р<0,001) # - достоверные различия между группами контроль+НГ/Ь-ЫАМЕ+НГ (# - Р<0,05, ## - Р<0,01)

Частота сердечных сокращений

Ударный объем крови

1 I ♦ * г?

й I I § а у I § ЁЗ м в Й

г з

I &

-Контроль+физ. раствор —О— контроль+НГ

•Ь^АМЕ+НГ

Оконтроль+физраствор В контроль+НГ ИЬ^АМЕ+НГ

Общее периферическое сопротивление сосудов

-<¡0 ** *

□ контроль+физраствор ЕЗ контроль+НГ ИЬ^АМЕ+НГ

Рис 4 Влияние последовательного введения антагонистов Р1-АР, а]-АР и мг~-нитроглицерина. Примечание, как и к рис 3

Минутный объем кровообращения

30-

й контроль+физраствор ® контроль+НГ ИЬ^АМЕ+НГ на реакцию показателей насосной функции сердца при введении

Ударный объем крови крыс с блокадой ЫО-синтаз на 10,5% ниже показателей группы контроль+НГ (р<0,05) (табл 3) Отрицательный инотропный эффект НГ на фоне блокады N0-синтаз составил 25,8%, что на 11,4% больше реакции УОК у крыс группы контроль+НГ (р<0,05)

После блокады РгАР произошло существенное снижение реакции УОК на введение НГ в группе Ь-ЫАМЕ+НГ, где реакция составила лишь 8,5% (р<0,01), что значительно ниже первона-чальной реакции (рис 4) Введение НГ привело к снижению УОК у крыс группы контроль+НГ на 19,2%, что значительно выше реакции крыс группы ЫЧАМЕ+НГ, у которых она равна 8,5% (р<0,01).

Реакция на НГ после последующей блокады 0С1-АР празозином у крыс группы Ь-ЫАМЕ+НГ самая низкая и составляет 13,1%, что меньше по сравнению с группой контроль+НГ - 21,1% (р<0,05) Обращает на себя внимание одинаково выраженная и высокая реакция УОК на атенолол у крыс групп контроль+НГ и 1ЖАМЕ+НГ, однако реакция на празозин у крыс с блокадой >ГО-синтаз значительно ниже На фоне блокады Р1-АР и 011-АР введение НГ вызвало снижение УОК в группе с блокадой >ТО-синтазы на 6,7%, однако, более значительные изменения на 11,2% выявлены у крыс группы контроль+НГ (р<0,05)

На фоне блокады Р1-АР, <Х1-АР и м2-ХР отрицательные инотропные реакции НГ выражены в равной мере в группах контроль+НГ и Ь-ЫАМЕ+НГ и составляют 12% и 12,7%

Следовательно, блокада ЫО-синтаз введением Ь-КАМЕ вызывает снижение УОК у крыс, что обусловлено уменьшением регуляторных влияний, реализуемых о^-АР и повышением роли М2-ХР Отрицательный инотропный эффект НГ более выражен у крыс с блокадой ЫО-синтазы, его выраженность снижается при последовательной блокаде РгАР и а^АР Следовательно, отрицательное инотропное действие донора оксида азота связано с угнетением адренергических влияний, реализуемых РгАР и агАР Введение блокатора м^-ХР галамина на фоне действия антагонистов РгАР и 0С1-АР привело к увеличению УОК во всех группах крыс, наиболее выраженная реакция, составившая 29,8%, выявлена у крыс с блокадой ЫО-синтаз.

Блокада ЫО-синтаз введением Ь-ЫАМЕ вызывает снижение минутного объема кровообращения (МОК) на 12,3% (р<0,05) (рис 4) После введения НГ у крыс с блокадой ЫО-синтаз наблюдается наиболее выраженное уменьшение МОК на 47,9%, в группе контроль+НГ реакция в 2 раза меньше - 21,7% (р<0,001).

Введение атенолола привело к снижению МОК у животных всех групп В группе животных Ь-ЫАМЕ+НГ реакция на блокаду Р1-АР составила 23,2%, что значительно ниже по сравнению с группой контроль+НГ- 33,99% (р<0,05) Это свидетельствует о том, что у крыс с блокадой синтеза N0 снижены адренергические влияния на МОК, реализуемые р1-АР Нитроглицерин, вводимый на фоне блокады Р1-АР, вызывает снижение МОК в группе Ь-ЫАМЕ+НГ на 8,8%, чгго значительно меньше реакции животных группы контроль+НГ -21,5% (р<0,01).

Можно отметить, что блокада Р1-АР значительно снижает реакцию МОК на введение НГ в группе Ь-ЫАМЕ+НГ и не влияет на выраженность снижения МОК у крыс группы контроль+НГ У крыс с блокадой синтеза N0 после введения атенолола и НГ показатели МОК значительно ниже, по сравнению с группами контроль+НГ и особенно кон-троль+физраствор (р<0,05)

Блокада 0С1-АР празозином вызвала снижение МОК у животных с блокадой МО-синтаз на 15,6%, что значительно меньше реакции в группе контроль+физраствор 24,8% (р<0,05) На фоне блокады РгАР и 0С1-АР реакция на НГ составляет 9,2% и 7,5% (р>0,05)

Это позволяет предполагать, что происходит увеличение холинергических влияний на МОК вследствие воздействия нитроглицерином На фоне блокады Р1-АР, си-АР и м2-ХР реакции МОК на НГ составили 10,6% и 13,9%, межгрупповых различий не выявлено

Анализ длительности периода изгнания крови из левого желудочка сердца, фазы быстрого и медленного изгнания при введении нитроглицерина на фоне блокады адрено- и

холинорецепторов позволял выявить особенности влияния N0 на фазовую структуру сердечного цикла

Установлено, что фаза быстрого изгнания крови составляет 13,8 - 15% от длительности периода изгнания крови, а фаза медленного изгнания 85 - 86% Введение НГ уменьшает длительность фазы быстрого изгнания с 15% до 10% (р<0,05) и увеличивает длительность фазы медленного изгнания с 85% до 90% (р<0,05) у крыс группы контроль+НГ Это свидетельствует о том, что донор N0 нитроглицерин изменяет соотношение фаз быстрого и медленного изгнания крови относительно периода изгнания, которое сопровождается уменьшением длительности быстрого и увеличением длительности медленного изгнания У крыс с блокадой синтеза оксида азота эти изменения менее выражены

У крыс с блокадой ?ЧО-сингаз нами установлено увеличение периода изгнания крови на 17,3% (р<0,05) за счет удлинения фазы медленного изгнания. Донор N0 нитроглицерин увели-чивал период изгнания крови за счет увеличения фазы медленного изгнания и уменьшения фазы быстрого изгнания Это свидетельствует о том, что МО-зависимые механизмы прини-мают участие в регуляции фазовой структуры сердечного цикла Воздействие атенололом увеличивало период изгнания крови во всех группах животных за счет увеличения времени медленного изгнания крови и уменьшения фазы быстрого изгнания

У крыс с блокадой синтеза !ЧО-синтаз введением 1ЖАМЕ выявлено повышение систолического и диастолического артериального давления (САД и ДАД) на 17,7% и 20% соответственно по сравнению с группой контрольных животных (р<0,05) Максимальный гипотензивный эффект НГ проявлялся через 30 секунд у крыс с блокадой КО-синтаз реакция САД - 46,2 % и ДАД - 47,5% (р<0,001), а у интактных крыс САД - 38,1% и ДАД - 43% (р<0,001) Как видно из приведенных данных, гипотензивное действие НГ в большей мере проявляется у крыс с блокадой синтеза N0 Блокада Р1-АР атенололом не вызвала изменений САД и ДАД у крыс с блокадой МО-синтаз, при этом отмечена тенденция к повышению данного показателя На фоне блокады Р1-АР НГ вызвал снижение САД и ДАД на 35,6% и 38,6% (р<0,01) у крыс с блокадой синтеза N0, а у контрольной группы на 31,1% и 32% (р<0,001) соответственно Существенные межгрупповые различия в реакции САД и ДАД выявлены на блокаду (Х1-АР. На фоне блокады МО-синтаз происходит снижение САД на 13%, а ДАД - на 16%, в группе с интакгными ЫО-синтазами реакции на празозин значительно выше - 33,5% и 35,8% (р<0,01) В условиях блокады Р1-АР, <Х]-АР нитроглицерин вызвал снижение САД у крыс с блокадой синтеза N0 на 34,8%, что в 2 раза больше реакции у крыс группы контроль+НГ (15,3%) Снижение ДАД на НГ под влиянием блокады Р1-АР, сн-АР составило 37% (р<0,001) у крыс с Ь-МАМЕ, а в группе контроль+НГ изменений не выявлено Блокада м^-ХР не вызывает существенного изменения САД и ДАД Однако на фоне полной блокады адрено- и холинорецепторов гипотензивное действие НГ выражено значительно у крыс с блокадой синтеза N0 и снижение САД и ДАД составило соответственно 31,7% и 35% (р<0,01)

Общее периферическое сопротивление сосудов (ОПСС) у крыс с блокадой синтеза N0 на 77% выше, чем у крыс группы контроль+НГ (р<0,01) (рис 4) Блокада МО-синтаз увеличивает выраженность снижения ОПСС при воздействии донора N0 нитроглицерина с 39% до 49% Реакция на введение атенолола составила 32%, что значительно выше, чем в группе контроль+НГ (7%) Сопоставление реакций свидетельствует о том, что адренергические влияния на ОПСС, реализуемые РиАР, у животных с блокадой синтеза N0 значительно выше, чем у крыс группы контроль+НГ Введенный на этом фоне НГ привел к кратковременному снижению ОПСС у животных с блокадой МО-синтаз, у которых установлена максимальная реакция 50,7% (р<0,05) и у крыс группы контроль+НГ - 34,6% (р<0,01). Эти данные свидетельствуют о том, что блокада 01-АР не влияет на выраженность эффектов НГ на ОПСС. Вместе с тем, блокада 1Ч0-сшгтаз вызывает значительное увеличение адренерги-ческих влияний на ОПСС, реализуемых ргАР по сравнению с животными группы контроль+НГ В условиях блокады <ц-АР и ргАР воздействие НГ уменьшило ОПСС' у крыс с

блокадой МО-синтазы реакция 23% (р<0,05), а в группе контроль+НГ она выше - 33,9% (р<0,05) Поскольку у крыс с блокадой >ТО-синтаз реакция на НГ не изменяется в условиях блокады Р1-АР и уменьшается в два раза после блокады 011-АР, следовательно, влияние НГ на ОПСС вызывает угнетение адренергических влияний, реализуемых 011-АР

Реакция ОПСС на введение НГ на фоне блокады Р1-АР, 011-АР и м2-ХР составила 22% в группе контроль+НГ, это значительно выше по сравнению с реакцией группы с блокадой синтеза оксида азота - 6,7% Это свидетельствует о том, что блокада М2-ХР значительно снижает реакцию ОПСС на введение НГ

Следует отметить, что показатели ОПСС у крыс с блокадой синтеза N0 остаются на более высоком уровне на протяжении всего исследования - как при введении НГ, так и при последовательной блокаде Р1-АР, о^-АР и м2-ХР, а в группе контроль+НГ наиболее выраженное снижение ОПСС на 39% имеет тенденцию к снижению при последовательной блокаде рг АР, 0С1-АР и мз-ХР.

Мощность сердечных сокращений (\У) увеличена у крыс с блокадой синтеза N0 на 20,7% (р<0,05) Снижение \У при введении НГ происходит в равной мере в контрольной группе на 58,5% и у животных с блокадой 1ЧО-синтазы на 59,5% (р<0,001) На фоне блокады атенололом воздействие НГ привело к снижению данного показателя как у крыс с блокадой МО-синтазы, так и у контрольных' на 28% (р<0,05) и 46,4% (р<0,01) соответственно Мощность сердечных сокращений при введении НГ на фоне блокады Р1-АР у крыс с блокадой МО-синтазы выше, чем в группе контроль+НГ На фоне последовательной блокады адренорецепторов влияние НГ на \У постепенно снижается с 58,5% до 28% (р<0,01) после блокады Р1-АР и до 36,8% (р<0,05) после блокатора 011-АР В группе с блокадой ИО-синтаз происходят аналогичные изменения под влиянием адреноблокаторов - реакция на НГ с 59,5% снижается до 44,6% (р<0,05) Следует отметить, что наибольшие изменения в выраженности эффектов НГ происходят все же после блокады Р1-АР Обращает на себя внимание высокая реакция - 52% (р<0,01) на галамин в группе с блокадой синтеза N0 Вместе с тем, и в группе контроль+НГ происходит значительное снижение данного показателя на 23,8% (р<0,05).

Следовательно, под влиянием блокады МО-синтаз снижается роль адренергических влияний в регуляции мощности сердечных сокращений и в большей мере это связано с Р1-АР Одновременно, в этой группе крыс происходит значительное повышение холинерги-ческих влияний, которые реализуются через м2-ХР На фоне блокады Р1-АР, агАР и м2-ХР не происходит существенного изменения реакции мощности сердечных сокращений на введение НГ и она составляет 29% у крыс с блокадой синтеза N0 и 33% в группе контроль+НГ

Расход энергии на перемещение 1 литра крови (Рэ) у крыс с блокадой МО-синтазы на 46,6% выше показателей группы контроль+НГ (р<0,05) Введение НГ приводит к снижению данного показателя в обеих группах, причем реакция более выражена у животных с блокадой синтеза оксида азота и составляет 56,2% (р<0,001) После блокады атенололом НГ вызвал выраженное снижение Рэ крыс с блокадой МО-синтазы и у животных контроль+НГ на 42,4% (р<0,05) и 37,5% (р<0,05)

Блокада празозином не оказала влияния на Рэ у крыс с блокадой Ж)-синтазы, в то время как у крыс групп контроль+физраствор и контроль+НГ произошло его выраженное снижение на 52,8% (р<0,05) и 31,5% (р<0,001) В условиях блокады празозином введение НГ вызвало снижение данного показателя у крыс с блокадой ТЧО-синтазы на 34,8% (р<0,05) Расход энергии на перемещение 1 литра крови после последующего введения галамина и НГ не изменился ни в одной из трупп животных Следует отметить, что Рэ у крыс с блокадой МО-синтазы на протяжении всего эксперимента увеличен по сравнению с животными группы контроль+НГ

Объемная скорость изгнания крови (Уе) на 18,4% меньше у крыс с блокадой N0-синтазы, чем в группе контроль+НГ (р<0,01) Введение НГ вызвало снижение данного показателя на 7,7% у крыс группы Ь-МАМЕ+НГ и на 13,5% у животных группы

контроль+НГ Блокада атенололом вьввала выраженное снижение Уе у всех групп животных Наиболее высокая реакция отмечена у крыс контроль+ФР - 29,4% (р<0,001), в группах контроль+НГ и Ъ-КАМЕ+НГ она ниже и составляет соответственно 24% (р<0,001) и 20,5% (р<0,05) Введение на этом фоне НГ не оказало воздействия на Уе у крыс с блокадой МО-синтаз, в отличие от контрольных животных, где установлено снижение объемной скорости изгнания крови В условиях блокады РгАР, а1-АР и м-ХР НГ не оказал воздействия на данный показатель ни в одной из опытных групп

Согласно нашим данным, у крыс с блокадой Ж)-синтаз увеличено ОПСС на 77%, мощность сердечных сокращений на 20,7%, расход энергии на перемещение 1 литра крови на 46%, а объемная скорость изгнания крови на 18,4% меньше, по сравнению с контролем У крыс с блокадой МО-синтаз расход энергии на перемещение одного литра крови независимо от введения нитроглицерина и последовательной блокады адрено- и холинорецепторов значительно выше по сравнению с группой контроля

Таким образом, у крыс нитроглицерин в дозе 0,4 мг/кг вызывает отрицательное инотропное, хронотропное и гипотензивное действие Блокада МО-синтаз хроническим введением Ь-МАМЕ оказывает существенное влияние на параметры насосной функции сердца крыс, снижая ЧСС, УОК, МОК, объемную скорость кровотока, увеличивая длительность периода изгнания крови и изменяя соотношение фаз быстрого и медленного изгнания крови В то же время, под влиянием блокады синтеза оксида азота происходит повышение САД, ДАД, ОПСС, мощности сердечных сокращений и расхода энергии на перемещение литра крови, что свидетельствует о неэкономном функционировании сердца таких животных Установлено, что в реализации эффектов доноров оксида азота лежит их способность ослаблять или подавлять адренергические влияния, реализуемые через Р1-АР, СС1-АР и усиливать холинергические влияния, реализуемые м2-ХР

Проведенные исследования свидетельствуют о том, что оксид азота оказывает выраженное влияние на все показатели насосной функции сердца крыс Его действие реализуется через различные подтипы адренергических и холинергических рецепторов Причем впервые установлено, что отрицательные инотропные и хронотропные влияния доноров оксида азота на сердце крыс реализуются через угнетение адренергических влияний, реализуемых р], р2, оц- адренорецепторами и активацию холинергических влияний, которые реализуются м2-холинорецепторами

Выводы

1 Доноры оксида азота нитроглицерин и нитропруссид натрия влияют на сердце, снижая частоту сердечных сокращений и увеличивая длительность интервала Р<3 на электрокардиограмме.

2 Нитроглицерин в дозе 0,4 мг/кг приводит к снижению частоты сердечных сокращений, ударного объема крови, минутного объема кровообращения, объемной скорости изгнания крови, артериального давления, общего периферического сопротивления сосудов, мощности сердечных сокращений, расхода энергии на перемещение 1 литра крови и увеличению периода изгнания крови

3 Субстрат синтеза N0 Ь-аргинин оказывает выраженный гипотензивный эффект и обладает двухфазным действием на хронотропную, инотропную функции сердца, длительность периода изгнания крови, вызывая первоначальное снижение показателей, а затем их увеличение.

4 О-аргинин вызывает гипотензивный эффект и обладает двухфазным действием на хронотропную, инотропную функции сердца, длительность периода изгнания крови, но данные изменения менее выражены по сравнению с Ь-аргинином, что предполагает наличие собственных, не зависящих от образования N0, эффектов данных аминокислот

5 Блокада МО-синтаз хроническим введением Ь-МАМЕ вызывает уменьшение частоты сердечных сокращений, ударного объема крови, минутного объема кровообращения, объемной скорости изгнания крови, увеличение периода изгнания крови, повышение

артериального давления, общего периферического сопротивления сосудов, мощности сердечных сокращений, расхода энергии на перемещение 1 литра крови

6 Блокада синтеза N0 хроническим введением L-NAME увеличивает в 1,8-2,2 раза реакции показателей насосной функции сердца на нитроглицерин

7 Отрицательный хронотропный эффект нитроглицерина отсутствует на фоне блокады ß-АР, снижается в условиях блокады ßi-AP и не выявляется после блокады ai-AP, следовательно, он связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых ßi- и ai-адренорецепторами.

8 Нитропруссид натрия в дозе 1 мг/кг независимо от блокады ß-AP и м-ХР снижает ЧСС и увеличивает длительность интервала PQ

9 У крыс с блокадой NO-синтаз отрицательный инотропный эффект нитроглицерина снижается в 2 раза после блокады ßi-адренорецепторов, следовательно, он связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых ßr адренорецепторами

10 Блокада NO-синтаз введением L-NAME вызывает снижение ударного объема крови у крыс, что обусловлено уменьшением адренергических и повышением холинергических влияний, реализуемых соответственно oti-адренорецепторами и мг-холинорецепторами

Список опубликованных по теме диссертации работ

1 Насырова А.Г. Влияние доноров оксида азота на артериальное давление и частоту сердечных сокращений в условиях блокады адрено- и холинорецепгоров / А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина // Актуальные проблемы нейробиологии Тез докл - Казань, 2001 - С 48

2 Насырова А Г Особенности гемодинамических эффектов возрастающих доз доноров оксида азота по времени действия / А Г Насырова, Р Р Нигматуллина, А J1 Зефиров, Ф Ф Рахматуллина//II Российский национальный конгресс кардиологов Тез докл-М, 2001 -С. 197

3 Насырова А Г Особенности гипотензивного эффекта различных доноров оксида азота / А Г Насырова, Р Р Нигматуллина, О С Перепеченова, Д И Насырова, А В Безбрязов, Р А Афзалов, Ф Ф Рахматуллина, Я X Ибрагимов, Р П Ишметов // ХУШ съезд физиологического общества им. И П Павлова. - Казань, 2001,- С. 170-171

4 Нигматуллина Р Р Влияние десимпатизации гуанетидином на адаптацию насосной функции сердца крыс разного возраста / Р.Р. Нигматуллина, А.Г. Насырова, ИГ. Хурамшин, Д И Насырова // Архив клинической и экспериментальной медицины - 2001 - Т. 10, №2 -С 194

5 Перепеченова О С Влияние десимпатизации гуанетидином на адаптацию насосной функции сердца крыс к физическим нагрузкам / О.С Перепеченова, Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, А В Безбрязов, М В Кашина, Д И Насырова // Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины Материалы XI Российской конференции молодых ученых Тез докл. - М., 2001,- С. 282

6 Нигматуллина Р Р Влияние гуанетидина на адаптацию насосной функции сердца / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, О С Перепеченова, А В Безбрязов, М В Кашина, Д И Насырова // Современные возможности эффективной профилактики, диагностики и лечения артериальной гипертонии Материалы Всероссийской научно-практической конференции: Тез. докл. - М, 2001- С. 44.

7 Нигматуллина Р Р Большие дозы симпатолитического препарата гуанетидина нарушают адаптацию насосной функции сердца к физическим нагрузкам / Р Р Нигматуллина, А Л Зефиров, А.Г Насырова, О.С Перепеченова, A.B. Безбрязов, Д И. Насырова, М В Кашина // VIII Российский национальный конгресс "Человек и лекарство"' Тез докл - М , 2001 - С 594

8 Нигматуллина Р Р Двухфазное, дозо-зависимое влияние доноров NO на атипические кардиомиоциты крыс и лягушек / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, Г Ф Ситдикова,

И А Латфуллин // ХУЩ съезд физиологического общества им И П Павлова - Казань, 2001 - С 173

9 Нигматуллина Р Р Роль симпатического отдела вегетативной нервной системы в становлении и адаптации насосной функции сердца крыс к мышечным нагрузкам / Р Р Нигматуллина, ИГ. Хурамшин, А.Г. Насырова // УП международное совещание и V школа по эволюционной физиологии Тез докл.- С -Петербург, 2001 - С 97-98

! 0 Нигматуллина Р Р. Доноры оксида азота дозозависимо урежают частоту сердечных сокращений на фоне снижения артериального давления крови у крыс / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, Ф.Ф Рахматуллина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 2002 - Т 134, № 7 - С. 40-43

11 Нигматуллина Р Р Влияние нитроглицерина, нитропруссида натрия, серотонина и виагры на артериальное давление и частоту сердцебиений крыс / Р.Р Нигматуллина, А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина, Г 3 Зиязетдинова, А В Безбрязов // V международный славянский конгресс по элекгростимуляции и клинической электрофизиологии сердца Вестник аритмологии: Тез докл - С -Петербург, 2002,- № 25 - С 5

12 Нигматуллина Р Р. Блокада адрено- и холинорецепторов модулирует реакцию насосной функции сердца на оксид азота / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина // VI Всероссийский симпозиум Растущий организм' адаптация к физической и умственной нагрузке Научно-практическая конференция молодых ученых Тез докл - Казань, 2002 -С 125-126

13 Рахматуллина Ф.Ф Влияние оксида азота на течение экспериментального инфаркта миокарда / ФФ Рахматуллина, А Г Насырова, AJI Зефиров // VI Всероссийский симпозиум Растущий организм адаптация к физической и умственной нагрузке Научно-практическая конференция молодых ученых: Тез. докл.- Казань, 2002 - С. 139-140

14 Насырова А Г. Влияние оксида азота на регуляцию работы сердца крыс в условиях блокады бета-адренорецепторов / А.Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина // VI Всероссийский симпозиум Растущий организм' адаптация к физической и умственной нагрузке Научно-практическая конференция молодых ученых Тез докл.- Казань, 2002 - С 123-124

15. Насырова А Г Модуляция насосной функции сердца на фоне блокады бета- адренорецеп-торов у нормо- и гипертензивных крыс / А.Г Насырова // VII Научно-практическая конференция молодых ученых. Тез. докл - Казань, 2002 - С 101-102

16 Нигматуллина Р.Р Влияние оксида азота на частоту сердечных сокращений и артериальное давление крыс при блокаде адрено- и холинорецепторов / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина // Международная конференция по функциональной нейроморфологии Колосовские чтения'Тез докл - С.-Петербург, 2002 - С 197-198.

17 Нигматуллина Р.Р Реакция насосной функции сердца крыс на оксид азота модулируется блокадой адрено- и холинорецепторов / РР. Нигматуллина, А Г Насырова, Ф.Ф Рахматуллина // IV Съезд физиологов Сибири' Тез докл. - Новосибирск, 2002 - С 200-201

18 Нигматуллина Р Р Блокада адрено- и холинорецепторов модулирует реакцию насосной функции сердца на оксид азота / Р Р Нигматуллина, А.Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина // Российский национальный конгресс кардиологов Тез докл - С.-Петербург, 2002 - С 287

19 Насырова А Г Взаимосвязь бета! -адренорецепторов и оксида азота в механизмах регуляции работы сердца / А Г Насырова // Российский национальный конгресс кардиологов Тез. докл - С -Петербург, 2002,- С 281.

20 Нигматуллина РР Влияние десимпатизации на насосную функцию сердца в постна-тальном онтогенезе крыс / Р Р Нигматуллина, И Г Хурамшин, А Г Насырова // Росс физ журн им Сеченова - 2002-№ 12 - С 1567-1576

21 Нигматуллина Р Р Роль N0 в модуляции адренергических и холинергических влияний на насосную функцию сердца крыс / Нигматуллина Р.Р, Насырова А Г, Рахматуллина Ф Ф // Ш Съезд биохимического общества' Тез докл - С -Петербург, 2002 - С 452

22 Насырова А.Г Влияние оксида азота на частоту сердечных сокращений и артериальное давление у крыс в условиях блокады бета-адренорецепторов // А Г Насырова, Р Р Ниг-

матуллина, Ф Ф Рахматуллина // IV Международная конференция по функциональной нейроморфологии "Колосовские чтения - 2002"- Тез докл - С -Петербург, 2002 - С 197198

23 Нигматуллина Р Р Реакция насосной функции сердца крыс на оксид азота модулируется блокадой адрено- и холинорецепгоров / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина ИIV съезд физиологов Сибири Тез докл - Новосибирск, 2002 - С 200-201

24 Нигматуллина Р Р Блокада адрено- и холинорецепторов модулирует реакцию насосной функции сердца на оксид азота / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина // Российский национальный конгресс кардиологов "От исследований к клинической практике" ■ Тез докл - С -Петербург, 2002 - С 287

25 Насырова А Г Взаимосвязь pi-адренорецепторов и оксида азота в механизмах регуляции работы сердца / А Г. Насырова // Российский национальный конгресс кардиологов "От исследований к клинической практике" • Тез докл - С -Петербург, 2002 - С 281

26 Насырова А Г Влияние оксида азота на частоту сердечных сокращений и артериальное давление у крыс в условиях блокады бета-адренорецепторов / А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина, О Ф Салихова // Конференция молодых ученых СО РАМН по проблемам фундаментальной и прикладной медицины • Тез докл - Новосибирск, 2002 - С 47

27 Рахматуллина Ф Ф Гемодинамические показатели в процессе развития экспериментального инфаркта миокарда при усилении синтеза оксида азота / Ф Ф Рахматуллина, А Г Насырова, Д И Насырова // Конференция молодых ученых СО РАМН по проблемам фундаментальной и прикладной медицины' Тез докл - Новосибирск, 2002 - С 69

28 Насырова А Г Механизмы влияния оксида азота на фазовую структуру сердечного цикла / А Г Насырова, Р Р Нигматуллина // Механизмы функционирования висцеральных систем Ш Всероссийская конференция с международным участием, посвященная 175-летию со дня рождения Ф В Овсянникова Тез докл - Санкт-Петербург, 2003 - С 216-217

29 Насырова А.Г Сравнительное исследование концентрации оксида азота в различных тканях крыс методом ЭПР / А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина, А И Исмаилова, Р Р Нигматуллина, A JI Зефиров // Архив клинической и экспериментальной медицины -2003 -Т.12, №1 - С 43.

30 Рахматуллина Ф Ф Морфофункциональные изменения сердечной мышцы в процессе формирования экспериментального инфаркта миокарда у крыс (роль системы оксида азота) / Ф Ф Рахматуллина, А Г Насырова, В.В. Валиуллин, Н.Р. Сагдеев, A JI Зефиров // Архив клинической и экспериментальной медицины - 2003 - Т 12, №1,- С 75

31 Насырова А Г Блокада N0- синтазы изменяет эффекты нитроглицерина на насосную функцию сердца крыс / А Г Насырова, Ф Ф. Рахматуллина, Р Р Нигматуллина // Рецепция и внутриклеточная сигнализация - Пущино, 2003 - С. 174-176

32 Рахматуллина Ф Ф Влияние блокатора и субстрата синтеза оксида азота на течение экспериментального инфаркта миокарда / Ф Ф Рахматуллина, А Г Насырова, Н И Зиятдинова, Р Р Нигматуллина, А Л Зефиров // Рецепция и внутриклеточная сигнализация - Пущино, 2003-С 189-192.

33 Исмаилова А И Определение оксида азота в тканях органов крыс методом ЭПР-спектро-скопии / А И Исмаилова, Л Н Муранова, А Г Насырова, Ф Ф. Рахматуллина // Биология -наука XXI века 7-я Пущинская школа-конференция молодых ученых Пущино, 2003 - С 24-25

34 Насырова А Г Насосная функция сердца у крыс с блокадой NO-синтазы / А Г Насырова Ф Ф Рахматуллина, Р Р Нигматуллина, А.Л Зефиров // Актуальные проблемы биологии и экологии' Тез докл.- Сыктывкар, 2003 - С. 67

35 Рахматуллина Ф Ф Влияние блокады синтеза N0 на течение экспериментального инфаркта миокарда / Ф Ф Рахматуллина, А Г Насырова, Р Р. Нигматуллина, А. Л Зефиров // Актуальные проблемы биологии и экологии' Тез докл.- Сыктывкар, 2003 - С 95

36 Рахматуллина Ф Ф Течение экспериментального инфаркта миокарда в условиях блокады и усиления синтеза оксида азота IФ Ф. Рахматуллина, А Г Насырова, Р Р Нигматуллина,

АЛ Зефиров // Vm Научно-практическая конференция молодых ученых- Тез докл-Казань, 2003 - С 42-43

37 Насырова А Г Оксид азота влияет на фазовую структуру сердечного цикла / А Г Насырова, Ф Ф Рахматуллина, Р Р Нигматуллина // Материалы Всероссийской конференции, посвященной 100-летию профессора О Д Курмаева "Нейрогуморальные механизмы регуляции сердца" Тез докл - Казань, 2004 - С. 25

38 Насырова А Г Дозозависимые эффекты L-аргинина на гемодинамику / А Г. Насырова, Ф Ф Рахматуллина, Р Р Нигматуллина // Третья Всероссийская с международным участием школа-конференция по физиологии кровообращения- Тез докл - М, 2004 - С 67-68

39 Рахматуллина Ф Ф Дозозависимое влияние L-аргинина на течение экспериментального инфаркта миокарда / Ф Ф Рахматуллина, А Г Насырова, В В Кириллова, М Р Мазитов, А Л Зефиров // Третья Всероссийская с международным участием школа-конференция по физиологии кровообращения ■ Тез докл - Москва, 2004 - С. 90

40 Rachmatullina FF Regulation by nitric oxide of functions in normal heart and during experimental myocardial infarction / F F Rachmatullina, A G Nasyrova, Yu A Chelishev, A L Zefirov // Signal transduction in cardio-vascular system Workshop in cardiovascular physiology - Warszawa, Poland, 2004 - P 92-93

41 Нигматуллина P P NO модулирует адренергические и холинергические влияния на насосную функцию сердца крыс / Р Р Нигматуллина, А Г Насырова // Растущий организм адаптация к учебной и физической нагрузке Материалы УП Всероссийского симпозиума и школы молодых ученых, учителей Тез докл - Набережные Челны, 2004 -С 13-14

42 Нигматуллина Р Р Отрицательное хронотропное и инотропное действие L-NAME реализуется через снижение адренергических и повышение холинергических влияний на сердце / Р Р Нигматуллин, А Г Насырова // VI симпозиум по сравнительной электрокардиологии • Тез докл - Сыктывкар, 2004,- С 49-50

A \

«18 5 19

РНБ Русский фонд

2005-4 13555

Подписано в печать 17.09.2004 Печать ризографическая, бумага вОтр/м2 Тираж 100 эю заказ № 152 Отпечатано в типографии ООО «Эмеральд»

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Насырова, Аида Гайдаровна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. N0 в регуляции функций сердца.

1.2. Адренорецепторы и холинорецепторы в регуляции функций сердца.

1.2.1. Р- адренорецепторы в регуляции сердца.

1.2.2. (Храдренорецепторы в регуляции сердца.

1.2.3. Мускариновые холинорецепторы в регуляции сердца.

1.3. N0 в модуляции симпатических и парасимпатических влияний на насосную функцию сердца.

2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объект исследования.

2.2. Методы фармакологического воздействия.

2.3. Методика определения артериального давления.

2.4. Методика регистрации электрокардиограммы и реограммы.

2.5. Методика определения амплитудно-временных характеристик дифференцированной реограммы.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Влияние доноров N0 - нитроглицерина и нитропруссида натрия на частоту сердечных сокращений и артериальное давление крови крыс.

3.2. Влияние Ь-аргинина и О-аргинина на насосную функцию сердца крыс.

3.3. Влияние блокады Р-АР и м-ХР на реакцию насосной функци сердца крыс при введении нитроглицерина и нитропруссида натрия.

3.4. Модуляция эффектов N0 на насосную функцию сердца крыс антагонистами рь арадренорецепторов и м2-холинорецепторов в условиях предварительной блокады ЫО-синтаз.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Оксид азота в механизмах регуляции насосной функции сердца крыс"

Актуальность исследования. Оксид азота (N0) участвует в функционировании разнообразных систем организма и представляет исключительный интерес в связи с влиянием на ионные каналы (Уразаев, Зефиров, 1999), секрецию медиатора, обмен ионов кальция (Зефиров, 1999). Наиболее изученным является действие оксида азота на сосуды. Показано, что нормальный уровень артериального давления поддерживается постоянной фоновой активностью системы L-аргинин - NO-синтаза - оксид азота (Calver et al., 1993; Moneada, Higgs, 1993; Star, 1993). При сердечно-сосудистой патологии используются препараты, эффект которых основан на высвобождении NO и расширении коронарных сосудов. Однако механизм действия доноров оксида азота на сердце, особенно при сочетанном применении с адреноблокаторами, до конца не исследован.

Известно, что источниками оксида азота могут быть коронарный эндотелий, эндокард и кардиомиоциты (Kojda and Kottenberg, 1999; Massion, 2003). Открытие NO-синтаз в разных структурах сердца (Klimaschevski et al., 1992, Han et al., 1996;) привлекло внимание к исследованию роли оксида азота в регуляции насосной функции сердца, основными показателями которой являются ударный объем крови, частота сердечных сокращений, минутный объем кровообращения, артериальное давление, мощность сердечных сокращений. Выявлены эффекты N0 на изолированные кардиомиоциты (Massion, 2003), показано увеличение силы сокращения кардиомиоцитов при небольших концентрациях NO и угнетение при ее повышении (Mohan et al., 1995; Kojda et al., 1999). Однако в условиях in vivo изучение влияния NO на сердце не проводилось.

Модуляции оксидом азота адренергических и холинергических влияний на сердце посвящены исследования Lewis et al. (1994), Welch et al. (1994), Schuman et al. (1994), Massion et al. (2003). В связи с этим можно ожидать эффектов экзогенных доноров NO и блокады NO-синтаз на насосную функцию сердца, связанных с изменением ее регуляции через адренорецепторы и холинорецепторы. Однако рецепторные механизмы, опосредующие эффекты оксида азота на сердце, не изучены.

Исследованию механизмов адренергической и холинергической регуляции сердца посвящены работы Абзалова (1986), Нигматуллиной (1991), Гильмутдиновой (1991), Святовой (1997), Ситдикова (1998), Зефирова (1999), Ferrari (1993). Установлено, что регуляция хронотропной и инотропной функций сердца крыс в основном реализуется через ¡3-, агадренорецепторы и м-холинорецепторы. В кардиомиоцитах желудочков крыс преобладают Pi-АР (Kuznetsov et al., 1995; Juberg et al., 1985; Liang et al., 1985; Lemoine et al., 1991), которые модулируют сократимость миокарда исключительно через цАМФ-зависимый механизм. С другой стороны в регуляции сердца важны аг АР (Нигматуллина, 1999), т.к. реализация их эффектов осуществляется другими внутриклеточными посредниками.

Цель исследования - изучение механизмов регуляции насосной функции сердца оксидом азота.

Задачи исследования:

2. Исследовать влияние субстрата синтеза NO L-аргинина и правовращающего изомера D-аргинина на насосную функцию сердца крыс.

3. Изучить влияние блокады NO-синтаз хроническим введением L-NAME на насосную функцию сердца крыс.

5. Оценить влияние последовательной блокады РгАР, ссрАР и м2-ХР на выраженность эффектов нитроглицерина на насосную функцию сердца крыс.

Научная новизна

Новыми являются данные о том, что механизмы отрицательного хронотропного действия доноров N0 нитроглицерина и нитропруссида натрия различны. Отрицательный хронотропный эффект нитроглицерина не проявляется после введения обзидана, следовательно, он связан с угнетением Р-адренергических влияний. Влияние нитропруссида натрия на частоту сердечных сокращений не зависит от блокады Р-адренорецепторов обзиданом, снижается при блокаде м-холинорецепторов атропином, следовательно связано- с усилением холинергических влияний.

Приоритетными являются данные о том, что субстрат синтеза оксида азота Ь-аргинин оказывает влияние на показатели насосной функции сердца крыс. Ь-аргинин обладает двухфазным действием на инотропную . и хронотропную функции сердца. Вместе с тем, неактивный изомер Ь-аргинина Б-аргинин вызывает сходные изменения показателей насосной функции сердца крыс, но влияние Ь-аргинина более выражено. Оба изомера аргинина обладают гипотензивным действием.

Впервые установлено, что механизмы отрицательного инотропного и хронотропного действия нитроглицерина на сердце реализуются как через рг, Р2-, так и агадренорецепторы. Эти данные позволяют сделать предположение, что оксид азота реализует влияние на функции сердца через модулирование различных внутриклеточных сигнальных систем, т.е. цГМФ, цАМФ, инозитол-три-фосфат и диацилглицерол.

Научно-практическая значимость

Полученные результаты позволяют расширить представление о роли оксида азота в регуляции сердечно-сосудистой системы, уточнить механизмы влияния N0 на хронотропную, инотропную функции сердца, фазовую структуру сердечного цикла, а также раскрыть роль адренорецепторов и холинорецепторов в опосредовании эффектов оксида азота на сердце. Полученные результаты свидетельствуют о том, что доноры N0, блокатор синтеза N0 Ь-ИАМЕ, применяемые совместно с адреноблокаторами оказывают выраженное влияние на хронотропную и инотропную функции сердца, а не только на артериальное давление крови и коронарное кровообращение, что необходимо учитывать в кардиологической практике.

Полученные результаты представляют интерес для специалистов по физиологии, фармакологии и кардиологии.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Оксид азота обладает выраженным влиянием на сердце, вызывая уменьшение частоты сердечных сокращений, ударного объема крови, увеличение длительности интервала Р(2 и периода изгнания крови.

2. Отрицательное инотропное и хронотропное действие оксида азота на сердце осуществляется через модуляцию адренергических и холинергических влияний, реализуемых (3]-АР, (З2-АР, агАР и м-ХР.

3. Субстрат синтеза N0 Ь-аргинин и стереоизомер Б-аргинин вызывают сходные изменения показателей насосной функции сердца крыс, эффекты Ь-аргинина более выражены по сравнению с О-аргинином. Предполагается, что аргинин обладает собственным, не связанным с метаболизмом оксида азота, действием на функции сердца.

Апробация работы. Результаты исследований, выполненных по теме диссертации, доложены на XVIII съезде физиологического общества им. И.П.Павлова (Казань, 2001), VII Всероссийской школе молодых ученых "Актуальные проблемы нейробиологии" (Казань, 2001), Российском национальном конгрессе кардиологов (Санкт-Петербург, 2002), VI Всероссийском симпозиуме "Растущий организм: адаптация к физической и умственной нагрузке" (Казань, 2002), VII Научно-практической конференции молодых ученых (Казань, 2002), международной конференции "Рецепция и внутриклеточная сигнализация" (Пущино, 2003), Всероссийской конференции, посвященной 100-летию профессора О.Д.Курмаева "Нейрогуморальные механизмы рефляции сердца" (Казань, 2004), на заседании кафедры нормальной физиологии Казанского государственного медицинского университета (2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 42 научные работы.

Объем и структура диссертации

Диссертация объемом 165 страниц, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов. В работе имеется список литературы, содержащий 281 источников, из них 249 иностранных авторов. Диссертация иллюстрирована 37 рисунками и 26 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Насырова, Аида Гайдаровна

ВЫВОДЫ

1. Доноры оксида азота нитроглицерин и нитропруссид натрия влияют на сердце, снижая частоту сердечных сокращений и увеличивая длительность интервала РС) на электрокардиограмме.

2. Нитроглицерин в дозе 0,4 мг/кг приводит к снижению частоты сердечных сокращений, ударного объема крови, минутного объема кровообращения, объемной скорости изгнания крови, артериального давления, общего периферического сопротивления сосудов, мощности сердечных сокращений, расхода энергии на перемещение 1 литра крови и увеличению периода изгнания крови.

3. Субстрат синтеза N0 Ь-аргинин оказывает выраженный гипотензивный эффект и обладает двухфазным действием на хронотропную, инотропную функции сердца, длительность периода изгнания крови, вызывая первоначальное снижение показателей, а затем их увеличение.

4. Б-аргинин вызывает гипотензивный эффект и обладает двухфазным действием на хронотропную, инотропную функции сердца, длительность периода изгнания крови, но данные изменения менее выражены по сравнению с Ь-аргинином, что предполагает наличие собственных, не зависящих от образования N0, эффектов данных аминокислот.

5. Блокада ИО-синтаз хроническим введением Ь-ЫАМЕ вызывает уменьшение частоты сердечных сокращений, ударного объема крови, минутного объема кровообращения, объемной скорости изгнания крови, увеличение периода изгнания крови, повышение артериального давления, общего периферического сопротивления сосудов, мощности сердечных сокращений, расхода энергии на перемещение 1 литра крови.

6. Блокада синтеза N0 хроническим введением Ь-ЫАМЕ увеличивает в 1,8-2,2 раза реакции показателей насосной функции сердца на нитроглицерин.

7. Отрицательный хронотропный эффект нитроглицерина отсутствует на фоне блокады Р-адренорецепторов, снижается в условиях блокады (Зг адренорецепторов и не выявляется после блокады ai- адренорецепторов, следовательно, он связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых {Зг и ar адренорецепторами.

8. Нитропруссид натрия в дозе 1 мг/кг независимо от блокады Р-адренорецепторов и м-холинорецепторов снижает ЧСС и увеличивает длительность интервала PQ.

9. У крыс с блокадой NO-синтаз отрицательный инотропный эффект нитроглицерина снижается в 2 раза после блокады Pi-адренорецепторов, следовательно, он связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых рг адренорецепторами.

Ю.Блокада NO-синтаз введением L-NAME вызывает снижение ударного объема крови у крыс, что обусловлено уменьшением адренергических и повышением холинергических влияний, реализуемых соответственно ar адренорецепторами и м2-холинорецепторами.

137

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Оксид азота (N0) - газообразный посредник, участвует в функционировании разнообразных систем организма. Особый интерес представляет наличие NO-синтаз (NOS) во всех отделах сердца, что предполагает влияние N0 не только на тонус и реактивность сосудов, уровень артериального давления, но и на функции сердца [158, 219]. Кардиомиоциты способны экспрессировать эндотелиальную и индуцибельную NO-синтазы. N0, высвобождаемый коронарным эндотелием, эндокардом и кардиомиоцитами, участвует в регуляции функций сердца [158].

Наиболее изученным является гипотензивное действие доноров N0, которое в наших исследованиях на крысах проявлялось уже через 30 секунд после введения препаратов. Снижение систолического артериального давления носит дозозависимый характер: при увеличении дозы нитроглицерина от 0,2 мг/кг до 1 мг/кг реакция увеличилась с 16,4% до 25,7%. Длительность гипотензивного действия нитроглицерина в дозах от 0,2 мг/кг до 0,8 мг/кг составляла не более 30 секунд, при увеличении его дозы до 1 мг/кг гипотензивное действие сохранялось в течение 2,5 минут.

Другой донор N0 - нитропруссид натрия обладает гораздо более выраженным влиянием на систолическое артериальное давление, вызывая его снижение на 57%) ко 2 минуте. Гипотензивное действие нитропруссида натрия сохранялось более длительный период времени - до 4 минут. Выявлено снижение диастолического артериального давления от 15,5%) до 24,2% в ответ на введение повышающихся доз нитроглицерина и на 60% после введения нитропруссида натрия.

Оксид азота - высокореактивное соединение, он легко реагирует, например, с супероксидным радикалом, окисляясь до нитрата. Поэтому в организме он должен быстро исчезать; этим, очевидно, обусловлено быстрое прекращение гипотензивного действия многих продуцентов NO при их одноразовом введении [3]. Нитропруссид натрия продуцирует NO в организме крыс эффективнее, чем нитроглицерин [3]. Нами установлено, что нитропруссид натрия вызывает снижение систолического артериального давления на 51 мм.рт.ст, что находится на уровне изменений, выявленных в других работах [3]. Согласно литературным данным, в отсутствие спиновой ловушки для NO - диэтилдитиокарбамата, введение нитропруссида натрия в дозе 300 мкг/кг вызвало резкое снижение АД на 50-60 мм.рт.ст с последующим его возвращением к исходному уровню за 7-10 минут [3]. Гипотензивный эффект нитропруссида натрия четко коррелировал с наличием NO, продуцируемого из нитропруссида. Уже через 7-10 минут после введения нитропруссида натрия количество NO снижалось до нуля, при этом АД восстанавливалось до исходного уровня. Внутриартериальное введение крысам нитроглицерина в дозе 200 мкг/кг вызывало кратковременное и обратимое снижение АД. Оно было существенно слабее, чем при введении той же молярной дозы нитропруссида натрия - 300 мкг/кг [3]. Следовательно, гипотензивный эффект наиболее распространенных нитровазодилятаторов -нитропруссида натрия и нитроглицерина - коррелирует с высвобождением из них NO. Однако первый из них помимо NO высвобождает и токсичный цианид, а ко второму быстро развивается толерантность [46].

Гипотензивное действие доноров NO зависит от количества образуемого NO: чем его больше, тем шире просвет сосуда. С точки зрения роли NO в физиологии сердечно - сосудистой системы, существенное значение имеют и такие факторы регуляции его образования (активации NOS), как сдвиги артериального давления [143], пульсовые колебания кровотока и вызываемое движущейся кровью смещение эндотелиальных клеток (shear stress) [228]. Только в артериальном русле циркуляции имеет место постоянное (базальное) образование NO, поддерживающее дилятацию артериол. Правда, на микроциркуляторном уровне в некоторых органах NO может оказывать влияние и на тонус венул, а не только артериол [33, 224].

Действие нитроглицерина проявляется в коронародилатации, уменьшении общего периферического сопротивления сосудов большого круга кровообращения. При этом снижается венозный возврат к сердцу, уменьшается сердечный выброс и сила сердечных сокращений, что приводит к гемодинамической разгрузке сердца и уменьшает потребность миокарда в кислороде.

Следовало бы ожидать в ответ на столь выраженное гипотензивное действие нитроглицерина и нитропруссида натрия рефлекторного повышения частоты сердечных сокращений. Однако, полученные нами результаты, свидетельствуют об обратном, происходит урежение частоты сердцебиений. На нитроглицерин в дозе 0,2 мг/кг не выявлено изменений частоты сердечных сокращений, при повышении его дозы до 0,4 мг/кг проявился отрицательный хронотропный эффект, который составил 8%. Увеличение дозы нитроглицерина до 0,8 мг/кг привело к более выраженному урежению ЧСС -на 13,6%. Однако нитроглицерин в дозе 1 мг/кг вызвал менее выраженную брадикардию, ЧСС снизилась на 6,4%.

Имеются данные о том, что физиологические концентрации N0 могут стимулировать частоту сердечных сокращений, активируя вызванный гиперполяризацией направленный внутрь ток и этот эффект снижается при высоких концентрациях N0 [149]. Сопоставляя эффекты от введения одинаковых доз нитроглицерина и нитропруссида натрия следует отметить, что эффект второго составил 27%, в то время как нитроглицерин в дозе 1 мг/кг вызвал урежение ЧСС на 6,4%. Показано, что при перфузии сердца крыс нитропруссидом натрия проявлялся преимущественно тормозной эффект на ЧСС и влияние нитропруссида натрия в 4,6 раза превышало действие Ь-аргинина [14]. Обращает на себя внимание, что отрицательный хронотропный эффект нитропруссида натрия сохранялся длительное время.

Установлено влияние N0 на различные функции млекопитающих и земноводных [29], в том числе и на хронотропную функцию сердца [14, 21, 158, 219]. N0, подобно активации КАТФ каналов, подавляет активность симпатических нервов в сердце [158] и, вероятно, это один из путей его влияния на ЧСС. Очевидно, доноры N0 оказывают влияние и на клетки проводящей системы сердца, увеличивая время предсердно-желудочкового проведения возбуждения. Об этом свидетельствую полученные нами данные об увеличении длительности интервала РС) на 16,2% и 20,7% при введении нитроглицерина. Более выраженное увеличение длительности интервала Р<3 выявлено после введения нитропруссида натрия - на 24,7% и максимальное -на 29,7%.

Нами выявлена разновременность проявления гипотензивного и хронотропного эффектов доноров N0: под влиянием небольших доз нитроглицерина происходит кратковременное снижение артериального давления, а урежение частоты сердечных сокращений наступает после восстановления АД до исходного уровня. Эти данные позволяют сделать предположение о том, что имеются различные и независимые друг от друга механизмы влияния доноров N0 на сосуды и сердце.

Кардиодепрессивное действие эндогенного N0 может играть роль при определенных формах сердечной недостаточности [149]. Одним из механизмов отрицательного хронотропного действия N0 является увеличение образования цГМФ. Показано, что внутриклеточное увеличение цГМФ экзогенным и эндогенным N0 уменьшает частоту сокращений сердца у новорожденной крысы и мыши [104, 38]. Эффекты N0 на пейсмекерные клетки трудно разделимы из-за одновременного действия на различные мишени с противоположным действием на их спонтанную деполяризацию, например, ингибирование токов

С а Ь -типа, и активация пейсмекерного тока ^ [204].

Следовательно, N0 может играть важную роль в контроле частоты сердцебиений, стимулируя сердечные пейсмекеры в сино-атриальном узле. Однако, в отличие от полученных нами результатов, и литературных данных, Миз1а1ек [205] считает, что в изолированных кардиомиоцитах сино-атриального узла морской свинки и препаратах предсердий, нано-микромолярные концентрации доноров N0 увеличивают ЧСС на 20-30%. В сердце свиньи аппликация доноров N0 на область сино-атриального узла увеличивает ЧСС на 10%), указывая, что положительный хронотропный эффект N0 имеется т vivo. Значимое увеличение ЧСС на 12%, было выявлено у людей с внутривенным введением донора N0, тогда как давление крови не изменялось. Прямой стимулирующий эффект N0 на сердечные пейсмекерные клетки опосредуется стимуляцией пейсмекерного тока If в клетках сино-атриального узла через каскад, включающий цГМФ, ФДЭЗ, ПКА и мобилизацию внутриклеточного кальция. Следовательно, этими авторами впервые продемонстрировано, что N0 оказывает прямой положительный хронотропный эффект через активизацию новой сигнальной передающей цепи в клетках сино-атриального узла [205].

Выявленное в наших исследованиях урежение частоты сердечных сокращений после введения нитроглицерина и нитропруссида натрия сопровождается увеличением длительности интервала PQ и комплекса QRS. Это позволяет предположить, что оксид азота действует непосредственно на кардиомиоциты и необходимо выявить механизмы отрицательного хроно-тропного действия доноров N0.

Нами установлено, что отрицательный хронотропный эффект повышающихся доз нитроглицерина не проявляется в условиях блокады ß-AP, следовательно, он связан с угнетением ß-адренергических влияний в регуляции частоты сердечных сокращений. Вместе с тем, отрицательное хронотропное действие нитропруссида натрия основано на угнетении адренергических влияний, реализуемых ß-AP и, помимо этого - в усилении холинергических влияний, реализуемых м-холинорецепторами. Независимо от блокады ß-AP или м-ХР нитропруссид натрия увеличивает длительность интервала PQ, вероятно, он влияет непосредственно на клетки проводящей системы сердца крыс.

При адренергическом возбуждении N0 может оказывать непрямое действие на блуждающий нерв, увеличивая скорость снижения частоты сердечных сокращений при его стимуляции [238]. В условиях in vivo, играет роль механизм пресинаптической модуляции вагуса. При активации nNOS происходит облегчение вагусной передачи на пресинаптическом уровне, т.е. в сердечных • ганглиях [197]. На постсинаптическом уровне, eNOS кардиомиоцитов модулирует ответ на мускариновую холинергическую стимуляцию. Вероятно, nNOS (в сердечном ганглии) и eNOS (в кардиомиоцитах) координированно усиливают вагусное эфферентное угнетение частоты сердечных сокращений.

В культуре кардиомиоцитов in vitro [135, 188] и в условиях in vivo на лабораторных животных [135] показано, что N0 может уменьшать положительные хронотропные ответы на агонисты Р-АР. Нитропруссид натрия ослабляет хронотропный ответ на стимуляцию симпатического нерва в изолированном предсердии морских свинок [78]. В кардиомиоцитах атриовентрикулярного узла выявлено цГМФ-зависимое ингибирование ICíl;L после стимуляции [3-АР [131]. N0 угнетает потенциал-зависимые Са2+ каналы L-типа, уменьшая 1Са>ь что происходит в ответ на адренергическую стимуляцию [112].

Антагонизм [3-адренергического эффекта и N0 па проводимость и возбудимость в сердце имеет значение для его защиты от аритмии. Активация эндогенных NO-синтаз увеличивает устойчивость желудочков к аритмии [103]. Наоборот, кардиомиоциты мышей, нокаутных по eNOS, имеют низкий порог аритмогенного эффекта катехоламинов. Показано увеличение реакции ЧСС на стимуляцию симпатического нерва после воздействия селективным ингибитором nNOS у ваготомированных животных [240] свидетельствуя, что нейронально-образуемый N0 может способствовать этому эффекту in vivo.

Механизмом, которым in vivo N0 реализует свое ингибирующее действие на сердечные симпатические ответы, может быть пресинаптическое угнетение освобождения норадреналина из симпатических окончаний. В интактном сердце крыс ингибиторы NOS усиливают, а доноры N0 угнетают высвобождение норадреналина в сердце при стимуляции симпатического нерва [235]. Положительный инотропный ответ на добутамин, агонист Р-АР, усиливается при одновременном введении блокатора NO-синтазы L-NMMA.

Нейрональный оксид азота содействует вызванной стимуляцией вагуса брадикардии через пресинаптическую модуляцию нейропередачи [79].

Оксид азота, синтезируемый в клетках сино-атриального узла млекопитающих, участвует в холинергическом контроле ЧСС. ЫО-синтаза обнаружена в нервных клетках наряду с нейромедиаторами и нейропептидами, чаще фермент определяется в холинергических нейронах [27]. Вместе с тем, неизвестно какой из двух - синтезированный внутри нейрона или образуемый в сино-атриальном узле N0 играет роль в регуляции частоты сердцебиений. Показано, что нейронально выделяемый N0 и активность сердечных ингибиторных белков параллельно опосредуют снижение ЧСС у мышей [149].

Таким образом, нами установлено, что блокада р-АР влияет на выраженность отрицательного хронотропного действия доноров N0 нитроглицерина и нитропруссида натрия.

В сердце крыс примерно 80% р-АР принадлежат к семейству РгАР [166]. Следовательно, необходимо было установить в последующих сериях исследований влияние селективного блокатора РгАР атенолола на выраженность действия нитроглицерина. Вместе с тем, из анализа литературных источников стало ясно, что активность еЫ08 влияет на выраженность холинергических влияний в регуляции функций сердца. В связи с чем, появилась необходимость исследования влияния донора N0 нитроглицерина на насосную функцию сердца крыс, как при интактных, так и при хронически блокированных >Ю-синтазах. Известно, что из большой группы м-ХР, представленных в сердце, наиболее значимое влияние на хронотропную и инотропную функцию реализуется через м2-ХР. В связи с чем, исследовалось влияние блокады м2-ХР на выраженность действия донора N0 в интактном сердце и после блокады 1Ч0-синтаз введением Ь-ЫАМЕ.

Нами установлено, что блокада ЫО-синтаз хроническим введением Ь-МАМЕ вызывает уменьшение частоты сердечных сокращений, ударного объема крови и минутного объема кровообращения соответственно на 7,7%, 10,5% и 12,3%. Вероятно, это может свидетельствовать о том, что образующийся эндогенно оксид азота участвует в поддержании показателей насосной функции сердца в норме. Имеются данные, что у крыс до введения L-NAME ЧСС была 319 уд/мин, а после введения снизилась до 263 уд/мин. На фоне введения L-NAME у мышей и крыс повышалось АД и снижалась частота сердцебиений. Угнетение NO-синтазы или исчезновение ее гена связано со значимым уменьшением ЧСС на 10% in vitro и in vivo, что вероятно свидетельствует, о тоническом положительном хронотропном эффекте эндогенного N0 [205]. Ингибирование NOS может вызывать отрицательный инотропный эффект, свидетельствуя, что в некоторых случаях сократимость сердца постоянно поддерживается эндогенным образованием NO [188].

Блокада синтеза N0 вызывает увеличение реакции ЧСС, УОК и МОК на нитроглицерин в 1,8 - 2,2 раза. Следовательно, экзогенный донор NO нитроглицерин приводит к снижению частоты сердечных сокращений, ударного объема крови и минутного объема кровообращения и под влиянием блокады синтеза N0 установлена более высокая реактивность хронотропной и инотропной функции сердца. Эти данные могут быть объяснены бимодальным действием доноров N0 на сократимость сердечной ткани с повышением ее при низком уровне NO и угнетением при высоком.

В изолированных кардиомиоцитах желудочка крысы, субмикромолярные концентрации экзогенного донора N0 вызвали увеличение инотропии на 14,4% [157]. N0 ускоряет расслабление и это один из путей повышения силы сокращения сердца. Эффект экзогенного N0 был усилен после ингибирования эндогенного N0 [203], что выявлено и в наших экспериментах с блокадой NO-синтаз L-NAME. Применение нитроглицерина в дозе 0,4 мг/кг снижает УОК на 14,4%, следовательно, можно предположить, что эта доза нитроглицерина вызывает освобождение оксида азота в больших, чем субмикромолярные, концентрациях и оказывает отрицательный эффект.

Точная роль N0 как модулятора сократимости миокарда и связи сила-длина неясна. В присутствии блокады NO-синтазы донор оксида азота SNAP в концентрациях от наномолярных к микромолярным вызывает умеренный положительный инотропный эффект на изолированной папиллярной мышце. Низкие концентрации N0 могут модулировать миокардиальные функции, увеличивая сократимость и время взаимодействия миофиламентов, но не влияя значительно на связь сила-длина, предполагая влияние на освобождение Са2+ из саркоплазматического ретикулума [188]. Выделяемый эндотелием коронарных сосудов NO оказывает влияние на сократимость миокарда, в том числе, на длительность систолы и расслабления [61, 62, 178, 198].

В изолированных папиллярных мышцах или кардиомиоцитах, NO вызывает отрицательный инотропный эффект, уменьшая положительную связь частота-сила, возможно через цГМФ и ГПШ-зависимое фосфорилирование тропонина I и последующее понижение ответа миофиламентов на

Са [152].

Следовательно, N0 снижает частоту сердечных сокращений, вследствие чего наступает десенсибилизация Tnl к ионам кальция, что ведет к снижению ударного объема крови.

Возможными механизмами снижения показателей инотропной и хронотропной функции сердца при блокаде синтеза оксида азота может быть выявленное нами снижение адренергических влияний, реализуемых Pi-AP и а.р АР, a также существенное увеличение холинергических влияний опосредуемых м2-ХР.

Отрицательный хронотропный эффект нитроглицерина (18%) снижается в условиях блокады Pi-AP до 10% и не проявляется после блокады ai-AP, следовательно, он связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых Р,-АР и ссгАР.

У крыс с блокадой NO-синтаз адренергические влияния, реализуемые на частоту сердцебиений (Згадренорецепторами ниже, arAP - не выражены, а холинергические, реализуемые м2-ХР выше, чем у животных контрольной группы.

У крыс с блокадой NO-синтаз отрицательный хронотропный эффект нитроглицерина (32,7%) снижается в условиях блокады ргАР до 6% и не проявляется после блокады агАР, следовательно, он связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых pi-АР и ai-АР.

Блокада NO-синтаз введением L-NAME вызывает снижение показателей УОК у крыс, что обусловлено уменьшением регуляторных влияний, реализуемых ai-AP и повышением роли м2-ХР.

Отрицательный инотропный эффект нитроглицерина у крыс с блокадой NO-синтаз снижается после блокады pi-AP с 25,8% до 8,5% и при последующей блокаде ai-АР до 6,7%, следовательно, он связан с угнетением адренергических влияний, реализуемых pi-AP и ai-AP. Отрицательный инотропный эффект нитроглицерина (14,4%) в группе крыс с интактными NOS не изменяется после блокады pi-АР и снижается до 9,6% при последующей блокаде arAP. На фоне блокады pi-AP, apAP и м2-ХР отрицательные инотропные реакции нитроглицерина выражены в равной мере в группах контроль+НГ и L-NAME+НГ и составляют 12% и 12,7%.

NO может модулировать активность p-адренорецепторов. Подобно вызванному NO положительному инотропному эффекту, стимуляция р2-АР вызывает медленно развивающееся увеличение амплитуды сокращения (в сравнении со стимуляцией pi-AP) без воздействия на кинетику сокращения или Са2+-ток [269]. Различия в регуляции сопряжения возбуждения-сокращения в сердце, связанные с pi-AP или р2-АР, могут быть отнесены к функциональной компартментации цАМФ [276]. Это позволяет нам предположить, что экспериментальные результаты низких концентраций N0 включают специфическую активацию р2-АР или возможно G-белков, специфически связанных с ними.

Предполагается, что роль сердечных NOS проявляется как механизм компенсации, положительный инотропный Р-адренергический эффект катехоламинов усиливается в случае ингибирования NOS. Уменьшение активности рианодиновых рецепторов может быть ключевым механизмом в вызванном N О снижении реактивности р-АР [277, 278]. Хотя доноры NO не изменяют частоту возникновения Са2+ спарков в нормальных кардиомиоцитах, они существенно влияют после стимуляции р-АР (что опосредовано изменением Са загрузки саркоплазматического ретикулума) [279]. Нейрональная NOS также может быть локализована возле саркоплазматического ретикулума [270].

Нитропруссид натрия ослабляет оба - инотропный и хронотропный ответы на стимуляцию симпатического нерва в изолированном предсердии морских свинок [78], как и инотропные ответы на изопреналин в тканях предсердий и желудочков человека [107]. Нитроэргическое угнетение инотропных ответов на адренергическую' стимуляцию было также подтверждено на интактных собаках с блокированной автономной нервной системой, у которых L-NAME значительно изменил инотропный эффект на внутрикоронарно введенный добутамин [153]. В наших экспериментах нитроглицерин снижает ЧСС как в группе контроль+НГ, так и L-NAME+НГ, выше во втором случае, что свидетельствует о том, что этот эффект состоит из 2 компонентов: симпатического и собственного влияния нитроглицерина.

Сопоставленные вместе, исследования in vitro и in vivo подтвердили, что реакции сердца на адренергическую стимуляцию, как инотропные, так и хронотропные, находятся под ингибирующим нитроергическим влиянием. Механизмы, опосредующие данный эффект, могут включать модуляцию входящего тока кальция через L-тип Са2+ каналов и пресинаптическое угнетение освобождения норадреналина из симпатических нервных окончаний.

В эндотелии коронарных сосудов наряду с базальным существует и рецептор-опосредованное высвобождение оксида азота, которые имеют важное значение в регуляции коронарного кровотока, а также хронотропной и инотропной функции изолированного сердца при действии норадреналина. В изолированном перфузируемом сердце крыс карбахолин снижает коронарный кровоток и оказывает отрицательный хроно- инотропный эффекты. Последние в основном опосредуются через активацию мускариновых рецепторов миокарда и ГМК сосудов, однако, при этом происходит и высвобождение N0, который модулирует эффекты карбахолина. Таким образом, N0 принадлежит важная роль в регуляции коронарного кровотока, биомеханической функции сердца и реализации кардиотропных эффектов холино- и адреноагонистов [28].

В условиях in vitro как L-NMMA, так и метиленовый синий, блокируют отрицательный хронотропный эффект мускариновой стимуляции у спонтанно сокращающихся кардиомиоцитов неонатальных крыс [38, 40], т.е. нет образования оксида азота и холинергический эффект блокирован. У людей при введении L-NMMA происходит увеличение АД и падение ЧСС [69].

Установлено, что оксид азота вызывает повышение активности вагусных нейронов и играет ключевую роль в регуляции ЧСС у животных в сознании с преобладанием вагусной активности [217]. У анестезированных крыс введение L-NAME в желудочки мозга вызвало увеличение давления крови и ЧСС, что блокировалось атенололом, но не атропином [210]. У анестезированных хорьков с блокадой Р-АР L-NAME значительно снижает брадикардию в ответ на стимуляцию вагуса [83]. Алкильные сложные эфиры, такие как L-NAME, проявляют активность конкурирующих антагонистов мускариновых рецепторов [65]. Таким образом, эксперименты in vivo и in vitro свидетельствуют, что NO усиливает хронотропный ответ на парасимпатическую стимуляцию у некоторых видов млекопитающих.

L-NMMA замедляет скорость урежения частоты сердечных сокращений при стимуляции вагуса, эффект удваивается нифедипином, ингибитором L-типа кальциевых каналов [239]. В изолированных миоцитах желудочков L-NMMA устраняет холинергическое ослабление адренергически увеличенного I Са,ь [112, 40], свидетельствуя, что этот механизм может влиять опосредованно на вагусный контроль сократимости также хорошо, как и на хронотропные ответы. Показано, что эндотелиальная NO-синтаза играет ключевую роль в холинергической модуляции функции сердечных миоцитов [104].

Анализ длительности периода изгнания крови из левого желудочка сердца, фаз быстрого и медленного изгнания при введении нитроглицерина на фоне блокады адренорецепторов и холинорецепторов позволил выявить особенности влияния N0 на фазовую структуру сердечного цикла.

У крыс с блокадой ЫО-синтаз нами установлено увеличение периода изгнания крови на 17,3% за счет удлинения фазы медленного изгнания. Донор N0 нитроглицерин увеличивал период изгнания крови за счет увеличения фазы медленного изгнания и уменьшения фазы быстрого изгнания. Это свидетельствует о том, что МО-зависимые механизмы принимают участие в регуляции фазовой структуры сердечного цикла. Воздействие атенололом увеличивало период изгнания крови во всех группах животных за счет увеличения времени медленного изгнания крови и уменьшения фазы быстрого изгнания.

Нами установлено, что у крыс фаза быстрого изгнания крови составляет 13,8 - 15% от длительности периода изгнания крови, а фаза медленного изгнания 85 - 86%. Введение нитроглицерина уменьшает длительность фазы быстрого изгнания с 15% до 10% и увеличивает длительность фазы медленного изгнания с 85% до 90% у крыс группы контроль+НГ. Это свидетельствует о том, что эндогенный донор N0 нитроглицерин изменяет соотношение фаз быстрого и медленного изгнания крови относительно периода изгнания, которое сопровождается уменьшением длительности быстрого и увеличением длительности медленного изгнания. У крыс с блокадой синтеза оксида азота эти изменения менее выражены.

Согласно нашим данным, у крыс блокада МО-синтаз увеличивает общее периферическое сопротивление сосудов на 77%, мощность сердечных сокращений на 20,7%), расход энергии на перемещение 1 литра крови на 46%, а объемную скорость изгнания крови снижает на 18,4%, по сравнению с контролем.

У крыс с блокадой Ж>синтаз общее периферическое сопротивление сосудов увеличено на 77%, в этой группе животных происходит снижение ОПСС 49%) при воздействии нитроглицерина, что значительно больше, по сравнению с контролем (39%). У крыс с блокадой НО-синтаз реакция ОПСС на нитроглицерин не изменяется в условиях блокады (ЗрАР и уменьшается в два раза после блокады агАР. Нитроглицерин вызывает угнетение адренергических влияний на общее периферическое сопротивление сосудов, реализуемых ар АР. В группе контроль+НГ наиболее выраженное снижение общего периферического сопротивления сосудов на 39% имеет тенденцию к снижению при последовательной блокаде |ЗгАР, агАР и м2-ХР.

На фоне последовательной блокады адренорецепторов влияние нитроглицерина на мощность сердечных сокращений постепенно снижается с 58,5% до 28% после блокады РгАР и до 36,8% после введения антагониста ар АР. В группе с блокадой ИО-синтаз происходят аналогичные изменения под влиянием адреноблокаторов - реакция на нитроглицерин с 59,5% снижается до 44,6%. Следует отметить, что наиболее выраженные изменения в выраженности эффектов нитроглицерина происходят все же после блокады РгАР. Обращает на себя внимание высокая реакция мощности сокращений 52% на блокатор м2-ХР галанин в группе с Ь-ЫАМЕ. Вместе с тем, и в группе контроль+НГ происходит значительное снижение данного показателя на 23,8%.

Следовательно, под влиянием блокады ЫО-синтаз снижается роль адренергических влияний в регуляции мощности сердечных сокращений и в большей мере это связано с РгАР. Одновременно, в этой группе крыс происходит значительное повышение холинергических влияний, которые реализуются через м2-ХР. На фоне блокады РгАР, агАР и м2-ХР не происходит существенного изменения реакции мощности сердечных сокращений на введение нитроглицерина и она составляет 29% у крыс с блокадой синтеза N0 и 33% в группе контроль+НГ.

У крыс с блокадой ЫО-синтаз введением Ь-ЫАМЕ выявлено повышение систолического и диастолического артериального давления на 17,7% и 20% соответственно. Максимальный гипотензивный эффект нитроглицерина проявляется через 30 секунд: у крыс с блокадой ЫО-синтаз реакция систолического артериального давления - 46% и диастолического - 47,5%, а у интактных крыс - 38% и 43% соответственно. Как видно из приведенных данных, гипотензивное действие нитроглицерина в большей мере проявляется у крыс с блокадой синтеза N0.

Блокада Pi-AP атенололом не вызвала изменений систолического и диастолического артериального давления у крыс с блокадой NO-синтаз, при этом отмечена тенденция к повышению данного показателя. На фоне блокады Pi-АР нитроглицерин вызвал снижение систолического и диастолического артериального давления на 35,6% и 38,6% у крыс с блокадой синтеза N0, а у контрольной группы на 31% и 32% соответственно. Существенные межгрупповые различия в реакции систолического и диастолического артериального давления выявлены на блокаду агАР. На фоне блокады NO-синтаз празозин вызывает снижение систолического давления на 13%, а диастолического- на 16%, вместе с тем в группе с интактн!й NO-синтазой реакции значительно выше - 33,5% и 35,8%. В условиях блокады Pi-AP, агАР нитроглицерин вызвал снижение систолического артериального давления у крыс с блокадой синтеза N0 на 34,8%, что в 2 раза больше реакции у крыс группы контроль+НГ (15,3%о). Снижение диастолического артериального давления на нитроглицерин под влиянием блокады Pi-АР, ai-АР составило 37%) у крыс с L-NAME, а в группе контроль+НГ изменений не выявлено. Блокада м2-ХР не вызывает существенного изменения систолического и диастолического артериального давления. Однако на фоне полной блокады адрено- и холинорецепторов гипотензивное действие нитроглицерина выражено значительно у крыс с блокадой синтеза оксида азота и снижение систолического и диастолического артериального давления составило соответственно 32% и 35%).

Неселективное ингибирование NOS L-аргининовыми аналогами приводит к вазоконстрикции и повышению АД как у животных [32, 113, 145, 222, 215, 89], так и у человека [258, 140, 133, 69, 173, 211]. Это объясняется вазодилятацией, вызванной продукцией эндотелиального N0 [199]. Однако, прессорный ответ на системное угнетение NOS является частично и результатом активации симпатической нервной системы, нейрональный N0 может вызывать ингибиторное влияние на симпатическую нервную систему. Доказательства этого могут быть суммированы в следующем: 1) Острая фармакологическая ганглиоблокада более значительно увеличивает давление крови при хроническом угнетении NOS введением L-NAME, чем у контрольных животных [89, 232, 236]. Блокада 0-АР на фоне введения L-NAME приводит к более выраженному урежению ЧСС и снижению артериального давления, чем у контрольных животных [89]. 2) Гипертензия, вызванная острым введением L-NAME барорецептор-денервированным кошкам, была устранена подавлением центральных симпатических влияний охлаждением рострального вентролатерального мозга [272].

Разрушение гена эндотелиальной NO-синтазы и фармакологическое подавление образования NOS вызывают умеренную гипертензию [159]. Ингибиторы синтеза N0 вызывают дозозависимое сужение сосудов, а также торможение вазодилятаторного эффекта ацетилхолина и брадикинина у бодрствующих крыс [114] и кроликов [97], овец [254] и собак [80]. В то же время эффекты эндотелийнезависимых вазодилятаторов остаются неизменными, а по данным некоторых авторов [49] они становятся даже более выраженными. Снижение парасимпатической активности и ослабление синтеза оксида азота характеризуют особые сердечно- сосудистые состояния. Совпадение этих двух дефектов может инициировать внезапную смерть и способствует гипертензии в старости [174].

L-NAME понижает кровоток в верхней конечности человека на 50% [49], в надпочечниках - на 56% [264], но в головном мозге - только на 17% [258]. Тот же ингибитор NOS вызывает различную степень сужения сонной, кишечной, бедренной артерий, коронарных и других сосудов [113]. В связи с этим имеют место региональные особенности распределения сердечного выброса, отражающие различную чувствительность локального сосудистого тонуса к N0 в разных областях сосудистого русла организма [113].

N0 вызывает неодинаковую "гетерогенную" вазодилятацию в различных сосудах сердца, что способствует поддержанию нормального распределения их сопротивления кровотоку и сохраняет необходимый потенциал расширения артериол в коронарной микроциркуляции. Эти положения основаны на исследованиях с помощью ингибиторов NOS.

Торможение синтеза N0 препаратом L-NAME приводит к выраженным гетерогенным изменениям базального диаметра коронарных сосудов. Небольшие коронарные артерии сужаются, в то время как артериолы расширяются. Сужение небольших коронарных артерий с помощью L-NAME указывает на то, что базальная, зависимая, по-видимому, от тока жидкости продукция N0 эндотелием сосудов в норме уменьшает тонус этих сосудов. Скорость коронарного кровотока и микроваскулярное сопротивление могут не изменяться под влиянием L-NAME, что указывает на то, что расширение артериол является ауторегуляторным процессом возможно метаболической или миогенной природы.

Интерес представляет факт, что хроническое (в течение нескольких дней или недель) подавление синтеза N0 вызывает стойкое повышение системного АД, подтверждая положение о важной роли N0 в поддержании нормального тонуса сосудов [198, 228, 265]. Было показано в частности, что введение в течение 3 недель L-NAME крысам-самцам вызывает повышение среднего АД на 30-40 мм.рт.ст., а также выраженную гипертонию (170 мм.рт.ст), если тот же ингибитор вводился в течение 4-6 недель [225]. При этом была установлена зависимость степени повышения АД от дозы вводимого ингибитора [226].

Показано, что торможение синтеза N0 и подавление в результате этого вазодилятаторного эффекта ацетилхолина, брадикинина и других эндотелий-зависимых сосудорасширяющих агентов сопровождается повышением вазоконстрикторного действия целого ряда факторов, таких как норадреналин, ангиотензин, вазопрессин [10, 12, 35, 74, 93, 92, 139, 184]. Это создает условия для резкого преобладания сосудосуживающих факторов над сосудорасширяющими в общей регуляции АД. Если учесть, что концентрация многих вазоконстрикторных соединений нередко повышена. при различных формах артериальной гипертонии [11], то отмеченное преобладание их над вазодилятаторными факторами должно становиться еще более выраженным, вызывая дальнейшее повышение тонуса резистивных сосудов и уровня АД, обусловленного дефицитом N0 в эндотелии сосудов. Было показано снижение базального коронарного кровотока после введения L-NNA и L-NMMA в изолированное перфузируемое сердце крыс и морских свинок [256].

Нами установлено, что гипотензивное действие НГ в большей мере проявляется у крыс с блокадой синтеза N0. Хотя есть данные о том, что ингибиторы синтеза N0 не оказывали влияния на эффекты нитропруссида натрия и нитроглицерина [213].

У крыс Wistar-Kyoto L-NAME увеличивает систолическое давление и массу левого желудочка в сравнении с контролем, значительно увеличивая площадь поперечного сечения кардиомиоцитов через 8 недель [231]. Сходная картина наблюдается на изолированных подкожных венах человека, у которых вазоконстрикторная реакция норадреналина увеличена как при угнетении NOS, так и при удалении эндотелия, в то время как ответы на калий не изменились. Эти авторы показали, что N0, продуцируемый эндотелиальными клетками, угнетает сократительные ответы на симпатическую стимуляцию, вероятно действуя на постсинаптическом уровне [102]. У крыс, находящихся в сознании, внутривенное введение L-NAME приводит к повышению выраженности рефлекса "барорецептор-ЧСС", эффект был противоположным при введении нитропруссида натрия [193]. Как и в наших исследованиях, атенолол в эквимолярных концентрациях не вызывал вазоконстрикцию [76].

Высокие дозы L-NMMA связаны со значительным увеличением давления крови, вызванным падением активности симпатического нерва на 61% [133]. Следовательно, снижение симпатической нервной активности происходит благодаря активации барорецепторов, так как не было значимых различий от сходного прессорного ответа на фенилэфрин. Подтверждена значительная модуляция оксидом азота симпатической нервной активности в сравнении с эквивалентно действующими дозами фенилэфрина [173, 211]. Эти данные вместе с результатами экспериментов на животных свидетельствуют, что N0 может действовать как "буфер" активности симпатических нервов у людей.

Увеличение артериального давления и снижение частоты сердечных сокращений при введении Ь-МУ1МА сопровождаются изменением барорефлекторной чувствительности [69].

Показав влияние доноров N0 и блокады его синтеза на регуляцию показателей насосной функции сердца крыс, далее мы исследовали влияние субстрата синтеза N0 - Ь-аргинина и его стереоизомера Б-аргинина на изучаемые показатели.

В наших исследованиях показано, что Ь-аргинин и О-аргинин оказывают бимодальное влияние на ударный объем крови, вызывая его первоначальное снижение, которое сменяется повышением. Ь-аргинин в дозах 50 и 100 мг/кг вызывает максимальное снижение ударного объема крови на 27%. Отрицательные инотропные эффекты Ь-аргинина и Б-аргинина выражены в равной мере и составляют 16,5%-17,5%. Ь-аргинин в дозах 50 и 100 мг/кг вызывает максимальное повышение ударного объема крови на 20% и 34% соответственно. Положительные и отрицательные реакции Ь-аргинина в дозах 50 и 100 мг/кг выражены в равной мере, с увеличением его дозы до 200 мг/кг начинает преобладать положительная реакция ударного объема крови. Положительный инотропный эффект Б-аргинина (49%) выше, чем Ь-аргинина (27,8%).

Ь-аргинин в дозах 50 мг/кг и 100 мг/кг увеличивает минутный объем кровообращения на 24% и 40% соответственно. Однако повышение его дозы до 200 мг/кг не приводит к увеличению положительной реакции, и она составляет 33%. Сопоставление эффектов одинаковых доз Ь-аргинина и Б-аргинина свидетельствует о том, что реакции повышения минутного объема кровообращения выражены примерно в равной мере. Необходимо отметить, что обе изоформы аргинина в дозе 200 мг/кг обладают почти в 2 раза более выраженным положительным действием на минутный объем кровообращения, по сравнению с отрицательным.

Ь-аргинин в дозах 50 и 100 мг/кг снижает систолическое артериальное давление на 28 - 28,5%, а повышение его дозы до 200 мг/кг вызывает максимальное снижение систолического артериального давления на 43%. С увеличением дозы Ь-аргинина его гипотензивное действие начинает проявляться быстрее.

У анестезированных кроликов стимуляция эндогенного синтеза N0 внутривенным введением Ь-аргинина является причиной снижения симпатической активности в шейном отделе и в почечном симпатическом нерве, несмотря на падение давления крови [147].

Следовательно, в зависимости от дозы Ь-аргинина происходит максимальное снижение систолического артериального давления на 28 - 43%, а диастолического артериального давления на 31 - 40%. С увеличением дозы Ь-аргинина гипотензивный эффект достигается быстрее. Как Ь-аргинин, так и И-аргинин в дозах 200 мг/кг обладают гипотензивным действием, причем в первом случае оно выражено в большей мере.

Следует отметить, что в отличие от влияния как Ь-аргинина, так и Б-аргинина на сердце, когда наблюдаются отрицательный и положительный хроно-инотропные эффекты, влияние их на артериальное давление однонаправленно, происходит снижение систолического и диастолического артериального давления.

Установлено, что аргинин влияет на фазовую структуру сердечного цикла и длительность периода изгнания крови из левого желудочка сердца изменяется бимодально - увеличивается на первых минутах после введения, а начиная с 10 минуты происходит ее уменьшение. Ь-аргинин в дозе 50 мг/кг вызывает уменьшение периода изгнания крови на 8,3%, с увеличением дозы до 100 мг/кг реакция возрастает до 16%, а максимальное уменьшение на 20% происходит на введение Ь-аргинина в дозе 200 мг/кг. В-аргинин в дозе 200 мг/кг также приводит к уменьшению периода изгнания крови на 16,7%, т.е. реакция не отличается от изменений, вызываемых его изомером L-аргинином в той же дозе.

Протекторный эффект L-аргинина против кислородных радикалов, индуцирующих повреждение миокарда, обычно предполагается через стимуляцию активности NOS, исходя из увеличения доступности субстрата. Однако, результаты указывают на протекторный эффект L-аргинина, связанный с его возможностью нейтрализовать кислородные радикалы. Это заключение базируется на следующих основаниях. Во-первых, блокада NOS и другие дериваты L-аргинина были сходно эффективны в защите сердца и нейтрализации радикалов. Во-вторых, D-аргинин, который не является субстратом синтеза N0, аналогично защищал сердце и нейтрализовал радикалы. В-третьих, аминокислота глицин не предотвратила вызванную кислородом дисфункцию сократимости миокарда, и не проявила нейтрализующую кислородные радикалы способность. Наконец, радикал-нейтрализующая способность L-аргинина была показана ЭПР спектроскопией, с использованием специфической для кислорода ловушки [94].

Однако показано, что реакция L-аргинина является внеклеточной, потому что и L- и D-аргинин вызывали аналогичную защиту сердца, которая не ожидалась бы в случае внутриклеточного взаимодействия, так как только L-аргинин, но не D-аргинин транспортируется в клетки [233]. По этой причине, D-аргинин не является полезным контролем в экспериментах in vivo, чтобы показать, что эффекты L-аргинина происходят при активации NOS. Несмотря на это, предполагается, что L-аргинин, вошедший в клетки, проявляет свое действие внутриклеточно, тогда как D-аргинин имеет внеклеточный защитный эффект. Существующие результаты свидетельствуют, что L-аргинин может действовать, устраняя радикалы в биологических системах [266]. Супероксид анион синтезируется при недостатке аргинина [27].

Совсем недавно всеми признавалось, что N0 вызывает отрицательный инотропный эффект препаратов сердца, опосредованный преимущественно цГМФ-связанным механизмом, через уменьшение поступления Са" через Lтип Са -каналов, или через активацию цГМФ-зависимой фосфодиэстеразы или ПКГ и/или фосфатаз. Однако, в некоторых условиях доноры N0 способны повышать сократимость миокарда [196]. Было показано, что усиление сократимости экзогенным N0 может быть результатом увеличения внутриклеточного уровня цАМФ за счет цГМФ-зависимого угнетения гидролиза цАМФ цГМФ-угнетающей фосфодиэстеразой (цГЦ-ФДЭ или ФДЭ типа 111).

Miyamoto et al., [194] установили, что в эндотелиальных клетках N0 может избирательно ингибировать G-белки- Gi и Gq семейств, но не Gs и что модуляция G белков может действовать на связь Gs-аденилатциклаза. Таким образом, исследование этого вопроса о потенциирующей модуляции оксидом азота G-связанного сигнального пути в кардиомиоцитах может прямо доказывать, как N0 может активировать аденилатциклазу и вызывать положительный инотропный эффект.

Выявленное нами увеличение УОК на 40-50 минутах после введения L-аргинина вероятно связано с начинающимся увеличением освобождения оксида азота, а через некоторое время - к 60-70 минутам его освобождение, вероятно, становится значительным и развивается снижение ударного объема.

Другим механизмом увеличения УОК может быть выявленная десенсибилизация сердечных миофиламентов, ведущая к увеличению диастолической длины волокон под влиянием N0, что показано на изолированных кардиомиоцитах [169]. На уровне целого органа [127] это способствует увеличению диастолического резерва и также реализации механизма Франка-Старлинга в ответ на увеличение преднагрузки через растяжение кардиомиоцита.

В экспериментах на изолированном перфузируемом сердце крыс инфузия непосредственно в коронарную артерию нитропруссида натрия, а также L— аргинина вызывала значительное увеличение амплитуды и скорости сокращения сердца [13]. Следует иметь в виду, что коронарный эндотелий имеет доступ ко всему миокарду, в котором происходит тесное соприкосновение капилляров и миоцитов. Описанный инотропный эффект коронарного эндотелия (N0) на миокард устанавливает связь между более ранними и более поздними данными об инотропном эффекте коронарного кровотока и давления крови в коронарных сосудах на сократимость миокарда [126].

Ь-аргинин и доноры N0 обладают кардиопротекторным действием, уменьшая опосредованное реактивными • формами кислорода повреждение тканей [73, 168]. Увеличенная биодоступность N0 может предотвратить активацию провоспалительных эндотелиальных факторов при помощи блокирования ядерного фактора транскрипции № ЗВ, таким образом, предотвращая адгезию молекул на поверхности эндотелия [51].

Б-аргинин также как блокатор синтеза оксида азота, типа К(0)-т1то-Ь-аг§тте, обладают кардиопротекторным эффектом за счет прямого взаимодействия Ь-аргинина и его производных с кислородными радикалами [168, 250]. Показано, что внутривенное введение Ь-аргинина в дозе 300 мг/кг повысило ЧСС на 10% и уменьшило насыщение кислородом гемоглобина венозной крови на 23% без изменений артериального давления. Действие Б-аргинина в дозе 300 мг/кг было аналогичным. Кроме того, не было обнаружено никаких различий между эффектами Ь- и Б-изомеров, их эффекты не стереоспецифичны [253].

Следовательно, в наших исследованиях установлено бимодальное действие обоих изомеров Ь- и Б-аргинина на хронотропную, инотропную функцию сердца и фазовую структуру сердечного цикла. Причем эффекты аргинина на частоту сердечных сокращений, минутный объем кровообращения и ударный объем крови могут иметь два механизма реализации - его непосредственное влияние на клетки, а также за счет увеличения выработки N0. Влияние как Ь- аргинина, так и Б-аргинина на артериальное давление однонаправленное, вызывает его снижение. Эти результаты свидетельствуют еще .раз о том, что эффект действия N0 зависит от его количества - и может обладать как протекторными свойствами, так и провоцировать нарушения насосной функции сердца.

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют о том, что оксид азота оказывает выраженное влияние на все показатели насосной функции сердца крыс. Его действие реализуется через различные подтипы адренергических и холинергических рецепторов. Причем впервые установлено, что отрицательные инотропные и хронотропные влияния доноров оксида азота на сердце крыс реализуются через угнетение адренергических влияний, реализуемых (Зь арадренорецепторами и активацию холинергических, которые реализуются через м2-холинорецепторы.

135

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Насырова, Аида Гайдаровна, Казань

1. Абзалов P.A. Влияние десимпатизации гуанетидином на функции сердца крысят / Абзалов P.A., Ситдиков Ф.Г. // Бюлл. эксперим. биол. и мед.-1986.-№2.- С. 141-144.

2. Акулова Ф.Д. Реография. Инструментальные методы исследования сердечно-сосудистой системы / Акулова Ф.Д. // М.: Медицина, 1986.- С. 340-363.

3. Галаган М.Е. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо- и эндогенных источников / Галаган М.Е., Широколава A.B., Ванин А.Ф. // Вопросы медицинской химии.- 1991.- № 37(1).- С. 67-70.

4. Гильмутдинова Р.И. Влияние экзогенных норадреналина и ацетилхолина на сердце крысят, развивающихся при различных двигательных режимах / Гильмутдинова Р.И. // Автореф. дис. .канд. биол. наук.- Казань, 1991.

5. Зефиров A.JI. Эффекты экзогенного N0 на секрецию медиатора и ионные токи двигательного нервного окончания / Зефиров A.JL, Халиуллина P.P., Анучин A.A. //Бюлл. экспер. биол. и мед.- 1999.- т. 128,- № 8.- С. 144-147.

6. Зефиров Т.Л. Влияние избирательной ваготомии на вариационную пульсограмму сердца крысы при блокаде м-холино- и ß-адренорецепторов / Зефиров Т.Л., Ситдиков Ф.Г., Гайнуллин A.A. // Успехи физиол. наук. -1994.-т. 25.-№3,-С. 19.

7. Зефиров Т.Л. Возрастные особенности вагусной регуляции хронотропной функции сердца десимпатизированных и интактных крыс / Зефиров Т.Л., Святова Н.В. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1997. - № 6. - С. 703-706.

8. Зефиров Т.Л. Влияние ваготомии на ритм сердца интактных и десимпатизированных крыс разного возраста / Зефиров Т.Л., Святова Н.В. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1997. - № 7 - С. 21-25.

9. Ю.Манухина Е.Б. Защитный эффект ингибитора NO-синтазы при тепловом шоке / Манухина Е.Б., Покидышев Д.А., Голубева Л.Ю. и др. // Изв. РАН. Сер. биол,- 1996.- №5.- С. 583-586.

10. П.Марков Х.М. Патофизиология артериальной гипертонии / Марков Х.М. // София: Медицина и физкультура, 1970.- 375 с.

11. Марков Х.М. N0 и СО новый класс сигнальных молекул / Марков Х.М. // Успехи физиол. наук.- 1996.- т. 27.- №4,- С. 30-43.

12. З.Марков Х.М. Оксид азота и сердечно-сосудистая система / Марков Х.М. // Успехи физиол. наук.- 2001.- т. 32.- №3.- С. 49-65.

13. Надирашвили С.А. Функциональная роль монооксида азота и пуринов / Надирашвили С.А., Марков Х.М., Полещук B.C. и др. // Минск, 2001.- С. 125-127.

14. Нигматуллина P.P. Сердечный выброс в онтогенезе у крысят / Нигматуллина P.P., Ситдиков Ф.Г., Абзалов P.A. // Физиол. журн. СССР.-1988.-№7.- С. 965-969.

15. Нигматуллина P.P. Регуляция сердечного выброса у крыс, развивающихся в условиях различных двигательных режимов / Нигматуллина P.P. // Автореф. дис. .канд. биол. наук.- Казань, 1991.

16. Нигматуллина P.P. Показатели сердечного выброса развивающихся крыс при блокаде альфа1- и бета-адренорецепторов / Нигматуллина P.P., Абзалов P.A., Миннибаев Э.Ш. // Бюлл. эксперим. биол. и мед.- 1999.- №6.-С. 638-641.

17. Нигматуллина P.P. Особенности адренергической и холинергической регуляции сердечного выброса развивающегося организма / Нигматуллина P.P., Абзалов P.A., Кулаев Б.С. // Журнал эволюционной физиологии и биохимии.- 1999.- №5.- С. 405-412.

18. Пушкарь Ю.Т. Автоматизированное определение минутного объема крови методом реографии / Пушкарь Ю.Т., Цветков A.A., Хеймец Г.И. // Бюлл. Всесоюзного кардиол. научн. центра АМН СССР.- 1980.- №1.- С. 45-48.

19. Пушкарь Ю.Т. Возможности и перспективы развития реографических методов для изучения системы кровообращения / Пушкарь Ю.Т., Подгорный В.Ф., Хеймец Г.И. и др. // Тер. архив.- 1986.- т. 58.- №11.- С. 132-135.

20. Святова Н.В. Регуляция хронотропной функции сердца десимпатизи-рованных крыс в постэмбриональном онтогенезе / Святова Н.В. // Автореф. дис. .канд. биол. наук.- Казань, 1997.

21. Ситдиков Ф.Г. Особенности адренергической и холинерги ческой регуляции сердца крысят / Ситдиков Ф.Г., Гильмутдинова Р.И., Аникина Т.А. и др. // XVII съезд Всероссийского физиологического общества им. И.П. Павлова.-Ростов-на-Дону, 1998.- С. 318.

22. Сосунов A.A. Оксид азота как межклеточный посредник / Сосунов A.A. // Соросовский образовательный журнал.- 2000.- т. 6.- №12.

23. Суворова Т.А. Функциональный ответ изолированного сердца на стимуляцию адрено- и холинорецепторов в условиях блокады NO- синтаз / Суворова Т.А., Лобанок Л.М. // Функциональная роль монооксида азота и пуринов.- Минск, Бизнесофсет, 2001.- С. 175.

24. Уразаев А.Х. Физиологическая роль оксида азота / Уразаев А.Х., Зефиров АЛ. // Успехи физиол. наук.- 1999.- т. 30,- №1.- С. 54-72.

25. Ahlquist R.P. Study of adrenotropic receptors / Ahlquist R.P. // Am. J. Physiol.-1948.- v. 153.- № 6.- P. 586-600.

26. Ahmad Z. Autonomic regulation of type I protein phosphatase in cardiac muscle / Ahmad Z., Green F.J., Subuhi H.S., Watanabe A.M. // Biol. Chem.- 1989.- v. 264.- P. 3859-3863.

27. Amerzcua J.L. Nitric oxide synthesized from L-arginine regulates vascular tone in the coronary circulation of the rabbit / Amerzcua J.L., Palmer R.M.J., Moncada S. // Brit.J.Pharmacol.- 1989.- v. 97.- P. 1119-1124.'

28. Andrew P.J. Enzymatic function of nitric oxide synthases / Andrew P.J. and Mayer B. // Cardiovasc. Res.- 1999.- v. 43.- P. 521-531.

29. Archer S.L. Comparison of hemodynamic effects of nitric oxide and endothelium-dependent vasodilatators / Archer S.L., Rist K., Nelson D.P. et al. // J. Appl. Physiol.- 1990.- v. 68.- P. 737- 747.

30. Ashley E.A. Cardiac nitric oxide synthase 1 regulates basal and |3-adrenergic contractility in murine ventricular myocytes / Ashley E.A., Sears C.E., Bryant S.M. et al. // Circulation.- 2002.- v. 105.- P. 3011-3016.

31. Balligand J.-L. Control of cardiac muscle cell function by an endogenous nitric oxide signaling system / Balligand J.-L., Kelly R.A., Marsden P.A. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.- 1993.- v. 90.- P. 347-351.

32. Balligand J.-L. Cellular localisation of endothelial constitutive nitric oxide synthase in ventricular myocytes from rat and human heart / Balligand J.-L., Kobzik L., Kelly R.A. // Circulation.- 1995.- v. 92 (Suppl.l).- P. 1-565.

33. Balligand J.L. Nitric oxide synthases and cardiac muscle. Autocrine and paracrine influences / Balligand J.L, Cannon P.J. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol.- 1997.-v. 17.-P. 24-35.

34. Balligand J.-L. Regulation of cardiac b-adrenergic response by nitric oxide / Balligand J.-L. // Cardiovasc. Res.- 1999.- v. 43.- P. 607-620.

35. Barouch L.A. Nitric oxide regulates the heart by spatial confinement of nitric oxide synthase isoforms / Barouch L.A., Harrison R.W., Skaf M.W. et al. // Nature.- 2002.- v. 416.- 337-339.

36. Bartunek J. Dobutamine enhances cardiodepressant effects of receptor mediated coronary endothelial stimulation / Bartunek J., Shah A., Vanderheyden M., et al. // Circulation.- 1991.- v. 95.- P. 90-96.

37. Bassenge E. Endothelial and neurohumoral control of coronary blood flow in health and disease / Bassenge E., Hensch G. // Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol.- 1990.-v. 116.-P. 79-165.

38. Baydoun R. Substrate-dependent regulation of intracellular amino acid concentrations in cultured bovine aortic endothelial cells / Baydoun R., Emery P., Pearson J., Mann G. // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1990.- v. 173.- P. 940-948.

39. Belhassen L. Regulation of NOS3 transcription in vitro and in vivo by cyclic adenosine monophosphate in rat cardiac myocytes / Belhassen L., Kelly R.A.,

40. Smith T.W. and Balligand J.L. // J. Clin. Invest.- 1996.- v. 97.- P. 1908-1915.

41. Bellan J. Nw-nitro-L-arginine inhibits vasodilator responses to acetylcholine and bradykinin in cats / Bellan J., Minces R., McNamara D. et al. // Amer. J. Physiol.- 1991. v. 280.- P. H1025-H1029.

42. Bers D. Excilation-contracfion coupling and cardiac contractile force / Bers D. // 2nd ed. Dordrecht, Netherlands: Kluwer Academic Publishers, 2001.

43. Blum A. Oral L-arginine in patients with coronary artery disease on medical management / Blum A., Hathaway L., Mincemoyer R. et al. // Circulation.-2000,- v. 101.-P. 2160-2170.

44. Bode-Boger S.M. L-arginine infusion decreases peripheral arterial resistance and inhibits platelet aggregation in healthy subjects / Bode-Boger S.M., Boger R.H., CreutzigA. et al.//Clin. Sci.- 1994.-v. 87.-P. 303-310.

45. Boger R.H. Supplementation of hypercholesterolaemic rabbits with L-arginine reduces the vascular release of superoxide anions and restores NO production / Boger R.H., Bode-Boger S.M., Mugge A. et al. // Atherosclerosis.- 1995.- v. 117.-P. 273-284.

46. Bohm M. Coupling of M-cholinoceptors and Al adenosine receptors in human myocardium / Bohm M., Gierschik P., Schwinger R.H. et al. // Am. J. PhysioL-1994.- v. 266 (5 Pt 2).- P. 1951-1958.

47. Boron W.F., Boulpaep L. Medical physiology. A cellular and molecular approach. The cardiovascular system / Boron W.F., Boulpaep L. // Philadelphia, London, New York, St. Lous, Sydney, Toronto, 2003,- P. 421-590.

48. Brady A. Nitric oxide production within cardiac myocytes reduces their contractility in endotoxemia / Brady A., Poole-Wilson P., Harding S., Warren J. // Am. J. Physiol.- 1992.- v. 263.- P. H1963-H1966.

49. Brady A. Nitric oxide attenuates cardiac myocyte contraction / Brady A., Warren J., Poole-Wilson P., Williams T., Harding S. // Am. J. Physiol.- 1993.- v. 265.-P. H176-H182.

50. Bredt D.S. Isolation of nitric oxide synthetase, a calmodulin-requiring enzyme / Bredt D.S., Snyder S.H. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1990.- v. 87,- P.682-685.

51. Brunner F. Role of endothelin, nitric oxide and L-arginine release in ischaemia/reperfiision injury of rat heart / Brunner F., Leonhard B., Kukovetz W.R. and Mayer B. // Cardiovasc. Res.- 1997.- v. 36.- P. 60-66.

52. Brunner F. Myocardial contractile function and heart rate in mice with myocyte-specific overexpression of endothelial nitric oxide synthase / Brunner F., Andrew P., Wolcart G. et al. // Circulation.- 2001.- v. 104,- P. 3097-3102.

53. Brutsaert D.L. Effects of damaging of endocardial surface on the mechanical performance of isolated cardiac muscle / Brutsaert D.L., Meulemans A.L., Sipido K.R. et al. // Circul. Res.- 1988.- v. 62.- P. 357-366.

54. Brutsaert D.L. The endocardial endothelium / Brutsaert D.L., Andries L.J. // Amer. J. Physiol.- 1992.- v. 263.- P. H985-H1002.

55. Brutsaert D.L. Cardiac endothelial-myocardial signaling: its role in cardiac growth, contractile performance, and rhythmicity / Brutsaert D.L. // Physiol. Rev.- 2003.- v. 83.-№1.-P. 59-115.

56. Buga G. Arginase activity in endothelial cells: inhibition by //"-hydroxy-L-arginine during high-output NO production / Buga G., Singh R., Pervin S. et al.//Am. J. Physiol.- 1996.- v. 271.- P. H1988-H1998.

57. Buxton I.L. NG-Nitro-L-arginine methyl ester and other alkyl esters of arginine are muscarinic receptor antagonists / Buxton I.L., Cheek D J., Eckman D. et al. // Circ. Res.- 1993.- v. 72.- P. 387-395.

58. Calver A. Nitric oxide and cardiovascular control. Review / Calver A., Collier J., Vallance P. // Exp. Physiol.- 1993.- v. 78.- №3.- P. 303-326.

59. Casadei B. Nitric-oxide-mediated regulation of cardiac contractility and stretch responses / Casadei B., Sears C.E. // Prog. Biophys. Mol. Biol.- 2003,- v. 82.- P. 67-80.

60. Casolo G. Decreased spontaneous heart rate variability in congestive heart failure / Casolo G., Balli E., Taddei T., Amuhasi J. and Gori C. // Am. J. Cardiol.- 1989.-v. 64.-P. 1162-1167.

61. CawIey T.A. Effect of chronic neuroleptic treatment on central and peripheral muscarinic receptors / Cawley T.A., Shickley T.J., Ruggieri M.R. et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993.- v. 267.- № 1.- P. 134-139.

62. Ceremuzynski L. Effect of supplemental oral L-arginine on exercise capacity in patients with stable angina pectoris /Ceremuzynski L., Chamiec T., Herbaczynska-Cedro K. // Am. J. Cardiol.- 1997,- v. 80.- P. 331-333.

63. Chan J. Reduced functional expression and molecular synthesis of inducible nitric oxide synthase in rostral ventrolateral medulla of spontaneously hypertensive rats /Chan J., Wang L., Wu K., Chan S.//Circulation.-2001.- v. 104,- P. 1676.

64. Chen Y J. Effect of nitric oxide on strophanthidin-induced ventricular tachycardia / Chen Y.J., Tsai C.F., Chiou C.W., Chan P., Chen S.A. // Pharmacology.- 2001.- v. 62.- №4.- P. 213-217.

65. Cherry P. The role of endothelial cells in the relaxation of isolated arteries by bradykinin / Cherry P., Furchgott R.F., Zavadski I.V. et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 1982. v. 79.- P. 2106-2110.

66. Chin-Dusting J.P. Effects of in vivo and in vitro L-arginine supplementation on healthy human vessels / Chin-Dusting J.P., Alexander C.T., Arnold P.J. et al. // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1996.- v. 28.- P. 158-166.

67. Chlopincki S. NO-dependent vasodilatation induced by nebivolol in coronary circulation is not mediated by ß- adrenoceptors or by 5-HT)A-receptors / Chlopincki S., Kozlovski V.I, Gryglewski R. // J. Physiol. Pharmacol.- 2002.- v. 53.-P. 615-624.

68. Choate J. Effect of sodium nitroprusside and 8-bromo-cyclic GMP on the sympathetic control of heart rate and contraction in the isolated guinea-pig atria / Choate J., Paterson D. //J. Physiol. (London).- 1998.- v. 509.- P. 120P-121P.

69. Choate J. Nitric oxide inhibits the positive chronotropic and inotropic responses to sympathetic nerve stimulation in the isolated guinea-pig atria / Choate J., Paterson D. // J. Auton. Nerv. Syst.- 1999.- v. 75.- P. 100-108.

70. Choate J. Peripheral vagal control of heart rate is impaired in neuronal NOS knockout mice / Choate J., Danson E., Morris J., Paterson D. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol.- 2001,- v. 281.- №6.- P. H2310-H2317.

71. Chu A. Nitric oxide modulates epicardial coronary basal vasomotor tone in awake dogs / Chu A., Chamberas D.E., Lin C.C. et al. // Amer. J. Physiol.-1990,- v. 358.- P. H1250-H1254.

72. Clarkson P. Oral L-arginine improves endothelium-dependent dilation in hypercholesterolemic young adults / Clarkson P., Adams M.R., Powe A.J. et al. //J. Clin. Invest.- 1996.- v. 97.- P. 1989-1994.

73. Cohn J.N. Plasma norepinephrine as a guide to prognosis in patients with chronic congestive heart failure / Cohn J.N., Levine T.B., Olivari M.T. et al. // N. Engl. J. Med.- 1984.- v. 311.- P. 819-823.

74. Conlon K. Modulation of vagal actions on heart rate produced by inhibition of nitric oxide synthase in the anaesthetized ferret / Conlon K., Collins T. and Kidd C. //Exp. Physiol.- 1996.- v. 81.- P. 547-550.

75. Conlon K. Nitric oxide synthase inhibits the cardioaccelerator rate response to sympathetic stimulation in the anaesthetized ferret / Conlon K., Kidd C. and Collins T. // J. Physiol. (London).- 1998.- v. 509,- P. 122P-123P.

76. Costa P. Lack of m2 muscarinic acetylcholine receptor mRNA in rat lymphocytes / Costa P., Costoldi A.F., Traver D.J. et al. // J. Neuroimmunol.-1994.- v. 49.- №12.- P. 115-124.

77. Cotton J. Effects of nitric oxide synthase inhibition on basal function and the force-frequency relationship in the normal and failing human heart in vivo / Cotton J., Kearney M., MacCarthy P. et al. // Circulation.- 2001.- v. 104.- P. 2318-2323.

78. Creager M.A. Impaired vasodilation of forearm resistance vessels in hypercholesterolemic humans / Creager M.A., Cooke J.P., Mendelsohn M.E. et al. // J. Clin. Invest.- 1990.- v. 86.- P. 228-234.

79. Cui Y. Identification and functional role of P-adrenergic receptor subtypes in primate and rodent: in vivo versus isolated myocytes / Cui Y., Shen Y.T., Kalthof B. et al. // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1996.-v. 28,-P. 1307-1317.

80. Cunha R.S. Evidence that the autonomic nervous system plays a major role in the L-NAME-induced hypertension in conscious rats / Cunha R.S., Cabral A.M. and Vasquez E.C. // Am. J. Hypertens.- 1993.- v. 6.- P. 806-809.

81. De Bolder AJ. Nitric oxide and the pathogenesis of heart muscle disease / De Bolder A J., Radomski M.W., Martin J.F. et al. // Eur. J. Clin. Fnwil.- 1995.- v. 25.-P. 1-8.

82. De Bruyne B. Comparative effects of ischemia and hypoxemia on left ventricular systolic and diastolic function in man / De Bruyne B., Bronzwaer J.G.H., Heyndricux G.P. et al. // Circulation.- 1993.- v. 88,- P. 461-471.

83. De Nicola L. Nitric oxide and angiotensin 11. Glomerular and tubular interaction in the rat / De Nicola L., Blantz R.C., Cubbai F.B. // J. Clin. Invest.- 1992.- v. 89.-P. 1248-1256.

84. Drexler H. Correction of endothelial dysfunction in coronary microcirculation of hypercholesterolaemic patients by L-arginine / Drexler H., Zeiher A.M., Meinzer K. and Just H.//Lancet.- 1991.-v. 338.-P. 1546-1550.

85. Drexler H. Endothelial function in congestive heart failure / Drexler H., Hayoz D., Munzel T. et al. // Am. Heart J.- 1993,- v. 126.- P. 761-764.

86. Du Z.Y. Haemodynamic responses of N-nitro-L-arginine in conscious rabbit / Du Z.Y., Dusting G.I., Woodman D.L. // Clin. Exp. Pharm. Physiol.- 1991.- v. 18.-P. 371-374.

87. Eltze M. Involvement of muscarinic M2 and M3, but not of Ml and M4 receptors in vagally stimulated contractions of rabbit bronchus-trachea / Eltze M., Galvan M. // Pulm. Pharmacol. 1994.- v. 7.- № 2.- P. 102-120.

88. Elvan A. NO modulates autonomic effects on sinus discharge rate and AV nodal conduction in open-chest dogs / Elvan A., Rubart M. and Zipes D. // Am. J. Physiol. -1997.- v. 272.- P. H263-H271.

89. Endoh M. Cardiac al- adrenoceptors that regulate contractile function: subtypes and subcellular signal transduction mechanisms / Endoh M. // Neurochem. Res.- 1996.- v. 21.- № 2.- P. 217-229.

90. Eu J.P. The skeletal muscle calcium release channel: coupled 02 sensor and NO signaling functions / Eu J.P., Sun J., Xu L., Stamler J.S., Meissner G. // Cell.- 2000.- v. 102.- P. 499-509.

91. Fabi F. Nitric oxide-dependent and -independent modulation of sympathetic vasoconstriction in the human saphenous vein / Fabi F., Argiolas L., Chiavarelli M. and Del B.P. // Eur. J. Pharmacol.- 1996.- v. 309.- P. 41-50.

92. Ferrari AU. Modulation of parasympathetic and baroreceptor control of heart rate. Review / Ferrari AU. // Cardioscience.- 1993.- v. 4.- №1.- P. 9-13.

93. Fleming J.W. Muscarinic receptor regulation of cardiac adenylate cyclase activity / Fleming J.W., Strawbridge R.A., Watanabe A.M. // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1987.- v. 19.- P. 47-61.

94. Flesch M. Acute effects of nitric oxide and cyclic GMP on human myocardial contractility / Flesch M.5 Kilter H., Cremers B. et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther.-1997.-v. 281.-P. 1340-1349.

95. Flogel U. Myoglobin: a scavenger of bioactive NO / Flogel U., Merx M.W., Godecke A. et al.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2001.- v. 98.- P. 735-740.

96. Forstermann U. Nitric oxide synthase isozymes. Characterization, purification, molecular cloning, and functions / Forstermann U., Closs E.I., Pollock J.S. et al. // Hypertension (Dallas).- 1994.- № 23.- P. 1121 -1131.

97. Gaballa M.A. Effects of endothelial and inducible nitric oxide synthases inhibition on circulatory function in rats after myocardial infarction / Gaballa M.A., Raya T.E., Hoover C.A., Goldman S. // Cardiovasc. Res.- 1999.- v. 42.- P. 627-635.

98. Gallo M.P. Modulation of guinea-pig cardiac L-type calcium current by nitric oxide synthase inhibitors / Gallo M.P., Ghigo D., Bosia A. et al. // J. Physiol. (London).- 1998.- v. 506.- P. 639-651.

99. Gardiner S.M. Regional and cardiac haemodynamic effects of NG- nitro-L-arginine methyl ester in conscious rats / Gallo M.P., Ghigo D., Bosia A. et al. // Brit. J. Pharmacol.- 1990.- v. 101,-P. 625-631.

100. Gardiner S. Control of regional blood flow by endothelium-derived nitric oxide / Gardiner S., Compton A., Bennett T., Palmer R. and Moncada S. // Hypertension.- 1990.- v. 15,- P. 486-492.

101. George W.J. Elevation of guanosine 3-,5-cyclic phosphate in rat heart after perfusion with acetylcholine / George W.J., Polso J.B., O'Toole A.G. and Goldberg N.D. //Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.- 1970.- v. 66.- P. 398-403.

102. Giraldelo C. Effect of arginine analogues on rat hind paw oedema and mast cell activation in vitro / Giraldelo C., Zappellini A., Muscara M. et al. // Eur. J. Pharmacol.- 1994.- v. 257.- P. 87-93.

103. Giugliano D. Abnormal rheologic effects of glyceryl trinitrine in patients with non-insulin-dependent diabetes mellitus and its reversal by antioxidants / Giugliano D., Marfella R., Varrozzo G. et al. // Ann. Intern. Med.- 1995.- v. 123.-P. 338-343.

104. Giugliano D. The vascular effects of L-arginine in humans / Giugliano D., Marfella R., Verrazzo G. et al. // J. Clin. Invest.- 1997.- v. 99.- № 3.- P. 433-438.

105. Godecke A. Inotropic response to ß-adrenergic receptor stimulation and anti-adrenergic effect to Ach in endothelial NO synthase-deficient mouse hearts / Godecke A., Heinicke T., Kamkin A. et al. // J. Physiol.- 2001,- v. 532,- P. 195204.

106. Gold M. Depletion of arterial L-arginine causes reversible tolerance to endothelium-dependent relaxation / Gold M., Bush B., Ignarro L. // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1989.- v. 164.- P. 714-721.

107. Goldmann P.S. Differential role of the carboxyl-terminal tyrosine in down-regulation and sequestration of the m2 muscarinic acetylcholine receptor / Goldmann P.S., Nathanson N.M. // J. Biol. Chem.- 1994.- v. 269.- № 22.- P. 15640-15645.

108. Gordon J.B. Atherosclerotic influences the vasomotor response to epicardial coronary arteries to exercise / Gordon J.B., Ganz P., Nabel E.G. et al. // J. Clin. Invest.- 1989.- v. 83.-P.1946-1952.

109. Greenberg S.S. Release of norepinephrine from adrenergic nerve endings of blood vessels is modulated by endothelium-derived relaxing factor / Greenberg S.S., Diecke F.P., Peevy K. and Tanaka T.P. // Am. J. Hypertens.- 1990.- v. 3.-P. 211-218.

110. Greenberg S.S. Inhibition of sympathetic neurotransmitter release by modulators of cyclic GMP in canine vascular smooth muscle / Greenberg S.S., Diecke F.P., Cantor E., Peevy K. and Tanaka T.P. // Eur. J. Pharmacol.- 1990a.-v. 187.-P. 409-423.

111. Gregg D.E. Effect of coronary perfusion pressure or coronary flow on oxygen usage of the myocardium / Gregg D.E. // Circul. Res.- 1992.- v. 70.- P. 754-760.

112. Grocott-Mason R. Modulation of left ventricular relaxation in isolated ejecting heart by endogenous nitric oxide / Grocott-Mason R., Anning P., Evans H. et al. // Am. J. Physiol.- 1994.- v. 267.- P. HI804-1813.

113. Gyurko R. Modulation of mouse cardiac function in vivo by eNOS and ANP / Gyurko R., Kuhlencordt P., Fishman M. et al. // Am. J. Physiol.- 2000.- v. 278,-P. H971-H981.

114. Han X. An obligatory role for nitric oxide in autonomic control of mammalian heart rate / Han X., Shimoni Y. and Giles W. // J. Physiol. (London).- 1994.- v. 476.-P. 309-314.

115. Han X. Nitric oxide synthase (NOS3)-mediated cholinergic modulation of Ca2+ current in adult rabbit atrioventricular nodal cells / Han X., Kobzik L., .Balligand J., Kelly R., Smith T. // Circ. Res.- 1996,- v. 78.- P. 998-1008.

116. Han X. Muscarinic cholinergic regulation of cardiac myocyte ICa-L is absent in mice with targeted disruption of endothelial nitric oxide synthase / Han X., Kubota I., Feron O. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1998.- v. 95.- P. 65106515.

117. Hansen J. Is nitric oxide involved in the tonic inhibition of central sympathetic outflow in humans? / Hansen J., Jacobsen T.N. and Victor R.G. // Hypertension.-1994.- v. 24.-P. 439-444.

118. Hare J.M. Inhibition of nitric oxide synthase potentiates the positive inotropic response to P-adrenergic stimulation in normal dogs / Hare J.M., Keaney J.F., Kelly R.A. et al. // Circulation.- 1993.- v. 88 (suppl I).- P. 1901-1905.

119. Hare J.M. Nitric oxide inhibit the positive inotropic response to P-adrenergic stimulation in humans with left ventricular dysfunction / Hare J.M., Lh E., Creager M.A., Colucci W.S. // Circulation.- 1995.- v. 92.- P. 2198-2203.

120. Hare J.M. Contribution of caveolin protein abundance to augmented nitric oxide signaling in conscious dogs with pacing-induced heart failure / Hare J.M., Lofthouse R.A., Juang G.J. et al. // Circ. Res.- 2000.- v. 86.- P. 1085-1092.

121. Hasumuma K. Effect of inhibitors of EDFR on the vasoreactivity / Hasumuma K., Yamaguchi T., Rodman D.M. et al. // Amer. J. Physiol.- 1991.- v. 260.- P. L97-L104.

122. Haynes W.G. Inhibition of nitric oxide synthesis increases blood pressure in healthy humans / Haynes W.G., Noon J.P., Walker B.R. and Webb D.J.// J. Hypertens.- 1993,-v. 11.-P. 1375-1380.'

123. Hazeki O. Modification by islet-activating protein of receptor-mediated regulation of cAMP accumulation in isolated rat heart cells / Hazelci O., Ui M. // J. Biol. Chem.- 1981.- v. 256.- P. 2856-2862.

124. Herring N. Nitric oxide- cGMP pathway facilitates acetylcholine release and bradycardia during during vagal nerve stimulation in the guinea-pig in vitro / Herring N., Paterson D.J. //J. Physiol.- 2001.- v. 535.- P. 507-518.

125. Hishicawa K. Transmural pressure inhibits nitric oxide release from human endothelium / Hishicawa K., Nadaki T., Suzuki E et al. // Eur. J. Pharmacol. 1992.- v. 215.- P. 329-331.

126. Hoover D.B. Localization of muscarinic receptor MRNAs in rat heart and intrinsic cardiac ganglia by in situ hybridization / Hoover D.B., Baisden R.H., Xi-Moy S.X. // Circ. Res.- 1994.- v. 75.- № 5,- P. 813-820.

127. Huang M. Systemic and regional hemodynamics after nitric oxide synthase inhibition: role of a neurogenic mechanism / Huang M., Leblanc M.L. and

128. Hester R.L. // Am. J. Physiol.- 1994.- v. 267.- P. R84-R88.

129. Imaizumi T. Effects of L-arginine on forearm vessels and responses to acetylcholine / Imaizumi T., Hirooka Y., Masaki H. // Hypertension (Dallas).-1992.- v. 20.- P. 511-517.

130. Jimbo M. Role of nitric oxide in regulation of baroreceptor reflex / Jimbo M., Suzuki H., Ichikawa M. et al. // J. Auton. Nerv. Syst.- 1994.- v. 50.- P. 209-219.

131. Juberg E.N. (31- and J32-adrenoceptor binding and functional response in right and left atria of rat heart / Juberg E.N., Minneman K.P., Abel P.W. // Naunyn-Schmiedebergs Arch. Pharmacol.- 1985.- v. 330.- P. 193-202.

132. Katz S. Decreased activity of the L-arginine-nitric oxide metabolic pathway in patients with congestive heart failure / Katz S., Khan T., Zeballos G. et al. // Circulation.- 1999,- v. 99.- P. 2113-2117.

133. Kaye D.M. Adverse consequences of high sympathetic nervous activity in the failing human heart / Kaye D.M., Lefkovits J., Jennings G.L. et al. // J. Am. Coll. Cardiol.- 1995.- v. 26,- P. 1257-1263.

134. Kaye D. Frequency-dependent activation of a constitutive nitric oxide synthase and regulation of contractile function in adult rat ventricular myocytes / Kaye D.M., Wiviott S.D., Balligand J.-L. et al. // Circ. Res.- 1996.- v. 78,- P. 217-224.

135. Keaney J.F. Inhibition of nitric oxide synthase augments myocardial contractile responses to P-adrenergic stimulation / Keaney J.F., Hare J.M., Balligand J.L. et al. // Am. J .Physiol.- 1996.- v. 271.- P. H2646-H2652.

136. Kelly R.A. Nitric oxide and cardiac function / Kelly R.A., Balligand J.L., Smith T.W. // Circ. Res.- 1996.- v. 79.- P. 363-380.

137. Khan S.A. Nitric oxide regulation of myocardial contractility and calcium cycling: independent impact of neuronal and endothelial nitric oxide synthases / Khan S.A., Skaf M.W., Harrison R.W. et al. // Circ. Res.- 2003.- v. 92.- P. 13221329.

138. Klimaschewski L. Nitric oxide synthase in cardiac nerve fibers and neurons of rat and guinea pig heart / Klimaschewski L., Kummer W., Mayer B. et al. // Circ. Res.- 1992.- v. 71.- P. 1533-1537.

139. Kojda G. Low increase in cGMP induced by organic nitrates and nitrovasodilators improves contractile response of rat ventricular muscle / Kojda G., Kottenberg K., Nix P. et al. //Circ. Res.- 1996.-v. 78.- P. 91-101.

140. Kojda G. Regulation of basal myocardial function by NO / Kojda G., Kottenberg K. // Cardiovasc. Res.- 1999,- v. 41,- №3.- p. 514-523.

141. Kojima S. Effects of perfusion pressure on intracellular calcium, energetics and function in perfused rat hearts / Kojima S., Wri S.T., Wattrs T.A. // Amer. Physiol.- 1993.- v. 264.- P. H183-H189.

142. Koumi S. Acetylcholine-sensitive muscarinic K+ channels in mammalian ventricular myocytes / Koumi S., Wasserstrom J.A. // Am. J. Physiol.- 1994.- v. 266 (5 Pt 2).- P. 1812-1821.

143. Kronon M.T. Dose-dependence of L-arginine in neonatal myocardial protection: the nitric oxide paradox / Kronon M.T., Allen B.S., Halldorsson A. et al. // J. Thorac. Cardiovasc. Surg.- 1999.- v. 118.- P. 655-664.

144. Kubicek W.G. Development and evaluation of an impedance cardiac output system / Kubicek W.G., Karnegis I.N., Patterson R.P. et al. // Aerosp. Med.-1966.- v. 37.- №12.- P. 1208-1212.

145. Kubicek W.G. Impedance cardiography as a noninvasive means to monitor cardiac function / Kubicek W.G., Patterson R.P., Lillehei R. et al. // J. Amer. Assoc. for advancement of med. instrumentation.- 1970.- № 4.- P. 79-81.

146. Kubota I. Increased susceptibility to development of triggered activity in myocytes from mice with targeted disruption of endothelial nitric oxide synthase / Kubota I., Han X., Opel D.J. et al. // J. Mol. Cell. Cardiol.- 2000.- v. 32.- P. 1239-1248.

147. Kuznetsov V. p2-adrenergic receptor actions in neonatal and adult rat ventricular myocytes / Kuznetsov V., Pak E., Robinson R.B., Steinberg S.F. // Circ. Res.- 1995.- v. 76.- P. 40-52.

148. Lands A.M. Differentiation of receptor systems activated by sympathomimetic amines / Lands A.M., Arnold A., Mcauliff J.P., Luduena F.P., Brown T.G. // Nature.- 1967.- v. 214.- P. 597-598.

149. Lass A. Functional and Analytical Evidence for Scavenging of Oxygen Radicals by L-Arginine / Lass A., Suessenbacher A., Wolkart G., Mayer B. and Brunner F. // Mol. Pharmacol.- 2002.- v. 61.- P. 1081-1088.

150. Layland J. Role of cyclic GMP-dependent protein kinase in the contractile response to exogenous nitric oxide in rat cardiac myocytes / Layland J., Li J.-M., Shah A.M. //J. Physiol.- 2002.- v. 540.- №2.- P. 457-467.

151. Lee J.H. al-adrenergic receptor modulation of repolarisation in canine Purkinje fibers / Lee J.H., Rosen M.R. // J. Cardiovasc. Electrophysiol.- 1994.-v. 5.-№3.-P. 232-240.

152. Lefer A. Decreased basal nitric oxide release in hypercholesterolemia increases neutrophil adherence to rabbit coronary artery endothelium / Lefer A. and Ma X.-l. // Arterioscler. Thromb.- 1993.- v. 13.- P. 771-776.

153. Lepori M. Haemodynamic and sympathetic effects of inhibition of nitric oxide synthase by systemic infusion of NG-monomethyl-L-arginine into humans are dose dependent / Lepori M., Sartori C., Trueb L. et al. // J. Hypertens.- 1998.- v. 16.-P. 519-523.

154. Lepori M. Interaction between cholinergic and nitrergic vasodilation: a novel mechanism of blood pressure control / Lepori M., Sartori C., Duplain H., Nicod P., Scherrer U. // Cardiovasc. Res.- 2001.- v. 51.- №4.- P. 767-772.

155. Li H. Physiological mechanisms regulating the expression of endothelial-type NO synthase / Li H., Wallerath T., Forstermann U. // Nitric Oxide.- 2002.- № 7.-P. 132-147.

156. Li H. Regulation of endothelial-type NO synthase expression in pathophysiology and in response to drugs / Li H., Wallerath T., Munzel T., Forsterman U. //Nitric Oxide.- 2002a.- № 7.- P. 149-164.

157. Li K. Effect of dysfunctional vascular endothelium on myocardial performance in isolated papillary muscles / Li K., Roulean J.L., Andries L. et al. // Circ.Res.-1993.-v. 72.- P. 768-777.

158. Li K. Myocardial a 1-adrenoceptor: inotropic effect and physiologic and patthologic implications / Li K., He H., Li C. et al. // Life. Sci.- 1997.- v. 60.- № 16.-P. 1305-1318.

159. Liang B.T. (32-Adrenergic receptors contribute-catecholamine-stimulated shortening of action potential duration in dog atrial muscle / Liang B.T., Frame L.H., Molinoff P.B. //Proc. Nati. Acad. Sc. USA.- 1985,- v. 82.- P. 4521-4525.

160. Lindeman J.P. Muscarinic cholinergic inhibition of (3-adrenergic stimulation of phospholamban phosphorylation and Ca2+ transport in guinea pig ventricles / Lindeman J.P., Watanabe A.M. // J. Biol. Chem.- 1985.- v. 260.- P. 1312213129.

161. Linden J. The mechanism by which adenosine and cholinergic agents reduce contractility in rat myocardium: correlation with cAMP and receptor densities / Linden J., Hollen C.E., Patel A. // Circ. Res.- 1985.- v. 56.- P. 729-735.

162. Liu J. Effects of NO on baroreflex control of heart rate and renal nerve activity in conscious rabbits / Liu J., Murakami H. and Zucker I. // Am. J. Physiol.-1996,- v. 270.- P. R1361-R1370.

163. Liu S. Endothelium-derived relaxing factor inhibits hypoxic pulmonary vasoconstriction in rats / Liu S., Crawley D.E., Barnes P.J. et al. // Amer. Rev. Respir. Dis.- 1991.- v. 143.- P. 32-37.

164. Lombardi F. Heart rate variability as an index of sympathovagal interaction after acute myocardial infarction / Lombardi F., Sandrone G., Pernpruner S. et al. // Am. J. Cardiol. -1987.- v. 60.- P. 1239-1245.

165. MacAllister R.J. Vascular and hormonal responses to arginine: provision of substrate for nitric oxide or non-specific effects? / MacAllister R.J., Calver A.L., Collier J. et al. // Clin. Sci.- 1995.- v. 89,- P. 183-190.

166. Martin V. Induction of NO production by polyosides from the wall of Streptococcus mutans OMZ175 in the rat aorta / Martin V., Kleschyov A.L., Scholler M., Klein J.P., Beretz A. // Adv. Exp. Med. Biol.- 1997,- v. 418.- P. 669-672.

167. Massion P.B. Nitric oxide and cardiac function. Ten years after, and continuing / Massion P.B., Feron O., Dessy C., Balligand J.-L. // Circ. Res.- 2003.- v. 93.-P. 388-398.

168. Mentha S. L-Arginine produces systemic vasodilation and increases nitric oxide excretion in expired gas in humans / Mentha S., Stewart D.J., Hussian S. and Levy R.D. // Circulation.- 1994,- v. 90.-1-138a.

169. Mery P.F. Nitric oxide synthase does not participate in negative inotropic effect of acetylcholine in frog heart / Mery P.F., Hove-Madsen L., Chesnais J.M. et al. // Am. J. Physiol.- 1996.- v. 270.- P. HI 178-H1188.

170. Meszaros J. Effect of ouabain in catecholamine-induced cardiac hypertrophy / Meszaros J., Parztor B. // Acta Physiol. Hung.- 1995.- v. 83.- № 1.- P. 55-62.

171. Milano C.A. Myocardial expression of a constitutively active alB-adrenergic receptor in transgenic mice induces cardiac hypertrophy / Milano C.A., Dolber P.C., Rockman H.A. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. - v. 91.- № 21.-P. 10109-10113.

172. Minami N. The role of nitric oxide in the baroreceptor-cardiac reflex in conscious Wistar rats / Minami N., Imai Y., Hashimoto J. and Abe K. // Am. J. Physiol.- 1995.- v. 269.- P. H851-H855.

173. Miyamoto A. Modulation of bradykinin receptor ligand binding affinity and its coupled G-proteins by nitric oxide / Miyamoto A., Laufs U., Pardo C., Liao J.K. //J. Biol. Chem.- 1997.- v. 1,-№ 272(31).-P. 19601-19608.

174. Mohan P. Positive inotropic effect of nitric oxide in myocardium / Mohan P., Sys S.U., Brutsaert D.L. // Int. J. Cardiol.- 1995.- v. 50.- №3,- P. 233-237.

175. Mohan R.M.Activation of sulphonylurea-sensitive channels and the NO-cGMP pathway decreases the heart rate response to sympathetic nerve stimulation / Mohan R.M., Paterson D.J. // Cardiovasc. Res.- 2000.- v. 47.- №1.- P.81-89.

176. Mohan R.M. Neuronal nitric oxide synthase gene transfer promotes cardiac vagal gain of function / Mohan R.M., Heaton D.A., Danson E.J. et al. // Circ. Res.- 2002.- v. 91.- №12.- P. 1089-1091.

177. Moncada S. Biosynthesis and endogenesis roles of nitric oxide / Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. // Pharmacol. Rev. -1991.- v. 43.- P. 109-142.

178. Moncada S. The L-arginine-nitric oxide pathway / Moncada S., Higgs A. // N. Engl. J. Med.- 1993.- v. 329.- P. 2002-2012.

179. Moncada S. Does nitric oxide modulate mitochondrial energy generation and apoptosis? / Moncada S., Erusalimsky J.D. // Nat. Rev. Mol. Cell. Biol.- 2002.-v. 3.- P. 214-220.

180. Mori E. Intra-coronary administration of L-arginine aggravates myocardial stunning through production of peroxynitrite in dogs / Mori E., Haramaki N., Ikeda H. and Imaizumi T. // Cardiovasc. Res.- 1998,- v. 40.- P. 113-123.

181. Moric C.E. Mechanosensitive ion channels / Moric C.E. // J. Membr. Biol. -1990.-v. 113.-P. 93-107.

182. Muller-Strain G. Inhibition of nitric oxide synthase augments the positive inotropic effect of nitric oxide donors in the rat heart / Muller-Strain G., Kottenberg K., Zimmer H.G., Noack E., Kojda G. // J. of Physiology.- 2000,- v. 522,-P. 311-320.

183. Musialelc P. Nitric oxide can increase heart rate by stimulating the hyperpolarization-activated inward current, 1(f) / Musialek P., Lei M., Brown H.F. et al. // Circ. Res.- 1997.- v. 81.- P. 60-68.

184. Nagashima M. a 1-adrenoceptor subtypes mediating inotropic and electrophysiological effects in mammalian myocardium / Nagashima M., Hattori Y., Akaishi Y. et al. // Am. J. Physiol.- 1996.- v. 271 (4 Pt 2).- P. 1423-1432.

185. Nakaki T. L-Arginine-induced hypotension / Nakaki T., Hishikawa K., Suzuki H., Saruta T., and Kato R. // Lancet. -1990.- v. 336,- № 8716.- P. 696.

186. Palmer R.M.J. L-Arginine is the physiological precursor for the formation of nitric oxide in endothelium-dependent relaxation / Palmer R.M.J., Rees D.D., Ashton D.S. and Moncada S. // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1988.- v. 153,-P. 1251-1256.

187. Parent R. Contribution of nitric oxide to dilation of resistance coronary vessels in conscious dogs / Parent R., Lavallde W.M. // Amer. J. Physiol.- 1992.- v. 262,- P. H10-H16.

188. Paton J.F. Nitric oxide and autonomic control of heart rate: a question of specificity / Paton J.F., Kasparov S., Paterson D.J. // Trends Neurosci.- 2002.- v. 25.-№12.-P. 626-631.

189. Pegoraro A.A. Sympathetic modulation of endothelium-derived relaxing factor

190. Pegoraro A.A., Carretero O.A., Sigmon D.H. and Beierwaltes W.H. // Hypertension.- 1992.-v. 19.-P. 643-647.

191. Petroff M.G. Endogenous nitric oxide mechanisms mediate the stretch dependence of Ca2+ release in cardiomyocytes / Petroff M.G., Kim S.H., Pepe S. et al. //Nat. Cell. Biol.- 2001.- v. 3.- P. 867-873.

192. Picker O. Nitric oxide synthases in vagal neurons are crucial for the regulation of heart rate in awake dogs / Picker O., Scheeren T.W., Arndt J.O. // Basic. Res. Cardiol.- 2001.- v. 96.- №4.- P. 395-404.

193. Popova J.S. Chimeric G a s/G a i2 proteins define domains on G a s that interact with tubulin for b-adrenergic activation of adenylyl cyclase / Popova J.S., Johnson G.L., Rasenick M.M. // J. Biol. Chem.- 1994.- v. 269,- № 34.- P. 21748-21754.

194. Prabhu S.D. Nitric oxide effects on myocardial function and force-interval relations: regulation of twitch duration / Prabhu S.D., Azimi A., Frosto T. // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1999.- v. 31.- №12.- P. 2077-2085.

195. Prendergast B. Basal release of nitric oxide augments the Frank-Starling response in the isolated heart / Prendergast B., Sagach V., Shah A. // Circulation.- 1997.- v. 96.-P. i320-1329.

196. Pritchard K.A.Jr. Heat shock protein 90 mediates the balance of nitric oxide and superoxide anion from endothelial nitric-oxide synthase / Pritchard K.A.Jr., Ackerman A.W., Gross E.R. et al. // J. Biol. Chem.- 2001,- v. 276.- P. 17621-17624.

197. Reading S.A. The inotropic effect of nitric oxide on mammalian papillary muscle is dependent on the level of b 1-adrenergic stimulation / Reading S.A., Barclay J.K. // Can. J. Physiol. Pharmacol.- 2002.- v. 80.- P.- 569-577.

198. Rees D.D. Role of endothelium derived nitric oxide in the regulation of bloodpressure / Rees D.D., Palmer R.M.J., Moncada S. // Proc. Nantl. Acad. Sci. USA. -1989.- v. 86.- P. 3375-3378.

199. Ribeiro M.O. Persistant arterial hypertension by chronic blockade of nitric oxide synthesis / Ribeiro M.O., Nucci G.D., Zatz R. // J. Amer. Soc. Nephrol.-1991,- v.2.- P. 512 A.

200. Ribeiro M.O. Chronic inhibition of nitric oxide synthesis. A new model arterial hypertension / Ribeiro M.O., Antunes E., Zatz R. // Hypertension.- 1992.- v. 20.-P. 298-303.

201. Ritchie J.L. Effect of nitric oxide modulation on systemic haemodynamics and platelet activation determined by P-selectin expression / Ritchie J.L., Alexander H.D., Allen P., Morgan D., McVeigh G.E. // Br. J. Haematol.- 2002.- v. 116.-№4.- P. 892-898.

202. Rubanyi G.M. Flow-induced release of endothelium-derived relaxing factor / Rubanyi G.M., Romero I.C., Vanhoutte P.M. // Amer. J. Physiol.- 1986.- v. 250.- P. HI 145-H1149.

203. Ruffolo R.R. a-adrenoceptors / Ruffolo R.R., Hieble J.P. // Pharmacol. Ther.1994.- v. 61.-№ 12.-P. 64.

204. Saito K. a 1-adrenoceptors in the conduction system of rat heart / Saito K., Suetsugu T., Oku Y. et al. //Br. J. Pharmacol. -1994.- v. 111.- № 2,- P. 465-468.

205. Sanada S. Long-acting Ca2+ blockers prevent myocardial remodeling induced by chronic NO inhibition in rats / Sanada S., Node K., Minamino T. et al. // Hypertension.- 2003, Mar 10.

206. Sander M. Sympathetically mediated hypertension caused by chronic inhibition of nitric oxide / Sander M., Hansen P.G. and Victor R.G. // Hypertension.1995.-v. 26.-P. 691-695.

207. Schmidt K. Characterization of endothelial cell amino acid transport systems involved in the actions of nitric oxide synthase inhibitors / Schmidt K., Klatt P. and Mayer B.//Mol. Pharmacol.- 1993,-v. 44,- P. 615-621.

208. Schuman E.M. Nitric oxide and synaptic function / Schuman E.M., Madison D.V. // Annu. Rev. Neurosci.- 1994.- v. 17.- P. 153-183.

209. Schwarz P. Endogenous and exogenous nitric oxide inhibits norepinephrine release from rat heart sympathetic nerves / Schwarz P., Diem R., Dun N.J., Forstermann U. // Circ. Re.- 1995.- v. 77.- P. 841-848.

210. Scrogin K.E. Chronic nitric oxide inhibition with L-NAME: effects on autonomic control of the cardiovascular system / Scrogin K.E., Hatton D.C., Chi Y. and Luft F. C. // Am. J. Physiol.- 1998.- v. 274,- P. R367-R374.

211. Sears C.E. Role of nitric oxide in the rate and contraction responses to acetylcholine following adrenergic stimulation in the isolated frog heart / Sears C.E. and Paterson D.J. // J. Physiol. (London).- 1996,- v. 495P.- P. 167P.

212. Sears C.E. Inhibition of nitric oxide synthase slows heart rate recovery from cholinergic activation / Sears C.E., Choate J.K. and Paterson D.J. // J. Appl. Physiol. -1998.- v. 84.- P. 1596-1603.

213. Sears C.E. Cardiac neuronal nitric oxide synthase isoform regulates myocardial contraction and calcium handling / Sears C.E., Bryant S.M., Ashley E.A. et al. // Circ. Res.- 2003.- v. 92.- P. e52-e59.

214. Shah A.M. 8-Bromo-cGMP reduces the myofilament response to Ca2+ in intact cardiac myocytes / Shah A.M., Spurgeon H.A., Sollott S.J., Talo A., Lakatta E.G. // Circ Res.- 1994.- v. 74.- P. 970-978.

215. Shah A.M. Paracrine and autocrine effects of nitric oxide on myocardial function /Shah A.M., MacCarthy P.A.// Pharmacol. Ther.- 2000,- v.86.- P.49-86.

216. Smulders R.A. Plasma endothelin levels and vascular effects of intravenous L-arginine infusion in subjects with uncomplicated insulin-dependent diabetesmellitus / Smulders R.A., Stehouwer C.D.A. et al. // Clin. Sci.- 1994.- v. 87.- P. 37-43.

217. Star R.A. Nitric oxide. Southwestern Int. Medium Conf. / Star R.A. // Amer. J. Med. Sci.- 1993.- v. 306.- P. 348-358.

218. Stauss H.M. Role of nitric oxide in buffering short-term blood pressure fluctuations / Stauss H.M., Persson P.B. // News Physiol. Sci.- 2000.- v. 5.- P. 229-233.

219. Sterin-Borda L. Role of nitric oxide in cardiac b-adrenoceptor-inotropic response / Sterin-Borda L., Genaro A., Perez L.C. et al. // Cell. Signal.- 1998.- v. 10.-P. 253-257.

220. Stojanovic M.O. Anti-adrenergic effects of nitric oxide donor SIN-1 in rat cardiac myocytes / Stojanovic M.O, Ziolo M.T., Wahler G.M. et al. // Am. J. Physiol.- 2001.- v. 281.- P. C342-C349.

221. Stroes E. Vascular function in the forearm of hypercholesterolaemic patients off and on lipid-lowering medication / Stroes E., Koomans H., de Bruin T. and Rabelink T. // Lancet.- 1995.- v. 346.- P. 467-471.

222. Takeuchi K. Direct detrimental effects of L-arginine upon ischemia-reperfusion injury to myocardium / Takeuchi K., McGowan F.X., Danh H.-C. et al. // J. Mol. Cell. Cardiol.- 1995.- v. 27.- P. 1405-1414.

223. Tesfamariam B. Endothelium inhibits responses of rabbit carotid artery to adrenergic nerve stimulation / Tesfamariam B., Weisbrod R.M. and Cohen R.A. //Am. J. Physiol.- 1987.- v. 253.- P. H792-H798.

224. Todorovic Z. The influence of L-arginine on heart rate and tissue oxygen extraction in haemorrhaged rabbits / Todorovic Z., Prostran M., Vuckovic S. // Pharmacol. Res.- 2001.- v. 43.- №4.- P. 321-327.

225. Treshman J.J. Haemodynamic and humoral effects of N-nitro-L-arginine in sheep / Treshman J.J., Dusting G.J., Coghlan J.P. et al. // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol.- 1991.-v. 18.-P. 327-330.

226. Trochu J.N. Role of endothelium-derived nitric oxide in the regulation of cardiac oxygen metabolism: implications in health and disease / Trochu J.N., Bouhour J.B., Kaley G., Hintze T.H. // Circ. Res.- 2000.- v. 87,- P. 1108-1117.

227. Ueda M. Nitric oxide modulates coronary autoregulation in the guinea pig / Ueda M., Silvia S.K., Olson R.A. // Circ. Res.- 1992.- v. 70.- P. 12296-12303.

228. Vallance P. Effects of endothelium-derived nitric oxide on peripheral arteriolar tone in man / Vallance P., Collier J., Moncada S. // Lancet.- 1989.- v. 28.- №11-P. 997-1000.

229. Varghese P. b3-Adrenoceptor deficiency blocks nitric oxide-dependent inhibition of myocardial contractility / Varghese P., Harrison R.W., Lofthouse R.A. // J. Clin. Invest.- 2000.- v. 106.- P. 697-703.

230. Velianou J.L. L-Arginine: a novel therapy for coronary artery disease? / Velianou J.L., Suwaidi .JA. and Lerman A. // Exp. Opin. Invest. Drugs.- 1999.-v. 8.-P. 1785-1793.

231. Vo P.A. Attenuation of vasoconstriction by endogenous nitric oxide in rat caudal artery / Vo P.A., Reid J.J. and Rand M.J. // Br. J. Pharmacol.- 1992.- v. 107.- P. 1121-1128.

232. Wahler O.M. Nitric oxide donor SIN-1 inhibits mammalian cardiac calcium current through cGMP-dependent protein kinase / Wahler O.M., Dollinger S.L. //Am. J. Physiol.- 1995,- v. 268.- P. C45-C54.

233. Wang J.X. Effects of bradykinin and postaglandin inhibition on systemic andregional haemodynamics in coscious normotensive rats / Wang J.X., Lammek B., BresnahamM. et al. // J. Hypertension. -1991.- v. 9.- P. 805-812.

234. Ward J.E. Acute and chronic inchibition of NOS in conscious rabbits: role of nitric oxide in the control of vascular tone / Ward J.E., Angus J.A. // J. Cardiovasc. Pharmacol.- 1993.- v. 21.- P. 804-814.

235. Wascher T.C. Vascular effects of L-arginine: anything beyond a substrate for the NO-synthase? / Wascher T.C., Posch K., Wallner S. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1997.- v. 234.- P. 35-38.

236. Welch G. Nitric oxide and the cardiovascular system. Review / Welch G., Loscalzo J. //J. Card. Surg.- 1994,- v. 9.- №3.- P. 361-371.

237. Weyrich A.S. The role of L-arginine in ameliorating reperfusion injury after myocardial ischemia in the cat / Weyrich A.S., Ma X.-l. and Lefer A.M. // Circulation.- 1992.- v. 86.- P. 279-288.

238. Xiao R.P. (31-Adrenoceptor stimulation and (32-adrenoceptor stimulation differ in their effects on contraction, cytosolic Ca~+ and Ca"+ current in single rat ventricular cells / Xiao R.P., Lakatta E.G. // Circ. Res.- 1993.- v.73.- P. 286-300.

239. Xu K.Y. Nitric oxide synthase in cardiac sarcoplasmic reticulum / Xu K.Y., Huso D.L., Dawson T.M. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1999.- v. 96.- P. 657-662.

240. Zahradnikova A. Inactivation of the cardiac calcium release channel by nitric oxide / Zahradnikova A., Minarovic L., Venema R.C. et al. // Cell. Calcium.-1997.- v. 22.- P. 447-453.

241. Zanzinger J. Inhibition of sympathetic vasoconstriction is a major principle of vasodilation by nitric oxide in vivo / Zanzinger J., Czachurski J. and Seller H. // Circ. Res.- 1994,- v. 75.- P. 1073-1077.

242. Zefirov T.L. The influence of chosen vagotomy on chronotropic function of rats heart in ontogenesis / Zefirov T.L. // XXXII Congress of the International Union of Physiological Sciences. Glasgow, 1993. - P. 99.

243. Zefirov T.L. Both denervation and blockade of axonal transport in a rat vagus nerve fibers regulates heart rate variability / Zefirov T.L. // Growth and Death inthe Nervous System. Switzerland, 1998. - P. 35.

244. Zembowicz A. Nitric oxide and another potent vasodilator are formed from A^-hydroxy-L-arginine by cultured endothelial cells / Zembowicz A., Hecker M., Macarthur H., Sessa W.C., Vane J.R. // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.- 1991.-v. 88.- P. 11172-11176.

245. Zhou Y.Y. Localized cAMP-dependent signaling mediates beta 2-adrenergic modulation of cardiac excitation-contraction coupling / Zhou Y.Y., Cheng H., Bogdanov K.Y.//Am. J.Physiol.- 1997,-v. 273(3 Pt2).-P. H1611-1618. '

246. Ziolo M.T. Myocytes isolated from rejecting transplanted rat hearts exhibit reduced basal shortening which is reversible by aminognauidine / Ziolo M.T., Dullinger X.L., Wahler G.M. // J. Moll. Cell. Cardiol.- 1998.- v. 30.- P. 10091017.

247. Ziolo M.T. Expression of inducible nitric oxide synthase depresses P~ adrenergic-stimulated calcium release from the sarcoplasmic reticulum in intact ventricular myocytes / Ziolo M.T., Katoh H., Bers D.M. // Circul.- 2001.- v. 104.- P. 2961-2966.

248. Ziolo M.T. Myocytes isolated from rejecting transplanted rat hearts exhibit a nitric oxide-mediated reduction in the calcium current / Ziolo M.T., Harshbarger C.H, Roycrott K.E. et al. // J. Mol. Cell. Cardiol.- 2001.- v. 33.- P. 1691-1699.

249. Ziolo M.T. Positive and negative effects of nitric oxide on Ca~ sparks: influence of P-adrenergic stimulation / Ziolo M.T., Katoh H., Bers D.M. // Am. J. Physiol.- 2001.- v. 281.- P. H2295-H2303.

250. Zweier J.L. Non-enzymatic nitric oxide synthesis in biological systems / Zweier J.L., Samouilov A., Kuppusamy P. // Biochim. Biophys. Acta.- 1999.- v. 1411.-P. 250-262.166 X ¿2

Информация о работе

Насырова, Аида Гайдаровна
кандидата медицинских наук
Казань, 2004
ВАК 03.00.13

Диссертация

Оксид азота в механизмах регуляции насосной функции сердца крыс - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы