Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Окисление феназепама в биологических мембранах

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Метешкин, Юрий Валентинович

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. ХИМИЧЕСКИЕ, ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ

СВОЙСТВА ФЕНАЗЕПАМА

1.1. Синтез феназепама, его метаболитов, их химические и физико-химические свойства

1.2. Фармакологические свойства феназепама

ГЛАВА 2. МЕТАБОЛИЗМ И КИНЕТИКА РАСПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕНАЗЕПАМА

2.1. Основные пути биохимической трансформации феназепама в организме экспериментальных животных.

2.2. Метаболизм 5-бром-2-хлор-2-аминобензофе

2.3. Распределение феназепама и его метаболитов в тканях и органах различных видов животных.

ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ОКИСЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВ НА ЦЕЛОСТНОМ

ОРГАНИЗМЕ,ИЗОЛИРОВАННЫХ КЛЕТКАХ И МИКРОСОМАХ

3.1. Целостный организм.

3.2. Изолированные гепатоциты

3.3. Микросомы.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

ГЛАВА 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4.1. Методы исследования окисления феназепама, проводимые на целостном .организме

4.2. Выделение субклеточных фракций из гомогената печени крыс и мышей

4.3. Методика и вьщеления изолированных гепато-цитов белых крыс

4.4. Методы определения активности ферментов окисления ксенобиотиков микросомной фракции печени крыс

4.4.1. Активность НАДО1-цитохром Р-450-редуктазы.

4.4.2. Определение содержания цитохрома

4.4.3. Определение содержания цитохрома

4.4.4. п-Гидроксилазная активность

4.4.5. Деметилирующая активность

4.4.6. Глюкозо-6-фосфатная активность.

4.4.7. Определение содержания ДЯК и РНК.

4.4.8. Дыхательная активность микросом

4.5. Спектральные изменения комплекса цитохрома Р-450 с феназепамом и 3-оксиметаболитом.

4.6. Постановка опытов

4.7. Определение феназепама и его метаболитов в постинкубационных жидкостях и в продуктах экскреции (аналитические методы определения)

4.8. Математическая обработка

4.8.1. Регрессионный анализ

4.8.2. Оптимизация метода экскреции С-фена-зепама и его метаболитов из гомогенатов печени крыс

4.8.3. Дисперсионный анализ

4.8.4. Особый вариант двухфакторного дисперсионного комплекса (достоверность различий двух рядов регрессии)

4.8.5. Расчет электронной плотности молекул 1,4-бенздиазепинов

ГЛАВА 5. ВЫВЕДЕНИЕ ФЕНАЗЕПАМА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ ИЗ ОРГАНИЗМА РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

5.1. Метаболизм и экскреция феназепама у кроликов

5.2. Экскреция феназепама и его метаболитов у диких норок

5.3. Метаболизм феназепама в организме кур.

ГЛАВА 6. ОКИСЛЕНИЕ ФЕНАЗЕПАМА В ИЗОЛИРОВАННЫХ ГЕПАТОЩТАХ

БЕЛЫХ КРЫС

6.1. Распределение феназепама и его метаболитов в субклеточных фракциях гепатоцитов крыс и мышей

ГЛАВА 7. ОКИСЛЕНИЕ ФЕНАЗЕПАМА МИКРОСОМАМИ ПЕЧЕНИ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

7.1. Метаболизм феназепама в микросомах печени экспериментальных животных

7.2. Ферментативная кинетика окисления феназепама монооксигеназами микросом печени животных

7.3. Механизмы реакций окисления феназепама в биологических мембранах

Введение Диссертация по биологии, на тему "Окисление феназепама в биологических мембранах"

Коммунистическая партия и Советское правительство уделяют огромное внимание развитию здравоохранения и медицины, с целью дальнейшего улучшения благосостояния советских людей, улучшения условий их труда и быта. В многочисленных материалах съездов и пленумов указывается на необходимость углубления исследований в области молекулярной биологии, физиологии, биохимических основ жизнедеятельности человеческого организма для ускорения решения важнейших медико-биологических проблем борьбы с сердечно-сосудистыми, онкологическими, эндокринными, вирусными и профессиональными заболеваниями, болезнями центральной нервной системы. Одним из средств для решения этих неотложных задач является создание новых высокоэффективных лекарственных препаратов, позволяющих предупреждать и лечить ряд заболеваний.

В наш век - век научно-технического прогресса и большого притока информации - возросли нагрузки на центральную нервную систему, что привело к увеличению числа заболеваний или же увеличению числа эмоционально-стрессовых перегрузок, сопровождаемых страхом, тревогой, напряженностью, раздражительностью, нарушением сна.

Наиболее распространенным средством лечения таких неврозо-подобных состояний является использование транквилизаторов бенз-диазепинового ряда. К числу наиболее распространенных представителей этого ряда относятся седуксен, нитразепам, оксазепам, медазепам, хлоразепам, лоразепам и др.

В Советском Союзе со средины 70-х годов ведется активный поиск новых транквилизаторов бенздиазепинового ряда в Одесском госуниверситете и Физико-химическом институте АН УССР. Этот

- б поиск увенчался успехом. Так, под руководством академика АН УССР, доктора химических наук, профессора Богатского А.В. был синтезирован первый отечественный препарат - 7-бром-5-хлор(фенил)-1,2-дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-он, названный по международным правилам феназепамом.

Фармакологические свойства феназепама были изучены Ю.И.Вих-ляевым и Т.А.Ворониной в Научно-исследовательском институте фармакологии под руководством академика АМН СССР В.В.Закусова.

В ходе исследований феназепам показал себя высокоактивным транквилизатором с ярко выраженным противосудорожным и гипносе-дативным действием и по всем параметрам превосходящим большинство других зарубежных препаратов.

Изучение фармакологического действия феназепама в клиниках показало его высокую активность при лечении неврозоподобных состояний, сопровождаемых чувством страха, тревоги, напряжения, раздражительности и нарушениях сна. Кроме этого, феназапам оказался эффективным средством в анастизиологии, благодаря потенцирующему действию на наркотические анальгетики, а также средством обшей анестезиологии при подготовке больных к хирургическим операциям и при лечении алкогольной абстиненции. I

Эти качества феназепама позволили внедрить его в широкую медицинскую практику в лечебных заведениях нашей страны. Так, решением Фармакологического Комитета МЗ СССР от 12 октября

1976 года феназепам рекомендован для широкого применения в медицинской практике.

Приказом Министра здравоохранения СССР № 966 от 10 ноября

1977 года утверждено внедрение феназепама в медицинскую практику и промышленное производство, которое осушествлено на опытном заводе Физико-химического института АН УССР. В сентябре

1978 года феназепам поступил для реализации в аптечную сеть.

Значительная часть исследований по метаболизму, фармако-кинетике, распределению феназепама и его метаболитов в организме экспериментальных животных была проведена в нашей лаборатории доктором биологических наук Н.Я.Головенко и старшим научным сотрудником В.Г.Зиньковским.

Благодаря этим исследованиям был изучен метаболизм феназепама в организме экспериментальных животных (крыс и мышей) и установлена структура образующихся метаболитов, причем оказалось, что процессы окисления препарата различаются у данных видов животных. Распределение метаболитов феназепама в органах и тканях в значительное мере зависело от характера метаболизма. Изучение кинетики выведения феназепама и его метаболитов позволило установить двухфазный линейный характер этих процессов, с преимущественным образованием глюкуронконъюгированных метаболитов. При длительном выведении препарата возрастала роль экскреции с желчью свободных метаболитов феназепама.

Разработанные в ходе исследований методы выделения, очистки, идентификации и количественного определения продуктов биотрансформации феназепама, математические методы анализа и моделирования фармакокинетических процессов, а также обнаруженные закономерности фармакодинамики у различных видов экспериментальных животных и в различных условиях эксперимента, несомненно, имеют важное практическое значение, поскольку могут быть использованы непосредственно в клинических испытаниях препаратов данного класса на человеке.

Однако, несмотря на высокую информативность и прикладное значение имеющихся результатов, оставался неисследованным ряд принципиально важных вопросов, касающихся механизмов ферментативного окисления феназепама. В частности, не установлены причины межвидовых различий биотрансформации данного препарата, характер и кинетические свойства монооксигеназ, окисляющих фена-зепам. Осталась незатронутой проблема возможного воздействия на окислительные ферменты индукторами и ингибиторами монооксигеназ с целью ускорения их метаболизма или пролонгирования действия данного препарата. Кроме этого, значительный интерес представляет изучение механизмов реакций окисления феназепама на различных уровнях организации биологических систем, поскольку вопрос о возможности сопоставления результатов, полученных в опытах на целостном организме, клеточных системах и субклеточных фракциях имеет практическое значение.

Учитывая все это, нами были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать межвидовые особенности биотрансформации феназепама на целостном организме, изолированных гепатоцитах и микросомах.

2. Изучить распределение феназепама и его метаболитов в субклеточных фракциях гепатоцитов экспериментальных животных.

3. Охарактеризовать свойства ферментных систем, катализирующих окисление феназепама в гепатоцитах различных видов экспериментальных животных.

4. Исследовать процессы взаимодействия феназепама с моноокси-геназами микросом, характеризующие механизмы окисления препарата.

Приношу глубокую благодарность академику АН УССР А.В.Бо-гатскому за научное консультирование по данной работе и доктору биологических наук Н.Й.Головенко за руководство данной работой.

Также хочу поблагодарить кандидата химических наук Л.Н.Якубовскую за любезно предоставленный ^С-феназепам и его метаболиты.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Метешкин, Юрий Валентинович

ВЫВОДЫ

1. Экспериментальные животные различаются по интенсивности образования и выведению отдельных метаболитов феназепама. У кроликов выведение свободных метаболитов и глюкуронидов осуществляется в одинаковой степени. Свободные метаболиты представлены продуктами ароматического гидроксилирования, а конъюгаты - глюкуро-нидом 3-оксипроизводного. У диких норок основной путь метаболизма феназепама - окисление гетерокольца. Выводится этот метаболит в свободной форме и незначительно в виде глюкуронида. Метаболизм феназепама у кур характеризуется высокой интенсивностью, с образованием продуктов ароматического гидроксилирования и хиназолин

2-она. Выводятся метаболиты с пометом в свободной или связанной форме.

2. Окисление феназепама изолированными гепатоцитами крыс .протекает с образованием продуктов ароматического гидроксилирования и в меньшей степени 3-оксипроизводного. Индукция моноокси-геназ печени фенобарбиталом приводит к изменению направления окисления феназепама в сторону образования 3-оксиметаболита.

3-метилхолантрен не оказывал индуцирующего влияния на эти процессы.

3. Феназепам и его метаболиты распределяются неравномерно в субклеточных фракциях печени крыс и мышей и обнаруживаются во всех исследованных фракциях (ядра, митохондрии, микросомы, цито-золь) с максимальным их содержанием в микросомах. Характерным для распределения у мышей является преобладание содержания 3-оксипроизводного, а у крыс - продуктов ароматического гидроксилирования. Значительная часть окисленных метаболитов феназепама у крыс связывается с белком.

4. В изолированных микросомах печени крыс, мышей и кроликов осуществляются процессы окисления гетерокольца, ароматического гидроксилирования, а также сужения гетерокольца - у кроликов. У крыс преобладает процесс ароматического гидроксилирования, у мышей - окисления гетерокольца, у кроликов оба процесса равны. Ингибиторный анализ показал на возможность участия в окислении молекулы феназепама нескольких модификаций гемопротеида, причем цитохром Р-450 ответственен за образование 3-оксиметаболита. Необходимым этапом для осушествления реакции сужения гетерокольца, с образованием хиназолин-2-она, является процесс С3-гидро-ксилирования.

5. Для осушествления процессов окисления феназепама необходим НАДФН и молекулярный кислород. В данных реакциях частично может использоваться НДЦН. Ингибирование процессов окисления феназепама SKF-525A у крыс, мышей и кроликов протекает в различной степени и затрагивает все процессы.

6. Феназепам и 3-оксиметаболит образует комплекс с цито-хромом Р-450 по второму типу связывания. Различия в характеристических точках спектров и оптических констант связывания данных субстратов обусловлены особенностью распределения электронной плотности гетерокольца.

Практические рекомендации

Полученные в условиях опыта результаты включены в коллективную монографию "Феназепам" (Киев: Наукова думка, 1982, с. 4143), используются в учебном процессе в Одесском госуниверситете при чтении спецкурсов по биохимии. Данные по метаболизму феназепама у норок внедрены в Одесском пушном зверохозяйстве, где препарат используется в качестве антистрессового агента.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Метешкин, Юрий Валентинович, Одесса

1. Андронати С.А., Авруцкий А.В., Богатский А.В. и др. Феназепам. Киев: Наукова Думка, 1982, 288 с.

2. Анишиц А.Г., Соколовский В.Д., Бурнин С.Ю., Ляхович В.В., Цырлов И.Б. Влияние строения субстратов и индукторов на катали-ческую активность микросомальных ферментов. Кинетика и катализ, 1979, 20, № 4 с. 865-869.

3. Арчаков А.И. Молекулярная организация и функция цепей переноса электронов мембран ЭПР печени. Успехи совр. биологии, 197I, 71, в. 2, с. 174-176.

4. Арчаков А.И., Девиченский В.Н. Влияние ионов натрия и калия на скорость переноса электронов в микросомах. Биофизика, 1973, 18, № 6, с. I04I-I046.

5. Арчаков А.И., Девиченский В.Н. Перенос электронов в мембранах эндоплазматического ретикулума: участие цитохрома b ^ в НАДФН-зависимых реакциях. Биохимия, 1974, 39, в. 4, с.691-694.

6. Арчаков А.И., Девиченский В.Н., Карузина И.Н. Перенос электронов в мембранах ЭПР. Взаимодействие НАДШ и НАДН специфических цепей переноса электронов в микросомах. Биохимия, 1974, 39, в. 5, с. 903-907.

7. Арчаков А.И. Микросомальное окисление. М.: Наука, 1975, 327 с.

8. Богатский А.В., Коломейченко Г.Ю., Андронати С.А. Зависимость между химическим строением, фармакологической активностью, метаболизмом и фармакокинетикой некоторых транквилизаторов 1,4-бенздиазепинового ряда. Хим.-фарм. журн., 1976, № II, с. 14-18.

9. Богатский А.В., Головенко Н.Я., Андронати С.А., Коломейченко Г.Ю., Жилина З.И. Участие редокс-цепи микросом печени крыс в сужении кольца 1,4-бенздиазепинов'. Докл. АН СССР, 1977, 234, № I, с. 215-219.

10. Богатский А.В., Головенко Н.Я., Гурман Э.Г., Метешкин

11. Ю.В. Капюлированный вывернутый мешок из тонкой кишки модель для изучения всасывания ксенобиотиков. - Докл. АН УССР, сер. Б, 1978, № 8, с. 745-749.

12. Богатский А.В., Зиньковский В.Г., Головенко Н.Я., Андро-нати С.А., Яворский А.С., Шарбатян П.А. Ферментативное превращение феназепама в организме экспериментальных животных. Докл.

13. АН УССР, сер. Б, 1979, № II, с. 943-946.

14. Богатский А.В., Андронати С.А., Головенко Н.Я. Транквилизаторы (1,4-Бенздиазепины и родственные структуры). Киев: Наукова Думка, 1980, 276 с.

15. Богатский А.В., Головенко Н.Я., Зиньковский В.Г. Внут-рипеченочная циркуляция ^С-феназепама и его метаболитов в организме белых крыс. Бюлл. экспер. биол. и мед., 1980, № I,с. 27-29.

16. Вайсберг А. Установление структуры органических соединений физическими и химическими методами. М: Химия, 1967,с. 242-250.

17. Вихляев Ю.И., Воронина Т.А. Фармакология феназепама. -Экспресс информ. ВНИИМИ. Сер. Новые лекарственные препараты, 1978, № 3, с. 2-6.

18. Воронина Т.А. Фармакология соединений бенздиазепиново-го ряда: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. М., 1978. - 47 с.

19. Воронина Т.А. Новое психотропное средство феназепам и пути его создания. В кн.: Тез. докл. на Пленуме правления Всесоюзного об-ва фармакологов, фармакологии физиологически активных веществ. Фрунзе, 1978, с. 10-11.

20. Воронина Т.А. Фармакокинетика препаратов бенздиазепи-нового ряда. Итоги науки и техники. Фармакология. Химиотера-певтические средства. - М., 1979, II, с. 81-113.

21. Головенко H.JI., Мятешкин Ю.В. Взаимодействие цитохрома

22. Р-450 микросом печени белых крыс с 1,4-бенздиазепинами. Докл. АН УССР, сер. Б, 1976, № с. 154-157.

23. Головенко Н.Я., Андронати С.А., Коломейченко Г.Ю. Половые отличия метаболизма некоторых 1,4-бенздиазепинов. Докл. АН УССР, сер. Б, 1976, № 5, с. 443-445.

24. Головенко Н.Я., Богатский А.В., Карасева T.JI. Взаимоотношение ферментных систем печени экспериментальных животных, восстанавливающих, ацетилируюших и дезацетилируюших 1,4-бенздиа-зепины. Докл. АН УССР, сер. Б, 1976, № 5, с. 447-450.

25. Головенко Н.Я., Карасева T.JI., Богатский А.В. Зависимость метаболизма нитразепама от способа его введения и вида экспериментальных животных. Укр. биохим. журнал, 1978, 50, № 3, с. 302-306.

26. Головенко Н.Я., Зиньковский В.Г. Метаболизм и распределение в организме белых крыс производных 2-аминобензофенона.

27. В кн.: Тезисы докл. Ш Всесоюз. симпоз. по целенаправленному изысканию новых физиологически активных веществ, Рига, 1979, 37 с.

28. Головенко Н.Я., Зиньковский В.Г., Богатский А.В., Андронати С.А., Середенин С.Б., Якубовская JI.H. Сравнительное изучение выведения метаболитов феназепама при его однократном и многократном введении белым крысам. Хим.-фарм. журнал, 1979, № I, с. 21-26.

29. Головенко Н.Я. Механизм реакций метаболизма ксенобиотиков в биологических мембранах. Киев: Наукова Думка, 1981,217 с.

30. Головенко Н.Я. Метаболизм и распределение бенздиазепи-нов в организме животных. Автореф. дисс. . д-ра биол. наук.-Киев, 1981. - 49 с.

31. Гордон А., Форд Р. Спутник химика. М.: Мир, 1978, 541 с.

32. Де Робертис Э., Новинский В., Саэс Ф. Биология клетки, М.: Мир, 1973, 484 с.

33. Драговцев В.А. Системный анализ и методологические проблемы биологии. Новосибирск: Наука, 1981, 411 с.

34. Жердев В.П., Экономов А.Л., Родионов А.П., Вихляев ДО.И. Метаболизм нового психотропного средства феназепама. Хим.-фарм. журнал, 1979, 13, № 7, с. 11-16.

35. Жердев В.П., Экономов А.Л., Родионов В.П. Метаболизм фторциазина и феназепама. В кн.: Окисление физиологически активных веществ в биологических мембранах. Тез. докл. Всесоюзн. симп. (Одесса, октябрь, 1979). Одесса, 1979, с. 31.

36. Зиньковский В.Г., Головенко Н.Я., Галкин Б.Н., Станкевич Е.А. Нелинейный характер некоторых сторон фармакокинетики феназепама в организме крыс. Фарм. и токсикол., 1981, № 2.1, с. 71-81. .

37. Зиньковский В.Г.,чГоловенко Н.Я. Кинетика выведения метаболитов феназепама с желчью у крыс результат ферментативных процессов,описываемых функцией Михаэлис-Мэнтен. - Докл. АН УССР, сер. Б, .1981, № 9, с. 75-77.

38. Зиньковский В.Г., Головенко Н.Я., Жук О.В. Оптимизация экстракции лекарственных веществ из биологических сред. Хим.-фарм. журнал, 1983, № 3, с. 361-366.

39. Панаева И.П., Карякин А.В., Аленичева Т.В., Бурмантова И.П., Алимов Г.А., Арчаков А.И., Зенкевич Г.Д. Дыхание и окислительное фосфориллирование в изолированных клетках печени. Цитология, 1978, 17, № 5, с. 545-551.

40. Карузина И.И., Арчаков А.И. Выделение микросомальной фракции печени и характеристика ее окислительных систем. В кн.: Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977, с. 49-62.

41. Корниш-Боуден Э. Основы ферментативной кинетики. М.: Мир, 1979, 280 с.

42. Кривченкова Р.С. Определение активности сукцинатдегид-рогеназьт в суспензии митохондрий. В кн.: Современные методыв биохимии. М.: Медицина, 1977, с. 44-46.

43. Кругляк Ю.А., Дядюша Г.Г., Куприевич В.А., Подольская JI.M., Коган Г.И. Методы расчета электронной структуры и спектров молекул. К.: Наукова думка, 1969, 303 с.

44. Кун М.Д. Структурные и функциональные характеристика высокоочишенных изоформ цитохрома Р-450 микросом печени. В кн.: Цитохром Р-450 - структура и функция. (Минск, июнь, 1982), Минск,1982, с. 99.

45. Лакин К.М., Крылов Ю.Ф. Биотрансформация лекарственных вешеств. М.:.Наука, 1981, 340 с.

46. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1980, 291 с.

47. Ляхович В.В., Цырлов И.Б. Структурные аспекты биохимии минооксигеназ. Новосибирск: Наука, 1978, 235 с.

48. Ляхович В.В., Цырлов И.Б. Индукция ферментов метаболизма ксенобиотиков. Новосибирск: Наука, 1981, 238 с.

49. Мансурова И.Д., Роль ЭПР в обмене лекарственных препаратов. Эксперем. патол. печени, Душанбе, 1973, в. 4, с. 6-24.

50. Метелица Д.И. Активация кислорода ферментными системами. М.: Наука, 1982, 295 с.

51. Мэдди Э. Биохимическое исследование мембран. М.: Мир, 1979, 458 с.

52. Парк Д. Биохимия чужеродных соединений. М.: Медицина, 1973, 287 с.

53. Петков В. Лекарство, организм, фармакологический эффект. София: Медицина и физкультура, 1974, 350 с.

54. Пиотровский Е. Использование кинетики метаболизма и выведение токсических вешеств в решении проблем промышленной токсикологии. М.: Медицина, 1976, 195 с.

55. Плохинский И.А. Алгоритмы биометрии. Московский университет, 1980, 150 с.

56. Рукпауль К., Шварц Д., Бланк Ю., Райн X. Роль фосфоли-пидов в модуляции ферментной активности цитохрома Р-450. В кн.:

57. Цитохром Р-450 структура и функция. Тез. докл. Всесоюзн. симп. (Минск, июнь, 1982). Минск, 1982, с. 12.

58. Сергеев П.В., Ведерникова И.И., Майский А.Л., Арчаков А.И. Механизмы индукции барбитуратами ферментных систем, мета-болизируюших лекарственные соединения Фармакол. и токсикол., 1973, 36, № 3, с.365-376.

59. Сергеев П.В., Халилов Э.М., Арчаков А.И., Сейфулла Р.Д., Девиченский Р.Д., Карузина И.И. Гидроксилирование ксенобиотикови стероидов в эндоплазматическом ретикулуме печени крыс. Бюлл. эксп. биол. и мед., 1976, № 3, с. 299-302.

60. Середенин С.Б., Головенко Н.Я., Бледнов Ю.А., Зиньковский В.Г., Бадыштов Б.М. Распределение "^С-феназепама в организме белых крыс. Хим.-фарм. журнал, 1976, 12, № 10, с. 22-24.

61. Середенин С.Б., Головенко Н.Я., Бледнов Ю.А., Зиньковский В.Г., Бадыштов Б.И. Распределение ^С-феназепама в организме белых крыс. Бюлл. экспер. биол. и мед., 1980, № I, с. 2729.

62. Середенин С.Б., Зиньковский В.Г., Бадыштов Б.А., Головенко Н.Я., Рыбина И.В. Изучение генетических различий в проти-восудорожном эффекте и скорости метаболизма феназепама. Бюлл. экспер. биол. и мед., 1981, № 10, с. 450-452.

63. Середенин С.Б., Зиньковский В.Г., Головенко Н.Я., Рыбина И.В. Экспериментальное изучение генетических различий в метаболизме и распределении феназепама-^С. Хим.-фарм. журнал, 1981, №9, с. 787-790.

64. Середенин С.Б., Зиньковский В.Г., Головенко Н.Я., Рыбина И.В. Изучение генетических различий в выведении феназепама-14С. Вопр. мед. химии 1981, № 6, с. 788-790.

65. Соловьев В.Н., Фирсов А.А., Филов В.А. Фармакокинетика (руководство). М.: Медицина, 1980, 423 с.

66. Цырлов И.Б., Громова О.А., Ривкинд Н.В., Вакулин Т.Н., Ляхович В.В. Субстратный тип индукции фенобарбиталом микросомаль-ных монооксигеназ в печени. Биохимия, 42, № 7, с. II84-II94.

67. Цырлов И.Б., Захарова Н.Е., Ляхович В.В. Роль первичного метаболизма индукторов в механизме действия 3-метилхолан-трена и фенобарбитала. Докл. АН СССР, 1975, 223, № I, с. 237240.

68. Чечер С.И. Транспортная функция сывороточного альбумина. М.: АН СССР, 1975, 183 с.

69. Шарбатян П.А. Масс-спектрометрическое исследование бенздиазепинов и их производных: Автореф. дис. . канд. хим. наук. М., 1976, 24 с.

70. Эйхгорн Г. Неорганическая биохимия. М.: Мир, 1978, 2, 735 с.

71. Якубовская Л.Н., Богатский А.В., Андронати С.А., Зиньковский В.Г., Головенко Н.Я. Синтез феназепама -С*4 и его потенциальных метаболитов. Хим.-фарм. журнал, 1979, в. 2, № 13, с. 85-89.

72. Si. Andersson В., Berggren M«, Moldeus P. Conjugation of vari-rious drugs in isolated hepatocytes. Drug. Metab. and Disposit., 1978, 6, N6, p.611-616.

73. Argyris P.S., Heinemann R. Eibosome accumulation in 3» methylcholantrene induced liver growth in aduld male rats. Exp. and Mol. Pathol., 1975, 22, N3, p.335-341.

74. Axelrod H. Biochemical factors in the activ&tin of drugs. Arch. Exp. Path. Riarmacol., i960 , 241 p,238-241.

75. Backes W.I»., Canady W.J. The interaction of hepatic cytochrome P-450 with organic solvents. J. Biol.Chem., 1981, 256, F1IC, p. 7213-7227.

76. Barbieri E.J., Ciaccio J* Depression of drug metabolism in the mouse by a combination of Mycobacterium buieyricum and anaesthetics. Brith. J. Pharmacol. 1979, 65, K1, p.111-117.

77. Bell S., Childress S. Rearrangmeat of 5-aryl-1,3-di-hydro-2H-^l ,4-benzodiazepine-2-one-4-oxyde. J. Org. Chem., 1962, 27, РИ691-1694.

78. Billings R.E., McMahon R.B.,Asmore J., Wagll S.R., Themetabolism of drugs in isolated rat hepatocytes. A comparison with in vivo drug metabolism and drug metabolism in subcellular liver fractions. Drug. Metab. and Disposit., 1977, 5, N6, p.518-526.

79. Clifford J., Smith W.,Tiie determination of some 1,4-benzodiazepines and their metabolites in body fluids*- Analyst*,1974, 99, N 1178, p. 242-272.

80. Comal K., Gay lor J.L. Exystence and separation of three forms of cytochrome P-450 from rat liver microsomes. J. Biol. Chem., 1973, 248, N 23, P. 49^7-4954.

81. Correia M.A., Meyer U.A., Schmid R. Apocytocrome P-450: reconstitution of functional cytochrome with hemin in vitro. — Fed. Proc., 1974, 33t N 3, p. 588-595.

82. Dallner G. Studies on the structural and enzymatic or-ni sat ion of the membranous elements of liver microsomes. Acta Pathol. Microb. Scand. Suppl., 1963, 166, H 1, p, 3-94.

83. Dallner G., Ernster L. Subfractionation and composition of microsomal membranes: a reviev. J. Hist о chem. Cytochem., 1968, 16, N 3, P. 611-632.

84. DiCarlo F.J., Viau J.P. Prazepam metabolites in dog urine. J. Pharm. Sci., 1970, 59, N 2, p. 322-325*1153 97 • Dlsche Ij* Ini Nucleic Acids* SdSi Е» Qhsirgaff end J.R» Davidson. New York, Acad. Press, 1955, 1, p. 285-3o5.

85. Haugen D.A., Coon M.J., Kebert D.W. Induction of multiple forms of mouse liver cytocrome P-450. J. Biol. Chem., 1976, 251, H 6t p. 1817-1829.

86. Holtzman J.L. Effect of chronic phenobarbital administration on the turnover of hepatic microsomal protein. Biochem. Pharmacol., 1969» 18, N 10, p.2573-2576.

87. Jones D.P., OrreniuB Б», Mason S. Hemoprotein Quanti-tatuion in Isolated hepatocytes. Biochera. et Biophys. Acta, 1979, 576, И 1, p.17-29.

88. K&oh.ole M.S., Makhije S»G., Pauer S.3. Microsomal mixed-function oxydase system in human placenta substrate inter» actions with cytocrom P-45o. Indlcian J# Exp. Biol., 1978, 16, p. 263-264.

89. Kemath S.A., Narayan K.A. Interaction of Ca++ with endoplasmatic reticulum of rat liver. A standartized procedure for the isolation of rat liver microsomes. Anal. Biochem., 1972» 48, N 1, p. 53-61.

90. Knoll R., Christ W,, Muller-Oxlinghausen В., Coper Q. Formation of chlorpromasine by microsomes of sural 1 intestine. -Naunyn-Schraidelbergs, Arch. Pharmacol., 1977, 297, N2,p.l95-200.

91. Koehlin В., Schwartz M., Erol G., Oberhauslin W. Themetabolic fate of ^C-labelled chlordiazepoxyde in man, dog and the rat. J. Parmacol.tnd Exper. Therap., 1965,148 ,N3,p .399-411.

92. Lowry O.H., Rosenbrougjx H.J., Parr A.L.Kandall R.J. Protein measurement with the Folin reagent. J. Biol. Chem., 1951, 193, H2, p.265-275.

93. Lu A.Y.H., West S.B., Ryan P., Levin W. Characterisation of partially purifed cytochrome P-450 and P-44B from rat liver microsomes. Drug. Metab. and Disposit. Biol. Pate Chem., 1974, 1, H1, 29-39*

94. Lu A.Y.H,, West S.B., Vore M,, Sycur D., Levin W. The role of cytochrome b^ in hydrochylation by a reconstituted cytochrome P-450 containing system. J. Biol. Chem., 1974, 249, H21, p. 6701-6709.

95. Lu A.T.H. Multiplicity of liver drug metabolizing enzymes. Drug. Metab. Rev.,1979, 10, B2, p.187-208,

96. Lu A.Y.H., West S.B. Multiplicity of mammalian microsomal cytochrome P-450. Hiarmacol. Rev., 1979,31 ,N4,p.277-295.

97. Muller W., Wollert V. Interaction of benzodiazepines with serum human albumins.- Haynyn-Schmidelbergs Ann. Fharm., 1973, 278, НЗ, p. 301-312.

98. Bau H., Brendel K.f Idddiard C. Benzodiazepine metabolism in cultures of isolated hepatocytes and liver fragments of human fetus. Drug. Metab. Rev.,1979, 9, HI» Р- 131-146.

99. Horati R.E. Baarmacokinetica and molecular modification implications in drug design and evaluation. J. Phann. Sci., 1973, 62, N6, p. 865-888.

100. Onrara Т., Sato R. The carbon monoxyde binding pigment of liver microsomes. J.Biol.Chem.,1964, 239. N7, P.2370-2373.

101. Orrenius S., Will son B.I., Bahr 0., Schenkman G.B# On the significance of drug-induced spectral changes in liver microsomes. Biochem. Soc.Symp., 1971, H9, N34, p.210-212.

102. Parke D.V. Induction of the drug metabolizing enzymes •Basic Life Sci., 1975» 6i, p.207-271.

103. Parke D.V. Regulation of the drug-metabolizing enzymes.-Prog. Int. Symp. Univ. Surrey., 1976, p. 55-70.

104. Ragland W.L., Friend M., Trainer D.O. Inteaction between duck hepatits virus and DDI in duck. Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol., 1971, 2, p.236-239

105. Remmer H., Merker H.J. Effect of drugs on the formation of smooth endoplasmatic reticulum and drug-metabolizing enzymes.-Ann. N.V. Acad. Sci., 1965, 123, N1, p. 79-96.

106. Remmer H. The role of the liver in drug metabolism. -The Amer. J. of Med., 1970, 19» N5, p. 617-629.

107. Remmer H. Perspectives of the relative importance of hepatic and extrahepatic drug metabolism. 6-th Int. Congr. Pharmacol., Helsinki, 1975, Abstr.,S.I.,1975, p.145.

108. Rendic S., Kajfec F, Interaction of desmethyldiazepam with, rat liver microsomes.- Acta Pharm.Jugosi.,1980 , 30 ,N2, p. 141-149.- 159

109. Roberts R.K., Wilkinson G.K., Brauch R.A., Schenker S. Effect of age and parenchymal liver dieaee on the disposition and elimination of chlordi zepoxyde (librium ). Gastroenthero-logy, 1978 , 75, H3t P. 479^85.

110. Robertson H.A. Benzodiazepine receptor in "emotional" and "non-emotional" mice comparison of four strains, Europ. J. Pharmacol., 1979, 56, N 1-2, p. 163-166.

111. Ruelins H., bee I., Album H. Metabolism of diazepam in dogs: transformation to oxasepam.- Arch, of Biochem. and Biophys., 1965, 111, N2, p.376-380.

112. By an D., Lu Y.H., West S., Levin W. Hygli purifed cytochrome P-448 and P-4-50 from rat liver microsomes. Biochem. and Biophys. Res. Communs., 1975, 64, N4-, p. 1134-1141.

113. Ryan D., Lu Y.H., West S., Levin W. Multiple forms of cytochrome P-450 in phenobarbital and 3-methylcholantrene- treated rats. Separation and spectral properties. J. Biol. Chem., 1975, 250, N6, p. 2157-2163.

114. Sadee W.J. Pragmentation pattern of 1,4-benzodiazepine-2-ones under electron impact. U.Med. Chem., 1970, 13, N3, p. 4-75-4-79.

115. Salhab A.S., Dujovne C.A. Chlorpromazine uptake by isolated rat hepatocytes. Esq?. Biol, and Med., 1979, 161, Ю, p. 270-274.

116. Sawada H., Yamo H., Kido A. The study of" bromazepam metabolism. 1 .Elimination and identification of metabolites of bromazepam in urine. J. Iharm. Soc. Jap., 1972,12, N10, p. 1237-1241.

117. Shenkman J.B., Remmer H., Estabrook R.W. Spectral studies of drug interaction with hepatic microsomal cytochrome P-450. -Mol. Pharmacol., 19^7, 3, N1, p. 113-123.

118. Schwartz M., Koechlin В., Postma E., Palmer S., Krol G. Metabolism of diazepam in rat, dog and man. J. Pharmacol, and Exper. Therap., 1965, 149, N3, P. 423-435.

119. Silva J.A.de, Morton A., Stepanovic V., Kaplan J, dAconte L. Determination of diazepam in blood by gas-liquid chromatography Anal. Chem., 1964, N 36, p. 2099-2105.

120. Sisenwine S.F., Tio C.O., Schrader S», Ruelins H. The biotransformation of oxasepam in man, miniature swine and rat. -Arzneimittel.-Forsch., 1972, 22, N4, p. 682-687.

121. Staudinger H.J., Zubrizfcy A. Zur Kinetik der mikrosoma-len NADPH-Oxydation bei verschidenen Sauerstoffdrucken. Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem., 1965, 340, H1, p. 191-199.

122. Steidinger I., Schmid E. Untersuchungen uber den Schtoff-wechsel von 7-chlor-l ,3-dihidro-3-hydroxy-5-ph.enyl-2H-^l ,4-benzodi-azepine-2-on»- Arzneimittel.-Forsoh.,1970 , 20, H9, s.1232-1235.

123. Sternbach L.H. Chemistry of 1 ^-"benzodiazepines and some aspects of the structure-activiti relationship. In: The benzodiazepines (Ed. by S. Garattini, E.Mussini, L.Randall), K.Y., Raven press, 1973, p.1-26.

124. Takashi G. Some properties of kidney cortex splenic microsomal NADPH-cytochrome с reductase.- FEBS Lett.,1974, 46, N1, p. 31-54.

125. Tateichi M., Shimizu H. A new metabolic pathway of bromazepam involving attachment of methyl two group. Xenobio-tica, 1976, 6, H7, p. 431-439.

126. Tephly T.R., Hasegawa E., Baron G. Effect of drug on heme synthesis in liver. Metabolism,1971,20,112, p.200-214.

127. Thurman R.G., Kauffman F.C. Factors regulating drug metabolism in intact hepatocytes. Pharmacol.Rev., 1979, 31, N4, p. 229-251.

128. Viau J.P., Epps E.J., DiCarlo F.J. Erazepam metabolism after chronic administration to humans.- Xenobiotica, 1973, 3» E9, p. 581-587.

129. Viau J.P., Epps E.J., DiCrlo F.J. Prazepam metabolism in the rat. J. Pharm. Sci., 1973, 62, H4, p. 641-645.

130. Weiching R.R., Mangeniello V.0.,Chou R., Ihillips A.H. Purification of hepatic microsomal membranes. Biochem., 1972,11, N13, P* 3128-3135.

131. Werringloer J., Estabrook R.W. Heterogenity of liver microsomal cytochrome P-450; the spectral characterisation of reactants with reduced cytochrome P-450. Arch. Biochem. and Biophys., 1975, 167, N1, P. 270-286.

132. Yin T.D., Rossum M. Isolated rat hepatocytes and 9000 g supernatant as metabolic systems for the study of the pharmacokinetics of barbiturates. Xenobiotica, 1977, 7, N9, p.573-582.

133. Yoshida J., Kumaoki H. Studies on the substrate induced spectral changes of cytochrome P-4-50 in liver microsomes. — J* Biochem., 1975, 78, H3, p .4-56-468.

134. Zakin D., Vassey D. Techniques for characterisation of glucoso-6-phosphate and their tighly-bound microsomal enzymes.-Method of Microchem, Anal., 1973, 21, p. 1-38.