Обмен коллагена костной ткани крыс при воздействии преднизолоном в условиях экспериментального диабета

Данилова, Ольга Владимировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Обмен коллагена костной ткани крыс при воздействии преднизолоном в условиях экспериментального диабета
ВАК РФ 03.01.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Обмен коллагена костной ткани крыс при воздействии преднизолоном в условиях экспериментального диабета"

На правах рукописи

ДАНИЛОВА ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА

ОБМЕН КОЛЛАГЕНА КОСТНОЙ ТКАНИ КРЫС ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРЕДНИЗОЛОНОМ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО

ДИАБЕТА

03.01.04. - биохимия

Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

2/,

Уфа-2010

004608154

Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ижевская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Бутолин Евгений Германович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Моругова Татьяна Вячеславовна

доктор медицинских наук, профессор Высокогорский Валерий Евгеньевич

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Казанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита диссертации состоится >^-/¿2^-2^2010 г. в ^Учас. на

заседании диссертационного совета Д.208.006.03 при государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», г. Уфа, ул. Ленина, д.З.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (430000, г. Уфа, ул. Ленина, д. 3).

Автореферат разослан '£2 » /¿^¿¿2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета: доктор медицинских наук, профессор

Г.Х. Мирсаева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Сахарный диабет (СД) в настоящее время является третьей по распространенности нозологией (М.И. Балаболкин, 2000; М.Г. Давидович и соавт., 2009) и является глобальной медико-социальной проблемой для здравоохранения всех стран мира и пациентов всех возрастов. В настоящее время в мире насчитывается около 175 млн. больных СД, а к 2025 году, ВОЗ прогнозирует увеличение численности болеющих свыше 300 млн. человек, из которых 80-90 % составят больные СД 2 типа (Е.Б. Кравец, 2005; М.И. Балаболкин, 2007; М.Г. Давыдович и соавт., 2009; E.Adeghate et al., 2006). В развитых странах ВОЗ предсказывает к 2025 году увеличение числа больных СД на 41 % (с 51 до 72 млн. человек) (К.Ф. Вартанян, 1999; А.Н. Шишкин и соавт., 2008).

Большая социальная значимость СД заключается в ранней инвалидизации и летальности в связи с поздними осложнениями. Метаболические нарушения, сосудистые и неврологические осложнения СД приводят к развитию изменений практически всех органов и тканей (М.И. Балаболкин, 2000; М.Г. Давыдович и соавт., 2009). Среди них значительное место занимают поражения костной ткани (С.Н. Ткач и соавт., 1986; Н.В. Савинова, 2004). Потеря минеральных компонентов и изменения костной ткани признаны хроническим осложнением СД (В.Л. Орленко, 2000; Я.В. Гирш, 2003).

Несмотря на значительные успехи, достигнутые в области диагностики, изучения патогенеза СД и его влияния на различные органы и системы организма, многие аспекты этой проблемы остаются недостаточно освещенными, в том числе вопрос о развитии костных изменений при этой патологии. Имеющие данные литературы об особенностях метаболизма костной ткани, частоте и механизмах развития остеопении при СД носят достаточно противоречивый характер (P.E. Чечурин, 1999; К.Ф. Вартанян, 2003).

Поражение костной системы при СД является одним из малоизученных и малоосвещенных в литературе разделов клинической диабетологии (В.Л. Орленко, 2000). Анализ литературы позволяет заметить, что единого мнения по вопросу о частоте поражения костной системы не существует. По данным различных авторов, патологические изменения костной ткани при диабете встречаются от 0,1 % до 77,8 % наблюдений. Опасность развития

<Cl

малообратимых изменений костной ткани и их значительная роль в снижении качества жизни больных СД определяют необходимость дальнейшего изучения механизмов развития диабетической остеопатии.

В патогенезе изменений костной ткани при СД, помимо инсулиновой недостаточности, важную роль играет избыток глюкокортикоидов (ГК) в организме (С.Н. Ткач и соавт., 1986), способный вызывать нарушение минерального обмена, что приводит к развитию остеопороза (Е.Л. Насонов, 1999). В целом сведения об этом влиянии ГК противоречивы и не поддаются однозначной трактовке (З.А. Бурнашова, 2000).

Основным условием динамической устойчивости костной ткани является функциональное состояние белкового компонента кости и, прежде всего, коллагена (П.А. Ревелл 1993, Н.В. Корнилов и соавт., 2000). В связи с этим возникает интерес к вопросу о состоянии обмена костного коллагена в условиях диабета и гиперкортицизма. ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Определить особенности обмена коллагена в костной ткани и продуктов его метаболизма в плазме крови крыс при аллоксановом диабете, экзогенном гиперкортицизме, их сочетании, а также в условиях дефицита кортикостероидных гормонов. ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Изучить изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и плазме крови крыс в динамике аллоксанового диабета.

2. Исследовать показатели обмена коллагена в костной ткани и плазме крови крыс при введении высоких доз преднизолона.

3. Изучить изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и плазме крови крыс при сочетании аллоксанового диабета с введением высоких доз преднизолона.

4. Выявить особенности обмена коллагена и его метаболитов в костной ткани и плазме крови крыс при аллоксановом диабете в условиях дефицита кортикостероидных гормонов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

В работе впервые выявлено, что экзогенный гиперкортицизм вызывает в начальные сроки воздействия усиление, как процессов синтеза, так и распада коллагена костной ткани. Преобладание катаболизма приводит к снижению содержания суммарного коллагена. Невысокая активность анаболических

процессов во второй декаде опыта сопровождается низким содержанием нерастворимого и суммарного коллагенов в губчатой костной ткани.

Впервые получены данные об особенностях обмена коллагена в диафизе бедренной кости и теле 2-го поясничного позвонка в динамике экзогенного гиперкортицизма, аллоксанового диабета и их сочетании. Показано, что в обмене коллагена костной ткани при аллоксановом диабете в первые 30 дней эксперимента превалировали процессы катаболизма на фоне стойкого угнетения процессов его синтеза.

Показано, что при аллоксановом диабете, протекающем на фоне введения преднизолона, в первые дни опыта наблюдалось одновременное угнетение процессов синтеза и распада. В последующие сроки эксперимента рассогласованность анаболических и катаболических реакций в костной ткани вызвали неодинаковые изменения: в компактной кости - усиление катаболизма, а в губчатой - угнетение и синтеза, и распада коллагена.

Обнаружено, что угнетение стероидогенеза при аллоксановом диабете вызывает снижение интенсивности катаболизма коллагена костной ткани и преобладание его синтеза, что приводит к увеличению содержания суммарного коллагена в компактной и губчатой костной ткани. НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Полученные в ходе эксперимента данные расширяют имеющиеся представления об особенностях обмена коллагена костной ткани при экзогенном гиперкортицизме, аллоксановом диабете, их сочетании, а также дополняют имеющиеся в литературе сведения, касающиеся важной роли глюкокортикоидов в регуляции обмена коллагена костной ткани при диабете.

Результаты исследований могут быть использованы в изучении патогенеза остеопатий у больных СД.

Примененные биохимические методы определения уровня метаболитов коллагена в крови могут быть использованы, в комплексе с другими методами, для оценки состояния обмена коллагена костной ткани у больных СД. ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ: 1. Аллоксановый диабет и экзогенный гиперкортицизм сопровождаются изменениями в обмене коллагена костной ткани, характеризующимися преобладанием катаболических процессов.

2. Дефицит глюкокортикоидных гормонов на фоне аллоксанового диабета вызывает изменения в обмене коллагена костной ткани, нарушая равновесие между процессами его распада и синтеза, с преобладанием последних. АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Материалы диссертации доложены на Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 85-летию Самарского государственного медицинского университета «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины» (Самара, 2005); VI Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Санкт-Петербург, 2008), совместном научном заседании сотрудников кафедр биохимии, нормальной физиологии, патофизиологии, клинической биохимии и лабораторной диагностики, биологии с экологией (Ижевск, 2010). ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 14 работ, в том числе 3 - в журналах, рекомендованных ВАК Российской Федерации. ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

Данные о состоянии обмена коллагена костной ткани при экзогенном гиперкортицизме и аплоксановом диабете включены в лекционные курсы по биохимии, клинической биохимии и лабораторной диагностики, нормальной физиологии для студентов и слушателей факультета повышения квалификации и профессиональной переподготовки, используются в научно-исследовательской работе кафедры биохимии ГОУ ВПО ИГМА. СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация объемом 144 страницы машинописного текста состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 10 рисунками. Список литературы содержит 228 источника (119 на русском и 109 на иностранных языках).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Опыты проведены на 284 белых беспородных крысах-самцах массой 180230 г, находящихся на стандартном рационе вивария со свободным доступом к воде. При проведении экспериментов соблюдались положения Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным (Одобрительная форма комитета по биомедицинской этике №154).

Инсулинзависимый сахарный диабет вызывали путем однократного подкожного введения аллоксана тетрагидрата (мезоксалилмочевина, «Fluka Chemika», Швеция) в дозе 170 мг/кг веса животного (H.A. Пальчикова и соавт., 1987).

Для выяснения влияния глюкокортикоидов на обмен коллагена костной ткани проведены серии, моделирующие избыточное и недостаточное содержание ГК в организме.

Избыток ГК (экзогенный гиперкортицизм) моделировали путем введения преднизолона («Гедеон Рихтер», Венгрия) в дозе 50 мг/кг - в течение 14 дней (J.L. Ambrus et al., 1978).

Явления гипокортицизма индуцировали путем ежедневного подкожного введения аминоглютетимида («ПЛИВА», Хорватия) в дозе 50-100 мг/кг массы тела животного по схеме (В.П. Комиссаренко, 1972). Аминоглютетимид (3-(4-аминофенил)-3-этил-2,6 пипериндион) ингибирует синтез глюкокортикоидов и минералокортикоидов в коре надпочечников, подавляя превращение холестерина в прегненолон, а также синтез эстрогенов, подавляя ароматизацию первого кольца (П.В. Сергеев, 1984)

Для выяснения влияния ГК на обмен коллагена костной ткани. при инсулинзависимом диабете проведены серии с сочетанными воздействиями: диабет на фоне введения преднизолона и диабет на фоне введения аминоглютетимида. :::

Анализ показателей обмена коллагена в плазме крови, диафизе бедренной кости (компактный костная ткань), теле 2-го поясничного позвонка (губчатая костная ткань) проводили на 5, 15, 20, 30 и 45 дни опыта. В указанные дни проводили декапитацию животных под кратковременным эфирным наркозом.

В плазме крови исследовали показатели, характеризующие обмен коллагена: содержание свободного (СО), пептидносвязанного (ПСО) гидроксипролина (П.Н. Шараев и соавт., 1981); коллагенолитическую активность (КА) (Е. Schalinatus et al., 1978; в модификации П.Н. Шараева и соавт., 1987).

Состояние метаболизма коллагена в костной ткани оценивали по содержанию свободного гидроксипролина (СО) (П.Н. Шараев и соавт., 1976); суммарного коллагена (CK) (П.Н. Шараев и соавт., 1976) и его фракций: нейтральносолерастворимой (HPK), цитратрастворимой (ЦРК) и нерастворимой

(НК) (Л.И. Слуцкий, 1969; Л.Я. Прошина, 1982; В.Б. Спиричев, 1984); коллагенолитической активности (КА) (Е. Schalinatus et al., 1978).

Количество СО и ПСО в плазме крови выражали в микромолях на 1 литр плазмы крови (мкмоль/л). Содержание СО, СК и его фракций в исследуемых тканях выражали в миллимолях гидроксипролина на 1 килограмм сухой обезжиренной ткани (мкмоль/кг). КА в плазме крови и тканях выражали в микромолях гидроксипролина на 1 грамм белка за 1 час (мкмоль/г/ч).

Воспроизведение аллоксанового диабета контролировали, определяя в крови концентрацию: глюкозы глюкозооксидазным методом («Витал Диагностике СПб», Россия); гликозилированного гемоглобина («Лахема Диагностика Брно», Словакия).

Кроме того, в крови определяли: уровень 11-ОКС (А.Г. Резников, 1980); содержание общего кальция и активность щелочной фосфатазы наборами «Витал Диагностике СПб», Россия.

В исследуемой костной ткани определяли содержание кальция титрометрическим методом (Д.М. Зубаиров, 2001).

Концентрацию изучаемых показателей в крови выражали: 11-ОКС - в микрограммах на 1 литр плазмы (мкг/л), общего кальция и глюкозы в миллимолях на 1 литр плазмы (ммоль/л), гликированного гемоглобина - в микромолях фруктозы на 1 грамм гемоглобина (мкмоль/г НЬ), активность щелочной фосфатазы - в наномолях на литр плазмы за секунду (нмоль/(с*л)). Количество кальция в костной ткани выражали в молях на килограмм сухой ткани (моль/кг).

В качестве контроля были использованы результаты исследований, проведенных на интактных животных и крысах с подкожным введением 0,9 % раствора натрия хлорида.

Результаты исследований обрабатывали методом вариационной статистики с определением достоверности измерений (р) по критерию Стьюдента (t), оценка нормальности распределения признаков проводилась по критерию Шапиро-Уилка, связь между явлениями оценивали при помощи корреляционного анализа, рассчитывая коэффициент корреляции Пирсона (г). Математические операции проводились с использованием компьютерной программы «Excel 2003».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Коллаген составляет около 90 % всех белков костной ткани (Л.Я. Рожинская, 2000; В.В. Поворознюк и соавт., 2004; M.F.Young, 2003; P.Fratzl et al., 2004). Метаболизм коллагена подразумевает наряду с постоянным биосинтезом, уравновешивающий его процесс катаболизма (Л.И. Слуцкий, 1969; Е.Г. Бутолин и соавт., 2005). Изучение фракционного состава коллагена позволяет судить о характере изменений в обмене исследуемого биополимера. На ускорение синтеза указывает увеличение содержания суммарного коллагена и его растворимых фракций (В.И. Мазуров, 1974; В.Н. Никитин и соавт., 1977; С.Е. Переведенцева 1997). Катаболические процессы приводят к повышению коллагенолитической активности, содержания свободного гидроксипролина и снижению суммарного коллагена в тканях (Л.И. Слуцкий, 1969; П.Н. Шараев, 2001; Н.В. Савинова, 2004).

При экзогенном гиперкортицизме, моделируемом введением животным преднизолона, содержание 11-ОКС в плазме крови крыс возрастало к 5 дню до 638,23±60,28 мкг/л (+177,28 %; р=2,58*10-10) против 230,17±13,70 мкг/л в контроле, оставалось повышенным на 15 и 20 дни опыта, начиная с 30 дня, уровень исследуемых гормонов не отличался от данных интактных животных.

Концентрация глюкозы в плазме крови опытных животных была повышена в течение 30 дней опыта и достигала максимума на 5 день наблюдения (7,7±0,50 ммоль/л; р=0,004). В последующие дни уровень гликемии медленно уменьшался, оставаясь при этом выше контрольных значений, а на 45 день снижался на 11,21 % (р=0,022) в сравнении с контролем. Уровень гликированного гемоглобина не менялся на протяжении всего опыта.

Содержание СО в плазме крови при введении преднизолона возрастало на 5 и 20 дни эксперимента соответственно на 39,96 % (р=0,0002) и 66,83 % (р=0,01). Уровень ПСО повышался на 5 день наблюдения на 68,09 % (р=0,048), затем снижался к 15 дню до 4,13±1,06 мкмоль/л (-74,36 %; р=5*10"6), а с 20 дня наблюдения значимо не изменялся. КА в плазме крови существенно возрастала на 5 и 30 дни после введения преднизолона на 404,31 % (р=0,005) и 194,83 % (р=0,0002) соответственно.

В обмене коллагена костной ткани крыс при введении преднизолона на 5 день отмечалось усиление, как процессов синтеза, так и распада. Об активации анаболизма свидетельствует увеличение содержания НРК в бедренной кости с 10,54±0,41 до 17,51+0,95 ммоль/кг (р=6*106), а в позвонке с 12,17±0,47 до

17,39±1,59 ммоль/кг (р=0,012). Параллельно возрастал уровень ЦРК в позвонке с 4,99±0,39 до 6,18±0,29 ммоль/кг (р=0,026). Увеличение интенсивности распада характеризовалось повышением в ткани бедренной кости и позвонка уровня СО соответственно на 30,48 % (р=3,4*10 5) и 81,83 % (р=107), снижением содержания НК в диафизе бедренной кости с 175,05±6,16 до 121,81 ммоль/кг (р=2,2*10 5), а в ткани позвонка с 182,32±4,54 до 113,35±6,30 ммоль/кг (р=2,6*107). В последующие дни динамика обмена коллагена носила неодинаковый характер в компактной и губчатой костной ткани. В диафизе бедра процессы распада активно протекали с 20 по 30 дни: в этот период содержание СО в ткани возрастало соответственно до 0,95±0,05 (р=0,02) и 0,97±0,05 (р=0,03), против 0,76±0,04 ммоль/кг в контроле. К А на 43,69 % (р=0,012) и на 47,74 % (р=0,011) соответственно превышала данные интактных животных. На 45 день СО и КА в компактной кости были снижены, а в ткани позвонка процессы катаболизма были угнетены на 15, 20 и 45 дни воздействия, СО в эти сроки был снижен соответственно на 21,65 % (р=0,0094), 53,43 % (р=108) и 20,17 % (р=0,016). КА в этот период достигала лишь 0,61±0Д2 (р=0,039), 0,57+0,11 (р=0,045) и 0,58±0,16 мкмоль/г/ч (р=0,014) соответственно против 1,25±0,19 мкмоль/г/ч в контроле. В обеих изучаемых тканях с 15 по 20 дни эксперимента синтетические реакции были угнетены: уровень НРК снижался в ткани бедра на 20,39 % (р=0,027) и 52,96 % (р=2,1*10 8), в позвонке

- на 37,95 % (р=7,5*10~5) и 67,98 % (р=5*Ю10) соответственно.

Рассогласованность процессов синтеза и распада коллагена привели к снижению содержания СК в диафизе бедренной кости на 5 день наблюдения с 187,32±4,03 до 138,26±6,52 ммоль/кг (р=10"6). В теле поясничного позвонка снижение уровня СК отмечалось на 5, 15 и 20 дни наблюдения с 197,20±3,29 до 136,92±6,47 (р=2,52*10"9), 147,6±3,99 (р=7,6ПО"10) и 178,88±5,68 ммоль/кг (р=0,044) соответственно. Возможно это связано с тем, что ГК угнетают образование остеобластов и синтез коллагена (Л.И. Слуцкий, 1969; А.М. Герасимов и соавт., 1986; Ф. Франке и соавт., 1995; В.Г. Подковкин и соавт., 2009; ¡^етеЬасИ, 2008), путем снижения уровня м-РНК проколлагена, а также

- ингибированием активности ферментов пролил- и лизилгидроксилаз. (Л.Я. Рожинская, 2000; Е.С Северин, 2003). В наших исследованиях обнаружена отрицательная корреляция между концентрацией 11-ОКС в плазме крови и содержанием СК в теле 2-го поясничного позвонка (г=-71; р<0,01).

Резорбтивное действие ГК можно объяснить тем, что при их введении изменяется соотношение OPG/RANKL. RANKL экспрессирован на клеточной поверхности остеобластов и их предшественников, связывается с RANK, находящимся на предшественниках остеокластов и стимулирует дифференцировку и активность остеокластов (Е.Г. Зоткин, 2003; А.П. Шепелькевич и соавт., 2008; Н.М. Шуба, 2008; W.J. Boyle et al., 2003). ГК повышают синтез коллагеназы за счет постгранскрипционных механизмов, а также вызывают подавление синтеза тканевого ингибитора металлопротеиназы-I, что, по-видимому, и определяет стимулирующий эффект гормонов на деградацию коллагена I типа (Е.Г. Зоткин, 2003). Кроме того, ГК повышают костную резорбцию за счет подавления всасывания кальция в кишечнике и увеличения экскреции кальция в связи с ухудшением канальцевой реабсорбции, вызывая тем самым транзиторную гипокальциемию (Франке и соавт., 1995; В.В. Поворознюк и соавт., 2004), которая стимулирует выработку паратгормона и усиливает резорбцию костной ткани (Л.Я Рожинская, 2000; Ф.Х. Камилов и соавт., 2005; Е.М. Kagel et al., 1995; С.А. Ш et al., 2002). В наших исследованиях введение животным преднизолона сопровождалось снижением содержания кальция в диафизе бедренной кости в первые 20 дней исследования, а в теле 2-го поясничного позвонка - в течение всего эксперимента.

При аллоксановом диабете увеличение концентрации глюкозы в плазме отмечалось у животных во все дни наблюдения. Наибольших значений гипергликемия достигала на 5 и 30 дни эксперимента, когда уровень глюкозы с 6,10±0,16 ммоль/л возрастал соответственно до 9,06±0,64 (р=0,005) и 9,45±0,23 ммоль/л (р=2,9*Ю"10). Содержание гликированного гемоглобина в плазме крови крыс возросло к 15 дню эксперимента до 4,47±0,19 (+22,49 %; р=0,011) против 3,65±0,25 мкмоль/гНЬ в контроле и оставалось повышенным во все последующие дни наблюдения.

Динамика содержания 11-ОКС в плазме крыс с аллоксановым диабетом носила фазный характер: на 5 день опыта концентрация гормонов снизилась до 110,13±17,31 мкг/л (р=10 5), что на 52,15 % меньше значений интактных крыс (230,17±13,70 мкг/л), на 15 день значимых изменений не выявлялось, а на 20, 30 и 45 день определялось выраженное увеличение концентрации 11-ОКС в плазме крови.

_ П гЦ.

к TS

а НРКИЦРКЖНК Дни опыта

100 80 60 40 20 0 -20 -40 -60 -80 -100

Ш]

О HPK 0 ЦРК ■ НК д„и опыт«

_ Дни опыта DHPK ИЦРКИНК] Дни опыта

В HPK □ ЦРК М НК | --

Рис. 1. Изменение фракционного состава коллагена в диафизе бедренной кости (слева) и теле 2-го поясничного позвонка (справа) при введении преднизолона (А), аллоксановом диабете (Б) и при сочетании аллоксанового диабета с введением преднизолона (В). Обозначения: HPK -нейтральносолерастворимый коллаген; ЦРК - цитратрастворимый коллаген; НК - нерастворимый коллаген.

Достоверность к контролю: *-р<0,05; **-р<0,01; ***- р<0,001.

Содержание СО в плазме крови снижалось на 15 день опыта до 12,99±0,48 мкмоль/л (-23,55 %; р=0,002), в последующие дни опыта уровень СО

был выше контрольных значений, достигая максимума на 30 день - 55,39+1,61 мкмоль/л (+226,02 %; р=4,7*10"8). Динамика содержания ПСО носила сходный характер. В течение эксперимента значимых отличий КА плазмы крови не выявлялось.

В костной ткани крыс с аллоксановым диабетом отмечалось угнетение синтетических процессов в течение первых 30 дней эксперимента. В ткани диафиза бедра содержание HPK в эти сроки был снижено, достигая минимальных значений на 20 день - 6,75 ±0,33 (р=10 б) против 10,54 ±0,41 ммоль/кг в контроле. В ткани позвонка содержание этой растворимой фракции уменьшалось на 5, 20 и 30 дни соответственно на 56,7 % (р=1,4*107), 51,42 % (р=10 6) и 39,52 % (р=2*10"6). К 45 дню уровень HPK возрос и превышал данные интакгных животных в бедренной кости на 54,51 % (р=10 7), а в ткани позвонка на 26,22 % (р=0,043). Количество ЦРК в изучаемых тканях был меньше контрольных значений на 5, 20 и 30 дни наблюдения, достигая минимальных значений на 30 день опыта- 1,38+0,16 ммоль/кг (-67,32 %; р=10"5) в компактной кости и 1,45+0,29 ммоль/кг (70,98 %; р=10'5) в губчатой костной ткани.

Угнетение синтеза коллагена, вероятно, связано с дефицитом инсулина, который обладает анаболическим эффектом на метаболизм костной ткани и прямым стимулирующим влиянием на синтез изучаемого белка. (P.E. Чечурин и соавт., 1999; К.Ф. Вартанян, 2003; Ф.Х. Камилов и соавт., 2005). В условиях дефицита инсулина нарушается остеобластическая функция - происходит снижение выработки коллагена (Е.И. Марова, 2003; А.Н. Шишкин и соавт., 2008). Ряд авторов объясняют эти изменения пониженным образованием ИФР-1 и связывающих его белков (B.JI. Орленко, 2000; Е.И. Марова, 2003; А.Н. Шишкин и соавт., 2008; М. Cokolic, 1998).

При сахарном диабете изменения белкового обмена в костях связаны с катаболическим влиянием на него ГК (С.Н. Ткач и соавт., 1986). Относительная или абсолютная недостаточность инсулина сопровождается увеличением секреции ГК и приводит к активации остеокластов и усилению катаболических процессов в костном матриксе (B.JI. Орленко, 2000; P.Lopez-Ibarra et al., 1992).

В нашем исследовании катаболические реакции в ткани бедренной кости активно протекали с 15 по 20 дни исследования, в эти сроки отмечался рост СО на 58,10 % (р=10 5) и 63,10 % (р=0,01). КА на 15 день диабета превышала контроль на 28,09 % (р=0,045), достигая 1,12+0,05 мкмоль/г/ч. Обнаружена сильная корреляционная связь (г=0,70; р<0,01) между данным показателем и

содержанием СО в изучаемой ткани. В позвонке процессы распада протекали фазно: содержание СО повышалось на 15 и 30 день на 56,61 % (р=1,7*10 7) и 62,66 % (р=0,018) соответственно и уменьшалось на 20 и 45 дни соответственно на 44,56 % (р=0,006) и 48,72 % (р=1,69*10"7). Одновременно уменьшалась К А на 70,85 % (р=0,0014) и 59,32 % (р=0,049) соответственно указанным дням. На 45 день воздействия в обеих изучаемых тканях активировался синтез коллагена (возрастало содержание НРК), интенсивность катаболизма существенно снижалась.

На фоне описанных сдвигов в обмене коллагена содержание СК в диафизе бедренной кости снижалось к 20 дню на 20,45 % (р=0,00б) относительно контроля и составляло 148,94±10,34 ммоль/кг. Содержание СК в губчатой костной ткани было меньше контрольных значений во все сроки эксперимента, за исключением 30 дня. Минимальное содержание СК в теле позвонка отмечалось на 20 день диабета и составляло 132,92 ±7,80 ммоль/кг (33,30; р=8,2*10"9) против 197,20±3,29 ммоль/кг в контроле.

При сочетании аллоксанового диабета с введением преднизолона содержание глюкозы в плазме крови экспериментальных животных было повышено во все дни опыта, уровень гликемии был максимален на 5 и 15 день опыта, когда содержание глюкозы увеличивалось с 6,10±0,16 до 21,08±5,51 (р=0,034) и 16,83±1,7 ммоль/л (р=10б) соответственно. Количество гликированного гемоглобина возрастало к 5 дню эксперимента с 3,90±0,28 до 6,67±0,63 мкмоль/г НЬ (р=0,0014) и оставалось повышенным до 30 дня эксперимента, максимально отличаясь от контроля на 20 день - на 87,99 % (р=10-6).

Введение преднизолона на фоне аллоксанового диабета характеризовалось увеличением содержания 11-ОКС плазме крови на 5 и 15 дни исследования на 78,37 % (р=0,004) и 228,24 % (р=8,6*1015). На 20 день исследования содержание изучаемых гормонов значительно снижалось в сравнении с контрольными показателями.

В плазме крови КА была значительно повышена в первые 20 дней сочетанного воздействия, достигая максимума на 15 день опыта (+284,83%; р=0,0002). На 30 день исследования КА в плазме крови существенно снижалась в сравнении с контролем (0,031+0,003 мкмоль/г/ч; р=0,003). Концентрация СО в плазме на 20 и 30 дни превышала показатели интактных животных

соответственно на 226,02 % (р=5,05*10 8) и 82,12 % (р=0,008). Уровень ПСО в плазме крови был повышен в первые 20 дней воздействия.

ГК усиливают костную резорбцию и подавляют костеобразование, что приводит к снижению костной массы (Е.Г. Зоткин, 2003; Р. Oelzner et al., 1997; Е.Т. Molenaar et al., 2000). В компактной костной ткани увеличение КА отмечалось на 5 день (1,76±0,09 мкмоль/г/ч; р=10"6) и 15 дни сочетанного воздействия (3,32±0,55; р=0,0012). Начиная с 20 дня, данный показатель не отличался от значений контроля (0,87±0,09 мкмоль/г/ч), что также может быть связано со снижением содержания 11-ОКС в плазме крови. СО в ткани бедренной кости увеличивался с 20 по 30 дни исследования на 47,83 % (р=0,005) и 70,00 % (р=0,001). В ткани позвонка при сочетанном воздействии интенсивность процессов распада коллагена была невысока: с 5 по 15 день опыта уровень СО был снижен и составлял соответственно 0,50+0,09 (р=8*10-5) и 0,40±0,06 ммоль/кг (р=5,7*10"8), рост его отмечался лишь на 20 и 30 дни на 43,03 % (р=0,002) и 37,48 % (р=0,01). КА не изменялась значимо в первые дни исследования, а с 30 дня сочетанного воздействия была стойко угнетена.

Динамика содержания растворимых фракций коллагена в костной ткани при сочетании сахарного диабета и гиперкортицизма носила фазный характер. В компактной кости содержание HPK было снижено на 5 и 20 дни наблюдения на 31,35 % (р=0,004) и 17,84 % (р=0,049) в сравнении с контролем (13,23±0,85 ммль/кг), но, в отличие от серии с «чистым» диабетом, на 15 и 30 дни опыта показатель возрастал соответственно до 16,35±0,93 (р=0,027) и 17,24±0,86 ммоль/кг (р=0,007). В губчатой ткани позвонка уровень HPK снижался на 5 и 45 день на 49,42 % (р=4*10"8) и 25,38 % (р=0,0011) в сравнении с контролем (11,50±0,45 ммоль/кг), а на 15 день возрастал до 19,21±0,51 ммоль/кг (р=Ю"10). Активация синтетических процессов, возможно, связана с влиянием ГК на кальций-фосфорный обмен. Обнаруженная нами гиперкальциемия на 15 день исследования могла увеличить выработку кальцитонина, который ингибирует активность остеокластов и стимулирует остеобласты, увеличивая синтез ими коллагена (Б.Л. Риггз и соавт., 2000; Ф.Х. Камилов и соавт., 2005). Увеличение уровня HPK в бедренной кости на 30 день можно объяснить тем, что содержание 11-ОКС в плазме крови в этот период не отличалось от контрольных значений. В литературе имеются сведения, что в физиологических условиях ГК повышают количество рецепторов на клетках кости к ИФР-1 и др. (Ф.Х. Камилов и соавт., 2005).

В ходе нашего эксперимента дисбаланс процессов синтеза и деградации коллагена привел к снижению содержания СК в бедренной кости на 15, 30 и 45 дни, минимальное значение определялось на 45 день - 134,22+4,03 ммоль/кг (28,35 %; р=6,3*10"8). Снижение содержания кальция в диафизе бедренной кости отмечалось с 20 дня и до конца эксперимента. Полученные нами результаты не противоречат данным литературы о том, что при сахарном диабете обнаруживается уменьшение преимущественно кортикальной кости (С.Н. Ткач и соавт., 1986).,

В позвонке на 20 и 30 дни СК увеличивался соответственно на 18,37 % (р=0,002) и 12,01 % (р=0,011) что связано, вероятно, с низкой интенсивностью реакций распада биополимера. В то время как в серии с изолированным введением аллоксана отмечалось стойкое снижение показателя в течение всего опыта.

Состояние дефицита глюкокортикоидов в организме животных моделировали путем введения аминоглютетимида. Препарат подавляет ферментативное превращение холестерина в прегненолон в надпочечниках и ингибирует синтез ГК (В.П. Комиссаренко, 1984; П.В. Сергеев, 1984)

Содержание 11-ОКС в плазме крови на 5 день исследования снижалось с 230,17+13,70 до 89,78 мкг/л (р=Ю6). На 15 и 20 дни уровень гормонов оставался существенно сниженным: на 27,78 % (р=0,02) и 38,92 % (р=0,002) соответственно. На 30 день значимые отличия от контроля не определялись, а к 45 дню содержание 11-ОКС в плазме экспериментальных животных возросло до 578,78 мкг/л (+151,45 %; р=3*Ю"10).

Концентрация глюкозы в плазме крови снижалась на 20 день воздействия до 5,24+0,26, что на 14,08 % (р=0,01) меньше контроля. На 30 и 45 дни отмечалось увеличение уровня глюкозы в плазме крови на 9,82 % (р=0,021) и 24,37 % (р=3*10"6) соответственно. В течение всего срока наблюдения содержание глюкозы коррелировало с концентрацией 11-ОКС в плазме крови (г=0,76; р<0,01). Количество гликированного гемоглобина в крови экспериментальных животных увеличивалось на 15 и 20 дни соответственно до 4,69+0,21 мкмоль/г НЬ (+20,38 %; р=0,049) и 6,64+0,21 мкмоль/г НЬ (+70,39 %; р=0,005) против 3,90+0,28 мкмоль/г НЬ в контроле.

В плазме крови животных, получающих аминоглютетимид, концентрация СО была повышена с 5 по 30 дни. Наибольший рост отмечался на 15 день (+241,75 %; р=6,7*10"14). Содержание ПСО на 5 день опыта резко возрастало с

16,09±1,37 до 112,21±5,16 мкмоль/л, что на 596,97 % (р=3,2*Ю"10) превышало значения интактных крыс. КА плазмы крови снижалась на 30 день исследования с 0,067±0,01 до 0,029±0,003 мкмоль/г/ч (-57,33 %; р=0,01).

В теле 2-го поясничного позвонка в первые 20 дней воздействия активно протекали процессы распада коллагена, о чем свидетельствует увеличение КА на 5 день воздействия на 59,32 % (р=0,049) и содержания СО на 5, 15 и 20 дни соответственно на 62,61 % (р=7*10 6), 38,59 % (р=0,004) и 26,12 % (р=0,01), во второй половине опыта интенсивность катаболизма существенно уменьшалась: КА снижалась на 30 и 45 дни до 0,62±0,12 (р=0,004) и 0,52±0,10 мкмоль/г/ч (р=0,01) против 1,25±0,19 в контроле; количество СО в этот период также было меньше данных интактных животных на 27,93 % (р=0,011) и 35,94 %; (р=0,016). Синтез коллагена в губчатой костной ткани интенсивно протекал на 5 и 20 дни введения аминоглютетимида - в этот период НРК возрастал с 11,50±0,45 до 14,73+1,33 (р=0,012) и 17,74±0,84 ммоль/кг (р=10 6). На 20 день опыта на 39,14 % (р=0,0011) также был повышен ЦРК в изучаемой ткани. На фоне этих изменений в обмене изучаемого белка в теле 2-го поясничного позвонка наблюдалось прогрессирующее увеличение содержания СК с 20 по 45 дни эксперимента. На 45 день количество СК в губчатой ткани позвонка достигло 261,74±10,34 ммоль/кг (+32,74 %; р=4,2*10"9).

Усиление катаболических процессов в компактной костной ткани отмечалось также в течение первых 20 дней введения аминоглютетимида, когда были повышены показатели распада коллагена. КА в диафизе бедренной кости на 5 день исследования возрастала до 1,51±0,20 мкмоль/г/ч (р=0,005) против 0,87±0,09 мкмоль/г/ч в контроле и оставалась повышенной на 15 день на 70,79 % (р=0,01). Рост СО в диафизе бедра отмечался на 5, 15 и 20 дни введения аминоглютетимида на 70,47 % (р=0,02), 64,10 % (р=0,04) и 55,22 % (р=0,002) соответственно указанным дням. Полученные результаты согласуются с данными литературы, согласно которым ГК способны ингибировать экспрессию множества генов, вовлеченных в синтез провоспалительных цитокинов (Д.А. Воеводин и соавт., 2006; Дж. Гриффин и соавт., 2008), в условиях дефицита ГК нарушается баланс выработки про- и противовоспалительных цитокинов, что может активировать процессы резорбции в костной ткани.

- 40 30 с 20

5 ю Е 0 г-ю > -20 5-30 -40 -50

80 ео

40 ' 20 о -20 -40 -ео

...

J ищ Уш

р щ 1 1

|D HPK В ЦРК Я НК [ днй опыта

20 30

□ HPK □ ЦРК ■ НК Дни опыта

Рис. 2. Изменение фракционного состава коллагена в диафизе бедренной кости (слева) и теле 2-го поясничного позвонка (справа) при введении аминоглютетимида (А), при сочетании аллоксанового диабета с введением аминоглютетимида (Б). Обозначения: HPK - нейтральносолерастворимый коллаген; ЦРК - цитратрастворимый коллаген; НК - нерастворимый коллаген. Достоверность к контролю: *-р<0,05; **-р<0,01; ***-р<0,001.

Содержание HPK в диафизе бедренной кости снижалось на 15 день опыта до 10,26±0,88 (р=0,044), а на 20 день превышало данные контроля на 18,20 % (р=0,049). Угнетение синтеза в ранние сроки эксперимента на фоне усиленного распада привело к снижению содержания суммарного коллагена в диафизе бедренной кости на 5 и 15 дни исследования на 11,09 и 13,17 % (р=0,01). Однако увеличение выработки растворимых коллагенов на 20 день опыта (HPK - на 15,03 %; р=0,049 и ЦРК - на 50,91 %; р=0,001) восстановило уровень CK, а 45 день опыта характеризовался увеличением содержания этого показателя компактной костной ткани.

Активация синтеза, возможно, объясняется тем, что ингибирование выработки ГК сопровождается компенсаторным увеличением продукции АКТГ (В.П. Комиссаренко, 1972), при этом усиливается синтез СТГ. (Зайчик и соавт., 2000). В кости СТГ индуцирует продукцию ИФР-I и II, которые активируют

пролиферацию остеобластов и стимулируют синтез коллагена I типа (Л.Я. Рожинская, 2000; T.L. Carthy et al., 1989; R. Barnard et al., 1991).

У животных с аллоксановым диабетом, протекающим в условиях дефицита кортикостероидиых гормонов, содержание 11-ОКС в плазме крови повышалось лишь на 20 день воздействия на 79,29 % (р=6*105), а в остальные сроки было снижено, за исключением 45 дня.

Концентрация глюкозы в плазме крови при сочетанном воздействии была увеличена во все сроки наблюдения. На 5 день исследуемый показатель возрастал с 6,10±0,16 ммоль/л до 12,38 ммоль/л (+106,77 %; р=0,009). Наибольших значений гипергликемия достигала на 20 и 30 дни. Уровень гликемии в течение эксперимента тесно коррелировал с содержанием 11-ОКС (г=0,76; р<0,01). Содержание гликированного гемоглобина на фоне двойного воздействия также было увеличено во все дни опыта и прямо коррелировало с уровнем гликемии (г=0,58; р<0,01).

КА плазмы крови опытных животных лишь на 20 день возрастала до 0,14+0,03 мкмоль/г/ч (р=0,019). Уровень СО повышался в плазме крови на 15 и 30 дни эксперимента с 16,99+0,74 до 30,94+1,36 (р=4,3*108) и 32,47+3,60 мкмоль/л (р=0,003) соответственно. Содержание ПСО в плазме крови на 15, 20 и 30 дни последовательно возрастало, превышая аналогичные показатели контроля на 44,82 % (р=0,03), 57,29 % и 72,13 % (р=0,02) соответственно.

В компактной костной ткани КА возрастала к 15 дню до 2,94+0,56 мкмоль/г/ч (р=0,005) и оставалась повышенной на 20 день сочетанного воздействия. На 30 день эксперимента КА в диафизе бедра снижалась до 0,33+0,10 мкмоль/г/ч (р=0,002), вместе с этим снижалось и содержание СО с 0,86+0,05 до 0,60+0,08 ммоль/кг (р=0,048). В ткани позвонка КА снижалась соответственно на 15 и 20 дни эксперимента 58,47 % (р=0,023) и 48,47 % (р=0,01), на 30 день отличий от контроля не выявлено, а на 45 день КА возрастала до 2,31+0,16 мкмоль/г/ч (р=0,001). В губчатой костной ткани уровень СО уменьшался во все сроки опыта (кроме 20 дня). Минимальное значение СО (0,49+0,06 ммоль/кг; р=0,001) отмечались на 45 день сочетанного воздействия.

Содержание НРК при сочетанном воздействии, как в компактной, так и губчатой костной ткани было повышено на 15, 20 и 45 дни исследования. В диафизе бедренной кости в указанные сроки показатель возрастал с 13,23+0,85 до 16,91+0,96 (р=0,011), 16,31+0,95 (р=0,03) и 16,34+0,84 ммоль/кг (р=0,049)

соответственно. В ткани позвонка рост НРК в эти сроки составил 34,15 % (р=0,0012), 36,89 % (р=0,02) и 72,19 % (р=0,002) в сравнении с контролем.

Количество ЦРК в ткани бедренной кости на 15 день опыта снижалось до 3,24±0,39 ммоль/кг, (-37,17 %; р=0,04). В гомогенате ткани позвонка содержание ЦРК снижалось на 5 и 30 дни сочетанного воздействия соответственно на 48,49 % (р=0,0011) и 31,82 % (р=0,007) в сравнении с контролем (4,79±0,23 ммоль/кг).

В ткани диафиза содержание СК на 15 и 45 дни опыта возрастало с 187,32±4,03 до 219,75±4,57 и 214,04±8,95 ммоль/кг, что на 17,31 % (р=2*10"5) и 14,27 % (р=0,049) соответственно больше контроля. В гомогенате ткани тела позвонка уровень СК на 5 день на 32,35 % (р=6*10'п) превышал данные интактных крыс. В дальнейшем, на 15, 20 и 30 дни исследования изучаемый показатель оставался повышенным на 17,92 % (р=0,004), 13,03 % (р=0,04) и 14,25 % (р=0,02) соответственно.

Увеличение содержания СК костной ткани при сочетании аллоксанового диабета с введением блокаторов стероидогенеза обусловлено усилением синтеза биополимера, протекающего на фоне низкой активности процессов катаболизма. Усиление синтетических процессов коллагена при сочетанном воздействии может быть связано с уменьшением ингибирующего влияния ГК на функциональную активность остеобластов, синтез ИФР-I и коллагена I типа. Это подтверждается обнаруженной нами сильной отрицательной корреляцией (г=-0,7; р<0,01) между содержанием 11-ОКС в плазме крови и уровнем НРК в бедренной кости в первые 15 дней опыта.

Данные наших экспериментов свидетельствуют о том, что введение избыточных доз ГК, аллоксановый диабет, а также их сочетание сопровождаются выраженными нарушениями в обмене коллагена костной ткани. Следует отметить, что реакция костной ткани диафиза бедренной кости (компактная костная ткань) и тела 2-го поясничного позвонка (губчатая костная ткань) на моделируемые состояния часто носила неоднозначный и разнонаправленный характер. Как правило, более чувствительной к повреждающим факторам оказывалась губчатая костная ткань позвонка, так как метаболически она более активна, чем компактная (В.В. Поворознюк и соавт., 2004; Ф.Х. Камилов и соавт., 2005; J. Reeve et al., 1993; I. Steinebach, 2008).

выводы

1. Экзогенный гиперкортицизм, моделируемый введением высоких доз преднизолона, вызывает изменения в метаболизме коллагена костной ткани, характеризующиеся усилением, как синтеза, так и распада биополимера в начальные сроки эксперимента, разнонаправленным течением этих процессов во второй и третьей декаде опыта и угнетением катаболизма коллагена в изучаемых тканях на 45 день.

2. Экспериментальный диабет, индуцированный аллоксаном, вызывает изменения в обмене коллагена костной ткани, проявляющиеся угнетением синтетических процессов в течение первых 30 дней и активацией катаболических процессов с 15 дня воздействия, которые сменяются на 45 день опыта снижением распада и увеличением синтеза коллагена.

3. Введение преднизолона животным с аллоксановым диабетом вызывает неодинаковые изменения в обмене коллагена компактной и губчатой костной ткани, характеризующиеся превалированием катаболических процессов в диафизе бедренной кости, что проявляется стойким снижением суммарного коллагена; и угнетением процессов распада коллагена в теле 2-го поясничного позвонка, что приводит к накоплению суммарного коллагена и его нерастворимой фракции.

4. Гипокортицизм, воспроизводимый введением аминоглютетимида, вызывает активацию распада коллагена костной ткани в первые 20 дней воздействия и снижение интенсивности этого процесса в последующие сроки, сопровождающиеся выраженным повышением синтеза коллагена на 20 день исследования, что приводит к увеличению содержания суммарного коллагена в поздние сроки опыта.

5. При сочетании аллоксанового диабета с введением аминоглютетимида обмен коллагена костной ткани характеризуется превалированием синтетических процессов, что проявляется увеличением содержания нейтральносолерастворимой фракции и суммарного коллагена, как в компактной, так и в губчатой костной ткани.

6. Метаболизм коллагена костной ткани при аплоксановом диабете зависит от содержания глюкокортикоидных гормонов и характеризуется качественными и количественными изменениями фракционного состава и коллагенолитической активности.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Использованные в работе биохимические методы определения коллагена

костной ткани и его фракций могут быть рекомендованы в клинике для оценки

состояния костной ткани, а также в качестве критерия риска развития

остеопатий у больных сахарным диабетом.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Данилова, О.В. Обмен коллагена компактной костной ткани крыс при аллоксановом диабете на фоне введения блокатора стероидогенеза / О.В. Данилова, Е.Г. Бутолин // Морфологические ведомости. - 2008. - №3-4. -С.31-33.

2. Данилова, О.В. Обмен коллагена в диафизе бедренной кости крыс при введении аминоглютетимида на фоне аллоксанового диабета / О.В. Данилова // Аспирантский вестник Поволжья. - 2009. - №7-8. - С.171-173.

3. Данилова, О.В. Изменение обмена коллагена в губчатой костной ткани и плазме крови крыс при сочетании аллоксанового диабета с введением высоких доз преднизолона / О.В. Данилова, Е.Г. Бутолин // Сибирский медицинский журнал. - 2010. - №1. - С.52-54.

4. Бутолин, Е.Г. Изменение обмена биополимеров соединительной ткани у крыс при экспериментальном сахарном диабете / Е.Г. Бутолин, О.В. Данилова, А.И. Глазырин, И.И. Мосягин // Материалы межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 85-летию Самарского государственного медицинского университета. - Самара, 2005. - С.63-65.

5. Переведенцева, С.Е. Содержание суммарного коллагена в тканях крыс при аллоксановом диабете / С.Е. Переведенцева, Н.В. Савинова, С.Р. Трофимова, О.В. Данилова // Труды Ижевской государственной медицинской академии. - Ижевск, 2005. - Т 43. - С.32-33.

6. Данилова, О.В. Состояние метаболизма коллагена костной ткани при экзогенном гиперкортицизме / О.В. Данилова, Н.В. Савинова, С.Е. Переведенцева // Материалы III региональной научно-практической конференции «Проблемы геронтологии и гериатрии - 2006». - Сыктывкар -Санкт-Петербург, 2006. - С. 75-76.

7. Савинова, Н.В. Особенности метаболизма коллагена костной ткани при гипокортицизме у крыс с аллоксановым диабетом / Н.В. Савинова, О.В.

Данилова, С.Е. Переведенцева // Труды Ижевской государственной медицинской академии. - Ижевск, 2006. - Т 44. - С.15-17.

8. Савинова, Н.В. Особенности метаболизма коллагена в компактной и губчатой костной ткани крыс при экспериментальном диабете / Н.В. Савинова, С.Е. Переведенцева, О.В. Данилова // Материалы межрегиональной научной конференции «Патофизиология современной медицине», посвященной 70-летию кафедры патофизиологии Ижевской государственной медицинской академии. - Ижевск, 2007. -С.121-123.

9. Данилова, О.В. Обмен коллагена компактной костной ткани при введении аминоглютетимида / О.В. Данилова, Е.Г. Бутолин // VI Всероссийская конференция с международным участием, посвященная 50-летию открытия A.M. Уголевым мембранного пищеварения «Механизмы функционирования висцеральных систем»: Тезисы докладов. - Санкт-Петербург, 2008. - С.62.

Ю.Данилова, О.В. Изменение содержания суммарного коллагена и его фракции в костной ткани крыс при введении избыточных доз глюкокортикоидов // О.В. Данилова // Вятский медицинский вестник. - 2008 -№1.-С.78-80.

11. Переведенцева, С.Е. Влияние преднизолона на содержание кальция в крови и костной ткани крыс / С.Е. Переведенцева, О.В. Данилова, Н.В. Савинова // Вятский медицинский вестник. - 2008 -№1. - С.80-81.

12. Данилова, О.В. Влияние избыточных доз глюкокортикоидов на обмен коллагена костной ткани крыс / О.В. Данилова // Материалы II международной научной конференции молодых ученых-медиков. - Курск, 2008. - С.34-35.

13. Данилова, О.В. Обмен коллагена и содержание кальция в диафизе бедренной кости крыс при сочетании диабета и введения преднизолона / О.В. Данилова // Материалы Российской конференции «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии». Российская конференция, посвященная 80-летию со дня рождения Р.И. Лившица, приуроченная к 65-летию Челябинской государственной медицинской академии. - Челябинск, 2009. - С.34-36.

14.Данилова, О.В. Обмен коллагена губчатой костной ткани при сочетании аллоксанового диабета с введением блокатора стероидогенеза / О.В. Данилова // Труды Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических

процессов». - Новосибирск, 2009. - С.105-108.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГК- глюкокортикоиды

ИФР-1 - инсулиноподобный фактор роста-1

КА - коллагенолитическая активность

HPK - нейтральносолерастворимый коллаген

НК - нерастворимый коллаген

11-ОКС - 11-оксикортикостероиды

ПСО - пептидносвязанный гидроксипролин

ПТГ - паратиреоидный гормон

СД - сахарный диабет

СО - свободный гидроксипролин

CK - суммарный коллаген

RANKL - лиганд рецептора-активатора ядерного фактора-каппа В RANK - рецептор-активатор ядерного фактора-каппа В OPG - остеопротегерин

ДАНИЛОВА ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА

ОБМЕН КОЛЛАГЕНА КОСТНОЙ ТКАНИ КРЫС ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРЕДНИЗОЛОНОМ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ДИАБЕТА 03.01.04 - Биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Лицензия № 0177 от 10.06.1996 г. Подписано в печать 28.05.2010 г. Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84 1/16.Усл.-печ. л. 1,5. Уч.-изд. л. 1,7. Тираж 100 экз. Заказ № 134.

450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3, ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Данилова, Ольга Владимировна

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Коллаген: биохимические и морфо-функциональные особенности

1.1.1. Строение и функции коллагена.

1.1.2. Метаболизм коллагена и его регуляция.

1.2. Механизмы влияния глюкокортикоидов на костную ткань.

1.3. Сведения об изменениях костной ткани при сахарном диабете.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. Материалы и методы исследования.

Глава 3. Обмен коллагена костной ткани при воздействии преднизолоном в условиях аллоксанового диабета

3.1. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и крови крыс при введении преднизолона.

3.2. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и крови крыс при аллоксанового диабете

3.3. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и крови крыс при введении преднизолона на фоне аллоксанового диабета.

Глава 4. Обмен коллагена костной ткани в условиях гипокортицизма.

4.1. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и крови крыс при введении аминоглютетимида

4.2. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и крови при введении аминоглютетимида на фоне аллоксанового диабета

Введение Диссертация по биологии, на тему "Обмен коллагена костной ткани крыс при воздействии преднизолоном в условиях экспериментального диабета"

Сахарный диабет в настоящее время является третьей по распространенности нозологией (М.И. Балаболкин, 2000; М.Г. Давыдович и соавт., 2009) и является глобальной медико-социальной проблемой для здравоохранения всех стран мира и пациентов всех возрастов. По прогнозам специалистов, к 2030 г. каждый 25-й житель планеты будет болеть данным заболеванием. В настоящее время в мире насчитывается около 175 млн. больных диабетом, и, по оценке ВОЗ, к 2025 г. прогнозируется, что численность болеющих превысит 300 млн. человек, из которых 80-90 % составят больные сахарным диабетом 2 типа (Е.Б. Кравец, 2005; М.И. Балаболкин, 2007; М.Г. Давыдович и соавт., 2009; Е. Adeghate et al., 2006). В промышленно-развитых странах распространенность диабета составляет 5-6 % и имеет тенденцию к дальнейшему увеличению, в первую очередь в возрастных группах старше 40 лет (М.И. Балаболкин, 2000). В развитых странах Всемирная организация здравоохранения предсказывает к 2025 году увеличение числа больных сахарным диабетом на 41 % (с 51 до 72 млн. человек) (К.Ф. Вартанян, 1999; А.Н. Шишкин и соавт., 2008).

Большая социальная значимость сахарного диабета состоит в том, что он приводит к ранней инвалидизации и летальности в связи с поздними осложнениями. Метаболические нарушения, сосудистые и неврологические осложнения сахарного диабета приводят к развитию изменений практически всех органов и тканей (М.И. Балаболкин, 2000; М.Г. Давыдович и соавт., 2009). Среди них значительное место занимают поражения костной ткани (С.Н. Ткач и соавт., 1986; Н.В. Савинова, 2004). Потеря минеральных компонентов и изменения костной ткани признаны хроническим осложнением сахарного диабета (В.Л. Орленко, 2000; Я.В. Гирш, 2003).

Несмотря на значительные успехи, достигнутые в области диагностики, изучения патогенеза сахарного диабета и его влияния на различные органы и системы организма, многие аспекты этой проблемы остаются недостаточно освещенными. Например, вопрос о развитии костных изменений при этой патологии. Имеющие данные литературы об особенностях метаболизма костной ткани, частоте и механизмах развития остеопении при сахарном диабете носят достаточно противоречивый характер (Р.Е. Чечурин, 1999; К.Ф. Вартанян, 2003).

Поражение костной системы при сахарном диабете является одним из малоизученных и малоосвещенных в литературе разделов клинической диабетологии (B.JI. Орленко, 2000). Анализ литературы позволяет заметить, что единого мнения по вопросу о частоте поражения костной системы не существует. По данным различных авторов, патологические изменения костной ткани при диабете встречаются от ОД % до 77,8 % наблюдений. Опасность развития малообратимых изменений костной ткани и их значительная роль в снижении качества жизни больных сахарным диабетом определяют необходимость дальнейшего изучения механизмов развития диабетической остеопатии.

В патогенезе изменений костно-суставной системы при сахарном диабете, помимо инсулиновой недостаточности, важную роль играет избыток глюкокортикоидов в организме (С.Н. Ткач и соавт., 1986). Показано увеличение уровня АКТГ и кортизола плазмы при некомпенсированном сахарном диабете. Данные о гиперактивности гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы при этом заболевании согласуются с результатами работ, подтверждающих повышенную экскрецию свободного кортизола и его метаболитов с мочой у больных (Н.К. Мазурина, 2007). Избыток ГК способен вызывать нарушение минерального обмена, которое приводит к развитию остеопороза (E.JI. Насонов, 1999). В целом сведения об этом влиянии глюкокортикостероидов противоречивы и не поддаются однозначной трактовке (З.А. Бурнашова, 2000).

Цель исследования.

Задачи исследования.

Научная новизна.

В работе впервые выявлено, что экзогенный гиперкортицизм, индуцированный введением высоких доз преднизолона вызывает в начальные сроки эксперимента усиление, как процессов синтеза, так и процессов распада коллагена в костной ткани, с преобладанием последних, что приводит к снижению содержания суммарного коллагена. В период с 15 по 20 дни невысокая активность анаболических процессов сопровождается низким содержанием нерастворимого и суммарного коллагенов в губчатой костной ткани.

Впервые получены данные об особенностях обмена коллагена в диафизе бедренной кости и теле 2-го поясничного позвонка в динамике аллоксанового диабета, экзогенного гиперкортицизма и их сочетании. Показано, что в обмене коллагена костной ткани при аллоксановом диабете в первые 30 дней эксперимента превалировали процессы катаболизма на фоне стойкого угнетения процессов его синтеза.

Показано, что при аллоксановом диабете, протекающем на фоне введения преднизолона, в первые дни опыта наблюдалось одновременное угнетение процессов синтеза и распада. В последующие сроки эксперимента рассогласованность анаболических и катаболических реакций в костной ткани вызвали неодинаковые изменения: в компактной кости — усиление катаболизма, а в губчатой - угнетение и синтеза, и распада коллагена.

Обнаружено, что ингибирование синтеза стероидных гормонов при аллоксановом диабете вызывает снижение интенсивности катаболических процессов в обмене коллагена костной ткани и превалированию его синтеза, приводящего к увеличению содержания суммарного коллагена в компактной и губчатой костной ткани.

Научно-практическая значимость работы

Полученные в ходе эксперимента данные расширяют имеющиеся представления об особенностях обмена коллагена в костной ткани при экзогенном гиперкортицизме, экспериментальном сахарном диабете, их сочетании, а также дополняют имеющиеся в литературе сведения, касающиеся важной роли глюкокортикоидных гормонов в регуляции обмена коллагена костной ткани при диабете.

Результаты исследований могут быть использованы в изучении патогенеза остеопатий — поздних осложнений у больных сахарным диабетом.

Примененные в работе биохимические методы определения концентрации продуктов метаболизма коллагена в крови могут быть использованы в комплексе с другими методами для оценки состояния обмена коллагена костной ткани и больных сахарным диабетом.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Аллоксановый диабет и экзогенный гиперкортицизм сопровождаются изменениями в обмене коллагена костной ткани, характеризующимися преобладанием катаболических процессов.

Апробация работы.

По материалам диссертации опубликовано 12 работ Внедрение результатов исследования.

Данные о состоянии обмена коллагена в костной ткани при экзогенном гиперкортицизме и экспериментальном аллоксановом диабете включены в лекционные курсы по биохимии, клинической биохимии и лабораторной диагостике, нормальной физиологии для студентов и слушателей факультета повышения квалификации и профессиональной переподготовки, используются в научно-исследовательской работе кафедры биохимии ГОУ ВПО «Ижевская государственная медицинская академия».

Структура и объем диссертации.

Диссертация объемом 143 страницы машинописного текста состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 10 рисунками. Список литературы содержит 228 источника (119 на русском и 109 на иностранных языках).

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Данилова, Ольга Владимировна

Выводы.

Метаболизм коллагена костной ткани при аллоксановом диабете завиист от содержания глюкокортикоидных гормонов и характеризуется качественными и количественными изменениями фракционного состава и коллагенолитической активности.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Данилова, Ольга Владимировна, Уфа

1. Аргинтаев, Е.С. Взаимодействие опиоидных пептидов и кальцийрегулирующих желез при стрессе / Е.С. Аргинтаев, В.Д. Слепушкин, Г.К. Золоев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1988. - №1. - С.36-38.

2. Ахмедова, З.Г. Состояние фосфорно-калыдиевого обмена и кальцийрегулирующих систем при сахарном диабете / З.Г. Ахмедова, А.С. Ахметов, JI.K. Торицина // Клиническая медицина. — 1995. №3. - С. 103-105.

3. Бабарыкин, Д.А. Глюкокортикоиды и регуляция обмена кальция / Терапевтический архив. 1984. - №.3. - С. 137-140.

4. Балаболкин, М.И. Диабетология / М.И. Балаболкин. М.: Медицина, 2000. -671 с.

5. Балаболкин, М.И. Значение инсулиновой терапии в компенсации углеводного обмена при сахарном диабете / М.И. Балаболкин // Фарматека. 2007. -№ 12. - С.52-56.

6. Балаболкин, М.И. О патогенезе диабетической остеопатии / М.И. Балаболкин, Э.Р. Хасанова, A.M. Мкртумян // Клин. Мед. 1988. - №3. -С.86-88.

7. Балаболкин, М.И. Роль гликирования белков, окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений при сахарном диабете / М.И. Балаболкин // Сахарный диабет. Материалы Второго Всероссийского диабетологического конгресса. 2002. - № 4. - С.8-16.

8. Блох, К.О. Молекулярные механизмы повреждения бета-клеток поджелудочной железы при действии диабетогенных факторов / К.О. Блох, В.В. Полторак, A.M. Поверенный // Успехи современной биологии. 1987. -Т.103, вып.1. - С.96-108.

9. Бурнашова, З.А. Нарушение минерального обмена при воздействии преднизолоном и его фармакологическая коррекция димефосфоном: автореф. дис. .канд. мед. наук / Бурнашова Земфира Ахметзиевна. -Ижевск, 2000. 20с.

10. Вавилова, Т.П. Биохимия тканей и жидкостей полости рта / Т.П. Вавилова. М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2008 - 208с.

11. Вартанян, К.Ф. Клинико-диагностические аспекты остеопатии при сахарном диабете / К.Ф. Вартанян // Российские медицинские вести. -2003. Т.8.- №3. - С.39-46.

12. Вартанян, К.Ф. Патология костной ткани при сахарном диабете / К.Ф. Вартанян // Остеопороз и остеопении. — 1999 г. №4. - С.31-33.

13. Вельков, В.В. Гликозилированный гемоглобин в диагностике сахарного диабета и в оценке риска его осложнений / В.В. Вельков // Лабораторная диагностика. 2008. - Е.44. - №2. - С.65-76.

14. Воеводин, Д.А. Цитокиногормональные взаимодействия: положение об иммуноэндокринной регуляторной системе / Д.А. Воеводин, Г.Н. Розанова // Педиатрия. 2006. - №1. - С.95-102.

15. Герасимов, A.M. Биохимическая диагностика в травматологии и ортопедии / A.M. Герасимов, Л.Н. Фурцева. М., «Медицина». - 1986. - 235с.,

16. Гирш, Я.В. Оценка эффективности использования препарата Кальций-Бз Никомед при поражении костной ткани у детей с сахарным диабетом 1-го типа / Я.В. Гирш // Педиатрия. 2004 г. - №5. - С.78-81.

17. Гликозилированный гемоглобин: методические приемы и диагностическое значение (Обзор литературы) / А.Г. Торосян и др. // Лабораторное дело. -1988 г. -№8.-с.З-7.

18. Голиков, П.П. Рецепторные механизмы глюкокортикоидного эффекта / П.П. Голиков. М., «Медицина». - 1988. - 288 с.

19. Гольдберг, Е.Д. Сахарный диабет: этиологические факторы / Е.Д. Гольдберг, В.А. Ещенко, В.Д. Бовт //. Томск, 1993. - 136с.

20. Давыдович, М.Г. Сахарный диабет: теория и практика / М.Г. Давыдовыч, А.Ж. Гильманов. — Уфа, Издательство научно-технической литературы «Монография». 2009. - 304с.

21. Дедов, И.И. Недостаточность надпочечников / И.И. Дедов, А.В. Фадеева, Г.А. Мельниченко. М., ФГОУ «ВУНМЦ Росздрава». - 2006. - 320 с.

22. Диагностика системного остеопороза / С.Т. Зацепин и др. // Ортопедия, травматология и протезирование. 1988. - №1. - С.60-64.

23. Динамика Р- и а-клеточных популяций поджелудочной железы и содержание глюкозы в крови крыс при аллоксановом диабете / Г.Н. Алеева и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2002. — Т. 133. — №2. - С. 151-153.

24. Зайчик, А.Ш. Основы патохимии / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. СПб.: Элби, 2000.-688с.

25. Зак, К.П. Цитокины и сахарный диабет 1-го типа учеловека (обзор с включением собственных данных) / К.П. Зак, В.В. Попова // Укра'шський медичний часопис. 2006. - Т.51. - №1. - С.78-88.

26. Западнюк, И.П. Лабораторные животные / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария. Киев: Вища школа, 1984. - 300с.

27. Зубаиров, Д.М. Медицинская биохимия / Д.М. Зубаиров, В.Н. Тимербаев,

28. B.C. Давыдов. Казань: ФЭН, 2001. - 295.

29. Камилов, Ф.Х. Остеопороз. Патогенез, патохимия, принципы диагностики, лечения и профилактики (курс лекций) / Ф.Х. Камилов и соавт. Уфа. -2005,- 136 с.

30. Ковалев, Л.И. Изучение желатиназной активности в белковых фракциях, полученных электрофорезом в полиакриламидном геле / Л.И. Ковалев, П.З. Хасигов, П.Г. Рубачев // Вопросы в мед. химии. 2002. - Т.48. - №2.1. C.15-18.

31. Колычева, Н.Л. Морфофункциональная характеристика эндокриноцитов коркового вещества надпочечных желез при экспериментальном сахарном диабете / Н.Л. Колычева, А.В. Абрамов // Юпшчна анатом1я та опертивна xipyprifl. 2008. - Т.7. - №4. - С.82-86.

32. Кольман, Я. Наглядная биохимия / Я.Кольман, К.-Г. Рём. М.: Мир, 2000.-469с.

33. Комиссаренко, В.П. Ингибиторы функции коры надпочечных желез / В.П. Комиссаренко, А.Г. Резников. Киев: «Здоров'я», 1972 г. — 315 с.

34. Кондраченко, М.Ю. Минеральная плотность костной ткани при сахарном диабете I типа разной продолжительности заболевания и степени компенсации углеводного обмена / М.Ю. Кондраченко // Вестник ВолГМУ. — 2006. Т.18. - № 2. - С. 51-54.

35. Корнилов, Н.В. Адаптационные процессы в органах скелета / Н.В. Корнилов, А.С. Аврунин. С-Пб.: «Морсар АВ», 2000. - 296.

36. Кравец, Е.Б. Диабетология: масштабы, проблемы, достижения и перспективные направления / Е.Б. Кравец // Бюллетень сибирской медицины. 2005.-№1 - С. 9-18.

37. Мазовецкий, А.Г. Сахарный диабет / А.Г. Мазовецкий, В.К. Беликов. М.: Медицина, 1987.-288 с.

38. Мазурина, Н.К. Нарушения гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы при сахарном диабете / Н.К. Мазурина // Проблемы эндокринологии. 2007 г. - Т. 53, № 2. - С. 29-34.

39. Мазуров, В.Н. Биохимия коллагеновых белков / В.И. Мазуров. М.; Медицина, 1974. - 248 с.

40. Мари, Р. Биохимия человека: в 2-х томах / Р. Мари, Д. Греннер, П. Мейес. — М.: Мир, 1993.-2 т.

41. Матвеев, Б.П. Химиотерапия гормонорезистентных форм рака предстательной железы / Б.П. Матвеев // Практическая онкология. — 2001. -№2(6) С.42-49.

42. Мацкевичус, З.К. Механизмы и роль биодеградации коллагена в патологии / З.К. Мацкевичус //Архив патологии. 1987. - Т.59, вып.6. - С.3-10.

43. Мейрамова, А.Г. Диабетогенные Zn-связывающие 13-цитотоксические соединения / А.Г. Мейрамова // Проблемы эндокринологии. 2003. - Т.49, №2. - С.8-16.

44. Микоша, А.С. Актуальные вопросы регуляции функции коры надпочечных желез / А.С. Микоша // Вестник РАМН. 1997. - №8. - С.6-10.

45. Минченко, Б.И. Биохимические показатели метаболических нарушений в костной ткани. Часть I. Резорбция кости. / Б.И. Минченко, Д.С. Беневоленский, Р.С. Тишенина // Клиническая лабораторная диагностика. — 1999. -№1.-С.8-15.

46. Мкртумян, A.M. Особенности минерального обмена и костной системы при некоторых эндокринных заболеваниях: Автореф. дис. . докт. мед. наук. М., 2000. - 290 с.

47. Мкртумян, A.M. Оценка состояния костной ткани у больных сахарным диабетом / A.M. Мкртумян // Остеопороз и остеопатии. 2000. - №1.- С.27-30.

48. Насонов, E.J1. Общая характеристика и механизмы действия ГК / E.J1. Насонов // Русский медицинский журнал. 1999. - Т.7. - №8. С. 364-370.

49. Насонов, Е.Л. Стероидный остеопороз / Е.Л. Насонов // Русский медицинский журнал. 1999. - Т.7. - №8. - С.377-384.

50. Некачалов, В.В. Патология костей и суставов / В.В. Некачалов. — СПб. — «СОТИС». 2000. - 285 с.

51. Никитин, В.Н. Возрастная и эволюционная биохимия коллагеновых структур / В.Н. Николаев, Е.Э. Перский, Л.А. Утевская. Киев, Наукова думка. - 1977.-279 с.

52. Носиков, В.В. Молекулярная генетика сахарного диабета типа 1: достижения и перспективы / В.В. Носик, Ю.А. Серегин // Молекулярная биология. 2008. - Т.42. - №5. - С.867-879.

53. Обмен витамина D при экзогенном гиперкортицизме у крыс / Н.А. Каратабанова и др. // Вопросы медицинской химии. 1988. - Т.34. - №1. -С. 83-86.

54. Один, В.И. Аутоиммунный сахарный диабет / В.И. Один. С-Пб.: Изд-во Военно-медицинской академии, 2003. - 343 с.

55. Орленко, В.JI. Поражение коетно-суставной системы у больных сахарным диабетом / B.JI. Орленко // Укра'шський медичний часопис. — 2000. — Т. 19. -№5. С.101-109.

56. Пальчикова, Н.А. Количественная оценка чувствительности экспериментальных животных к диабетогенному действию аллоксана/ Н.А. Пальчикова, В.Г. Селятицкая, Ю.П. Шорин // Проблемы эндокринологии. 1987. №4.-С. 65-68.

57. Панов, А.Н. Динамика содержания 11-гидроксикортикостероидов в периферической крови крыс, после введения разных доз гидрокортизона и кортикостерона / А.Н. Панов, В.Г. Шаляпина // Лабораторное дело. —1988 г.-№2.-с.75-77.

58. Патогенетические механизмы поражения сердечно сосудистой системы у больных сахарным диабетом / Ю.В. Рыбченко и др. // Теор1я та практика с1мейно1 медицини. 2008. - №2. - С.74-77.

59. Переведенцева, С.Е. Изменение обмена коллагена в печени при аллоксановом диабете и стрессе: автореф. дисс. . канд. мед. наук / Переведенцева Светлана Евгеньевна Казань, 1997 — 19 с.

60. Поворознюк, В.В. Костная система и заболевания пародонта / В.В. Поворознюк, И.П. Мазур. Киев, 2004. - 446с.

61. Поворознюк, В.В. Остеопороз и биохимические маркёры метаболизма костной ткани /В.В. Поворознюк // Лабораторная диагностика. 2002. -№1. - С.53-60.

62. Подковкин, В.Г. Изменение показателей метаболизма коллагена у крыс с различным эмоциональным статусом при остром стрессе / В.Г. Подковкин, Д.Г. Иванов // Фундаментальные исследования. Медицинские науки. -2009. №5. - С.77-80.

63. Пронин, B.C. Диагностика остеопороза у мужчин со вторичным андрогенным дефицитом / B.C. Пронин, О.В. Смыкова // Андрология и генитальная хирургия. 2006. — №3. - С.6-11.

64. Прохончуков, А.А. Состояние белковой фракции костной ткани человека после космического полета / А.А. Прохончуков, В.К. Леонтьев, Р.А. Тигранян // Космическая биология и авиакосмическая медицина. — 1980. -№2. С.22-26.

65. Прошина, Л.Я. Исследование фракционного состава коллагена в ткани печени / Л.Я. Прошина, М.Н. Приваленко // Вопросы мед. химии. 1982. -№1. - С.115-119.

66. Рамез, С.Х. Влияние противоастматической терапии на развитие остеопороза и пути повышения качества жизни больных бронхиальной астмой / С.Х Рамез, С.К. Рамез // Вестник ВолГМУ. 2008. - №1. С.36-38.

67. Резников, А.Г. Методы определения гормонов / А.Г. Резников. — Киев: Наукова думка, 1980: 399с.

68. Ремизов, О.В. Поражение опорно-двигательной системы у детей, больных сахарным диабетом: автореф. дне. .канд. мед. наук / Ремизов Олег Валерьевич. Москва, 1998. - 24с.

69. Репарационный остеогенез при сахарном диабете / И.М. Варшавский и др. // Проблемы эндокринологии. 1995. -Т.41. - №5. - С. 13-16.

70. Риггз, Б.Л. Остеопороз: пер. с англ. / Б.Л. Риггз, Л.Дж. Мелтон. СПб.: ЗАО «Издательство БИНОМ», «Невский диалект», 2000 г. — 560 с.

71. Рожинская, Л.Я. Нарушения минерального обмена, костного' метаболизма и их коррекция при болезни Иценко-Кушинга: автореф. дис. .канд. мед. наук / Рожинская Людмила Яковлевна. Москва, 1991. - 21с.

72. Рожинская, Л.Я. Системный остеопороз: практическое руководство / Л.Я. Рожинская. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Издатель Мокеев, 2000 г. - 196 с.

73. Руководство по остеопорозу / под ред. Л.И. Беневоленской. М.; Бином. Лаборатория знаний. — 2003. — 524с.

74. Руководство по остеопорозу / Под редакцией Л.И. Беневоленской. — М., БИНОМ. Лаборатория знаний. 2003. - 524 с.

75. Рывняк, В.В. Электронно-гистохимическая локализация коллагеназы в печени // В.В. Рывняк, B.C. Гудумак. Е.С. Оня // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1996.- №1. С.98-100.

76. Савинова, Н.В. Изменение показателей обмена коллагена костной ткани при аллоксановом диабете и стрессе: автореф. дис. .канд. мед. наук / Савинова Наталья Вячеславовна. Казань, 2004. - 24 с.

77. Савинова, Н.В. Содержание инсулина и С-пептида в крови крыс с экспериментальным диабетом в условиях гипокортицизма / Н.В. Савинова, Н.Г. Наумова, А.И. Глазырин, Ю.А. Петров и др. // Материалы Всероссийской конференции. — Новосибирск. — 2004. — С. 165.

78. Свободнорадикальные процессы в патогенезе аллоксанового диабета / В.Н. Бобырев и др. // Проблемы эндокринологии. 1992. — Т.38. - №6. - С.55-57.

79. Северин, Е.С. Биохимия / Е.С. Северин. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. - 779 с.

80. Сергеев, П.В. Стероидные гормоны / П.В. Сергеев. М: Наука, 1984. -239с.

81. Серов, В.В. Соединительная ткань (функциональная морфология и общая патология) / В.В. Серов, А.Б. Шехтер. -М.: Медицина, 1981.-312 с.

82. Скрипникова, И.А. Остеопороз, индуцированный глюкокортикоидами / И. А. Скрипникова, Е.Л. Насонов, В. А. Насонова, Клиническая фармакология и терапия. — 1996. — Т.5 №1. — С. 56-61.

83. Слуцкий, Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани / Л.И. Слуцкий. Л.: Медицина, 1969. - 376 с.

84. Современные представления о некоторых нетрадиционных механизмах стресса / В.Д. Слепушкин и др. // Успехи физиологических наук. 1985.1. Т.16. №4.-С. 106-118.

85. Современные представления об обмене коллагена и его регуляции: обзор / Е.Г. Бутолин и др. / Биохимия соединительной ткани (норма и патология): сборник научных статей, посвященный 70-летию кафедры биохимии ГОУ ВПО ИГМА. Ижевск. - 2005. - 212с.

86. Содержание различных цитокинов в крови здоровых детей-сибсов, позитивных и негативных по наличию диабетассоциированных аутоантител (GADA, IA-2A, IAA) / В.В. Попова и др. // Лис. Справа. Врачеб. Дело. 2003. - №8. - С.26-29.

87. Спиричев, В.Б. Витамин Д и коллаген костной ткани / В.Б. Спиричев, В.А. Исаева // Вопросы мед. химии. — 1984. №2. — С.5-17.

88. Сравнительный анализ методов определения гликозилированного гемоглобина / М.Н. Гриншпун, и др. // Лабораторное дело. 1988 г. -№Ц.-с.51-53.

89. Старостина, Е.Г. Взаимосвязь утилизации глюкозы тканями и остаточной секреции инсулина и их роль в генезе гипергликемии при сахарном диабете I типа / Е.Г. Старостина, A.M. Лобанова // Проблемы эндокринологии. 1992. -№ 3. - С. 15-18.

90. Страйер, Л. Биохимия: пер. с англ. В 2 томах. Т.2 / Л. Страйер. М.: Мир, 1984.-312 с.

91. Суханов, А.В. Перестройка костной ткани после нарушения целостности костей / А.В. Суханов, А.С. Аврунин, Н.В. Корнилов. Морфология. -1997. - Т. 112. - №6. - С.82-87.

92. Ткач, С.Н. Поражение костно-суставной системы при сахарном диабете / С.Н. Ткач, А.В. Щербак // Клиническая медицина. 1986 г. - №5. - с.21-26.

93. Ткачук, В.А. Введение в молекулярную эндокринологию / В.А. Ткачук. — М.: Издательство московского университета, 1983. 256 с.

94. Трофимова, С.Р. Изменение обмена коллагена при экспериментаьных стреееогенных воздействиях и системном введении даларгина: автореф. дис. .канд. биол. наук/Трофимова Сания Равильевна. Уфа, 1999. — 19 с.

95. Трусов, В.В. Свободный и связанный оксипролин у больных сахарным диабетом / В.В. Трусов, Т.Е. Чернышева, П.Н. Шараев // Проблемы эндокринологии. 1984. - №6. - С. 15-18.

96. Фаллер, Дж.М. Молекулярная биология клетки / Дж.М. Фаллер, Д. Шилдс; Пер.с англ. М.: Бином, 2003. — 268с.

97. Физиология эндокринной системы / под ред. Дж. Гриффина, С. Охеды // М. «БИНОМ. Лаборатория знаний». - 2008. - 496 с.

98. Филаретов, А.А. Закономерности функционирования гипоталамо-гипофизарно-адрекортикальной системы / А.А. Филаретов // Успехи физиологических наук. 1993. -№ 2. - С. 70-83.

99. Филаретов, А.А. Принципы и механизмы регуляции гипофизарно-адренокортикальной системы . А.А. Филаретов. Л.: Наука. - 1987. - 165с.

100. Филаретов, А.А. Функциональное значение многозвенного построения гипоталамо-гипофизарных нейроэндокринных систем / А.А. Филаретов // Успехи физиологических наук. 1996. - Т. 27. - №3. - С. 3-11.

101. Формирование остеопоротических сдвигов в структуре костной ткани (костные органы, структура костной ткани и ее ремоделирование, концепция патогенеза остеопороза, его диагностики и лечения) / А. С. Аврунин и др.; СПб.: Ольга. - 1998. - 67с.

102. Франке, Ю. Остеопороз / Ю. Франке, Г. Рунге. М.: Мед. - 1995. - 299с.

103. Характеристика функционального состояния щитовидной железы при дегенеративных поражениях позвоночника и суставов / Л.Р. Габитова и др. // Биохимия соединительной ткани (норма и патология). Сб. научных статей. — Ижевск, 2005. С. 61-65.

104. Юб.Хилькин, A.M. Коллаген и его применение в медицине / A.M. Хилькин и др.. -М.: «Медицина», 1976. -256с.

105. Чечурин, Р.Е. Сахарный диабет I типа и остеопороз / Р.Е. Чечурин, А.С. Аметов // Остеопороз и остеопении. 1999 г. - №1. - с.2 -4.

106. Шалина, М.А. Остеопенический синдром у женщин с сахарным диабетом 1 типа / М.А. Шалина // Журнал акушерства и женских болезней. 2006. -Т. LV. - №4. - С. 35-40.

107. Шараев, П.Н. Метод определения свободного и связанного гидроксипролина в сыворотке крови / П.Н. Шараев // Лабораторное дело. -1981.-№5.-С.9-11.

108. Шараев, П.Н. Методы исследования обмена коллагена в клинике / П.Н. Шараев // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии: материалы конф. биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири. -Ижевск. 2001. - С. 150-153.

109. Шараев, П.Н. Определение коллагенолитической активности в плазме крови / П.Н. Шараев, В.Н. Пишков, Н.Г. Зворыгина // Лабораторное дело. -1987.-№1.-С.60-62.

110. Шепелькевич, А.П. Проблема остеопороза при заболеваниях эндокринной системы /А.П. Шепелькевич, З.В. Забаровская // Медицинские новости. — 2008. №7. - С.53-58.

111. Шишкин А.Н. Диабетическая остеопатия / А.Н. Шишкин, В.В. Мануленко // Вестник санкт-петербургского университета. 2008. — Cep.l 1. - Вып. 3. -С.70-79.

112. Шрейбер, В. Патофизиология желез внутренней секреции / В. Шрейбер. -Прага: Авиценум, 1987. -493с.

113. Шуба, Н.М. Остеопороз — актуальная проблема XXI века: современное представление о патогенезе и терапии / Н.М. Шуба // Укра'шський ревматолопчний журнал. 2008. - Т. 32. - № 2. - С.5-14.

114. Щербак, И.Г. Биологическая химия. Учебник для медицинских вузов / И.Г. Щербак. 2005. - СПб, Издательство СПбГМУ. - 480с.

115. Яременко, О.Б. Глюкокортикоиды в ревматологии: Современная номенклатура дозовых режимов и рациональное применение / О.Б. Яременко // Укра'шський ревматолопчный журнал. 2002. - Т.9. - №3. -С.20-26.

116. Adeghate, Е. An Update on the Etiology and Epidemiology of Diabetes Mellitus / E. Adeghate, P Schattner E. Dunn // Annals of the New York Academy of Sciences. 2006.-V. 1084.-P.1-29.

117. Ambrus, J.L. Studies on osteoporosis. I. Experimental models. Effect of age, sex, gentic background, diet, steroid and heparmn treatment on calcium metabolism of mice / J.L. Ambrus et al. // Res Commun Chem Pathol Pharmacol. 1978. - V.22. - P.3-14.

118. Aoki, Y. Stiffening of connective tissue in elderly diabetic patients relevance to diabetic nephropathy and oxidative stress / Y. Aoki et al. // Diabetologia. -1993. V.36 -№1. - P.79-83.

119. Aumailley, V. Structure and biological activity of the extracellular matrix / M. Aumailley, B. Gayraud // J. Molecular Medicine. 1999. - V.76. - P.253-265.

120. Avioli, L.V. Senile and postmenopausal osteoporosis / L.V. Avioli // Adv. Internat. Med. 1976. -№12. -P.391-415.

121. Azar, S. T. Type I (Insulin-Dependent) Diabetes Is a Thl- and Th2-Mediated Autoimmune Disease / ST. Azar et al. // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 1999. - V.6. - №.3. - P.306-310.

122. Barnard, R. Growth hormone receptors in clonal osteoblast-like cells mediate a mitogenic response to GH / R. Barnard et al. // Endocrinology. 1991. - V. 128. -P. 1459-1464.

123. Baynes, J.W. Role of oxidative stress in development of diabetic complications / M. Baynes // Diabetes. 1991. - V.40. - № 4. - P.405-412.

124. Baynes, J.W. Role of oxidative stress in diabetic complications. A new perspective on an old paradigm / J.W. Baynes, S.R. Thorpe // Diabetes. 1999. -V. 48. -№1. - P. 1-9.

125. Birk, D. Collagen fibrillogenesis in vitro; integration of types I and V collagen regulates fibril diameter / D. Birk et al. // J. Cell. Sci. 1990. - V.95. - P.649-657.

126. Birkedal-Hansen, H. Proteolytic remodeling of extracellular matrix // H. Birkedal-Hansen // Curr. Opin. Cell. Biol. 1995. - №4. - P.728-735.

127. Blair, H.C. How the osteoclast degrades bone / H.C. Blair // Bioessays. 1998.- V.20.-№10.-P.837-846.

128. Bord, S., The effects of estrogen on osteoprotegerin, RANKL, and estrogen receptor expression in human osteoclasts / S. Bord et al. // Bone. 2003. V.32.- P.136-141.

129. Boyle, W.J. Osteoclast differentiation and activation / W.J. Boyle, S.W. Scott, D.L. Lacey //Nature. 2003. - V. 423. -P.337-342.

130. Broek, D.L. Characterization of the tissue form of type V collagen from chick bone / D.L. Broek et al. // Journal of Biological Chemistry 1985. - V.260 -P.555-562.

131. Caldwell, J.R. The efficacy and safety of low dose corticosteroids for rheumatoid arthritis / J.R. Caldwell, D.E. Furst // Semin. Arthritis. Rheum. -1999.-V. 21.-P.1-11.

132. Calvo, M.S. Molecular basis and clinical application of biological markers of bone turnover / M.S. Calvo, D.R. Eyre, C.M. Gundberg // Endocr. Rev. 1996. -V. 17. - P.333-367.

133. Canalis, E. Insulin-like growth factor I mediates selective anabolic effects of parathyroid hormone in bone cultures / E. Canalis et al. // J Clin Invest. 1989. -V. 83. -№1.-P. 60-65.

134. Canalis, E. Mechanisms of glucocorticoids action in bone / E. Canalis // Current Osteoporosis Reports. 2005. - Vol. 3. - № 3. - P. 98-102.

135. Carnevale, V. Skeletal involvement in patients with diabetes mellitus / V. Carnevale , E. Romagnoli, E. D'Erasmo // Diabetes/Metabolism Research and Reviews. 2004. - V.20. - Issue 3. - P. 196-204.

136. Carthy, T.L. Regulatory effects of insulin-like growth factors I and II on bone collagen synthesis in rat calvarial cultures / T.L. Carthy, M. Centrella, E. Canalis //Endocrinology. 1989. - V.124. - P. 301-309.

137. Cenci, S. Estrogen deficiency induces loss by enhancing N-cell production of TNF-a / S. Cenci et al. // J. Clin, invest. 2000. - V.106. - P. 1229-1237.

138. Chanoki, M. Increased expression of lysyl oxidase in skin with scleroderma / M. Chanoki et al. // Br. J. Dermatology. 1995. - V.133. - P.710-715.

139. Chavassieux, P. Glucocorticoid-induced inhibition of osteoblastic bone formation in ewes: A biochemical and histomorphometric study / P. Chavassieux et al. // Osteoporosis International. 1993. - Vol. 3. - №2. - P. 97-102.

140. Cheah, K.S.E. Collagen genes and inherited connective tissue disease / K.S.E. Cheah // Biochem. J. 1985. - V.229. - P.287-303.

141. Colcolic, M. Diabetes mellitus and osteoporosis / M. Cokolic // Diabetologia croatica.- 1998.-V.27. №4.-P. 135-142.

142. Compston, J.E. Sex steroids and bone / J.E. Compston // Physiol. Rev. 2001 -V.81 - №1. - P.419-447.

143. Caplan, G.A. Pathogenesis of vertebral crush fractures in women / G.A. Caplan, A.C. Scane, R.M. Francis // J. Roy. Soc. Med. 1994. - № S7. - P.200-202.

144. Devecerski, M.S. Adrenal steroid production in rats with alloxan diabetes / M.S. Devecerski, T.T. Frawley // Endocrinology. — 1963. V.73. - P.386-391.

145. Ekholm, E.C. Bone repair / E.C. Ekholm. Turku. - 2001. - 80 p.

146. Ekholm, Е.С. Extended expression of cartilage components in experimental pseudoarthrosis / E.C. Ekholm, K. Hietaniemi, A. Maatta, E.Vuorio, P. Paavolainen, R.P.K. Penttinen // Connective Tissue Research. 1995. - V.31. -№3.-P.211-218.

147. Ellegast, H.H. Skeletal changes in Cushing's syndrome / H.H. Ellegast, H. Schmoller // Der Radiologe. 1974. - V.14. - №5. - S.243-251.

148. Eyre, D.R. Cross-linking in collagen and elastin / D.R. Eyre, M.A. Raz, P.M. Gallop // Annu. Rev. Biochem. 1984. - V. 53. - P.717-748.

149. Fraser, W.D. The collagen crosslinks pyridinoline: a review of their biochemistry, physiology, measurement, and clinical applications / W.D. Fraser // J. of Clin. Ligand Assay. 1998. - V.21. - №2. - P.102-110.

150. Fratzl, P. Structure and mechanical quality of the collagen-mineral nano-composite in bone / P. Fratzl et al. // Journal of Materials Chemistry. — 2004. -V. 14. P.2115 - 2123.

151. Fu, M.X. Glycation, glycoxidation and cross-linking of collagen by glucose: kinetics, mechanism and inhibition of late stages of the Maillard reaction / M.X. Fu et al. // Diabetes. 1994. - V.43. - №5. - P. 676-683.

152. Gasser, R.W. Glukokortikoid-induzierte osteoporose / R. W. Gasser // J. Miner. Stoffwechs. 2001. - V.8. - №4. - S.13-16.

153. Girotti, M. Differential responses of hypothalamus-pituitary-adrenal axis immediate early genes to corticosterone and circadian drive / M. Girotti, M.S. Weinberg, R.L. Spencer // Endocrinology. 2007. - V.148. - №.5 - P. 25422552.

154. Gunczler, P. Decreased lumbar spine bone mass and low bone turnover in children and adolescents with insulin dependent diabetes mellitus followed longitudinally / P. Gunczler et al. // J Pediatr Endocrinol Metab. 1998. -V. 11. - №3. — P.413-419.

155. Hedtmann, A. Praktische Orthopadie. Osteoporose / A. Hedtmann, S.Gotte. -"Steinkopff". Darmstadt. - 2002. - 11 Is.

156. Hie, M. Increased cathepsin К and tartrate-resistant acid phosphatase expression in bone of streptozotocin-induced diabetic rats / M. Hie et al.// International Bone and Mineral Society. 2007. - V. 41. -1.6. - P. 1045-1050.

157. Hofbauer, L.C. Clinical Implications of the Osteoprotegerin/ RANKL/RANK System for Bone and Vascular Diseases / L. C. Hofbauer, M. Schoppet // JAMA.- 2004. Vol.292. - №.4. - P.490-495.

158. Hough, S. Calcium homeostasis in chronic streptozotocin-induced diabetes mellitus in the rat/ S. Hough, J. E. Russell, S. L. Teitelbaum, L. V. Avioli // AJP- Endocrinology and Metabolism. 1982. - V. 242, Issue 6, P.451-456

159. Humphrey, E. Effects of dissociated glucocorticoids on OPG and RANKL in osteoblastic cells / E. Humphrey et al. // Bone. 2006. - Vol. 38. - Issue 5. -P. 652-661.

160. Kagan, H.M. Intra- and extracellular enzymes of collagen biosynthesis as biological and chemical targets in the control of fibrosis / H.M. Kagan // Acta Trap. 2000. - V.77. - P. 147-152.

161. Johnell, O. Biochemical indices of bone turnover and the assessment of fracture prodadillty / O. Johnell et al. // Osteoporos int. 2002. - V.l3. - P.523-526.

162. Kagel, E.M. Effect of diabetes and steroids on fracture healing / E.M. Kagel, R.J. Majeska, T.A. Einhorn // Curr. Opin. Orthop. 1995. - V.6. -.№5. - P.7-13.

163. Katayama, Y. Role of nonenzymatic glycosylation of type I collagen in diabetic osteopenia / Y. Katayama et al.// J. Bone Miner Res. 1996. - V.l 1. -№7. -P.931-937.

164. Keeney, D.S. Developmentally regulated expression of adrenal 17 alpha-hydroxylase cytochrome P450 in the mouse embryo / D.S. Keeney et al. // Endocrinology. 1995. - V. 136 - P.4872-4879.

165. Kemink, S.A. Osteopenia in insulin-dependent diabetes mellitus; prevalence and aspects of pathophysiology / S.A. Kemink et al. // J Endocrinol Invest. -2000. V.5. - P.295-303.

166. Khaw, K.T. Glycated hemoglobin as a marker of cardiovascular risk / K.T. Khaw, N. Wareham // Curr. Opin. Lipidol. 2006. - V.17. - №6. - P.637-643.

167. Kleerekoper, M. Bone mass, bone remodeling and biochemical markers / M. Kleerekoper // Clin. Lab. News. 1994. - V.20, №11. -P.5.

168. Klein, R. Relation of glycemic control to diabetic microvascular complication in diabetes mellitus / R. Klein, B.T. Klein, S.E. Moss // Ann. Int. Med. 1996. -V. 124:1. Pt.2. - P.90-96.

169. Knoerzer, D.B. Clinical and histological assessment of collagen-induced arthritis progression in the diabetes-resistant BB/w or rat / D.B. Knoerzer et al. // Toxicology Pathology. 1997. - V.25. - №1.-P.13-19.

170. Kreisberg, J.I. Hyperglycemia and microangiopathy. Direct regulation by glucose of macrovascular cells / J.I. Kreisberg // Laboratory Investigation. -1992. V.67. - P.416-426.

171. Kahari, V.M. Matrix metalloproteinases and their inhibitors in tumour growth and invasion / V.M. Kahari, U. Saarialho-Kere // Ann. Med. 1999. - V.31. -P.34-45.

172. Leidig-Brucner, L. Diabetes mellitus a risk for osteoporosis? / G. Leidig-Brucner, R. Zeiler // Exp Clin Endocrinol Diabetes. 2001. - V.109. - Suppl.2. -P.493-514.

173. Lill, C.A. Effect of ovariectomy, malnutrition and glucocorticoid application on bone properties in sheep: a pilot study / C.A. Lill, A.K. Fluegel, E. Schneider // Osteoporos Int. 2002. - V.13. - №6. - P.480-486.

174. Lindberg, M.K. Androgens and the skeleton / M.K. Lindberg et al. // Minerva Endocrinol. -2005 V.30 Suppl.l. - P. 15-25.

175. Liu, Z. Steroidogenic Factor 1 (SF-1) and SP1 Are Required for Regulation of Bovine CYP11A Gene Expression in Bovine Luteal Cells and Adrenal Y1 Cells / Z. Liu, E.R. Simpson // Molecular Endocrinology. 1997. - V. 11. - № 2. P. 127-137.

176. Locatto, M.E. Growth and development of bone mass in untreated alloxan diabetic rats. Effects of collagen glycosylation and parathyroid activity on bone turnover / M.E. et al. // Bone Miner. 1993. V.23. - Suppl.2. - P. 129-144.

177. Lopez-Ibarra, P. Bone mass in type I diabetes mellitus / Diabetologia. 1992. -V. 35. -P.151.

178. Lukert, B.P. Glucocorticoid-induced osteoporosis: pathogenesis and management / B.P. Lukert, L.G. Reiz // Ann. Intern. Med. 1990. - Vol. 112. -P. 353-364.

179. Lund, B. Bone mineral loss, bone histomorphometryand vitamin D metabolism in patients with rheumatoid arthritis on long-term glucocorticoids treatment / B. Lund, T.L. Storm, B. Lund // Clin. Rheumatol. 1985. - №.4 - P. 143-149.

180. Mallinak, N.J.S. Crosslinked N-telopeptides of bone collagen: a marker of bone resorption / N.J.S. Mallinak, J.D. Clemens // J. of Clin. Ligand Assay. 1998. -V.21. - №2. - P.l 11-117.

181. Manelli, F. Glucocorticoid-induced osteoporosis / F. Manelli, A. Giustina // Trends in Endocrinology ad Metabolism. 2000. Vol.11. - Issue 3. P.79-85.

182. Manna, P.R. Regulation of the steroidogenic acute regulatory protein gene expression: present and future perspectives / P.R. Manna et al. // Molecular Human Reproduction. 2009. - V.15. - №6. - P.:321-333.

183. Mensah-Broun, E. Functional Capacity of Macrophages Determines the Induction of Type 1 Diabetes / E. Mensah-Broun et al. // Annals of the New York Academy of Sciences. 2006. - V. 1084. - P.49 - 57.

184. Miller, W.L. Minireview: Regulation of steroidogenesis by electron transfer /W.L. Miller // Endocrinology. 2005. - Vol. 146. - №. 6. - P. 2544-2550.

185. Miller, W.L. Mitochondrial specificity of the early steps in steroidogenesis / W.L Miller 11 The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. -1995. V. 55. - Issues 5-6. - P. 607-616.

186. Miller, W.L. The adrenal cortex / W.L. Miller, J.B. Tyrrell // Endocrinology and metabolism; Eds. P. Felig, J.D. Baxter, L.A. Frohman. 1995. - P.555-712.

187. Molenaar, E.T. Levels of markers of bone resorption are moderately increased in patients with inactive rheumatoid arthritis / E.T. Molenaar et al. // Rheumatology. 2000. - V.39. - P.742-744.

188. Monnier, V.M. Cross-linking of the extracellular matrix by the maillard reaction in aging and diabetes: an update on "a puzzle nearing resolution" / V.M. Monnier et al. // Annals of the New York Academy of Sciences. 2005. - V. 1043.-P. 533-544.

189. Monnier, V.M. The mechanism of collagen cross-linking in diabetes: a puzzle nearing resolution / V.M. Monnier et al. // Diabetes. 1996. - V.45. - №3. -S.867-872.

190. Mueller, P.W. Predicting type I diabetes using autoantibodies: the latest results from the diabetes autoantibody standardization program / P.W. Mueller et al. // Diabetes Technol. Ther. 2002. - V.3. - №4. - P.379-400.

191. Niuibizi, C. Identification of cartilage alpha I (XI) chain and type V collagen from bovine / C. Niuibizi, D.R. Eyre // FEBS lett. 1989. - V.212. - P.314-318.

192. Olmos J.M., Bone densitometry and biochemical bone remodeling markers in type 1 diabetes mellitus / J.M. Olmos et al. // Bone Miner. 1994. - V.26, №1. —P.l-8.

193. Pacifici, R. Estrogen, cytokines and pathogenesis of postmenopausal osteoporosis / R. Pacifici // J. Bone Miner. Res. 1996. - V. 11. - P. 1043-1051.

194. Pfeilschifter, J. Changes in proinflammatory cytokine activity after menopause./ J. Pfeilschifter, et al. // Endocr. Rev. 2002. - V.23. - P.90-119.

195. Reid, I.R. Pathogenesis and treatment of steroid osteoporosis / I.R. Reid // Clin. Endocrinol. 1989. - Vol. 30. P. 83-103.

196. Reynolds, T.M. Glycated haemoglobin (HbAic) monitoring / T.M. Reynolds, W.S. Smellie, P.J. Twomey // B.M.J. 2006. - V.333. - P.586-588.

197. Reiser, K. Enzymatic and nonenzymatic cross-linking of collagen and elastin / K. Reiser, R.J. Cormick, R.B. Rucker // FASEB J. 1992. - №6. - P. 24392449.

198. Saito, M. Degree of Mineralization-related Collagen Crosslinking in the Femoral Neck Cancellous Bone in Cases of Hip Fracture and Controls / M. Saito, K. Fujii, K. Marumo // Calcified Tissue International. V.79. - №3. - P.160-168.

199. Saito, M. Role of collagen enzymatic and glycation induced cross-links as a determinant of bone quality in spontaneously diabetic WBN/Kob rats / M. Saito et al. // Osteoporosis international. 2006. - V. 17. - №10. - P. 1514-1523.

200. Scalinatus, E. Activitas best immungbau collagrnasen / E. Scalinatus, U. Behuke, H. Rutloff// Nahrung. 1978. - V.22. - №4. - S.401-408.

201. Schwartz, A.V. Diabetes mellitus: Does it affect bone? / Schwartz, A.V. // Calcified tissue international. 2003. - V.73. - №6. - P. 515-519.

202. Scott, J.E. Extracellular matrix, supramolecular organization and shape / J.E. Scott // J. Anat. 1995. - V. 187. - P.259-269.

203. Spanheimer, R.G. Decreased collagen production in diabetic rats / R.G. Spanheimer, G.E. Umpierrez, V. Stumpf// Diabetes. 1988. - V.37. - №4. -P.371-376.

204. Steinebach, I. Die glukokortikoidinduzierte Osteoporose — Pathogenese, Diagnostik und Therapie / I. Steinebach // J. Miner. Stoffwechs. 2008. - V.15. - №1. - S.34-37.

205. Sugawara, Т. Structure of the human steroidogenic acute regulatory protein (StAR) gene: StAR stimulates mitochondrial cholesterol 27-hydroxylase activity / T. Sugawara, et al. // Biochemistry. 1995. - V.34. - №39. - P. 1250612512.

206. Swidai, S.Z. Effect of blood glucose concetrations on the development of chronic complications of diabetes mellitus / S.C. Swidai, P.A. Montgomery // Pharmacotherapy. 1998. - V.18. - №5. - P.961-972.

207. Vaarala, O. The Gut Immune System and Type 1 Diabetes / O. Vaarala // Annals of the New York Academy of Sciences. 2006. - V. 958. - P.39 - 46.

208. Vanderschueren, D Androgens and bone / D. Vanderschueren et-al. // Endocr . Rev. -2004. V.25. - № 3. - P.389-425.

209. Vidal, N.O. Osteoprotegerin mRNA is expressed in primary human osteoblast-like cells: down-regulation by glucocorticoids / N.O. Vidal et al. // Journal of Endocrinology. 1998. Vol. 159. - Issue 1. - P. 191-195.

210. Vu, Т.Н. Matrix metalloproteinase: effectors of development and normal physiology / H. Vu, Z. Werb // Gen. Dev. 2000. - V.14. - P.2123-2133.

211. Vuorio, E. The family of collagen genes / E. Vuorio, de B. Crombrugghe // Annu. Rev. Biochem. 1990. - V.59. - P.837-872.

212. Watts, N.B. Clinical Utility of Biochemical Markers of Bone Remodeling / N. B. Watts // Clinical Chemistry. 1999. - V.45. - P. 1359-1368.

213. Weinstein, R.S. Apoptosis of osteocytes in glucocorticoid-induced osteonecrosis of the hip / S. R. Weinstein, R.W. Nicholas, S.C. Manolagas // The Journal of Clinical Endocrinology&Metabolism. 2000. - Vol.85. - № 8. - P.2907-2912.

214. Williamson, J.R. Hyperglycemic pseudohypoxia and diabetic complications / J.R. Williamson, K. Chang, M. Frangos // Diabetes. 1993. - V.42. - P. 801813.

215. Winnay, J.N. Steroid receptor coactivator-1 -deficient mice exhibit altered hypothalamic-pituitary-adrenal axis function / J.N. Winnay et al. // Endocrinology. 2006. - Vol. 147. - №.3. - P. 1322-1332.

216. Young, M. F. Bone matrix proteins: their function, regulation, and relationship to osteoporosis / M. F. Young // Osteoporosis International 2003. - V.l4. -Suppl.3. - S.35-42.

217. Yamada, T. Glycoregulatory hormones in the immobilization stress-induced increase of plasma glucose in fasted and fed rats / T. Yamada, S. Inuoue, T. Tanaka //Endocrinology. 1993. - V.132. -P.2199-2205.

218. Zhang, H. Insulinoma cells in culture show pronounced sensitivity to alloxsan induced oxidative stress / H. Zhang, K. Zllinger, U. Brunk / Diabetologia. -1995. V.38. — P.635-641.

Информация о работе

Данилова, Ольга Владимировна
кандидата медицинских наук
Уфа, 2010
ВАК 03.01.04

Диссертация

Обмен коллагена костной ткани крыс при воздействии преднизолоном в условиях экспериментального диабета - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы