Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Обеззараживание сточных вод, их осадков и почвы от возбудителей гельминтозов препаратом на основе ювенильной формы паслена клубненосного

ВАК РФ 03.02.11, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Обеззараживание сточных вод, их осадков и почвы от возбудителей гельминтозов препаратом на основе ювенильной формы паслена клубненосного"

На правах рукописи^

СЕРЕГИН МИХАИЛ ЮРЬЕВИЧ

ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЕ СТОЧНЫХ ВОД, ИХ ОСАДКОВ И ПОЧВЫ ОТ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ГЕЛЬМИНТОЗОВ ПРЕПАРАТОМ НА ОСНОВЕ ПАСЛЕНА КЛУБНЕНОСНОГО (Solanum tuberosum)

03.02.11 - паразитология 03.02.08-экология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

- 3 ¿ЕН 2010

Москва 2010

004616214

Работа выполнена в проблемной лаборатории ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина» РАСХН, на кафедрах «Водоснабжение и водоотведение» института инженерно-экологических систем Ростовского государственного строительного университета и «Инженерная экология и защита окружающей среды» Южно-Российского государственного технического университета (НПИ).

Научные руководители: доктор ветеринарных наук, профессор

Сафиуллин Ринат Туктарович доктор технических наук, профессор Серпокрылов Николай Сергеевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Малышева Наталья Семёновна

доктор биологических наук, профессор

Денисов Аркадий Алексеевич

Ведущая организация:

ГНЦ «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт»

Защита состоится 15 декабря 2010 г. в 14 часов на заседании Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д.006.011.01 при ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К. И. Скрябина» (ВИГИС).

Адрес: 117218, Москва, Б. Черемушкинская ул., д. 28

С диссертацией можно ознакомиться в научно-технической библиотеке ГНУ ВИГИС. Автореферат размещен неофициальном сайте ГНУ ВИГИС Россельхозакадемии http://www.gnuvigis.n&y.ru

Автореферат разослан </5» 2010 г.

Ученый секретарь Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций, доктор биологических наук, профессор В. К. Бережко

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. В Российской Федерации кишечные гельмиитозы занимают третье место по опасности для человека после сердечно-сосудистых заболеваний и онкологии. Изыскание методов, позволяющих повысить подавление жизнеспособности возбудителей гельминтозов в различных объектах окружающей среды (почвы, сточные воды и их осадки), является одним из наиболее актуальных проблем современной экологии. При этом данные методы должны приводить не только к подавлению жизнеспособности возбудителей гельминтозов более, чем на 90%, но и по возможности не вызывать сильного вторичного загрязнения объекта обеззараживания.

Существующие методы (физические, химические, биологические) не имеют высокий процент (ближе к 100) подавления жизнеспособности возбудителей гельминтозов в сточных водах, их осадках и почве. Кроме того, применение вышеуказанных методов связано с риском возникновения сильного вторичного загрязнения объекта обеззараживания. Эти методы также связаны с использованием агрессивных веществ и высоких физических воздействий (радиация, ультрафиолетовое и электромагнитные излучения), представляющих серьезную опасность как для компонентов биоценоза объекта обеззараживания, так и для здоровья самого человека (Онищенко, 2009; Романенко, 2002).

Таких недостатков лишен метод обеззараживания, основанный на применении препарата, производимого из ювенильной формы паслена клубненосного (Solatium tuberosum): препарата «БИНГСТИ.

Исходя из состава «сока» Solarium tuberosum,можно предположить, что вещества препарата оказывают повреждающее воздействие на оболочки яйца, в частности, может происходить разрушение триацилглицеролов и фосфолипидов оболочки возбудителя гельминтозов (Уролов, 1991; Грибова, 2003; Серпокрылов, 2005).

Однако воздействие препарата «БИНГС'ГИ» на фосфолипиды высших позвоночных до наших исследований не было изучено.

Кроме того, не установлены способы повышения эффективности препарата при обеззараживании сточных вод, в частности, применение коагулянтов совместно с вводом овоцидных препаратов, а также не проведен сравнительный анализ эффективности препарата и синтетических поверхностно-активных веществ, исходя из его состава, не исследована возможность обеззараживания почвы и, наконец, не определен временной интервал, при котором высокие овоцидные свойства препарата сохраняются.

Исследование воздействия препарата на липопротеиновые мембраны, а также уровня подавления жизнеспособности возбудителей гельминтозов в почве и варьирования способов его ввода в сточные воды для повышения эффективности дегельминтизационных мероприятий является актуальной проблемой и позволит управлять санитарно-экологическим риском возникновения крупномасштабных паразитарных загрязнений и, как следствие,

массовых случаев заболевания кишечными гельминтозами, что имеет большое социальное и экономическое значение.

Цель исследования и задачи. Целью нашей работы было изучение овоцидной активности, методов повышения эффективности и исследование механизма действия препарата «БИНГСТИ» на клеточные компоненты (мембранные структуры) высших позвоночных животных.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

- установить овоцидную активность препарата «БИНГСТИ» путём культивирования яиц свиной аскариды (Ascaris suum) в термостате и постановкой биологической пробы, а также изучить химический состав, содержание действующего вещества, стандартность и стабильность, способы консервации и сохранение овоцидных свойств в интервале времени более 30 суток со дня изготовления;

- изучить зависимость овоцидной активности препарата «БИНГСТИ» от таких параметров, как время экспозиции, экспозиционная доза, консервант;

- рассмотреть овоцидную активность препарата «БИНГСТИ» и установить пути повышения эффективности при обеззараживании от возбудителей кишечных гельминтозов в сточных водах;

- изучить динамику процесса перекисного окисления липидов (ПОЛ) в модельной системе желтка яиц кур;

- исследовать влияние препарата «БИНГСТИ» на жизнедеятельность объектов водной экосистемы (гидробионты), почвенной экосистемы (почвенные микромицеты), а также бактерицидные и фитотоксические свойства.

Научная новизна. Получены новые данные по химическому составу препарата на основе ювенильной формы паслёна клубненосного и содержание действующего вещества. Изучены овоцидные свойства препарата и предложены производству: оптимальная доза «БИНГСТИ» для использования в качестве овоцидного средства против яиц гельминтов - 10"6 г/л,экспозиция -8 часов, консервант — бензоат натрия 0,01 % по массе, а также влияние консервантов на стабильность его свойств. Установлена зависимость эффективности обеззараживания от условий применения овоцидного препарата и оптимизированы условия его воздействия на яйца возбудителей паразитозов в почве и сточных водах. Впервые доказано отсутствие прооксидантных свойств у препарата «БИНГСТИ» в липопротеидах желтка яиц кур.

Проведён анализ эффективности консервантов в составе препарата «БИНГСТИ», выбран наиболее эффективный консервант — бензоат натрия, впервые доказан синергизм со стороны бензоата и ДВ препарата при подавлении жизнеспособности яиц гельминтов и обосновано его содержание.

Практическая значимость работы подтверждена результатами использования препарата «БИНГСТИ» научными и природоохранными организациями при разработке и практическом осуществлении методов дегельминтизации объектов окружающей среды (сточных вод, навоза, донных отложений р. Темерник), при исследовании новых способов инактивации

возбудителей паразитозов, а также при преподавании дисциплин по экологии на кафедрах «Водоснабжение и водоотведение» РГСУ и «Инженерная экология и защита окружающей среды» ЮРГТУ (НПИ). Результаты исследований диссертационной работы легли в основу «Методических рекомендаций по обеззараживанию почвы, сточных вод, их осадков, донных отложений с поверхностных водоёмов в условиях Ростовской области», одобренных секцией «Инвазионные болезни животных» отделения ветеринарной медицины РАСХН, протокол №1 от 4 марта 2010 г.

Апробация работы. Результаты исследований были неоднократно представлены на научно-практических конференциях института инженерно-экологических систем РГСУ («Строительство - 2005 - 2009», Ростов-на-Дону, 2005 - 2009), международных и межрегиональных конференциях кафедры «Инженерная экология и защита окружающей среды» ЮРГТУ (НПИ) («Повышение организованности и эффективности предприятий коммунального хозяйства города (населенного пункта)», Новочеркасск, 2003, «Техновод», Новочеркасск, 2004, «Актуальные проблемы строительства», Новочеркасск, 2009), на заседаниях учёного совета ВИГИС (2009 - 2010).

Личный вклад соискателя. Представленная диссертационная работа является результатом семилетних научных исследований соискателя. Исследования по изучению влияния препарата «БИНГСТИ» и бензоата натрия на параметры железоинициированной хемилюминесценции и уровень малонового диальдегида в липопротеидах желтка, зависимости процента подавления жизнеспособности яиц Ascaris suum препаратом «БИНГСТИ» от времени экспозиции, дозы и консерванта, влияния консервантов на сохранение свойств препарата «БИНГСТИ», изучение эффективности препарата «БИНГСТИ» при совместном применении с коагулянтом (полиоксихлорид алюминия) при обеззараживании сточных вод от возбудителей гельминтозов, исследования эффективности препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании осадков сточных вод и почв от возбудителей гельминтозов выполнены соискателем лично.

Методические рекомендации по обеззараживанию сточных вод их осадков, почвы, донных отложений поверхностных водоёмов от возбудителей гельминтозов в условиях Ростовской области составлены совместно с научными руководителями Н. С. Серпокрыловым и Р. Т. Сафиуллиным.

Работа выполнена под научным руководством доктора ветеринарных наук, профессора Р.Т. Сафиуллина и доктора технических наук, профессора Н. С. Серпокрылова, которые оказывали научно-методическую помощь в проведении исследований и анализе полученных результатов.

Основные положения, выносимые на защиту:

- химический состав, овоцидные свойства, оптимальная доза, время экспозиции, стандартность и стабильность препарата «БИНГСТИ»;

- синергизм воздействия со стороны консерванта бензоата натрия и ДВ препарата при подавлении жизнеспособности яиц Ascaris suum в лабораторных условиях;

- овоцидная активность препарата в осадке сточных вод и почвах, его эффективность при обеззараживании от возбудителей кишечных гельминтозов в сточных водах;

- влияние веществ препарата «БИНГСТИ» на уровень малонового диальдегида и параметры железоинициированной хемилюминесценции в липопротеидах желтка яиц кур;

- влияние препарата «БИНГСТИ» на жизнедеятельность объектов водной и почвенной экосистемы; бактерицидные и фитотоксические свойства.

Публикации. По материалам диссертации опубликованы 12 научных статей, в том числе четыре - в изданиях, рекомендованных ВАК, в которых изложены основные положения и выводы по изучаемой проблеме.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 143 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов, методов и результатов исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы. Работа включает в себя 21 таблицу и 17 рисунков. Список литературы содержит 107 источников, из числа которых 15 иностранных. Приложение на 22 страницах.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Проведён анализ литературы по санитарно-паразитологической ситу ации в РФ, а также методам обеззараживания различных объектов окружающей среды - сточные воды, их осадки, почва и др. от возбудителей гельминтозов. Приведена характеристика препарата «БИНГСТИ».

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы

Работа выполнена в проблемной лаборатории ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина» РАСХН, на кафедрах «Водоснабжение и водоотведение» Института инженерно-экологических систем Ростовского государственного строительного университета и «Инженерная экология и защита окружающей среды» Южно-Российского государственного технического университета (НПИ). Исследования проводили в 2003 - 2010 гг. на 20 образцах спиртового раствора препарата «БИНГСТИ», 108 влажных камерах (чашки Петри с яйцами Ascaris suum количеством 200 экз., стандартизированном по методике, описанной в «Справочнике по медицинской гельминтологии» Л. Н. Ярового (1984)), 20 лабораторных мышах, 150 мембранах с липопротеидами желтка яиц кур, изготовленных по методике Котерова (1987), 35 пробах сточных вод р. Темерник, 45 пробах почвы с территории Ботанического сада Южного федерального университета (пойма и надпойменная терраса р. Темерник), 70

пробах почвы с территории очистных сооружений канализации ОАО «Водоканал», Ростова-на-Дону.

Для изучения состава препарата «БИНГСТИ» использовали методы пламенной фотометрии, объемного титрования и тонкослойной хроматографии.

При исследовании овоцидных свойств препарата «БИНГСТИ» в отношении яиц Ascaris suum применяли такие методы, как культивирование в термостате и постановка биологической пробы на лабораторных мышах.

Культивирование яиц в термостате проводили при температуре не выше 37°С и временным интервалом 30 суток с момента закладки опыта. При закладке опыта общее количество яиц Ascaris suum было поделено на 2 группы, по 200 экз. каждая: 1) контрольная группа - с добавлением физраствора во влажные камеры; 2) опытная группа - с добавлением дозы препарата «БИНГСТИ» 10"6 г/л.

Биологическую пробу ставили на 20 беспородных мышах, разделенных на 2 группы: 1) контрольная - получала инвазионные яйца Ascaris suum с добавлением физраствора; 2) опытная - получала инвазионные яйца Ascaris suum, обработанные препаратом «БИНГСТИ» в дозе 10"6 г/л, временем экспозиции - 8 часов. Через 7 суток с начала опыта мышей умерщвляли, вскрывали и исследовали лёгкие и печень по методу Бермана-Орлова.

При изучении зависимости овоцидной активности препарата от дозы, времени воздействия, консерванта использовали следующие экспозиционные дозы: 10"3, 10~6, 10~9 г/л и время воздействия 4 и 8 часов со времени добавления препарата во влажную камеру, добавляли свежеприготовленный препарат без консерванта, с консервантом ССД-200 и консервантом бензоат натрия.

При исследовании влияния различных консервантов на сохранение овоцидной активности препарата более 30 суток со дня изготовления использовали экспозиционную дозу 10"6 г/л; время воздействия 8 часов. Во влажную камеру добавляли свежеприготовленный препарат без консерванта; с консервантом ССД-200 и консервантом бензоат натрия (контрольные пробы 1 -3) и сравнивали с аналогичными образцами (без консерванта, с консервантом ССД-200, с консервантом бензоат натрия) 20,40, 60 суток со дня изготовления.

При полевых испытаниях препарата «БИНГСТИ» и синтетических поверхностно-активных веществ (анионных, катионных и неионных) в комплексе с полиоксихлоридом алюминия, использовали следующие дозы: препарата «БИНГСТИ» 10"6 г/л + полиоксихлорида алюминия 65,0 мг/л; синтетических поверхностно-активных веществ (анионные и неионные) 10"6 г/л + полиоксихлорида алюминия 65,0 мг/л. Отбор проб сточных вод проводился до обработки препаратом «БИНГСТИ» (гельминтологический контроль) в трёх точках: 1,5 км выше места выпуска, в месте выпуска, 1,5 км ниже места выпуска сточных вод. Овоцидную активность препарата и синтетических ПАВ определяли путём отбора проб в аналогичных точках через 8 и 24 часов с момента обработки.

При полевых испытаниях препарата «БИНГСТИ» на почве и осадках сточных вод использовали дозу 1,5-10" г/м3. Обрабатывали участок площадью

1м2 методом орошения. Обрабатывали следующие объекты: на территории ОСК ОАО «Водоканал», Ростов-на-Дону: 1) осадок сточных вод (ОСВ) (ил, 1 год); 2) поверхностный горизонт почвы вблизи дороги, ведущей к очистным сооружениям: расстояние от дороги: 10, 20, 50 м (аллювиальные луговые почвы); 3) экспериментальные площадки (ЭП) по рекультивации ОСВ: ЭП 1 -«старый» ил (2,5 года складирования), «молодой» ил, почва, отвальные породы угольных шахт (1: 1: 1: 1); ЭП 2 - молодой ил (0,5 года складирования), почва (1:1); на территории ботанического сада Южного федерального университета: 1) левый берег поймы р. Темерник (аллювиальные болотные почвы); 2) 10 м вверх от берега (надпойменная терраса р. Темерник) (аллювиальные луговые почвы). Сбор проб до (гельминтологический контроль) и после обработки проводили методом конверта. Овоцидную активность измеряли через 24 часа после обработки объекта.

При экотоксикологических исследованиях препарата «БИНГСТИ» проводили биохимическое исследование «БИНГСТИ» в модельной системе липопротеидов желтка яиц кур, а также изучали воздействие на компоненты биоценоза объектов обеззараживания: 1) сточных вод и их осадков (бактерии группы кишечной палочки, инфузории, дафнии); 2) почвы (фитотоксичность, фунгицидные свойства).

При биохимическом исследовании препарата «БИНГСТИ» и бензоата натрия в липопротеидах желтка яиц кур использовали максимальную биоэффективную концентрацию С тах = 0,02 г/ г липопротеидов. Препарат инкубировали 24 часа при температуре 37°С. Изучали изменения уровня малонового диальдегида (МДА) и параметров железоинициированной хемилюминесценции (Fe-XJI): 1) стадия фонового свечения (сразу после ввода препарата (Fon)); 2) стадия быстрой вспышки (ранний этап хемилюминесценции (h)); 3) стадия максимального свечения (изменение величины амплитуды максимального свечения (I ^у, параметров Fe-XJI, характеризующих качество процесса хемилюминесценции; 4) светосумма (суммарный выход квантов (Sm)); 5) скорость нарастания интенсивности свечения (tg а). При изучении параметров Fe-XJI использовали следующий диапазон концентраций: 10'3 С тах; С тах; неразведенный препарат; а также концентрации препарата в смеси с ионами Fe+2: Fe+2 + С max; Fe+2 + +неразведенный препарат. Уровень МДА исследовали при изучении воздействия нового консерванта препарата «БИНГСТИ» на липопротеиды желтка. Использовали следующий диапазон концентраций: бензоат 10 СБЭ тах; бензоат 10"6 С тах; бензоат натрия 0,2 С тах; смесь бензоата и ионов Fe+2: Fe + +бензоат 10"3 С шах. Исследование параметров Fe-XJI проводили по методике Шерстнева (1995); а уровня МДА в липопротеидах желтка - по методике Владимирова (1987).

При изучении воздействия препарата «БИНГСТИ» на бактерии группы кишечной палочки, использовали следующие разведения 10"2 - 10"9 г/л. Количество микроорганизмов изучали на момент закладки опыта, через 1, 2 и 7 суток после закладки опыта. При изучении влияния «БИНГСТИ» на хемотаксическую функцию инфузорий Tetrahymena pyriformis применяли

диапазон концентраций препарата - IO''-Ю"'0 г/л. Хемотаксическую функцию исследовали через 1,5 часа после закладки опыта. При изучении влияния препарата «БИНГСТИ» на жизнедеятельность дафний использовали концентрации 10"1 - 1012 г/л. Процент гибели дафний изучали через 1, 24, 48, 72, 96 часов после закладки опыта.

Изучение фитотоксических свойств препарата «БИНГСТИ» проводили на семенах овса Avenum arvensis при использовании разведений препарата 1:1, 1:10, 1:30 и 1:50, 5-Ю"2 - 5-10"7 г/л. В качестве показателя применяли длину проростков через 24 часа после закладки опыта. Фунгицидные свойства препарата «БИНГСТИ» изучали на почвенных микромицетах Aspergillus niger, Aspergillus terrius, Alternaria alternaría, Fusarium moniliforme. Использовали разведение препарата «БИНГСТИ» 0,1,1,10,100%.

Статистическая обработка результатов исследований

Полученные результаты подвергли статистической обработке с использованием метода Стьюдента-Фишера с t-критерием, а также пакетом статистического анализа компьютерной программы Microsoft Excel.

2.2. Результаты исследований 2.2.1. Состав препарата «БИНГСТИ»

Результаты исследования состава препарата «БИНГСТИ» показали, что в одном литре содержание воды составляет 979,9 мл. Главное достоинство препарата - ДВ - алкалоид L - соланин - 2,8 мг/л. Общая сумма содержания аминокислот в препарате 5,95 мг/л. Из числа незаменимых - аргинин -1,25 мг/л, лизин - 0,5 мг/л, гистидин - 0,2 мг/л, триптофан - 0,2 мг/л, а в числе заменимых аминокислот - тирозин - 0,3 мг/л, пролин - 3,45 мг/л.

Из минеральных веществ, обнаруженных в составе препарата «БИНГСТИ» были следующие: натрий - 17 мг/л, калий - 12,6 мг/л, кальций -1,04 мг/л, магний - 6,7 мг/л.

Такое содержание действующего вещества (ДВ) обеспечивает полное обеззараживание объектов окружающей среды (сточные воды, их осадки, почва и др.) от яиц гельминтов при интервале времени 8-24 часа с момента обработки.

2.2.2. Овоцидные свойства препарата «БИНГСТИ»

При исследовании овоцидных свойств препарата «БИНГСТИ» методом культивирования яиц Ascaris sawn в термостате установлено, что на 30-е сутки после закладки опыта число жизнеспособных яиц свиной аскариды в опытной группе (обрабатывалась препаратом «БИНГСТИ» в дозе 10"'" г/л) снизилось по сравнению с контрольной группой на 99% и составило 2±0,1 экз. (р< 0,05) При микроскопировании яиц, культивируемых в термостате, у опытной группы

были выявлены вакуолизация содержимого, нарушение целостности оболочек (рис. 1).

а - на момент закладки опыта б - контрольная группа на 30-е увеличение в 400 раз сутки. Увеличение в 200 раз

в- опытная группа на 30-е сутки увеличение в 400 раз Рис. 1. Культивирование яиц Ascaris suum в термостате

Результаты постановки биологической пробы на лабораторных мышах показали, что в опытной группе (которую заражали инвазионными яйцами Ascaris suum, обработанными раствором, содержащим 10~6 г/л препарата «БИНГСТИ», временем экспозиции 8 часов) количество мигрирующих личинок аскариды в печени составило 2 ± 0,1 экз., что на 98.3% ниже аналогичного показателя в контрольной группе. В легких мигрирующих личинок не обнаружено (табл. 1).

Таблица 1

Результаты постановки биологической пробы при испытании препарата

«БИНГСТИ»

Показатель Количество мигрирующих личинок свиной аскариды (экз.)

Группы Контрольная Опытная

М±т % М± m %

Печень 115 ±3,3 100 2 ±0,1 -98,3*

Лёгкие 79 ±2,5 100 0 - 99,9*

* различие с контролем достоверно при р< 0,05

Таким образом, овоцидная активность препарата «БИНГСТИ» при культивировании в термостате составила 99,1%, при постановке биологической пробы — 99,1 %. Это позволяет говорить о высоких овоцидных свойствах препарата «БИНГСТИ» и подтверждает результаты более ранних исследований.

2.2.3. Влияние дозы, времени экспозиции, консерванта на овоцидные свойства препарата «БИНГСТИ» в отношении яиц Ascaris suum При исследовании влияния времени экспозиции, дозы и консерванта на овоцидные свойства препарата «БИНГСТИ» установлено, что наибольший процент подавления жизнеспособности яиц Ascaris suum был достигнут при использовании дозы 10"6 г/л, консерванта бензоата натрия 0,01% по массе и времени экспозиции 8 часов: число жизнеспособных яиц Ascaris suum снизилось по сравнению с контролем на 99,4%, и составило_5 ± 0,28 экз. При использовании консерванта ССД-200 0,01% по массе и дозы препарата 10~6 г/л при времени экспозиции 8 часов подавление жизнеспособности яиц Ascaris suum составило 64,3%: число жизнеспособных яиц снизилось до 250± 4,14 экз.

(р<0,05) (рис. 2).

СО ССД-200 0,05% по массе Шбензоат натрия 0,01% по массе

Рис. 2. Подавление жизнеспособности яиц Ascaris suum препаратом

«БИНГСТИ» с разными экспозиции 8 часов

консервантами в дозе 10" г/л и времени

При использовании ССД-200 в качестве консерванта в диапазоне доз при двух значениях времени экспозиции подавление жизнеспособности яиц Ascaris suum превышает 50%-ный барьер, но не приближается к величинам свыше 90%. Это можно объяснить тем, что ионы серебра могут взаимодействовать с препаратом, образуя серебросодержащие производные, которые могут менять Ph препарата (снижать до кислых величин) и тем самым снижать овоцидную активность препарата «БИНГСТИ» в отношении яиц Ascaris suum. При использовании дозы более 10" г/л происходит обволакивание яйца плёнкой, содержащей ДВ. Это не локальная адсорбция ДВ

на оболочке яйца, ведущая к её повреждению. В данном случае может происходить просто уменьшение газообмена и поступления минеральных веществ внутрь яйца. При дозе меньше 10"6 г/л количество ДВ недостаточно для достижения процента подавления жизнеспособности выше 90%. При использовании бензоата наблюдалось возрастание величины подавления жизнеспособности яиц свиной аскариды более 90%. Бензоат натрия диссоциирует на анион бензойной кислоты и катион натрия, что позволяет поддерживать Ph препарата в стабильно щелочных величинах, близких к нейтральным, что способствует увеличению его овоцидного эффекта и, следовательно, можно говорить о синергизме бензоата и ДВ препарата «БИНГСТИ» при проявлении его овоцидных свойств.

2.2.4. Влияние консерванта на сохранение овоцидных свойств препарата

При изучении стабильности препарата «БИНГСТИ» при разных сроках хранения установлено, что при использовании образца препарата 60 суток со дня изготовления с консервантом бензоат натрия число жизнеспособных яиц Ascaris suum снизилось на 92,2% и составило 55±0,39 экз. (р<0,05), что на 3,2% ниже овоцидной активности аналогичного свежеприготовленного образца; при использовании образца с консервантом ССД-200 количество жизнеспособных яиц Ascaris suum снизилось на 34,4% и составило 459±23,15 экз. (р<0,05), что на 31,1% ниже свежеприготовленных образцов с консервантом ССД-200; при использовании образца без консерванта количество жизнеспособных яиц Ascaris suum снизилось на 18,5% по сравнению с контролем и составило 570±19,4'5 экз., что на 2.4,9% ниже значений свежеприготовленного образца без консерванта (рис. 3).

% ,,, бО суток со дня изготовления

ЕЕЭ без консерванта Ш с ССД-200 0,05% по массе □ с бензоатом натрия 0,01 но массе * - разшичие е контролем достоверно при р<0,05

Рис. 3. Овоцидные свойства препарата «БИНГСТИ» в отношении яиц Ascaris suum (%) с различными консервантами при разных сроках хранения

Полученные результаты исследования показывают, что при использовании консерванта бензоата натрия 0,01% по массе овоцидные свойства образцов препарата «БИНГСТИ» более 30 суток со дня изготовления сохраняются. Высокий процент овоцидной активности препарата «БИНГСТИ» в отношении яиц Ascaris suum при использовании консерванта бензоата натрия

0,01% по массе может объясняться синергизмом бензоата и действующего вещества при проявлении овоцидных свойств.

2.2.5. Нолевые испытания препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании сточных вод, их осадков и почвы

2.2.5.1. Эффективность препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании сточных вод р. Темерник при совместном применении с коагулянтом

Испытания препарата «БИНГСТИ» и поверхностно-активных веществ в дозе 10"6 г/л в комплексе с коагулянтом полиоксихлоридом алюминия в количестве 65,0 мг/л, проведенные при обеззараживании сточных вод р. Темерник, показали, что наиболее эффективно использование препарата «БИНГСТИ» в дозе 10"6 г/л в комплексе с полиоксихлоридом алюминия 65,0 мг/л при максимальном времени экспозиции 24 часа: число жизнеспособных яиц гельминтов снизилось на 99,3% по сравнению с контролем и составило 1±0,11 экз. (р<0,05). При использовании анионных поверхностно-активных веществ в дозе 10"6 г/л в комплексе с полиоксихлоридом алюминия 65,0 мг/л через 24 часа число жизнеспособных яиц гельминтов понизилось на 81,7% по сравнению с контролем и составило 4±0,26 экз. р<0,05). При использовании неионных поверхностно-активных веществ (ПАВ) количество жизнеспособных яиц гельминтов снизилось на 68,2 % по сравнению с контролем и составило 8±0,52 экз. (р<0,05) (рис. 4).

% ох кон тролая

ЕИ коагулян-г+"БИНГСТИ"

rasg коагулянп—« лимонн..|е ПАВ

□ коагулянт-»- неионные ПАВ

* - различие с контролем достоверно при р<0,0£

Рис. 4. Подавление жизнеспособности яиц гельминтов при испытании препарата «БИНГСТИ» и синтетических поверхностно активных веществ (ПАВ) в комплексе с коагулянтом

Полученные результаты исследований овоцидной активности «БИНГСТИ» и поверхностно-активных веществ в комплексе с коагулянтом полиоксихлоридом алюминия показывают, что различие «БИНГСТИ» и анионных поверхностно-активных веществ в комплексе с коагулянтом составляет не более 20%. В то же время эффективность анионных и неионных ПАВ различалась с эффективностью «БИНГСТИ» более чем на 15%. Это можно объяснить тем, что анионные поверхностно-активные вещества по

своей структуре ближе к соланину, чем неионные, и имеют большую полярность.

Однако синтетические поверхностно-активные вещества труднее разлагаются по сравнению с соланином. Таким образом, при использовании поверхностно-активных веществ требуется доза более 10"6 г/л, что может вызвать риск вторичного загрязнения объекта обеззараживания.

2.2.5.2. Эффективность препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании открытых участков почвы в черте города, почвы и осадка сточных вод на иловых картах вблизи очистных сооружений

Испытания препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании почвы и осадков сточных вод в разных зонах землепользования показали, что наибольший эффект применения препарата «»БИНГСТИ» был достигнут в отношении яиц Toxascaris sp. и Ascaris lumbricoides на территории очистных сооружений канализации ОАО «Водоканал» РостоЕа-на-Дону. Так, при обеззараживании ила 1 года складирования, открытых участков почвы 10, 20 и 50 м от дороги, площадок по рекультивации осадка сточных вод (ЭП-1 и ЭП-2) число жизнеспособных яиц Toxascaris sp. во всех случаях снижалось на 99,9% (р < 0,05): при гельминтологических исследованиях почвы и осадка сточных вод через 24 часа после их обработки дозой препарата «БИНГСТИ» 1,5-10"6 г/м3 жизнеспособных яиц Toxascaris sp. обнаружено не было (рис. 5).

% от контроля

100 т

50

Toxascaris sp.

жм

Э9,Э*Ц 99,9* 99,9* Ипк

Я J 'Щ'с HHI «

Шил 1 год складирования □ почва 20 м от дороги И почва и ОСВ ЭП-1 If.

В почва 10 м от дороги □ почва 50 м отдороги Ш почва и ОСВ ЭП-2

Ряс. 5. Подавление жизнеспособности яиц Tt)xascans яр. при обеззараживании осадков сточных вод и почвы на территории ОАО «Водоканал» Ростова-на-Дону

При изучении воздействия препарата «БИНГСТИ» на яйца Ascaris lumbricoides наибольший процент был достигнут при обеззараживании почвы 10 м от дороги, а также почвы и осадка сточных вод на экспериментальной площадке рекультивации (ЭП) №2: количество жизнеспособных яиц человеческой аскариды снизилось на 99,9% (р < 0,05) по сравнению с

контролем и составило 0 экз.; при обработке ила 1 года складирования - на 98,75% и 1 ± 0,05 экз. (р < 0,05) соответственно; при обработке почвы 20 м от дороги - на 98,33% и 2 ± 0,007 экз. (р < 0,05) соответственно; при обработке почвы 50 м от дороги - на 97,5% и 1 ± 0,004 экз. (р < 0,05) соответственно; при обработке почвы и осадка сточных вод на экспериментальной площадке по рекультивации осадка: а (ЭП) №1 - на 97,5% и 1 ± 0,03 (р < 0,05) экз. соответственно (рис. 6).

% от контроля

ЮОп

99 98 -97 96

H ил 1 год складирования ЕВ почва Ю м от дороги

СП почнгл 2С м от дороги □ почва ВО м от дороги

m почва и ОСВ ЭП-1 ЕЯ почва и ОСВ ЭП-2

* - различие с контролем достоверно при р < 0,05

Рис. 6. Подавление жизнеспособности яиц Ascaris lumbricoides при обеззараживании осадков сточных вод и почвы на территории очистных сооружений канализации ОАО «Водоканал» Ростова-на-Дону

Неравномерность величины овоцидной активности препарата «БИНГСТИ» в отношении яиц Ascaris lumbricoides можно объяснить как разной величиной залегания инвазионного начала в почве, так и различием сорбционной способности почвы и осадка сточных вод на площадках рекультивации, а также особенностями строения яйца. Также на овоцидную активность препарата «БИНГСТИ» в отношении выбранных яиц гельминтов в осадке сточных вод и почве могут влиять такие показатели, как влажность субстрата и его реакция. Так, эффективность препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании аллювиальных луговых почв была выше, что объясняется щелочной реакцией данного вида почв и более лёгким гранулометрическим составом.

2.2.6. Экотоксикологические исследования препарата «БИНГСТИ»

2.2.6.1. Биохимическое исследование препарата «БИНГСТИ» в модельной системе липопротеидов желтка яиц кур

При исследовании параметров железоинициированной

хемилюминесценции в модельной системе липопротеидов желтка яиц кур установлено, что наиболее существенные изменения этих параметров происходили при вводе в систему смеси биоэффективной концентрации препарата «БИНГСТИ» и ионов двухвалентного железа. Наиболее существенными были изменения параметров, характеризующих ранний этап хемилюминесценции: фоновое свечение, быстрая вспышка, амплитуда

Ascaris lumbricoides

максимального свечения. Так, при добавлении смеси Fe+2+ С тах препарата «БИНГСТИ» величина фонового свечения (Fon) повысилась по сравнению с контролем на 35% и составила 2,7±0,42Лк (р<0,05); величина быстрой вспышки (h) - на 53 % по сравнению с контролем и составила 7,54±0,12 мм (р<0,05); величина амплитуды максимального свечения (I тах) - на 72% по сравнению с контролем и составила 5,33±0,17 Гц. Изменение параметров, характеризующих интенсивность процесса таких, как суммарный выход квантов (светосумма (Sm)) и пиковое нарастание интенсивности свечения биопробы (tg á) были несущественны (рис. 7).

Fe +Стах

OFon lh 01 max. OSm Btga

- ршячи« t контролем досгшрас при p< 05 05

Рис. 7. Изменение параметров железоинициированной хемилюминесценции в липопротеидах желтка яиц кур при использовании смеси Fe1"2 + С тах препарата «БИНГСТИ»

Таким образом, процесс железоиндуцированнон хемилюминесценции при использовании смеси биоэффективной концентрации препарата «БИНГСТИ» и ионов двухвалентного железа активировался преимущественно на ранних стадиях (стадия быстрой вспышки, стадия максимального свечения) и сразу после ввода препарата в систему. Однако активация процесса была непродолжительной о чем свидетельствуют величина светосуммы и пикового нарастания интенсивности свечения биопробы. Следовательно, препарат не влияет непосредственно на сверхслабые свечения, вызванные изменением скорости метаболизма клетки. Изменения параметров железоиндуцированной хемилюминесценции происходят в результате воздействия компонентов препарата на липопротеиды желтка яиц кур.

При изучении влияния бензоата натрия на уровень манонового диальдегида в липопротеидах желтка яиц кур установлено, что наиболее существенные изменения происходили при вводе в липопротеиды смеси Fe+2+ бензоатКа 10"3 С тах и бензоата натрия в концентрации 0,2 С тах. Так, при использовании смеси Fe+'+ бензоат Na 10° С 1пах содержание малонового диальдегида в липопротеидах желтка повысилось на 1212% и составило 1,194±0,03 нмоль/л (р<0,05); при вводе в систему бензоата натрия в

концентрации 0,2 С тах содержание уровня малонового диальдегида в желточных липопротеидах составило 0,538±0,016 нмоль/л, что на 412% превосходит контроль (р<0,05) (рис. 8).

% отйонтроля

Э Бензоат N8 ю 3 С тах. й Бензоат N810"6 С гою,

О Ре+ бензоат№ ю3 С тт. П бензоат N3 0,2 с тах.

" - различие с шпршгсм достоверно при р<0,05

Рис. 8. Изменение уровня малонового диальдегида в липопротеидах желтка яиц кур при воздействии бензоата натрия

Полученные результаты свидетельствуют о выраженных прооксидантных свойствах бензоата в концентрации 0,2 С ,шх и выше. Однако при использовании меньших концентраций влияние бензоата на процесс перекисного окисления липидов в липопротеидах желтка яиц кур несущественно. Следовательно, возможно предположить, что препарат «БИНГСТИ» в дозе меньшей 10"3 г/л и бензоат натрия меньше 10" г/л не влияют существенно на процесс перекисного окисления липидов в липопротеидах желтка. А изменение параметров железоиндуцированной хемилюминесценции происходит опосредованно и за счёт повреждающего воздействия алкалоидов, содержащихся в препарате «БИНГСТИ», из которых количественно превалирует Г - соланин, являющийся действующим веществом препарата «БИНГСТИ», который представляет собой азотсодержащие аналоги сапонинов, имеющие детергентный механизм воздействия на липидные компоненты мембран живых организмов.

2.2.6.2. Исследование воздействия препарата «БИНГСТИ» на компоненты биоценоза сточных вод, их осадков и почвы

При изучении бактерицидных свойств препарата «БИНГСТИ» установлено, что наибольший эффект в отношении бактерий группы кишечной палочки был достигнут при использовании дозы препарата 10"6 г/л сразу после внесения и на первые сутки после внесения вышеуказанной дозы: так, сразу после внесения вышеуказанной дозы число колоний бактерий группы кишечной палочки сократилось до 140 КОЕ/мл; на первые сутки после внесения число колоний уменьшилось до 130 КОЕ/мл, на вторые и седьмые -возросло до 600 и 20000 КОЕ/л соответственно (рис. 9).

КОЕ/л 2000 1500 1000 500 О

В контроль ¡ш сразу после ввода препарата

□ 1-е сутки после ввода препарата О 2-е сутки после ввода препарата

И 7-е сутки после ввода препарата

Рис. 9. Влияние дозы препарата «БИНГСТИ» J06 г/л на жизнедеятельность бактерий группы кишечной палочки

На основании результатов можно говорить о выраженных бактерицидных свойствах дозы препарата «БИНГСТИ» Ю-6 г/л сразу и на первые сутки после внесения. Но изменения количества бактериальных клеток на вторые и седьмые сутки свидетельствует о полном прекращении воздействия препарата. Следовательно, влияние препарата на микрофлору сточных вод, а значит и на процессы самоочищения несущественно.

При исследовании фунгицидных свойств препарата «БИНГСТИ» в отношении почвенных микромицетов выявили наличие стимулирующего эффекта. Наибольший стимулирующий эффект был получен при использовании неразведенного препарата(100%-ная концентрация) в отношении грибка Fusarium moniliforme, число колоний которого по сравнению с контролем возросло на 517% (р<0,05). Однако с уменьшением дозы препарата «БИНГСТИ» в эксперименте наблюдалось и снижение стимулирующего эффекта. Так, при использовании 0,1%-ного разведения препарата «БИНГСТИ» стимулирующий эффект составил 42%, что на 472% меньше, чем в случае с Fusarium moniliforme при использовании неразведенного препарата и на 220% меньше, чем в случае с Alternaría alternaría при использовании 10%-ного разведения препарата (рис. 10).

% от _____________________________________________________________________________________________

контроля ......'

ООО

400

ZOO

О

0,1% 1 "Л, Ю% -I оо%

Е] Aspergillus niger Aspergillus terrius

□ Alternaría alternaría □ Fusarium moniliforme

* - различие с контролем достоверно при р<0,05

Рис. 10. Стимулирующее воздействие разных концентраций препарата «БИНГСТИ» на почвенные микромицеты (на оси X указано разведение препарата, %)

Такой характер изменений может объясняться разной чувствительностью выбранных грибков к препарату при разных концентрациях. Исходя из состава

препарата «БИНГСТИ» (наличие алкалоида соланина) и детергентного механизма воздействия, азотсодержащие аналоги сапонинов, к которым относится и соланин, при больших концентрациях (больше 10"3 г/л) обволакивают мицелий грибов, не повреждая его и предохраняя от внешних воздействий. При меньших концентрациях происходит локальная адсорбция на стенке мицелия грибка с последующим лизисом. Отсюда следует, что у дозы препарата «БИНГСТИ» 10"6 г/л будут выраженные фунгицидные свойства в течение выбранного времени экспозиции. Однако природные азотсодержащие аналоги сапонинов биоразлагаемы, и поэтому влияние препарата на почвенную микрофлору не будет существенным.

Полученные результаты исследований свидетельствуют об отсутствии у препарата «БИНГСТИ» и бензоата натрия в концентрациях менее 10"3 г/л существенного влияния на процесс перекисного окисления липидов в клетке, а также на фито- и зооценозы объекта обеззараживания.

Таким образом, при обеззараживании сточных вод, их осадков и почвы оптимальная доза препарата «БИНГСТИ» - 10"6 г/л, время экспозиции -8-24 часов, консервант - бензоат натрия.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Изложено обсуждение результатов собственных исследований и данных литературы по вопросам свойств препарата «БИНГСТИ», его эффективности при обеззараживании сточных вод, их осадков, почвы и др., а также способах её повышения и экотоксикологических свойств препарата (биохимическая активность и воздействие на компоненты биоценоза объектов обеззараживания).

4. ВЫВОДЫ

1. Препарат «БИНГСТИ», приготовленный на основе ювенильной формы паслена клубненосного (Solatium tuberosum) - комплексный биогенный препарат, состоящий из алкалоида (ДВ) - L-соланин (2,8 мг/л); аминокислот (мг/л): незаменимых - аргинин (1,25), лизин (0,5), гистидин (0,2), триптофан (0,2); заменимых - тирозин (0,3), пролин (3,45) и минеральных веществ (мг/л): натрий (17), калий (12,6), кальций (1,04), магний (6,7).

2. Интенсэффективность препарата «БИНГСТИ» по результатам культивирования яиц модельной нематоды Ascaris suum в термостате равнялась 99%, а по биопробе - 99,1%.

3. Подавление жизнеспособности яиц гельминтов препаратом «БИНГСТИ» зависит от дозы (разведение), времени воздействия и консерванта. Оптимальной дозой препарата для использования в качестве овоцидного средства против яиц A. suum является 10"6 г/л, экспозиция -8 часов, консервант - бензоат натрия 0,01% по массе.

4. Установлена высокая стабильность препарата «БИНГСТИ» при использовании в качестве консерванта бензоата натрия 0,01% по массе,

изменение свойств препарата составило менее 10% в течение 60 суток со дня изготовления по сравнению со свежеприготовленными образцами, а также синергетизм между ДВ препарата и бепзоата.

5. При обеззараживании аллювиальной луговой почвы и осадка сточных вод в полевых условиях подавление жизнеспособности яиц гельминтов достигало: Ascaris lumbricoides- 98,75%; Toxascaris sp. - 99,9%.

6. Эффективность применения препарата «БИНГСТИ» в комплексе с коагулянтом при экспериментальном обеззараживании сточных вод р. Темерник составила от 77,8 до 99,3%; эффективность применения анионных поверхностно-активных веществ в комплексе с коагулянтом - от 65,7 до 81,4%, неионных ПАВ в комплексе с коагулянтом - от 53,9 до 76, 6%.

7. Наиболее существенные изменения параметров железоинициированной хемилюминесценции и уровня малонового диальдегида в липопротеидах желтка яиц кур происходили только при использовании смеси различных концентраций препарата «БИНГСТИ» и ионов двухвалентного железа: Fe+2 + С max, Fe"1"2 + неразведенный препарат, концентрации бензоата натрия 0,2 С тах и смеси бензоата натрия с ионами двухвалентного железа: Fe+i + бензоат натрия Ю~3 С max, а при концентрации больше Ю'3 С таху бензоата натрия проявляются выраженные прооксидантные свойства.

8. Активность препарата в липопротеидах желтка проявляется в детергентном механизме воздействия его состава.

9. Препарат «БИНГСТИ» не токсичен для фито- и зооценозов объекта обеззараживания, не оказывает канцерогенное и мутагенное воздействие при обеззараживании на основании того, что в дозе Ю"6 г/л не выявлено способности оказывать какое-либо влияние на свободнорадикальные процессы и перекисное окисление липидов (про- или антиоксидантные свойства) в модельной системе липопротеидов желтка яиц кур.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты исследования по влиянию консерванта на сохранение свойств препарата «БИНГСТИ» рекомендуется использовать при его промышленном производстве, а данные по исследованию подавления жизнеспособности возбудителей гельминтозов в осадках сточных вод и почвах необходимо учитывать при проведении мероприятий по их обеззараживанию. Кроме того, данные по исследованию подавления жизнеспособности возбудителей гельминтозов препаратом «БИНГСТИ» в комплексе с коа1улянтом (полиоксихлорид алюминия) в сточных водах рекомендуется учитывать при проведении мероприятий по их обеззараживанию, а данные по экотоксикологическому исследованию препарата «БИНГСТИ» рекомендуется учитывать при его применении.

2. По результатам проведенной работы производству предложены: оптимальная доза препарата «БИНГСТИ» для использования в качестве

овоцидного средства против яиц гельминтов - 10"6 г/л, экспозиция - 8 часов, консервант - бензоат натрия 0,01% по массе.

3.Разработаны методические рекомендации по обеззараживанию почвы, сточных вод и их осадков, донных отложений поверхностных водоемов от возбудителей гельминтозов препаратом на основе паслена клубненосного (Solanum tuberosum) в условиях Ростовской области, которые одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол №1 от 4 марта 2010 г.).

Список работ, опубликованных по теме диссертации

♦публикации в печатных изданиях перечня ВАК РФ

1. Серегин М. 10.; О механизме действия овоцидных препаратов из растений семейства пасленовых. Рост. гос. строит, ун-т. - Ростов н/Д, 2003. - 7 е.- Деп. в ВИНИТИ 23.10.03, № 1854 -В- 2003.

2. Серегин М. Ю. Повышение эффективности дезинвазии сточных вод коммунально-бытового происхождения путем применения овоцидных биопрепаратов // Повышение организованности и эффективности предприятий коммунального хозяйства города (населенного пункта): материалы И Международной научно-практической конференции. - Новочеркасск, 2003. -С. 72 - 75.

3. Серегин М. Ю. Повышение качества дезинвазии и очистки осадков сточных вод коммунально-бытового происхождения путем использования овоцидных препаратов нового поколения // Актуальные проблемы строительства: материалы 53-й научно-технической конференции профессорско-преподавательского состава, научных работников, аспирантов и студентов ЮРГТУ (НПИ). - Новочеркасск, 2004. - С. 15 - 17.

4. Серегин М. Ю. Повышение эффективности дезинвазии и очистки коммунально-бытовых сточных вод путем применения овоцидов нового поколения. Строительные материалы и технологии // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Технические науки: спецвыпуск. - 2005- С. 104 - 107.

5. Серегин М. Ю. Сравнительная оценка затрат на консервацию овоцидного препарата // Строительство - 2005: международная научно-практическая конференция. - Ростов-на-Дону: РГСУ, 2005. - С. 50 - 52.

6. Серегин М. Ю., Артамонова А. А., Серпокрылов Н. С. Изучение овоцидной активности препаратов нового поколения // Строительство - 2006: материалы Международной научно-практической конференции. Ростов-на-Дону: РГСУ, 2006. - С. 71 - 73.

7. Изучение овоцидной активности препаратов нового поколения, применяемых для дезинвазии сточных вод коммунально-бытового происхождения/ М. Ю.Серегин [и др.] // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Естественные науки: приложение. - 2006. - №8. -С. 68-71.

*8. Серегин М. Ю., Серпокрылов Н. С Изучение механизма воздействия препарата «БИНГСТИ» на возбудителей кишечных гельминтозов при обеззараживании сточных вод // Известия высших учебных заведений. СевероКавказский регион. Естественные науки. - 2006. - №7. - С. 105 - 109.

*9. Серегин М. Ю., Заводовская Е. В., Артамонова А. А. Применение овоцидного препарата «БИНГСТИ» для дегельминтизации почвы и осадка сточных вод // Экология урбанизированных территорий. - 2007. - №4. - С. 36 -41.

10. Теоретические основы и практика дегельминтизации окружающей среды/ М. Ю. Серегин [и др.] // Вода: экология и технология. - 2008. - №2. - С. 47-59.

*11. Грибова О. А., Серегин Н. С., Серпокрылов Н.С. Овоцидный препарат «БИНГСТИ» для дегельминтизации сточных вод и осадка // Водоснабжение и строительная техника. - 2009. - № 2. - С. 28 - 30.

*12. Серегин М. Ю. Действие овоцидного препарата «БИНГСТИ» на клеточные мембраны желтка яиц кур // Российский паразитологический журнал. - 2009. - №4. - С. 104 - 108.

Подписано в печать 10.11.2010. Формат 60x84/16. Ризограф. Бумага писчая. Уч.-изд.л. 1,7 Тираж 100 экз. Заказ 756. Редакционно-издательский центр Ростовского государственного строительного университета 344022, г. Ростов-на-Дону, ул. Социалистическая, 162

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Серегин, Михаил Юрьевич

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Санитарно-паразитологическая ситуация в РФ

1.2. Понятие природной очаговости гелъминтозов

1.3. Характеристика методов обеззараживания почвы, сточных 17 вод и их осадков от возбудителей гелъминтозов

2. Собственные исследования ^

2.1 .Материалы и методы

2.2. Результаты исследований

2.2.1 Приготовление опытных образцов препарата «БИНГСТИ» 51 и его химический состав

2.2.2. Изучение овоцидных свойств препарата «БИНГСТИ»

2.2.3. Определение оптимальной дозы, времени экспозиции и консерванта препарата «БИНГСТИ» и их влияние на овоцидные свойства в отношении яиц Ascaris sиит

2.2.4. Изучение стабильности консервантов препарата «БИНГСТИ» и сохранение его свойств '

2.2.5. Полевые испытания препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании сточных вод, их осадков и почвы 2.2.5.1. Эффективность препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании сточных вод р. Темерник при совместном применении с коагулянтом

2.2.5.2. Эффективность препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании открытых участков почвы в черте города, почвы и осадка сточных вод на иловых картах вблизи очистных сооружений

2.2.6. Сравнительный анализ эффективности методов обеззараживания сточных вод и их осадков, почвы от возбудителей гелъминтозов ^

2.2.7. Экотоксикологические свойства препарата «Б1/1НГСТИ»

2.2.7.1 .Биохимическое исследование препарата «БИНГСТИ» в модельной системе липопротеидов желтка яиц кур ^

Исследование параметров железоинициированной хемилюминесценции и уровня малонового диалъдегида в липопротеидах желтка яиц кур при изучении влияния препарата «БИНГСТИ» на перекисное окисление липидов (ПОЛ) на мембранах высших позвоночных

Тестирование антиокислителъной активности (АОА) модельной системы липопротеидов желтка яиц кур ^

Изменение параметров железоинициированной хемилюминесценции в липопротеидах желтка яиц кур при воздействии препарата «БИНГСТИ»

Изменение уровня малонового диалъдегида в липопротеидах желтка яиц кур при воздействии препарата «БИНГСТИ» и бензоата натрия

2.2.7.2. Действие препарата «БИНГСТИ» на компоненты биоценоза объекта обеззараживания (бактерии группы кишечной палочки, гидробионты (инфузории, дафнии), фунгицидные свойства, фитотоксичностъ)

Действие препарата «БИНГСПТ» на бактерии группы кишечной палочки

Действие препарата «БИНГСТИ» на гидробионтов (инфузории, дафнии)

Действие препарата «БИНГСТИ» на хемотаксису инфузорий

Действие препарата «БИНГСТИ» на дафний

Фитотоксичностъ препарата «БИНГСТИ»

Фунгицидные свойства препарата «БИНГСТИ»

3. Обсуждение результатов

4. ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Обеззараживание сточных вод, их осадков и почвы от возбудителей гельминтозов препаратом на основе ювенильной формы паслена клубненосного"

Актуальность проблемы. В Российской Федерации кишечные гельминтозы занимают третье место по опасности для человека после сердечнососудистых заболеваний и онкологии. Изыскание методов, позволяющих повысить подавление жизнеспособности возбудителей гельминтозов в различных объектах окружающей среды (почвы, сточные воды и их осадки), является одним из наиболее актуальных проблем современной экологии. При этом данные методы должны приводить не только к подавлению жизнеспособности возбудителей гельминтозов более, чем на 90%, но и по возможности не вызывать сильного вторичного загрязнения объекта обеззараживания.

Существующие методы (физические, химические, биологические) не имеют высокий (ближе к 100%) процент подавления жизнеспособности возбудителей гельминтозов в сточных водах, их осадках и почве. Кроме того, применение вышеуказанных методов связано с риском возникновения сильного вторичного загрязнения объекта обеззараживания. Также эти методы связаны с применением агрессивных веществ и высоких физических воздействий (радиация, ультрафиолетовое и электромагнитные излучения), представляющих серьезную опасность, как для компонентов биоценоза объекта обеззараживания, так и для здоровья самого человека (Онищенко, 2009; Романенко, 2002).

Таких недостатков лишен метод обеззараживания, основанный на применении препарата, производимого из ювенильной формы паслена клубненосного (Solanum tuberosum): препарата «БИНГСТИ.

Исходя из состава «сока» Solanum tuberosum,можно предположить, что вещества препарата оказывают повреждающее воздействие на оболочки яйца, в частности, может происходить разрушение . триацилглицеролов и фосфолипидов оболочки возбудителя гельминтозов (Уролов, 1991; Грибова, 2003; Серпокрылов, 2005).

Однако воздействие препарата «БИНГСТИ» на фосфолипиды высших позвоночных до наших исследований не было изучено.

Кроме того, не установлены способы повышения эффективности препарата при обеззараживании сточных вод, в частности, применение коагулянтов совместно с вводом овоцидных препаратов, а также не проведен сравнительный анализ эффективности препарата и синтетических поверхностно активных веществ, исходя из его состава, не исследована возможность обеззараживания почвы и, наконец, не определен временной интервал, при котором высокие овоцидные свойства препарата сохраняются.

Исследование воздействия препарата на липопротеиновые мембраны, а также уровня подавления жизнеспособности возбудителей гельминтозов в почве и варьирования его способов ввода в сточные воды для повышения эффективности дегельминтизационных мероприятий является актуальной проблемой и позволит управлять санитарно-экологическим риском возникновения крупномасштабных паразитарных загрязнений и, как следствие, массовых случаев заболевания кишечными гельминтозами, что имеет большое социальное и экономическое значение.

Цель исследования и задачи. Целью нашей работы было изучение овоцидной активности, методов повышения эффективности и исследование механизма действия препарата «БИНГСТИ» на клеточные компоненты (мембранные структуры) высших позвоночных животных.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи: Установить овоцидную активность препарата «БИНГСТИ» путём культивирования яиц свиной аскариды (Ascaris suum) в термостате и постановкой биологической пробы, а также изучить химический состав, содержание действующего вещества, стандартность и стабильность, способы консервации и сохранение овоцидных свойств в интервале времени более 30 суток со дня изготовления;

Изучить зависимость овоцидной активности препарата «БИНГСТИ» от таких параметров, как время экспозиции, экспозиционная доза, консервант;

Изучить овоцидную активность препарата «БИНГСТИ» и установить пути повышения эффективности при обеззараживании от возбудителей кишечных гельминтозов в сточных водах;

Изучить динамику процесса перекисного окисления липидов (ПОЛ) в модельной системе желтка яиц кур;

Изучить влияние препарата «БИНГСТИ» на жизнедеятельность объектов водной экосистемы (гидробионты), почвенной экосистемы (почвенные микромицеты), а также бактерицидные и фитотоксические свойства.

Научная новизна. Получены новые данные по химическому составу препарата на основе ювенильной формы паслёна клубненосного и содержание действующего вещества. Изучены овоцидные свойства препарата, определена оптимальная доза, время экспозиции и консервант, а также влияние консервантов на стабильность его свойств. Установлена зависимость эффективности обеззараживания от условий применения овоцидного препарата и оптимизированы условия его воздействия на яйца возбудителей паразитозов в почве и сточных водах. Впервые доказано отсутствие прооксидантных свойств у препарата «БИНГСТИ» в липопротеидах желтка яиц кур.

Проведён анализ эффективности консервантов в составе препарата «БИНГСТИ», выбран наиболее эффективный консервант — бензоат натрия, впервые доказан синергизм со стороны бензоата и ДВ препарата при подавлении жизнеспособности яиц гельминтов и обосновано его содержание.

Практическая значимость работы подтверждена результатами использования препарата «БИНГСТИ» научными и природоохранными организациями при разработке и практическом осуществлении методов дегельминтизации объектов окружающей среды (сточных вод, навоза, донных отложений р. Темерник), при исследовании новых способов инактивации возбудителей паразитозов, а также при преподавании дисциплин по экологии на кафедре «Водоснабжения и водоотведение» РГСУ и на кафедре инженерной экологии и защиты окружающей среды ЮРГТУ (НПИ). Результаты исследований диссертационной работы легли в основу «Методических рекомендаций по обеззараживанию почвы, сточных вод, их осадков, донных отложений с поверхностных водоёмов в условиях Ростовской области», одобренных секцией «Инвазионные болезни животных» отделения ветеринарной медицины РАСХН, протокол №1 от 4 марта 2010 г.

Апробация работы. Результаты исследований были неоднократно представлены в научно-практических конференциях института инжерерно-экологических систем РГСУ («Строительство - 2005 - 2009», г. Ростов-на-Дону, 2005 - 2009 гг.), международных и межрегиональных конференциях кафедры инженерной экологии и защиты окружающей среды ЮРГТУ (НПИ) («Повышение организованности и эффективности предприятий коммунального хозяйства города (населенного пункта)», г. Новочеркасск, 2003 г., «Техновод», г. Новочеркасск, 2004 г., «Актуальные проблемы строительства», г. Новочеркасск, 2009 г.), на заседаниях учёного совета ВИГИС (2009 -2010).

Личный вклад соискателя. Представленная диссертационная работа является результатом семилетних научных исследований соискателя. Исследования по изучению влияния препарата «БИНГСТИ» и бензоата натрия на параметры железоинициированной хемилюминесценции и уровень малонового диальдегида в липопротеидах желтка, зависимости процента подавления жизнеспособности яиц Ascaris suum препаратом «БИНГСТИ» от времени экспозиции, дозы и консерванта, влияния консервантов на сохранение свойств препарата «БИНГСТИ», исследования эффективности препарата «БИНГСТИ» при совместном применении с коагулянтом (полиоксихлорид алюминия) при обеззараживании сточных вод от возбудителей гельминтозов, исследования эффективности препарата «БИНГСТИ» при обеззараживании осадков сточных вод и почв от возбудителей гельминтозов выполнены соискателем лично.

Методические рекомендации по обеззараживанию сточных вод их осадков, почвы, донных отложений поверхностных водоёмов от возбудителей гельминтозов в условиях Ростовской области выполнены совместно с научными руководителями Н. С. Серпокрыловым и Р. Т. Сафиуллиным.

Работа выполнена под научным руководством доктора ветеринарных наук, профессора Р.Т. Сафиуллина и доктора технических наук, профессора Н. С. Серпокрылова, которые оказывали научно-методическую помощь в проведении исследований и анализе полученных результатов.

Основные положения, выносимые на защиту:

Химический состав, овоцидные свойства, оптимальная доза, время экспозиции, стандартность и стабильность препарата «БИНГСТИ»;

Синергизм воздействия со стороны консерванта бензоата натрия и ДВ препарата при подавлении жизнеспособности яиц Ascaris suum в лабораторных условиях;

Овоцидная активность препарата в осадке сточных вод и почвах, его эффективность при обеззараживании от возбудителей кишечных гельминтозов в сточных водах;

Влияние веществ препарата «БИНГСТИ» на уровень малонового диальдегида и параметры железоинициированной хемилюминесценции в липопротеидах желтка яиц кур;

Влияние препарата «БИНГСТИ» на жизнедеятельность объектов водной и почвенной экосистемы; бактерицидные и фитотоксические свойства.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 научных статей, в том числе четыре статьи, в изданиях, рекомендованных ВАК, в которых изложены основные положения и выводы по изучаемой проблеме.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 149 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы. Работа включает 22 таблицы и 15 рисунков. Список литературы содержит 107 источников, из числа которых 15 иностранных. Приложение на 22 страницах.

Заключение Диссертация по теме "Паразитология", Серегин, Михаил Юрьевич

1. Результаты исследования по влиянию консерванта на сохранение свойств препарата «БИНГСТИ» рекомендуется использовать при его промышленном производстве, а данные по исследованию подавления жизнеспособности возбудителен гельминтозов в осадках сточных вод и почвах необходимо учитывать при проведении мероприятий по их обеззараживанию. Кроме того, данные по исследованию подавления жизнеспособности возбудителей гельминтозов препаратом «БИНГСТИ» в комплексе с коагулянтом (полиоксихлорид алюминия) в сточных водах рекомендуется учитывать при проведении мероприятий по их обеззараживанию, а данные по экотоксикологическому исследованию препарата «БИНГСТИ» рекомендуется учитывать при его применении.

2. По результатам проведенной работы производству предложены: оптимальная доза препарата «БИНГСТИ» для использования в качестве овоцидного средства против яиц гельминтов — 10-6 г/л, экспозиция — 8 часов, консервант - бензоат натрия 0,01% по массе.

3.Разработаны методические рекомендации по обеззараживанию почвы, сточных вод и их осадков, донных отложений поверхностных водоемов от возбудителей гельминтозов препаратом на основе паслена клубненосного (Solanum tuberosum) в условиях Ростовской области, которые одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол №1 от 4 марта 2010 г.)

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Серегин, Михаил Юрьевич, Москва

1. Ажипа Я. И. Об изменении содержания свободных радикалов в связи с нарушением обменных процессов в тканях/ Ажипа Я. И., Каюшин Л. П., Никишкин Е. И., Львов К. М. — Биофизика, 1964, т. 7, С. 610*

2. Байрамгулова Г.Р. Санитарная охрана почвы как основа профилактики аскаридоза в Башкирском Зауралье: Автореф. Дисс. Канд. биол. наук. М, 2000, С. 5 7.

3. Безуглова О. С. Особенности почвенного покрова урболандшафта Ростова-на-Дону/ Безуглова О. С., Крыщенко В. С., Горбов С. Н. // Проблемы антропогенного почвообразования: тез. докл. международной конференции 16-21 июня 1997 г. Том 2. М., 1997. С. 203-205.

4. Беэр С.А., Этапы эволюции ареалов некоторых описторхид и очагов описторхоза// Описторхоз. Теория и практика. М., 1989, С. 4 - 7

5. Беэр С. А. Биология возбудителя описторхоза, М.: Товарищество научных изданий КМК, 2005, 336 с.

6. Беэр С. А. Паразитологический профиль России: один из возможных путей оценки/ Беэр С. А., Лысенко А. Я. // Региональные проблемы и управление здоровьем населения России. М.: Изд. РАЕН, 1996,- Вып. 6., С. 441 -449.

7. Беэр С.А. Роль водного фактора в распространении паразитарных болезней человека в России/ Беэр С.А., Сергиев В.П., Романенко H.A. и др. // Матер. Межд. Конгресса «Вода, экология и технология».- М.Д994.-Т.4.

8. Боев С. Н., О* природной очаговости легочных нематодозов жвачных животных в Казахстане// Природная очаговость болезней в Казахстане. Алма-Ата, 1954, Вып. 2., С. 165 170.

9. Боев С. Н. Формы очаговости гельминтозов/ Боев С. Н., Гвоздев Е. В. // Природная очаговость болезней и вопросы паразитологии животных, 1971, Вып. 6. С. 40-44.

10. Бондаренко И. А. Природа в бассейне нижнего Дона. Проблемы природопользования и охрана окружающей среды. — Ростов н/Д. кн. изд-во,1982. С. 34-39.

11. Бочарова Т. А. Проблемы природной очаговости описторхоза в Западной Сибири // Мат. Межобл. научно-практич. конф. По проблеме описторхоза человека. Томск, 1979, С. 22 — 24.

12. Бронштейн А. М. Комплексная оценка очагов описторхоза в Коми-Пермяцком автономном округе/ Бронштейн А. М., Учуаткин Е. А., Романенко Н. А. и др. // Медицинская паразитология, 1989, №4. С. 66 67.

13. Бэмфорд К. Образование и стабилизация свободных радикалов/ Бэмфорд К., Дженкинс А. -М.: Изд-во иностр. лит., 1962, с. 503 504, 126 — 128.

14. Василькова З.Г. Методы гельминтологических исследований. — М.:Медгиз,1955. 103с.

15. Владимиров Ю. А. Оценка антиокислительной и антирадикальной активности веществ с помощью железоиндуцированной хемилюминесценции / Владимиров Ю. А., Шерстнев М. П., Азимбаев Т. К.// Биофизика. — 1992.Т. 37, вып. С. 1041 -1047

16. Власов В. И. Обезвоживание осадков очистных сооружений г. Москвы/ Власов В. И., Батурова М. Д., Веденяпин А. А.//Инженерная экология. 2001.№1. С. 22 -26.

17. Вознесенский В. В. Экологические технологии и проблемы очистки сточных вод/ Вознесенский В. В., Феофанов Ю. А.//Инженерная экология. -1999, №1. С. 2-5.

18. Гафурова 3. М. Эколого-социальные основы эпидемиологии и профилактики основных гельминтозов на Южном Урале. Автореф. дисс. д-ра мед. наук. м., 1996.

19. Гвоздев Е. В. К вопросу о значении диких куриных в резервации гельминтозов домашних птиц // Природная очаговость заразных болезней в Казахстане. Алма-Ата, 1954, Вып. 2, С. 171-177.

20. Герасимов И. П. Элементарные почвенные процессы, как основа для генетической диагностики почв// Почвоведение, 1975, №5. С. 3 — 9.

21. Гороненкова О. Н. Загрязненность почвы яйцами токсокар в г. Москве/ Гороненкова О. Н., Аляутдина JI. В., Тимошенко Н. И. и др. // Паразитарное загрязнение мегаполиса Москвы. -М:, 1994. С. 15 16.

22. Горохов В.В. Региональный мониторинг гельминтозов в Московской области // Паразитарное загрязнение мегаполиса Москвы. М., 1994.

23. Грибова О. А. Научное обоснование технологии производства и применения растительных препаратов для дегельминтизации инвазированных объектов окружающей среды. Автореф. Дисс. канд. тех. наук. Новочеркасск, 2003.

24. Григорьев А. Г. Охрана окружающей среды от загрязнения возбудителями паразитозов на животноводческих предприятиях // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: тез. докл. науч. конф. М., 1999, С. 70-71.

25. Актуальные вопросы теоретический и прикладной трематодологии и цестодологии /Григорьев А. Г., Черепанов А. А. // Материалы докл. Науч. Конф. М., 1997, С. 47 - 48.

26. Гримайло JI. В. Интегрированный метод дезинвазии объектов окружающей среды при аскаридозе. Дисс. канд. мед. наук. Ростов н/Д., 1990.

27. Довгалев А. С. Система мероприятий по профилактике биогельминтозов в России в современных условиях: Автореф. Дисс. д-ра мед. наук. М., 1998

28. Егоров Ю. А. Термическая обработка осадков сточных вод в изолированных иловых картах/ Егоров Ю. А., Николаевский В. С., Суздалева Л. А. //Инженерная экология. 2001. №1. С. 16 -20.

29. Захаров П.В. Выживаемость яиц свиной аскариды в компостах и животноводческих стоках // Бюлл. Всесоюзн. ин-та гельминтол. — 1988. — Вып. 49. С.21-23.

30. Захаров С. А. Почвы Ростовской области и их агрономическая характеристика. Краткий очерк. Ростов н/Д.: кн. изд-во, 1946. С. 90 — 95.

31. Зиновьева С. В. Биохимические механизмы устойчивости растений к фитогельминтам// Итоги науки и техники. М.: ВИНИТИ, 1984, Стр. 69 113

32. Зиновьева С. В. Образование фитоалексинов при инвазии картофеля стеблевыми нематодами/ Зиновьева С. В., Чалова Л. И.// Докл. АНСССР.1986. Т.288.Стр. 1277 1280.

33. Канцан В.Н. Изучение выживаемости яиц гельминтов в сточной воде на очистных сооружениях // Гигиенические аспекты охраны окружающей среды: Тезисы докл. 4-й Ростовской областной научно-практической конференции. — Ростов на - Дону, 1985. - С.33-34.

34. Каримова К.К. Эффективность очистки сточных вод от яиц гельминтов // Проблемы паразитологии. Киев: 1972.'- 4.1. — С.337-339.

35. Касатиков В.А. Утилизация осадков сточных вод и бытовых стоков // Водоснабжение и канализация. 1990. - № 3. - С.23.

36. Кебина В.Я. Санитарно-гельминтологическая оценка метода центрифугирования осадков сточных вод // Медицинская паразитология. -1970. JNo3.-C.311.

37. Козырева Т. Г. Эколого-эпидемиологические основы профилактики токсокароза в Дальневосточном регионе Росси: Автореф. Дисс. канд. биол. наук, М., 1999.

38. Коршунов М. Б. Биоиндикация класса чистоты водоемов/ Коршунов М. Б., Костров В. В. // Инженерная экология. 1997. - №2. - С. 40 -43.

39. Котеров А. Н. Ингибирование металлопротеином железоиндуцированного перекисного окисления липидов в липопротеидах яичного желтка.// Биохимия. — 1977. №1. С. 108 — 109.

40. Красильникова JI. А. Биохимия растений/ Красильникова JI. А., Авксеньтьева О. А., Жмурко В. В., Садовниченко Ю. А. / под ред. к. б. н. JI. А. Красильниковой.- Ростов Н/Д: "Феникс", Харьков: Торсинг, 2004. — С. 179 180.

41. Кузьмин С. М. На пути к паразитологическому мониторингу воды/ Кузьмин СМ., Левин В.М., Новосильцев Г.И. и др. //Тез. докл. 2-го Международного конгресса «Вода, экология и технология». — М., 1996. — С. 427—428.

42. Куприянова Н. Ю. Развитие яиц токсокар в почве г. Иркутска // Проблемы экологии Прибайкалья. Иркутск, 1988. - С.121-122.

43. Лейкина Е. С. Типы очагов основных гельминтозоонозов в СССР // Мед. паразитол., 1984, №2 С. 51 57.

44. Малышева Н. С. Экологический мониторинг и профилактика паразитарных болезней в Центрально-Черноземной зоне Российской Федерации : автореф. дисс. доктора биол. Наук/ Всеросс. науч.-исслед. ин-т гельминтологии им. К.И. Скрябина Курск, 2006. С. 11 - 14

45. Метлицкий Л. В. Фитоалексины/ Метлицкий Л. В., Озерецковская О. Л. М.: Наука, 1973, 175 стр.

46. Методические рекомендации по применению методов биотестирования для оценки качества воды в системах хозяйственно-питьевого водоснабжения, М, 1995г.

47. МУК 4. 2. 796 99. Методы санитарно-паразитологических исследований, 2000. С. 49 -52.

48. Мусыргалина Ф. Ф. Биосоциальные основы функционирования очагов описторхоза на Южном Урале: Автореф. Дисс. канд. биол. наук, М., 2000.

49. Мяги Э. К. К вопросу об изучении диапаузы картофельной нематоды/ Вредители сельскохозяйственных растений и меры борьбы с ними. Елгава, 1970, т. 4. 4. 1. стр. 86 -88.

50. Овчинников Ю. А. Биоорганическая химия. М.: Просвещение, 1987, с. 516-523.53.0нищенко Г. И. Санитарно-паразитологическая ситуация в регионах Российской Федерации. Мед. паразитол., 2009, С. 3 6.

51. Определение токсичности воды и водных экстрактов из объектов окружающей среды по интенсивности биолюминесценции бактерий, М., 1996г.

52. Павловский Е. Н. состояние учения о природной очаговости болезней человека / Природная очаговость болезней человека и краевая эпидемиология, Л., 1955, С. 17 - 26.

53. Павловский Е. Н. Учение о природной очаговости трансмиссивных болезней / Ж. общ. Биол., 1946, №1, С. 3-5.

54. Падченко И.К. О предупреждении передачи цист кишечных простейших и яиц гельминтов через осадок бытовых сточных вод/ Падченко И.К., Локтева И.М., Данько О.П. и др. // Современные проблемы протозоологии:4-й съезд ВОПР. Л., 1987. - С. 104-105.

55. Патент № 2120421 РФ, 6 С 02 F 11/00. Способ дегельминтизации осадков сточных вод от яиц гельминтов / Долженко JI.A., Шевцов Д.А., Серпокрылов Н.С., Гримайло JI.B., Хроменкова Е.П., Калмыков Н.И. (РФ). -Заявл. 20.11.1997.

56. Романенко Н. А. Биосоциальные основы функционирования очагов описторхоза на Южном Урале / Мед. паразитол., 1998, №2, С. 16-20

57. Плющева Г.Л. Мониторинг паразитарной обстановки в зоне влияния гидрообъектов / Плющева Г.Л., Чефранова Ю.А., Романенко H.A. и др. // Матер. 7 съезда Всероссийского общества микробиологов, эпидемиологов и паразитологов. — М., 1985. С.357-358.

58. Романенко Н. А. Гигиенические вопросы профилактики паразитарных болезней // Гигиена и санитария, 2003, № 3, с. 16 -18.

59. Романенко Н. А. Совершенствование системы санэпиднадзора -необходимое условие повышения эффективности профилактических мероприятий при паразитозах // Медицинская паразитология и паразитарные болезни, 2000, №4 с. № 8.

60. Романенко H.A. Санитарные требования к сельскохозяйственному использованию сточных вод и их осадков// Гиг. и сан. — 1986. — № 7, С. 25 -31.

61. Романенко Н. А. Современные задачи санитарной паразитологии.//Медицинская паразитология и паразитарные болезни"; 2003, №5, с. 25-29.

62. Романенко H.A. Санитарно-паразитологическая характеристика почвы / Романенко H.A., Русаков Н.В., Сабгайда Т.П. и др. // Гиг. и сан. — 1994. -№ 9.-С. 14-17.

63. Романенко H.A. Среда обитания и паразитарные болезни в Северных районах России / Романенко H.A., Сергиев В.П., и др. // Федеральная целевая программа «Дети Севера» — Национальный приоритет России. Москва - Новый Уренгой, 1998. - С.86-89.

64. Русаков Р. В. Эколого-гигиеническая характеристика загрязнения почвы г. Москвы / Русаков Р. В., Тонкопий Н. И., Великанов Н. Л. и др. // Гигиеническая оценка состояния окружающей среды и здоровья населения. -М., 1997. С. 107-113.

65. СанПин 3.2.569-96 «Профилактика паразитарных болезней на территории России», МЗ РФ, 1996

66. Свободные радикалы в биологических системах Сб. ст./ Пер. с англ. Калмансона А. Э., и Мошковского Ю. Ш. Под ред. и с предисл. Блюменфельда Л. А. М.: Изд-во иностр. лит., 1963, с. 32 — 35.

67. Серпокрылов Н. С. Расширение технологических свойств коагулянтов// «Строительство- 2007», материалы международной научно-практической конференции. Ростов н/Д: Рост. гос. строит, ун-т, 2006, С. 58 -62.

68. Сибирцев Н. М. Избранные сочинения. В 2-х т. М.: Сельхозгиз, 1951, Т 1: Почвоведение. С. 49-83.

69. Симонов А.П. Средства и методы дезинвазии объектов внешней среды при гельминтозах. — М.,1978. — 42 с.

70. Скрипова JI. В. Санитарно-паразитологический мониторинг объектов окружающей среды в очагах кишечных паразитарных болезней на территории Республики Беларусь: Автореф. Дисс. д-ра биол. наук, М., 1997.

71. Скрипова JT.B. Источники питьевого водоснабжения и их участие в распространении паразитарных болезней / Скрипова JI.B., Романенко H.A. // Сб. научных трудов БЕЛНИСГИ. 1996. - Т.2. - С.77-79.

72. Скрябин К. И. Трематодозы животных и человека М. Л., 1950, С. 7-10.

73. Сыскова, Т. Г. Состояние паразитарной заболеваемости населения в 1999г. / Сыскова, Т. Г., Цыбина Т. Н, Сидоренко А. Г., Ясинский А. А. //"Медицинская паразитология и паразитарные болезни", 2001, №3, с. 31 —35.

74. Уролов М. А. Биохимия гельминтов /Под ред. Э. X. Эргашева; Самарк. гос. пед. ин-т им. С. Айни, Ташкент Фан, 1991

75. Федоров В.Г. Роль водоемов Омской области в распространении гельминтозов человека / Гигиеническая оценка водоемов Западной Сибири при различных видах водопользования: Сб. научн. трудов. Омск, 1986.

76. Хроменкова Е.П. Санитарно-гельминтологическое обоснование мероприятий по охране окружающей среды как основа профилактики гельминтозов. Дисс. канд. мед. наук. Ростов н/Д., 1992. - 201с.

77. Хроменкова Е.П. Изыскание средств нетрадиционного характера действия для обеззараживания объектов окружающей среды при паразитозах

78. Хроменкова Е.П., Гримайло JI.B., Ермолова Р:С. // Мед. паразитол. — 1997. -№3., С. 13-17.

79. Чиликин М.М. Обеззараживание от яиц гельминтов механически обезвоженного осадка сточных вод / Медицинская паразитология. 1973. - № 1.-С.82.

80. Шевцов Д. А. Экологический анализ и регулирование инактивации возбудителей паразитозов в урбоареалах. Специальность 03.00.16. "Экология". Ростов-на-Дону, 2003, с. 9 13.

81. Шерстнев М. П. Активированная нильским синим железоиндуцированная хемилюминесценция желточных липопротеидов / Шерстнев М. П., Азимбаев Т. К., Владимиров Ю. А.// Биофизика. — 1995. -Т. 40, вып. 3. С. 531 -533.

82. Шкавро З.Н. Методы и реагенты обеззараживания осадков водоочистки / Шкавро З.Н., Кульский JI. А., Медведев М. М. и др. //Химия и технология воды. — Киев, 1983.—Т. 5,№3. — С. 271—275.

83. Щербаков В.Г. и др. Биохимия растительного сырья/ В. Г. Щербаков, В. Г. Лобанов, Т. Н. Прудникова, С. А. Федорова, под ред. В. Г. Щербакова. -М.: Колос, 1999. С. 211, 338.

84. Яковлев С.В. Водоотведение и очистка сточных вод / Яковлев С.В., Карелин Я.А., Ласков Ю.М., Калицун В.И. М.: Стройиздат,1996.

85. Л. Н. Яровой Справочник по медицинской гельминтологии / Л. Н. Яровой, М. Н. Зубчук, А. К. Токмалев, под ред. К. М. Лобана: Кишинев «Карта Молдавеняскэ», 1984, С. 280-285.

86. Aust S. D. Free Radicals in Biol. Med. / Aust S. D., Morehouse L. A, Thomas C.E. , 1985, V. 1,№1,P.3.

87. Balentine J. D. Pathology Of Oxygen Toxity, N.Y. L. Paris etc.: Acad. Press,1982, P. 34-39.

88. Bull R.O. Health effect of alternative disinfection and their reaction production

89. J/Amer. Water Works Assoc.-1980.V.72. № 5.- P 229 - 303.

90. Batterfield J.D., McGraw P. C., Free Radical Pathology Stroke. 1978, №5, P.

91. Chester R. The ways and the methods to halt a risqué of parasitic contamination in Western Europe / Chester R., Nimmo M., Alar M. etal. // Science, 1998, 4, p. 135 142.

92. Chin Tsong Lo Compability and host parasire relationships between species of the genus Bulinus and Egyptian strain of Schistosoma haemotobia // Malacologia, 1972, V. 11 №2 P. 225 230

93. Combes C. Rencontre, identification, installation dans le cycle des metazoaires parasites// Bull. Soc. Zool. Fr., 1990 V. 115., P. 99 105.

94. Commoner B. Biological activity of free radicals / Commoner B., Heise J., Lippincott B. B., Passoneau J. V., Towsend J. // Science, 1957, 5, p. 126.

95. Esch G. W. Impact of the ecological succession on the parasite fauma in centrarchids from oligotrophic and eutrophis ecosystems / Amer. Midland. Naturalist., 1971, V. 86, P. 160 168.

96. Evans S. Wastewater purification in a case of biological contamination / Evans S., Stephenson J. NY. 1995, P. 134 139.

97. Fraenkel G. S. The orientation of animals. Kines, taxes, ayd compass renctions / Fraenkel G. S, Gunn D. L // Dover Publ. Inc. NY, 1961, P. 24-37.

98. Gorby W. Free radicals as a cause of mutations and cancer/ Theory in biology. London, 1956, p. 8 - 12.

99. Gutterige J. M. Free Radicals Aging And Degenerative Deseases / Gutterige J. M., Westerwarck T., Halliwell B. . N Y.: Alan Liss Inc., 1986, P. 99- 104.

100. Tappel A. L. Pathology of Cell Membranes. N.Y.: Acad. Press, 1975, V. 1,P. 145- 150.