Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

НЕКОТОРЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ФУНКЦИИ РУБЦОВОГО ЗВЕНА ПРОЦЕССА ВНУТРЕННЕЙ ЦИРКУЛЯЦИИ АЗОТА У ЖВАЧНЫХ

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "НЕКОТОРЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ФУНКЦИИ РУБЦОВОГО ЗВЕНА ПРОЦЕССА ВНУТРЕННЕЙ ЦИРКУЛЯЦИИ АЗОТА У ЖВАЧНЫХ"

МИНИСТЕРСТВО ВЫСШЕГО И СРЕДНЕГО СПЕЦИАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ УзССР

Ташкентский Ордена Трудового Красного Знамени Государственный университет им. В. И. Ленина

НИКОКИРИС ПАНАИОТИС НИКОС

НЕКОТОРЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ФУНКЦИИ РУБЦОВОГО ЗВЕНА ПРОЦЕССА ВНУТРЕННЕЙ ЦИРКУЛЯЦИИ АЗОТА У ЖВАЧНЫХ

(03.00. 04—биологическая химия)

На правах рукописи

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соксканне ученой степени кандидата биологических наук

Ташкент — 1974

/ ,- ■■■'■' ■■ J

министерство шсшего и среднего специального образования узбекской сср

і

Ташкентский ордена Трудового Красного Знамени Государственный Университет имени В.И.Ленина

На правах рукописи

НИКОКИРИС ПАНАЙОТИС НИКОС

некоторые закономерности функции рущошго звена процесса внутренней циркуляции азота у жвачных .

(03*00,04 - биологическая химия)

Автореферат

диссертации на соискание учёной степені кандидата биологических наук

] ; :; п г і

і

Ташкент - 1974

Работа выполнена в Научно-исследовательском ордена трудового Красного Знамени Институте животноводства Лесостепи и Полесья УССР, г.Харьков (Южное отделе газ ВАСШШ) ♦

Научный руководитель - кавд,йаологичес!отх наук, доцент В.А.КАПЛАН.

Официальные оппоненты:

1, Профессор кафедры биохимии и биофизики ТашГУ игл* В. И Ленина, доктор биол.наук Б.А.ТАШШМВДОВ.

2. Заведующий лабораторией физиологии пищаварения Отдела физиологии АН УзССР, доктор биол.наук К.Р.РАШЮВ.'

Работа направлена на официальный отзыв в Узбекски! (ту чно~псследоватвльский Институт животноводства.

Автореферат разослан * ¿(р^Л 1974 г.

Зашита состоятся " Ц " (Ъ(>4.) 1975 г. яа эасе-лашя Учёного Совета по присуяд^нлюСучёных Степеней ао биологическим наукам Ташкентского ордена Трудового Красного Знамени Государственного Университета им.В.И.Лекина (ул. К,Маркса, 35, аудитория 133).

Отзывы на автореферат просим направлять по адресу! г.Татгкент, 47, ул.К.Маркса, 35, ТашГУ, биолого-почвенний факультет, учёному секретарш'(в двух экземплярах).

С диссертацией мояно ознакомиться в научной библиотеке ТашГУ им. В.И.Лешша (Вузгородок 4).

Учёный секретарь Совета, доцент

И.К.КЛДЫРОВ

Быстрые тешш роста населения на Земле настоятельно увеличивает потребность а продуктах штания, основный источником которых является сельское хозяйство, и, в частности, одна из ведудах его отраслей - животноводство. Для успешного решения »той чрезвычайно вааисй проблеш представляется необходим™ широкое использование биологаческой особенности жвачных превращать с помощью скибиотическоЗ микрофлоры преяжелудкоа небелковые азотистые соединения в ценные пищевые продукты для человека.

Жвачные животные ¡шест исключительно большое значение в обеспечения человечества пщевда белкой, поскольку только она способны производить этот белок с использованаей в качестве кордового азота мочевины и аммонийных солеЛ благодаря деятельности населяющих их предкелудки микроорганизмов, Эффективность использования азота природных а синтетических кормовых средств в огромной степени зависит от характера превращений их в рубце, Ключевое положение в этих превращениях занимает аммиак, который, с одной стороны, возникает как продукт расщепления белковых и небелковых азотистых веществ корма и непрерывно поступающей в рубец из крови мочевины, с другой стороны, является исходным материалом для биосинтеза рубцовой микрофлорой бактериального белка, являвдегооя важным источником аминокислотного питания жвачных. Возвращение части иочевины крови в рубец обес- -печивает возможность ее реутилизации, т.е. повторного использования ее азота для пополнения фонда аминокислот. Этот процесс, получивший название внутренней (румино-гепатической) циркуляции азота, является одним аз факторов, определяющих

эффективность использования азота корма у ясачных.

Результаты многих исследований показывают (Каплая, Бойко, 1^63; Алиев, Кмпаров, 1У65; Нурилов, 1^65; ПшцкиЙ, ХУ65; Явоненко, 1^66; Алиев, Алиева, 1^67; Каплан, Свириденко, 1У67; Макарцеэ, 1^68; и^с^ег г:ь е! «л.,

1961;. ¿^¿¿к , 1у65; ег , 1^67 и др.), что изуче-

ние внутренней циркуляции азота у жвачных, как одного из путей использования эндогенной мочевягш, а также роли стенки преджелудков в этом процессе, представляет значительней интерес как для познания самих закономерностей этого недавно выявленного звена межуточного обмена у жвачных, так и для выяснения возможностей организма к более полному использование азота корма - Наиболее дефицитной часта рациона. Однако среди исследователей, зашшащахса этим вопросом, имеются разные взгляды на природу этого явления и на механизм, по которому осуществляется транспорт мочевины из крови в рубец. Не решен еще окончательно вопрос о назначении и целесообразности внутренней циркуляции азота в поддержании азотистого равновесия у жвачных животных.

Другим аспектом этой проблемы является использование жвачными аммиака, поступающего из полости рубца в кровяное русло, а также вопросы его детоксижации. Проходит ли аммиак через стенку рубца "транзитом" в печень, где он превращается в мочевину, или же в. тканях стенки уже начинаются такие его превращения, которые могут оказать влияние на эффективность использования азота корма? Последний вопрос сводится к тому, происходит ли в рубцовой стенке обезвреживание аммиака путем синтеза мочевины (Кусень и сотр.,1963; Кусень, 1966; Алиев и сотр., 1965; Курилов, Кшаров, 1^69), благодаря чему часть азота корма исключается из сферы аминокислотного обмена еще до поступления в циркулирующую кровь, или же продуктами этого обезвреживания являются глуташновая кислота к г луг амин (Кош аров, 1^64;

1У64; ,1966),

т.е. вещества широко используемые а метаболических процессах, протекающих в животных тканях. Однако по вопросу о механизме детоксикаяия аммиака в рубцовой стенке нет еще единой тотки зрения.

Важность а актуальность решения этой проблема для теории и практика кормления хвачншс животных связана. во-первих о тем, что характер превращений всасывашегося из рубца аммиака оказывает влияние на обаую эффективность использования азота корма, в, во-вторых, с широким использованием мочевшш и адао-шйиих солей в корцлешга жвачных, с чей связана возможность всасывания из рубца больших количеств аммиака и отравления животных,

Исходя из изложенного, задачей настоящей работы является изучение вопросов транспорта азота мочевшш через стенку рубца и факторов регулирущях этот процесс, а также исследование некоторых сторон азотистого обмена в стенке.этого органа с целью определения его роли в детоксанаода г последующей утилизации аммиака, всасывающегося из рубцового содержимого.

Материал и методика исследований

Экспериментальные исследования проводились в лаборатории физиологии Научно-исследовательского ордена Трудового Красного Знамена Института животноводства Лесостепи и Полесья УССР.

О опытах были использовали клинически здоровые животные; в острых опытах использовали овец а баранов породы прекос в возрасте 3-5 лет, а для проведения хронических экспериментов по исследованию вопросов трансаорта мочевины из крови в рубец, а также процессов азотистого метаболизма в рубце было взято четыре бычка-кастрата о постоянной фистулой рубца. Рационы для подопытных животных были составлены по общепринятый нормам о учетом живого веса, возраста и продуктивности; суточная норна кормов скармливалась в две равные дачи, поились животные вволю из автопоилок. Исследования проводили на некормленных & течение 18 часов животных.

Для определения роли станки рубца в детоксикации аммиака и транспорте азота мочевины, в условиях острого эксперимента был применен метод артерио-венозноЛ (А-В) разницы по рубцу для компонентов небелкового азота (аммиака, глутамина а мочевины). Влияние уровня аммонийного азота в рубце на детоксикадаонную функцию его стенки и на транспорт азота мочевины из крови в полость этого органа изучалось в двух сериях опытов. В первой серии в полость рубца вводили 11^-ныЗ раствор аммиака (0,25 ид

иа кг веса тела), а во второй серил - такое же количество шлюшка + 2 л. 12,5^-ного раствора сахарози ( для обеспечения высокой метаболической активности рубцоаоЙ микрофлоры).

Фактори, вллящне на транспорт азота ыочевияы через стопку рубца изучала следующим образом: а) одно -и двухкратным увела- ■ чешем концентрации мочевины в циркулирующей крош путем внфу-зяи мочевины в яремную вену, б) увеличением концентрации мочевины в рубце я в) исследованием скорости расцепления мочевины рубцовой жидкостью. Все представленные данные о содержания изучавшихся веществ в оттекающей от рубца крош вычислены с учетом изменения гематокрита.

Для количественной характеристики детоксикадаонной функция стенки рубца применяли метод перфузии рубца in viU-o с использованием аппарата искусственного кровообращения (АЩ) ИСЛ-2* . При этом в полость перфузируемого рубца вводили 200 ыл 10^-ного раствора сернокислого аммония с 15%-ным атомным избытком н15 и 400 ші 5/£-ного раствора углекислого натрия (последний вводился для создания в рубце слабощелочной среды а увеличения в связи с втим скорости всасывания аммиака). Перфузио рубца проводили в течение 75-90 мин. с момента введения изотопа. Перфузатом служила цельная гепаринизированная кровь того же животного, у которого извлекали рубец для перфузии. Перфузию контролировали определением в перфузируемой крова следукщах показателей: гемоглобин ( по Сали), насыщенность крови кислородом ( на оксигемо-иетрв 057Ü), гематокритное число с помощь» специальной приставки к центрифуге ЦУЫ-1. .

Йэ перфузата о помощью разработанного наші истода, на колонке с суліфокатионитом КУ-2 выделяет компоненты небелкового азота, э которах определяли внедрение метки к*5. В остальных пробах перфузата в. рубцовой стенки« после предварительной обработки» на масс-спектрометре Щ-І305 определяли внедрение метка у, Концентрацию изотопа (атомный % избытка) определяла по Гйттелбергу (1948)*

„15 . JSSL |Я9 ».Ж Л 2« +1 ' * ■ Í2fj ¿эот вши&ка и яшдиий азот глутамина определяли в цельной кропя lílt КрОДИ'ІфУзиошшм методом с пргммнением фенсл-гапохлориТН0-"ч реактива (Наслан, Свиридълко, 1^66), азот мочевины - уреаз- С -

выы методом в чашках Конвзя о последующей несслеризацией (Каплан, Сварвденко, 1966). Для дальнейшей ыасс-спеггроыетряи общий g небелковый аэот в пробах нроая и стенки рубца определяла иакроыетодш Кьельдадя в аппарате Маркгама. В перфузате определяли глшозу по Шоыодьи (1952) и молочную кислот; (do Баркер в Самерсон, 1^41). Определение jü крови (acut вазелиновым маслом) a рубцовой жидкости производили на потенциометре ДНУ-01, ашаака в рубцовой жидкости микродиффуэноняш методом, летучае тарные каслоты (Лак) в рубцово2 жидкости методой отгоняя о водяным паром в аппарате Маркгама.

Глутаминсинтетазную активность в тканях стенка рубца и для сравнешзя в печени а в мозгу определяла по методу Пашляно н сотр. (1962) в вашей модификации. Подавлящеа большинство полученных цифровых данных обработано общепринятым методой Сгыден-та, описанным Асатиани (1965)«

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

I. TpaqcqopT №ffltffi fiT^CT РТбца

А. Влияние уровня вшяака в рубце не транспорт мочевины ва крови в полость «того органа

Роль рубца в сбивав азота у квачных не сводится только лхжь к шкроЗивльноиу переваривании значительной чаоти азотистых веществ корма. Рубец выполняет такие важнув функцию во внутренней царнуллцви аэота, обеспечивая реутилизации поступавшей в пего иочевяны путей превращения »того азота о поыощьо микроорганизмов а белковый азот.

Поскольку непосредственны« всточником азотистого питания для основноа массы рубцоаих шкрооргакжзыов является аммонийный азот, представлялось необходимый ияучдть» в кахоД мэре процесс внутренней циркуляции азота носат характер прсспособятельноа реакции» обеспечяващеЗ потребности рубцовой кикрофдорн в аэоте. Результаты проведенных двух серой экспериментов, в которых определялась вртерао-веноэная (A-S) разница для азота мочевины по рубцу до а после введенгя в'aero раствора пшаака ж аммиака + сахарозы представлены в твбл.1.

Дашше таблицы Í показывает» что до введения аммиака в полость рубца в оттехашев oí пего крови содержится Меньше мочевин ь, чем в пратекавдей, и, следовательно А-В разница для азота

Та&шоа І

Концентрація азота мочевінн в притекащеЗ к рубцу я остекащеЗ от вето крови, а тадое величина рй в рубцовой жидкости и содеришае в неЗ адцояаЕаого азота после введеная в рубец раствора аитгдтд к ашиада+сахарозы .

Условия проведения экспериментов

ІВремя І Азот иочевивн.в крови {М+m ) ІРубпоззя стереть (f,U---) І^Ібршяая

Кішн) !_

¡рубцовая! А-В ¡изменение ' '.аігюшіїяна ! !вева !раз- !А-В разшпщіазот (иг%) ! ! Івица ! (в %) ! !

Введение в руйец раство- О ра Eicaaaa (0,25ия U%- 20 ?аго раствора оа кг веса 40 т&га ( р:= 8)

Введения в рубец раство- q ра ашиаяа (0*25 ия II¿о а ого раствора на кг веса. 40 тела) к 2 д. 12,5?-ного раствора сахарозы ( к» 4)

12,Э8±1,66 II,79+1,25 +1ДЭ 100,0 12,42+0,36 7,09+0,05

13,97+1,80 П,36±1,80 +2,64 219,32 23,37^0,35 7,00¿0,04

14,55+1,53 ІІ,48±І,79 +3,(У? 257,98 25,20¡0,7I 7,04+0,10

9,64¿p,3I 8,93+0,24 +0,65 100,0 7,77+0,03 7,12+0,07

9,77¿0,I9 +0,53 83,07 8,48+0,11 6,57+0,05

16,10+0,23 6,85+0,15 +1,25 192,30 8,35¡0,06 6,18+0,03

иочевшы является полоздтельноД (+І.І& мг^}. Содержание аыио-нийного азота а рубце составляло 12,45^0,36 при слабощелочном їй рубцевого содержаного.

Через 20 минут после введения ашшха в полость рубца параллельно с увеличением концентрации иочевааи в артериальной крови увеличивалась л А-В разница мочевины (+2,64 мг#)ї хотя концентрация аммонийного азота в рубце была довольно высокой -23,37+0,63 рН рубцового содержимого ври втом практически не измея алея. А-В разница для мочавкны и в дальнейшем продолжает оставаться положительной, сохраняя тенденцию в увеличешп (+3,07 кг%). При этом наблюдается незначительное повышение ашо-нцЯиого азота в содержимом рубца (па 1,83 мг?»); это повышение, вероятно, обусловлено увеличением перехода мочевины из крови в рубец, о чей свидетельствует, возросшая величина А-В разницы дл« мочевины. Следует подчеркнуть, ЧТО В ЭТОЙ серии ОПЫТОВ ПИ В 0)11)1.11 случае не яабладалось уменьшение полоаштеяьной А-В разницы для мочевина после введения амшака в рубец. Более того, нарастание концентрации ыочевшш в крови после введения раотвора аммиака в рубец и увеличение А-В раашщц мочевины свидетельствует о том, что переход мочевина иа крови в рубец во всех случаях был бодь-шш, чем до повышения концентрации в рубце аммиака в результате его введегшг,

В другой серии опытов для обеспечения эффективного использования рубцовой клкрофлорой вводимого в рубец аммиака одновременно с последним вводили раствор сахарозы. В этах опытах в оттекающей от рубца крова мочевина такжа всегда содержалось меньше, чем в притекающей; в течение 40 минут после введения а рубец растворов аммиака я сахарозы величина А-В разница для азота мочевины возрастала с +0,65 до +1,65 т.е. мочевина не только продолжала поступать в рубец, но транспорт этот -даже увеличивался. Вместе с тем происходило значительное снижение рН рубцовоЙ ломкости { с ?,Х2±0,05 до 6,16*0,09), что явилось следствием интенсивного сбраживания введенной врубец сахарозы. Параллельно происходила усилецааяэуталвзация мккрофлороЗ рубца введенного в его полость аммиака, благодаря чему не наблвдалось столь значительного увеличения его концентрации, как это имело место в опытах с введением аммиака без евхароаы. Следовательно, введение в рубец раствора аммиака вместе с легко доступным для Рубцовых

бактерий источником анергии (сахарозой), обеопечивавдим интенсивное использование введенного аммиака, не только не •~ззжло поступление мочевины аз нроаз в рубец, но через 40 минут после ввфузки раотворов А-В разница для азота мочевина значительно увеличилась. Эти опыты показали, что независимо от концентрация аммиака а рубцовой жидкости и от того имеются или отсутствует в рубце условие для аффективного использования аммонийного азота рубцоэой микрофлорой, мочевина всегда поступает из крови з рубец.

Полученные данные по транспорту мочевины из крови в рубец согласуются о результатами других исследований, выполненных яа -фистулироваякых и йнгиостомированны! шшотных я на пврфузирован-всэ1 рубце (Кондратьев, 1^66; Иаяарцев, 1^67, I96B; Александров, I960; Самедов, I9e9j Муядровицкая, 1Э6Э; Создатенков, ЮгааДЭбЭ).

Таким образом,'результаты нааих исследований, а таксе инео^ щиеся в литературе экспериментальные данные даот основание заключить, что поступление мочевины из крови в рубец не зависит от уровня аммиака в рубцовой жидкости. Нам не удалось также обнаружить причинную связь между поступлавней мочевины из крови в рубец и потребность!? в азоте михробиадыюй флора рубца. Возможность использовать поступающую из крови мочевину определяется не потребность» организма в азоте, а наличием 8 рубце соответствующих метаболических условий, обеспечивав®« трансформации бактериями рубца азота мочевины я азот заменимых и незаменимых аминокислот. Поступление мочевина и» крови в рубец происходит я при отсутствии таких условий я в этом случае циркуляция мочевины осуществляется вхолостую, т.н. бактерии рубца лишены возможности использовать образующийся при уреазном расщеплении аммиак (Каплан, Свириденко, 1967; Варади в оотр.,1^70), который всасывается ив рубца в вновь превращается в печени"в мочевину. Вероятно, по этой причине в начале голодания у жвачных повышается как уровень мочевины в крова, тая ж экскреция ее почками (Juhis» » Каплан я Сшрвденко, I^CTj virady et al. ,

Х%7). Очевидно, значительная часть синтезируемой в организме мочевины, которая в условиях нормального питания включается в процесо внутренней циркуляции азота, в начале голодания «декретируется почками и организм жвачного при этом может терять некоторое количество азота.

Б. Двусторонняя проницаемость отеааз; рубяа лая мочэвияы

Для того, чтобн охарактеризовать факторы, влиявдае на транспорт ыочекяны из крова в рубец, необходимо было соста-взть представление о концентрации кочевина во обо стороны рубцовсй стещсл, как мембранного образования,

а) уоеааная актавчость соаеояявого ртбпа

Уровень мочевины в кровз жвачных зависит от количества поступающего о кормом азота и от объема всасывавдегося из рубца аимиака í и Bars , Xö57} Эннисон и Дшс, ІУ62 и др.). Учитывая противоречивые даніаа о содержания мочевины в содержи-ной рубца» наш на двух фистулировашых бычках-кастратах проведены опыты по исследовании уреазноЯ активности рубцового содераимого.

Результаты зтих экспериментов показали, что после введения иочешЕн в рубец она обнаруживается в состава рубцовоЗ жадности. Так, через 5 минут посла ее кяфуэии, концентрация мочевияы составляет 174,0 мг£, а спустя 30 минут она снизилась до 14,4$ игЗ». Скорость расщепления мочевины при этом значительза н составляет 5,30 мг^/мвз. Через I час, после инфуэиа раствора мочевины в рубец,ее уже ее удалось обнаружить в составе рубцовоЗ жидкости. Следовательно, поступающую мочевину мооао обнаружить в рубце лишь в течение относительно короткого отрезка времени, что связано с высокой уреаэяой активностью рубцовоЗ жидкости (Бекетова, 1^68; Кавлан и Бекетова, 1^*71). По атоЗ причине при отсутствии мочевины в корив концентрация ее в жидкости рубца практически будет равна нуля. Следовательно, благодаря отсутствию мочевины в жидком содержимом рубца всегда существует полета -тельный концентрационный градиент между кровью ж рубцовой жид-кос ты), величина которого определяется концентрацией мочевины в циркулирующей крови. Очевидно, что наличие этого градиента ж проницаемость рубцовой стенки для мочевины являются теми непосредственными причинами, которые определяют постоянный переход мочевины из крови в рубец.

б) Влияние величины и направления концентрационного градиента мочевины на еа транспорт через стеккт рубпа

Влияние концентрации мочевины в крови на транспорт ее в

- II -

рубец изучалось нами б острых опытах на баранах. Увеличение концентрации мочевины в циркулирувдей крови осуществлялось путем окно -и двухкратного внутривенного введения раствора мочевины. В этих опытах было установлено, что повышение содержанка мочевины в крова приводит к значительному увеличению ее А-В разницы« т.е. к увеличению перехода мочевины из крови я рубец. Спустя 20 мин. после внутривенного введения мочевины концентрация авота ыочевинн в артериальной крови увеличилась в три раза к достигла уровня 33,79 мйС» при одновременном увеличения содержания его в венозной крови о 10,7^ иа% до 27,73 кг£. Величина А-В ревности возросла при этом с +0,64 мг£ до +6,06 иг?. Это резкое увеличение А-В разницы азота мочевина по рубцу является результатом увеличения ее концентрации в циркуляруго«Я крови, т.е. результатом повышения концентрационного градиента между кровью к рубцовой жидкостью.

Через 40 кинут эта картина сохранялась! концентрация азота мочевины в артериальное крова ненамного падала (29,$б мг£), во одновременно понижалось ■ содержание азота мочевины'в крови . рубцовой вены (23,21 мгХ). При этом А-В разница продолжала оста- * ватьоя на выоокои уровне <+6,76 т.е. тенденция к поступлению ыочевинн кэ крови в рубец не только не уменьшалась, ко даже несколько увеличивается.

Аналогичные результаты были получены при двухкратной увеличении концентрации мочевины а крови; в этом случае критерием транспорта мочввжяы кэ крови в рубец служилоувеличение кон- . централи аммонийного азота в рубцовой жидкости (рио.1).

Приведенные на риоД данные покавнвают, что о увеличением концентрации мочевины в крови происходит увеличение аммонийного азота в рубцовой жидкости. Уровень ЛХК при етом остается неизменный в связи о тем, что опыты были проведены на некормленных животных. При рассмотрении результатов «их опытов следует вьщеляп два момента. Во-первых, эти данные свидетельствуют о прямой зависимости транспорта мочевины в рубец от ее концентрации в кровя, и, во-вторых, »тот транспорт не ваваоит от метаболической ситуации в рубце. Постоянство концентрации ДОС а ходе экспериментов свидетельствует о том, что метаболическая активность рубцовой микрофлоры оставалась все время на постоянном уровне, в то время как содержание аммиака, вырежащее в

1 - конпеатредкя азота мочевины в артериальная крови

2 - " азота аммиака в рубцовой жидкости

3 - летучие жирные кислоты (£ЗК) в рубцовсй жадности

Рис. X, Влияние двухкратное внутривенное кнфувии

мочевины на концентрацію аммиака 8 рубцовой жидкости

условиях данных опытов поотуоленив из крови мочевины, резво увеличилось ( от 6,3 до 7,6 мг£)*

Такий образом, результаты этих исследовании свидетельствует о том, что азот аадогеаасЛ мочевины у жвачных животных непрерывно поступает из крови в рубец,

В наших опытах средняя А-В разница ааота мочевины по рубцу в норме равнялась 1,80 Исходя на этой величины представляется возможный вычислить количество мочевины, которое может поступать в рубец ( при допущении# что скорость кровотока будет постоянной). Воли ми%тный объем крови для рубца овцы составляет 0,3 л/мин ( лийнаг , 1$63), то количество азота мочевины, поступапдее нз крови в руйец'эа сутки, будет составлять 7,79 г, что эквивалентно 48,60 г белка в сутки. Это количество азота может служить существенной добавкой при ограниченной поступлении его с кормом; при наличии в рационе достаточного количества легкосбраживаемых углеводов азот этот будет использоваться

Рубцовой микрофлорой ДЛЯ синтеза белка ( Dsoker et al. , I960).

Поступление иопевшш s клетку осуществляется путей ее пассивного проникновения через клеточную мембрану. Этот транспорт определяется в основном величиной а направлением концентрационного градаедта. Действительно, как наки показано, меаду кровы» в рубцовой жидкостью всегда существует солсаштапьный концентра-ционниа градиент для мочевины, вехачина которого определяется концентрацией мочевины в циркулирующей крови. Очевидно, наличие втого градиента и проницаемость ткааеЗ рубцовой стенка для ыочевшш, а ас потребность микроорганизмов а азоте являзтоя тепа непосредственными причинами, которые определяют постоянный переход мочевины еэ крови в рубец. Поэтому транспорту почавшої через стенку рубца, лав мембранного образования, не присущи ка-ккэ-лшбо отличительные особенности; он подчиняется тем же закован транспорта неэлектролитов, которые характерны дая всех биологических мембран.

Бопроо о двусторонней проницаемости стенки рубца для иочеви-ші изучали путей заливания в опорохнекный рубец 0,5#-ного раствора мочевины.

Таблица 2

Концентрация азота мочевины в крови я ее А-£ разница по рубцу после введения в опороаненный рубец раствора мочевины (Ияз)

Время I Азот мочевины в крови ( в иґ%) {Изменения взятия 3 г ц . в ї jA-B разницы проб крови!_1 " * '_I (в %)

(мин.) 'Бршная 1 Рубцовая ÍA-B разни- 1 ¡аорта Г вена 1ца !

О 9,45±І,І9 7,13¿p,56 +2,34 100,0

5 П,82±І,5І 23,06±2,6I -11,24 -480,0

20 I3,65±I,63 25,I0¿2,78 -11,45 -489,0

. 40 I5,06±I,77 30,04±2f47 - 4,98 -212,0

Исследованиями установлено (табл.2), что с изменением направлення концентрационного градиента для мочевины изменилось к направление трансаорта ее в системе кровь - рубцовая жидкость. Таи, если исходная А-Б разница для азота мочевины была положительной а равнялась в среднем +2,34 мг£, то через 5 минут после

начала эксперимента эта величина стала резко отрицательной (-11,24 Отрицательная А-В разница сохраняется в течение

всего 40-цянутного периода наблюдений. Таким образом, ткан* рубца, как г следовало ожидать, не отличаются по своей двусторонней проницаемости для мочевины от других биологических объектов.

Благодаря хорошей проницаемости клеточных мембран для мочевины, процесс внутренней циркуляции азота является универсальным явлением. Этот круговорот азота свойственен не только гвачкым, но и моногастрическим животным (Кремер, 1^65). Однако особенность» »того процесса у жвачных является то,"что циркулирующий азот мочевины используется не только для образования в печени заменимся аминокислот, но а для синтеза незаменимых аминокислот рубцовой микрофлорой. Следовательно, внутренняя циркуляция азота является у жвачных важпш источником постоянного пополнения фонда незаменимых аминокислот и играет у этих азвотних важную роль в рациональном использовании азота корма.

2. Дэтоксккациорная, (барьерная) фикция ртрнкя шгбпа

а} Детохсикация аммиака стенкой рубца

В табл.3 представлены результаты определения в притекающей и оттекавдей от рубца крови аммиака и глутамина ( как предполагаемого продукта обезвреживания аммиака) при введении в рубец растворов аммиака или аммиака * сахарозы. Ло введения этих растворов в рубец содержание аммиака в артериальной крови находилось в пределах нормальных физиологических величия (45±3,21 я У^+4,^8 мкгЙ). Содержание амидного азота глутамина а артериальной крови в обеих сериях опытов составляло 634^26,10 и 1200+30,02 мкг£, а в оттекавшей от рубца крови оно было заметно выше (Х10бд34,23 ж 1638+Эе,В1 мкг£). Следует отметить, что ¿-В разница для мочевины в этих опытах всегда была паяют-тельной (табл.1), а то время как эта величина для азота аммиака и амидного азота глутамина в первой и второй сериях опытов всегда была отрицательной. Необходимо подчеркнуть, что А-В разница для амидного азота глутамина по своему абсолвтноку значению всегда была вше, чем для азота апилака.

При введенш* в рубец аммиака происходит резкое увеличение концентрации в оттекавдей от рубца крови амидного азота глутамина. уровень его в оттекавдей от рубца крови, достигает 3-4

- 15 -

Тдйдвда 3

-Ковдовтрацня азота мшяга < глядяого азота глутагша а дриевавдей к рубду а оттекзщей от вйго крови

| Условия проведения экспериментов

тов I

'.Вреиа Шот ашиава (шг£) Ш ¿к !взя- !

¡^НЬ ; кровь'орга-! кровь руо-'А-я (<шш.)|воа аоР*ы |Чов вены *—

)1Ашднкй ! Ы±т)

азотглугащна (шсг?)

¡кровь орш-! кровь руБ-!А-Н ' !раз- 1ной аорты ! совой вены.'раз-'шща ?_1, !вица

Введение в рубец раствора ашаака (0,22 ш Нового раствора на кг веса тела С д=8)

Введение в.рубец раствора аи**»*» и сахарозы ( то же, что ж в 1-й серая + 250 г сахароза в 2 л веды (д':= 4)

0 99*4,У8 305^,84 ,-206

20 106+5,04 851*12,86 -745

40 128*5,23 И56*11,44 -928

0 45*3,21 206+ 6,02 -161

20 107*4,56 221*7,44 -114

40 100*4,47 120+4,12 -20

$34^25,10 734±30,30 842±36,80

1106*34,22 -472 2^05^145,30 -2ХЙ 3351±130,2'0 -2509

1200*30,02 1638* 36,80 - 436 ^¿35,40 1487+ 33,81 -512 1120+29,90 1893+38,45 -773

т.«. увеличивается в тря раза. В 4-5 раза увеличивается величина А-В разницы. Во второй серии опытов наблюдается та хв тенденция к увеличении содержания глутамина в оттекающей от рубца крови. Однако увеличение »то было менее значительным а связи о тем, что всасывание аммиака ив рубцового содержимого происходило менее интенсивно, благодаря более низкой величине рН рубцовой хздкости (табл.Х). По »той же причине а концентрация аммиака в венозной крови увеличивается в значительно меньшей от*пени.

Сопоставление величины А-В разницы для аммиака, глутамина в мочевины ( таблицы I и 3) убедительно свидетельствует о том, что детоксикация поступавшего из просвета рубца в кровь аммиака происходит в рубцовой стенке о образованием глутшдша. Если количество всасывающегося аммиака принять равным суммарной А-В разнице аммиака и амидного азота глутамияа, то ысошо рассчитать доле всасывающего аммиака, превращающуюся в рубцовой стенке в »митярЯ азот. В первой серии опытов она составляла 70-73^, во-аторой - 73-82/Е. Степень обезвреживания аммиака а стенке рубца фактически, очевидно, еще выше, т.к. часть его связывается в процессе восстановительного ашинированю? «с-кетоглутарата о образованием глутаминовой кислоты ( кеЬагеп ,19641 Яво-венко, 1968, ■ * 1

Ревультаты"наших исследований получили подтверждение в а работах других авторов (Врыдник и сотр.Д^б9! Алиев я Наркобн-лов, 1^70; Алиев и Радченхова, 1970} Стулак^ 1^71, 1^72). Однако обнаружение способности тканей рубца к бноейнтезуглут амина не позволяет еще утверждать, что в отенкз рубца аз происходит превращения части всаснваэдего аммиака в мочевину, поскодьву положительная А-В разница для мочевины может бить следствием не только отсутствии ее синтеза, но ж выражением того, что скорость транспорта мочевины аз крови через стекку рубца всегда превышает скорость возможного ее новообразования. V

Решение этого вопроса обеспечивалось проведением исследований на перфузнруемоы рубце о введением в полооть органа меченой н*® ашояМяой соли а последуххции определением внедрении метки а состав мочевины, глутамина и ашиаха перфувата. Результаты биохимического определения компонентов небелкового азота в изотопный аналия внедрения метки к15 предотаалены в таблицах 4 и 5.

Таблица 4

Изменение содержаний в крови азота мочевины, еккзака и аюдного азота глутамива оря перфузка рубца цельной гапариназароааиноЗ кровьа { продолитедьяооть перфузии - ч> шш)

( п * 4)

Показатели небел-і ^о:гдеитРаиая р nepbyattpvewoS 7ГО9ВИ ( нового азота і„0 ВйЧзлз. пер- їпря окончания kІизмеяедия !фузші І ¡¿¿и 7 Іперадзші )J _

-9,26 +3,12

+5,47

В результате перфузии существенно изменилось содержанаа в крови мочевины, аммиака и глуташяа (табл.4) > Несмотря на высокий уровень аммиака в рубца <40-42 мс%) концентрация иочелзяы в циркулирующей по замкнутей системе аппарат-орган крови яе только не^увеличивается, но, напротив, ее количество убывает, переходя а полость рубца. Если ее концентрация до начала перфузия равнялась 2I,60¿0,69 мг#, то к концу перфузии эха величина понизилась на 3,26 уг%. Таким образом нам, также как и Макарцеву (1%7, 1^68), не удалось показать увеличения концентрации мочевины s перфузируемсй крови. Это является косвенным доказательством невозможности биосинтеза мочевины в стенке рубца. Здесь наряду со снижением уровня мочевины наблюдается накопление в яер-фуэате аммиака при одновременном, но более выраженном росте ахдкного азота глутешна ( соответственно на 3,12 и 5,47 Следовательно, в отношении изменения содержания мочевины, глу-таынна в аммиака в крови при прохождении ее через рубец в опытах о перфузией получили такие яе результаты, как в опытах по определение А-В разницы По рубцу ln eitu (табл.3). И в тех к в других опытах при прохождении крова черва рубец наблюдалось уменьшение содержания кочевяны и увеличение уровня аммиака в в особенности гдуташиа.

Следует отметить, что изотопная метка н15 была обнаружена ¿Ыицтчвтельво только а составе небелкового азота и отсутствовала в белках дерфузата. Исследование внедрения метки и^5 в

Азот мочевины 21,6+0,6» I2,34¿0,75

Азот аммиака 0,10^0,07 3,22+0,35

Амидный азот _ ,

глутакана 0,42+0,08 6,8*^0,26

компоненты небелкового азота перфуэата производилось после предварятельного вх фракционирования на колонке с сульфокатио-витсм КУ-2.

Результаты, полученные в втих опытах, представлены в табляде 5.

Таблица 5

Внедрение метки и*® в азот мочевины, аммиака и амидный азот глутамина перфуэаруемпй через рубец крови (атомный % избытка)

Опыты !Ддзтель-1 Азот мочевины I Амидный азот глутамина + ! иость 1_|азот аимдака_^

I(и?!7!8" "Артери-1"Веноз-1 В-А {"Артера-1"Ванов- ! В-А Нмин.) 'альная" 1яая" 1 . ельная" I ная"

Ия* • Нп» 1 «яИ

I »О 0,110 0,170 0,060 5,460 5,883 0,423

П 90 0,039 0,101 0,062 6,60 7,190 0,б90.

Услоено "артериальная" - кровь притекающая от АИКа х рубцу, условно "венозная" - кровь, оттекающая о* рубца в венозный приемник АИКа, Проба перфузата огбиралксь через $0 кга, посла введения метки

Проведенный изотопный анализ отдельных фракций небелкового азота перфузата показывает, что незначительное количество метки обнаружено как в "артериальной" (0,039-о,И атомных % избытка ' к15), так в в "венозной" крови {0,101-0,170 атома. % избытка

Однако это внедрение метки в составе мочевины весьма незначительно, если сравнить эти показатели о включением метки и*5 во фракции амидаого азота глутамава и азота аммиака} здесь ка обнаруживаем очень интенсивное внедрение как в артериальной* <5,46-6,60 атом, % избытка), тая и в "венозной" чаоти перфузата (5,88-7,19 атеын. % избытка).

Исходя из данных таблиц 4 ж 5 рассчитано, что к концу перфузии 1,65^ от введенной в рубец метки

обнаруживается в Составе ааота мочевлны, глутамина ж аммиака применявшейся для перфузии крови. Обнаруженное количество метки распределялось между зтхми веществами следувдим образе«] в аиидном азоте глутамина "62,402,

в аммиаке - 35,80# и в мочеяшт - 1,60 % .

Следовательно, приведенные данные показывают, что большая часть всосавшегося из рубцового содержимого аммиака обезвреживается в стенке рубца с образованием глуталзіна. Такое распределение метки свидетельствует о том, что синтез глутамиия, а не образование мочевины является основным механизмом обезвреживания аммиака в рубцовой стенке. Обнаруженное в опытах Кшарова (1^65), Курплова и Кошарова а также и в наших исследо-

ваниях (табл.5) незначительное'внедрение метки в составе мочевины, может быть объяснено наличием в слизистой рубца аргиназ-ноЗ активности (Кусень, Х^ЗЗ; и-чі-уісіі ні Синте-

зируемый из меченного аммонийного езота бактераяш-в рубце, а также я в его стенке, аргинин (Комаров, 1а63, 1^65), всасываясь, мшат подвергаться гидролитячео кому расщеплению" слизистой стенки ' рубца о образованием мочешни ( іц^ь-а сі її. ДУо8; и.п^уиг • ї и. ,1^68).

Д етоксикши и тая функция стенки рубца может рассматриваться как одна из сторон ее уяогогранних синтетических возможностей. Степен^внедрения метки в ее азотистые компоненты ( от

5,72 до свидетельствует об активной утилизации о^опийно-

го азота'стенкой рубца, притом в составе мышечного слоя стенка включение метки ІГ® большее, чем в слизистой. По-видимому, глу-ташн, синтезируясь в слизистой, легко транспортируется в кровь. Этому способствует хоршая мембранная проницаемость глуташка (Гофман, 1^71). Связывание аммиака в стенке рубца о образованием глутамина следует» очевидно, рассматривать не только как процесс детоксикадзш, во и как депонирование.части кормового азота для последующего использования его я разнообразных биосинтетических процессах ( Майстер, ІУ6І),

б) Гртуамидсинтетаза ткаи<$ стежки рубца

Исследованиями установлено, что ткани стенки рубца обладают глутаминсвнтетазной активностью (таблица б). Показано, что »та активность довольно ощутима в слизистой в составляет от 8,0 до 10, СЙ от активности мозга и около £5% от активности этого фермента в печеш*

■.; ..»Сушарная активность фермента в стенке рубца несколько ниже, тея х мозге я печени. Тем не менее, активность глутаминсинте-'чзд суежка рубца достаточно высока к »та ткань, как нами пока- ЙО -

зано, способна к значительному синтезу глуїалаша. Учитивая большую поверхность слизистой рубца и значительно большй относительный вес рубца по сравнению с печенья и мозгом {Кусень и Маслянко, 1%2), можно полагать, что глутпшнсилтстаза стенки рубца играет существенную роль в обезвреживании омутка, всп-сывапцегося из рубца. Увеличение концентрации глутакнна в оттекавшей от рубца крова после амг.аачноА нагрузки свидетельствует об индуктивной природе этого фермента. Это положение подтверждают и исследования Ступака £ ІУ7І, і У72).

Таблица 6

Активность глутамплсян тетази стеккц рубца, печени и мозга овецЛврекя инкубирования 30 как. при 37°)

Показатели ~ | Стенка рубца 1 печенЫ Мозг

іслизиотаяісерозно- І ( (мышечный ! ! _1 !слоЙ_І..........! ...........

Активность (в мМ глутаишо-гидрсксамовоЯ к-ты на І г

ацетонового порошка) 1,14*0,2* 0»85^0,03 7,7*0,24 13,77

- - ~ ±1(62

% от общей активности

мозга 8,£0 6,20 55,3 100

*

в) Биосинтез глутамина в рубцовом содержимом в возможность всасывания глутамина из рубаа в кровь

Возможность образования глутамина а рубцовом содержимом и всасывания его из рубца изучали на фястулированных бычках -кастратах, кормившихся зелеными кормами. Результаты этих исследований представлены в таблице 7.

В первой серии опытов вам не удалось обнаружить в содержимом рубца аывдный азот глутамина (табл.7). В пробах же, взятых через чао после скаршшвавия зеленой суданки уровень амэдного азота глутамина достигал 1,95*0,18 ш%. Во второй серии опытов нам также не удалось обнаружусь наличие глутамина в рубцовоЯ жидкости некормленных хлвотннх. Не установлено также наличие глутаыана и после введения в рубец этим животным мочевины и сахарози, т.е. при создания благоприятных энергетических я субстратных возможностей для этого синтеза. Следовательно, гдута-

Таблица 7

Величина pH рубцовой жидкости в содержание s вей азота аммиака и {¡кадастр азота глуташна у волов до кормления и после скармливания ем зеленой суданки или введения в рубец мочевин» и сахарозы ( восемь опытов на двух животных)

Серии I Условия опытов !/ ЕИш ч !А80Т ем_ 'АМЭДНЫЙ

опытов! ■/слоаил тактов ¡{ е+и ) миака азот глу-

I і . Нмгг) Іташна I_ I _1 ИМу)

I До кормления 7»04^0,16 7,43±0,71 0,00

Через I чае после окармливания суданки 6,64*0,16 І6»І0±І,2І 1,^5^0,18

П Некормленные животные 7,01¿0,06 5,84x0,82 0,00

После введения в рубец мочевины а сахарозы через

1 чао 7,20^0,06 15,65+1,09 0,00

2 часа 7,і9іР,05 12,58^1,09 0,00

4 чаоа 7,0&±p,06 Э,76±1,63 0,00

мив, обнаруженный нами в рубцовой кидкооти, имеет кормовое происхождение, Поскольку А-В разница для амилного азота глуташна у некормленных животных, а такие и после введения в рубец ашонийного азота ж оахарозы всегда бшш отрицательней {табл.3), и исходя из того, что в втих условиях в оодержииои рубца не обнаружен глутаман, можно сделать вывод, что увеличение содержания его в оттеяаадей от рубца крови обусловлено только его синтезом d« лото в стенке рубца. г

Приведенные результаты наших акоперименто» (табл.3), а также . литературнее данные ( Lobonaltt ,1^48; Lewis , 1§57 ж

др.) еввдетельствугт о том, что на рубца в кровь всасывается ааачительвые количества ашиака. Однако даже при введения аммиака в рубец мы не обнаруживала высоких вонцентрацай его в гархулирувдей крова. Не столь же жыооиоЭ была и концентрация его в оттегапцей от рубца крови. Это свидетельствует о том, что основная масоа »саснвавдегося es рубца шшдаиа обезвреживается а в ціркулирущу» кровь * свободной форме яе поступает. Выеоте о teil, имеосся данные» указывающие на то, что скорость

превращения аммоішлнсго азота в цочевищ в расчете на единицу веса печени у квачицх кивотньзс меіпліе, чем у других млекопи-таших ( ііііійєі'ї.'.ііиїі , ілгш.ґ.сі- - лі^і-п ,1^56), Кроме того относительна вес печепи у яаатаюс ішде, чем у моногастрм-ЧЄСКЇІХ ЖИВОТНЫХ (КусеНЬ, ^слллко, 1^62). Противоречивость этих данных п обуздал а допустить существование интенсивного де-токоннацистшого механизма в са:,:оії стенке предкелудков. Однако наои исследования и исследования ряца других авторов ( Хгуи-

тіси ілЧілсІе , ifvn4i.cn , 1^4;

гєіио Д9Є6; itt.rir.ui'иг еі а. , ІУ6У, ІУ6У) -сіслючавт пред г .»латавшуюся вначале возможность обезвреживания аммиака в стенке предаелуднов путем превращения его в мочевиь/. Оказалось, что детсксикацня псасшзавдегося аммиака в стенке рубца осуществляется такие, кпк и во всех других кепеченочных тканях, т.е. путем превращения его в амцЦний азот глутамина. Кроме того, в слизистої! рубца часть поступающего аі.їлаака используется для синтеза гдутаыновой кислоты путем восстановительного аминировакия а-кзтоглутаровой кислоти ( і.сі..л'еп , Явоненко, 1^68,

І^бУ)* в стенке преджелудкоя, очевидно, происходят и другие синтетические процессы с использованием аммиака и имеет место его связывание с образованием амлцных групп белков (Кусень, Купин, 1^61), В результате этих превращений о кровь» воротной вены в печень поступает лишь относительно небольшая часть (менее троги) того количества ашиака, которое всасывается из предав- , лудков,

Следует подчеркнуть, что биосинтез глутамина путем овязы-ваякя дополнительного моля аммиака в стенке рубца модно рассматривать не только как процесс детоксикации, но и как депонирование части корыовогй азота с последующим использованием его в разнообразных метаболических реакциях. Это обстоятельство дает возможность организму жвачных животных более рационально использовать протеин корма и таким путем избегать обесценивание той части азота, которая всасывается в виде аммиака из рубца.

Такай образом, дегоксикация ашиака, всасывавшегося из полости рубца, у явачных животных осуществляется и два, пространственно' разделенных этаса: в стенке рубца большая часть аммиака превращается в глуташй» а в печени определенная часть амидного азота и оставшаяся аммиак превращается в мочевину.

виводи

Изложенные в настоящей работе результаты экспериментальных исследований позволяют сделать следующие выводы;

1. Реутилизация-азота, посредством его внутренней циркуляции, у жвачных животных является естественным физиологическим процессом, сущность которого заключается в транспорте мочевины из крови в рубец и в дальнейшей утилизации азота эндогенной мочевины микробиальной флорой содержимого рубца.

2. Установлено, что поступление мочевины кз крови в рубец не зависит от уровня аммиака в рубцовсй жидкости, Пе обнаружена также причинная связь между поступлением мочевины из крочи в рубец и потребностью микробиальной флоры рубца в азоте,

3. Высокая уреазная активность .содержимого рубца обусловливает отсутствие мочевины в рубцовсй жидкости» Это является причиной наличия постоянного концентрационного градиента для мочевины между кровью и рубцовсй жидкостью, величина которого определяется концентрацией мочевины в циркулирующей крови.

4. Транспорт мочевины из крови п рубец, являясь $изико-хими-чеоким процессом, определяется в основном, величиной и направлением концентрационного градиента мочевины. Процессу транспорта мочевины через стенку рубца, как мембранного образования, не присущи какие-либо отличительные особенности; он подчиняется законам транспорта неэлектролитов,' характерным для всех биологических мембран.

5. Стенка рубца обладает двусторонней проницаемостью для ыочевшт. С изменением направления концентрационного градиента для мочевины происходит и изменение направленности ее транспорта в системе кровь-рубцовая жидкость.

Внутренняя циркуляция азота мочевины и использование его рубцовбй микрофлорой являются двумя независимыми друг от друга процессами. Возможность использовать поступающую из крови мочевину определяется не потребностью организма в азоте, а наличием в рубце соответствующих метаболических условий, обеспечивающих трансформацию бактериями рубца азота мочевины в азот аминокислот. Метаболическую значимость внутренняя циркуляция азота приобретает только тогда, когда она сопряжена о реутилизацией азота мочевины, т.е. о использованием его на биосинтез бактериального

белка. У жрачных этот процесс является весьма ватшим источником постоянного пополнения фондч незаменимых аминокислот, используемых в разнообразных реакциях тканевого синтеза.

7. Стенка руОца играет существенную роль в переработке аммиака, всасывающегося из полости этого органа. При.перфузии рубца цельной гепаршшзировзнноЗ кровью, в течете у0 минут его стенкой использовано в среднем 7,40# введенной метки и15. Источником энергии для этих синтетических процессов служит утилизированная глюкоза.

8. В слизистой рубца обнаружена глутаминсинтетг-эная активность, Ее активность в ткпшх слизи стен! рубца составив? Х0(? от общей активности этого энзима в мозге.

У. Обнаруженный нами в рубцовом содержимом анидный азот имеет"растительное происхождение. В обычних условиях глутамия содержимого рубца очень интенсивно расщепляется амвдаэами микроорганизмов и не может япляться продуктом всасывания. Увели-чеЕше содержания глутамина в оттекавдей от рубца крови обусловлено его синтезом в слизистой рубца г.очо.

10. Б тканях рубца, как к в других непеченочных тканях, де-токсикация амглиака происходит путем образования глуташша, а не путем синтеза мочевины. С образованием глутамина обезвреживается не менее 3/4 - 4/5 всасывающегося из рубца количества аммиака.

11. Жвачные обладают двухступенчатой барьерной системой детоксикации шлмиака. Детоксикация осуществляется в два, пространственно разделенных этапа: в стенке рубца происходит превращение аммиака в глутамин, а в печени амидный азот глутамина превращается в мочевину. Детоксикационная функция этой системы долина оцениваться не только по содержанию в крови ашиана ж мочевины, но также По содержанию амвдного азота глутамина.

12. Синтез глутамина в стенке рубца является не только процессом обезвреживания аммиака, но и процесоом резервирования азота в легкоыетаболизируемой форме. Эта функция стенки рубца противодействует обесцениванию азота корма и обеспечивает максимальную эффективность его использования.

13. Предложен метод фракционирования компонентов небелкового азотй1 на колонке.с полиотирольным сульфокатиояитом КУ-2. Метод ма«ет быть применен при масс-спектрометрическом определении внедрения метка к15 в компонентах небелкового азота крови*

ИАТЕРИАЛЦ ДИССЕРТАЦИИ ОПУБЛИКОВАНЫ В СЛЗДУЩИХ РАБОТАХ:

1. О роли стсмки рубца л обмене азота. Материалы УІ Всесоюзной конференции по ^гиолошчсскійл я биохышческш основам повышения продуктивности сельскохозяйственные к:івотних,Борозск, 1368, 218.

2. Вивчення дещах сторін внутрішнього кругообігу 03оту у жуйних тварин. Сб. "Фізіол.біохям. с.г. тварин", Кнів, І~£В, вып.4, 176.

3. Роль стенки рубца в детохсикашк аммггака. Тезисл докладов I Республиканской научно-техннческоД коп-^ереициа молодых учених и специалистов сельского хозяйства но актуальным вопросам жгцштно-водства, Харьков, 1^63, 2У.

4. Транспорт мочевины'сэ кровл в рубец. Физиология пищеварения, Мотерзали докладов Республиканской конференции, Одесса, 1^69, 75.

5. Некоторые особенности внутреннего круговорота азота у жвачных. Второй Есесошніїїі биохимический съезд. Тезисы секционных сообщений, 23 секция, Тегкент, Ї^У, 59.

6. Барьерная функция рубцовой стенки и"печена в отношении всасыващегося из рубца аыглиака при разных уровнях и источниках азота в рационе* XI съезд Всесоюзного физиологического общества им. И.П.Павлова, г.П, Тезисы научных сообщений, Ленинград,ІУ70, 453.

7. О механизме обезвредившая всасиваадагося из рубца аммиака. Материалы УІЇ Всесоюзной копференгдл но физиологическим и биохимическим основам повышения продуктивности с-х.животншс, посвященной 100-летию со дяя рсвдешя Б.И-Лешка, Боровск, 1370, 62.

8; О внутреннем круговороте азота у жврчных животно. Доклады ВАСХНИЛ, 19?1( 6, 29. '

9. Некоторые особенности внутреннего круговорота азота у жвачных. Сб. "Физиол.-бнохим.основы повышения продуктивности с-х. животных", и., "Колос", ІУ7І, 30.

10, Вивчення функції ниркового та рубцевого ланок внутрішнього кругообігу азоту у жуйних. Сб, "Фівіология і" б'іохімі я о.г. тварин*. Киів, 1971, вып.16( 42,

II* 0 метаболизме азота в перфорируемом рубце. Сельскохозяйственная биология, ІУ7І, 6, 78. "

12, The ammonia detoxicatiori in the rumen wall.

International Symposium, 1972, Boíla, 9Ь.

Í3. Ввделение методой иояообмевя азота мочеваны, аммиака к амидного азота глутамина из крови для масс-спектроыетричяскоро авадизя. Научно-тегнл ческий бюллетень, Харьков, 1^73, вып. 5-6, 24»

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ ДИССЕРТАЦИЙ ДОЛОЖЕНЫ:

1. На 71 Всесоюзной конференции по физиологическим и Сгь~ хвшчеекзш основам повышения продуктивности с-х.гиэогнш, Боровок, 1^68.

2. На"1 республиканской научно-технической конференции молодых ученых и специалистов сельского хозяйства по актуальный вопросам хинотвоводства, Харьков, 1^63.

3. На республиканской конференции но фаэиологки а патологии пищеварения, Одесса, 1Убу.

4. На,Втором всесоюзном"биохимическом съезце, Ташкент,

5. На научной конференции сотрудников и аспирантов НИИ животноводства Лесостепи и Полесья УССР, Харьков, 1353.

Подписано в почать Іб/ХП-74г. Зак.Я ИЗО. 1И£. чаи эха. і.я

vAnriñHl, Н-іимои» «4, r Льикєиї