Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Морфофункциональные исследования взаимодействия нейрохимических сигналов на нейронах сенсомоторной области коры больших полушарий крыс

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональные исследования взаимодействия нейрохимических сигналов на нейронах сенсомоторной области коры больших полушарий крыс"

шжозскгй 01=ДЗШ ЯШШНА, ордена ОКТЯБРЬСКСД КШОЛЩВ! К 0?Ш1з ВДДОВиГО КРАСНОГО ЗИАШЯ ГОС7ДАГСТБЕПШ Л55БШЖЭТ

cu. и.с.лсцэяособо

етиагачнаш факультет

Es npaoss рутаяшга

лллькд

В, 5£8?Еф Свдерспяч

Ш: 6I2.022.SKÏ5.7e? УОРШМГЩЩШАЛЫШ ЙССЯЕДОВАКЕЙ !ШЖ>ДШЛЕШ

кгшш^ячкяшх гагнтзв на ийрондх сег.о*л>тои1Ся (зшсга ¡tora вольете патдаш imx

03.00.I3 - (¡-»заотагпя ".еяоэя&я я szbotl'js.

Автореферат дяссертацшг на соасюндв гчен^Я степэш кандидата бзаяогетсякг наук

Москва - 1991

Работе выполнена на кафедра фиаиологт высиоС иарввоЗ дая-геяьноста Биологического факультета МРУ ш. Ы.В.Лоашносовь

Няучный руководитель: доктор биологических наук,

профессор

Б.Н.Котвяр

С|яцийльш8 оплоканты: доктор биологических наук,

профессор с. Л. Чопурнов

кандидат биологических наук, &.В.Копытова

Вадуеэе нвучно-иссладовотельское учреждение: Кнститу? бзгологкческой фвэздя АН СССР.

йагдага соетыггс;! " 1991 г. в ...... чзео"

ка еасадашгй специализированного Совате Д.053.05.35 при Москоъскаа госудорстьашюи университете ка. Ы. В.Ломоносове no адреоу» II9899, Иосква, Ленинские Гора, Биологический фЬ^ЛЬТ-Э? «ГУ.

С Д5.ссе5-'таодва ыохто озпако&здться в бкОляогеко Биологического факультете UI7.

Автореферат разослан 'JfJ^" 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета

кандидат биологических наук t>. а. Унарен

Акт j а ль ¡:oc т ь _проО леиу л Одним из наиболее ааимх вопросов, рассматривает! в процессе изучения принципов функционирования центральной нервной системы, является вопрос о связи аэяду функциональными н структуршагл нзиененшши, прсисходяпг-али в различных отделах ЦНС при гаггегративной деятельности. В ряде работ, посвя-эзшшх выяснению характера нейроструктуркых перестроек, вызаввэ-мдх предъявлением повыиеннсй функциональной нагрузки (Маиинэ, 1971; Дьячхова, 1979; Ыоккоа я др.,1530; Зеиасковский к др.,1032; Яо11 et al, 1978; Dacaotid, Levy,1985; Benes, Paekevich, 1395; Нога ot al,1535, п др.), бакя получен? убедительные доказательства структурных изменений, связвшьа с различными {^зяологическсхя воздгйств'зяш кэ нерзпув ткань.

Нзоднокротно высказывалось предлогс-гагла, что гтесоцяатав-ные процесса снязанн с морфологическнл; изменениями е поракой системе; в далькэйие.и это било подтверждено ьюггочкеяашадг*. ггссяад-овашхяг! (Вэкцель, 1580; Пошшпшэ, Русинов, 1976; Артгшта, 1979; Лосева, 1982; Котляр п др.,1984; 1085; Vrenzen, Cardczo, 1981; McGat-e, Horn, 1988, я др.). При атом отшзчались ультрастру-ктурш^е перестройки синоптического аппарата нейронов, что свидетельствует о связи aatsjss изаешшзимся функцйЭ!афс*«9ни<1м синапсов и интегратшэкмии процессага в ЦНС.

В процессах обучегаш, памяти и r-фЛсктя; психотропных средств значительное место отводаггея иодуляцаи синоптических ф71?"гт<*. При этой ванное значение имеет регуляторная роль ипйрсгггдпаторяв. Известно, что эффекты, визиваеиые иейрсмедаатсром, -¿огут контроятф-оваться я модулироваться другим медиатором вной бнохн^гчесхоЛ природа (Reefer et al.,1979; Krnjevlc et al.,1981: Doipln, 1532; Labour et al.,1983; Metherate ei al., 1968, и Др.). В результэте изменяется активность рецелторного аппарата нейронов. Целостность нейрс1яшг:есксй организация яааяти позволяет влиять на зффектпв-

кость ее функционирования путец соответстиукцих воздействий ш отдельше ее звенья или их совокупность. В атой связи большой интерес представляет изучение взаиь.сдайстшш различных иадиаторнш систол в ситуациях, допускагаях воалюашость взаюшого влияния ш в определена;! участках центральной нервней система.

При изучения клеточного вналого временной связи, создаваемого на нгйроньх сенсоиоторной коры крыс путей ионофоретической аппликации радиаторов (Котляр в др., 198% 1985) Сшш проделонстрирсзе-кц наыеиаиия ультраструктуры сипаптического аппарата посла сочэ-Тиннш предъяалегшй нвйроггэдиаторов. Рвнае (¡¡.отлир, Оачарс-нко, 1580) было показано, что пра сочетаниях аппликациях гдутаиата з ацэтолхооша происходят перестройки импульсной активности пзйрош сенсоаоториой кори. Подою возможности выяснения действия сочата-еццх цейреждиатороз на санвптический аппарат нейронов, данш$ подход исгат служить ыодальв ассоциативных процессов в центральной нарвной систеыа.

состояло в изучении вэекиодвйстшя классических ивйроиадааторов па основагсш иаыек8Ш1й корфологичесхаз показателей синоптического хотаакта.

В работе были поставлены следукцло задача;

1. Исследовать улътраструктурзше шэдшеияя сипаптнчзского аппарата нейронов сенсомоторноЯ области коры иоэги крыси прп сочатанш: аппликациях трах нейро&едиаторов разной биохимической природа виэавБиздг различимо фцзкологичаскае реакции нервных клеток (Ъ-глутицат (Гл), вцетилхолан (АХ) п иорадреналии (НА)).

2. Выяснить, опродэляот ла тип реакция нейрона на атшидфуемы« шзднвторч прп сочеганшх предъявлениях струкгурыуэ ысдЕфшвцш синапса.

3. По ялрактару и вчрвкешоетн ультраструктуршж БЕигвкехшЙ сигал пгческого штарата после многократных ассоциировании предьввлс-

- а -

шй нейрохимических сигнал з: I)глутсиат-ацзтмл£оляи; 2)глутавдт-иорадрзкаяпи; 3) зцетклхолгт- глутшат, установить особенности промэнких отпожениД в дсЛстгкя ассоциируемых нейршедиаторов.

кость. Впервые детально исслздованы ультрзструкгурныо персстрой?г. постсинаптическс1-о участка, происходящие и иейропаг сенсшготорнсЯ ксры илзксяитвюада посла кжфоммтофсрет'.гч'рсюи предыхвдшшй изл1-вторсв резной хгагической прчроди в раагычгкз. сочэта;"1ях а с различным временем отстзвлеппл кэяду кжя.

Псхаз&но, что при сочптпншл прэдъязлегаьтх кэдиятороп (в давнем случсо пар Гл-АХ, Гл-ИЛ» АХ-Гд) сущзстанет прзнетс" ыгтор-вэл отстеаленая (спапф'.'гесгаЛ для кгкадой пари), пр1? котором кср-фоооптсесгаз яз::зкепЕЛ сипгатгсчоского аппарате (тол^шм псютсикз-пютоспого уплотзеншг, джг?! постсжчаптичйскохо риюттлкпп,. пл>>~

сеченнп ПСУ) окйэываш'са наиболее шрааеншлга.

Подробно раекготрэла гашсвдость степекз иорфо-оглчссла дз~ кепзниЯ парамзтрез аксодендрмтл сшигпссв пеЗропои 1П-7 с во з о сеасомоторпеа области кора иозга Kjr.sc от врекаю: отс^яа-оюгя ычя-ду асссцикруе^лаи енгнэлгьа, показано достевзрюо етличаа раскрэ-дслзняЯ пврвмЕтроп псстспназса а »«яггрслэ (¡аюго!ф8тнс1 пропускаете форетирущего тока в разшх пепрашглпях и иосочетаите предъявления кедияторов) п опите (сочеташша сшлкшихвп Гя-А2, Гя-11А, Ал-Гл с различны 1 врекенеы отстевло»шл).

Еигалукгыа вреишпшо раыют, в продолах г.оторих происходи? взеииодаЯствтга предъявляемых К2г>рсг&пгчвспих сигналов, виразаэда-еся в специфических структурных сдвигах на скпэппгюском уровне позволяет моделировать процесс ультра структурной иодкфжацтш для дзлькейши нсоледовэшй «эхтгизмов мшалтэтсскоЭ пластичности _иа молекулярном уровне. -Имеющиеся дагааиз расширяют представление о взаимодействии различных медиаторе« сястец; учет этих данных,

принимая во вшшадае важность синаптических функций для процессов обучения и памяти, ысает бить полезен при изучении вреиегших закономерностей ассоциативных процессов.

^проЗёШ^-ЕйЗЗлУ • Иатернвлы диссертации бит долсаены на ко-ыйяренцши молодых ученых Ьнолошческого факультета 15ГУ, Москва, 198а, 1909; IX Всесоюзной конферош&ш по нейрокмбернетшш, Ростов-на-Доку , 1989; XXVIII Совецашш по проблемам шсеей нервной деятельности, Ленинград, 1909[ Всесоюзном сишошуиэ "1*орфофущс-цконвльные исследования нейронов н синапсов", Пувщно, 1989.

П^бликацш^ По материалам диссертации опубликовано 6 пачат-12и работ.

Стрхктхра_реботыл Диссертация состоит нз введения, обзора литературы, сшсаная иатодов исследования, результатов собственных исследования, их обсуждения и выводов. Содер2Е5ше диссартацаа излохеио на 122 страницах к включает 21 расунок в 3 таблицы. Спя-ссн лнтергтур: содержат 261 ишшеноаанае, на них 92 отачестввюшл и 169 зарубежных авторов.

ивтодакл.

Опыты проаодшш на сайках белых крыс ыессоА 180-250 г, обездвиженных (1-тубокуррршюи (20 иг/кг) и пероведвщаа кп искусственное дыхвими с активные вдохш н пассивным выдохш (8 циклов за 10 с). Под »¿ееткоЗ новокашювой (23 раствор) аыестеааей производили скальпирование киаотиого и трепанацию черепа: илсверливала отверста-а диаметре:! 2,5 ш и облаем сонсеыоторной коры (Светухн-яа, 1962). Твериог® »гозгевуа оболоч^ надрезали, посла чего в облаявший участок кора мозга погружали кончик слоеного стеклянного шкроолоктрода. Отверста залывали бистро застывевдей разогретой сыесью иеднцквекого воска с вазелиновое иаслои, которая предотар-вщала лодсихвиие ткани во вроьш акспарииента. Через 15-30 шнут (период времени, необходимый для возобновления нормального функ-

— В —

цноаирования исследуемого участка коры) начинал! эксперимент.

В экспериментах применялись слоянке стеклянные гяжроэлэхт-родд. Использовались одноствольные стеглшпшо заготовки с диаг^ет-роа ствола 1,2 ш (1В120Р-6 фермы 5ГР1). Комплекса электродов состояли из нескольких стекляюгых ьикроэ.'эктродов для аппликация т-дивторов (хеиотродов) и метяцих кккроэлектродов ¿ля нкьекции красителя. Хемотроды с копчиком диаметром 4-3 икм, приклеенные к регистрирующему электроду (для проверки качества хекотродоа) заполнялась растворами: Ь-глутзната (Б1сла,1.0 иоль/л,р!'=Т-8), ацетил--холина (81@па, 1.0 моль/л, рН=4), норадренал/ша иоль/л,р!!=4). Регистрирухкесй электрод заполняли Счзиоло-пчэсюп» рпствсрш, метящие электроды - 2%-иг-И рустзсрш красите.?.! "Ниагара голубей". Постоянно выдергиваемое расстояние ыезду хемотродгки и верхним и нижним метящими елекгродвыи (550 ка) позволяло производить аппликацию медиаторов всегда в веригою часть V слои корт и затем тс*но ориентироваться при выделении иикроучастков ткани, зеключенной между метками (Ххудова и др.,1984).

Проведенное исследование вклачало в себя трч группы экспериментов. Первая группа состояла из сени серий: I пропускание тока через ствол, заполненной физиологическим растворсм (в раеных направлениях); 2)несочетанное предъявление Гл а АХ (медиаторы аппли-цировались с разный Бременем отставлешш ч в случайной порядке); 3)сочетанная аппликация глутамата и ацетилхолинз с временем отс-тавлекия 1с; 4)сочатанкая аппликация Гл и АХ с временен отставлэ-ния 2 с; 5) сочеташ!ая аппликация Гл и АХ с временем отставленяч Зс; 6)сочетанная аппликация Гл и АХ с временем отстовлешш 5с; 7)одновременное предъявление Гл и АХ. Вторая группа вклвчала: I)несочетанные предъявления глутамата и норадренвлана; 2)сочетпн-ий аппликации Гл и НА с временем отставлешш 1с, 2с, Зс, 5<;. Третья группа экспериментов состояла из сочетании предъявлений

— Q -

вцзталхакана u глутематч (втсрш предъявлялся глутс^ат) с врана-наил ототамеаня Ос, Зо, 5с, 7с, 9с.

LüOcp указаниях вариантов времени отстявдашш шдреторов, а tasau» сзшах ^здааторов осзюекводся на шя&кагших рака с особешюс-'i'а* радюгшшсси! аайроков оанссезг>'.орноа оСг.;:ста uojsi к дайаш ш-дааторш (Котлср, 0зчирекко,19Э0» Котляр, !£ксиевов,1Э87). На рис. I показана схаив зкдпйгдшентсв.

Кезд&к пера есссцшфуш&ис caqscre вводилась шкровоиофорэто-чч-v- (250 цЛ, 0,5 о) во €0 раз с шпергадаш 2 ьзш, В авядой са-р!3 Biicneptj-ÄU-yojj использовалось во тра кшотшх. По окоичаозз кила uas-ispa »лактрадо? баиофоротичзсхи Еэодалсл в коог красите д; (CjJjiü том ~ 10 istA). Затаа Bjsassrpo^jiua кашпэкс шшяек&п-Ci- кэ иоага. Еавспшш декашгшровакгсь в, оравншруасъ по варжЕзй ьядзляяся участок корм рззгзороа 1,5x1,5 in?, которий фаюж-ровиаон 3 чвоа в S, SSJ-i-ca г^шх-еральдогида на фосфатной буфера (pHt.7,3). ПрсштьЛ ь фо.-фатиаи буфаро кусочек *к£1Ш помоцаяса на Ззшлрэа&льку» бумагу, пракрешюкяую к деравяшюыу Оруску, вшз-еелси 7%-ныу растворза агар-агаре, и uocjbs затверщашя кзготвилзз-вшьгсь срази то^диноЗ I60-I60 шш. Вз ереэа, содзргаЕ,аго оде ¡ят-isi, с учетош расстояния »шззду иатвтаа элзктродаш в лещягродоь сад ыакроспаига шрвэшася участок pesüapcu 150x150 шш. Ткинь ио-агв дс4иксироаа/;ас1, осилен, оОаавсашзадась в гшигэчшшсь в спо;:-С1гдную сыаау (tnon-012) по стЕвдартвсй катодике (Ушш:, IS75). Ультратошше среза тояз^'.ой 60 вд контрастЕровзлись уранклацета-тш и цитратса сшнцв и прссоатрЕзашс!, под влактронкаа микроскопом. Увеличение аагстшоа соатавтло 20000; шрфшэтрячаскка апа-;нз когЕтывоя с^овсдавм, исааяьауя приеи "cjecaoro* контроля, пр ькй об^еа уввлячакйй состев-ж-о 160000. оцашвал-

зсь ширина воэттзишггячгского «плотжэвая, деает постсетшгягзоа»-гч> упЕоткешш, езрши скколтнческсй вдяя.

Дашаа сбрсбатизолхсь аз ивкро-ЭШД "ЭлзктроЕккэ ДЭ-28" и ПП

ЗБУ ЕС 1040. Пра оцаккэ ргспрздзлэнЕй палтгаш пользовалась крггго-2

ршгая % в Кашогороза-Скяргюва (Закс, 1976). Кроне тега, справлялась внатеняя среднего, сродна го таадротнчяого отклонения, ася-игатркя а влецессэ, хврахтергговэвззга каж.т^а ез зтаг распределяясь.

результат.! цссяцовмеч

В зтсЛ cepsn осытсв пзлучегш дг.&зыэ, гарэктзрязуЕГтп рзсзрз-да лагам ссяапсов одной и тоЗ же группы наЗроноэ сешж'оторп&з об-лзста корт мозг? крыс по то-щзнз псотсянзптяческого угкютперхт, шршю сшгсптнчбскэз дали и деата активной .аош ctsKcimwcspro контакта пра разных лос&лъвп вксперглянггвльпцх вошгайотктх. Средкео ппзчошз тсшзпм ПС? сттюои поело кевтрэлыт скспарл-ücirroD (гпогократное пропускаете одвэтряческсго том разного кзп-раняашш н ввсоче-сспчсо юткрокоюфоратичвекоа яодездевде Гя a £J.) составляет Зв,9 гм (IOCS) г 10,6 (104Я) соот^тствоино.-!:Зсгопратшз. одновршежга предьязягтлх Цидгатсрсв среднее »írieiq ПСУ екнапеэв составляз? 45,0 к*« (US')¡ чесдайстпят Гл и ЛХ с отстав/ieitiisu последнего ж 5 с - <5,2 »et (116«), прп стстаз-лешш АХ на 3 с - 49,3 hi (ÏZ3Z), lía I с - СО, i ai? ¿130S). a ups 07стаз.-э:«и AS по 2 с - 51,=? iüj (Í33Z). (Ряс. 2 ).

Иное соотношешэ нвблвдг^ось в ерэдгах витаниях нггриет синоптической щели при тех se видах зкепзркмзптальних вездейп. . ¡йфнна

сивиптеческой щели б^ла нэишшькей npv: дсйствшт тока (18,4 reí (1005)). При сочетанием предъявлении Гл и Ал с врекенеы отста-вления 3 с ширина синапткческой щели составляла 19,1 ш (104%), при отставлпнии АХ па Ь с - 19,3 ты (105Ж), при отставльгаш АХ но I с - 19,6 ни (107%), при одновремег'-оы предьявлешуи медиаторов -

- в —

<f>

Щ ШГШ041* {ft/ft »©и"*»»«"«* 1—1 г *>*•■»«

QCOQ а

оаоооооооооо оооаоооойоонппоойоа

1ГЗ

эк» t

сэ

сЬ

,-L

à

Рае. I Схема экспериментальных воздей-стелЗ. (Диаграммы ответов нейронов на глутамат и ацетялхо-лиа взяты из работ А.А.Мяснякова, П.А. Гусева, Ю.Л.Мартинсон. Те;лнш цветом выделены участки ответов, наблюдавшихся

у более чем 501 нойроноа соогзагствущях групп. Каждый из уровней по оса ординат - 12,552 клеток популяции). Чержй прямоугольник - 0,5а аппликация ацетилхолина, заегряхоЁШШый - 0,5 сек аппликация норадреналяна, светлый прямоугольник - 0,5с аппликация глутамата. На фоне реакции нейронов на гдутачаг ацетилхолин ашшщировался одновременно с глуталатом, а также с 1с, 2с, Зс и 5-секундным оставлением; норадреналин апшш-цвровалоя с 1о, '¿с, Зс и 5-оекунднык отстаэлением. На фоне реакции нейронов на ацетилхолин глутамат апплицпровался одновременно с нш, а также о Зо, 5с, 7с и Эс оставлением.

о

0

1

Ркз. 2. Уровни средних и средних квадратичных отклонений значений толкни ноотсинаптического уплотнения ое-напоов нейронов s зоне действия медиаторов, предъявлявшихся £ рекимах 1-7.

Обозначения см. на рио.3

— а —

20,4 нм (IIIS), при песотатвкиоы подведения Гя к АХ - 20,G ш (113%), я при сочетанием прэдъявлб'зш Гл и АХ с временем отстав-ленпя 2с ¡лирика синалтическоЯ г$олк составляла 20,9 ни (114?). (Ркс.З).

По внрагшшости впиякия на протпнзнность активной вст синапсов зкспершенхплыые воздействия рокпфутвтся следу «тою оОрлгтм: одновременное предъявление Гл и РЛ (335 ик (100%)), сочетвшгс?; введение Гл и АХ с промене!! сгстрлк'экш 5с (342 пи (102%)), г," Яства? тока (346 ei (103%)), несо^отаеттов в?»оденяо иодивторсв (3S6 им (1093)), сочзтаннсв нвадеим Гл и ЛХ с ьр-И'аном отстпвлегая 1с (369 ici (II0S)), сочатг.'"?ое введение Гл и Я с rpsinnsu отстявле ния Зс (370 ш (110%) ), сочетзнноо прзда_-звланио Гл и Ах при отс-тзвлшбш 2с (417 ни (I2ÎS)). (Р:;с- 3 )•

Более детальный анализ рзспродчяаннЯ синапсов по величине кйгдого из указанных параметров позволил догт.петтельио вмяпкть ряд их особенностей при рэзныж ркспертаэнтзльпах воздействиях. На ркс. 4,6 представ,":э!Ш пелетоны распределений спнапсоп нейронов сонсомоториоЯ облгети кора позга по толцшкэ ПСУ, пярдш сииапти-ческой щеля я длино актотной зоны синапса соответственно. Видно, что форча рэспределешш югаапссв по толщин» ПС7 цоноаодэльнз при действии па ткань тока. Версзша рзспредедег21Я соответствует значению тслзцйны ПСУ, рпвноыу 37,5 нм. Пря несочетснннх ;с одновременных предъявлениях Гл и АХ распределения синапсов бикодвлыти. Положения наиболее выразенннх вернто; этих распределений совпадают и соответствуют значениям толщины ПСУ 37,5 к 52,5 sïu. Распределения синапсов по толцине ПСУ после нногогератных совместных сочетании предъявлений Гл и АХ с отствЕленякмм Le, 2 с', 3 с, 5 с имеет но-номодалышй характер. Полояение веряшгы этих распределений со ответствует значения 52,5 ни.

Распределения синапсов по.шрине синаптической щели, получи

— 1С —

ГД-НА

Рис.3 Уровни средних и средних квадратичных отклонений значений тираны синадтической щели (обозначена буквой А) а длины постсинадтическо-го.уплотнения (Б) синапсов нейронов а зоне действия медиаторов, предъявлявшихся в режимах 1-7; светлые прямоугольники - значения контрольных величин (действие тока (I) и- несоче-таняые .предъявления медиаторов (2)), Темные прямоугольники - значения параметров после ассоциированных аппликаций медиаторов. Высота каждого столбца - среднее значение параметра в % от минимального. Цифры между--столбцами - время отставления второго медиатора в паре относительно первого при сочетаниях. Нижние части столбцов, общие для всех, не показаны. Значения величин средних квадратичных отклонений отложени в том же маоштабе. Под каждой парой А и Б указано, какие медиаторы и э какой последовательности ашишцировалясь при сочетанию предъявления!.

Е Йз ах-гл*

иные для для четырех из 7 указанных видов экспериментальных воздействий, ¡шеют мономодальный характер (рис. 6). Моды распределений синапсов нейронов после действия тока, предъявления Гл и АХ в случайном порядке, а также сочеташгоы предъявлении Гл и АХ с 3- я Б-секундныы временем отстввлешм приходятся на значения ииршш скнаптаческой сели, равные 21,3; 23,В; 21,3; 21,3 т соответственно. Бимодальный характер распределения сииапсов по величине данного показателя отмечается после многократных одновременных предъявлений Гл и АХ (положения верпин этого рдспределения соответствуют знйчанияа пирнш скпаптаческсй г,ели, ровный 16е3-10,8 к 23,0 пи), сочетшшых предъявлений Гл я АХ с времени ототпвдешя I с (кода 18,0 и 23,8), 2 с (коды 21,3 я 26,3 кн).

Распределения сшапсов тЩюиоп исследованной области кори по длило активной зовы синапса ююют ионсиодз.гыплЯ характер. После действия тока и сочетвнног© прельявлонкя Гл и АХ с 5-секугудаиы отставлеииш полояетю мода соответсгвовеяо 255 ни. Посла одновременного многократного предъявления Гл и АХ и сочитапного предъявления Гл а АХ о временем отставлэккя Зс положение иощ соответствовало значению 306 №. При нессчетеияом предъявлении кедиато-ров и сочеташшх предъявлениях Гл я АХ с временем отставлснвд 1с и 2с положение иода соответствовала значения 357 т. (Р., ;. 6 ).

Таким образом в этой серки экспериментов заявлены ■ временные интервалы, изменял?»; величину ПСУ при сочетавши дойствпи Гд и АХ. Обнаружено, что при использовании в ходе сочетании аппликаций Гл к АХ вреьеннзг-о интервала, равного 2-й секундам, наблюдается наибольшая модификация псстсинаптических участков.

синапсов при.аппликациях глутаиата и норсдрэвалина При нгзу четм влияния сочетании аппликаций глутямнтв и нор;! лронадиня но толщину ноетеиначтического уплотнения нейронов оря

— —

31 И <1 Ы Мам II )| 4) и и М » II (9 и Н

Рйо.4 Распределения аксодендритннх синапсов нейронов сенсо-..'этпрной области коры мозга крыо по толщине постсинацтическо-го уплотнения. Обозначения те &е, что на ряс. 6

* 5 о 7 0 а . О 1 < 3 * 5 ч 7 5 3 »

Рис.5 Зависимость толщины ПСУ (А),площади сечения ПСУ (Б) и длины ПСУ (В) аксодендритных синапсов для всех трех пар медиаторов от времени оставления второго медиатора в паре относительно первого при сочетаниях. По оси ординат отложены значения средних величин. Сплошная линия-лара Гл-А1,пун-к тир-Гл-НА., штрв хду нктяр-АХ-Гл.

в

' \ ' 'Ч * \ ' V

/

______а-ц . Г.-М

.!«№}>«< ТМ4

1 ; з * г $ 7 а г с

— -га —

солоторлоа коры icpyc были получены следусцие результата: средняя величина толщины ПСУ при сочеташюм кведениа Гл л íiA с враиек&м отставления 1с составляет -15,3 su (1X63), гги отсталшзтш 2с значение этого параметра 52,0 им (I34S), при сочетпином введет« Гл ц НА с временем отстввлегаш 3 с сре;^шя толщина ПСУ составляв? 55,4 ны (I42S), яри отстовленки IIA па Бс - 52,5 mi (1353); изсо-четанное введение ледиаторов - 40,5 им (1043), контрольное действие тока - ЗЙ,9 152 (109%). (Рис. 2 ).

Анализ значения кяршш «шаптичесзюй пели показал, что кеч-больсая величина этого параметра míe от место в случае печатанного предъявления Гл а Н.\ с вр-зменеи отставления Зс (среднее значений ;дфжжи цэли 2-3,2 ш (I42S)); при аппликации Гл и НА о вроиекеи сгставлешш 2 с ерзднев значение сирщзд ¡цели составляет 23,2 ни (I35S), при предъявлении медиаторов с отстааленкем норадрсналяня на 5 с - 21,7 ш (1273), при отставлении Гл и НА на I о - 17,0 щ (IOCS); при нвсочетаннси введения медиаторов среднее значение ;.ц-ршш цели составляет 17,9 км (105%), йри действии тока - 18,4 нм (I09S). (Рис.3 )•

При рассмотрении значения длины активней зоны сннаптическах контактов для пари глутвиат-норадренаяин Сила установлена слздув-цал очередность (в порядке возрастания): контрольное действие тока (среднее значение длина активной вони синапса 346 гал (1005)), сочетагшое введение медиаторов с временем отставления НА 1с (351 на (104%)), насочеташюо coemqcthoq сведение Гл а НА (361 ны (1045)), сочетанноз сведение Гл и НА с отставленной Бо (42S ш (I23S) >, сочетанное введешь с отставлешгаи 2 с (440 нм (1273)) и с отставлениен нородреналида на 3 с (516 ны (14935)). (Рас. 3 ).

На рис. 4 представлены полигоны распределений синапсов нейронов сенссмоторной области косы иозго по толщине ПСУ. Распреде-• .'.•/ля синапсов моншодалыш üp i ;<ce.:i экспериментальных воздейст-

— ча -

ГА-АХ ГЛ-КА АХ-ГА

Рис.6 Распределения аксодендрятных синапсов нейронов в микроучастках сенсомоторной области коры мозга крас по длине поотсинадтического уплотнения (обозначена буквой А) и ширине оипаптической щели (Б) при разных экспериментальных воздействиях. А-2 (маленькие буквы) - нормированные полигоны распределений синапсов при действии толчка тока (А), насочетанных предъявлениях медиаторов (Б), сочеталишс предъявлениях медиаторов с различным временем отстазлания второго медиатора относительно первого: обозначено цифрами для полигонов В-К. По оси абсцисс отложена величина параметра в нанометрах. Под каждой парой А я Б (большие буквы) указано, какие медиаторы я я какой последовательности апплицировались при сочстаяяых предъявлениях-

ваше. При действии тока вершина соответствует гшаченик 70лщшш ПСУ, равному 37,5 ни, во всех остальных случаях (кесочетакная и сочетанная аппликация Гл и НА с разним временем отставления) пад-озашш вершин совпадают и соответствуют значена» 52,5 нм.

Распределения синапсов по слрине схиаптическоЗ 1«<зп ■.•^¡вт мопоыодадьшаа характер посла воздействия тока, несочэтанного предъявления шдцаторов ц сочатагаюй эпплакацш Гл и НА с вро::з::оя отставлешш I с (мода распределений приходятся на значение, равное 21,3 ил). БныодалышЗ характер распределения синапсов по зэ-.тачине данного показателя отаечается в ткани, исследованной поело сочетанного предъявления Гл и НА с временем отставлекня 2 с (знв-Ч01П58 мод 21,3 и 26,3 ну), сочетанноы предъявлении Гл и НА о ото-тавлениеи 3 с (значение код 26,3 и 31,3 на) н сочетаннмл прад-»яв~ ленш! ыздиаторов с отставленной 5с (значение иод 21,3 я 23,3 ни). (Ркс.6)

Распределения синапсов по длине активной зоны, построешшэ для ошзеашшх характеристик меянейроншы контактов в ткани, псод-едозашюй в ходе несочеташмх и сочетании*: предъявлений Гл а НА, а такзе действия тска (контроль) инеют иоиежодальн&й характер о полсяшшеы ыодн, соотватствущш значениям 255 ш (действие токи) 357 ни (сочетанное действие Гл я 11Л с временен отставлешш 1о), 459 нм (сочетмшое действие Гл и НА с вреиене.ч отставлешш 2с, Зс, 5с; несочеташюе действие мадкатороп). (Рпс. 6 ).

Тягот образом, в этой серии экспериментов шявпепн вренен.чно янтпрпялы, изменяете величину ПСУ при сочетшшсы дейстши Гч п НА. Обнаружено, что при использовании в ходе сочетпшшх йпшпкя-г-.й Гл а НА временного нотервала, равного 3-м секундам, наблюдается нанбольотя поотсинвптических участков.

3. Исследование корфологическях параметров аксодепдрятшх синапсов при аппликациях зцегклхолша и глутвмвта.

— 1С —

Исследования структурных иэкенешй! синапсов нейронов сонсо-моторисй коры при сочетании аппликациях ацетилхолкиа к глутаната показали, что среднее значение тояцины постсинаптического уплотнения достигает максимального значения (62,2 ras (131%)) в случае, когда время отставлешш Гл состсшшет 7с { при сочс.'аннои введении AS и Гл с временем отставленкя 9с среднее значение ПСУ имеет величину 60,2 isi (129%) ,при отставлешш Гл на 5с -40,8 на (125%), при аппликациях медиаторов с временем отставления Зс сроднее зяа-чанаа толщина ПСУ составляет 44,1 ни (II3X): при одновременное впадении АХ и Гл есднчипй дшшого параметра 45,0 им (1162). Результаты когггрольных серий: несочетмшое введение медиаторов - 40,5 нм (104%), действие тока - 38,9 rj (I00S) (Рис.2).

Аяализ результатов в отношении ширины синоптической це/ш показал, что наиЗольиая валичияа этого параметра иыеат касто в случае сочегакного предъявления АХ и Гл с враианек отставления Эс (среднее значение шршш ¡цели 23,6 км (I29Z)); при аппликации АХ и Гл с времоздц отставлешш 7 с среднее значение ширины щели составляет 22,6 ну (123%), при предъявлении медиаторов с отставлйни-ем глутаната на Б с - 20,8 ни (1143), при отстевла!ша АХ в Гл на 3 с - 18,3 нм (IOOS)s при одновременном введении АХ и Гл - 20,4 нм (111%); пр;: кесочетаниом введении радиаторов среднее значение ширины щели составляет 20,8 ш-(П4%), при действии тока - 18,4 км (101S). (Рис■ 3 ).

При раосмотрешш значений длины акганой зоны сккзлтичасетх контактов для пары ацетилхолин-глутамат была установлена следущ-ая очередность (в порядке возрастания): сочеташое предъявление АХ и Гл с временем отставления Зс (329 ни (100%)); одновременное предъявление медиаторов (334 нм (102%)); контрольное действие токе (346 нм (10М)); несочетанное введеше медиаторов (36G км (111%)); сочеташюе введение ЛХ и Гл с аренекем отстаплешк 5с

(419 им (127Х)): сочетаю!оа введение АХ и Гл с временем отстввле-кая 9с (446 нм (136%))} сочетанное введение АХ и Гл с временем отставлення 7о (489 нм (149«)). (Рис. 3 ).

На рас. 4 предстввлены полигоны нормированных распределений синапсов нейронов сенсомоторной коры крыс после действия пары 45 - Гл по толщине ПСУ. Распределения синапсов поело многократен* сесместш.: сочетании! предъявлений АХ и Гл с отсташшниями Зс, 7о а 9с хшеот ионсмодалышй характер, положение вершин втих. распределений соответствует значению 52,5 па. При несочетакшх, одков-реиеншх а сочетагашх с 3-х секундный отставанием предъявлена« АХ а Гл рзспряделешш бимодальны, положения верит для одновреьп-кшх II иесочетанта аппликаций совпадазот и соответствуют значениям тоддаш ПСУ 37,5 и 52,5 им; для сочетают с 3-х секундным от-отвзлчлыем аппликаций - 37,5 -42,5 и 47,5 ш. Пра действии тока Оораа распределения монокодальна с вертгиноЯ, соответствующая толщина ПСУ 37,5 нм.

Распределения синапсов по Барине сияаптическсй щели тлеют иономодаяыай характер при действии тока, несочетаншх предъявлениях мадиотороа н сочеташшх аппликациях АХ и Гл о временем оставления Зс и Эс (моды распределений приходятся иа значения 21,3 ем; 23,8 нм; 10,8-21,3 нм; 26,3 иы соответственно). йшодальшЭ характер распределения синапсов по величине донного показателя отнечается пра сочетанных предъявлениях АХ и Гл с временем отставания 5с (значение иод 21,3 я 26,3 иы), с временем отставят«? 7с (значение ыод 21,3 я 26,3 нм), при одновременных предъявлениях •гадя агорой (значение мод 16,3-18,0 я 23,8 км). (Рио. 6 ).

На рас. 6 представлена полигоны распределений синапсов по длина активной зогм. Все они (за исюшчением сочетанных апплнкя-цэй с &-секуадЕЮ1 отставанием, рвепредеденне которых Лимодвльно) пжя? ггеткагодальньй характер. После действия тока знпчешш модн

— ig —

соотватотвоБИйо 255 V2S, посла Еасочзтанках предъязлзтШ иадвстор-оя - 357 EL3, послв одновременно Ешшщарувиих - 303 ш, сочетсп-1ИХ о 3-х секундные отставленной - 225 ktí, сочэтапша с 7- в Э-п оекувдшгл отставлзкне^ Гл - 357 ш.

Уакна образен в этой cepas акспереагонтоз кгдалэш врэкэшша штараат» иэиешп^щ величину ПСУ пра сочотанйш дейсткш и Гл. OCuspyseao, что при использовгшщ в ходе сочетспниг .ытхака-¡угй АХ н Гл временного интервала, равного 7-к секундам пабдвдаз?-ся навболшая иодефтацвя постсшшптаческкх участков.

cpaeiígeíg рвенрвделаниа скиапс :а по м.щвко постсняептеязс-

?

кого уплотпэкш о критериев Кол'огорозс Сгг*р::оаа к % по -

казало, что распределения, ио;дчошЕ1е после айсоцалркзашых спал-сксцгЯ издявторов, ¿остиварко отличаются от коктрэльгах рееврвдэ-¿eisffli сравиаша распределишь по двл:ю ПСУ копгзалб, ч-;а достоверно по обошл критериям от контроле', отлаЧЕЕтея рсспт?одол2!са:, пояучекнта поело сочьташых апшгглцг,й иодиатороа с вре^акегз отс~ vcajieiam 2с для пары Гл~Дл9 За для г,ара Гл-НЛ к 7с дай пары АХ-Гл. Достоверные отличия распределений czaaaooa по ащ яке еккеятн-чвекой г4з;а поало сочетвшых ьпплшеапдй taдва?opon получена только для парк глутаызт-иорадренадйи.

На рко. 5 й,впродещ>нс?ркроваЕи грг.;.:ст: згшспдоста ддзш ье-тшзкоЯ som к толфоы постютьптичеСкого уплоткзнкя для всех трах пар шдааторов от вреиовн отстбвлеккя второго иедлаторз в парс относительно первого прл сочетаниях. Отаачеш уровни сктивиого контроля к действия Tosa.

Эавношость площади сечения ПСУ от врекека отстсвлегшз иади-

аторов в рассматриваемых парах представлена па рис. 5, б

ОБСУЙЗЕНИБ.

Результаты проведенных исследований свидетельствуют о той, что существует определенная связь иенду ультрэструктурнммм изме-

— -!П —

папягага сингштаческого аппарата нейронов коры бгльзых пояуаарзЗ и-многократна сочетании (ассоциированный) прадьявланиеи гждяатср-оэ, сЕалзцзруегаи на эта нейроны, находпдая отргзенке в увслита-Hxsa раааэров постсшаптического уплотненмя.

При пзучаняи взаимодействия цвцду рвэлпчныш ыадяатсраша сзстеимет бкла продейонстрироваиа возможность контроля а кодуля-Ц22 с£фектет, рлзвапишс одош иадиаторса, со стороны другого ь:з-терэ гксЛ баоззшичесхсЗ щнродц (Елаев, Подоскновакова, 1073 j Дпг-лр, ISQ2; По ."с пс пая, Рйбвневач, IBB2; Reader ot al., 1579} r.onhtoyanto ot al.,1?80; Krnjevlc at al.,ieai; Dolpln, 19025 Hor-tua/i ei ., i537s Ьдя-оиг ot al.,15385 Marshall, Teal, ISSQj Ma-thsrata ot al., 1S30a,bj ИотЫвоп at al. ,1969), При sтон надлпзз-*зсь пнгзпзезя ©угшглонвлькой ал-гивноста рзцептерного аппарата гзЗровов.

Ежяшанае функциональной иагруаяя сопровождается ультрастру-ктуртася изменениями синапсов. Имеются &шогочнсдешше данрив об улътргртрухтурннх изменениях синаптнческого аппарата г.ентралькмх нейронов при различных Сжнологически воздействиях. В навей работе прод.е:юпотряров№о увеличение толг^нш постсинаптического уп-лотвекня при сочэтвнках глпфопоиофоретичесхих аплли:слцнлх медиа-тороз. Это хсрого согласуется с сппсангажи в литературе утолзени-zasa данного сшшптического кшпенеята в отитах с пошаонноЯ Оугас-гсгсшш.Еоа вагрузкоЗ (Скребищшй, Ку^ряшсв, IS79; Рпбтштша, Арт»~ зззнэ, 1580; Исгтов а др.,1530; Брагяна, I986J Котляр п др.,1Г04, ISSSj Wall ot al., 1978; Srobatch, 1970).

Уваяггэняэ д*аш ssrussoe зага «ншлеэ» дсотоверно отлтэт»-г^аеся с? иовтролвй в точках ссгпшальшх врохашгих отстазланиА, шхлутазвое пк.а дга пзр глутгага-г-етртзлхояхп, гдггЕИЭТ-Есрадраяа-жжя я шдатздхплан-гдттгмат, yssro» zx&rs подтзэрздвнзо в яитопа-гу-ре (етта от ю.яринпфсвани1 я грнтеяыета стгмуляцяз цизлат (Пат-

-ша-

рова, 1989), введению амфетамина (Uranova et al.,1989), фенашиа (Маншш, 1971), диатиллизерлшовой кислоты (Попова, 1974), длительной высокочастотной активации ыотонейронов спинного вогга (Зшес-ковский и др.,1982)).

Продемонстрированное в нашей работе увеличение площади сечения постсинаптического уплотнения - результат роста толщивд пост-синаптического уплотнения и длины активной зона синапса. В работах по длительной алектростиыуляцин афферентных аксонов показано, что площадь, занимаемая постсипаптическим уплотненней, возрастает (Deemond, Levy, 1985; Нот et al.,1S85).

В ряде работ при изучении ассоциативных процессов отмечались ультраструк-урные перестройки синаптического сппарата (Векцель, 1900; Павлыпша, Русиноа, I97S; Артахипо, 1979} Лосева, 1982} Vrensen, Cardoso,1981; HcCabe, Horn, 1988), что указывает на ватную роль синаптической модификации в информационных процессах ЦНС. В связи с тем, что изменение размеров ПСУ наблюдается как при неассоциативных, так и при ассоцизткв!ых процессах, возникает вопроо о спецгтфичности ультраструктурных изменений, полученных в nai3u экспериментах. В пользу специфичности свидетельствует тот факт, что функциональное изменение синаптическкх входов в активном контроле (при многократном предъявлении неассоциироаакнш сигналов) не приводит к морфологическим перестройкам синаптического аппарата нейронов.

Использование в одной из пар в качестве ассоциируемого сигнала кедивтора, вызывакцзго тормознув реакцию нейронов, показало, что направленность и вырвиекность структурных изменений постсина-г.тического уплотнения не зависит от типа реакции нейронов ка второй ассоциируемый сигнал.

Результаты анализа разных показателей структурной пластичности постсинаптического аппарата свидетельствуют о том, что решаю-

— Н1 —

цен фактором в развитии структурных перестроек в корковых нейронах становится временной интервал между началом действия раздра-вителэй. Ворфологическне перестройки синапсов зависят от времени отставлення кекду ассоциируемыми сигналами (недаатораш;) - ииш-нения аксодендритных синапсов шевт различи/!» степень шраиенности; для каздой пары ассоциируемых не^рсиеднатороь существует врэ-машюя ыгтервал отставления, при котором зти изиенения проявляются в наибольшей степени. Были иыявлагщ условия, при которых ягб~. людавтся ультраструктурныз перестрой!«!: I)второй ассоциируемый нейрохкшчесхкО сигнал подается на фоне реакции нервной клетки из первый сигнал; 2)оптимально« время отставле1Шя при сочетаниях (когда норфологаческао перестройки в синапсе наиболее выракеш) определяется иоаентоы действия второго ассоциируемого медиатора п пераод снижения реахции на первый медиатор, что также свидетельствует в пользу специфичности обнаруженных изменений, поскольку одним пз допущений спець-фчческнх нор$ологических изменений в сп-яапсах является условие совпадешш рвзрядов пре- и постсинаптнче-ского компонентой (НеЬЬ, 1949). Наблвдаеиое увеличение Постсинеп-тачаского уплотнения прн ассоциировании сигналов является следст-к1«:! взаимодействия разных >:олекуллр:шх регуляторкых механизмов нервной клетка, акттаирутйкглхся при связывают? медиаторов с рецеа-торша», •■¡охтпкноп, которою ответственны за изменения в ношшх каналах сянапсов, виброс медиаторов, изменения чувствательностн ре-мзпторов и структуры синапсов. В настоящее врешг имеется достаточно осиовшгай для утверждения, что ылтегративниэ функции нейронов сОеепечитаются при участии вторгашх посредников - систем цнклп-чйстах нукг.еотадов, системы кальцкй-калыюдудин а соединений фос-фсиаозытолъЕого цакла.

Врез/.ахш отставлеш'я иеяду еоча-гениаш ряодраамтелйми отводился вззшзя роль при азуг'екнн зссоцкатавшх процессов. Дня болкш-

- ас -

кства классических и шструтлентслыгыг рефлексов наиболее эффективно оперекение условного сигнала кв 200-400 ис. При измекешга ея-тервала могду сочетвемшгн раздражителями выработка условного рефлекса затрудняется или на происходят совсем. Нзйрсбволопгческая основа указанной фундаызгхтальной закономерности до ностоищэго времени не выяснона н представляет собой актуальную задачу исследования. В этой связи представляет интерес работа Д.Г.Фролова (Рго1оу, 1981) .Не основании имекйщхся литературные данных и результатов собственных исследований автор высказывает предположение о существоватш "критического условия подкрепления", которое заключается в той, что условная связь кээду двуш фуиагшнадышкЕ центраш формируется и приобретает устойчивость пра условия, что снзванная скткв^ссть нейронов первого (условного) центра пстагае-тся в течение (или сразу после) иозбувдсикя второго (подкрепляйте го) центра, т.е. сптенальноГ» для формирования условной связи является подача подкрешкицаго стимула в игагнт затухания рескцкк ка условный стшг/л.

НзоСходамэ отметить, что этот павод был сделан при азшшэо дашшх, получешзлх на поаэденчэском уроше; рзб05а ^огет сяугять ноаеденчесюш аналогов наших исследований оптимального врэкзвп отставления ызлду ассоциируемыми ситкалаик, в которых показано, что нйибольЕая степень ультраструктурных изааютй стпттичвского Ёппвратв корковых нейронов имеет место в случае, когда второй сочетаемый медиатор подается в момент окончания реакция на первоп вещество. Необходимо дальнейшее тщательное изучанае рассмотренных предположений.

Получе1Шые нами данные отражают не только влияние функциональных нагрузок на синаптический аппарат нейронов; они свидетельствуют о той, что медиаторы в качестве ассоциируемых сигналов могут быть использованы при анализе ассоциативных процессов в керв-

ной система.

ВЫВОДЫ.

1. Установиея*, что сочетанное действие различных медиаторов (глутвыат-ацетилхолкн, глутЕыат-норадренал!Ш, ацеталхолни-глутяыат) ачзиапат функционально обрягкмна ¡¡ор^ологи-часкла изненекия скнаптичоского аппарата - толягиш постсинаптичэ-ского уплотнения, ддиш постсинштичзского уплотнения, ллсяшдн сечешя псс?г..д;ап?ичесг.ого уплотнения.

2. Покзеяио различие в степени изменения ультрсструвтура сииапти-ческого аппарата при ассоциированном предъявлении Гл-АХ, Г-я-НА, Д2-Гл. Пгправлотшость структурных иашшенкй постсинаптичзского уплотнения кэ зависит от типа реакции нейронов на второй лссс-!^-ируошй сигнал.

3. Изменение параметров постсинсптачоского уплотнения пра сочат;:-хшых предьяалеплях издавторов свидетельствует о том, что реаагязп.) £шсторон в развитии и выраженности улътраструктурних перестроек в синапсах корковых нейронов является временной интервал ыезду сочетавшими иедиатораш. Показано, что в зависимости от времени этот я ала гля г:адиаторов при сочетанных предъявлениях ультраструктур-пыа изменения аксоденцритных синапсов имеют различную степень вы-рзжгшюста, и для каздой пари неЕромедиаторов существует временной иетервал отста&авния, при котором эти изменения проявляется в ппибольззай степени.

а) Дкя псссвдированцых глутамата и ацетлхолнна Ътй«альное вреуя отстаалошш (когда ыорХалогачесгше переотро&а в синапсе наиболее гаркгшм) составляет 2 о.

б) Для .'¡ссоцшгр^веншх глутамата и норадреналпна оптимальное г.ре-на отстззлвнаа составляет 3 с.

— —

в) Для ассоциированных ацотклхолина и глутаматв оптимальное время отставленкя составляет 7 с.

4. Установлено, что наибольпую выразЕЭШюсть ультраструктурные изменения синапсов иыеот в том случае, когда второй ассоциируешь кодиатор апплицируется в период снихення реакции не перваЗ нейрохимический сигнал.

Б. Продемонстрированная ультраструктурная кодификация постспнап-тического звена является отражением изменения синаптической передачи и служит показателем функциональных перестроек в нервной сети при взаимодействии нейрохимических сигналов.

1. Лялька В.Ф.,Гусев П.Д. Исследование взаимодействия ассоциативных раздраяений о коре больших полушарий. //Труды XIX конференции иолодых ученых биологического ф-та МГУ. 1538. Ч. 3. Депок. в ВИНИТИ, 1? 67I2-B88. С. 4Э-53.

2. Лялька B.C. Морфофизиологическиа исследовании клеточного аналога ассоциативного обучения на нейронах коры больших полуюарий. //Труды XX конференции молодых ученых биологического факультета МГУ. 1989. Депон. в ЕШГГН, М Б42-В90. С. 7-И.

3. Котляр Б.И.,Хлудова Г.Г..Мясников A.A.,Гусев П.А.,Лялька В.®. Временная специфичность в денйствни раздражителей при формировании ассоциативных ультраструктурных перестроек в нейронах корн мозга. // Журнал высш.кервн.дея?. 1989. Х.ЗЭ. Bun. 4. С.704-713.

4. Котляр Б.И.,Хлудова Г.Г..Мясников A.A.,Гусев П.А.,Лялька В.Ф. Изменения ультраструктуры кортикальных синапсов при воздействия вссоциировашаис нейрохимических раздракителей. // Нейрсфлзй-ОЛОГИЯ. 1989. Т.21. N 2. С. 270-272.

5. Котляр Б.И.,Хлудова Г.Г.,1у5ясюжов A.A.,Гусев II.А.,Лялька В.О. Временные отношения в действ1» раздражителей при формировании ассоциативных перестроек в нейронах корковых микросистем. //Тезисы IX Всесоюзной конференции по нейроккбернетика. Ростов-на-Дону. 1989. С.2Э.

6. Лялька В.в.,Гусев П.А. Ультраструктурная пластичность синапсов корковых койронов при действии ассоциируемых раздражителей. // Тезиса XXVIII Совещания по проблемам ЕысшеЯ нервной деятельности. Ленинград. 1989. С. 39.