Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение поведенческих эффектов введения нейротензина в хвостатое ядро и черную субстанцию мозга крыс в норме и с повреждением серотонинергических нейронов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Изучение поведенческих эффектов введения нейротензина в хвостатое ядро и черную субстанцию мозга крыс в норме и с повреждением серотонинергических нейронов"

На правах рукописи

Ольшанский Артем Сергеевич

ИЗУЧЕНИЕ ПОВЕДЕНЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ ВВЕДЕНИЯ НЕЙРОТЕНЗИНА В ХВОСТАТОЕ ЯДРО И ЧЕРНУЮ СУБСТАНЦИЮ МОЗГА КРЫС В НОРМЕ И С ПОВРЕЖДЕНИЕМ СЕРОТОНИНЕРГИЧЕСКИХ НЕЙРОНОВ

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2004

Работа выполнена в лаборатории морфофизиологии условного рефлекса ГУ НИИ мозга РАМН г. Москва

Научный руководитель: доктор медицинских наук,

заведующий лабораторией морфофизиологии условного рефлекса ГУ НИИ мозга РАМН Н.П. Шугалев

Официальные оппоненты: заслуженный деятель науки,

доктор медицинских наук, профессор Островская Р.У.

доктор биологических наук, профессор Тушмалова Н.А.

Ведущая организация: ГУ Научно исследовательский институт ВНДиНФРАН

Защита состоится « »_2004 г. в_часов на заседании

диссертационного совета Д501.001.93 в МГУ им. М.В. Ломоносова по адресу: 119992, Москва, Воробьёвы горы, МГУ им. М.В. Ломоносова, биологический факультет.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке биологического факультета МГУ.

Автореферат разослан " " 2004г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук

Б.А. Умарова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования Нейротензин (НТ) - пептид, который широко распространён в ЦНС и обладает множеством регуляторных функций (Levant В., Nemeroff СВ. 1988; Bissete G., Nemeroff C.B. 1995).

Высокий интерес исследователей к нейротензину связан с тем, что он обладает нейролептическими (Nemeroff СВ. 1980) и анальгезирующими свойствами (Raeliwas at al. 1994), а также может быть вовлечён в опосредование эффектов антипсихотических препаратов (Sharma R.P et al

Изучение фармакологических свойств нейротензина показало, что его эффекты во многом определяются местом введения в мозг (Levant В., Nemeroff СВ. 1988, 1992, Jolicoeur F.B.,1992; Santucci V, 1997). Значительная часть исследований свойств нейротензина связана с введением его в такие образования мезокортикальной и мезолимбической дофаминергической систем как прилежащее ядро и вентральная область покрышки, потому что поведенческие эффекты введения нейротензина в эти структуры более выражены, чем при введении в образования стрионигральной системы. В то же время отмечается, что на уровне нигростриатной дофаминергической системы действие нейротензина может быть более важным при фармакологических воздействиях в условиях патологических ситуаций.

В доступной нам литературе мы не встретили данных относительно нормализующего влияния нейротензина на поведение животных с повреждением серотонинергических структур мозга. В то же время имеются пока немногочисленные данные о важной роли этих структур в механизмах действия этого нейропептида.

Известно, что на уровне неостриатума и черной субстанции имеются окончания серотонинергических (СТ) нейронов, тела которых расположены в дорзалыюм- ядре шва среднего мозга, -'Эти нейпоиы оказывают

модулирующее влияние на дофаминергически тной

1997).

системы. Также известно, что нейротензин оказывает возбуждающий эффект на серотонинергические нейроны дорзального ядра шва (Jolas, Aghajanian; 1997), и таким образом, можно предположить, что нейротензин принимает участие в регуляции не только в дофаминергической, но и в серотонинергической нейротрансмиссии.

В связи с этим представляет интерес выяснить поведенческие эффекты введения нейротензина в образования нигростриатной системы при избирательном повреждении нейронов дорзального ядра шва (ДЯШ).

Цели и задачи исследования

Целью работы являлось проведение сравнительного анализа модулирующих эффектов введения нейротензина в хвостатое ядро и чёрную субстанцию мозга в коррекции поведения животных в норме и в условиях дефицита функции серотонинергических нейронов. Для решения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить особенности влияния микроинъекций нейротензина в чёрную субстанцию и хвостатое ядро на реализацию и угашение условного двигательного рефлекса у крыс в норме;

2. Выяснить особенности последействия микроинъекций нейротензина в хвостатое ядро и чёрную субстанцию при формировании поведенческих реакций в ответ на позитивные и негативные условные сигналы;

3. Выяснить возможности коррекции с помощью нейротензина нарушений поведения крыс, возникающих после повреждения серотонинергических нейронов дорзального ядра шва.

Научная новизна работы

Впервые было показано нормализующее действие микройнъекций нейротензина в хвостатое ядро и чёрную субстанцию мозга крыс на их поведение при повреждении серотонинергических структур дорзального ядра шва. Выявлено положительное последействие на угашение условных двигательных реакций после однократной стимуляции нейротензином структур хвостатого-ядра и черной субстанции.

Теоретическое значение работы

Полученные данные дополняют сведения о регуляторном действии нейротензина в условиях функциональной нагрузки и экспериментальной патологии. Установлено, что регуляторное действие нейротензина на уровне образований нигростриатной системы мозга в значительной степени связано с нормализацией мотивационно-эмоционального состояния животных.

Практическое значение работы

Полученные данные могут являться патогенетической моделью для изучения механизмов действия пептидов и новых лекарственных средств, влияющих на поведение и нейромедиаторный обмен в условиях дисфункции серотонинергической системы мозга.

Положения, выносимые на защиту

1. В норме, на уровне хвостатого ядра нейротензин облегчает развитие угасательного торможения условных двигательных реакций и оказывает положительное последействие на угашение неподкрепляемых условных реакций.

2. В норме на уровне черной субстанции нейротензин не оказывает существенного влияния на развитие угасательного торможения.

3. На поведение животных с повреждением серотонинергических структур дорзального ядра шва нейротензин оказывает нормализующее влияние как на уровне хвостатого ядра, так и на уровне черной субстанции.

Апробация диссертации

Основные результаты были доложены на конференции молодых ученых ИВНД и НФ РАН (Москва 2001, 2002), на XVIII Съезде физиологического общества ми. ИЛ. Павлова (Казань, 2001); симпозиуме «Нигростриатная система и поведение в норме и патологии» (Санкт-Петербург 2002); международных Асратяновских чтениях «Фундаментальные и клинические основы интегративной деятельности мозга» ИВНД и НФ РАН (Москва 2003); конференции «Пластичность и структурно-функциональная взаимосвязь

корковых и подкорковых образований мозга» ГУ НИИ мозга РАМН, (Москва 2003); ученом совете ГУ НИИ мозга РАМН (2003).

Объём и структура диссертации

Работа изложена на 95 страницах и содержит 20 иллюстраций. Она состоит из введения, обзора литературы, описания материалов, методов исследования, полученных результатов и их обсуждения, выводов. Список литературы содержит 156 источника.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа была выполнена на 76 беспородных белых крысах - самцах, массой 300-3 50г. одного возраста. Перед началом исследования у крыс вырабатывали условный двигательный рефлекс с питьевым подкреплением: в ответ на включение лампочки крыса для получения воды в течение 15с должна была нажать передними лапами на полку с поилкой. Крысы считались обученными, если число условных реакций было не ниже 80%. По окончании обучения проводили стереотаксическую операцию вживления направляющих канюль. Под нембуталовым наркозом (40мг/кг в/б) крысам в стереотаксической установке проводилось вживление направляющих канюль по следующим координатам от брегмы, средней линии и от поверхности мозга соответственно: хвостатое ядро:-1,5; 2,5; 4,5 билатерально; черная субстанция: 4,2; 1,9; 7,0 билатерально; дорзальное ядро шва: 7,0; 1,8; 5,5 под углом 15°унилатерально. Размеры канюль, вводимых в хвостатые ядра, черную субстанцию, дорзальное ядро шва: L=12 мм и - 16мм соответственно, диаметр всех канюль: D=0,7 мм. Канюли фиксировались к черепу с помощью винтов и зубного акрила. Через неделю после операции у крыс восстанавливали условный двигательный рефлекс до предоперационного уровня и проводили исследование поведенческих эффектов микроинъекций нейротензина при его введении в образования нигростриатной системы. По завершении

экспериментов проводили морфологический контроль, расположения направляющих канюль в мозге.

Структура исследования. Исследование включало 3 серии экспериментов. Перед, каждым из трёх исследований за 10 минут до эксперимента производили микроинъекцию нейротензина в хвостатое ядро или чёрную субстанцию(билатерально), контрольным крысам вводился в том же объёме 0,9% р-р №С1. Все микроинъекции проводились металлической иглой, выступающей на 1 мм. из кончика направляющей канюли- и соединённой переходной трубкой с микрошприцем. Препараты вводились вручную со скоростью 1мкл/мин. В хвостатое ядро и черную субстанцию билатерально вводилось по 1 мкл раствора пептида (концентрация НТ-2,5мкг/мкл), затем удаляли инъекционную иглу и вставляли металлический мандрен.

В первой серии экспериментов проводилось исследование влияния микроинъекций нейротензина-в хвостатое ядро на реализацию и угасание условного двигательного рефлекса с питьевым подкреплением, выявления эффекта последействия после однократного введения нейротензина в хвостатое ядро и исследование поведенческих эффектов нейротензина в тесте «открытое поле». Число животных, использованных в этой серии - 24: 12 контрольных и 12 опытных.

Во второй серии • экспериментов проводилось исследование влияния микроинъекций нейротензина в хвостатое ядро и /или черную субстанцию на реализацию двигательных реакций в ответ на позитивные и негативные условные сигналы, а также особенности последействия введения нейротензина. Позитивными сигналами были подкрепляемые, а негативными- неподкрепляемые сигналы, при которых за секунду до включения лампочки включался зуммер (20 Гц) Число животных, использованных в этой серии - 24: 12 контрольных и 12 опытных.

В третьей серии экспериментов проводилось изучение возможности коррекции поведения введением нейротензина в черную субстанцию и

стриатум у крыс с повреждением серотонинергических нейронов дорзального ядра шва (ДЯШ). Повреждение серотонинергических нейронов осуществлялось введением избирательного токсина 5,7-дигидрокситриптамина в ДЯШ. Для этого за неделю до эксперимента крысам в ДЯШ вводился токсин в дозе 7,0 мкг в 0.7 мкл 0,05% раствора аскорбиновой кислоты. Эти животные считались «оперированными». Крысы, получившие микроинъекцию в ДЯШ растворителя считались «ложнооперированными». Число животных, использованных в этой серии -28: (7-контрольных и 7-опытных ложнооперированных 7- контрольных и 7-опытных оперированных крыс). Опытным крысам перед экспериментами вводили нейротензин.

Статистическую обработку полученных результатов производили с использованием программы «EXCEL». Применялся параметрический

t-критерий Стьюдента, а также ряд непараметрических критериев (Вилкоксона-Манна-Уитни и точечный метод Фишера).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Исследования показали, что билатеральные микроинъекции нейротензина в хвостатое ядро мозга облегчали начальный этап угасательного торможения условного рефлекса (рис.1). Процесс угашения условного двигательного рефлекса выражался в сокращении по сравнению с контролем числа условных и межсигнальных двигательных реакций (рис.2), а также в более интенсивном нарастании величины латентного периода условных двигательных реакций по мере последовательного предъявления неподкрепляемых условных сигналов. Микроинъекции нейротензина в хвостатое ядро не оказывали заметного влияния на реализацию условного двигательного рефлекса (рис. 1,1). Этот эффект нейротензина, очевидно, в большей степени связан с ослаблением мотивационного возбуждения животного, чем с угнетением двигательного компонента рефлекса. Подтверждением является тот факт, что двигательная активность крыс в «открытом поле» на фоне действия нейротензина даже усиливалась по сравнению с контролем: 86+12,1 и

48,2+9,4 пересеченных квадратов, соответственно (р>0,05). Возможно, у экспериментальных крыс также ослаблялось чувство страха в условиях незнакомой обстановки.

Отсутствие заметного влияния нейротензина на реализацию положительного рефлекса, по-видимому, обусловлено значительной устойчивостью упроченных условных рефлексов к нейрофармакологическим и некоторым другим воздействиям (Кругликов 1981).

Рис.1. Процент условных реакций при реализации (1) и угашении условного двигательного рефлекса с питьевым подкреплением(2 и 3). 1 и 2- через 10 мин после введения НТ, 3 -через 7 дней после введения НТ. Каждый первый столбик-контроль, каждый второй-после введения НТ *- различия с контролем достоверны р<0,05

при

Рис. 2. Межсигнальные двигательные реакции при угашении условного рефлекса. А-первая процедура угашения после введения НТ;

Б - последующее угашение без введения НТ. Каждый первый столбик-число межсигнальных двигательных реакций с -5 предъявлений неподкрепляемого условного сигнала, каждый второй-последующие 6-10 предъявления. *-различия с контролем достоверны при р<0,05

Процесс дифференцирования подкрепляемых и неподкрепляемых условных сигналов был трудным для животных и вызывал у них сильное эмоциональное возбуждение. Условные двигательные реакции на оба сигнала осуществлялись регулярно, с коротким латентным периодом и сопровождались большим количеством межсигнальных реакций. Микроинъекции нейротензина в хвостатое ядро не оказывали заметного влияния на реализацию условных реакций в ответ на позитивных условных сигналах, но увеличивали латентные периоды двигательных реакций на негативные сигналы и уменьшали число межсигнальных реакций (рис.3).

Таким образом, обнаруженные поведенческие эффекты нейротензина при его введении в хвостатое ядро мозга в значительной степени объясняются его нормализующим влиянием на мотивационно-эмоциональное состояние животного. В соответствии с данными литературы такое влияние может быть связано с нейролептическими свойствами нейротензина, а именно, с его угнетающим действием на функцию дофаминергических структур путем повышения эффективности пресинаптического торможения дофаминергических нейронов (Fuxe et al., 1992; Levante, Nemeroff, 1992). Кроме того, анализ литературных данных позволяет полагать, что обнаруженное в наших экспериментах ослабление чувства страха под влиянием нейротензина может отражать его взаимодействие не только с дофамин-, но также с серотонинергическими структурами мозга (Dilts et al., 1996; Hanson et al., 1997).

Имеются данные о важной роли серотонина в механизмах устойчивости животных к стрессу. На это, в частности, указывает тот факт, что предъявление крысам редких неизбегаемых громких, вызывающих стресс звуков вызывает увеличение обмена серотонина (Dilts et al., 1996). Введение нейротензина блокировало эту реакцию на стресс. То есть, эндогенный нейротензин может принимать участие в регуляции активности серотонинергических нейронов дорзального ядра шва мозга.

Обнаружено также, что аппликация нейротензина усиливала клеточную активность 60% серотонинергических нейронов дорзального ядра шва (Jolas and Aghajanian, 1997). Известно, что эти нейроны посылают свои аксоны к стриатуму и черной субстанции, где они оказывают модулирующее влияние на дофаминергические структуры. Таким образом, можно предположить, что серотонинергические структуры наряду с дофаминергическими структурами играют важную роль в механизмах действия нейротензина.

черная субстанция

Рис. 3. Латентные периоды условных двигательных реакций крыс на позитивные (А) и негативные (Б) сигналы после микроинъекции в хвостатое ядро в черную субстанцию. 1 - после микроинъекции физиологического раствора; 2 - после микроинъекции нейротензина; 3 - в последующий день после микроинъекции физиологического раствора; 4 - в последующий день после микроинъекции нейротензина. Передний ряд - латентные периоды двигательных реакций за первые 5 предъявлений; задний ряд - латентные периоды двигательных реакций за вторые 5 предъявлений сигнала. По вертикали -величина латентного периода (с). * - достоверность различий относительно контрольной группы (р<0,05).

Анализ результатов исследования показал, что повреждение серотонинергических нейронов посредством введения 5,7-ДОТ в дорзальное ядро шва интенсифицировало поведение крыс. Это выражалось в увеличении числа межсигнальных двигательных реакций при реализации и угашении условного рефлекса (рис 4), а также в усилении двигательной

активности в открытом поле. Кроме того, у животных усиливались эмоциональные реакции. Хорошо известно, что повреждение серотонинергических нейронов с помощью избирательных нейротоксинов сопровождается активацией поведения и усилением эмоционального возбуждения животных. Этот эффект связывают с реципрокной активацией катехоламинергических нейронов (Громова 1980; Ferre et al., 1994).

Билатеральные микроинъекции нейротензина в хвостатое ядро в значительной степени ослабляли эффект 5,7-ДОТ: у животных с повреждением серотонинергических нейронов наблюдалось облегчение процесса угашения условного рефлекса, что сопровождалось ослаблением общей двигательной активности и возникновением состояния ожидания подкрепления.

Обнаруженное облегчающее влияние нейротензина при его введении в хвостатое ядро на угашение условного рефлекса, как указывалось, в значительной степени связано с его нейролептическими свойствами. Вместе с тем важное значение в этом процессе может иметь также участие нейротензина в модулировании ГАМК передачи в стриатуме (Chapmann, See 1994; Ferraro et al. 1997). Из данных литературы известно, что нейротензин, введенный в стриатум, ретроградно транспортируется в дофаминергические нейроны черной субстанции (Landuron 1995). Поглощение нейротензина осуществляется и на уровне тел дофаминергических клеток через терминали и дендритное дерево. Поглощенный нейротензин транспортируется центропетально к соме клетки. Возможно, что указанные механизмы также вовлекаются в развитие эффектов нейротензина при его введении в стриатум и черную субстанцию мозга оперированных животных.

'6 10 кии 1 S яин

хвостатое ядро

черная субстанция

Рис. 4 Межсигнальные реакции при угашении условного рефлекса у крыс после микроинъекций НТ в хвостатые ядра и черную субстанцию.

По вертикали - число межсигнальных реакций после микроиньекций в ХЯ и в ЧС. Первый ряд - число межсигнальных реакций за первые пять, второй рад - за вторые пять предъявлений неподкрепляемых условных раздражителей

1 - после введения №0 в хвостатое ядро (черную субстанцию) и в ДЯШ (ложнооперированные контрольные),

2 - после введения N1 в хвостатое ядро и №0 в ДЯШ (ложнооперированные опытные), 3 - после введения №0 в хвостатое ядро (черную субстанцию) и токсина в ДЯШ (оперированные контрольные);

4 - после введения НТ в хвостатое ядро (черную субстанцию) и токсина в ДЯШ (оперированные опытные)

+ - различия с контрольными и * - различия с ложнооперированными животными достоверны при р<0,05.

В отличие от эффекта введения нейротензина в хвостатое ядро его введение в черную субстанцию оказывало различное влияние на поведение контрольных и оперированных крыс. У контрольных животных введение нейротензина не оказывало заметного влияния ни на угашение, ни на реализацию условного рефлекса. Вместе с тем при тестировании крыс в открытом поле наблюдалось увеличение двигательной активности, а также числа стоек. Такой эффект нейротензина, очевидно, связан с его активирующим действием на дофаминергические нейроны (Stove, Nemeroff

1991) и ослаблением пресинаптического эффекта D2 дофаминовых нейронов (Werkman et al. 2000). Имеются данные о том, что дофаминергические нейроны среднего мозга отвечают на нейротензин эффектами, сходными с эффектами антагонистов D2 дофаминовых рецепторов' таких как галоперидол, а именно, увеличением импульсации и высвобождения дофамина из терминалей дофаминергических проекций (Shi, Bunney 1991). Вызванное дофамином' угнетение дофаминергических нейронов через активацию ауторецепторов также ослаблялось аппликацией нейротензина.

Билатеральные микроинъекции нейротензина в черную субстанцию оперированных крыс, также как микроинъекции в хвостатое ядро, облегчали угашение условных и межсигнальных двигательных реакций. Но поведение этих крыс отличалось: если после введения нейротензина в хвостатое ядро животные неподвижно сидели у поилки в ожидании подкрепления, то после введения нейротензина в черную субстанцию крысы продолжали активно двигаться по камере, игнорируя полку с поилкой. При тестировании условного рефлекса такого эффекта не наблюдалось. Вместе с тем усиленная двигательная активность оперированных крыс в «открытом поле» снижалась до уровня, наблюдаемого у контрольных крыс. То есть, после введения нейротензина в черную субстанцию у крыс наблюдалась коррекция изменений поведения, вызванных введением нейротоксина 5,7-ДОТ в дорзальное ядро шва. Это может быть в значительной мере обусловлено восстановлением серотонинергического влияния на дофаминергические нейроны.

Большое значение для регуляции функции дофаминовых нейронов имеют ауторецепторы, которые могут располагаться на различных областях дофаминовых клеток. Стимуляция- дофаминовых ауторецепторов в соматодендритной области замедляет скорость разрядов дофаминергических нейронов, а их стимуляция в области нервных терминалей приводит к угнетению синтеза и высвобождения дофамина. В общем, все дофаминовые ауторецепторы могут быть классифицированы как D2 дофаминовые

рецепторы. Чувствительность Б2 ауторецепторов к агонистам и антагонистам дофамина более высокая, чем постсинаптических рецепторов. Б2 ауторецепторы первыми реагируют повышением чувствительности при различного рода повреждениях дофаминергических структур мозга.

Ауторецепторы также отличаются от постсинаптических Б2 рецепторов в аспекте их взаимодействия с Б1 рецепторами. Установлено, что Б, и Б2 рецепторы действуют синергично во многих поведенческих и электрофизиологических моделях. Стимуляция Б1 рецепторов играет, по-видимому, облегчающую или разрешающую роль: то есть, задействование Б] рецепторов необходимо для полного проявления функциональных эффектов стимуляции постсинаптических Б2 дофаминовых рецепторов.

Общий суммарный эффект воздействия на дофаминовую активность зависит от его пре- и постсинаптических эффектов (компонентов). Блокада постсинаптических дофаминовых рецепторов представляется как первичный эффект введения нейролептиков, а именно, как ослабление дофаминергической передачи. Однако для нигростриатной клетки этот эффект сопровождается компенсаторным механизмом обратной связи. При этом блокада пресинаптических ауторецепторов нейролептиком приводит к увеличению синтеза и высвобождения дофамина из терминалей. Увеличение синаптического дофамина может действовать конкурентно, прерывая блокаду дофаминовых рецепторов. В дополнение к этим локальным механизмам обратной связи могут быть задействованы пути длинной нейрональной петли обратной связи. Все это предполагает, что нейролептики могут оказывать множество эффектов на дофаминовые нейроны, и что результирующая этих эффектов будет зависеть от относительной значимости пре- и постсинаптических рецепторов в регуляции активности разных групп дофаминовых нейронов.

Проведенное исследование показало, что поведенческие эффекты нейротензина в значительной степени объясняются его нормализующим влиянием на мотивационно- эмоциональное состояние оперированных

животных. Такое влияние может быть связано с восстановлением баланса взаимодействия дофамин и серотонинергической систем мозга.

Механизмы действия нейротензина в зависимости от точки приложения могут быть разными: на уровне хвостатого ядра это действие, очевидно, больше связано с повышением эффективности механизма пресинаптического торможения дофаминергических нейронов, а на уровне черной субстанции с модулирующим влиянием на сохранившиеся серотоникергические окончания.

Было обнаружено, что вызванное нейротензином облегчение торможения двигательных реакций на неподкрепляемые условные стимулы сохраняется в последующих экспериментах уже без процедуры микроинъекций. Кроме того, введение нейротензина в хвостатое ядро нормализовало условнорефлекторое поведение животных, изначально имевших трудности с реализацией условных двигательных реакций (рис.5).

Рис. 5. Процент условных реакций на позитивные (светлые столбики) и негативные (серые столбики) сигналы после микроинъекций нейротензина в хвостатые ядра у крыс с затруднением выполнения условного рефлекса из-за страха, возникшего в экспериментальной установке.

1 - за сутки до введения НТ; 2 - после микроинъекций НТ; 3 - на следующий день после микроинъекции; 4 - на второй день после микроинъекции. По вертикали -количество реакций ( % ) * - достоверность различий относительно контрольной группы (р<0,05).

Нейротензин назван пептидом подкрепления (Glemicher at al., 1984; Rompre at al., 1997), о чем свидетельствует его влияние на предпочтение животными определённого места, а также степень самостимуляции мозга. Показано также (Rompre, Boye, 1993; Rompre, Perron, 2000), что после отмены повторных внутрижелудочковых инъекций нейротензина появлялась поведенческая сенситизация к стимулирующему действию фенамина, то есть, повторная стимуляция нейротензиновых рецепторов- вызывала долгодлящиеся изменения ответов на действие психостимулятора. Сопоставление полученных в работе фактических результатов и данных литературы позволяет предположить, что положительное последействие нейротензина на угашение двигательных реакций на негативные (дифференцировочные) сигналы может быть связано с формированием у животных обстановочного условного эмоционального состояния, способствующего более эффективному угашению неподкрепляемых реакций и оптимизации условнорефлекторной деятельности.

ВЫВОДЫ

1 Микроинъекции нейротензина в хвостатые ядра мозга не оказывают заметного влияния на реализацию рефлекса, но облегчают угашение условного рефлекса с питьевым подкреплением.

2 На уровне хвостатых ядер нейротензин оказывает положительное последействие на процесс угасательного торможения рефлекса в последующих экспериментах после отмены пептида.

3 Локальное введение токсина 5,7-дигидрокситриптамина в дорзальное ядро шва сопровождается усилением двигательной активности в «открытом поле», а также растормаживанием межсигнальных реакций при реализации и угашении условного двигательного рефлекса с питьевым подкреплением.

4 Микроинъекции нейротензина в хвостатые ядра и чёрную субстанцию мозга оперированных крыс ослабляют растормаживающий эффект нейротоксина при угашении, но не при. реализации условного двигательного рефлекса. У ложнооперированных крыс введение нейротензина в хвостатые ядра облегчает угашение рефлекса, тогда как введение нейротензина в чёрную субстанцию не имеет заметных последствий.

5 В обстановке «открытого поля» микроинъекции нейротензина в чёрную субстанцию оперированных крыс ослабляли их двигательную активность до уровня контрольных животных. Микроинъекции нейротензина в хвостатые ядра не изменяли горизонтальную, но усиливали вертикальную двигательную активность оперированных крыс.

6 Эффекты нейротензина на поведение крыс с дефицитом функции серотонинергических нейронов связаны с нормализацией мотивационно-эмоционального состояния животных. На уровне хвостатых ядер действие нейротензина объясняется в большей степени повышением эффективности механизма пресинаптического торможения дофаминергических нейронов, а на уровне чёрной субстанции - модулирующим влиянием на сохранившиеся серотонинергические окончания.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Влияние микроинъекций нейротензина в хвостатые ядра мозга крыс на реализацию и угашение условного двигательного рефлекса. // ЖВНД 2001, т. 51, №4, с.473-476. (Соавт. Шугалев Н.П., Хартман Г.)

2. Влияние нейротензина на поведение крыс с повреждением серотонинергических нейронов. // ЖВНД 2002, т.52, №6, с.750-755. (Соавт. Шугалев Н.П., Хартман Г.)

3. Особенности влияния нейротензина на двигательные реакции крыс в ответ на позитивные и негативные условные сигналы. // Российский физиологический журнал. 2002, т88. №10, с 1324-1329. (Соавт. Шугалев Н.11, Ямщикова Н.Г., Ставровская А.В.)

4. Влияние нейротензина на угашение условного двигательного рефлекса. // В сб. Научной конференции молодых ученых ИВНД и НФ РАН. Москва. Октябрь 2001. С. 10.

5. Значение нейротензина для повышения адаптивных возможностей крыс с повреждением серотонинергических нейронов. // В сб. Всероссийской конференции «Пластичность и структурно-функциональная взаимосвязь коры и подкорковых образований мозга». Москва. Октябрь 2003.С. 112. (Соавт. Шугалев Н.П., Ямщикова Н.Г., Ставровская А.В.)

STUDYING OF BEHAVIOURAL EFFECTS OF NEUROTENSIN INJECTIONS INTO NUCLEUS CAUDATUS AND SUBSTANTIA NIGRA OF THE RATS' BRAIN IN NORM AND WITH LISIONS OF SEROTONINERGIC

NEURONS.

Olshanskyi A.S.

The main research task was carrying out of the comparative analysis of modulating effects of neurotensin injections into nucleus caudatus and substantia nigra in correction of animals behavior in norm and in deficit function of serotoninergic neurons conditions.Research has shown, that neurotensin microinjections into nucleus caudatus of rat brain do not influence on realization of a reflex perceptibly but facilitate extinction of a motor conditioned reflex.

Also it has been shown, that at a nucleus caudatus1 level neurotensin has positive aftereffect on extinction.

Experiments have shown, that local introduction of toxin 5,7-dihydroxitriptamin into the nucleus raphe dorsalis is provided by amplification of motor activity in the "open field", and also by increased intersignal reactions during realization and extinction of a conditioned motor reflex. Neurotensin microinjections into nucleus caudatus and into substantia nigra of operated rats brain weakened effect of neurotoxin at extinction, but not at realization of a motor conditional reflex. Introduction of neurotensin into nucleus caudatus of pseudooperated rats facilitated the extinction of a reflex, whereas introduction of neurctensin into substantia nigra had no perceptible consequences.

In the "open field" microinjections of neurotensin into substantia nigra of operated rats weakened their motor activity up to a level of control animals. Microinjections ofneurotensin into nucleus caudatus did not change horizontal, but increased vertical motor activity of the operated rats.

The conclusion is made, that effects of neurotensin on behavior of rats with deficit function of serotoninergic neurons are connected to the normalization of a motivational-emotional condition of animals. At a level of nucleus caudatus the action of neurotensin in the greater degree is caused by the increasing of efficiency of the presinaptic inhibition mechanism of dophaminergic neurons, and at a level of substantia nigra it is connected to modulating influence on kept serotoninergic endings.

Подписано в печать 1 03.2004 г. Формат 60x90,1/16. Объем 1,25 п.л. Тираж 100 экз. Заказ № 49

Отпечатано в ООО "Фирма Блок" 107140, г. Москва, ул. Русаковская, д.1. т. 264-30-73 www.blokO 1 centre. naro d. ru Изготовление брошюр, авторефератов, переплет диссертаций.

500 9

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Ольшанский, Артем Сергеевич

Список сокращений.

Оглавление.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Морфологическая организация стриатума.

1.2. Функциональное значение хвостатого ядра.

1.3. Нейрохимическая организация хвостатого ядра.

1.4. Дофамин.

1.5. Нейротензин.

1.5.1. Локализация НТ в нигростриатной и лимбической системах.

1.5.2. Функциональное взаимодействие между ДА и НТ системами

1.5.3. Нейрохимические и электрофизиологические эффекты центрально введённого НТ.

1.5.4.Физиологические и фармакологические свойства НТ.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Объём и структура исследований.

2.2. Выработка условного двигательного рефлекса с питьевым подкреплением.

2.3. Операции вживления направляющих канюль.

2.4. Исследование влияния микроинъекций НТ.

2.5. Морфологический контроль.

2.6. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты исследования.

3.1. Влияние микроинъекций НТ в хвостатые ядра и чёрную субстанцию на реализацию и угашение УДР с питьевым подкреплением.

3.3 Влияние НТ на двигательную активность крыс в ответ на позитивные и негативные условные сигналы.

3.2. Влияние НТ на двигательную активность крыс с повреждением серотонинергических нейронов.

Глава 4. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение поведенческих эффектов введения нейротензина в хвостатое ядро и черную субстанцию мозга крыс в норме и с повреждением серотонинергических нейронов"

Актуальность исследования

Существует большое количество регуляторных пептидов, оказывающих значительное влияние на поведение животных, как в норме, так и в условиях экспериментальной патологии. Одним из таких пептидов является нейротензин (НТ), который широко распространён в ЦНС и обладает множеством регуляторных функций(Сагга\уау R.E., Leeman S.E. 1973; Levant В., Nemeroff С.В. 1988; Bissete G., Nemeroff С.В. 1995).

Высокий интерес исследователей к нейротензину связан с тем, что этот пептид обладает нейролептическими (Nemeroff С.В. 1980) и анальгезирующими свойствами (Raeliwas at al. 1994), а также может быть вовлечён в опосредование эффектов антипсихотических препаратов (Sharma R.P et al 1997). Большинство используемых антипсихотических препаратов непосредственно действует на высвобождение дофамина (ДА) и ДА-ергическую передачу. Длительное применение антипсихотических препаратов сопровождается развитием экстрапирамидных нарушений. В связи с этим остро стоит проблема в создании эффективных антипсихотических препаратов с минимальными побочными эффектами и исследование свойств нейротензина может помочь в создании таких препаратов.

Изучение фармакологических свойств нейротензина показало, что его эффекты во многом определяются местом введения в мозг (Levant В., Nemeroff С.В. 1988,1992, Jolicoeur F.B.,1992; Santucci V, 1997). Значительная часть исследований свойств нейротензина связана с введением его в образования мезокортикальной и мезолимбической ДА систем. По мнению ряда авторов (Binder, Kindked, Owens, Nemeroff, 2001), исходя из анатомического сравнения нейротензиновой и дофаминергическоЙ систем, нейротензин может играть более важную роль в физиологической регуляции мезокортиколимбической, чем нигростриатной системы. Поведенческие эффекты введения нейротензина в структуры мезокортико- и мезолимбической систем более выражены, чем при введении нейротензина в образования стрионигральной системы. В тоже время отмечается, что в нигростриатной дофаминергической системе действие нейротензина может быть более важной при фармакологических воздействиях в условиях патологических ситуаций.

В связи с этим представляет интерес выяснить поведенческие эффекты введения нейротензина в образования нигростриатной системы после избирательного повреждения серотонинергических нейронов дорзального ядра шва.

В доступной нам литературе мы не встретили данных относительно нормализующего влияния нейротензина на поведение животных с повреждением серотонинергических структур мозга. В то же время имеются пока немногочисленные данные о важной роли этих структур в механизмах действия этого нейропептида.

Известно, что на уровне неостриатума и черной субстанции имеются окончания серотонинергических (СТ) нейронов, тела которых расположены в дорзальном ядре шва среднего мозга. Эти нейроны оказывают модулирующее влияние на дофаминергические структуры нигростриатной системы. Также известно, что нейротензин оказывает возбуждающий эффект на серотонинергические нейроны дорзального ядра шва (Jolas, Aghajanian; 1997), и таким образом, можно предположить, что нейротензин принимает участие в регуляции не только в дофаминергической, но и в серотонинергической нейротрансмиссии.

В связи с этим представляет интерес выяснить поведенческие эффекты введения нейротензина в образования нигростриатной системы при избирательном повреждении нейронов дорзального ядра шва (ДЯШ).

Цели и задачи исследования

Целью работы являлось проведение сравнительного анализа модулирующих эффектов введения нейротензина в хвостатое ядро и чёрную субстанцию мозга в коррекции поведения животных в норме и в условиях дефицита функции серотонинергических нейронов. Для решения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить особенности влияния микроинъекций нейротензина в чёрную субстанцию и хвостатое ядро на реализацию и угашение условного двигательного рефлекса у крыс в норме;

2. Выяснить особенности последействия микроинъекций нейротензина в хвостатое ядро и чёрную субстанцию при формировании поведенческих реакций в ответ на позитивные и негативные условные сигналы;

3. Выяснить возможности коррекции с помощью нейротензина нарушений поведения крыс, возникающих после повреждения серотонинергических нейронов дорзального ядра шва.

Научная новизна работы

Впервые было показано нормализующее действие микроинъекций нейротензина в хвостатое ядро и чёрную субстанцию мозга крыс на их поведение при повреждении серотонинергических структур дорзального ядра шва. Выявлено положительное последействие после однократной стимуляции нейротензином структур хвостатого ядра и чёрной субстанции на угашение условных двигательных реакций.

Теоретическое значение работы

Полученные данные дополняют сведения о регуляторном действии нейротензина в условиях функциональной нагрузки и экспериментальной патологии. Установлено, что регуляторное действие нейротензина на уровне образований нигростриатной системы мозга в значительной степени связано с нормализацией мотивационно-эмоционального состояния животных. Практическое значение работы

Полученные данные могут являться патогенетической моделью для изучения механизмов действия пептидов и новых лекарственных средств на поведение и нейромедиаторный обмен в условиях дисфункции серотонинергической систем мозга.

Положения, выносимые на защиту 1. В норме, на уровне хвостатого ядра нейротензин облегчает развитие угасательного торможения условных двигательных реакций, и оказывает положительное последействие на угашение неподкрепляемых условных реакций. 2. В норме на уровне черной субстанции нейротензин не оказывает существенного влияния на развитие угасательного торможения. 3. На поведение животных с повреждением серотонинергических структур дорзального ядра шва нейротензин оказывает нормализующее влияние как на уровне хвостатого ядра, так и на уровне черной субстанции.

Апробация диссертации

Основные результаты были доложены на конференции молодых ученых ИВНД и НФ РАН (Москва 2001, 2002), на XVIII Съезде физиологического общества ми. И.П. Павлова (Казань, 2001); симпозиуме «Нигростриатная система и поведение в норме и патологии» (Санкт-Петербург 2002); международных Асратяновских чтениях «Фундаментальные и клинические основы интегративной деятельности мозга» ИВНД и НФ РАН (Москва 2003); конференции «Пластичность и структурно-функциональная взаимосвязь корковых и подкорковых образований мозга» ГУ НИИ мозга РАМН, (Москва 2003); ученом совете ГУ НИИ мозга РАМН (2003).

Объём и структура диссертации

Работа изложена на 95 страницах и содержит 20 иллюстраций. Она состоит из введения, обзора литературы, описания материалов, методов исследования, полученных результатов и их обсуждения, выводов. Список литературы содержит 156 источника.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Ольшанский, Артем Сергеевич

Выводы

1 Билатеральные микроинъекции нейротензина в хвостатое ядро мозга не оказывают заметного влияния на реализацию рефлекса, но облегчают угашение условного рефлекса с питьевым подкреплением.

2 На уровне хвостатого ядра нейротензин оказывает положительное последействие на процесс угасательного торможения рефлекса в последующих экспериментах после отмены пептида.

3 Локальное введение токсина 5,7-дигидрокситриптамина в дорзальное ядро шва сопровождается усилением двигательной активности в «открытом поле», а также растормаживанием межсигнальных реакций при реализации и угашении условного двигательного рефлекса с питьевым подкреплением.

4 Микроинъекции нейротензина в хвостатое ядро и чёрную субстанцию мозга оперированных крыс ослабляют растормаживающий эффект нейротоксина при угашении, но не при реализации условного двигательного рефлекса. У ложнооперированных крыс введение нейротензина в хвостатое ядро облегчает угашение рефлекса, тогда как введение нейротензина в чёрную субстанцию не имеет заметных последствий.

5 В обстановке «открытого поля» микроинъекции нейротензина в чёрную субстанцию оперированных крыс ослабляли их двигательную активность до уровня контрольных животных. Микроинъекции нейротензина в хвостатое ядро не изменяли горизонтальную, но усиливали вертикальную двигательную активность оперированных крыс.

6 Эффекты нейротензина на поведение крыс с дефицитом функции серотонинергических нейронов связаны с нормализацией мотивационно-эмоционального состояния животных. На уровне хвостатого ядра действие нейротензина в большей степени обусловлено с повышением эффективности механизма пресинаптического торможения дофаминергических нейронов, а на уровне чёрной субстанции - с модулирующим влиянием на сохранившиеся серотонинергические окончания.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Ольшанский, Артем Сергеевич, Москва

1. Адрианов О.С. О принципах организации интегративной деятельности мозга. // М. "Медицина" 1976.

2. Адрианов О.С. Структурно-функциональные основы сложных форм высшей нервной деятельности. // ЖВНД 1986, т.36, №2, с.256-275.

3. Андреев Л.Н. Влияние частичного разрушения хвостатого ядра. // В сб. "Материалы XXI совещания по проблемам ВНД" М. -Л. 1966 с. 1516.

4. Арушанян Э.Б, Зависимость антипсихотического эффекта нейролептиков от их дофаминблокирующих свойств. // Фармакол. и токсикол., 1982, т.45, №5, с. 118-126.

5. Арушанян Э.Б., Отеллин В.А. Хвостатое ядро. Очерки по морфологии, физиологии и фармакологии. Л. 1976.

6. Арушанян Э.Б., Толпышев Б.А. Влияние парахлорфенилаланина и 5-окситриптофана на хвостатое ядро кошек. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1978, т. 85, №3, с.293-299.

7. Ашмарин И.П., Стукалов П.В. с соавт. Нейрохимия. 1996. М. Издательство института биомедхимии РАМН.

8. Булнаева А.Ф., Козлов А.П., Таиров О.П. Влияние разрушения головки хвостатого ядра на вызванные потенциалы в соматической афферентной системе. // Физиол. журнал СССР 1977, т.63, №7. с. 945948.

9. Громова Е.А. Эмоциональная память и её механизмы. М. Наука, 1980. с. 179.

10. Ермолаева В.Ю. О пространственной организации корковых италамических афферентных связей хвостатого ядра и скорлупы кошки. // В сб. "Базальные ганглии и поведение" 1971. Материалы симпозиума. JI. с. 29-30.

11. З.Ермолаева В.Ю., Ермоленко С.Ф. О двусторонних связях 1-й и 2-й соматосенсорных зон коры головного мозга с хвостатым ядром. // Арх. анат., гистол. и эмбриол., 1972, т. 63, №7, с. 20-26.

12. И.Качалова Л.М. Базальные ганглии и сенсорные системы: моторно-сенсорная зависимость. // Успехи физиол. наук 1991. т. 22. №4 с. 77-92.

13. Леонтович Т.А. Пространственная организация тканевых элементов хвостатого ядра мозга собаки.// Нейрофизиология. 1983. т. 15, с. 474484.

14. Леонтович Т.А., Мухина Ю.К. Нейронная организация сложнейших подкорковых ассоциативных центров. // Ассоциативные системы. Л. «Наука». 1985 с 61-70.

15. Марко Л.А. Физиология внутренних синапсов хвостатого ядра. // Материалы симпозиума "Мозг и движение" Ереван 1973 с.99-100.

16. Орлова Т.В. Стриатная система и поведение в норме и патологии. // Материалы симпозиума. Л. 1988.

17. Островская Р.У., Гузеватых А.С., Гудашева Т.А., Зайцева Н.И., Воронина Т.А. Нейролептикоподобная активность трипептидного аналога нейротензина ГЭР-123. // Ж. Экспериментальной и клинической фармакологии. М. 2002. 1 с.3-6.

18. Павлов И.П. Двадцатилетний опыт объективного изучения высшей нервной деятельности (поведения) животных. М.;Л. 1928. 388с.21 .Суворов Н.Ф. Стриатная система в норме и патологии. // Материалы симпозиума. Л. 1974

19. Суворов Н.Ф. Стриарная система и поведение. //Л. «Наука» 1980.

20. Су воров Н.Ф. Стриатная система и поведение в норме и патологии. // Материалы симпозиума JL 1988.

21. Суворов Н.Ф., Сидякин В.Г. Двигательные пищевые условные рефлексы и отсроченные реакции у собак после повреждения хвостатых ядер. // ЖВНД 1975, т.25, №2.

22. Толкунов Б.Ф. Стриатум и сенсорная специализация нейронной сети. Д., 1978. с. 175.

23. Черкес В.А., Луханина Е.П., Литвинова А.Н., Зелинская B.C.

24. Неостриатум как подкорковый уровень интеграции. // Материалы симпозиума "Стриатная система в норме и патологии" Л. 1984, с. 182195.

25. Шаповалова К.Б. Возможные нейрофизиологические инейрохимические механизмы участия стриатума в инициации и регуляции произвольного движения. // Физиол. журн. СССР им И.М. Сеченова. 1985. т. 71, №5. с. 537-553.

26. Шуваев В.Т., Суворов Н.Ф. Базальные ганглии и поведение. СПб. «Наука» 2001.

27. Шугалев Н.П. Медиаторное обеспечение доминирующих состояний животных в процессе условнорефлекторной пищедобывательной деятельности. // Диссертация на соискание ученой степени доктора мед. наук, НИИ мозга ВЦПЗ АМН СССР. М. 1986.

28. Шугалев Н.П., Ольшанский А.С., Хартман Г. Влияние нейротензина на поведение крыс с повреждением серотонинергических нейронов. // ЖВНД 2002, т.52, №6, с.750-755.

29. Шугал ев Н.П., Ольшанский А.С., Хартман Г. Влияние микроинъекций нейротензина в хвостатые ядра мозга крыс на реализацию и угашение условного двигательного рефлекса. // ЖВНД 2001, т. 51, №4, с.473-476.

30. Шугалев Н.П., Ямщикова Н.Г., Ольшанский А.С., Ставровская

31. А.В. Особенности влияния нейротензина на двигательные реакции крыс в ответ на позитивные и негативные условные сигналы. // Российский физиологический журнал. 2002, т88. №10, с 1324-1329

32. Шугал ев Н.П., Хартман Г. Механизмы саморегуляции дофаминовых нейронов мозга в процессах условно-рефлекторной деятельности. // Материалы XVII съезда физиологов России. Ростов н. Д. 1998.

33. Alburges М.Е. and Hanson G.R. Differential responses by neurotensin systems in extrapyramidal and limbic structures to ibogaine and cocaine. // Brain Res 1999 818: 96-104.

34. Adrianov O.S., Molodkina L.N., Mukhin E.I., Shugalev N.P., Yamshikova N.G. Participation of caudate nucleus in different forms of voluntary in cats. // Acta Neurobiol. Exp. 1980, 40, 729-740.

35. Alexander M.J. Niller M.A., Dorsa D.M, Bullock B.P, Melloni R.H., Dobner P.R, and Leeman S.E. distribution of neurotensin/neuromedin NmRNA in rat forebrain: unexpected in hippocampus and subiculum. // Proc Natl Acad Sci USA 1989 86: 5202-5206.

36. AImenoff J., Wilk S, and Orlowski M. Membrane bound pituitary metallendopeptidase: apparent identity to enkephalinase. // Biochem Byopys Res Commun 1981 102: 206-214.

37. Balessarini R.J. and Tarazi F.I. Brain dopamine receptors: a praimer on their current status, basic and clinical. // Harv. Rev. Psychiatry 1996 3: 301325.

38. Beauregard M., Ferron A., and Descarries L. Opposite effects of neurotensin on dopamine inhibition in different regions of the rat brains: an an ionophoretic study. // Neuroscience 1992 47:613-619.

39. Bissete G. and Nemeroff C.B. The neurobiology of neurotensin, in Neuropsychopharmacology: The Fourth Generation of Progress (Bloom F.E. and Kupfer D.J. ed) 1995 pp 573-582, Raven Press, New York.

40. Breslin N.A., Suddaach R.L., Bissette G, Nemeroff C.B Lowrimore P, and Weinderger D.R. CSF concentration of neurotensin in schisofrenia: an investigation of clinical and biochemical correlates. // Schsophr Res 1994, 12:35-41.

41. Brog J.S and Zahm D.S. Morphology and Fos immunireactivity reveal two subpopulations of striatal neurotensin neurons following acute 6-pydroxydopamine and reserpine administration. //Neuroscince 1995 65:7186.

42. BuchvaId N.A., Wyers E.J., Laupecht C.W., Heuser G. The caudate-spindel. 4. A behavioral index of caudate-induced inhibition.-EEG a.clin. Neurophysiol., 1961.V. 13, №4, 531-537.

43. Bures J., Buresova O. Methods in Pschophysiology. Vol.2. R.D. Myes Academic Press New York pp 319-343.

44. Carlson A. The current status of the dopamine hypothesis of schizophrenia. // Neuropsyshopharmacology 1988 1:179-186.

45. Carpenter M.B. Anatomy of the corpus striatum and brain stem integrating system // Handbook of physiology (Bethesda, Maryland). 1981. Sect.l, V.2 Part 2. P. 947-995.

46. Carraway RE, Leeman S.E. The isolation of a new hypotensive peptide-neurotensin, from bovine hypothalami. // Biol. Chem. 1973, 248: 68546861.

47. CasteI MN., Morino P., Dagerlind A., and Hokfelt T. Up-regulation of neurotensin mRNA in the rat striatum after acute methamphetamine treatment. // J. Neurosci. 1994 6:646-656.

48. Castel MN., Morino P., Frey P. Terenius and Hokfeld T. Immunohistochemical evidence for a neurotensin striatonigral pathway in the rat brain. //Neuroscience 1993 55:833-847.

49. Castel MN., Wang WX., Laduron P.M., Beandett A. Light and electronic microscopic localization of retrogradely transported neurotensin in rat nigrostrial dophaminergic neurons. //Neuroscience 1992; 50: 269-282.

50. Champman M.A., See R.E. The neurotensin receptor antagonist SR 48692 decreases extracellular striatal GAB A in rats. // Br. Res. 1996, 729,1,124126.

51. Champman M.A., See R.E. and Bissete G. Neurotensin increases extracellular striatal dopamine levels in vivo. // Neuropeptides 1992 22:175183.

52. Checler F, Mazella J, Kitabgi P, and Vincent J.P. High-affinity receptor sites and rapid proteolytic inactivation of neurotensin in primary cultured neurons. // J Neurochem 1986a 47:1742-1748.

53. Checler F, Vincent J.P., and Kitabgi P Purification and characterization of a novel neurotensin-degrading peptidase from rat brain synaptic membranes. // J Biol Chem 1986b 261: 11274-11281.

54. Cusack B, Boules M, Tyler B.M, Fauq A, McCormick D.J, and Richerdson E. Effects of a novel neurotensin peptide analog given extracranial^ on CNS behaviors mediated by apomorphine and haloperidol. // Brain Res 2000 956: 48-54.

55. Deutch A.Y. and Zahm D.S. The current status of neurotensin-dopamine interactions. Issues and speculations.// Ann. NY Acad. Sci. 1992 668:232252.

56. Diets B.R., Novitzki M.R., Phan Т.Н., Corley K.S., Boadic-Biber M.C.

57. Neurotensin inhibits the activation of midbrain — serotoninergic neuronsproduced by random in escapable sound. // Br. Res. 1996, 742(1-2), 294198.

58. Dilts R.P., and Kalivas P.W. Autoradiographic localization of mu-opioid and neurotensin reseptors within the mesolimbic dopamine system. // Brain Res. 1989 488:311-327.

59. Ernandez R., Sabater R., Sacr J. A., Montes R., Alba F., Ferrer J.M. Mediation by neurotensin-of effects of neurotensin — on self stimulation of the mediale prefrontal cortex. // Br.J. Phrmacol. 1996, 119, 2: 299-302.

60. Fallon J.H. Topographic organization of ascending dophaminergic projections. // Ann NY Acad. Sci. 1988 537:1-9.

61. Farkas R.H., Chein P.Y. Nakajima S. and Nakajima Y. Properties of a slow nonselective action conductance modulated by neurotensin and other neurotransmitters in midbrain dophaminergic neurons. // J. Neurophysiol 1996 76:1968-1981.

62. Fassio A., Exans G., Grisshammer R., Bolam J.P., Mimmack M., and Empson P.C. Distribution of the neurotensin receptor NTS 1 in the rat CNS studied using an amino-terminal directed antibody. // Neuropharmacology 2000 39:1430-1442.

63. Ferre S., Cortes R., Artigas F. Dopamine regulation of the serotoninergic raphe-striatal pathway: microdialysis studies in freelly moving rats. //Neurosci. 1994. V. 14. №8 P.243-250.

64. Ferrer J.M., Sabater S., Sacr J.A. Neurotensin N decreases selfstimulation of the medial prefrontal cortex. // NeuroReport. 1992; 3:1027-1029.

65. Ferrer J.M., Sabater S., Saer J.A. Neurotensin participates in selfstimulation of the medial prefrontal cortex in the rat. // Eur. J. Pharmacol 1992; 321:39-45.

66. Garver D.L., Bissette G, Yao J.K, and Nemeroff C.B. Relation of CSF neurotensin concentration to symptoms and drug response of psychotic patens // Am J Psychiatry 1991 148: 484-488.

67. Goldman-Rakic P.S. Topography of cognition: Parallel Distributed Networks in Primate Association Cortex // Ann. Rev. Neurosci. 1988. 2: 137-156.

68. Glemicher P.W., Margolin D.H., Giovino A.A, Hoebel B.G. Neurotensin: a new "reward peptide". // Brain Res. 1984, 291:119-124.

69. Goldstein M, and Deutch A.Y. Dopaminergic mechanisms in the patogenesis of schizophrenia. // FASEB 1992 J 6:2413-2424.

70. Graybel A.M. Neurotransmitters and neuromodulators in the basal ganglia // Trends of Neurosci. 1990 v.13, N 4, 244-254.

71. Hanson G.R., Buch L.G., Taylor V.Z., Gibb Y.W., Dawis F. Schmidt C.J. Comparison of neurotensin responses to MDL 100,907, a colective 5HT2A antagonist, with closapine and haloperidol. // Br. Res. Bull. 1997, 42,3, :211-219.

72. Hernandez D.E., Stanley D.A., Melvin J.A. and Prange A.J Jr1.volvement of brain dopamine systems on neurotensin-induced protection against stress gastric lesions // Brain Res. 19^6 381-:159-163.

73. Hokfelt Т., Everitt BJ., Theodorsson-Norheim E., Goldstein M. Occurrence of neurotensin-like immunoreactivity in subpopulation of hypothalamic mesencephalic and medullary catecholamine neurons. // J. Сотр. Neurol. 1984,222: 543-559.

74. Huang W., Hanson G.R. Differential effect of haloperidol on release of neurotensin in extrapyramydal and limbic systems. // Eur. J. Pharmacol. 1997,332(1), 15-21.

75. Jaber M., Robinson S.W., Missale C, and Caron M.G. Dopamine receptors and brain function //Neuropharmacology 1996 35: 1503-1519.

76. Jolas Т., Aghajanian G.K. Neurotensin and the serotoninergic system. // Prog. Neurobiol.1997, 52(6) :455-468.

77. Jolas Т., Aghajanian G.K Neurotensin excitation of serotoninergic neurons in the dorsal raphe nucleus of the rat in vivo. // Eur. J. Neurosci. 1996 8:153161.

78. Jolicoeur F.B., Rivest R., St-Pierre S. Drumheller A. Antiparkinson-like effects of neurotensin in 6-hydroxydophamine lesioned rats. // Brain Res. Bui. 1991,538:187- 192.

79. Jolicoeur F.B., Gagne M.A., Rivest R. Drumheller A., St-Pierre S.

80. Atypical effect-like behavioral of neurotensin. // Brain Res. Bui. 1993, 32: 487- 491.

81. Joyce J.N. The dopamine hypothesis of schizophrenia: limbic interactions with serotonin and norepinephrine. // Psychopharmacology 1993 112(Suppl I):sl6-s34.

82. Kalivas P.V., Miller J.S. Neurotensin neurons in the ventral tegmental area project to the medial nucleus accumbens. // Brain Res.1984, 300: 157-160.

83. Kemp J.M., Powell T.P.S. The connections of the striatum and globus pallidus: synthesis and speculation. // Phil. Trans.Roy. Soc. (London). 1971 v.262, N 854. 441-457.

84. Kemp J.M., Powell T.P.S. The structure of the caudate nucleus of the cat: light end electron microscopy //J.Phil. Trans. Roy. Soc. Lond.(Biol) 1971. V. 263 N 845. P.383-401.

85. Kilts C.D, Anderson C.M, Bissete G, Ely T.D, and Nemeroff C.B. Differenial effects of antipychotic drugs on the neurotensin concentration of discrete rat brain nuclei. // Biochem Pharmacol 1988 37:1547-1554.

86. Koob G.P and Nestler E.F. The neurobiology of drug addition // J Neuropsychiatry Clin Neurosci 1997 9:482-497.

87. Lambert P.D, Gross R, Nemeroff C.D. Anatomy and mechanisms of neurotensin-dopamine interactions in the central nervous system. // Ann NY Acad Sci 1995 757:377-389.

88. Letter A.A. Merchant K, Gibb J.W, and Hanson G.R. Effect of metamphetamine on neurotensin concentrations in rat brain regions. // J Pharmacol Exp Ther 1987 241:443-447.

89. Levant В., Bissette G., Widerlov E., Nemeroff C.B. Alterations in regional brain neurotensin concentrations produced by athypical antipsychotic drugs. // Regul. Pept.1991,32: 193-201.

90. Levant В., Nemeroff C.B. The psychobiology of neurotensin. // Neuroendocrinology.1988, 8: 232-262.

91. Levant В., Nemeroff C.B. Further studies on the modulation of regional brain97.neurotensin concentrations by antipsychotic drugs: focus on haloperidol and ВМУ 14802. //J. Pharmacol. Exp. Ther.1992,262: 348-355.

92. Levine M.S., Hull C.D., Yillablanca J. The spontaneous firing pattern of forebrain neurons. II Effects of unilateral caudate nucleus ablation. // Brain Res. 1974, V.78, N3, 411-424.

93. Mazella J, Zsuger N, Navarro V, Chadry J, Kaghad M, Caput D, Ferrara P, Vita N, Gully D, Maffrand J.P, and Vincent J.P. The 100-kDa neurotensin receptor is gp/sortilin, a non-G-protein copuled receptor. // J Biol Chem 1998 273: 26273-26276.

94. Masuo Y, Montagne M.N., Pelaprat D, Scherman D, and Rostene

95. W. Regulation of neurotensin-conteaning neurons in the rat striatum. Effects of unilateral striatal lesions with quinolinic acid on neurotensin content and its binding site density. // Brain Res 1990a 520:6-13.

96. McCarthy P.S, Walker R.J, Yajima H, Kitagawa K, and Woodrung G.N. The action of neurotensin on neurons in the nucleus accumbens and cerebellum of the rat. // Gen Pharmacol 1979 10:331-333.

97. Meisenberg G. and Simmons W.H. Motor hypoactivity induced by neurotensin and related peptides in mice. // Pharmacol Biochem Behav 1985 22:189-193.

98. Merchant K.M., Dobner P.R, and Dorsa D.M. Differential effects of haloperidol and clozapine on neurotensin gene transcriptions in rat neostriatum. // J Neurosci 1992 12:652-663.

99. Moyse E., Rostane W., Vial M., Leonard K., Mazella J., Kitabgit P., Vincent J.P., and Beaudet A Distribution of neurotensin binding sites in rat brain: a light microscopic study using monoiodo 1251-Tyr-neurotensin. // Neuroscience 1987 22:525-536.

100. Nalivaiko E, Michaud J.C, Soubre P, and Le5 Fur G. Electrophysioligical evedence for putative subtypes of neurotensin receptors in guinea-pig mesencephalic dophaminergic neurons. // Neuroscience 1998 86:799-811.

101. Nauta W.J.H. The relationship of the basal ganglia to the limbic system // Handbook of the Clinical Neurology. Amsterdam, 1986. v.5,19-31.

102. Nemeroff C.B. Neurotensin: perchance endogenous neuroleptic? // Biol. Psychiatry. 1980, 15: 283-302.

103. Nemeroff C.B., Bissette G., Prange AJ., loosen P.T., Barlow T.S., Lipton M.A. /Neurotensin: central nervous ayatem effects of a hypothalamic peptide.//Brain Res. 1977, 128:485-496.

104. Nemeroff C.B., Hernandez D.E., Orlando R.C., and Prange A.J. Jr. Cytoprotective effect of centrally administered neurotensin on stress-induced gastric ulcers. // Am. J. Physyol. 1982 242:G342-G346.

105. Nestler E.J. Molecular mechanisms of drug addition. // J Neurosci 1992 12:2439-2450.

106. Nestler E.J. Molecular mechanisms of opiate and cocaine addition // Curr Opin Neurobiol 1997 7:713-719.

107. Nicot A., Rostene W., and Berod A. Neurotensin receptor expression in the rat forebrain and midbrain: a combined in situ hybridization and receptor radioautography study. // J. Сотр. Neurol. 1994 341:407-419.

108. O'Connor W.T., Tanganelli U., Ungershtedt U., and Fuxe K. The effects of neurotensin on GABA and acetylcholine release in the dorsal striatum of the rat: an in vivo microdialysis study. // Brain Res 1992 573: 209-216.

109. Palacios J.M and Kuhar M.J Neurotensin receptors are located on dopamine containing neurons in rat midbrain // Nature(Lond) 1981 29,4: 587-589.

110. Pilotte N.S., Mitchell M., Sharpe L.G., De Soura E.B., Dax E.M.

111. Chronic cocaine administration and withdrawal of cocaine modify neurotensin binding in rat brain. // Synapse 1991,9: 111-120.

112. Pozza M.F. King E., Bischoff S, and Ople H.R. The neurotensin analog xenopsin excites nigral dopamine neurons. // Eur J Pharmacol 1988, 145:341-343.

113. Radke J.M., Owens M.J., Ritche J.C., and Nemeroff C.B. Atypical antipsychotic drugs selectively increase neurotensin efflux in dipamine terminal regions. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA 1998 95:11462-11464.

114. Rompre P.P. Repited actinuation of neurotensin receptors sensitises to the effect of amphetamine. //Eur. J. Pharmacol. 1997, 328,2-3, p.131-134.

115. Rompre P.P., Boye S.M. Opposite effects mesencephalic microinjection of cholecystokinin octapeptide and neurotensin (1-13) on brain stimulation reward. // Eur. J. Pharmacol. 1993, 232: 299-303.

116. Rompre P.P., Gratton A Mesencephalic microinjection of neurotensin(8-13), and its C-terminal fragment, neurotensin(8-13), potentiate brain stimulation reward. // Brain Res. 1993. 616:154-162.

117. Rosvold H.E. The frontal lobe system: cortycal-subcortical interrelationships. // Acta Neurol. Exp., 1972, 32, 2: 493-451.

118. Roth R.H, Elsworth J.D. Biochemical pharmacology of midbrain dopamine neurons. Psychopharmacology: The forth generation of progress; chapter 21 edited by Floid J. Kupfer. Raven Press, Ltd. N.Y 1995.

119. Sarhan S, Hichchock J.M Grauffel C.A, and Wettsteein J.G

120. Comparative antipsychotic profels of neurotensin and a releated systemically active peptide agonist.//Peptides 1997 18:1223-1227.

121. Schotte A. and Lysen J.E. Autoradiographic evidence for the localization of hogh affinity neurotensin binding sites on dophaminergic nerve terminals in the nigrostriatal and mesolimbic pathways in rat brain. // J Chem Neuronal 1989 2:253-257.

122. Seroogy K.B., Metha A, and Fallon J.H. Neurotensin and cholecystokinin coexsistense within neurons of the mesencephalon: projections to forebrain. // Exp Brain Res 1987 68: 277-289.

123. Seutin V, Massote L, and Drasse A. Electrophysiological effects of neurotensin on dophaminergic neurons of the ventral tegmental area of the rat in vitro. // Neuropharmacology 1989 28: 949-954.

124. Sharma R.P, Jannicak P.G, Bissete G, and Nemeroff C.B. СSF neurotensin concentrations and antipsychotic tretment in schizophrenia and schiszoaffective disorders. // Am JPsychiary 1997 154: 1019-1021.

125. Skoog K.M, Cain S.T, and Nemeroff C.B. Centrally administrated neurotensin suppresses locomotor hyperactivity induced by d-amphetamine but not by scopolamine or caffeine. // Neuropharmacology 1986 25: 777782.

126. Stowe Z.N, and Nemeroff C.B. The electrophysiological actions of neurotensin in the central nervous system. // Life Sci 1991 49:987-1002.

127. Studler J.M., Kitabgi P., Tramu G., Herve D., Glowinski J., and Tassini J.P., Extensive co-localisation of neurotensin wich dopamine inrat meso-cortoco-frontal dophaminergic neurons. // Neuropeptides 1988 11:95100.

128. Tanaka K, Masu M, and Nakanishi S. Structure and functional expression of the cloned rat neurotensin receptor // Neuron 1990 4: 847-854.

129. Tanganelli S, von Euler G, Fuxe K, Agnati L.F, and Ungerstedt U. Neurotensin counteracts apomorphine-induced inhibition of dopamine release as studied by microdialysis in rat striatum. // Brain Res 1989 502:319-324.

130. Tanganelli S, O'Connor W.T., Ferraro L, Bianchi C, Ungershtedt U, and Fuxe K. Facilitation of GABA release by neurotensin is associated with a reduction of dopamine in rat nucleus accumbens. // Neuroscience 1994 60:649-657.

131. Uhl G.R. Distribution of neurotensin and its receptor in central nervous system. // Ann NY Acad Sci 1982,400: 132-149.

132. Uhl G.R. Goodman R.R. and Snyder S.H. Neurotensin-containing cell bodies, fibers and nerve terminals in the brain stem of the rat: immunohistochemical mapping. II Brain Res. 1979 167:77-91.

133. Uhl G.R. Kuhar and Snyder S.H. Neurotensin:immunohistohemical localization in rat central nervous system. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1977 74:4059-4063.

134. Vincent J.P. Neurotensin receptors: binding properties, transduction pathways, and structure.//Cell. Mol. Neurobiol. 1995 15:501-512.

135. Vincent J.P. Mazella J., and Kitabgi P Neurotensin and neurotensin receptirs. // Trends Pharmacol. Sci. 1999 // 20:302-309.146. von Euler G., Mailleux P., Vanderhaegen J.J. and Fuxe K.

136. Neurotensin reduced the affinity of dopamine D2 receptors in midbrains from post mortem human caudate-putamen. // Neurosci Lett. 1990 109: 325330.147. von Euler G., van der Ploeg I., Fredholm B.B., and Fuxe К

137. Neurotensin decreases the affinity of D2 agonist binding by a G protein-independent mechanism//J. Neurochem. 1991 56: 178-183.

138. Wagstaff J.D., Bush L.G., Gibb J.W., and Hanson G.R. Endogenous neurotensin antagonizes methamphetamine-enhanced dophaminergic activity. // Brain Res. 1994 665:237-244.

139. Wagstaff J.D., Gibb J.W., and Hanson G.R. Microdialyesis assessment of methamphetamine-induced changes in extracellular neurotensin in the striatum and nucleus accumbens. //J. Parmacol. Exper. Ther. 1996 278:547-554.

140. Washi M, Okuda M, Togashi S, Miyashita O, and Wakahoi T. Effects of methamphetamine administration on brain neurotensin-like immunoreactivity in rats. //Neurosci Lett 1987 78:222-226.

141. Wu T, and Wang H.L. Neurotensin increases the cationic conductance of rat substantia nigra dophaminergic neurons through theinositol 1,4,5-triphosohate-calcium pathway.//Neursci Lett 1995 184:121124.

142. Zham D.S. Neurotensin-immunoreactive neurons in the ventral striatum of the adult rat: ventromedial caudate-putamen, nucleus accumbens and olfactory tuberce. // Neurosci. Lett. 1987 81:41-47.

143. Zham D.S. Subsetes of neurotensin-immunoreactive neurons relevated following antagonism of the dopamine-mediated suppression of neurotensin immunoreactivity in the rat striatum. // 1992 Neuroscince 46: 335-350.

144. Zsuger N, Mazella J, and Vincent J.P. Solubilization and purification of a high affinity neurotensin receptor from newborn human brain. // Brain Res 1994 639:245-252.1. S,4