Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование регуляции внеклеточной ГАМК в первом слое неокортекса у мышей в ранний постнатальный период

ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Исследование регуляции внеклеточной ГАМК в первом слое неокортекса у мышей в ранний постнатальный период"

На правах рукописи

Мяхар Ольга Леонидовна

ИССЛЕДОВАНИЕ РЕГУЛЯЦИИ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ ГАМК В ПЕРВОМ СЛОЕ НЕОКОРТЕКСА У МЫШЕЙ В РАННИЙ ПОСТНАТАЛЬНЫЙ ПЕРИОД

03.03.01 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва-2011

1 / МАР 2011

4840678

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор

Камкин Андрей Глебович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук,

профессор Смирнов Виктор Михайлович

(Российский государственный медицинский университет)

кандидат биологических наук Саложин Сергей Владимирович

(Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН)

Ведущая организация: Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова, биологический факультет.

Защита состоится «28» марта 2011 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.072.05 при ГОУ ВПО РГМУ Росздрава по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО РГМУ Росздрава по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1

Автореферат разослан «25» февраля 2011 года

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат медицинских наук, доцент

Т. Е. Кузнецова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы

Гамма-аминомасляная кислота (ГАМК) является важнейшим тормозным нейромедиатором центральной нервной системы, рецепторы которого широко распространены в структурах головного мозга. Основная физиологическая роль ГАМК заключается в создании устойчивого равновесия между возбуждающими и тормозными системами. Долгое время считалось, что эта аминокислота связана исключительно с синаптическим торможением. Но оказалось, что на ранних этапах развития мозга ГАМК опосредует преимущественно синаптическое возбуждение. Будучи основным возбуждающим передатчиком в развивающемся мозге, эта аминокислота действует как экстраклеточный регулятор, управляя такими процессами, как пролиферация клеток, миграция нейробластов, дендритное созревание. Все эти явления опосредованы через паракринный, диффузный, несинаптический способ действия, который предшествует более сфокусированному быстродействующему способу передачи в синаптических соединениях (Represa А., Ben-Ari Y., 2005). Таким образом, изменение концентрации или градиента ГАМК может значительно повлиять на процессы нейрональной миграции в развивающейся коре головного мозга (Fukuda A., Luhmann Н., 2006).

Обратный захват ГАМК из внеклеточного пространства осуществляется глиальными и нейрональными транспортерами гамма-аминомасляной кислоты (ГAT) (Kavanaugh М., et al., 1992). ГАТ-1 и ГАТ-3 экспрессируются в коре головного мозга и локализуются как на астроцитах, так и на самих нейронах. ГАТ-1 активно удаляет ГАМК из синаптического и внеклеточного пространства (Dingledine, Korn, 1985; Scanziani М., 2000), а ГАТ-3, действуя как регулирующий механизм внеклеточной концентрации ГАМК (Rossi D.J. et al. 2003), поддерживает ее значение на определенном уровне в развивающейся коре, и может как удалять ГАМК из внеклеточного пространства (Kinney G. et al., 2002), так и высвобождать медиатор во внеклеточное пространство (Kinney G., 2005).

ГАМК-эргическая система представляет собой совокупность нервных центров, волокон и синапсов, синтезирующих и выделяющих ГАМК в качестве медиатора. Компоненты ГАМК-эргической рецепторной системы (включающей в себя ГАМК-эргические нейроны, рецепторы к ГАМК и сам нейромедиатор) появляются очень рано в процессе кортикогенеза и сохраняются в течение всей жизни. Исследования развивающейся соматосенсорной коры мышей и крыс показали, что ГАМК-содержащие синаптические контакты могут быть идентифицированы уже на четвертый день жизни (Micheva К., Beaulieu С., 1996; De Felipe J. et al., 1997).

ГАМК может участвовать в опосредованном контроле кортикогенеза через активацию клеток, участвующих в регуляции миграции созревающих нейронов.

Клетки Кахаля-Ретциуса (KP-клетки) - самые ранние нейроны маргинальной зоны развивающегося неокортекса. Они синтезируют рилин - полипептид экстраклеточного матрикса, ответственный за регуляцию миграции и определяющий слоистое строение коры (D'Arcangelo G. et al., 1995). KP-клетки получают исключительно ГАМК-эргические входы (Kilb W., Luhmann Н. J., 2001; Radnikow G. et al., 2002), следовательно ГАМК опосредованно может участвовать в формировании коры.

Значительное изменение уровня ГАМК в ЦНС может привести к развитию целого ряда психоневрологических заболеваний. Дефицит ГАМК обнаружен у пациентов, страдающих биполярным расстройством, а также у больных эпилепсией (Leventer R. J. et al., 2008), шизофренией (Jones E. G.,1997), аутизмом (Courchesne E. et al., 2007). Клинические данные свидетельствуют о связи этих заболеваний с нарушением развития коры больших полушарий. К примеру, основной причиной аутизма считается чрезмерное развитие головного мозга в утробе матери и остановка, либо даже его деградация после рождения (Courchesne Е. et al., 2007). Возникновение же шизофрении может быть связано с нарушениями клеточной миграции на поздних этапах кортикогенеза, что в свою очередь приводит к нарушению организации структуры коры головного мозга (Jones E.G., 1997). Поскольку механизмы вышеперечисленных заболеваний до конца не выяснены, становится очевидной важность исследования роли ГАМК в развитии этих

патологий, в частности, необходимость точного измерения уровня внеклеточной концентрации медиатора в маргинальной зоне неокортекса на ранних стадиях развития коры головного мозга.

Цель исследования

Целью настоящей работы было изучение внеклеточной концентрации ГАМК, факторов ее определяющих, а также динамики изменения концентрации ГАМК в маргинальной зоне неокортекса у мышей в ранний постнатальный период.

Задачи исследования

1. Выявить локализацию и расположение ГАМК-эргических волокон, образующих синапсы на клетках Кахаля-Ретциуса, относительно самих KP-клеток в маргинальной зоне неокортекса.

2. Исследовать возможность десенситизации постсинаптических ГАМКд рецепторов апплицируемой ГАМК.

3. Исследовать механизмы, ответственные за регуляцию концентрации внеклеточной ГАМК в маргинальной зоне неокортекса (глиальные и нейрональные транспортеры ГАМК, глутамат-декарбоксилаза).

4. Измерить уровень ГАМК в маргинальной зоне неокортекса мышей линии C57BL/6J, используя пресинаптические метаботропные ГАМКБ рецепторы, как датчик ее внеклеточной концентрации.

5. Изучить изменение концентрации ГАМК в маргинальной зоне неокортекса в течение первой постнатальной недели у мышей линии C57BL/6J.

Научная новизна работы

В работе впервые с высокой степенью точности измерена внеклеточная концентрация ГАМК в первом слое развивающейся коры, а также прослежена динамика ее изменений в течение первой недели постнатального развития. Была доказана возможность использования в качестве показателя внеклеточной концентрации ГАМК активации пресинаптических метаботропных ГАМКВ рецепторов, проявляющейся в снижении эффективности синаптической передачи (Семьянов A.B., 2004) на клетках Кахаля-Ретциуса.

5

Экспериментально подтверждены основные механизмы, вносящие вклад в поддержание концентрации экстраклеточной ГАМК в маргинальной зоне неокортекса на ранних этапах постнатального развития. Кроме того, доказано отсутствие других факторов, влияющих на уровень концентрации экстраклеточной ГАМК.

Теоретическая и практическая значимость результатов исследования

Теоретическая значимость работы заключается в том, что впервые точно была измерена динамика концентрации ГАМК в маргинальной зоне неокортекса в течение первой недели постнатального развития. Данные о внеклеточной концентрации ГАМК могут быть использованы при изучении нарушений регуляции кортикогенеза. Практическая значимость исследования состоит в том, что его результаты могут быть использованы как основа для поиска методов ранней диагностики и разработки новых фармакологических препаратов с целью лечения таких неизлечимых на сегодняшний день неврологических заболеваний, как шизофрения, аутизм, эпилепсия и др.

Положения, выносимые на защиту

1. Используя пресинаптические метаботропные ГАМКБ рецепторы, как датчик внеклеточной концентрации гамма-аминомасляной кислоты, измерена концентрация ГАМК в маргинальной зоне неокортекса мышей линии C57BL/6J.

2. Величина концентрации внеклеточной ГАМК в маргинальной зоне развивающегося неокортекса мышей сильно снижается в течение первой недели постнатального развития.

3. Внешняя концентрация ГАМК в маргинальной зоне неокортекса определена, главным образом, активностью транспортеров ГАМК (ГAT): ГАТ-2/3 и ГАТ-1.

Рекомендации по внедрению результатов работы в практику

Результаты диссертации могут быть использованы в научно-исследовательской работе и учебном процессе на кафедре фундаментальной и прикладной физиологии МБФ ГОУ ВПО РГМУ.

Апробация работы

Основные положения работы представлены на VIII встрече немецкого неврологического общества (2009, Геттинген, ФРГ), а также доложены на двух конгрессах (FENS, 2008, 2010) и совместной научной конференции кафедры фундаментальной и прикладной физиологии МБФ ГОУ ВПО РГМУ Росздрава (Москва, Россия, 2010) и лаборатории электрофизиологии.

Материалы диссертации изложены в 3 статьях (1 - в отечественном, 2 - в зарубежных периодических изданиях).

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа состоит из 5 глав: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты и их обсуждение, список использованной литературы.

Работа изложена на 122 страницах машинописного текста, включая 40 рисунков и список литературы из 186 источников.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Все эксперименты проводились на черных мышах линии C57BL/6J. Были использованы две возрастные группы: на 2, 3 (П2-3), а так же 5, 6 и 7 (П5-7) дни постнатального развития. При выполнении экспериментов соблюдались «Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев) от 6.04.1973 № 1045-73».

Иммунофлуоресцентная окраска срезов

Для визуализации исследуемой области применялась иммунофлуоресцентная окраска срезов головного мозга антителами к рилину - маркеру клеток Кахаля-Ретциуса, а также, собственно, к ГАМК.

В работе применяли следующие растворы:

1) Раствор 1 для приготовления срезов: 125 мМ NaCl, 4 мМ KCl, 10 мМ С6Н1206, 1,25 мМ NaH2P04, 25 мМ NaHC03, 0,5 мМ СаС12 и 2,5 мМ MgCl2; pH = 7,3; аэрация карбогеном (5% С02 и 95% 02).

2) Стандартный фосфатно-солевой буфер (PBS): 137 мМ NaCI, 2,7 мМ KCl, 10 мМ Na2HP04,1,76 мМ КН2Р04, pH 7,4.

3) Раствор 2 для фиксации мозга: раствор 4% параформальдегида и 4% сахарозы в 1%PBS.

4) Раствор 3 для отмывки срезов мозга: 8% раствор сахарозы в 1% PBS.

5) Раствор 4 для нанесения антител на срезы мозга: 1% раствор бычьего сывороточного альбумина (Sigma, США) в 1% PBS.

Приготовление переживающих срезов мозга

После декапитации голову животного помещали в стоящую на льду чашку Петри с охлажденным до 0°С раствором 1. Далее с помощью ножниц и пинцета снимали кожные покровы и хрящи верхней половины черепа. После этого мозг быстро вынимали из черепной коробки и перекладывали в стеклянный стакан с охлажденным до 0°С раствором 2. Препарат на 0,5 часа помещали в орбитальный шейкер (Barnstead), скорость вращения платформы 40 об/мин. Затем стакан с препаратом герметично закрывали и на 5,5 часов оставляли при температуре 4°С.

Окраска срезов антителами

Мозг отмывали в растворе 3, после чего препарат оставляли в растворе 3 на 12,5 часов при температуре 4 °С.

Инкубированные препараты мозга заливали парафином, после чего в холодильной камере криостата изготавливали и аккуратно переносили на охлажденные предметные стекла сагиттальные срезы мозга толщиной в 20 мкм.

8

Срезы отмывали в 1% PBS, а дальше промывали в следующих растворах: 50 мМ NH4C1, 1% PBS, 0,12% желатин. После отмывки стекла заливали 0,12% раствором желатина и оставляли на 2,5 часа при температуре 4°С.

Далее проводили аппликацию первичных антител. Использовали моноклональныс мышиные антитела к рилину (Sigma, USA) и поликлональные кроличьи антитела к ГАМК (Sigma-Aldrich, USA). Срезы с нанесенными первичными антителами инкубировали в течение 9 часов при температуре 4°С без доступа света. Затем стекла со срезами отмывали в 0,12% растворе желатина.

После отмывки апплицировали вторичные антитела. Использовали поликлональные антитела к иммуноглобулинам мыши, меченые флуоресцеинизотиоцианатом (Sigma-Aldrich, USA) и поликлональные антитела к иммуноглобулинам кролика, меченые цианином 3 (Sigma-Aldrich, USA).

После нанесения вторичных антител, срезы оставляли в темном помещении на 1 час при комнатной температуре. Готовые препараты хранили в темноте при температуре 4°С.

Электрическая стимуляция аксонов клеток Кахаля-Ретциуса

В работе применяли следующие растворы:

1. Раствор 1 для приготовления срезов: (состав - см. стр. 5).

2. Инкубационный раствор (искусственная цереброспинальная жидкость): 125 мМ NaCl, 4 мМ KCl, 10 мМ глюкозы, 1,25 мМ NaH2P04, 25 мМ NaHC03, 2 мМ СаС12 и 1 мМ MgCl2; pH = 7,3; 330 мОсмоль/л; аэрация карбогеном (5% С02 и 95% 02).

3. Раствор для заполнения patch-пипеток: 100 мМ калий-глюконата (СбНц07К), 50 мМ KCl, 5 мМ NaCl, 0,5 мМ СаС12, 5 мМ EGTA, 25 мМ Hepes, 2 мМ MgAT® и 0,3 мМ ГТФ; pH = 7,2; 320 мОсмоль/л.

Идентификация клеток Кахаля-Ретциуса

Клетки идентифицировались микроскопически (Axioscope FS, Zeiss, ФРГ), используя следующие морфологические критерии: 1) расположение в маргинальной зоне неокортекса; 2) горизонтальная ориентация; 3) большая яйцевидная сома; 4) одиночный толстый дендритный ствол, расположенный параллельно поверхности

мягкой оболочки мозга (Hestrin S., Armstrong W.E.,1996; Radnikow G. et al., 2002). Для экспериментов выбирали клетки, расположенные в соматосенсорной, моторной и премоторной зонах (1-5 поля Бродмана) неокортекса мышей.

Далее в конфигурации whole cell электрофизиологически проверялась правильность выбора клетки. Для клеток Кахаля-Ретциуса характерно: высокое входное сопротивление: более 500 МОм (Kilb W., Luhmann H.J., 2001); относительно деполяризованный мембранный потенциал ~ -40 мВ (Mienville J. М., Pesold С., 1999); токи, активируемые гиперполяризацией: Ih-токи (Kilb W., Luhmann HJ., 2000); довольно низкая частота генерации потенциалов действия при деполяризации (Mienville J.M., 1998); спонтанные ГАМК-эргические ПСТ (Kirmse К., Kirischuk S., 2006).

В режиме фиксации потенциала (voltage-clamp), мембранный потенциал на клетках Кахаля-Ретциуса поддерживался на уровне -70 мВ. Потенциал реверсии по хлору составлял -20 мВ.

Электрофизиологические исследования в переживающих срезах мозга

Постсинаптические токи (ПСТ) на клетках Кахаля-Ретциуса записывали с помощью стандартной техники фиксации потенциала на целой клетке (patch-clamp в конфигурации whole cell). Сопротивление пипеток для регистрации составляло 3-5 МОм, этими пипетками производился поиск и patch клеток Кахаля-Ретциуса.

Для статистической обработки отбирали данные регистрации от тех клеток, последовательное сопротивление которых было менее 40 МОм. Компенсация последовательного сопротивления не проводилась. Из обработки результатов исключали данные, полученные на клетках, последовательное сопротивление на которых в течение эксперимента изменялось более чем на 20%.

Миниатюрные постсинаптические токи и их оценка

Для оценки выброса в синаптическую щель отдельной везикулы нейромедиатора на клетках Кахаля-Ретциуса регистрировали миниатюрные ПСТ. С целью блокады возникновения и проведения потенциала действия к синапсам был использован тетродотоксин в концентрации 0,5 мкМ (Brown Т.Н. et al., 1979).

Поскольку исходная частота ПСТ была низкой (около 0,07 Гц), для увеличения вероятности спонтанного выброса медиатора был использован N-этилмалеимид (Kirmse К., Kirischuk S., 2006).

Электрическая стимуляция клеток Кахаля-Ретциуса

Для исследования вызванных электрических токов на клетках Кахаля-Ретциуса применялась фокальная электрическая стимуляция с помощью униполярного хлорсеребряного электрода, погруженного в микропипетку. Сопротивление стимулирующего электрода - 10 МОм.

В экспериментах с применением электрической стимуляции для предотвращения Na+-TOKOB во внутриклеточный раствор добавляли 2 мМ №(2,6-диметилфенилкарбамоилметил)-тритиламмониум бромида (QX 314) (Connors B.W., Prince D.A., 1982). Для исследования генерации потенциалов действия использовали регистрационные пипетки, заполненные раствором без присутствия блокатора.

Поиск отдельного синаптического входа на клетку Кахаля-Ретциуса производили непосредственно после перевода клетки в конфигурацию whole-cell. На стимулирующий электрод постоянно подавали тестирующие сигналы из повторяющихся каждые 5 с пачек электрических импульсов (4 прямоугольных импульса длительностью 0,5 мс и интервалами в 50 мс). В случае появления синаптического ответа на тестовые импульсы амплитуду сигнала и положение кончика пипетки подстраивали таким образом, чтобы вызывать на клетке Кахаля-Ретциуса минимальный электрический ответ одного синаптического входа, сила стимулирующего тока составляла 1-2 мкА (Kirmse К. et al., 2007). После нахождения синаптического входа стимуляцию на 5 мин прекращали, после чего начинали регистрацию. Работа с одним срезом не превышала 1,5 часов.

Метод парной стимуляции

Вызванные постсинаптические потенциалы (вПСП) регистрировали в режиме фиксации тока (current clamp) в конфигурации whole cell, а поиск синаптических входов и 20 пар парной стимуляции проводили в режиме фиксации потенциала

(voltage clamp). В режиме current clamp удерживаемый ток устанавливали и поддерживали на таком уровне, чтобы потенциал соответствовал значению в -60 мВ.

В ходе эксперимента для оценки синаптической пластичности входов была использована минимальная электрическая стимуляция отдельных аксонов парами стимулов с интервалом между парами 10 с и межстимульными интервалами в 50 мс, длительность отдельного стимула - 0,5 мс.

Обработка экспериментальных данных

Данные обрабатывали в программе PeakCount V3.2 (автор - С. Henneberger, Институт нейрофизиологии, Берлин): производился автоматический поиск каждого события, измерение амплитуды, времени нарастания и временной константы спада моноэкспоненциальной аппроксимации, подсчет количества миниатюрных ПСТ, записанных в заданном промежутке времени. Положение базовой линии, уровень аппроксимации экспотенциальной кривой, а также отсев попавших в выборку событий не физиологического характера (шум) контролировались вручную.

При обработке данных при условии стабильности входа (стимуляция оставалась минимальной) для усреднения использовали все записи. Для получения усредненной записи использовали ответы клетки не менее чем на двадцать пар стимулов. Далее рассчитывали средние амплитуды вПСТ на первый и второй стимул (вПСТ1 и вПСТ2, соответственно) и парное отношение (ПО) средних амплитуд вПСТ2 к

вПСТ1, характеризующее кратковременную пластичность синаптических входов д

(ПО - — *пст2). Для статистической обработки данных использовали такие

А вПСТ1

программы, как Corel Draw 12, Prism v 4.03 и приложения MS Office 2007.

Нормальность распределения проверяли с помощью теста Колмогорова-Смирнова, для тестирования различий между средними значениями параметров использовали парный тест Стьюдента (t-тест). В отдельных случаях использовали также однопопуляционный тест Стьюдента, post hoc t-тест Стьюдента (для сравнения средних значений в группе) и ANOVA.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Уровень концентрации внеклеточной ГАМК в маргинальной зоне развивающегося неокортексэ определяет количество активированных метаботропных ГАМКБ-рецепторов (Югшве К. е! а1., 2005). В диссертационной работе было сделано предположение о том, что уровень пресинаптической активации ГАМКБ-рецепторов способен отразить внеклеточную концентрацию ГАМК в неокортексе мышей. Это предположение было взято за основу для исследования уровней концентрации нейромедиатора вблизи синаптических контактов, расположенных на клетках Кахаля-Ретциуса.

Иммунофлуоресцентная окраска коры

На рис. 1 показана иммунологическая окраска антителами, селективными к ГАМК (показано фиолетовым цветом) и рилину (показано зеленым цветом) на 3 день постнатального развития мыши, снятая при десятикратном увеличении объекта. На рисунке хорошо различимы ГАМК-положительные волокна, расположенные параллельно поверхности мягкой оболочки коры головного мозга. Видно, что концентрация ГАМК в этом слое значительно выше, чем в более глубоко расположенных слоях (маргинальная зона прокрашена гораздо лучше остальных -практически белая линия на рис. 1). Таким образом, отсутствие желтого, который мог бы появиться при пересечении зеленого и фиолетового, указывает на то, что эти нейроны не синтезируют ГАМК.

Для более детального рассмотрения взаимодействий между КР-клетками и ГАМК-эргическими волокнами первого слоя неокортекса, были сделаны (с увеличением в 40 раз) фотографии отдельной клетки Кахаля-Ретциуса в окружении ГАМК-эргических волокон маргинальной зоны неокортекса. На рис. 2 видно, как одно из ГАМК-эргических волокон ветвится вблизи тела КР-клетки. Также на фото заметно то, что ГАМК-позитивное волокно, расположенное вдоль поверхности клетки Кахаля-Ретциуса, идет параллельно поверхности мягкой мозговой оболочки. Следовательно, при поиске ГАМК-эргических синаптических входов необходимо направлять движение кончика стимулирующего электрода перпендикулярно

поверхности мягкой мозговой оболочки, увеличивая тем самым вероятность нахождения и стимуляции нужного аксона.

Рис. 1. Иммунофлуоресцентная окраска коры мозга антителами к ГАМК и рилину.

Мышь возраста ПЗ. Увеличение при съемке в 10 раз.

1 маргинальная зона,

2 рилин-положительные клетки Кахаля-Ретциуса,

3 мягкая мозговая оболочка.

100 мкм

Рис. 2. Иммунофлуоресцентная покраска антителами к ГАМК и рилину в маргинальной зоне неокортекса.

Мышь возраста П2. Увеличение при съемке: в 40 раз.

1 мягкая мозговая оболочка,

2 клетка Кахаля-Ретциу-са,

3 ГАМК-эргическое волокно, ветвящееся вблизи клетки Кахаля-Ретциуса.

Проверка на десенситизацию постсинаптических ГАМКА-рецепторов

При использовании концентрации внешней ГАМК равной 2.5 мкМ время нарастания, кинетика спада и медианная амплитуда минПСТ не изменялись (Рис. 3). Это позволило нам сделать вывод об отсутствии десенситизации постсинаптических ГАМКд-рецепторов. В связи с этим при дальнейшей обработке результатов экспериментов фактор десенситизации ГАМКд-рецепторов, как таковой, не учитывался.

ГАМК (2.5 мкМ)

О 50 100 мПСТ амплитуда (пА)

В

< с

ь 30

с

2 20 ГО

> 10' з

£ О

2

<

3 мин

В

^ # 4-0* А*

Рис. 3. Влияние 2,5 мкМ внешней ГАМК на параметры активности КР-клеток.

A. Усредненная запись минПСТ,

Б. Кумулятивные гистограммы зависимости вероятности высвобождения медиатора от амплитуд минПСТ,

B. Медианные амплитуды минПСТ.

Измерение концентрации ГАМК в маргинальной зоне неокортекса

Для измерения концентрации внеклеточной ГАМК было решено создать условия, при которых уровень концентрации медиатора во внеклеточном пространстве оставался бы постоянным. При построения модели дальнейших экспериментов была поставлена следующая задача: отключить все механизмы, ответственные за изменение концентрации ГАМК в неокортексе, после чего зарегистрировать в маргинальной зоне неокортекса вызванные ПСТ для измерения уровня внеклеточной ГАМК: в контроле, после блокады всех механизмов, участвующих в регуляции концентрации ГАМК, при аппликации калибровочных концентраций ГАМК (для сравнения полученных результатов с контрольными значениями).

Исследование механизмов, ответственных за регуляцию концентрации внеклеточной ГАМК в маргинальной зоне неокортекса

Во время перинатального развития экспрессия транспортера ГАТ-2/3 гораздо выше, чем ГАТ-1 (Conti F. et al., 2004). Поскольку именно этот транспортер выбрасывает ГАМК из клеток во внеклеточное пространство (Kinney G.A., 2005; Kirmse К., Kirischuk S., 2006), он может определять концентрацию ГАМК в маргинальной зоне развивающегося неокортекса. Для проверки этой гипотезы в первой серии экспериментов был использован специфический блокатор транспортера ГАТ-2/3 SNAP-5114 (40 мкМ). В экспериментах тестировали 2 возрастные группы мышей: возраста П2-3 и П5-7.

В экспериментах с обеими группами животных SNAP-5114 продемонстрировал значимое увеличение амплитуды первого ответа вызванных постсинаптических токов (вПСТ)) и снижение значений парного отношения (ПО) (рис. 4).

При аппликации различных концентраций ГАМК на фоне действия блокатора транспортеров ГАТ-2/3 было выяснено, что добавление 0,5 мкМ ГАМК к внеклеточному раствору возвратило физиологические параметры в обеих возрастных группах к их контрольным значениям. Таким образом, ГАТ-2/3-опосредованное освобождение ГАМК может имитировать 0,5 мкМ внешней ГАМК у мышей обеих возрастных групп.

Та же концентрация медиатора (0,5 мкМ) была ранее измерена в эмбриональных срезах коры с использованием техники «sniffer cell» (Cuzon V.C. et al., 2006). Поскольку «sniffer cells» по размеру крупнее синапсов, полученные схожие данные могут свидетельствовать о том, что данный вид транспортера управляет общей концентрацией внешней ГАМК в маргинальной зоне неокортекса. Таким образом, ГАТ-2/3, работая в обоих направлениях, является основным источником ГАМК в околосинаптическом пространстве, поддерживая концентрацию медиатора на уровне около 0,5 мкМ.

1м2Г 2

о§

вПСТ]

О П2-3 • П5-7

(п=10) (п=9)

1

О

1.5

1.0 -

0.5

ПО

1

[ГАМК], мкМ

[ГАМК], мкМ

Рис. 4. вПСТ у мышей возраста П2-3 и П5-7 при блокаде ГАТ-2/3 8МАР-5114. А. Средняя амплитуда вПСТь Б. Парное отношение.

В свою очередь ГАТ-1 регулирует локальную внеклеточную концентрацию ГАМК, поддерживая физиологически требуемую силу их передачи в ГАМК-эргических синапсах (Клпше К., Ктяйтк 8., 2006).

В следующей серии экспериментов на фоне SNAP-5114 (специфический блокатор ГАТ 2/3, 40 мкМ) и N0-711 (антагонист ГАТ-1, 10 мкМ) был апплицирован СОР55845 (блокатор ГАМКБ-рецепторов, 1 мкМ).

Из рис. 5 видно, что блокатор ГАМКБ-рецепторов значимо не повлиял ни на среднюю амплитуду вПСТ1; ни на парное отношение. Наблюдаемое уменьшение средней амплитуды вПСТ в присутствии блокатор ГАМК-транспортеров отражает тот факт, что ГАТ-1 обеспечивает поступление ГАМК для заполнения пресинаптических пузырьков (Кипке К., КтвсИик в., 2006).

Исходя из полученных результатов, можно сделать вывод о том, что активация ГАМКБ-рецепторов определяется главным образом активностью транспортеров ГАМК.

А

Контроль SNAP+NO SNAP+NO+CGP

Б В

к ■ I ,оЛ * * ^о ■ л пя

р0-5 I £ I

Г || " J

О У—1.М. о1-и™

О Контроль и БЫДР+ЫО ШвЫДР+ЫО+ССР

Рис. 5. Блокада ГАТ-1 и ГАТ-2/3 устраняет пресинаптическое ГАМКБ-рецепторно-опосредованное торможение. , А. Записи усредненных вПСТ, полученных путем парной стимуляции, Б. Средняя амплитуда вПСТ,,

В. Парное отношение. * - р<0,05 по сравнению с контролем.

Блокада транспортеров ГАМК

В присутствии N0-711 (антагонист ГАТ-1) и SNAP-5114 (блокатор ГАТ-2/3) были апплицированы различные концентрации ГАМК. Из рис. 6 видно, что 125 нм ГАМК значительно уменьшили среднюю амплитуду вПСТ, в П5-7, в то время как только 250 нм ГАМК смогли вызвать подобное снижение амплитуды вПСТ] у мышей возраста П2-3.

: t ö

0.5

[ГАМК]. мкМ

I

Б

вПСТ, ОП2-3 вП5-7 (п=6) (п=5)

t

{ {

~г

1

О

2,5 ■

2.0 •

1.0 -

1.5 -

-г^-1—■—I—.—г

fr 0,5 1

(ГАМК).мкМ

+

а. <

z

ю

ПО

!

Рис. 6. Влияние внешней ГАМК на вПСТ (А) и ПО (Б) у мышей возраста П2-3 и П5-7 на фоне блокады транспортеров ГАМК.

У мышей возраста П2-3 значения ПО значительно не отличались от контрольных в присутствии 250 нм ГАМК. У мышей возраста П5-7 значения парного отношения были одинаковы в контроле и в присутствии 125 нм ГАМК (рис. 6). Отсюда можно сделать вывод о том, что 250 и 125 нм внеклеточной ГАМК у мышей возраста П2-3 и П5-7, соответственно, имитируют контрольные значения концентрации внешней ГАМК, когда транспортеры ГАМК заблокированы.

Обобщая полученные результаты, можно констатировать, что концентрация ГАМК в маргинальной зоне неокортекса мышей равна 250 нМ у мышей возраста П2-3 и 125 нМ у мышей возраста П5-7, таким образом, снижаясь в течение первой недели после родов.

Блокада глутамат-декарбоксилазы и транспортеров ГАМК

Нельзя исключить вероятность того, что в дополнение к транспортерам другие механизмы вносят вклад в регуляцию концентрации внешней ГАМК. Для рассмотрения этой возможности, была выполнена дополнительная серия экспериментов с апликацией SNAP-5114 и NO-711 в присутствии МРА (блокатора ГАД - фермента, превращающего глутамат в ГАМК). Если действие предполагаемого источника ГАМК зависит от концентрации ГАМК в клетке, то следует ожидать отклонения от величин, полученных только в присутствии SNAP-

5114 и N0-711. Однако если неизвестный механизм высвобождения ГАМК зависит от внутриклеточной концентрации ГАМК, то количество внеклеточной ГАМК, требуемой для имитации контрольных значений в присутствии MP А с N0-711 и SNAP-51! 4 должно отличаться от значений, полученных в присутствии только N0-711 и SNAP-5114. Тем не менее, из рис. 7 видно, что апплицированные в присутствии МРА SNAP-5114 и N0-711 не повлияли на значения ПО (рис. 7 Б).

При аппликации различных концентраций ГАМК были получены следующие результаты: на фоне действия МРА уже 125 нм ГАМК значительно уменьшили среднюю амплитуду вПСТ! у мышей возраста П5-7, в то время как понадобилось 250 нМ для получения подобного результата у мышей возраста П2-3.

Таким образом, преинкубация среза с МРА не изменила экзогенные концентрации ГАМК, отражающие контрольные значения медиатора в присутствии SNAP-5114 и NO-711 (рис. 6), что доказывает отсутствие существования дополнительного механизма регуляции концентрации ГАМК в маргинальной зоне неокортекса.

Можно заключить, что внешняя концентрация ГАМК около ГАМК-эргических синапсов на клетках Кахаля-Ретциуса в маргинальной зоне неокортекса определена главным образом активностью ГАТ-2/3 и ГАТ-1 транспортеров и составляет приблизительно 250 и 125 нм в возрастной группе П2-3 и П5-7, соответственно.

М1^ ГТс

ЙО 1.0

С о.

jggj 0.8 § х

«3

Sa о Ö§

N t 8

вПСТ,

О П2-3 • П5-7

Сп=51 (п=5)

0,8

[ГАМК|. м«М

ПО

по 2.0 • 1.5 ■ О Z -fr а. < ж X to • i t f §

5 ----: 4.« . ----

f 1.0 ■ а Ii® л л" -УЛ~\-—

О 0.5

[ГАМК], мкМ

Рис. 7 вПСТ (А) и ПО (Б) у мышей возраста П2-3 и П5-7 при блокаде транспортеров ГАМК и глутамат-декарбоксилазы. Пунктиром - контрольные величины.

Выводы:

1. ГАМК-эргические волокна, образующие синапсы на поверхности клеток Кахаля-Ретциуса, локализованы преимущественно в маргинальной зоне неокортекса и расположены параллельно поверхности мягкой мозговой оболочки.

2. Концентрации ГАМК до 2,5 мкМ не вызывают десенситизации постсинаптических ГАМКА-рецепторов.

3. Внешняя концентрация ГАМК в маргинальной зоне некортекса определяется главным образом активностью ГАТ-2/3 и ГАТ-1 транспортеров.

4. Концентрация ГАМК в маргинальной зоне развивающегося неокортекса мышей составляет 250 нМ на 2-3 день и 125 нМ на 5-7 день постнатального развития.

5. Внеклеточная концентрация ГАМК в маргинальной зоне развивающейся коры снижается в течение первой недели после родов. Биологический смысл этого явления, по-видимому, заключается в устранении стоп-сигнала для мигрирующих в зону неокортекса клеток.

Практические рекомендации

Основные положения и выводы, приведенные в диссертационной работе, целесообразно использовать в научно-исследовательских лабораториях, в которых проводится изучение развития коры головного мозга и, в частности, осуществляется поиск веществ для фармакологической коррекции нарушений, возникающих в процессе кортикогенеза.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Dvorzhak A., Myakhar О., Kamkin A., Kirmse К., Kirischuk S. Postsynaptically different inhibitory postsynaptic currents in Cajal-Retzius cells in the developing neocortex. Neuroreport. 2008; 19(12):1213-1216.

2. Myakhar O., Dvorzhak A. & Kirischuk S. Postsynaptic characterization of two GABAergic inputs to Cajal-Retzius cells in the mouse neocortex. 6th Forum European Neuroscience, Geneva, Switzerland. FENS 2008; Abstr., vol.4, 011.17.

3. Dvorzhak A., Myakhar O., Unichenko P., Kirmse K., Kirischuk S. Estimation of ambient GABA levels in layer I of the mouse neonatal cortex in brain slices. J Physiol. 2010; 588(Pt 13):2351-2360.

4. Дворжак А.Ю., Лысенко H.H., Мяхар O.JL, Камкин А.Г. ГАМК-эргическая синаптическая регуляция входов на клетки Кахаля-Ретциуса в неокортексе у мышей. Вестник РГМУ. 2010; №4: 67-71.

5. Unichenko P., Myakhar О., Dvorzhak А. & Kirischuk S. Estimation of ambient GABA levels in layer I of the mouse neonatal cortex in brain slices. 7th Forum European Neuroscience, Amsterdam, Netherlands. FENS 2010; Abstr., vol.5,104.27.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Мяхар, Ольга Леонидовна

Содержание.

Список использованных сокращений.

Введение.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование регуляции внеклеточной ГАМК в первом слое неокортекса у мышей в ранний постнатальный период"

Цель и задачи исследования.10

Научная новизна работы.11

Теоретическая и практическая значимость результатов исследования.12

Апробация работы.13

Структура и объем работы.13

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Мяхар, Ольга Леонидовна

Выводы

1. ГАМК-эргические волокна, образующие синапсы на поверхности клеток Кахаля-Ретциуса, локализованы преимущественно в маргинальной зоне неокортекса и расположены параллельно поверхности мягкой мозговой оболочки.

2. Концентрации ГАМК до 2,5 мкМ не вызывают десенситизации постсинаптических ГАМКл-рецепторов.

3. Внешняя концентрация ГАМК в маргинальной зоне некортекса определяется главным образом активностью ГАТ-2/3 и ГАТ-1 транспортеров.

4. Концентрация ГАМК в маргинальной зоне развивающегося неокортекса мышей составляет 250 нМ на 2-3 день и 125 нМ на 5-7 день постнатального развития.

5. Внеклеточная концентрация ГАМК в маргинальной зоне развивающейся коры снижается в течение первой недели после родов. Биологический смысл этого явления, по-видимому, заключается в устранении стоп-сигнала для мигрирующих в зону неокортекса клеток.

Заключение

На сегодняшний день микродиализ стал часто используемым методом для изучения внеклеточной концентрации нейромедиаторов в определенных участках живого мозга (Ungerstedt, 1991; фургон der Zeyden и др., 2008). Однако, внеклеточные уровни ГАМК, измеренные с использованием этой технологии, демонстрируют сильную вариабельность, даже если внеклеточная жидкость была забрана из той же области (например, в гиппокампе разброс составляет от нескольких нМ до нескольких мкМ (Lerma и др., 1986; Biggs и др., 1992; Rowley и др., 1995; Rakovska и др., 1998)). И, поскольку размер забираемой пробы является относительно большим (обычно -250 мкм в диаметре), нельзя исключить то, что наблюдаемая вариабельность внешней концентрации ГАМК является также следствием повреждения ткани. Например, при изучении методом микродиализа уровней концентрации внеклеточного глутамата сообщались цифры района 1-4 мкМ (Lerma и др., 1986; Baker и др., 2002), в то время как измерения, выполненные в острых срезах мозга продемонстрировали намного более низкую внеклеточную концентрацию глутамата (Cavelier и Attwell, 2005; Herman М. и Jahr С., 2007).

Кроме микродиализа альтернативно использовались так называемые «sniffer cells», то есть ненейрональная клеточная линия, экспрессирующая высокоафинные рецепторы ГАМКд для измерения внешней концентрации ГАМК. При использовании этого подхода, концентрация нейромедиатора в корковых органотипичных культурах и остро подготовленных срезах от эмбрионов мышей Е14.5, как сообщалось, была равна приблизительно 0,5 jiM (Cuzon и др., 2006). Пространственное решение этого метода определялось "размером" «sniffer cells». Но и здесь есть свои минусы. Так, например, концентрация ГАМК могла быть измерена только у поверхности среза и полученные величины определенно могут значительно отличаться от ее концентрации в глубине среза.

Таким образом, оба метода обладают своими плюсами и минусами, однако ни один из них на данный момент не может дать точный ответ, на вопрос об уровне изменений внеклеточной концентрации ГАМК вблизи синаптического пространства на ранних стадиях развития неокортекса

В данном же исследовании было предложено использовать пресинаптические метаботропные ГАМКБ-рецепторы, как датчик внешней концентрации ГАМК в маргинальной зоне развивающейся коры. И было показано, что концентрация нейромедиатора вблизи ГАМК-эргических синапсов на клетках Кахаля-Ретциуса составляет приблизительно 250 нМ во 2-3 дни после родов (П2-3) и уменьшается до 125 нМ к 5-7 дням после родов. Таким образом, экспериментально подтверждено то, что внеклеточная концентрация ГАМК в 1 слое развивающейся коры значительно снижается в течение первой недели после родов.

Таким образом, нами впервые была с высокой степенью точности измерена внеклеточная концентрация медиатора в первом слое неокортекса, что дает ученым почву для дальнейших исследований механизмов миграции и дифференцировки нервных клеток. А, в свою очередь, сведения о различии вне- и внутриклеточных концентраций ГАМК, а так же о динамике их изменения на протяжении пре- и постнатального развития могут помочь в дальнейшем нейрофизиологам в решении важных задач исследования нарушений кортикогенеза на ранних стадиях развития организма.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Мяхар, Ольга Леонидовна, Москва

1. Козлов В.И., Т. А. Цехмистренко //"Анатомия нервной системы"// М.: Мир: ООО «Издательство ACT», 2004. 206, 2. с: ил.

2. Обухов Д.К. //"Современные представления о развитии, структуре и эволюции неокортекса конечного мозга млекопитающих животных и человека"// Вопросы морфологии XXI века; 2008; Выпуск 1; Стр 200-222

3. Семьянов А.В. //"Диффузная внесинаптическая нейропередача посредством глутамата и ГАМК"//Журнал высшей нервной деятельности им.И.П.Павлова; 2004; N 1; Стр. 68-84

4. Тимофеев И., 2007 //" Тканевой микродиализ: принципы и клиническое применение метода в интенсивной терапии"// Журнал Интенсивная Терапия; 2007 г.; №1

5. Agmon A, Hollrigel G, O'Dowd DK. //"Functional GABAergic synaptic connection in neonatal mouse barrel cortex.»// J. Neurosci.; Aug. 1996; Том 16(15); Стр. 4684-95.

6. Allendoerfer К. L. и Shatz С. J. //"The subplate, a transient neocortical structure: its role in the development of connections between thalamus and cortex"//Annu. Rev. Neurosci.; 1994; Том 17; Стр.185-218.

7. Angevine J. В., Jr. и Sidman R. L. //"Autoradiographic study of cell migration during histogenesis of cerebral cortex in the mouse"// Nature; Nov. 1961; Том 192 Стр.766-768.

8. Anwyl R. //"Modulation of vertebrate neuronal calcium channels by transmitters."//Brain Res. Rev.; Sep.-Dec. 1991; Том 16(3); Стр. 265-81.

9. Artola A, Singer W. //"Long-term potentiation and NMDA receptors in rat visual cortex."//Nature; Dec. 1987; Том 330(6149); Стр. 649-52.

10. Asay MJ, Boyd SK.//"Characterization of the binding of 3HJCGP54626 to GABAB receptors in the male bullfrog (Rana catesbeiana).»// Brain Res.; Jun. 2006; Tom 1094(1); Стр. 76-85.

11. Attwell D, Barbour B, Szatkowski M. //"Nonvesicular release of neurotransmitter."//Neuron; Sep. 1993; Том 11(3); Стр. 401-7.

12. Auld D. S. и Robitaille R. //"Glial cells and neurotransmission: an inclusive view of synaptic function"// Neuron; Oct. 2003; Том 40(2); Стр.389-400.

13. Baker DA, Xi ZX, Shen H, Swanson CJ, Kalivas PW. //"The origin and neuronal function of in vivo nonsynaptic glutamate.»// J. Neurosci.; Oct. 2002; Tom 22(20); Стр. 9134-41.

14. Barakat L, Bordey A. //"GAT-1 and reversible GABA transport in Bergmann glia in slices."// J. Neurophysiol.; Sep. 2002; Том 88(3); Стр. 1407-19.

15. Beaulieu С. //"Numerical data on neocortical neurons in adult rat, with special reference to the GABA population.»// Brain Res.; Apr. 1993; Том 609(1-2); Стр. 284-92.

16. Behar Т. N., Li Y. X., Tran H. Т., Ma W., Dunlap V., Scott С., и Barker J. L. //"GABA stimulates chemotaxis and chemokinesis of embryonic cortical neurons via calcium-dependent mechanisms"// J. Neurosci.; Mar. 1996; Том 16(5); Стр.1808-1818.

17. Behar TN, Schafftier AE, Scott CA, Greene CL, Barker JL. //"GABA receptor antagonists modulate postmitotic cell migration in slice cultures of embryonic rat cortex.»// Cereb. Cortex; Sep. 2000; Том 10(9); Стр. 899-909.

18. Behar TN, Smith SV, Kennedy RT, McKenzie JM, Marie I, Barker JL. //"GABA(B) receptors mediate motility signals for migrating embryonic cortical cells.»//Cereb. Cortex; Aug. 2001; Том 11(8); Стр. 744-53.

19. Belan PV, Kostyuk PG. //"Glutamate-receptor-induced modulation of GABAergic synaptic transmission in the hippocampus."// Pflugers. Arch.; May 2002; Tom 444(1-2); Стр. 26-37.

20. Belichenko P. V., Vogt Weisenhorn D. M., Myklossy J., и Celio M. R. //"Calretinin-positive Cajal-Retzius cells persist in the adult human neocortex"// Neuroreport; Oct. 1995; Том 6(14); Стр. 1869-1874.

21. Ben-Ari Y., Khazipov R., Leinekugel X., Caillard О., и Gaiarsa J. L. //"GABAA, NMD A and AMP A receptors: a developmentally regulated 'menage a trois"'// Tr Luhmann ends Neurosci.; Nov. 1997; Том 20(11); Стр.523-529.

22. Berry M. и Rogers A. W. //"The migration of neuroblasts in the developing cerebral cortex"//J. Anat.; Oct. 1965; Том 99(Pt 4); Стр.691-709.

23. Biggs CS, Pearce BR, Fowler LJ, Whitton PS. //"The effect of sodium valproate on extracellular GAB A and other amino acids in the rat ventral hippocampus: an in vivo microdialysis study.»// Brain Res.; Oct. 1992; Том 594(1); Стр. 13842.

24. Blatow M, Rozov A, Katona I, Hormuzdi SG, Meyer AH, Whittington MA, Caputi A, Monyer H. //"A novel network of multipolar bursting interneurons generates theta frequency oscillations in neocortex.»// Neuron; Jun. 2003 5; Том 38(5); Стр. 805-17.

25. Bormann J, Feigenspan A. //"GABAC receptors."// Trends Neurosci.; Dec. 1995; Том 18(12); Стр. 515-9.

26. Bormann J, Hamill OP, Sakmann B. //"Mechanism of anion permeation through channels gated by glycine and gamma-aminobutyric acid in mouse cultured spinal neurones."// J Physiol.; Apr. 1987; Том 385; Стр. 243-86.

27. Bowery NG, Enna SJ. //"gamma-aminobutyric acid(B) receptors: first of the functional metabotropic heterodimers.»// J. Pharmacol. Exp. Ther.; Jan. 2000; Tom 292(1); Стр. 2-7.

28. Brown Т. H., Wong R. К., и Prince D. A. //"Spontaneous miniature synaptic potentials in hippocampal neurons"// Brain Res.; Nov. 1979; Том 177(1); Стр. 194-199.

29. Buzsaki G, Chrobak JJ. //"Temporal structure in spatially organized neuronal ensembles: a role for interneuronal networks."// Curr. Opin. Neurobiol.; Aug. 1995; Tom 5(4); Стр. 504-10.

30. Cavelier P, Attwell D. //"Tonic release of glutamate by a DIDS-sensitive mechanism in rat hippocampal slices.»// J. Physiol.; Apr. 2005; Том 564(Pt 2); Стр. 397-410.

31. Chan CH, Yeh HH. //"Enhanced GABA(A) receptor-mediated activity following activation of NMDA receptors in Cajal-Retzius cells in the developing mouse neocortex.»// J. Physiol.; Jul. 2003; Том 550(Pt 1); Стр. 10311.

32. Cheng Q, Yeh PW, Yeh HH. //"Cajal-Retzius cells switch from expressing gamma-less to gamma-containing GABA receptors during corticogenesis.»// Eur. J. Neurosci.; Oct 2006; Том 24(8); Стр. 2145-51.

33. Cherubini E, Conti F. //"Generating diversity at GABAergic synapses.»// Trends Neurosci.; Mar. 2001; Том 24(3); Стр. 155-62.

34. Chu DC, Albin RL, Young AB, Penney JB. //"Distribution and kinetics of GABAB binding sites in rat central nervous system: a quantitative autoradiographic study.»//Neuroscience; 1990; Том 34(2); Стр. 341-57.

35. Connors В. W. и Prince D. A. //"Effects of local anesthetic QX-314 on the membrane properties of hippocampal pyramidal neurons"// J. Pharmacol. Exp. Ther.; Mar. 1982; Том 220(3); Стр.476-481.

36. Conti F., Minelli А., и Melone M. //"GABA transporters in the mammalian cerebral cortex: localization, development and pathological implications"// Brain Res. Rev.; July 2004; Том 45(3); Стр. 196-212.

37. Courchesne E., Pierce K., Schumann С. M., Redcay E., Buckwalter J. A., Kennedy D. P., и Morgan J. //"Mapping early brain development in autism"// Neuron; Oct. 2007; Том 56(2); Стр.399-413.

38. Coyle JT, Enna SJ. //"Neurochemical aspects of the ontogenesis of GABAnergic neurons in the rat brain.»// Brain Res.; Jul. 1976; Том 111(1); Стр. 119-33.

39. Coyle JT. //"Development of neurotransmitters in the neocortex.»// Neurosci. Res. Program. Bull.; Apr. 1982; Том 20(4); Стр. 479-91.

40. Cuzon VC, Yeh PW, Cheng Q, Yeh HH. //"Ambient GABA promotes cortical entry of tangentially migrating cells derived from the medial ganglionic eminence.»// Cereb. Cortex; Oct. 2006; Том 16(10); Стр. 1377-88.

41. Dammerman R. S., Flint A. C., Noctor S., и Kriegstein A. R. //"An excitatory GABAergic plexus in developing neocortical layer 1"// J. Neurophysiol.; July 2000; Tom 84(1); Стр.428-434.

42. D'Arcangelo G. //"Apoer2: a reelin receptor to remember"// Neuron; Aug. 2005; Tom 47(4); Стр.471-473.

43. D'Arcangelo G., Miao G. G., Chen S. C., Soares H. D., Morgan J. I., и Curran T. //"A protein related to extracellular matrix proteins deleted in the mouse mutant reeler"// Nature; Apr. 1995; Том 374(6524); Стр.719-723.

44. Del Rio J. A., Sole M., Borrell V., Martinez А., и Soriano E. //"Involvement of Cajal-Retzius cells in robust and layer-specific regeneration of the entorhino-hippocampal pathways"// Eur. J. Neurosci.; June 2002; Том 15(12); Стр. 18811890.

45. Derer P. и Derer M. //"Cajal-Retzius cell ontogenesis and death in mouse brain visualized with horseradish peroxidase and electron microscopy"// Neuroscience; 1990; Том 36(3); Стр.839-856.

46. Dingledine R, Korn SJ. //"Gamma-aminobutyric acid uptake and the termination of inhibitory synaptic potentials in the rat hippocampal slice.»// J. Physiol.; Sep. 1985; Том 366; Стр. 387-409.

47. Dvorzhak A., Myakhar O., Kamkin A., Kirmse К., и Kirischuk S. //"Postsynaptically different inhibitory postsynaptic currents in Cajal-Retzius cells in the developing neocortex"// Neuroreport; Aug. 2008; Том 19(12); Стр.1213-1216.

48. Erlander MG, Tillakaratne NJ, Feldblum S, Patel N, Tobin AJ.//"Two genes encode distinct glutamate decarboxylases."//Neuron; Jul. 1991; Том 7(1); Стр. 91-100.

49. Fatemi SH. //"Reelin mutations in mouse and man: from reeler mouse to schizophrenia, mood disorders, autism and lissencephaly.»// Mol. Psychiatry; Mar. 2001; Том 6(2); Стр. 129-33.

50. Fon EA, Edwards RH. //"Molecular mechanisms of neurotransmitter release.»// Muscle Nerve; May 2001; Том 24(5); Стр. 581-601.

51. Friauf E. и Shatz C. J. //"Changing patterns of synaptic input to subplate and cortical plate during development of visual cortex"// J. Neurophysiol.; Dec. 1991; Tom 66(6); Стр.2059-2071.

52. Friauf E., McConnell S. К., и Shatz C. J. //"Functional synaptic circuits in the subplate during fetal and early postnatal development of cat visual cortex"// J. Neurosci.; Aug. 1990; Том 10(8); Стр.2601-2613.

53. Galarreta M, Hestrin S. //"Properties of GAB A A receptors underlying inhibitory synaptic currents in neocortical pyramidal neurons."// J Neurosci.; Oct. 1997; Tom 17(19); Стр. 7220-7.

54. Gaspary HL, Wang W, Richerson GB. //"Carrier-mediated GABA release activates GABA receptors on hippocampal neurons."// J. Neurophysiol.; Jul. 1998; Tom 80(1); Стр. 270-81.

55. Ghosh А. и Shatz C. J. //"Involvement of subplate neurons in the formation of ocular dominance columns"// Science; Mar. 1992; Том 255(5050); Стр.14411443.

56. Glezer 1.1., Hof P. R., и Morgane P. J. //"Calretinin-immunoreactive neurons in the primary visual cortex of dolphin and human brains"// Brain Res.; Nov. 1992; Tom 595(2); Стр.181-188.

57. Hanganu I. L., Kilb W., и Luhmann H. J. //"Functional synaptic projections onto subplate neurons in neonatal rat somatosensory cortex"// J. Neurosci.; Aug. 2002; Том 22(16); Стр.7165-7176.

58. Hansen GH, Belhage B, Schousboe A, Meier E. //"Temporal development of GABA agonist induced alterations in ultrastructure and GABA receptor expression in cultured cerebellar granule cells."// Int. J. Dev. Neurosci.; 1987; Tom 5(3); Стр. 263-9.

59. Hatten ME. //"Central nervous system neuronal migration."// Annu Rev. Neurosci.; 1999; Том 22; Стр. 511-39.

60. Haydar TF, Wang F, Schwartz ML, Rakic P. //"Differential modulation of proliferation in the neocortical ventricular and subventricular zones.»// J. Neurosci.; Aug. 2000; Том 20(15); Стр. 5764-74.

61. Heck N, Kilb W, Reiprich P, Kubota H, Furukawa T, Fukuda A, Luhmann HJ. //"GABA-A receptors regulate neocortical neuronal migration in vitro and in vivo."// Cereb Cortex.; Jan 2007; Том 17(1); Стр. 138-48.

62. Hendry SH, Schwark HD, Jones EG, Yan J. //"Numbers and proportions of GABA-immunoreactive neurons in different areas of monkey cerebral cortex.»//J. Neurosci.; May 1987; Том 7(5); Стр. 1503-19.

63. Herman MA, Jahr CE. //"Extracellular glutamate concentration in hippocampal slice."//J. Neurosci.; Sep. 2007; Том 27(36); Стр. 9736-41.

64. Hestrin S. и Armstrong W. E. //"Morphology and physiology of cortical neurons in layer 17/ J. Neurosci.; Sept. 1996; Том 16(17); Стр.5290-5300.

65. Hevner R. F., Neogi Т., Englund C., Daza R. А., и Fink A. //"Cajal-Retzius cells in the mouse: transcription factors, neurotransmitters, and birthdays suggest a pallial origin"// Brain Res. Dev. Brain Res.; Mar. 2003; Том 141(1-2); Стр.39-53.

66. Hill DR, Bowery NG, Hudson AL. //"Inhibition of GABAB receptor binding by guanyl nucleotides."//J. Neurochem.; Mar. 1984; Том 42(3); Стр. 652-7.

67. Huntley GW, Hendry SH, Killackey HP, Chalupa LM, Jones EG. //"Temporal sequence of neurotransmitter expression by developing neurons of fetal monkey visual cortex.»//Brain Res.; Sep. 1988; Том 471(1); Стр. 69-96.

68. Hutchinson PJ, O'Connell MT, al-Rawi PG, Kett-White R, Gupta AK, Kirkpatrick PJ, Pickard JD.//"Clinical cerebral microdialysis-determining the true extracellular concentration."// Acta Neurochir Suppl.; 2002; Том 81; Стр. 359-62.

69. Jacob TC, Moss SJ, Jurd R. //"GABA(A) receptor trafficking and its role in the dynamic modulation of neuronal inhibition.»// Nat. Rev. Neurosci.; May 2008; Tom 9(5); Стр. 331-43.

70. Jones E. G. //"Cortical development and thalamic pathology in schizophrenia"// Schizophr. Bull; 1997; Том 23(3); Стр.483-501.

71. Kaila К. //"Ionic basis of GABAA receptor channel function in the nervous system."//Prog Neurobiol.; Mar. 1994; Том 42(4); Стр. 489-537.

72. Kavanaugh MP, Arriza JL, North RA, Amara SG. //"Electrogenic uptake of gamma-aminobutyric acid by a cloned transporter expressed in Xenopus oocytes."// J. Biol. Chem.; Nov. 1992 5; Том 267(31); Стр. 22007-9.

73. Kerjan G. и Gleeson J. G. //"A missed exit; Стр. Reelin sets in motion Dabl polyubiquitination to put the break on neuronal migration"// Genes Dev.; Nov. 2007; Tom 21(22); Стр.2850-2854.

74. Keynan S, Kanner BI. //"gamma-Aminobutyric acid transport in reconstituted preparations from rat brain: coupled sodium and chloride fluxes."// Biochemistry; Jan. 1988; Том 12;27(1); Стр. 12-7.

75. Khazipov R, Esclapez M, Caillard O, Bernard C, Khalilov I, Tyzio R, Hirsch J, Dzhala V, Berger В и Ben-Ari Y. //"Early development of neuronal activity in the primate hippocampus in utero."// J Neurosci.; Dec 2001 Том 21(24); Стр. 9770-81.

76. Kilb W. и Luhmann H. J. //"Characterization of a hyperpolarization-activated inward current in Cajal-Retzius cells in rat neonatal neocortex"// J. Neurophysiol.; Sept. 2000; Том 84(3); Стр.1681-1691.

77. Kilb W. и Luhmann H. J. //"Spontaneous GABAergic postsynaptic currents in Cajal-Retzius cells in neonatal rat cerebral cortex"// Eur. J. Neurosci.; Apr. 2001; Tom 13(7); Стр.1387-1390.

78. Kilb W., Ikeda M., Uchida K., Okabe A., Fukuda А., и Luhmann H. J. //"Depolarizing glycine responses in Cajal-Retzius cells of neonatal rat cerebral cortex"//Neuroscience; 2002; Том 112(2); Стр.299-307.

79. Kinney GA, Spain WJ. //"Synaptically evoked GABA transporter currents in neocortical glia.7/ J. Neurophysiol.; Dec. 2002; Том 88(6); Стр. 2899-908.

80. Kinney GA. //"GAT-3 transporters regulate inhibition in the neocortex.»// J. Neurophysiol.; Dec. 2005; Том 94(6); Стр. 4533-7.

81. Kirmse К. и Kirischuk S. //"Ambient GABA constrains the strength of GABAergic synapses at Cajal-Retzius cells in the developing visual cortex"// J. Neurosci.; Apr. 2006a; Том 26(16); Стр.4216-4227.

82. Kirmse К. и Kirischuk S. //"Ambient GABA constrains the strength of GABAergic synapses at Cajal-Retzius cells in the developing visual cortex"// J. Neurosci.; Apr. 2006b; Том 26(16); Стр. 4216-4227.

83. Kirmse К. и Kirischuk S. //"N-ethylmaleimide increases release probability at GABAergic synapses in layer I of the mouse visual cortex"// Eur. J. Neurosci.; Nov. 2006c; Том 24(10); Стр. 2741-2748.

84. Kirmse К., Dvorzhak A., Henneberger C., Grantyn R., и Kirischuk S. //"Cajal Retzius cells in the mouse neocortex receive two types of pre- and postsynaptically distinct GABAergic inputs"// J. Physiol; Dec. 2007b; Том 585(Pt 3); Стр.881-895.

85. Kirmse К., Grantyn R., и Kirischuk S. //"Developmental downregulation of low-voltage-activated Ca2+ channels in Cajal-Retzius cells of the mouse visual cortex"// Eur. J. Neurosci.; June 2005; Том 21(12); Стр.3269-3276.

86. Kolk S. M., Whitman M. С., Yun М. Е., Shete Р., и Donoghue М. J. //"А unique subpopulation of Tbrl-expressing deep layer neurons in the developing cerebral cortex"// Mol. Cell Neurosci.; Dec. 2005; Том 30(4); Стр.538-551.

87. Kostovic I. и Rakic P. //"Developmental history of the transient subplate zone in the visual and somatosensory cortex of the macaque monkey and human brain"// J. Comp Neurol.; July 1990; Том 297(3); Стр.441-470.

88. Kriegstein AR. //"Constructing circuits: neurogenesis and migration in the developing neocortex.»//Epilepsia; 2005; Том 46; Стр. 15-21.

89. Krnjevic К. //"Role of GABA in cerebral cortex."// Can J Physiol Pharmacol.; May 1997; Том 75(5); Стр. 439-51.

90. Kullmann DM, Semyanov A. //"Glutamatergic modulation of GABAergic signaling among hippocampal interneurons: novel mechanisms regulating hippocampal excitability.»//Epilepsia; 2002; Том 43; Стр. 174-8.

91. Laming PR, Kimelberg H, Robinson S, Salm A, Hawrylak N, Miiller C, Roots B, Ng K. //"Neuronal-glial interactions and behaviour."// Neurosci. Biobehav. Rev.; May 2000; Том 24(3); Стр. 295-340.

92. Lauder J. M., Han V. K., Henderson P., Verdoorn Т., и Towle A. C. //"Prenatal ontogeny of the GABAergic system in the rat brain: an immunocytochemical study"//Neuroscience; Oct. 1986; Том 19(2); Стр.465493.

93. Letinic К., Zoncu R., и Rakic P. //"Origin of GABAergic neurons in the human neocortex"// Nature; June 2002; Том 417(6889); Стр.645-649.

94. Leventer R. J., Guerrini R., и Dobyns W. B. //"Malformations of cortical development and epilepsy"// Dialogues. Clin. Neurosci.; 2008; Том 10(1); Стр.47-62.

95. Lin С. S., Nicolelis M. A., Schneider J. S., и Chapin J. K. //"A major direct GABAergic pathway from zona incerta to neocortex"// Science; June 1990; Tom 248(4962); Стр.1553-1556.

96. Liron Z, Wong E, Roberts E. //"Studies on uptake of gamma-aminobutyric acid by mouse brain particles; toward the development of a model.»// Brain Res.; Mar. 1988; Том 444(1); Стр. 119-32.

97. Loo DD, Eskandari S, Boorer KJ, Sarkar HK, Wright EM. //"Role of CI- in electrogenic Na+-coupled cotransporters GAT1 and SGLT1."// J. Biol. Chem.; Dec. 2000; Том 275(48); Стр. 37414-22.

98. LoTurco JJ, Blanton MG, Kriegstein AR. //"Initial expression and endogenous activation of NMD A channels in early neocortical development.»// J. Neurosci.; Mar. 1991; Том 11(3); Стр. 792-9.

99. LoTurco JJ, Owens DF, Heath MJ, Davis MB, Kriegstein AR. //"GABA and glutamate depolarize cortical progenitor cells and inhibit DNA synthesis.»// Neuron.; Dec. 1995; Том 15(6); Стр. 1287-98.

100. Luhmann H. J., Hanganu I., и Kilb W. //"Cellular physiology of the neonatal rat cerebral cortex"// Brain Res. Bull.; May 2003; Том 60(4); Стр.345-353.

101. Marin-Padilla M. //"Cajal-Retzius cells and the development of the neocortex"// Trends Neurosci.; Feb. 1998; Том 21(2); Стр.64-71.

102. Marin-Padilla M. //"Dual origin of the mammalian neocortex and evolution of the cortical plate"// Anat. Embryol.; (Berl); Feb. 1978; Том 152(2); Стр.109126.

103. McCormick D., Wang Z., Huguenard J. //"Neurotransmitter control of neocortical neuronal activity and excitability.McCormick DA, Wang Z, Huguenard J."// Cereb Cortex.; Sep.-Oct. 1993; Том 3(5); Стр. 387-98.

104. Mellor JR, Randall AD. //"Frequency-dependent actions of benzodiazepines on GABAA receptors in cultured murine cerebellar granule cells."// J. Physiol.; Sep. 1997; Том 503; Стр. 353-69.

105. Meyer G. //"Genetic control of neuronal migrations in human cortical development"// Adv. Anat. Embryol. Cell Biol.; 2007; Том189.

106. Meyer G., Perez-Garcia C. G., Abraham H., и Caput D. //"Expression of p73 and Reelin in the developing human cortex"// J. Neurosci.; June 2002; Том 22(12); Стр.4973-4986.

107. Meyer G., Wahle P., Castaneyra-Perdomo А., и Ferres-Torres R. //"Morphology of neurons in the white matter of the adult human neocortex"// Exp. Brain Res.; 1992; Том 88(1); Стр.204-212.

108. Mienville J. M. //"Persistent depolarizing action of GABA in rat Cajal-Retzius cells"//J. Physiol.; Nov. 1998a; Том 512 ( Pt 3) Стр.809-817.

109. Mienville J. M. и Pesold C. //"Low resting potential and postnatal upregulation of NMDA receptors may cause Cajal-Retzius cell death"// J. Neurosci.; Mar. 1999; Том 19(5); Стр.1636-1646.

110. Mienville J. M., Marie I., Marie D., и Clay J. R. //"Loss of IA expression and increased excitability in postnatal rat Cajal-Retzius cells"// J. Neurophysiol.; Sept. 1999; Том 82(3); Стр. 1303-1310.

111. Mikkonen M., Soininen H., и Pitkanen A. //"Distribution of parvalbumin-, calretinin-, and calbindin-D28k-immunoreactive neurons and fibers in the human entorhinal cortex"// J. Comp Neurol.; Nov. 1997; Том 388(1); Стр.6488.

112. Minelli A, Brecha NC, Karschin C, DeBiasi S, Conti F. //"GAT-1, a high-affmity GABA plasma membrane transporter, is localized to neurons and astroglia in the cerebral cortex."// J. Neurosci.; Nov. 1995; Том 15(11); Стр. 7734-46.

113. Mintz IM, Bean BP. //"GABAB receptor inhibition of P-type Ca2+ channels in central neurons."//Neuron; May 1993; Том 10(5); Стр. 889-98.

114. Molliver M. E., Kostovic I., и van der L. H. //"The development of synapses in cerebral cortex of the human fetus"// Brain Res.; Feb. 1973; Том 50(2); Стр.403-407.

115. Mrzljak L., Uylings H. В., Kostovic I., и Van Eden C. G. //"Prenatal development of neurons in the human prefrontal cortex: I. A qualitative Golgi study"//J. Сотр. Neurol.; May 1988; Том 271(3); Стр.3,55-386.

116. Nadarajah В, Parnavelas JG. //"Modes of neuronal migration in the developing cerebral cortex.»// Nat. Rev. Neurosci.; Jun. 2002; Том 3(6); Стр. 423-32.

117. Owens D. F. и Kriegstein A. R. //"Is there more to GAB A than synaptic inhibition?"//Nat. Rev. Neurosci.; Sept. 2002; Том 3(9); Стр.715-727.

118. Owens D. F., Liu X., и Kriegstein A. R. //"Changing properties of GABA(A) receptor-mediated signaling during early neocortical development"// J. Neurophysiol.; Aug. 1999; Том 82(2); Стр.570-583.

119. Owens D. F., Liu X., и Kriegstein A. R. //"Changing properties of GABA(A) receptor-mediated signaling during early neocortical development"// J. Neurophysiol.; Aug. 1999; Том 82(2); Стр.570-583.

120. Owens DF, Boyce LH, Davis MB, Kriegstein AR. //"Excitatory GABA responses in embryonic and neonatal cortical slices demonstrated by gramicidin perforated-patch recordings and calcium imaging.»// J. Neurosci.; Oct. 1996; Tom 16(20); Стр. 6414-23.

121. Pearlman AL, Faust PL, Hatten ME, Brunstrom JE. //"New directions for neuronal migration.»// Curr. Opin. Neurobiol.; Feb. 1998; Том 8(1); Стр. 4554.

122. Pozas E, Paco S, Soriano E, Aguado F. //"Cajal-Retzius cells fail to trigger the developmental expression of the CI- extruding co-transporter KCC2.»// Brain Res.; Nov. 2008; Том 1239; Стр. 85-91.

123. Radian R, Kanner BI. //"Stoichiometry of sodium- and chloride-coupled gamma-aminobutyric acid transport by synaptic plasma membrane vesicles isolated from rat brain."// Biochemistry; Mar. 1983; Том 1;22(5); Стр. 123641.

124. Radnikow G., Feldmeyer D., и Lubke J. //"Axonal projection, input and output synapses, and synaptic physiology of Cajal-Retzius cells in the developing rat neocortex"// J. Neurosci.; Aug. 2002; Том 22(16); Стр.69086919.

125. Rakic P. //"Elusive radial glial cells: historical and evolutionary perspective"// Glia; July 2003; Том 43(1); Стр.19-32.

126. Rakic P. //"Neurons in rhesus monkey visual cortex: systematic relation between time of origin and eventual disposition"// Science; Feb. 1974; Том 183(123); Стр.425-427.

127. Rakic S. и Zecevic N. //"Emerging complexity of layer I in human cerebral cortex"// Cereb. Cortex; Oct. 2003b; Том 13(10); Стр. 1072-1083.

128. Rakovska A, Giovannini MG, Delia Corte L, Kalfin R, Bianchi L, Pepeu G. //"Neurotensin modulation of acetylcholine and GABA release from the rat hippocampus: an in vivo microdialysis study.»// Neurochem. Int.; Oct. 1998; Tom 33(4); Стр. 335-40.

129. Rea K, Cremers TI, Westerink ВН. //"HPLC conditions are critical for the detection of GABA by microdialysis."// J. Neurochem.; Aug. 2005; Том 94(3); Стр. 672-9.

130. Represa A., Ben-Ari Y. //"Trophic actions of GABA on neuronal development."// Trends Neurosci.; Jun. 2005; Том28(6); Стр. 278-83.

131. Rice D. S. и Curran T. //"Role of the reelin signaling pathway in central nervous system development"// Annu. Rev. Neurosci.; 2001; Том 24; Стр.1005-1039.

132. Richerson GB, Wu Y. //"Dynamic equilibrium of neurotransmitter transporters: not just for reuptake anymore.»// J. Neurophysiol; Sep. 2003; Том 90(3); Стр. 1363-74.

133. Rossi DJ, Hamann M, Attwell D. //"Multiple modes of GABAergic inhibition of rat cerebellar granule cells."// J. Physiol.; Apr.2003 1; Том 548; Стр. 97-110.

134. Rowley HL, Martin KF, Marsden CA. //"Determination of in vivo amino acid neurotransmitters by high-performance liquid chromatography with o-phthalaldehyde-sulphite derivatisation.»// J. Neurosci. Methods; Mar. 1995; Tom 57(1); Стр. 93-9.

135. Scanziani M. //"GABA spillover activates postsynaptic GABA(B) receptors to control rhythmic hippocampal activity.»// Neuron.; 2000 Mar;25(3); Стр. 673-81.

136. Schwartz Т. H., Rabinowitz D., Unni V., Kumar V. S., Smetters D. K., Tsiola А., и Yuste R. //"Networks of coactive neurons in developing layer 1"// Neuron; Mar. 1998; Том 20(3); Стр.541-552.

137. Schwartz-Bloom RD, Sah R. //"gamma-Aminobutyric acid(A) neurotransmission and cerebral ischemia."// J. Neurochem.; Apr. 2001; Том 77(2); Стр. 353-71.

138. Semyanov A, Kullmann DM. //"Modulation of GABAergic signaling among interneurons by metabotropic glutamate receptors."// Neuron; Mar. 2000; Том 25(3); Стр. 663-72.

139. Sheng M., Cummings J., Roldan L. A., Jan Y. N., и Jan L. Y. //"Changing subunit composition of heteromeric NMDA receptors during development of rat cortex"// Nature; Mar. 1994; Том 368(6467); Стр. 144-147.

140. Sidman R. L. и Rakic P. //"Neuronal migration, with special reference to developing human brain: a review"// Brain Res.; Nov. 1973; Том 62(1); Стр.135.

141. Sitte HH, Singer EA, Scholze P. //"Bi-directional transport of GAB A in human embryonic kidney (HEK-293) cells stably expressing the rat GABA transporter GAT-1.7/Br. J. Pharmacol.; Jan. 2002; Том 135(1); Стр. 93-102.

142. Soda T., Nakashima R., Watanabe D., Nakajima K., Pastan I., и Nakanishi S. //"Segregation and coactivation of developing neocortical layer 1 neurons"// J. Neurosci.; July 2003; Том 23(15); Стр.6272-6279.

143. Somogyi P, Tamâs G, Lujan R, Buhl EH. //"Salient features of synaptic organisation in the cerebral cortex."// Brain Res. Rev.; May 1998; Том 26(2-3); Стр. 113-35.

144. Sotnikov О. S. //"Primary sensory neurons in the central nervous system."// Morfologiia; 2005; Том 127(3); Стр.75-81.

145. Super H., Martinez A., Del Rio J. А., и Soriano E. //"Involvement of distinct pioneer neurons in the formation of layer-specific connections in the hippocampus"//J. Neurosci.; June 1998; Том 18(12); Стр.4616-4626.

146. Sur M, Leamey CA. //"Development and plasticity of cortical areas and networks.»//Nat Rev Neurosci.; Apr. 2001; Том 2(4); Стр. 251-62.

147. Taylor J, Gordon-Weeks PR. //"Calcium-independent gamma-aminobutyric acid release from growth cones: role of gamma-aminobutyric acid transport."// J. Neurochem.; Jan. 1991; Том 56(1); Стр. 273-80.

148. Tissir F. и Goffmet A. M. //"Reelin and brain development"// Nat. Rev. Neurosci.; June 2003; Том 4(6); Стр.496-505.

149. Traub RD, Jefferys JG, Whittington MA. //"Functionally relevant and functionally disruptive (epileptic) synchronized oscillations in brain slices.»// Adv. Neurol.; 1999; Том 79; Стр. 709-24.

150. Van Eden C. G., Mrzljak L., Voorn P., и Uylings H. B. //"Prenatal development of GABA-ergic neurons in the neocortex of the rat"// J. Comp Neurol.; Nov. 1989; Том 289(2); Стр.213-227.

151. Voigt T., Opitz T., и de Lima A. D. //"Synchronous oscillatory activity in immature cortical network is driven by GABAergic preplate neurons"// J. Neurosci.; Nov. 2001; Том 21(22); Стр.8895-8905.

152. Volterra А. и Meldolesi J. //"Astrocytes, from brain glue to communication elements: the revolution continues"// Nat. Rev. Neurosci.; Aug. 2005; Том 6(8); Стр.626-640.

153. Westerink BH, de Vries JB. //"On the origin of extracellular GAB A collected by brain microdialysis and assayed by a simplified on-line method.»// Naunyn. Schmiedebergs Arch. Pharmacol.; Jun. 1989; Том 339(6); Стр. 603-7.

154. Wilson FA, O'Scalaidhe SP, Goldman-Rakic PS. //"Functional synergism between putative gamma-aminobutyrate-containing neurons and pyramidal neurons in prefrontal cortex."// Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A.; Apr. 1994; Том 91(9); Стр. 4009-13.

155. Wolff JR, Böttcher H, Zetzsche T, Oertel WH, Chronwall BM. //"Development of GABAergic neurons in rat visual cortex as identified by glutamate decarboxylase-like immunoreactivity.»// Neurosci Lett.; Jun. 1984; Tom 47(3); Стр. 207-12.

156. Wolff JR, Joo F, Dames W. //"Plasticity in dendrites shown by continuous GABA administration in superior cervical ganglion of adult rat.»// Nature; Jul. 1978; Tom 274(5666); Стр. 72-4.

157. Wu Y, Wang W, Richerson GB. //"GABA transaminase inhibition induces spontaneous and enhances depolarization-evoked GABA efflux via reversal of the GABA transporter."// J. Neurosci.; Apr. 2001; Том 15;21(8); Стр. 2630-9.

158. Zhou F. M. и Hablitz J. J. //"Postnatal development of membrane properties of layer I neurons in rat neocortex"// J. Neurosci.; Feb. 1996; Том 16(3); Стр.1131-1139.

159. Zhu WJ, Vicini S. //"Neurosteroid prolongs GABAA channel deactivation by altering kinetics of desensitized states."// J. Neurosci.; Jun. 1997; Том 17(11); Стр. 4022-31.

160. Zhu WJ, Wang IF, Corsi L, Vicini S. //"Lanthanum-mediated modification of GABAA receptor deactivation, desensitization and inhibitory synaptic currents in rat cerebellar neurons."// J. Physiol.; Sep. 1998; Том 511; Стр. 64761.

161. Zucker R. S. и Regehr W. G. //"Short-term synaptic plasticity"// Annu. Rev. Physiol.; 2002; Том 64 Стр.355-405.