Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование кутикулярного эпителия и клеток полостной жидкости приапулид

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Соловей, Ирина Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ.

I. КУТИКУЛЯРНЫЙ ЭПИТЕЛИЙ.

1. Эпителиальные клетки.

2. Кутикула.

3. Гранулярные клетки в покровном эпителии 46 П. КЛЕТКИ ПОЛОСТНОЙ ЖИДКОСТИ.

1. Эритроциты.

2. Гранулоциты.

3. Обновление клеток полостной жидкости. . 101 Ш. ЗАЩИТНЫЕ РЕАКЦИИ КЛЕТОК ПОЛОСТНОЙ ЖИДКОСТИ Ю

1. Фагоцитоз.

2. Коагуляция полостной жидкости

3. Инкапсуляция инородных тел.

4. Репаративные процессы в покровах.

ГЛАВА 1У. ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование кутикулярного эпителия и клеток полостной жидкости приапулид"

Проблема взаимоотношений тканей внутренней среды и эпителиальных тканей была впервые поставлена в эволюционном плане А.А.Заварзиным на основании серии экспериментальных исследований, проведенных на представителях различных групп беспозвоночных животных - моллюсках, олигохетах, насекомых, ракообразных (Заварзин, 194-5, 1947). Актуальность этой проблемы стала еще более очевидной в настоящее время в связи со значительным усовершенствованием методов исследования и углублением критериев, по которым можно сопоставлять эти первичные ткани многоклеточных, а также характер их взаимодействия у представителей различных групп животных.

Исследования, проводимые на кафедре цитологии и гистологии ЛГУ, позволили сформулировать представление о гранулярных амебоцитах, как широко распространенном типе подвижных клеток тканей внутренней среды у беспозвоночных животных (обзор: Заварзин, 1981).

Гранулярные амебоциты представляют собой амебоидно-подвижные клетки, содержащие в цитоплазме многочисленные гранулы и осуществляющие комплекс защитных реакций (коагуляция, инкапсуляция, репарация повреждений за счет выведения материала гранул и образования на его основе межклеточного вещества. Гранулярные амебоциты встречаются в циркуляторных системах различного типа и представлены у самых разных групп животных, например, у Hydrozoa, Echinodermata, Arthropoda, Ascidiacea. ЭТИМ животным можно противопоставить такие группы, как, например, моллюски, у которых защитные реакции (инкапсуляция инородных тел и репарация поврежденных тканей) осуществляются клетками крови, трансформирующимися в фибробласты и синтезирующими межклеточное вещество - коллаген - in situ (Потапина, 1978; Старостин и др., 1979; Sminia, 1981).

Дальнейшее изучение этого вопроса показало также, что в типичных случаях животные, обладающие гранулярными амебоцитами, имеют кутикулярный покров сходного строения. Кутикулярная пластинка у них всегда подразделяется на два основных слоя. В основе внутреннего слоя - эндокутикулы - лежит сеть линейных молекул нейтрального полисахарида, погруженная в гликопротеид-ный матрикс. Наружный слой - экзокутикула - имеет преимущественно белковую природу и подвергается дополнительной стабилизации (обычно за счет фенольного дубления). Такая организация кутикулярной пластинки характерна для всех членистоногих, ас-цидий и гидроидных полипов. У многих других беспозвоночных кутикула имеет принципиально иное строение: ее основу составляет система коллагеновых фибрилл, погруженных в гликопроте-идный матрикс, а сама кутикулярная пластинка не имеет дополнительно стабилизированного наружного слоя. Подобная кутикула встречается у аннелид, сипункулид, погонофор и некоторых дру

Уо о животных с кутикулярной пластинкои этого типа, например, у кольчатых червей, гранулярные амебоциты не найдены .

Еще один существенный момент состоит в том, что гранулярные амебоциты не только выполняют защитные функции, но и принимают участие в формировании кутикулярной пластинки. Так обстоит дело у асцидий ( Barrington, Thorpe, 1968; Чага, 1980, 1983), гидроидных полипов (Knigth, 1970, 1971) и, вероятно, насекомых и ракообразных (см. например, Denneii, 1947; Vacca, Pingerman, 1983; см. также обзоры: Orossley, 1975; Brunet,

1980).

Как можно заметить, указанное выше сходство в организации кутикулярного эпителия и системы гранулярных амебоцитов проявляется у групп животных, далеко отстоящих друг от друга в филогенетическом отношении. Таким образом, эти примеры демонстрируют определенную закономерность эволюционной динамики кутикулярного покрова и подвижных клеток тканей внутренней среды беспозвоночных. Изучение такого рода закономерностей возможно благодаря применению разработанного в 1925 году А.А.Заварзиным метода функциональных аналогий, ставшего в настоящее время основой сравнительно-гистологических исследований (обзор: Заварзин, 1981). Применение этого метода основано на изучении тканевой организации неродственных групп животных, что позволяет выявить спектр возможных модификаций строения функционально-аналогичных тканей и закономерные (то есть функционально ооусловленные) сходства между ними.

Дальнейшее исследование системы гранулярных амебоцитов и их связи с кутикулярным эпителием требует, с одной стороны, изучения этих тканевых систем у животных, неродственных упомянутым выше группам, а с другой стороны, более полного исследования их структурно-функциональной организации (см. например, Чага, 1983). В этой связи наше внимание привлекли при-апулиды - группа животных с неясным, но, безусловно, ооособ-ленным систематическим положением.

Строение кутикулы и клеток полостной жидкости у приапу-лид остается до настоящего времени изученным недостаточно. Однако в литературе имеются данные, позволившие предположить, что в полостной жидкости этих животных имеются клетки ("лейкоциты" ), аналогичные гранулярным амебоцитам (Mattisson,

Fange, 1973) и что кутикула приапулид имеет строение, характерное для животных, обладающих гранулярными амебоцитами (см. я например, Carlisle, 1959; Shapeero, 1962; Moritz, 1972; Заварзин, 1973), Имеются даже указания на миграцию "лейкоцитов" в толщу кутикулярной пластинки (Molcanov, 1908).

Таким образом, задача нашей работы состояла в том, чтобы подробно исследовать кутикулярный эпителии и клетки полостной жидкости приапулид, дать характеристику структурно-химической организации этих тканей, а также выявить проявление характерных функциональных особенностей отдельных тканевых элементов -в экспериментальных условиях и в нормальных гистогенезах (процессах линьки, при обновлении клеток полостной жидкости). Кроме того, перед нами стояла задача сопоставить полученные данные, включая сведения по взаимосвязи кутикулярного эпителия и клеток полостной жидкости, с соответствующими данными в отношении других групп животных (асцидии, насекомые, ракообразные, мечехвосты), неродственных приапулидам, но облагающих функционально аналогичными подвижными клетками тканей внутренней среды и кутикулярным эпителием.

Для решения поставленной задачи было проведено комплексное изучение покровов и клеток полостной жидкости приапулид Priapulus caudatus и Halicryptus spinulosus с применением светооптических, электронномикроскопических, авторадиографических, гистохимических и экспериментальных методов исследования.

Полученные данные позволили выяснить строение и химическую организацию кутикулярного эпителия и клеток полостной жидкости у двух видов приапулид. Кутикула этих животных по своей морфо-биохимической организации оказывается сходной с кутикулами членистоногих и асцидий. Кутикулярная пластинка приапулид, так же как у этих животных, подразделяется на два основных слоя - эндокутикулу, содержащую хитин, незначительное количество белков и сульфатированные полисахариды, и экзо-кутикулу, целиком образованную задубленными белками, В участках кутикулярного покрова со значительными механическими нагрузками (например, глоточные зубы) экзокутикула подвергается дополнительному фенольному дублению, что приводит к образованию гистохимически инертной, "сверхзадубленной" кутикулы (эк-зокутикулы II), наличие которой свойственно и для кутикулярного покрова асцидий и членистоногих.

Полостная жидкость приапулид содержит два типа клеток: . эритроциты и гранулоциты. При изучении эритроцитов, наряду с особенностями организации, общими для клеток с респираторной функцией у беспозвоночных, удалось выявить существенные различия в строении этих клеток у двух близких родов. У одного из них увеличение удельной поверхности эритроцитов достигается благодаря уплощенной форме, у другого - при помощи системы инвагинаций плазматической мембраны, совершенно необычной для клеток с респираторной функцией.

Особое внимание в работе было уделено исследованию второго типа клеток полостной жидкости - гранулоцитам. Полученные с помощью разносторонних методических подходов данные показывают, что они являются типичными гранулярными амебоцитами. Цитоплазма гранулоцитов содержит специфические гранулы с характерной для этого типа клеток упаковкой секрета в виде тубуляр-ных структур, С помощью гистохимического анализа показано, что по химической организации материала гранул гранулоциты приапулид существенно отличаются от гранулярных амебоцитов асцидий, насекомых и ракообразных отсутствием в них компонен- . тов фенолоксидазной системы и богатым содержанием дисульфид-ных связей.

Гемопоэтические органы и малодифференцированные киетки у приапулид не найдены, а к пролиферации способны дифференцированные клетки полостной жидкости - эритроциты и гранулоциты, причем данные тимидиновой авторадиографии указывают на возможную периодичность обновления клеток полостной жидкости.

Гранулоциты приапулид, так же как аналогичные клетки асцидий и членистоногих, осуществляют целый комплекс защитных реакции: коагуляция полостной жидкости, фагоцитоз и инкапсуляция инородных тел, репарация поврежденных тканей. В основе всех защитных реакций (кроме фагоцитоза) лежит образование межклеточного вещества за счет выведения материала гранул гранулоцитов путем экзоцитоза (до настоящего времени происхождение межклеточного вещества было установлено только для мечехвостов и асцидий).

Сравнение собственных и литературных данных показало специфические черты функционирования системы гранулярных амебоцитов в разных группах животных, касающиеся их взаимодействия с кутикулой в норме и при репарации поврежденных покровов. Отсутствие в гранулоцитах приапулид компонентов фенолоксидазной системы исключает возможность их участия в фенольном дублении кутикулы при ее построении, что характерно для асцидий и большинства членистоногих. Вместе с тем, гранулоциты, как и гранулярные амебоциты у других рассматриваемых групп, участвуют в репаративных процессах при повреждении целостности покровов, причем в механизмах этих процессов у приапулид наблюдаются черты, сближающие их как с асцидиями, так и с членистоногими. Таким образом, гранулоциты приапулид представляют собой своеобразную модификацию гранулярных амебоцитов, обнаруженную до сих пор только у одной из групп членистоногих - мечехвостов (у которых гранулярные амебоциты также не содержат компонентов фенолоксидазной системы, а белок их гранул богат дисульфидньши связями).

Полученные в нашей работе материалы еще раз показывают плодотворность применения в современных исследованиях сравнительно-гистологического анализа по принципу функциональной аналогичности как метода изучения тканей внутренней среды и их взаимодействия с другими тканевыми системами.

Заключение Диссертация по теме "Эмбриология, гистология и цитология", Соловей, Ирина Валерьевна

ВЫВОДЫ

1. Кутикула приапулид P.caudatus и Н.spinulosus состоит из двух слоев - зндо- и экзокутикулы, соотношение которых различается у изученных видов и варьирует в разных отделах тела животных. Эндокутикула содержит хитин, незначительное количество белков и сульфатированные полисахариды. Экзокутикула хитина не со7;ержит и целиком образована белками, которые стабилизируются с помощью фенольного дубления. В участках кутикулярного покрова, несущих значительную механическую нагрузку, экзокутикула подвергается дополнительному задубливанию, что приводит к образованию экзокутикулы П, которая, в отличие от обычной экзокутикулы I, не взаимодействует с большинством гистологических красителей.

2. Гранулярные клетки в составе покровного эпителия приапулид по своей структурно-химической организации и реакции на стрессовые воздействия обнаруживают сходство с пептидэргически-ми нейросекреторными клетками. Происхождение и функциональное значение этих клеток требует дальнейшего исследования.

3. Эритроциты приапулид имеют строение, характерное для клеток с респираторной функцией у других беспозвоночных: дыхательный пигмент - гемэритрин - локализован в цитоплазме, а деградация и накопление "отработавшего" гемэритрина осуществляется в вакуолях (гранулах). Увеличение поверхности для интенсификации газообмена в эритроцитах p.caudatus достигает благодаря их типичной дисковидной форме, тогда как у сферических эритроцитов н.spinulosus - за счет необычной для этого типа клеток системы глубоких инвагинаций плазматической мембраны.

Гранулоциты у обоих видов приапулид обладают амебоидной подвижностью и несут в цитоплазме гранулы, в которых выявляются нейтральные полисахариды и белки, богатые дисульфидными связями. Компоненты фенолоксидазной системы в гранулах этих клеток отсутствуют. На электронномикроскопическом уровне в гранулах при фиксации OsO^ выявляются тубулярные структуры диаметром около 15 нм.

5. Дифференцированные клетки полостной жидкости приапулид способны к пролиферации, малодифференцированные клетки и гемо-поэтические органы не обнаружены. Эритроциты и гранулоциты представляют собой две независимо и, возможно, периодически обновляющиеся популяции клеток.

6. Гранулоциты приапулид способны к фагоцитозу мелких инородных тел и выделению материала гранул, который преобразуется в межклеточное вещество, состоящее из трубочкоподобных структур диаметром около 15 нм и по гистохимическим характеристикам идентичное материалу гранул гранулоцитов. Выделение межклеточного вещества служит основой для осуществления гранулоцитами коагуляции полостной жидкости, инкапсуляции крупных инородных тел и репарации поврежденных покровов.

7. Коагуляция полостной жидкости выражается в образовании сгустков, состоящих из клеток (гранулоцитов) и межклеточного вещества. На поверхности инородных тел также в первую очередь образуется сгусток полостной жидкости, затем гранулоциты в нем уплощаются и формируют капсулу с прослойками межклеточного вещества. При повреждении покровов гранулоциты мигрируют в область раны, инфильтруя окружающие ткани и кутикулярную пластинку, и образуют в полости раны репаративную пробку, подобную капсуле вокруг инородного тела. На краю поврежденной эндокутикулы путем фенольного дубления формируется защитный слой, сходный

- 209 по строению и гистохимическим свойствам с экзокутикулой и образующийся без участия гранулоцитов.

8. Проведенный сравнительный анализ показал, что а) кутикула приапулид по своей морфо-биохимической организации сходна с кутикулами членистоногих и асцидий; б) по морфо-функциональной организации и характеру участия в защитных реакциях гранулоциты приапулид являются аналогами гранулярных амебоцитов членистоногих и асцидий; в) взаимоотношения гранулоцитов приапулид с кутикуляр-ным эпителием в норме существенно отличаются от таковых у асцидий и большинства членистоногих, что связано с отсутствием в гранулоцитах фенолоксидазной системы; в то же время репарация поврежденных покровов приапулид имеет целый ряд общих черт с аналогичными процессами у асцидий и членистоногих.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Соловей, Ирина Валерьевна, Ленинград

1. Беклемишев В.Н. Основы сравнительной анатомии беспозвоноч-ных. -М.: Наука, т. 2. 446 с.

2. Гиляров М.С. Закономерности приспособлений членистоногих кжизни на суше. -М.: Наука, 1970. 276 с.

3. Дженсен У.А. Ботаническая гистохимия. -М.: Мир, 1965. 377 с.

4. Жинкин Л.Н. Особенности развития и систематическое положение

5. Priapulida. Учен. зап. Ленингр. пед. инст. им. Герцена, 1955, т. ПО, с. 129-139.

6. Заварзин А.А. Об эволюционной динамике тканей. Арх. биол.наук, сер. А, 1934, т. 36, вып. I, с. 3-64.

7. Заварзин А.А. Очерки эволюционной гистологии крови и соединительной ткани. Вып. I. -М.1 Медгиз, 1945. 290 с.

8. Заварзин А.А, Очерки эволюционной гистологии крови и соединительной ткани. Вып. 2. М.-Л.: Медгиз, 1947. 274 с.

9. Заварзин А.А. Исследование кутикулярного эпителия приапулидпри циклических изменениях, связанных с линькой. -Арх. анат. гист. эмбр., 1973, т. 65, Ш 7, с. 30-37.

10. Заварзин А.А, Состояние и перспективы разработки проблемыэволюционной динамики тканей. Цитология, 1981, т. 23, № 9, с. 971-990.

11. Зайцева О.В. Гистохимическое и авторадиографическое исследование гиподермальных желез Halicryptus spinulosus (Priapulida ). Тр. Петергоф, биол. ин-та, 1978, т. 26, с. I45-I6I.'

12. Иванова-Казас О.М. Сравнительная эмбриология беспозвоночных животных. Простейшие и низшие многоклеточные. -Новосибирск: Наука, 1975. 372 с.

13. Иоффе Б.И. Сравнительно-эмбриологический анализ развитияпервичнополостных червей. Тр. Зоол. инст. АН СССР,1979, т.84, с. 39-62.

14. Кедровский Б.М., Трухачева К.П. Новые методы для изученияфункциональной морфологии клеток и тканей. ДАН СССР, 1952, т. 86, №4, с. 833-837.

15. Кононский А.И. Гистохимия. Киев: Вища школа, 1976. 278 с.

16. Кулаковский Э.Е. Влияние опреснения на нейросекреторную систему мидий Mytilus edulis (L) Белого моря. Исследование фауны морей, 1976, т. 17 (25), с. 160-166.

17. Лебский В.К. Тонкое строение кутикулярного эпителия Priapulus caudatus в процессе линьки. Цитология, 1974, т. 16, № 7, с. 903-907.

18. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. -М.: Мир, 1969. 646 с.

19. Луппа X. Основы гистохимии. -М.: Мир, 1980. 343 с.

20. Макаров П.В. Новые данные цитохимического анализа развивающихся яиц лошадиной аскариды. Тр. Сан. Гиг. инст. , 1959, т. 43, с. 47-63.20. (Максимов А.А.) Maximow A.A. Bindegewebe und blutbildende

21. Gewebe. In: Die Gewebe. Berlin, 1927, Bd. II, t. I, S. 232-583.

22. Малахов В.В. Cephaiorhyncha новый тип животного царства,объединяющий Priapulida, Kinorbyncha, Gordiacea и система первичнополостных червей. Зоол. ж.,1980, т. 59, вып. 4, с. 485-499.

23. Мечников И.И. Лекции о сравнительной патологии воспаления.1. М.: Природа, 1917. 119 с.23. (Молчанов Л.A.) Molcanov L.A. Beitrag sur Morphologic und \f- 212

24. Physiologie der Priapuliden. Bull. Acad. Imp. Sci. St. Petersbourg, 1908, Bd. 2, S. 957-967.

25. Потапина H.B. О происхождении клеток, формирующих капсулувокруг инородного тела-у обыкновенного прудовика. -Онтогенез, 1978, т. 9, №6, с. 639-642.

26. Пирс Э. Гистохимия.-- М.: Изд. иностр. лит., 1962, 962 с.

27. Ромейс Б.-Микроскопическая техника. -М.: Изд. иностр.лит., 1953. 718 с.

28. Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника. -М.:

29. Советская наука, 1957. 467 с.

30. Старостин В.И., Потапина Н.В., Сатдыкова Г.П. Некоторые аспекты изучения гистогенеза крови и соединительной ткани у брюхоногих моллюсков* В сб.: Цитологические механизмы гистогенезов. -М., 1979, с. 43-46.

31. Чага О.Ю. Морфология и гистохимия клеток крови асцидии

32. Molgula citrina. Цитология, 1980а, т. 22, Й 3, с. 287-295.

33. Чага О.Ю. Орто-дифенолоксидазная система асцидий. Цитология, 19806, т. 22, 1й 6, с. 619-625.

34. Чага О.Ю. Авторадиографический анализ процессов репродукции и дифференцировки клеток крови асцидии Molgula citrina. Цитология, 1982, т. 24, № II, с. 1305-I3II.

35. Чага О.Ю. Исследование системы клеток крови асцидий и еевзаимодействия с туникой. Диссерт. на соиск.учен. степ. канд. биол. наук. - Л., 1983. 270 с.

36. Чага О.Ю., Шигорин С.А. К вопросу о возможной роли о-дифенолоксидазы гемоцитов в процессах свертывания гемолимфы ракообразных. Цитология, 1981, т. 23, № 5,с. 551-558.

37. Шубич М.Г. Методы элективной окраски кислых (сульшатированных) мукополисахаридов основным коричневым. Бюлл. эксп. биол. мед., 1961, т. 51, й 2, с. II6-I20.

38. Шубич М.Г., Могильная Г.М. Гликопротеины и протеогликаны.

39. Принципы их гистохимического анализа. Арх. анат. гист. эмбр., 1979, т. 77, N2 8, с. 92-99.

40. Шубич М.Г., Рукавцов Б.И., Могильная Г.М., Лопунова Ж.К. '

41. Комплексное применение красителей в гистохимическом исследовании белка. Арх. анат. гист. эмбр., 1975, т. 68, IH, с. 52-59.

42. Adams O.W.M., Swettenham K.V. The histochemical identification of two types of basophil cells in the normal human adenohypophysis. J. Pathol. Bact., 1958, v. 75, P. 95-ЮЗ.

43. Andersen S.O. Outicular enzymes, and sclerotization in insects. In: The insect integument. Amsterdam, Elsevier, 1976, p. 121-144.

44. Andersen S.O. Biochemistry of insect cuticle. Ann. Rev.

45. Entomol., 1979, v. 24, p. 29-61.

46. Anderson R.S. Cellular responses to foreign bodies in thetunicate Molgula manchattensis (de Kay). Biol. Bull., 1971, v. 141, p. 91-98.

47. Apel W. Beitrage zur Anatomie und Histologie des Priapuluscaudatus und Halicryptus spinulosus. Z. Wiss. Zool., 1885, Bd. 42, S. 457-557.

48. Armstrong P.B., Levin J. In vitro phygocytosis by Limulusblood cells. J. Invert. Pathol., 1979, v. 34, p. 145-151.

49. Arnold J.W. The haemocytes of insects. In: The physiology of Insecta, New York London, Academic Press, 1974, v. 5, p. 201-254.

50. Arnold J.W., Hinks 0.Б1. Haemocytopoiesis in Lepidoptera. I.

51. The multiplication of circulating haemocytes. Can. J. Zool., 1976, v. 54, p. 1003-1012.

52. Arnold J.W., Hinks C.F. Haemocytopoiesis in Lepidoptera.

53. I. A note on the multiplication of spherule cells and granular haemocytes. Can. J. Zool., 1983, v. 61, p. 275-277.

54. Barrington E.J.W., Thorpe A. Histochemical and biochemicalaspects of iodine binding in the tunic of ascidian Dendrodoa grossularia (Van Beneden). Proc. Roy. Soc., London, ser. B, 1968, v. 171, p. 91-109.

55. Bauchau A.G. Crustaceans. In: Invertebrate blood cells.1.ndon a.o.: Academic Press, 1981, v. 2, p. 385-420.

56. Bauchau A.G., Mengeot J.C. Structure et junction des hemocytes chez les Crustaces. Arch. Zool. exp. g6n., 1978, t. 119, p. 227-248.

57. Behnke 0. Microtubules in disk-shaped blood cells. Int.

58. Rev. Exp. Pathol., 1966, v. 9, p. 1-92.

59. Bielig U.J., Bayer E., Dell H.D., Rohus G., Mollinger U.,

60. Riidiger W. Chemistry of hemovanadin. Prot. Biol.

61. FluidsT^vT 14, p. 197-204.

62. Breh£lin M. Hemolymph coagulation in Locusta migratoria:evidence for a functional equivalent of fibrinogen.

63. Сотр. Biochem. Physiol., v. 62B, p. 329-334.

64. Brown B.E. The form and function of metal-containing "granules" in invertebrate tissues. Biol. Rev,, 1982, v.57, P. 621-667.

65. Brown C.H. A review of the methods available for the determination of the types of forces stabiliazing structural proteins in animals. Quart. J. Micr. Sci., 1950, v. 91, P. 331-339.

66. Brunet P.C.J. Scleratins. Endeavour, 1967, v. 26, p.68-74.

67. Brunet P.C.J. The metabolism of the aromatic aminoacidsconcerned in the cross-linking of insect cuticle. -Insect Biochem., 1980, v. 10, p. 467-500.

68. Bursey C.R. Histological response to injury in the horseshoecrab, Limulus polyphemus. Can. J. Zool., 1977, v. 55, p. 1158-1165.

69. Carlisle D.B. On the exuvia of Priapulus caudatus Lamarck.

70. Ark. zool., 1959, v. 12, p. 79-81.

71. Gastino F., Bussolati G. Thiosulfation for the histochemical demonstration of protein-bound sulphydril and di-sulphide groups. Histochemistry, 1974, v. 39» P« 93-96.

72. Gostin N.M. Histochemical observations of the haemocytesof Locusta migratoria. Histochem. J., 1975» v. 7, p. 21-43.

73. Crossley A.G. The cytophysiology of insect blood. Adv.1.sect Physiol., 1975, v. 11, p. 117-221.

74. Dennell R. A study of an insect cuticle: the formation ofthe puparium of Sarcophaga falculata Pand. (Dipte-ra). Proc. Roy. Soc., London, ser B, 1947, v. 134, p. 79-110.

75. Dumont J.IT., Andersen E., Winner G. Some cytologic characteristics of the hefnocytes of Limulus during clotting. J. Morphol., 1966, v. 119, p. 181-208.

76. Durliat M., Vranckx R. Coagulation in the crayfish, Astacusleptodactylus: attempts to identify a fibrinogen-like factor in the hemolymph. Biol. Bull., 1976, v. 151, p. 467-477.

77. Eakin R.M., Brandenburger J.L. Ultrastructural features ofa gordian worm (Nematomorpha). J. Ultrastruct. Res., 1974, v. 46, p. 351-374.

78. Endean R. The test of the ascidian, Phallusia mammillata.

79. Quart. J. Micr. Sci., 1961, v. 102, p. 107-117.

80. Pange R. Haemerythrin in Proapulus caudatus Lam. Nature,1950, v. 165, p. 613-614.

81. Pange R. Gastrotricha, Kinorhyncha, Rotatoria, Kamptozoa,- 217

82. Nematomorpha, Nemertini, Priapulida. In: Chemical zoology, New York: Academic Press, 1969» 3» P« 593-609.

83. Fange R., Akesson B. The cells of the coelomic fluid of

84. Priapulus caudatus and their content of haemerythrin. Ark. zool., 1951, v. 3, p. 25-31♦

85. Fontaine A.R., Lambert P. The fine structure of the haemocite of the holothurian Cucumaria miniata (Brandt). -Can. J. Zool., 1972, v. 51, P. 323-332.

86. Fontaine O.T., Lightner D.V. Observations on the process ofwound repair in penaeid shrimp. J. Invert. Pathol.,1973, v. 22, p. 23-33.

87. Fuller G.M., Doolitle R.F. Studies of invertebrate fibrinogen. II. Transformation of lobster fibrinogen into fibrin. Biochemistry, 1971, v. 10, p. 1311-1315.

88. Fumarola D., Pasquetto N., Telesforo P., Donati M.B. Studies on the clotting mechanism of Limulus polyphemus. -Thromb. Res., 1975, v. 7, p. 401-408.

89. Goddard D.R., Michaelis L. A study on keratin. Biol.

90. Chem,, 1934, v. 106, p. 605. 77• Goodbody J. The physiology of ascidians. Adv. Mar. Biol.,1974, v. 12, p. 2-149.

91. Hammarsten 0. Zur Entwicklungsgeschichte von Halicryptusspinulosus (von Siebold). Z. wiss. Zool., 1915, Bd. 112, S. 527-571.

92. Hammarsten 0., Eunnstrom J. Cyto-physiologische Beobachtungen an der Hinterleibdriisen und der wanderzellen von Priapulus caudatus (Lam). Bergens. Mus. Aarb., Haturv. Eaekke, 1920, Bd. 13, S. 1-15.

93. Hammond E. The surface of Priapulus caudatus (Lamarck,1816). Z. Morphol. Tiere, 1970, Bd. 68, S. 255-268.

94. Herth W. Oalcofluor white and Congo red inhibit chitin microphfibril assembly of Proterioochromonas: evidence for a gap between polymerization and microfibril formation. J. Cell. Biol., 1980, v. 87, p. 442-450.

95. Hess E.T., Vena J.A. Pine structure of the clitellum of theannelid Enchytraeus fragmentosus. Tissue and Cell, 1974, v. 6, p. 503-514.

96. Hoffmann J.A., Porte A., Joly P. Sur la localisation d'uneactivity phenol-oxydasique dan les coagulocytes de Locusta migratoria L, (Orthoptera). Compte Eendu Acad. Sci., Paris, ser. D, 1970, t. 270, p. 629-631.

97. Hagopian I/I. Unique structures in the insect granular haemocytes. J. Ultrastruct. Ees., 1971, v. 36, p. 646658.

98. Holme E., Solum И.О. Electron microscopy of the gel proteinformed by clotting of Limulus polyphemus hemocyte ex- • tracts. J. Ultrastruct. Ees., 1973, v. 44, p.329-338.

99. Hopkin S.P., Nott J.A. Some observations on concentricallystructured intracellular granules in the hepatopan-creas of the shore crab Carcinus menas (L). J. Mar. Biol. Assoc. U.K., 1979, v. 59, p. 867-877.- 219

100. Humphrey C.D., Pittman F.E. A simple methylene blueazur II basic fuchsin stain for epoxy-embedded tissue sections. - Stain Technol., 1974, v. 4-9, p. 9-14.

101. Hunt S. Polysaccharide-protein complexes in invertebrates.- London ITew York: Academic Press, 1970 - 275 Р»

102. Jeuniaux 0. Chitinous structures. Сотр. Biochem., 1971»v. 26, p. 595-632.

103. Jungreis A.M. Physiology of moulting in insects. Adv.1.sect. Phys., 1979, v. 14, p. 109-183.

104. Karlson P., Sekeri K.E., Richards A.G., Richards P.A. Theamino acid composition of the various types of cuticle of Limulus polyphemus. J. Insect Physiol., 1969, v. 15, p. 495-502.

105. Knight P.D. Sclerotization of the perisarc in the calyptoblastic hydroid, Laomedea flexuosa. 2. Histochemical demonstration of phenol oxidase and attempted demonstration of peroxidase. Tissue and Cell, 1971» v. 3, P. 57-64.

106. Krishnan G., Ravindranath M.H. Mode of stabilization ofprosclerotin in arthropod cuticles. Acta histochem., 1972, v. 44, p. 348-364.

107. Lai-Fook J. The repair of wounds in the integument of insects. J. Insect. Physiol., 1966, v. 12, p.195-266.

108. Lai-Fook J. The fine structure of wound repair in an insect (Phodnius prolixus). J. Morphol., 1968, v. 124, p. 37-77.

109. Lai-Fook J. Haemocytes in the repair of wounds in an insect (Rhodnius prolixus). J. Morphol., 1970, v. 130, p. 297-314.

110. Lai-Fook J. The structure of the haemocytes of Calpodesethlius (Lepidoptera). -J. Morphol., 1973, v. 139, p. 79-104.

111. Land, J. van der. Systematics, zoogeography, and ecologyof the Priapulida. Zool. verhandel., 1970, v. 112, p. 4-118.

112. Lang K. Die Entwicklung des Eies von Priapulus caudatus1.m. und Systematische Stellung der Priapuliden. -Ark. zool., 1953, Bd. 5, S. 321-348.

113. Lipke H., Grainger M.M., Siakotos A.H. Polysaccharide andglycoprotein formation in cockroach. I. Identification and titer of bound monosaccharides. J. Biol. Chem., 1965, v. 240, p. 594-600.

114. Matisson A., Fange R. infrastructure of,erythrocytes andleukocytes of Priapulus caudatus. J. Morphol., 1973, v. 140, p. 367-380.

115. Matoltsy A.G., Lavker R.M., Matoltsy M.1T. Demonstration ofcystine-containing protein in keratohyalin granules of the epidermis. J. Invest. Dermatol., 1974-, v. 62, p. 406-410.

116. Matoltsy A.G., MatоItsy M.N. A study of morphological andchemical properties of keratohyalin granules. J. Invest. Dermatol., 1962, v. 38, p. 237-247.

117. Matoltsy A.G., Matoltsy M.U". The chemical nature of keratohyalin granules of epidermis.-- J. Cell.Biol. , 1970, v. 47, p. 593-603.

118. Matoltsy A.G., Matoltsy M.N. The amorphous component ofkeratohyalin granules. J. Ultrastruct. Res., 1972, v. 41, p. 550-560.

119. Mazia D., Brewer P.A., Alfert M. The cytochemical stainingand measurement of protein with mercuric bromphenol blue. Biol. Bull., 1953, v. 104, p. 57-67.

120. Meenakshi V.R., Scheer B.T. Acid mucopolysaccharide ofcrustacean cuticle. Science, 1959, v. 130, p. 11891190.

121. Merriman J.A. Curicular structures of the priapulid Halicryptus spinulosus: a scanning electron microscopical study. Zoomorphology, 1981, v. 97, p. 285-295.

122. Monpeyssin M., Beaulaton J. Hemocytopoiesis in the oaksilkworm Antheraea pernyi and some other Lepidoptera. I. Ultrastructural study of normal processes. J. Ultrastruct. Res., 1978, v. 64, p. 35-45.

123. Morris S.C. Fossil priapulid worms. Palae. Assoc., London, Spec. Papers in Palaeontol., 1977, N2 20, p. 1-95.117» Moritz K. Zur Feinstruktur integumentaler Bildungen bei- 222

124. Priapuliden (Halicryptus spinulosus und Priapulus caudatus). Z. Morphol. Tiere, 1972, Bd 72, S. 203230.

125. Moritz K., Storch V. Uber den Aufbau des Integumentes der

126. Priapuliden und der Sipunculiden. Z. Zellforsch., 1970, Bd 105, S. 55-64.

127. Miirer E.H., Levin J., Holme R. Isolation and studies ofthe granules of the amebocytes of Limulus polyphemus, the horse-shoe crab. J. Cell Physiol., 1975, v. 86, P. 533-545.

128. Nakamura S., Takagi Т., Iwanaga S., Niwa M., Takahashi K.

129. A clottable protein (coagulogen) of horse-shoe crab hemocytes. Structural change of its polypeptid chain during gel formation. J. Biochem., 1976, v. 80, p. 649-652.

130. Neuwirth M.„The structure of the haemocytes of Galleriamellonella (Lepidoptera). J. Morphol., 1973» -v. 139, P. 105-124.

131. Neville A.C., Luke B.M. A two-system model for chitin-protein complexes in insect cuticles. Tissue and Cell, 1969, v. 1, p. 689-701.

132. Ogawa H., Taneda A., Kanaoka Y., Sekine T. The histochemical distribution of protein bound sulfhydryl groups in human epidermis by the new staining method. J. Histochem. Cytochem., 1979, v. 27, p. 942-946.

133. Ouazana R. Structure et composition chimique du t6gumentcuticulaire des nematodes. Bull. soc. zool. France, 1982, t. 107, p. 420-432.

134. Percy J. Haemocytes associated with basement membrane of- 223 sex pheromone gland of Trichoplusia ni (Lepidoptera: Noctulidae). Ultrastructural observations. Can. J. Zool., 1978, v. 56, p. 238-245.

135. Pinkey K.G. Tyrosinasa in crustaceae blood. J. Exp. Biol., 1930, v. 7, p. 19-36.

136. Price C.D., Ratcliffe IT.A. A reappraisal of insect haemotocyte.classification by the examination of blood from fifteen insect orders. Z. Zellforsch., 1974, Bd 147, S. 537-549.

137. Ramalingam E. Chemical nature of monogenean sclerites. I.

138. Stabilization of clamp-protein by formation of dity-rosin. Parasitology, 1973, v. 66, p. 1-7.

139. Ratcliffe IT.A., Price C.D. Correlation of light and electron microscope hemocyte structure in Dictyoptera. -J. Morphol., 1974, v. 144, p. 485-497.

140. Richards A.G. The cuticle of arthropods. Ergebn. Biol.,195S, Bd. 20, S. 1-26.

141. Richards A.G. Sclerotizatiou and the localisation ofbrown and black colors in insect. Zool. Jahrb., Anat., 1967, Bd. 84, S. 25-62.

142. Rowley A.F. ULtrastructural and cytochemical studies onthe blood cells of the sea squirt, Ciona intestina-lis. Cell Tiss. Res., 1982, v. 223, P. 403-414.

143. Rowley A.P., Ratcliffe N.A. The granular cells of Galleriamellonella during clotting and phagocytic reactions in vitro. Tissue and Cell, 1976, v. 8, p.437-446.

144. Rowley A.F., Ratcliffe N.A. A histological study of woundhealing and hemocyte function in the wax-moth Galleria mellonella. J. Morphol., 1978, v. 157, p. 181200.

145. Rowley A.F., Ratcliffe N.A. An ultrastructural and cytochemical study of the interaction between latex particles and the haemocytes of the wax-moth Galleria mellonella in vitro. Cell Tiss. Res., 1979, v. 199, p. 127-137.- 225

146. Rowley A.F., Ratcliffe N.A. Insects. In: Invertebrateblood cells. London a.o.: Academic Press, 1981, v. 2, p. 421-490.

147. Ruppert E.E., Carle K.J. Morphology of metasoan circulatory system. Zoomorphology, 1983» v. 103, P- 193-208.

148. Schatz L. The development and differentiation of arthropodprocuticle: staining. Ann. Entomol. Soc. Amer., 1952, v. 45, p. 678-686.

149. Schauinsland H. Zur Anatomic der Priapuliden. Zool.

150. Anz., 1887, Bd. 10, S. 103-118.

151. Schmit A.R., Ratcliffe IT.A. The encapsulation of foreigntissue implantants in Galleria mellonella larvae. -J. Insect. Physiol., 1977, v. 23, p. 175-184.

152. Schmit A.R., Ratcliffe IT.A. The encapsulation of aralditeimplants and recognition of foreigness in Clitumnus extradentatus. J. Insect Physiol., 1978, v. 24, p. 571-521.

153. Schmit A.R., Rowley A.F., Norman A., Ratcliffe N.A. Therole of Galleria mellonella hemocytes in melanin formation. J. Invert. Pathol., 1977, v. 29, p. 232234.

154. Scott H.R. Rapid staining of beta cell granules in pancreatic islets-. Stain Technol., 1952, v. 27, p. 267-268.

155. Shishikura F., Ohiba J., Sekiguchi K. Two types of hemocytes in lokalisation of clottable protein in Japanese horse-shoe crab, Tachypleus tridentatus. J. Езф. Zool., 1977, v. 201, p. 303-308.

156. Sminia T. Gastropods. In: Invertebrate blood cells. London a.o.: Academic Press, 1981, v. 1, p. 189-252.

157. Smith J.D. A technique for the histochemical demonstrationof polyphenol oxidase and its application to egg chell formation in helminths and byssus formation in Mytilus. Quart. J. Micr. Sci., 1954, v. 95, p. 139-152.

158. Smith M.J. The blood cells and tunica of ascidian Halocynthia auranthium (Pallas). Biol. Bull., 1970, v. 138, p. 354-388.

159. Stang-Voss C. Z-цГ Ultrastructur der Blutzellen wirbelloser Tiere. I. Uber die Haemocyten der Larve des Mehl-kafers Tenebrio molitor L.Z. Zellforsch., 1970, Bd. 103, S. 589-605.

160. Sternshein D.J., Burton P.R. Light and electron microscopic studies of Crayfish hemocytes. J. Morphol., 1980, v. 165, p. 67-83.- 227

161. Sti6venart J. Recherches sur la morphologie et 6tude histochimique de la tuniqe dfHalocynthia papillosa Gun. Ann. Soc. roy. zool. Belg., 1971, t. 101, p.25-56.

162. Tai J.Y., Seid R.C., Huhn R.D., Liu T.-J. Studies on Limulus amoebocyte lysate. II. Purification of the coagu-logen and the mechanism of clotting. J. Biol. Chem., 1977, v. 252, p. 4773-4776.

163. Taylor R.L., Richards A.G. The subimaginal cuticle of themayfly Callibaetis sp (Ephemeroptera). Ann. Entom. Soc. Amer., 1963, v. 56, p. 418-423.

164. Torre J.C., Surgeon J.W. A methodological approach to rapid and sensitive monoamine histofluorescence using a modified glioxilic acid technique the SPG method. -Histochemistry, 1976, v. 49, p. 81-93.

165. Travis D.F. The deposition of sceletal structure in the

166. Crustacea. 3« The histochemical changes associated with the development of the mineralized gastrolithsin the crayfish, Orconectes virilis Hagen. Acta histochem., 1963, Bd. 15» S. 269-284.

167. Unestam Т., ITylund J.E. Blood reaction in vitro in crayfish against a fungal parasite, Aphanomices astaci. J. Invert. Pathol., 1972, v. 19, p. 94-106.

168. Vardanis A. Characteristics of the chitin-synthesising system of insect tissue (BBA 29042). Biochem. Biophys. Acta, 1979, v. 588, p. 142-147.

169. Whitehead D.L. Hew evidence for the control mechanism ofsclerotization in insects. Nature, 1969, v. 224, p. 721-723.

170. Voss-Foucart M.F., Barzin F., Toussaint C. Etude сотрагёеde la composition en acides amin§s d'extraits pepti-dique de la cuticle de sipunculiens et d'annelides polychaetes. Arch. zool. exp. g§n., 1978, t. 118, p. 467-470.- 229

171. Wigglesworth V.B. The hematocytes and. connective tissueformation in an insect, Rhodnius prolixus (Hemiptera). Quail;. J. Micr. Sci., 1956, v. 97, p. 89-98.