Интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге право- и левополушарных крыс при ингибировании NO-синтазы в условиях нарушения мозгового кровообращения

Косенко, Юлия Владимировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге право- и левополушарных крыс при ингибировании NO-синтазы в условиях нарушения мозгового кровообращения
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге право- и левополушарных крыс при ингибировании NO-синтазы в условиях нарушения мозгового кровообращения"

На правах рукописи

Косенко Юлия Владимировна

ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В МОЗГЕ ПРАВО-И ЛЕВОПОЛУШАРНЫХ КРЫС ПРИ ИНГИБИРОВАНИИ 1ГО-СИНТАЗЫ В УСЛОВИЯХ НАРУШЕНИЯ МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ

03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ростов-на-Дону 2009

003468187

Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии детей и подростков Педагогического института Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Южный федеральный университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук,

профессор

Менджерицккй Александр Маркович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник Федорова Татьяна Николаевна

доктор биологических наук, профессор

Погорелова Татьяна Николаевна

Ведущая организация:

Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН (г. Москва)

Защита диссертации состоится » мая 2009 года в_часов на заседании диссертационного совета Д. 212.208.07 по биологическим наукам в Южном федеральном университете (344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Большая Садовая, 105/42, ЮФУ, ауд. 203).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Южный федеральный университет» по адресу: 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Пушкинская, 148.

Автореферат разослан «1 б » апреля 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

Колмакова Т.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Изменение интенсификации свободноради-кальных процессов (СРП) возникает в организме в ответ на любое воздействие (Болдырев, 2001; Лобов с соавт., 2002; Olney, 1994; Shivakumar et al., 1995; Kondo et al., 1997; Rao et al., 1999; Adibhatia et al, 2003; Warner et al., 2004 и др.). В условиях стресса могут развиваться энергетический дефицит (Биленко, 1989; Лукьянова с соавт., 2007), дестабилизация клеточных мембран и нарушение процессов рецепторного связывания (Гусев, Скворцова, 2001; Скворцова, 2003), что приводит к гибели клеток по механизмам некроза и апоптоза (Chopp, Li, 1996; Morita-Fujimura et al., 2001; Nozaki et al., 2001; Kim et al., 2002; Crack et al., 2006 и др.).

Одним из основных медиаторов, регулирующих развитие этих процессов, является оксид азота, исследование которого стало возможным после открытия ферментных систем, ответственных за продукцию NO (Реутов, 1995). При этом использование ингибиторов NO-синтаз в различных моделях стресса способствует раскрытию вопроса о взаимосвязи антиоксидантного статуса и состояния системы оксида азота. Известно, что синтез индуцибель-ной NO-синтазы в макрофагах и других клетках организма является основой неспецифической резистентности и адаптации к стрессорным воздействиям (Меерсон с соавт., 1994), а ингибирование деятельности индуцибельной NO-синтазы снижает проявления окислительного стресса в условиях ишемиче-ского повреждения мозга (Parmentier et al, 1999; Rawal et al., 2004).

Одним из малоизученных препаратов, включающихся в регуляцию активности синтаз оксида азота, является AR-R 17477. Опираясь на данные литературы, можно утверждать, что AR-R 17477 ингибирует как индуци-бельную (Проскуряков с соавт., 2005), так и нейрональную изоформы NO-синтазы (Harukuni et al., 1999; O'Neil et al., 2000; Fedorov et al., 2004; Will-mot et al., 2005). Важно, что данный препарат не ингибирует эндотелиаль-ную NO-синтазу в силу ее важнейшей роли в поддержании сосудистого тонуса (Fedorov et al., 2004).

В настоящее время широко обсуждается проблема функционального состояния систем КО й антиоксидантов в контексте межполушарных взаимоотношений в условиях стресса. Исходя из представления о сопряженности поведенческого, нейрофизиологического и биохимического уровней системы функциональной межполушарной асимметрии (Клименко, 2004), наиболее адекватной моделью для изучения показателей свободноради-кального окисления является нарушение мозгового кровообращения (НМК) у животных с разным латеральным профилем.

Актуальность проблемы ишемического повреждения мозга обусловлена тем, что, согласно статистическим данным, ежегодно в мире переносят

инсульт около 6 млн. человек, а в России - более 450 тысяч (Яхно, Парфенов, 2000). Сосудистые заболевания головного мозга являются одной из ведущих причин заболеваемости, смертности и инвалидизации в нашей стране (Верещагин, Суслина, 2003; Гусев с соавт., 2003). При этом локализация ишемического очага в мозге в значительной мере определяет степень функциональных и регуляторных нарушений в организме (Кадыков, 2003), вероятно, в том числе, в результате различий в антиоксидантном статусе структур мозга, а именно, латерализации нейрохимических систем (Фокин, Пономарева, 2004).

Цель работы: изучение влияния ингибитора ЫО-синтазы на развитие окислительного стресса и изменение энергетического обмена в мозге крыс с разньм латеральным профилем при двусторонней окклюзии сонных артерий. Задачи исследования:

1. Исследовать состояние свободнорадикальных процессов и энергетического баланса в мозге крыс с разным латеральным профилем при 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, контра-латерального направленности побежек и ротаций в лабиринте, и 24-часовом дотировании сонной артерии со стороны полушария, ипсилате-рального направленности побежек и ротаций.

2. Изучить состояние свободнорадикальных процессов и энергетического баланса в мозге крыс с разным латеральным профилем при 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, ипсилатерального направленности побежек и ротаций, и 24-часовом дотировании сонной артерии со стороны полушария, контралатерального направленности побежек и ротаций в лабиринте.

3. Выявить влияние ингибитора синтазы оксида азота (АИ-Я 17477) на свободнорадикальные процессы и энергетический баланс в мозге лож-нооперированных крыс с разным латеральным профилем.

4. Исследовать влияние АЯ-Л 17477 на процессы свободнорадикального окисления и энергетический баланс в структурах мозга крыс с разным латеральным профилем, находящихся в условиях двусторонней окклюзии сонных артерий.

Выявить критерии устойчивости организма к окклюзии сонных артерий различной продолжительности у животных с разным латеральным профилем по изменению межполушарных взаимоотношений нейрохимических систем.

Научная новизна результатов исследования. Впервые в модели двусторонней окклюзии сонных артерий были установлены различия в протекании свободнорадикальных процессов и энергетического обмена в структурах мозга крыс с разным латеральным профилем.

Впервые показано, что низкая устойчивость крыс с праволатеральным профилем к нарушению мозгового кровообращения формируется в резуль-

тате недостаточности антиоксидантной системы защиты и энергетического дефицита в структурах мозга.

Впервые показано, что ингибитор синтазы оксида азота (АЯ-Я 17477) снижает интенсивность свободнорадикальных процессов, улучшает состояние энергетического обмена в головном мозге крыс с разньм латеральным профилем при двусторонней окклюзии сонных артерий.

Научно-практическая значимость работы. Результаты исследования расширяют представления о нейрохимических основах формирования резистентности организма к условиям нарушения мозгового кровообращения в зависимости от латерального профиля животных и дополняют существующие сведения о развитии окислительного стресса и изменении энергетического обмена в мозге крыс при нарушении мозгового кровообращения.

Полученные данные о влиянии АЯ-Я 17477 на показатели системы ан-тиоксидантных ферментов и энергетического обмена открывают перспективу его практического применения в неврологической практике в качестве лекарственного препарата.

Основные результаты работы внедрены в учебный процесс в виде методических разработок для проведения лекционных, практических и семинарских занятий в процессе преподавания вузовских курсов «Физиология человека» и «Психофизиологические основы интеллектуальной деятельности» на кафедре анатомии и физиологии детей и подростков Педагогического института Южного федерального университета.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В коре больших полушарий ложнооперированных животных с право-латеральным профилем уровень ТБК-реактивных продуктов и антиокси-дантных ферментов выше, чем у крыс с леволатеральным профилем, что является неспецифическим фактором, определяющим устойчивость к стрессу животных с разньм латеральным профилем. При стрессорном воздействии одинаковой интенсивности у животных с праволатеральным профилем происходит более выраженное истощение антиоксидантной системы и накопление молочной кислоты в мозге, относительно крыс с леволатеральным профилем, что определяет больший процент выживаемости последних.

2. Снижение интенсификации свободнорадикальных процессов и увеличение асимметрии в распределении антиоксидантных систем в коре больших полушарий и в стволовых структурах мозга крыс в условиях введения АЯ-Я 17477 перед двусторонней окклюзией сонных артерий способствуют возрастанию процента выживаемости животных. У крыс с праволатеральным профилем введение АЯ-Я 17477 перед 3-минутной окклюзией левой сонной артерии и 24-часовой окклюзией правой сонной артерии оказывает наиболее значительное влияние на энергетический обмен, что сопровождается повышением процента выживаемости животных в два раза в данной модели стресса.

3. Под влиянием введения ингибитора синтазы оксида азота у ложно-оперированных животных с разным латеральным профилем происходит повышение межполушарных перестроек в функциональных системах анти-оксидантных ферментов.

Апробация диссертационной работы. Материалы диссертации были представлены на IV Научно-практической конференции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2005), на Всероссийской конференции с международным участием «Структурно-функциональные, нейрохимические и иммунохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга» (Москва, 2007), на II Научно-практической конференции «Современные проблемы общей биологии и естествознания» (Ростов-на-Дону, 2007), на I Международной научно-практической конференции «Новые технологии в экспериментальной биологии и медицине» (Ростов-на-Дону, 2007), на IV Научной конференции с международным участием «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Патгайа, Таиланд, 2007), на IV Международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии» (Гоа, Индия, 2007), на II Научной конференции с международным участием «Актуальные проблемы науки и образования» (Ва-радеро, Куба, 2007).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ (из них 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ). Личный вклад автора в опубликованном материале составляет 70%, объем - 0,94 п.л.

Структура работы. Диссертация изложена на 165 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и библиографического списка, включающего 257 источников, из них 96 работ отечественных и 161 работа иностранных авторов. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 31 рисунком.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводили на 196 крысах-самцах линии Вистар в возрасте шести месяцев, массой 200-250 г. Животных содержали в условиях вивария при температуре 18 - 20°С на стандартном рационе питания. В работе использовали модель двусторонней окклюзии сонных артерий (ОСА) разной продолжительности (РиЫпеШ е1 а1., 1982) с целью развития у животных ишемических и реперфузионных повреждений структур мозга. Крыс обездвиживали введением 1,2 мл 1%-го раствора тиопентала на 100 г массы тела животного. Все хирургические процедуры проводили стерильно. Контрольной группой служила группа «ложнооперированных» животных, которым проводилась аналогичная операция, но без окклюзии сонных артерий.

Латеральный профиль (ЛП) животных определяли с использованием Y-образного лабиринта (Ефимов с соавт., 1987). Регистрировали направление побежек в месте расхождения коридоров лабиринта и направленность ротаций в тупиках коридоров. Согласно данным литературы (Русинов, 1977; Порошенко 1985) электрофизиологические корреляты моторно-ориентаци-онной асимметрии в сопоставлении с электрофизиологическими признаками искусственно сформированной и гестационной однополушарной доминанты позволяют рассматривать полушарие, ипсилатеральное преимущественной направленности побежек в лабиринте, как доминантное.

Экспериментальные животные с разным ЛП были разделены на шесть групп (табл. 1): 1-я группа - контрольные ложнооперированные крысы с праволатеральным (п = 8) и леволатеральным профилем (п = 8); 2-я группа - животные с праволатеральным (п = 30) и леволатеральным профилем (п = 24), которым проводили перевязку сонной артерии (СА) со стороны полушария, контралатерального направленности побежек и ротаций (НПР) в лабиринте, на 3 минуты и окклюзию СА со стороны полушария, ипсила-терального НПР, на 24 часа; 3-я группа — крысы с праволатеральным (п = 29) и леволатеральным профилем (п = 18), которым моделировали окклюзию СА со стороны полушария, ипсилатерального НПР, на 3 минуты и 24-часовую окклюзию СА со стороны полушария, контралатерального НПР; 4-я группа - крысы с праволатеральным (п = 8) и леволатеральным профилем (п = 8), которым за 1 час до ложной операции (л/о) внутрибрю-шинно вводили AR-R 17477 в дозе 30 мг/кг веса; 5-я группа - крысы с праволатеральным (п = 17) и леволатеральным профилем (п = 16), которым

Таблица 1

Схема эксперимента

Латеральный профиль Группы животных

1-я 2-я 3-я 4-я 5-я 6-я

Левополу-шарные крысы л/о 3-минутная окклюзия правой СА+ 24-часовая окклюзия левой СА 3-минутная окклюзия левой СА+ 24-часовая окклюзия правой СА AR-R 17477+ л/о АЯ-Я 17477+ 3-минутная окклюзия правой СА+ 24-часовая окклюзия левой СА АЛ-Л 17477+ 3-минутная окклюзия левой СА+ 24-часовая окклюзия правой СА

Правополу-шарные крысы 3-минутная окклюзия левой СА+ 24-часовая окклюзия правой СА 3-минутная окклюзия правой СА+ 24-часовая окклюзия левой СА АЯ-Я 17477+ 3-минутная окклюзия левой СА+ 24-часовая окклюзия правой СА ЛК-Я 17477+ 3-минутная окклюзия правой СА+ 24-часовая окклюзия левой СА

внутрибрюшинно за 1 час до операции вводили AR-R 17477 (30 мг/кг), затем проводили перевязку CA со стороны полушария, контралатерального НПР, на 3 минуты и окклюзию CA со стороны полушария, ипсилатераль-ного НПР, на 24 часа; 6-я группа - крысы с праволатеральным (п = 19) и леволатеральным (п = 11) профилем, которым за 1 час до операции внутрибрюшинно вводили AR-R 17477 (30 мг/кг) и проводили окклюзию CA со стороны полушария, ипсилатерального НПР, на 3 минуты и окклюзию CA со стороны полушария, контралатерального НПР, на 24 часа.

Через 24 часа после операции животных декапитировали в утренние часы. Мозг извлекали при минусовой температуре и выделяли правую и левую кору больших полушарий (КБП), правые и левые стволовые структуры (СС). Результаты сравнивали с контрольной группой животных.

Во всех сериях эксперимента в гомогенатах отделов мозга определяли содержание ТБК-реактивных продуктов (ТБК-РП) (Арутюнян, 2000), активность антиоксидантных (АО) ферментов: каталазы (Королюк с соавт., 1988), глутатионпероксидазы (ГПО) (Gunzler, Flohe, 1986), глутатионре-дуктазы (TP) (Beutler, 1975) и глутатион-Б-трансферазы (ГТ) (Карпищенко, 1999), уровень восстановленного глутатиона (ВГ) (Ellman, 1959), тиоловых групп белков (Арутюнян, 2000). Интенсивность углеводного обмена в мозге оценивали по содержанию основных метаболитов: глюкозы (с помощью набора реагентов фирмы «Ольвекс Диагностикум», Россия), пировиноград-ной кислоты (определяли модифицированным методом Умбрайта [Камышников, 2000]) и молочной кислоты (МК) (определяли модифицированным методом Barker, Summerson [Меньшиков, 1987]).

Для оценки асимметрии в распределении нейрохимических систем в коре больших полушарий и стволовых структурах мозга вычисляли коэффициент асимметрии КА:

где XR - значение данного показателя в правой коре больших полушарий (стволовых структурах), XL — значение данного показателя в левой коре больших полушарий (стволовых структурах).

Результаты были обработаны статистически и определены достоверности различий между группами по t-критерию Стьюдента и критерию Вил-коксона с использованием программы Statistica 5.5.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на свободнорадикальные процессы в мозге у крыс с разным латеральным профилем. В результате проведенного исследования установлено, что у ложнооперированных крыс с леволатеральным профилем уровень ТБК-РП

в коре больших полушарий был ниже, чем у крыс с праволатеральным профилем. При введении АЯ-Я 17477 перед л/о у крыс с праволатеральным профилем наблюдали достоверное снижение данного показателя в правых СС, а у крыс с леволатеральным профилем - в правых и левых стволовых структурах относительно контроля (табл. 2).

Таблица 2

Содержание ТБК-РП, активность каталазы, глутатиоипсроксидазы,

глутатиои-в-трансферазы в мозге у ложиоопернрованных крыс _с разным латеральным профилем (М±т)_

Группы Правая КБП | Левая КБП | Правые СС | Левые СС

Содержание ТБК-РП (нмоль/г белка)

Контроль, крысы с П 26,22±0,89 26,33±0,98 27,49±1,43 24,32±1,15

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с П 24,57±2,31 24,78±1,67 22,32±0,93* 22,67±2,21

Контроль, крысы с Л 21,02±0,81# 20,09±0,72# 28,40±1,21 25,45±1,67

Введение ЛЯ-Я 17477 перед л/о крысам с Л 19,27±1,08 18,23±0,89 17,47±1,56* 20,33±1,21*

Активность каталазы (ммоль/мин. на 1 г белка)

Контроль, крысы с П 4,25±0,16 5,38±0,20 4,04±0,15 2,06±0,08

Введение Л Я-Я 17477 перед л/о крысам с П 7,21±0,26* 7,91±0,27* 6,64±0,22* 4,20±0,17*

Контроль, крысы с Л 4,04±0,14 3,63±0,13# 2,88±0,10# 3,32±0,11#

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с Л 5,03±0,19* 5,81±0,19* 4,55±0,17* 5,45±0,18*

Активность глутатионпероксидазы (мкмоль/мин. на 1 г белка)

Контроль, крысы с П 46,29±1,40 60,99±1,74 80,15±2,76 77,26±2,09

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с П 23,72±0,79* 31,10±0,86* 32,42±1,26* 48,33±1,73*

Контроль, крысы с Л 40,13±1,54# 19,50±0,57# 43,27±1,24# 43,24±1,17#

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с Л 52,98±1,70* 22,74±0,65* 88,59±2,95* 56,70±1,72*

Активность глутатион-8-трансферазы (ммоль/мин. на 1 г белка)

Контроль, крысы с П 5,52±0,19 6,11±0,19 4,12±0,08 4,19±0,12

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с П 4,26±0,13* 5,44±0,16 3,82±0,12 3,45±0,08*

Контроль, крысы с Л 12,87±0,31# 12,82±0,46# 10,25±0,29# 10,35±0,2б#

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с Л 13,14±0,42 11,27±0,63 7,22±0,20* 7,94±0,27*

Примечание: П — праволатеральный профиль; Л - леволатеральный профиль; * -отличия достоверны относительно контроля; # — отличия достоверны относительно контрольных крыс с праволатеральным профилем.

Во 2-й группе крыс с праволатеральным профилем наиболее значимое увеличение уровня ТБК-РП было зафиксировано в правом полушарии, а у животных с леволатеральным профилем наблюдали еще более выраженное

накопление ТБК-РП в правой и левой КБП относительно контроля. В то же время в 3-й группе крыс с праволатеральным профилем наблюдали более значимое возрастание содержания ТБК-РП в КБП по сравнению с животными с леволатеральным профилем. Необходимо отметить, что у крыс 2-й и 3-й групп менее выраженное накопление ТБК-РП в мозге наблюдали в стволовых структурах при 3-минутной окклюзии СА (рис. 1).

300 250 200 , 150 -°100 50 -О -50 -

Ш2 группа правополушарные £35 группа правополушарные □ 2 группа левополушарные Щ 5 группа лезополушарные

250 200 150

% 100 50 0 -50

О^мЬг. I д

■У

й*

ЕЗ группа правополушарные И6 группа правополушарные □ 3 группа левополушарные §36 группа левополушарные

. 50 0 •

160 120 во

% 40 О

-80

Е32 группа правополушарные И 5 группа правополушарные 02 группа левополушарные □ 5 группа левополушарные

03 группа правополушарные И 6 группа правополушарные 03 группа левополушарные В6 группа левополушарные

Рис. 1. Изменение уровня ТБК-реактивных продуктов и каталазной активности в мозге крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий под влиянием

АЯ-Я 17477 (в % к контролю): А, Б - содержание ТБК-реактивных продуктов;

В, Г - активность каталазы; 1 - правая КБП; 2 - левая КБП; 3 - правые СС;

4 — левые СС; * - отличия достоверны по сравнению с контролем

Введение АЯ-Я 17477 перед окклюзией сонных артерий (ОСА) крысам с разным латеральным профилем способствовало уменьшению содержания ТБК-РП в мозге до уровня контроля, что свидетельствует о снижении интенсификации СРП в ответ на НМК.

Различия в содержании ТБК-РП в мозге у крыс с разным ЛП могут быть обусловлены разной функциональной активностью системы антиок-сидантной (АО) защиты. Для подтверждения данного предположения далее провели изучение влияния ингибитора Т^О-синтазы на АО-активность моз-

га животных в разных моделях ОСА. Для этого в коре больших полушарий и стволовых структурах мозга мы исследовали активность каталазы, ферментов глутатионовой системы (глутатионпероксидазы, глутатион-Б-тран-сферазы и глутатионредуктазы), а также уровень неферментативных анти-оксидантов (ВГ и белковых тиоловых групп).

В группе ложнооперированных крыс с леволатеральным профилем активность каталазы снижалась в левой КБП на 33% и в правых СС на 29%, но увеличивалась в левых СС на 61%, относительно ложнооперированных крыс с праволатеральным профилем. У крыс с разным ЛП при введении АЯ-Я 17477 перед л/о наблюдали возрастание каталазной активности в исследуемых структурах мозга относительно контроля (табл. 2).

В мозге крыс 2-й группы с праволатеральным профилем в коре больших полушарий наблюдалось снижение каталазной активности, а в стволовых структурах - увеличение, по сравнению с контролем. При введении АЯ-Я 17477 крысам с праволатеральным профилем (5-я группа) обнаружено увеличение активности каталазы в левых стволовых структурах - р < 0,01 (рис. 1).

У животных с леволатеральным профилем 2-й группы активность каталазы достоверно увеличивалась только в левых СС на 57%, а при введении АЯ-Я 17477 (5-я группа) - во всех структурах мозга (р < 0,05), по сравнению с контролем (рис. 1).

При ОСА наблюдали снижение активности ГПО в мозге крыс с праволатеральным профилем (рис. 2). Следует отметить, что в КБП со стороны 24-часовой окклюзии СА отмечали также наибольшее снижение каталазной активности по сравнению с другими структурами мозга (рис. 1), что, вероятно, является отражением значительной интенсификации здесь СРП. При введении же АЯ-Я 17477 перед ОСА у крыс с правым ЛП наблюдали увеличение активности ГПО в левых (5-я группа), либо в правых стволовых структурах (6-я группа) относительно контроля.

В отличие от крыс с праволатеральным профилем, у крыс с леволатеральным профилем при ОСА активность ГПО увеличивалась во всех исследуемых структурах мозга (за исключением правой КБП в 3-й группе). Известно, что ГПО помимо восстановления гидроперекисей и утилизации Н202 проявляет и пероксинитритредуктазную активность, восстанавливая ОЫОО" до нитрит-аниона 1Ч02~ (Меньшикова с соавт., 2006). Возможно, именно повышенное содержание пероксинитрита у крыс с леволатеральным профилем 2-й группы индуцирует наиболее выраженное повышение активности ГПО относительно контроля (рис. 2). Предварительное введение АЯ-Я 17477 крысам с левым ЛП в данной модели ОСА способствовало снижению активности глутатионпероксидазы во всех исследуемых структурах мозга. Возможно, это связано с уменьшением образования 0Ж)0~ в мозге, что в свою очередь обусловливает предотвращение реакций переокисления и нитрования, в которые активно вступает пероксинитрит.

с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий под влиянием AR-R 17477 (в % к контролю): А, Б - активность глутатионпероксидазы;

В, Г - активность глутатион-8-трансферазы; 1 - правая КБП; 2 - левая КБП;

3 - правые СС; 4 - левые СС; * - отличия достоверны по сравнению с контролем

Кроме того, во 2-й группе крыс с леволатеральным профилем увеличение активности ГПО относительно контроля было значительно выше, чем в 3-й группе крыс с леволатеральным профилем. Вероятно, это может быть обусловлено более высокой активностью каталазы в мозге крыс с левым ЛП 3-й группы относительно 2-й группы крыс с леволатеральным профилем (рис. 1).

У ложнооперированных крыс с леволатеральным профилем выявлена более высокая активность глу татион-S - гран с ф ераз ы в мозге, относительно ложнооперированных крыс с правым ЛП. При введении AR-R 17477 наблюдали достоверное снижение активности ГТ у животных с праволате-ральным профилем в правой КБП и левых СС, а у крыс с леволатеральным профилем отмечали снижение активности ГТ в стволовых структурах, по сравнению с контролем (табл. 2).

В мозге крыс с праволатеральным профилем при двусторонней ОСА на фоне снижения ферментативной активности ГПО наблюдали увеличение активности ГТ, тогда как у крыс с леволатеральным профилем выявлена обратная зависимость - увеличение ГПО активности на фоне понижения активности ГТ (рис. 2).

Следует также отметить, что в стволовых структурах мозга при 3-минутной окклюзии СА у крыс с праволатеральным профилем 2-й и 3-й групп происходило наиболее значительное увеличение активности глута-тион-Б-трансферазы, а у животных с левым ЛП - наименьшее снижение активности данного фермента.

Введение АЯ-Я 17477 крысам с праволатеральным профилем при ОСА вызывало, как правило, снижение активности глутатион-8-трансферазы, а у крыс с леволатеральным профилем - повышение ферментативной активности ГТ в исследуемых структурах мозга, по сравнению со 2-й и 3-й группами (рис. 2).

Также было установлено, что у ложнооперированных крыс с леволатеральным профилем уровень ВГ достоверно ниже в коре больших полушарий и правых стволовых структурах, относительно крыс с праволатеральным профилем (табл. 3).

Таблица 3

Уровень ВГ, активность глутатионредукгазы и содержание белковых тполовых групп в мозге у ложнооперированных крыс с разным латеральным профилем (М±т)

Группы Правая КБП | Левая КБП | Правые СС | Левые СС

Содержание ВГ (мкмоль/г ткани)

Контроль, крысы с П 0,90±0,03 0,82±0,03 1,74±0,06 0,85±0,03

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с П 0,36±0,01* 0,27±0,01* 1,30±0,05* 3,86±0,12*

Контроль, крысы с Л 0,63±0,02# 0,58±0,02# 0,67±0,02# 1,09±0,12

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с Л 0,27±0,01* 0,52±0,02 0,84±0,03* 0,99±0,04

Активность глутатионредуктазы (мкмоль/мин. на 1 г белка)

Контроль, крысы с П 24,44±0,82 20,32±0,82 10,83±0,36 27,93±0,82

Введение ЛЯ-Я 17477 перед л/о крысам с П 26,79±0,96 18,23±0,73 39,31±1,98* 28,51±0,87

Контроль, крысы с Л 32,52±1,25# 23,91±0,89# 19,33±0,69# 30,96±0,89#

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с Л 33,23±1,23 22,17±0,78 46,13±1,67* 72,10±2,49*

Содержание белковых тиоловых групп (мкмоль/мг белка)

Контроль, крысы с П 66,16±2,07 52,02±1,58 52,47±1,81 44,13±1,19

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с П 54,59±1,40* 71,32±1,93* 33,09±1,14* 47,38±1,58

Контроль, крысы с Л 63,82±2,13 118,06±3,11# 47,89+1,71 73,75±2,31#

Введение АЯ-Я 17477 перед л/о крысам с Л 69,60±2,18 63,69±1,93* 69,89±2,06* 46,77±1,23*

Примечание: сокращения как в табл. 2

При ОСА в мозге у крыс с разиьм латеральным профилем наблюдали снижение уровня ВГ. Обратимая окислительная модификация БН-групп является неспецифической реакцией организма на экстремальное воздействие. Известно, что истощение содержания ВГ в мозге при нарушениях мозгового кровообращения не обусловлено потреблением ВГ в перекисных реакциях с образованием окисленного глутатиона, а связано с первичным нарушением его синтеза из-за дефицита энергии или выходом ВГ во внеклеточное пространство (Биленко, 1989). Под влиянием введения АЯ-Я 17477 происходило увеличение уровня ВГ в исследуемых структурах мозга (за исключением коры больших полушарий у крыс с правым ЛП при ОСА). Это является отражением положительного влияния препарата при НМК, так как восстановленный глутатион функционирует на трех линиях ферментативной АО-защиты: восстановление Н202, гидроперекисей полиненасыщенных жирных кислот и обезвреживание вторичных метаболитов окислительной модификации (Кулинский, 1999).

В работе показано, что у ложнооперированных крыс с леволатераль-ным профилем активность ГР достоверно выше в коре больших полушарий и стволовых структурах, относительно крыс с праволатеральным профилем. При введении же ингибитора ЪЮ-синтазы перед л/о обнаружено значительное увеличение активности ГР у крыс с праволатеральным профилем в правых СС, а у крыс с леволатеральным профилем в правых и левых СС по сравнению с контролем (табл. 3).

У животных с праволатеральным профилем 2-й группы наблюдали более значительное снижение активности глутатионредуктазы в мозге по сравнению с 3-й группой крыс с праволатеральным профилем, относительно контроля. В стволовых структурах мозга со стороны 3-минутной окклюзии С А у крыс с правым ЛП 2-й и 3-й групп активность ГР была на уровне контроля, что, вероятно, способствовало увеличению ферментативной активности глутатион-8-трансферазы в данных структурах мозга. При введении АЯ-Я 17477 перед ОСА происходило увеличение активности ГР в мозге крыс с праволатеральным профилем 5-й группы относительно 3-й группы животных с праволатеральным профилем.

Активность ГР в мозге животных с леволатеральным профилем 2-й группы была на уровне контроля, что, возможно, способствовало увеличению активности ГПО у этих крыс. Введение АЯ-Я 17477 перед аналогичной моделью ОСА у крыс с леволатеральным профилем привело к увеличению активности глутатионредуктазы в мозге относительно животных 2-й группы. Следует отметить, что введение АЯ-Я 17477 в большей степени способствовало восстановлению функциональной активности ГР у крыс с разным ЛП при 3-минутной окклюзии СА со стороны полушария, контра-латерального НПР, и 24-часовой окклюзии СА со стороны полушария, ип-силатерального НПР, относительно другой модели стресса.

Таким образом, интенсификация процессов свободнорадикального окисления при ОСА не является обязательным фактором, приводящим к снижению активности АО-ферментов, и связь между этими двумя процессами не всегда имеет односторонний причинно-следственный характер. Так, существенное накопление ТБК-РП в головном мозге при НМК происходило на фоне повышения активности ГПО (у крыс с леволатеральным профилем), ГТ (у крыс с праволатеральным профилем). В то же время у крыс с разным латеральным профилем в некоторых структурах мозга увеличивалась активность каталазы.

В процессе изучения содержания белковых тиоловых групп было установлено, что у крыс с леволатеральным профилем 1-й группы уровень белковых SH-групп выше в левом полушарии и левых стволовых структурах по сравнению с крысами праволатерального профиля (табл. 3).

Наиболее значимое истощение белковых тиоловых групп на фоне снижения концентрации ВГ наблюдали у крыс с праволатеральным профилем при 3-минутной окклюзии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА. Тогда как у животных с левым ЛП при ОСА снижение уровня белковых SH-групп относительно контроля было обнаружено только в левом полушарии и левых стволовых структурах.

При введении AR-R 17477 происходили неоднозначные изменения в содержании белковых тиоловых групп в мозге крыс при ОСА. Возможно, это связано с тем, что тиолы (тиоредоксин и тиоредоксинредуктазная система) способствуют восстановлению каталитически активной структуры индуцибельной NO-синтазы (Ravi et al., 2004). Взаимосвязь тиоредоксина с NO-синтазой осуществляется как посредством прямого воздействия (защищает NO-синтазу от feedback-инактивации N0), так и через различные факторы транскрипции. Следовательно, в условиях изменения интенсивности СРП восстановленный глутатион и белковые SH-группы могут изменять свои свойства с антиоксидантного на прооксидантное.

Одной из наиболее значимых причин нарушения про- и антиоксидантного равновесия является энергетический дефицит в клетках. Поэтому далее представлены результаты изучения содержания глюкозы, пирувата и лактата в мозге у крыс с разным ЛП при ОСА.

Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на энергетический баланс в мозге у крыс с разным латеральным профилем. Показатели содержания глюкозы, пирувата и лактата в мозге у ложно-оперированных крыс с разным ЛП представлены в табл. 4.

При двусторонней ОСА у крыс с разным латеральным профилем наблюдали снижение уровня глюкозы в исследуемых структурах мозга (за исключением стволовых структур во 2-й группе крыс с правым ЛП). При введении ингибитора NO-синтазы перед ОСА уровень глюкозы в мозге увеличивался относительно крыс 2-й и 3-й групп (в стволовых структурах мозга крыс 2-й группы с праволатеральным профилем уровень глюкозы снижался).

Таблица 4

Содержание глюкозы, пиру вага и лактата в мозге у ложнооперированных крыс с разным латеральным профилем (М±т)

Группы Правая КБП | Левая КБП | Правые СС | Левые СС

Содержание глюкозы (мкмоль/г влажной ткани)

Контроль, крысы с П 2,33±0,09 2,24±0,06 2,03±0,08 2,06±0,08

Введение AR-R 17477 перед л/о крысам с П 2,18±0,08 2,76±0,07* 2,34±0,09* 2,29±0,08

Контроль, крысы с JI 3,24±0,Ш 2,28±0,08 2,54±0,10# 1,99±0,07

Введение AR-R 17477 перед л/о крысам с Л 1,81±0,07* 1,70±0,07* 2,47±0,09 3,27±0,11*

Содержание пирувата (мкмоль/г влажной ткани)

Контроль, крысы с П 1,27±0,04 1,15±0,04 1,77±0,05 2,10±0,06

Введение AR-R 17477 перед л/о крысам с П 1,89±0,05* 1,66±0,02* з,о8±о,о9* 3,93±0,11*

Контроль, крысы с J1 1,84±0,05# 1,58±0,05# 2,28±0,06# 1,54±0,05#

Введение AR-R 17477 перед л/о крысам с Л 2,25±0,06* 1,66±0,05 2,16±0,06 2,46±0,07*

Содержание лактата (мкмоль/г влажной ткани)

Контроль, крысы с П 0,64±0,02 0,63±0,02 0,88±0,03 0,90±0,03

Введение AR-R 17477 перед л/о крысам с П 0,69±0,02 0,69±0,02 0,77±0,05 0,85±0,02

Контроль, крысы с Л 1,06±0,03# 1,15±0,03# 1,80±0,06# 1,79±0,05#

Введение AR-R 17477 перед л/о крысам с Л 0,60±0,02* 0,70±0,02* 0,87±0,02* 1,41±0,04*

Примечание: сокращения как в табл. 2

У крыс с праволатеральным профилем в условиях 3-минутной окклюзии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА происходило увеличение уровня пирувата в исследуемых структурах мозга относительно контроля (рис. 3). По данным B.C. Новикова с соавт. (1998), увеличение пирувата в мозге при окислительном стрессе свидетельствует о снижении его утилизации в процессе окислительного фосфорилирования. Введение AR-R 17477 перед аналогичной моделью ОСА способствовало снижению содержания пирувата в мозге, что, вероятно, связано с усилением процесса окислительного фосфорилирования.

В 3-й группе крыс с праволатеральным профилем наблюдали увеличение уровня пирувата в мозге относительно контроля (за исключением правого полушария), но накопление пирувата у данной группы животных было менее выраженным, чем во 2-й группе крыс с праволатеральным профилем (рис. 3). При введении AR-R 17477 в 6-й группе крыс с праволатеральным профилем в КБГ1 и правых СС содержание пирувата было увеличено относительно контроля.

П2 группа правополушарные Ш5 группа правополушарные □ 2 группа левополушарные 05 группа левополушарные

ЕЭЗ группа правополушарные

□ 6 группа правополушарные

□ 3 группа левополушарные Ш6 группа левополушарные

2 3

Е32 группа правополушарные Ш5 группа правополушарные □ 2 группа левополушарные 05 группа левополушарные

ЕЗЗ группа правополушарные П6 группа правополушарные □3 группа левополушарные ®6 группа левополушарные

Рис. 3. Изменение содержания пирувата и лактата в мозге у крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий под влиянием АЛ-Я 17477 (в % к контролю): А, Б - содержание пирувата; В, Г - содержание лактата; 1 - правая КБП; 2 - левая КБП;

3 - правые СС; 4 - левые СС; * - отличия достоверны по сравнению с контролем

Снижение уровня пирувата относительно контроля в мозге обнаружено только у крыс с леволатеральным профилем в модели 3-минутной окклюзии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА, а также при введении АЯ-Я 17477 крысам 6-й группы с левым ЛП (р < 0,05) (рис. 3).

Во 2-й группе крыс с праволатеральным профилем уровень молочной кислоты (МК) был выше уровня контроля во всех структурах мозга. При введении ингибитора Ж)-синтазы крысам с праволатеральным профилем 5-й группы накопление МК в мозге было менее выраженным, чем во 2-й группе крыс с правым ЛП. У крыс с леволатеральным профилем 2-й группы содержание лактата было ниже контрольных значений в левой коре больших полушарий и стволовых структурах. В 5-й группе животных с леволатеральным профилем наблюдали достоверное снижение уровня лактата во всех исследуемых структурах мозга относительно контроля (рис. 3).

В мозге крыс с праволатеральным профилем 3-й группы содержание МК было выше контроля (р < 0,05), но не столь значимо, как во 2-й группе

животных с правым ЛП. При введении AR-R 17477 крысам с праволате-ральным профилем перед 3-минутной окклюзией правой СА и 24-часовым лигированием левой СА выявлено увеличение уровня МК в стволовых структурах (р < 0,05) относительно контроля. У крыс с леволатеральным профилем 3-й и 6-й групп наблюдали снижение уровня МК в мозге, особенно в 6-й группе (рис. 3).

Увеличение уровня лактата в мозге крыс с праволатеральным профилем в условиях ОСА свидетельствует о развитии метаболического ацидоза. Известно, что закисление среды приводит к дестабилизации клеточных мембран, снижает функциональную активность нейронов, влияет на метаболические процессы, в частности, усиливает СРП, а в случаях значительных изменений рН вызывает гибель нейронов по механизму некроза. В ходе работы было установлено, что развитие ацидоза у крыс с правым ЛП сопровождается снижением активности ГПО в мозге (рис. 2). Из данных, полученных Е.М. Link (1985), известно, что ГПО проявляет максимальную активность при рН 7,5. Таким образом, увеличение уровня метаболического ацидоза, возможно, является одним из факторов, определяющих более низкую выживаемость особей с праволатеральным профилем в условиях ОСА, относительно животных с леволатеральным профилем. Кроме того, низкая резистентность животных с праволатеральным профилем является результатом высокого уровня метаболических процессов в контрольной группе крыс данного ЛП, что определяет истощение антиоксидантного звена защиты при НМК.

При этом у крыс с праволатеральным профилем в условиях 3-минутной окклюзии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА изменение энергетического баланса носит менее благоприятный характер, чем в других группах крыс при ОСА, вследствие значительного накопления пирувата и лактата в мозге. Под влиянием же введения AR-R 17477 происходит снижение уровня пирувата и лактата в мозге при данной модели ОСА. Тогда как при введении AR-R 17477 крысам с правым ЛП 6-й группы изменения содержания пирувата и лактата в мозге не носили однонаправленный характер.

Необходимо также отметить, что только в мозге крыс с левым ЛП 3-й группы происходило одновременное снижение уровня пирувата и лактата, что может быть связано с их быстрой утилизацией по пути окислительного фосфорилирования в качестве компенсаторного механизма при недостатке АТР. Известно, что в мозге активность пируватдегидрогеназного комплекса значительно выше, чем в других тканях. Кроме того, высокая активность лактатдегидрогеназы, легкая обратимость этой окислительно-восстановительной реакции, а также особенности внутриклеточной локализации лактатдегидрогеназы как в цитоплазме, так и в митохондриях позволяют наиболее полно использовать пируват и лактат в дальнейших окислительных

реакциях (Ашмарин, 1999). При введении АЯ-Я 17477 перед ОСА крысам с леволатеральным профилем (5-я и 6-я группы) уровень пирувата и лактата в мозге снижался по сравнению, соответственно, со 2-й и 3-й группами (рис. 3).

Влияние введения А Я-К 17477 перед окклюзией сонных артерий на коэффициенты асимметрии нейрохимических систем в мозге крыс с разным латеральным профилем. В настоящее время установлено существование нейрохимической асимметрии на уровне не только коры больших полушарий, но и подкорковых структур, что подтверждают результаты данного исследования. При изучении коэффициентов асимметрии нейрохимических систем экспериментальных животных было установлено, что при введении АЛ-Я 17477 перед л/о в мозге крыс с разным ЛП повышается латерализация исследованных биохимических показателей: у крыс с праволатеральным профилем в левом полушарии наблюдали преобладание активности ГТ, каталазы, содержание белковых БН-групп и глюкозы; в левых стволовых структурах - активности ГП, содержания ВГ и белковых 8Н-груш1. У крыс с правым ЛП 4-й группы в правом полушарии обнаружено повышение содержания ВГ, пирувата и активности глутатионредуктазы; в правых стволовых структурах — активности каталазы, ГТ и ГР относительно контроля.

У крыс с леволатеральным профилем 4-й группы наблюдали более выраженные межполушарные перестройки изучаемых показателей по сравнению с крысами праволатерального профиля 4-й группы, а именно: в правом полушарии происходило увеличение антиоксидантной емкости глутатион-Б-трансферазы, глутатионредуктазы, глутатионпероксидазы, содержания белковых 8Н-групп, а также пирувата и глюкозы, а в правых стволовых структурах - активности глутатионпероксидазы и уровня белковых БН-групп. В левом полушарии у крыс с леволатеральным профилем 4-й группы преобладала активность каталазы, содержание восстановленного глута-тиона и лактата, а в левых стволовых структурах - активность глутатионредуктазы, восстановленного глутатиона, каталазы и содержание показателей энергетического обмена.

В условиях стресса происходило нарушение межполушарных взаимоотношений нейрохимических систем: при НМК у крыс с разным латеральным профилем снижалась антиоксидантная емкость в полушарии со стороны 24-часового лигирования СА. При этом неспецифическим механизмом действия предварительного введения препарата АЯ-Я 17477 у крыс с праволатеральным профилем в условиях ОСА является увеличение активности АО-систем в основном в левом полушарии. В то же время у крыс с леволатеральным профилем 5-й группы наблюдали преобладание активности ГПО и ГТ в правом полушарии, а активности каталазы, ГР и содержание тиоловых групп белков - в левом. В 6-й группе крыс с леволатеральным

профилем в правом полушарии преобладали активность глутатионредукта-зы и уровень белковых БН-групп, а в левом полушарии - активность глута-тионпероксидазы, каталазы, а также содержание ВГ.

Следует также отметить, что у крыс с разным ЛП 5-й и 6-й групп содержание ТБК-РП достоверно не изменялось между правой и левой корой больших полушарий, а также между правыми и левыми стволовыми структурами (рис. 4). Тогда как в условиях ОСА симметризации антиоксидант-ных систем и энергетического баланса между стволовыми структурами не происходило, но формировались новые латеральные взаимоотношения, что, вероятно, связано с повышением потребления энергетических ресурсов на фоне нитрозативного стресса. Это подтверждают данные литературы, согласно которым наибольшие энергетические траты приходятся на период наиболее выраженной межполушарной асимметрии. Возможно, определенная часть энергии тратится на поддержание функциональной межполушарной асимметрии (Клименко, 2000), что может быть характерно и для стволовых структур.

Рис. 4. Изменение коэффициента асимметрии содержания ТБК-РП в коре больших полушарий и стволовых структурах мозга у крыс с разным латеральным профилем: А - кора больших полушарий; Б — стволовые структуры; ПЛП — крысы с праволатераль-ным профилем; ЛЛП - крысы с леволатеральным профилем; 1-6 - экспериментальные группы; * - отличия достоверны между правым и левым полушарием мозга; # — отличия достоверны между правыми и левыми стволовыми структурами

В то же время введение препарата перед ОСА сопровождалось возрастанием латерализации исследованных показателей между правыми и левыми стволовыми структурами. Предположительно, это может быть связано с тем, что ингибирование 1ЧО-синтазы снижало энергозатраты, необходимые для функционирования клетки в ишемических условиях. В результате, при введении АЯ-Я 17477, наблюдали значительное увеличение латеральных перестроек антиоксидантных систем и показателей энергетического баланса в стволовых структурах мозга.

ВЫВОДЫ

1. В модели 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, контралатерального НПР, и 24-часовой окклюзии сонной артерии со стороны полушария, ипсилатерального НПР, показано, что выживаемость крыс с леволатеральным профилем в 2 раза превышает аналогичный показатель для крыс с праволатеральным профилем. У крыс с праволатераль-ным профилем ТБК-реактивные продукты накапливаются преимущественно в правой коре больших полушарий и правых стволовых структурах мозга, а также наблюдается значительное снижение антиоксидантной системы защиты. Накопление пирувата и лактата в мозге крыс с праволатеральным профилем свидетельствует о менее благоприятном характере энергетического баланса и развитии метаболического ацидоза, относительно крыс с леволатеральным профилем.

2. В модели 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, ипсилатерального НПР, и 24-часовой окклюзии сонной артерии со стороны полушария, контралатерального НПР, более высокий уровень выживаемости наблюдается у крыс с леволатеральным профилем, относительно животных с праволатеральным профилем. В мозге крыс с леволатеральным профилем в данной модели стресса наблюдается увеличение ферментативной активности каталазы и глутатионпероксидазы на фоне снижения уровня пирувата и лактата.

3. Под влиянием ингибитора синтазы оксида азота у животных с разным латеральным профилем формируется асимметрия в распределении показателей системы антиоксидантной защиты в коре больших полушарий и стволовых структурах правой и левой половин мозга.

4. При введении ингибитора синтазы оксида азота перед окклюзией сонных артерий процент выживаемости животных с разным латеральным профилем возрастает за.счет межполушарных перестроек нейрохимических систем в коре больших полушарий и в стволовых структурах мозга относительно групп стрессированных животных без введения препарата. При введении АЛ-Л 17477 перед окклюзией сонных артерий в мозге животных с разным латеральным профилем уровень ТБК-реактивных продуктов снижается до уровня контроля и повышается функциональная активность отдельных звеньев антиоксидантной системы защиты.

5. Критерием устойчивости организма к нарушению мозгового кровообращения является формирование асимметрии в распределении нейрохимических систем на уровне не только коры больших полушарий, но и стволовых структур.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Показатели свободнорадикальных процессов и энергетического обмена в мозге могут служить дополнительным тестом при оценке тяжести ише-мического повреждения мозга больных в неврологической практике.

AR.-R 17477 может быть рекомендован в качестве активного вещества препаратов, применяемых в неврологической практике для предотвращения развития ишемического инсульта после транзиторных ишемических атак.

Список работ, опубликованных по теме диссертации в журналах, рекомендованных ВАК РФ

1. Косенко, Ю.В. Влияние функциональной межполушарной асимметрии и ингибитора индуцибельной NO-синтазы на показатели свободнорадикальных процессов в мозге у крыс при окклюзии сонных артерий / Ю.В. Косенко, A.M. Менджерицкий, Г.В. Карантыш // Валеология. - 2007. - № 4. - С. 20-25 (0,21 п.л., личн. вк. 60%).

2. Менджерицкий, A.M. Влияние ингибитора индуцибельной NO-синтазы на показатели системы свободнорадикальных процессов у крыс с разным латеральным профилем в условиях нарушения мозгового кровообращения / A.M. Менджерицкий, Г.В. Карантыш, Ю.В. Косенко // Нейрохи-мия. - 2008. - Т. 25, № 3. - С. 1-6 (0,21 п.л., личн. вк. 60%.).

Список работ, опубликованных по теме диссертации

3. Карантыш, Г.В. Баланс нейромедиаторов и свободнорадикальные процессы при юпемии/реперфузии / Г.В. Карантыш, A.M. Менджерицкий, И.Л. Краснова, Ю.В. Косенко // Сборник трудов 4-й Научно-практической конференции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека». - Смоленск, 2005. - С. 275-277 (0,08 п.л., личн. вк. 30%).

4. Косенко, Ю.В. Влияние AR-R 17477 на уровень МДА и активность глутатионпероксидазы и глутатион-8-трансферазы в гемисферах коры у крыс с разным латеральным профилем при хронической окклюзии сонных артерий со стороны доминирующего полушария / Ю.В. Косенко, Г.В. Карантыш, А.М. Менджерицкий // Материалы Всероссийской конференции с международным участием «Структурно-функциональные, нейрохимические и имму-нохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга». - М.: ГУ НИИ неврологии РАМН, 2007. - С. 331-335 (0,21 п.л„ личн. вк. 80%).

5. Менджерицкий, A.M. Влияние окклюзии сонных артерий на глута-тионовую систему крыс с разным латеральным профилем / A.M. Менджерицкий, Г.В. Карантыш, Ю.В. Косенко // Успехи современного естествознания. -2007. -№ 1. - С. 77-79 (0,08 пл., личн. вк. 80%).

6. Косенко, Ю.В. Влияние ингибитора индуцибельной NO-синтазы на ферментативную активность глутатионпероксидазы в мозге крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий / Ю.В. Косенко, C.B. Демьяненко, Г.В. Карантыш, A.M. Менджерицкий // Успехи современного естествознания. - 2007. - № 3. - С. 81-83 (0,08 п.л., личн. вк. 80%).

7. Косенко, Ю.В. Энергетический обмен в мозге крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий / Ю.В. Косенко, Г.В. Ка-рантыш, Л.М. Менджерицкий // Фундаментальные исследования. - 2007. -№ 4. - С. 72-74 (0,08 пл., личн. вк. 80%).

8. Косенко, Ю.В. Влияние ингибитора индуцибельной NO-синтазы на энергетический метаболизм в мозге правополушарных крыс / Ю.В. Косенко, Г.В. Карантыш, A.M. Менджерицкий // Сборник тезисов докладов 2-й Научно-практической конференции «Современные проблемы общей биологии и естествознания». - Ростов-н/Д.: Изд-во ПИ ЮФУ, 2007. - С. 33-35 (0,13 пл., личн. вк. 80%).

9. Косенко, Ю.В. Функциональные перестройки нейрохимических систем у животных с разным латеральным профилем в условиях окклюзии сонных артерий / Ю.В. Косенко // Материалы Первой Международной научно-практической конференции «Новые технологии в экспериментальной биологии и медицине». - Ростов-н/Д.: ЦВВР, 2007. - С. 21-22 (0,08 пл., личн. вк. 100%).

10. Mendzheritskii, A.M. Effect of an inhibitor of inducible NO-synthase on the indices of free radical-mediated process in rats with different lateralization profiles under conditions of impaired cerebral blood flow / A.M. Mendzheritskii, G.V. Karantysh, Yu.V. Kosenko // Neurochemical J. - 2008. - Vol. 25, № 3. -P. 209-214 (0,21 пл., личн. вк. 60%).

Список сокращений

АО — антиоксидант

ВГ - восстановленный глутатион

ГПО - глутатионпероксидаза

ГР - глутатионредуктаза

ГТ - глутатион-8-трансфераза

КБП - кора больших полушарий

л/о - ложная операция

ЛП - латеральный профиль

МК - молочная кислота

НМК - нарушение мозгового кровообращения

НПР - направленность пробежек и ротаций

ОСА - окклюзия сонных артерий

СА - сонная артерия

СРП - свободнорадикальные процессы

СС - стволовые структуры

ТБК-РП - реактивные продукты, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой

Подписано в печать 4&Q4- Формат 60x84 1/16.

Офсетная печать. Объем ¿_0_ усл. печ. л. Тираж J0Q экз. Заказ № Q7 .

НПО ПИ ЮФУ: 344082, г. Ростов-на-Дону, ул. Б. Садовая, 33.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Косенко, Юлия Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Взаимосвязь стрессоустойчивости организма с функциональной межполушарной асимметрией.

1.2. Биохимические сдвиги в функционировании головного мозга при нарушении мозгового кровообращения.

1.2.1. Механизмы ишемического и реперфузионного нарушений функционирования клеток головного мозга.

1.2.2. Нарушения энергетического обмена при ишемическом повреждении мозга.

1.2.3. Избыток глутамата и повышение концентрации внутриклеточного кальция при ишемии мозга

1.2.4. Развитие окислительного стресса в мозге при нарушении мозгового кровообращения.

1.2.5. Роль радикала оксида азота в развитии окислительного стресса при нарушении мозгового кровообращения

1.3. Структура и механизм действия АЛ-Я 17477.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Постановка эксперимента.

2.2. Определение латерального профиля у крыс.

2.3. Приготовление гомогенатов мозга.

2.4. Биохимические методы исследования ткани мозга.

2.5. Статистическая обработка результатов исследования.

Глава 3. ОПИСАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.

3.1. Влияние введения АЯ-Я 17477 перед окклюзией сонных артерий на свободнорадикальные процессы в мозге крыс с разным латеральным профилем.

3.1.1. Содержание ТБК-реактивных продуктов в мозге крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий под влиянием ARR 17477.

3.1.2. Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на активность каталазы и функциональное состояние глутатионовой системы в мозге крыс с разным латеральным профилем.

3.1.3. Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на содержание белковых тиоловых групп в мозге крыс с разным латеральным профилем.

3.2. Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на энергетический обмен в мозге крыс с разным латеральным профилем.

3.2.1. Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на содержание глюкозы в мозге крыс с разным латеральным профилем.

3.2.2. Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных - артерий на содержание пирувата в мозге крыс с разным латеральным профилем.

3.2.3. Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на содержание лактата в мозге крыс с разным латеральным профилем.

3.3. Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на коэффициенты асимметрий нейрохимических систем в мозге крыс с разным латеральным профилем.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге право- и левополушарных крыс при ингибировании NO-синтазы в условиях нарушения мозгового кровообращения"

Изменение интенсификации свободнорадикальных процессов (СРП) возникает в организме в ответ на любое воздействие (Болдырев, 2001; Лобов с соавт., 2002; Olney, 1994; Shivakumar et al., 1995; Kondo et al., 1997; Rao et al., 1999; Adibhatia et al., 2003; Warner et al., 2004 и др.). В условиях стресса могут развиваться« энергетический дефицит (Биленко, 1989; Лукьянова с соавт., 2007), дестабилизация клеточных мембран и нарушение процессов рецепторного • связывания (Гусев, Скворцова, 2001; Скворцова, 2003), что приводит к гибели клеток по механизмам'некроза и апоптоза (Chopp; Li, 1996; Morita-Fujimura et al., 2001; Nozaki et al., 2001; Kim et al., 2002; Crack et al., 2006 и др.).

Одним из основных медиаторов, регулирующих развитие этих процессов, является оксид азота, исследование*которого стало> возможным после открытия ферментных систем, ответственных за продукцию NO (Реутов, 1995). При этом использование ингибиторов NO-синтаз в различных моделях стресса способствует раскрытию- вопроса о взаимосвязи антиоксидантного статуса и состояния системы оксида азота. Известно, что синтез индуцибельной NO-синтазы в макрофагах и других клетках организма является основой неспецифической резистентности и адаптации к стрессорным воздействиям (Меерсон с соавт., 1994), а ингибирование деятельности индуцибельной NO-синтазы снижает проявления окислительного стресса в условиях ишемического повреждения мозга (Parmentier et al., 1999; Rawal et al., 2004).

Одним из малоизученных препаратов, включающихся в регуляцию активности синтаз оксида азота, является AR-R 17477. Опираясь на данные литературы, можно утверждать, что AR-R 17477 ингибирует как индуцибельную (Проскуряков с соавт., 2005), так и нейрональную изоформы NO-синтазы (Harukuni et al., 1999; O'Neil et al., 2000; Fedorov et al., 2004; Willmot et al., 2005). Важно, что данный препарат не ингибирует эндотелиальную NO-синтазу в силу ее важнейшей роли в поддержании сосудистого тонуса (Fedorov et al., 2004).

В настоящее время широко, обсуждается проблема функционального состояния систем N0 и антиоксидантов в контексте межполушарных взаимоотношений в. условиях стресса. Исходя из представления о сопряженности поведенческого, нейрофизиологического и биохимического уровней системы функциональной» межполушарной асимметрии (Клименко, 2004), наиболее адекватной^ моделью1 для изучения показателей свободнорадикального окисления« является нарушение мозгового кровообращения (НМЕС) у животных с разным латеральным профилем.

Актуальность проблемы ишемического повреждения! мозга обусловлена тем, что, согласно статистическим^ данным, ежегодно в мире переносят инсульт около 6 млн. человек, а в-России - более 450 тысяч (Яхно, Парфенов, 2000). Сосудистые заболевания» головного мозга являются* одной из- ведущих причин заболеваемости, смертности и инвалидизации' в. нашей стране (Верещагин, Суслина, 2003- Гусев с соавт., 2003). При этом локализация* ишемического очага в мозге в значительной мере определяет степень, функциональных и регуляторных нарушений,в организме (Кадыков, 2003), вероятно, в том числе, в результате различий в антиоксидантном статусе структур мозга, а именно; латерализации нейрохимических систем (Фокин, Пономарева, 2004).

В связи с вышесказанным, целью данного исследования*явилось изучение влияния ингибитора МЗ-синтазы на развитие окислительного стресса и изменение энергетического» обмена в мозге крыс с разным латеральным профилем при* двусторонней окклюзии сонных артерий.

В соответствии с поставленной целью были определены, следующие* задачи'исследования:

1. Исследовать состояние свободнорадикальных процессов и энергетического баланса в мозге крыс с разным латеральным профилем, при 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, контралатерального направленности побежек и ротаций в лабиринте, и 24-часовом лигировании сонной артерии со стороны полушария, ипсилатерального направленности побежек и ротаций.

2. Изучить состояние свободнорадикальных процессов и энергетического баланса в мозге крыс с разным латеральным профилем при 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, ипсилатерального направленности побежек и ротаций, и 24-часовом лигировании сонной артерии со стороны полушария, контралатерального направленности побежек и ротаций в лабиринте.

3. Выявить влияние ингибитора синтазы оксида азота (АЯ-Я 17477) на свободнорадикальные процессы и энергетический баланс в мозге ложнооперированных крыс с разным латеральным профилем.

4. Исследовать влияние АЯ-Я 17477 на процессы свободнорадикального окисления и энергетический баланс в структурах мозга крыс с разным латеральным профилем, находящихся в условиях двусторонней окклюзии сонных артерий.

5. Выявить критерии устойчивости организма к окклюзии сонных артерий различной продолжительности у животных с разным латеральным профилем по изменению межполушарных взаимоотношений нейрохимических систем.

Положения, выносимые на защиту.

1. В коре больших полушарий ложнооперированных животных с праволатеральным профилем уровень ТБК-реактивных продуктов и антиоксидантных ферментов выше, чем у крыс с леволатеральным профилем, что является неспецифическим фактором, определяющим устойчивость животных с разным латеральным профилем к стрессу. При стрессовом воздействии одинаковой интенсивности у животных с праволатеральным профилем происходит более выраженное истощение антиоксидантной системы и накопление молочной кислоты в мозге по сравнению с левополушарными крысами, что определяет больший процент выживаемости последних.

2. Снижение интенсификации свободнорадикальных процессов и увеличение асимметрии в распределении нейрохимических систем в коре больших полушарий и в стволовых структурах мозга крыс в условиях введения АЯ-Я 17477 перед двусторонней окклюзией сонных артерий способствуют возрастанию процента выживаемости животных с разным латеральным профилем. У крыс с праволатеральным профилем введение AR-R 17477 перед 24-часовой окклюзией правой сонной артерии и 3-минутной окклюзией левой сонной артерии оказывает наиболее значительное влияние на энергетический обмен, что сопровождается повышением процента выживаемости животных в два раза в данной модели стресса.

3. Под влиянием введения ингибитора синтазы оксида азота ложнооперированным животным с разным латеральным профилем происходит повышение межполушарных перестроек в функциональных системах антиоксидантных ферментов.

Научно-практическая значимость работы.

Результаты исследования расширяют представления о нейрохимических основах формирования резистентности организма к условиям нарушения мозгового кровообращения в зависимости от латерального профиля. Результаты работы дополняют теоретические сведения о развитии окислительного стресса и изменении энергетического обмена в мозге крыс при нарушении мозгового кровообращения. Полученные данные о влиянии AR-R 17477 на показатели системы антиоксидантных ферментов и энергетического обмена открывают перспективу его практического применения в неврологической практике в качестве лекарственного препарата.

Основные результаты работы внедрены в учебный процесс в виде методических разработок для проведения лекционных, практических и семинарских занятий в процессе преподавания вузовских курсов по «Физиологии человека» и «Психофизиологическим основам интеллектуальной деятельности» на кафедре анатомии и физиологии детей и подростков Педагогического института Южного федерального университета.

Научная новизна результатов исследования.

Впервые в модели двусторонней окклюзии сонных артерий были установлены различия в протекании свободнорадикальных процессов и энергетического обмена в структурах мозга крыс с разным латеральным профилем.

Впервые было показано, что низкая устойчивость правополушарных крыс в условиях окклюзии- сонных артерий формируется в результате недостаточности антиоксидантной системы защиты и энергетического дефицита в структурах мозга.

Впервые было показано, что ингибитор синтазы оксида азота (AR-R 17477) снижает интенсивность свободнорадикальных процессов, улучшает состояние энергетического обмена в головном мозге у крыс с разным латеральным профилем при двусторонней окклюзии сонных артерий.

Апробация диссертационной работы.

Материалы диссертации были представлены на IV научно-практической конференции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2005), на Всероссийской конференции с международным участием^ «Структурно-функциональные, нейрохимические и иммунохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга» (Москва, 2007), на II' научно-практической конференции «Современные проблемы общей биологии и естествознания» (Ростов н/Д, 2007), на, I международной научно-практической конференции «Новые технологии в экспериментальной биологии и медицине» (Ростов н/Д, 2007), на IV конференции с международным участием «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Паттайа, Тайланд, 2007), на IV научной международной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии» (Гоа, Индия, 2007), на II научной конференции с международным участием «Актуальные проблемы науки и образования» (Варадеро, Куба, 2007).

Список работ, опубликованных по теме диссертации в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Менджерицкий, Г.В. Карантыш // Валеология. — 2007. - № 4. - С. 20-25 (0,21 п.л., личн. вк. 60%).

2. Менджерицкий, A.M. Влияние ингибитора индуцибельной NO-синтазы на показатели системы свободнорадикальных процессов у крыс с разным латеральным профилем в условиях нарушения мозгового кровообращения / A.M. Менджерицкий, Г.В. Карантыш, Ю.В. Косенко // Нейрохимия. - 2008. - Т. 25, № 3. - С. 1-6 (0,21 п.л., личн. вк. 60%.).

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

3. Карантыш, Г.В. Баланс нейромедиаторов и свободнорадикальные процессы при ишемии/реперфузии / Г.В. Карантыш, A.M. Менджерицкий, И.Л. Краснова, Ю.В. Косенко // Сборник трудов 4-й Научно-практической конференции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека». - Смоленск, 2005. - С. 275-277 (0,08 п.л., личн. вк. 30%).

4. Косенко, Ю.В. Влияние AR-R 17477 на уровень МДА и активность глутатионпероксидазы и глутатион-8-трансферазы в гемисферах коры у крыс с разным латеральным профилем при хронической окклюзии сонных артерий со стороны доминирующего полушария / Ю.В. Косенко, Г.В. Карантыш, A.M. Менджерицкий // Материалы Всероссийской конференции с международным участием «Структурно-функциональные, нейрохимические и иммунохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга». — М.: ГУ НИИ неврологии РАМН, 2007. - С. 331-335 (0,21 п.л., личн. вк. 80%).

5. Менджерицкий, A.M. Влияние окклюзии сонных артерий на глутатионовую систему крыс с разным латеральным профилем / A.M. Менджерицкий, Г.В. Карантыш, Ю.В. Косенко // Успехи современного естествознания. - 2007. - № 1. - С. 77-79 (0,08 п.л., личн. вк. 80%).

7. Косенко, Ю.В. Энергетический обмен в мозге крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий / Ю.В. Косенко, Г.В. Карантыш, A.M. Менджерицкий // Фундаментальные исследования. - 2007. -№ 4. - С. 72-74 (0,08 п.л., личн. вк. 80%).

8. Косенко, Ю.В. Влияние ингибитора индуцибельной NO-синтазы на энергетический метаболизм в мозге правополушарных крыс / Ю.В. Косенко, Г.В. Карантыш, A.M. Менджерицкий // Сборник тезисов докладов 2-й Научно-практической конференции «Современные проблемы общей биологии и естествознания». - Ростов-н/Д.;: Изд-во ПИ ЮФУ, 2007. - С. 33-35 (0,13 п.л., личн. вк. 80%).

Структура работы.

Диссертация изложена на 165 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, включающего 257 источников (96 отечественных и 161 работа иностранных авторов). Работа иллюстрирована 10 таблицами и 31 рисунком.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Косенко, Юлия Владимировна

ВЫВОДЫ

1. В модели 3-минутной?окклюзии сонной артерит со - стороны полушария,. контралатерального Hi IF, и 24-часовой окклюзии сонной- артерии- со стороны полушария; ипсилатерального НИР; показано, что/ выживаемость крыс с леволатеральным профилем в 2 раза превышает аналогичный показатель для крыс: с: право латеральным профилем: У* крыс: с праволатеральным? профилем ТБК-реактивные продукты накапливаются преимущественно в правой коре больших полушарий и правых стволовых структурах мозга, а также наблюдается значительное: снижение антиоксидантной системы, защиты. Накопление: пирувата и. лактата в; мозге крыс: с; праволатеральным; профилем свидетельствует о менее благоприятном характере энергетического баланса и развитии метаболического: ацидоза, относительно крыс с: леволатеральным* профилем.

2. В модели, 3 -минутной« окклюзии; сонной; артерии' со*стороны. полушария?., ипсилатерального HHP, и 24-часовой окклюзии сонной артерии со стороны полушария, контралатерального НИР, более высокий уровень выживаемости, наблюдается» у крыс с леволатеральным профилем, относительно * животных, с: праволатеральным профилем. В мозге крыс с леволатеральным профилем в данной модели стресса наблюдается^ увеличение ферментативной^ активности: катал азы и глутатионпероксидазы на фоне снижения уровня пирувата и лактата.

3L Под влиянием ингибитора синтазы оксида азота у животных с разным латеральным профилем: формируется асимметриям распределении показателей: системы антиоксидантной защитьг в: коре: больших полушарий; и стволовых структурах правой и левой половин:мозга.

4. При введении ингибитора синтазы.оксида азота перед окклюзией; сонных артерий процент выживаемости животных с разным латеральным: профилем возрастает за:счет межполушарных перестроек нейрохимических систем в коре больших , полушарий и: в стволовых структурах мозга относительно: групп стрессированных животных без введения препарата. При введении АЯ-Я 17477 перед окклюзией сонных артерий в мозге животных с разным латеральным профилем уровень ТБК-реактивных продуктов снижается до уровня контроля и повышается функциональная активность отдельных звеньев антиоксидантной системы защиты.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Косенко, Юлия Владимировна, Ростов-на-Дону

1. Абрамов, В.В. Асимметрия нервной, эндокринной и иммунной систем / В.В. Абрамов, Т.Я. Абрамова. Новосибирск: Наука, 1996. - 97 с.

2. Арутюнян, A.B. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма / A.B. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, H.H. Зыбина. СПб.: Фолиант, 2000. - 104 с.

3. Ашмарин, И.П. Биохимия мозга / И.П. Ашмарин, П.В. Стукалов, Н.Д. Ещенко. СПБ.: Изд-во СПб. ун-та, 1999. - 576 с.

4. Бадалян, JI.O. Детская неврология / JI.O. Бадалян. М.: Медицина,1975.

5. Бианки, B.JI. Асимметрия мозга животных / B.JI. Бианки. JL: Наука, 1985.-295 с.

6. Биленко, М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов (Молекулярные механизмы, пути предупреждения и лечения) / М.В. Биленко. — М.: Медицина, 1989.-368 с.

7. Боголепов, Н.К. Церебральные кризы и инсульт / Н.К. Боголепов. — М.: Медицина, 1971.

8. Боголепова, H.H. Особенности когнитивных нарушений у больных ишемическим инсультом в зависимости от локализации очага поражения / И.Н. Боголепова // Функциональная межполушарная асимметрия. М.: Науч. мир, 2004.

9. Боголепова, И.Н. Структурная асимметрия корковых формаций мозга человека / И.Н. Боголепова, Л.И. Малофеева. — М.: Изд-во РУДН, 2003. 156 с.

10. Ю.Болдырев, A.A. Окислительный стресс и мозг / A.A. Болдырев // Соросовский образовательный журн. — 2001. — Т. 7, № 4. С. 21-28.

11. Ванин, А.Ф. Оксид азота в биологии: история, состояние и перспективы исследований / А.Ф. Ванин // Биохимия. 1998. — № 7. — С. 867869.

12. Вартанян, Г.А. Химическая» симметрия., и асимметрия мозга / Г.А. Вартанян, Б.И. Клементьев. -М.: Медицина, 1991. — 190 с.

13. Верещагин, Н.В. Инсульт в зеркале медицины и общества' / Н.В. Верещагин, З.А. Суслина // Вестник Российской академии мед. наук. -2003. -№ 11.-G. 48-50.

14. Викторов, И.В. Роль оксида азота и других свободных радикалов .в ишемической патологии мозга / И.В. Викторов // Вестник Российской академии мед. наук. 2000. - № 4. - С. 5-10.

15. Винк, Д.А. Значение химических свойств оксида-азота1 для лечения онкологических заболеваний / Д.А. Винк и др. // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 7. - С. 948-957.

16. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров, О.А. Азизова, А.И. Деев // Итоги науки и техники. — 1991. — Т. 29.-С. 1-249.

17. Власова, И.Г. Влияние гипоксии на нейроны различных структур мозга в условиях переживающих срезов' / И.Г. Власова, Г.М.' Куцов, Ю.В. Ломакин // Материалы Второй Всерос. конф. «Гипоксия: механизмы, адаптация и коррекция». М., 1999. - С. 14.

18. Геодакян, В.А. Эволюционные теории' асимметризации организмов, мозга и тела / В.А. Геодакян // Успехи физиологических наук. 2005. - Т. 36, № 1. — С. 24-53.

19. Гехт, А.Б. Лечение больных инсультом в восстановительном периоде / А.Б. Гехт // Consilium medicum. 2000. - Т. 2, № 12. - С. 521-522.

20. Гусев, Е.И. Глутаматная нейротрансмиссия и метаболизм кальция в норме и при ишемии головного мозга / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова // Успехи физиологических наук. 2002. - Т. 33, № 4. - С. 80-93.

21. Гусев; Е.И. Ишемия головного мозга / Е.И. Гусев; В.И. Скворцова. -М.: Медицина, 2001. 328 с.

22. Гусев, Е.И. Сосудистые заболевания головного мозга / Е.И. Гусев, H.H. Боголепов, Г.С. Бурд. М.: Медицина, 1979. - 143 с.

23. Гусев, Е.И. Церебральный инсульт: проблемы и решения / Е.И. Гусев,

24. B.И. Скворцова, М.Ю: Мартынова // Вестник Российской академии мед. наук. — 2003. -№ 11.-С. 44-48.

25. Доброхотова, Т.А. Левши / Т.А. Доброхотова, H.H. Брагина. — М.: Книга, 1994.-240 с.

26. Евтодиенко, Ю.В. Регуляция ионами- кальция окислительного фосфорилирования во внутренней мембране митохондрий печени крысы / Ю.В. Евтодиенко, Т.С. Азарашвили, В.В. Теплова // Биохимия. 2000. - Т. 65. —1. C.1210-1214.

27. Ефимов, В.М. Формальная иерархическая классификация типов билатеральных асимметричных объектов* / В.М. Ефимов, И.А. Акимова, Ю:К. Галактионова7/ Доклады АН УССР (Сер. «Геологические, химические и биологические науки»). — 1987. № 3. - С. 64—66.

28. Зайко, H.H. Патологическая физиология / H.H. Зайко и др.. М.: МЕДпресс-информ, 2006. - 640 с.

29. Ивашкин, В.Т. Клиническое значение оксида азота и белков теплового шока / В.Т. Ивашкин, О.М. Драпкина. -М.: Гэотар-Мед., 2001. 88 с.

30. Иоффе, М.Е. Природа функциональной межполушарной асимметрии у животных / М.Е. Иоффе, Е.В. Плетнева, И.С. Сташкевич // Функциональная, межполушарная асимметрия. — М.: Науч. мир, 2004. С. 80-86.

31. Кадыков, А.Ф. Реабилитация: после инсульта / А.Ф. Кадыков. — М.: Миклош, 2003.-176 с.

32. Клименко, Л.Л. Структурно-функциональная организация межполушарной асимметрии в норме и при радиационном облучении головы / JI.JI. Клименко // Функциональная межполушарная асимметрия. — М.: Науч. мир, 2004.-С, 99-115.

33. Клименко, J1.JI. Температурная асимметрия больших полушарий головного мозга крыс / J1.J1. Клименко // Известия Российской академии наук. — 2000.-№6.-С. 721-727.

34. Колесниченко, JI.C. Глутатионтрансферазы / J1.C. Колесниченко,

35. B.И. Кулииский // Успехи современной биологии: 1989) - Т. 107, № 2.1. C. 179 -194.

36. Кондрашова, М.Н. Трансаминазиьтй цикл окисления субстратов в клетках как механизм адаптации к гипоксии / М.Н. Коидрашова // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний; М.: НИИ? фармакологии АМН СССР, 1989.- С, 51-66.

37. Королюк, М.А. Метод определения активности катал азы / М:А. Королюк и др. // Лаб. дело.'- 1988; -№1.- С. 16-19:

38. Косицкий, Г.Н. Нервная система и «стресс» (о принципе доминанты в патологии) / Г.Н. Косицкий, В.М. Смирнов. — М.: Наука, 1970. 199 с.

39. Кулииский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Соросовский;образовательный журн: — 1999. — № 1. — С. 2-7.

40. Кулинский, В.И., Биологическая роль глутатиона / В.И. Кулинский, JI.C. Колесниченко // Успехи современной биологии. 1990. - Т. 110, № 1. — С. 20-33.

41. Кургалюк, H.H. Оксид азота как фактор адаптационной защиты при гипоксии H.H. Кургалюк // Успехи физиологических наук. 2002. - Т. 33, № 4. -С. 65-79.

42. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высш. шк., 1973. - 343 с.

43. Леутин, В.П. Функциональная! асимметрия мозга и адаптация^ /

44. B.П. Леутин // Функциональная межполушарная асимметрия. М.: Науч. мир, 2004.-С. 481-522.

45. Лобов, М.А. Патофизиологические, патогенетические и терапевтические аспекты хронической ишемии головного мозга / М.А. Лобов,

46. C.В. Котов, И.Г. Рудакова // Русский мед. журн. 2002. - Т. 10, № 25. -С.1156-1158.

47. Лукьянова, Л.Д. Митохондриальная дисфункция типовой патологический» процесс, молекулярный механизм гипоксии / Л.Д. Лукьянова // Проблемы гипоксии: молекулярные, физиологические и клинические аспекты. — М., 2004.-С. 5-31.

48. Лукьянова, Л.Д. Молекулярные механизмы и регуляция энергетического обмена/ Л.Д. Лукьянова. — М.: Пущино, 1987. С. 153-161.

49. Лукьянова, Л.Д. Регуляторная роль митохондриальной дисфункции при гипоксии и ее взаимодействие с транскрипционной активностью / Л.Д. Лукьянова и др. // Вестник Российской академии мед. наук. 2007. — №2.-С. 3-13.

50. Лукьянова, Л.Д. Роль биоэнергетического обмена в формировании долгосрочных механизмов адаптации / Л.Д. Лукьянова, A.M. Дубченко,

51. F.Hs. Чернобаева II Материалы Второй Всерос. конф. «Гипоксия: механизмы, адаптация^ коррекция». — М., 1999; — С. 92.

52. Лукьянова, Л.Д. Современные проблемы гипоксии / Л.Д. Лукьянова // Вестник Российской академшгмед. наук. 2000* - № 9. - С. 3-12.

53. Лукьянова, Л.Д. Физиологические и клинические проблемы адаптации к гипоксии, гиподинамии, гипертермии / Л.Д. Лукьянова, A.B. Коробков. М.: Наука, 1981.-С. 73-76.

54. Луценко, В.К., Биохимическая асимметрия мозга / В.К. Луценко, М.Ю. Карганов// Нейрохимия. 1985. - Т.4, № 2. - С. 197-213.

55. Манухина, Е. Роль свободного и депонированного оксида азота- В' защитных эффектах адаптации' к гипоксии / Е. Манухина // Проблемы гипоксии: молекулярные, физиологические и, медицинские аспекты. М.: Истоки, 2004. - С. 138-155.

56. Медицинские лабораторные технологии: Справочник. / под ред. Карпищенко. СПб.: Интермедика, 1999. - Т. 2.

57. Менджерицкий, A.M. Влияние окклюзии сонных артерий на баланс моноаминов-в мозге и крови крыс / A.M. Менджерицкий и др. // Труды IV Межвузов, междунар. конф'. «Обмен веществ при адаптации и повреждении». — М., 2005.-С. 111-112.

58. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в клинике / В.В. Меньшиков. -М.: Медицина, 1987.

59. Меньшикова; Е.Б. Окислительный: стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньшикова и др.. — М;: Слово, 2006. 556 с.

60. Мойбенко, А.А. Роль оксида-, азота в механизмах формирования рефлекторных вазомоторных реакций / А:А. Мойбенко и др. // Успехи физиологических наук. — 2005. ТО. 36, № 4. — С. 3—12.

61. Мошарова, И:В1 Общие физиологические: механизмы воздействия глутаматашащентральнуюшервную систему / И.В. Мошарова, А.О. Сапецкий, Н.С. Косицын // Успехи физиологических паук. — 2004. — Т. 35, № 1. — С. 20-42.

62. Оковитый; С.В. Клиническая фармакология ант!юксидантов / С .В'; Оковитыш// ФАРМиндекс практик: — 2003 . — Вып: 5 : С. 85-1ШГ.

63. Окон, Е.Б. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний?/ Е.Б. Окон, А.М. Бабский, М.Н. Кондрашова. М:: НИИ фармакологии АМН СССР, 1989.-С. 45-46.

64. Попай, М. Значение асимметричного > распределения норадреналина в мозге и надпочечниках для развития экспериментального- невроза / М. Попай,. К. Гехт, М. Хильзе: // Исследование механизмов нервной; деятельности: — М.: Наука, 1984. С. 280 -283.

65. Порошенко, А.Б. Нейрофизиологический анализ1 природы и свойств асимметрии женской репродукции / А.Б. Порошенко // Дисс.канд.биол.наук.-Ростов н/Д, 1985. 285 с.

66. Проскуряков, С.Я. Структура и активность ингибиторов NO-синтаз, специфичных к L-аргининсвязывающему центру / С.Я. Проскуряков и др. // Биохимия. 2005. - Т. 70, вып. 1. - С. 14-32.

67. Рахимов, Р.Н. Асимметрия фонда свободных аминокислот в некоторых участках мозга крыс / Р.Н. Рахимов и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1989. - № 6. - С. 676-678.

68. Реутов, В.П. Проблема оксида азота в биологии и< медицине и принцип цикличности. Ретроспективный анализ идей, принципов и концепций / В .П. Реутов и др.. -М.: Эдиториал УРСС, 2003. 96 с.

69. Реутов, В.П. Цикл окиси азота в организме млекопитающих /

70. B.П. Реутов // Успехи биологических наук. 1995. - Т. 35. - С. 189-228.

71. Русинов, B.C. Электрофизиологические исследования корковой доминанты. / B.C. Русинов // Функциональное значение электрических процессов головногошозга. М.: Наука, 1977. - С. 363-372.

72. Русинова, Е.В. Влияние животного гипноза на двигательную доминанту, созданную действием постоянного тока на кору левого полушария / Е.В. Русинова // Журнал высшей нервной деятельности. 1997. - Т. 47, № 1. —1. C. 109-115.

73. Снарский, С.И. Половой диморфизм в роли правого и левого полушарий крыс в контроле болевой чувствительности / С.И. Снарский, В. Л. Бианки // Физиол. журн. им. ИМ. Сеченова. 1992. - Т. 78, № 1. - С. 12-19.

74. Соколовский, В.В1. Тиоловые антиоксиданты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальное воздействие / В.В. Соколовский // Вопр. мед. химии. 1988. - № 6. - С. 2-11.

75. Соловьев, А.И. Фармакология и токсикология оксида азота: два «лица» одной и той же молекулы / А.И. Соловьев, A.B. Стефанов // Современные проблемы токсикологии. 1998. - № 1. - С. 20-25.

76. Суслина, Э.А. Концепции нейропротекции: новые возможности ургентной терапии ишемического инсульта / Э.А. Суслина, М.Ю. Максимова // Нервные болезни. 2004. - № 3. - С. 4-7.

77. Фокин, В.Ф. Динамические характеристики функциональной межполушарной асимметрии / В.Ф. Фокин, Н.В. Пономарева // Функциональная межполушарная асимметрия. -М.: Науч. мир, 2004. С. 349-368.

78. Фокин, В.Ф. Энергетическая физиология мозга / В.Ф. Фокин, Н.В. Пономарева. М.: Антидор, 2003. - 287 с.

79. Хазанов, В. А. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний / В.А. Хазанов, О.Н. Панина, Е.А. Кобзева. М.: НИИ фармакологии АМН СССР, 1989.

80. Хаспеков, Л.Г. Влияние ишемии на активность оксида азота в органотипической культуре ткани гиппокампа / Л.Г. Хаспеков, М.В. Онуфриев, A.A. Лыжин // Гипоксия: механизмы, адаптация и коррекция. — М., 1999. — С.81.

81. Цыпленкова, В.Г. Апоптоз / В.Г. Цыпленкова, H.H. Бескровнова // Арх. патол. 1996. - Т. 58, № 5. - С. 71-74.

82. Черноситов, A.B. Функциональная межполушарная асимметрия мозга и неспецифическая резистентность / A.B. Черноситов, В.И. Орлов // Функциональная межполушарная асимметрия. М.: Науч. мир, 2004. - С. 444-480.

83. Чуприков, А.П. Латеральная терапия / А.П. Чуприков, А.Н. Линев, И.А. Марценковский. Киев, 1994. - 176 с.

84. Шинкаренко; Н.В. Химические свойства1 синглетного молекулярного кислорода и его значение в биологических системах / H.Bt Шинкаренко, В .Б. Алексовский // Успехи химии. 1982. - Т. 51', № 5. - С. 713-735.

85. Шмидт, Е.В. Сосудистые заболевания* головного* и спинного мозга / Е.В: Шмидт, Д.К. Лунев, HlB. Верещагин. -М.: Медицина, 1976. 135 с.

86. Юнкеров, В.И: Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований / В.И. Юнкеров, С.Г. Григорьев: СПб., 2002. - 266 с.

87. Ярилин, А.А. Апоптоз: природа феномена и-его-роль в. норме и при патологии / А.А. Ярилин // Актуальные проблемы патофизиологии / под ред. Б.Б. Мороза. -М.: Медицина, 2001. С. 13-56.

88. Яхно, Н.Н. Ишемические* острые нарушения мозгового» кровообращения./ Н.Н: Яхно, В:А-. Парфенов // Consilium»Medicum: 2000. - Т. 2, № 12. -С. 518-520.

89. Abe, К. Mechanisms of arachidonic acid liberation during ischemia nr gerbil cerebral' cortex / K. Abe et al. // J. Neurochemistry. 1987. - Vol: 48: -P. 503-509:

90. Adibhatia, R.M. Effect' of citicholine on Phospholipid and glutathione levels in transient cerebral ischemia / RIM. Adibhatia, B.S. Hatcher, R.I. Dempsey // Stroke. 20011. - Vol. 32, № 10. - P: 2376-2381.

91. Adibhatia, R.M. Phospholipase A2, hidroxyl1 radicals, and lipid peroxidation in transient cerebral ischemia / R.M. Adibhatia, B.S. Hatcher, R.I. Dempsey // Antioxid. Redox Signal. -2003. Vol. 5. - P. 647-654.

92. Amin-Hanjani, S. Mevastatin, an HMG-CoA reductase inhibitor, reduces stroke damage and; up regulates endothelial nitric oxide synthase in mice / S. Amin-Hanjani et al. // Stroke. 2001. - Vol. 32. - P. 980-986.

93. Andrew, P. Enzymatic function of nitric oxide synthases / P: Andrew, B: Mayer // Gardiovasc. Res. 1999: - Vol. 43; - P. 521-531.

94. Arrigoni, E. Effects of CDP-choline on phospholipase A2 and cholinephosphotransferase activities following a cryogenic brain injury in the rabbit /

95. Baron, B;M. Gliamine nucleotides are competitive:inhibitors;of N-methyl-D-aspartate at its? receptor site both in vitro and in vivo / B.M. Baron, et al. // Ji PharmacollExp;,Tlier. 1989L- Voll250= №d:. - P; 162M69.

96. Bauer, G. Reactive oxygen and nitrogen species: Efficient, selective, and: interactive signals during intercellular induction of apoptosis / G. Bauer // Anticancer Res. 2000. - Vol. 20. - P. 4115-4139.

97. Beutler,, E. Red ceir. metabolism: a1, manual of biochemical methods; / E. Beutler. New York: Grune and Stratton; 1975. - 160 p.

98. Bishop, A. NO signaling in the GNS: from; the: physiological; to the: pathological / A. Bishop, J.E. Anderson // Toxicology. 2005. - Vol. 208, № 2. -P. 193-205.

99. Borutaite, V. FEBS / V. Borutaite, R. Morkuniene, G.C. Brown // tetters. -2000. Vol. 467. - P. 155-159.

100. Boumbach, G.L. Hypertrophy of cerebral arterioles in mice deficient in expression of the gene for Cu Zn-Superoxide dismutase / G.L. Boumbach, S.P. Qidion, F.M. Faraci // Stroke. 2006. - Vol. 37, № 7. - P. 1850-1855.

101. Bredt, D. Localization of nitric oxide synthase indicating a neural role for nitric oxide / D. Bredt, P. Hwang, S. Snyder // Nature. 1990. - Vol. 347. - P. 768-770.

102. Bredt, D.S. Nitric oxide signaling specificity — the heart of the problem / D.S. Bredt // J. Cell Sci. 2003. - Vol. 116. - P. 9-15.

103. Brown, G.C. Nitric oxide, cytochrome c and mitochondria / G.C. Brown, V. Borutaite // Biochem. Soc. Symp. 1999. - Vol. 66. - P. 17-25.

104. Buga, G.M. Negative feedback regulation of endothelial cell function by nitric oxide / G.M. Buga et al. // Circ. Res. 1993. - Vol. 73, № 5. - P. 808-812.

105. Castillo, J. Nitric oxide-related brain damage in acute ischemic stroke / J. Castillo, R. Rama, A. Davalos // Stroke. 2000. - Vol. 31, № 4. - P. 852-857.

106. Chabrier, P.E. Nitric oxide synthases: targets for therapeutic strategies in neurological diseases / P.E. Chabrier, C. Demerle-Pallardy, M. Auguent // Cell. Mol. Life Sci. 1999. - Vol. 55, № 8-9. - P. 1029-1035.

107. Chan, P.H. Cellular aillioxiclant defense mechanisms / P.H. Chan. — Boca Raton: CRC Press, 1988.

108. Cheng, H. Mice overexpression extracellular superoxide dismutase have increased tolerance to global cerebral ischemia / H. Cheng et al. // Exp. Neurol. — 2002. Vol. 163. - P. 392-398.

109. Chopp, M. Apoptosis in focal cerebral ischemia / M. Chopp, Y. Li // Acta Neurochir. Suppl. 1996. - Vol. 66. - P. 21-26.

110. Christensen, T. Evidence for formation of hydroxy 1 radicals during reperfusion after global cerebral ischemia in rats using salicilate trapping and microdialysis / T. Christensen // Neurobiol. Dis. 1994. - Vol. 1, № 3. - P. 131-138.

111. Claiborne, A. Catalase activity: Handbook of methods for oxygen radical research / A. Claiborne. Boca Raton: CRC Press, 1986.

112. Clements, M.K. Inhibition of actic polymerization by peroxinitrite modulates neurotrophic functional responses / M.K. Clements et al. // J. Leukoc. Biol. 2003. - Vol. 73. - P. 344-355.

113. Crack, PJ. Increased infarct size and exacerbated apoptosis in the Gpx-1 knockout mouse brain in response to ischemia/reperfusion injury / P J. Crack et al. // J. Neurochem. 2001. - Vol. 78. - P. 1389-1399.

114. Crack, P.J. Potential contribution of NF-KB in Neuronal cell death in the glutathione Peroxidase-knockout mouse in response to ischemia-reperfusion injury / P.J. Crack et al. // Stroke. 2006. - Vol. 37, № 6. - P. 1533-1538.

115. Cui, Z. A genetic defect in phosphatidylcholine biosynthesis triggers apoptosis in Chinese hamster ovary cells / Z. Cui et al. // J. Biol. Chem. — 1996. — Vol. 271.-P. 14668-14671.

116. Denton, R.M. Role of calcium ions in the regulations of intramitochondrial centers in the Sox R transcription activator / R.M. Denton, J.G. McCormack // Proc. Natl. Acad. Sci. 2000. -Vol. 97.-P. 1514—1518.

117. Dobrucki, L.W. The protective role of nitric oxide in the brain ischemia / L.W. Dobrucki // J. Physiol. Pharmacol. 2000. - Vol. 51. - P. 695-703.

118. Du, W. Associative laming is enhanced by selective neuronal nitric oxide synthase inhibitors and retarded by a nitric oxide donor in the rabbit / W. Du, H. Weiss, J.A. Harvey // Psychopharmacology (Berl.). 2000. - Vol. 150, № 3. - P. 264-271.

119. Dyatlov, V.A. Lead potentiates cytocine- and glutamate-mediated increases in permeability of the blood-brain barrier / V.A. Dyatlov et al. // Neurotoxicology. 1998. - Vol. 19, № 2. - P. 283-291.

120. Eames, PJ. Dynamic cerebral autoregulation and beat to beat blood pressure control are impaired in acute ischaemic stroke / PJ. Eames et al. // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 2002. - Vol. 72. - P. 467-472.

121. Eaton, J.W. Catalases and peroxidases and glutathione and hydrogen peroxide: Mysteries of the bestiary / J.W. Eaton // J. Lab. Clin. Med. 1991. -Vol. 118.-P.

122. Eimerl, S. Acute glutamate toxicity and its potentiation by serum albumin*1. A ,are determined by the Ga concentration / S. Eimerl, M. Schramm // Neurosci. Lett. -1991. Vol. 130, № 1. -P:. 125-127.

123. Ellman, G.L. Tissue sulphydryl groups / G.L. Ellman // Arch. Biochem. Biophys. 1959:-Vol. 82. - P. 70-81.

124. Fedorov, R. Structures of nitric oxide-synthase isoforms complexed with the inhibitor AR-R17477 suggest a rational-basis for specificity and inhibitor design / R. Fedorov et al. // Proc. Natl. Acad.- Sci. USA. 2004. - Vol. 101, № 16. -P: 5892-5897.

125. Fujisawa, H. Pharmacological modification.of glutamate neurotoxicity in vivo / H. Fujisawa et al!. // BraimRes. 1993. - Vol: 629^ № I. - P. 73-78.

126. Fukai; T. Extracellular superoxide dismutase and'cardiovascular disease / T. Fukai et al.;// Cardiovasc. Res. 2002. - Vol. 55. - P. 239-249.

127. Galetti, PI Biochemical rationale for the use5 of CDP-choline in traumatic brain-injury: pharmacokinetics of the orally administered drug / P. Galetti et al. // Neurol. Sci. 1991.-Vol. 102.-P. 19-25.

128. Gerendai, I. Neuroendocrine asymmetry /1'. Gerendai, B;: Halasz:// Front: Neuroendocrinol: 1997. — Voli 18:.-P:.354-38r.

129. Goto, S: Poly (ADP-ribose) polymerase impairs early and long-term experimental stroke recovery / S. Goto et al. // Stroke. 20021 - Vol: 33 - № 4. — P; 1101-1106.

130. Green, D.R. Mitochondria and) apoptosis / D;R":. Green, J.C. Reed: // Science:- 1998k-Vol: 28L-P:.I309-13I2:

131. Gunzler. W.A. Glutathione: peroxidase:::Handbook.of methods for oxygen radical research / W.A. Gunzler, L. Flohe:Boca Ration: GRC Press, 1986.

132. Gupte, S.A. NADPH and heme redox modulate pulmonary artery relaxation and guanylate activation? by NO-/ Si A. Gupte et al. // Am., J. .Physiol; — 1999:-Vol. 277.-Pi 1124-1132.

133. Haley, E.G. High-dose tirilazadi for acute stroke (PANTTAS II). PANTTAS IITnvestigators / E.G. Haley // Stroke: 1998: - VoE29;.-P; 1256-1257:

134. Halliwell, B. Free radicals in Biology and. Medicine / B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge. Oxford: Oxford University Press, 1999.

135. Han, H.S. Influence of mild" hypothermia: on» inducible nitric; oxide synthase expression- and reactive: nitrogen: production in experimental stroke" and: inflammation / H.S. Han et al. // J. Neurosci;-2002. Vol. 22.-P. 3921-3928.

136. Hennerici, M. The subclavian steal phenomenon: a common vascular disorder with rare neurologic deficits / M. Hennerici, C. Klemm, \V. Rautenberg // Neurology. 1988. - Vol. 38, № 5. - P. 669- 673.

137. Hofmann, K. Ceramide in' apoptosis: does it really matter? / K. Hofmann, V.M. Dixit// Trends Biochem. Sci. 1998.-Vol. 23.- P. 374-377.

138. Ignarro, L.J. Endothelium-derived relaxing factor from pulmonary artery andtvein possesses pharmacologic and;chemical\propertieSiidentical to those of nitric oxide radical / L.J. Ignan-o // Circ Res. 1987.-Vol. 61, №:6. - P. 866-879.

139. Kim; G;W. Manganese superoxide dismutase deficiency exacerbates cerebral infarction after focal cerebral ischemia/reperfusionin mice: implications for production*and role of superoxide radicals / G.W. Kim et al. // Stroke. 2002.— Vol. 33.-P: 809-815.

140. Kirkman, H.N. Mechanisms of protection of catalase by NADPH. Kinetics^and* stoichiometry / H.N. Kirkman// J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. -P. 13908-13914.

141. Kiss, J. Nitric oxide: a novel link between«synaptic and nonsynaptic transmission / J: Kiss, S. Vizi // Trends »Neurosci. 2001. - Vol: 24. - №4. - P. 211—215.

142. Knowles, R.G. Nitric oxide synthases in mammals / R.G. Knowles, S. Moncada // Biochem. J. 1994. - Vol. 298. - P. 249-258.

143. Koh, J.Y. The role of zinc in selective neuronal, death after transient global cerebral ischemia / J.Y. Koh et al. // Science. 1996. - Vol. 272. - P. 1013-1016.

144. Kooy, N.W>. Evidence for in vivo peroxinitrite production in human acute lung injury / N.W. Kooy et al. // Am. J. Respir. Crit Care Med. 1995. - Vol: 151. — P. 1250-1254.

145. Lapierre, J.L. Cortical acetylcholine release is lateralized during asymmetrical slow wave sleep in northern fur seals» / J.L. Lapierre et al. // J. Neurosci. 2007. - Vol. 27, № 4. - P. 1199-2006.

146. Li, J. Peroxinitrite-induced relaxation in isolated canine cerebral arteries and mechanisms of action / J. Li, W. Li, B.M. Altura // Toxicol. Appl. Pharmacol. -2004.-Vol. 196.-P. 176-182.

147. Liaudet, L. Biology of nitric oxide signaling / L. Liaudet, F.G. Soriano, C. Szabo // Crit. Care Med. 2000. - Vol. 28. - P. 37-52.

148. Link, E.M. Enzymic pathways involved in cell response to H2O2 / E.M. Link // Free Radic. Res. Commun. 1990. - Vol. 11. - P. 89-97.

149. Liochev, S.I. The Haber-Weiss cycle 70 years later: an alternative view / S.I. Liochev, I. Fridovich // Redox Rep. - 2002. - Vol. 7. - P. 55-57.

150. Lo, E.H. Temporal correlation mapping analysis of the hemodynamic penumbra in mutant mice deficient in endothelial nitric oxide synthase gene expression / E.H. Lo et al. // Stroke. 1996. - Vol. 27. - P. 1381-1385.

151. Lock, R. Characteristics of the granulocyte chemiluminescence reaction following an interaction between human neurophils and Salmonella typhimurium bacteria / R. Lock, C. Dahlgren // APMIS. 1988. - Vol. 96. - P. 299-306.

152. Lopez-Coviella, I. Evidence that 5 -cytidinediphosphocholine can affect brain phospholipid composition by increasing choline and cytidine plasma levels / I. Lopez-Coviella et al. // J. Neurochem. 1995. - Vol. 65. - P. 889-894.

153. Lowry, O.H.R. Protein measurement with the Pholin phenol reagent / O.H.R. Lowry, A.L. Farr, R.I. Rendall // J. Biol. Chem. 1955. - Vol. 193, № 1. -P. 265-267.

154. Macdonald, P. Synergestic inhibition of platelet aggregation by endothelium-derived relaxing factor and prostacyclin / P. Macdonald, M. Read, G. Dusting // Tromb. Res. 1988. - Vol. 49. - P. 437-449.

155. Mainprize, T. GABA concentrations in the striatum following repetitive cerebral ischemia / T. Mainprize et al. // Neurochem. Res. 1995. - Vol. 20, № 8. — P. 957-961.

156. Mander, P. Activation of microglial NADPH oxidase is synergestic with glial iNOS expression in inducing neuronal death: a dual-key mechanism of inflammatory neurodegeneration / P. Mander, G.C. Brown-// J. Neuroinflammation. -2005.-Vol. 2.-P. 20.

157. Maneen, M.J. Peroxinitrite diminishes myogenic activity and is associated with decreased vascular smooth muscle F-actin in rat posterior cerebral arteries / M.J. Maneen et al. // Stroke. 2006. - Vol. 37, № 3. - P: 894-899.

158. Mannick, J.B. Fas-induced caspase denitrosylation / J.B. Mannick etal. // Science. 1999. - Vol. 284. - P. 651-654.

159. Marklund, S.L. Extracellular superoxide dismutase in human tissues and human cell lines / S.L. Marklund // J. Clin. Invest. 1984. - Vol. 74. - P. 1398-1403.

160. Martin, N.J: Design and synthesis of C5 methylated L-arginine analogues as active site probes for nitric oxide synthase / N.J. Martin et al. // J. Am. Chem. Soc. 2007. - Vol. 129, № 41. - P. 12563-12570.

161. McGeer, E.G. Neurodegeneration and the immune system / E.G. McGeer, P.L. McGeer // Neurodegenerative Diseases. Philadelphia, Saunders, Harcourt: Brace & World, 1994. - P. 277-299.

162. Mikkelsen, R.B. Biological chemistry of reactive oxygen and nitrogen and radiation-induced signal transduction mechanisms / R.B. Mikkelsen, P. Wardman // Oncogene. 2003. - Vol. 22, № 37. - P. 5734-5754.

163. Moncada, S. Nitric oxide: physiology, pathophysiology and pharmacology / S. Moncada, R. Palmer, E. Higgs // Pharmacol. Rev. 1991. - Vol. 43, № 2. -P. 109-143.

164. Morita-Fujimura, Y. Superoxide during reperfusion contributes to caspase-8 expression and Apoptosis after transient focal stroke / Y. Morita-Fujimura et al. // Stroke. -2001. Vol. 32, № 10. - P. 2356-2361.

165. Munday, R. Reduced glutathione in combination with superoxide dismutase as an important biological antioxidant defense mechanism / R. Munday, C.C. Winterboume // Biochem. Pharmacol. 1989. - Vol. 38, № 24. - P. 4349-4352.

166. Nakashima, K. Effects of hypothermia, pentobarbital, acid release during complete global cerebral ischemia / K. Nakashima, M.M. Todd // Anesthesiology. -1996.-Vol. 85, № l.-P. 161-168.

167. Nathan, C.F. Role of nitric oxide synthesis in macrophage antimicrobial activity / C.F. Nathan, J.B. Hibbs // Curr. Opin. Immunol. 1991. - Vol. 3, № 1. -P. 65-70.

168. Nozaki, K. Mitogen-activated protein kinases and cerebral ischemia / K. Nozaki, M. Nishimura, N. Hashimoto // Mol. Neurobiol. 2001. - Vol. 23, № 1. -P. 1-19.

169. O'Neill, M.J. ARL 17477, a selective nitric oxide synthase inhibitor, with neuroprotective effects in animal models of global and focal cerebral ischaemia / M.J. O'Neill et al. // Brain Res. 2000. - Vol. 871, № 2. - P. 243-244.

170. Okado-Matsumoto, A. Subcellular distribution of superoxide dismutases (SOD) in rat liver / A. Okado-Matsumoto, I. Fridovich // J. Biol. Chem. 2001. -Vol. 276, № 42. - P. 38388-38393.

171. Olney, J.W.E. New mechanisms of excitatory transmitter neurotoxicity / J.W.E. Olney // J. Neural. Transm. Suppl. 1994. - Vol. 43. - P. 47-51.

172. Orrenius, S. Oxidative stress studied in intact mammalion cells / S. Orrenius // Int. J. Biol. Sci. 1985. - Vol. 311. - P. 673-677.

173. Packer, L. Interactions among antioxidants in health and disease: vitamin E and its redox cycle / L. Packer // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1992. - Vol. 200, №2.-P. 271-276.

174. Palmer, R.M. Nitric oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor / R.M. Palmer, A.G. Ferrige, S. Moncada // Nature. 1987. - Vol: 327. - P. 524-526.

175. Parmentier, S. Selective inhibition ofinducible nitric oxide synthase prevents ischaemic brain injury / S. Parmentier S. et al. // Br. J. Pharmacol. — 1999. — Vol. 127, № 2. P. 546-522.

176. Peters, S. Zinc selectively blocks the action of N-methyl-D-aspartste on cortical neurons / S. Peters, J. Koh, D.W. Choi // Science. 1987. - Vol. 236. -P. 589-593.

177. Piech, A. Differential regulation of nitric oxide synthases andj their allosteric regulators in heart and vessels of hypertensive rats / A. Piech et al. // Cardiovasc. Res. 2003. - P. 57, № 2. - P. 456-467.

178. Poot, M. Oxidants and antioxidants in proliferative senescience / M. Poot // Mutat. Res. 1991. - Vol. 256. - P. 177-189.

179. Puka, M. In vivo acidosis reduced extracellular concentrations of taurine and glutamate in the rat hippocampus / M. Puka, A. Lehmann // J. Neurosci. Res. — 1994. Vol. 37, № 5. - P. 641-646.

180. Pulsinelli, W.A. Temporal prolife of neuronal damage in- a model of transient forebrain ischemia / W.A. Pulsinelli, J.B. Brierley, F. Plum // Ann. Neurol. — 1982.-Vol. 11, №5.-P. 491-498.

181. Pulsinelli, W.A. The therapeutic window in ischemic brain injury / W.A. Pulsinelli // Curr. Opin. Neurol. 1995. - Vol. 8, № 1. - P. 3-5.

182. Raes, M. Comparative study of the enzymatic defense systems against oxygen-derived free radicals: the key role of glutathione peroxidase / M. Raes, C. Michiels, I. Remade // Free Radic. Biol. Med. 1987. - Vol. 3. - P. 3-7.

183. Rao, A.M. Arachidonic acid and leukotriene C4: role in transient cerebral ischemia of gerbilts / A.M. Rao et al. // Neurochem Res. 1999. - Vol. 24, № 10. -P. 1225-1232.

184. Ravi, K. S-nitrosylation of endothelial nitric oxide synthase is associated with monomerization and decreased enzyme activity / K. Ravi et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. -2004. Vol. 101, № 8. - P. 2619-2624.

185. Ravichandran, L.V. Direct and reversible inhibition of endothelial nitric oxide synthase by nitric oxide / L.V. Ravichandran, R.A. Johns, A. Rengasamy // Am. J. Physiol. 1995. - Vol. 37. - P. 2216-2223.

186. Rees, D.D. Role of endothelium-derived nitric oxide in the regulation of blood pressure / D.D.4 Rees, R.M.J. Palmer, S. Moncada // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1989. - Vol. 86, № 9. - P. 3375-3378.

187. Rees, D.D. specific inhibition of nitric oxide formation from L-arginine attenuates endothelium-depenent relaxation / D.D. Rees et al. // Br. J. Pharmacol. -1989. Vol. 96, № 2. - P. 418-424.

188. Reif, D.W. Discovery and development of neuronal nitric oxide synthase inhibitors / D.W. Reif et al. // Free Radic. Biol. Med. 2000. - Vol. 28, № 10. -P. 1470-1477.

189. Remade, J. Importance of various antioxidant enzymes for cell stability. Confrontation between theoretical and experimental data/ J. Remade, D. Lambert, M. Raes // Biochem. J. 1992. - Vol. 286. - P. 41-46.

190. Rothwell, P.M. A systematic comparison of the risks of stroke and death due to carotid endartecectomy for symptomatic and asymptomatic stenosis / P.Ms Rothwell, I. Slattery, C.P. Warlow // Stroke. 1996. - Vol. 27, № 2'. - P: 266-269.

191. Schild, L.R.T. Nitric oxide- produced in rat liver mitochondria causes oxidative stress and, impairment of respiration after transient hypoxia / L.R.T. Schild. et al:. // FASEB J.-2003.-Vol. 17, № 15:-P. 2194-2201.

192. Semenza, G.L. Expression of hypoxia-inducible factor 1: mechanisms and consequences / G.L. Semenza // Biochem. Pharmacol. 2000. - Vol. 59, № 1. -Pi 47-53.

193. Sensi, S.L. Measurement of intracellular free zinc in living* cortical» neurons: routes of entry / S.L. Sensi et all. // J. Neurosci. 1997. - Vol. 17, №24.-P. 9554—9564.

194. Shivakumar, B.R. Glutathione and protein- thiol homeostasis in brain during reperfusionfafter cerebral ischemia / B.R. Shivakumar, S.V. Kolluri, V. Ravin-dranath // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1995. - Vol. 274, № 3. - P. 1167-1173.

195. Sneddon, J.M. Endothelium-derived relaxing factor reduces platelet adhesion to bovine endothelial cells / J.M. Sneddon, J.R. Vane // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - Vol. 85, № 8. - P. 2800-2804.

196. Stangel, M. A guickly revesible occlusion in the vertebrobasilar circulatory bed: often unrecognized? / M. Stangel, F. Boegner // Dtsch. Med! Wochenschr. 1996. - Vol. 121, № 37. - P. 1123-1126.

197. Starr, M. Bilateral asymmetry in brain GABAfimction / M. Starr, J.C. Kil-patrick // Neurosci. Lett. 1981. - Vol. 25, № 2. - P. 167-172.

198. Stevens, C.F. Quantal release of neurotransmitter and long-term potentiation / C.F. Stevens // Cell. 1993. - Vol. 72. - P. 55-63.

199. Stoffel, W. Studies in vitro on the byosynthesis of ceramide and sphingomyelin: a réévaluation of proposed pathways / W. Stoffel, I. Melzner //

200. Hoppe Seylers Z. Physiol. Chem. 1980. - Vol. 361, № 5. - P. 755-771.

201. Stoll, G. Proximal myotonic myopathy syndrome in the absence of trinucleotide repeat expansions / G. Stoll et al. // Muscle Nerve. 1995. — Vol. 18, №7.-P. 782-783.

202. Swanson; R.A. Glucose can fuel glutamate* uptake in ischemic brain / R.A. Swanson, I. Chen, S.H. Grahan // J. Cerebr. Blood Flow Metab. 1994. - Vol. .14,. . № l.-P. 1-6.

203. Taylor, J.M. Diminished Akt phosphorylation in neurons lacking glutathione peroxidase-1 (Gpxl) leads to increased susceptibility to oxidative stress-induced cell death / J.M. Taylor et al. // J. Neurochem. 2005. - Vol. 92, № 3. -P. 283-293.

204. Voiculescu, V. Current concepts in brain ischemia. A review / V. Voicu-lescu// Neurol. Physiatr. (Bucur). 1989. - Vol. 27, № 3. - P. 175-186.

205. Vos, J.P. Relationships between phosphatidylcholine, phosphatidyle-thanolamine, and sphingomyelin metabolism in cultured oligodendrocytes / J.P: Vos et al. // J. Neurochem. 1997. - Vol. 68, № 3. - P. 1252-1260.

206. Wang, G.L. Characterization of hypoxia-inducible factor I and regulationof DNA binding activity by hypoxia / G.L. Wang, G.L. Semenza // J. Biol. Chem. — 1993.-Vol. 268, №29.-P. 21513-21518.

207. Warner, D.S. Oxidants, antioxidants and ischemic brain / D.S. Warner, H. Sheng, J. Batinic-Haberle // J. Exp. Biology. 2004. - Vol. 207. - P. 3221-3231.

208. Waters, N.S. Differential prolactin responsiveness to stress in left- and right-pawed mice /N.S. Waters, L.L. Badura, V.H. Denenberg // Brain Res. 1996. -Vol. 724, № 1.-P. 112.

209. Willmot, M. Nitric oxide synthase inhibitors in experimental ischemic stroke and their effects on infarct size and cerebral blood flow: A systematic review / M. Willmot et al. // Free Radic. Biol. Med. 2005. - Vol. 39, № 3. - P. 412-425.

210. Xia, Y. Inducible nitric-oxide synthase generates superoxide from the reductase domain / Y. Xia et al. // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273, № 35. -P. 22635-22639.

211. Zablocka, B. Enhancement of 3 H.D-aspartate release during ischemia like conditions in rat hippocampal slices: source of excitatory amino acids / B. Zablocka, K. Domanska-Janic // Acta Neurobiol. Exp. (Wars). 1996. - Vol. 56, № l.-P. 63-70.

212. Zhu, Y. Transforming growth factor beta 1 increases bad phosphorylation and protects neurons against damage / Y. Zhu et al. // J. Neurosci. — 2002. Vol. 22, № 10.-P. 3898-3909.166

Информация о работе

Косенко, Юлия Владимировна
кандидата биологических наук
Ростов-на-Дону, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге право- и левополушарных крыс при ингибировании NO-синтазы в условиях нарушения мозгового кровообращения - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы