Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Иммунореактивность организма поросят на фоне скармливания продуктов микробиологического синтеза в составе рационов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Иммунореактивность организма поросят на фоне скармливания продуктов микробиологического синтеза в составе рационов"

нижегородский сельскохозяйственный ИНСТИТУТ

рт8 од

1 8 дер т

На правах рукописи

УДК 636:612.017.11/12

ВИНОГРАДОВА Анастасия Ивановна

ИММУНОРЕАКТИВНОСТЬ ОРГАНИЗМА ПОРОСЯТ НА ФОНЕ СКАРМЛИВАНИЯ ПРОДУКТОВ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО СИНТЕЗА В СОСТАВЕ РАЦИОНОВ

Специальность 03.00.13. — физиология человека и жисоткых

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород, 1994

Работа выполнена во Всесоюзном научно-исследовательском институте физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных (г. Боровск, Калужской области).

Научный руководитель: кандидат биологических наук, старшин научный сотрудник А. М. Соловьев.

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук, профессор А. Н- Успснский, Кандидат биологических наук Н. М. Травина.

Ведущее учреждение — Всесоюзный научно-исследова-тельскнй институт экспериментальной ветеринарии имени Я. Р. Коваленко (г. Москва).

в «.....час. на заседании специализированного Совета

К. 120.40.02. при Нижегородском сельскохозяйственном институте (603107, Н. Новгород, пр. Гагарина, 97).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородского сельскохозяйственного института 603107, Н. Новгород, пр. Гагарина, 97)-

Защита состоится

1994 г.

Автореферат разослан <

е.. 1994 г.

Ученый секретарь специализированного Совета,

к. б. н., доцент

Н. Н. Асафова.

шдаля ХАРАКТЕРИСТИКА глкоти Актуальность течц Пнинанно учтши тскшчески развита* г.трлн ним н посямшт годи било сконцентрировано на изучении поэножносп"» исполмо-панип бсдкоп опноклеточпня ннкрооргаиизмо« для рогаонич пгоплппи Ьозра.гаюяинч» дрФтттп трзлишкжмик (¡<*дкввмх корном и »инотлс • прдстпо. Однако пгспссси крупнотоннажного лроизроястпа яолко-rtas коицентрптоп микробного происхождения и рирокоро рпедс'нич кг п практику кормления сельскокозяйстнешшк ïiironrox соиро-вохдаотсы рядом ослоянсшсл.

С одной ci'opони, рязтгпи; провнлдсниосш нккробиологкпеско -го синтеза итшу отсгтстлня полной герметизации текнолрричпско-ро пронос-а и других Фактороп нохет пшштъ аллегри::лнип организма лип, занятая па ир«:дт>иптияч, произиоляммя р^лкопо-иита-нишши концентрат tiTBK), a тяюс нлсолмтя соотлотстмугпчк нпо-khîwгпшшк рягмпон. Пшшемлсиие для контроля элгрязксгргостн оте-рузааден среди гт>ибани-продуцентами микрстюлогичрстогс синтеза ието/ш определения коицсптрлшт oûmoro (¡елка с иончк'ч реактива Фсшииа-Чиаколтеу (метод Лоури) и нннуиохш«'» на оспоно иниуно-ГЛОбУЛИНОЙОРО эритгоцитлрлого дизг.чостикуил (РИГА) недостаточно надежны пследствие низких чувствительности .спе«и1к'шости ид к полного отсутствий последней. П спязц с этим потребность с разработке сррпстп и кстодон экологической опенки нроизподст-nei.Jtoft и внешней зон предприятия на оспогшшш содерзашш n nert ррибол-нродунентоп и антагениоакткшпк встести готоного продукта ~ папгииа. эшдага» - очевшиш (Неннря О. К. . Модявоп !». • 19т9;Тшии К. К.. 19В'К Xaamt Д. А.. 1987).

С другой стороны, по данным рчлп исследонатсяеЛ, «опрос о регламентации использований гсогмоп микробиологического синтоna

в с0стз.ш? корносмсссй кяя когнлспия cfj!bc!f0ko31'ftctnri""jr Х'Л~

нотный еще не ;>ешен окончательно и тробует проведения углуб-аевких мсишш-шюлогическшс «ссдеиовашиЛ. Оыши из соореиекиык аспектов пзучеккя ышнння «акторов внешней среди, в тон числе и алиионтариых. иа оргавизн является иннувологическиа. Однако анализ отечественной и зарубежной литературы возводнет шивить олредолешцу» дисароворшш о изучении воздействия продуктов никх>обио.1огичзского синтеза в состаие рацшиов «а Физиологические и биокннинеекке показатели крови и внутренних органов аавсташк. о чен внеетсн достаточно обширная иифоркация, и на «ннлювиодагичоскую реактивность организма» дашис- о состошшн шторой висьна ограничении (Соковом Ю. А. < 19601 Еалахониева 13.Н. с соавт., ич; Кустовая Т. В-. 19<1'Л. Изучению дашшя: иоаросаа посвшеиа иредяагаекац работа.

Паль н задачи исследование Цодьв работа являлись одешеа физиодогнческшч) состояния ср-гааизна иоросат васдеотьениого возраста иа 4ина (жаркддаашш наврнна к эииша в составе кормосмесей по показатедян ¡шиуно-догич<:ской реактааиостн а поиск обьектиаиорс, критерий таноа оценки яда решения вопроса о регламентации мсаодьзоваааи продуктов ии'.'.рооиидорического синтеза в усяовияк практического свиноводства.

и исследованиях решались следующие задачи: а) изучить характер «{мшю&иологшесиой реактишостн ерга-нмзна иоросит на верирадшое постиюш» зашла в кодачс-стиаа. обесиечшкигаьа 20 и ЪОХ нотреыюсга в сшчш вротеиае раадсва» «а »о«« во1н;итсх'адм1ои шшупнаашш поросят аатвтииийакгивши арсЗиратон заршии

Ы научать вознолшегь ироьикаовоиия авткреивоактивнил сос-ла1.':и!и1 наорина нз йеи'/лчлию-кпдачного тракта а крови иам-с«т о,чи..го ¿13 ьерейтниа 4-акте рои ригуд^ши: нал* носии^оги-

- 3 -

ческоП реактивности организма:

в) изучить состояние бактериоиеноза толстого отдела кишечника как Фактор иммунобиологической реактивности и естественней резистентности организма поросят послеотьемного позрзста на Фойе скармливания зприна в составе консиясгмор;

г) изучить уровень основных классов иикуноглооулинов (а и 0) в копгоФнльтратах как Фактор опенки состояния Сактериоценоза толстого отдела кишечника поросят на Фоне скармливания зприиа в составе рациона:

д) очсиить Физиологическое состояние растуиих и откармлите-шк свиней в условиях кормления комбикормами с использованием го и 50и зприна от уровня сырого протеина;

е) дать зоотехническую и экономическую оценку эффективности ис-пользонаиия комбикормов. 20 и 50* сирого протеина которых приколите я иа долю эпp:^,^•,• в кормлении поросят г-в - месячного возраста;

ж) изучить возможность использования метода последовательного Ферментзааисимого имнуносорбенткого анализа ( Hí/ч пли ELISA) для контроля загрязнённости окрухашей среди белком вяк.

Научная новизна

1, Установлено развитие негогальнси пшп'яологппескоп тологалт-ности к го и 50 z опиша по сотому протеину щипсна twionpwimo с формированием Перекрестной аргскглпиосм к релстиенпгл! вго-и»гм»вкнояг штуниу продуцента гслсвио-латогрйнда • гсиоли годэ candida в орпинима íwrоспг »eweoní много возраста.

г, п тсзчг'стто н'чгпюлогичоскс'го ппперич 0ири1«) состряпгя

гавизпя- иегостг на Фо>:е скш'клипгипя го к 50« эипма по ецр&мг гечтиму гаш'от сь'дз псвсяьгчл'т!» данннч os измнетм к тете» а-оксноз-! пгле'тчт-з. прнолисши»? «агзктегистиьев msi: i жст>»чт гоя'рлоглос-гчииоп кчассоз А и ч в ко»гоФ»пмт>чг1к. í4-t:>ü--•м'-.но.

что вшецеричкслешше метода оценки состояния ишунобиодоги-ческсц реактивности являются объективными критериями характеристики иммунологического статуса организма поросят на $оне скагнлиаанил гпрниа в составе радпоноо.

3. Б сивороткаа кроьи поросят обнаружены аитигенноактивные соьздиецья сангина после еро скарндивавдя.

4. Устйнойлй!-ц возиоаность использования разработанного метода улк ( Elisa i ала ouäii.cH п контроля загрязненности окрииоми среди производственном и виепнай зон заводои никробиологнческо-го синтеза oeiicou Ebi£.

Практическая ценность

1. iu;to« оигзделешш титров (мнуногдобулинов основиах классов в коиго^альгратак rtopocav послеотьенного .иезраста кожет быть нсиодьзоааи и качестве теста, карактернзэтоиего оактерноиеноз толстого отдела ришечника поросят. отрахашшл состояние юшуно-йкологпческон рсактивности и естественной резистентности органична на Фоне скармливания шве а составе радаоиоы

2. Метод ИМ (EL1S.M пригоден для ош-едеденля содержания в сывороткам крови поросят аитигениоактшгкьж сосдиаешш касгина цосле его скарнлизания.

3. Разработанный зариавт IWA 1 ELISA \ пригоден для использования в качестве метода опенка загрязненности производственной и внешней зон заводов микробиологического синтеза бедкой БЕК.

Апробация раеоти Но натйриапан диссертации опубпшеоваиц 3 печатные Pi^oru. Ouioiwe- положения диссертации обсуздены на Ц Республиканской KiK4«.'pfim;ni "та№оъиояогиа а сельскон хозяйстве" (ьштес. JSrSHi Вссссю^и сонематш "Hoaus аспекты участил оиодогичес-K.i ¿г.';;тиил ь*%ес-га в рег/.'шшш метаболизма н продуктивности

CS/.i.CbO'f-j.iiiiiCTbt.liU-.ii «UliCTHUX" ("opoiiük, 1591), НёХАвйОР<ЛОРНОН

совешашм отдела питания ШйИФВиП сельскохозяйственных хнпст-нкя (БОРОВСК. 1992).

Объем и структура работ« диссертация состоит из введения, обзора литературы U глава), описания методов псследоиания (г глаоаь изложения результатов исследования (3 глава), заключения, вняодов, практически!; предложений и содержит: рт кашне шгсиых страшш основного текста, 1) таблиц, з графика, Т схен и список цитируемо« литературы, пклочаюяип 119 работ отечрстпешшя и 122 работ инсстрашшя автороя.

Положения, выиосииио ui защиту 1.Эпр!ш. исдользупгаиися п качестве белкоео-пнтаишшоп добавки для балансирования белкового и аминокислотного состава комбикормов в дозах 20 и W- по сиропу протеину, гак-'влет изменения иммунобиологической реактивности органична поросят,пдрэктсризу-тиеся формированием перогально индучирспанпой иммунологической толераггшости к этому продукту, ,

г. Формирование пероральио ттукиропапной тшюлогиччскоя толерантности к зарину. пключйнноиг t! состав коиюспесеи в количествах EQ и EOZ от уровня сирого протеина. сопровождается появлением перекрестной имигпологическоз толерантности к Роястнсп-ш.;м проишишшоиг атакнг прояуиеита услсвио-яатсгетмп яго.»ле-пояовнш гризли рода candida.

3. <орчнропагше перекрестном ораяыю. ннпупировшшои толерантности к "слгвпо-патогситм яголлсподобнкн гг-кояи гола Candi<1л пгиподит к резкому увеличение численности 'этик ннкгеор-гаиианоп л толстой отделе кппе'шкка поросят, что может стать причине« р-с.тгпс? у юи кашотдончкозпол ткнжппп пл fem ейнг.е-ния о сдам колоиизапиоинеи »впястсшйоетк иикгобпоючюэа шзет»-рител'.чогп тракта.

4. Скаршншаняа зарина. в количества», обвспечииакяши го и 50И потребности поросят вослеотьённого возраста в сыром протеиае. вызывает изиенеыия в колнчестаенно-качествеиион. составе бак-теркоцснма толстого отдела кишечника. совровоздашнеея повышением уровня зкскрешш иммуноглобулинов классоь А и б в копро-Фидьтратак.

5. Изучение уровня экскреции иммуноглобулинов .а копрофидь-тгатах, характеризующего бактериоиеиоэ толстого отдела кшечнк-ка.является более чувствительным методом оценки состояния иммунобиологическом реактивности организма поросят «а Фоне скарщш-

шшя различима доз зприна в составе раиионов. чей исподьзгекие при стандартном тестировании методц оценки по показателя« наркологического н биохимического состава оргацои и ткаиеа.

6. в сшорогтедк кропи поросят посла однократного скармдива-11ия паг.иша могут появляться решестйа. специфически выявляемые . антителами к указанному продукту в игл,

'!. Разработанный натод И9А .коже? быть использован для контроля за загрязненности» окружамаей среды заводов тшробиологического синтеза белком БЕК.

НАТЕРИАШ 11 НИСОДЦ ЙССЛЕДОШИИ. Для ьшолнешм оостаилешшх ■ задач бшю организовано три 01шта.

Церши опыт бил одоведев на £'/ понесишс ворссатаи а-х месячного возраста. Возраст животина иосле снятия с опита составил 200-204 дня. Из соросат. подобрашшк во принципу аналогов, бшш сформировано 3 груо.^1. Поросята I гуушш - центральнойш получали конбикорн» составлений из традшшошшк растите-лыии .тормоз. .. с нсвользоьашгм ссеього ырота и качеств» оснобцой бшсоьоа *ш-баьки. чиаотьиг ьтороп и третьей групп (И к £.» потребляли койьилар« с зйиеиол частя соевого вюта зарянок и кьлачестье ¿о

и 50К от уровня сырого протеина рациона соответственно. Схекл раниоиоп представлена в тавлипе I.

Таелиаа I Состав комбикормов с<)

Группы поросят

Иигреднентп --------------------------------------------

рациона I п й

I П й . ÎY

Ячмень 57.0 ЪТ.О 57,0

кукуруза гг. о гг. о гг. о

Epöt соепнп 19.0 12.1

Зп.нп - Т. 1 13.0

Йрснипнтат 0.9 0,8 l. ï

Кел Kopitortoft, ß 0.9 о.з 1.4

соль поваодш.чя о. 2 о. г. о, а

Всего 100.0 100.0 100. о

Допдплсмо п ;кг конаикориа: CepiïOKJtcao'l мыт. кг ia.'t .7.9

виска, я»' loo, о сз. з 3?. з

сгп'скнслого марганаа. нг 110.9 Но. О 10?. О

йяогастогэ хободма. • нг' 3.3 £.9 2.4

йятзиишг А, тис. НЕ 2.9 2.9 2. ')

owrannia а. тыс. "Е - о. » о. о

шггяшна. tí . мкг 19. о 19.0. 25.0

В i!<r к.;л5И1'.с*на содержится: КМ/.!ОГЛТХ niUlUi!« 1-1

.■>Ш;<н:к>Й. энергии. ил« 3

i. 1 i г. 4

i. í

a

Продолжение таблицы I

I и и IV

сухого вещества, кг о, а 0.7 0. 9

сирого сротеина. г ПО. 0 170. 0 170. 0

вуреваиимго протеина, г 141. О 133.6 126. 0

сирой клетчатки, г 47.0 42. 0 45. 0

лпзииа, г 7. 9 S. 0 а. о

потнмшла ♦ циетииа. г ¿1 5. 0 ч. 9

! ML ты, г 6. 0 е. о 6. 0

t-осбора, г 6. 0 6, 0 &.0

по 5 поросят из itdixaii груеш ждаотник использовали для парентеральной имнуииэаш«! антигеион эприна. Способ г.риготоблзння аитагенд был разработан сотрудниками ленинградского Wiij гду-еокиа микозов и »шиогешюи аллергии ЛеиГИДУВа Pi. Скена vmymi-зации свиней еша предварительно разработана иани.

Регулярно на нротажешш всего иеризда опыта У жизоташ трех груии с катерьаяон в 4 дня проводили взятие кробн шгасаиеп уиной век«) и свелсмшаелеккик Фекалий. U upoüaü крови определили о&шее количество оти&лыиа 40№euiiu& элементов с восаедушлн шдомннен явакоцатарвой формулы. совер*аии8 геногяобьяа с аке-тоащаигидршом (Коидракии Я. П.. t97fi>. В «геороткан г.роои оярь-дьлйли обиее количество бедка по методу Лоури ¡: оешсе сокьрка-ийнукоглобулыюз с искользоьапжи сегаотлслого пипка Шязов O.E., йодгаеи U.K.. i973 ). ь у шшяшэюодотшс поросят - г.о-Лйчестео спеадулческик амтвтил к антигену зприна в ?еа<иши mi-v)'3iscüuoh преадвктаиии со ОухтерлошКЗальбер а. а.. 1968). ß про-6:»s кала сздвиАжы холдосгшшша и нидоиой состав иякрс«лорц: oniiiäv)- и иодс-чн-жислы* öut\tcii:ii, энтерококков. эсгмшш к «рож-

аеподобних гмсоп обиеприняппи пето/глин. Статистическую обработку результатов исследований проводили «о /.¡янргипу И. П. к , 13ого0ъеву л. к. (¡952). оаиео солеркашгс иммучогдобулиноа оенов-нш классов п копгофнльтратая определяли по методике Кунаевой ¡Т. G. и Тоикиной Т. 5i, (19ТЗ! с использования!! коииерческих препаратов шшуноглооулннов классов л, G, Н свиней,

По результатам кормления и взвешивания »¡тотннк определяли пчдшлтуалм:;« и груяпош.'-з показатели потребления корнов» интенсивность Роста .«нвотни:!, эффективность использования энергии и протеина норной и т основании получении^ дапння подсчитывали экономическую э^Фэглчшность от скармливания кск-сккогноаегонмс ¡1., Петуисва Е,Л.. )93ti.

Сторон опмт просолили с использованием 10 поросят породи Лаидрас. Йивоткш 2-месячного возраста оанокгатио скармливали паприн п количества \v. от вассы тела поело 16-4 совой голодпеп днэтк. До начала скармливания ¡1 через 0, 5г. г. О. а зааен кахдме 5 часа о течение суток у порсснт брали кройъ нутеи нуиквии уянея вены, ß сыворотка;: крови определяли присутствие воыеств, специфически выявляет»! с лоноаш иммуноиерокевдазньнт антител к пап-рину методой икмуиоферментксго анализа «ЮА. или ELISA), разработанного IfüHIi.

Способ получения антигена из паприна и скепа иннунизации кроднкоз дли получения аитнсисоротки сшш разгаоотани сотрудника»« Ленинградского иии глгоокик микозов и ннкогешюи аллергии ЛгиГКЙУЕа КЗ Р*.

Выделение и: ипюглобулг.ноа класса G проводили нетопен трехкратного высалнп.чния раствором суль«лта анкошш с последующей очисткой препарата диализом и иснеойкекноя хго.чатогра-Фней на яэлэ-нелл&лозе «Ь'улагпша т.о., 5909). Для получения перокскиазнкк конькгатов антител пешш.зоеади пегокешмзу хрена производства олмжскрг© завода еаохпшсчсских реактивов со

степень» очистки до JiZ=3. 0. окисление пероксидази крена прово-лиг.н вериподатон натрия с последующей очисткой гель-Фильтраин-еи на сезаденсе G-E5.B качестве субстратной снеси использовали 5-ашн!осалн:тловуй кислоту. Пороксидазиуе активность определяли сп8ктра4отонотрически на приборе KultlsKan ИСС при 458 им через !> иинут после начала реакции. Начальный титром коггьюгата считали разведение, даедге в полржцтелъион контроле Ь5 - i. г едпшшы оптической плотности, а в отрицательно!! - не более, о, Q5 оптическкт; едини«. Шшшй предел чувствительности и ФА при использовании да'аш антител составлял so иг/ил антигена, а iаоочин диапазон измерения находился в предалак 100-500Q иг/мл антигена.

Подготовка сывороток кроен, долучешшк от поросят в коде 2 опита, дли исследования я UZA заключалась с nit очистка от JeO я осуществлялась методом имиуносорешш с препаратами антисьшо-роток ¡; ibG с посагдушки удалением образовавшихся имтшна комплексов цеитрифугированиеи после добавления полизтиленгли-КОЛЯ «ПЭГ-ООО» «СКОУИС Д. . i965).

С «елью изучения возио.таостн использования разработанного метода для оиенки и контроля загрязненности воздука за-

водами по щ'&иэводота/ вш белкой гриоов-прозгаентов был организован опыт ill Vitro,

Ь oiiUTe ewso проведено сравнительное исследование проб .воз-дука. заиедоио сокем&шн папр.ш. тремя методами: традппиенно асгюльйукоинйся на заводан по производству БЬК истодами Лоури и РнГЛ!с использованием иннуноглобулинового эритроцигарного диаг-иооипума - КСД производства Ленинградского НИИ . вакцин и сывороток) ¡1 Ui-A.

отбор цроо воздуха проводили а жидкий поглотитель, в кото-р-н с иельи имитации его загрязненности вносили паприи и • дозах Зое иг - 500 мг. белок экстрагировали путем нагревания на кипи-

- и -

шеп водяной бане о точение 5 икнут,затеи при комнатной температуре при непрерывном порснеЕиаачт и течение £0 :шп:т. состли жидкого поглотителя и способ расчета солка п пробе воздука, приведенного к нормальным условиям, наян заикстпооаншИетохические указания по опенке загрязненности окружавшей ерем» выбросами предприятия иккгоСноломгкской проимзленностн при производстве иапгнна с помойья икнуиогдобулинопого зрнтроиитагпого ниагиос-тккуна (193'Н.

Результаты исследований обрабатывали статистически (Асатиани В. С.. 1965).

РЕЗУЛЬТАТУ ¡1ССЛЙДОВЛШ1 • 1. оценка нммунореактивности огганкгна поросят а ответ на скармливание го и ьох зпрппа по сирому протеину рациона

Результаты парентеральной иммунизации погоегт антигешюак-тявакя Препаратом зпмша из Фоне скагмякг.ания 2о и Зои этого продукта «о сырому протеину комшлсогиоп предстаилены в тас-е 2.

Таблица 2

Хитри специфически;', антител к антигену эпрнпа. сшшлешше

с лоноамэ резкими диффузионной преципитации (РДП) по оуятерлови а сызоротках кроен поросят после имнэтшэашш

Покер

ГрУпаьг поросят

животния

1 1 М 1 : б 1 9

г 1 128 i : 16 ! г

? 1 М 1 : Ч 1 4

4 1 (и ! : а нач. ргзв. сии-ни

5 1 04 1 : г то жа

- за -

Ошвчеяиэе csiasejuis (ясодснеиосзд кткгм?о мгвг.м па яйрс.чтс-kmusoc введшим ттдовгоьдос даз аптпггва ;пр5щд vi;;e t.tpaparti-Kopo г,оет/ия'_-ш!я £0 ü 10'/. эср«на по сыром/ протеиду uhosí.» са:;дегел^ствуе'т о «огш'доггюв! частичное вд-оралию V',!i?oíni!uc>Vi 'гояерач'гиосг;! к i¡ oprauusiíe яорослг

ciiíítülík групп.

Cücv0)!!¡;¡5 дуто-глоги oTi'ícnui полостей cpra:u:ï;n рассн-пт-н-îumca «¿¡к мцликатор его и«:и7корс£кт1шиости «а различиш 3j»¡>-roiíHiie ьоэдсмсткшь (Кяеиигрскзд lt. H.. i978; Нтшат h.a., 197Г>. « mêûv* изучали сьпшгм илигиошактивиости оргаа«з:п iícpo-с-.т а-«-иесячиого возраста »a «wie корнлешя копйагсорлгкп, со-двг*здшк го и 60* 'йигша по сироиг сротеану. u» ocuoi»a»uui «âiiiiius oä кмииешмх толстого отдела s;¡!:::e"'i5i;;K<i>

îtocbOiiuuM гндааксии^н kovopíu-í «вспатса н-яеиенк« состава ня«-:-j-oiÄopu lí:i ссиоиашы рааультетов иссдолэиаиий у с s о s so

мо»:ю ц^дв£пть г 'керкодз ü ст^кйвлгш!« батггрионеиоэй ¿здросат <лш'л:их гуукя. I период акмлзчлся но 70 кая ошта. в ¿того i>p¿'K«uu ка^клдадссь еаажоииа чяс&ивяжчи т*.;; "uoa&íuoíí* « кйрдстишз адюмкиоетя усйокго-е^юг.пшш икк-iïifi.'l. 3).

Тг.елкдз э

кокйаймш шакчесгсетюго и видового состава ш«с:»о«логи ■iey.wajï uo»ocüT из eo-íi r,sai> cv.vrt (lo;) ¡.-.но

¡¿И ¡Ш Груиви ПОРОСЯТ

кикрооргасшзиоь

IY

9, bbic. э ô. 73¿0. 12 ö. ifijo. 21

Пролпл.уенпз таблдал 3

I U п XV

сэдочяокксяке «актерки 8, 1.17 + 0. 2 t 7. 90+0. 10(1 i 7. 5'liO. 14 (2)

;ечн!ге ямочка т. гб»о. 12 7. 70i0. 30<tl 7. 73iO. 12 (35

йчтерококк!! 7. 33+0. 14 7. 88i0. 11 (t) 7. 75 + 0. 31 (1!

лрох^гвподоеш:? гркгн

рола car»(Ji,i:i - !i. £0+3. 20(2) '1. 1 Iii. 30 (Si

тмесь и дте газп:;п.1 ot::oc;.t?jsmio контроля сосгопвгна ври г>0. 0} 6) то КЗ Г.рц ?<0. 1

С«5а;'с-т от.чегнть, что ¡шенския чксатаиости указанная ой-йой б&ктер:гл u iticaiiMü поросят а перк-Ч <50 - 70 яз'Ой пссдг начала сг.арнлшгакич косбшюгнои с разаи уровнен содгр.ч;з:шя .эпрл-иа протекали ела шракешюа зависимости "доэа-зффенч"". Однако а изкгле:¡ня ижрегцой ',«шг-ог?а.п;и поросят а гр-ш ¡¡го-яслхчли сгсграсслровать а тон а;о ианрЕгкеяни. тогда к а» •/ порося? п грукпп спи. ¡постигнув уяазавного урогля, стабилизировались :: ¿п. iä ргог/льтате к коичу спита кеаву значениями показателей лодгтстегшю-качестезаиого состааа мккуобноа ког.рограьмп яого-езг Я и U групп образовался разгивегзбд. '>).

Члбчтг 4

Показателе содержания отдельный г.редстасителеа микрофлори Фекалий nopocav а конае ояыта (imposnuit тел, юз в tr)

еид» группы поросят мнкрооргашпноа -------------------------

I

Я

Продолкение таблицы 4

1У

БиФидобактсрШ! 9. об+0. 19 нолочкокнслыа бактерии 0. 4 о* о. г\

Конечные палочки '7. E0¿a i г

Энтерококки т.3tiO.15 Дрожхеповобпыг грксы рода ^andida

е. Ч7*о, зо<1) Т. 6¡¿o. Ш1) 7.09+0. 11111

г, ев to. it (£i

7. 92+0. 12 (2)

6. tojo, sí (г)

9. 13+0. IT (2) 7,75+0.19 t2»

ч. то+г, гтta> ч. ю+г. ют

Данные таблицы 4 свидетельствуют о той, что г поросят Пии групп процента? соотношения ие*лу представителя/!!! нормальной никрофлоры Фекалии изменены по сравнению с таковыми поросят контрольно« грушш в сторону закетного снижения численности молочнокислых (на 7, б и ет. 9я > и бвфидоеактериа (на 12.ч а ез. г/л при одновременной увеличении численности эшершшк (?. О и EG*) и энтерококков (4. О и 5.5*).

Существенный интерес представляют данные о нарастании численности дрожжеподобнык Грабов рода Candida в фекалиям поросят опытных групп. В свете полученных данных о Формировании частичкой пероралыго индуцированной толерантности к антигенам зпрнна в организме поросят опытних групп нарастание численности ярожкеподобных грибов рода Candida в фекалияя иохно расценивать как перекрестную иммунологическую толерантность к родственный в антигенном отношении промышленный итанкан гри-бов-продупентов условно-патогешшн грибам рода Candida.

Ведупую роль в формировании атипичного микробного заселения днст~лышк отделов пищеварительного тракта поросят играют неха-низна. обеспечивающие локальную иммунологическую защиту слизистых о&олочек и реагирующие, е частности, выработкой.и выделе-

пиен иммуноглобулинов п составе секретов.

Результата исследований концентрации иммуноглобулинов я копроФндьтратах поросят представлен« п таблице 5.

Таблиаа 5

Уровень иммуноглобулинов классов А. С.Н в копроФильтрдтах поросят (кг/ми)

п = Ю

Классы нмиуно глобулинов I период опыта (70 дней) П период опыта (70 дней)

Группы поросят

I П П I П Ш

А й н следи -»— 0. 39010. оаз 1. 742+0. 329 0. чаз+о, 1. 749+0. 511 0.0 0. 0 0. 207+0, 0'/9 1. 140+0. 41£ 0. 432+0. 030 1. 913 + 0. 349

11- разница относительно контроля достоверна при р<0. 01 21- то з£е при Р>о. ю

31- то асе при р<0. 05

Исследование копроФильтратов показало, что у большинства поросят л и ш групп(60*> в копроФильтратах присутствуют иммуноглобулины классов л и е. инмуиоглобулшш класса н не обнаруживались. в колроФидьтратак контрольной группы иммуноглобулины не обнаруживались совсем шш присутствовали п виде следов.

В копро^ильтратах поросят п и Ш групп имнуогло6ул*н А присутствовал в виде интактиои молекулы, а иммуноглобулины в - в виде фрагментов.

Повшанио титров иммуноглобулинов А и Си копрофильтратая

- !С» -

поросят п и и групп ногло быть вызвано антигенной стимуляцией со сторона измененных ннкробкых ассоананкя либо нарушением процесса деградации этил соединении вследствие резких сдвигов с никроэколории толстой метки. в любом случае резкое Увеличение концентрации иммуноглобулинов классов А и й и копрофильтратак указывает на глубокиэ сдвиги в микроэкологии толстой кнакн поросят и иоает быть использовано и клинике в качестве показателя для виявпетт скрытая Функциональных нарушен:« деятельности толстого отдела киаечника, отражаюшш состояние иммунобиологической реактивности организма поросят на Фоне скармливания П11БС в составе кориоснесеп.

2. Определение содержания антигенноактишшк структур паприиа после его скармливания в сыворотке крови поросят В последние годы знания об основные функциях питательны:' вс-кеств корнов - пластической, энергетической - пополнились даннй-. ни об ик биологической активности. Роль кориового Фактора как регулятора биологических процессов отчётливо проявляется во вли янни на Формирование иммунного ответа организма, наполнение этой роли объясняется возможностью прсниккоаения макроиалекул и ик крупных Фрагментов через барьер желудочно-кишечного тракта взрослых илекбпнтэшик во внутренне» среду организма, что подтверждается значительный числом исследования, учитывал слабую изученность этого вопроса и его важность для понимания меваниз-нои регуляции иммунологической реактивности организм при пер»-ральнон поступлении антигенноактивньш вешестЕ в составе корковая продуктои, мы провели с эответстьувкее исследование на поросятах после однократного скармлквания ни папринг.

Динамика содержания антигенноактивных соединений паприна а сы оротках крови поросят представлена в таблице 6.

- п -

Таблица б

динамика поступления аитигевдоактиЕни;: соединений паприна в кровоток поросят, нг/нл сшюротки крови

п = 10

Ереия и животного

аэптая ---------------------------------------------------------

крови, ч 1 23 'i 5 6 7 09 10

0.5 - 129

1.0 - 127 Е0'1

2,0 - 138 108

з.о гоа юз из

6.0 216

12. о

20'1 -

106 1 м - по

793 450 - £1 а

321 '121 1Т0 267

315 220 20<1

- . £00 - 166

• Появление антигешшн структур. спешКичесни связывамюшся пе-роксидазным зсоныогатои антител к паприну а ИС>А. ьыдо обнаружено у 7 поросят из ю 17Су. «ивотшш. причем у явук поросят - через 0. 5ч. у - чере- 1ч и у двуи - через Зч после скармливания

яапрапа. Через Зч после скармливания витигец присутствовал в сшоротке крови зсен 70х поросят.

адкскнальш::.! значений концентрация антигенов достигала через Зч после сяармлиозиия СЮ* у-ивотинх). У 30/. поросят максимум концентрации антигена в крови наблюдался ъ иное время - через 1 ила гч после скармливания. Через о и 12ч после скармливания пац-рина присутствие антигена в сыворотке кропи не определялось У 30 и УО/ живота!« соответственно из числа полоактель о Реагн-роьасшк, Бол:'¡ая дисперсия яаниах не позволяет ьияяить каких-либо тен.иенц;;а изменения концентрации антигена в сыворотках кг оси поросят но времени.

- 18 -

3, оаенка Физиологического состояния организма поросят, зоотекничсской и экономической эффективности скармливания поросятам послеотьемкого возраста комбнкорноо, 20 и 50■/■ протеина соевого еротй которых заменены эприиои

Сравнительное изучение морфологических и биокиническик показателей крови ие выявило костоиериык различии Физиологического состояния организма животных контрольной и опытная групп, исключение составил показатель концентрации обшего белка а сыворотке крови поросят Ш группы, пмевиия более низкие значения. Ннзкпп урогэнь белкового азота о сыворотках крови поросят» получавши« комбикорм с полной заменой соевого ¡¡¡Рота эпринок,свидстельстау-ет, по нашему пнеикю. о недостаточном уровне белкового питания это« группы животных, что согласуется с данными пустовой т.Е (1989).

Данные об интенсивности роста свиней о I опыте в расчете на ,одну голову приведены о таблиае 7,

Таблпаа 7

Интенсивность роста поросят по результатам I опыта ( е расчёте' на одну гояопу )

Групгш поросят

Показатели ---------------------------------------*

I период опыта <Т0 дней) Количество животных, гол. 9 9 9

"ивак пасса, кг:

в начале периода го. ¡;0. 1 21.0*0.1 19. г+0. С

г кони? периода 66.242.3 ьг. 1 + 1.0 б!>. 0

Продолжение таблицы 7

1 г з 4

40. 112. 2 41. 1+г, о зе. 3+3. 1

340+19

Абсолютный прирост

насси, кг Среднесуточиий прирост

иассн,Г 650140 560+32

П период опита 170 дней) Количество животнык.гоа 9 9

Живая насса. кг: в начале периода о конце периода Абсолютный ПРИРОСТ

массы, кг среднесуточнна прирост

иассн, г 911+20

В целой за опит

абс0люти1л1 прирост

насси. кг 109.9+1.3 104,241.2 среднесуточный прирост

насси. г 765*12

66,2+2,3 62.1 + 1.6 58. 1 + 1. в

130.0+2,1 125.2 + 2.4 96.5 + 2.0

63.611,7 63.1+2.0 36.4+2.7

901+32 Й4й+16

76. 8+2. 5

744+га Мй+20

Отмечена прямая корреляция между показателями интенсивности роста жиеотниз и эффективностью использования питательных веществ комбикормошг>о. 9»,

Итак, на основании анализа динамики изменения аив^л массы и показателей оЧвктиьности использовании питательных оашбсгн и энергии коиеикошои поросятами трок груди нохйо сделать ииьод о том, что йключеме ц состав комбикормов 20* опита по сцрому

протеину сопровождается относительным снижением живой массы и увеличением раскола комбикормов на получение единицы прироста г поросят послеотьемного возраста в первые то дней периода выращивания и откорма. Однако ко времени завершения откорма свиней по достижении ими живой массы 130кг разница в показателях интенсивности прироста и эффективности использования комбикормов, содержащих разные виды белковых добавок(эприн или соевый шрот) , становится статистически недостоверной, поэтому по конечный результатам вырашиваиия и откориа свиней до живой массы 130 кг можпо признать целесообразным скармливание комбикормов с заменой части соевого трота энрином в количестве гок от уровня сырого протеина. Увеличение доли введения эприна в конбикорма для поросят до 50К от потребности животных в сыром протеине является нецелесообразным с зоотехнической точки зрения, т. к. снгкает интенсивность вырашивания и откорма поросят до требуемой кондиционной массы и способствует большому перерасходу корнов на получение единицы прироста, это невыгодно с экономической точки зрения, т. к. способствует необоснованному увеличению Себестоимости продукции свиноводства.

4. Результаты лабораторных испытаний метода НФА для оценки загрязненности атмосферного аоэдука белком БВ2 В опыте изучали специфичность к ак-лшаозть пероксшшзиого кокьюгата антител а огл.тае1!;:и нэсколысик тияоз гомологичны;; препаратов антигенов из па»?ина и этчша. Кстптская дрожкевзя биомасса была получана с использованием разнкк ытлннов гри-бов-продунентов: • Candida uaitosa, ЬСВ-699; Candida tropicalis, ВСБ-651; Candida Utliis, всъ-7ГГ (рдэние партии паг.рина производства Кстовского опытно-экспериментального завода по произ-во стоу ГШ), Candida crusae, BCS-9E8 lonvim производства Пои-кирского биокинического комбината).

Таблица 8

Активность лероксидазннн коньогатов антител к белку лаприна й ифа с голологичными аитигешшми препаратами из разиня партий БЕЙ

кшшнадьно определимая Антигены доза антигена.

нкг белка/ил

Из яроязепоЯ биомассы ЕСБ-899: содно-еолепон экстракт белковая фракция гликопротэидная фракция Из дрожжевой биомассы ВСБ-631: белковая фракция рликопротеюшая фракция из ярокссвоа биомассы всв-777: водно-солевоа экстракт белковая фракн'тя гликопротеиднач фракция Из лрожэсевсн биомассы В&3-923: водно-солевой экстракт белковая фракция гликопротеиднач фракция

о. 05 - о, ю 0. 06 - 0. 12 0. 10 - 0. 15

О. 07 - 0, 12 О. 11 - С. 17

О. 01 - О. 07 0,0» - 0. 08 0. ог - 0. 22

0. 01 - О. 03 0.07 - 0. 16 0. 30 - 0. 35

Результаты, представленные п таблице в, свидетельствуют о больной антигенной идентичности сравниваемых итаммоа дродлепо-

ДОбНШС ГРИбОВ.

Сопоставление данных, полученных при анализе проз воздуха,

содержали^' специфический белок в начальной концентрации 0, 05 мг з

а расчете на 1п . трема методами показало, что и.чнуиохмиические

метод«(РИГА и ПФА) имели значительно более высокую чувствительность (0.005 - o.oi и о.ооооа - о. oooo'i мг/м'соответственно). что в сочетании с их специфичностью делает иг. применение для оценки загрязненности окружающей среди белком ВВК Солее пред-поччителышм, чем метода Лоури (общепринятый способ контроля внешне« среды иа суммарный белок; предел чувствительности -С. 01МГ белка в т*».

Метод ИФЛ уступал кетоду РНГЛ по чувствительности, однако показывал высокие специфичность и воспроизводимость результатов анализов, поэтому можно рекомендовать использование этого метода для оценки загрязненности среды рабочих помещении, складов паприна, где предполагается более высокий уровень содержания белка БВК в атмосфере,

выводы •

ЬЭприн. используюыийся в качестве белковой добавки для балансирования белкового и аминокислотного состава комбикормов в дозах 20 и 50'-( по сырому протеину, вызывает изменение состояния иммунобиологической реактивности организма поросят, карак-теризуюгаееся Формированием иммунологической толерантности к

этому'продукту,

2. Формирование пероральной иммунологической толерантности к зприну. включенноцу в состав корносмееей для поросят послеотьен-lioг'о возраста в количествах ЕО и 50/ по сырому протеину. сопро-воалается появлением перекрестной иммунологической толерантности к гоастпеинкм промышленному штамму продуцента условно-пато-reintvi грибам рода candida. ,

•«. скзишквэиле эирнна в количествах, обеслечивайзик 20 и 00'.'. cwore протеина рациона. вызывает сиидекие osuca нопояиэн-юимлгм» рсзпстг-гтпости »етчрооиопсиоэа толггогс отдг.ла кисечкмка itct^oc.ч г- сом>&б«кдда-?ес« повншеиием урорлч. mcckpsuuh ишуно -í Д".Г,ГЯШ1-Л« twwcvs A h С " K0i!PS'i:r'bTPHias:.

4. Увеличение уровня иммуноглобулинов классов а и g в копро-Фильтратан поросят на Фона скарнлиэанш 20 и зох эприна по сы~ рону протеину рациона не сопровождается изменеииен уровня циркулируют« а кроил иммуноглобулинов.

5. в сывороткан крови поросят после однократного скаршиша-ния паприна в количестве от массы тела появляются вещества, специфически вичвлчемие антителами к указанному продукту в ифа.

6. Скармливание эприна взамен 20 и 50и сырого протеина соевого шрота раяиона поросятам послеотьбнного возраста снижает эффективность использования питательны* веаеств и энергии комбикормов а показатели продуктами»сти животных в течение первый то дней выращивания и откорма, что свидетельствует о существовании адаптационного периода в органиэне поросят к данному виду белковой добавки.

7. Эприч в количестве 2ох от уровня сырого протеина рациона поросят "i-6-иесячного возраста обладает высокой протеиновой и энергетической питательность», сопоставимой с таковыми соевого крота,

а. Разработанная метод ИФА IEL1SA) может бить использован для опенки и коитром загрязненности с-кру»а»шего воздуха белком БЕК.

ЬРАК'ГЙЧЙСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1.Регламентацию использования эприна в качестве белковой добавки в конбнкорма для поросят раннего периода виражи a ami я и откорна проводить с учетом дашшх о состоянии никрооиоиеноза толстого отдела к»:шчника. являшикся косвенным показателен состояния иннуноъиологическои реактивности организма поросят.

2. ь качестве критерия. • Хйрактьрцэук-шего состояние .ихроеио-ценоэа аеросит на »сне скармливания эприна в составе кспбикоиши, »юнсльзоьать определение концентрации иинуиоглобу-лилов классов лиан kwipo Ильтратаа.

- гч -

з. на основании успешно проведотшк лабораторных испытания рекомендовать производственную проесрку нетопа ИФА (ELISA) для обнаружения Селка папрнна в атмосферном воздуке заводов микробиологического синтеза,

СПИСОК РАБОТi ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИЙ

1. Виноградова л. 1!., Соловьев А. И. Оценка бактериоцгноза кишечника поросят на фоне скармливании разный поз Бвк в составе рационов, //Микробиология в сельской козяпсгве: Тез. докл. И Республиканской конференции молодых ученых Молдавии, - Кишинев. -199». - с. юз.

г. Виноградова А. И. Сравнительная карактеристика нетодов оценки иммунной реактивности организма свинеП а связи с применением разный коз БВЯ в рационах. //Новые аспекты участия биологически активных веществ d регуляции метаболизма и продугтив-иости сельскохозяйственных животнык: Тез. докл. Bese, совещания. - Боровск. - 1991.- с. 120-121.

З.Виноградова а.и, Продуктивность свиней при скармливании БВК в составе конбикормов. // Информационный листок я 146-92: Нежотраслевоп территориальный нентр научно-технической инфорна-ции и пропаганды. - калуга, - 1992. - 4с,