Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Характеристика генетического разнообразия ячменя по устойчивости к возбудителям пятнистостей листьев и создание исходного материала для селекции

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Характеристика генетического разнообразия ячменя по устойчивости к возбудителям пятнистостей листьев и создание исходного материала для селекции"

/

АНИСИМОВА Анна Владимировна

На правах рукописи

ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ ЯЧМЕНЯ ПО УСТОЙЧИВОСТИ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ПЯТНИСТОСТЕЙ ЛИСТЬЕВ И С ОЗДАНИЕ ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ

Спемиальноегь- 06.01.11 - Защита растений

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург, Пушкин 2006

Диссертационная работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте защиты растений.

Научный руководитель: доктор биологических наук

Афанасенко Ольга Сильвестровна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Дмитриев Андрей Петрович

доктор биологических наук Лоскутов Игорь Градиславович

Ведущая организация:

Санкт-Петербургский государственный аграрный университет

Защита диссертации состоится 6 июля 2006 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.015.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте защиты растений по адресу: 196608, Санкт-Петербург, Пушкин, шоссе Подбельского, д. 3 факс (812) 470-51-10, E-mail: vizrspb@mail333.com

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского НИИ защиты растений

Автореферат разослан 5 июня 2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук

Г.А. Наседкина

¿QC6A з

¡5~ЪА 6 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы Основными факторами, лимитирующими получение высокого урожая качественного зерна ячменя, являются вредоносные болезни. В Северо-Западном регионе России основное значение среди наиболее опасных и вредоносных болезней ячменя имеют пятнистости листьев, вызываемые гемибиотрофными патогенами' сетчатая (возбудитель Pyrenophora leres Drechsler), темно-бурая (возбудитель Cochhobolus sativus Drechs. ex Dastur) пятнистости и ринхоспориоз (возбудитель Rhynchosporium secahs (Oud.) J J. Davis).

Развитие одного из видов пятнистостей выше порога вредоносности на Северо-Западе России происходит, в среднем, 5 раз за 10 лет Наиболее распространенной и вредоносной болезнью является сетчатая пятнистость Потери урожая ячменя от этого заболевания в период эпифитотий могут составлять от 20 до 40% (Обухович, Мицкевич, 1982). В последнее время отмечено нарастание вредоносности темно-бурой пятнистости листьев в посевах ярового ячменя При благоприятных условиях для развития болезни ее распространенность может достигать 100%, а развитие 50-90%, что можно было наблюдаггь в 2003 году на посевах ячменя Ленинградской области. Ринхоспориоз наиболее вредоносен при затяжной холодной весне. Последняя эпифитотия ринхоспориоза была зафиксирована на Северо-Западе РФ в 2001 году, когда развитие болезни на отдельных восприимчивых сортах достигало 80% (Иш-кова, 2002).

Наиболее экономически выгодным и экологически безопасным способом борьбы с этими патогенами являегся возделывание устойчивых сортов. Для успешной селекции ячменя на устойчивость к листовым пятнисгостям необходимы генетически охарактеризованные доноры групповой устойчивости. К настоящему времени наиболее полно изучена генетика устойчивости ячменя к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу.

Несмотря на то, что поиски эффективных источников устойчивости ячменя к возбудителям гемибиотрофных патогенов проводятся уже достаточно длительный период в нашей стране и за рубежом, генетическая коллекция доноров устойчивости к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу представлена небольшим количеством высокоэффективных генов устойчивости и только одним, ценным для селекции донором длительной устойчивости к возбудителю темно-бурой пятнистости. Сведения о донорах групповой устойчивости ячменя к перечисленным болезням в литературе отсутствуют.

Одной из стратегий создания сортов ячменя с длительной устойчивостью к болезням является объединение в одном генотипе нескольких генов устойчивости от используемого донора(ов) Для определения числа генов устойчивости к болезни, у создаваемых, с использованием нескольких генов устойчивости селекционных линий, необходимо проведение дополнительных скрещиваний, получения потомства F2 и его анализ. Ускорить данный процесс и сэкономить время и трудовые ресурсы возможно при использовании молекулярных маркеров определенных генов устойчивости. По объективным причинам, в настоящее время селекция с использованием молекулярных маркеров генов устойчивости пока не получила широкого применения. В работах Н.В. Мироненко (2005) и О А. Филатовой (2005) на основании выявленных закономерностей межорганизменной генетики патосистем ячмень - Р teres и ячмень - С sativus была обоснована возможность использования мейотического потомства от скрещивания изолятов грибов с определенным генотипом вирулентности для выявления числа генов и генетического разнообразия устойчивости у источников устойчивости ячменя. В данной работе предпринята попытка практической реализации этих разработок для выявления генетического разнообразия новых доноров устойчивости ячменя к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей и числа генов устойчивости, в созданных Т.Н. Радюке-вич в ЛНИИСХ сложных гибридах ячменя

Цель и задачи исследований Целью исследования являлось создание коллекции генетически разнородного исходного материала для селекции сортов ячменя с групповой устойчивостью к возбудителям пятнистостей листьев.

Для достижения данной цели предполагалось решить следующие зад.[«ДОС. НАЦИОНАЛЫ! V

БИБЛИОТИКЛ С.-Пегербург 03 200 (киту-! \

1 Охарактеризовать устойчивость районированных сортов ячменя, а также коллекционного и селекционного материала по устойчивости к группе листовых пятнистостей на Северо-Западе России.

2. Выявить источники устойчивости ячменя к возбудителям пятнистостей листьев и образцы с групповой устойчивостью.

3 Выявить генетическое разнообразие устойчивости у новых доноров ячменя, с использованием мейотического потомства от внутривидовых скрещиваний изолятов Р teres и С sativus.

4. Провести скрещивания источников устойчивости к Р teres и С sativus между собой и выявить гомозиготные по устойчивости к обоим возбудителям линии F3

5. Определить число генов устойчивости у линий сложных гибридов ячменя, созданных в ЛНИИСХ, с использованием различных доноров устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости.

Научная новизна исследований. Охарактеризована групповая устойчивость к Р teres, С sativus и R secalis источников и доноров устойчивости к отдельным болезням из коллекции ВИЗР Выявлено четыре новых источника групповой устойчивости к сетчатой, темно-бурой пятнистостям и ринхоспориозу: к-30594, к-30597, к-29830 и 2994 Tibet White 9; семь - к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей: к-29830, к-30023, к-30597, к-29438, к-30594, к-30452 и к-30451; и два к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу - к-27737 и к-8727.

Впервые реализован способ выявления генетического разнообразия устойчивости ячменя к Р teres и С. sativus, основанный на доказанных ранее взаимодействиях генов устойчивости и авирулентности в изучаемых патосистемах по типу ген-на-ген. В результате проведенной работы обнаружено, что у образцов к-23874, к-30013 и к-30141 устойчивость детерминирована геном Rptlb, у образцов к-15812 и к-30479 - генами Rptlb и Pt5, у образца к-15811 - генами Pt5, Ptl3 и pi/4 и у образца к-19979 - Rpt2c, ptl 7 (либо pU8), ptl 1 и ptl2.

Определено, что устойчивость к темно-бурой пятнистости у образцов к-29438, к-30453, к-29636, к-30594, к-29830, к-30023, к-30597 и к-27557 детерминирована геном Res5. Выявлено, по крайней мере, два новых эффективных гена устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости, донорами которых являются образцы к-30501 и к-30452.

Впервые для определения числа генов устойчивости у селекционных линий сложных гибридов ячменя было использовано мейотическое потомство гриба Р teres Отобрано 19 линий сложных гибридов, генотип которых представлен двумя и более генами, представляющих интерес для создания сортов ячменя с длительной устойчивостью к возбудителю сетчатой пятнистости.

Практическая значимость работы.

• В качестве доноров групповой устойчивости ячменя к Р teres, С sativus и Я secalis для практической селекции в Северо-Западном регионе РФ могут быть рекомендованы образцы: к-30594, к-30597, к-29830 и 2994 Tibet White 9; к Р teres и С sativus - к-29830, к-30023, к-30597, к-29438, к-30594, к-30452 и к-30451; и к Р teres и R secalis - к-27737 и к-8727.

• Созданная коллекция генетически охарактеризованных изолятов гриба Р teres с призна- < ками редкой вирулентности к донорам эффективных генов может быть использована для выявления селекционных линий, устойчивость которых детерминирована двумя и более генами.

• Для практической селекции на длительную устойчивость рекомендуются гомозиготные ,, по устойчивости линии F3 сложных гибридов ячменя, в генотипе которых имеются два и более генов устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости, а также линии F3 с групповой устойчивостью к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостям.

Апробация работы и публикации результатов исследования Результаты работы были представлены на: координационном совете по проблемам иммунитета растений к болезням и вредителям (Санкт-Петербург, 2003); конференции аспирантов и молодых ученых на тему: "Микология и альгология - 2004" (Москва, 2004); III Всероссийской научно-практической конференции по агротехническому методу защиты растений от вредных организмов (Крас-

нодар, 2005); II Всероссийском съезде по защите растений "Фитосанитарное оздоровление экосистем" (Санкт-Петербург, 2005); конференции аспирантов и молодых ученых на тему. "Формирование конкурентоспособности молодых ученых" СЗНМЦ (Санкт-Петербург -Пушкин, 2005).

Материалы исследований опубликованы в 4 печатных работах, 1 находится в печати.

Р Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 270 страницах машино-

писного текста, из них 29 страниц приложения и состоит из введения, шести глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 39 таблицами и 4 рисунками Библиография включает 331 источник, из них 258 на иностранном языке

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ Глава 1. Биологические особенности возбудителей пятнистостей листьев и устойчивость ячменя к болезням

Приведены данные по распространенности, вредоносности, биологическим особенностям, эпидемиологии возбудителей сетчатой, темно-бурой пятнистостей и ринхоспориоза ячменя. Обобщены сведения по изменчивости популяций патогенов по признаку вирулентности и генетике устойчивости ячменя к перечисленным болезням.

Глава 2. Материалы и методы

Скрининг устойчивых образцов ячменя к Р teres и С sativus в паборатории Для поиска эффективных источников устойчивости ячменя к листовым болезням были использованы 101 образец ячменя мировой коллекции ВИР, ранее охарактеризованных как относительно устойчивые к возбудителю сетчатой пятнистости (Лукьянова и др., 1996), также 15 образцов ячменя с известными генами устойчивости к P. teres коллекции лаборатории иммунитета растений к болезням ВИЗР (Афанасенко, 1996; Филатова, 2005) и 15 источников устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости из коллекции Миннесотского Университета, любезно предоставленных нам проф. Б. Стеффенсоном

Для инокуляции растений в лабораторных условиях использовали изоляты гриба С sativus из трех мест сбора: Ленинградская и Челябинская области РФ и Финляндия. Изоляцию, клонирование и культивирование гриба проводили по методике ОС. Афанасенко (1987) на среде Чапека в модификации A.A. Бенкена и др. (1969). Тестирование образцов ячменя на устойчивость к клонам С sativus проводили, используя метод искусственной инокуляции отсеченных листьев проростков с применением бензимидазольной техники (Тырышкин, Михайлова, 1993). Инокуляцию растений осуществляли опрыскиванием конидиальной суспензией гриба С sativus с тшром спор 8000-10000 конидий/ мл. В качестве восприимчивых сортов (контроль) использовали сорта Белогорский и Пиркка. Тип реакции определяли на 3-й сутки после заражения растений по 5-ти бальной шкале. Балл заражения С sativus определяли для каждого отрезка листа, а затем как среднее значение для группы растений. Образцы с типом реакции до 2,4 баллов относили к устойчивым, более 2,6 баллов - к восприимчивым, от 2,4 до 2,6 баллов оценивали как промежуточный тип реакции.

• Оценка сортов и образцов ячменя к листовым болезням на естественном инфекционном

фоне в поле За период 2003-2005 гг. при различных погодных условиях проведена полевая оценка устойчивости к листовым болезням (сетчатая, темно-бурая пятнистости, мучнистая роса и ринхоспориоз) районированных и перспективных для районирования сортов ячменя, находящихся в системе госиспыганий на ГСУ Северо-Западной Зоны РФ, а также коллекционных образцов ВИР и ВИЗР, селекционных образцов из контрольных и селекционных питомников ЛНИИСХ "Белогорка" и производственных сортов ячменя на Тосненской опытной станции защиты растений (ТосСТаЗР) Ленинградской области. Всего за период с 2003 по 2005 гг. на естественном инфекционном фоне оценено 1245 делянок ячменя.

Оценку сортов и образцов ячменя к листовым болезням на естественном инфекционном фоне проводили в фазу молочной спелости зерна, используя такие показатели как тип реакции и развитие болезни в % (Афанасенко, 1987).

ч.'

Оценка образцов ячменя к Р teres на искусственном инфекционном фоне в поле В 2005 году на опытном поле ВИЗР была проведена оценка линий сложных гибридов ячменя (F3 и F4) на искусственном инфекционном фоне к Р teres. Эти линии были получены в 2000-2001 гг в ЛНИИСХ Белогорка Т Н Радюкевич, с использованием шести доноров известных генов устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости ячменя из коллекции ВИЗР- CI 7584 (Rpt3d, Rpt2c И, Pt/5), Diamond (Ptó, pt22, pt23), Harbin (Pt2), Tifang (RPtla, Pt26, X, x), Canadian Lake Shore (Pt2, Pt3) и Ogalitsu (генотип не установлен)

Инокуляцию растений в фазе выхода в трубку проводили опрыскиванием суспензией из смеси изолятов Р teres из Ленинградской обл (концентрация 50000-70000 конидий/мл) В качестве восприимчивого контроля был использован сорт Пиркка Для создания влажной камеры инокулированные растения укрывали на 24 часа полиэтиленовой пленкой. Тип реакции растений (в баллах) учитывали через 7-10 дней после инокуляции по шкале О С Афанасенко (1977). Развитие болезни (%) рассчитывали по формуле АЕ Чумакова и ТИ. Захаровой (1990).

Генетический анализ устойчивости ячменя к сетчатой и темно-бурой пятиистостям С целью объединения в одном генотипе устойчивости к двум патогенам были проведены скрещивания источников устойчивости ячменя к сетчатой (к-19979 и к-23874) и к темно-бурой пятнистости (сорт Могех). Гибридизацию проводили по общепринятой методике на опытном поле ВИЗР. Потомство каждого растения F2 представляло семью F3

Для выявления линий F3 гомозиготных по генам устойчивости к сетчатой и темно-бурой пятнистостям, использовали метод, позволяющий анализировать расщепление по устойчивости в гибридных популяциях одновременно к нескольким изолятам патогенов (Афанасенко, 1996).

Для генетического анализа использовали два штамма гриба Р teres (8-4, 181-6) и два - С sativus (ND90Pr и Gamba 30). Моноаскоспоровый изолят 8-4 был получен Н В. Мироненко в результате скрещивания изолятов 181-6 (Россия, Ленинградская обл ) и 8ах (Россия, Приморье) Изоляты ND90Pr и Gamba 30, относящиеся к патотипам 2 и 1 были получены от проф Б Стеффенсона из США.

При анализе расщепления по устойчивости линий F3 учитывали реакцию одного и того же растения на инокуляцию штаммами Р teres и С sativus.

Выявление генетического разнообразия устойчивости ячменя к сетчатой и темно-бурой пятнистостям с использованием мейотического потомства грибов Р teres и С sativm На основании выявленных ранее закономерностей межорганизменной генегики в патосистемах ячмень - Р teres и ячмень - С sativus была обоснована возможность использования аскоспо-ровых популяций патогенов для выявления числа и тождественности генов устойчивости у ячменя (Мироненко, 2005). Для практической реализации данного метода нами проведены два этапа исследований:

1 Анализ наследования вирулентности к 20 образцам с известными генами устойчивости к Р teres и к двум донорам устойчивости к С sativus, с последующим анализом тождественности i енов вирулентности и комплементарных им генов устойчивости Полученные результаты сравнивали с данными гибридологического анализа устойчивости, проведенного ранее I (Афанасенко, 1996; Steffenson et al, 1999).

2 Анализ тождественности генов устойчивости у 7 новых источников устойчивости к Р

teres и 10 - к С sativus между собой и с донорами известных генов устойчивости со сходной 1 экспрессией

Выявление генетического разнообразия у новых источников устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости Для выявления генетического разнообразия и числа генов устойчивости у образцов с известными генами устойчивости (к-8695, С1 5791, С1 9825, CI 9819, к-29192, к-20921, к-20019, к-21914, к-25282, СГ 739, Psaknon, CI 5401, CI 5809, Tifang, к-21849, к-8755, к-8721, Harbin, к-6904 и CI 4922) и у семи новых источников (к-15811, к-15812, к-19979, к-23874, к-30013, к-30141 и к-30479) была изучена вирулентность 70 аскоспоровых изолятов Р teres, полученных в лаборатории иммунитета растений к болезням ВИЗР

Н В Мироненко и др., в 2002 году в результате скрещивания родительских изолятов Н-22 (Приморье, Россия) и 92-179/8 (Канада) В качестве восприимчивого сорта (контроль) использовали сорт Белогорский Эксперимент был выполнен в двух, а иногда в трех повторностях Соответствие фактического расщепления по признаку вирулентности теоретически ожидаемому в половом потомстве гаплоидного гриба определяли методом

Для определения идентичности генов устойчивости у новых источников устойчивости с известными донорами, было проведено сравнение числа авирулентных и вирулентных изолятов к сравниваемой паре образцов Анализировали соотношение четырех классов фенотипов: а/а - авирулентность к обоим образцам, а/в - авирулентность к первому и вирулентность ко второму образцу, в/а вирулентность к первому и авирулентность ко второму образцу и в/в -вирулентность к обоим образцам. Теоретически ожидаемые соотношения фенотипических классов (а/а, а/в, в/а и в/в) при наличии тождественных генов авирулентносги к двум определенным сортам было рассчитано на основании числа генов авирулентносги у родительских изолятов по методике Н.В. Мироненко (2005). Полученные результаты о количестве комплементарных генов авирулентносги и устойчивости в патосистеме сравнивали с данными по гибридологическому анализу устойчивости, проведенному ранее (Афанасенко, Кушниренко, 1989; Афанасенко, 1996; Макарова, 1996).

Выявление генетического разнообразия у новых источников устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости Для выявления числа и разнообразия генов устойчивости у новых источников устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости были использованы 120 аскоспоровых изолятов от скрещивания двух изолятов С sativus ND90Pr и Gamba 30 (патслгип 2 и патопгип 1), различающихся по вирулентности к образцам Bowman и ND 5883, любезно предоставленных д.б.н. Н.В Мироненко.

В работе были использованы 10 новых источников устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости (к-29438, к-30453, к-29636, к-30594, к-29830, к-30023, к-30597, к-27557, к-30401 и к-30452), выделенных нами в лабораторном скрининге мировой коллекции ВИР и два американских сорта (Bowman и NDB 112) из коллекции Б. Стеффенсона (США). В качестве восприимчивого сорта (контроль) использовали сорт Белогорский и ND 5883.

Эксперимент был выполнен в двух, а иногда трех повторностях.

Генетическое разнообразие устойчивости у новых источников устанавливали методом, описанным выше при решении аналогичной задачи в рамках патосистемы ячмень - Р teres.

Выявление числа генов устойчивости к возбудитечю сетчатой пятнистости у сложных гибридов ячменя с использованием мейотического потомства патогена Материалом исследования служили 271 линия F3 и F4 сложных гибридов ячменя, созданных в ЛНИИСХ с двумя и более пенами устойчивости, переданных от доноров устойчивости к Р teres Для выявления числа генов устойчивости к Р teres у данных линий использовали два подхода. 1. Создание коллекции маркированных по генам авирулентносги изолятов Р teres, с последующим их использованием для выявления числа комплементарных им генов устойчивости и 2. Выявления характера наследования вирулентности к линиям сложных гибридов в аскоспоровой популяции Р teres, полученной от скрещивания изолятов Н-22 и 92-179/8.

На первом этапе работы были отобраны линии устойчивые к родительским изолятам гриба Р teres. В дальнейшем, на основании анализа данных расщепления были выявлены изоля-ты гриба с одним, двумя и более чем двумя генами авирулентносги по отношению к определенным донорам устойчивости Эти генетически охарактеризованные (тестерные) изоляты были использованы нами для выявления числа генов устойчивости и генетического разнообразия в сложных гибридах и новых источниках устойчивости Для этого мы провели инокуляцию устойчивых линий аскоспоровыми изолятами, имеющими комплементарные гены авирулентносги к генам устойчивости образцов, использованных в скрещивании Другим способом решения этой проблемы являлось выявление характера расщепления по вирулентности к линиям сложных гибридов и к их родителям в мейотическом потомстве гриба Р teres, что позволило отобрать линии, у которых в родословной предполагается наличие двух и более генов устойчивости.

Глава 3. Устойчивость ячменя к листовым пятнистостям

3.1. Оценка устойчивости районированных и перспективных для районирования сортов ячменя к листовым пятнистостям на Государственных сортоучастках (ГСУ) в

Северо-Западном регионе РФ

В течение трех лет (2003-2005 п ) в Северо-Западном регионе РФ зафиксировано две эпифитотии пятнистостей ячменя' в 2003 i оду - темно-бурой, в 2005 i оду - сетчатой. Развитие темно-бурой пятнистости на сортах-стандартах Криничный и Суздалец, составляло 45% и 52%, сетчатой пятнистости - 15% и 20%, соответственно. На сортах- Селлар, Сокол, Hyp, Аннабель, Сапют-1 и Партнер развитие темно-бурой пятнистости достигало 90%. Сорта Сокол, Максим, Селлар, Тандем и Инари были поражены сетчатой пятнистостью на 50-65%. По результатам двух- и трехлетних полевых оценок районированных и перспективных для районирования сортов ячменя в Северо-Западном регионе РФ (Ленинградская и Псковская области) не выявлено ни одного устойчивого к группе листовых пятнистостей сорта. Однако в эпифитотийные годы выделен сорт Хлыновский, развитие пятнистостей на котором не превышало 22%

3.2. Выявление коллекционных образцов ячменя с групповой ус гойчивостью

к болезням

В результате лабораторных и полевых оценок выявлено четыре новых источника с групповой устойчивостью к сетчатой, темно-бурой пятнистостям и ринхоспориозу: к-30594, к-30597, к-29830 и 2994 Tibet White 9, семь - к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей: к-29830, к-30023, к-30597, к-29438, к-30594, к-30452 и к-30451; и два к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу - к-27737 и к-8727.

Выявленные в лабораторном скрининге новые источники устойчивости ячменя к возбудителям пятнистостей листьев подтвердили свою высокую устойчивость к паюгенам в поле и могут быть рекомендованы для селекции в условиях Северо-Запада Нечерноземной зоны РФ.

Глава 4. Выявление генетического разнообразия устойчивости ячменя к сетчатой и

темно-бурой пятнистостям с использованием мейотического потомства грибов

P. teres и С. sativus

Взаимоотношения в изучаемых патосистемах Р teres - Н vulgare и С sativus - Н vulgare по типу ген-на-ген (Афанасенко и др, 2002; Павлюшин и др, 2004, Мироненко, 2005; Филатова, 2005) явились предпосылкой выполнения данного исследования но выявлению генетического разнообразия устойчивости у новых источников ячменя с использованием мейотического потомства возбудителей сетчатой и темно-бурой пятнистостей.

Изучено расщепление по вирулентности в мейотическом потомстве Р teres и С sativus к сортам и образцам ячменя с известными генами устойчивости и к новым источникам устойчивости Тождественность или различия генетических факторов устойчивости устанавливали путем сравнения расщепления по вирулентности в аскоспоровой популяции к каждой паре сравниваемых сортов. На первом этапе исследований предполагалось сравнить полученные данные с результатами гибридологического анализа устойчивости к возбудителю сетчатой пятнист ости, проведенного ранее в лаборатории иммунитета растений к болезням ВИЗР (Афанасенко, 1996; Макарова, 1996).

4.1 Характер наследования вирулентности гриба P. teres к сортам ячменя с известными генами устойчивости и новым источникам

В соответствии с поставленной задачей мы изучили наследование признака вирулентности у гриба Р teres f teres к сортам и образцам ячменя с известными генами устойчивости и к семи новым источникам устойчивости Поскольку анализ тождественности генов устойчивости у растений с использованием мейотического потомства гриба возможно было провести только в рамках одного эксперимента, мы повторили изучение наследования вирулентности

к 9 образцам ячменя (к-21849, CI 9825, CI 5401, к-8755, С! 9819, CI 4922, Harbin, к-8721 и к-29192), изученных ранее О.А Филатовой (2005) и Н.В. Мироненко (2005)

Результаты расщепления к некоторым из этих образцов и новым источникам устойчивости приведены в таблице 4.1. В случае, когда один из родительских изолятов был вирулентен к источнику устойчивости, а другой авирулентен, расщепление I 1, свидетельствовало о наличие одного гена авирулентности у авирулентного изолята (к образцам к-20921, CI 739, к-25282, к-6904, Psaknon и Harbin), 3:1 - о двух генах (к образцам к-21914, к-8721 и к-8755), 71 и 15:1 - о трех или четырех генах (к образцу к-30013). Если в аскоспоровой популяции выще-плялись вирулентные изоляты, а оба родительских изолята были авирулентны к источнику устойчивости мы предполагали у них различный генетический контроль авирулентности (к образцам к-8695, к-20019, CI 5809, CI 5791, CI 9825, CI 9819, CI4922, CI 5401. Tifang, к-29192, к-21849, к-15811, к-15812, к-23874, к-19979, к-30141 и к-30479) В некоторых случаях объединение растений с промежуточным типом реакции с классом устойчивых растений влияло на выбор гипотезы о характере наследования признака. Например, расщепление в потомстве от скрещивания вирулентного (Н-22) и авирулентного (92-179/8) к образцу CI 739 изолятов составляло 36А 25В, что характерно для теоретически ожидаемого отношения 1:1 (х2 = 1,98) или моногенного наследования авирулентности у изолята 92-179/8. При объединении класса устойчивых растений с классом растений, имеющих промежуточные типы реакций на инокуляцию патогеном, фактическое расщепление 45 авирулентных и 25 вирулентных изолятов соответствовало теоретически ожидаемому отношению 9 7 (х2 = 1,84) или наличию двух рецессивных генов авирулентности и двух рецессивных генов-супрессоров В подобных случаях мы привели обе возможные гипотезы наследования вирулентности к образцам к-25282, к-21914, к-6904 и к-30141

Полученные данные о характере наследования вирулентности к 27 образцам ячменя послужили основанием для определения тождественности генов авирулентности и, соответственно, комплементарных им генов устойчивости у новьгх источников устойчивости по сравнению с донорами известных генов.

Таблица 4

Расщепление по вирулентности в аскоспоровом потомстве гриба Р teres ("F" комбинация) к различным образцам ячменя Число изолятов

Образцы ячменя -

Фактическое расщепление

Теоретически ожидаемое _расщепление_

Уровень значимое™

авирулент- вирулент- авирулент- вирулент-

ных ных ных ных

CI 9825

(к-25275) 61 5 7 15 1 1 1,46 0,20 0,10-0,25 0,50-0,75

к-8755 49 18 3 1 0,12 0,50-0,75

к-30013 64 7 7 15 1 1 0,45 1,58 0,50-0,75 0,10-0,20

к-30141 46 7 7 1 0,02 0,90

к-30479 48 23 3 1 2,07 0,10-0,20

4.2. Анализ тождественности генов авирулентности у изолятов гриба P. teres к различным образцам ячменя

Ранее в лаборатории иммунитета растений к болезням ВИЗР был проведен анализ расщеплений в потомстве от диаллельных скрещиваний источников устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости. Это исследование позволило выявить генетическое разнообразие устойчивости у образцов к-8695, CI 5791, CI 9825, CI 9819, к-29192, к-20921, к-20019, к-21914, к-25282, CI 739, Psaknon, CI 5401, CI 5809, Tifang, к-21849, к-8755, к-8721, Harbin, к-

IU

6904 и CI 4922 (Макарова, 1996; Афанасеико, 1996) Данные сведения были использованы при изучении возможности определения тождественности генов устойчивости по результатам расщепления в мейотическом потомстве гриба (табл 4 2 1). Результаты исследования подтвердили наличие общих генов устойчивости у образцов CI 9825, CI 9819, С! 5791 и CI 5401, выявленных ОС Афанасенко (1996). Таким образом, мы можем предположить, что общим геном у этих образцов является ген - Rptlb, ранее описанный у образца CI 9819 в литературе (Bockelman et al, 1977; Афанасенко, 1996; Афанасенко и др, 1999)

Таблица 4 2 1 Анализ тождественности генов вирулентности у гриба Р teres

и комплементарных им генов устойчивости у образцов ячменя _

Фактическое и теоретическое распределение феноти-Сравниваемые г пических классов по реак-

I СНОТИПЫ . п

образцы устойчивости 111111 сРавниваемых образцов Примечание

ячменя у ячменя к аскоспоровым

изолятам (^"комбинация)

а/а а/в в/а в/в f

С19825 R1R2R3R4 48 7 2 2 Ген А1 комплементарен гену

CI5401 R1R5 23 7 I 1 3,47 в обоих сортах

CI9825 R1R2R3R4 32 8 2 0 -"-

к-30141 R1R5 23 7 1 1 1,97

CI4922 R1R2 26 1 14 0 Нет общих генов устойчивости

CI 5791 R3R4R5R6 45 3 15 1 5,82 в обоих сортах

к-8721 R1R2 37 1 10 4 ГенА1 комплементарен гену

к-15811 R1R3R4R5 23 1 7 1 3,88 Rl в обоих сортах

к-23874 R1R2R3R4 37 7 0 0

к-30141 R1R5 23 7 1 1 4,36

к-19979 R1R2R3R4 36 6 1 0 Нет общих генов устойчивости

к-30141 R5R6 45 15 3 1 3,94 в обоих сортах

к-30013 R1R2R3R4 32 5 1 1 Ген А1 комплементарен гену

к-30141 R1R5 23 7 1 1 2,10 Rl в обоих сортах

Обозначения R- ген устойчивости, А- ген авирулентности Одинаковые обозначения генов не означают их тождественности и могут рассматриваться только в пределах одной пары сравниваемых образцов ячменя

Жирным шрифтом выделены теоретически ожидаемые значения. Р > 0,95 при х2 < 7,82.

Соотношение фенотипических классов а/а : а/в : в/а : в/в к образцам CI 9819 и CI 739 34:16:0 6 не противоречит модели расщепления 8:7:0-1 (х2 ~ 6,03), при тетрагенном и моногенном наследовании авирулентности к каждому образцу соответственно. Соответствующая данному расщеплению генетическая модель: четыре не сцепленных гена авирулентности, один из них общий к обоим образцам и, соответственно, комплементарные им четыре гена устойчивости, из которых один ген тоже общий. Мы предполагаем, что это ген ptl идентифицированный и обозначенный у этих образцов О.С. Афанасенко и др. (1999). Одновременно у образца CI 9819 вьшвлен ген общий с сортом Psaknon, вероятно ген Rpt2c (Bockelman et al, 1977; Афанасенко, 1996; Афанасенко и др, 1999), и с образцом к-8755. Наши данные соответствуют результатам, полученным ранее при гибридологическом анализе устойчивости.

Наличие одного общего гена авирулентности показано при сравнении расщепления по вирулентности в аскоспоровом потомстве гриба Р teres к образцам CI 4922 и к-25282. Модель наследования 2:1:0:1 (х2 = 2,26) соответствует трем генам авирулентности, один из которых общий к обоим образцам и комплементарных им генов устойчивости, из которых один также общий, что было также показано при гибридологическом анализе устойчивости. Следовательно, мы можем предполагать, что общим геном устойчивости у этой пары образцов

является ген Pt2 (или Pt3), ранее идентифицированный у этих образцов американскими исследователями С Y Mode и C.W. Schaller (1958)

Также как и в гибридологическом анализе не выявлено идентичных генов устойчивости у образца CI 4922 с образцами CI 5791 ик-21849 Модель наследования 45:3 15 1 характеризует наличие шести независимых генов авирулентности к каждой паре сравниваемых образцов Отсутствие общих генов устойчивости показано у образцов CI 5809 и к-29192 с образцами к-25282 и Psaknon Предложенные модели к парам сравниваемых образцов, 3 31 1 и 7.7Т Т, соответствуют в первом случае трем, во втором - четырем независимым генам авирулентности и комплементарных им трем (четырем) генам устойчивости. Данное предположение соответствует выводам, полученным при гибридологическом анализе устойчивости (Афанасенко, 1996).

Несмотря на то, что в большинстве случаев наши данные совпали с результатами гибридологического анализа устойчивости растений (Афанасенко, 19%; Макарова, 1996), мы выявили случаи несовпадений Например, у образцов CI 9825 и CI 5809 по данным О С. Афанасенко (1996) было показано отсутствие общих генов устойчивости, тогда как в нашем случае был выявлен общий ген авирулентности к обоим образцам (модель 23:71:1, х2 = 0,90) Или другой пример, где по результатам нашего анализа не бьшо обнаружено общих генов устойчивости у образцов CI 4929 (Harbin) и CI 4922, отмеченного ранее в литературе (Mode, Schaller, 1958; Афанасенко, 1996). Такие несовпадения могут быть обусловлены либо кластеризацией генов авирулентности, либо различными генотипами изолятов, использованных в гибридологическом анализе устойчивости и вирулентности.

Основываясь на выявленных закономерностях, нами проведен анализ генетического разнообразия устойчивости у новых источников. Основная цель состояла в выявлении тождественности генов устойчивости у новых источников, по сравнению с образцами, устойчивость которых детерминирована эффективными генами со сходной экспрессией (табл 4 2 2). К таким образцам относятся: CI 9819 (гены Rptlb, Rpt2c, ptI7, ptl8), CI 9825 (гены Rptlb, Pt5, PtlI,ptI2), CI 5791 (гены Rptlb, Ptl3,ptl4), CI 5401 (гены Rptlb, X,x) и к-8721 (ген PtS).

Сравнительный анализ расщепления по фенотипам вирулентности к образцам с известными генами устойчивости и новым источникам позволил идентифицировать общий ген устойчивости у образцов П 9825, CI 9819, CI 5401 и CI 5791 с образцами к-15812, к-23874, к-30013, к-30141 и к-30479 Согласно результатам, установленным ранее гибридологическим анализом (Афанасенко, 1996) мы можем предположить, что общим геном устойчивости у этих образцов является 1ен RPtlb. Кроме гена RPtlb у таких образцов как к-15812 и к-30479 выявлен второй ген устойчивости общий с геном образца к-8721. По нашему предположению это ген Pt5, идентифицированный и обозначенный у этого образца О.С. Афанасенко и И.Ю Кушниренко (1989) Поскольку ранее было показано, что устойчивость известных доноров, кроме к-8721, детерминирована тремя и более генами, то у других пар образцов, к которым показано наличие двух общих генов авирулентности и соответственно комплементарных им двух генов устойчивости, вторым геном может быть любой из известных.

Показано наличие двух обших генов устойчивости у образца к-15811 с генами образцов CI 9825 и CI 5791 (модель расщепления 57.3:3:1), один из которых предположительно ген RPtlb. В то же время, не выявлено идентичных генов устойчивости у образца к-15811 с образцами CI 9819 и CI 5401, несущих общий ген RPtlb. Следовательно, можно предположить, что в детерминации устойчивости образца к-15811 участвуют другие гены, например ген Pt5, обнаруженный при попарном сравнении фенотипов вирулентности в аскоспоровой популяции триба к парам образцов к-15811 и С1 9825 (модель 57:3:3:1, f = 0,85) и к-15811 и к-8721 (модель 23:1'71, f = 3,88) Поскольку анализ наследования вирулентности (раздел 4.1.1) в мейотическом потомстве гриба показал наличие четырех независимых генов авирулентности к образцу к-15811 (модель 15:1, х2 = 0,91) и, соответственно, комплементарных им четырех генов устойчивости у данного образца, мы можем предположить, что общими генами у образцов к-15811 и CI5791 являются гены Ptl3 и ptl4.

Наличие общих генов устойчивости обнаружено у образца к-19979 с образцами С1 9825 и С1 9819, и в то же время, отсутствие их с образцами С1 5401 и С1 5791, в генотипе которых отмечен общий ген ЯР^Ь и к-8721, несущим ген Р/5. Таким образом, с учетом выявленного теграгенного характера наследования вирулентности к образцу к-19979 (модель 15:1, х2 = 2,71) можно предположить, что устойчивость образца к-19979 контролируют два гена из комбинации Яр12с,р117и р>]8, идентичных генам образца С1 9819 и два гена. Р(11 и рИ2, общих с генами С1 9825.

Таблица4.2 2 Новые источники устойчивости ячменя с тождественными генами устойчивости к Р teres

Новые источники устойчивости ячменя

Предполагаемые гены устойчивости

Наличие тождественных генов у образцов

к-15811 Pt5 CI 9825 и к-8721

Ptl3 ptl4 CI 5791

к-15812 RPtlb CI 9825, CI 9819, CI 5809, CI 5401

Pt5 к-8721

к-23874 RPtlb CI 9825, CI 9819, CI 5809, CI 5401, CI 5791

к-19979 Rpt2c, ptl 7 (либо ptl8) CI 9819

Ptl 1, ptl2 CI 9825

к-30013 RPtlb CI 9825, CI 9819, CI 5401, CI 5791

к-30141 RPtlb CI 9825, CI 9819, CI 5809, CI 5791

к-30479 RPtlb, Pt5 CI 9825, CI 9819, к-8721, CI 5401, CI 5791

4.3. Характер наследования вирулентности гриба С. sativus к различным сортам ячменя

Следуя поставленной задаче, мы изучили наследование признака вирулентности гриба С sativus к двум полученным из США устойчивым сортам ячменя, Bowman и NDB 112 и 10 образцам коллекции ВИР, ранее отобранных нами как устойчивые к возбудителю темно-бурой пятнисюсти ячменя Эти данные частично представлены в таблице 4.3.

Аналогично, как и в случае с Р teres, если один из родительских изолятов был вирулентен к источнику устойчивости, а другой авирулентен, расщепление 1:1, свидетельствовало о наличие одного гена авируленгности у авирулентного изолята (к образцам к-30501, к-30452 и сорту Bowman), 3 1 - о двух генах (к образцам к-29438, к-30453 и к-27557). Если в аскоспоро-вой популяции вьицеплялись вирулентные изоляты, а оба родительских изолята были авиру-лентны к источнику устойчивости мы предполагали у них различный генетический контроль авирулснтности (к образцам к-29636, к-30594, к-29830, к-30023 и к-30597). В некоторых случаях объединение растений с промежуточным типом реакции с классом устойчивых растений также влияло на выбор гипотезы о характере наследования признака Например, расщепление в аскосиоровой популяции от скрещивания вирулентного (URY98-Gamba 30) и авирулентного (ND90PR) к образцу к-30453 изолятов составляло 61А :36В, соответствующее теоретически ожидаемому отношению 5:3 (х2 = 0,01), что можно объяснить наличием двух доминаю ных генов авирулеитности и одного доминантного гена-супрессора При объединении класса авирулентных изолятов с классом изолятов, вызывающих промежуточные типы реакций растений, соотношение 75 авирулентных и 36 вирулентных изолятов соответствует модели 31 (х2 = 3,27) и свидетельствует о дигенном наследовании авирулентности у изолята ND90PR. В подобных случаях мы также привели обе возможные гипотезы наследования вирулентности к образцам к-30452, к-30501, к-30597 и к-29830 (табл 4.3).

Таким образом, моногенное наследование признака определено к образцам к-30501, к-30452 и сорту Bowman, дигенное к образцам к-29438, к-29636, к-30453, к-30023, 30597 и к-27557, тригенное к образцам NDB 112, к-30594 и к-29830.

Для анализа на идентичность генов в паре сравниваемых образцов мы использовали простые модели наследования признака.

Таблица 4 3 Расщепление по вирулентности в аскоспоровом потомстве С <шй\пк ("5" комбинация скрещивания) к различным сортам и образцам ячменя

_Число изолятов_

Образцы Фактическое расщепление Теоретически ^ Уровень

—' —f*-ruitui iwvitvv uuviuviuiviiiiv

ячменя__-_ожидаемое расщепление

значимости

авирулент-ных вирулентных авирулент-ных вирулентных

к-29438 78 28 3 1 0,11 0,50-0,75

к-30501 37 45 1 3 1 5 0,78 2,03 0,25-0,50 0,10-0,25

к-30594 100 11 7 1 0,68 0,25-0,50

к-30597 76 36 3 5 1 3 3,05 1,37 0,05-0,10 0,10-0,25

к-27557 79 28 3 1 0,08 0,75-0,85

Р > 0,95 при х2< 3,84.

4.4. Анализ тождественности генов авирулентности у изолятов гриба С. sativus к различным образцам ячменя

Для выявления тождественности генов авирулентности у изолятов гриба С sativus и комплементарных им генов устойчивости у разных образцов ячменя мы провели анализ расщепления по фенотипам вирулентности аскоспорового потомства скрещивания ND90PR х URY98-Gamba 30 к двум сравниваемым сортам ячменя.

Результаты анализа к отдельным парам образцов представлены в таблице 4 4.1

Ранее в работе Н В Мироненко (2005) было показано моногенное наследование вирулентности гриба С sativus к сорту Bowman и тригенное к образцу NDB 112 Поскольку из литературы известно, что в родословную сорта Bowman входит линия NDB 112 (Fetch, Steffenson, 1994), то один из генов авирулентности к линии NDB 112, по-видимому, является общим с геном авирулентности к сорту Bowman.

В нашей работе соотношение фенотипических классов а/а: а/в • в/а ■ в/в к сорту Bowman и линии NDB 112 было 36 Г37:7, что соответствовало модели 4:0:3:1 (у2 ~ 2,91) при моногенном и тригенном наследовании вирулентности к каждому образцу. Данная модель соответствует наличию у патогена трех генов авирулентности, из которых один ген общий к обоим образцам (ген Ahvl), или трех генов устойчивости у растений-хозяев, один из которых тоже общий.

Фактическое расщепление по фенотипам вирулентности 30-23:4:11 к сорту Bowman (моногенное наследование) и образцу к-29438 (дигенное наследование) не противоречит модели 3:3:1:1 (х2 = 4,16), предполагающей три независимых гена авирулентности к этим образцам Ген ответственный за авирулентность к образцу к-29438 не идентичен гену, контролирующему авирулентность к сорту Bowman, и, следовательно, был обозначен как Ahv2, другой ген к этому образцу мы обозначили Ahv3.

Соотношение фенотипических классов 47:11:10:16 к образцам к-30453 и к-29438 при ди-генном наследовании вирулентности к каждому образцу соответствовало модели 51:1:1 (х2 -3,50), что свидетельствует о двух генах устойчивости у этих образцов, один из которых общий. Поскольку у образца к-30453 не выявлено идентичных генов устойчивости с сортом Bowman, несущим ген R1, то, следовательно, устойчивость у него будут детерминировать другие гены, например R2 и R3, один из которых (ген R2) общий с геном образца к-29438

Сравнительный анализ расщепления по фенотипам вирулентности к двум парам образцов, NDB 112 и к-30501 и к-30452 и к-30594 показал отсутствие идентичных генов авирулентности к ним и, соответственно, отсутствие комплементарных им генов устойчивости у

данных образцов (модель расщепления 7:1.7:1, f = 4,24; 4,95). Данную модель расщепления можно объяснить наличием четырех независимых генов устойчивости в паре сравниваемых образцов. «Перекрестным» анализом обнаружено отсутствие общих генов устойчивости у образцов к-30501,30452 и к-30594.

Использование данного метода позволило выявить, по крайней мере, два новых гена устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости у новых источников устойчивости (табл. 4.4.2).

Например, было показано, что у образцов NDB 112, к-29438, к-30453, к-29636, к-30594, к-29830, к-30023, к-30597 и к-27557 устойчивость детерминирована общими генами, в то же время при попарном сравнении образцов к-30501 и к-30452 с образцами NDB 112, Bowman, к-29438, к-30453, к-29636, к-30594, к-29830, к-30023, к-30597 и к-27557, а также между собой у них обнаружены неизвестные гены устойчивости

Таким образом, с использованием аскоспоровой популяции гриба С sativas было идентифицировано два новых гена устойчивости у образцов к-30501 и к-30452 в сравнении с донорами известных генов.

Таблица 4.4 1. Анализ тождественности генов авирулентности у изолятов гриба С.

и комплементарньк им генов устойчивости у различных сортов ячменя __

Фактическое и теоретическое распределение фенотипиче-ских классов по реакции сравниваемых образцов ячменя к Примечание аскоспоровым изолятам ('^"комбинация)

Сравниваемые образцы ячменя

Генотипы устойчивости

а/а а/в в/а в/в f

Bowman NDB 112 R1 R1R2R3 36 4 1 0 37 3 7 1 2,91 Ген А1 комплементарен гену Rl в обоих сортах

к-29438 к-30453 R1R2 R1R3 47 5 11 1 10 1 16 1 3,50 к

к-29438 Bowman R1R2 R3 30 3 23 3 4 1 11 1 4,16 Нет общих генов устойчивости в обоих сортах

к-29438 NDB112 R1R2 R1R3R4 53 11 5 1 17 3 5 I 0,34 Ген А1 комплементарен гену Rl в обоих сортах

к-30501 к-30594 R1 R2R3R4 22 7 1 1 34 7 6 1 5,89 Нет общих генов устойчивости в обоих сортах

к-30501 NDB112 R1 R2R3R4 19 7 2 1 32 7 3 1 4,24

к-30452 к-30594 R1 R2R3R4 47 7 6 1 33 7 2 1 4.95

к-30452 R1 46 3 25 5 7,18 к

NDB112 R2R3R4 7 1 7 1

Обозначения: R- ген устойчивости, А- ген авирулентности. Одинаковые обозначения генов не означают их тождественности и могут рассматриваться только в пределах одной пары сравниваемых образцов ячменя.

Жирным шрифтом выделены теоретически ожидаемые значения Р > 0,95 при х2 < 7,82.

Таким образом, нами впервые реализован способ выявления генетического разнообразия устойчивости ячменя к Р teres и С salmis, основанный на доказанных ранее взаимодействиях генов устойчивости и авирулентности в изучаемых патосистемах по типу ген-на-ген

В результате проведенной работы нам удалось определить, что у образцов к-23874, к-30013 и к-30141 устойчивость детерминирована геном Rptlb, у к-15812 и к-30479 - генами Rptlb и Р/5, у образца к-15811 - генами /V, РИЗ иptl4 и у к-19979 - Rpt2c, pt!7 (либо ptl8),

ptl I и ptl2 Однако данный метод не позволяет определить наличие других неизвестных генов в генотипе устойчивости новых доноров, так как наличие известного гена маскирует фе-нотипическое проявление других факторов устойчивости

В связи с тем, что в предыдущих исследованиях была установлена специфичность сегрегации в гибридной популяции растений к различным изолятам возбудителя сетчатой пятни> стости ячменя (Афанасенко, 1996; Но et al., 1996, Макарова 1996; Афанасенко и др., 1999) применение данного метода нельзя абсолютизировать. Очевидно, что результаты будут зависеть от генотипов родительских изолятов гриба, авирулентность которых может быть детерминирована как одним, так и несколькими генами Кроме того, необходимы дополнительные исследования возможности кластеризации генов авирулентности В то же время, данный тест можно рассматривать как первичный скрининг тождественности генов устойчивости у новых источников Проведение такого скрининга позволяет планировать диаплельные схемы скрещиваний в разумньгх объемах, что послужит существенному ускорению работы по выявлению новых генов устойчивости.

Анализ результатов работы позволил определить, по крайней мере, два новых эффективных гена устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости у образцов к-30501 и к-30452 При этом образец - к-30452 является одновременно источником групповой устойчивости к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей

Получешгые нами результаты свидетельствуют о небольшом генетическом разнообразии (в отличие от Р teres) как генов авирулентности, так и генов устойчивости к грибу С sativus, что также согласуется с данными литературы (Fetch. Steffenson, 1994; Мироненко, 2005) В связи с тем что ген устойчивости от NDR 112 (Res5) обеспечивает длительную устойчивость к патогену (Wilcoxson et al., 1990) и его никогда не использовали в отечественной селекции, широкое использование такого гена является обоснованной альтернативой генетическому разнообразию устойчивости.

Глава 5. Выявление числа генов устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости

у сложных гибридов ячменя с использованием мейотического потомства патогена

Объединение в одном генотипе нескольких генов устойчивости является одной из предпосылок создания сортов с длительной устойчивостью к болезням, в том числе и ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости Для определения числа генов устойчивости к болезни в гибридных линиях ячменя мы использовали мейотическое потомство от скрещивания изолятов возбудителя сетчатой пятнистости листьев ячменя, с определенным генотипом вирулентности.

5.1. Выявление изолятов с определенными генами вирулентности к известным донорам устойчивости среди мейотического потомства гриба P. teres

Результаты исследований позволили выявить аскоспоровые изоляты с одним, двумя и более чем двумя генами авирулентности по отношению к определенным донорам устойчивости Только в пяти случаях выявлено моногенное наследование вирулентности к образцам к-1 25282, Psaknon, CI 739, Harbin (CI 4929) и к-20921 (модель расщепления Ii) Два гена авиру-

лентности обнаружено к образцам Tifang, к-8721, к-8755, к-8695, к-20019, к-21914, CI 5401, CI 4922 и CI 5809 (модель расщепления 3i). Четырехгенное наследование вирулентности в ас-коспоровом потомстве отмечено к образцам CI 9825, CI 9819, к-21849, к-29192 и CI 5791 (модель расщепления 15:1). Полученные результаты позволили сгруппировать образцы ячменя восприимчивые к определенным аскоспоровым изолятам гриба и определить гены авирулентности гриба комплементарные определенным генам устойчивости растения-хозяина.

Данные, генетически охарактеризованные (тесгерные) изоляты были использованы нами для выявления числа генов устойчивости в сложных гибридах и для выявления генетического разнообразия устойчивости у новых источников устойчивости ячменя.

5.2. Выявление линий сложных гибридов ячменя с двумя и более генами устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости с использованием маркированных

изолятов гриба

Линии F3 и F4 сложных гибридов были получены с использованием доноров 2-х, 3-х и более генов устойчивости к Р teres В задачу исследования входило определение числа генов, контролирующих признак в устойчивых линиях. Для этого мы использовали, выявленные ,4 ранее аскоспоровые изоляты гриба с генами авирулентности комплементарными определенным генам устойчивости образцов ячменя, включенных в скрещивания при создании сложных гибридов.

На первом этапе исследований была проведена инокуляция каждой из 271 линии родительским изолятом Н-22 в условиях лаборатории. По результатам оценки было отобрано 77 устойчивых линий.

Для выявления линий, содержащих два и более генов устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости, мы провели инокуляцию устойчивых линий аскоспоровыми изолятами, имеющими комплементарные гены (а)вирулентносги к генам устойчивости образцов, использованных в скрещивании. Например, для выявления линий, несущих гены устойчивости от сортов как Tifang, так и Harbin были использованы аскоспоровые изоляты гриба вирулентные к Harbin, но авирулентные к Tifang (3-3,6-2,7-1,7-2,7-4, 7-5, 8-3,9-3,9-4, 10-7,11-2,14-2 и 14-8) и наоборот авирулентные к Harbin и вирулентные к Tifang (7-3 и 14-3) При этом мы предполагали, что линии, которые проявят устойчивость к обоим изолятам, будут нести гены устойчивости от обоих родителей.

Так, например, у линии 7 комбинации скрещивания (Harbin х Агра) х (Белогорский х Tifang) один из родителей (Harbin) показал реакцию восприимчивости (тип реакции 3) на инокуляцию изолятом 11-1, тогда как другой родитель - Tifang был устойчив (тип реакции 2,3) к этому изоляту. Следовательно, устойчивость данной линии к изоляту 11-1 детерминирована геном от сорта Tifang. В то же время при заражении этих родителей изолятом 11 -2 мы наблюдали обратную реакцию, а именно авирулентность изолята к сорту Harbin (тип реакции 2) и вирулентность к Tifang (тип реакции 2,6) Следовательно, устойчивость данной линии к изоляту 11-2 детерминирована геном от сорта Harbin В таком случае устойчивость линии контролируют гены, переданные от обоих родителей.

Согласно полученным результатам был выделен ряд линий сложных гибридов ячменя, в родословной которых мы предполагаем наличие генов устойчивости, переданных в процессе гибридизации от разных доноров устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости.

Другим способом решения этой же задачи является анализ расщепления в мейотическом потомстве гриба по вирулентности к линиям и их родителям.

S.3. Выявление линий сложных гибридов ячменя с двумя и более генами устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости на основании анализа расщепления по вирулентности в аскоспоровой популяции P. teres

Сравнение результатов расщепления по вирулентности в мейотическом потомстве гриба Р teres к устойчивым линиям и их родителям позволило отобрать 19 линий сложных гибри- * дов, генотип которых представлен двумя и более генами устойчивости. Эти данные частично представлены в таблице 5.3.

Например, в родословной линий 1,2 и 4 скрещивания (Karin х Tifang) х Ogalitsu, линий 1, 3 и 7 скрещивания (Karin х Tifang) х CI 7584, линии 6 - (Karin х Ogalitsu) х Tifang и линии 5 -(CI 7584 х Агра) х CI 5809 обнаружено до четырех генов устойчивости Эти линии представляют особый интерес для практической селекции на длительную устойчивость к возбудителю сетчатой пятнистости ячменя.

Более того, эти линии обладают комплексом хозяйственно-полезных признаков, поскольку они получены с образцами, которые помимо высокой устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости характеризуются некоторыми ценными селекционными качествами. Оценка линий сложных гибридов ячменя на естественном и искусственном инфекционных фонах. По

результатам оценки на устойчивость к возбудителю сетчатой пятнистости на искусственном инфекционном фоне среди 77 линий, отобранных на устойчивость к изоляту Н-22 в лабораторном скрининге 48 показали высокую устойчивость к патогену в поле. Развитие болезни от О до 15%.

Таблица 5 3 Расщепление по вирулентности в аскоспоровой популяции Р teres (скрещивание "F") к линиям сложных гибридов ячменя

Комбинация Фактическое соотношение Теоретически Теоретически ожидаемое при

изолятов ожидаемое V2 наличии генов

скрещивания a а/в в расщепление X устойчивости от обоих родителей

(Harbin х Агра) х (Бело-горский * Tifang) 7 11 8 3 3:1 7.1 1,52 0,02 7.1

(Karin х Harbin) х (Karin х Tifang) 9 11 5 6 3.1 0,06 7.1

(Harbin CI 4929 x Агра) * Canadian Lake Shore 3 10 6 6 3:1 0,06 3:1

(Karin x Tifang) x Ogalitsu 1 17 4 1 151 0,11 15:1

(Karin x Tifang) x Ogalitsu 2 7 3 1 3 1 15:1 1,49 0,15 15.1

(Karin x Tifang) x Ogalitsu 4 15 4 3 3.1 15.1 1,52 2,05 15:1

(Kann * Ogalitsu) x Tifang 6 17 0 2 3:1 15:1 0,59 2,12 15:1

(Kann x Tifang) x CI 7584 1 18 2 2 3.1 15.1 2,97 0,30 15:1

(Karin x Tifang) x CI 7584 3 8 7 2 3:1 15:1 1,59 0,88 15:1

(Karin x Tifang) x CI 7584 7 13 4 3 3:1 15:1 0,27 2,61 15:1

(CI 7584 x Агра) x CI 5809 5 8 5 2 31 15:1 1,09 1.28 15:1

Примечание: а - авирулентный; в - вирулентный; а/в - изоляты, вызывающие промежуточные типы реакций растений.

Глава 6. Генетическая детерминация устойчивости к P. teres и С. sativus и выявление гомозиготных по устойчивости линий F3 от скрещивания устойчивых

образцов ячменя

С целью определения числа генов у гибридных растений F3, полученных от скрещивания устойчивых к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей образцов ячменя был проведен анализ расщепления по устойчивости с использованием двух штаммов гриба Р teres и двух - С sativus.

Ггнетическая детерминаиия устойчивости к Р teres Соотношение устойчивых и восприимчивых линий F3 в гибридной популяции Могех х к-19979 к штамму гриба Р teres 8-4 составляло 67-9, что характерно для теоретически ожидаемого отношения 13'З (%2 = 2,38) или 55:9 (х2 = 0.31) Поскольку оба родителя были устойчивы при заражении этим изолятом, то мы можем предположить наличие у одного из них, например у к-19979 доминантного и рецессивного генов устойчивости, а у другого, соответственно Могех - одного рецессивного гена

К штамму 181-6 фактическое расщепление 69:7 соответствовало наличию двух доминантных генов устойчивости (модель 15:1, х2 = 1,14). В связи с тем, что один из родителей

(Morex) был восприимчив к этому штамму (тип реакции 2,6), то, следовательно, устойчивость этих линий детерминировали два доминантных гена, переданных от образца к-19979

Таким образом, данные гибридологического анализа свидетельствую! о наличии у образца к-19979 одного доминантного и одного рецессивного генов устойчивости к штамму 8-4 и двух доминантных генов к штамму 181-6. Эти данные согласуются с результатами расщепления в мейотическом потомстве гриба, свидетельствовавших о наличии двух генов авирулент- i ности у обоих родительских изолятов.

Генетическая детерминация устойчивости к С sativus. При заражении изолятом URY98-Gamba30 родительских генотипов скрещивания Morex х к-19979 была отмечена реакция восприимчивости сорта Morex. Фактическое расщепление 51У ЗВ дает основание предполагать наличие двух (модель 15.1, х2 = 0,69) или трех (модель 63.1, х2 - 2,81) доминантных генов устойчивости у образца к-19979

К штамму ND90PR сорт Morex также был восприимчив, а образец к-19979 - устойчив. Из 76 изученных линий не выявлено восприимчивых, но наличие 13 расщепляющихся к этому штамму линий может быть объяснено сложным наследованием, с участием трех и более генов устойчивости.

В комбинации скрещиванич Morex (В) х к-23874 (У) к изолятам ND90PR и URY98-Gamba30 не выявлено восприимчивых линий (26У.0В), что может быть связано с недостаточной выборкой, либо наличием одного и более тождественных генов.

Таким образом, в результате анализа линий F; комбинации скрещивания Morex х к-19979 обнаружено, что два гена контролируют устойчивость образца к-19979 к изолятам гриба Р leres и два или три гена к С sativus. Следовательно, данный образец может быть использован как донор групповой устойчивости к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостям. Проведенный анализ позволил отобрать линии гомозиготные по устойчивости к обоим патогенам 1,3, 8,9, 12, 14,16,23,26,28, 56,63,81,87, 88, 89,96,98,99, 100,101,107 и 110. Перечисленные линии могут быть использованы как исходный материал для селекции сортов ячменя с групповой устойчивостью к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей.

ВЫВОДЫ

1 На естественном инфекционном фоне охарактеризованы районированные и перспективные сорта ячменя по устойчивости к листовым пятнистостям в условиях Северо-Запада РФ (Ленинградская и Псковская обл.). Не выявлено слабопоражаемых темно-бурой пятнистостью сортов ячменя и, соответственно, сортов с групповой устойчивостью к трем видам пятнистостей. Однако, на фоне силыюпоражаемых сортов в год эпифиготии темно-бурой пятнистости (2003 г.) и высокого развития на восприимчивых сортах сетчатой пятнистости (2005 г.) выделен сорт Хлыновский слабопоражаемый обоими патогенами (развитие болезни до 22%).

2. В результате лабораторных и полевых оценок выявлено четыре новых источника с групповой устойчивостью к сетчатой, темно-бурой пятнист остям и ринхоспориозу: к-30594, к-30597, к-29830 и 2994 Tibet White 9, семь - к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей: к-29830, к-30023, к-30597, к-2943 8, к-30594, к-30452 и к-30451; и два к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу к-27737 и к-8727.

3. Для определения числа и тождественности генов устойчивости у новых источников охарактеризованы генотипы вирулентности аскоспоровых изолятов Р teres f teres ("F" скрещивание) по генам авирулентности, комплементарным известным генам устойчивости. Выявлено, что вирулентность к образцам к-20921, CI 739, к-25282, к-6904, Psaknon и Harbin детерминирована одним геном, к образцам к-8695, к-20019, CI 5809, к-21914, к-8755, Tifang, к-8721, CI 5401 и С1 4922 - двумя и к образцам CI 5791, С1 9825, к-21849 и к-29192 - четырмя генами авирулентности.

4. Анализ расщепления по вирулентности в мейотическом потомстве Р teres ("F" скрещивание) к семи новым источникам устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости показал наличие двух генов авирулентности и, соответственно, двух комплементарных генов ус-

тойчивости у образцов к-15812, к-30141 и к-30479, трех - четырех генов у образцов к-30013, к-23874, к-15811 и к-19979.

5. Определено число генов, контролирующих устойчивость у 10 новых источников устойчивости к С. sativus, на основании характера расщепления по вирулентности в аскоспоро-вом потомстве гриба ("S" скрещивание). Показано моногенное наследование признака устойчивости у образцов к-30501 и к-30452, дигенное - к-29438, к-29636, к-30453, к-30023, к-30597 и к-27557 и тригенное - к-30594 и к-29830.

6 Впервые реализован способ выявления генетического разнообразия устойчивости ячменя к Р teres и С sativus, основанный на доказанных ранее взаимодействиях генов устойчивости и авирулентности в изучаемых патосистемах по типу ген-на-ген. Анализ генетического разнообразия устойчивости у новых источников к Р teres позволил определить, что у образцов к-23874, к-30013 и к-30141 устойчивость детерминирована геном Rptlb, у образцов к-15812 и к-30479 - генами Rptlb и Pt5, у образца к-15811 - генами PtS, Ptl3uptI4 и у образца к-19979 - Rpt2c, ptl 7 (либо ptl8), ptl I и pt¡2.

1 На основании анализа расщепления в аскоспоровом потомстве С sativus ("S" скрещивание) выявлено генетическое разнообразие устойчивости к патогену у 10 новых источников устойчивости и двух известных доноров (NDB 112 и Bowman). Показано, что у образцов, NDB 112, Bowman, к-29438, к-30453, к-29636, к-30594, к-29830, к-30023, к-30597 и к-27557 устойчивость детерминирована общим геном, по-видимому, Rcs5. У образцов к-30501 и к-30452 выявлено два новых гена устойчивости к возбудителю темно-бурой пятнистости.

8. Гибридологический анализ позволил выявить, что у образца к-19979 устойчивость к возбудителю сетчатой пятнистости детерминирована двумя генами (один доминантный и один рецессивный), а к возбудителю темно-бурой пятнистости - двумя или тремя доминантными генами устойчивости. Выявленные, гомозиготные по устойчивости к двум патогенам (Р teres и С sativus) линии F3 представляют ценный материал для селекции сортов с групповой устойчивостью.

9. С использованием аскоспоровых изолятов с определенной вирулентностью к донорам эффективных генов устойчивости и результатов расщепления в мейотическом потомстве Р. teres к 77 линиям сложных гибридов, созданных в ЛНИИСХ, отобрано 19 линий F3, генотип которых представлен двумя и более генами устойчивости.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАЮТ

1. Анисимова, A.B. Создание доноров групповой устойчивости ячменя к сетчатой и темно-бурой пятнисгостям / A.B. Анисимова // Микология и альгология - 2004: Тез. конф. аспирантов и молодых ученых. - М. - 2004. - С. 19-20.

2. Анисимова, A.B. Устойчивость районированных и перспективных сортов ячменя к листовым пятнисгостям / A.B. Анисимова, O.A. Филатова, О.С. Афанасенко, Т.И. Добрина // Методические основы селекции зерновых культур и картофеля на устойчивость к болезням. -ВИЗР. - СПб. - 2005. - С. 66-69.

3. Анисимова, A.B. Выявление эффективных источников устойчивости ячменя к листовым пятнисгостям / A.B. Анисимова И Агротехнический метод защиты растений от вредных организмов. Материалы Третьей Всероссийской научно-практической конференции. - Краснодар, Изд-во КубГАУ. - 2005. - С. 208-209.

4. Анисимова, A.B. Групповая устойчивость ячменя к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнисгостям / A.B. Анисимова // В кн: Фитосанитарное оздоровление экосистем. -Второй Всероссийский съезд по защите растений. - ВИЗР. - СПб. - 2005. - С. 390-391.

Научное издание ЯКО-печать ООО "ИННОВАЦИОННЫЙ ЦЕНТР ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ" Лицензия ПЛД № 69-253. Подписано к печати 2 июня 2006 г., тир. 100 экз.

»1532fr

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Анисимова, Анна Владимировна

Страницы

ВВЕДЕНИЕ

• ГЛАВА 1. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ 11 ПЯТНИСТОСТЕЙ ЛИСТЬЕВ И УСТОЙЧИВОСТЬ ЯЧМЕНЯ К

БОЛЕЗНЯМ

1.1. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ 11 ПЯТНИСТОСТЕЙ ЯЧМЕНЯ

1.1.1. Сетчатая пятнистость

1.1.1.1. Распространение и вредоносность болезни

1.1.1.2. Таксономия возбудителя

1.1.1.3. Специализация

1.1.1.4. Симптоматика болезни

1.1.1.5. Морфологические особенности конидиального и сумчатого 14 спороношения

1.1.1.6. Эпидемиология

1.1.2. Темно-бурая пятнистость

1.1.2.1. Распространение и вредоносность болезни

1.1.2.2. Таксономия возбудителя

1.1.2.3. Специализация

1.1.2.4. Симптоматика болезни

1.1.2.5. Морфологические особенности конидиального и сумчатого 18 спороношения ф 1.1.2.6. Эпидемиология

1.1.3. Ринхоспориоз

1.1.3.1. Распространение и вредоносность болезни

1.1.3.2. Таксономия возбудителя

1.1.3.3. Специализация

1.1.3.4. Симптоматика болезни

1.1.3.5. Морфологические особенности конидиального и сумчатого 23 спороношения

1.1.3.6. Эпидемиология

1.2. СТРУКТУРА ПОПУЛЯЦИЙ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ПЯТНИСТОСТЕЙ 24 ф ЛИСТЬЕВ ЯЧМЕНЯ

1.2.1. Сорта-дифференциаторы для анализа популяций гемибиотрофных 24 патогенов ячменя

1.2.1.1. Сетчатая пятнистость ячменя

1.2.1.2. Темно-бурая пятнистость ячменя

1.2.1.3. Ринхоспориоз ячменя

1.2.2. Микроэволюционные процессы в популяциях возбудителей 34 пятнистостен ячменя

1.3. УСТОЙЧИВОСТЬ ЯЧМЕНЯ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ПЯТНИСТОСТЕЙ 42 ЛИСТЬЕВ 1.3.1. Методы выявления источников устойчивости к гемибиотрофным 42 ** патогенам

1.3.1.1. Лабораторный скрининг ф 1.3.1.2. Методы создания искусственных инфекционных фонов к 44 возбудителям пятнистостей листьев ячменя

1.3.2. Источники устойчивости к сетчатой пятнистости

1.3.3. Генетика устойчивости

1.3.4. Источники устойчивости к темно-бурой пятнистости 65 1J.5. Генетика устойчивости

1.3.6. Источники устойчивости к ринхоспориозу

1.3.7. Генетика устойчивости

1.4. HORDEIJM VULGA11E SUBSP. SPONTANEUM- ЦЕННЫЙ ИСТОЧНИК 85 УСТОЙЧИВОСТИ К БОЛЕЗНЯМ

1.5. ИСТОЧНИКИ ГРУППОВОЙ УСТОЙЧИВОСТИ ЯЧМЕНЯ К 90 БОЛЕЗНЯМ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Выявление источников групповой устойчивости ячменя к 93 возбудителям сетчатой, темно-бурой пятнистостей и ринхоспориозу

2.1.1. Скрининг образцов ячменя устойчивых к P. teres и С. scitiviis в 93 лаборатории

2.1.2. Оценка сортов и образцов ячменя к листовым болезням на 95 естественном инфекционном фоне в поле

2.1.3. Оценка образцов.ячменя к P. teres на искусственном инфекционном 98 фоне в поле

2.2. Методы создания исходного материала для селекции ячменя с ' 98 групповой устойчивостью к болезням

2.3. Генетический анализ устойчивости ячменя к сетчатой и темно-бурой 99 пятнистостям в лаборатории

2.4. Выявление генетического разнообразия устойчивости ячменя к 101 сетчатой и темно-бурой пятнистостям с использованием мейотического потомства грибов P. teres и С. sativus

2.4.1. Выявление генетического разнообразия у новых источников 102 устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости

2.4.2. Выявление генетического разнообразия у новых источников 105 устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости

2.5. Выявление числа генов устойчивости к возбудителю сетчатой 106 пятнистости у сложных гибридов ячменя с использованием мейотического потомства патогена

ГЛАВА 3. Устойчивость ячменя к листовым пятнистостям

3.1. Оценка устойчивости районированных и перспективных для 110 районирования сортов ячменя к листовым пятнистостям на

Государственных сортоучастках (ГСУ) в Северо-Западном регионе РФ

3.2. Выявление коллекционных образцов ячменя с групповой 116 устойчивостью к болезням в лаборатории

3.3. Оценка устойчивости образцов ячменя к листовым пятнистостям на 124 естественном инфекционном фоне в условиях опытного поля ВИЗР

3.4. Оценка устойчивости сортов, образцов и линий ярового ячменя к 126 листовым пятннстостям на опытных делянках ЛНИИСХ Белогорка

3.5. Оценка устойчивости коллекционных образцов ячменя ВИР к 128 листовым пятнистостям

ГЛАВА 4. Выявление генетического разнообразия устойчивости ячменя к сетчатой и темно-бурой пятнистостям с использованием мейотического потомства грибов P. teres и С. sativus

4.1 Характер наследования вирулентности гриба P. teres к сортам ячменя с известными генами устойчивости

4.1.1. Характер наследования вирулентности гриба P. teres к новым источникам устойчивости

4.2. Анализ тождественности генов авирулентности у изолятов гриба Р. 143 teres к различным образцам ячменя

4.3. Характер наследования вирулентности гриба С. sativus к различным 161 сортам ячменя

4.4. Анализ тождественности генов авирулентности у изолятов гриба 169 С. sativus к различным образцам ячменя

ГЛАВА 5. Выявление числа генов устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости у сложных гибридов ячменя с использованием мейотического потомства патогена

5.1. Выявление изолятов с определенными генами вирулентности к 183 известным донорам устойчивости среди мейотического потомства гриба Р. teres

5.2. Выявление линий сложных гибридов ячменя с двумя и более генами 188 устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости с использованием маркированных изолятов гриба

5.3. Выявление линий сложных гибридов ячменя с двумя и более генами 196 устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости на основании анализа расщепления по вирулентности в аскоспоровой популяции P. teres

5.4. Оценка линий сложных гибридов ячменя на естественном и .204 искусственном инфекционных фонах

ГЛАВА 6. Генетическая детерминация устойчивости к P. teres и С. salivas и 206 выявление гомозиготных по устойчивости линий F3 от скрещивания устойчивых образцов ячменя

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Характеристика генетического разнообразия ячменя по устойчивости к возбудителям пятнистостей листьев и создание исходного материала для селекции"

Ячмень (Hordeum vulgare L.) является ценной зернофуражной и продовольственной культурой. Зерно ячменя используется в качестве сырья для пивоварения, кондитерской, хлебопекарной, фармацевтической, текстильной и кожевенной промышленности. Однако наибольший объем (7075%) от валового сбора зерна этой культуры приходится на кормовые цели для нужд животноводства (Лукьянова и др., 1990).

В Северо-Западном регионе России около 10% пахотных земель занимают серые хлеба (Уровни и тенденции., 2000).

Ячменное зерно - это основное сырье для пивоваренной промышленности. В настоящее время для России, и для Северо-Западного региона в частности, остро встал вопрос о выращивании больших объемов зерна пивоваренных сортов ячменя для нужд бурно развивающейся пивоваренной промышленности (Радюкевич и др., 2002).

Основными факторами, лимитирующими получение высокого урожая качественного зерна, являются вредоносные болезни. В Северо-Западном регионе России основное -значение среди наиболее опасных и вредоносных болезней ячменя имеют пятнистости листьев, вызываемые гемибиотрофными патогенами: сетчатая (возбудитель Pyrenophora teres Drechsler.), темно-бурая (возбудитель Cochliobohis sativus Drechs. ex Dastur) пятнистости и ринхоспориоз (возбудитель Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis).

Развитие одного из видов пятнистостей выше порога вредоносности в Северо-Западной Нечерноземной Зоне РФ происходит, в среднем, 5 раз за 10 лет. Наиболее распространенной и вредоносной болезнью ячменя является сетчатая пятнистость. Потери урожая ячменя от этого заболевания в период эпифитотий могут составлять от 20 до 40% (Обухович, Мицкевич, 1982). При этом вредоносность болезни состоит не только в прямых потерях урожая из-за сниженного фотосинтеза растений, но и в снижении качества зерна.

В последнее время отмечено нарастание вредоносности гриба С. sativus как возбудителя темно-бурой пятнистости листьев в посевах ярового ячменя. Это заболевание ежегодно проявляется на коллекционных и производственных посевах ячменя в Северо-Западном Нечерноземной Зоне России и при благоприятных условиях для развития болезни ее распространенность может достигать 100%, а развитие 50-90%, что можно было наблюдать в 2003 году на посевах ячменя Ленинградской области.

Ринхоспориоз распространен повсеместно. Эта болезнь наиболее вредоносна в Северо-Западном регионе РФ на яровом ячмене при затяжной холодной весне. Последняя эпифитотия ринхоспориоза была зафиксирована в этом регионе в 2001 году, когда развитие болезни на отдельных восприимчивых сортах достигало 80% (Ишкова, 2002).

Наиболее экономически выгодным и экологически безопасным способом борьбы с этими патогенами является возделывание устойчивых сортов.

Создание коллекций источников устойчивости с.-х. культур различного происхождения, в том числе и ячменя к листовым пятнистостям является базовой работой при целенаправленной селекции устойчивых сортов. Особенности биологии популяций гемибиотрофных патогенов ячменя и их жизненных циклов определяют методологию поиска эффективных источников устойчивости (Афанасенко, 1996).

Для успешной селекции ячменя на устойчивость к листовым пятнистостям необходимы генетически охарактеризованные доноры устойчивости.

К настоящему времени наиболее полно изучена генетика устойчивости ячменя к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу.

Несмотря на то, что поиски эффективных источников устойчивости ячменя к возбудителям гемибиотрофных патогенов проводятся уже достаточно длительный период в нашей стране и за рубежом, генетическая коллекция доноров устойчивости к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу представлена небольшим количеством высокоэффективных генов устойчивости и одним, ценным для селекции геном длительной устойчивости к возбудителю темно-бурой пятнистости. Сведения о донорах групповой устойчивости ячменя к перечисленным болезням в литературе отсутствуют.

Одной из стратегий создания сортов ячменя с длительной устойчивостью к болезням является объединение в одном генотипе нескольких генов устойчивости от используемого донора(ов). Для определения числа генов устойчивости к болезни, у создаваемых с использованием нескольких генов устойчивости селекционных линий, необходимо проведение дополнительных скрещиваний, получения потомства F2 и его анализ. Ускорить данный процесс и сэкономить время и трудовые ресурсы возможно при использовании молекулярных маркеров определенных генов устойчивости. По объективным причинам, в настоящее время селекция с использованием молекулярных маркеров генов устойчивости пока не получила широкого применения. В работах Н.В. Мироненко (2005) и О.А. Филатовой (2005) на основании выявленных закономерностей межорганизменной генетики патосистем ячмень - P. teres и ячмень - С. sativus была обоснована возможность использования мейотического потомства от скрещивания изолятов грибов с определенным генотипом вирулентности для выявления числа генов и генетического разнообразия устойчивости у источников устойчивости ячменя. В данной работе предпринята попытка практической реализации этих разработок для выявления генетического разнообразия новых доноров устойчивости ячменя к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей и числа генов устойчивости, в созданных Т.Н. Радюкевич в ЛНИИСХ сложных гибридах ячменя.

Цель и задачи исследований. Целью исследования являлось создание коллекции генетически разнородного исходного материала для селекции сортов ячменя с групповой устойчивостью к возбудителям пятнистостей листьев.

Для достижения данной цели предполагалось решить следующие задачи:

1. Охарактеризовать устойчивость районированных сортов ячменя, а также коллекционного и селекционного материала по устойчивости к группе листовых пятнистостей на Северо-Западе России.

2. Выявить источники устойчивости ячменя к возбудителям пятнистостей листьев и образцы с групповой устойчивостью.

3. Выявить генетическое разнообразие устойчивости у новых доноров ячменя, с использованием мейотического потомства от внутривидовых скрещиваний изолятов P. teres и С. sativus.

4. Провести скрещивания источников устойчивости к P. teres и С. sativus между собой и выявить гомозиготные по устойчивости к' обоим возбудителям линии F3.

5. Определить число генов устойчивости у линий сложных гибридов ячменя, созданных в ЛНИИСХ, с использованием различных доноров устойчивости.

Научная новизна исследований. Охарактеризована групповая устойчивость к P. teres,. С. sativus и R. secalis коллекций источников и доноров устойчивости к отдельным болезням. Выявлено четыре новых источника групповой устойчивости к сетчатой, темно-бурой пятнистостям и ринхоспориозу: к-3.0594, к-30597, к-29830 и 2994 Tibet White 9; семь - к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей: к-29830, к-30023, к-30597, к-29438, к-30594, к-30452 и к-30451; и два к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу - к-27737 и к-8727.

Впервые реализован способ выявления генетического разнообразия устойчивости ячменя к P. teres и С. sativus, основанный на доказанных ранее взаимодействиях генов устойчивости и авирулентности в изучаемых патосистемах по типу ' ген-на-ген. В результате проведенной работы обнаружено, что у образцов к-23874, к-30013 и к-30141 устойчивость детерминирована геном Rptlb, у образцов к-15812 и к-30479 - генами Rptlb и Pt5, у образца к-15811 - генами Pt5, Ptl3 и ptl4 и у образца к-19979 - Rpt2c, pt 17 (либоpi 18),pill иptl2.

Определено, что устойчивость к темно-бурой пятнистости у образцов к-29438, к-30453, к-29636, к-30594, к-29830, к-30023, к-30597 и к-27557 детерминирована геном Rcs5. Выявлено, по крайней мере, два новых эффективных гена устойчивости ячменя к возбудителю темно-бурой пятнистости, донорами которых являются образцы к-30501 и к-30452.

Впервые для определения числа генов устойчивости у селекционных линий сложных гибридов ячменя было использовано мейотическое потомство гриба P. teres. Отобрано 19 линий сложных гибридов, генотип которых представлен двумя и более генами, представляющих интерес для создания сортов ячменя с длительной устойчивостью к возбудителю сетчатой пятнистости.

Практическая значимость работы.

• В качестве доноров групповой устойчивости ячменя к P. teres, С. sativus и R. secalis для практической селекции в Северо-западном регионе РФ могут быть рекомендованы образцы: к-30594, к-30597, к-29830 и 2994 Tibet White 9; к P. teres и С. sativus - к-29830, к-30023, к-30597, к-29438, к-30594, к-30452 и к-30451; и к P. teres и R. secalis - к-27737 и к-8727.

• Созданная коллекция генетически охарактеризованных изолятов гриба P. teres с признаками редкой вирулентности к донорам эффективных генов может быть использована для выявления селекционных линий, устойчивость которых детерминирована двумя и более генами.

• Для практической селекции на длительную устойчивость рекомендуются гомозиготные по устойчивости линии F3 сложных гибридов ячменя, в генотипе которых имеются два и более генов устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости, а также линии F3 с групповой устойчивостью к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостям.

Апробация работы и публикации результатов исследования. Результаты работы были представлены на: координационном совете по проблемам иммунитета растений к болезням и вредителям (Санкт-Петербург, 2003); конференции аспирантов и молодых ученых на тему: "Микология и альгология - 2004" (Москва, 2004); III Всероссийской научно-практической конференции по агротехническому методу защиты растений от вредных организмов (Краснодар, 2005); II Всероссийском съезде по защите растений "Фитосанитарное оздоровление экосистем" (Санкт-Петербург, 2005); конференции аспирантов и молодых ученых на тему: "Формирование конкурентоспособности молодых ученых" СЗНМЦ (Санкт-Петербург-Пушкин, 2005).

Материалы исследований опубликованы в 4 печатных работах, 1 находится в печати.

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 270 страницах машинописного текста, из них 29 страниц приложения и состоит из введения, шести глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 39 таблицами и 4 рисунками. Библиография включает 331 источник, из них 258 на иностранном языке.

Заключение Диссертация по теме "Защита растений", Анисимова, Анна Владимировна

211 ВЫВОДЫ

1. На естественном инфекционном фоне охарактеризованы районированные и перспективные сорта ячменя по устойчивости к листовым пятнистостям в условиях Северо-Запада РФ (Ленинградская и Псковская области). Не выявлено слабопоражаемых темно-бурой пятнистостью сортов ячменя и, соответственно, сортов с групповой устойчивостью к трем видам пятнистостей. Однако, на фоне сильнопоражаемых сортов в год эпифитотии темно-бурой пятнистости (2003 г.) и высокого развития на восприимчивых сортах сетчатой пятнистости (2005 г.) выделен сорт Хлыновский слабопоражаемый обоими патогенами (развитие болезни до 22%).

2. В результате лабораторных и полевых оценок выявлено четыре новых источника с групповой устойчивостью к сетчатой, темно-бурой пятнистостям и ринхоспориозу: к-30594, к-30597, к-29830 и 2994 Tibet White 9, семь - к возбудителям сетчатой и темно-бурой пятнистостей: к-29830, к-30023, к-30597, к-29438, к-30594, к-30452 и к-30451; и два к возбудителям сетчатой пятнистости и ринхоспориозу - к-27737 и к-8727.

3. Для определения числа и тождественности генов устойчивости у новых источников охарактеризованы генотипы вирулентности аскоспоровых изолятов P. teres f. teres ("F" скрещивание) по генам авирулентности, комплементарным известным генам устойчивости. Выявлено, что вирулентность к образцам к-20921, CI 739, к-25282, к-6904, Psaknon и Harbin детерминирована одним геном, к образцам к-8695, к-20019, CI 5809, к-21914, к-8755, Tifang, к-8721, CI 5401 и CI 4922 - двумя и к образцам CI 5791, CI 9825, к-21849 и к-29192 - четырмя генами авирулентности.

4. Анализ расщепления по вирулентности в мейотическом потомстве Р. teres ("F" скрещивание) к семи новым источникам устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости показал наличие двух генов авирулентности и, соответственно, двух комплементарных генов устойчивости у образцов к-15812, к-30141 и к-30479, трех - четырех генов у образцов к-30013, к-23874, к-15811 и к-19979.

5. Определено число генов, контролирующих устойчивость у 10 новых источников устойчивости к С. sativus, на основании характера расщепления по вирулентности в аскоспоровом потомстве гриба ("S" скрещивание). Показано моногенное наследование признака устойчивости у образцов к-30501 и к-30452, дигенное - к-29438, к-29636, к-30453, к-30023, к-30597 и к-27557 и тригенное - к-30594 и к-29830.

6. Впервые реализован способ выявления генетического разнообразия устойчивости ячменя к P. teres и С. sativus, основанный на доказанных ранее взаимодействиях генов устойчивости и авирулентности в изучаемых патосистемах по типу ген-на-ген. Анализ генетического разнообразия устойчивости у новых источников к P. teres позволил определить, что у образцов к-23874, к-30013 и к-30141 устойчивость детерминирована геном Rptlb, у образцов к-15812 и к-30479 - генами Rptlb и Pt5, у образца к-15811 -генами Pt5, Ptl3 и ptl4 и-у образца к-19979 - Rpt2c,ptl7 (либо ptl8),ptll и ptl2.

7. На основании анализа расщепления в аскоспоровом потомстве С. sativus ("S" скрещивание) выявлено генетическое разнообразие устойчивости к патогену у 10 новых источников устойчивости и двух известных доноров (NDB 112 и Bowman). Показано, что у образцов, NDB 112, Bowman, к-29438, к-30453, к-29636, к-30594, к-29830, к-30023, к-30597 и к-27557 устойчивость детерминирована общим геном, по-видимому, Rcs5. У образцов к-30501 и к-30452 выявлено два новых гена устойчивости к возбудителю темно-бурой пятнистости.

8. Гибридологический анализ позволил выявить, что у образца к-19979 устойчивость к возбудителю сетчатой пятнистости детерминирована двумя генами (один доминантный и один рецессивный), а к возбудителю темно-бурой пятнистости - двумя или тремя доминантными генами устойчивости. Выявленные, гомозиготные по устойчивости к двум патогенам (P. teres и С. sativus) линии F3 представляют ценный материал для селекции сортов с групповой устойчивостью.

9. С использованием аскоспоровых изолятов с определенной вирулентностью к донорам эффективных генов устойчивости и результатов расщепления в мейотическом потомстве P. teres к 77 линиям сложных гибридов, созданных в ЛНИИСХ, отобрано 19 линий F3, генотип которых представлен двумя и более генами устойчивости.

214

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Анисимова, Анна Владимировна, Санкт-Петербург

1. Афанасенко, О.С. Лабораторный метод оценки устойчивости сортообразцов ячменя к возбудителю сетчатого гельминтоспориоза / О.С. Афанасенко // С.-х. биология. -1977.-Т.12,№2.-С. 297-299.

2. Афанасенко, О.С. Изучение структуры популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя по признаку вирулентности в связи с селекцией устойчивых сортов / О.С. Афанасенко // Автореф. канд. дис. Л., 1978. - 22 с.

3. Афанасенко, О.С. Методические указания по диагностике и методам полевой оценки устойчивости ячменя к возбудителям пятнистостей листьев / О.С. Афанасенко // РАСХН, ВИЗР. Л.-Пушкин. - 1987. - 20 с.

4. Афанасенко, О.С. Изменчивость популяций гельминтоспориозных пятнистостей ячменя и генетический контроль устойчивости к Pyrenophora teres Drechs. / О.С. Афанасенко // Автореф. дис. на соиск. учен, степ, д-ра биол. наук. СПб. - 1996. - 41с.

5. Афанасенко, О.С. Устойчивость ячменя к гемибиотрофным патогенам / О.С. Афанасенко // В кн: Идентифицированный генофонд растений и селекция; РАСХН, ГНЦ РФ ВИР. СПб. - 2005. - С. 592-614.

6. Афанасенко, О.С. Проблема дифференциации популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя / О.С. Афанасенко, Г.С. Коновалова, А.В. Войлоков, М.С. Воронова // Теоретические основы иммунитета растений к болезням. Сб. науч. Тр. ВИЗР. -Л.- 1988. -С. 39-45.

7. Афанасенко, О.С. Число генов у ячменя, детерминирующих устойчивость к штаммам Pyrenophora teres Drechs. / О.С. Афанасенко, И.Г. Макарова, А.А. Зубкович // Генетика. 1999. - Т. 35, № 3. - С. 341-351.

8. Афанасенко, О.С. Наследование устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости у некоторых сортов ячменя / О.С. Афанасенко, И.Ю. Кушниренко // Генетика. 1989. - Т. 25, № 11-. - С. 1994-2000.

9. Афанасенко, О.С. Устойчивость сортов ячменя к возбудителю сетчатого гельминтоспориоза / О.С. Афанасенко, А.Я. Трофимовская // Сб. науч. Тр. ВИЗР. Л. -1976.-Вып. 49.-С. 45-49.

10. Афанасенко, О.С. Международный набор сортов-дифференциаторов популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя / О.С. Афанасенко, X. Хартлеб, Н.Н. Гусева, М. Минаржикова, М.Яношева // Миколог, и фитопатол. 1994. - Т. 28, вып. 4. -С. 34-42.'

11. Бенкен, А.А. Сетчатый гельминтоспориоз ячменя / А.А. Бенкен, М.В. Гайке, Л.К. Хацкевич // Тр. 5-го Всесоюз. совещания по иммунитету растений. Киев, 1969. -Вып. 5, № 2. - С. 38-42.

12. Бибик, Е.В. Источники устойчивости к листовым заболеваниям у ярового ячменя / Е.В. Бибик, Т.М. Евланова, А.Г. Дунаевский // IX Всесоюз. совещ. по иммунитету растений к вредителям и болезням. Минск. - Т. 1. - С. 66-67.

13. Брискина, О.С. Скрининг коллекции ячменя на устойчивость к ринхоспориозу / О.С. Брискина, И.А. Терентьева // Вестник защиты растений. СПб-Пушкин. - 2000. - С. 105-106. '

14. Булат, С.А. ДНК-полиморфизмы фитопатогенных грибов Pyrenophora teres Drechsler Pyrenophora grcimima Ito Kuribayashi / С.А. Булат, H.B. Мироненко // Генетика. -1989.-Т. 25, №5.-С. 838-850.

15. Булат, С.А. Видовая идентичность фитопатогенных грибов Pyrenophora teres Drechsler и P. graminea Ito and Kurib. / C.A. Булат, Н.В.Мироненко // Миколог, и фитопатол. 1990. - Т. 24, вып. 5. - С. 435-441.

16. Булат, С.А. Полиморфизм грибов: ДНК-маркеры / С.А. Булат, Н.В. Мироненко // Успехи соврем, генетики. 1993. - Вып. 18. - С. 75-120.

17. Вавилов, Н.И. Учение об иммунитете растений к инфекционным заболеваниям / Н.И. Вавилов // М.-Л., "Сельхозгиз". 1935. - 500 с.

18. Вавилов, Н.И. Законы естественного иммунитета растений к инфекционным заболеваниям. (Ключи к нахождению иммунных форм) / Н.И.Вавилов // Изв. АН СССР, сер. биол. 1961. - Т. 1.-С. 117-157.

19. Вавилов, Н.И. Законы иммунитета растений к инфекционным заболеваниям / Н.И. Вавилов // В кн.: Избр. произв. Т. 2. - М., "Наука". - 1967. - 430 с.

20. Вавилов, Н.И. Иммунитет растений к инфекционным заболеваниям / Н.И.Вавилов // М., "Наука". 1986. - 520 с.

21. Велибекова, E.JL Восприимчивость ячменя к корневым гнилям / E.JL Велибекова // Селекция и семеноводство. № 10. - С. 20-21.

22. Войтова, JLP. Сетчатая пятнистость ячменя / JI.P. Войтова // Защита растений,-1971.-№ 11.-С. 44.

23. Гайке, М.В. Перспективы селекции ячменя в Латвийской ССР и исходный материал для их решения / М.В. Гайке // Автореф канд. дис. Л. - 1976. - 28 с.

24. Гешеле, Э. Отношения ячменей к паразитному грибку Helminthosporium teres! Э. Гешеле // Сб. науч. Тр. по прикл. бот., ген. и сел. 1928. - Т. 19, вып. 1. - С. 371384.

25. Жуковский, П.М. Сопряженная эволюция растения-хозяина и паразита / П.М. Жуковский // Генетические основы селекции растений на иммунитет. М., "Наука". -1973.-С. 120-134.

26. Киселева, Е.В. Пахолкова, Н.Н. Кряжева, Л.Н. Назарова, Е.А. Соколова, В.А. Павлюшин, И.Я. Гричанов, А.Н. Фролов, Т.Д. Кузнецова, Ф.А. Карлик // М. Россельхозакдемия. -2002.

27. Ишкова, Т.И. Диагностика основных грибных болезней хлебных злаков / Т.Н. Ишкова, Л.И.Берестецкая, E.JI. Гасич, М.М. Левитин, Д.Ю.Власов // СПб. 2002. - 76 с.

28. Кашемирова, Л.А. Фитосанитарные диагностические системы -защиты ярового ячменя от темно-бурого и сетчатого "гельминтоспориозов'7 Л.А. Кашемирова // автореф. канд. дис. Большие Вяземы. - 1995. - 33 с.

29. Коновалова, Г.С. Изменчивость Drechslera teres (Sacc.) Schoem. при соматической гибридизации. I. Получение соматических гибридов D. teres / Г.С. Коновалова//Миколог, и фитопатол. -1997. -Т. 31, вып. 2. -С. 35-41.

30. Котова, В.В. Ринхоспориоз зерновых особенности развития, меры борьбы / В.В. Котова, ЯЗ. Бутрымович // Защита зерновых культур от болезней в современном земледелии. - СПб. - 1995. - С. 52-58.

31. Кушниренко, И.Ю. Изучение устойчивости сортообразцов ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости листьев на Южном Урале / И.Ю. Кушниренко, О.С. Афанасенко // Сибирский вестник с.-х. науки. 1984. - № 3. - С. 37-40.

32. Лебедева, Л.В. Внутривидовое разнообразие фитопатогенного гриба Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis / Л.В. Лебедева // Канд. дис. СПб. - 2005. - 142 с.

33. Левитин, М.М. Структура популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя по признаку вирулентности. III. Локальность популяций / М.М. Левитин, О.С. Афанасенко // Миколог, и фитопатол. 1980. - Т. 14, вып. 2. - С. 130-132.

34. Левитин, М.М. Сравнительное изучение популяций Bipolaris sorokiniana (Sacc.) Shoem. по признаку вирулентности / М.М Левитин, А.Н. Петрова, О.С. Афанасенко // Миколог, и фитопатол. 1985. - Т. 19, вып. 2. - С. 154-158.

35. Лукьянова, М.В. / Новые источники и доноры для селекции ячменя / М.В. Лукьянова // Бюлл. ВИР. 1990. - Вып. 201. - С. 26-30.

36. Лукьянова, М.В. Источники устойчивости к сетчатому гельминтоспориозу, видам головни, карликовой ржавчине / М.В. Лукьянова, А.П. Хохлова, О.С. Афанасенко,

37. И.А. Терентьева, Л.Р. Тюлина, Г.М. Богданова, И.Г. Макарова // Каталог мировой коллекции ВИР. Ячмень. СПб. - 1996. - Вып. 684. - 45 с.

38. Лукьянова, М.В. Генетическая коллекция ячменя с идентифицированными генами устойчивости к мучнистой росе / М.В. Лукьянова, И.А. Терентьева // Каталог мировой коллекции ВИР. Ячмень. СПб. - 1997. - Вып. 685. - 76 с.

39. Лэхтиков, О.Н. Селекционная ценность комплексноустойчивых к пятнистостям листьев сортов ячменя / О.Н. Лэхтиков // Вклад молодых ученых в развитие с.-х. производства. Л. - 1988. - С. 2-3.

40. Макарова, И.Г. Генетический анализ устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости / И.Г. Макарова. Канд. дис. - СПб. - 1996. - 195с.

41. Мироненко, Н.В, Молекулярно-генетические механизмы специализации возбудителей «гельминтоспориозных» пятнистостей зерновых культур / Н.В. Мироненко // Автореф. дис. на соиск. учен. степ, д-ра биол. наук. СПб. - 2005. - 42 с.

42. Михайлова, Л.А. Генетика устойчивости пшеницы к бурой ржавчине / Л.А. Михайлова // Типы устойчивости растений к болезням (Материалы научного семинара); РАСХН, ВИЗР, Инновац. центр. СПб. - 2003. - С. 45-60.

43. Мостовой, В. А. Фитопатологическая оценка перспективных сортов ячменя / В.А. Мостовой, Г.И. Брежнева // IX Всесоюз. совещ. по иммунитету растений к болезням и вредителям. Минск. -1991! - Т. 1. - С. 65.

44. Назарова, Л.Н. Болезни озимой ржи / Л.Н. Назарова, Т.В. Фоченкова, Л.Н. Корнева // Защита растений. 1992. - № 5. - С. 52-53.

45. Неттевич, Э.Д. Доноры устойчивости к гельминтоспориозу для селекции ячменя / Э.Д. Неттевич, К.Д. Титова // Селекция и семеноводство. 1979. - № 6.- С. 2223.

46. Никифоров, А.Н. Источники комплексной устойчивости ячменя к грибным болезням на южном Урале / А.Н. Никифоров, И.Ю. Кушниренко, Л.А. Пуалаккайнан // IX Всесоюз. совещ. по иммунитету растений к болезням и вредителям. Минск. - 1991. - Т. 1. - С. 62-63.

47. Обухович, Е.М. Вредоносность сетчатого гельминтоспориоза ячменя в условиях Белоруссии / Е.М. Обухович, В.К. Мицкевич // Тезисы. Докл. Научно-методической конференции. -Жодино. 1982. - С. 80-81.

48. Павлюшин, В.А. Генетика взаимоотношений в патосистеме Hordeum vulgare Pyrenophora teres / В. А. Павлюшин, О.С. Афанасенко, Н.В. Мироненко, О. А. Филатова, Д. Копаньке // Докл. РАСХН. - 2004. - №3. - С. 62-65.

49. Пересыпкин, В.Ф. Атлас болезней полевых культур / В.Ф. Пересыпкин // Киев, Урожай. 1987. - 143 с.

50. Петрова, А.Н. Эффективный метод создания инфекционного фона / А.Н. Петрова // Селекция и семеноводство. 1983. - № 9. - С. 32-33.

51. Петрова, А.Н. Вирулентность популяций возбудителей темно-бурой и сетчатой пятнистостей ячменя и принципы создания инфекционных фонов / А.Н. Петрова // Автореф. канд. дисс. Л. - 1985. - 17 с.

52. Радюкевич, Т.Н. Селекционная ценность образцов ярового ячменя -источников устойчивости к сетчатой пятнистости в условиях Северо-Западного региона России / Т.Н. Радюкевич, Н.В. Иванова, О.С. Афанасенко // Вестник защиты растений. -2002. № 2. - С. 63-66.

53. Рочев, М.В. Устойчивость сортообразцов ячменя к Bipolaris sorokiniana (Sacc.) Shoem. в условиях среднего Урала /М.В. Рочев, М.М. Левитин // Сибирский вестник с.-х. науки. 1986. - № 6 (96). - С. 18-21.

54. Сиренко, А.С. Защита озимого ячменя от болезней в интенсивном земледелии Краснодарского края / А.С. Сиренко // Автореф. канд. дис. СПб. - 1994. - 22 с.

55. Смирнова, З.Г. Источники устойчивости ячменя к сетчатой пятнистости / З.Г. Смирнова, А.Я. Трофимовская // Сб. науч. Тр. по прикл. бот., ген. и сел. 1985. - Т. 95.-С. 52-56.

56. Соловьева, Н.Н. Генетический контроль устойчивости коллекционных образцов и сомаклональных вариантов ярового ячменя к темно-бурой листовой пятнистости и обыкновенной корневой гнили / Н.Н. Соловьева // Канд. дис. СПб. - 2004. -110 с.

57. Трофимовская, А.Я. Ячмень / А.Я. Трофимовская // Л. 1972. - С. 20-36.

58. Трофимовская, А.Я. Источники устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости (Drechslera teres) / А.Я. Трофимовская, О.С. Афанасенко // Докл. ВАСХНИЛ. 1983. - № 3. - С. 19-21.

59. Тырышкин, Л.Г. Наследование устойчивости к листовой пятнистости вызываемой Bipolaris sorokiniana, сорта мягкой пшеницы 181-5 / Л.Г. Тырышкин, Л.А. Михайлова// Сб. науч. Тр. по прикл. бот., ген. и сел. 1993. - Т. 147. - С. 35-39.

60. Тырышкин, Л.Г. Генетика устойчивости пшеницы и ячменя к темно-бурой листовой пятнистости / Л.Г. Тырышкин, Д.Н. Шевченко // Генетика. 1994. - Т. 30. - С. 160.

61. Уровни и тенденции изменения видового состава и внутрипопуляционной структуры, ареалы комплексов вредных и полезных организмов и прогноз опасных фитосанитарных ситуаций по зонам страны СПб. - 2000.

62. Филатова, О.А. Доноры устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости и генетический контроль взаимоотношений в системе растение-патоген / О.А. Филатова // Автореф. канд. дис. СПб. - 2005. - 22 с.

63. Abbott, D.C. Genes for scald resistance from wild barley (Hordeum vulgare ssp. spontaneum) and their linkage to isozyme markers / D.C. Abbott, J. J. Burdon A. H. D. Brown // Euphytica. 1992. - Vol. 61. - P. 225-231.

64. Abbott, D.C. Identification of RFLPs flanking a scald resistance gene on barley chromosome 6 / D.C. Abbott, E.S. Lagudah and A. H. D. Brown // J. Heredity. 1995. - Vol. 86.-P. 152-154.

65. Abdel-Hak, T.M. Sources of resistance to net blotch H. teres (Sacc.) in U. A. R. / Т. M. Abdel-Hak, E. Gebrial, S,M. Dessouki, A.A. Mansour, M. I. Khalifa // Tech. Bull. 1968, № 10. - P.' 1-7.

66. Abdel-Hak, T.M. Net blotch situation in Egypt / T.M. Abdel-Hak, E. Ghobrial, A.M. Hammouda // Proc. Barley Dis. Assoc. Breed. Methodol. Workshop. - 1981. - P. 54-67.

67. Afanasenko, 0. Landraces from Peru new sources of resistance to net blotch of barley / 0. Afanasenko, I. Terentieva, I. Makarova // Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000 b. - P. 71-73.

68. Afanasenko, 0. Investigations on Populations of Pyrenophora teres f. teres, the cause of net blotch of barley / O. Afanasenko // J. Russian Phytopathol. Soc. Vol. 2. - 2001. -P. 9-18.

69. Anikster, Y. Coevolution of rust fungi on Graminae and Liliaceae and their hosts / Y. Anikster, I. Wahl // Ann. Rev. Phytopathol. 1979. - Vol. 117. - P. 367-430.

70. Arabi, M. I. Inheritance of partial resistance to net blotch in barley / M. I. Arabi, A. Sarrafi, G. Barrault, L. Albertini // Plant Breeding. 1990. - Vol. 105. - P. 150-155.

71. Ali, S.M. Inheritance of scald resistance in barley. I. Resistance genes of group A barley cultivars / S.M. Ali // Aust. J. Agric. Res. 1975 a. - Vol. 26. - P. 243-250.

72. Ali, S.M. Pathogenicity of 203 isolates of Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis on 21 barley cultivars / S'. M, Ali, A.H. Mayfield, B.G. Clare // Physiol. Plant Pathol. -1976.-Vol. 9.-P. 135-143.

73. Amy, R.E. Inheritance of resistance in barley to headblight incited by Helni'mthosporium sativum / R.E. Arny // Ph. D. thesis. University of Minnesota. St. Paul. -1951.-83 p.

74. Ayesu-Offei, E.N. Epidemiology of leaf scald of barley / E.N. Ayesu-Offei, M.V. Carter// Austral. J. Agric. Resear. 1971. - Vol. 22. - P. 283-290.

75. Baker, R. J. The inheritance of scald resistance in barley / R. J. Baker, E.N. barter // Can. J. Genet. Cytol. 1963. - Vol. 5. - P. 445-449.

76. Banttari, E.E. Helni'mthosporium headblight resistance in six-row spring barleys / E.E. Banttari, W.H. Anderson and D.C. Rasmusson // Plant Dis. Rep. 1975. - Vol. 59. - P. 274277.

77. Bartletes, F. Studien uber Marssonia graminicola / F. Bartletes // Forschungen auf dem Gebiet der Pflanzenkrankheiten. Berlin. 1928. - P. 73-114.

78. Bilgic, H. Comprehensive genetic analyses revel differential expression of spot blotch resistance in four populations of barley / H. Bilgic, B.J. Steffenson, P.M. Hayes // Theor. Appl. Genet. 2005. - Vol. 111.-P. 1238-1250.

79. Bizimungu, B. Marker-assisted selection in breeding for resistance to scald and QCCJ stem rust in western Canadian barley germplasm / B. Bizimungu, W.C. Legge // J. Can. Barley Gen. 2000. - № 8. - P. 81.

80. Brandl, F.P. Differential of physiological races of Drechslera teres (Sacc.) Shoem. pathogen of net blotch of barley / F.P. Brandl, G. M. Hoffmann // Zeitschrift fur Pflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz. 1991. - Vol. 98, № 1. - P. 47-66.

81. Brown, A.R. Registration of "Dawn" barley / A.R. Brown, D.P. Morey, J.W. Johnson, B.M. Cunfer // Crop science. 1983. - Vol. 23. - P. 597.

82. Brown, J. S. Pathogenic variation among isolates of Rhynchosporium secalis from cultivated barley growing in Victoria, Australia / J. S. Brown // Euphytica. 1985 a. - Vol. 34. -P. 120-133.

83. Brown, J. S. Pathogenic variation among isolates of Rhynchosporium secalis from cultivated barley growing South Eastern, Australia / J. S. Brown // Euphytica. 1985 b. - Vol. 50.-P. 81-89.

84. Brown, J. S. Host range of Pyrenophora teres f. teres isolates from California / J. S. Brown, B.J. Steffenson, R.K. Webster // Plant Dis. 1993. - Vol. 77, №. 9. - P. 942-947.

85. Bruce, A. The population genetics of plant pathogens and breeding strategies for durable resistance / A. Bruce, B.A. McDonald, Celeste, Linde // Euphytica. 2002. - Vol. 124. -P. 163-180.

86. Bryner, C.S. Inheritance of scald in resistance in barley / C.S. Bryner // Ph. D. Thesis, The Pennsylvania State University. University Park. - 1957. - 101 p.

87. Bjarko, M. E. Sources and genetic action of resistance in barley to different virulent types of Pyrenophora teres, the causal organism of net blotch / M. E. Bjarko // Thesis: Montana State University. 1979. - 97 p.

88. Bockelman, H. E. Trisomic analysis of genes for resistance to scald and net blotch • in several barley cultivars / H. E. Bockelman, E. L. Sharp, R. F. Eslick // Can. J. Bot. 1977. -Vol. 55, №15. -P. 2142-2148.

89. Bockelman, H. E. Isolates of Pyrenophora teres from Montana and the Mediterranean region that produce spot-type lesions on barley / H. E. Bockelman, E. L. Sharp, M.E. Bjarko // Plant Dis. 1983.'- Vol. 67. - P. 696-697.

90. Buchannon, K. W. Sources of resistance in barley to Pyrenophora teres / K. W. Buchannon, W.C. McDonald // Canad. Plant Sci. 1965. - Vol. 45, № 2. - P. 189-194.

91. Buchannon, K. W. Inheritance of reaction to Septoria passerinii Sacc. and Pyrenophora teres (Died.) Drechsl., and row number, in barley / K. W. Buchannon // Ph. thesis, University of Saskatchewan. Saskatoon. 1961. -40 p.

92. Caddel, J.L. Sources of resistance to net blotch of barley in Morocco / J.L. Caddel, R.D. Wilcoxson // Plant Dis. Rep. 1975. - Vol. 59. - P. 491-494.

93. Caldwell, R.M. Rhynchosporium secalis of barley, rye and other grasses / R.M. Caldwell //J. Agric. Res. 1937,- Vol. 55.-P. 175-198.

94. Ceoloni, L. Race differentiation and search for sources of resistance to Rhynchosporium secalis in barley in Italy / L. Ceoloni // Euphytica. 1980. - Vol. 29. - P. 547553.

95. Cherif, M. Virulence spectrum to barley in some isolates of Pyrenophora teres / M. Cherif, M. Harabi //Proc. of Intern, workshop on barley leaf blights, ICARDA (7-11 April). -Aleppo.- 1993.-P. 15-16.

96. Choo, T.M. Tests for randomness among doubled-haploid lines derived by the bulbosam method in barley {Hordeum vulgare L.) / T.M. Choo, K.M. Ho, T. Konishi, R.A. Martin // J. SABRAO. 1992. - Vol. 24. - P. 87-92.

97. Clark, R.V. Distribution and severity of root and leaf disease and cereal leaf butler damage of barley in western Ontario // R.V. Clark // Can. Plant Dis. Surv. 1978. - Vol. 58, № 2. - P. 33-38.

98. Coja, M. A study of the barley parasite Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J.Davis in Serbia and the development of sources of resistance / M. Coja // Rev. of Res. Work at the Faculty of Agriculture. Belgrade. - 1998. - Vol. 43, № 1. - P. 25-39.

99. Cromey, M. G. Pathogenic variation in Rhynchosporium secalis on barley in New Zealand / M. G. Cromey // NZI Agric. Res. 1987. - Vol. 30. - P. 95-99.

100. Cromey, M. G. Integrated management of scald in New Zeland barley crops / M. G. Cromey // Proceed, of the second Int. workshop on barley leaf blight, ICARDA (7-11 April). -Aleppo.-2002. P. 120-126.

101. Cselenyi, L. Inheritance of resistance to Rhynchosporium secalis in spring barley (Hordeum mlgare L.) / L. Cselenyi, F. Ordon, W. Friedt // Plant Breed. 1998. - Vol. 117, - P. 23-26.

102. Deadman, M.L. The effect of Drechslera teres seed infection on spring barley seedling growth / M.L. Deadman, B.M. Cooke // Ann. Appl. Biol. 1988. - Vol. 112. - P. 385388.

103. Douglas, G.B. Quantitative genetics of net blotch resistance in barley / G.B. Douglas, I.I. Gordon // N. Z. J. Agr. Res. 1985. - Vol. 28, № 1. - P. 157-164.

104. Dyck, P.L. Inheritance of resistance in barley to several physiological races of the scald fiings / P. L. Dyck, C. W. Schaller // Can. J. Genet. Cytol. 1961. - Vol. 3. - P. 153-164.

105. Evans, S.G. Observations on the development of leaf blotch and net blotch of barley debris / S.G. Evans // Plant Pathol. 1969. - Vol. 18, № 3. - P. 116-118.

106. Faiad, M.G.R. Evaluation of fungi in seed germplasm before long term storage / M G R. Faiad, M.M.V.S. Wetzel, A.N. Salomao and R. Cunha // Seed Sci. Technol. 1996. -Vol. 24.-P. 505-511.

107. Fetch, T.G.Jr. Identification of Cochliobolus sativus isolates expressing differential virulence on two-row barley genotypes from North Dacota / T.G. Jr. Fetch, B.J. Steffenson//Can. J. Plant Pathol. 1994. - Vol. 16. - P. 202-206.

108. Fetch, T.G.Jr. Rating scales for assessing infection responses of barley infected with Cochliobolus sativus / T.G. Jr. Fetch, B.J. Steffenson // Plant Dis. 1999. - Vol. 83. - P. 213 -217.

109. Frecha, S. H. Inheritance of the resistance to Rhynchosporium secalis in barley / S. H. Frecha //Bol. Genet. Inst. Fitotec. Castelar. - Vol. 4. - P. 5-13.

110. Fukuyama, Т. Wide resistance to scald among introductions from Turkey, Ethiopia and Algeria / T. Fukuyama, T. Matsumoto, T.M. Grime, W. J. R. Boyd // Proc. of the 8lh International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000. - P. 110-112.

111. Gacek, E. Studies on the resistance of barley to net blotch caused by Pyrenophora teres (Died.) Drechsl. / E. Gacek // Hodowla Rosl. Aklim. Nasienn. 1979. - Vol. 23. - P. 7383.

112. Garvin, D. F. Inheritance and chromosome locations of scald-resistance genes derived from Iranian and Turkish wild barleys / D. F. Garvin, A. H. D. Brown, J. J. Burdon // Theor. Appl. Genet. 1997. - Vol. 94. - P. 1086-1091.

113. Garvin, D. F. Genetic mapping of the barley Rrsl4 scald resistance gene with RFLP, isozyme and seed storage protein markers / D. F. Garvin, A. H. D. Brown, H. Raman, B. J. Read // Plant Breed. 2000. - Vol. 119. - P. 193-196.

114. Gamba, F. First report of differential virulence in Uruguayan isolates of Pyrenophora teres / F. Gamba, A. Tekauz // Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000. - P. 113-114.

115. Gamba, F. Variation in virulence within a Uruguayan population of Cochliobolus sativus I F. Gamba, E. Estramil // Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA (7-11 April). Aleppo. - 2002. - P. 20-21.

116. Genger, R. K. Molecular markers for wild barley-derived scald resistance genes / R. K. Genger, A. H. D. Brown, J. J. Burdon // Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000. - P. 117-119.

117. Gilchrist,- S.L. Selecting sources of resistance to Cochliobolus sativus under subtropical conditions and preliminary loss assessment / S.L. Gilchrist, F.H. Vivar, C.F. Gonzales and C. Velazquez // Rachis. 1995. - Vol. 14. - P. 35-39.

118. Graner, A. RFLP mapping in barley of a dominant gene conferring resistance to scald (Rhynchosporium secalis) / A. Graner, A Tekauz // Theor. Appl. Genet. 1996. -Vol. 93. -P. 421-425.

119. Gray, G.G. Genetics systems in the net blotch disease complex of barley / G.G. Gray // Rh. D. Thesis, North Dakota State Univ. Fargo. - 1966. - 65 p.

120. Criffe, F. Correlated inheritance of botanical characters in barley and the manner reaction to Helminthosporium sativum / F. Griffe // J. A. Agric. Res. Vol. 30. - P. 915-933.

121. Grannerod, S. Genetic analysis of resistance to barley scald (Rhynchosporium secalis) in the Ethiopian line "Abyssinian" (CI 668) / S. Grannerad, A.G. Maray, J. MacKey, A. Tekauz, G.A. Penner, A. Bjornstad // Euphytica. 2002. - Vol. 126. - P. 235-250.

122. Goodwin, S. В. Analysis of gene-for-gene interactions, and variability for isozyme and pathogenicity markers in Rhynchosporium secalis / S. B. Goodwin // Ph. D. thesis. University of California. Davis. - 1988. - 133 p.

123. Goodwin, S. B. A nomenclature for Rhynchosporium secalis pathotypes / S.B. Goodwin, R. W. Allard, R. K. Webster // Phytopathology. 1990. - Vol. 80, № 12. - P. 13301336.

124. Goodwin, S.B. Isozyme variation within and among populations of Rhynchosporium secalis in Europe, Australia and the United States / S.B. Goodwin, M.A. Saghai-Maroof, R.W. Allard, R.K. Webster // Mycol. Res. 1993. - Vol. 97. - P. 49-58.

125. Goodwin, S.B. Evidence for mutation and migration as sources of genetic variation in populations of / S.B. Goodwin, R.K. Webster, R.W, Allard // Phytopathol. 1994. Vol. 84. - P. 1047-1053.

126. Gray, G.G. Genetic system in the net blotch disease complex of barley / G.G. Gray // Ph. D. Thes, North Dakota State University. Fargo. - 1966. - 65 p.

127. Griffe, F. Correlated inheritance of botanical characters in barley, and manner of reaction to Helminihosporium sativum / F. Griffe // J. Agric. Res. 1925. - Vol. 30. P. 915-935.

128. Gustafsson, M. Present research projects in barley at the Institute of Plant Breeding / M. Gustafsson, R. von Bothmer // Svalov. J. Swed. Seed Ass. 1994. - Vol. .104. - P. 211-216.

129. Habgood, R. M. The inheritance of resistance to Rhynchosporium secalis in barley / R. M. Habgood, J.D. Hayes // Heredity. -1971. Vol. 27. - P. 25-37.

130. Hampton, J,G. The presence and effects of seed-borne and soil-borne Drechslera sorokiniana on barley in New Zealand I. Occurrence of the pathogen / J.G. Hampton // N.Z.J, exper. Agr; 1979. - Vol. 7. - P. 383-398.

131. Harranger, J. Les 'taches brunes de l'orge / J. Harranger // Phytoma. 1982. - № 334.-P. 17-19.ф 165. Hartleb, H. Das resistanzverhalten von saatgersten von Drechslera teres (Sacc.)

132. Shoem. / H. Hartleb, V. Meyer, С. O. Lehmann // J. Phytopathol. 1990. - V. 26. - P. 257-264.

133. Hansen, L. R. Virulence spectrum of Rhynchosporium secalis in Norway and sources of resistance in barley / L. R. Hansen, H.A. Magnus // Phytopathol. Vol. 76. - 1973. - P. 303-313.

134. Hawksworth, D.L. Ainsworth a. Bisby's Dictionary of the fungi. 8 th ed. IMI. -1995.-616 p.

135. Hayes, H.K. Resistance of barley to Helminthosporium sativum / H.K. Hayes, E.C. Stakfnan//Phytopathology. 1921.-Vol. 11.-P. 405-411.

136. Herdam, H. Symptome der Netzfleckenkran kheit (Pyrenophora teres) und der Helminthosporium Blattfleckenkrankheit (Cochliobolus sativus) an Gerste / H. Herdam, E. Richter // Nachrichtenbl. Pflanzenschutz. DDR. - 1983. - Vol. 37. № 10. - P. 203-205.

137. Ho, K.M. Genetic studies on net blotch resistance in barley cross / K.M. Ho, A. Tekauz, T.M. Choo, R.A. Martin // Can. J. Plant Sci. 1996. - Vol. 76. - P. 715-719.

138. Houston, B.R. Newly determined races of barley scald fungus in California / B.R. Houston, L.J. Ashworth // Phytopathology. 1957. - Vol. 47. - P. 525.

139. Hrushovetz, S.B. Cytological studies of Ascus development in Cochliobolussativus / S.B. Hrushovetz // Canad. J. Bot. 1956. - Vol. 34. - P. 641-651.

140. Huang, H.C. Histology of Cochliobolus sativus infection in subcrown internodes of wheat and barley / H.C. Huang, R.D. Tinline // Can. J. Bot. 1976. Vol. 54. - P. 1344-54.

141. Ito, S. The ascigerous forms of some graminicolous species of Helminthosporium in Japan / S. Ito, K. Kuribayashi // J. Facul. Agric. Hokkaido Imp.Univ. 1931. - Vol. 29. - P. 85-125.

142. Jackson, L.F. Race differentiation, distribution and frequency of Rhynchosporiumщ secalis in California / L.F. Jackson, R. K. Webster // Phytopathol. 1976. - Vol. 66. - P. 719-725.•

143. Jackson, L.F. The dynamics of a controlled population of Rhynchosporium secalis changes in race composition and frequencies / L.F. Jackson, R. K. Webster // Phytopathol. -1976.-Vol. 66.-P. 726-828.

144. Jackson, L.F. Genetic analysis of changes in scald resistance in barley composite cross / L.E. Jackson, R.K. Webster, R.W. Allard, A.L. Kahler // Phytopathol. 1982. - Vol. 72. -P. 1069-1072.

145. Jalli, M. Effect of host barley cultivar on virulence of Drechslera teres / M. Jalli, J. Robinson//J. Appl. Genet. 1997. - Vol. 38B. - P. 17-27.

146. Jana, S. Responses of wild and cultivated barley from West Asia to net blotch and spot blotch // S. Jana, K.L. Bailey // Crop Science. 1995. - Vol. 35, № 1. - P. 242-246.

147. Jevtic, R. Resistance of barley to Bipolaris sorokiniana / R. Jevtic, N. Przulj, V. Momcilovic // Proceedings: Breeding of small grains. 1998. - P. 305-309.

148. Jin, Y. Evolution of cultivated and wild barley for resistance to pathotypes of Puccinia hordei with wide virulence / Y. Jin, B.J. Steffenson, and H.E. Bockelman // Genet. Res. Crop Evol. 1995. - Vol. 42. - P. 1-6.

149. Jonsson, R. Inheritance of resistance to Pyrenophora teres f. teres in spring barley / R. Jonsson, T. Sail, T. Kraft, M. Gustafsson // Plant Breeding. 1999. - Vol. 118. - P. 313-317.

150. Jorgensen, J.H. Sources and genetucs of resistance to fungal pathogens / J.H. Jsrgensen // In: P.R. Shewry (Ed:), Barley: Gen., Biochem., Mol. Biol, and Biotech. Alden Press, Oxford.-1992.-P. 442-457.

151. Jeirgensen, H.J. Pathogenic variation of Rhynchosporium secalis in Denmark and sources of resistance in barley / H.J. Jorgensen, V. Smedegard-Petersen // Plant Disease. 1995. -Vol. 79.-P. 297-301.

152. Kajiwara, T. Studies on the strains of the barley scald fungus, Rhynchosporium secalis (Oud.) Davis / T. Kajiwara, Y. Iwata // Jap. Bull. Nat. Inst. Agric. Sci. Ser. 1963. - Vol. 15.-P. 67-82.

153. Kay, J.G. Host range of Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis / J.G. Kay, H. Owen // Trans. Brit. Mycol. Soc. 1973. - Vol. 60, № 3. - P. 413-422.

154. Kenneth, R. On the taxonomy, morphology and geographic origins of Pyrenophora teres Drechsler and allied species / R. Kenneth // Bull, of Res. Council, of Israel, sect. D. 1962. - Vol. 11, № 2. - P. 55-82.

155. Kenneth, R. Problems in breeding barley resistant to net blotch disease in Israel / R. Kenneth, Y. Atzmon, I. Khair // Proc. of the first Israel Congr. of Plant Pathol. 1967. - P. 46-47.

156. Kingsland, G.C. A leaf spot diseases of wheat caused by Helminthosporium sorokiniana in South Carolina / G.C. Kingsland // Phytopathol. 1979. - Vol. 69. - P. 529.

157. Khan, T. N. Turkish barley varieties as a source of resistance to net blotch / T. N. Khan // Euphytica. 1971. - Vol. 20. - P. 292-298.

158. Khan, T. N. Host specialization by Western Australian isolates causing net blotch symptoms on Hordeum / T. N. Khan // Trans. Br. Mycol. Soc. 1973. - Vol. 6, № 1. - P. 215220.

159. Khan, T. N. Relationship between net blotch (Drechslera teres) and losses in grain yield of barley in Western Australia / T. N. Khan // Aust. J. Agric. Res. 1987. - Vol. 38. -P. 671-679.

160. Khan, T. N. Genetics of host resistance to net blotch in barley / T. N. Khan, W.J. Boyd // in: Barley Genetics. II. R.A. Nilan, ed. Washington State University Press, Pullman. -1971.-P. 484-492.

161. Khan, T. N. Inheritance of resistance to net blotch in barley. II. Genes conditioning resistance against race WA-2 / T. N. Khan, W.J. Boyd // Canad. J. Genet, and Cytol. 1969 a. - Vol. 11. - P. 592-597.

162. Khan, T. N. Physiologic specialization in Drechslera teres / T. N. Khan, W.J. Boyd // Austral. J. Biol. Sci. 1969 b. - Vol. 22. - P. 1229-1235.

163. Khan, T. N. Occurrence and pathogenicity of Drechslera teres isolates causing spot type symptoms on barley in Western Australia / T.N. Khan, A. Tekauz // Plant Dis. 1982. - Vol. 66. - P. 423-425.

164. Khan, T.'N. / T.N. Khan, R. McLean, P.A. Portmann // Euphytica. 1984 a. -Vol. 33.-P. 903-906.

165. Khan, T. N. / T.N. Khan, P.A. Portmann, R. McLean // Euphytica. 1984 b. -Vol. 33.-P. 897-901.

166. Kline, D. M. Pathogenecity of isolates of Cochliobolus sativus from cultivated and wild gramenious hosts from the western hemisphere to species of Gramineae / D.M. Kline, R.R. Nelson / Plant. Dis. Reptr. r 1963. 47. - P. 890 - 895.

167. Kline, D.M. Variation in mating capacities among 103 isolates of Cochliobolus sativus/ D.M. Kline, R.R. Nelson//Phytopathology. 1968. - Vol. 58. - P. 1055.

168. Kline, D.M. The inheritance of factors in Cochliobolus sativus conditioning lesion induction -on gramineous hosts / D.M. Kline, R.R. Nelson // Phytopathology. 1971. - Vol. 61, №9.-P. 1052-1054.

169. Kolapudi, D.M. Epidemiological studies in relation to the breeding for resistance to net blotch (Drechslera teres (Sacc.) Shoem.) of barley (Hordeum vulgare L.) / D.M. Kolapudi // Ph. Thesis. Nedlands: University of Western Australia. 1985. - 88 p.

170. Lacicowa, В. Бобовые растения хозяева Helminthosporium sorokiniana Sacc. / B. Lacicowa // Ochrona Roslin. 1972. - № 8-9. - P. 9-10.

171. Legge, W.G. Reaction of Turkish barley accessions to Canadian barley pathogens / W.G. Legge, D R. Metcalfe, A.W. Chiho, J.W. Martens, and A. Tekauz // Can. J. Plant Sci. -Vol. 76.-P. 927-931.

172. Lehmann, L. Isolation and transfer of disease resistance from Hordeum spontaneum / L. Lehmann // Nordisk Jordbrudsforskning. 1988 a. - Vol. 70. - P. 530-532.

173. Louw, J.P.J/ Characterization of Phyrenophora isolates associated with spot and net type lesions on barley in South Africa / J.P.J. Louw, D.Victor, P.W. Crous, G. Holz, B.J.H. Janse // J. Phytopathol- Phytopathol Zeit. 1995. - Vol. 143. - P. 129-134.

174. Luthra, J.K. Inheritance of seedling resistance to Helminthosporium blight in. barley / J.K. Luthra, M.V.Rao // Indian J. Genet. Plant Breed. 1973. - Vol. 33. - P. 378-379.

175. Lyngs, Pathogenic variation of Rhynchosporium secalis in Denmark and sources of resistance in barley / Lyngs, H.J. Jorgensen, V. Smedegard-Petersen // Plant Dis. 1995. -Vol. 79. - P. 297-301.

176. Mackie, W.W. Inheritance of resistance to barley scald / W.W. Mackie // Phytopathology. Vol. 19. - P. 1141.

177. Manninen, O. Application of BARE-1 retrotransposon markers to the mapping of a major resistance gene for net blotch in barley / O. Manninen, R. Kalendar, J. Robinson, A.H. Schulman // Mol. Gen. Genet.- 2000. Vol. 264. - P. 325-334.

178. Martin, R.A. Disease progression and yield loss in barley associated with net blotch, as influenced by fungicide seed treatment / R.A. Martin // Can. J. Plant Pathol. 1985. -Vol. 7.-P. 83-90.

179. McDermott, J.M. Genetic variability for pathogenicity, isozyme, ribosomal DNA and colony color variants in populations of Rhynchosporium secalis / J.M. McDermott, B.A. McDonald, R.W. Allard, R.K. Webster // Genetics. 1989. - Vol. 122. - P. 561-565.

180. McDonald, В.A Diseases and other factors affecting average yields of barley in Manitoba, 1954-1968 / B.A. McDonald // Can. Plant Dis. Surv. Dec. 1970. - Vol. 50, № 4. - P. 113-117.

181. McDonald, B.A. The population genetic of fungi: tools and techniques / B.A. McDonald // Phytopathology. 1997. - Vol. 87. - P. 448-453.

182. McDonald, B.A. Coevolution of host and pathogen populations in the Hordeum vulgare-Rhynchosporium secalis pathosystem / B.A. McDonald, J.M. McDermott, R. W. Allard, R.K. Webster//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - Vol. 86. - P. 3924-3927.

183. McDonald, B.A. Genetic structure of Rhynchosporium secalis in Australia / B.A. McDonald, J. Zhan, J.J. Burdon // Phytopathol. 1999. - Vol. 89. - P. 639-645.

184. Minarikova, V. Analysis of populations of Pyrenophora teres on Barley in the Czech Republic / V. Minarikova, I. Polisenska// Plant Protection Sci. 1999. - Vol. 35. - P. 115120.

185. Mironenko, N.V. Molecular variation and genetic structure in field populations of Pyrenophora teres causing net blotch in barley / N. V. Mironenko // 5-th Mendel centenary Congress. Brno. -2000. -P. 181.

186. Mode, C.Y. Two additional factors for host resistance to net blotch in barley / C.Y. Mode, C. W. Schaller // Agric. J. 1958. - Vol. 50. - P. 15-18.

187. Mohamed, M.S. Genetics of resistance in barley to Rhynchosporium secalis scald, Rhynchosporium secalis (Oud.) Davis / M.S. Mohamed // Ph. D. thesis. University of California. -Davis. 1975.-70 p.

188. Moreno, R. Especializacion patogenica de Rhynchosporium secalis en los valles altos de Mexico / R. Moreno, H. Vivar // Turrialba. 1975. - Vol. 25. - P. 223-225.

189. Moseman, J.G. Resistance ofHordeum spontaneum collected in Israel to infection with Erysiphe graminis hordei / J.G. Moseman, E. Nevo and D. Zohary // Crop. Sci. 1983. -Vol. 23.-P. 1115-1119.

190. Nevo, E. Genetic diversity and environmental associations of barley, Hordeum spontaneum, in Israel / E. Nevo, D. Zohary, A.H.D. Brown, and Haber // Evolution. 1979. -Vol. 33.-P. 815-833.

191. Newman, P. L. Evidence of asexual recombination in Rhynchosporium secalis / P. L. Newman, H. Owen // Plant Pathol. 1985. - Vol. 34. - P. 338-340.

192. Newton, A.C. Somatic recombination in Rhynchosporium secalis / A.C. Newton // Plant Pathology. 1989. - Vol. 38. - P. 71-74.

193. Olofsson, B. Bladflaksjukdomar pa korn och havre / B. Olofsson // Vaxtskyddsrapp Konsulentavd. vaxtskydd Inst, vaxt-och skogsskyold. Jordbruk. - 1982. - № 20.-P. 134-146.

194. Owen, H. Physiologic specialization in Rhynchosporium secalis / H. Owen // Trans. Br. Mycol. Soc. 1958. - Vol. 41. - P. 99-108.

195. Owen, H. Physiologic races of Rhynchosporium secalis on cultivated barley / H. Owen //Trans. Br. Mycol. Soc. 1963. - Vol. 46.-P.604-608.

196. Ozoe, S. Studies on the Rhynchosporium secalis scald of barley and its control / S. Ozoe// Shimane Prefectural Agric. Instit. Bull. 1956. - Vol. 1. - P. 115-122.

197. Patil, V. Genetics of Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis) resistance in barley (Hordeum vulgare L.) / V. Patil // Ph. D. thesis. Agriculture University of Norway. -Norway.-2001.

198. Patil, V. Resistance to scald (Rhynchosporium secalis) in barley (Hordeum vulgare L.). II. Diallel analysis of near-isogenic lines / V. Patil, A. Bjomstad, H. Magnus, J. MacKey // Hereditas. 2002. - P. 186-197.

199. Patil, V. Molecular mapping a new gene Rrs4ci iu49 for resistance to barley scald (Rhynchosporium secalis) / V. Patil, A. Bjomstad, J. MacKey // Mol. Breed. 2003. - Vol. 12. P. 169-183.

200. G. Legge, P. A. Burnett, T. Ferguson, J. F. Helm // Euphytica. 1996. - Vol. 92. - P. 367-374.

201. Penner, G.A. Identification of isolate specific sources of scald resistance in Turkish barley (Hordeum vulgare) accessions / G.A. Penner, W. G. Legge, A. Tekauz // Euphytica. 1998. - Vol. 99. - P. 111-114.

202. Piening, L.J. Development of barley net blotch from infested straw and seed / L. J. Piening // Can. J. of Plant Sci. 1968. - Vol. 48, № 6. - P. 623.

203. Pinnschmidt, H.O. Variability of scald resistance in spring barley cultivars as affected by the environment and the pathogen population / H.O. Pinnschmidt, M. Rasmussen //

204. Abstracts of 2nd International workshop on barley leaf blights, ICARDA (7-11 April). Aleppo. -2002. - P. 37.

205. Platz, G.J. Pathotype variation of the Australian net blotch population / G.J. Platz, K. L. Bell, R. G. Rees, V. J. Galea // Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000. - P. 160-162.Щ

206. Poehlman, J.M. Agronomic characteristics and disease resistance of winter barleys tested in Missouri / J.M. Poehlman // Res. Bull. Univ. Miss. Agric. Exp. Stat. 1949. -№442.-P. 1-28.

207. Pon, D.S. Physiologic specialization and variation in Helminthosporium teres / • D.S. Pon//Phytopathol. 1949.-Vol. 39.-P. 18.

208. Price, A.M. Registration of "Starling" barley / A.M. Price, C.A. Griffey, W.L. Sisson, D.E. Brann // Crop science. 1996 a. - Vol. 36. - P. 1077.

209. Price, A.M. Registration of "Pamunkey" barley / A.M. Price, C.A. Griffey, W.L. Sisson, D.E. Brann // Crop science. 1996 b. - Vol. 36. - P. 1078.

210. Price, A.M. Registration of "Callao" barley / A.M. Price, C.A. Griffey, W.L. Sisson, D.E. Brann // Crop science. 1996 c. - Vol. 36. - P. 1077.щ 252. Proeseler, G.H. Resistenzeigenschaften im Gerstenund Weizensortiment

211. Raemaekers, R.H. Helminthosporium sativum: disease complex on wheat and sources of resistance in Zambia / R.H. Raemaekers // Wheat production constraints in tropical environments. -CIMMYT.- 1988. -P. 175-185.

212. Rau, D. AFLP genetic diversity of Pyrenophora teres Drechsler on barley landraces / D. Rau, A.H.D. Brown, G. Attene, V. Balmas, C.L. Brubaker, E. Saba // Papa EUCARPIA Cereal Section Meeting (21-25 November). 2002. - Salsomaggiore (Italy). - P. 185.

213. Riddle, O.C. Inheritance of resistance to scald in barley / O.C. Riddle, F.N. Briggs // Hilgardia. 1950. - Vol. 20. - P. 19-27.

214. Robinson, J. Genes for resistance in barley to Finnish isolates of Rhynchosporium secalis / J. Robinson, H. Lindqvist, M. Jalli // Euphytica. 1996. - Vol. 92. - P. 295-300.

215. Salamati, S. Leaf blotch severity on spring barley infected by isolates of Rhynchosporium secalis (Oudem.) J.J. Davis under different temperature and humidity regimes / S. Salamati, H.A. Magnus // Plant Pathol. 1997. - Vol. 46, № 6. - P. 939-945.

216. Salamati, S. Pathogenicity of Rhynchosporium secalis isolates from Norway on 30 cultivars of barley / S. Salamati, A. M. Tronsmo // Plant Pathol. 1997. - Vol. 46, № 6. - P. 416-424.

217. Sarasola, J.A. Reaccion de algunas cebadas con respecto a Rhynchosporium secalis en Argentina / J.A. Sarasola, M.D. Campi // Rev. de Invest. Agric. 1947. - Vol. 1. - P. 243-260.

218. Sato, K. An establishment of seedling test and a search for resistant varieties to net blotch in barley / K. Sato, K. Takeda // Bull. Res. Inst. Biores. Okayama Univ. 1992. - Vol. 1.-P. 75-90.

219. Sato, K. Pathogenic variation of Pyrenophora teres isolates collected from Japanese and Canadian spring barley / K. Sato, K. Takeda // Bull. Res. Inst. Bioresour. Okayama Univ.- 1993.-Vol. l.-.P. 147-158.

220. Sato, K. Sources of resistance to nrt blotch in barley germplasm / K. Sato, K. Takeda // Bull. Res. Inst. Bioresour. Okayama Univ. 1994. - Vol. 2. - P.91-102.

221. Sato, K. Net blotch resistance in wild species of Hordeum / K. Sato, K. Takeda // Euphytica. 1997. - Vol. 95. - P. 179-185.

222. Schaller, C.W. Inheritance of resistance to net blotch of barley / C.W. Schaller // Phytopathol. 1955. - Vol. 45. - P. 174-176.

223. Schaller, C.W. Sources of resistance to net blotch of barley / C.W. Schaller, G.A. Wiebe // Agr. J. 1952. - P. 334-336.

224. Scheffer, R.P. Role of toxins in evolution and ecology of plant pathogenic fungi / R.P. Scheffer //Experientia. 1991. - Vol. 47. - P. 804-811.

225. Schein, R.D. Pathogenic specialization in Rhynchosporium secalis / R.D. Schein // Phytopathology. 1958. - Vol. 48. - P. 477-480.

226. Schweitzer, G. RFLP markers linked to scald (Rhynchosporium secalis) resistance gene Rh2 in barley / G. Schweizer, M. Baumer, G. Daniel, H. Raugel, M.S. Roder // Theor. Appl. Genet. 1995. - Vol. 90. - P. 920-924.

227. Schweitzer, G. Mapping of Rhynchosporium secalis resistance genes in barley / G. Schweizer, L. Hartl, M. Schonfeld, M. Roeder, M. Baumer // Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000. - P. 172 - 174.

228. Schweitzer, G.F. Genetic mapping of a novel scald resistance gene Rrs 15a 8288 in barley / G.F. Schweitzer, M. Herz, S. Mikolajeewski, M. Bremner, L. Hartl, M. Baumer // Abstract 9th Intern. Barley Genet: Sympos., Brno. -2004.

229. Selim, A. K. A. Inheritance of mature plant reaction to net blotch disease of barley / A. K. A. Selim, A. M. Omar, S. M. Desouki, L. К. M. Mohamed // Poljoprivz. 1973. -Vol. 22. - P. 65-70.

230. Semeane, Y. Importance and control of barley leaf blights in Ethiopia / Y. Semeane//Rachis. 1995. - Vol. 14. - P. 83-89.

231. Semeane, Y. Breeding Ethiopian barley landrace lines for combined resistance to leaf scald and net blotch / Y. Semeane // Abstracts of the 2nd Intern, workshop on barley leaf blights, ICARDA (7-11 April). Aleppo. - 2002. - P. 33.

232. Shein, R.D. Pathogenic specialization in Rhynchosporium secalis / R.D. Shein // Phytopathology. 1958. - Vol. 48. - P. 477-480.

233. Shipton, W.A. Effect of net blotch infection of barley on grain yield and quality / W.A. Shipton // Aust. J. Exp. Agric. Anim. Husb. 1966. - Vol. 6. - P. 437-440.

234. Shipton, W.A. Scald of barley / W.A. Shipton, W.J. Boyd, S.M. Ali // Rev. Plan. Pathology. 1974. - Vol. 53. -P. 840-861.

235. Skoropad, W.P. Barley scalds in prairie provinces of Canada / W.P. Skoropad // Commonw. Phytop. News. 1960. - Vol. 6. - P. 25-27.

236. Skoropad, W.P. Effect of alternate wetting and drying on sporulation and survival of Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis // W.P. Skoropad // Phytopatology. 1962. - Vol. 52.-P. 752.

237. Smedegard-Petersen, V. Pyrenophora teres f. maculate f. nov. and Pyrenophora teres f. teres on barley in Denmark / V. Smedegard-Petersen // In: Yearbook Roy. Vet. Agric. Univ. Copenhagen. - 1971. - P. 124-144.

238. Smedegard-Petersen, V. Reduction in yild and grain size of barley due to attack by net blotch fungus Pyrenophora teres / V. Smedegard-Petersen // Revew of Plant Pathol. -1974.-Vol. 53, №9.-P. 108-117.

239. Smedegard-Petersen, V. Inheritance of genetic factors for symptoms and pathogenicity of hybrids of Pyrenophora teres and Pyrenophora graminea / V. Smedegard-Petersen // Phytopathol. r 1977. Vol. 7, № 89. - P. 193-202.

240. Segaard, B. Barley: genes and chromosomes / B. Sogaard, P. von Wettstein-Knowles // Carlsberg Res. Comm. 1987. - Vol. 52. - P. 123-196.

241. Stakman, E.C. The determination of biologic forms of Puccinia graminis of Triticum ssp. / E.C. Stakman, M.N. Levine // Minnesota Agr. Exper. Stat. Techn. Bull. 1922. -№8. -P. 38-41.

242. Starling, T-M- Inheritance of reaction to Rhynchosporium secalis in winter barley cultivars / T.M. Starling, C.W. Roane, K. Chi // In: Proc. 2nd Int. Barley Genetics Symp.

243. Pullman. Washington. - 1971. -P. 513-519.

244. Steffenson, B. J. Durable resistance to spot blotch and stem rust in barley / B. J. Steffenson // Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000. -P. 39-44.

245. Steffenson, B. J. Reduction in yield loss using incomplete resistance to Pyrenophora teres f. teres in barley / B. J. Steffenson, R. K. Webster, L.F. Jackson // Plant Disease. 1991. - Vol. 75, № 1. - P. 96-100.

246. Steffenson, B. J. Pathotype diversity of Pyrenophora teres f. teres on barley / B.

247. J. Steffenson, R. K. Webster // Phytopath. 1992 a. - Vol. 82. - P. 170-177.

248. Steffenson, B. J. to Quantitative resistance to Pyrenophora teres f. teres in barley / B. J. Steffenson, R. K. Webster // Phytopath. 1992 b. - Vol. 82, № 4. - P. 407-411.

249. Steffenson, B.J. Sources of resistance'to net andspot blotch in barley / B.J.

250. Steffenson, T. Fetch, D. Wesenberg, H. Bockelman // North Dakota State University. Fargo. -1999.•301. Tekauz, A. Effect of plant age and leaf position on the reaction of barley to Pyrenophora teres // J. Can. Plant Pathol. 1986. - Vol. 8. - P. 380-386.

251. Tekauz, A. Characterization and distribution of pathogenic variation in

252. Pyrenophora teres f. teres and P. teres f. maculata from Western Canada / A. Tekauz // Canad.• J. of Plant Pathol. 1990. - Vol. 12. - P. 141-148.

253. Tekauz, A. Pathogenic variation in Rhynchosporium secalis on barley in Canada / A. Tekauz// Can.J. of Plant Pathol. Vol. 13. -1991. - P. 298-304.

254. Tekauz, A. Distribution and sources of resistance to biotypes of Pyrenophora teres in Western Canada / A. Tekauz. K.W. Buchannon // Can. J. Plant Sci. 1977. - Vol. 57.1. P. 389-395.

255. Tinline, R.D. Studies on the perfect stage of Helminthosporium sativum / R.D. Tinline // Can. J. Bot. 1951. - Vol. 29, № 5. - P. 467-478.

256. Tinline, R.D. Cochliobolus sativus, a pathogen of wide host range / R.D. Tinline // Advances in Plant Pathology. Eds. D.S. Ingram et al. Acad. Press. - London. - 1988. - Vol.6.-P. 113-122.

257. Tsuchiya, D. Cytological karyotyping of three Cochliobolus spp. By the germ tube burst method / D. Tsuchiya, M. Taga // Phytopathology. 2001. - Vol. 91. - P. 354-360.

258. Tyryshkin, N.N. Voronkova // J. Appl. Genet. 1997. - Vol. 38 B. - P. 141-145.

259. Valjavec-.Gratian, M. Genetics of virulence in Cochliobolus sativus and resistance in barley / M. Valjavec-Gratian, B.J. Steffenson // Phytopathology. 1997. - Vol. 87. -P. 11401143.

260. Wallwork, H. The use differential isolates of Rhynchosporium secalis to determine resistance to scald in barley / H. Wallwork, L. Scott, P. Davies, K. Williams, and J.

261. Cheong // Proceed, of the second Int. workshop on barley leaf blight, ICARDA. Syria. - 2002. P. 311-318.

262. Wallwork, H. Resistance to scald identified uing differential isolates / H. Wallwork, L. Scott and K. Williams // In proceedings of the 9th Intern/ Barley Genet. Sympos. (20-25 June). Brno, Czech Republic. - 2004. - P. 140.

263. Wells, S.A. Inheritance of reaction to Rhynchosporium secalis in barley / S.A. Wells, W. P. Skoropad //Can. J. Plant Sci. 1963. - Vol. 43. - P. 184-187.

264. Whittle, A.M. Cochliobolus sativus on barley in Scotland / A.M. Whittle // Plant Pathol. 1977. - Vol. 25, № 2. - P. 67-74.

265. Wiebe, G.A. Description, history, and distribution of varieties / G.A. Wiebe, D.A. Reid // In: Classification of barley varieties grown in United States and Canada in 1958. Tech. Bull.1224, USDA Agric. Res. Ser. - Washington DC. -1961.

266. Wilcoxson, R.D. Development of barley resistant to spot blotch and genetics of resistance / R.D. Wilcoxson, D.C. Rasmusson, M.R. Miles // Plant Dis. 1990. - Vol. 74. - P. 207-210.

267. Wilcoxson, R.D. Inheritance of resistance to Pyrenophora teres in Minnesota barley / R.D. Wilcoxson, D.C. Rasmusson, L.M. Treeful, Suganda // Plant Dis. Vol. 76. - P. 367-369. '

268. Williams, K. J. Physiologic races of Rhynchosporium secalis on barley in Britain / K.J. Williams, H. Owen // Can. J. Plant Pathol. 1973. - Vol. 8. - P. 380-386.

269. Williams, K. Development and use of molecular markers for barley leaf scald resistance / K. Williams, P. Bogacki, L. Scott, A. Karakousis, H. Wallwork // Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium (22-27 October). 2000. - P. 206-207.

270. Xi, K. Histopathological study of barley cultivars resistant and susceptible to Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis / K. Xi, P.A. Burnett, J.P. Tewari, M.H. Chen, Т.К. Turkington, J.H. Helm // Phytopathology. 2000. - Vol. 90, № 1. -P.94-102.

271. Xi, К. Pathogenic variation of Rhynchosporium secalis in Alberta / K. Xi, A. Xue, , Т.К. Turkington, J.H. Helm, C. Bos // Can. J. Plant Pathol. Vol. 24. - P. 176-183.

272. Xue, G. Components of parasitic fitness in Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis and quantitative resistance to scald in barley as determined with a done inoculation chamber / G. Xue, R. Hall // Can. J. Plant Pathology. 1991. - Vol. 13. - P. 19-25.

273. Xue, G. Variation in seedling and adult-plant resistance to Rhynchosporium secalis in barley / G. Xue, P.A. Burnett, J. Helm, B.G. Rossnagel // Can. J. Plant. Pathology. -1995.-Vol. 17.-P. 46-48.

274. Yahyaoui, A.H. Screening for resistance to scald (Rhynchosporium secalis) in barley / A.H. Yahyaoui, Z. Alamdar, S. Ceccarelli, S. Grando // Abstracts of 2nd International workshop on barley leaf blights, ICARDA (7-11 April). Aleppo. - 2002.

275. Zhang, Q.R.K. Race composition and pathogenicity associations of Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis in California / Q.R.K. Zhang, B.A. Webster, L.F. Crandall, L.F. Jackson, M.A. Saghai-Maroof// Phytopathology. 1992. - Vol. 82. - P. 798-803.