Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Генетические эффекты малых доз хронического облучения Drosophila melanogaster

ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Генетические эффекты малых доз хронического облучения Drosophila melanogaster"

I1 ( аоскоййии ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Ш1. Ц.В.ЛШОНОСОЕЛ

- '1 ДПР 183^

На правах рукописи Кагоыедова Манада Ахвадаабаевна

УДК: 575.24.46:595.773.4

Генетические гффег.ти налах доз хрошгеес:сого облучегая ОговорЬИа гйе1епо&ав*е.£\

(03.00.15 - гепз71!кэ)

Автор© О.в р а'т

диссертации на ссисаанне ученноЭ степесз кандидата -биологических'наук

Уосква 1993

Робота выполнена на кафедре генетики и селекции Биологического факультета. Цосковского Государственного универститета имени У.В. Ломоносова

Научные руководитель:

доктор биологических наук, профессор U.M. Аслалян

0@щцалыша оппоненты:

доктор биологических наук М.Д. Померанцева

кацдддат биологических наук E.H. Няснянэтна

Еодуцзв учревдение - 1[нститут генетики и цитологии ВАН

Ssssrsa диссертации состоится " " (?Si $ 199^1 г.

в " " часов на заседании Специализированного совета £003.49.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени ддагора биологических наук по специальности 03.00.15 - генетика Инстптуте'общей генетики та. Н.И. Вавилова РАН по адресу: 1Ш03 г. Москва, ул.Губкина, 3.

С дцсссртЕщсэй цошо ознакомиться в ■ библиотеке МГУ.

Лотсреф-эрат разослан

секретарь спзциалнзированного совета кащшдат ОиадогЕческнх наук

Г. К. Побита

0БЩ4Я ЗДРМТЕРЙСТЙСА РАбОТЫ Актуальность тезы. Загрязнение оиосферы радиоактивными веществами привело к появлению регионов с повышенным уровнем радиации. Одним из таких регионов является зона аварии на Чернобыльской АЫС. Все. это может привести к различным генетическим нарушениям в популяции (Дубинин. Алтухов. 1977, 1ЬЬ2; Алтухов, КурОатовз. I&84; Шевченко В.А.. 1у89; Аорамов и др.. 1992). Мутационшо эффекты высока доз ионизирующих г г. лучений изучены достаточно полно с использованием различных ооъе.ктов, включая п дрозофилу. Специфика -лз действия малых доз хронического облучения, частоты и характера проявления различных типов мутация мало исследованы.

Коль п задатя исследования. Целью данной раОотц явилось выяснение возможности использования высокомутаоилвноп линии с ностссильшлл геио.'.".о!з, полученной в лаборатории генетики амвотных МГУ, в генетическом .мониторинг« загрязнения окрукак^ей среди ргдаоектпкшмз элемента.

Для достппзпня поставленной цела треоовалось решена^ слодупса задач:

I. Ояродэлошо уровней спонтанных и гадуцироьашшх облучешюы ■ ГСШа.1 а. ЛЛМ у гопээтг.оски нестаоильноя лшки дрозофилы кг. п стандартно!! лабораторной линии п. ?.. Научение влияния малых доз радиации на гащукиию видимых

пз.-лэиэнип у гэ!<от:.:пулес!см различающихся линия я и из. 3. ''зучошге взятая шлих доз радиации на плодовитость и змз-

пзспофОность анализируешь линия. Л. слрздэле'1г:э сфрэкто пролонгированного действия малых доа :фсютоского солучегам за счет прослогявоивя мдакта евдучмш з рпяу последосвташак поколения. Нтг^-пп ргеггг-э нвалуздопвнлл. Шарьыо предпринята пояыткь лсспол&зсьсппгл кдсо:соцутооальиоз ¿ига Б.ш^ппозасгвг гй. с зодагйаллща гокс:.:см при изучении язпетвия доо хронического лг;П ?яюшшя ?.ог:хжюстл 'лепользозакая этой етса з «^из'Г^эк'оу гаязторкигэ гагряая&иаа смрупсвдай сродц

Впервые 8 практике исследования мутаций мутагенчувствитель-ности дрозофилы проведена оценка влияния шшд доз pajpaiamt на инду 1щию различного тала мутаций в системе с генетической нестабильностью. в которой происходят транспозиции. отдельных семейств мобильных элементов. Облучение мух линии иб u 5 -ти километровое зоне ЧАЭС и в модельных экспериментах позволяло обнаружить повышенно частот доминалтних деталей и пилимых генеративных и соматических мутаций.

Проанализировала степень чувствительности различних стадия сперматогенеза у самцов по тесту. ЛШ на спонтанном д индушфованноы уровнях. Установлено, что воздействие.радиация на отцовский геном увеличивает эмбриональную гибель потомства даже при сравнительно кадре дозах облучения.

В зрела сперматозоидах самцов ив могут возникать предаутациошше (потенциальные) изменения на. спонтанном и индуцированном .уровнях* которое в последующих поколениях реализуются в мутации. Шявлеш различия в. ответе на действие различных доз радиации меаду линией w и MS. Показано, что для лиши us характерна более .высокая чувствительность к действию облучения, чем длл линии w.

Научно-практическая значимость. Выамсомутабвльная линия дрозофшш lis может сыть использоваша в качество тост-систем при. оценке генетической.опасности загрязнения округавщой среда, в том числе при анализе эффектов долговременного хронического облучения организма.

При оценке мутагекнше эффектов Фздичесгазс и химических факторов окружающей среди можно ракошндовать тести иа вшааш ' изменения и доминантные летали» • Тост на РСШ1М нэ эдектавез при работе с малыми дозами радиации.

Апробация работы.. Результаты исследовшшй была представлены на v Кординациохшом совеиззпии "Генетические последствия-загрязнэния окру^вдей среда в связи с аварией на ЧАЭС" '(.Минск. 1991);-заседаниях кафедру генетики! и. селекции (1991г., 1992г.): на семинарах лаборатории генетики ютотшгх. . (I99Q-ISS3r.r.); маядаборатарном семинара Института обдай1 генетики им.Н.й.Вавялова

- з -

Российской АН (Москва, 1993г.).

Структура и облеы работы. Диссертация состоит, из введения, трех глав, заключения, выводов, списка литературы. Работа изложена на 151 странице машинописного текста, включая 5 рисунков, '26 таблиц и список литературы из 309 наименования.

МАТЕРИАЛ И шот

Для решил поставленных задач иссполъзована высокомутабильная мутаторная линия KS с нестабильным геномом, получэнная в лаборатории генетики животных МГУ. (Ким и др.. 1986; Асланян, 1988; Ким, 1991).

Линия MS характеризуется повышенным уровнем спонтанного мутирования по видимым мутациям (I0"J-I0~4) по сравнена» с сбычвыма линиями (10""-1СГ7). Обнаружэнные мутации носят премейотическкй характер мутирования. При этом мутации возникают не в результате скрещиваний, а происхгцят в самой линии. В соматических клетках из также наблюдалось увеличение частоты спонтанных мутаций, что проявляется в виде появления фенокопий, мутаций или соматического мозаицизма.Установлено, что повышегаое мутирование герминативных и соматических клеток нестабильной линии ES связано с транспозицией гюоилышх элементов двух семейств - МДГ4 и hobo. При этом транспозиции этих элементов проходят независимо друг от друга (Лил, 1991).

Линия и, стабильная лабораторная линия, явл гея исходной при выведении линии MS. Лшшя C(1)RM y/Y - характеризуется

СЦаПЛвННЫМи Х-хр0М0С0МаМИ (С(1)). ЛИНИЯ FU?,ydm3wa/yr/ nwi о1 -несет множественно маркированный, многократно инвертированный балансер хромосомы I (РЫ7) .

Линии дрозофилы культивировались на стандартной лнтатэлькся среде пра 25*0.'

В качество -мутагена использовано ионизирующее вздучонне. Облучейию подвергалась: I) самцы шаго линий » и as; 2) кладка яиц самок линий * ж 135 от стадш яяц до-етадии имаго, при этом цдэт облучение в процессе развития на эмбриональной, ягщяочдой и куколочной стадах.. Облутецие проводилось в Б-та з&га га враз на ЧзрыоОылскай АЭС, , а & лесератй^ш** усдавмх ка 'радаэйКтшаой

почве и на смоделированных на кафедре радиохимиии МГУ источниках 7-излучения 137сз.

Экспонирование материала в зоне аварии проводилось в 1990 и 1991г.г. Уровень средней радиоактивности в 1990 году в точках экспозиции составил 4,6 х 10 2 Бк на см2 почвы, измерения проводились счетчиком КРБ-Г, время экспозидаи-14 суток. Средняя поглощенная доза в 1991 году р^-излучения составила Ю±1рад, измерения поглощенной дозы проводились детекторами ТДЦ-ЮП и ТЛД-Бг-П(ТЛД-Бг-ЫГУ), разработанными в МГУ, время экспозиции составило 9 суток.

. Облучение опытного материала, в лабораторных условиях на радиоактивной почве проводилось с использованием радиоактивной почвы, с удельной активностью 7Бк/г почвы (измерения проводились с использованием 7-спектрометра Шк ОЗФ).

При экспозиции материала на источниках 7-излучения 137са, на протяжении 5-8 суток, поглощенная доза составила ~1-2,8 Гр. При единовременном остром облучении поглощенная доза составила 1,5-45 Гр, время экспозиции от ЗОсек.до 15 мин.

Обработанных самцов скрещивали с виргинными самками согласно схемам скрещиваний.

Учет рецессивных сцепленных с полой летальных мутаций.

Определение частот рецессивиыхсцепленных с полом лоталышх мутаций (РСШШ) проведен с использованием метода Меллер-5 (Медведев, 1966).

Учет дшамантнш: летальных мутаций.

Учет ДЛМ проводился посредством подсчета числа отложенных и неразвитаоихся яиц полученных при массовых скрещиваниях облученных С8мцов с необлучонными самками.. На основе анализа но развившихся яиц проводился анализ доминантных ранних (РЭЛ) и доминантных поздних (ГОЛ) эмбриональных леталей, различающихся по цвету. Проведенние 5-ти перебросок через каадцо 2 суток позволило проследить частоту ДЛМ на протяжении 5-ти стадий спермиогопоза; стюршй,, ранних и поздних сперматид, сперматоцит и спарматогоний (Ауарбах,1978).

Учет видимых изменений.

Самцов исследуемых лилий индивидуально скрещивали с самками тестерной линии С(1), имеющей оцеплетше Х-хромосомы, что позволяло регистрировать видимые изменения появляющиеся в первом поколении. При подтверздении во втором поколении выявленных в первом поколении изменений, они регистрировались как видимые мутации, а при ' отсутствии подтверждения - как морфося-(соматические мутации).

Учет плодовитости

Учет плодовитости проводился за счет вседневного . (б: суток) подсчета отложенных яиц. Затем полученные результаты по колличеству отлогенных яиц суммировались отдельно для кэдой линии и высчитывалось среднее число яиц.отлогенных одной самкой в дань.

Учат зизнаспособности

Жизнеспособность потомства облучённых са\цов определялась кш; отношение числа вылупивпзгхся особей к числу отлокепзых ялц.

Анализ жизнеспособности проводился в течении 2-х суток.

Статистическая обработка подученных результатов

Сравнение результатов проводили-с использованием„ф-крдтерня п 1ф1ггерия Стыодента.. Ошибку проценте вычисляли для - 95"-го' уровил по формуле (Шюхинскнй, 1978):

í¡n » ± -1,95

Р-'(ЮО-Р)

IT

Частоту.' ДЛМ вычисляли по форму лр :■

Ч - 1в

' ? ' = -:- X ICO Я

х 1-1 . . ч

it - доля нергзвавшихся яка в облученных сериях; i - доля 'есрззвцЕЗШХОя яиц в шоблучекшх сериях.-;' ?т - процент' дсмЬшгпшх лзтзлъдвх. »утпшй!

- t> -

Статистическая сюработка полученных результатов проводилась с исспользовашем ЭВМ.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Проводилось сравнение уровней спонтанного и индуцированного мутагенеза у генотипически различающихся линий w и MS.

I. Анализ рецессивных сцепленных с полой летальных нутаций.

Известно, что РСПЛМ представляют собой совокупность точковых *смель истинно генных мутаций и микроаберраций).

Опытный материал облучался ь 5-ти км зоне ЧА'-эо, на радиоактивной почве и на источниках 7-излучения

I.I. Динамика РСПЛМ при экспонировании ыа ЧАЭС.

Полученные результаты при экспонировании мух на ЧАЭС оказались неоднозначными.

Облучение кладки яиц лишш мз в ХЭУОгоду индуцировало с достоверно большей частотой РСШШ по сравнению с:, контролем (рис.1). Увеличенный выход РСШШ наблюдался на протяжении рлда последовательных поколений полученных от облученных самцов (?1, Р2, ГЗ и Р6). Пр! этом частота РСШШ у облученных (опыт) мух оказалась выше чем у нэоблученных (контроль) нп протяжении трех поколений (р<0,001). а к Р6 произошло выравнивание частот РСПЛМ опыта и контроля.

В 1991 году облучению в гюне аварии повергались самцы имаго И кладка йиц линий w и ИВ. Экспонирование самцов и кладки яиц не привело к индукции РСПЛМ ни у одной из исследуемых линий. На спонтанном уровне нами также не отмочено увеличение частоты МШЛ.

TíiKirJ образом мы видим, что ■ реакция нестабильной лишш мй на хроническое воздействие малых доз в полевых условиях' оказалась неоднородной. Вероятно ото связана с особенностью отой .пиши, связанной с перемещением мобильных элементов ь геноме (Ким.ШЭГ).

1.2. Даиагаке РСШШ при экспозиции мух на радиоактивной почве.

Облучению подвергались самцц имаго и кладка яиц линий и и ns.

А) Самцы имаго w к us линий подвергались хроническому облучению малыми дозами (7 Бк/г) ни протяжении (4 дней. Эксперимент проведен в 3-х повторнпстях (ll[tfL-: я П.ч) и результаты всех повторностей оказались неоднозначными (рис.2).

Б П1 нами выявлялись РСШЗ» у самцов из. В этой повторное™. как-и в эксперименте на ЧАЭС (1990г.). наблюдалось повыше! ле частоты РСШШ на спонтанном (контроль) и индуцированном (опыт) уровнях. Причем частота леталей в опыте оказалась выше, чей в контроле (р<0,001), даже при такой низкой дозе, облучения (УБк/г). В П2 в опыте и контроле у обеих линия но выявлено леталей. Тогда как в ГО в контроле лишь у у» отмечено увеличение частоты РСПЛМ по сравнению с опытом этой же лшши (опыт-ОХ, контроль-!.4 Г* *, и по сравнению с опытом и контролем у мз.

В) Облучение же на радиоактивной почве кладки лиц мух линий V» и МБ на протяжении 9 суток не вызвало увеличения выхода РСЛЛМ ни в одном из проанализированных поколений. В контроле у оооих линий также не обнаружено увеличения частоты РСПЛМ.

1.3. Динаыика РСШШ при хронической облучении на источниках Т-издзрешя 137Се.

В атом разделе экспериментальной работы нами и<^<:ле.-д<)б.^л-и;ь влияние малых доз хронического облучения I)на самцов имаго (ГГр), 2) на самцов взятых из облученной кладки яиц (^.8Гр) и 3) ¡ы самцов подвергнутых комбинированному облучению (хроиич. »остриц, дозой 2.9Гр).

Анализ полученных результатов по выяпил увеличения частчгы РСПЛМ при различ1шх режимах облучении у обоих линий (к и мг <. ь; обяарукено увеличение частоты РОШМ и у пеоблучешш мух атих ке линий.

1.4. Динашша РС1Ш пр.ч остром облучении на источниках •)-излучения 'ЗГСВ.

Облучению подвергались самцы имаго линий « и мз. Учет РСШШ проводился по двум дозам острого оолученил-ЭГр и 4ЬГр. пптроо облучение семцов те и НЗ этими дозами индуцировало достоверном повьление частоты РСПЛМ, по сравнению с нооб..-учошсими самцами. Причем с увеличением дозы увеличивается и частота РШШ в сбиих линиях (рис.3). Интересно, что частота РСШШ у М- незначительно отличается от « (р>о,о5). А при сравныш результатов опыта и контроля видно, что как у ИЗ, так и'у « в ог«ш акспоркмс-.нтах частота РСПЛМ в опыте выше, чем в контроле.

Рис. j.Частота РСП/1М при облучении линии MS в зоне ЧАЭС в 1990 г.

X Л1Г8ЛЫ

МИ -«périment; SSI -control; vtptrinenl — пря еблучивтс control - S*» otyww

л«г.2.Частота РСП/1М при облучении на радиоактивной почве самцов w и MS;

% fMTQOM

•xperimpit; control;

вдмпггмпЪ control;

Ч& :'.. . • X

ВШ PI o«drqktH£; ; ' , £2 f2ef«MnUS:' . О Me» «lrdn И$

B5B:,P2ei»!reb'W""-'' "ES pseiiwn «:'' .*

Dftrimant ~ При обАучищ control - Ло сб.утятt ~пt/ajlS - лотариоег* »»единая-д.

Т, о. из вышерассмотренного шдно, что хроническое облучении сащов имаго и кладки яиц линий w и US в различит* режимах не индуцировало значительного повышения частоты РС1Ш raí в о,хной линии. А острое облучение высокими дозами самцов имаго вцрыило сходное увеличение частоты РСШ1М у обеих линий.

2. Анализ доминантных летальных мутаций.

Тест по выявлению доминантных летальных мутаций ШЛО /вляется показателем различного рода повреждений возникших в половых клетках (Шварцман, Анисимов, 1974). Наибольший вклад в формирование ДЛМ вносят крупные хромосомные перестройки (Ауарбах, 1978; Sobéis & Vogel, 4976). В число неразвившихся яиц могут входить: I) неоплодотворенше яйца; 2) яйца погибшие из-за экологически причин: 3) яйца погасшие по генетическим причинам (Моссо, ГЭЭО).

Для выявления ДЛМ, острому облучению в больших дозах, на источниках 7-излучения 137Св, и .хроническому облучении в малых дозах, на радиоактивной почва и на источниках 7 излучения 1370з, подвергались самцы имаго и кладка яиц, из кторой орались самцы, линий w и MS. Нами проводился учет ранней и поздноП доминантной смбриопалыгой гибели, на различных стадиях сперматогенеза. Известно, что раздельный учет ранней и поздней эмбриональной гибели позволяет дифференцировать раз;п»чкые мехаш!змы поврездений Геномч.

2.1.Динамика ДЛМ при хронической облучении на радиоактивной почве.

Облучение самцов на радиоактивной ючве (?Бк/г) привело ь основном к индукции доминантных ранних эмбриональных леталей (RUI), а частота доминантных поздних эмбриональных леталей (ИЗЛ) оказалась незначительной (табл.1). Из таблицы видно, что частота РЭЛ у самюв линии ms выше, чем в контроле на всех стадиях сперматогенеза. Тогда как у w в опыте частота ЮЛ превышает контрольную величину лишь на ' стадии ранних спорматид.

По частоте РЭЛ в линии MS наиболее чувствительной к облучони») оказалась, стадия сперматогоний, а в лиши w наиболее чувствительной оказалась стаддя ранних опорматад.

Рк^.з. Частота РСПЛМ при остром облучении самцов V* и МБ

X юталм

9 Гр

£23 ~еф*г4тмп| о! № ЕЗ -МгЛго! я) кЩ

45 Гр поглаавянаа лоэа

ЕЭ —ехр&ЬтегЛ о 1 »: —соп(го1 С-'?

мроПтеЫ — л?м» сйлучо»**; соп!гЫ - баз овлучэмхз.

р«&^Настото видимых изменений у самцов линий V/ и на индуцированном (облучение на ЧДЭС) и спонтанном уровнях

зо г

ГШ"

5 гШ^' К • й-!

Шч Р [ тт. ШШштш

1

^¿те-г-, ГЬП __г-> Е-уЛ-Е

* 4—СШ^Т^;

*1Ы

гас»)

2—соп ¿га';

03 5- вф«

153 З-иеептвгё; СЗ б-ссШти';

соя Г -■ОС- .

Таблица I.

лйглдь: дзтальшх мутаций при экспонировании самцов линий изияна радиоактивной почве .у,сь .иг. нротжзнш 14 суток, уровень радиоактивности почвы составлял 7 Бк/г).

лгаия ЛИНИЯ те

■ 1 Я!':Ц ! гибель з;/.0риодов, % РХ раь. Рх позд. кол-во отлож. яиц гибель эмбрионов," Рх ран. Рх позд.

ранних поздних ранних поздних

; С ) —• '' : - 1 1713 2,5910,47 0,70x0,39 0.06+0.12 0,06+0.12 +1,9 0 1356 1Л5 1,11+0,55 0,53+0,39 0 0 +0,58 0

- • 12&3 I о,е2+о,4з 0 0 +4,04 0 1081 857 I,85±0,80 1,63+0,85 0 0 +0,22 0

• ! ¡(/X ! 3 7811.18 ! 0 20+0,27 • ; ! ! 1.2310,72 ) и г 1 +2,58 +0,20 799 691 4,13+1,33 2,02±1,05 0,12±0„24 0 +2,15 +0,12

• хтъ-; 1 0.34г0,95 1 0,0810,15 •; ! | 0,39гС,'7 i 0 +0,26 + 0,08 686 768 1,36+0,94 2,0311,01 0,1710,33 0 -0,74 ¡0,17

! Я;",? ! 11,5с 13,90 ! с i +9,55 ; . ; •■>' ! 2,241:1,31 ] 0 | ° 483 283 1,24+0,99 1,7411,51 0,21+0,41 0 -0,51 + 0.21

¡с с;.чу-;с-г^ом);?;-контрол (без облучения); Рх • частота доминантных лэталышх мутаций.

- Iii -

-..2. Далахага да при хроническое_сбдуче1£Ш иа • КСТОЧННКаЗС ^-кзлучешш 13iCs.

Ькспог-ировались самцы имаго и кладка яиц.

Л) Ослучеше самцов имаго линий w и l's в течении 5 суток ,1Гр) индуцировало как РЭЛ, так к ПЭЛ (табл.2). Хроническое излучение самцов линии MS достоверно повысило частоту РЭЛ лишь на ■гадай спермий, на всех других стадиях сперматогенеза наблюдается ;осгов"рноо снигвние частот РЭЛ. Для линии и характерна :ротив<'положная картина: на стадам спермиев ранняя эмбриональная ■исель при облучении ниже, чем в контроле, а на других стадиях тале чаемся повышение частоты РЭЛ. Примзчатол'.но также и то, что тоцеит рашей гибели эмбрионов у MS в опыте и контроле оказался iuüjo чем у vi почти на всех стадиях сперматогенеза (р<о,ооч)(кроме гтадии спермиз.в опыте, где р>0,05). По процентам поздней гибели шбрионов эта величина выше у линии « чем у линии ms (кроме ;тадаи слерматоцит, где р.>0,05).

.Наиболее чувствительной по частоте рэл у ms оказалась стадия ;пормий, а у w стадия поздних сперматид. наиболее чувствительной ю частоте ПЭЛ била стадия сперматогоний, а у w стадия спермий.

Б) Исследование сюрмлровакия ДЛ?Л у самцов, подвергшихся сокГ'.шкровашсиу облучению дозой 2,9 Гр (хроническое облучение сладки-от стадии яиц до стадии имаго (Ьсуток) + острое облучение ;амцоз вылетевших из облученной кладки (30 сек.)), дало следующие •¿бзультоти (табл.3). Облучение не индуцировало значительного /соличлаш 'частоты ранне я и поздней омг-рионадьноя гибели у самцов is. ng сравнению с контролем. Тогда юж у самцов w облучение достоверно.увеличило'частоту РЭЛ на стадии спермий • (p<o,oi), а tüCTOTy ПЗЛ на стадии поздних спзрнатид. ¡3 целом при. сравнение густот РЭЛ и ПЭЛ мевд собой видно, что как в опыте, так'' н. в контроль эти во.'мчшш 'больше у lis, чем у w.

Наиболее чувствительной.по частоте РЭЛ' у цз оказалась стадия тоздйих" сперма-гид,-.'а^у w. стадия спермий. Наиболее чувствительной та частоте'ПЭЛ у as' сказалась стадия стадия спермий,. а у'« стадия тозцннх сперматид.

5 л •i

ig

a

S

ra К

я н Q

&

О г)

ч я м о Рч Й о 40 о + О о о - « ¡-0,31 íj о т o o -r

N О о •Í LO N OJ <Ll

<ч 1 + О + M ч O T

& с: X« ** m о о S. о S В Г5 S К) ~ U) tí> о о ■Н "Н О ч U) о oj *ч N L0 -<? О О 4-1 ЧЧ (О О о о M тч" Л • • О о +1 +1 LO И о 01 И * го • » О о ft +1 О IÍ) Г- н гЧ r-t 10 í4-LO O O +i Í0 « (1 O OJ* AJ

0) L0 <0 0) (0 s ю 0) W LO Ю N О/ (û f o> <0 ф N"

■ > о хэ g и и CJ Рч о о 41 +1 tt О (0 L0 fí LO о о +1 +¡ *f rf N 0) -Í M О о 41 41 О !Л LO oí (У О О ■Н т| 26 "í w O o +1 N ^ N И w :J

кол-во лтрознзл. 1 яиц !û m Ii) M « oj 0* 0) со •tf M Я 0) О Ai m P¡ M M iù -f О <n P) rt to w o cu w

« я Х< о к LO M о 4. N OJ 6 + о a 0 1 !-О to ! O

, m «4 -í a 01 v') O

и 3 И» Рч о m i LO 1 Ol 1 OJ 1

ю íi я о о Ü о к -а f=í ш о s g Ei Г) С, г: о., о 'í <0 с" о И ri L) О CO Ii) о о U) -í n fl СО M 14 U3 i-l о о а w CJ о 0 +1 -tt rj PJ •t а о о !/) О (Л 0) о о Tt ti f-I LO -- M ,1 »H n O fj O 0 ■M "1 rt) ^t N O

tt; Р И LI Й й Рч и о LI •-> т * ,-Ч +1 it О С) ¡0 « О N CT (1) 4- Ом 41 +1 СО о '-J N £~ О N Li N ^ О ^ +t -rl (Í. О О С! t' ^ i; & o w 3-1 -н !j f'J o n r. n o o o rt ТЧ +1 -n N CJ Ш fj ГЧ

0 . « я _ 1 a ri К ;■> м О Он« Ï"- ^ а оз »-4 »—• н <0 m а Í\' -i ЙЙ '9 О 0} Ц1 vJ О •» С) N 10 O ,1) 03 -, o <0 C" fl l'> O O V rí

рч о OS O fei ОЙ ОЙ OM

о 1 о с: si о >5 ft 1.3 ta u> г-. H t- о О О и fj Li ft о П i.) .н ti о о N О г* Я U 14 р . t) Й г- л 111 i ; м О t i i П éU'i 'l' o i; £- С ! 1 f3 .".i r-: M

К ¡4

03

я

tí §

л г-<

о

H

о сэ I-

о р1

о о

X

в

g I

о

¡J

i ;

Таблица г.

Чпсгоуа ДЯЫ при'-комбинированном облучении самцов линий к ус лозой и,9 Гр Схрсппчоскоо 1,4 Гр -¡- острое 1,5 Гр), на источнике радиоактивного 7-излучен**" 13,Св.

! :■:;.'.: г-;™: сор. " Л?ЛШП КЗ ЛИНИЯ VI

••.тал-Бэ о Т1!0::с, ЯИЦ ' гибель оморионог;. Рх рои. Гх ПОЗЛ- кол -во отлог;. ЯИЦ табель эмбрионов, "г Рх ран. +0.99 Рх псьл.

рэшкх поздние раннда позгт.Гл

..к . гззс - 2137 - ''3.44+0;74 6,15±С,04 0,77±0,35 о.зэ+о,го -г.ез + 0,45 .2700 2669 Е.73±0.е1 1 ,76+0,550 0.28+0.19 О.З 9+0,15 +0.07

. - с.Г'-.':: '. гео? - Б,58±0.85 О.ОЕ±О.С4 о.ео+о.гж 0.С£±0.37 +0,54 -0. 33 зезз , 31 3-*. :,24+0,41 1.59±0,44 0,95+0.33 0,4110,23 -0.36 +0.Б4

спорг'.агг.} С с' ¡ К." 2253 ■ ггез • 37 ±0.90 Э,С0+1,10 о.31±о.гз С,7С+0.33 -5.35 -0,46 302в • 234 4 1.23+0,43 1.ОО+О.ЕО о.еэ+о.зо 0.95+0.36 -0,32 -0.26

М'СЦлТ 0 К' ЕйОЗ" згат . 0.54 ±1,14 15',се±1 ,гз о.ег+о.зз 0.93+0,33 -5,гг -0,11 3213 3757 1.43+0,42 1,46+0,35 0,34+0,20 0,21 +С-.15 +о,оз +0.13

"ге-р;;:!-■юто-л-'г' :о к ■ 1745 2424 С. 45 + 1 .11 0.4-О+С,ЗО о.5е±о,зо -4. го -0.1В 261 >3 1сео 1,ОЗ+О.ЗЗ <1,е4±0,3о О,54+0.28 0,27±0.27 +0,4 0 +0.17 -

Пп^й^отгта: О - опит (с облучением): К - контроль (без облучения); Т^ - частота домпнантних летальных мутаций.

3.3. Д!яа?£5ка ДЯ« поз оетрса ебдзняята

üctovsk2£ -у-излучег-ля ^Сз. Острому облучения подвергались cavuu лиа «г и мз. Использованы следующие дозобыэ величины: 1,5 Гр, 9 Гр и ¿5 Гр.

Л) Острое облучение дозой 1,5 Гр снзвало индукцию РЭЛ и 1Ш с различное --частотой на розньг1 стадиях сперматогенеза (табл.4).

Сравгэшш опита 2 контроля для сакцоз „таши ь'В. показало что частота РЭЛ в опито на стадиях споржй и спврлатогат прзшетавт таковум величину в контроле (р<0,001). к по частоте ПЭЛ опыт преЕ'лаол гонтроль на стадии сперкатогоний (р<0,05). Для спадов ж ¿леют si обнаружено, что частота РЭЛ з спктб» достоверно mïQ чем в контроле но всех Ссроке стада! cnepv*2î-p>0.05) стадам сперматогенеза. По частоте иЭЛ результаты олнта и .контроля у нозка'п:голы1о отлкчаэтся друг от друга.'

Сравпеше частот РЭЛ и ПЭЛ обеих лилий бгушо, что в спите ГЭЛ V vs впше, чем у «г .-язь нг стадии спармий :-i спзрнзтсии? (р<o,ooi), а па стадии спорматогснкй эта величала была внше в оч'лте у-л-, х-ь-л у HS (pv'0,001). ß контроле та частота РЭЛ сказалась ¡т& на всех стадиях у US по сравнении с w. Частота ПЭЛ в 01Ш58 на стадия сперматид была зна'шмо Bise у В -юнтролг-чсгт частота ПУЛ у я достоверно вшай, чем у üs • на стадах спермий я псзгщпх спврмзтнд. ■

Наиболее чувствительна по частоте РЭЛ у из оказалась спермин, а-у п ранние спар"отвд!. Наиболее . чувствительные /п'о «чстоте ПЭЛ у i's била стадия :спергатогоний, 'а у .7 позднее спзрматгда. '

S) Сблучвюю допой в 9 Гр шл/исрсвало как РЗЯ, так/и .ПЭЛ у обеих лшлй'с высокой частотой, чем у необлучешшх (табл.5).

Анализ получежшх результатов для са'.щов дгашг '»«s; покпзаг', что облучение индуцировало достоверно больно РЭЛ п ПЭЛ, чей в :"о.чтроло на всег'стадиях сперматогенеза., Уво-^чеышй т'хоц РЭЛ м !1ЭЛ в j: чем а контроле стшчон-я для. c/5;-j;oa хвелЪ.

Ilprt сравниin: розульч-атоз oseiwpüieiiTß получешшх для лцШ"-,-. ч roi'AY едбсй 'ftiio, что:п опыте ■/.-' частота ржгалйг: rws, '-en " '.V ял. сгззлк епзриотсьгл1 (VörCpi а вуз Ь.Ч&'дчпка

Таблица 4.

Чппгота да прт остро:: облучении сатщов латай т.- и is дозой па радиоактивном источнике ТгКЗДУЧЭНЗГЛ (БОЛИЧПНа поглолюшой дозы-1,6 Гр).

С'ГПДСШ • СПОПМО" гогёнэзз сэр- дайзш IS . ЛИНИЯ Т7

кол-во стлоа. ЯШ . гибель вибрионов; ■> р . ран- Р ПОЗД. кол-во ОТЛОЕ. ЯЕЦ гибель эмбрионов, íí Р • ран. Р позд.

ран.. гозд. ран. позд.

ссзрстй О к 745 1072 О. 03+1. ©5 •в.гэ+1 .si о,67+0,sa о. '17+0,41 +3,93 +-0,21 S35 'eos I.S2+0.93 2,73+1,13 1.ÜG+0.S4 i.еэ+о.se -0.84 -0.44

стхглзт m позд. 0 к ÍESS С74 3.94+1,07 6.52+Î .64 о.зэ+о.зг O.C7+O.ES -г.тс -0.Е9 loss юза 4.78+1 ,'27 3,05+1,02 2.11+O.G5 i.es+o.76 +1.70 +0.46

сзэрмата дк раз* О к 6S5 его 4.в1+1 .63 Q.OS+1.S5 0.15+0.2Э О.12+0,04 -.',.67 +0.03 1S1G гсзо 5.03+1,15 2.79+0.71 0,43+0,32 0,38+0.27 +3,18 +0,05

сггаимз-гоцкт 0 к 13?2 3 431 е.гв+i.48 4,Б!3+1.09 О,68+0,44 о, 43+0,ss +3,76 +0.10 1182 14еэ 3,s"+1,11 1.gs+O.69 0,26+0.29 0,47+0,35 +2,14 -0,22

се£ф!-!3~ rorowîiî 0 к íñíi 1es4 5.B0+I.30 4.33+1.12 i. Ei +о. ei 0.40+0,35 +1,52 +0.83 1171 ©ВО S.71+1,62 2.G2+1,07 1.20+0,G2 0.c3+0.5s +c.2s +о, зе

Пржочспио: О - опыт (с облученем): К - контроль (без облучения);

Рх - частота доминантных летальных мутаций.

Таблица 6.

Часгтота.ДЛЫ вр? остром облучении О.,щоз линей «г и шз на радиоактивном источнике 7-^олучояая'-1-этСо. (''й.'пгаша ноглоаешой дозц-9 Гр).

стгсхка , . спгетмато- сер. ЛЛШШ ¡¿Б ЛИНИЯ да

КОЛ-ВО отлоз, яиц '' гибель 0!.:брионоз, % .. Рх ран. Рх нозд. КОЛ-БО отлоз. яиц гибель эмбрионов,% Рх ран. Рх цозд. ♦ Й.11 4 „ АнО

ранних поаднк ранних поздних

сшерыий 0 К 200Э 1147 12.79±1.46 4.Ю11.15 О.17+0,24, +0.07 +2,43 1443 1633 ю,зон ,91 г.оэю.ео 3.0810.37 1.60+0.02 +13.3!.»

ошаиати-да: зюзд.. - 0. •к 1702 1813 10;71±1,43 Э.ОО+1 О,61±0,36 О , У Э ±0, -1С +1.14 -о, за 1231 1435 8,77+1,28 6.4311.27 3,1710,08 1.7410,£3

спермата- дк ранзиэ 0 ;■ к ■ "1е54 ,11.37 17,гл±1.0&. 7,£3±1 2,2410.71 1.2410,ец «10,74 +1.01 1433 1717 16,3711.91 3.3410,31 4.7311.10 1.16*0.61 +12.СТ« ♦ 3,61

гаврча- ", топит.:-. • 0 ' к . 2150 33,¿ми тэз 11,8611.53 3.81±0.01 1,оз±о,сз +гз,1б +1 ,!ЭЭ юго 1713 19.7011,83 з.гио.ез ■4.1 2Ю.01 0.Б410.33 »17.1Й

спврма- ; тогоний 0 К' 21СЗ 24&Э 33,05±2.01 17.££3±1 ,43. 0.72±1,£в 1.13+0,43 +19.06 + 0.04 юаэ " 1010 ЗО.ОЭ12.71 3,27 ±1 .ю 0.1011.61 г,301О.О4 ♦27.ee

К^кэгэчакиэ: 0- ошт (с ^-Злучением); 1С---шш-роль (баз облучения): Рх - часто- го дсишаяп на лоталой- .

££ллэ чеы у ИЗ на стадии спершй (Р<0,001). В контроле частота РЭЛ у МБ оказалась достоверно вишо, чему я на всех, стадиях сперматогенеза. Частота ке ПЭЛ в опыте у к оказалась выше чем у 115 на стадиях поздних и ранних сперматид (¡ко,оси ). Тогда как в контроле частота ПЭЛ была вше у МБ на стадии сперматоцит, а у у/ на стадии спермин в сперматогоний.

Наиболее чувствительной по частоте ЮЛ у мз оказалась стадия сперматоцит, а у и стадия сперматогоний. Тогда как наиболее чувствительной по частоте ПЭЛ у из к у \ч оказалась стадия сперматогоний.

В) Облучение самцов дозой 45 Гр индуцировало РЗЛ и ПЭЛ с наибольшей, чем .при дозе 9Гр, частотой (табл.6). В этом эксперименте частота РЭЛ и ПЭЛ била достоверно выше в опыте по сравнению с контролем у обеих линий, на всех стадиях сперматогенеза (р<с,оо1). При этом частота РЭЛ у самцов линии кз в опыте была выше, чем в опыте у самцов линии ч> (р<о,ооо на всех стадиях. Достоверно высокий уровень РЭЛ у мг, по сравнению с « обнаружен и в контроле.Токда как по частоте ПЭЛ наибольшая величина в.опыте для КЗ по сравнению с опытом * наблюдалась на стадиях поздних и ранних сперматид (р<0,01, р<0,001), на стадиях т' сперматоцит и сперматогоний эта величина выше у ж (Р<0,С5,Р<0,001). В контроле процент ПЭЛ оказался ваше у « на стеда поздних спериатид (р<0,01).

' ¡НаЕболез чувствительной: по. частоте РЭЛ у Ми и у « оказалась стадия сперматогоний. Наиболее чувствительной по частоте ПЭЛ у ме Сиди сперг.зш и сперматогошш, а у к сперматого! шл.

Ктак, из вшаэкзлогенного видно, что частота РГ^Л в экспериментам в основном вьке у самцоз УЗ, а более высокий процент поздней ГЕйали чулбрионов наблюдается у к. Причем при хроническом оОлучоша каждая стадия по разному реагирует но изменение дозовой Бараглерястаж. При остром ;кз облучении большими дозами (9 н 4С< ГР) уозлйдазтся сходная картина реагирования линий « к М2. Так, нааоолао чувсшггельншш у обэпх линий оказались п^к^/м'чи'клг с-^аагл", и яос'гшаотичислсао,

Чао-.ота ДзУ.при остром облучении самцов лщшй н и КБ на радиоактивном источнике 7-пзлучения (величина ноглощешюй дозы-45 Гр)-

стадия спергатс геввза сэр. линия ыз линия я

кол-во проан. яиц гибель эмбрионов, % Рх ран. Рх позд. кол-во проан. яиц гибель эмбрионов, * ?х ран. Рх позд.

ранних ПОЗДНИХ ранних поздних

икрлай 0 к 2581 1340 42,оон.90 6.40 ±1 ,32 7.40+1.01 О,62+0,48 +39,05 +6,08 1248 1108 35,18+2,65 1,90±0,80 6,65+1.38 1.3510,68 +33.92 +5,37

плашата; № пазя. 0 к 1393 2322 41,2212.16 3,09+1,15 6.15+1,32 О, В2Ю, 37 +35.62 +5,33 2405 200э 27.4411,78 1,84+0,59 4,74 ±0,85 1,7410,57 +26.06 +3,05

"■ЦЭГСГЗТЗ 0 к 1940 2001 33,5Э±2,18 0,С0±1,23 б,'ее-:1 ,сз 1 .0010,44 +33. Э1 +5.34 2347 1536 25,5211,76 3.65ю.94 3,75ю,77 1.37ю.53 +22,70 +2.42

0 \ К 207Э .1273 ее,1з±2,оо 6,4111 ,34 е,Б-1±1 ,ое 1,02±0,65 +65,58 +5.58 1354 1153 59,01±2.62 .3,3811,04 9.01 ±2,62 о,8710,54 +57,58 +в.га

ггар-а- | 0 ] К - 1546 1113 74,45±2,17 3.04+1 .01 7,1С±1,23 О, &4 ±0,43 +73.6б +<3,63 772 1641 бг,1е13.4а 1.60+0,59 э,8412.10 1,03+0,46 +61 ,53 +8,90

•» - \:±г? (<■■ сйкучением); К - контроль (баз облучения)-; Рх - частота доминантных леталей.

-Г 20 -

3. Анализ частоты вцдшнт изменений

Известно, что под действием факторов внешней среды, таких как температура, ионизирующие'излучения,- химические соединения, в период эктогенеза у особей может происходить нарушение закладки и дифференциации тканей и органов. Это может привести к возникновению фенотипических нарушений наследуемого (мутации) и ненаследуемого (морфозы) характера (Рапопорт, 1966).

Наш исследовалось влияние малых доз хронического облучения в полевых условиях (в 5-ти км зоне аварии ЧАЭС), в в лабораторных условиях (на смоделированных источниках 7-излучения 13'сы) на самцов линий к и не.

3.1. Даппмтеп видимых изиевений при облучении В 5-ТИ км зоне аварии ЧАЭС : В эксперименте исспользованы облученные самцы имаго и самцы, взятые из облученной кладки. Экспошфование в аоне аварии ЧАЭС ало в течении 9 суток (О.ХГр).

А) Обнаружено, что облучение самцов имаго л шиш мз в полевых условиях не индуцировало видимых изменений в потомстве л с достоверно высокой частотой, по сравнению с неполученными (рис.4) тогда как. в Р2' и РЗ наблюдалось повышение частот видимых изменений. Частота мутаций и морфозов в опыте и контроле у цз превышает таковую величину в 'опыте и контроле у V» во цен* проанализированных поколениях (р<о,оо1). Интересно, что мутации обнаруженные у мз родственны мутациям обнаруженным у у», в опыте и контроле. Все обнаруженные мутации в обеих линиях оказались цетанковыми с нестабильным характером проявления и аутпеомной природы. Нестабильность проявляется в потомстве фенотипичеолси нормальных и мутантных особей на протяжении всех анализируемых поколений, [фи атом у ш> эти мутации выражаются в основном в отсутствии осцелярных и поствертикальных щотгаюк, и в увеличении Числа дорзоцентральных щетинок, а у * только в увеличении числа - дорзоцентральных щетинок. Характер фшотиничоского проявления мутации-различен.(они могут появляться ца теле как симметрично, так в ассиметрично).

Ворфозы оонаруженшо в опыте и контроле обоих линий можно

Рис.5. Частота видимых изменений (на ЧАЭС) у самцов из кладки яиц линий * и МБ

П(М5) Р2(Мв) П(М8) Р4<1«) П(») Р2<») ГЭ(«> Г4<»)

1 *С1р

г

^врсгЬ»»*

овтт X иммг нашсшч; Ж ш>р1с<швщЗ,9~ Ж< сея//?/" Аю вв^чмяь

Частота вилимых изменений

на.индуцированном (1Гр на "Сз) и спонтанном уровнях у самцов линий М5

П(МЗ)

1-арег-' Ч-с**го<:

Р2(М5) .

Е2Э г-еаЫ; ЕЭ

П(*)

«с»)

СЗ

обшмя X «имиммг ¡ни А*-; X нарговон А«- «г*

*хр*гкг»в1- при евутнеег в»»,<

разделить на несколько типов: глазные, ¡цетинковие, крыловые и другие. Из обнаруженных морфозов морфозы глаз, фенотипически проявляющиеся как темные пятна на глазах, обнаружены только у мс.

Б) Выявление видимых изменений у самцов взятых из облученной кладки проводилось на протяжении 4-х поколений (р1,у2,рз и р4 (рис. -5)). Обнаружено, что облучение индуцировало видимые изменения с достоверно повышенной частотой в опыте у МБ по сравнению с необлученным контролем (р1). Повышенный уровень мутирования у М2 в опыте по сравнению с контролем обнаружен и в Р2 и Р4 поколениях. А при сравнении результатов полученных для линии Ы5 с результатами полученными для линии V», установлено, что здесь, также как и в выше рассмотренном эксперименте, в опыте и в контроле частота видимых изменений у из оказалась выше Чим у и, во всех проанализированных поколениях.

Большой процент мутаций у обеих линий обусловлен возникновением нестабильных щетииковых мутаций ь опыте и контроле (подобных выше рассмотренным). Обнаруженные морфозы относятся к нескольким типам: глазные, щетинковые, крилоЕые и другие. При этом такие корфозы, как тешше пятна на глазах, оонаружены только уши больаш всего в опыте. Больше всего морфозов обнаружено у И5 р у «г в опыте Р1 по сравнении с р2, ?з и р4 опыта.

Таким образом из выше рассмотренного материала видно, что хроническое облучение малыш дозами радиации в 5-ти км зоне аварии ЧАЭС индуцировало видимые измонения у самцов линии мз с. большей частотой, чем у-нбоблученных самцов этой лее линии, и по сравнению с облученными самцами линии При ртом частота видашх изменений у необлученных самцов оказалась также выше у ЦБ, чем у к. Наблщавшаяся высокая частота видимых изменения б опыте и контроле у из по сравнению с во всех анализируемых поколениях говорит о ее большей чувствительности по тесту видимых Езмэнений к воздействия малых доз хронического оолучония. Большая частота Вадимах изменений в ряду последовательных поколений говорит о куыулировашш в геноме дозы, при длительном облучении, что приводят к формированию керепарироьашшх потенциальных повреадзний.

- 2гз -

3.2. Динамика вддшых изькненкй при облучении н^ источниках

1*37

у-излуче ния Сз

В этом эксперименте татке исспользованы облученные и необлученние самцы . имаго и сам:щ из кладки яиц. Экспози:. .! на источниках "[-излучения 1 ^"с^ проводилась: са. .цоб имаго в течеиш Ь-ти суток (доза I Гр); кладки - на протяжении '-х генераций (8+8 суток, доза 2.8 Гр).

А) В эксперименте по выявлению видимых изменения у самцоь имаго выявление вивдмых изменений проводилось на протяжен,^ ¿-д поколений (рис.6). Сравнетгсельшй анализ полученных рраульгат-ь в опыте и контроле для обеих линия не покапал значи'\:лишл различия в п и в Р2 опыта от контроля (р>0,05). Оскогч-пП процеа-! из обнаруженных мутаций в опыте и контроле у и « сс-."1аг>ля,.,г Еыше . описанные щетинковые мутации с нестабильным характером проявления, аутосомной природы. Кроме уже известных щогннкоьиь мутаций у МБ в опыте ?1 обнаружена 1 мутация, ьиражакша^си ь отсутствии дорзоцеитральных гстинок, и I крыловая мутации, выражающаяся нарушеш!ем жилкооашчЛ крыловой пластинки. пае мутации также нестабильного характера и аутосомной природы. м :с обнаруженные морфозы, как и в рапное онисатшх акеперимептпх, долятся 1!а несколько типоь: глазные, щетинкоьые, крыловые н другие.

и. Исследование по выявлению видимых измегжий ь опыт^ и контроле у самцов линий МБ п V, взятых из облученной кладки прсводилось на протяжении 3-х погсоле'шй (рис.7).

• Из 3-х праанализировашшх поколений у мз наибо.щ шан частота ьидимых изменений в опыте по сравнению с контролем наблюдалась а Р1 (р<0,0!>). Из обнаружешшх видимых иампышй наноольший процент составляют морфоаы во всех поколениях и ъ опыте, и п гот роле.

У в П1 наблюдалось постепенное увеличении частоты видимы/, иаметний от ?1 к УЗ в опыте и контроля, причем очень ре^ко ь Р^ в опыте (по*ти а 18 раз по сравнегоно с Р1). Интересно, чт > ¡. а! во всех поколениях, в опито и контроле, процент м->(<!»,1<ыи-., процента видимых мутг.ций. Тогда как п у уу наиблльмий >ц..'н видимых изменений в опыте и контроле Р1. затем и ыал';-

Рис.7. Частота видимых изменений при облучении (2.8Гр на"7 Сз) и без облучения у самцов из кладки яиц линий у/ и М5

12 10 8 б

2 О

и

-----

•

В In 1 -Г

ilk*. Slir] lÉlLn n IP m,

F1<MS); FlfUS); FX«S); Р1Д<«): P1.F2»; P1.F3(v): Pin(w); PZ.F2«: P2.F3<»J

ESI Hnwhwt ЕЭ 2*-control; E3 >-«xp«rtme

ES 4-eeMrd; ES 5-е*ргАгнм* □ e-»n!ro(;

U- общим X ачднхъв «awwwfl; 3,4- X uopfoaoê; 5,6- S мошш u/roums; axperhunf - при еблучзыwç control - Cet сблучзютг, Fi,FZ.F3 — г&кляамия; P1,P2 — полторности иесзертмто.

Рис.8: Плодовитость при хроническом облучении самцов линий w и MS

14С(-

,.zro nui «a олну сойку

»U

и>

"t

I u-i-fc-c

v't- psss^

BÉBÉ

î»5 Гр

ЕЗ^вгга^сйкЧ - -"entra" MS; * СЭ

• С л ;' ; .V «'. • ' '

— r^ti oSifjrsissc: с--п1гЫ - САЗ o&çnsms.

1 Г£■

i

наблюдалось понижение этой величины к рз. Основную часть, выявленных изменений в Р1 соста:зляли мутации, а в гс (в опыте ч контроле) и в ?Э (опыте) процент морфозов несколько выше процента мутаций.

Анализ обнаруженных видимых мутаций в'опыте и контроле М5 и v показал, что основную массу обнаруженных кутаций составляют нестабильные щотанковые и крыловые мутации аутосомной приводы (щеткнковые мутации подобны . выше описанным, а. «рыловые феиотипичоски лроявляются в виде расставленных крыльев). Обнаружены в опыте F1 у fis также и 2 стабильные крнлозь-з мутации (короткие помятые крылья) локализова:зше в X-хромосоме. Появление нестабильных крыловых мутаций нами отмечено у соеих линий в Пй, до этого крыловые мутацкине наблюдались«

Все обнаруженные морфозы делятся на несколько типов: глазные, щеткнковые, крьловые и другие.

Т.о. из вышо рассмотренного материала видно, облучении самцов дозой 1Гр в течении 5 суток индуцировало у больше мпрфозев (соматических мутаций), чем у к. Облучение ¡сладки па протлкении 2-х генераций дозой 2,8Гр у us в обеих повторное?ях, а у w в Ш также индуцировало больше морфозов чем видимых мутаций (генеративных мутаций). Тогда как в П2 у w в опито и контроле обнаружено больше мутац.Л. В своей экспериментальной работе ми столкнулись с повышение:! уро?ня матирования у лиши w (особенно :.. П2 у самцов взятых из кладки), связа.шое с неизвестными пока причинами.

4. диализ плодосктоста и жизнеспособности при облучении на источниках 7-излучекя Сз

Известно, что облучение неблагоприятно влияет на жизнеспособность и плодовитость (Гринько и др., Н'«2: Bi'ookfieltl, 1984). Величина жизнеспособности и плодовитости служит мерилом приспособленности и чувствительности к изменениям, происходящим в среде обитания. Так, о популяциях наряду с снижением плодовитости и кигнеспособности вначале, в по<утлущ>"»м наблюдается повышение этид характеристик (Бычковскаи, 1Г>:ЗК,

Рис.9. Жисжеспособность потомства при облучении самцов линий ъ и М5

X хигиеспосс^нгсти

(¡'А?--.-;

;о1 •• Ь: •.•нч

ЙЙш;

О '• -1 Гр

2,5 р

ГСЛ! МЗ: И -етЛгг) из; ЕШ! -ехргНпчМ * .

-• лр» облучянпм: тЫгЫ - сблучвчн и

поглощенная доза Ш -сспЬ-е! т.

МОССЭг 1Э90).

Опытные материал экспонировался на модельных источниках 7-излучения

4.1. Динмдкя жизнеспособности и плодовитости

3 исследованиях по выяснению жизнеспособности и плодовитости, при действии малых доз хронического облучения,.нами исспользованы замш имаго, экспонировавшиеся в течении 5 суток ЦГр). и самцы подвергавшиеся двойному хроническому облучению (2,8 Гр).

обнаружено, что облучение самцов имаго дозой 1Гр вызвало понижение жизнеспособности и увеличение плодовитости у мв, по сравнению с неоолученным контролем птои же линии (рис.а и рис.у к / самцов получивших дозу в 2.8Гр выявлено понижение плодовитости у из по сравнению с * (рис.9).

Итак из полученных результатов, видно, что самцы линии оказались наиболее чувствительными к действию малых доз радиации, чем самш мша и.

ВЫВОДЫ

1. Хроническое облучение самцов Ш'сакомутабильной линии № и « в 5-ти километровой зоне аварии ЧАЭС в 1Уэи п 1991 годах показало неоднозначные результата по тесту РСШм. в гээо г. зарегистрировано достоверное повышение частоты РСПЛМ (при 4.бх1г/:Бк/см~), а э 1991. г. отличий мезду опытом и контролем не обнаружено (при О.ХГр).

2. В модэльннх экспериментах при разных дозах получения (иЛГр: 1Гр; 2,8Гр; 2,ЗГр) достоверного увеличения частоты РСПЛМ в линиях КЗ и у» не обнаружено.

3. Острое облучение дозами 9Гр а 45Гр. индуцирует с высокой частотой- РСШЗЛ у самцов линий вин.

•4. Хроническое облучение самцов линии мз в малых дозах I удельная радиоактивность 7БК/г) достоверно увеличивает частоту ранних эмбриональных летала, и индифферентно в отношении поздшх эмбриональных лэталеа.

5» При. малых дозах хронического а острого ослучешпг ебнаругагошптся РЭЛ и ПЭЛ' на. всех стадиях сперматогенеза- йри действии бысоклми дозами острого облучения . (ЭГр я 45 Гр).

наиоольшая чувствительность показана для- приыейотичыиац стадия (сперматоцит и сперматогоиий).

е. Повышенная частота видимых изменений (морфозоь и мутаций) показана при малых дозах хронического оолучения (и,1Гр. 1Гр, 2,8Гр) в линии »as в течении нескольких поколений (У1,?2,?3). ?. Предложен суммарный показатель частот морфозоь и видимых мутаций за три поколения как сюлее информативный. В. получение малыми дозами хронического оолучения индуцировало понижение плодовитости (2,8Рр) и жизнеспособности (1Гр) у самцов

ЛИНИИ Ы£.

9. Индуцированная мутаоильность по тесту ДЛМ к видимых изменений ъ линии KS существенно вше чем в линии w, что определяется генотипическими различиями.

Список раоот, опубликованных по тема диссертации I. Асланян М.М., Ким A.M.. Магомедова М.А., Фаткулоаянова Н.Л. Анализ рецессивных сцепленных с полом летальных мутаций и гена типически различавшихся линиях D.ni«lä»ogamer ms и и экспонированных в Ь-ти километровой зоне аварии ЧАЭС. // Генетика lö94,vAl5'/ß ПЕЧАТИ.

'¿. Асланян U.M., Ким А.И., п!агомедова U.A., Фаткулбаянов^ Н.Л. Анализ рецессивных сцепленных с полом и до:линантшх летальных мутаций индуцированных калькли дозами радиации в гинотипическ.и различающихся линиях D.malano^aster ¡IS и и. // Геиетшса. •iQS4) ыь. ¡Ъ ПВЧ/VTVi

3. Асланян U.U., Ким А.И., Магоиедова И.А., Фаткулбаяиова Н.Л. Анализ видимых изменений, индуцированных хронически.! облучением ь Ь-ти километровой зоне аварии на Чернобыльской АХ. // Вестник

ura\ се л. i С<t БисдоГ1и>1 f ¡99ч г.,