Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Доноры устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости и генетический контроль взаимоотношений в системе растение-патоген

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Доноры устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости и генетический контроль взаимоотношений в системе растение-патоген"

На правах рукописи

ФИЛАТОВА Ольга Анатольевна

ДОНОРЫ УСТОЙЧИВОСТИ ЯЧМЕНЯ К ВОЗБУДИТЕЛЮ СЕТЧАТОЙ ПЯТНИСТОСТИ И ГЕНЕТИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ ВЗАИМООТНОШЕНИЙ В СИСТЕМЕ РАСТЕНИЕ-ПАТОГЕН

Специальность: 06.01.11 - Защита растений

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург, Пушкин, 2005

Диссертационная работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте защиты растений.

Научный руководитель: доктор биологических наук

Афанасенко Ольга Сильвестровна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор

Иващенко Владимир Гаврилович

кандидат биологических наук Коновалова Галина Сергеевна

Ведущая организация:

Санкт-Петербургский государственный аграрный университет

Защита диссертации состоится 28 апреля 2005 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.015.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте защиты растений по адресу: 196608, Санкт-Петербург, Пушкин, шоссе Подбельского, Д. 3

факс (812) 470-51-10, E-mail: vizrspb@mail333.com

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского НИИ защиты растений

Автореферат разослан^^ марта 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

ГА. Наседкина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Ячмень (Hordeum vulgare L.) — важная продовольственная, кормовая и техническая культура. Существенный урон производству зерна ячменя наносят болезни: сетчатая, темно-бурая и полосатая пятнистости, ринхоспориоз, мучнистая роса, септо-риоз, головневые. Среди них, сетчатая пятнистость ячменя является наиболее распространенным и вредоносным заболеванием.

Возбудитель сетчатой пятнистости листьев гриб Pyrenophora teres f. sp. teres Drechsler. [анаморфа Drechslera teres (Sacc.) Shoem. f. teres Smedeg.] адаптирован к различным климатическим условиям, вследствие чего эта болезнь встречается ежегодно в ареале возделывания ячменя.

В зависимости от региона эпифитотии в России отмечаются 3-5 раз за 10 лет. Потери урожая ячменя от сетчатой пятнистости могут достигать 20-45% (Обухович, Мицкевич, 1982).

Наиболее экономичным и экологически чистым методом борьбы с болезнью является селекционно-генетический. Стратегия успешной генетической защиты растений от болезней и, в том числе, ячменя от сетчатой пятнистости, базируется на сведениях о структуре популяций паразитов и наличии генетических коллекций доноров устойчивости. Известно, что устойчивость к возбудителю сетчатой пятнистости детерминирована как олигогенно, так и полигенно. Использование в селекционных программах олигогенов наиболее быстрый и эффективный метод селекции на устойчивость. Генетическое разнообразие устойчивости у возделываемых сортов ячменя предотвращает возникновение и развитие эпифитотии, за счет своевременных сортосмен. Несмотря на то, что изучение генетического контроля ячменя к сетчатой пятнистости за рубежом и в нашей стране проводится, уже на протяжении нескольких десятилетий, в существующей генетической коллекции доноров устойчивости лишь небольшое число генов устойчивости продолжает оставаться высокоэффективными. Отсутствие фундаментальных знаний о механизмах взаимоотношений паразита и хозяина является препятствием эффективной целенаправленной селекции устойчивых к возбудителю сетчатой пятнистости сортов ячменя.

Цель и задачи исследований. Цель работы — выявление новых доноров устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости и генетического контроля взаимоотношений в системе Н. vulgare— P. teres.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи.

1. Изучить структуру географических популяций P. teres по признаку вирулентности к набору сортов-дифференциаторов.

2. Изучить устойчивость образцов ячменя из мировой коллекции ВИР к различным популяциям патогена в лабораторных и полевых условиях.

3. Определить эффективность источников устойчивости ячменя к различным популяциям возбудителя сетчатой пятнистости ячменя.

4. Выявить штаммы P. teres с различными типами спаривания и создать коллекцию моноаскоспоровых изолятов.

5. Изучить характер наследования вирулентности к сортам ячменя с известными генами устойчивости.

6. Провести анализ вирулентности мейотического потомства от скрещивания штаммов P. teres и гибридологический анализ устойчивости новых источников устойчивости ячменя с использованием этих же штаммов.

Научная новизна. Выявлены 4 новых источника устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости: к-23874 (Эфиопия), к-19979 (Эфиопия), к-15812 (Китай) и к-15811 (Китай), охарактеризована эффективность их устойчивости к различным географическим популяциям P. teres и определена генетическая детерминация устойчивости. Впервые, в мировой практике проведены генетические исследования патосистемы Н. vulgare-P. teres. Показано как доминантное, так и рецессивное моногенное, дигенное и тригенное наследование авирулентности P. teres к 9 сортам и образцам ячменя с известными генами устойчивости, а также наличие супрессии генов авиру-лентности. В разных комбинациях скрещивания штаммов P. teres определен различный характер наследования вирулентности к одному и тому же образцу ячменя. Анализ вирулентности мейотического потомства от скрещивания штаммов гриба, использованных в гибридологическом анализе новых источников устойчивости, показал компле-ментарность генетических систем устойчивости ячменя и вирулентности P. teres.

Практическая значимость работы. В качестве доноров устойчивости к Р teres для практической селекции рекомендованы образцы ячменя к-23874, к-19979, к-15812 и к-15811.

Коллекция аскоспоровых изолятов P. teres может быть использована для изучения генотипа устойчивости хозяина фитопатологиче-ским тестом, по характеру расщепления признака вирулентности к устойчивым образцам в мейотическом потомстве гриба. Использование генетически маркированных штаммов гриба возможно также для выявления генетического разнообразия устойчивости у серии источников и доноров.

Апробация работы и публикация результатов исследования. Результаты работы были представлены на: I Всероссийском съезде по иммунитету растений к болезням и вредителям (Санкт-Петербург, 2002); международной конференции "Современные проблемы устойчивости зерновых культур к болезням " (Санкт-Петербург, 2002); VI международной конференции "Disease Resistance in Plant Pathology" (Чехия, 2002); научно-теоретической конференции аспирантов и молодых ученых (Санкт-Петербург, 2003); координационном совете по

проблемам иммунитета растений к болезням и вредителям (Санкт-Петербург, 2003); конференции аспирантов и молодых ученых "Микология и альгология - 2004" (Москва, 2004); III съезде ВОГи С (Москва, 2004).

Исследования поддержаны грантом РФФИ (№ 030449082) 20032005 г.г.и. грантом для аспирантов, молодых ученых и специалистов г. Санкт-Петербурга (№ АСП 303443) в 2003 г, также работу проводили по международной программе "Биорегуляция агроэкосистем ".

Материалы исследований представлены в 8 печатных работах, 2 находится в печати.

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 159 страницах машинописного текста и состоит и введения, четырех глав, выводов, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 19 таблицами и 14 рисунками. Библиография включает 275 источников, из них 186 на иностранном языке.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

Глава 1. Обзор литературы

Приведены данные по распространенности и вредоносности возбудителя сетчатой пятнистости ячменя, обобщены сведения по изменчивости популяций патогена, устойчивости ячменя к болезни, современное состояние исследований по генетике устойчивости и генетике взаимоотношений в патосистеме H.vulgare — P. teres.

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Анализ популяций P. teres по признаку вирулентности

При изучении структуры популяции P. teres по признаку вирулентности был использован международный набор сортов-дифференциаторов (Afanasenko et al., 1995).

Инфекционный материал собирали в разных географических точках с одного сорта ячменя Инари (табл. 1), для исключения возможности влияния генотипа хозяина на формирование популяций патогена. Была получена коллекция из 193 моноконидиальных изолятов P. teres, представляющая пять популяций патогена, разного происхождения.

Таблица 1. Происхождение изолятов P. teres, используемых при изучении структуры популяций патогена

Условное обозначение популяций P. teres

Место сбора популяций P. teres (сорт ячменя Инари)

В Выборг JI Луга

Россия, Ле- Выборгский р-н нинградская Лужский р-н область_Гатчинский р-н

Количество моноконидиальных изолятов гриба

Рождественно_область

Р _______

И Иокиойнен Ул Улистаро

Финляндия Йокиойнен Улистаро

30

31 58

33 21

Для выделения гриба P. teres в чистую культуру использовали простерилизованные отрезки листьев ячменя с симптомами поражения болезнью. Гриб культивировали на модифицированной среде Чапека (Бенкен и др., 1969).

При тестировании различных изолятов P. teres по признаку вирулентности применяли метод инокуляции отрезков листьев проростков ячменя, метаболизм которых поддерживался 0,004% водным раствором бензимидазола. Использовали конидиальную суспензию с титром спор 5000-7000 на мл (Афанасенко и др., 1976). Реакцию образцов ячменя на инокуляцию определяли на 4-5 сутки после заражения по 4-х балльной шкале (Афанасенко, 1977). Номера расам P. teres присваивали по октальной системе (Gilmour, 1973).

При характеристике сходства или различий популяций Р. teres использовали следующие показатели: число вирулентных изолятов к отдельным сортам-дифференциаторам с использованием критерия достоверности Фишера (Лакин, 1980), частоту встречаемости общих рас (Животовский, 1979), среднюю вирулентность популяций (Мартене, 1968), ранговый коэффициент корреляции (Плохинский, 1969).

2.2. Изучение устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости листьев

Изучали устойчивость образцов ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости из коллекций ВИР и ВИЗР. В лабораторных условиях охарактеризованы по устойчивости 500 образцов ячменя, на искусственном инфекционном фоне - 28.

Для определения эффективности устойчивости образцов ячменя использовали изоляты P. teres различного географического происхождения. Сбор инфекционного материала проводили в четырех районах Ленинградской (Выборгский, Лужский, Гатчинский, Пушкинский), Кировской и Псковской областях. Кроме того, листья с симптомами поражения сетчатой пятнистостью были получены из Фаленок (Волго-Вятский регион), Дальнего Востока, а также из различных районов Германии, Швеции, Чехии, Финляндии и Дании. Создана коллекция из 500 моноконидиальных изолятов P. teres, вирулентность которых изучали к устойчивым образцам ячменя по описанным выше методам.

В 2003 г. на опытном поле ВИЗР искусственный инфекционный фон создавали путем инокуляции растений в фазе проростков кони-диальной суспензией гриба с титром спор 50000-100000 на мл. Первый учет проводили через 7-10 дней после заражения, второй в фазу выхода в трубку. При этом учитывали тип реакции растений и развитие болезни в % по общепринятой формуле (Афанасенко, 1987).

2.3. Генетический анализ устойчивости ячменя к сетчатой пятнистости и вирулентности P. feres При гибридологическом анализе устойчивости ячменя к P.teres оценивали реакцию гибридов F2 от скрещиваний устойчивых образцов ячменя (табл. 2) с восприимчивым сортом ячменя Пиркка на инокуляцию "родительскими" штаммами патогена, использованных в анализе генетики признака вирулентности. Типы реакции каждого растения определяли по 4-х балльной шкале (Афанасенко и др., 1976).

_Таблица 2. Новые источники устойчивости ячменя к P.teres_

Номер по каталогу ВИР Разновидность Происхождение

15811 pallidum Китай

15812 pallidum Китай 19919 brunneinudum Эфиопия 23814 parallelum Эфиопия

Для проведения генетического анализа признака вирулентности были использованы образцы ячменя с известными генами устойчивости и новые источники устойчивости к P.teres (таблицы 2 и 3), а также аскоспоровые изоляты P. teres от прямых скрещиваний, беккрос-сов и сибкроссов (табл. 4).

Таблица 3. Генотипы устойчивости образцов ячменя, использованных при изучении генетики признака вирулентности гриба P. teres и генетики взаимо-

отношен Образцы ячменя гии r системе паразит -Символы генов растение-хозяин Источник

CI 9819 (к-25214) Rpt lb, Rpt 2c, Rpt lb, Rpt 2c, 18pt, ptll Bockelman et al., 1977 Афанасенко, 1996

CI 9825 (к-25215) Pt 5, Rpt lb, Pt 5, Pt 11, pt 12 Афанасенко, Кушниренко, 1989 Афанасенко и др., 1999

Canadian Lake Shore (к-25282) Pt 2, Pt 3 Mode, Schaller, 1958

CI4922 Pt 2, Pt 3 Mode, Schaller, 1958

CI 5401 Rpt lb, X, x Афанасенко, 1996

Harbin, (CI 4929) Pt 2 Mode, Schaller, 1958

Diamond (к-29192) Pt 6, pt 22, pt 23 Афанасенко, 1996

Tifang Pt1 Rpt la Rpt la, Pt 26, X, x Mode, Schaller, 1958 Bockelman et al., 1977 Афанасенко, 1996

K-8155 Pt 6 Pt 6 (Pt 13) Афанасенко, Кушниренко, 1989 Афанасенко, 1996

K-8121 Pt 5 Афанасенко, Кушниренко, 1989

к-21849 Pt 9 То же

Таблица 4. Происхождение аскоспоровых изолятов от беккроссов и сибкроссов Комбинация скрещива- Условные обозначения ком- Количество изолятов

ния изолятов P.teres_бинаций гриба_P.teres

181-6х А80 D Прямые 173

Н22 х 92-179/8 F скрещивания 192

181-6х d 8-4* DB5 Беккроссы 23

181-6х d8-3* DB7 15

92-179/8 х F69** FBI 27

d9-6*x d9-2* DSI Сибкроссы 27

d9-l*x d9-4* DS2 27

F35** x F14** FS2 27

F4**x F74** FS4 38

Происхождение изолятов P.teres: 181-6-Россия, Ленинградская область; H 22-Россия, Приморский край; 92-179/8-Канада; А80-Моноаскоспоровый изолят от скрещивания 181-6 х 8ах; * Моноаскоспоровый изолят от скрещивания D; ** Моноаскоспоровый изолят от скрещивания F.

Гибридизацию изолятов P. teres проводили в лабораторных условиях по методике McDonald (1967). Создана коллекция из 365 моно-аскоспоровых изолятов, вирулентность которых оценивали к образцам ячменя представлены в таблицах 2 и 3.

При генетическом анализе взаимоотношений в патосистеме ячмень - P. teres изучали генетику признака вирулентности P. teres и генетику признака устойчивости ячменя, с использованием одних и тех же образцов ячменя и изолятов гриба.

В связи с тем, что скрещивание к-15811 х Пиркка отличалось высокой фертильностью, нам представилась возможность оценить расщепление по устойчивости в данной гибридной популяции не только в лаборатории, но и в теплице. В стадии второго листа, растения гибридной популяции инокулировали конидиальной суспензией изолятов F4 и F74 (концентрация спор - 5000 конидий в мл). Одновременно была изучена вирулентность 38 аскоспоровых изолятов от скрещивания F4 х F74 к образцам к-15811 и Пиркка. Учет проводили через 10-12 дней после инокуляции по 10 балльной шкале (Tekauz, 1985). Растения с баллами поражения 0, 1, 2, 3, 4, и 5 относили к устойчивым, с баллами б, 7, 8, 9, и 10 к восприимчивым.

Глава 3. Выявление эффективных источников устойчивости ячменя к различным популяциям P.teres

Известно, что достоверность оценки устойчивости растений к патогенам, в том числе и ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости, зависит от состава инокулюма (Афанасенко, 1996). Узколокальное распределение популяций P. teres является причиной различной эффективности устойчивости у источников и доноров. Основным фактором, влияющим на структуру популяции патогенов, является генотип растения-хозяина, поэтому представлялось целесообразным сравни-

тельное изучение популяций Северо-Западной зоны России и Финляндии в связи со сходными климатическими условиями, но различным сортиментом возделываемых ячменей.

3.1. Сравнительный анализ структуры популяции P. teres из Северо-Западного региона России и Финляндии по признаку вирулентности

Проведен сравнительный анализ по признаку вирулентности популяций P. teres, паразитирующих на сорте ячменя Инари в трех районах Ленинградской области и в Финляндии.

Выявлены различия по числу вирулентных изолятов к отдельным сортам-дифференциаторам в некоторых популяциях гриба. Существенными являются различия по концентрации вирулентных изолятов к образцам ячменя: к -25282, Harbin, к-29192 и CI 9825 при сравнении выборгской и финских популяций. При сравнении лужской и рождественской с финскими были обнаружены существенные различия по числу вирулентных изолятов к Harbin, к-8755, Tifang, к-29192 и CI 9825. Финские популяции (Йокиойнен и Улистаро), также отличались между собой по данному признаку к образцам к-8755 и к-29192 (табл. 5).

Таблица

Сорта-

5. Характеристика популяций P. teres по доле вирулентных изолятов к сортам-дифференциаторам

Процент вирулентных изолятов** в популяциях P.t

Сравнение популяций P.teres

диффе-ренца-торы 1. Выборг 2. Луга 3. Рож-дест-вено _ 4. Йокиойнен 5. Ули- со с старо 2 з 1 с 4 1 с 5 2 с 3 2 с 4 2 с 5 3 с 4 3 с 5 4 с 5

к-25282 44,8 29,1 13,4 9,7 15,38 * * *

Harbin 46,1 50,0 45,1 17,8 18,91 * * * * * *

к-8755 34,8 35,5 15,8 0 9,75 * * * * * ★ * *

к-20019 57,1 48,4 38,2 34,8 35,29

CI 4207 23,1 42,1 30,2 21,4 13,88

CI 739 37,9 58,2 45,8 54,1 37,1

Tifang 16,8 32,2 6,9 6,1 2,4 * * * *

Diamond

(к-29192) 40,0 32,2 24,1 3,8 27,77 * * * *

CI 9825 41,3 37,9 35,7 15,0 12,82 * * * * *

CI 5791 15,4 23,1 30,2 16,6 12,66

CI 9819 16,7 29,1 10,3 9,7 12,5 *

Всего

изолятов 30 31 58 33 41

*Различия достоверны при Р>0,95 (tf > tst; tst =1,96). **Из 193 изолятов P. teres.

Выявлено высокое разнообразие по расовому составу. Среди 193 изолятов патогена была выявлена 101 раса. Доминирующими расами, встречающимися во всех популяциях, оказались 0000 и 2000. В каждой изученной популяции P. teres выявлена группа рас, отсутствую-

щая в других. Например, расы 0540 и 0401 встречались в популяциях из Йокиойнен и Улистаро, а расы 0560, 0561 и 1734 были обнаружены только в рождественской, лужской и выборгской популяциях (табл. 6).

Таблица 6. Сравнительная характеристика популяций P. teres по расовому составу

Частота встречаемости рас в популяциях P. teres, '

№ расы Рождест-вено Выборг Луга Йокиойнен Улистаро

0000 32,76 16,67 9,68 44,12 29,8

2000 5,16 3,33 3,23 2,94 5,26

0401 0 0 0 0 5,26

0540 0 0 0 2,94 0

0560 1,72 0 0 0 0

0561 0 0 3,23 0 0

1734 0 3,33 0 0 0

Всего выявлено 35 25 28 17 28

Сравнительный анализ частоты встречаемости общих рас в популяциях P. teres показал, что все изученные популяции имели низкие показатели сходства. Популяции из Рождественно и Улистаро имели уровень сходства всего лишь 52%. В остальных популяциях данный показатель находился в диапазоне от 16% до 41% (рис. 1).

При сравнении данных по средней вирулентности были выявлены отличия между популяциями из Ленинградской области и Финляндии (рис. 2). Более вирулентной оказалась популяция из Луги (4,7).

Рис. 1 Сходство популяций РЛее по числу общих рас (по формуле Живатовского)

Рис 2. Средняя вирулентность популяций P.teres (по формуле Мартенса)

При попарном сравнении популяций P. teres, ранговые коэффициенты корреляции по числу вирулентных изолятов к отдельным сортам-дифференциаторам в большинстве случаев оказались недостоверными (значения находились в диапазоне от 0,15 до 0,45). Это означает, что популяции имели значительные различия по изучаемому признаку, который выражался в отсутствие совпадения рангов сортов.

Достоверное значение рангового коэффициента корреляции выявлено только при сравнении популяций из Рождествено и Улистаро (0,64), и финских популяций из Йокиойнена и Улистаро (0,73).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о значительных различиях в структуре изучаемых популяций P. teres. Узко-локалыюе распределение популяций патогена является причиной различной эффективности устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости у источников и доноров устойчивости ячменя.

3.2. Отбор устойчивых образцов ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости в лабораторных условиях

С целью выявления новых источников устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости была проведена оценка 500 образцов ячменя - новейших поступлений в мировую коллекцию ВИР.

Скрининг образцов ячменя в лабораторных условиях, с использованием синтетических и природных популяций P. teres различного географического происхождения, позволил выявить 58 образцов с различным уровнем специфической устойчивости.

Некоторые образцы отличались устойчивостью к одной или двум исследованным популяциям P. teres . Например, образец к-29652 оказался восприимчив к изолятам из германской и фаленской популяций, и устойчив к популяциям из Швеции и Чехии. В то время как, образец к-30313 был устойчив к популяциям из Германии и Фаленок, и восприимчив к изолятам из шведской и чешской популяций.

Устойчивыми к 5 популяциям патогена были образцы к-23874 (Эфиопия), к-19979 (Эфиопия), к-15812 (Китай) и к-15811 (Китай).

При дальнейшем изучении эффективности устойчивости этих образцов было проведено изучение вирулентности отдельных монокониди-альных изолятов из популяций гриба различного происхождения (табл.7).

Таблица 7. Число вирулентных изолятов, к четырем образцам ячменя, в популяциях P. teres различного географического происхождения

Число вирулентных изолятов к образцам Всего изучено

_ячменя (%)_ изолятов

к-23374 к-19979 к-15812 к-15811 P. teres

Происхождение популяций

Дальний Восток 0 0 1,9 0

Фаленки (Волго-

Вятский регион) 4,3 6,5 8,6 4,4

Луга 3,2 3,2 9,5 0

Рождествено 0 1,72 8,6 0

Выборг 0 0 0 0

Псков 0 8,8 8,8 0

Чехия 5,8 0 5,8 О

Финляндия 0 2,7 0 4,05

Германия 0 0 0 0

Дания 0 0 6,25 0

Швеция__0 0 0 0

52

46

31

53 30 34 34 74

32 32 12

К образцу к-15811 не выявлено вирулентных изолятов в большинстве изученных популяций за исключением единичных в финской и фаленской; к образцу к-23874 единичные вирулентные изоляты были выявлены лишь в популяциях с Дальнего Востока и из Фаленок, Луги и Чехии. К образцу к-19979 отсутствовали вирулентные изоляты в популяции из Выборга, Чехии, Германии, Дании и Швеции, а к образцу к-15812 -Выборга, Финляндии, Германии и Швеции, в то время как в остальных изученных популяциях P. teres к этим образцам выявлены единичные вирулентные изоляты гриба.

Таким образом, изученные образцы ячменя являются перспективными для использования в селекции, так как отличались высокой устойчивостью к большинству изученных популяций P. teres.

3.3. Оценка образцов ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости на искусственном инфекционном фоне

На искусственном инфекционном фоне испытывали 28 образцов ячменя, проявивших устойчивость ко всем или к определенным популяциям гриба в лабораторных условиях. В качестве накопителя инфекции и контроля был использован восприимчивый сорт Пиркка.

Инокулировали образцы суспензией, в состав которой входило несколько моноконидиальных изолятов из Рождествено, Луги и Выборга. Полученные данные позволили разделить образцы на 4 группы по устойчивости к P. teres.

1. Высоко устойчивые образцы (к-22836; к-30008; к-30328; к-30336; к-30338; к-30349; к-30351; к-21799; к-30014; к-20921; к-15811; к-19979; к-15812; к-23874 и к-6904) характеризовались отсутствием поражения P. teres.

2. Устойчивые образцы (к-18542; к-30013; к-30330; к-30343; к-30348; к-30350 и к-30353) развитие болезни, у которых составило не более 5% (тип реакции 1-2 балла).

3. Среднеустойчивые образцы (тип реакции 2,3 балла) - к-18552 и к-30344 с развитием болезни 10-15%.

4. Восприимчивые образцы (тип реакции 3-3,4 балла) - к-22336, к-29577, к-17273 и к-23351, развитие болезни на которых составило более 25%.

Вполне вероятно, что обнаруженные отличия по устойчивости при лабораторных и полевых оценках могли быть связаны с различной возрастной устойчивостью растений, или с качественным составом ино-кулюма, т.к. при лабораторной оценке и испытаниях на искусственном инфекционном фоне были использованы различные изоляты P. teres. Выявленные нами образцы ячменя к-23874, к-19979, к-15812 и к-15811, после широкого экологического испытания могут быть использованы в качестве источников устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости. Эти образцы переданы нами в 2004 г. в ЛНИИСХ (Белогорка) и КНИИСХ (Краснодар) для их производственных испытаний. В 2004 г. на них не отмечено симптомов болезни в обеих зонах изучения.

Глава 4. Генетика взаимоотношений в системе хозяи-патоген

H.vulgare ~ P. teres

Изучение генетики взаимоотношений H.vulgare-P. teres предполагает параллельный гибридологический анализ устойчивости растений и вирулентности паразита. Из литературы известно, что характер наследования устойчивости ячменя к P. teres зависит от используемого в анализе изолята гриба (Но et al., 1996; Афанасенко и др., 1999). В связи с этим, необходимым условием изучения генетики взаимоотношений в данной патосистеме является использование одних и тех же изолятов для гибридологического анализа устойчивости ячменя и вирулентности паразита.

В первый год исследований нам удалось получить аскоспоровое потомство от скрещивания изолятов 181-6 и А80; Н-22 и 92-178/9 (табл. 4) в количестве достаточном для проведения гибридологического анализа вирулентности. В связи с тем, что F2 от скрещивания новых источников устойчивости с восприимчивым к сетчатой пятнистости сортом ячменя удалось получить лишь через 2 года, на первом этапе нами был проведен гибридологический анализ вирулентности гриба к образцам ячменя с известными генами устойчивости. На втором этапе проведен параллельный генетический анализ устойчивости и вирулентности с использованием одних и тех же изолятов гриба.

4.1. Генетический анализ вирулентности P. feres Поскольку гриб P. teres является гетероталличным, на первом этапе необходимо было выявить изоляты гриба с различными типами спаривания. Для определения типов спаривания были поставлены все возможные комбинации скрещиваний для нескольких изолятов гриба различного происхождения. В 11 из 120 комбинаций скрещиваний между коллекционными изолятами через 2-4 месяца были получены зрелые псевдотеции. В результате отбора более фертильных штаммов с определенными типами спаривания процент фертильных скрещиваний с изолятами природных популяций возрос до 30. Для генетического анализа вирулентности были выбраны фертильные скрещивания 181-6 х А80, Н-22 х 92-178/9 (табл. 4). Всего изолировали 550 ас-коспор и оценили их вирулентность к девяти сортам ячменя.

Для подтверждения результатов гибридологического анализа вирулентности, было получено мейотическое потомство от беккроссов (3 комбинации: FB1, DB5b DB7) и сибкроссов (4 комбинации: DS1, DS2, FS2 и FS4) (табл. 4).

Изучено наследование вирулентности P. teres к образцам ячменя с известными генами устойчивости

Образец ячменя к-21849. В потомстве скрещивания D выявлено дигенное наследование признака (3:1, здесь и далее дается соотношение авирулентные: вирулентные), таблица 8. В потомстве беккросса DB7 были обнаружены авирулентные и вирулентные аскоспоровые

изоляты в отношении 1:1 (9:5), что подтверждает моногенное наследование вирулентности у изолята 181-6. Наличие по одному гену вирулентности у "родительских" изолятов, подтверждает расщепление в сибкроссе DS2.

В скрещивании F расщепление соответствовало 15:1 или модели наследования признака по 4 независимым генам. В беккроссе FB1 расщепление было 1:1 (17:11), свидетельствующее о наличии одного гена авирулентности у изолята 92-179/8. Следовательно, у второго родителя скрещивания F, изолята Н-22, можно предположить наличие трех генов авирулентности. Результаты расщепления в сибкроссе FS4 не противоречат первоначальной гипотезе.

к-25275. В скрещивании D расщепление в потомстве было 3:1, что соответствует дигенному наследованию (по одному гену авиру-лентности в каждом родителе). Результаты расщепления по вирулентности в 2-х беккроссах - DB5 (14:3) и DB7 (19:4) не противоречат первоначальной гипотезе.

В скрещивании F расщепление в потомстве соответствовало 15: 1 или наследованию по четырем независимым генам (табл. 8). Анализ одного беккросса FB1 и двух сибкроссов FS2 и FS4 дает основание предполагать наличие разных генов авирулентности у родителей, участвующих в этих скрещиваниях.

О 5401. В скрещивании D расщепление в потомстве было 3:1, что соответствует дигенному наследованию (табл.8). У каждого родительского изолята предполагается наличие одного гена авирулентности. Результаты расщепления по вирулентности в беккроссах DB5 (12 6) и DB7 (8:6) и сибкроссе DS2 (9:1) не противоречат первоначальной гипотезе.

Наиболее интересно взаимодействие генетических систем хозяина и паразита, выявленное при анализе вирулентности аскоспоро-вого потомства от комбинации скрещивания Н-22 х 92-178/9 к образцу ячменя О 5401. В скрещивании F потомство состояло из 18 авиру-лентных и 65 вирулентных изолятов, что соответствует расщеплению 1:3 (табл. 8). Данное расщепление может быть как результатом комплементации двух генов авирулентности, так и существования одного гена авирулентности и одного гена - супрессора. Расщепление по вирулентности в сибкроссе FS2 (12:15) также подтверждает эту гипотезу.

к-8755. В скрещиваниях D и F расщепление по вирулентности было 7:1, что соответствует наличию трех независимых генов авирулентности. Можно предположить дигенное наследовачие вирулентности к образцу к-8755 у изолята 181-6 и моногенное у изолята А-80 (или наоборот) (табл. 8). Результаты беккроссов (DB5 и DB7) и сибкроссов (DS1 и DS) скрещивания D не противоречат данной гипотезе. Для изолята d9-4 можно предположить дигенное наследование вирулентности к к-8755.

В скрещивании F расщепление соответствовало теоретически ожидаемому 7:1 или модели наследования признака по 3 независи-

мым генам. В потомстве беккросса (FB1) были вирулентные и авиру-лентные изоляты, что свидетельствует о наличии различных генов авирулентности у родителей. В сибкроссе (FS4) все потомство было вирулентным к к-8755 (фактическое расщепление по вирулентности составило 0:24), что показывает, что родители имели три рецессивных аллели генов авирулентности.

к-25274. Расщепление в потомстве в скрещивании D соответствовало отношению моногенного наследования (табл.8). В беккроссе DB7 было получено расщепление по вирулентности 11:4, что соответствует отношению 1:1. Поэтому, мы предположили, что родитель 1816 имеет доминантную аллель гена авирулентности, и в таком случае второй родитель А-80 должен иметь рецессивную аллель этого гена и, соответственно, отличаться вирулентностью к к-25274. Как было указано выше, изолят А80 отличался наличием аномальных конидий. Его авирулентность, наблюдаемая к образцу к-25274, вероятно, является результатом маскирующего влияния мутации формы конидий. Следовательно, возможно предположить, что изолят А-80 несет рецессивную аллель гена авирулентности. В скрещивании DS1 между двумя авирулентными изолятами все потомство было авирулентным.

В потомстве скрещивания F отношение авирулентных и вирулентных изолятов 15:1 соответствует расщеплению по четырем независимым генам авирулентности. Отношение 15:2 в потомстве сибкросса FS4 соответствует наличию четырех независимых генов авирулентности.

Сорт ячменя Harbin. В потомстве скрещивания D расщепление соответствовало 1:1 или моногеннному наследованию у изолята А80 (табл. 8). Результаты расщепления в сибкроссе DS2 (9:1) не противоречили первоначальной гипотезе.

Расщепление в потомстве скрещивания F соответствовало 1:3. Этот тип расщепления можно объяснить, предположив наличие одного гена авирулентности и одного гена — супрессора, либо наличием двух рецессивных генов авирулентности. Выщепление авирулентных потомков в сибкроссе FS4 также подтверждает это предположение.

Таблица 8. Результаты генетического анализа вирулентности P. teres к сортам ячменя с известными генами устойчивости Фенотипы

Расщепление в аскоспоровом

потомстве (авирулентных: вирулентных) х2

Образец ячменя

Комбинация скрещивания штаммов

родительских штаммов P.teres

P. teres 1 2 Фактическое Теоретически ожидаемое

к-21849 D A A 47:15 3:1 0,05

DB 7 A В 9:5 1:1 1,14

DS2 A A 23:4 3.1 1,49

F A A 87:2 15:1 2,49

FBI A A 17:11 3:1 3,04

FS4 A В 11:6 . 1:1 3:1 1,47 0,96

CI 9825 D A А 41:19 3:1 1,42

(к-25275) DB5 A А 14:3 3:1 0,29

DB7 A А 19:4 3:1 0,23

F A А 87:2 15:1 2,49

FS2 A А 20:7 3:1 0,012

FS4 A А 23:0 1:0 0

FBI A А 13:0 1:0 0

CI 5401 D A А 49:19 3:1 0,32

DBS A В 12:6 1:1 2,01

DB7 A В 8:6 1:1 0,29

DS2 В А 9:1 3:1 1,20

F В А 18:65 1:3 ОД

FBI В А 11:2 3:1 0,61

FS2 A В 12:15 1:1 0,33

FS4 В В 14:5 3:1 0,03

к-8755 D A А 64:7 7:1 0,45

DB5 A А 19:0 1:0 0

DB7 A А 12:2 3:1 0,10

DSI A А 19:0 1:0 0

DS2 A В 21:6 3:1 0,11

F A А 78:10 7:1 0,10

FBI A А 11:3 3:1 0,09

FS4 В В 0:24 0:1 0

CI 9819 D A А 29:22 1:1 0,96

(к-25274) DB7 A В 11:4 1:1 3,27

DSI A А 18:0 1:0 0

F A А 82:5 15:1 0,03

FS4 A А 15:2 15:1 0,88

CI 4922 D В А 56:23 3:1 0,71

DB7 В А 5:8 1:1 0,69

F В А 40:25 1:1 3,46

FBI В А 14:13 1:1 0,04

FS4 В А 8:9 1:1 0,06

Harbin D В А 39:25 1:1 3,06

DS2 А В 9:1

F В А 20:70 1:3 0,37

FS4 В В 2:18 1:15 0,48

к-8721 D В А 16 37 1:3 0,76

DB7 В А 8:6 1:1 0,28

DS2 А В 9:2

F В А 40:39 1:1 0,01

FBI В А 19:11 1:1 2,13

FS2 А В 13:14 1:1 0,03

FS4 В А 6:7 1:1 0,08

Diamond D А А 20:7 3:1 0,01

(к-29192) DB7 А А 10:4 1:1 2,27;

3:1 0,09

DS2 А В 17:10 1:1 1,82

F В А 32:34 1:1 0,06

7:9 0,60

FBI А А 20:7 3:1 0,01

FS4 А А 8:3 3:1 0,03

D-181-6xA-80; F-H-22x 92-179/8; DB5-181-6x d 8-4; DB7-181-6x d 8-3; DS1- d 9-6x d 9-2; DS2-d 9-4x d 9-1; FBI- F-69x 92-179/8; FS2-F-35x F-14; FS4-F-74 x F-4.

к-8721. В потомстве скрещивания D расщепление по вирулент-

ности составило 1:3, что свидетельствует о дигенном наследованию признака у изолята А80 (табл. 8). Результаты расщепления по вирулентности в беккроссе DB7 (8:6) и сибкроссе DS2 (9:2) не противоречили предложенной модели наследования.

В скрещивании F потомство состояло из 40 авирулентных и 39 вирулентных, что соответствует расщеплению 1:1 или моногенному наследованию. Результаты расщепления в беккроссе FB1 (19:11) и сибкроссах FS2 и FS4 (13:14 и 6:7, соответственно) не противоречили первоначальной гипотезе.

CI 4922. В скрещивании D расщепление по вирулентности было 3:1 по двум независимым генам, которые присутствуют у изолята А80 (табл. 8). Результаты расщепления в беккроссе DB7 не противоречат этой гипотезе.

В скрещивании F потомство состояло из 40 авирулентных и 25 вирулентных изолятов, что соответствует расщеплению 1:1 или моногенному наследованию. Результаты расщепления в бекроссе FB1 (14:13) и сибкроссе FS4 (8:9) не противоречили гипотезе.

Сорт ячменя Diamond (к-29192). Полученное в скрещивании D расщепление по вирулентности 3:1 свидетельствует о наличии различий между двумя родительскими изолята ми по двум генам авиру-лентности, или, иначе говоря, моногенном наследовании вирулентности для каждого родителя. Результаты расщепления по вирулентности в беккроссе DB7 составили 10:4, что не противоречило первоначальному предположению о дигенном наследовании вирулентности. Результаты расщепления потомства сибкросса DS2 (17:10) подтвердили наличие в аскоспоровом изоляте d9-4 одного гена авирулентности. При анализе потомства от скрещивания F, получено расщепление со-ответствущее отношению 1:1, что дает основание предположить моногенное наследование авирулентности у изолята 92-179/8. В беккроссе FBI и сибкроссе FS4 ожидали получить только авирулентное потомство к этому сорту, поскольку скрещивания считали гомозиготными по аллелю авирулентности. Однако в первом скрещивании FB1 (между авирулентным потомком и авирулентным родителем) получено фактическое отношение 20:7, во втором FS4 (между двумя авиру-лентными потомками) - 8:3, что ожидается при расщеплении по двум генам авирулентности у гаплоидного гриба. Выщепление вирулентных изолятов в потомстве от беккроссов и сибкроссов показывает, что родители имеют различные гены авирулентности к сорту Diamond.

Расщепление по вирулентности в скрещивании F также соответствует расщеплению 7:9, соответствующее наличию четырех генов, ответственных за вирулентность (табл.8). Такое расщепление может быть либо результатом комплементарного действия двух пар генов, либо супрессии двух генов авирулентности двумя генами-супрессорами. Обе эти гипотезы подтверждают данные расщепления по вирулентности в потомствах от бекроссов и сибкроссов.

Таким образом, обнаружена зависимость наследования признака

вирулентности P.teres к одному и тому же устойчивому образцу ячменя от генотипов родительских штаммов: в зависимости от комбинации скрещивания изолятов гриба выявлены случаи моногенного, ди-генного, тригенного и тетрагенного наследования признака.

Показано выщепление вирулентных к эффективным донорам устойчивости изолятов в мейотическом потомстве от скрещивания 2-х авирулентных изолятов, что свидетельствует о возможности быстрого расообразования при наличии полового процесса в природных популяциях P. teres.

4.2. Генетика взаимоотношений в системе Н. vulgare— P.teres

Генетику взаимоотношений в патосистеме изучали при параллельном гибридологическом анализе устойчивости ячменя и вирулентности гриба с использованием одних и тех же штаммов патогена (табл. 9).

Наследование устойчивости у образца ячменя к-23874 к каждому из использованных для инокуляции штаммов было моногенным, но при параллельном изучение наследования признака вирулентности у этих же штаммов, было выявлено, по крайне мере, два гена устойчивости у образца к-23874. Наличие дигенного расщепления по вирулентности к этому образцу в аскоспоровом потомстве от скрещивания штамма 181-6 и штаммов d8-4 и d8-3 свидетельствует о том, что у каждого из этих штаммов авирулентность детерминирована одним геном, и, что гены авирулентности у штаммов 181-6 и d8-4, а также у 181-6 и d8-3 различны. Следовательно, и устойчивость к этим штаммам контролируется разными генами. Фактические данные расщепления по устойчивости не противоречат этому заключению: однотипное расщепление к штаммам d8-3, d8-4 и d9-l (61:29; 60:30 и 60:30, соответственно) свидетельствует об одинаковом генетическом контроле устойчивости к ним у образца к-23874. В то же время расщепление по устойчивости этих же гибридных растений к штаммам 181-6 и d9-4 (73:17 и 75:15) свидетельствует об иных генетических факторах устойчивости. Таким образом, с учетом генетической характеристики вирулентности штаммов, использованных в генетическом анализе устойчивости у образца к-23874 можно предполагать наличие, по крайней мере, двух генов устойчивости.

У образца к-19979 выявлено наличие одного доминантного и одного рецессивного гена, детерминирующего устойчивость к штамму 181-6 (13:3), и одного доминантного гена к штаммам d8-3 и d9-4 (3:1). Расщепление по вирулентности к этому образцу в комбинациях скрещиваний 181-6 х d8-3 и 181-6 х d9-4 можно интерпретировать как тригенное, следовательно, авирулентность у этих штаммов контролируют разные гены. Кроме того, дигенное расщепление по вирулентности к образцу к-19979 в комбинации d9-l x d9-4 свидетельствует о различных генах, детерминирующих авирулентность у этих штаммов, соответственно, и различные гены определяют устойчивость

к ним этого образца*. Таким образом, было выявлено три гена устойчивости у данного образца.

Таблица 9. Генетика взаимоотношений в системе Н. vulgare - P. teres

Наследование устойчивости у трех образцов ячменя к разным штаммам P. teres Наследование вирулентности P. teres к трем образцам ячменя

Расщепление Комби- (У:В) Расщепление Комбина- (A:V)

нация Штам- £ § „ скрещив § 1 § Х2 ™ гриба £ 1 1Х образцов r g р g. ячменя £ q. g га о Я © £ ° ция скре- 0б g 1 ф щивания £ g Р | Х2 штаммов J g « гриба g £ Э к S< § cd Ок 0 ¿5 °

к-23874 х Пиркка

к-19979 х Пиркка

к-15811 х Пиркка

Тест на отсеченных листьях в условиях лаборатории

d 8-3 61: 29 3: 1 2,40

d 8- 4 60: 30 3: 1 3, 30

d 9-1 60: 30 3: 1 3, 30

d 9-4 73: 17 3: 1 1,78

181-6 75: 15 3: 1 3,30

d 8-3 50: 30 3: 1 1,21

3: 1 2,2

d 8-4 63: 17 13: 3 0,32

d 9-1 66: 14 3: 1 1, 55

d 9-4 56: 24 3: 1 1,2

181-6 59: 21 13: 3 0,006

d 8-3 169: 64 3: 1 0,94

3- 1 1, 55

d 9-1 183: 50 13: 3 1,2

3: 1 3,64

d 9-4 178: 55 13: 3 0,26

181-6 200: 33 13: 3 3,26

ic раст€

329 :

F4 128 3 : 1 2,19

303 :

F74 102 3 : 1 0,01

d9-l х d9-4 181-6 х d8-4 181-6 х d8-3

к-23874

21: 6 3: 1 0, 18

15: 5 3: 1 0,00

11: 4 3: 1 0,01

d9-l x d9-4 к-19979 23: 4

181-6 x d9-4 181-6 xd8-3

d9-l x d9-4 к-15811

23: 4 3: 1 1,49

18: 2 7: 1 0,11

13: 2 7: 1 0,00

181-6 x d9-4

181-6 x d8-3

3: 1 1,42

23: 4 7: 1 0,12

3: 1 0,26

16: 4 7: 1 0,22

3: 1 0,02

11: 4 7: 1 2,76

к-15811 x Пиркка

F4 x F74 к-15811 38:0

У - устойчивость, В - восприимчивость; А - авирулентность, V - вирулентность.

Наследование устойчивости образца к-15811 и вирулентности к

нему штаммов гриба изучали в лабораторных опытах, при инокуля-

ции отрезков листьев и в теплице на интактных растениях. Данные лабораторного анализа позволили выявить дигенное наследование устойчивости к штамму 181-6 и моногенное (либо дигенное) к штаммам

d8-3, d9-l и d9-4. Тригенное расщепление по вирулентности в комби-

нациях 181-6 х d9-4 и 181-6 х d8-3 свидетельствует о различных ге-

нетических детерминантах признака у данных штаммов. Расщепление по устойчивости у этого образца к штамму d9-l можно интерпретировать как моногенное, так и дигенное. Поскольку расщепление по вирулентности в комбинации скрещивания d9-l x d9-4 соответствует либо дигенному, либо тригенному, а по первоначальной гипотезе у штамма d9-4 а вирулентность детерминирована одним геном, то, по-видимому, нельзя считать доказанной, как гипотезу наличия двух генов авирулентности у штамма d9-l и, соответственно, двух генов устойчивости к этому штамму у образца к-15811, так и моногенного контроля признака.

При инокуляции интактных растений моногенный контроль устойчивости у образца к-15811 выявлен к обоим использованным штаммам P. teres F4 и F74. В гибридной комбинации от скрещивания этих штаммов не выявлено растений восприимчивого класса. По-видимому, один и тот же ген детерминирует устойчивость к обоим изолятам гриба, также как и один и тот же ген авирулентности контролирует признак у данных штаммов.

ВЫВОДЫ

1. Анализ структуры пяти популяций возбудителя сетчатой пятнистости из Ленинградской области и Финляндии позволил выявить существенные различия между ними по числу вирулентных клонов к отдельным сортам-дифференциаторам и расовому составу. Среди 193 изолятов P. teres выявлена 101 физиологическая раса. Частота встречаемости общих рас в сравниваемых популяциях, колебалась в пределах от 15,7% до 52,1%.В каждой изученной популяции выявлена группа рас, отсутствующая в других. Наибольшей средней вирулентностью отличались популяции, обитающие в Ленинградской области на производственных посевах сорта Инари, по сравнению с популяциями, паразитирующими на этом же сорте на сортоучастках.

2. Изучена устойчивость к различным популяциям возбудителя сетчатой пятнистости 500 образцов ячменя из генетической коллекции ВИР в лабораторных условиях и 28 на искусственном инфекционном фоне. Выявлено 24 образца ячменя устойчивые к популяциям патогена из Северо-Западного региона Нечерноземной зоны РФ.

3. Выявлено 4 образца ячменя: к-23874 (Эфиопия), к-19979 (Эфиопия), к-15812 (Китай) и к-15811 (Китай), которые проявили высокую устойчивость к изолятам гриба из 4-х популяций Ленинградской области, Псковской области, Дальнего Востока, Волго-Вятского региона, Чехии, Германии, Дании, Финляндии и Швеции. Эти образцы могут быть рекомендованы для использования в селекции устойчивых сортов.

4. Выявлены штаммы P. teres с «+» и «-» типами спаривания. От трех скрещиваний штаммов гриба различного происхождения, а также от беккроссов и сибкроссов создана коллекция из 550 аскоспоро-вых изолятов.

5. Выявлена зависимость наследования признака вирулентности к одному и тому же устойчивому образцу ячменя от генотипов родительских штаммов: в зависимости от комбинации скрещивания изоля-тов гриба выявлены случаи моногенного (к сортам и образцам: к-8121; к-21849; CI 5401; CI 9819; CI 4922; Harbin и Diamond к-23814, к-19919 и к-15811), дигенного (Diamond, к-21849; к-8121; к-8155; CI 4922; CI 9825; CI 5401, Harbin, к-19919 и к-1511), тригенного (к образцу к-8155) и тетрагенного (CI 9825; CI 9819 и к-21849) наследования признака.

6. Выщепление вирулентных к эффективным донорам устойчивости изолятов в мейотическом потомстве от скрещивания 2-х авирулент-ных изолятов свидетельствует о возможности быстрого расообразования при наличии полового процесса в природных популяциях P. teres.

1. Моногенный контроль устойчивости к пяти изолятам P. teres у новых источников, выявляемый при инокуляции отдельными штаммами гибридной популяции от скрещивания устойчивых образцов и восприимчивого сорта ячменя, не дает полной характеристики генетических детерминант устойчивости. Генетическая характеристика вирулентности штаммов, использованных в гибридологическом анализе устойчивости, позволяет констатировать наличие дополнительных генов устойчивости, эффективных против определенных штаммов гриба. У образцов к-19919 и к-15811 выявлено 2 доминантных и 1 рецессивный, у к-23814 - два доминантных гена устойчивости к Р. teres. 8. Анализ вирулентности мейотического потомства от скрещивания штаммов гриба, использованных в гибридологическом анализе новых источников устойчивости, показал комплементарность генетических систем устойчивости ячменя и вирулентности P. teres. Постулированы взаимоотношения в системе Н. vulgare- P. teres по типу "ген на ген".

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для экологического испытания в Северо-Западном и Волго-Вятском регионах Нечерноземной зоны РФ предлагаются следующие устойчивые образцы ячменя: к-23874 (Эфиопия), к-19979 (Эфиопия), к-15812 (Китай), к-15811 (Китай), к-27553 (Ставропольский край.), к-30344 (Перу), к-30014 (Перу), к-30532 (Франция), к-30479 (Югославия), к-30320 (Турция), к-30313 (Эфиопия), к-30328 (Перу), к-30338 (Перу), к-30349 (Перу), к-30350 (Перу), к-30351 (Перу), к-30330 (Перу), к-30336 (Перу), к-30343 (Перу), к-23351 (Австралия), к-29577 (Австралия), к-17273 (Австралия), к-18542 (Австралия), к-18552 (Австралия).

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Павлюшин ВА, Афанасенко О.С., Мироненко Н.В., Филатова ОА, Копаньке Д. Генетика взаимоотношений в патосистеме Hordeum vulgare/Pyrenophra teres// Доклады РАСХН -2004.- №3.- C.62-65.

2. Филатова О.А.Сравнительная характеристика географических популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя из Ленинградской области и Финляндии// Микология и альгология- 2004: Тез. конф. аспирантов и молодых ученых. М., 2004.-С.49-50.

3. Мироненко Н.В., Филатова О.А., Афанасенко О.С. Генетический анализ вирулентности возбудителя сетчатой пятнистости ячменя гриба Pyrenophora teres// Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития: Тез. III съезда ВОГиС. М., -2004. -С.416-417.

4. Afanasenko О., Mironenko N., Filatova О., Makarova I., Kopah-nke D., Kramer I. Genetics of host- pathogen interaction in the Pyrenophora teres/ Hordeum vulgare pathosystem// Modern problems of cereal resistance to deseases Intern. Sympos., St.-Petersburg (Russia). -2002.-P.253-254.

5. Mironenko N., Filatova O., Afanasenko O. Genetic control of Pyrenophora teres virulence to three barley accessions// Plant Protect. Sci. -2002,- № 38.- P.30-32.

6. Mironenko N., Afanasenko O., Filatova O., Kopahnke D. Genetic analysis of virulence in the Pyrenophora teres// Modern problems of cereal resistance to diseases: Abstact Intern. Symposium., St.— Petersburg (Russia).- 2002.- P.263-264.

7. Afanasenko O., Manninen O., Filatova O, Mironenko N. Genetic and molecular mechanisms of barley resistance to Pyrenophora teres Drechs. Molecular Plant-Microbe Interactions: new bridges between past and future// Abstact.llth Intern. Congress of molecular plant-microbe interactions. St.-Petersburg (Russia).- 2003. P.69-70.

8. Afanasenko O., Terentieva I., Manninen O., Kopahnke D., Fila-tova O., Mironenko N. Genetic resources of barley resistance to net blotch// Czech. J. Genet. Plant Breed. - 2004. -Vol. 40, № -P. 125-126.

Научное издание ККО-печатъ ООО "ИННОВАЦИОННЫЙ ЦЕНТР ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ" Лицензия ПЛД № 69-253. Подписано к печати 22 марта 2005 г. тир. 100 экз.

.s i

ff-

835

22 MAP 2005

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Филатова, Ольга Анатольевна

ВВЕДНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Распространение и вредоносность возбудителя сетчатой пятнистости ячменя.

1.2. Изменчивость популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя.

1.3. Ареалы популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя.

1.4. Роль половой рекомбинации в изменчивости популяций P. teres.

1.5. Источники устойчивости ячменя к P. teres.

1.5.1. Методы выявления устойчивых образцов к P. teres.

1.5.2. Устойчивость сортообразцов из генцентров происхождения ячменя.

1.5.3. Устойчивость отечественных и зарубежных сортообразцов ячменя к P. teres.

1.5.4. Селекционная ценность различных типов устойчивости.

1.6. Генетика устойчивости ячменя к P. teres.

1.7. Генетика взаимоотношений в системе патогенрастение-хозяин.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы.

2.1.1. Сорта и образцы ячменя.

2.1.2. Сбор инфекционного материала и создание коллекции изолятов P.teres.

2.2. Методы.

2.2.1 .Выделение гриба P. teres в чистую культуру.

2.2.2.Анализ популяций P. teres по вирулентности к сортам- дифференциаторам.

2.2.3. Оценка устойчивости сортов и образцов ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости. г 2.2.3.1. Оценка устойчивости образцов ячменя в лаборатории.

2.2.3.2. Оценка устойчивости образцов ячменя в поле.

2.2.4. Методы генетического анализа взаимоотношений в системе H.vulgare - P. teres.

2.2.4.1. Гибридизация штаммов P. teres.

2.2.4.2. Создание коллекции моноаскоспоровых изолятов P. teres.

2.2.4.3. Метод изучения наследования признака вирулентности

P. teres в аскоспоровом потомстве.

2.2.4.4. Гибридологический анализ устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости.

2.2.4.4.1. Гибридизация ячменя.

2.2.4.4.2. Получение семян FbF2.

2.2.4.5. Генетический анализ взаимоотношений в системе ячмень - Р, teres.

• 2.3. Агрометеорологические данные.

2.4. Статистическая обработка данных.

Глава 3. ВЫЯВЛЕНИЕ ЭФФЕКТИВНЫХ ИСТОЧНИКОВ УСТОЙЧИВОСТИ ЯЧМЕНЯ К РАЗЛИЧНЫМ ПОПУЛЯЦИЯМ P. teres

3.1. Сравнительный анализ структуры популяции P. teres из Северо-Западного региона России и Финляндии по признаку вирулентности.64"

3.1.1. Обсуждение.

3.2. Отбор устойчивых образцов ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости в лабораторных условиях.

3.3. Оценка образцов ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости на искусственном инфекционном фоне.

3.3.1.Обсуждение.

Глава 4. ГЕНЕТИКА ВЗАИМООТНОШЕНИЙ В СИСТЕМЕ ХОЗЯИН-ПАТОГЕН Н. vulgare

P. teres.

4.1. Генетический анализ вирулентности P. teres.

4.2. Генетика взаимоотношений в системе

Н. vulgar е-P. teres.

4.2.1. Обсуждение.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Доноры устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости и генетический контроль взаимоотношений в системе растение-патоген"

Ячмень - одна из древнейших культур, возделываемых человеком. Зерно ячменя широко используется человеком для кормовых, продовольственных и технических целей. Это концентрированный корм для скота и основное сырье для пивоваренной промышленности. Препараты из ячменного солода используют также в хлебопечении в качестве носителей активных амилолитических ферментов при производстве жидких дрожжей. Из зерна ячменя вырабатывают муку ячменную сортовую, которая используется в составе мучных композиций, а также крупы: ячневую и перловую (http: www.5ka.ru).

В России ячмень распространен практически повсеместно. Посевные площади ячменя в нашей стране составляют в зависимости от года от 8 до 10-12 млн.га. При этом на долю ярового ячменя приходится до 90 % (http: www.5ka.ru).

Важным резервом повышения урожая ячменя является борьба с болезнями, а также создание и внедрение в производство сортов, устойчивых к инфекционным заболеваниям.

Актуальность работы. В последние годы ухудшилась фитосанитарная обстановка производственных и селекционных посевов ячменя. Существенный урон производству зерна культуры наносят болезни: сетчатая, темно- бурая и полосатая пятнистости, ринхоспориоз, мучнистая роса, септориоз, головневые. Среди них, сетчатая пятнистость ячменя является наиболее распространенным и вредоносным заболеванием.

Возбудитель сетчатой пятнистости листьев Pyrenophora teres f. sp.teres Drechler. [анаморфа Drechslera teres (Sacc.) Shoem. f. teres Smedeg.] адаптирован к различным климатическим условиям, вследствие чего эта болезнь встречается ежегодно во всех регионах культивирования ячменя.

В зависимости от региона эпифитотии в России отмечаются 3-5 раз за 10 лет. Потери урожая ячменя от сетчатой пятнистости могут достигать 2060% (Обухович, Мицкевич, 1982; Flah et al., 2002; Benbelkacem et al.,2002; Jalli,2004 и др.,).

Наиболее экономичным и экологически чистым методом борьбы с болезнью является селекционно-генетический. Стратегия успешной генетической защиты растений от болезней и, в том числе, ячменя от сетчатой пятнистости, базируется на сведениях о структуре популяций паразитов и наличии генетических коллекций доноров устойчивости. Известно, что устойчивость к возбудителю сетчатой пятнистости детерминирована как олигогенно, так и полигенно. Использование в селекционных программах олигогенов наиболее быстрый и эффективный метод селекции на устойчивость. Генетическое разнообразие устойчивости у возделываемых сортов ячменя предотвращает возникновение и развитие эпифитотий, за счет своевременных сортосмен. Несмотря на то, что изучение генетического контроля ячменя к сетчатой пятнистости за рубежом и в нашей стране проводится, уже на протяжении нескольких десятилетий, в существующей генетической коллекции доноров устойчивости лишь небольшое число генов устойчивости продолжает оставаться высокоэффективными. Отсутствие фундаментальных знаний о механизмах взаимоотношений паразита и хозяина является препятствием эффективной целенаправленной селекции устойчивых к возбудителю сетчатой пятнистости сортов ячменя.

Целью представленной работы является — выявление новых доноров устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости и характера генетических взаимоотношений в системе Hordeum vulgare - P. teres . В соответствии с указанной целью в задачи исследования входило:

1. Изучить структуру географических популяций P. teres по признаку вирулентности к набору сортов- дифференциаторов;

2. Изучить устойчивость образцов ячменя из мировой коллекции ВИР к различным популяциям патогена в лабораторных и полевых условиях;

3. Определить эффективность источников устойчивости ячменя к различным популяциям возбудителя сетчатой пятнистости;

4. Выявить штаммы P. teres с различными типами спаривания и создать коллекцию моноаскоспоровых изолятов;

5. Изучить характер наследования вирулентности к сортам ячменя с известными генами устойчивости;

6. Провести анализ мейотического потомства от скрещивания штаммов P. teres и гибридологический анализ устойчивости ячменя с использованием этих же штаммов.

Научная новизна.

Выявлены 4 новых источника устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости: к-23874 (Эфиопия), к-19979 (Эфиопия), к-15812 (Китай) и к-15811 (Китай); охарактеризована эффективность их устойчивости к различным географическим популяциям P. teres и определена генетическая детерминация устойчивости.

Впервые, в мировой практике проведены генетические исследования патосистемы Н. vulgare - P. teres .

Впервые показано как доминантное, так и рецессивное наследование вирулентности у гриба P. teres к 9 сортам и образцам ячменя с известными генами устойчивости, а также наличие супрессии генов авирулентности. В разных комбинациях скрещивания штаммов P. teres определен различный характер наследования вирулентности к одному и тому же образцу ячменя.

Выявлены случаи моногенного, дигенного и тригенного наследования авирулентности.

Анализ вирулентности мейотического потомства от скрещивания штаммов гриба, использованных в гибридологическом анализе новых источников устойчивости, показал комплементарность генетических систем устойчивости ячменя и вирулентности P. teres .

Практическая значимость результатов.

В качестве доноров устойчивости к P.teres для практической селекции рекомендованы образцы ячменя: к- 23874, к-19979, к- 15812 и к-15811.

Коллекция аскоспоровых изолятов P. teres может быть использована для изучения генотипа устойчивости хозяина фитопатологическим тестом, по характеру расщепления признака вирулентности к устойчивым образцам в мейотическом потомстве гриба. Использование генетически маркированных штаммов гриба возможно также для выявления генетического разнообразия устойчивости у серии источников и доноров.

Для экологического испытания в Северо - Западном и Волго-Вятском регионах Нечерноземной зоны РФ предлагаются следующие устойчивые образцы ячменя: к-27553 (Ставропольский край.), к-30344 (Перу), к-30014 (Перу), к-30532 (Франция), к-30479 (Югославия), к-30320 (Турция), к-30313 (Эфиопия), к-30328 (Перу), к-30338 (Перу), к-30349 (Перу), к-30350 (Перу), к-30351 (Перу), к-30330 (Перу), к-30336 (Перу), к-30343 (Перу), к-23351 (Австралия), к-29577 (Австралия), к-17273 (Австралия), к-18542 (Австралия), к-18552 (Австралия).

Апробация работы и публикация результатов исследования.

Результаты исследований представлены на:

I Всероссийском съезде по иммунитету растений к болезням и вредителям (Санкт- Петербург, 2002); международной конференции "Современные проблемы устойчивости зерновых культур к болезням" (Санкт- Петербург, 2002); VI международной конференции "Disease Resistance in Plant Pathology" (Чехия, Прага, 2002); научно- теоретической конференции аспирантов и молодых ученых (Санкт- Петербург, 2003); координационном совете по проблемам иммунитета растений к болезням и вредителям (Санкт- Петербург, 2003); конференции аспирантов и молодых ученых" Микология и альгология- 2004" (Москва, 2004); III съезде ВОГиС (Москва, 2004).

Материалы исследований представлены в 8 печатных работах, 2 находится в печати

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 160 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, выводов, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 18 таблицами и 14 рисунками. Библиография включает 275 источника, из них 186 на иностранном языке.

Заключение Диссертация по теме "Защита растений", Филатова, Ольга Анатольевна

ВЫВОДЫ

1. Анализ структуры пяти популяций возбудителя сетчатой пятнистости из Ленинградской области и Финляндии позволил выявить существенные различия между ними по числу вирулентных изолятов к отдельным сортам-дифференциаторам и расовому составу. Среди 193 изолятов P. teres выявлена 101 физиологическая раса. Частота встречаемости общих рас в сравниваемых популяциях, колебалась в пределах от 15,7% до 52,1%. В каждой изученной популяции выявлена группа рас, отсутствующая в других. Наибольшей средней вирулентностью отличались популяции, обитающие на производственных посевах сорта Инари в Ленинградской обл., по сравнению с популяциями, паразитирующими на этом же сорте на сортоучастках.

2. Изучена устойчивость к различным популяциям возбудителя сетчатой пятнистости 500 образцов ячменя из генетической коллекции ВИР в лабораторных условиях и 28 на искусственном инфекционном фоне. Выявлено 24 образца ячменя устойчивые к популяциям патогена из Севро-Западного региона Нечерноземной зоны РФ.

3. Выявлено 4 высокоустойчивых образца: к-23874 (Эфиопия), к-19979 (Эфиопия), к-15812 (Китай) и к-15811 (Китай), которые проявили высокую устойчивость к изолятам гриба из 4-х популяций Ленинградской области, Псковской области, Дальнего Востока, Волго-Вятского региона, Чехии, Германии, Дании, Финляндии и Швеции. Эти образцы могут быть рекомендованы для использования в селекции устойчивых сортов.

4. Выявлены штаммы P. teres с «+» и «-» типами спаривания. От трех скрещиваний штаммов гриба различного происхождения, а также от беккроссов и сибкроссов создана коллекция из 550 аскоспоровых изолятов.

5. Выявлена зависимость наследования признака вирулентности к одному и тому же устойчивому образцу ячменя от генотипов родительских штаммов: в зависимости от комбинации скрещивания изолятов гриба выявлены случаи моногенного (к сортам и образцам: к-8721; к-21849;

CI 5401; CI 9819; CI 4922; Harbin и Diamond, к-23874, к-19979 и к-15811), дигенного (Diamond; к-21849; к-8721; к-8755; CI 4922; CI 9825; CI 5401, Harbin, к-19979 и к-1511), тригенного (к образцу к- 8755) и тетрагенного (CI 9825; CI 9819 и к-21849) наследования признака.

6. Выщепление вирулентных к эффективным донорам устойчивости изолятов в мейотическом потомстве от скрещивания 2-х авирулентных изолятов свидетельствует о возможности быстрого расообразования при наличии полового процесса в природных популяциях P. teres .

7. Моногенный контроль устойчивости к пяти изолятам P. teres у новых источников, выявляемый при инокуляции отдельными штаммами гибридной популяции от скрещивания устойчивых образцов и восприимчивого сорта ячменя, не дает полной характеристики генетических детерминант устойчивости. Генетическая характеристика вирулентности штаммов, использованных в гибридологическом анализе устойчивости, позволяет констатировать наличие дополнительных генов устойчивости, эффективных против определенных штаммов гриба. У образцов к-19979 и к-15811 выявлено 2 доминантных и 1 рецессивный, у к-23874 - два доминантных гена устойчивости к P. teres .

8. Анализ вирулентности мейотического потомства от скрещивания штаммов гриба, использованных в гибридологическом анализе новых источников устойчивости, показал комплементарность генетических систем устойчивости ячменя и вирулентности P. teres . Доказаны взаимоотношения в системе Н. vulgare — P. teres по типу "ген на ген".

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Филатова, Ольга Анатольевна, Санкт-Петербург- Пушкин

1. Афанасенко О.С., Левитин М.М., Михайлова Л.А. Методы изучения вирулентности и агрессивности возбудителя сетчатого гельминтоспориоза ячменя// Миколог, и фитопатол.- 1976- Т. 10, Вып. 5, -С. 433-436.

2. Афанасенко О.С. Лабораторный метод оценки устойчивости сортообразцов ячменя к возбудителю сетчатого гельминтоспориоза// С.-х. биология. -1977.- Т.12, № 2, -С. 297-299.

3. Афанасенко О.С. Изучение структуры популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя по признаку вирулентности в связи с селекцией устойчивых сортов//Автореф. дис. канд. биол. наук.- Л.- 1978.- 22 с.

4. Афанасенко О. С., Левитин М.М. Структура популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя по признаку вирулентности. I. Идентификация рас// Миколог, и фитопатол.-1979.- Т. 13, Вып. 3.- С. 230-234.

5. Афанасенко О. С., Левитин М.М. Структура популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя по признаку вирулентности. II. Распространенность рас// Миколог, и фитопатол. -1979.- Т. 13, Вып. 5.- С. 385-388.

6. Афанасенко О.С., Трофимовская А.Я. Источники устойчивости к сетчатой пятнистости ячменя// Устойчивые к болезням сорта сельскохозяйственных растений в условиях концентрации и специализации производства. Тр. ВИЗР, 1981.- С. 22-29.

7. Афанасенко О. С., Левитин М. М., Мироненко Н.В. Конкурентоспособность рас в популяциях Drechslera teresll В кн.: Изменчивость фитопатогенных организмов.- М.: Колос, -1983. -С. 135-144.

8. Афанасенко О.С. Методические указания по диагностике и методам полевой оценки устойчивости ячменя к возбудителям пятнистостей листьев. -Л., -1987. -20с.

9. Афанасенко О.С., Коновалова Г.С., Войлоков А.В., Воронова М.С. Проблема дифференциации популяций возбудителя сетчатой пятнистостиячменя// Теоретические основы иммунитета растений к болезням/ Сб. научн. тр. ВИЗР.- Л.,1988.- С. 39-45.

10. Афанасенко О.С., Кушниренко И. Ю. Наследование устойчивости к возбудителю сетчатой пятнистости у некоторых сортов ячменя// Генетика. 1989. -Т. 25, №11.- С. 1994-2000.

11. Афанасенко О.С., Хартлеб X., Гусева Н.Н., Минаржикова В., Яношева М. Международный набор сортов- дифференциаторов популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя// Миколог, и фитопатолог. 1994.Т. 28, Вып. 4,- С. 34-42.

12. Афанасенко О.С. Характеристика устойчивости некоторых сортообразцов ячменя к различным популяциям возбудителя сетчатой пятнистости Pyrenophora teres (Died.) Drechsler f. sp. teresll Миколог, и фитопатол. 1995.- T.29, Вып. 4.- С. 27-32.

13. Афанасенко О.С. Изменчивость популяций возбудителей гельминтоспориозных пятнистостей ячменя и генетический контроль устойчивости к Pyrenophora teres Drechs.// Автореферат докт. дис. Санкт-Петербург, 1996, 41 с.

14. Афанасенко О. С.Методы анализа популяций возбудителей листьев ячменя// Сборник методических рекомендаций по защите растений. / Ред. Новожилов К. В. и др. С.-Петербург. 1998.-С. 127-134.

15. Афанасенко О.С., Зубкович А.А., Макарова И.Г. Генетический контроль устойчивости образцов ячменя к штаммам Pyrenophora teres Drechs. // Генетика.- 1999 (а).- Т. 35, № з, с. 336-340.

16. Афанасенко О.С., Макарова И.Г., Зубкович А.А. Число генов у ячменя, детерминирующих устойчивость к штаммам Pyrenophora teres Drechs.// Генетика.- 1999 (б).- Т. 35, № з. с. 341-351.

17. Афанасенко О.С. Селекционная ценность специфической и неспецифической устойчивости зерновых культур к гемибиотрофным патогенам// Типы устойчивости к болезням. Материалы научного семенара.-Санкт Петербург.- 2003.-С.25-32.

18. Бенкен А.А., Гайке М.В., Хацкевич JI.K. Сетчатый гельминтоспориоз ячменя// Труды 5 Всесоюзного совещания по иммунитету растений,- Киев, 1969.- Вып. 5(2).- С. 38-42.

19. Булат С. А., Мироненко Н. В. ДНК- полиморфизмы фитопатогенного гриба Pyrenophra tritici- repentisll Генетика. -1989. Т.- 25. № 11.- С. 20592063.

20. Буртымович Янина. Биология возбудителя ринхоспориоза ячменя и ржи и приемы ограничения развития некоторых пятнистостей при интенсивном возделывании // Автореф. дис. канд. биол. наук. JL- 1990.- 18с.

21. Вавилов Н.И. Проблемы иммунитета культурных растений. 1964.-С.356-359; 462-470.

22. Вавилов Н.И. Законы иммунитета растений к инфекционным заболеваниям// В кн.: Избр. произв., Л., -"Наука". -1967.- Т. 2.- 430 с.

23. Ван дер Планк Я. Генетические и молекулярные основы патогенеза у растений. М.: Мир.- 1981.- 236 с.

24. Вареница Е.Т., Мозговой Л.М., Карпухина Л.М. Полевая и расоспецифическая устойчивость сортов озимой пшеницы доноров иммунитета к мучнистой росе// Вестн. с.-х. науки.- 1981,- № 4.- С. 85-88.

25. Войтова Л.Р. Сетчатая пятнистость ячменя// Защита растений.- 1971, № 11.-С. 44-45.

26. Гайке М.В. Перспективы селекции ячменя в Латвийской ССР и исходный материал для их решения// Автореф. дис. канд. биол. наук.- Л., 1976.-28 с.

27. Гайке М.В. Устойчивость сортов ячменя к сетчатому гельминтоспориозу// Генетические основы болезнеустойчивости полевых культур. Рига.-1977.-С.70-75.

28. Дмитриев А.П. Ржавчина овса.- Санкт-Петербург, 2000.- 112 с.

29. Дмитриев А.П. Особенности биологии взаимоотношений в системе паразит- хозяин как основа выбора типа устойчивости зерновых культур кржавчине. Типы устойчивости к болезням. Материалы научного семенара.-Санкт Петербург.-2003.- С.33-44.

30. Дорожкин Н.А. Проблемы иммунитета сельскохозяйственных растений к болезням// Защита растений.- 1988.- № 5.- С.32-35.

31. Дьяков Ю. Т. Популяционная биология фитопатогенных грибов,- М.: Муравей.-1998.-382 с.

32. Дьяков Ю.Т., Озерецковская О.Л., Джавахия В.Г., Багирова С.Ф. Общая и молекулярная фитопатология.- М. "Общество фитопатологов"-2001.- С.46-55.

33. Животовский Л.А. Значение сходства популяций по полиморфным признакам// Общая биология.- 1979.- № 4.- С. 587-602.

34. Жуковский П.М. Культурные растения и их сородичи// Л., -Колос.-1971.- 751 с.

35. Зарубайло Т. Я. Генетические предпосылки создания продуктивных сортов зерновых культур// Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции.- ВИР.1976.-Т.58, №1.- С.3-11.

36. Иванова Н.С., Обухович Е.М., Кузнецова Н.А., Трофимовская Выявление доноров устойчивости ячменя к сетчатой пятнистости в условиях Белоруссии// Земледелие и растениеводство в БССр. Сборник научн. трудов.- Минск.-1981.-Вып.24.- С.138-142.

37. Иващенко В.Г. Типы устойчивости кукурузы к болезням и пути их использования в селекционной практике// Типы устойчивости к болезням. Материалы научного семенара. Санкт - Петербург.- 2003 .-С.61-83.

38. Ишкова Т.И., Берестецкая Л.И., Гасич Е.Л., Левитин М.М., Власов Д.Ю. Диагностика основных хлебных злаков// СПб. ВИЗР.-2002.- 76 с.

39. Кадыров A.M., Будрусь М.В. Устойчивость ячменя к сетчатой пятнистости: селекционные и технологические аспекты// Ахова Раслин. Минск.- 1999.- № 5.- С.27-29.

40. Кашемирова JI.А. Фитосанитарные диагностические системы защиты ярового ячменя от темно-бурого и сетчатого "гельминтоспориозов'7/ Автореф. канд. дисс., 1995.- Большие Вяземы, 33 с.

41. Киселева М.И. Структура популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя// Защита и карантин растений.- 1997.- №9,- С.43-44.

42. Коновалова Г.С., Левитин М.М., Мироненко Н.В. Естественная и индуцированная изменчивость возбудителя сетчатой пятнистости ячменя// Тр. ВИЗР, Л., 1981.- С.56-62.

43. Коновалова Г.С. Изменчивость возбудителя сетчатой пятнистости ячменя при бесполом размножении// Автореф. дис. канд. биол. наук.- Л., 1991.-21 с.

44. Коновалова Г.С.Спонтанная и индуцированная изменчивость возбудителя ринхоспориоза ячменя// Вестник защиты растений. СПб-Пушкин.- 2000, № 1.- С.104-105.

45. Кушниренко И.Ю. Сетчатая пятнистость ячменя на Южном Урале и исходный материал для создания болезнеустойчивых сортов: Автореф. дис. канд. биол. наук.-Л., 1987.- 19 с.

46. Лакин Г.Ф. Биометрия.- М.- Высшая школа.- 1990.- С. 122-124.

47. Лебедева Л.В. Полиморфизм популяций возбудителя ринхоспориоза ржи (Rhynchosporium secalis (Oud.).J.J Davis по изоферментным маркерам// Генетика в XXI веке современное состояние и перспективы развития: Тез. 111-го съезда ВОГиС. М.,-2004.-С 209-210.

48. Левитин М.М., Шестопалов С.В. Типы спаривания и гибридизация штаммов Drechslera (Helminthosporium) teres// Иммунитет с.-х. растений к болезням. Труды ВИЗР.- Л.-1976.-№ 49.- С. 27-29.

49. Левитин М.М., Афанасенко О. С., Структура популяций возбудителя сетчатой пятнистости ячменя по признаку вирулентности. III. Локальность популяций// Миколог, и фитопатол.- 1980. Т. 14, вып. 2.- С. 130-132.

50. Левитин М.М. Генетические механизмы изменчивости фитопатогенных грибов. В кн.: Изменчивость фитопатогенных организмов.-М.: Колос, 1983. С. 31-39.

51. Левитин М.М., Петрова А.Н., Афанасенко О.С. Сравнительное изучение популяций Bipolaris sorokiniana (Sacc.) Shoem. по признаку вирулентности// Миколог, и фитопатол. 1985.- Т.19, Вып. 2.- С.154-158.

52. Левитин М. М. Генетические основы изменчивости фитопатогенных грибов.- М.: Агропромиздат.- 1986,- 208 с.

53. Левитин М.М., Коновалова Г.С. Соматическая гибридизация и изменчивость грибов// Успехи современной генетики.- 1994.- Вып. 19.- С.49-67.

54. Лэхтиков О.Н. Исходный материал для селекции ярового ячменя на северо- западе Нечерноземной зоны РСФСР// Автореф. дис. канд. с.-х. наук.-Л.- 1989.- С.10-13.

55. Майр Э. Популяции, виды и эволюция. М.: Мир, 1974.- 460 с.

56. Макарова И.Г. Генетический анализ устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости//Канд. дис. Санкт-Петербург,- 1996.195 с.

57. Мережко А.Ф., Ерохин Л.М., Юдин А.Е. Эффективный метод опыления зерновых культур.: Методические указания.- Л.: ВИР.-1973.- 11с.

58. Мережко А.Ф. Проблема доноров в селекции растений. С.-Петербург, ВИР.- 1994.- 123 с.

59. Мироненко Н.В., Петрова О.С. Генетическая структура популяций возбудителя красно- бурой пятнистости гриба Pyrenophora avenall Генетика в XXI веке современное состояние и перспективы развития: Тез. Ш-го съезда ВОГиС. М.,-2004.-С.215-216.

60. Мироненко Н.В. Современные достижения в изучении генетической структуры популяций фитопатогенных грибов// Успехи современной биологии.- 2004.- Т. 124, № 3.- С.234- 245.

61. Михайлова JI.A. Анализ дербентской популяции Puccinia triticina Erikss. по признаку вирулентности к сортам пшеницы Аврора и Кавказ// Миколог, и фитапотол.- 1972.- Т.6, Вып.1.- С.61- 62.

62. Михайлова JI.A. Популяционно-генетическое исследование возбудителя бурой ржавчины пшеницы Puccinia recondita в Дербенте. Автореф. дис. канд. биол. наук.- Л., -ВИР.-1973 .-19с.

63. Михайлова Л.А., Одинцова И.Г., Афанасенко О.С. Генетика взаимоотношений паразита и растения-хозяина// В кн.: Методы экспериментальной микологии. Справочник. Киев, "Наукова думка", 1982.-С. 358-375.

64. Михайлова Л.А. Генетика популяций фитопатогенных грибов// В кн.: Изменчивость фитопатогенных микроорганизмов. М., Колос.- 1983.1. С. 39-51.

65. Михайлова Л.А., Пригоровская Т.И. Желтая пятнистость листьев пшеницы- Pyrenophora tritici- repentis II Микол. и фитопатол. 2000.- Т.34, Вып.1.-С.7-16.

66. Михайлова Л. А. Генетика устойчивости пшеницы к бурой ржавчине. Типы устойчивости к болезням. Материалы научного семенара.- Санкт— Петербург.-2003.- С.45-61.

67. Генетика в XXI веке современное состояние и перспективы развития: Тез. 111-го съезда ВОГиС. М.,-2004.-С С. 428-429.

68. Неттевич Э.Д., Титова К.Д. Доноры устойчивости к гельминтоспориозу для селекции ячменя// Селекция и семеноводство, 1979, № 6, с. 22-23.

69. Обухович Е.М., Мицкевич В.К. Вредоносность сетчатого гельминтоспориоза ячменя в условиях Белоруссии// Тезисы. Докл. Научно-методической конференции.-Жодино.- 1982.- С. 80-81.

70. Одинцова И.Г., Смирнова Л.А., Михайлова Л.А., Анпилогова Л.К., Кузнецова Е.В. Идентификация генов устойчивости пшеницы к грибным заболеваниям. Методические указания.- Л.- 1989.- 34с.

71. Петрова А.Н. Популяции возбудителя сетчатой пятнистости ячменя в Ленинградской обл.// Тр. ВИЗР, 1981.- С. 19-22.

72. Петрова А.Н. Вирулентность популяций возбудителей темно-бурой и сетчатой пятнистостей ячменя и принципы создания инфекционных фонов: Автореф. канд. дис. канд. биол. наук,- Л., 1985.- 17 с.

73. Петрова О.С. Структура популяций возбудителя красно- бурой пятнистости овса на Северо Западе РФ и источники устойчивости к болезни// Автореф. дис. канд. биол. наук.- СПб., 2004.- 17 с.

74. Планк ван дер Я. Устойчивость растений к болезням.- М. Колос.-1972.- 292с.

75. Плохинский Н.А. Биометрия. Новосибирск, 1961.- 250 с.

76. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Высшая школа.:Минск.-1964.- С.252-253.

77. Сиренко А.С. Защита озимого ячменя от болезней в интенсивном земледелии Краснодарского края// Автореф. канд. дис., СПБ, 1994, 22 с.

78. Скурдянене И. Иммунологическое обоснование селекции ярового ячменя на устойчивость к возбудителю сетчатой пятнистости (Drechslera teres (Sacc.) Shoem.): Автореф. дис. канд. биол. наук.- Вильнюс, 1993.- 17 с.

79. Смирнова З.Г., Трофимовская А .Я. Источники устойчивости к сетчатому гельминтоспориозу// Сб. научн. Тр. По прикл. Ботанике, генетике, и селекции / ВНИИ растениеводства.- 1985.- Т.95. С.52-55.

80. Тамразов Х.Ч. Иммунологические основы селекции ячменя на устойчивость к гельминтоспориозам в условиях Азербайджанской ССР: Автореф. дис. канд. биол. наук.- Тбилиси, 1989.- 17 с.

81. Трофимовская А. Я. Ячмень.- JL- 1972.- С. 20-36.

82. Трофимовская А.Я., Афанасенко О.С. Источники устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости {Drechslera teres)// Доклады ВАСХНИЛ.- 1983, № 3.- С. 22-29.

83. Трофимовская А.Я., Афанасенко О.С., Левитин М.М. Источники устойчивости ячменя к возбудителю сетчатой пятнистости {Drechslera teres Ito.)// Доклады ВАСХНИЛ.- 1983, №5.- С. 19-21.

84. Уровни и тенденции изменения видового состава и внутрипопуляционной структуры, ареалы комплексов вредных и полезных организмов и прогноз опасных фитосанитарных ситуаций по зонам страны. СПб.-2000.- 100 с.

85. Хасанов Б.А. Несовершенные грибы как возбудители основных заболеваний злаков в Средней Азии и Казахстане// Автореф. докт. дис., М., 1992, 44 с.

86. Хохряков М.К., Доброзракова Т.Л, Степанов К.М, Летова М.Ф. Определитель болезней растений.- СПб.: Лань, -2003.-С.54-64.

87. Abdelal R., El-Fahl A.M., Ghobrial E., Xata H.M., Hammouda A.M. Cultural and physiological specialization of Helminthosporium teres isolates// Egypt J. Phytopathol., -1981.- Vol. 13.- 6 p.

88. Abdelhak Т., Dessouki S.M., Ghobrial E., Massour A.A., Khalifa M.I. Sources of resistance to net blotch Helminthosporium teres (Sacc.) in U.A.R., Tech. Bull. 1968.-10, Plant Protection Department, Ministrry of Agriculture, United Arab Republic.

89. Afanasenko O. Terentieva I., Makarova I. Landraces from Peru new sources of resistance to net blotch of barley// Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium. 22-27 October. -2000. -P. 71-73.

90. Afanasenko O. Investigations on Populations of Pyrenophora teres f. teres, the cause of net blotch of barley. J. Russian Phytopathol. Soc. -2001.1. Vol. 2.- P. 9-18.

91. Ali S., Buchenau G.W. Incidence of toxin- producing pathtypes of Pyrenophora tritici- repentis in South Dakota. (Abstr.)// Phytopathol.,- 1992.- Vol. 82.- P.1159.

92. Ali S., Francl L. J. Population race structure of Pyrenophora tritici-repentis prevalent on wheat and noncereal grasses in the Geat Plains// Plant Dis.-2003.- Vol. 87.- P. 418-422.

93. Arabi M. I., Sarrafi A., Barrault G., Albertini L. Inheritance of partial resistance to net blotch in barley// Plant Breeding.- 1990.- Vol. 105.- P. 150-155.

94. Arabi M. I., Barrault G., Sarrafi A., Albertini L. Variation in the resistance of barley cultivars and in the pathogenicity of Drechslera teres f. sp. maculata and D. teres f. sp. teres isolates from France// Plant Pathol., -1992.- Vol. 41.- P. 180186.

95. Asher M.J.C., Thomas C.E. The inheritance of mechanisms of partial resistance to Erysiphe graminis in spring barley// Plant Pathol.- 1987.- Vol. 36.- P. 66-72.

96. Aylor D.E. Dispersal in time and space: aerial pathogens// Plant Disease an advanced treatise. New York, San Francisco, London: Academic press.- 1978.-Vol. 11.-P. 159-179.

97. Balkema-Bomstra A.G., Mastebroeek H.D. Diallel analysis of partial resistance to powdery mildew caused by Erysiphe graminis f.sp. hordei (Hordeum vulgare L.) // Euphytica.- 1993.- Vol.65.- P. 15-21.

98. Baltazar B.M., Scharen A.L. Variation in virulence of net and spot forms of Pyrenophora teres (Died.) Drechsl. on barley.- 1993.- Rachis .Vol. 12.- P. 3-7.

99. Barrault G. Albertini L., Sarrafi A. Epidemiologic de Drechslera teres (Sacc.) Shoem. (f. teres et f. maculata) parasite de l'Orge (Hordeum vulgare L.) //Rev. Cytol. et Biol. Veg. Bot., -1990.- Vol.13, №4,- P.209-211.

100. Bengtsson A., Lejerstam B. Bladflacksjuka hos korn. Vaxtskyddsnotiser.- 1982.- Vol. 46, № 1.- P. 31-33.

101. Bjarko M. E. Sources and genetic action of resistance in barley to different virulent types of Pyrenophora teres, the causal organism of net blotch// Thesis: Montana State University.- 1979.- 97 p.

102. Bockelman H. E., Sharp E. L. Eslick R. F. Trisomic analysis of genes for resistance to scald and net blotch in several barley cultivars// Can. J. Bot.,-1977.-Vol. 55, N 15.-P. 2142-2148.

103. Bockelman H. E., Sharp E. L., Bjarko M.E. Isolates of Pyrenophora teres from Montana and the Mediterranean region that produce spot-type lesions on barley// Plant Dis., 1983.- Vol. 67.- P. 696-697.

104. Brandl F., Hoffmann G.M. Net blotch disease on winter barley (Drechslera teres; perfect stage: Pyrenophora teres); disease progress and threshold for fungicidal treatments // Gesunde Pflanzen,- 1990.- Vol. 42.- P. 192-201.

105. Brandl F., Hoffmann G.M. Differentiation of physiological races of Drechslera teres (Sacc.) Shoem., pathogen of net blotch of barley// Zeitschrift fur Pflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz, -1991.- Vol. 98, № 1.- P. 47-66.

106. Buchannon K. W., McDonald W.C. Sources of resistance in barley to Pyrenophora teresll Canad. Plant Sci.,- 1965.- Vol. 45, № 2.- P. 189-194.

107. Burdon J.J., Abbott D.C., Brown A.H.D., Brown J.S., Genetic structure of the scald pathogen {Rhyncosporium secalis) in south east Australia: implications for control strategies// Aust. J. Agric.,- 1994.- Vol.45.- P.1445-1454.

108. Caddel J.L. , Wilcoxson R.D. Sources of resistance to net blotch of barley in Morocco// Plant Dis. Rep., -1975.- Vol. 59.- P. 491-494.

109. Carmona M., Barreto D. Fungal deiseases of barley in province of Buenos Aires (Argentina) in 1991// Fitopatologia Brasileira.- 1995.- Vol. 3.- P. 509-510.

110. Chen D., Zeigler R. S., Leung H., Nelson R. J. Population structure of Pyricularia grisea at two screening sites in the Philippines// Phytopathol., -1995. -Vol. 85.-P. 1011- 1020.

111. Chen R-S., McDonald B. A. Sexual reproduction plays a major role in the genetic structure of populations of the fungus Mycosphaerella graminicola// Genetics.,- 1996.-Vol. 142.- P. 1119- 1125.

112. Cherif M., Harabi M. Virulence spectrum to barley in some isolates of Pyrenophora teresll Proc. of Internat. Workshop on Barley Leaf Blights. Aleppo, -1993.-P. 15-16.

113. Clifford B.C., Jones D. Net blotch of barley. In UKCPVS 1980 Annual report. Published by the UK Cereal Pathogen Virulence Survey Committee, Cambridge, England. 1981.

114. Cox D.J., Hosford R.M. Jr. Resistant winter wheats compared at differing growth stages and leaf positions for tan spot severity// Plant Dis.-1987.- Vol.71, №10.- P. 883-886.

115. Crandall B.A. Differetiation and distribution of Rhynchosporium secalis on composite cross population and pureline cultivars in California. Ph.D.diss.,1987. University of California, Davis

116. Diaz de Ackermann M., Hosford R.M.Jr., Cox D.J., Hammond J.J. Resistance in winter wheat to geographically differing isolates of Pyrenophora tritici-repentis and observation on pseudoperitecia// Plant. Dis.-1988.-Vol.72, № 10.- P.l028-1031.

117. Dreiseitl A., Jurecka D. Disesase occurrence on spring barley in Czech Republic in 1989-1995. Ochrana Roslin.- 1996. Vol. 3.- P. 221-229.

118. Douglas G.B., Gordon I.L. Quantitative genetics of net blotch resistance in barley//N.Z.J. Agric.,- 1985.- Vol. 28.- P. 157-164.

119. Evans S. G. Observations on the development of leaf blotch and net blotch of barley debris// Plant Pathol., -1969.- Vol. 18, № 3, -P. 116-118.

120. Flah E., Medimagh S., Sakkouhi L. Evalution of barley leaf blight disease in Tunisia// Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA, 7-11 April, 2002.- P.39-48.

121. Flor H.H. Host-parasite interection in flax- rust- its genetics and ohter implications// Phytopathol., 1955.- Vol.- 45, № 12.- P680-685.

122. Frecha S. H. Herencia de los factores de resistencia a Helminthosporium teres que posen los variedades de Cebada Rojo, Hoye Epuyen у Hordeum spontaneum// Rev. de Investig. Agr., -1958.- Vol. 12.- P. 91-95.

123. Habgood R.M. Designation of physiological races of plant pathogens// Nature, -1970.- № 227.- P. 1268-1269.

124. Hampton J.G. The role of seed-borne inoculum in the epidemiology of net blotch of barley in New Zealand// N.Z. J. Exp. Agr.- 1980.- Vol. 8.-P.297-299.

125. Hansen L.R, Magnus H.A. Virulence spectrum of Rhynchosporium secalis in Norweay and sources of resistance in barley// Phytopathol.,- 1973. -Vol. 76.- P.303-313.

126. Harabi M. A., Kamel A. Virulence spectrum to barley in some isolates of Pyrenophora teres form the Mediterranean region// Plant Dis., -1990.- Vol. 74.- P. 230-232.

127. Hartleb H., Meyer V., Lehmann С. O. Das resistanzverhalten von saatgersten von Drechslera teres (Sacc.) Shoem.// J. Phytopathol., 1990.- Vol. 26.-P. 257-264.

128. Но K.M., Tekauz A., Choo T.M., Martin R.A. Genetic studies on net blotch resistance in barley cross// Can. J. Plant Sci., 1996.- Vol. 76.- P. 715-719.

129. Hosford R.M. A form of Pyrenophora trichostoma pathogenic to wheat and other grasses// Phytopathol., 1971.- Vol. 61, №1.- P.28-32.

130. Hosford R.M., Jordahel J.G., Hammond J.J. Effect of wheat genotype, leaf position, growth stage, fungal isolate and period on tan spot lesions// Plant Dis.- 1990.- Vol. 74, 5.- P.385- 390.

131. Hwang B.K., Heitefus R. Characterization of adult plant resistance of spring barley to powdery mildew (Erysiphe graminis f. sp. hordei). I. Race specificity and expression of resistance// Phytopaht.,- 1982. -Vol. 104.- P. 168-178.

132. Gacek E. Studies on the resistance of barley to net blotch caused by Pyrenophora teres (Died.) Drechsl.// Hodowla Rosl. Aklim. Nasienn.,-1979.- Vol. 23.-P. 73-83.

133. Gacek E. Variabilities of pathogenicity of the Pyrenophora teres (Died.) Drechsl. fungus// Hodowla Rosl. Aklim. Nasienn.,- 1985.- N 29.- P. 41-50.

134. Gamba F., Tekauz A. First report of differential virulence in Uruguayan isolates of Pyrenophora teresII Proc. of the 8lh International Barley Genetics Symposium. 22-27 October. -2000.- P. 113-114.

135. Gamba F., Tekauz A. Physiologic Specialization in Uruguayan Isolates of Pyrenophora teresll Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA, 7-11 April, 2002,.- P.35-43.

136. Garvin D.F., Brown A.H.D., Burdon J.J. Inheritance and chromosome locations of scald-resistance genes derived from Iranian and Turkish wild barleys//Theor. Appl. Genet.,- 1997.- Vol.94.-P. 1086-1091.

137. Garvin D.F., Brown A.H.D., Raman H., Read B.J. Genetic mapping of the barley Rrsl4 scald resistance gene with RFLP, isozyme and seed storage protein markers// Plant Breeding.- 2000.- Vol.119.- P.193-196.

138. Gatti A., Rizza F., Delogu G., Terzi V., Porta-Puglia A., and Vannacci G., Physiological and biochemical variability in a population of Drechslera Gramineall J. Genet .Breed.,- 1992.- Vol. 46.- P. 179-186.

139. Gay A., Leon J. QTL for Drechslera teres resistance in barley// Abstracts of 9nd International Barley Genetics Symposium, Brno, Czech Republic.- 20-26 June- 2004.- P. 132-133.

140. Gilmour J. Octal notation for designating physiological races of plant pathogens // Nature, -1973.- № 256.- P. 620.

141. Goodwin S.B.,Allard R.N., Webster R.K. Izozyme analisis reveals geographical differetniation of Rhynchosporium secalis populations// Phytopathol.,- 1987. -Vol. 77. -P. 1710.

142. Goodwin S.B., Saghai Maroof M.A., Allard R.W., Webster R.K. Isozyme variation within and among populations of Rhynchosporium secalis in Europe, Australia and the United States// Mycol. Res. 1993. Vol. 97. P. 49-58.

143. Goodwin S.B., Cohen B.A., Deahl K.L., Fiy W.E. Migration from Northen Mexico as the probable cause of recent genetic changes in populations of

144. Phytophthora infestans in the United States and Canada // Phytopathology.- 1994.-Vol.84.- P. 553-558.

145. Graner A., Foroughi-Wehr В., Tekauz A. RFLP mapping of a gene in barley conferring resistance to net blotch (P. teres)/I Euphytica.- 1996.- Vol. 91. -P. 229-234.

146. Gray G. G. Genetic systems in the net blotch disease complex of barley. Rh. D. Thesis, North Dakota State Univ., Fargo,- 1966.- 65 p.

147. Gupta S., R. Loughman, R. Lance, and M.G.K. Jones. Genetics of seedling and adult plant resistance in barley against Pyrenophora teres f. teresll Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA, 7-11 April, 2002, p. 32.

148. Jackson L.F., Webster R. K. Race differentiation, distribution, and frequency of Rhynchosporium secalis in California// Phytopathol. 1976. -Vol. 66. -P. 719-725.

149. Jackson L.F., Kahler A.L., Webster R.K., Allard R.W. Conservation of scald resistance in barley composite cross populations// Phytopathol.,-1978.-Vol.68.- P.645-650.

150. Jalli M., Robinson J. Stable resistance in barley to Pyrenophora teres f. teres isolates from the Nordic- Baltic region after increase on standard host genotypes// Euphytica. 2000. -Vol.113. -P.71-77.

151. Janczak C., Lawecki Т., Pawlak A. Prevalent fungal disease ofcereals in 1997 and their consecquences. Progress in Plant Protection.- 1998.- Vol. 2.- P. 467-469.

152. Jayasena K., Loughman R., Managing Barley leaf disease// Agriculture Western Australia.- 2001. -No. -64.

153. Johnson Т., Buchannon K.W. The reaction of barley varieties to rye stem rust, Puccinia trticina var. Secalisll Can.J. Agric., 1954. -Sci. 34: P. 473-482.

154. Johnston C.O., Melchers L.E., Greenhouse studies on the relation of age of wheat plants to infection by Puccinia trticina!I J. Agric., 1929.- Res. 38:1. P. 147-157.

155. Jones E.R.L., Clifford B.C. Netblotch of barley, UK Cereal pathogen virulence survey. 1995 Annual Report, P. 61-66. The United Kingdom Cereal Pathogen Virulence Survey Committee, Cambridge.

156. Jones D.A. Genetic properties of inhibitor genes in flax rust that alter avirulence to virulence on flax// Phytopathol., -1988.- Vol. 78.- P. 342-344. •

157. Jonsson R., Bryngelsson Т., Gustafsson M. Virylence studies of Swedish net blotch isolates (Drechslera teres) and identification of resistant barley lines// Euphytica.- 1997.- Vol. 94.- P. 209-218.

158. Jonsson R., Bryngelsson Т., Jalli M., Gustafsson M. Effect of growth stage on resistance to Drechslera teres f. teres in barley// Phytopathol.,- 1998.-Vol. 146.-P. 261-265.

159. Jonsson R., Sail Т., Kraft Т., Gustafsson M. Inheritance of resistance to Pyrenophora teres f. teres in spring barley// Plant Breeding. 1999.- Vol. 118.- P. 313-317.

160. Jonsson R., Sail Т., Bryngelsson T. Genetic diversity for random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers in two Swedish populations of Pyrenophora teresIt Can. J. Plant Pathol. 2000.- Vol. 22.- P. 258-264.

161. Jonsson R. Breeding for resistance to barley net blotch (Pyrenophora teres).Doctoral thesis. Swedish university of agricultural scieces. Alnarp.- 2001.-264p.

162. Jordan V.W.L. Aetiology of barley net bloth caused by Pyrenophra teres and some effects on yiad// Plant Pathol., -1981.- Vol. 30, № 2.- P.77-87.

163. Jorgensen H.J.L., Smedegaard-Petersen V. Pathogenic variation of Rhynchosporium secalis in Denmark and sources of resistance in barley// Plant Diseas.,- 1995.- Vol.79.- P.297-301.

164. Kammiovirta К., Peltonen S., Jalli M., Karjalainen R. Molecular variation in Drechslera teres populations detected by RAPD markers// Annals of Appl. Biol., 1995.- P.33.

165. Keller S. M., McDermott J. M., Pettway R. E., Wolfe M. S., McDonald B. A. Gene flow and sexual reproduction in the wheat glume blotch pathogen Phaeosphaeria nodorum (anamorph Stagonospora nodorum)/I Phytopathol.,-1997.- Vol. 87.- P. 353.

166. Kenneth R., Atzmon Y., Khair I. Problems in breeding barley resistant to net blotch disease in Israel// Rep. from " The First Israel Congress of Plant Pathology", 1967.- P. 46-47.

167. Khan T. N., Boyd W.J. Long term preservationof Drechslera teres by freeze drying//Phytopathol.,- 1968.- V.58.- P. 1448-1449.

168. Khan T. N., Boyd W.J. Inheritance of resistance to net blotch in barley. II. Genes conditioning resistance against race W.A. 2// Canad. J Genet, and Cytol., 1969.- Vol. 11, № 3.- P. 592-597.

169. Khan T. N. Turkish barley varieties as a source of resistance to net blotch// Euphytica, 1971.- Vol. 20.- P. 292-298.

170. Khan T.N. Changes in pathogenicity of Drechslera teres relating to changes in barley cultivars grown in western Austalia// Plant Disease.- 1982.-Vol. 66.- P.655-656.

171. Khan T.N., Tekauz A. Occurence and pathogenicity of Drechslera teres isolates causing spot type symptoms on barley in Western Australia// Plant Dis., 1982.-Vol. 66.-P. 423-425.

172. Khan T.N., Gilmour R., Portmann P.A. Resistance to spot- type net blotch in barley // 9 Austr. Plant Breeding Conference, Wagga, 27th June-1st July,-1988.- P. 79-80.

173. Khan T.N. Effect of spot-type net blotch (Drechslera teres (Sacc.) Shoem) infection on barley yild in short season environment of Northern cereal belt of Western Australia// Aust. J. Agric. Res., 1989.- Vol. 40.- P. 745-752.

174. Krupinsky J.M. Observation of the host range of isolates of Pyrenophora trichostoma II Can. J. Plant Pathol.,- 1982.- Vol.4.- P.42-46.

175. Kumar J., Nelson R.J., Zeigler R. S. Population structure and dynamics of Magnaporthe grisea in the Indian Himalayas// Genetics.-1999. -Vol. 152. P. 971-979.

176. Lamari L., Bernier C.C. Evalution of wheat lines and cultivars to tan spot (Pyrenophora tritici- repentis) based on lesion type// Can. J. Plant Pathol.- 1989.-Vol.l 1, №1.- P.49-56.

177. Lamari L., Gilbert J., Tekauz A. Race differentiation in Pyrenophra tritici- repentis and survey of physiologic variation in western CanadaII Can. J. Plant Pathol.- 1998.-Vol. 20.- P. 396-400.

178. Lau G.W., Chao C.T., Ellingboe A.H. Interaction of genes controlling avirulence/virulence of Magnaporthe grisea on rice cultivar Katy// Phytopathol.,-1993.-Vol. 83.- P.375-382.

179. Leung H., Borromeo E.S., Bernardo M.A., Notteghem J.L. Genetic analysis of virulence in the rice blast fungus Magnaporthe griseaII Phytopathol., 1988.- Vol.78. -P.1227-1233.

180. Limpert E., Muller K. Designation of pathotypes of plant pathogens// J. Phytopath., -1993.- Vol. 140.- P. 346-358.

181. Long D.L., Kolmer J.A., Leonard K.L., Hughes M.E. Physiologic spcialization of Puccinia triticina on wheat in Unit States in 2000// Plant Dis.,- Vol. 86.- P. 981-986.

182. Louw J.P.J., Victor D., Crous P.W., Holz G., Janse B.J.H. Characterization of Pyrenophora teres isolates associated with spot and net type lesions on barley in South Africa // J. Phytopathol.,- 1995.- Vol. 143.- P. 133-134.

183. Luz W.C., Hosford R.M. Twelve Pyrenophora trichostoma races for virulence of wheat in cenral Plains of North America// Phytopathol.,- 1980.- Vol. 70, № 12.- P. 1193-1196.

184. Lyngs Jorgensen H.J., Smedegard-Petersen V. Pathogenic variation of Rhynchosporium secalis in Denmark and sources of resistance in barley// Plant Dis. -Vol. 79.- 1995.- P. 297-301.

185. Manninen O., Kalendar R., Robinson J., Schulman A.H. Application of BARE1 retrotransposon markers to the mapping of a major resistance gene for net blotch in barley // Mol. Gen. Genet.- 2000 (6). -Vol. 264.- P. 325-334.

186. Martens J.W. Stem rust of oats in Canada in 1967// Canad. Plant. Dis. Sur., 1968.- Vol.48.- P. 17-19.

187. Martin R.A., Clough K.S. Relationship of airborne spore load of Pyrenophora teres and weather variables to net blotch development of barley// Can. J. of Plant Pathol.,- 1984.- Vol. 6.- P. 105-110.

188. McDonald W.C. Heterotallism in Pyrenophora terasV/Phytopathol.,-1963. Vol.53, № 7. - P.771-773.

189. McDonald W.C. Variability and the inheritance of morphological mutants in Pyrenophora teres I I Phytopath., 1967.- Vol. 57, № 7.- P. 747-755.

190. McDonald B.A., McDermott J.M., Allard R. W., Webster R.K Coevolution of host and pathogen populations in the Hordeum vulgare-Rhynchosporium secalis pathosystem// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. Vol. 86.-P. 3924-3927.

191. McDonald B.A. The population genetics of septoria tritici (teleomorph Mycrosphaerella graminicola) Abstr. 5th Internat. Mycol. Congr. Vancouver. Canada.-1994(a).- P. 137.

192. McDonald B.A., Miles J., Nelson L.R., Pettway R.E. Genetic variability in nuclear DNA in field populations of Stagonospora nodorumll Phytopathol.,-1994(6).- Vol. 84.- P.250-255.

193. McDonald В. A., Zhan J., Burdon J.J. Genetic structure of Rhynchosporium secalis in Australia// Phytopathol.,- 1999,-Vol. 89.- P. 639-645.

194. McDonald B.A., Linde C. The population genetics of plant pathogens and breeding strategies for durable resistance// Euphytica.-2002. V. 124.-P.161.

195. McDermott J.M., McDonald B.A., Allard R.W., Webster K., Genetic variability for pathogenicity, isozyme, ribosomal DNA and colony color variants in populations of Rhynchosporium secalis// Genetics.- 1989.-Vol. 122.- P. 561-565.

196. Metcalfe D.K., Chiko A.W., Martens J.W., Tekauz A. Reaction of Ethiopian barleys to Canadian barley pathogens// Can. J. of PI. Sci.,- 1978.- Vol. 58, № 3.- P. 885-890.

197. Minarikova V. The study of Pyrenophora teres (Died.) Drechs. Population on the territory of the Czech Republic.// Ochr. Rostl., 1993.- Vol. 29.-P. 169-177.

198. Minarikova V. An analysis of Pyrenophora teres (Died.) Drechs. population in the Czech republic and its use for barley resistance breeding// Ochr. Rostl.,- 1995.-Vol. 31.- P. 1-10.

199. Minarikova V., Polisenska I. Analysis ofpopulations of Pyrenophora teres on Barley in the Czech Republic// Plant Protection Science.- 1999. -Vol. 35.-P. 115-120.

200. Mode C.Y., Schaller C. W. Two additional factors for host resistance to net blotch in barley//Agr. J., 1958.- Vol. 50.- P. 15-18.

201. Newman, P.L. and Owen, H. Evidence of asexual recombination in Rhynchosporium secalis// Plant Pathol. -1985.-Vol.34.- P338- 340.

202. Newton A.C., Searle J., Hackett C.A., Cooke DEL. Variability in pathotype, aggressiveness, RAPD profile, and rDNA ITS1 sequences of UKisolates of Rhynchosporium secalisll Journal of Plant Disease and Protection.-2001.-Vol.- 108.-P. 446-458.

203. Nutter F.W., Pederson V.D. Components of rate limiting resistance in 6-row spring barley to net blotch {Pyrenophora teres) using a seed germination paper technique// Phytopathol.,- 1981.- Vol. 71.- P. 1117.

204. Omar A. M., Selim A. K. A. , Khalifa, Inheritance of barley reaction to causal agent of net blotch// U.A.R. J. Bot., 1970.- Vol. 13, № 1.- P. 29-43.

205. Peever T.L., Milgroom M.G. Genetic structure of Pyrenophora teres populations determined with random amplified polymorphic DNA markers// Can. J. Bot.- 1994.- Vol. 72.- P. 915-923.

206. Peltonen S., Jalli M., KammiovirtaK., Karjalainen R. Genetic variation in Drechslera teres population as indicated by RAPD markers// Ann. Appl. Biol. -1996.- Vol.128.- P. 465-477.

207. Penner G.A., Legge W.G., Tekauz A. Identification of isolate specific sources of scald resistance in Turkisch barley {Hordeum vulgare) accessions// Euphytica.- 1998.- Vol. 99.- P. 111-114.

208. Piening L.J. The occurrence of Pyrenophora teres on barley straw in Alberta// Can. Plant Dis. Survey Dec., 41, 5.- 1961- P.299-300.

209. Piening L.J. Devolopment of barley net bloth from infected straw and seedII Canad. J. PI. Sci.- 1968.- Vol.48, № 6.- P.623

210. Piening L. J., Kaufmann M.L. Comparison of the effects of net blotch and leaf removal on yield in barley// Can. J. PI. Sci., 1969.- Vol. 49 P. 731-735.

211. Platz G.J., Rees R.G., Galea V.J. Virulence of net blotch in Australia// VII International Barley Genetics Symposium, Saskatchewan — Canada.- 1996.- P. 761-763.

212. Platz G.J., Bell K. L., Rees R. G., Galea V. J. Pathotype variation of the Australian net blotch population// Proc. of the 8th International Barley Genetics Symposium. 22-27 October. 2000.- P. 160-162.

213. Platz G.J., Poulsen DM.E. The Value of Seedling Screening in Selection for Resistance to Net Blotches (.Pyrenophora teres)!I Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA, 7-11 April, 2002.- P.-122

214. Platz G.J., Poulsen D.M.E, Williams K. The value of seedling screening in selection for resistance to net blotches (Pyrenophora teres)!/ Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA, 7-11 April. 2002. -P. 3637.

215. Pon D. S. Physiologic specialization and variation in Helminthosporium teres!! Phytopathol.,- 1949.- Vol. 39.- P. 18.

216. Populer C. Changes in host susceptebility with time.,, in Academic Press, new York.J.G. Horsfall and E.B. Cowling eds. Plant Disease- An Advanced Treatise. -1978.-Vol.2.- P. 239-262.

217. Prakash O., Mirsa A.P. Barley variety as a source of resistance to net blotch// Indian J. Mycol. PI. Pathol.- 1976.- Vol. 6.- P.109-110.

218. Rau D., Brown A.H.D., Attene G., Balmas V., Brubaker C.L., Saba E., Papa R. AFLP genetic diversity of Pyrenophora teres Drechsler on barley landraces// EUCARPIA Cereal Section Meeting. 21-25 November, 2002 -Salsomaggiore Italy.- P. 185.

219. Raymond P.S., Bockus W.W., Normann B.L. Tan spot of winter wheat: procedures to determine host responce// Phytopathol.,- 1985.- Vol. 75, №6.- P.686-690.

220. Rees R.G., Platz G.J., Effects of yellow spot on wheat on: Comparison of epidemics at different stages of crop development// Australian Journal of Agricultural Research.- 1983.- Vol.34.- P. 39-46.

221. Riaz M., Bockus W.W., Davis M.A. Effects of wheat genotype, time after inoculation and leaf age on conidia production by Drechslera tritici-repentisll Phytopathol.,- 1991.- Vol.81, №10.- P. 1293-1302.

222. Rizk R.A., Massarat El-ghamry, Noaman M.M., Faten El- Nasher, Khlifa M.M. Survey and determination of barley fungal and viral disease along the nortwest coast and Siria// Assiut Journal of Agricultural Sciences.- 1991.- Vol. 22, №1.- P.143-150.

223. Rizk R.A., I.A. Ahmed, sources of resistance to net blotch in Egyptian barley// Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA, 7-11 April, 2002.-P

224. Robbertse В., Lennox C.L., van Jaarsveld A.B., Crous P.W., van der Rijst M. Pathogenecity of the Rhynchosporium secalis population in the Western Cape province of South Africa// Euphytica.- 2000.- Vol. 115. P. 75-82.

225. Russel G.E., Andrews C.R. and Bishop C.D. Development of powdery mildew on leaves of several barley varieties at different growth stages. Ann Appl. Biol.,-1976.- Vol. 82. P. 467-476.

226. Sah D.N., Fehrmann H. Virulence patterns of geographically differing isolates of Pyrenophora tritici- repentis and sources of resistance in wheat// Plant Dis.- 1992.- Vol.76.-P. 712- 716.

227. Salamati S., Zhan J., Burdon J.J. McDonald B.A. The Genetic structure of field populations of Rhynchosporium secalis from three continents suggests moderate gene flow and regular recombination// Phytopathol., 2000. -Vol. 90. -P. 901-908.

228. Salamati, S. and Tronsmo, A.M. Pathogenicity of Rhynchosporium secalis isolates from Norway on 30 cultivars of barley// Plant Pathol. -1997.-Vol.46.-P.416-424.

229. Sayoud R., Bendif N. Barley leaf blights in Algeria. Rachis. -1995.-Vol.l.- P.61-63.

230. Schaller C.W., Wiebe G.A. Sources of resistance to net blotch of barley// Agr. J., -1952.- № 6.- P. 334-336.

231. Schaller C. W. Inheritance of resistance to net blotch of barley// Phytopathol., -1955- Vol. 45, № 3.- P. 174-176.

232. Schilder A.M.C., Bergstrom G.C. Variationin virulence and agressiveness within the population of Pyrenophora tritici-repentis in New York// Phytopathol.,- 1990.- Vol.80, № 1.- P. 84-89.

233. Selim A. K. A., Omar A. M., Desouki S. M., Mohamed L. К. M. Inheritance of mature plant reaction to net blotch disease of barley// Poljoprivz., -1973.- g. 22, br. 3/4,- P. 65-70.

234. Semeane Y. Importance and control of barley leaf blights in Ethiopia. Rachis.- 1995.-Vol. 1.- P. 83-89.

235. Serenius M., Mironenko N., Manninen O. Molecular diversity on Finnish barley net blotch {Pyrenophora teres) populations// Abstract . Proceedings of the NJF' s 22d Congress " Nordic Agricalture in Global Prespective" , July, 1-4,2003, Turku, Finland.

236. Serenius M., Manninen O. Genetic variation, occurence of mating types and different forms of Pyrenophora teres causing net blotch of barley in Finland// Mycol. Res. 2005 (in press).

237. Shipton W.A. Effect of net blotch infection of barley on grain yield and quality// Austr. J. of Exper. Agric. and Animal Husbandry, -1966.-V.6, №23.-P.437-440.

238. Singh S. Biotic factors affecting barley net blotch epidemiology// Indian Phytopathol., 1962.- Vol. 15,N3/4.-P. 195-202.

239. Smedegard-Petersen V. Reduction in yield and grain size of barley due to attack by net blotch fungus Pyrenophora teres!I Revew of Plant Pathol., -1974.-Vol. 53, №9.- P. 108-117.

240. Smedegaard-Petersen V. Inheritance of genetic factors for symptoms and pathogenicity in hybrid of Pyrenophora teres and Pyrenophora graminealf Phytopathology. Z. -1977. -Vol. 89, № 3. -P. 193-202.

241. Steffenson B.J., Webster R.K, Jackson L.F. Reduction in yield loss using incomplete resistance to Pyrenophora teres f. teres in Barley// Plant Disease, 1991, Vol. 75, №1, -p. 96-100.

242. Steffenson B.J., Webster R.K. Pathotype diversity of Pyrenophora teres f. teres on barley// Phytopathol.,- 1992. -Vol.82.- P.170-177.

243. Steffenson B.J., Hayes P.M., Kleinhofs A. Genetics of seedling and adult plant resistance to net blotch {Pyrenophora teres f. teres and spot blotch {Cochliobolus sativus) in barley// Theor. Appl. Genet. -1996.- Vol. 92. P. 552558.

244. Steffenson B.J., Fetch Т.,Jr., Wesenberg D., Bockelman H. Sources of resistance to spot and blotch in barley. Abstract in Phytopathology. -1998.- P. 192196.

245. Steffenson B.J. Durable resistance to spot blotch and stem rust inth *

246. Barley// Proc. of the 8 International Barley Genetics Symposium. 22-27 October. 2000.- P. 39-44.

247. Tacconi G., Cattivelli L., Faccini N., Pecchioni N., Stanca A.M., Vale G. Identification and mapping of a new leaf stripe resistance gene in barley {Hordeum vulgare L)// Theor. Appl. Genet. -2001.- Vol.102.- P. 1286-1291.

248. Tekauz A., Buchannon K.W. Distribution and sources of resistance to biotypes of Pyrenophora teres in Western Canada// Canad. J. Plant Sci., 1977- Vol. 57.- P. 389-395.

249. Tekauz A.A numerical scale to classify reaction of barley to Pyrenophora teres,H Can. J. Plant Pathol.,.- 1985.-Vol. 7.- P.181-183.

250. Tekauz A. Effect of plant age and leaf position on the reaction of barley to Pyrenophora teres!I Canad. J. of Plant Pathol., -1986.- Vol. 8.- P. 380-386.

251. Tekauz A. Characterization and distribution of pathogenic variation in Pyrenophora teres f. teres and P. teres f. maculata from Western Canada// Canad. J. of Plant Pathol., -1990.- Vol. 12.- P. 141-148.

252. Tekauz A. Pathogenic variation in Rhynchosporium secalis on barley in Canada// Can. J. of Plant Pathol. -1991.- Vol. 13. -P. 298-304.

253. Valjavec-Gratian M., Steffenson B.J. Genetics of virulence in Cochliobolus sativus and resistance in barley// Phytopathol.,- 1997. -Vol. 87.- P. 1140-1143.

254. Vandenberg C.G.J., Rossnagel B.G. Epidemiology of spot type net blotch on spring barley in Saskatchewan.// Phytopathology. -1991.-Vol. 81, № 11.-P. 1446-1452.

255. Weiland J.J., Steffenson B.J., Cartwright R.D., Webster R. K. Identification of molecular genetic markers in Pyrenophora teres f. teres associated with low virulence on 'Harbin' barley// Phytopathol., -1999.- Vol. 89.- P. 176-181.

256. Wilcoxson R.D., Rusmusson D.C., Treefue L.M., Suganda T. Inheritance of resistance to Pyrenophora teres in Minnesota Barley// Plant Dis., -1992.- Vol. 76.- P. 367-369.

257. Wu H.L., Steffenson B.J., Li Y., Lesson A.E., Zhong S. Genetic variation for virulence and RFLP marcers in Pyrenophra teresll Can. J. Plant Pathol., -2003.- № 3.- P.82-90.

258. Xue A.G, Burnett J., Helm J., Rossnagel B.G. Variation in seedling and adult- plant resistance to Rhynchosporium secalis in barley// Can. J. Plant Pathol. -1995.-Vol. 17.-P.46-48.

259. Yahyaoui AH., Alamdar Z., Ceccarelli S., Grando S. Screening for resistance to Scald {Rhynchosporium secalis) in barley // Abstracts of 2nd International workshop on Barley leaf blights, ICARDA, 7-11 April, 2002.