Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Диагностика вирусных болезней яблони
ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Диагностика вирусных болезней яблони"

На правах рукописи

Бриндаров Дмитрий Дмитриевич

ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ЯБЛОНИ

Специальность 06.01.11 - защита растений

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Работа выполнена в ГНУ "Всероссийский селекционно-технологический институт садоводства и питомниководства". Научный руководитель:

кандидат сельскохозяйственных наук, старший научный сотрудник Приходько Юрий Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Романенко Николай Демьянович

кандидат биологических наук, доцент Белошапкина Ольга Олеговна

Ведущая организация:

Всероссийский научно исследовательский институт садоводства имени И.В. Мичурина.

Защита состоится " 25 2005г. в /3 часов

на заседании диссертационного со'вета Д 006.035.01 в ГНУ "Всероссийский селекционно-технологический институт садоводства и питомниководства" по адресу: 115598,Москва, М-598, Загорье, ул. Загорьевская 4, ВСТИСП, ученый совет.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВСТИСП.

Автореферат разослан "_"_2005г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат сельскохозяйственных наук (^^'ЛА^/''' Принёва

/

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Яблоня является ведущей плодовой культурой и занимает наибольшие площади, как в Нечерноземной зоне, так и в России в целом. Важная роль в обеспечении её высоких ежегодных урожаев принадлежит защите растений от вредителей и болезней. Вирусные и фитоплазменные болезни широко распространены на промышленных сортах и клоновых подвоях яблони и обладают большой вредоносностью: вызывают нарушение физиологических процессов, подавляют рост, снижают генеративную продуктивность, устойчивость к стрессовым фактам среды, приживаемость глазков, укореняемость и выход отводков в маточниках.

Современные меры борьбы с вирусными и фитоплазмен-ными болезнями основаны на системе безвирусного питомниковод-ства, внедренной в большинстве ведущих стран с развитым садоводством. Ключевым элементом технологии получения безвирусных клонов является диагностика латентной инфекции вирусов, которая преимущественно осуществляется методами древесных растений-индикаторов (основной тест) и иммуноферментного анализа.

Классический вариант индикаторного осуществляется в условиях открытого грунта, продолжается не менее 3-х лет и требует набора из 6 растений-индикаторов для тестирования одного образца. Альтернативой полевому тесту может стать использование древесных индикаторов в тепличных условиях, которое все более широко практикуется в США и странах Западной Европы, однако совершенно не апробировано в России. Тепличный тест позволяет получать результаты в течение 6-10 недель после инокуляции, не зависит от климатических условий и позволяет использовать теплолюбивые индикаторы на небольшой площади.

Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований являлось изучение вирусных болезней яблони в Нечерноземной зоне России и совершенствование методов их диагностики. .

В конкретные задачи исследования входило:

1.Изучить распространенность латентных вирусов на основных группах сортов яблони в коллекциях научных учреждений.

2.Усовершенствовать технологию отбора образцов для диагностики вирусов яблони методом ИФА.

3.Отработать вопросы диагностики вирусов яблони на древесных индикаторах в условиях защищенного и открытого грунта.

Научная новизна и практическая значимость работы. Проведен серомониторинг латентных вирусов хлоротической пятнистости листьев яблони (ACLSV), бороздчатости древесины яблони (ASGV) и ямчатости древесины яблони (ASPV) в коллекционных и маточных насаждениях яблони ведущих садоводческих учреждений г. Москвы, заложенных оздоровленным и несертифициро-ванным посадочным материалом и регулярно использующихся для заготовки черенков. Проведён анализ встречаемости этих вирусов на основных группах сортов яблони и ряда форм клоновых подвоев.

Констатирована незначительная распространённость в зоне на яблоне иларвируса мозаики яблони (ApMV) и отсутствие непо-вируса кольцевой пятнистости томата (ToRSV), являющегося объектом европейского карантина. Установлена возможность латентного заражения вирусами бороздчатости и ямчатости древесины яблони большинства стандартных древесных индикаторов и необходимость их предварительной фитосанитарной селекции.

Для условий защищенного грунта уточнены сроки и органы максимальной локализации латентных вирусов в растениях яблони для их эффективного выявления методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Впервые в России проведена отработка различных элементов технологии тепличного теста на древесных индикаторах для выявления латентных вирусов яблони и оценка его эффективности по сравнению с классическим полевым тестом и методом ИФА. Выявлены наиболее чувствительные индикаторы и наиболее эффективные способы их инокуляции. Оценена восприимчивость ряда диких видов и декоративных форм яблони к заражению латентньми вирусами. Констатирована перспективность нескольких форм в качестве потенциальных индикаторов.

Реализация результатов исследований. В результате проведённых исследований выделены безвирусные клоны ряда сортов и клоновых подвоев яблони, которые использованы для закладки оздоровленных маточников.

Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на VI международном симпозиуме (г. Пущино ВНИИС-

СОК, 2005 г.), Международная научно-практическая конференция студентов, аспирантов и молодых ученых (с. Кокино Выгоническо-го района Брянской области ГСХА, 2005 г.), Конференция молодых ученых (г. Москва, МСХА, 2005 г.), заседаниях Ученого совета и секции плодовых культур ВСТИСП.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано две печатные работы и еще две находятся в печати.

Объем и содержание диссертации. Диссертация изложена на 223 машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, выводов, рекомендаций по практическому использованию, списка использованной литературы из 312 наименований, в том числе 246 -зарубежных авторов содержит 31 таблицу и 18 приложений.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ.

Во введении обоснована актуальность темы и сформулированы основные напрвления исследований.

В первой главе «Обзор литературы» представлен анализ мировой литературы по рассматриваемой проблеме. Особое внимание уделено распространенности и вредоносности вирусов яблони в СНГ и других странах мира, различным методам их диагностики, детально освещены существующие и перспективные приемы оздоровления яблони от вирусов.

Во второй главе «Материалы и методы проведения исследований» изложена методика проведения тест-методов и экспериментов.

Исследования проведены в 2002-2004 г.г. на базе лаборатории вирусологии ВСТИСП, насаждений яблони ВСТИСП и ряда других научных учреждений РФ.

Объектами исследований являлись вирусы хлоротической пятнистости листьев яблони (ACLSV), ямчатости древесины яблони (ASPV), бороздчатости древесины яблони (ASGV), мозаики яблони (ApMV) и кольцевой пятнистости томата (ToRSV). Для их диагностики методом ИФА отбирали образцы листьев со средней части 1-летних побегов. Тесты проводили методом прямого сэндвич-варианта ИФА (DAS-ELISA) в модификациях С. Flegg, M Clark (1979) - для ACLSV и ASGV, и М. Clark, A. Adams (1977) - для ApMV, ASPV и TomRSV. Для анализов использовали диагностические наборы на основе поликлональных антител к ACLSV, ASPV и

ASGV из НИИ садоводства Молдовы и видоспецифических конью-гатов этих антител с щелочной фосфатазой, полученых в лаборатории вирусологии ВСТИСП.

Для диагностики ACLSV, ApMV и TomRSV использовали также диагностические наборы фирмы "Savoir Faire" (IRNA, Франция).

Биотесты проводили с использованием древесных индикаторов Malus platycarpa, Spy-227, Lord Lamboume, Джай Дарлинг, Virginia crab и R-12740/7Ä, содержащихся в лаборатории вирусологии ВСТИСП и полученных из Мичуринского государственного аграрного университета (МГАУ). Изучали также реакцию на заражение латентными вирусами растений ряда диких видов и декоративных форм яблони.

Тепличный биотест на древесных растениях-индикаторах проводили по методике Фридлунда (P.R.Fridlund, 1976,1980), а полевой тест на древесных индикаторах - классическим методом двойной окулировки (ЕРРО,1991).

Автор выражает глубокую благодарность доктору биологических наук Горбунову Ю.Н. и кандидату сельскохозяйственных наук Сусову В.И. в содействии при проведении обследований насаждений яблони, кандидатам биологических наук Калашану Ю.А. и Билкей Н.Д. - в предоставлении диагностических антисывороток для ИФА.

В третьей главе «Результаты исследований» изложены результаты обследований, наблюдений и экспериментов.

В 2002-2004 гг. проведен серомониторинг латентных вирусов в коллекционных и маточных насаждениях яблони ведущих садоводческих учреждений г. Москвы, которые регулярно используются для заготовки черенков.

Констатировано отсутствие реинфекции изучаемыми патогенами безвирусного маточника яблони ВСТИСП, что ранее было установлено также Д.В. Рединым (1999). Это свидетельствует об отсутствии в условиях Подмосковья естественных активных биотических агентов распространения вирусов яблони.

В трёх других маточно-коллекционных насаждениях, заложенных нетестированным посадочным материалом, встречаемость латентных вирусов колебалась от 26,7 до 50% и в среднем

составила 33,3%. При этом ACLSV, ASGV и ASPV были выявлены соответственно в 19,0; 17,9 и 20,9% тест-образцов (таблица 1).

Таблица 1 - Встречаемость латентных вирусов в обследованных насаждениях яблони (2002-2004 гг.).

Примечание: — * тестирование не проводили

Ранее при обследовании различных насаждений яблони в Нечерноземной зоне РФ серомониторинг выявил наличие латентных вирусов в 50,4% тест-растений, а встречаемость ACLSV, ASGV и ASPV составила соответственно 27,9; 22,4 и 10,7% [Д.В.Редин, 1999; Д.В.Редин и др., 1999]. Таким образом, в изучаемых нами насаждениях несколько чаще встречался вирус ямчатости древесины яблони (ASPV).

Таким образом, в средней полосе России встречаемость латентных вирусов в насаждениях яблони в виде моноинфекции обычно не превышает 30% и является менее высокой, чем в Крыму, Молдове, Казахстане и Средней Азии [Ж. Тулеуов и др., 1984; Т.Д. Вердеревска, В.Г. Маринеску, 1985; Р.Ш. Шагалов, 1993 и другие].

В обследованных нами насаждениях чаще других встречался комплекс ASGV + ASPV, несколько реже - комплексы ACLSV + ASGV и ACLSV + ASPV. Наличие комплексной инфекции из трёх латентных вирусов нами не отмечено.

Ни на одном обследованном растении яблони нами не отмечено типичных симптомов мозаики, а по результатам тестирования 238 растений методом ИФА вирус мозаики яблони (ApMV) был

выявлен всего в 2,5% тест-образцов, преимущественно на уровне вероятной зараженности.

Ни в одном тест-растении яблони, включая сорта североамериканского происхождения, методом ИФА нами не выявлен вирус кольцевой пятнистости томата (ToRSV), являющийся объектом европейского карантина.

Подтверждено, что коллекционно-маточные насаждения яблони, заложенные нетестированным посадочным материалом и используемые для заготовки черенков, являются резерваторами и источниками распространения латентных вирусов. Это подтверждает необходимость перевода отечественного садоводства на безвирусную основу.

В обследованных насаждениях не отмечено устойчивой тенденции по встречаемости латентных вирусов в зависимости от «возраста» и происхождения сортов яблони.

Так в Мичуринском саду МСХА ASGV и ASGV наиболее часто встречались на сортах селекции ВНИИСПК (56,7% серополо-жительных тест-образцов), значительно реже на сортах селекции ВНИИС и североамериканского происхождения (соответственно 31,3% и 30%), а на сортах народной селекции они были выявлены всего в 18,4% тест-образцов.

В коллекции ГБС РАН латентные вирусы были наиболее распространены на сортах Красноярской ОСП, народной и североамериканской селекции (соответственно 77,7; 64,7 и 60% сероположи-тельных образцов), но значительно реже — на сортах селекции ВСТИСП и ВНИИСПК (40 %).

По результатам тестирования методом ИФА 20 растений кло-новых подвоев селекции МГАУ вирус ямчатости древесины яблони (ASPV) был обнаружен у растений форм Малыш Будаговского (76-6), Парадизка Будаговского, 57-195, 32-396, 57-491 и 71-330, а ACLSV — у формы 71-330. Лишь растения формы 22-223 оказались свободы от латентных вирусов.

Известно, что в условиях ЦЧР наиболее распространённые клоновые подвои селекции ВНИИС и МГАУ заражены латентными вирусами на уровне 17-50% (А.В.Соловьев, 2000].

Методом ИФА нами установлена возможность латентного заражения ASGV и ASPV целого ряда индикаторных клонов яблони и груши. ASGV был выявлен на индикаторах М. platycaIpa,

R-12740/7A, Spy-227 и M. baccata, a ASPV на Lord Lamboume, Spy-227, V. crab, R-12740/7A и Berry Hardy (таблица 2). В литературе данный факт ранее не отмечался, но наличие суперлатентных штаммов, не вызывающих симптомы на стандартных древесных индикаторах было ранее установлено для ACLSV. Следовательно, необходима предварительная фитосанитарная селекция индикаторных растений с использованием метода ИФА, равно как и параллельное осуществление индикаторного и серологического тестов.

Таблица 2 - Зараженность ASGV и ASPV древесных растений индикаторов, содержащихся в зимней теплице лаборатории вирусологии ВСТИСП (2003 г.).

Ивдикагср Прсижмдаие растений Кшичвсто ТЕСТ растений ASGV ASPV

- -к + - ■К +

Лсрц Лэмбурн ВСШСП 8 7 1 0 8 0 0

МГАУ 3 2 1 0 2 1 0

R-127407A ВСШСП 4 2 1 1 4 0 0

МГАУ 8 3 3 2 6 1 1

Spy 227 ВСШСП 11 7 1 3 10 1 0

МГАУ 2 2 0 0 2 0 0

V.aab всгисп 6 3 3 0 6 0 0

М.рЙ>шра ВСШСП 3 0 2 1 3 0 0

Mfcaoda ВСШСП 8 5 0 3 8 0 0

Джй Дарит ВСШСП 9 6 3 0 9 0 0

Когморасшвйш [рулшмзадажеия, % 59,7 242 Щ 4» 1,7

Примечание: *- Заключение о зараженности вирусов: + достоверное заражение (Ао/А,> 2); +- недостоверное заражение (Ао/А,= 1,6 -1,9); - отсутствие заражения (Ао/А,< 1,6).

Для условий зимних теплиц констатировано преимущество цветков яблони по сравнению с листьями в качестве тест-органов при выявлении ACLSV методом ИФА. Аналогичное заключение для вируса, но для условий открытого грунта было ранее сделано Д.В.Рединым(1999).

Оценка нескольких сроков проведения ИФА для диагностики ASGV в условиях закрытого грунта выявило преимущество более ранних сроков анализа (февраль - март) по сравнению с тестом в

июне. Для выявления ACLSV наиболее эффективен был тест в апреле, позволивший диагностировать этот вирус в 83% тест-образцов. Вследствие термотолерантности ASPV, испытанные сроки тестирования не оказывали существенного влияния на эффективность его выявления.

Как известно, метод ИФА позволяет выявлять лишь сокопе-реносимые вирусы яблони при наличии к ним антисывороток (ACLSV, ASGV, ASPV, ApMV, TomRSV, TobRSV). Напротив, индикаторный метод обеспечивает возможность диагностики всех известных вирусов и вирусоподобных агентов яблони (при условии использования полного набора растений-индикаторов) и демонстрирует инфекционность выявляемых патогенов.

Малоснежная зима 2002-2003 гг. позволила оценить потенциальную возможность полевого теста в плане зимостойкости использованных индикаторов. Констатировано, что приживаемость глазков индикаторов Lord Lambourne, V. crab и Spy-227 составила 61-65%, а форм R-12740/7A, М. platycarpa и Джай Дарлинг — соответственно 45; 39 и 33%. В то же время, приживаемость глазков инокулюма (изоляты вирусов на V. crab и тестируемые сорта селекции ВСТИСП) составила 61-75%.

В полевом тесте индикаторы М. platycarpa и Spy-227 реагировали на заражение ACLSV образованием типичных симптомов хло-ротической пятнистости листьев всего через один год после инокуляции, но на растениях Spy-227 эти симптомы были значительно менее интенсивными, чем на М. platycarpa. На второй год после инокуляции данные симптомы усиливались на М. platycarpa, но не на Spy-227. Имеющийся во ВСТИСП клон Русского сеянщ (R-1274/7A) оказался неэффктивньм для диагностики ACLSV.

В полевом тесте растения V. crab в ответ на заражение ASGV образовывали симптомы типичной бороздчатости древесины на прививочном узле через два года после инокуляции. Растения Spy-227 в ответ на инокуляцию ASGV в ряде случаев развивали симптомы слабовыраженной пятнистости, крапчатости и морщинистости на листьях через два года после инокуляции, но не реагировали образованием симптомов на древесине.

Реакцией растений индикатора Spy-227 на заражение ASPV явились симптомы ямчатости древесины через два года после инокуляции, аналогичные описанным в литературе.

Растения Джай Дарлинг в полевом тесте заражались ACLSV и ASPV лишь в латентной форме (что было установлено тестами ИФА), не проявляя каких - либо симптомов на листьях.

Испытанные нами в полевом тесте индикаторы ACLSV (М. platycarpa, Spy-227, R-1274/7A, Джай Дарлинг) оказались непригодными для диагностики этого вируса в растениях груши отборной формы №18 из отдела селекции ВСТИСП. Данное растение имело отчётливые симптомы кольцевой пятнистости на листьях и было инфицировано ACLSV по результатам ИФА. Глазки данного инокулюма достаточно успешно приживались на индикаторах, а развившиеся из них побега также имели симптомы кольцевой пятнистости. Несмотря на это, индикаторы не заразились вирусом, что было констатировано как по отсутствию на них симптомов, так и результатами ИФА. Очевидно, для диагностики ACLSV на груше необходимо использовать лишь специальные индикаторы (Berry Hardy, Nouveau Poiteau, C-7/1), рекомендованные последними сертификационными схемами, но являющиеся недостаточно зимостойкими.

При тестировании в полевом эксперименте (таблица 3) растения яблони со стабильной сероположительной реакцией к ACLSV (изолят №16), было получено полное совпадение результатов серодиагностики и индикаторного метода по реакции индикаторов M.platycarpa и Spy-227. В то же время индикаторный метод позволил выявить ACLSV в нескольких тестируемых растениях яблони (Марат Бусурин, Восход-1, Подарок Гравскому-3) с сероотрица-тельной реакцией к данному вирусу. Эти растения в течение длительного времени (3-4 года) содержались в горшечной культуре в зимней теплице лаборатории вирусологии под воздействием высокой естественной температуры воздуха в летний период. Несомненно, естественная термотерапия привела к снижению концентрации антигена ACLSV в этих растениях ниже уровня чувствительности ИФА, но не оказала влияние на эффективность индикаторного метода.

Для более термотолерантных ASGV и ASPV получено высокое соответствие результатов серодиагностики исходных растений и реакции инокулированных индикаторов как для сероположитель-ных, так и для сероотрицательных тест-объектов (таблица 3).

Таблица 3 - Сравнительная эффективность выявления ASGV и ASPV методом ИФА и на индикаторах V. crab и Spy-227 в полевом тесте.

ИвдиьЕтес^ объемы Комоидаагсровс СфСГОЛОИШЭПЯОЙ (Эф. ИФА) Клио ИфИОГСрСВС симггга»иш дрвесине,% РФ-йа) Ошгаиг эффеюинхли мевдвИФАи индаагсрио,% РфИФА-Эф Ивд)

АДшюсшкаА8СУ»оэ1шИМиши1даот)реУлаЬ

С сдхпжжикдасй реаокй (ишяты №6и№16) 0 100 -100

С серогарвдкшюй режщй (Воаад-13; Пщхк Грвфаоому-Бюри) 0 83 -83

ВДш1хшгаА8РУ\ож)м№Аишис1Икшпрк5{у-227иУ.свЬ

С сфсшБиапвкной реадцгй(Восад-1) Щ Щ -моуо

С оерошрицрешсй реааией (изашпы №5 и №16; Вссход-13; Ародж-12; Мг|ИгБусур«) 0 0 0

Однако эти вирусы существенно различались по характеру системного распространения в инокулированных индикаторах. Так при инокуляции ASGV (изоляты №6 и №16) все растения V. crab проявили симптомы бороздчатости древесины, но в их листьях методом ИФА вирус не был обнаружен. Очевидно, через два года после инокуляции ASGV все ещё был локализован в древесине растений-индикаторов и не распространился в листья.

Напротив, ASPV был выявлен методом ИФА в листьях большинства инокулированных растения V. crab и Spy-227, но лишь половина из них проявила симптомы на древесине.

Отличающиеся погодные условия 2002-2004 гг. позволили выявить как достоинства, так и определённые ограничения отрабатываемого нами тепличного теста на древесных растениях-индикаторах.

Ввиду ограниченной возможности регулирования условий в используемой зимней теплице, главным лимитирующим фактором следует признать высокую температуру воздуха в поздневесенний период.

Так аномально жаркая погода в весенний период 2002 г. ин-гибировала развитие вирусспецифических симптомов у всех растений-индикаторов, включая М. platycarpa и Lord Lambourne. Типичные симптомы заражения ACLSV и ApMV развились на этих индикаторах лишь весной 2003 г., т.е. спустя год после инокуляции. При этом высокая температура не оказала существенного влияния на эффективность передачи термотолерантных ASGV и ASPV, тогда как более термолабильный ACLSV был выявлен лишь в отдельных инокулированных растениях.

Эксперименты 2003-2004 гг. были проведены при более благоприятных температурных условиях. В этих экспериментах оценивали чувствительность к заражению латентными вирусами набора растений-индикаторов и различные способы их инокуляции (таблица 4).

По результатам тестирования методом ИФА инокулирован-ных индикаторов, наиболее эффективная передача ACLSV произошла на растения V. crab, Spy-227 и Джай Дарлинг (28,1-33,3% растений с сероположительной реакцией). При этом растения V.crab и Spy-227 реагировали на заражение ACLSV симптомами хлоротической пятнистости листьев, но менее выраженными, чем растения М. platycarpa. На одном растении Джай Дарлинг развились симптомы красной кольцевой пятнистости листьев. По результатам ИФА ACLSV был выявлен всего в 7,7% инокулирован-ных растениях M.platycarpa, тогда как типичные симптомы хлоро-тической пятнистости листьев (ХПЛ) проявили 30,8% растений этого индикатора (таблица 4). Очевидно, в сроки проведения ИФА концентрация ACLSV оказалась ниже порога чувствительности этого метода.

Как и в полевом тесте, индикатор R-12740/7A не реагировал на заражение латентными вирусами какими-либо симптомами.

Как известно, ASGV индуцирует образование симптомов бо-роздчатости древесины у V. егаЬ, а АБРУ — ямчатость древесины на прививочном узле Бру-227, которые и являются главными диагностическими признаками для этих вирусов. Однако в нашем эксперименте V. егаЬ и Бру-227 преимущественно реагировали на заражение нетипичным образованием некрозов в месте прививки, которые развивались через 12-14 месецев после инокуляции. Чаще всего некрозы прививочного узла коррелировали (по результатам ИФА) с присутствием АБР^ несколько реже — с комплексной инфекцией ASGV и АБР^ и лишь в отдельных случаях — с моноинфекцией ASGV.

В подтверждение нашим данным, имеется сообщение из Франции [I. Без^пея й а1., 1992] о развитии некротической реакции на побегах молодых растений V. егаЬ вокруг привитых экс-плантов, зараженных ASGV. Очевидно, причиной образования данного типа симптомов являются специфические условия зимних теплиц.

В нашем эксперименте у обоих индикаторов эти некрозы обычно были взаимосвязаны также со слабовыраженными симптомами морщинистости, крапчатости или хлороза листьев, которые ввиду низкой интенсивности проявления не имели существенного диагностического значения. Растения М. рМуеагра и Джай Дар-линг также реагировали на заражение ASGV и ASPV симптомами морщинистости листьев.

Двойная окулировка и двойная копулировка значительно превосходили два других изучаемых способа инокуляции в эффективности передачи ACLSV на растения-индикаторы. Передача ASGV несколько лучше происходила при использовании методов двойной копулировки и комбинированной прививки, а ASPV — методов двойной окулировки и комбинированной прививки (таблица 4).На основании полученных данных целесообразным следует считать параллельное использование методов двойной окулировки (рекомендуемого большинством авторов) и комбинированной прививки.

Таблица 4 - Эффективность нескольких растений индикаторов

и способов инокуляции в выявлении латентных вирусов _яблони (2003-2004 гг.)._

Наличие вирусов по результатам ИФА Симптомы

АСЬЗУ АвРУ на листьях на древесине

Индикаторы:

5ру-227 9в2*(28Л%) 632(Щ7°/<) 1432(43,7%) 11/52(34,4%) 1432(43,7%)

V. сгаЬ 1236(333%) 9/Щ5Щ 19ВД8%) 11436(38^%)

11-12740/7А 2/18(11,1%) Щ5Д%) 018(0%) **_

М. рЫусагра 1/13(7,7%) 7/13(53,8%) Щ61,5%) —

Ь. ЬашЬоигпе 1/7(143%) (У7ТО 47(57,1%) —

Джай Дарлинг 4/12(333%) 5/12(41,7^ 612(50,0%) 512(41,7%) —

М. Ьасса1а 23(66,7%) 1/3(333%) Щ333%) ЩЦЗ0^ —

Способы инокуляции

Дэсшая скугартка 1433(42,4%) 5ЙЗ(1$2%) Ш3(57£%) 7/33(212%) 3/16(18,?/«)

.Пасйная №пул$сва 1022(45,4%) 622(273%) Щ45,4°/Э 622(273%) 617(353",«)

Кобнфсвама яприша 636(147%) &36(222Уо) 1&36(50й%) 1836(50,СР/о) ^16(18,7%)

Мвоорташ инадлящи Щ33%) 630(2ДСР/о) 1230(40/]%) 1030033%) 1419(73,7%)

Примечание: *— в числителе - число тест-образцов с сероположительной реакцией, в знаменатели - число тест-образцов;

**— симптомы на древесине индикаторов Я 12740/7А, М. рМуеагра, Ь. ЬашЬоигпе, Джай Дарлинг и М. Ьаееа1а, не учитывали.

После использования в качестве источника инокулюма почек растения яблони, предположительно зараженного пролиферацией, на индикаторах V. crab, Lord Lambourne и Джай Дарлинг на второй сезон после инокуляции развивалась повышенная облиственность побегов, вызваная пробуждением спящих почек, что является одним из симптомов это болезни. Однако не наблюдалось развития типичного симптома пролиферации — анормального развития крупных прилистников. Данный тест-объект оказался заражен также комплексом ACLSV + ASGV + ASPV, что установлено как серодиагностикой, так и индикаторным методом.

Целью других экспериментов являлся отбор перспективных индикаторов из числа ряда диких видов и декоративных форм яблони, произрастающих в естественных условиях средней полосы РФ (таблица 5).

За рубежом в результате интенсивных исследований в качестве индикаторов латентных вирусов и пролиферации был предложен целый ряд диких видов яблони с некротической реакцией на заражение, однако подавляющие большинство из них не адаптировано к условиям Подмосковья.

В нашем эксперименте по результатам ИФА перенос ACLSV наблюдался на большинство изучаемых растений, за исключением формы Нань - янь, a ASPV - за исключением яблони Недзведского и Джай Дарлинг. Напротив, передача ASGV была низкой как на изучаемые перспективные формы, так и на традиционные индикаторы (таблица 5).

Наиболее интересными симптомами у изучаемых форм были: хлоротическая пятнистость листьев на растении М. caido в результате заражения ACLSV; сильные деформации листьев и образования на них бурых пятен у растений сорта Ола в качестве реакции на заражение ACLSV и ASPV.

В результате комплексного заражения ACLSV и ASPV растения М. pumila развивали морщинистость и изменение формы листьев наряду с их более интенсивной красной окраской.

Растения Джай Дарлинг реагировали на инокуляцию ACLSV образованием на листьях пятен интенсивной красной окраски.

Таблица 5 - Эффективность передачи латентных вирусов на растения ряда видов и сортов яблони (2004 г.).

Ралаия Ншшиев1|ухвгюреулиша<ИФА: Симптомы щлииьях Опизясскипкмв

АО^У АБСУ АБРУ

ЯНедэведскго ЩЩ »5(0%) ЩЩ имавигформли ггкраавйслпм! (2)мЗр£ЦНИСГОС1Ь (ЗГ

Мйагейав 3/4(75,0%) ЩЩ 44(100%) 04(0%) 6Ь

Нжь-янь (Щ)%) ЩЩ 24(50%) 1/4(25,0%) мокжигагаьйхлсроз Р),!фептаоаь(1)

Мририеа 2(6(333%) ЩЩ 46(667%) Щ16,7%) крягагосп>(1)

М£ка 3/3(100%) 13(333%) 3/3(100%) 1/3(333%) шфашшиелсшев 0)

МсакЬ 35(60,0%) (Щ)% задо%) 1/5(20,0%) ХПЛ(1)

Рояли 36(50,0%) ЩЗОЩ 66(100%) 06(0%) &с

Она 25(400%) Щ20(Щ 45(80/3%) 3/5(60,0%) дфрмздмлильеЕ, (эдзьЕпинар)

Мршйа 56(833%) ЩЩ 16(16,7%) 26(333%) мэрщииисгость(1), пскраснешг.ильев 0)

Мрй>сара 2/5(40,0%) ЩЩ 56(100%) 45(80%) ХГОЩхпсрози дефср^ядаялнльев 0)

Я-1274(У7А 46(66,7%) ЩЩ 16(16,7%) 26(333%) дефсршщхпсрсв лгаьев(2)

$ру-2Н 26(333%) Щ\6,Т%) 16(016,7%) 26(533%) крягишь(1) мзршнипоаь лиаьев(1)

ДюйДртг 26(333%) ЩЩ 06(0%) 66(100%) дефоркяиялижв (6)бур>егаша(6), 1ф0СНЬЕГВГОВ(2)

Примечание: * - в числителе - количество растений с сероположительной реакцией или количество растений-индикаторов с симптомами, в знаменателе - общее количество растений;

** - в скобках указано количество растений с данным типом симптомов.

Наблюдавшиеся у растений Нань - янь, М. purpurea, M. fusca, R-12740/7A, Spy-227 и Джай Дарлинг симптомы слабой крапчато-сти, хлороза, морщинистости и деформации листьев были вызваны аномальными условиями зимней теплице, т.к. имели место как на инокулированных, так и на контрольных растениях (таблица 5).

Все вышеописанные специфические симптомы вирозов, равно как и симптомы хлоротической пятнистости листьев у растений М. platycarpa, Spy-227 и V. crab во всех экспериментах развивались преимущественно через 60-70 дней после инокуляции, не маскируясь на протяжении последующих 30-40 дней. Лишь после наступления периода жаркой погоды в июне-июле интенсивность проявления симптомов значительно ослабевала.

Таким образом, впервые в России нами подтверждено высокая эффективность тепличного теста на древесных индикаторах М. platycarpa, Spy-227, V. crab, Джай Дарлинг в выявлении латентных вирусов яблони и отработаны различные элементы технологии этого теста. Для развития симптомов этих вирусов на листьях индикаторов обычно требовалось не более 10 недель после инокуляции, но для диагностики ASPV и ASGV по симптомам на древесине Spy-227 и V. crab тесты целесообразно продлить до 12-14 месяцев. Изучена реакция ряда диких видов и декоративных форм яблони на заражение латентными вирусами и констатирована перспективность использования некоторыз из них в качестве древесных индикаторов.

В таблице 6 приводится расчет себестоимости проведения одного анализа в полевом и тепличном тесте. Из расчета следует, что себестоимости проведения одного анализа (т.е. затрат по уходу за одним инокулированным растением-индикатором) в тепличном тесте более чем в 2 раза ниже таковой в полевом тесте. Таким образом, при практически равной эффективности выявления вирусов, проведение тепличного теста экономически более целесообразно, чем осуществление полевого теста.

Таблица 6 - Расчет затрат на выделение безвирусных клонов яблони с использованием стандартной технологии (полевой тест) и предлагаемой технологии (тест в условиях зимней теплицы), рублей (в пересчете на 1000 растений)

№ п/п Статьи расхода Технология

Стандартная (полевой тест) Предлагаемая (тепличный тест)

1. Зарплата с начислениями (руб.) 1550,7 265,8

2. Исходный посадочный материал (руб.) 4000,0 400,0

3. Отопление зимней теплицы (руб.) — 31,5

4. Почвенный субстрат (руб.) — 100,0

5. Горюче-смазочные материалы (руб.) 888,0 —

6. Удобрения (руб.) 483,9 32,3

7. Ядохимикаты (руб.) 790,5 20,3

8. Амортизация, текущий ремонт, тех. уход (руб.) 1676,1 140,1

Итого прямых затрат (руб.) 9389,2 4590,0

Общепроизводственные и общехоз? расходы (руб.) 2816,7 1377,0

Страховые накопления (руб.) 72,3 35,3

Всего затрат (руб.) 12278,2 6002,3

Себестоимость одного теста (руб.) 12,3 6,0

Экономический эффект от проведения одного теста по предлагаемой технологии (%) 105

Выводы.

1. Проведён серомониторинг латентных вирусов хлоротической пятнистости листьев яблони (ACLSV), бороздчатости древесины яблони (ASGV) и ямчатости древесины яблони (ASPV) в коллекциях и маточных насаждениях яблони ведущих научных учреждений г. Москвы, использующихся для заготовки черенков. В безвирусном маточнике яблони ВСТИСП реинфекция вирусами не установлена. В насаждениях заложенных несертифицированным посадочным материалом вирусы выявлены в среднем в 33,3% тест-растениях, а встречаемость ASPV, ACLSV и ASGV составила соответственно 20,9; 19,0 и 17,9%.

2. Констатирована зараженность большинства тестируемых форм клоновых подвоев селекции МГАУ вирусом бороздчатости древесины яблони (ASPV).

3. Установлена незначительная распространенность в зоне исследований на яблоне иларвируса мозаики яблони (ApMV) и отсутствие неповируса кольцевой пятнистости томата (TomRSV), являющегося объектом европейского карантина.

4. Проведён анализ встречаемости латентных вирусов на основных группах сортов яблони.

5. Установлено латентное заражения вирусами бороздчатости и ям-чатости древесины яблони большинства стандартных древесных индикаторов, что обуславливает необходимость их предварительной фитосанитарной селекции.

6. Для условий защищенного грунта уточнены сроки и органы максимальной локализации латентных вирусов в растениях яблони для их эффективного выявления методом ИФА.

7. Впервые в России проведена отработка различных элементов технологии тепличного теста на древесных индикаторах для выявления ApMV и латентных вирусов яблони, оценена его эффективность в сравнении с классическим полевым тестом и методом ИФА.

8. В тепличном тесте установлено, что специфические симптомы заражения ApMV на Lord Lambourne и ACLSV на индикаторах Malus platycarpa, Virginia crab, Spy-227 и Джай Дарлинг развиваются в течение 60-70 дней после инокуляции. Симптомы заражения ASGV и ASPV на древесине индикаторов V.crab и

Spy-227 имеют вид некрозов на прививочном узле и развиваются через 12-14 месяцев после инокуляции.

9. Методы двойной окулировки и комбинированной прививки имели преимущество в качестве способов инокуляции латентных вирусов по сравнению с методами двойной копулировки и массированного заражения.

10. В полевом тесте констатирована низкая зимостойкость индикаторов R-12740/7A, Malus platycarpa и Джай Дарлинг.

11. Изучена реакция на заражение латентными вирусами растений ряда диких видов и декоративных форм яблони. Установлена потенциальная возможность использования видов М. caido,

М. nedzwedszKii и сорта Ола в качестве индикаторов ACLSV. Для растений М. transitoria и сорта Роялти характерна латентная инфекция ACLSV и ASPV.

12. Установлена неэффективность индикаторов Malus platycarpa, R-12740/7A, V.crab, Spy-227 и Джай Дарлинг для выявления ACLSV на груше.

13. Благодаря значительному сокращению сроков тестирования, осуществления тепличного теста на древесных индикаторах позволяет более чем в 2 раза снизить затраты на выделение безвирусных клонов яблони по сравнению с классическим полевым тестом.

Рекомендации по практическому использованию.

1. Научно-исследовательским учреждениям и специализированным лабораториям, выпускающим безвирусный посадочный материал в условиях средней полосы РФ, рекомендуется использовать апробированную технологию тепличного теста на древесных индикаторах в сочетании с оптимизированной методикой отбора образцов для ИФА с целью ускоренного выявления клонов яблони, свободных от комплекса вирусов.

2. Ввиду широкой распространённости вирусов в маточных насаждениях яблони, заложенных несертифицированным посадочным материалом, рекомендовать государственным и частным питомникам осуществить постепенный перевод питомниководства яблони на безвирусную основу путем приобретения сертифицированного исходного привойного и подвойного материала в научно-исследовательских учреждениях по садоводству.

Публикации по теме диссертации.

1. Приходько Ю.Н. Латентные вирусы на сортах и клоновых подвоях яблони в Европейской части России. / Ю.Н. Приходько, Д.В. Редин, Д.Д. Бриндаров // Плодоводство и ягодоводство России: сб. науч. работ / ВСТИСП. М., 2004.- Т.П. - С.337-353.

2. Бриндаров Д.Д. Реакция ряда диких видов и декоративных сортов яблони на заражение латентными вирусами. /Д.Д. Бриндаров, Ю.Н. Приходько // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования. / VI Международный симпозиум: Материалы конференции. /Изд-во РУДН. - М., 2005. -Том I. - 442с.

Усл. печ. л. 1,16 Зак. 424 Тир. 100 экз.

Центр оперативной полиграфии ФГОУ ВПО МСХА им. К.А. Тимирязева 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 44

к< \

1 5 Щ 20G5 J.

* ¿»¡лЫТШ J

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Бриндаров, Дмитрий Дмитриевич

Введение

Цель и задачи исследований

Научная новизна и практическая значимость работы

1. Обзор литературы

1.1 Видовой состав и распространенность вирусов яблони

1.1.1 Характеристика вирусов яблони

1.1.2 Распространенность вирусов яблони

1.2 Вредоносность вирусов яблони

1.2.1 Влияние вирусов на рост и урожай

1.2.2 Влияние вирусов на приживаемость глазков и индукция явление несовместимости

1.2.3 Влияние вирусов на метаболизм яблони.

1.3 Диагностика вирусов яблони

1.3.1 Диагностика вирусов яблони с использованием растении индикаторов

1.3.2 Диагностика вирусов яблони с использованием растений индикаторов

1.4 Способы оздоровления растений яблони от вирусов

1.4.1 Суховоздушная термотерапия

1.4.2 Метод культуры апикальных меристем и микропрививок in vitro

1.4.3 Метод хемотерфии 78 2. Материалы и методы проведения исследований

2.1 База исследований

2.2 Материалы и объекты исследований

2.3 Методика проведения экспериментов 86 3. Результаты исследований

3.1 Встречаемость латентных вирусов в насаждениях яблони и груши ряда научных учреждений РФ ^

3.2 Совершенствование технологии диагностики латентных вирусов яблони методом ИФА , ЛО

3.2.1 Выявление латентной инфекции вирусами древесных растений индикаторов , АО

3.2.2 Конкретизация сроков диагностики латентных вирусов яблони методом ИФА в условиях закрытого грунта

3.3 Оценка эффективности полевого и тепличного теста на древесных растениях-индикаторах в выявлении латентных вирусов яблони

3.4 Обсуждение результатов

3.5 Ожидаемый экономический эффект от применения тепличного теста на древесных индикаторах вместо классического полевого теста.

Выводы

Рекомендации по практическому использованию,

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Диагностика вирусных болезней яблони"

Яблоня является ведущей плодовой культурой и занимает наибольшие площади, как в Нечерноземной зоне, так и в России в целом. Популярность этой культуры обуславливается высокими питательными и лечебно - профилактическими свойствами плодов, большой потенциальной продуктивностью и высокой адаптационной способностью к условиям выращивания. Плоды яблони транспортабельны и пригодны к более длительному хранению в свежем виде, чем плоды других плодовых культур, а также широко используются в перерабатывающей промышленности для получения пищевых продуктов.

Наряду с расширением площадей под плодовыми и ягодными культурами, основным направлением в развитии плодоводства является максимальная интенсификация этой отрасли с учетом принципов адаптивного садоводства [В.И. Кашин, 1995]. Важная роль в обеспечении высоких ежегодных урожаев плодовых культур принадлежит защите растений от вредителей и болезней, включая вирусы. Исследования, проведенные в нашей стране и за рубежом, показали широкую распространенность вирусных и фитоплазмен-ных болезней на промышленных сортах и клоновых подвоях яблони. Возбудители этих болезней обладают большой вредоносностью: вызывают нарушение физиологических процессов, подавляют рост, снижают генеративную продуктивность, устойчивость к стрессовым фактам среды, приживаемость глазков, укореняемость и выход отводков в маточниках, повышают восприимчивость растений к грибным и бактериальным заболеваниям.

Современные меры борьбы с вирусными и фитоплазменными болезнями основаными на системе безвирусного питомниководства, внедренной в большинстве ведущих стран с развитым садоводством (США, Канада, Франция, Италия, Бельгия, Голландия, Германия и другие). В России в 80-е годы также были достигнуты существенные успехи в производстве безвирусного посадочного материала. Однако, с последовавшими затеми политическими изменениями и недостаточными государственным финансированием, к настоящему времени сохранились лишь отдельные региональные фрагменты этой системы.

За последние 50 лет мировой наукой достигнут существенный прогресс в изучении вирусных болезней яблони, предпосылкой которому явилась разработка высокочувствительных серологических и молекулярных методов диагностики и биотехнологических приемов оздоровления. Однако ввиду ряда объективных факторов (латентный характер заражения растений большинством вирусов, отсутствие экспресс - методов диагностики для ряда возбудителей, высокая толерантность ряда вирусов к существующим методам оздоровления и т.д.), технологический процесс получения безвирусных клонов яблони по-прежнему является слишком продолжительными по времени (не менее 4-5 лет) и весьма дорогостоящим.

Дальнейшие исследования должны быть направлены на поиск решений, позволяющих интенсифицировать процесс получения безвирусных клонов.

В связи с вышеизложенным, целью наших исследований являлось изучение вирусных болезней яблони в Нечерноземной зоне России и совершенствование методов их диагностики.

В конкретные задачи исследования входило следующее:

1.Изучить распространенность латентных вирусов на основных группах сортов яблони в коллекциях научных учреждений.

2.У совершенствовать технологию отбора образцов для диагностики вирусов яблони методом ИФА.

3.Отработать вопросы диагностики основных вирусов яблони на древесных индикаторах в условиях защищенного и открытого грунта. \ \

Научная новизна и практическая значимость работы.

Проведён серомониторинг латентных вирусов хлоротической пятнистости листьев яблони (АСЬЭУ), бороздчатости древесины яблони (АБСУ) и ямчатости древесины яблони (А8РУ) в коллекционных и маточных насаждениях яблони ведущих садоводческих учреждений г. Москвы, заложенных оздоровленным и ^сертифицированным посадочным материалом и регулярно использующихся для заготовки черенков. Проведён анализ встречаемости этих вирусов на основных группах сортов яблони и ряде форм клоновых подвоев.

Констатирована незначительная распространённость на яблоне в зоне иларвируса мозаики яблони (АрМУ) и отсутствие неповируса кольцевой пятнистости томата (ТотК^У), являющегося объектом европейского карантина. Установлена возможность латентного заражения вирусами бороздчатости и ямчатости древесины яблони большинства стандартных древесных индикаторов и необходимость их предварительной фитосанитарной селекции.

Для условий защищенного грунта уточнены сроки и органы максимальной локализации латентных вирусов в растениях яблони для их эффективного выявления методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Впервые в России проведена отработка различных элементов технологии тепличного теста на древесных индикаторах для выявления латентных вирусов яблони и оценка его эффективности по сравнению с классическим полевым тестом и методом ИФА. Выявлены наиболее чувствительные индикаторы и наиболее эффективные способы их инокуляции. Оценена восприимчивость ряда диких видов и декоративных форм яблони к заражению латентными вирусами. Констатирована перспективность нескольких форм в качестве потенциальных индикаторов.

В результате проведённых исследований выделены безвирусные клоны ряда сортов и клоновых подвоев яблони, которые использованы для закладки оздоровленных маточников. А

1. Обзор литературы.

Заключение Диссертация по теме "Защита растений", Бриндаров, Дмитрий Дмитриевич

Выводы.

1. Проведён серомониторинг латентных вирусов хлоротической пятнистости листьев яблони (ACLSV), бороздчатости древесины яблони (ASGV) и ямча-тости древесины яблони (ASPV) в коллекциях и маточных насаждениях яблони ведущих научных учреждений г.Москвы, использующихся для заготовки черенков. В безвирусном маточнике яблони ВСТИСП реинфекция вирусами не установлена. В насаждениях, заложенных несертифицированным посадочным материалом, вирусы выявлены в среднем в 33,3% тест-растениях, а встречаемость ASPV, ACLSV и ASGV составила соответственно 20,9; 19,0 и 17,9%. Проведён анализ встречаемости латентных вирусов на основных группах сортов яблони.

2. Констатирована зараженность большинства тестируемых форм клоновых подвоев селекции МГАУ вирусом ямчатости древесины яблони (ASPV).

3. Установлена незначительная распространенность в зоне исследований на яблоне иларвируса мозаики яблони (ApMV) и отсутствие неповируса кольцевой пятнистости томата (TomRSV), являющегося объектом Европейского карантина.

4. Установлено латентное заражение вирусами бороздчатости и ямчатости древесины яблони большинства стандартных древесных индикаторов, что обуславливает необходимость их предварительной фитосанитарной селекции- vf ' J

5. Для условий защищенного грунта уточнены сроки и,органы максимальной локализации латентных вирусов в растениях яблони для их эффективного выявления методом ИФА. У&Ч^Ъ-С" и^м

6. Впервые в России проведена ^отработка различных элементов технологии тепличного теста на древесных индикаторах для выявления ApMV и латентных вирусов яблони, оценена его эффективность в сравнении с классическим полевым тестом и методом ИФА.

7. В тепличном тесте установлено, что специфические симптомы заражения ApMV на Lord Lambourne и ACLSV на индикаторах Malus platycarpa, Virginia crab, Spy-227 и Джай Дарлинг развиваются в течение 60-70 дней после инокуляции. Симптомы заражения ASGV и ASPV на древесине индикаторов V.crab и Spy-227 имеют вид некрозов на прививочном узле и развиваются через 12-14 месяцев после инокуляции. Ч-íA^íf ~ ^Ja j,*,.

0 % 1

8. Методы двойной окулировки и комбинированной прививки имели преимущество в качестве способов инокуляции латентных вирусов по сравнению с методами двойной копулировки и массированного заражения.

9. В полевом тесте констатирована низкая зимостойкость индикаторов R-12740/7A, Malus platycarpa и Джай Дарлинг. ( ( ^ ' г

10. Изучена реакция на заражение латентными вирусами растений ряда диких видов и декоративных форм яблони. Установлена потенциальная возможность использования видов М. caido, М. nedzwedsKii и сорта Ола в качестве индикаторов ACLSV. Для растений М. transitoria и сорта Роялти характерна латентная инфекция ACLSV и ASPV. л

11. Установлена неэффективность индикаторов Malus platycarpa, R-12740/7A, V.crab, Spy-227 и Джай Дарлинг для выявления ACLSV на груше. •

12. Благодаря значительному сокращеннию сроков тестирования, осуществления тепличного теста на древесных индикаторах позволяет более чем в 2 раза снизить затраты на выделение безвирусных клонов яблони по сравнению с классическим полевым тестом. Х.,о * l"lP ^i^f^l^ ^

Рекомендации по практическому использованию.

1. Научно-исследовательским учреждениям и специализированным лабораториям, выпускающим безвирусный посадочный материал в условиях средней полосы РФ, рекомендуется использовать апробированную технологию тепличного теста на древесных индикаторах в сочетании с оптимизированной методикой отбора образцов для ИФА с целью ускоренного выделения клонов яблони, свободных от комплекса вирусов.

2. Ввиду широкой распространённости вирусов в маточных насаждениях яблони, заложенных несертифицированным посадочным материалом, ре-^ комендовать государственным и частным питомникам осуществить постепенный перевод питомниководства яблони на безвирусную основу путем приобретения сертифицированного исходного привойного и подвойного материала в научно-исследовательских учреждениях по садоводству. о ^^ г V

Г . > ч

I ар * ь * , V г к г>- С

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Бриндаров, Дмитрий Дмитриевич, Москва

1. Белошапкина О.О. Обоснование и усовершенствование мер борьбы с вирусными болезнями земляники. / О.О. Белошапкина // Автореф. дисс. канд. биол. наук. М., - 1991 - 14с.

2. Бивол Т.Ф. Латентные вирусы яблони и их изучение в Молдавской ССР. / Т.Ф. Бивол // Вирусные болезни плодово-ягодных культур и винограда в Молдавии. Кишинев., - 1972 - С.32 - 65.

3. Бивол Т.Ф. Изучение "латентных" вирусов яблони в Молдавской ССР и фитосанитарный отбор как метод получения безвирусного посадочного материала. / Бивол Т.Ф. // Автореф. дисс. канд. с/х. наук Кишинев., - 1978 -23с.

4. Бивол Т.Ф. Изучение вируса хлоротической пятнистости листьев яблони (ХПЛ) на косточковых плодах / Бивол Т.Ф. // Вирусные, микоплазменные и бактериальные болезни плодовых культур и винограда в Молдавии. Кишинев, - 1980. - С. 20-26.

5. Блинов В.А. Вирус хлоротической пятнистости листьев яблони в условиях Орловской области. / Блинов В.А. // Селекция, сортоизучение и агротехника плодовых и ягодных культур. / Сб. науч. трудов ОПЯОС., 1978 - Т.8. -С. 59-64.

6. Блинов В.А. Зараженность сортов и создание безвирусного фонда яблони в условиях станции. / Блинов В.А. // Наука-производства. / Сб. науч. трудов ОПЯОС., 1981 Т.Н. - С.87 - 89.

7. Блинов В.А. Влияние латентных вирусов на приживаемость и перезимовку глазков яблони // Улучшение сортимента и разработка агротехники плодовых и ягодных культур. / Орловская ЗПЯОС., Орел., 1982 - С. 70-72.

8. Блинов В.А. Распространение и вредоносность вирусов яблони в условиях Орловской области / Блинов В.А. // Селекция, сортоизучения, агротехника плодовых и ягодных культур. / Орловская ЗПЯОС., 1985 - С.79 - 83.

9. Блинов В.А. Получение безвирусного посадочного материала яблони / Блинов В.А. // Селекция и сортоизучение плодовых культур/ /Сб. науч.трудов ВНИИСПК.- Орел, 1995. - С.360-364.

10. Вердеревская Т.Д. Вирусные и микоплазменные заболевания плодовых культур и разработка мер борьбы с ними в Молдавской ССР. / Вердерев-ская Т.Д. // Автореф. дисс. доктора биол. наук. Кишинев., - 1973 - 42с.

11. Вердеревская Т.Д. Система оздоровления плодовых культур от вирусных и микоплазменных заболеваний. / Т.Д. Вердеревская, X. Кеглер И Интенсификация садоводства и виноградорства. Кишенев., - 1981 - С. 53 - 57.

12. Н.Вердеревская Т.Д. Вирусные и микоплазменные заболевания плодовых культур и винограда в Молдавии. / Т.Д. Вердеревская, В.Г. Маринеску / -Кишинев., Штиинца. 1985 - 311с.

13. Высоцкий В.А. Методические указания по клональному микроразмножению подвоев и сортов яблони. / В.А. Высоцкий, O.A. Леонтьев Орлов / -М.,- 1985 -22с.

14. Гибсс А. Основы вирусологии растений. / А. Гибсс, Б. Харрисон / М., Мир.- 1978-429с.

15. Гусейнов И.Г. Мозаика яблони в Азербайджане. / И.Г. Гусейнов // Защита растений. 1975 - №10. - С. 55.

16. Долгих В.А. Вирусные болезни плодово ягодных культур и винограда и производство оздоровленного посадочного материала. / В.А. Долгих, A.A. Разживин, Ж.Т. Тулеуов // Вопросы технологии про-ва плодов, ягод и винограда. - 1987 - С. 176-184.

17. Долгих С.Г. Оздоровление яблони от вирусной инфекции методом термотерапии / С.Г. Долгих // Молодые ученые-садоводству России/ Тезисы докл. Всерос. совещания. М., ВСТИСП.-1995. - С. 120-122.

18. Капица О.С. Оздоровление растений картофеля от У-вируса с помощью культур меристем / О.С. Капица, Э.И. Андреева // Вирусные болезни с.-х. растений и меры борьбы с ними/ Труды 5-го Всесоюзного совещания по вирусным болезням. Киев, - 1966. - С.46-47.

19. Кашин В.И. Научные основы адаптивного садоводства./ В.И. Кашин / М., Колос. - 1995-335с.

20. Литвиненко И.С. Термическое обеззараживание плодовых растений от вирусов. / И.С. Литвиненко, Ю.И. Помазков // Тезисы докладов VI Всесоюзного совещания по вирусным болезням растений. Киев., - 1971 - С. 183184.

21. Лукьянова Е.А. Особенности производства безвирусного посадочного материала земляники и малины в ЦЧР. / Е.А. Лукьянова // Автореф. дисс. канд с/х наук. Мичуринск., - 1998 - 26с.

22. Малыхин П.М. Диагностика вирусов земляники и усовершенствования методов ее оздоровления. / П.М. Малыхин // Автореф. дисс. канд. биол.наук. -М., 1988- 18с.

23. Малыхин П.М. Оздоровление земляники методом культуры апексов при использовании синтетических ингибиторов вирусов / П.М. Малыхин, О.П. Виницкая, В.А. Шмыгля, Г. Шустер // Известие ТСХА. 1986. - №3. -С.134-137.

24. Мерцалова О.С. Механическая передача одного из вирусов яблони / О.С. Мерцалова // Материалы науч. конференции молодых ученых.- Л., 1967. -С. 24-25.

25. Мишина А.П. Мозаика и розеточность яблони (этиология, патогенез). / А.П. Мишина // Автореф. дисс. канд. с/х. наук, М., - 1974 - 22с.

26. Минаев Ю.В. Химиотерапия в системе защиты земляники от вирусных болезней / Ю.В. Минаев // Защита растений от вредителей и болезней на Юго-Востоке Саратов, - 1987. - С.56-64.

27. Помазков Ю.И. Термическое обеззараживание плодовых и растений от вирусов / Ю.И. Помазков, И.С. Литвиненко, И.Л. Зленко // Плодоводство и ягодоводство Нечерноземной полосы / Сб. науч. трудов НИЗИСНП, 1972.- Т.4. С.363-371

28. Помазков Ю.И. Вирусные болезни плодовых и ягодных культур в Нечерноземной зоне. / Ю.И. Помазков //Автореф. дисс. доктора с/х. наук. М., -1975 - 34с.

29. Помазков Ю.И. Вирусные болезни земляники в Нечерноземной зоне. / Ю.И. Помазков, А.П. Мишина // Культура земляника В СССР. М., - 1972- С.370-374.

30. Приходько Ю.Н. Совершенствование технологии оздоровления яблони от латентных вирусов. / Ю.Н. Приходько, Д.В. Редин, В.И. Кашин // Плодоводство и яговодство России. / Сб. науч. работ ВСТИСП. 2000 - Т. 7. -С.89-101.

31. Приходько Ю.Н. Эффективность различных методов оздоровления яблони от латентных вирусов. / Ю.Н. Приходько, Д.В. Редин И Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. / Материалы докл. научной конференции. М„ -2001 - С.208-209.

32. Приходько Ю.Н. Разработка метода хемотерапии вирусов в процессе мик-роклонального размножения плодовых и ягодных культур. / Ю.Н. Приходько, J1.B. Цубера // Плодоводство и яговодство России. / Сб. науч. трудов ВСТИСП. М., - 1996 - Т.З. - С.96-101.

33. Редин Д.В. Латентные вирусы яблони в Нечернозёмной зоне России и совершенствование мер борьбы с ними. / Д.В. Редин // Автореф. дисс. канд. с/х. наук. М., - 1999а - 23с.

34. Редин Д.В. Распространенность и иммунодиагностика латентных вирусов яблони. / Д.В. Редин, В.И. Кашин, Ю.Н. Приходько // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. / Материалы докладов науч. конференции ВИГИС. М., - 1999 - С.223-224.

35. Семина Н.П. Вирусные болезни плодовых растений в связи с селекцией и размножением сортов и клоновых подвоев. / Н.П. Семина // Сб. науч. трудов ВНИИС им И.В. Мичурина. Мичуринск., - 1980 - С.42-46.

36. Семина Н.П. Изучение видового состава и распространённость вирусных инфекций на яблоне в ЦЧЗ. / Н.П. Семина // Пути повышения устойчивости садоводства. / Сб. науч. трудов ВНИИС им И.В. Миичурина. Мичуринск., - 1998 - С.93-97.

37. Семина Н.П. К вопросу о роли "латентных" вирусов яблони в явлении несовместимости. / Н.П. Семина, Т.Ф. Бивол // Вирусные, микоплазменные и бактериальные болезни плодовых культур и винограда в Молдавии. Кишинев., - 1980- С.26-38.

38. Семина Н.П. Производство безвирусного посадочного материала яблони в Центрально Черноземной зоне. / Н.П. Семина, Е.М. Цуканова // Молодые ученые-садоводству России. / Тезисы докладов Всеросийского совещания. - М., ВСТИСП - 1995 - С.115-117.

39. Соловьев A.B. Выращивание безвирусного посадочного материала яблони в условиях ЦЧР. / A.B. Соловьев // Автореф. дисс. канд. с/х. наук. Мичуринск., 2000 - 23с.

40. Суркова О.Ю. Анализ размножения, вредоносности и этиологии вирусных и вирусоподобных болезний красной и черной смородины и разработка мер борьбы с ними в средней полосе России. / О.Ю. Суркова // Автореф. дисс. канд. с/х. наук. М., - 1994 - 20с.

41. Суркова О.Ю. Эффективность различных методов оздоровления смородины от вирозов / О.Ю. Суркова, Ю.Н. Приходько // Плодоводство и ягодо-водство России / Сб. науч. тр. ВСТИСП. 1995. - Т. 1. - С. 193-198.

42. Тулеуов Ж. Вирусные заболевания яблони и разработка мер борьбы с ними в зонах плодоводства Казахской ССР. / Ж. Тулеуов // Автореф. дисс. канд. биол. наук. Алма-Ата., - 1982 - 22с.

43. Тулеуов Ж.Т. Получение безвирусного посадочного материала яблони / Ж. Тулеуов // Плодоовощное хозяйство. 1986. - №10. - С.15-17.

44. Технологический процесс получения безвирусного посадочного материала плодовых и ягодных культур. / В.И. Кашина // Методические указания/ -М.,-2001 -С.20-33.

45. Цубера Л.В. Хемотерапия вирусов плодовых и ягодных растений в комбинации с культурой изолированных апексов. / Л.В. Цубера // Автореф. дисс. канд. с/х. наук. М., - 1998 - 22с.

46. Цуркан И.Г. Разработка термического метода борьбы с латентными вирусами яблони / И.Г. Цуркан // Вирусные болезни плодлво-ягодных культур и винограда в Молдавии. Кишинев. - 1973а. - Вып. 2. - С.51-67

47. Шенгелия Л.Н. Метод микропрививок цитрусовых в культуре in vitro / Л.Н. Шенгелия, Р.Г. Бутенко // Культура клеток растений и биотехнология/ Сборник науч. трудов. Кишинев, - 1983. - С. 116-117.

48. Шиманский X. Опыт, накопленый при термообработке клонов яблони. / X. Шиманский // Технология выращивания безвирусного посадочного материала плодовых культур. Кишинев., - 1977 - С.43 - 49.

49. Гъбова Р. Елиминиране на вируса на шарката по сливата (Plum pox virus) чрез in vitro техника / P. Гъбова // Растениевъд. науки. 1990. - Т.27, №4.1. С.29-32.

50. Гъбова Р. Тъканното культивиране при обезвирусяване на овощните видове / Р. Гъбова // Растениевъдни Науки.- 1987. Т.24, №7. - С.3-9.

51. ПауновисЬ С. Проучаванье неких изолата вируса хлоротичне лисне нета-вости ja6yKe. / С. ПауновисЬ // Зборник Радова Полвопривредног факулте-та. 1990 - №594 - С.201-213

52. Станкев С. Изследованеи изпозуване на камера за термотерапия на растения / С. Станкев, Д. Трифонов // Селкостопанска Техника. 1970. - №7. -С.12-14.

53. Achmet S. System of virus elimination by thermoterapy in fruit trees. / S. Achmet, I. Vertesy, G. Weber // Acta Phytopathology. Sci. Hung. 1980. -Vol.15. - №1-4. - P.257-260.

54. Akius M. Chemical suppression of apple chlorotic leaf spot virus by ribavirin. / M. Akius II Vaxtskydsnotiser. 1983. - Vol.47. - №3. - P.39-45.

55. Akius M. Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV). Purification, immunization and further characterization / M. Akius, B. Westron II Vaxtskydsnotiser. 1983. -Vol.47.-№5-6.-P.74-76.

56. Alskieff J. Greffage in vitro d'apex sur des plantules decapitees de pommier ( Malus pumila Mill.) / J. Alskieff, P. Villermur // Comptes Rendus Acad. Sci. -1978. Vol.282. - P.l 115-1118.

57. Babovic M.V. Appearance and distribution of chlorotic leaf spot virus on different apple cultivars. / M.V. Babovic, G.P. Delibasic // Acta Horticulturae. -1986. №193.-P.81-88.

58. Bar-Joseph M. The Closteroviruses: a distinct group of elongated plant viruses. / M. Bar-Joseph, S.M. Garnsey, D. Consalves // Advances Virus Res. 1979. -Vol.25.-P.93-168.

59. Baumann G. Untersuchungen uber die Ockstadter Fruchtnecrose der Kirsche / G. Baumann // Erwerbsobstbau. 1971. - №12. - P.203 - 205.

60. Barbara M. Detection of strains of apple chlorotic leafspot virus by F (ab)2 -based in derect ELISA. / M. Barbara, M.F. Clark // Acta Horticulturae. 1986.193. P.297 - 304.

61. Bawden F.C. Inhibitors and plant viruses. / F.C. Bawden // Advances Virus Res. 1954.-Vol.2.-№1.-P.32-55.

62. Bernard R. Le virus du chlorotic leaf spot. Contamination de differentes especes de Prunus. Population de virus / R. Bernard, J. Dunez // Ann.Phytopathology. -1971. Vol.8.-P.317-335.

63. Bern M. Comparison of particle properties of heraneum latent and apple chlorotic leaf spot viruses / M. Bern, A.F. Murant // J. Gener. Virol. 1979. -Vol.44.-P.817-826.

64. Bitters W.P. Healthy trees from test-tube / W.P. Bitters, T. Murashige, T.S. Rangan // Citrograph. 1972. - Vol.57. - № 3. - P.85 - 86.

65. Blattny C. Some remarks to the economical importance of Sharka disease in Czecoslovakia. / C. Blattny // Zastita Bilja. 1968. - №85-88. - P.417 - 418.

66. Boxus Ph. Handbook of plant cell culture. / Ph. Boxus // Macmillian Publishing Co 1984.- №3.- 17s.

67. Boye R. Pommier: Detection rapide des maladies de degenerescence. / R. Boye, D. Cornaggia // Jntos. 1988. - Vol.42. - P. 15 - 20.

68. Cadman C.H. Affinitives of viruses infecting fruit trees and raspberry / C.H. Cadman // Plant Disease 1963. - Vol.47. - №6. - P.459 - 463.

69. Cadman C.H. Filamentous viruses infecting fruit trees and raspberry and their possible mode of spread / C.H. Cadman // Plant Disease Rep. 1965. - Vol.49. -№4. - P.230 - 232.

70. Cambra M. Diagnostico rapido de virus en fruitales de hueso mediante la tecnica immunoenzimatica ELISA DAS. / M. Cambra, G. Llaser, P. Rere de San Roman, P. Moreno, V. Durba // Bol. Serv. Plagas. - 1983. - Vol.9. - №1. -P.45 - 59.

71. Cameron H.R. Effect of viruses on deciduous fruit trees. / H.R. Cameron // Hort. Sci. 1977. - Vol.12. - №5. - P.484 - 487.

72. Campbell A.I. Virus disseases of fruit trees: II Latent virus in apple varieties and rootstocks. / A.I. Campbell // Ann. Rep. Long. Ashton Agr. Hort. Res. Stn. for 1961. - P.73 - 76.

73. Campbell A.I. Techniques used for inactivation of same apple viruses / A.I. Campbell // Ann. Rep. Long Ashton Res. Stn. 1962. - P.73-76.

74. Campbell A.I The effect of some latent viruses on the growth and cropping of apple trees. / A.I. Campbell // VII Europeisches Symposium uber viruskranheiten der Odstbaume., Berlin. 1968. - P. 10

75. Campbell A.I. The effect of some apple viruses on the susceptibility of two clonal rootstock to collar rot caused by Phytopthora cactorum. / A.I. Campbell // J. Hort. Sci. 1969. - Vol.44. -P.121 - 126.

76. Campbell A.I. The effect of some apple viruses on the growth of Malus species and varieties. / A.I. Campbell // J. Hort. Sci. 1970. - Vol.37. - P.239 - 246.

77. Campbell A.I. A comparison on the growth of young apple trees on virus infected and healthy rootstock. / A.I. Campbell // J. Hort. Sci. 1971. - Vol.46. -№ 1. - P. 13 - 16.

78. Campbell A.I. Virus, fertilizer and rootstock effect on the growth and precocity of young apple trees. / A.I. Campbell, C. Bould // J. Hort. Sci. 1970. - Vol.45. -P.75 - 85.

79. Campbell A.I., Sparks T. Effect of latent viruses on growth of apple and pears under different nutritional regimes. / A.I. Campbell, C. Bould // Rep. Long Ashton Res. Stn. for. 1975-1976. P.41 - 42.

80. Campbell A.I. Improvement of fruit trees by eliminating virus and mycoplasma infection. / A.I. Campbell, T. Sparks // Rep. Long. Ashton Res. Sth. for. 19751976. P.39 - 41.

81. OO.Candresse T. In vitro translation of apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV) RNA / T. Candresse, S. German, M. Lanneau, J. Dunez // Arch. Virology.-1996.-Vol.141. P.2031 -2043.

82. Canova A. Le malattie da virus e da mycoplasma delle pomacee: loro significato agronomico e fitopatologico. / A. Canova // Infopmatore fitopatologico. 1984. - Vol.34. - №4 - P.35 - 42.

83. Chairez R. A comparison of two strains of apple chlorotic leaf spot virus / R. Chairez, R.M. Lister // Phytopathology. 1973. - Vol.63. - №12. - P. 1458 -1464.

84. Cieslinska M. Preliminary results of investigation on elimination of viruses from apple, pear and raspberry using thermotherapy and chemotherapy in vitro / M. Cieslinska, B. Zawadska// Phytopathology Pol. 1999. - Vol.17. - P.41 - 48.

85. Clark. M.F. Characteristic of the microplate mehtod of enzyme linked immunosorbent assay for the detection of plant viruses. / M.F. Clark., A.N. Adams // J. Gen. Virol. - 1977. - Vol.34. - №3 - P.475 - 483.

86. Coffin R.S. The closteroviruses, capilloviruses and other similar viruses; a short revive / R.S. Coffin, R.H. Coutts // J.Gener.Virology. 1993. - Vol.174. -P.1475- 1483.

87. Cropley R. The association of a sap transmissible virus with apple chlorotic leaf spot / R. Cropley // Plant Disease.Rep. 1963. - Vol.47. - №3. - P. 165 - 167.

88. Cropley R. Transmission of apple chlorotic leaf spot virus from Chenopodium to apple / R. Cropley // Plant Disease. Rep. 1964. - Vol.48. - №9. - P.678 - 680.

89. Cropley R. Recent work on some sap transmissible viruses from apple 1. Apple chlorotic leaf spot / R. Cropley // Zastita Bilja. 1965. - Vol.54. - P.243 -245.

90. A.B. Lllutz // Can. J. Plant. Pathology. 1989. - Vol.11. - №4. - P.337 -346.

91. Desvignes J.C. Use of heat treatment and cross protection to identify some specific fruit tree virus diseases / J.C. Desvignes // Acta Phytopathlogy. Acad. Sci. Hung. 1980.-Vol.15.-№1-4.-P.371 -374.

92. Desvignes J.C. Different diseases caused by the chlorotic leaf spot virus on the fruit trees / J.C. Desvignes, R. Boye // Acta Horticulturae. 1989. - №235. -P.31 -38.

93. Desvignes J.C. Quick detection of the principal apple and pear virus diseases. / J.C. Desvignes, R. Boye, D. Cornaggia, N. Grasseau // Acta Horticulturae. -1992.-№309.-P.377-384.

94. Dijk van P. Accession of Australian Nicotiana species suitable as indicator hosts in the diagnosis of plant virus diseases / P. Dijk van, F.A. Meer van, P.G. Piron //Neth. J.Plant Pathology. 1987. - Vol.93. - P.73 - 85.

95. Dimalla J. The prevalence of latent viruses in commercial apple varieties. / J. Dimalla // Phytopathology. 1962. - Vol.52. - №8. - P.730.

96. Dunez J. Variability of symptoms induced by the apple chlorotic leaf spot. A type of CLSV probably responsible for bark split diseases of prune trees / J. Dunez, C. Marenaud, R. Delbos, M. Lansac // Plant Disease.Rep. 1972. -Vol.56.-P.193 - 195.

97. Dunez J. Le role de differents factors de stabilisation appliques a la purification du virus du chlorotic leaf spot du pommier (CLSV) / J. Dunez, R. Delbos, R. Bertranet // Ann. Phytopathology. 1973. - Vol. 5. - P.255 - 264.

98. Dunez J. Back split disease of prune trees and its association with strains of apple chlorotic leaf spot / J. Dunez, C. Marenaud, R. Delbos // Acta Horticulturae. 1975. - №44. - P.81 - 91.

99. Fidan U. Indexing of apple trees for apple mosaic virus, apple chlorotic leafspot virus and apple stem grooving virus by ELISA. / U. Fidan // J. Tur. Phytopathology 1994. - Vol.23. - №3. - P.127 - 132.

100. Flegg C. The detection of apple chlorotic leaf spot virus by a modified procedure of enzyme, linked immunosorbent assay (ELISA). / C. Flegg, M. Clark // Ann. appl. Biol. 1979. - Vol.91. - P.61 -65.

101. Fridlund P.R. Distribution of chlorotic leaf spot virus in apple budsticks. / P.R. Fridlund // Plant Disease Rep. 1973. - Vol.57. - P.865 - 869.

102. Fridlund P.R. Pear vein yellows virus symptoms in greenhouse grown pear cultivars. / P.R. Fridlund // Plant Disease Rep. - 1973. - Vol.60. - P.891 - 894.

103. Fridlund P.R. Glasshouse indexing for fruit tree viruses. / P.R. Fridlund // Acta Acad. Sei. Hung. 1980. - Vol.15. - №1-4. - P.153 - 158.

104. Fridlund P.R. Distribution of chlorotic leaf spot virus infected buds on various lengths of arrle budsticks in successive years. / P.R. Fridlund // Acta Horticulturae. 1982. - №130 - P.85 - 88.

105. Fridlund P.R. Influence of apple green crinkle disease on the quality of Granny Smith apples. / P.R. Fridlund, S.R. Drake // Plant Disease. 1987. -Vol.71. - №7.-P.585 - 587.

106. Fuchs E. Seroloqical detection of apple chlorotic leaf spot virus (CLSV) and apple stem grooving virus (SGV) in apple trees. / E. Fuchs // Acta Phytopathology. Acad. Sei. Hung. 1980a. - Vol.15. - №1-4. - P.69 - 73.

107. Fuchs E. Untersuchungen zum serologischen Nachweis mechanisch-ubertragbarer Viren des Keronobstes / E. Fuchs // Tag.-Ber. Acad.Landwirtsch. -19806. №184. - P.453 - 460.

108. Fuchs E. Vergleich verschiedener serologisehet Methoden zum Nachweis des stammfurchungs viren des Apfels (SGV) und des chlorotischen blattfleckungsvirus des Apfels (CLSV). / E. Fuchs // Arch. Gartenbau. 1983. - Vol.31. - №5. - P.237 - 245.

109. Fuchs E. Particle Reinigung des Chlorotischen Blattfleckungs Virus des Aphels (apple chlorotic leaf spot virus) und Antiserum herstellung / E. Fuchs, D. Merker // Arch. Phytopatholgy. Pflanz. - 1985. - Vol.21. - №2. - P. 101 - 110.

110. Fulton R.W. Serology of viruses causing cherry necrotic ringspot, plum line pattern, rose mosaic. / R.W. Fulton // Phytopathology. 1968. - Vol.58. - P.635 -638

111. Gabova R. Virusfree pome fruits through merustem tip culture. / R. Gabova // Acta Horticulturae 1988. - №235. - P.69 - 76.

112. Gardner F.E. Lethal effect of certain apple scion on Spy 227 stock. / F.E. Gardner, P.C March., J.R. Magness // Proc. Americ Soc. Hort. Sci. - 1946. -Vol.48.-P.159-199.

113. German-Retana S. Nucleotide sequence and genomic organization of apple chlorotic leaf spot closterovirus / S. German-Retana, T. Candresse, M. Lanneau, J.C. Huet, J.C. Pernollet, J. Dunez // Virology. 1990. - Vol.179. - P. 104 - 112.

114. Gheorghiu E. A potential indicator for detection of virus and mycoplasma that infect fruit tress. / E. Gheorghiu // Acta Acad. Sci. Hung. 1980. - Vol.15. - №1-4.-P.175- 181.

115. Gilmer R.M., Mink G.I. Latent viruses of apple. III. Indexing with Chenopodium quinoa. / R.M. Gilmer, G.I. Mink // Search agriculture. 1971. -Vol.1. - №10. - P.15 - 21

116. Giunchedi L. Le malattie virale e simili del pero: situacione attuale in Italia / L. Giunchedi // Revista Frutticoltura et ortofrutticoltura. 1990. - №8-9. - P.55 -59.

117. Gilles G.L. Detection of fruit tree viruses by grinhouse indexing with woodyindicators. / G.L. Gilles, S.H. Borman // Acta Horticulturae. 1986. - №193. -P.275-281.

118. Gilmer R.M. The association of chlorotic leaf spot virus with decline of Spy-227 rootstocks / R.M. Gilmer, K.D. Brase // Phytopathology. 1961. - Vol.57. -№7. - P.457 - 461.

119. Guengerich H.M. Trans mission of the stem-pitting factor in apple. / H.M. Guengerich, D.E. Millikan // Plant Disease Rep. 1956. - Vol.40. - P.934 - 938.

120. Guengerich H.W. Heat therapy as a method for obtaining virus-free clones of apple / H.W. Guengerich, D.F. Millikan // Plant Dieasese Rep. 1964. - Vol. 48. - № 5. - P.343 - 345.

121. Guise C.M. Detection of apple chat fruit. / C.M. Guise, A.D. Webster, A.N. Adams // Farnham 1996. - Vol.3. - P.913 - 918.

122. Giunchedi L. Cytopathologial negative staining and serological electron microscopy of a clostero-like virus associated with pear vein yellows diseases / L. Giunchedi, C. Poggi-Pollini // J.Phytopathology. 1992. - Vol.134. - P.329 -335.

123. Guengerich H.M. Transmission of the stem-pitting factor in apple. / H.M. Guengerich, D.E. Millikan // Plant Disease. Reptr. 1956. - Vol.40. - P.934 -938.

124. Gyorgy B. Biochemical changes of plums caused by plum pox virus. / B. Gyorgy // Acta Horticulturae. 1976. - №67. - P.234 - 241.

125. Hampton R.E. The relation of polyphenol oxidaxe to instabity in vitro of prumi dwarf and sour cherry necrotic rengspot viruses. / R.E. Hampton, R.W. Fulton // Virology. 1961. - Vol.13. - №1. - P.44 - 52.

126. Hamdorf G. Latente viren in Apfelsorten und Unterlagen. / G. Hamdorf // Mitt. Biol. Bundesans Land und Forstwirtschat. 1968. - №121 - P. 152 -154.

127. Hansen A.J. Effect of ribavirin on green ring mottle causal agent and necrotic ring spot virus in prunus species. // Plant Disease. 1984. - Vol.68. - №3. -P.216 - 218.

128. Hansen A.J. Potential of ribavirin for tree fruit virus inhibiton. / A.J. Hansen,

129. Green//Acta Horticulturae. 1985. - №130. - P. 183 - 184.

130. Hansen A.J. Plant disease diagnosis present status and futhure prospects. / A.J. Hansen, R.L. Wick // Adv. Plant. Pathology. 1993. - Vol.10. - P.65 - 126.

131. Hunter J.A. Note on a modification in technique for inactivation apple mosaic virus in apple wood by heat treatment / J.A. Hunter, E.S. Chamberlain, I.D. Atkinson // N.Z. J. Agric.Res. 1959. - Vol.2. - №5. - P.945 - 946.

132. Hibino H. Virus-like flexuous rods associated with pear vein yellows / H. Hibino, H. Schneider // Arch. Gesamte Virusforsh. 1971. - Vol.33. - P.347 -355.

133. Hilborn A. Anatomical changes associated with wood pitting on suspected virus disease. / A. Hilborn, F. Nuland // Phytopathology. 1957. - Vol.47. - №1. -P.16.

134. Howard B.H. Depressing effects of virus infection on adventitious root production in apple hardwod cutting. / B.H. Howard // J. Hort. Sci. 1972. -Vol.47.-№1.-P.65 -69.

135. Huang S.C. In vitro micrografting of apple shoot tips. / S.C. Huang, D.F. Millikan // J. Hort. Sci. 1980. - Vol.15. - P.741 - 743.

136. Jacob H. Untersuchungen zur tihermotherapie von Steinofst virosen. / H. Jacob // Acta. Phytomedica. 1972. - №4. - P.5 - 53.

137. Janecova M. Eliminace viru jabloni kombinaci termoterapie in vivo, segmentovymi pupenovumi kulturami in vitro. / M. Janecova // Vedecke prace ovocnarske. 1995. - №14. - P.45 - 50.

138. Janecova M. Termoterapie jablonove podloze M9. / M. Janecova, C. Blattny // Zahradnictvi. 1984. - R11. - №3. - P.167 - 174.

139. Janecova M. Vusledky testu ELISA pri zjistovani pritomnosti viru zlabkovitosti kmene jablone (ASGV) ve 24 izolatech ASGV separovanuch termoterapii. / M. Janecova, Z. Pluhar // Zahradnictvi. 1987. - R.14. - №2. -S.86-91.

140. Jnougue N. Citrus tatter leaf virus isolated from lily. / N. Jnougue, T. Maeda, K. Mitsuhata // Ann. Phytopath. Soc. Japan. 1979. - Vol.45. - P.712 - 720.

141. Johnstone G.R. Interaction of rootstocks, scion variety and virus complement on apple tree growth. / G.R. Johnstone, W.D. Boucher // J. Hort. Sei. 1973. -Vol.48.-P.175- 179.

142. Kalashjan J.A. Apple chlorotic leaf spot virus in affected tissues and the possibility of its detection by immune electron microscopy (IEM). / J.A. Kalashjan, Z.M. Lipartia // Acta Horticulturae. 1986. - №193. - P.311 - 317.

143. Karesova R. Zkusenosti s testem ELISA viru poritivinch stromu jabloni. / R. Karesova, L. Svobodova, F. Paprstein // Ved. Prace Ovocnarske. 1995. - №14. - S.59 - 66.

144. Kartte S., Seemuller E. Variable response within the genus Malus to the apple proliferation disease. / S. Kartte, E. Seemuller // Z. Pflanzenkankh. 1988. -Vol.1995.-№1.-P.25-34.

145. Kegler H. Untersuchunqen über Virosen des Keernobsten. 1 Das Apfelmosaic virus. / H. Kegler // Phytopathlogy Zeitschrift. 1959. - Vol.37. - №2. - P.170 -186.

146. Kegler H. Untersuchungen über Virosen des Kernobstes. 2. Das Ringfleckenmosaikvirus der Birne. / H. Kegler // Phytopathlogy Zeitschrift. -1960. Vol. 37. - № 4. - P. 180 - 186

147. Kegler H. Eine einfache Apparatur zur Warmbehandlung viruskranker obstpflanzen. / H. Kegler // Inst für Phytopath. Ashersleben der Deutsch. Acad. der Landwirtschaft. Berlin. 1967. - №15. - S.42

148. Kegler H. Untersuchungen zaz jdenti fi ziezung und Differenziezung des Blattrollvirus des Kirsche. / H. Kegler, J. Richter, H.B. Schmidt // Phytopath. Zeitshr 1966. - Vol.56. - №4. - P.313 - 330.

149. Kegler H. Ein mechanish ubertragberes latenten Aphelvirus / H. Kegler, H.B. Schmidt // Nachr. bl. Dt. Pflanzenchutzd. 1964. - Vol.18. - №3. - P.73 - 74.

150. Kegler H. Untersuchungen über die Fruchtringfleckig fleckigkeit die des Apfels. / H. Kegler, H.B. Schmidt, T. Verderevskaja, J.A. Kalasjan, D. Spaar // Arch. Gartenbau. 1977. - J.25. - P. 141 - 146

151. Kegler H. Untersuchungen über Wechselbeziehungen verschiedener Kern und Steinnobst-virosen / H. Kegler, T. Verderevskaya, E. Fuchs // Arch.Gartenbau. -1979.-J.27-P.325 -336.

152. Kerlan C. Immunosorbentelecron microscopy for detektion apple chlorotic leaf spot and plum pox viruses / C. Kerlan, B. Mille, J. Dunez // Phytopathology. 1981.-Vol.71.-P.400-404.

153. Kerlan C. Immunoelectron microscope for virus detection and virus strain identification / C. Kerlan, B. Mille, J. Dunez // Acta Horticultura. 1982. -№130.-P.173- 178.

154. Kinard G.R. Detection of apple chlorotic leaf spot and stem grooving virus by RT-PCR and JC-RT-PCR. / G.R. Kinard, S.W. Scott, O.W. Barnett // Med. Fac. Landbouw. Univ. Gent. 1995. - Vol.60. - №2. - P.277 - 287.

155. Kirby M.J. Comparison of a bioassay and laboratory assays for apple stem grooving virus. / M.J. Kirby, C.M. Guise, A.N. Adams // 18th Intern. Symp. Virus and Virus-like discrders of temperate fruit crops., England. 2000. - P.54

156. Kirkpatrick H.C. A mechanically transmissible virus latent in apple / H.C. Kirkpatrick, R.C. Lindner// Phytppathology. 1964. - Vol.54. - P.229 - 232.

157. Knapp E. Distribution of apple chlorotic leaf spot virus in apple shoot cultivated in vitro / E. Knapp, V. Hanzer, H. Weiss, A. Camara-Machado, Q. Wang, B. Weiss, H. Katinger, L.M. Camaro-Machado // Acta Horticulturae. -1995. №386. -P.187- 194.

158. Koganezawa H. Purification of a flexuous filamentous virus, possible causal virus of apple stem pitting / H. Koganezawa, H. Yanase // Ann. Phytopathology. Soc. Japan. 1988. - Vol.54. - P.398 - 399.

159. Koganezawa H. A new type of elongated virus isolated from apple trees containing the stem pitting agent / H. Koganezawa, H. Yanase // Plant.Disease. -1990. Vol.74. - №8. - P.610 - 614.

160. Komorowska B. Amplification of the coat protein gene of Apple stem pitting virus(ASPV) / B. Komorowska, T. Malinowski, B. Zavadzka // Phytopatholjgy. Polonica. 1999. - Vol.17. - №1. - P.49 - 59.

161. Kristensen H.R. Distribution of virus and virus-like diseases of fruit trees (surveys 1965 -1985). / H.R. Kristensen // Acta Horticulturae. 1986. - №193. -P.373 -384.

162. Kristensen H.R. Apple mosaic virus strain interference plants and strains. / H.R. Kristensen, A. Thomsen // Phytopathology. Mediterránea. 1963. - Vol.2. -№3. - P.100 - 103.

163. Kryczynski S. Virus infection status of some apple propagative material plantations in Poland. / S. Kryczynski, M.S. Szyndel, E. Padych-Cichal, M. Glowacki // Phytopathol. Polonica Poznan. - 1995. - №10(22). - P.75 - 84.

164. Krylova N.I. Popato virus X in potato apical meristems / N.I. Krylova, V.I. Stepanenko, V.G. Reifman // Acta Virology. 1973. - Vol.17. - P. 172.

165. Kudell A.R. Elimination of raspbeny bushy dwarf virus from axillary bud cultures of red raspberry cv. Lloyd George by antiviral compounds / A.R. Kudell, H. Buchenauer // J. Phytopathology. 1989. - Vol.124 - P.332 - 336.

166. Kummert J. Detection of apple chlorotic leaf spot virus and apple stem grooving virus by RT-PCR and JC-RT-PCR. / J. Kummert, G. Ruffland, D. Colinet, P. Lepoivre // Med. Fac. Landbouww. Univ. Gent. 1995. - Vol.60. -№2a. - P.277 - 287.

167. Kundu J.K. Diagnosis and distribution of the aplle stem pitting virus in Czech Republik / J.K. Kundu // 18 th Inter.Symp.virus and virus-like Diseases of Temperate Fruit Crops.-England. 2000. - P. 125.

168. Lemoine J. Manifestation de symptômes de stony pit sur les fruits indicateurs d'tspecies différentes a partir de certaines sources de vein yellows du porier / J. Lemoine // Ann. Phytopathology. 1979. - Vol.33. - P.519 - 523.

169. Legrand G. Utilization of indirect enzyme linked immunosorbent assay for the detection of plant viruses. / G. Legrand // Med. Fac. Rijksuniv. Gent. 1986. -Vol.51. -№2.-P.783 - 789.

170. Lemoine J. Les principales maladies de degenerescense du poirier et du pommier. // Phytoma 1986. - №330. - P.36 - 40.

171. Leone G. Back transmission of a virus associated with apple stem pitting and pear vein yellows from Nicotiana occidentalis to apple and pear / G. Leone, J.L. Lindner, G. Jordedijk, F.A. Van der Meer // Acta Horticulturae. 1995. - №386. - P.72 - 77.

172. Lister R.M. Some sap transmissible viruses from apple. / R.M. Lister, M.J. Nadakavukareh, J.B. Bancroft // Phytopathology. 1965. - Vol.55. - №8. - P.859 -870.

173. Lister R.M. Apple stem grooving virus. / R.M. Lister // CMJ/AAB

174. Descriptions of Plant Viruses. 1970a. - №31. - 5p.

175. Lister R.M. The purification, characterization and serology of filamentous apple viruses. / R.M. Lister // Proceeding XIII th European Symp. Fruit Tree Virus Diseases, Bordeaux 1970b. - P.365 - 371.

176. Lister R.M. Apple chlorotic leaf spot virus / R.M. Lister // CMI/AAB Description of Plant Viruses. 19706. - №30 - 4s.

177. Lister R.M., Hadidi A.F. Some properties of apple chlorotic leaf spot and their relation to purification problems / R.M. Lister, A.F. Hadidi // Virology. 1971. -Vol.45.-P.240-251.

178. Llacer G. Suitable conditions for detecting apple chlorotic leaf spot virus in apricot trees by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). / G. Llacer, M. Cambra, A. Lavina, J. Aranburu // Agronomie. 1985. - Vol.5. - №9 - P.248 -252.

179. Luckwill L. Malus platycarpa as an apple virus indicator. / L. Luckwill, A. Campbell // J. Hort. Sci. 1959. - Vol.34. - P.248 - 252.

180. Mackenzie D.J. Improved RNA extraction from woody plants for the detection of viral pathogens by reverse transcription polymerase chain reaction. / D.J. Mackenzie, M.A. Melean, S. Mukeyi, M. Geen // Plant Disease. 1997. -Vol.81.-P.222-226.

181. Magome H. Single strand conformation polimorpism analisis of sequence variants. / H. Magome, N. Yoshikawa, T. Takahashi // Phytopathology. - 1999. -Vol.89. - №2.-P.136- 140.

182. Malinowski T. Detection of apple stem pitting virus and pear vein yellowsvirus using reverse transcription-polymerase chain reaction / T. Malinowski, B. Komorowska, T. Golis, B. Zawadzka // Acta Horticulturae. 1998. - №472. -P.87-95.

183. Marenaud C. Mise en evidence sur 1 espece Abricotier d un incompatibilité intraspecifique due a la presence 1 un virus du type chlorotic leaf spot / C. Marenaud // Etude Virol.Ann / Epiph. 1968. - Vol. 19. - P.225 - 245.

184. Marenaud C. Separation pur thermotherapie du Virginia decline et de six autres infections virales du pommier. / C. Marenaud, C. Karamidas // Ann Phytopathology. 1969. - Vol.4. - №1. - P.645 - 652.

185. Marinho V.L. Detection of apple stem grooving virus in dormant apple trees with crude extracts as templates for one-step RT-PCR. / V.L. Marinho, J. Kummert, G. Raffard, D. Colinet // Plant Disease. 1998. - Vol.82. - №7. -P.785 - 790.

186. Martelli G.P. Classification and nomenclature of plant viruses: state of the art / G.P. Martelli // Plant Dis. 1992. - Vol.76. - P.436 - 441.

187. Martelli G.P. Foveavirus, a new plant virus genus / G.P. Martelli, W. Jelkmann // Arch. Virol. 1998. - Vol.143. - №6. - H.1245 - 1249.

188. Martelli G.P. Foveavirus, a new plant virus genus / G.P. Martelli, W. Jelkmann // Arch. Virol. 1988. - Vol.143. - №6. - H.1245 - 1249.

189. Martelli G.P. Trichovirus, a new genus of plant viruses / G.P. Martelli, T. Candresse, S. Namba // Arch. Virology. 1994. - Vol.134. - P.451 - 455.

190. Martelli G.P. Vitivirus, a new plant virus genus / G.P. Martelli, A. Minafra, P. Saldarelli // Arch. Virology. 1997. - Vol.142. - P.1929 - 1932.

191. Martin-Tanguy J. The distribution of hydroxynamic acidamides in flowering plants / J. Martin-Tanguy, F. Cabanne, E. Perdizet, C. Martin // Phytochemistry. 1978. - Vol. 17. - P. 1927 - 1928.

192. Masseron A. Pommier les variétés sans virus. / A. Masseron, E. Dalle // Jnfos -Ctifl. 1987.-№30.-P. 15 - 18.

193. Morvan G. Une affection virale distinct de 1 Enroulement chlorotiquet la Rosette de 1 Abricotier, Variete luizet / G. Morvan, C. Castelian // Et. de Virol. Ann. Epiph. 1967. - Vol. 18. - P.205 - 206.

194. Milbrath J.A. A virus disease of pear caused by chlorotic leaf spot of apple / J.A. Milbrath, J.E. Reunolds // Phytopathology. 1962. - Vol.52. - P.743.

195. Mink G. Preliminary evoluation of some Russian apple varieties as indicators for apple viruses. / G. Mink, J. Shay // Plant Disease Reptr. 1959. - Suppl 254. - p.785 - 790.

196. Mink G.I. Latent viruses of apples. 2. Symptoms on woody indicators and strain variation / G.I. Mink, .R. Shay I, R.M. Gilmer, R.F. Stouffer // Search Agric.- 1971.-№1.-P.9- 15.

197. Minoiu N. Cercetari ou privire la virusurile latente ale marului. / N. Minoiu // A.N.Y.C.P.P. -1972. -Vol.8. P.43 - 52.

198. Mosella L.S. Sur les ameliorations apportiees aux techniques de micrograffage des apex in vitro les arbres fruitiers. / L.S. Mosella, M. Riedel, R. Jonard // Compertes Rendus de L'Academie des Sciences de Paris. 1979. - Vol.289. -№5. - P.505 - 508.

199. Mosella L.S. Sur la mise au point de techniques de micrograffage de apex en vue de l'eliminations de deux types de particules virales chez le pecher. / L.S. Mosella, P.A. Signoref, R. Jonard // C. R. Acad. Sci. 1980. - Vol.290. - P.287 -290.

200. Murphy F.A. Virus Taxonomy; 6th Report of the International Commifîtee on Taxonomy of Viruses. / F.A. Murphy, C.M. Fauguet, D.H. Bishop, S.A.

201. Ghabrial, A.W. Sarvis, G.P. Martelli, M.A. Mago, M.D. Summers // Arch. Virology. 1995.- S. 10.

202. Meer van der F.A. Plant species outside the genus Malus as indicators for latent viruses of apple / F.A. Meer van der // Acta Horticulturae. 1975. - №44. - P.213 - 217.

203. Meer van der F.A. Odservations on apple stem grooving virus. / F.A. Meer van der//Acta Horticulturae. 1976. - №67. - P.293 - 304.

204. Meer van der F.A. Hypersensi tivity of woody indicators for apple stem grooving virus. / F.A. Meer van der // Acta Horticulturae. 1982. - №130. -P.133 - 140.

205. Meer van der F.A. Observations on the etiology of some virus diseases of apple and pear / F.A. Meer van der // Acta Horticulturae. 1986.-№ 193. -P. 7374.

206. Navarro L. Shoot-tip grafting in vitro for elimination of viruses in peach plants (Prunus persica Batsch). / L. Navarro, G. Llacer, M. Cambra, J. Juares // Acta Horticulturae. 1983. - №130. - P.185 - 192.

207. Navarro L. Improvement of shoot-tip grafiing in vitro for virus-free citrus. / L. Navarro, C.N. Roistacher, T. Murashige // J. Amer. Soc. Hort. Sei. 1975. -Vol.100. - №5.-P.471 -479.

208. Nemchinov L., PCR-detection of apple stem pitting virus from pome fruit hosts and sequence variability among viral isolates / L. Nemchinov, A. Hadidi, F. Faggioli // Acta Horticulturae. 1998. - №472 - P.67 - 73.

209. Patzold G. Wush-und Ertrags-verhalten virusfreier und virusdefaallener Apfelbaume. / G. Patzold, H. Shimanski, H. Kegler // Archiv fur Gartenbau.1988. J1.36, №5. - P.273 - 278.

210. Paunovich S. Double-stranded RNA associatet with fruit deformation of quince / S. Paunovich // Acta Horticulturae. -1995. №386 - P.45 - 50.

211. Paunovic S., Rancovich M. Relationship between quice fruit deformation virus and some pome fruit viruses / S. Paunovic, M. Rancovich // Acta Horticulturae.-1998.-№472-P.125 133.

212. Paunovic S. Characterization of a virus associated with Pear stone pit in cv. Wuttemberg / S. Paunovic, V. Maksimovic, M. Rancovic, S. Radovich // J.Phytopathology. -1999. Vol.147. - №11-12. - P.695 - 700.

213. Pena-Iglesias A. Preliminary identification of the viruses producing apricot pseudo-pox (viruella) and apricot mosaic diseases / A. Pena-Iglesias, P. Ayuso // Acta Horticulturae. -1973. 44. - P. 255-265.

214. Posnette A.F., Cropley R. A preliminary report on strains of the apple mosaic. / East Mailing Rep. Res. Sta. for. 1951 - 1952. - P. 128 - 130.

215. Posnette A.F. Apple mosaic virus-host plants and strains. / A.F. Posnette, R. Cropley // Phytopathology. Mediter. 1963. - Vol.2. - №3. - P. 100 - 103.

216. Posnette A.F. Indicator plants for latent virus infection in apple. / A.F. Posnette, R. Cropley // J. Hort. Sci. 1961. - Vol.36. - P.168 - 173.

217. Posnette A.F. Natural spread of chlorotic leaf spot virus in apple and quice. // A.F. Posnette, R. Cropley // East Mailing. Rep. Res. Stn. for. 1963 1964. -P.115- 116.

218. Posnette A.F. Heat inactivation of some apple and pear viruses / A.F. Posnette, R. Cropley, L.D Wofswinkel. // East Mailing Rep. Res. Stn. for 1961 1962. - P. 94 - 96.

219. Posnette A.F. A disease resembling plum pox in England / A.F. Posnette, C.E. Ellenberger // Plant Pathology.-1963.-Vol.12. №3. - P. 115 - 117.

220. Polak J. Diagnosis and distribution of apple chlorotic leaf spot virus in pome fruits in the Czech Republik. / J. Polak, J. Zieglerova, J. Bouma // Zahradnictvi -1997. R.24. - №3. - S.89 - 94.

221. Poul F. Use of monoclonal antibodies for the detection of the apple chloroticfeaf spot virus. / F. Poul, Z. Dunes // Acta Horticulturae. 1988. - №235. - P.49 -57.

222. Poul F. Use of monoclonal antibodies for the identification of different antigenic domains in apple chlorotic leaf spot virus. / F. Poul, Z. Dunes // Arch. Virology. 1990. - Vol. 114 №3 - 4. - P. 191 - 202.

223. Ragozzino A. Su due virus mecanicamente transmissibili da piante di Ciliego dolce, affette la necrosi dei frutti / A. Ragozzino // Phytopath. Mediter. 1967. -Vol.6.-№3.-P.162- 167.

224. Rich A.E. Influence of apple and stem pitting viruses on tree growth and fruit yields over a fourteen year perid. / Rich A.E. // Plant Disease Rep. 1967. -Vol.51. - №4. -P.293 - 295.

225. Reynolds J.E. Comparison of flowering crab apple varieties for fast detection of a common latent viruses in apples. / J.E. Reynolds, J.A. Mildrath // Plant Disease. Rep. 1962. - Vol.46. - №4. - P.243 - 245.

226. Saksena K.N. Purification and properties of apple chlorotic leaf spot virus / K.N. Saksena, G.I. Mink // Phytopathology. 1969. - Vol.59. - P.84 - 88.

227. Sampson H.J. Effects of rootstocks, scion variety and virus complement on fruit production and growth of young apple trees. / H.J. Sampson, G.R. Johnstone // J. Hort. Sci. 1974. - Vol.49. - P. 183 - 187.

228. Sato K. Complete nucleotide sequence of the genome of an apple isolate of apple chlorotic leaf spot virus / K. Sato, N. Yoshikawa, T. Takahashi // J. Gener. Virology. 1993. - Vol.74. - P.1927 - 1931.

229. Sawamura K. A peach latent strain of Apple chlorotic leaf virus isolated from peach tree. / K. Sawamura, M. Arai, K. Jamashita // Bulletin Faculty Agric. Hirosaki Univ. 1988. - №50. - P.16 - 21.

230. Sawamura K. The apple industry in Japan. A historical scotch and diseases inthe region. / K. Sawamura, Y. Harada, T.Kikuchi, J.M. Oguwa // Plant Disease -1993.-Vol.77.-P.546-552.

231. Schade C. Practiceskoe vyiavlenie virusa chloroticeskoj pjatnistostii listev jablone (CLSV) pri pomosci lateks-testa. / C. Schade, E. Fuchs // Tag-Ber Acad Landvirtasch-wiss. DDR. 1977. - №152. - P.37 - 41.

232. Schwarz K. Detection and characterization of European apple stem pitting virus isolates of apple and pear by PCR and partial sequence analysis / K. Schwarz, W. Jelkmann // Acta Horticulture. 1998. - №472. - P.75 - 85.

233. Schmid G. Five and more years of observations virus of apples in field / G. Schmid//Zastita Bilja. 1965. - Vol.16. -P.85 - 88.

234. Sequeira O.A. Recent work on the some sap transmissible viruses from apple. II Apple cucumber virus and E-36 virus. / O.A. Sequeira // Zaztita Bilja 1965 .Vol.16. -P.247- 249.

235. Sequeira O.A. Studies on a virus causing stem grooving and graft-union abnormalies in Virginia crab apple. / O.A. Sequeira // Annal. appl. Biol. 1967 -Vol.60 №1.-P.59- 66

236. Sequeira C.A. Application of latex floctuation serological testing to apple viruses. / C.A. Sequeira, R.M. Lister // Phytopathology. 1969. - Vol.59. - №4. -P.572 - 574.

237. Sequeira C.A. Purification and relationship of some filamentous viruses from apple. / C.A. Sequeira, R.M. Lister // Phytopathology. 1969a. - Vol.59. -№11. -P. 1740- 1745.

238. Semancice J.S. Partial purification of mechanically transmissible virus associated vith tatter leaf of citrus. / J.S. Semancice, L.G. Waethers // Phytopathology. 1965. - Vol.55. - P.1354 - 1358.

239. Sjomina H. Apple latent viruses and incompatibility between scions and stocks. / H. Sjomina, T. Bivol // Acta Phytopathology. Hung. 1980. - Vol.97. -№16. -P.31 -34.

240. Smidt H. The effect of latent virus infections on the yield of maiden trees on 20 apomictic apple seedling rootstocks. / H. Smidt // J. Hort. Sci. 1972.1. Vol.47. -P.159 -163.

241. Shiel P.J. Detection of tobacco mosaic and tobacco ringspot viruses in herbaceous-infected white ash trus in central New York / P.J. Shiel, J.D. Castello // Plant Disease. Vol.69. - P.791-795.

242. Shuster G. Outline of the fully synthetic antifitoviral application. / G. Shuster // Zesz. Probl. Post. Nauk. Roln. 1983. - Z.291. - P.275 - 289.

243. Sjomina H. Apple latent viruses and incompatibility between scions and stocks. / H. Sjomina, T. Bivol // Acta Phytopat. Hung. 1980. - Vol.97. - №16. -P.31 -34.

244. Smith W.W. Occurence of «Stem pitting» and necrosis in some body stocks of apple trees / W.W. Smith // Proc. Amer.Soc.Hort.Sci. 1954. - Vol.63. - P. 101 -103.

245. Sweet J.B. Virus diseases of some ornamental and indigenous trees an Britain / J.B. Sweet // Acta Horticulturae. 1976. - №5. - P.83 - 92.

246. Reynolds J.E., Mildrath J.A. Comparison of flowering crab apple varieties for fast detection of a common latent viruses in apples. / J.E. Reynolds, J.A. Mildrath // Plant Dis. Rep. 1962. - Vol.46. - №4. - P.243 - 245.

247. Takahashi T. Jamashita S. Apple stem grooving virus isolated from japanese apricot (Prunus mumi) imported from China. / T. Takahashi, N. Saito, M. Geto, A. Kawai, S. Namba, S. Jamashita // Res. Bull. Plant Prot Serv. Japan. 1990. -№26. - P.15 - 21.

248. Thomas H.Z. Virus diseasas of apple. / H.Z. Thomas // Hilgardia. 1961. -Vol.31.-№13.-P.435-457.

249. Thomsen A. Micropropagation and plant health / A. Thomsen // Combined Proceedings Int. Plant Propagators Society. 1992. - Vol. 42. - P. 180-182.

250. Tomary K. Approposal concerning agricultural pesticides in the twenty-first century: antiviral agent for plants. / K. Tomary // Jap. Pest. Inf. 1987. - Vol.50. -P.13-15.

251. Torrance L. Development in serological methods to detect and identify plant viruses. / L. Torrance // Plant Cell. Tissue and Organ Culture. 1998. - Vol.52. -P.27-32.

252. Tremaine J.H. Viruses mechanically transmitted to herbaceous host from apple trees with mosaic Sygmptoms. / J.H. Tremaine, R.S. Willison, W.R. Allen // Phytopathology. Mediterranea. 1963. - Vol.2. - №3. - P.92 - 95.

253. Uyemoto J.K. Apple stem grooving virus: propagating host and purification. / J.K. Uyemoto, R.M. Gilmer // Ann appl. Biol. 1971. - Vol.69. - P. 17 - 21.

254. Voller A. The detection of virusesi by enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). / A. Voller, A. Bartlett, D.E. Bidwill, M.F. Clark, A.N. Agams // J. Gen. Virol. 1976. - Vol.33. - №1. - P. 165 - 167.

255. Warner J. Effect of virus infection on the performance of Mc Intosh apple trees on selected seedling and clonal rootstocks. / J. Warner, H.B. Heeney, S.J. Lenty, C.L. Potter // Can. J. Plant. Sci 1984. - Vol.64. - №2. - P.361 - 368.

256. Waterworth H. Dark green epinasty of chenopodium quinoa, a syndrome induced by a virus latent in apple and pear. / H. Waterworth, R.M. Gilmer // Phytopathology. 1969. - Vol.5 - P.334 - 338.

257. Welsh M. Virus induced wood pitting in the root systems of apple seedlings and its effects on tree vigor. / M. Welsh, G. May // Canad. J. Plant. Sci. - 1967. -Vol.47.-№1.-P.703 -708.

258. Welsh M.F. Preliminary results in the indexing of apple in British Columbia. / M.F. Welsh, F.M. Keane // Plant Dis. Rep. 1959. -Vol.254. - №1. - P.25 - 29.

259. Welsh M.F. Transmissible decline diseases of apple. / M.F. Welsh, F.M. Keane // Phytopathology. 1961. - Vol.51. - P.l - 4.

260. Welsh M.F. Diseases of apple that are caused by viruses or that have characteristics of virus diseases. / M.F. Welsh, F.M. Keane // Canad. Plant Disease. Surv. 1964. -Vol.41 - P.123 - 147.

261. Welsh M.F. Elimination and separation of viruses in apple clones by exposure to dry heat. / M.F. Welsh, G. Nyland // Canadian Journal of Plant Science. -1965. Vol.45. - №5. - P.443 - 454.

262. Welsh M.F. Necrotic stem pitting and decline, two bud-transmissible diseases affecting Malus robusta N5 apple rootstock in British Columbia. / M.F. Welsh, L.P.S. Spangelo // Phytopathology. 1961. - Vol.52. - №1. - P.2.

263. Wigger E.A. Untersuchunger uber latente Kernobstviren / E.A. Wigger // Jahresb.Dt.Pflanzenschutzd. 1969. - P.279 - 282.

264. Wood G.A. Further virus diseases in pear in New Zealand / G.A. Wood // N.Z.J. Agric.Res.-1972. Vol.15. - P.160 - 172.

265. Wood G.A. Elimination of latent apple virus srough growth and yield improvements. / G.A. Wood // The Orchardist of NZ 1974 - Vol.47. - №6. -P.173.

266. Yanase H. Studies of apple topworking disease with apple latent viruses / H. Yanase // Bull.Fruit.Tree.Res.Stn.Japan. 1974. - №C1. - P.47 - 109.

267. Yanase H. Viruses causing apple top-working disease in Japan / H. Yanase // Acta Horticulturae. 1975. - №44. - P.221 - 229.

268. Yanase H., Yamaguchi A. Malus sieboldii MO-65 as a new indicator plant for apple stem pitting virus. / H. Yanase, A. Yamaguchi // Bull. Fruit Tree Res. Sth. Japan. 1982. - №9 - P.69 - 77.

269. Yanase H. Correlation of pear necrotic spot with pear vein yellows and apple stem pitting and a flexious filamentous virus associated with them / H. Yanase, H. Koganezawa, P.R. Friedlund // Acta Horticulturae. 1989. - №235. - P.157 -158.

270. Yoshikawa N. Propeities of RNAs and proteins of apple stem grooving and apple chlorotic leaf spot viruses. / N. Yoshikawa, T. Takahahi // J. Gen. Virology. 1988. - Vol.69 - P.241 - 245.

271. Yoshikawa N. The nucleotide sequence of stem grooving capillovirus genome. / N. Yoshikawa, E. Sasaki, M. Kato, T. Takahashi // Virology. 1992. - Vol.191. -P.98- 105.

272. Zawadzka B. The virus isolated from deckling plum trees primarily inoculated with plum pox virus / B. Zawadzka // Acta Horticulturae. 1982. - Vol.130. -P.73 - 79.1. Приложен^!