Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ И РАЗРАБОТКА МЕР БОРЬБЫ С СЕМЕННОЙ ПЕРЕДАЧЕЙ ВИРУСА ТАБАЧНОЙ МОЗАИКИ В КУЛЬТУРЕ ТОМАТА

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ И РАЗРАБОТКА МЕР БОРЬБЫ С СЕМЕННОЙ ПЕРЕДАЧЕЙ ВИРУСА ТАБАЧНОЙ МОЗАИКИ В КУЛЬТУРЕ ТОМАТА"

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ имени К- А. ТИМИРЯЗЕВА

На правах рукописи

МАКАЕВ Сайцелим Шамсудинович

УДК 632.3.07 :635.1/8 : 634.64

БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ И РАЗРАБОТКА МЕР БОРЬБЫ С СЕМЕННОЙ ПЕРЕДАЧЕЙ ВИРУСА ТАБАЧНОЙ МОЗАИКИ В КУЛЬТУРЕ ТОМАТА

Специальность 06.01.11 — фитопатология и защита растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА — 1984

Работа выполнена в Московской ордена Леннна и ордена Трудового Красного Знамени сельскохозяйственной академии имени К. А. Тимирязева.

Научный руководитель — кандидат биологических наук, доцент В. А. Шмыгля.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Ю. И. Помазков; кандидат биологических наук, старший научный сотрудник Л. Т. Харченко.

Ведущее учреждение —Московское отделение Всесоюзного института растениеводства им. Н. I I. Вавилова. ■

Защита диссертации состоится

в «/¿Ч час. на заседании специализированного совета К 120.35,03 в Московской ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени сельскохозяйственной академии имени К. А. Тимирязева по адресу: 127550, Москва И-550, Тнмиря-*.-*.. зевская ул., 49, Ученый совет ТСХА. '

Ученый Совет ТСХА. ' ¿ШШ

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХА.

Автореферат разослан

» ¿¿¿'¿ЯлГ/'с^Л^ 1984 г.;

Ученый секретарь Специализированного совета— . '/''«-з

кандидат с.-х. наук, доцент К. Торянска

. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РЛБСШ-

Актуалгность теш. В "Основных направлениях экономического и социального развития СССР на ISSÎ-I935 годы и на■ пзркол до 1900 года" и в Продовольственной программе СССР предусматривается даль-

■ кейший подъем произтодства каргсфзля w .ошщей.1 Одно из первых шст среди овощей по дродоводьсгвзиному и хозяйственному значению занимают томаты, Как в открытом/ так и в заижкзшкш грунте томаты сильно зораяаются вирусом тайачной^моааики(НГ.ц). Его вредоносность ейшз в условиях защищенного грунта, так как обязательные процессы ухода за тепллчгшми растениями'(пасннкование, пршципна, подвязка fi т.п.) способствуют-быстрому контактному распространению ВГ1.1- Кроме »обычной мозаики, 3TU в зависимости от сорта, условий вураэдивания, ороков заракения, ' атамыовых особенностей, могет

"вызывать более тякелне/симлгош; стрик, нитевидность листьев, не-• проз : плодов и семян. Обычно потери урожая от мозаики составляют ' IQ-I5ÎÎ. а отстрвкадо 60^ { Влас о в Ю .И1973 ; Роди на К. И., 1975). ■Длд: защиты томатов от.-ВГИ- различными ^авторами:.аредлояен комплекс -' санита'рно-сррфалажтическиз: и.зашитнах мероприятий. Этот комплекс •включает в себя селйкцшэ: я использование;устойчивых сортов, вак' цинацшсь растений, дезинфекщго: поч шv тары,инве нтаря, инструшн-' та, лраыенениа ;антивирусныг веществ. Борьба с 'передачей ИГ,'Л соме-

■ яамя-свсдится к химической- обработке, последних, что, по.мнение

;многих;авторов,.не обеспечивает-надежного; их обеззараживания от ■вяруской: инфекции. Поскольку основным< источником первичной ивфек-Ций'-ВГМ в культуре'тоыата'являются зараженные;сеыена, отсутствие ■эффективных■дар>првдуяре.тдения семенной передачи вируса следует считать судаственн^ недостатком существующих-систе« эазшты тоиа-та от* ВГМ.' Пвредача 'НПЛ'семенаыи' обеспечишет устойчивую циркуля-

НАУЧ L.-.5>:hoteha

с-''.'^,'", гкадьь*м

ци'э »пруса з культура то,гата, что раз ко сзк^ает эффективность са-нлтари0-ар0'|-;1л£1к'г;:чес1'.:;х я эогитпкх ¿«ропрачтлИ. >1мвшаеся сведения о биологли передач;! Ь*ГМ се шлака со:.;ата, о локализации и состоянии вируса п се;лшах кедссгатоиш для разработки методов обнаруживая их ..'зарахзнностг я ¡.«толов толучения семян, свободных от ьцруской ик^окдин, Цели :гаатол;цэ£Е работы состояли в слвдующм:

- лрозэсти сравнена; результатов диагностики ЗГМ в семенах, арэростках и растеш^ях томата различия и;-. ;.ютодаки;

- гнести усоьертзкотьоъаниа в методику диагностики заракен-кости сег.-лн томата ВГ.'Л;

- изучать факторы, гсЕЯваие на зараженность семян томата ВГМ а на результаты диагностики этой зараженное?л;

- изучать вэзг.'о.таоотн получения семян то;^атаI свобсдгшх от

ХЛ1:.!;

- получить даш.'а о гладкая некоторых млхроакекантов па про-яеленив и эродоноснсохь Нал иа то.'-птах.

Научная норкзнд воэультатов исследований. Показало, что инфекция ЯГи может находиться в се маках тоь*лта в двух формах. Одна аз них обнаруживается с полюдью серодаагкостлдл я рас те нл "-индикаторов с местной некротической реакцией на 2ТМ. Эгорая форма вируса отличается очонь слабой серологической активностью и не проявляет внфекцконности на индикаторах с местно3 некротической реакцией, ко диагностируйтон цутем правящей проростков на растения л отделенное листья турецкого табака. Разработана ¡датодкка выяаяе-ния скрытой инфекции в проростках из заражениях семян, позволяя- . ^ая установить уровень Эараг-енностя партий семзк независимо от сроков их хранения И поверхностной обработки, Показана возможность получения свободных от ЗГМ рчстениЛ томата из заралэшшх, семян . ' путем вддзления эародь'аа, .,'*,''

Практическая ценность вдбоуц. Выявленные в настоящей работе некоторое особенности семенной передачи ЗТ'1 у томата дал? возможность усовершенствовать диагностику заратепнссти семдк и внгстп некоторое дополнения. в с кете ну ьдароприятяН по защите теглкчкого то«ата от этого вируса. Разработанный нами метод Еыявлеккя зараженности семян томата ЗГМ удазт быть использован в селеюхташю'.г я семеноводческой работе длд отбора образцов й ликгЛ, сяободгакс от шфзнцил, Еяращаваниа растениЗ яз «золирозанннх заро-

дышей .тожгт быть еепользовано для получения исходных партий семян, свободных от ЗТМ, в семеноводстве данной культуры дм затаенного грунта. ;.!атеряалы вс следований используются лр- разработке ¿'отодичоских реко.'.-еядацаа по диагностике вирусов в сернах культурных раотеша пра изучении передачи вирусов сеиека:;,:, а также дрл чтенкл лекций студентам отделения защиты растения ТСХА.

Дпробацая'.работы. Материалы диссертации додохены на научных . конференцпях. ТСХА з декабре 1932 г. и в аюне 1083 г. и на УЗ Зсо-союзяод совевднаи до вирусным болезням.растений (3&льняс,маЯ 1334г.),

Объея и.структура райотн. Диссертационная работа гзлояена на /&Хстраницах машвтодиеного текста. Состоит из ввеДания, обзора литературы, . 6 эвдверя:«нтальных разделов, выводов, предложений для практики; спаска-использованной.литературы и приложений. Содержит таСляц д -и рисунков. Список использованной литературы !вклячаат 275 яеточииков,. в-то«.числе и.о.. иностранных.

V С(ШР2АШЭ РАБОТЫ

Бзрдеяя«». Дана краткая характеристика- экономического значения культуры,томатами его важнейших ввруетпе полезней.

Обзор-литература,. Приведена литературно диннье по олифито-таологди ЭТИ. в тевличной культуре томата.. Рассмотрено совре:«нпое

состояние вопроса передачи ЗГИ ce.voitavj: Дана характеристи-

ка вредоносности ЗГ.'Л и завися.-гостг. от раэлкчотх (¿октороз. о;суэда-т; судаствукже эа^кчке .мероприятия против ЗГГЛ в оаеттанно« грунте.

Спя»»я№лмтя опенки ¡методов диагностик» ВТ" п сериях, запо-д^злх,^' пгютюсткаэс и тпдтрнйтгх тоу-тгп . Для диагностики HTM "с польза вали заражении« ЗГГ.1 седана то юта сорта Плэнерскяй после различных сроков хранения я в различно« состоянии (сухке, набухшие и на-кгмнувгаеся), атакяэ проростки в начальной стадии развития семядольных листочков к о полностью развившим коя сеиядолышмл листочками. Пробы для анализа готовили следующим образом: 100 се;,ян яла ■ 20 проростков растирала в фар|ороБоа ступке с I мл O.X'.l £юс?атю-го буфера pH 7,5. Для серодиагностики полученную суспензию отфильтровывала пипеткой чарез вату. Полученный £:иьтрат использовала, для анализа. Серодиагностику ЗГУ проводит капельным методом по Дуклцу М.С. и Куш:аново2 S.B. (I95S> ц имцукоферментным методом. Ш 01 tifie and Ad&nfl AJI. <1977) (в модификаций hl clit о г J.-, '* ot, ni., 1979). Для индикаторной диагностики НШ в сешнах и проростках использовали отделенные листья клейкого табака (lUcoti-b/.u Blucinoaa i>. ) И Дуриана обыкновенного (Du tur u stnuioniuc lJ. Листья, кнокулированные суспензией исследуемого образца ду-' тем натирания о карборундои, лнкублровадя во атажшлс камерах на свету при комнатной температуре* Препараты для электронно-нпкро-. сконического исследованак готовили по методике 3i*¿mdos J.et ol. (1064), с контрастированием раствором фос$орно-ваяьфрамовой кислоты и уряпил-ацетата. Препараты просматривали'при увеличении , х40 тис. Для диагностики Ю в пророотках тоиата ш применял я; ■■■ кроме других методов, привинку проростков на табак, Пророоткя томата в (}лэе полного развития сеилцольшл двсточковиверхугакк

стейм?. взрослых растений прививали на целке рас те игл п та отделе инки -часты турецкого табака ( Mcoeiana са'люи^ j,. ). сорта Самсун. Прививку прорсст:;ов в вгрху^зк стс5ле2 на пастепдя табана проводили .voто2.0у "в пазуху листа". Серологический и нндиксторннй анализ;; привитых растений табака проводили чэрез £0-25 днзЗ после прлкнЕхн. исследуемого :.;атериала па отделе)im;о листья та-

бака выполняли по разработанной на:гя- методике, в разрез сргхшзГ; жилки I'-i-i черенка с нижней стороны листа. Привитые листья соьа:ца-ли в с тетопронпдс.о;.;ую кажнуга шк-йру и инкубировали при тендера-тур-j 20-25° к 4-6 тис.лк в течение 15-20 суток, эатеи

пр:-.оутстЕ2е вируса з листе определяли серологкчгсгскм и янпикатор-ным тетсда^и 7,0 о б ¡того 2 методике. Диагностику ВГМ на семлдслышх

листочках огурца проводила по методике Ио1.мс ?.о. (1929), с а

оЗесЦэчивзнкем инокулярованных листьев этанолом и окрашиванием кпахмагыих- паранекрозов йодом, ;.5еханичвскую иноку;:яцко растений ■ провод иди дутом натирания листьев соком или суспензией с помогаыо кусочка поролона с нряглнениги карборунда и активированного угля. Листья контрольных растений натирали водопроводной водой. Результат приведена в табл.1.

Данные, приведенные в табд.1 показывают, что в суспензии свехешделенных зараженных семян ВТ.Тлегко обнаруживается всеми метода-л;, однако яоеле хранения секян более года вирус в с ус ас н-Эил не дкагнссткруется на ¡¡.{-lutinoLja L. и D.str^cuiu.-a i,. , но. проявляют пнфекционность на семядольных листьях огурца. 3 проростках кэ зародеиных семян вирус диагностируется путем прививки На растения'турецкого табшеа ( ;;.tab.icur;. ) а методоминокуляции семядольных листьев-orypaa С CÜcüäIs'sattvuo l>. ). Зараженность проростков из зародышей, поделенных и^. зараженнь;х семян, значительно щуке зараженности проростков иэ'целкх семян тоЛ яе

карткя. Провели сравнительный анализ проростков томата сорта Пионерский из зарахенних ВГМ семян в начале развития первого настоящего лкста несколькими мзтодаун. Результаты анализа приведены в тайл.2.

ТайлЕща I.

Результаты диагностика НГМ в семенах в проростках томата сорта Пионзрскнй различными методами

Капель-: Отделенная :лае лдо-серо- ;тья л. дкагло-:civti-oo-

с тика

: средн. :к-во кек-!розов на :1 лист

Сехэдалькке ; Прямика листья огурца I на табак,, ---пололо ;пассая :хи?елъшх Холм-;на ;резуль-

': sc :

I. Сш*ешделен!пге 20

с огона * + X

г. Секона, хранившие- 1

ся 14 veo. - 0 -г X

3. Проростки из с ве хе- ео

гкЗД ленных cet-'лн - 0

4. Проростка из семян, . 35

хранишихся 14 мес. - 0 ч-

5. Проростки яз заро-

днаэй _ 0 +. 7

Лри;«чэнке: + - постоянный положительный результат;

-- достоянный отрицательный результат;

х - анализ не проводился*

Данные сравнительного анализа (тайл.2) показывают, что ЗГЧ в проростках из заражокншс семян отличается по своим свойствам от вируса, прясугствуювйго в контактно-зараженных растеадях томата и табака. Заруо не оврозует типичных для ЗГ.У частиц, не ггроявля- ' ет яи^ахциэннэсти на H.Kiutinoca l, , имеет очень слабую сероло- • гитескую активность, но обнаруживает инфегашонность на • семядольных листьях огуриа. ГЬалученнке результаты приводят к шподу, что''

Таблица 2

Результаты диагностики НГМ в проростках тогата сорта Пионерский различными методами

** ; а/в: Методы ; диагностика Количество : лроакализи-; ро ванных ; проб ; • Процент положительных результатов ; Примечание *

I. Капельная серодиагностика 200 0

2. I'отк?аторнач диагностика на . и - 1 1.. 100 . 0

3. атектронная микроскопия 20 0

4. 11м:гуно*орентный метод 50 14 Реакции слабые

5. Инокуляция семядольных листьев огурца по Холмсу 100 100

6. Прививка на табах ICO G0 ■

обнчпо применяемые (¿етодн диагностики ЗТМ: касгльная серодиагностика, инокуляция .е1иг1поаи ь. и электронная микроскопия не пригодны для диагностики зараженности проростков я изучения передачи

семенами. Варуо может.быть обнаружен путем инокуляции се;.*л-додышх листьев огуриа, а такхе прививкой на растения и отделенные листья турецкого табака.

йактогн., йк'дтаа на результаты двягностпии ВГМ в свмйнпх. пгюрютках и растениях томата

"лучали связь некроза семян с их внутренней зараженность» ЗП1, влияние обработки семян 20% соляной кислотой и длительности их хранения на результаты диагностики их зараженности ВГМ разлвч-. ними ¡летодамя. В табл .3 приведены результаты пндакаторноД диагностики ЗГМ в суспензии зараженных семян без некрозов и некротиэи-рованных в различной1 степени, до и после их обработки соляноЛ кислотой.

Таблица 3

стоячий нлфотиэацки сеглк л ойрпбот;;» 20" соляной к):о.-.отоЛ ни ии^схцсоннссть их суспаюнл (количество некрозов на 10 л;:отьях шгслкаторних растения)

Oe.'.isira йез обтботки : üe.Jüm; , ob Di ¡CO * "4 у ташг;е

Расте ная-ищу.каторы стопанъ нйкротизпцпп сейш

»acpo-igjg :нш! Шекро-: ПОТ1 t1"-1 :,iaii ; ела- : бая : CtUTb- ная

Saturn с trnüoniu.-: 1,. 32 47 219 0 24 79

"icotiiiaa ylutiKO^^ ь. 27 79 231 2 . 38 91

Лакш;о табл .3 показитэт, что некроткзированнке седана содержат значительная запас внухрзннеЛ анфекцзи, на устраняема при поЕорхнсстноЗ! дезинсекции. Поэтому использование л производстве партий cet^rn, содоржк^и се .та на с пр;; знаками некроза, нецелесообразно. В настоясге врекя ддн диагностики зараженности сешн томата Ю применяется .метод, идаочаяЕяЗ серологическиЗ я индикаторной анализы экстракта измельченной пробы семян (Власов Я.И.,1931). При зтом обнаруживается, главным образом поверхностная контаминация се:-гш из цульгш зараженных плодов. Эти же' методы дают в большинстве случаев отрицательные результаты, если семена подвергались поверхностной химической обработке или хранились длительное BpetM (более года).

Iii сравнили результаты индикаторной диагностики НПЛ в семенах после различных сроков хранения, до и после химической обра- . Сотки, а также в проростках из них (табл.4).

Результаты, приведенные в табл.4 показывают, что методы индикаторной диагностики на ЛИСТЬЯХ Mcotianu .(-lutinu-;» L. , 3atu~ m мояно обнаружить ЗГУ в суспензии светевыделенных.

cetuit и поело 3-х месяцив хранения, но вирус не выявляется этим

Таблица 4

З^плнпе сроков хранения и химической обработки семян то.тата (сор? Пионерский) на результаты иодикаторной д1:агностаки ВП в семенах и проростках (среднее количество некрозов на X лкот индикатора)

Г Семена без обработ-; Семена. обработанные 20£ ВС

п/с: .'.'дторкая : ки :

: ; : -!---5-! ;:. ; у.

Суспенакл со.улн:

1. - свеаюеыдслекиых.

сухлх 25,4

2. - свежевыделенных

ноклю ну е~;1Хся 26,5

3. - хранившихся 3 мес. 20,0

4. - хранившихся 14 мес. О

Суспензия проростков ид свяч^г^д.сеь'дн:

5. - в начале развитая

сеиядольн.лпотьев * О

6. - в начале развития

1-го наст.ласта О

20,0

19,0 24,0 О

О О

9,0 О '

О

о

о о

о о

хе методом в семенах, хранившихся в течение 14 месяцев, а также в проростках аз тех ае партий семян. Обработка семян 205 соля но Л кислотой резко снижает пнйекцвонность их суопензаи, но не устраняет ее полностью. Хранение семян в течение года л более после выделения из плодов снимет инфекционность вируса как на поверхности семян настолько, что инфекция мояет не обнаруживаться на анди-каторных растениях с местной некротической реакцией, Полученные накиданные вполне согласуются с литературным«^ однако по нашему инепио отрицательные результаты диагностика ЗГУ в семенах и проростках не могут слудлть основанием для заключения об отсутствии вируса в них, поскольку чувствительность индикаторов с местной некротической реакцией недостаточна для окончательного ресеняя

этого вопроса. Поэтом/ для более точкой диагностики ЭТУ в проростках и растениях тодата из зараженных семян бил пропелен опыт с прививкой их на молодыо растения турецкого табака. Результаты приведены в табл.5.

Таблица 5

Результаты диагностики ВГУ в растениях томата, полученных из о&раявнных солин, различными .метод а-лл

Сорт

4аза ;Ка1И-развнтпя Гчество растений ¡рдсте-:нип в :опыте

Подвой

¡Леонида

Ъиоаоия

¡"оличест-¡Контроль; Сэродя-¡во поло- ¡непоивк-: агности-:кятелышх:тые ра- : ка ЗГ( ¡реакций, ¡стешш в исход: тГ ;(листья): кых рас: : : тениях

Белый сегядоль-

налив ные листья

Мос- соичдоль-

нне листья

ков-

ский начало

осен- цштения

ний

начало

цветения

Пио- бутониза-

нер- ция

20

20

10 10

10

растения

'отделенные листья

растения

отделенные листья

растения

60

50 40

60

О О

о о

Диннке табл.5 показиваот, что ВГМ в высоком проценте определяете: г и л^.сстках или молодых растениях томата при. прививке ах на целые рутения ели отдаденные листья турецкого табака, при этом в соке исходных подонктных растений еще длительное в^кя не обна-р/^тается ин|дзкциошюсть и серологическая активность вируса. Т!а сспокании результатов, приведенных в табл.5, мокло утжерч5ать, чю ВГ.'.( мо*от присутствовать в се;/енах и лрорсстках тоуата в состоянии, недоступном для капельного серологического анализа и индикаторной диагностики ч соке «ли и суспензии, В наг:их опытах-

растения, разЕиаииесп из зараженных ЗГМ семян, как правлю, не показывали положительных результатов серологической а индикаторной диагностики вируса (при аоханичоской инокуляа«и) ка всем протяжении их вегетации в теплице, то есть около двух месяцев. Те яе растения при прививке их на растения иди отделешше листья турецкого табака дали до ftO? яоллхит^льннх реакций,

Лрг. изучении передачи люйогл вируса семена;-"! оч«нь (mien вопрос док.-",кзалии его в семенах, По данным многих авторов, значительная часть ЗГУ, содержащегося в семенах то;.*ата, сосредоточена в кокурэ. значительно реже и в г/.еньсем количестве ÎÏTM ест ре чается в евдоспйр;ле а не был до сих лор обнаружен в эароднже. Сегена от зарсцкеннах ЗГ:л растений, хранквпихся 3 месяца, после обработки 20> еояянэ* кислотой препарировали для выделения зародышей. "з шдо-лсннык за^дихей (в пробе 20 зародышей) готовили инокулюм, растирая их в ^C'îaTKow буфере, а затем суспензией каждой пробы иноку-* лпровали по 4 листа индикаторных растения ;i .^lutinosa l. о р, sera .oiiiu-i L. . Кз той же партии семян без поверхностной обработки препарировали семена для подготовки ижжулгсма из оболочек семян, суспензией которых проводили инокуляция листьев растпннй-вн-дикаторов. Для подготовки инокулюма из эндосперма, сешна из этой же партии после обработки кислотой шее вали в растильни с кггч^це-вым песком, пропитанием раствором Кнопа. После прорастания семян собирали пустые оболочки, из которых с помощью иглн и пинцета извлекали остатки эндосперма. Из катдой части eef-ин готовили лноку-Дюы с добавление:* буфера. Полученные результату нрятдвда в табд.6. Эти данные подтверждают результаты других автороп (■¿•.¿yjlsj B.C.,* 1957, 1358; ruyioriy.H. , XSSI;Jroadcont l. , 1Ж), однако, они де itasT основания считать, что в зародщщ. до прорастания вирус полностья отсутствует, известно. что чунзтвэтрлюность кнкякр-

Габлша 5

Гл&кционнзсть суспензии из рэзл:1Ч[а;х частив заражениях Ю сег^ян тог/ата

Варианты : Среднее число некрозов на I лист из ; четырех по вторе ни Г) по 4 листа

Суспензия зародкаеЯ О О

Суспонзия эндосперма 12 4

Суспензия оболочек соулн 58,5 42,1

торных растений с местной нокротическоЗ реакцией ограничена (Р.Мэ— тьяз, 1973). Поэтом/ испытания заратекности эародмей были продол-хеш другими методалот. !.Ы сравнивали результаты диагностики НГМ в проростках из зараженных сеггян я изолированных зародыжей томата сорта Пионерский ьотодом прибивки па целые растения я отделенные листья турецкого табака. Результаты, приведенные в табл.6 показывают, что этот метод позиазяет шяелть зараженность эародноеЯ, выделенных из зараженных семян.-

Таблица 7

Результаты диагностика ВГ.М в проростках из зараженных сецян и изолированных зародыше3 тоиага (с .Пионерский)" методом прививки на растения и на отделенные листья турецкого табака Со.Самоун)

Прививка на растения: ирававка на отде-); .зьлсы :леннвв листья

Варианты

колячаотво;процент :кол ичзст-! процент растение :патожягелы-по листь-:паяпжктель-табака :ных ре- ¡ев табака:них резуль-_:эультдтов ?_^а-гов

Прививка проростков из целых сеьош 125 48 120 35

Припивка проростков аз зародигеИ 100 7 -

Контроль, нвпрккктие растения и лястья 50 0 50 0,

Полученные на.*л результаты показывают, что вопреки сукеству-оэд«у мнении, в зародышах может бить обнаружена вирусная инфекция, однако процент зараженноетд растспп!), развившихся ип внделен--них эародь'-вЛ, значительно низа эаракяшгости расгепиЛ лз цатк* се-

Это дает осло'инк« предполагать,, что внделекив зародыша может льиться однп.л иэ путеЯ получения растения, свободкых от ВГМ, и в конечное счете - свободных от БЛ семян томата. Сращстгалв результаты капельного серологического анализа шроелнх рпстен'-:й сорита Пионерски?, в бутонизации верной кисти с результатами прививки езрхугек тех же растений то«ата на табак. После двух серологических анализов, дак^ях отрицательный результат, верхуикп от этих растения привяли на табак. В течение опкта про ре де но пять серологических проверок подотшшх растений. Растения, показадаае положительную реакцию, исключались из опыта. На 16-3 день после прививки серологический анализ привитых растений табака показал их зараженность ВПД на 94?. Згот результат означает, что подопытные растения быяя практически полностью заражены ВГУ уже в начале опыта, однако серологическая реакция появилась значительно позжа - через 30-60 дней. Результаты опыта представлены на рис.1.

Результаты опнтов позволяют считать, что ВГЦ находится во всех частях семян томата, полученных от зараженного растения, однако соотносила степени зараженности различных частей может быть неодинаковым, что влияет на результаты диагностики их зараженности до и после поверхностной химической обработки.

Показателем высокой степени внутренней зараженности семян ВГ.'Л является поражэнность их некрозом. Поверхностная химическая обработка таких партий семян не снижает их зараженность ВГМ, определяемую путем инокуляции листьев н .кш^псе« ь. сусгокзиоЗ пробы семян.

to о ti

rt и

SV;

r caí

«Aï

рок» анализа 20,5 Ю.б ' 30.6 20.7 10.8 , '

Рис Л. Результаты даагаостики 2Т1 .з растениях тоиата нетодаии приэавки /а/-на растении табака,/б/~С0РОДиагностика, -/г/~Уда№Ш.чз растения.

1Ж1

- 15 -

Хранение сем-чн после вццеления из плодов более года, а также их обработка 2.0% соляной кислотой снижают и»1екционность суспензии семян на листьях ::.к1и«лоиа I,. , но не мияпт на зараженность проростков, определяемую методами инокуляции семядольных листочков огурца я прививки проростков на растения и отделанные листья турецкого табака.

Нтияние хшпческоЯ обработки семян, зараженных НГМ а «■•деления ^засо^и^й на дягчгносткху зараженности во время вегетации растения

' Данные, приведенные в предшествующих разделах, показывает, что обработка зараженных семян 20? соляной кислотой снижает процент зараженности проростков примерно в два'раза, а процент зараженности проростков аз зародышей, выделенных из семян до пх прорастания, примерно в 7 раз ниже зараженности проростков из целых семян той ж» партии, обработанной соляной кислотой. Однако результатов диагностика ВГУ в проростках недостаточно для заключения о влиянии указанных приемов на динамику зараженности растений во время вегетации. изучали раздельное я совместное действие обработки семян 20% соляной кислотой и выделения зародышей на результаты диагностики зараженности растений томата НГМ на разных стадиях вегетации, Обработку семян и выделение зародышей проводили, как указано Bu.it). Зародсти шра^авали на питательной среде Мурасиго-Скуга (1062) оли на прокаленном кварцевое песке, пропитанном раствором Хнопа поло пинкой концентрации. Рпстения из аерОчЫ-еЯ и целых семян ъырашпчим в теплица в условиях, мключавдях контактно-ме ханиче-ское заражение. Эо времч вогетсции определяли зараженность растений «урологическим я индикаторным методами, Результаты всех опытов преде та мены в судной табл.8.

■ -16 -

; ' Таблица 8

Результаты серологической.и:индикаторной диагностики ВТМ в растениях тод;ата из зародышей и целых семян (% положительных результатов)

Растения из целых семян Растения из аародш^ей

Обработ- " заражшюсть зар-х-^ниость

Сорта ал семян Я:" <П К е- о а н ia •IM «■- rgg/ оа^Ф P* м Э- ¡3 <u*s о 5 <3 о, t< S.O U'SKO в конце вегетации . 8Ч <о л в- <в е ^ II • 1 as * во * я ез : ti о : а оЯФА -mg <5,о Зк®и!х Ё, аз» 2, в: ta . <п а аа,сз к т я

im г,

Белый налив 202.HCl ICO I 2?. 100

РЗВЗ г.

Пионерский 30 0 -36,6- IC0

Пионерский без обра- 114 .0 .'68,7 IC0 ботки ■

Пионерский 20£ HCl 114 0 22,8 .100

Пионерский 15 13,3 46 . .80

'./"'. 19Й4 г. ,

Московский 15 13,3: 40". 4S

осенний * ■

Украинский 15 0 .0 66

тепличный ' * : ■■'.

100 0 0 0 30 0 3,3 Х0,0

126 15

15 15 .

О О

О

о

О 0,8

о е,е

О 13,3

О 20

Лонные табл.8 показывают, что 'химическая обработка соггш то-«ата несколько отсдвягает сроки, кассового проявления ВГМ во врекя' вегетации растений, в результате чего:уменьшается его.вредоносность. 3 варианте, где шделяли зародыши после-кислотной обработки семян, в конце вегетации (1082) было обнаругано одно растение,-инфицированное ВГ.'Л (0,8?), В результате сочетания, двух факторов: . поверхностной дезинфекции семян и: выделения зародышей до начала их прорастания достигнуто резкое снижение,"зараженности ЗТМ у рас-' тений этого варианта по сравнению с растениями из целых сеьзтн,

что даст основание предполагать, что ин^цироглнио зародыша происходит го speiii прорастаиия семян, вероятно - па ранних его этапах.

Ст растении, разв/.клпхся из зародизей и оставшимися к кояцу ьегстанг;: свободными от ИГ.'.!, выделены семена, вирусологическая проверка которых гсс.чп .'.«тода'л::, включая прививку проростков на табак зкопу.тлцал сем-иолышх листьев огурца, показала парное отсутствие вирускоЯ зара>йннссти.

Полученные результаты дают основание считать, что. выделение рародыей из comih, обработанных 20Й соляной кислотой, с последуп-адй проверкой растений серологическим и индикаторным методами дает возможность выращивать из зараженных семян растения, свободные от ЗГМ, для получения здорок:х секта.

Влияние сроков n;rf "'^гттот'я гастонпй гомата КГ1 на

упогдй плодов. ззпахрцность семян п их посевные качества

В литературе имеются сообщения о том, что вредоносность ЗГУ в культуре томата тем выве, чем меньше возраст растений в момент заражения, однако точных количественных данных по этому вопросу мало. В опыте исаояьзо вали сенека от здоровых растений сорта Пионерский. Растения выращивали в пластиковых сосудах емкость» 5 кг почвы, но одному растению в сосуде. Варианты опыта: I. контроль, без заражения; 2. заражение растений в возрасте 4-6 настоящих листьев; 3. заражение растений во время цветения первой кисти; 4, заражение растений в начале блакке вой спелости плодов первой кисти. Учитывали об^ув массу и количество плодов от одного растения, массу IGQQ семян, энергию прорастания, всхожесть и поражен-ность семян некрозом по вариантам. Опыт проводился в течение двух лет - 1981 я 1982 гг.-Результаты представлены в табл.9.

Данные, приведенные в табл.9 показывают, что заражение растений томата обычным ¡ктаммом BTíi снижает их урожайность на 16., .65%

. Таблица 9

Влияние сроков заражения растений томата ЗГМ на пх урожаЗиость (сорт Пионерский) (средние данные за два года, 1981-82 гг. )' *

■«я : п/п; Варианты : Обцая масса : ПЛОДОВ 2 • ; I растения : ' Средняя .: масса плода ■.Количество" ;плодов на. ;растекяа

: г ь %■ :- г (* Í» : ат. : % .

I. Контроль, без заражения 919,80 ■ 100; 68,72 100 13,4 100 '

2. I срок зараже-нся (4-6 настоящих листьев) 342,75 37,26 43,22 62,89 7,95 59,33

3. П срок заражения (цветение 1-ой кисти) 476,58 51,81 ' 52,04 75,73 9,3 69,40

4..£1 срок заражения (Оланяавая спелость плодов 1-й кисти) ' . 759,79 . 82,60 „' ■ 61,11 68,93 12,45 92,91

в зависимости от возраста растений в мэдаят заражения. Наибольсая; вредоносность вируса наблюдается при раннем инфицировании растений' - в рассадном возрасте. Заражение растений томата HTM резко снижает посевные качества семян!, При раннем заражении масса ICC0 семян снижается на 65*, всхожесть и.энергия прорастания - примерно на.-. 203,- индекс кекротизациа семян достигает 340. 1?э полученчых данных следует, что заражение растений томата ЗГМ может бить причиной несоответствия семян Госуда;ютренному стандарту, по'качеству. Необходимым условием получения яысококачествечных сешн/ЯЕЛяется. поддержание семеноводческих посадок в свободном:от ЕГПЛ состоянии- .

Нижние м^игоэ.Т'ментов на патогенность ВТ'< нч тоетах

3 литературе имеются сообщения': о "том,, что микроэлементы, особенно каргакец, цинк, бор, медь, в1ияот;на ход:инфекционного и па-

тол отческого процессов прв заражении томата HTM, усглитя сопротивляемость растений инфекции и снижая ее вредоносность, С кельи получения дате:! по этому вопросу мы провели ошт в условиях песчаной культура с искусственно созданным недостатком марганца, а также югетсд»;он-ш2 опыт на почленной, смеси с заражением растений 2ГГ..! в рлэике сроки и некорневыми подкорками раствором солей марганца, магния, бора, меда, цинка и молибдена. В следуюз»« вегетационном опыте на растениях томата, шраяенных в пластиковых сосудах на зочзенкой с:^еси зараженных ВО изучали соцерканив макро- и микроэле.^ентов. Учитывали характер и степень проявления симптомов HTM, концентрация инфекционных частиц в соке листьев, урожай плодов, содержание макроэлементов в листьях томата. Содержание железа, марганца,- меди, цинка, магния определяли на атомном*абсорбционном спектрофотометре С jvrhin .iicor ).

3 результате опытов установлено, что недостаток марганца усиливает проявление симптомов ВГГ4 и угнетение растений, при этом концентрация инфекционных частиц вируса в соке листьев, определенная методом подсчета местных некрозов на листьях ;;.t;iutinoeui l. ,d. sii-t^.oniuii l. , повысилась на 25-607» so сравнению с растениями на фоне оптимального питания.

'3 табл.10 представлены результаты опыта с некорневой подкормкой растений тошта микроэлементами на фоне заражения HTM в разном возрасте. Данные табл.10 показывают, что некорневая подкормка растений томата, зарэжекных ВГМ, микроадгементамя: бором, марганцем, меды>, железом и молибденом существенно снижает вредоносность НМ'и обеспечивает при раннем заражении растений прибавку урожая около 30i. При заражении растений томата ВГМ в возрасте 4-6 настоящих листьев снижается содержание в растуаих листьях микроэлементов: марганца -в 2-2,5 раза, цинка - в 1,5-2 раза.

железа - в 1,8 раза до сравнению с незараженным контролем. Мате-матачзску» обработку экс лериментальных дакшх опытов проводили по £.»\,£оспехову (1079).. ■ : . • ■

Таблгаа 10

Ечеял::9 сроков заражения ЗТ-М и' некорневых подкэг>г.?ох микро-злегдгктами на урожайность томата сорта Имперски;1.

jüí ; а/а: ■ Зарканты ;."лсса пледов от I растен:'л

- : г ; в % к контролер

X. Контроль без заратания и без

подкормки ' ,1032,5 100

2. 1-2 срок заражения без подкормок 350,57 34,72

3. 1-Е срок заражения + подкорка -473,73 45,83

4. 2-2 срок'заражения без подкормок 576,48 55,83

5. 2-Я срок заражения + подкормка 659,6 ■ 63,88

. C2Z3 ШВОДЫ

1. ЗГ.М'передается .семенами томата с различной вероятностью - от 5 до 100?!, Vзависимости от сорта, возраста растений в момент заражения, сроков хранения семян после, их выделения из ало-' дов. Различия процента передачи не. имеют практического значения, т.к. зараженность растений быстродостигает IOOÍ вследстпге контактного перезаракэния во врем вегетации., ',

2. 3 семенах томата,, полученных от засаленных ВГ-М растений,, этот иирус обнаружен во всех частдх сешни: оболочке,, эндосперме и зародыше. 3 передача вируса семенами участвуют все три вида его локализации; В проростках из засодызей'вирус обнаруживается в небольшом ароценте (не более . . • •'

3.. В соке в суспензии проростков.из зараженных ЗТ'Л семян томата вирус не обнаруживается,капельким серологическим, индикаторным (на glutinoso L..'г.. :) к о л е ктрон но—микро—

- 21 - .

сконическим метода'«, не диагностируется цутеа инокуляции секя-дольннх листьев огурца я методом прививки проростков на растения я отделенные листья ту|>ецкого табака ( :<'3.со-б1ипа гооиси^ ь. ). В небольшом проценте проростков вирус бить обнаружен также

яму но—£ер,лзнт11^1 !.'зтодом. Указанные особенности диагностика вируса могут сохраняться' в течение всей вегетации пли большей ео части. ■ * " •

■ 4. Поверхностная дезинсекция семян, зараженных.НГ;Л, 20% соляной кислотой а течете 30 «ия, не вляяет на зараженность проростков, диагностируем*» методом прививки на табак, но изменяет сроки проявления симптомов а капельной серологической реакция во время вегетации растений.

5. длительное хранение семян (более I года) несколько снижает процент передачи ВО семенами, но не устраняет ее.

6. ¡Зараженность ВГ'Л проростков и растений, развившихся из зародышей, выделенных из зараженных секян, в несяхтько раз ниже, чем проростков и растений из целых семак, иногда зараженность полностью отсутствует.'

7.Существует обратная вависвмость меаду возрастом растений томата в мошкт заражения НГМ и процентом передачи вируса семенами. Наибольший процент передачи наблюдается лрл инфицировании растений до завязывания плодов первой кисти.

8. Наличие в партия семян томата даже небольшого процента зерновок, пораненных некрозом,' указывает на сильную степень внутренней зараженности партии ВГМ. Такие семена нецелесообразно использовать в производстве.:-

9. 7 зараженных КГЛ растений тотта существенно снижается поступление из почвы некоторых минеральных алэиентов, п частности ;-магния, цинка, трганца, железа, что, по-видимому, усилит-

, - 22 -

er вредоносность-вируса и снижает сопротивляемость роетекг".

10. Не корне иае подкормки расте ниято иата ¡«так ро зле^с нта.»а: бором, марганцем, цинком, кедыз, келезом сдержкшюг проявление сп«п-тоиов ВПЛ и повывают урожай заратеншлс растения npi:i»pno на 30%.

Н^О'.ЗРДАЩГ:! ЛД/Т ПРАКТУ1Я Полученные в нлше.1 работе результаты и их о£с убегите с учетом литературных данных позволяют рекомендовать для яро ел водет ле иного испытания следуюдке сочетания мер Ьвдорэьчеши от ЗТМ районированных сортов.томата п исходных форм,, пепольауешх дяя получения глб-рвдов:

I.. Отбор партии семам о'.наименьязй лчутрйннеЯ зараженность» ЗТМ после поиерхпсстпоЯ'дезинсекции-'flyríM анализа .'.-етодама яноку-* ляция семядольных лкстьев огурца и орившиш на.табэк^ а также иа-. ^11о-"^эрментнйм методом. ' ^ * ■■■, . , '.*,■'

2. Получение исходных здоровых йартяй семян для дальнейшего разложения путем вкраивания растений-из- зародывеЗ, выделенных . из набухших семян после тдательной ях поверхностной дезинсекции,"

3., Проверка расгеодЗ в'семеноводческих посадках методами , указанными в п.1 на отсутствие латентной .инфекции ВГМ, удаление..;/.-зараженных растений. ..; ','-\V/(-'*' - • *'" ■'■ :

Бее указание йргеьы должны-использояаться;на фоне строгого: соблюдения всех известных' « рек0^ндовалныхгранее wep профилактики и подавления ЗТМ в культуре .тоыатаг дезин^юкцкя грунта,, инструментов я инвентаря, применения препаратов антивирусного действия; подкормок: микроэлементами"и др.*;,.,.„■.*■ - .'■ , . " \С':."

- 23 -

"о .УПГЛГ;:^'''.' п?"се1УГацук сл^дгтстз гяботи;

1. П.А., '.Бакаев С.Й. Получение секгш по.'.тдора свобод-к;х от чирус не" инфекции. - Доклады 7СХАДЭ79, гща.С51, с. 156-158.

2. Шжгля З.А., Йкйс С.::., ; Бакаев С .С?. Диагностика вируса табачной „юэа^ки в семенах томага и получение здорогах семян. -

71 г о! огу. ^ г йс. о'." гпо 9 * СстГепллэ иЬо Сг.ес1юа1ох,ил

3. !'л>*.аоп С,Сравнение эффективности различных методов диагностики зарачекноот:'. проростков и растения томата вирусом табачной мозаики. - Известил ТС.ХА. 1983, 4, 0.138-141.

4. Заыгдя З.А,, Бакаев С.'Л. Диагностика ингибированной инфекции вируса табачной тоэаики у томатов. - В кн.; Влияние вирусов на сбнез растея:Л. Тр.Енолого-почшнного института ДБЯЦ АН СССР, Вяадшюсток, 1963, о.71-77.

5. ¡1\щгдя З.А., :.'гжгеэ С.ц!. Способ обнаружения вируса табачной шзаики в семенах тоиата. Положительное решение от 17,07.84

о выдаче авторского свидетельства по заявке 3565553/30-15/041605/ от 17 марта 1983 г.

6. Ишгля З.А., !.!акаев С.П1., Актаа С. Эндогенное- анги б про ванне вируса табачноЯ мозадки при передаче его семенами томата и табака. - Тезисы докладов 71Е-го Всесоюзного совещания по вирусным болезням растений, Вильнюс, 1984, с.38-41.

а

' л.- if¿ сеч . ■.*'.■■-:■,■'-.".

Объем п и : : ' •>' Зак aj.JWC Ти раж i € С ' \

Тнпографня .Москоиекон с-х. академнн им^ К. А. Тимирязева ;• >у ' 127550, МоскваН-550.ТимнрязевСКАяул.',-НJ г ■.-,.