Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологические свойства микробов-ассоциантов, выделенных в Доме ребенка

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Биологические свойства микробов-ассоциантов, выделенных в Доме ребенка"

вОС($#1СКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ

г ? Гсэ

На правах рукописи

БИРЮКОВ Владимир Валентинович УДК (576.851+582.282.23) : 613.953.6

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА МИ&РОБОВ-АССОЦИАНТОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ В ДОМЕ РЕБЕНКА

03.00.07 — микробиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва — 1993

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Рязанского медицинского института имени академика II П. Павлова.

Научный руководитель —

заслуженный деятель науки РСФСР, доктор медицинских паук, профессор Р. Н. РЕБРОВА

Официальные оппоненты —

доктор медицинских наук, профессор С. А. ДРАТВИН

доктор медицинских наук, профессор В. М. ЛЕЩЕНКО

Ведущая организация —

Центральный Ордена Ленина институт усовершенствования врачей.

Защита состоится « » _1993 г. в «/^ » час.

на заседании специализированного совета К 053.22.10 в Российском университете дружбы народов по адресу: 117198 г. Москва, улица Миклухо-Маклая, дом 8.

С диссертацией можно ознакомится в научной библиотеке Российского университета дружбы народов по адресу: г. Москва, улица Миклухо-Маклая, дом 6,

Автореферат разослан « & » '993 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат биологических наук

И. II. ШАРОВА

Актуальность темы.а последние годы повсеместно отжючз'г1сл росч заболеваний, внзычаеь-ых условно-патогенными микроорганизьт-:.-.и ( Р.Н.1>;нцел,1990;.с..-..-.,1 : •: ).Наиболее подвержены этим инфекциям новорожденные и дети младшего ; озраста С Л.А.Литяева, 19*?!;.. .. ; •• г.-:-.1 ■ " ).»{ногие виды условно-патогенных микробов 1Ж<1) являются представителями нормальной микрофлоры,но в организме детей с ослабленной иммунной защитой,могут стать возбудителями инфекционных заболеваний ( С.а.й{зименко,1951;

1 • последние годы появляются публикации о вы-

делении микробных ассоциаций и при заболеваниях, вызываемых ЖМ С Р.Н.Ребров1,19ь9;А.З.Смолянская с соавт. ,1990; М.111?п, 1590 ). . •

Известно,что микробн-ассоцианты могут оказывать взаимное влияние на основные биологические свойства: патогенность и чув-:твиг^льность к антимикробным препаратам ( Р.Н.Реброва,19Ь9; ^.Д.11сропаева,19Ь9;Ь.Ф.0ркинД^91 ).

Бесконтрольное применение антибиотиков при лечении .дно-их заболеваний у детей создает условия для формирования госпитальных штаммов,обладающих «факторами патогенности.полирезис-гентностья к дезинфицирующим веществам-,к антимикробным препаратам и к физическим факторам внешней среды.Появлению госпиталь-ют штампов способствует длительное пребывание больных,со анионной иммунной защитой,в замкнутом пространстве палат ( У.Л. Лившиц с соавт.,1992 >.

ь.цо.мах ребенка имеются все условия для формирования оспитальных штампов : длительнее пребывание детей в замкнутых □¡лечениях С группах ),постоянные контакты друг с другом,пер-оналок.с предметами ухода,игрушка/ли и мебелью,снижание иммун-ой защиты,обусловленное отягощенной наследственностью,отсут-ТЕием естественного вскармливания,массиной антибиотикотера-ией,а также постоянным использованием одних ч тех же дезин-ицирушшх растворов при обработке помещений,в которых нахо-ятся дети. -

а доступной нам литераторе не удалось найти публикаций о аспространении и взаимном влиянии на основные биологические ечйства ЛЫ,их ассоциаций и госпитальных штаммов на прдметах сода,стенах помещений домов ребенка.

Исходя га вышеизложенного,мы поставили цель - провести ).-иплексное изучение биологических свойств и взаимного влия-1я условно-патогенных микробов-ассоциантов,выделенных с прзд-:тов помещений, от детей и персонала дома ребенка.

£) ходе исследования решались следующие задачи :

1. Определить распространение.видовой состав условно-патогенных микроорганизмов.

2. Йьшвить микробные ассоциации на предметах ухода, предметах, связанных с питанием, на стенах и мебели помещений младшей, старшей групп и изолятора, а также на слизистых оболочках зева детей, персонала и кожи кистей рук персонала.

3. Поучить основные биологические свойства мичробов в составе разных типов ассоциаций :

- факторы патогекности

- устойчивость к антимикробным, дезинфицирующим препаратам

- резистентность к ультрафиолетовым лучам и высушиванию.

4. Разработать практические рекомендации по выявлению микробов -ассоцнантоз и госпитальных штаммов условно-патогенных микробов в доке ребенка.

Научная новизна.Ьпервые проведено комплексное изучение микробных ассоциаций в смывах с поверхности предметов,стен помещений, в материале со слизистых оболочек зева детей и персонала, коли«. кистой рук персонала в доме ребенка.

Показано,что золотистые и эпидермальные стафилококки,выделенные с предметов помещений,способствуют проявлению факторов патогенност;1 1рибов кандида альбиканс,повышают'резистентность к противогрибковым и дезинфицирующим препаратам.ультра-фнолетоЕьм лучаа.Грибы рода кандида увеличивает частоту проявления факторов патогенности стафилококков и энтеробактери.., снижают их чувствительность к антибиотикам,дезинфицируюциы препаратам и ультрафиолетовым лучам.Изменения биологических свойств штаммов зависели от состава микробных ассоциаций к не зависели от источника выделения УПИ.

Разработаны новые критерии оценки адгезивной активности грибов кандида альбиканс,выделенных с предаетев,стен помещений дома ребенка.

Доказано,что штаммы условно-патогенных микробов с большим числом факторов патогенности,мнояеетвенной резистентностью к противомикробнш, дезинфицирующим препаратам и более устойчивые к ультрафиолетовым лучач,чаще высевались из ассоциаций с участием грибов рода кандида.

Предлсзлн способ выявления госпитальных штаммов грибОЕ рода кандида,золотистых и эпидармальных стафилококков,некоторы:

дов энтеробактерий ( в условиях дома ребенка ).

Практическая ценность. Работа проводилась в состЕетстсии планом научно-исследовательской работы института по целевой ограмме С.14 - 01В60П0360 "Разработка методоэ диагностики лечения кандидозной инфекции при заболеваниях негрибкозой иологии",утвержденной ¿О ИЖР. Тема : "Биологические своПст-микробов-ассоци'антов,выделенных в доме ребенка" ( номер срегистрации 01920005031 ).

На основе проведенных совместно с педиатрами исследований зоаботаны методические рекомендации "Выявление микробных ас-циаций и госпитальных штаммов в условиях организованных дет-их коллективов".Рекомендации доложены на трех конференциях я врачей педиатров йладимнровехой,.Московской,¿Мурманской,Ря-нской,Тульской,Читинской областей,для врачей-бактериологов занскай области,для педиатров областного дома ребенка № 2 и едрены в учебный процесс кафедры педиатрии факультета усопернет во ванил врачей Рязанского медицинского института имени адемика И.П.Павлова.¿Аэтодические рекомендации внедрены в об-зтном доме ребенка № 2, в бактериологической лаборатории об-гтного центра гос.сан.надзора г.Рязани, в диагностической 4Трализованной бактериологической лаборатории г.Рязани.

Апробация работы. Материалы диссертации опубликованы з 0 5отах.Результаты исследований доложены на республиканской •¡ференции "Разработка и производство препаратов медицинской ^технологии"(г..Махачкала,1990),на II международном микологи-:кон симпозиуме "¡¿икозы и иммунодефицита"(г.Ленинград,1591), XI научней конференции "Факторы клеточного и гуморального «унитета при различных физиологических и патологических сос-шиях"(г.Челябинск,1992).

Положения, выносимые на эолиту : Предметы,стены помещений дома ребенка,дети и персонал кон-таминированы в основном микробами-ассоциантами.Наиболее •.тыми типами ассоциаций микробов являются е^.рианты *. ста^.и-гокки + грибы рода кандида + знтеробактерии и стафилококки + •рибы рода кандида.

Микробы-ассоцианты,находясь на предметах и стенах помещенлй, на слизистых оболочках зева детей,персонала,на ко:?.е кистей рук персонала дома ребенка,взаимно влияют на о'снопнке биологические свойства.Грибы рода кандида способствуют преявле-

нию факторов патогенкости золотистых,зпидермальных стафилококков и энтеробактерийувеличивают резистентность их к антибиотикам .дезинфицирующим растворам и ультрафиолетово«}' облучению.Стафилококки активируют факторы патогенкости грибов кандида альбиканс,повышают устойчивость к противогрибковым, дезинфицирующим препаратам,ультрафиолетовым лучам.

3. Разработанный способ выделения микробов-ассоциантов при комплексном обследовании предметев,стен помещений,детей, персонала эффективен и экономичен*

4. Предложены сигнальные тесты для выделения в условиях дома ребенка госпитальных штаммов кандида альбиканс,стафилококков, некоторых видов энтеробактерий из микробных ассоциаций; тесты включают - определение 3-4 факторов патог^нности, резистентности к Ь - 6 антибиотикам, 3 противогрибковом и

Э - 4 дезинфицирующим препаратам,устойчивость к ультрафиолетовым лучам.

Струпктура и объем работы..Диссертация включает введение, обзор литературы, 5 глав собственных исследований,выводы,практические рекомендации,список литературы,приложение.материал изложен на 14S страницах машинописного текета,содержит 21 таблиц и ¿0 рисунков.Список литературы включает 326 источников : 213 отечественных и 113 иностранных.

ОСКОЬНОЕ CQÄERLvME РАБОТЫ

Материалы и методы. Материалами для исследования бьшн 195 смывов с поверхностей предметов,стен помещений, 25 смывов с кожи кистей рук персонала и 101 биосубстрат со слизистых оболочек зева детей и персонала.Всего взято 321 проба исследуе- . мого материала,которые засевались одновременно на 4 - В раэ-. личных питательных сред,штаммы условно-патогенных микроорганизмов идентифицировались по II - 22 признакам.йвделено 3955 итам-• ыов ¿ГШ,относящихся к V родам II видам бактерий и V видам грибов рода кандида, в том числе : 627 штаммов s.cureuc, 903 -

5.epideraidic, 339 - E.coli, 131 - C.frenndii, 1С- C.diversus, 35 - ü.cloacae, 137 - Е.асс1отегийз, 17 - ü.serocenes, 3 - ii.e.l-vei, б - S.rubidese, 9 - P.vulgaris, 49 - ?.гп1гаЪИ1с, 956 - Candida albicans, "f95 - Candida kntsei, 187 - Candida £uilliernondii 133 - Candida tropicalis, 39 - Candida pneudotropicalic, 15 - Candida parapsilosib, 9 - Candida stellatoidea. • •

. 4 1 ,

единичних случает выделялась

Изучены биологические свойства у 1534 штаммов грибов рода вндада, 1530 - стафилококков и Ь91 - знтеробактер/Й.Проведено 2а99 исследований.

Для первичного посева применялись питательные среда : Зн-о,Ллоскирева,желточно-солевой агар,кандида-агар,а таюке среды акопления - 4 % сахарный бульон, 6,5 % солевой бульон, 10 )~> елчный бульон, питательный бульон.

Для выделения условно-патогенных микроорганизмов исполь-эваны методики количественного посева материала,биологические войства микробов изучали с помощью двух разных репликатореа. г,ентификация стафилококков осуществлялась в соответствии с риказами £ 535 от 22.04.b5r., & 691 от 2Ь.12.69г., методи-эскими рекомендациями А.К.Акатова и соавт.(1983),усло?но-па-эгенных знтеробактерий - с помощью пластин биохимических ^фференцирующих энтеробактерии ( ПЦЦЭ ) производства Горьковато НИИ эпидемиологии и микробиологии г. Н.Новгорода и по зтодике С.А.Дратвина с соавт.(I9b3),условно-патогенных грибов зда кандида - по методике П.Н.Каикина и coaET.(IS&3), З.О.Ка-¡евл и соавт.(I9&4),Р.Н.РебровоЙ(19Ь9).Чувствительность бак-;рий к антибиотикам определялась по методикам Е.А.ВедьминоЯ соавт. (1979) н С.М.Навашина и. соавт. (19Ь2).лнтилизоцимн.1я я ¡зоцкмная актизность услошо-патогенных микробов изучалась по ■тодикач О.й.Бухарина и соавт.(1984) в нашей модификации.Био-шировалив грибов кандида альбнканс выполнялось по методичке лсл ^ Abbott ( 1 rvj ) во всесоюзном микологическом

;нтр'з ( I99l ) нам;- совместно с Т.С.Богомоловой и на кефедре [крсб'.юлогля Рязанского медицинского института имен;! ака.цеми-! И.П.Павлова с эталонными н:та-.«мами,любезно предоставленными С.Богомоловой.Устойчивость микробов к дезинфицирующим растрам определяли по методике А.А.Адарчг.нко и <"оавт.(19Ь9), к ьтрафиолетопым лучам по методике Я.Э.Нейатадта (1955).

Полученные результаты подвергались статистической обра-тке ( И.П.Ажарин,А.А.]}оробьев,1962;А.М.Мерков,Л.Ь;.Поляков, 74 ) с применением средств вычислительной техники - IBM /АТ, "Искра" - 1030 - М, электронного микрокалькулятора лектроника'' Ж -51.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛадоаАЛИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЙ ■

I. Распространенность условно-патогенных бактерий и грибов рода кандида у детей.персонала и ка предметах окружающей среды е доме ребенка.

Комплексное бамериологическое я микологическое исследование .¿21 смыва в доме ребенка показало высокий уровень микробной обсемененности дома ребенка - 76,3%. Чаще контаминирован УПЫ изолятор - 87,3 % и младшая группа - '77,6 %,по сравнении со старшей группой - 64,7 %. И изоляторе и старлей группе с предмете в, стен помещений ЛШ выделялись значительно чаще,чем от детей и персонала ( рис.1).В младшей группе,где персонал постоянно контактирует и с детьми,и с разлигааяш предметами ухода,уровень контаминации предметов,детей «а персонала практически одинаков ( Р>0,05 ).

%

>оо ••

30 •■ 80 • 70 -¡60 до 4С ■ 30 • е.0 " 10 •

Изолятор. Дладеая группа Старшая группа

Рис. I Частота шсеваемости ЛШ в изоляторе,иладаей и старшей " группах - с предметов окружающей среды, от детей и персонала ( в % ). гл. Предметы о кружащей среды - Дета

- Персонал

Условно^патогенные микробы выделенные в изоляторе и мадией- групйа,находились чаще в ассоциациях,чем в монокультурах -- 51,9 ± 4,9% , 52,9 + 4,6 % и 33,3 + 4,7 % , 23,9 + 3,9 % соответственно < Р< 0,001 ); в старшей группе ассоциации ЛШ

95,3 4-

Щ

1т66'7

выделялись практически с такой же частотой,«то и монокультуры ( 34,3 + 4,7 % а 33,3 + 4,6 % ; Р > 0,35 ), но реже.,чем в изоляторе и младшей группе ( Р<0,01 ).Наиболее обсемененными ЛЫ я их ассоциациями были предметы в и-оляторе - пеленальные стоды,посуда,кухонные столы,игрушки ; в кяадаей группе - манежи »пеленальные столы,мебель,ходунки,обеденные стсшы,умывальники ; в старшей группе — кухонные и обеденные столы,умывальники, игрушки.

По родовому составу ШЫ распределены не две группы ассоциаций. Чаще высевались мнко-Йаятериадьные ассоциации ( бактерии + грибы рода кандида ) - ЭЬ,2 + 2,7 %■> чем бактериальные С без участия грибов ) - 0,7 + I// % ( рис.2 ).

•а

50

да -

зо ■■ 20 • я ••

38,5 „

3,7

И

Л

щч

13

21,6

V

А

12,7

[7

Изолятор

¡¿ладная группа

Старшая группа

Всего во всех помещениях

Рис. 2 Частота выееваемости мико-бактериалыаас я бактериальных ассоциаций с предметов окружающей среды, от детей и персонала ( своднъ .> данные ; в % ).

| |- вдко-бактериальные ассоггации

\//\ - бактериальные ассоциации

¿гЗико-бактериальнке ассоциации чаще высевались,чем бактериальные в ис )Ляторе С с предметов и от детей ) и в младаей группе ( с предметов,от детей и персонала ).3 старшей группе ,мико-бактериальиые и бактериальные ассоциации Еысевялись практически одинаково С Р ?0,0Ь }.

Ассоциации микробов- состояли из 2 - 3 родов «2-18 ий-

дов условно-патогенных микробов.в основном наблюдались следующие варианты микробных ассоциаций : ■ •

1) стафилококки + грибы рода кандида + энтеробактерии (СГЬ);

2) стафилококки + гриОы рода кандида (СГ);

3) грибы рода кандида + энтеробактерии

4) стафилококки + энтеробактерии 1СЭ).

Сравнение уровней высеваемости разных вариантов ассоциаций показало,что в помещениях чаще выделлвтея микробные ассоциации СТО ( 22,5 ± 2,7 % ) и СГ ( 20,5 ± 2,6 % ), реяе СЭ ( 12,7 + 2,1 2,1 %) к еще реже ассоциации П> ( 7,1 + 1,7 % ).В помещениях изолятора,младшей группы е смывах с предметов и от детей преобладали ассоциации стафилококков и грибов рода кандида е сочетании с знтеробактериями или без ню;,реке выделялись монокультуры ЛЫ и еще реже бактериальные ассоциации микробов.В старшей группе - монокультур-л высевались чаще,чем нико-бактериальные и бактериальные ассоциации ¿Ш1.

Из 16 екдоб УПМ чаще высевались эпидермапьные к золотистые стафилококки ( 61,1 50, грибы кандида альбиканс ( 47,5 %), кандида крузеи ( 12,7 %), эхерихии коли ( 25,0 % },знтеробак-тер гггломеранс С II,В % ).

2. Биологические свойства грибов рода кандида,стафилококков и онтеробактеря.'., выделенных из микробных ассоциаций в доме ребенка.

Изучение основных биологических свойств взделеюых ассо-циактов - yiliü осуществлено в нескольких направлениях : опре,.г-лялись факторы патогенности,резистентность к прэтивомикробньи . и дезинфицирующим препаратам,устойчивое.ь к ультрафиолетовым лучам,высушиванию.Установлено,что ыикробы-ассоцланты,находясь на предметах,стенах помещений,ка слизистых оболочках зеьа де- ■ Teil и персонала,на коке кистей рук персонала дома ребенка,взаимно влияют на основные свойства.Грибы рода кандида,высекнныэ из ассоциаций со стафилококками с участием энтеробактерий или без них,чаща проявляли фосфзлипаэу,кислую яротеазу и антилизоциы-нув активность,снижали чувствительность к амфотерицину Б,нистатину,натриевой соли леворина, к хлорной извести, хлорцину, хлорамину В.хлоргексидину.Изучение адгезивной активности кандида альбиканс показало,что грибы б присутствии стафилококков позывают адгезию в 1,8 - 2,3 раза,а в сочетании с энтеробакте-ридкк скипают ее в 1,0 - 1,3 раза.Разработанные критерии адге-

b ■ ■

энвной активности позволили установить,что канг.нда альбикан с высокой адгезивной активностью ( 10,2 - 11,7 ) высевались в изоляторе с предметов,стен в 3,Ь + 3,Ь от детей - 42,2 + + 12,3 % и от персонала - 50,С + 9,1 % ; э младшей группе -- с предметов - 27,3 ± 9,7 %, от детей - 54,5 ♦ 15,7 % ; в старшей группе грибы с такой адгезивной активностью не выделялись.Предложенные нами критерии адгеэигной активности каноня? альбиканс,выделенных с предметоЕ.стен, от детей и персонала, позволяют определить контингент риска по кандиданосительству к.кандидозу у детей,персонала дома/ребенка.

У эпидермадьных стафилококков в присутствии грибов рсда канднда,чаче обнаруживалась лецнтнназа,ДНК-аза,гегэлит/ческая, низоцимная.антилизоцимная активность,повыалась устойчивость к гентамицкну, карб еницилл ину, стре птомицкку, аулкцкллкну, a un.и о кс-натрия, эритромицину, левомицетину, бенэилпеьлцилли; 1у,докс;:цикл;!-^у,к дезтфщиррощим pací ворам - хлорной извести .хлорцину, морамину й.хлоргексидину биглюконату;у золотистых стафилококков дополнительно к перечисленным сзойстеям чал;е ылтнля-. юсь плазмакоагулаза.Аналогичным влиянием обладает rp:;fiu рода сандида я в отношении энтеро^актесий.Знтеробактерии.Еэделекние !3 ассоциаций с участием грибйв рода :;ап^ида,с прэдаетов,стен 1с:.!еп;ений,со слизистых оболочек зева детеК,персонала.с vos:; истей рук персонала,чаде,чем энтеробактерин з иенокультурзх им з ассоциациях со стафилококкам! пл-елн гемсл:;тичйс>сую,ДНг[-•азнуэ,антулизоц!*лнуо ахтииносгь,усто.'.'-гав-чсгъ к ентаз/ицину, гарбекицихпкну, ампициллину,амтюлсу-на'рия,полил<ксин>- Л,к яорнсй из нести, хлорамину В.Более выра-тенг^е изменения биологических свойств условно-патогенных :д1ксо(;св-ассоциактоБ оточены з гладнеЯ груше и изоляторе.

Установлено,что изменения осноаиых свойстз микробов-ассонантов зависели от состава ассоциаций и не зависели от н^тсч-шка пыделения ыикробоз (-с поверхности предков,стен немецкий, от детей,от персонала ).

Совместно,с эпидемиологом Н.А.Казберюкои установлена сеязь езду забо-еваемостью детей инфекциями дыхательных путей и тгавнем микробной обсеуененносш услоЕНО-патог-гнсгаи микроба--п предметов,стеь помещений,детей,персонала в ыладзе« гр;-ппз изоляторе. • ' ••

3. Выявление пикробоо-ассоццактоа для гфогнозироглкия фор-

мирования госпитальных штаммов в условиях дома ребенка.

а ходе исследования обнаружены штаммы УПМ,им2вщив одновременно несколько факгоров патогенности.множественную устойчи-в-сть к противомикрсб!ад и дезинфицирующим препарата«,резистентность к ультрафиолетовый лучам и высушиванию.Обнаружено,чт такие оламу.ы кандида альбиканс,имеющие все из исследованных факторы патэгеннссти,резистентность ко всем трем проверяемым противогрибковым препаратам и 3 - 4 дезинфицирующим растворам, чаще выделялись из ассоциациГ со стафилококками с участием эн-теробихтерий или без них ( СПЭ, СГ; P<i 0,001 ).Количество зол< тистых и зпидерыадьных стафилококков,имевдих соответственно 6 - V и 4 - Ь факторов патогенности,резистентность к 9 - II ант» биотипам,к о -1 дезинфицирующим препаратам,оказалось наибольшим в ассоциации с грибами рода кандида С Cid, СГ; Р<0,001 ), Нан5о.гызее число энтеробактерий.о'бладаадих 3 г 5 факторами пан тохенности,устойчивостью к V - 9 антибиотикам и 3 - 4 деэюфн цирутьим веществам, высевалось из ассоциаций с грибами ( ГЭ; Р<0,001 ).Эти штаммы JrlU были более резне.ентны я воадеЯста|| УМ - 60 % стафилококков погибало только через Ö минут,около ЬО % грибов рода кандида - альбиканс теряли жизнеспособность после 6 минут облучения,а 53,V + 7,h % энтеробактерий - после 3,0 - 3,5 минут.Устойчивость к высушиванию в течении 32 дней ( cpoj: наб.:л:;ения ) была выявлена у 96,2 ¿5,5 % стафялокоякор Ы,5 ± Ь,Ь % .сандида альбиканс и у Ь8,4 ± &,0 % кишечной палочки.

Сопоставление г.г; 19-22 признакам характеристик микро-бов-асслциантов позволило ьыявить законоыэрное преобладание стаммов с наиболъаии числом факторов гатогенности и множественной устойчивостью к антимикробным препаратам в помещении_ изолятора и младшей группе. /

ß результате бактериологических и микологических иссле/(о ваний,систематически проводила в течении 15 месяцев по разрд ботанноГ: нами мэтодике,удалось ваделать с8 штаммов УШ в 'цго-, ляторе,младшей л старлей группах доли ребенка,имеющие все" мз изучаемых факторов патогенностк,высокую устойчивость к лечеб-ним антимикробным и дезинйицируюгдом препаратам.Совокупность:' этих свойств у выделенных штаммов,позволяет отнести их к-г^с-литальным,способным противостоять всем неблагоприятнаs факторам химического и биологического характера.Госпитальные штамму

^ида альбиканс С 13 из 14 ),золотистые и эпидермальные ста-юкоккн ( 16 из IB ) были выделены а младшей группе и изсля--js с предметов,стен и со слизистых оболочек зева детей кз юциаций : стафилококки + грибы рода кандида + этеробакте-1 и стафилококки + грибы рода кандида. Госпитг-льные штампы ки-шой палочки обнаружены в смывах с предметов изолятора ( I LMM ) и на слизистых оболочках зева детей младшей группа ( i шма ); I штамм энтеробактера клоацс высеян из ассоциации -:тафилококкк + грибы рода кй.щида ♦ энтеробактерии.

Сопоставление характеристик выделенных в разные сроки 14 1Ш0В кандида альбиканс ( по II признакам ), Ib ттаммоь золо-гтых и злидермальньпс стафилококков К по 22 и ¿0 признакам соот-'ственно ),а также & штаммов кишечной палочки и по i9 призна-! ) показало полную их идентично ль.Это дает основание поладь,что прл повторных неследованиях высевались те же штаммы гробов,которые обнаругивались в смывах,дзятых ранге.Следе»а-1Ьно в доме ^ебенка были выделены Ь госпитальных птзи.с.:ов : щида альбиканс, золотистый стафилжокк, зпидерма^ьныЯ стгфи-:окк, этерихия ксди и знтеробактер клоаце.

выводы. 1. Установлена высокая нысеваеиость уело вно-пат.-генных гробов в доме ребенка - 76,6 %, 'лз них часто свделялись : jhylococcua aureus, Ctuphylococcus apldsrniiis - 61 iida albicena, С.слзе! и др.- - üacherichla coli,

»rotmeter ч^пЯопегзпз и Др. - 35,5;-.

2. При комплексном обследовании помечен«??,детей и персона-дома ребенка установлено,что наиболее контачинированы .но-патогенными микробами изолятор, - 87 г3 кладаая группа--7,8 %. УШ чаще взделялись б этих помещениях с предметов да,предметов, снязаншас с питанием,мебели и стен,а такл.е со зистых оболочек зева детей 3- Микробные ассоциации ( 47,9 % ) обнаруживались чъце, монокультуры ( 25,0 % } .тех -е еидов ЛМ. Наиболее п.°сто т ялись ассоциации, вклвчащие г-чбы рода кандида, стафилокок-зктеробактерии, несколько perte - грибы рода кандида в соче-ии со стафилококками и значительно реге - оактертаигьнме. ас-иации без грибов. "' '•

4. ¿'лкробы-ассоцнацтн, находясь'иа предметах я' стонах пи- ■

...... ' . . И;

«елений дома 'хзбенха, взаимно влияют на основные биологические сзоР.ггв*. Грис'ы рода кандида способствуют проявлению факторов патогенности золотистых, опидермальных стафилококков и энтеробактерий,повьшают ргзч-стентность их к антибиотикам, де -згмфицируищим раствсрам и ультрафиолетовому облучению. Стафилококки активируют факторы патогенности грибов кандида альби-кяне, псЕызат устойчивость к пр тивогрибковыы,дезинфицирующим препаратам, ультрз^иолетоеым лучам.

Изменен;:.! осногных биологических свойств условно-пато-ге-ных микробов ячвисели от состава микробоз - ассоциантов и не зависели от источника ьыделения микробов ( с поверхности, от аетзй, персонала ). Более аыгаяг:яы эти изменения у штаммов, Быделеннкх в млацщей группе и изоляторе.

6. Подложены кригер.*.и адгезивной активности кандида альбиканс, ь'/деле^чюс с предметов, стен помещений, позволяющие оценивать их патогенность. Обнаружение грибов с высокой ( 10,3 - 11,7 ) •.{ средней i 6,0 - iJ.c ) степень" адгезивной активности MixH.a считать фактэс?м риска по развитию канддданоситгльст-Fa и кандидозе у д-лте?. дома ребенка.

V. П;«дл05.ен оригинальный л экономичный способ выявления микробов - ассоциан-. )s с использованием минимального набора питательных сред ( Зндо, Плоскирева, желточно - солевого агара, к'1.ч ";И.т:г1 - агара ) и даух разных репликаторов для определения основных оиологических сеойгтв.

Ь. На пгечметах, стенах и со слизистых оболочек зева детей в изоляторе и млаакй группе дома ребенка обнаружены 5 гос-Ш' гальн:..х штаммов - г: ел did а albicans, Stcp-clo coccus eurcue, ; cpidor^J-dio, Zcchcric'jie coli, Hnxaro-actcr cloacae которые • еысеЕвгись в течеши lb месяцев ( срок наблюдения ). а млад-" шей группе от персонал« П'делены та кч птаммы - С.albicans, S.c.-jrcuc,C.epidcrrJ.dio, S.ooll, Е.cloacae. Госпиталь,

ныз штаммы чаще еыдолялмсь из мико - бактериальных ассоциаций.

9. Разработан способ выделения s дохе ребенка госпитальных станков канх-дда ьльблканс, стафилококков, некоторых видов энтеробактерий из микробн.-лх ассоциаций по сигнальным тестам, включающим определение 3-4 ¿акторов патогенности, резистентности к Ь - 6 антибиотикам, 3 противогрибковым и L - 4 дезинфицирующим препаратам," с учетом устойчивости к уль'трафиолето-'вым лучам. •

Список работ, опубликованных по теме дисс»М)Тации : 1. Некоторое асп'.чты использования кандида - агара в практических и научных исследованиях / Р.Н.Ребрэва, С.А.Кэп-тибенко, Л.Н.Усачева и др. // Разработка и производство препаратов медицинской биотехнологии : Тез.докл.кон*. С 29 - 30.0b.90 ).- ¡Махачкала, 1990.- 4..V.- С. 123 - 124. '¿. Грибу рода Candiäa у детей дома ребенка психоневрологического профиля / Р.Н.Реброва, В.И.Аэноплева, А.А.Климов, В.В.Бирюков // Микозы и иммунодефиците : Тез. докл. 11 мзждународ. симпоз.- Л., 1991.- С. 161. з. Адгезивнее свойства грибов рода кандида, выделенных от больных острыми кишечными инфекциями / К.А.Силин, В.В. Биркиов, В.И.Коноплева и др. // ¿¿.,1991.- II е.- Деп. в ЗЛИЛИ 26.06.91, * г/14 -1. Бирюков В. В. Распространение и биологические свойства стафилококков, выделенных из дома ребенка // М. ,1991.-- 1Ь е.- а п. в В,ШГй 09.07.91, S 2ьЭ6 - В 91. ). Ребрюва P.h., Бирюков B.ü. Микробы - ассоцианты у детей,' обслуживающего персонала и на окрулаюцих их объектах в доме ребенка // М., 1992.-. 13 е.- Деп. в ШЛЯИ 2И.02. 92,' .V 677 - d 92. !. Условно - пзтогенные энтеробактерин, вэделенные от д<ь-тей, персонала и с окружазщих их объектов в доме-ребенка / В.В.Бирюков, О.В.Евдокинова, О.А.Сьетова, Т.И.Карпова // 14., 1992.- 12 е.- Деп. в ВИНИТИ 2В.02.62, ■ ;; 67Ь - ь 92.

. Бироков В.З., Назберюк H.A., Светова O.A. О взаимосачзи уровня инфекционной заболеваемости с микробной обсеме-ненностью помещений, детей и персонала дома ребенка // М., 1992.- <-с.- Деп. в ЫШГИ 20.07.92, s- 2351 - И 92. . Сравнительные данные по неспецифической резистентности • детей дома ребенка и обсемененности микробами - ассо-циантами объектов окрукаюшей среды / Р.Н.Реброва, В.В. Бирюков, В.И.Коноплева, А.А.Климов // Факторы меточного и гуморального иммунитета 1.ри различных физиологических состояниях : Тез. докл. XI науч. конф.- Челябинск, 1992.- С. 92.