Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биохимические аспекты регуляции фетоплацентарной системы у женщин с гипофункцией яичников различного генеза

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимические аспекты регуляции фетоплацентарной системы у женщин с гипофункцией яичников различного генеза"

министерство здравоохранения и медицинской промышленности российской федерации

□ г е .ростовский медицинский институт

г! Ь ОД

? 3 ,у\

На правах рукописи

ДРУККЕР Нина Александровна

БИОХИМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕГУЛЯЦИИ ФЕТОПЛАЦЕНТАРНОЙ СИСТЕМЫ У ЖЕНЩИН С ГИПОФУНКЦИЕЙ ЯИЧНИКОВ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА

03.00.04 — биологическая химия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Ростов-на-Дону 1994

Работа выполнена в Ростовском научно-исследовательском институте акушерства и педиатрии Министерства здравоохранения и медицинской промышленности Российской Федерации

Научный консультант: доктор биологических наук,

профессор Погорелова Т. Н.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук.

старший научный сотрудник Микашинович Ь. И.

доктор биологических наук, профессор Дукаш А. и.

доктор медицинских наук, профессор Блуште'йн Л Я.

Ведущая организация: НИИ биологии Ростовского

госуниверситета

Защита состоится__1994 года в _часов

на заседании специализированного совета Д. 084.53.01.

Ростовского медицинского института

(344718. Ростов-на-Дону, пер. Нахичеванский, 29).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ростовского медицинского института.

Автореферат разослан " _ "__ 1994 г.

Ученый секретарь специализированного совета, доцент

Н. Я Корганог,

0Б8АЙ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблем* В настоящее время становится все более очевидным значение проблемы биохимии внутриутробного онтогенеза для охраны здоровья человека не только перинатальный, но и в последующие этапы жизни. Различные изменения, происходящие' в организме матери, вызывают соответствующие адаптивные реакции у плода, в значительной степени определяющиеся состоянием плаценты - органа, осуществляющего взаимосвязь между материнским и плодовым организмами. Обеспечивая гомеостаз развивающегося плода, плацента обладает целым комплексом специфических взаимодействий с отдельными дефинитивными органами и является необходимой составной частью системогенеза (Е И. Ди-рельников, 1980). Выполняя большое количество функций (трофическая, выделительная, защитная, эндокринная и др.), плацента имеет прямое отношение к развитию и дифференцировке практически всех- жизненно важных систем .плода, определяя.уровень адаптационных процессов каждой из них. Нарушение функций пла-' центы является одной из основных причин перинатальной заболеваемости и смертности.

По мнению Г.М.Савельевой и соавт. (1984),: Т.аПогореловой (1984). А К Никулиной (1985), М. В. Федоровой, Е. Е Калашниковой (1986), И. Е Ларичевой, С. А. Витушко (1990) плацентарная недостаточность является интегральным проявлением многих- перинатальных осложнений, обусловленных изменением характера эндок-ринно-обменной регуляции. ,Развитие плода, егр Способность приспосабливаться к воздействиям внешней и внутренней среды во многом зависят от полноценности плаценты, ее .обменных и гор-монпродуцирующих фуйкций.

Сохранение оптимального уровня и направленности обменных процессов.в плаценте обеспечивается, главным образом, благодаря согласованному действию гормонов. Нарушение гипоталамо-ги-пофизарно-овариальных взаимоотношений в организме человека приводит к снижению эндокринной функции плаценты (Р.Хип, А. Флинт, 1987)изменяя тем самым гормональную регуляцию в единой биологической системе мать-плацента-плод.

К числу патологических состояний, сопровождающихся гормональным -дисбалансом, относятся эндокринные формы женского

бесплодия, е лечении которых в последние годы достигнуты определенные успехи. Однако наступившая беременность может в этих чслучаях протекать на фоне значительных изменений в эндокринной регуляции, что приводит к различным ее осложнениям и нарушениям в развитии плода ( JL А. Ухолова и соавт. , 1986; R И. Кулаков и соавт., 1989; А. А. Афонир и сравт. , 1992).

Известно, что нарушение гормональной регуляции может (Зыть связано не только с уровнем-секреции соответствующих гормонов, но и с изменением процессов рецепции и содержанием внутриклеточных регуляторов метаболизма (П. Е. Сергеев и соавт., 1979; .]. Е. Anderson, 1984; Н. Е. Кучеренко и соавт. . 1986; Ы. А. Красильников, 1993). Кроме того, реализация гормонального эффекта в значительной степени зависит от структурно-функциональной полноценности клеточных мембран. В настоящее время показано, что нарушения, возникающие в любом звене рецепторного и эффекторного процессов гормонального воздействия,могут приводить к глубокой патологий (А.Хорст, 1982; В. Б. Розен, 1984). Однако указанные процессы в плавднте изучены' недостаточно. В то же время знание механизмов клеточной регуляции метаболизма плаценты при физиологической беременности и в условиях эндок-'ринной патологии открывает пути адекватного воздействия на них.

Выяснение влияния гормональной недостаточности на обменные процессы в фетоплацентарной'системе у беременных с эндокринной патологией, установление метаболических дефектов, приводящих к осложнениям беременности,, выявление нарушений в зф-фекторном звене эндокринной регуляции, позволят предложить патогенетически обоснованные методы диагностики и прогнозирования осложнений со стороны- плода, откроют новые пути перинатальной охраны плода.

Цель ксс-вэдозаиия. Целью работы явилось изучение компонентов внутриклеточной регуляции и состояния плазматических мембран плаценты женщин с эндокринным бесплодием в анамнезе. Выяснение молекулярных механизмов формирования фетоплацентарной недостаточности npi: эндокринной патологии.

-Вздачм мсслздсзамка. Для. достижения указанной цели были поставлены следующие задачи.

1. Изучит;- я сопоставить динамику фосфолииидно: о состава, активности фосфолипазы А-2, жирнокислотногр состава фосфодшш-

дов плазматических мембран плаценты женщин, леченных по поводу бесплодия, обусловленного различными формами.гипофункции яичников.

2. Охарактеризовать особенности белкового- компонента мембран плаценты женщин с гипофункцией яичников различного гекеза.

3. Изучить динамику углеводных компонентов .и. активности нейраминидазы плазматических мембран плаценты женщин с гипофункцией яичникоз различного генеза.

4. Определить содержание циклических нуклеотидоз, активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы в плаценте лекции с гипофункцией яичников различного генеза.

5. Оценить уровень простагландиноз, рецепторов зстрадкола и прогестерона в плаценте женщин с гипофункцией яичников различного генеза.

6. Изучить содержание нуклеотидоз, пуринозЫх оснований и активность ферментов их обмена в плаценте аенщин с гипофункцией яичников различного генеза.

7. Разработать объективные критерии оценки состояния плода и прогнозирования- состояния новороддененого.

Иа*гчиаа яаяхзхв. Впервые дана биохимическая характеристика плазматических мембран плаценты яеншин в условиях нарушенной эндокринной регуляции. Шлучены новые данные о динамике плацентарных циклических яуклеотидов и простагландиков з зависимости от формирования гипофункции яичкикоз. Прослеяены особенности рецепции стероидных гормонов з плаценте.лентяи, ' страдающих бесплодием эндокринного гекеза. Установлены отличия ' в иуклеотидноы и пуриновом обменах плаценты, развивающейся на фоне гормонального дисбаланса. Впервые получены материалы, позволявшие понять биохимические механизмы развития фгтопйа-цевтариой недостаточности в условиях эндокринной патологии.

' Зеота'ягсэскгя и горзетакесгаа гкачкмсеть райсзы Проведенные исследования углубляют представление о регуляторных «еха-яивнах клеточного -«теболизна 2 плэдекте зянгош с физиологической беременностью и при эндокринной патология.

Полученные данные обосновывают теоретические предпосылки к проведению профилактики и тёрапии плацентарной недостаточности и пс."1 волях?? оценить эффективность ее лечения. Предложим новые методы диагностики состояния плода :: прогнозирования состояния новорожденного.

" - 6 -

Материалы диссертации используются в лекционных курсах по перинатальной охране. плода на. факультете усовершенствования врачей РГМИ.

В результате проведенной работы разработаны "Способ диагностики энцефалопатии плода " (а.с. N 1476381)', "Способ диагностики пороков развития плода" (а. е. . N 1511691), "Способ прогнозирования гипотиреоза у новорожденных" (а.с. N 1504600), "Способ диагностики дискоординации родовой деятельности" (а. с. N 16483-16), "Способ отбора женщин с эндокринной патологией для индукции овуляциии" (а. с. N 1697750), "Способ прогнозирования антенатальной гибели плода у беременных" (а.с. N 1822978), "Способ дифференциальной диагностики анте- и интранатального церебрального повреждения у новорожденных" (а,с. N 1783443), "Способ диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек" (заявка N 4936524/14, решение о выдаче патента от 27.05.92 г).

Указанные способы используются в отделении патологии беременных и родильном отделении .РНИИАП.

Апробация работ Основные Положения работы доложены на 5 Всесоюзном биохимическом съезде (г.Киев, 1986), на 4 симпозиуме по гипербарической оксигенации (г.Москва, -1989). Материалы работы были представлены на 15 Всесоюзном .съезде акушеров-гинекологов (г. Москва, 1989), на научно-практических конференциях акушеров-гинекологов и педиатров (г. Рига, . 1986; г. Душанбе, 1988), на Всесоюзной конференции "Современные вопросы репродукции", (г.Тбилиси, 1988.)

ГЬ теме диссертации опубликованы 21 работа, получено 7 авторских свидетельств и одно, решение о выдаче патента.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 205 страницах машинописного текста и состоит' из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, ' обсуждения результатов, выводов и библиографического указателя, включаю-щэго 146 отечественных и 136 зарубежных источников. Работа иллюстрирована '20 рисунками и 23 таблицами.

■ - ? -

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1 .

Для решения поставленных задач было обследовано 135 беременных в возрасте 21-33 лет, страдавших бесплодием в течение 2-6 лет. В качестве контроля использованы плаценть!-соматически . здоровых женщин (30), полученные после нормальных своевременных родов'(1 группа). В зависимости от причины бесплодия женщины были разделены на три группы. .Беременные с ановуляцией в анамнезе составили 2 группу,, с неполноценной лхтгеиновой фазой • (НЛФ) менструального цикла - 3 группу, женщины с синдромом по-ликистозных яичников (ПКЯ) -. 4 группу.

Изучение особенностей течения беременности и родов у женщин' ранее страдавших бесплодием, связанным с нарушениями ней-роэндокринных механизмов овуляции, позволило отметить, .что у них имел место высокий процент осложнений течения беременности, родового акта и высокая частота оперативного родоразре-пения. При этом обращает на себя внимание тот факт, чтр у жен-Шя 4 группы чаще встречалась наиболее тяжелая форма патологии беременности, а именно, угроза ее прерывания, самая высокая частота наиболее" опасных осложнений родового акта (первичная и вторичная слабость родовой деятельности), угрожающая внутриутробная асфиксия плода).

Больше число осложнений беременности и родов в 4 группе женщин связано с явлениями фетоплацентарной недостаточности, причиной которой явилась, первичная гипофункция яичников, имевшая место, по-видимому, вследствие неполноценной гормональной коррекции до наступления беременности. •. ' /,

Среди основных причин перинатальной смертности необходимо выделить: врожденные уродства, несовместимые с.жизнью, в том числе эндокринной и сердечно-сосудистой систем.'

Всём женщинам в течение беременности были' проведены ультразвуковая морфометрия плода и плаценты, ' мониторное наблюдение за состоянием плода.* Для суждения о состоянии эндокринных желез матери и эндокринной функции фетоплацентарного комплекса определяли в сыворотке кровй содержание эстрадиола, эстриола, прогестерона, альфа-фетопротеина ишДтгафлуоресцентными методами с помощью наборов фирмы "АтэгйЬат" (Англия) и установки "АтегШе" (Англия), плацентарного лактогена иммунофлуо-'

' - 8 -

ресцентными методами, с помощью наборов "DELFIA", (LKB, Швеция) и анализатора "Arkus" (LKB, Швеция). :

Гормональный статус женщин с индуцированной беременностью, характеризовался низким уровнем эстрадиола, прогестерона и кортизала на фоне незначительны^ отклонений в'содержании эст-риола.

В плацентах женщин исследовали нуклеотидный.состав (АТФ, АДФ, AMJv цАМФ, ЦГЩ, активность аденин-, аденозин-,. гуанин-дезаминаз, 5'-нуклеотидазы, аденилатциклазы и фосфодиэстеразы, содержание рецепторов эстрадиола и прогестерона, простагланди-нов F-2¿, и Е-1. В мембранах плаценты изучено.количество холестерина, фосфолипидов и их фракционный состав, белков и белковых фракций, -углеводных компонентов гликопротеинов. Жирно-"кислотный с о отав фосфолипидов, активность н^йраминидазы .и фосфолипазы, А- 2.

В цеМх диагностики состояния внутриутробного плода в околоплодных водах, полученных путем аыниоцёнтеза, в 35-36 недель

. » . беременности проведено определение уровня альфа-фетопротеина,

гомокарнозина. '

Содержание адениннуклеотидов оценивали с-помощью UY-test •наборов "Boehringer Mannheim GmbH Diagnostica" в безбелковых перхлоратных центрифугатах плаценты. по изменению оптической " плотности растворов при окислении.НАДЕ

Содержание циклических нуклёотидов (цАШ>, цГМФ) в безбел: ковых лиофилизированних • экстрактах плаценты определяли радиоиммунологическим методом с помощью коммерческих наборов (Чехословакия). Уровень радиоактивности измеряли с помощью гаы-ма-счетчика "Наркотест".

Активность аден1Ш-, аденозин-, гуаниндезаминаа (КФ 3.5. 4.2, КФ 3. 5/4. 4, КФЗ. 5. 4.3, соответственно) определяли по мё-тоду Caraway, описанному В. В. Нечаевым (1970).. В качестве субстрата использовали аденин, аденозин и гуанин фирмы "Serva". (Германия).

Активность аденилатциклазы (АТФ-пирофосфонатлиаза циклиру-' кидая, КФ 4.6. Í.1) определяли по методу, описанному В. А. Ткачу-ком и Г. Н. Балдёнковым (1978). Для приготовления субстратных дмесей использовали ЭДТА,. АТФ, креатинфосфат и креатинфосфоки-назу фирмы "Reanal" (Венгрия), ГТФ фирмы "Serva" (Германия). Измерение активности фосфодиэстеразы (¡Í1' 3.1.4.1) проводи-

■ ; - -'9 -

ли по методу, описанному Е А. Ткачукои с соавтс (1978). Для приготовления субстратной смеси иснольаовали циклический 3':5'-AMD (Ä-3:5-MP, cyeltschj фирмы "ВоеhrInger Mannheim GtnbH" (Германия) и циклический' 8- (Н-3) -." 3': 5' - АШ фирмы "Amersham" (Англия).

Содержание рецепторов эстрадиола и прогестерона определяли . в супернатантах, полученных после центрифугирования 10 7. гомо-генатов плаценты при 20 ООО g (t - 0-4 С), твердофазным имму1 , ноферме'нтным методом с помощью наборов реактивов "ABBOTT ER-EIA Monoclonal" и "ABBOTT PgR-EIA Monoclonal" (США). Ин-, /генсивност'ь окрашенных о-фенилендиамином продуктов пероксидаз-/ ной реакции измеряли при . 492 нм на спектрофотометре фирмы / "АВВОТГ* (США).

Щхютагландины F-^и Е-1 выделяли из гомогенатов ворсистого- хориона после последовательной двухкратной сЬиртово-хлоро-фориенной экстракции с помощью хроматографии на колонках с кремниевой кислотой ("Sigma", США) по методу В. П.Зыковой и соавт. (1978). Количественное определение простатланд«нов F-& »£-1 осуществляли радиоиммуЬологическим методом с помощью наборов реактивов "Prostaglandin Е-1, F-St(H-3) RIA KIT". (США) _на гамма-анализаторе "Наркотест".

. Плазматические мембраны плаценты выделяли по методу (N. С. Smith, М. a Brush, 1978). Данный метод позволяет получить ^мембраны микроворсин сшодгГиотрофобласта плаценты, являщихся наиболее активными элементами в транспортных процессах между организмами матери ,и плода.

Степень чистоты препарата проверяли по определению активности. маркерных ферментов: ,5'-нуклеохидааы (Кф/ 3.1.3.5) и Na, К-АТФазы (КФ 3.6.1.3). Активность 5г-нуклеотидазы определяли' ho приросту неорганического фосфора (Э. Щеклик, 1966).. Активность Na,К- АТФазы оценивали по разности между общей активностью АТФаэ и активностью Ca.Mg-АТФазы (Р. IL-Глебов и соавт., 1974). Активность данных ферментов во фракции мембран синцити-отрофобласта превышала" такЬвую в гомогенате плаценты в 10-15 раз. •■ ' .. ■"'

Экстракцию мембранных лйпидов проводили по Фолчу (J.Folch et al. ,1957). Содержание холестерина определяли, используя коммерческие"наборы химических реактивов (НПО "Биолар"), уровень общих фосфолипидов - унифицированным методом по содержа-

,-Л- ■ - ío -

нию липидного фосфора (В. Г. Колб, Е С. Камышников, 1982). .

Для разделения фосфолипидов проводили одномерную хроматографию в системе хлороформ-метанол-вода в соотношении 65:25: 4 на пластинах с закрепленным, слоем сил'икагеля (Е Г. Новицкая, ' 1972). Фосфолипиды идентифицировали с помощью стандартных сви- : детелей ("Sigma", США),- а также сопоставляя полученные для отдельных фракций Rf с известными из литературы (Э. Шгаль,1965; KL А. Барышков, 1966; П. О. Бадальян. и соавт. ,1984). Для количественной оценки хроматограмм . использовали денситометрическую установку "Camag TLC Scanner II" (Швейцария) с интегратором фирмы "Hewlett Packard" (США). ■ '

Жирнокислотный состав фосфолипидов изучали с помощью газожидкостной хроматографии на хроматографах "Цвет-4", "Цвет-5", "Хром-3" и "/крои-4" с плазменно-ионизационным детектором, используя качестве .неподвижной средне-полярной фазы

"JIaK-2R-446'V Идентификацию пиков осуществляли с помощью стандартных смесей (GLC mixture, , "Мбгк",' Германия) по времени удержания в сравнении со свидетелями и данными литературы (кКейтс, 1975). ' '

Активность фосфолипазы А-2 (КФ 3.1.1.4) определяли методом •Левиса с соавт. ( G. Р. Lewis et al: , 1979),. используя в качестве субстрата фосфатидилхолин ("Signya", США). Об активности фермента судили по приросту свободных жирных кислот, которые определяли методом О. Д. Кушмановой и Г. М. Ивченко (1983).

Уровень белка в мембранах плаценты определяли по методу Лоури с соавт. (0. Н. Lowry et al., 1951).

Фракционирование белков плацентарных мембран осуществляли методом плоского электрофореза в 10 % полиакриламидном геле в приборе "Хийу Калур", разработанном в Институте экспериментальной биологии АН Эстонии, с использованием реактивов фирмы "Reanal" (Венгрия) в системе с . додецилсульфатом натрия (К. Okamura et al., 1981). Для .количественной оценки.,электрофо-реграмм использовали денситометрическую установку "Camag TLC Scanner II" (Швейцария) с интегратором фирмы "Hewlett Packard" (США). При определении молекулярных масс белков в качестве маркеров использовали следующие коммерческие препараты: ката-лаза (мол. м. 230 ООО "Koch-Light", Англия), гамма-глобулин (мол. м. 160 ООО, отечественный), бычий сывороточный альбумин ( мол.' м. 68 000, "Koch-Light"-, Англия), .овальбумин (мол. м.

-11 - . , 45 ООО, "Kferck", Германия), ,рибонуклеаза (мол. м. 13 700,-"Reanal"; Венгрия) и щггохром С (мол. м, 12 500,. "Carbiochem", США). '

Углеводные компоненты гликопротеинов мембран плаценты оп-^ ределяли в сухих остатках мембран после экстракции липидов и последующего гидролиза г

Содержание сиаловых кислот, определяли по методу Уоррена (L. Warren, 1959) в модификации И, R Цветковой (1966). В качестве стандарта использовали N-ацетилнейраминовую кислоту ("Reanal",- Венгрия).

Гексоз'амнны после отделения от сопутствующих веществ на хроматографической колонке с карбоксильным полиакриловым кати-онитом определяли по методу А. Е Болобовой, Л. И. Линевич (1988).

Определение гексоз осуществляли с помощью антронового реактива (P. R Меркурьева, '1982).

Актизность кейраминидазы (КФ 3.2.1.18) определяли по методу, описанно5г/ R Д. Патрушковой с соавт. (1985). В качестве субстрата использовали 'Ьацетилнейрашниллактозу-2-3 изомер С "Sigma", США). ' '

Результаты исследований подвергали вариационно-статистической . обработке с ■ помощью пакета прикладных программ Statgraphlcs, Еерсия 3.0. Данные наблюдений вводились в компьютер IBM PC/AT и обрабатывались подпрограммами из указанного .пакета.

РЕЗУЛЬТАТЫ КОСЛЕдОЗАШШ Н ИХ ОЗСУЕДЕШ®

Бксггг^ГчгскаЕ ^apeitiepsscTKKa плазматических ьгембраг: пга-цешы. • , .

Тшидный состав и активность фосфолипазы А-2 >*ембран . пма-цгнты. Проведенные нами исследования свидетельствуют о том, что развитие плаценты в условиях нарушенного гормонального баланса приводит к значительным сдвигам в ее обменно-регулятор-ных процессах даже ,й случае донашивания беременности. Так, установлено, что У женщин, в анамнезе которых бесплодие было обусловлено наличием ановуляции'(2 группа), содержание общих фосфолипидов. в'плазматических мембранах плаценты не отличалось от контрольных данных (1 группа), как. и у женщин 3 группы с нарушением лотеиновой фазы. * В то же время в плаценте женщин 4-

- 12 - ..

группы с синдромом поликистозных яичников уровень общих фосфо-липидов мембран был снижен, а содержание холестерина обнаруживало тенденцию к повышению. Последний показатель во второй и третьей группах не отличался от физиологических величин. Коэффициент молярного соотношения ходестерин/фосфолипиды в 4 группе был выше нормы, чтсУ может свидетельствовать об изменении жесткости мембран плаценты при СПКЯ.

Установлена определенная • модификация в содержании отдельных фракций фосфолипидов (табл. 1). В группе женщин с ановуля-цией в анамнезе обнаружено^наиболее существенное повышение относительно нормы уровня дизофосфатидилхолина (р,< • 0,01) и менее выраженное - фосфатидилглицерина (р < 0,05) при одновременном снижение концентрации .фосфатидилинозита, фосфатидилхо-"лина (р < О,ОЙ и фосфатидилэтаноламина (р < 0.Р01). Факт накопления лизЬфосфатидилхолина ври доношенной беременности, по-видимому,. можно рассматривать не только как деструктивный процесс, но и как определенный компенсаторный механизм, направленный на поддержание текучести липидной фазы мембран в условиях зстрогенного дефицита.

Причинами увеличения лизофосфатидилхолина- могут быть: снижение процессов его ацилирования,- а также повышение активности фосфолипазы А-2. Как показали наши исследования, в исследуемых условиях последнее действительно имеет место. '

Увеличение активности фосфолипазы А-2, очевидно, связано прежде всего с выполнением основных ее функций - регуляцией форфолипидного состава мембран плаценты. Кроме того, катализируя реакцию освобождения арахидоновой кислоты, она в определенной мере может регулировать синтез простатландинов, участ*-вувдих в механизмах развязывания родовой деятельности.

Установленное значительное увеличение уровня лизофосфатидилхолина, молекулы которого имеют клинообразную форму, играет особо важную роль в нарушении.проницаемости мембран.

Тенденция к повышению сфингомиелина наиболее насыщенного \ по жирнокислотному составу и уменьшение содержания фосфатидид-холина обусловили снижение коэффициента фосфатидилхолин/сфин-гомиелин до 0,65 против 0,87 в норме. Известно, что изменение этого показателя' может приводить к увеличению вязкости мембран.'

- 13 -

• ■ Таблида 1.

Биохимические-показатели плазматических мембран плаценты у женщин с физиологической беременностью и при нарушении функции яичников (№ + т)

I-:-1-;-1-1-;-1---1

Показатели | 1 группа|-2 группа| 3 группа! 4 группа |

_;_I I_1_и__I

Общие фосфолипиды 0,71+ 0,66+ 0,69+ ■ 0,59+

(мкмоль/мг белка) 0,03 0,02 0,03 0,02 ^

Холестерин 0,41+ 0,39+ 0.39+ 0,46+

(мкмоль/мг белка) 0,02~'. 0,02 0,05 0,02

Коэффициент холе- 0,57+ 0,59+ 0,56+ 0,78+

стерин/фосфолипиды 0,03 . 0,03 0,06 . 0,03 л

Фосфолипаза А-2 4,0 + 5,2 + 4.4 + 5,1 +

(мкмоль/мг белка) 0,2 . 0,1 л 0,3 ' 0,1. А

Фосфатидил- 20,5 + . 17,0 + 21,0 + 16,2 +

холин (X) 0,8 0,8 * 1.0 ~ 0,7 *

Фосфатидил-. 17,8 + 12,9 + 18,0 + 13{8 +

этаноламин (7.) ' • 0.7 0,8 * 0.8 0,6 *

Сфингомиелин . 23,4 + 26,1 + 22.9 + 26,' 8.+

1.1 1.0 1,0 1.1 л

Лизофосфатидил- 8,3 + 11,3 + 10,5 + 12.0 +

холин (%) 0,3 0,5 * 0,4. * 0,6 *

Фосфатидил- 8,8 + 6,0 + 5,9 + 7,4 +

инозит (%) 0,5 . 0.4 . * 0,3 * .0,2 *

Фосфатидил- ' 5,8 + 6,5 + 4.8 + 6,8 +

глицерин (X) 0,3 0,3 * 0,3 * /0,3 *

Фосфатидил-. 8,1 + 8,9 +.. 8,0 +' ' 9,2 +■

• серин (%) 0,5 . 0,5 0,6 0,5 *.

Сиаловые кислоты •• 0,079+ 0,066+ 0,0*51+' 0,058+

(ьйололь/мг белка) 0,004 0,003 * 0,004 * • 0,003 *

Гексозы ! 0,35+ 0,27+ 0,36+ 0,26+

(мкмоль/мг белка) 0,03 0,03 * 0,04 • 0,01 *

Гексозамины 0,33+ 0,31+ 0.31+ 0,24+

(мкмоль/мг белка) 0,01 0,01 0,01 0.01 *

Нейраминидаза ' 0,33+ 0,37+ 0,46+ 0,48+.

(мкмоль/мг белка) 0,02 0,01 * 0,02 *• 0,02 *

I---:-2-_:_:_!_I

* - отличия достоверны по отношению к контрольным значениям-

• -14- ..

Существенное снижение содержания наиболее .легкоокисляемой , фракции - фосфатидилэтаноламина, очевидно, связано прежде всего с активацией липопероксидации, в то время как заметное изменение содержания уровня фэсфатидилхолина, по-видимому, характеризует усиление фосфолипазного гидролиза, являющегося^ как указывалось, одним из важных факторов модификации клеточных мембран. В основе обнаруженных изменений, помимо названных 'причин, может лежать нарушение синтеза фосфолипидов, развивающееся в результате повреждения механизмов ацилирования и реа-цилирования (Я В. Рожковский и соавт. , 1991). В частности, уменьшение содержания фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина . может быть в определенной мере обусловлено угнетением реацили-рования лизбфо^фатидилхолина, о чем свидетельствует накопление этого фосфолилида.

Уровень 'фосфатидилинозита в мембранах плаценты женщин 2 группы нийе'соответствующих физиологических величин на 32 7. (р < 0,001). Изменение содержанияьэтой минорной фракции, очевидно, имеет важное значение в регуляции обменных процессов в плаценте в связи' с известным влиянием ряда гормонов, в том числе половых стероидов, через фоефоинозитную. рецепториую систему.

Что касается фосфолипидного спектра мембран плаценты у женщин с нарушением лютеиновой фазы, то обнаруженные отклонения носят несколько иной характер. Повышение уровня фосфоли-пидных фракций относительно физиологических значений было характерно только для лизофосфатидидхолина (на . 22 X, р<0,01) снижение - для фосфатидилинозита (в 1,5 раза, р<0,01) и-фосфа-тидилглицерина (на 17 %, р<0,05). В то же время в мембранах плаценты описываемой группы женщин уровень' остальных липидных фрвкций остается не измененным.

Структурные компоненты мембран плаценты у женщин, в анамнезе которых наблюдалась НЛФ.. подвержены меньшей модификации,, чем у женщин с индуцированной беременностью по.поводу ановуля-' ции.

Активность фосфолипазы А-2 в 3 группе сохранялась на уровне контрольных значений, в то время как во 2 группе она была повышенной. Последнее свидетельствует о том, что роль фосфолипазы А-2 в модификации мембран плаценты в случаях гипофункции яичников, обусловленной НЛФ, представляется проблематичной.

Хотя очевиден факт участия избыточного количества лизофосфатидилхолина в дестабилизации мембран плаценты в. этих условиях. Наиболее низкий уровень фосфатидилинозита, выполняющего' рецеп-торную роль в реализации действия гормонов, сочетается с самым низким содержанием прогестерона в этой группе, по сравнению с другими. Такое положение свидетельствует о наличии частичного дефекта в системе регуляции клеточного метаболизма плаценты, ввиду дефицита источника биологического сигнала, а также ограничения возможности его приема на мембране.

Модификация фосфолипидного состава в группе женщин с синдромом ПНЯ в анамнезе заключается в следующем: оказался традиционно сниженным уровень фосфатидилхолина до 16,2 7. против 20,5 X . в норме и фосфатидилэтаноламина - до 13,8 7. при 17,8 7. в физиологических условиях, а также фосфатидилинозита с 8,8 до 7,4 (р < 0,05). Повышенное содержание было характерно для сфингомиелина (р < 0,01), лизофосфатидилхолина (р < 0,001) и фосфатидилглкцерина (р < 0,01). Необходимо отметить, что стабильной оставалась лишь фракция фосфатидилсерина.

Обнаруженные отклонения в структуре мембран плаценты при изучаемой патологии женщины сочетались по нашим данным с низ-¡с!ш уровпем в крови эстрадиола. Возможные механизмы деструкции яипидкого компонента плазматических мембран плаценты женщин этой группы, очевидно,. аналогичны описанным ранее. Повышение активности фосфолипазы А-2 как относительно контроля, так и относительно ее величины з плаценте женщин с НЛФ. подтверддает вклад этого фермента в динамику содержания фосфолипидов в мембранах плаценты яенщин с СПКЯ.

Мириоююдотиый состав фосфолипидов-мембран плацзнты. Доми-йируквдши кислотами в фосфолипидах мембран .плаценты (табл. * 2) во всех исследованных группах явились пальмитиновая, стеариновая, олеиновая, которые обычно преобладают и во всех других тканях человека. Исключение составляет арахидоновая кислота. Содержание йоследней превышает показатели линолевой кислоты, тоторач в липидах мембран других тканей занимает обычно положение выше (С 20:4) арахидоновой. Наличие более высокого уровня полйненасыщенной арахидоновой кислоты, играющей важную роль в функционировании плаценты, относительно, других жирных кислот является, очевидно,'особенностью плазматических мембран этого органа. '-'■ ...

Жирнокислотный состав фосфолипидов (% от общего содержания) мембран плаценты у женщин с физиологической беременностью и при нарушении 'функции/яичников (М + ш)

Показатели

Контрольная группа

1. 14:0 Миристиновая кислота 0,8 + 0,06

2. 16:0 Пальмитиновая кислота 32,1 + 2,2

3. 17:0 Маргариновая кислота 1,48 +.0,3

4. 18:0 Стеариновая кислота 24,1 +1,1

5. 18:1 Олеиновая кислота 10,3 + 1,0

6. 18:2 .фшолевая кислота 2,1 + 0,1

7. 18:3 Линоленовая кислота 1,2 ,+ 0,3

8. 20:0/ Арахиновая кислота 1,44 +0,2

9. 20:1. Эйкозамоноеновая кислота 2,1+0,2

10. 20:3 Эйкоэатриеновая кислота 0,92 + 0,1

11. 20:4 Арахидоновая кислота 2;66 + 0,1

Коэффициент насыщенности 3,27 + 0,15

1 Показатели | 1 1 2 группа 1 ■ 1 1 . 1 . . з группа 1 4' I группа | , 1

1. 14:0 0.7 + 0,08 0.69 + 0,09 0,6 + 0,07

2. 16:0 31,1 + 2,2 31,9 + 2,1 34,5 + 2,0

3. 17:0 1,39 + 0,3. 1,49 + 0,3 1,51 + 0,3

4. 18:0 28,1 + 1,2 * 30,4 + .1,1 * 30,2 + 1,0 А

5. 18:1 12,9 ' + 0,8 А 14,0 + 1,Г* 14,4 + 1,2 А

6. 18:2 1,6 + 0,2 * 1,59 + 0,1 * 1.7 + 0,2 А

7. 18:3 0,98 + 0,3 1,1 + 0,2- 1,1 + 0,3

8. 20:0 1,38 + 0.3 1,55 + 0,3 1.5 + 0,2

9. 20:1 2,1 + 0,3 2,1 + 0.2 . 2,0 + 0,3

10. 20:3 0,89 + 0,1 1.1 + 0,1 0,99 + 0,1

11. 20:4 3,54 + 0,3 А 2.1 + 0.1 * .3,67 + 0.3 А

Коэффициент" >

насыщенности 2,79 + 0,2 3.2 + 0,3 2,86 + 0,08 V

* -' отличия достоверны по отношению к контрольным значениям

. Функциональная значимость арахидоновой кислоты общеизвестна. Она является -следствием ее высокой, ненасыщеннорти. Арахи-доновая кислота служ? щеточником ряда биологически активных геществ, таких как простациклины и простатландины, роль которых чрезвычайно важна в развязывании родовой, деятельности.

Сопоставление полученных результатов позволяет отметить однозначное повышение в фосфолипидах плацентарных мембран всех групп женщин с индуцированной беременностью содержание стеариновой, олеиновой кислот, а также снижение содержания линолевой кислоты. Динамика полиненасыщенной арахидокозой кислоты заключалась з ловывэнии ее содержания у женщин в анамнезе с анову-ляцией и СПКЯ, при снижении концентрации у пациенток с индуцированной беременностью па фоне НЛФ. Количественные изменения уровня насыщенной пальштиновой [«слоты были менее зкраженны, лишь з 4-ой группе обнаружена тенденция к его увеличению..

Заслуживает знимания факт наиболее выраженных отклонений акрнокислотиого спектра мембранных фосфолияидоз плацент женщин с индуцированной беременностью на фоке СПКЯ (условия наиболее выраженного эстрагенного дефицита на протяжения всей беременности) .

Причиной указанных аыше изменений могут бкть нарушения ряда биохимических процессов. Прежде всего, окислительная модификация молекул фосфолипидов (активация ПОЛ)» имеющая место з этих условиях, что неизбежно отражается на гидрофильно-гидрофобном . балансе и обусловливает нарушение липид-липидных и белок- хипидных взаимодействий.

Содержание и фракционный состав мембранных белков плаценты. Деструктивные процессы в плазматических мембранах плацент затрагивают я белгаэвый компонент. У ;ленщин 2 группы содержание мембранных белков плаценты составило О,16+0,02 мг на 1 г • ткани, ' что праотически не отличалось от контрольных данных (0,15+0,02 мг/г). Аналогичные величины получены и у женщин с нарушением лютеиновой фазы (0,16+0,03'мг/!*). В-то же вр-ни в плаценте женщин с СПКЯ уровень белков мембран был снижен на 26,6 7. (р < 0,01) и составил 0,11+0,01 мг/г.

Мембранные белки плаценты женщин контрольной группы разделяются на 13-14 фракций, расположенных в зонах с электрофоре-тической подвижностью (Рт) от 0,00 до 0,45. Наибольшее количество белка находится в гонах с Нт 0,00 - 0,10 (молекулярная

" - 18 -

масса выше 150 ООО дальтон),что свидетельствует о преобладании высокомолекулярных "медленных" белков в изученных мембранах. На долю белков с молекулярной массой 65 ООО - 90 ООО (Иш 0,16 - 0,25) приходится 30 7. от общего уровня белков рдааматических мембран плаценты. Низкомолекулярные белки представлены 5 минорными фракциями. ■:..".

Мембранные белки плаценты женщин 2, 3 и 4 групп разделяется в ПААГ .на 12-13 фракций, расположенных также- в зонах Вт от 0,00 до 0,45. Достоверное снижение уровня белков стартовой 8оны (Яш 0,00 - 0,05), как и,общего содержания мембранных белков, обнаружено только у женщин 4 группы'(р < 0,05), что свидетельствует о наиболее глубоких повреждениях белкового компонента мембран '.плацент при СПКЯ.по сравнению с другими формами нарушений функции яичников. Выявленные особенности подтвержда--ются также анализом количества белков, обладающих большей электрофоретической подвижностью.

В плацентах женщин с индуцированной беременностью отмечено достоверное снижение концентрации белков с 1?т 0,21 - 0,25 (молекулярная масса 65 ООО - 70 ООО) на 18^0 7., 34,4 % и 39,3 % и увеличение содержания белков с более низкими молекулярными массами. Уровень белков с молекулярной массой 40 ООО - 45 ООО (Иш 0,31 - 0,35) повышался на 64,8 7.,- 87,0 ,7. и 103,7 X,' а с молекулярной массой 25 ООО - 30 ООО (1?ш 0,41 - 0,45) на 63,3 %, 116,6 1 и 123,3 7., соответственно во 2-ой, 3-ей и 4-ой группах женщин (р < 0,01). ' Кроме того, обнаружено увеличение .относительного содержания/белков с Яш 0,26 - 0,30 у женщин 3 и 4 групп на 39,2 7. и 66,0 7., соответственно, что, возможно, является следствием диссоциации высокомолекулярных белковых ' комплексов.

В исследуемых условиях изменяется также электрофорети-ческая подвижность некоторых фракций. Так, фракция с относительной электрофоретической подвижностью, равной у женщин контрольной группы 0,29+0,01, у женщин 3 и 4 .групп имеет Рш 0,26+0,01 (р < 0,05). Причинами отклонений в составе' и электрофоретической подвижности белков в исследуемых условиях может быть нарушение нормального соотношения процессов синтеза и распада белков, их постсинтетическая модификация, изменение белок-белковых и белок-липидных взаимоотношений.

Модификация белкового компонента мембран- плаценты, по-ви-

-'19 - . ,

димому, нарушает многие функции плацентарного барьера, включая транспортные процессы, рецепцию,, иммунологические взаимоотношения матери и плода. Наибольшие отклонения от нормальных величин отмечены у женщин 4 группы, наименьшие' - у женщин 2 группы, что подтверждает нашу убежденность в значительном влиянии гормонального дисбаланса до индукции беременности на ее течение и формирование мембран плаценты.

Содержание углеводных компонентов и активность нейраминидазы мембран плаценты. Анализ данных гликопротеинового спектра плацентарных мембран свидетельствует о его существенной модификации (табл. 1). Уровень М-ацетилнейраминовых кислот в мембранах плацент женщин 2 группы по сравнению с нормальными величинами снижен на 16,4 7. (р <. 0,05). Аналогичная динамика обнаружена и для гексоз (на 22,8 %, р < 0,05). Уровень гексозами-нов оставался без изменения. В 3 группе женщин оЬределение тех же мембраносвязанных углеводов в плаценте показало снижение уровня сиаловьк кислот, как.относительно нормы (на 35,4 7., р < 0,01), так. и относительно данных... полученных в предыдущей группе (на 22,7 %, р'< 0,05). , Содержание гексоз и гексозаминов 'не отличалось от физиологических показателей . В мембранах плацент женщин 4 группы были обнаружены достоверные отклонения в содерлании всех изученных углеводных компонентов по сравнению с контрольными величинами. Так, концентрация сиаловых . кислот была снижена относительно нормальных показателей на 26,5 X (р < 0,001), . уровень,гексоз, как и содержание'гексозаминов, тага® не достигал, физиологических величин в среднем на 25-27 X (р < 0,01).

Что касается нейраминидазы, то ее активность превышала, нормальные показатели во 2, • 3 и 4 группах,. соответственно,*на 12,1 7., 39,4 7. и 45-, '4 л. Как известно, нейраминидаза припишет участие в обмене сиадогликопротеинов. Между активностью данного фермента и уровнем Н-ацетилнейраминовой кислоты обнаружена обратная корреляционная связь: у яенщин; которым произведена индукция беременности на фоке ановуляции, НЛФ и СПКЯ коэффициенты корреляции (г) составили - 0,68, - 0,67 и - 0,72, соот-вететвёшю.

Не вызывает сомнения, что уменьшение содержания углеводсо-держащих соединений'наружной поверхности плазматических мембран и.повышение активности нейраминидазы, вносят определеннный

- 20 - .. ..... вклад в нарушение функционирования мембран. Прежде всего, это приводит к отклонениям в . межклеточных взаимодействиях, транспорте ионов, эффекте гормонов. В процесс рецепции гормонов включается либо вся.молекула, либо только терминальные структуры олигосахаридной части,, и недостаток последней может привести к потере рецепторной-функции.-.

Следует отметить, что низкий уровень Н-ацетилнейраминовой кислоты в мембранах плаценты женщин с гипофункцией яичников различного генеза, в условиях гестаген-зстрагенного дефицита обусловлен, очевидно, высоткой активностью нейраминидазы, обнаруженной нами при этом. Уровень последней хотя и не подавляет . связывание гормонов с рецептором, однако приводит к потере чувствительности к нему. Следовательно, сиаловые кислоты, являющиеся комитентами рецепторов и необходимые для передачи -принятого сигнала от рецептора к соседним структурам, в этих условиях теряют свои функциональные возможности.

Причиной активации нейраминидазы может быть, прежде всего, изменение рН крови и тканей в кислую сторону,, что имело место у всех наблюдаемых женщин. Повышению активности мембранной нейраминидазы может способствовать ги стимуляция симПатико-ад-реналовой системы, наблюдающаяся у беременных (Э. И. Исаев и соавт. , 1983). Другой причиной увеличения распада структурных гликообразований является гипоксия тканей, возникающая при нарушении маточно-плацентарного кровообращения различной этиола- : гии, в частности, при гормональном дисбалансе у женщин, беременность которых протекает с угрозой ее прерывания.

Содержания некоторых регуляторов метаболизма плаценты у юн-нш с индуцированной беременностью.

Содержание циклических нуклеотидов, простаглаидинов, рецепторов прогестерона и эстрадиола, активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы в плашнте женщин с ановуляцией в анамнезе. Результаты проведенных исследований (табл. 3) свидетельствуют,' что в плаценте женщин этой группы уровень цАШ> был ниже нормы на 24 7. (р < 0,01), в то же время содержание. цГШ> превышало ее почти в 2 раза Активность аденилатциклазы, как и активность фосфодиэстеразы, оказались сниженными по сравнению с контрольной величиной на 19 % (р < 0,01) и на 35 7. (р <' 0,001), соответственно.

Таблица 3.

Содержание циклических нуклеотидов, активность- аденилат-циклазы и фосфодиэстеразы, содержание простатландинов, рецепторов прогестерона и эстрадиола в плаценте женщин с фи. зиологической беременностью и при нарушении функций яичников (М. + ш) ?.

I-1-г-:—I-:-1-1

| Показатели | 1 группа | 2 группа | 3 группа 4 группа |

I_1—:_I_1_I__1-!_I_I

цАШ 318.1+ 235.4+ • 271,3+ 164,0+

(нмоль/г ткани) 16,6. 17.0 * 9,0 21,0 А

цП© 18,2+ 34.0+ 24,4+ 12,6+

(нмоль/г ткани) 1.5 2.5 А 1.5 * 1,1 А

Аденилатциклаза 230,0+ 181,0+ 198.0+ 177,1+

(тюль/мг белка) 11,0 15,0~* 10,5 Л 11.7 А

Сосфодиэстераза 52,0+ 33,9+ 38,8+' 67,0+

(пмоль/мг белка) 3,0 2,9 * 4.0.* 2,0 а

ПГР-£к '2.64+ 0,50+ 0,73+' 0,57+

(нмоль/г ткани) . 0,81 0,09 а 0,09 '* 0,09

ПГЕ-1 1,62+ . 2,38+ 3,93+ 0,77+

(имоль/г ткани) 0,81 0,70 а 0,70 а 0,09 а

Рецепторы прогесте- 37.5+ . 40,1+ 18,3+ 25,1+

рона (фмоль/мг бэлка) 4,3 5,1 5,9 а 4,0 а

Рецепторы эстрадиола 52.3+ 37,7+. 38.4+ 39,4+

(фмоль/мг белка) б..3~ . 4,0 а 5»£ л ■ . 2,8 а

!___:__!_I

* - отличия достоверны по отношению к контрольным значениям.

Что касается простагландинов. то содержание ПГР-£^и ПГЁ-1 превышало норму, соответственно з 5 и 1,5 раза (р<0,001). В плаценте женщин данной группа установлено идентичное контрольным величинам содержание цит'оплазматических рецепторов прогестерона и снижение уровня рецепторов эстрадиола.

Анализируя полунённиз данные, можно: полагать, что падение активности аденилатциклазы в этих условиях обусловлено структурными изменениями мембранных липидов.' Известно, что многие гормоны способны стимулировать аденилатциклаау лишь при наличии в мембране фосфатидилинозота, фосфатидилэтанояамина, фосфатидилсерина (Т.С.Саатов, 1981). В плацентарных мембранах ■

женщин 2 группы наблюдалось достоверное снижение фосфатидили-нозита и фосфатидилэтаноламина. В.то же время высокое содерда-ние клеточного ПГЕ-1, по-видимому, способствовало сохранению концентрации цАМФ на уровне, при котором возможна передача сигнала гормонов, осуществляющих регуляцию клеточного метаболизма через цАМФ. •: .

Данное предположение вытекает из того факта, что ПГЕ-1 повышает уровень цАМФ, стимулируя аденилатциклазу и ингкОируя фоефодиэстеразу (Д.Теппермен, Х.Теппермеи, 1989). .

Учитывая важную сочетднную роль циклических нуклеотидов и ШТ-^, в механизмах регулирования плацентарного кровоток и транспорта кислорода к плоду, были рассчитаны коэффициенты, соотношения циклические нуклеотидов и ПГГ-2- . При физиологической беременности данный коэффициент в плаценте соотвество-вал 120 для цАМФ/ШТ-^и -7 для цПЛ/ПЛ7-^. В случае гипофункции яичников (ановуляция) первый коэффициент достигал - 70 и второй - 68. '

Рассматривая причины снижения уровня цАЩ> в плаценте лен- . щин 2 группы, можно полагать, что одной из них является уменьшение активности аденилатциклазы.„Низкий уровень ПГГ-2 не влияет на содержание цАМФ, хотя эта ситуация не благоприятна для синтеза рецепторов прогестерона и эстрогенов (А^ 0.6Птап,1984).

Известно, что ворсистый хорион является не" только местом синтеза гормонов, но и их акцептором, что способствует пролонгированию беременности. ' Надо полагать, что снижение эстроген-ных рецепторов у описываемой группы женщин явилось результатом дефицита эстрадиола, который, осуществляя экспрессию генов, обеспечивает синтез специфических для плацентарных клеток рецепторов. Отклонения в содержании важнейших регуляторных метаболитов, Несомненно, сказываются на реализации механизмов действия гормонов (эстрадиола, эстриола, прогестерона), что в значительной мере определяет- характер патологии. Выявленная модификация клеточной регуляции в плаценте, по-видимому, находит выражение в.клинике течения беременности и родов.

Содержание' циклических нуклеотидов, прссгаглждшюв, рецепторов прогестерона и эстрадиола, активность аденилатциклазы и фоофодиэстеравы в платите хеишт с НЛФ в анамнезе. ■ В плацентах женщин третьей группы обнаружена та «э направленность изменений циклических нуклеотидов и простаглацдинов относи-

тельно контрольных значений, что и у женщин второй группы. однако их степень менее выражена. Уровень цАМФ был ниже нормальной величины на 14,7% (р < 0,05), а цГМФ, напротив, повышен на • 34,0% (р < 0,01). Содержание ПГР-2л,снижалось относительно нормы з 3,6 раза (в предыдущей группе - в 5 раз), а ПГЕ-1 - в 2,4 раза (р < 0,0i). Активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы в этих условиях была ниже контроля, как и в плацентах женщин предыдущей группы. Что касается содержания рецепторов прогестерона и' зстрадиола, то зти показатели не достигали нормы. Уровень рецепторов прогестерона был в 2 (р<0,001), а зстрадиола - в 1,4 (р<0,01) раза ниже физиологических величин.

Причины установленных модификаций важнейших элементов регуляции биохимических процессов в плаценте в данной ситуации, очевидно, те же, что и у женщин второй группы.

Характер динамики активности изученных ферментов и содержания ряда регуляторных метаболитов в плаценте женщин третьей группы сопоставлен с гормональным профилем. Беременность и роды у них протекали на фоне значительного снижения уровня зстрадиола и, особенно, прогестерона.

Анализируя полученные данные о содержании рецепторов зстрадиола и прогестерона, следует отметить, что низкий уровень стероидных рецепторов еще не показатель критического состояния регуляции клеточного метаболизма Все рецепторы стероидных гормонов представляют собой глобулярные белки с очень высоким сродством связывающие гормоны. Именно поэтому чуствителыше •слетки-мишени могут концентрировать стероиды при крайне' низких концентраций свободного гормона Последнее позволяет счи" .ть. что в данных условиях в плаценте могут развиться адаптационно- метаболические реакции, результатом чего является сохранение беременности и ее донашивание. Так, например, низкие концентрации хотя и приводят к падению уровня цАК№, но способствуют увеличению содержания рецепторов зстрадиола и прогестерона (G. J. Blackwell, R.J. Flower, 1981). Такая метаболическая ситуация наблюдается в плаценте женщин с НЛФ в анамнезе при одновременном повышении содержания ПГЕ-1. Это позволяет констатировать, что в условиях дефицита зстрадиола и прогестерона динамшса liTF-Sj.- и ПГЕ-1 соответствовала метаболической потребности плаценты. Однако, несмотря на донашивание беременности, обнаруженные отклонения в содержании метабол«-

тов. очевидно, дезорганизуют воздействие на клетку, прежде всего, гормонов плаценты и являются существенной причиной раз-, вития фетоплацентарной недостаточности. Последнее приводит к повреждению материнско-плодового обмена, ухудшая тем самым трофику и кислородное обеспечение плода, его компенсаторно-приспособительные реакции. •

Содержание циклических нуклеотидов, простагландинов, рецепторов прогестерона и эстрадиола, активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы в плаценте женщин с СПКЯ в анамнезе. Результаты исследования плацент 4 группы женщин показали, что харак- ■ тер наблюдаемых в предыдущих группах изменений в активности изученных ферментов и содержании некоторых клеточных метаболитов в основном сохраняется, но имеется и ряд особенностей. Так, концентрация цАМФ, ItfF-2fc,рецепторов прогестерона и эст-радиола оказалась достоверно сниженной по сравнению с контрольными данными. Активность аденилатциклазы также была ниже нормы на 23 7. (р < 0,01). Нэ в отличие от ситуации в плацентах женщин ранее описанных групп активность фосфодиэстеразы превышала физиологический уровень на 29 7. (р < 0,01), а содержание цГМФ и ПГЕ-1 было ниже контрольных значений (р.< 0,01).

Такой характер ¡снеточной регуляции складывается в плацентах женщин четвертой группы в случае доношенной беременности. На протяжении всей беременности у них сохраняются низкие уроз- - -ни эстрадиола и прогестерона, причем степень снижения, более выражена по сравнению с таковой у'гаэнщин с К® или ановуляцией в анамнезе. Значительный дефицит естественных антиоксидантов, какими являются стероидные гормоны, несомненно усиливает процессы ШЛ в мембранах плаценты. В этих условиях падает актив- • ность ■ аденилатциклазы, как в результате нарушения взаимодействия фермента с клеткой, так и в результате снижений ее активности, вследствие низкого количества ПГЕ-1 (Я. Б. Ёлюм и-соавт., 1981). Последние активируют аденилатцикдазу, повышая образование цАШ (F.Berti et al., 1975). Надо полагать, что в плацентах пациенток предыдущих групп, роль второго посредника ' мог выполнять цГМ$, уровень которого был выше нсрма.

В случае наличия в анамнезе жеишлк синдрома ПКЯ содержание . цГМФ было достоверно ниже контрольных значений, что свидетельствует о значительных отклонениях в. регуляции метаболизма плаценты в этих условиях.

Особого внимания заслуживает то обстоятельство, что в плацентах пациенток четвертой группы сниженными оказались как содержание изученных регуляторных метаболитов, так и активность аденилатциклазы на фоне повышения активности фосфодиэстеразы. Несмотря на имеющее место изменение регуляции клеточного метаболизма в плацентах обследованных нами женщин основных групп беременность у них была сохранена и доношена. Можно полагать, что на протяжении всего периода существования плаценты обнаруженные изменения обеспечивают, вероятно, в случае возникновения акушерской патологии метаболическую адаптацию.

Показатели пуринового и нуклеотидного обменов в пладеыте векзден с индуцированной беременностью

Показатели пуринового и нуклеотидного обменов в плаценте женщин с ановуляцией в анамнезе. Проведенные исследования выя-..;<■■>1 определенные закономерности в содержании пуркновых оснований в ткани ворсистого хориона женщин 2 группы (табл. 4). Так, уровень мочевой кислоты соответствовал контрольным значениям при достоверном повышении содержания ксантина и гуанина, аденина. Активность гуаниндезаминазы в этих условиях не изменялась относительно нормы. В то же время установлено резкое, (в 1,7 раза) снижение активности адениндезаминазы (р<0,001) . Более чем в два раза оказалась сниженной в плаценте описываемой группы женщин активность 5'-нуклеотидазы на фоне отсутствия изменений активности аденозиндезаминазы, что могло способствовать сохранению уровня аденозина.

Выявленные отклонения в обмене пуринов в плаценте, по видимому, объясняются гормональным дефицитом, с одной стороны, и возникающим ацидозом - с другой. Последнее приводит к снижению рН в цитоплазме и ядре клеток, вызывая, очевидно, депуриниза-цию ДНК, катализируемую водородными ионами (М. М. Виленчик, 1976, Е. М. Хватова и соавт. , 1987). Между изменением активности изученных дезаминаз и концентрацией соответствующих субстратов выявлена определенная корреляция. Прежде всего это относится к системе гуаниндезаминаза-гуанин. Нарастание уровня ксантина может происходить в результате соответствующего превращения гипоксантина. Некоторое угнетение активности гуаниндезаминазы и аденозиндезаминазы в' конце беременности отмечал НауазЬ1 (1965). хотя содержание гипоксантина и ксантина в плаценте к

этому сроку достигало больших величин. Последнее сказывается и на высоком уровне оксипуринов в ретраплацентарной крови, из которой гипоксантин и ксантин поступают в печень матери, содержащую ксантиноксидазу, где окисляются до мочевой кислоты (И.К.Гурская, 1966; Т. Науаз1и, 1972). Немаловажное значение в появлении мочевой кислоты в ткани ворсистого хориона, очевидно, имеет спонтанное ее образование из предшественников' (Б. СаБ1е11о еЪ а1. 1968). /

Таблица 4.

Показатели пуринового и нуклеотидного обмена в плаценте • ': женщин с физиологической беременностью и при нарушении функции яичников (М + ш)

I-1---1————1-1--1

| Показатели | 1 группа| 2 группа| 3 группа| 4 группа!

I_I_I_I _1_|

Аденин 245,0+ 341,5+ 337,5+ 279,0+

(пмоль/г ткани) 17,0 15,0 * 11,0 * 9,5 л

Ксантин+гуанин 45,0+ 61,8+ .49,6+ 78,4+

(мкг/г) , 3.6 . _ 6,2 * 2,9 11,0 *

Мэчевая кислота , 101,0+ 104,0+ 103,4+ 108,2+

(мкг/г) 6,7 9,2 8,9 ю, г

Гуаниндезаминазы 0,84+ 0,99+ 0,78+ 0,89+

(нмоль/мг. ч) 0,11 0,08 .0,08 0,09

Адениндезаминазы 0,51+ 0,03+ . » 0,03+ 0,05+"'

(нмоль/мг. ч) 0,06 0,01 * о,оГ* - о,т л

АТФ 2,68+ 1,84+ . --1.11+ 1,46+

(мкг/г ггкани) 0,48 0,41 * 0,39 * 0,454

АДФ/А1Й ■ 2,2+ . 2,9+ 1,2+ 14+

0,3 0,2 * 0,3 * 0,2 *

Аденозикдезашшазы 1,69+ 1,68+ 2,00+ 2,33+

(нмоль/мг. ч) 0,50 0,90 0,50~ 0,6 л

5*-нуклеотидазы 0,66+ " 0,30+ . 0.33+ 1,38+

(нмоль/мг. ч) 0,05 0,06 * 0,04 * 0,05 л

1-:_;_^

*' - отличия достоверны по отношению к контрольным значениям

Следует отметить, что в данной ситуации накопление уровня аденина, по-видимому, обусловлено низкой активностью аденинде-заминазы, когда блокируется путь превращения его в гипоксан-

тин. При этом, очевидно, ингибируется включение аденина в АМ1 через аденин-фосфорибозилтрансферазу. Лунное предположение подтверждается нарастанием коэффициента АДФ/АМФ, определяемого нами в плаценте. Как следует из данных приведенных в таблице 4, уровень* АТФ был ниже нормы. Эта ситуация, при которой концентрация АМФ может снижаться, как и АТФ, но содержание АДФ является достаточным для поддержания необходимого количества АТФ.

Поскольку в плаценте отсутствует АМФ-дезаминаза и синтез из АМФ ИМФ не осуществляется, больше значение в регуляции уровня АШ> принадлежит активности фермента 5' -нуклеотидазы, снижающейся у женщин с НЛФ.

Показатели пуринового и нуклеотидного обменов в плаценте женщин с ШН». в анамнезе. Характер сурикового метаболизма в плацентах женщин 3 группы выявил ряд особенностей. Они заключались в значительном нарастании (на 70 7.) содержания аденина относительно идентичных показателей в плацентах контрольной группы (р<0,01), снижении уровня АТФ почти в 2,5 раза и коэффициента отношения АДФ/АШ в 1.8 раза (р<0,01) . Динамика активности изученных ферментов носила неоднозначный характер. Так, наблюдалось снижение активности адениндезаминазы в 17 раз (р<0,001) и 5*-нуклеотидазы - в 2 раза (р<0,001) по сравнению с физиологическими величинами. Активность аденозиндеза-миназы имела тенденцию к повышению, а гуаниндезаминазы - сохранялась на уровне контроля. Они заключались в, значительном нарастании (на 70 %) содержания аденина» относительно как нормы, так и данных, полученных в плацентах, женщин с индуцированной беременностью на фоне ановуляции. Снижение содержания ЛТФ было более чем двукратным, в то время как. а предыдущей группе отмечено хотя и дортоверное падение концентрации'. АТФ, но менее выраженное. Коэффициент отношения АДФ/АМФ снижался относительно контрольных значений в 1,8 раза (р<0,.01)„ в. то время как в плацентах женщин с ансвуляцией, напротив повышался.. Это очевидно свидетельствует о нарастании, уровня АШ е. этих условиях относительно физиологических показателей.. Содержание других пуриновых оснований не отличалось от контрольных, значений..

В указанной группе .женщин активность адениндезаминазы и 5'-нуклеотидазы в плаценте была такой, же. низкой., как и в группе женщин с. ановуляцией в анамнезе. Что, касается: гуаниндезаминазы, то ее величина не отличалась от нормы..

Приведенные выше особенности обмена пуриновых нуклеотидов, нуклеозидов и оснований в плаценте позволяют считать, что. высокое содержание аденина в данных условиях обусловлено низкой активностью адениндезаминазы, когда блокируется его превращение в гипоксантин. Физиологические величины гуанкндезами-назн обеспечивают реакцию дезаминирования гуанина до ксантина. Двукратное снижение образования аденозина из АМФ нивелируется некоторым повышением активности аденозиндезаминазк.

Обращает на себя внимание, что различие в метаболической характеристике пуринового обмена в плаценте женщин данной группы и группы беременных с ановуляцией в анамнезе выражается в повышенном содержании ксантина к гуанина у вторых ' и отсутствием такового у первых. В то же время в плацентах обеих групп имеет место нарастание концентрации аденина.

Такая ситуация, возможно, отражает потребности плацентарных клеток женщин с индуцированной беременностью на фоке НЛФ. Аденин может явиться источником АМФ в реакция, катализируемой аденинфосфорибозилтрансферазой.

Однотипным оказалось в обеих группах снижение активности адениндезаминазы и 5' нуклеотидазы, а Такхе уровня АТФ, более выраженное в плацентах женщин с НЛФ.

Анализируя полученные данные, можно считать, что высказан- . ные йыше возможные причины кодификации пуринового обмена в. ткани-ворсистого хориона в группе женщин с индуцированной беременностью в случае ановуляции в анамнезе имеют'место и в плацентах родильниц, у которых до наступления беременности наблюдалась ЕЖ'.

Показатели пуринового и нуклеотидного обменов *в платите женщин с синдромом ПКЯ в анамнезе. Что касается пуринового метаболизма в плаценте женщин этой группы, то у них обнаружена" более значительная его модификация по сравнению с предыдущими группами. Прежде всего, уровёнь ксантина и гуанина в этих условиях оказался выше контрольных данных и данных в плацент? женщин г ановуляцией и НЛФ в анамнезе. Содержание АТФ было ниже -нормы в 1,8 раза (р < 0,001) также, как и в плацентах женщин предыдущих групп. КоэМипиент соотношения АЛФ/АМФ оказался снижен в 2 раза (р ' 0.001). Такая ситуация наблюдалась и в группе женшкн с НЛФ з анамнэзе. е то же г-р^мя в плаценте пациенток с ановуляцией в анамнезе соотношение АДФ'АШ» было попы

шено. Следует отметить, что уровень АТФ в плацентах женщин с индуцированной беременностью снижен во всех случаях, при одновременном нарастании содержания АШ> в плацентах родильниц с НЛФ и СПКЯ в анамнезе.

Активность аденозиндезаминазы по сравнению с нормой повышалась на 38 % (Р < 0,01), а 5'-нуклеотидазы - в 2 раза (р < 0,001) при резком (в 10 раз) падении адениндезаминазы.

Отмечалось также незначительное повышение уровня аденина относительно данных в контрольной группе. Однако по сравнению с плацентами женщин с индуцированной беременностью на фоне ановуляции и НЛФ, у которых концентрация аденина также превышала норму, накопление этого метаболита было менее выраженным.

•Анализ полученных результатов исследования поззоляет заключить, что наиболее значительные отклонения в пуриновом метаболизме характерны для плаценты женщин, индукция беременности которым произведена по поводу синдрома ПКЯ. Прежде всего происходит накопление такого мощного цитостатика, каким является аденин. В то же время усиливается превращение АМФ до аденозина - сильнейшего вазодилататора. Однако отмеченное повышение активности аденозиндезаминазы приводит к более значительному, чем в норме, превращению аденозина в инозин. Последний расщепляется до гипоксантина. По-видимому, этот ускоренный реакционный путь и приводит к нарастанию ксантина, что имеет место в тканй ворсистого хориона в данной ситуации.

Приведенные данные показывают, что первичным звеном нарушений пуринового и нуклеотидного обменов в плаценте в условиях гормонального дефицита, очевидно, является изменение ак.ив-ности ферментов обмена АМФ и аденозина, снижение уровня АТФ, наиболее выраженное у женщин с индуцированной беременностью на фоне синдрома ПКЯ. . Вероятно, это объясняется наличием предшествующего беременности заболевания и общебиологическим принципом, согласно которому в процессе эволюции возникла необходимость в получении клетками плаценты информации о процессах в других метках (Е Е. Радзинский, П. Я.Смалько, 1987). В организме человека передатчиками информации служат гормоны, специфические белки беременности, выполняющие функции передачи регу-ляторных сигналов от клетки к клетке как в пределах одного органа, так ;и в масштабах-всего организма. Можно предположить, что нарушения в системах и клетках материнского организма,

обусловленные хроническим зстрогенным дефицитом, уже на ранних этапах существования плаценты приводят к соответствующим изменениям в ней обмена пуринов. Последнее обусловливает истощение клеточных энергетических запасов. Однако, во всех случаях беременность закончилась срочными родами. Известно, что исход беременности и родов для матери и плода во многом зависит от уровня адаптационно-гомеостатических реакций в плаценте. Данная патология женщины, по-видимому, направляет течение этих реакций в плаценте по пути синтеза из АШ>аденозина, значение которого в метаболизме заключается в усилении плацентарного кровотока, а также активации аденилатциклаза В этих условиях содержание активаторов последней СПГЕ-1 и белковых горюнов) резко снижается.

Анализируя полученные данные, необходимо отметить, что у всех обследованных нами женщин до наступления беременности в течение длительного времени имел место гормональный дисбаланс. Последний, по данным ряда авторов, способствует формированию в организме обмена веществ, характерного для процессов старения. У указанного контингента женщин при формировании плаценты на самых ранних этапах из-за дефицита эстрогенов в ее клетках наблюдается изменение экспрессии генов, обеспечивающей инициацию клеточного деления.

Особого внимания заслуживает тот факт, что во всех случаях беременность была доношена и, по-видимому, не только благодаря проводимому лечению, но и в результате развития адаптационно-приспособительных механизмов регуляции; Обнаруженные изменения в плаценте не носят того катастрофического характера, как можно было ожидать, исходя из исключительно закной роли стероидных гормонов в регуляции клеточного метаболизма. Нами установлено, что в данных условиях регуляция обменных процессов в плаценте, в определенной мере, достигается более ак* тивным участием иных биологических соединений.

Исходя из полученных данных, можно констатировать, что высказанное нами предположение о важной роли продуктов обдана нуклеинов® кислот - адениннуклеотидэв, нуклеозидов и пурино-вых оснований т. поддержании клеточного плацентарного метаболизма нчшла свое подтверждение (рис. 1. П. 31.' •

Липиды

I

т

1. Изменение проницаемости стероидных 'гормонов

2.- Снижение уровня рецепторов эстрадиола

3. (Снижение экспрес-сий генов

4. Нарушение синтеза беллковых гормонов и рецепторов

Рис 1.

Изменение

лческих компонентов мембран ]

..Бедки....

Повышение активности фосфолипазы А-2

Повышение уровня арахидоновой кислоты

Изменение уровня простагландинов Е-1 и

1. Изменение рецепции белковых гормонов-

2. Снижение активности аденилатциклазы

3. Снижение уровня цАМФ

4. Изменение активности фосфодиэстеразы

'Углеводы

Изменение проведения • гормонального сиг-'нала

Общие и частные закономерности метаболических изменений в плаценте женщин с ановуляцией в анамнезе

1:

Снижение уровня АТФ

I

Изменение уровня АДФ

Й

Повышение уровня АМФ

-А-

*ня аденозина

И

Изменение уров-вня аденина —

Повышение уров-вня ксантина

со

■/1ПЯИДЫ

I 1

1. Изменение проницаемости стероидных гормонов

2. Снижение уровня рецепторов эстради-ола и прогестерона

3. Снижение экспрессии ;генов

4. Нарушение синтеза беллковых гормонов, и рецепторов

Изменение химических компонентов' мембран

I "

Белки

Сохранение активности фосфо-липазы А-2

Снижение уровни арахидонрвой кислоту

Повышение уровня простатландинов Е-1 и снижение

1. Изменение рецепции белковых гормодов —:—

2. Снижение активности адени--латциклазы

3. Снижение уровня цАДО

4. Снижение активности фосфо-диэстеразы

Углеводы

Изменение проведения гормонального сигнала . ,

Снижение уровня АТФ

* И

Изменение уровня АДФ,

Повышение уровня А1№

*ня аденозина

Швышение уров-вня аденина -

Сохранение уров-вня ксанткна

8

I

Рис. 2. Общие и частные закономерности метаболических изменений

в плаценте женщин с'нарушением лютеиновой фазы в анамнезе

Линией

1. Изменение проницаемости стероидных гормонов

2. Снижение уровня рецепторов эстрадиола и прогестерона

3., Снижение экспрессии генов

4. Нарушение синтеза беллковых гормонов и рецепторов

■ Изменение химических компонентов мембран

Белки

Повышение активности фосфолипазы А-2

Повышение уровня арахидоновой кислоты

Снижение уровня простагландинов Е-1 и

1. Изменение рецепции белковых гормонов ^

2. Снижение активности аденилатциклазы

3. Снижение уровня цАМФ

4. Повышение активности фосфодиэстеразы

Углеводы

Изменение проведения -гормонального сигнала

Рис. 3. Обще и частные закономерности метаболических изменений

I

Снижение уровня АТФ

Изменение уровня, АДФ

и

ювыш

Повышение уровня АМФ **—I

Изменение уровня аденозина

И

Повышение уров--вня аденина -

1

Повышение уров-вня ксантина

8

в плаценте женщин с синдромом поликистозных яичников в анамнезе

В плацентах женщин с ановуляцией в анамнезе направленность обмена пуриновых соединений такова, что накапливаются аденин и _ ксантин. Данные метаболиты играют существенную роль в обмене цЛМФ путем активации аденилатциклазы и снижения активности фосфодизстеразы, тем самым обеспечивают компенсаторные р'еакции в реализации гормональной регуляции. На наш взгляд - это вал-нейший элемент, обеспечивающий сохранение клеточной регуляции на уровне белковых гормонов. Что касается регуляторных особен' ностей стероидных гормонов,, когда уровень рецепторов эстрадйо-ла снижен, а рецепторов прогестерона сохранен, то, вероятно, в питоплалмагическом связывании эстрадиола роль рецептора !-:ог выполнять альфа-фетопротейн (Н. Е. КуЧеренко и соавт. , 1986)'. Уровень последнего значительно превышал /контрольные данные.

Обнаруженные особенности дают Теоретическое обоснование ' коррекции метаболизма фетоплацентарной системы при гипофункции яичников в случае индуцированной беременности.

.Для расширения арсенала фармакблогических средств несомненно важнейшими препаратами целенаправленной коррекции нарушенных регуляторных процессов в этих условиях могут быть рибоксин (рибозид-гипо^сантина), ,'трентал и агапурин (ксантин). Последние обеспечат снижение активности фосфодизстеразы^ предотвращая расщепление цАШ> до АМ$, чем достигается адекватный уровень посредника в реализаций регуляции клеточного метаболизма белковыми гормонам!. При этом рибоксин может предотвратить распад аденозина (мощного' сосудистого дилататора)_ и явиться источником внутриклеточного АТФ. ТаЗ;ая терапия будет способствовать улучшению )^аточно-плацентарного кровообращения путем совершенствования молекулярных механизмов клеточной ре- ' гуляции плацентарного гомеостаза. . ..

выводы

1. При индуцированной беременности в плаценте женщин с нарушенной функцией яичйиков различного генеэа наблюдаются отклонения в липилном, белковом и углеводном компонентах клеточных мембран: Обнаружены изменения в механизмах,клеточной регуляции плаценты. Выявлены адаптивные признаки обмена адениннук-леотидов, нуклеозидов и пуриноЕых оснований.

В зависимости от формы гипофункции яичников установлены'

различия в степени и направленности изменений содержания изученных компонентов и активности ферментов.

2. В плаценте женщин в анамнезе с ановуляцией снижена ак-' тивность 5'-нуклеотидазы и адениндезаминазы, повышен уровень ксантина.

При нарушении лютеиновой фазы - сохранены активность аде-нозиндезаминазы и уровень ксантина на контрольных значениях при резком снижении активности 5'-нуклеотидазы.

При синдроме ПКЯ повышены активность 5"-нуклеотидазы, аденозиндезаминазы, содержание ксантина и снижена активность адениндезаминазы.

3. Установлено, что в плаценте при индуцированной беременности на фоне ановуляции в фосфолипрдном составе плазматических мембран наблюдается существенное повышение содержания лизофосфатидилхолина, сочетающееся с высокой активностью фосфолипазы А-2.

4. Обнаружена специфичность в содержании арахидоновой кислоты в фосфолипидах плацентарных мембран, заключающаяся в более высоком ее уровне, относительно мембран других тканей. Повышение содержания арахидоновой кислоты по сравнению с контролем отмечено в плацентах женщин с ановуляцией и синдромом поликистозных яичников при его снижении в плацентах женщин с нарушением лютеиновой фазы.

5. Установлено, что в плаценте женщин в условиях гормонального дисбаланса фетоплацентарной системы наблюдаются нарушения в состав^ мембранных белков: изменяется уровень белка во фракциях и злектрофоретическая подвижность отдельных фра.дий. Модификации подвергаются и углеводные компоненты мембран, что находит свое отражение в снижении количества ацетилнейрамино-вой кислоты во всех обследованных группах, коррелирующим со степенью повышения активности нейраминидазы.

• 6. Нарушение функции яичников сопровождается изменением в плаценте количества цитоплазматических рецепторов зстриола и прогестерона, изменением соотношения простагландинов, циклических нуклеотидов, модификацией активности аденилатциклазы и фосфодизстеразы.

7. Комплексом биохимических исследований установлена взаимосвязь гормональной регуляции, мессенджеров второго порядка и компонентов пуринового обмена, в плаценте. Отклонения в уровне

основных протекторов беременности у мгнщин с ановуляцией в анамнезе нивелируются повышением содержания ПГЕ1 (активатор, аденилатциклазы) и ксантина (ингибитор фосфодиэстеразы), направленным на поддержание концентрации цАИФ.

8. Установлена роль продуктов обмена нуклеиновых кислот: адениннуклеотидов, нуклеозидов и пуриновых оснований в поддержании клеточной регуляции в плаценте женщин с гипофункцией, яичников. В плацентах женщин с ановуляцией в анамнезе направленность обмена пуриновых оснований обеспечивает накопление1 аденозина.

9. Наиболее выраженные изменения в биохимической характеристике плазматических мембран, клеточной регуляции, пуриновом метаболизме обнаружены в плацентах женщин с синдромом ПКЯ . в анамнезе.

10. Изменение клеточной регуляции в плаценте при индуцированной беременности на фоне гипофункции яичников является результатом развития адаптивных реакций, направленных на сохранение клеточного метаболизма, адекватного условиям плацентарного гомеостаза и сохранение вида.

i , Список работ, айублжоваш&в m теме диссертация

1. Структурно-функциональная характеристика мембран синци-. тиотрофобласта в динамике физиологически и осложненной беременности (Т. Н. Погорелова, И.Й.Ерукиер, Т.О. Дяужевская) . -//Тезисы докладов V Всесоюзного биохимического съезда. - U.. 1985. - С. 105. ' \ . • ' ■

2. Состояние плазматических: мембран синцитиотрофобласта при фетоплацентарной недостаточности (Т. R Погорелова, И. И. Кру-киер, Т. С. Длужевская). - //Тезйсы докладов П сгезда акушеров-гинекологов Таджикистана, г Душанбе, 1986, - С. 154-156. •

3. Роль физико-химической модификации мембранных структур плаценты в развитии фетоплацентарной недостаточности (Т. Е Погорелова, И.И.Крукиер,). .- //Тезисы докладов объединенной научно-практической конференции детских врачей и акушеров-гинекологов Латвийской СбР. - Рига, 1986. - С. 165-166.

4.. Липидный состав мембран эритроцитов беременных женщин с фетоплацентарной нёдостаточностью (Т. Н. Погорелова, Т. С. Длу-жевская, И. И. Крукиер, Ю. А. Ширенков). - //Вопр. охр. матер. •

1987. - N 7. - С. 59-61.

5. Значение пуриновых оснований в диагностике внутриутробной гипоксии плода //Немедикаментозные методы лечения в аку-' шерстве и гинекологии. - Ы., 1987. - С. 68-75.

6. Активность ферментов пуринового обмена у беременных, получавших лечение по поводу галактореи-аменореи (Т. ЕПогоре-лова, В. И. Орлов, С. Л. К^овский). - //Современные вопросы репродукции. - Тбилиси. 1988. - С. 166-167.

7. Состояние мембран эритроцитов у женщин с бесплодием эндокринного генеза ( Т. Е Шгорелова. С. Л Юровский, а Я Орлов). -//Современные вопросы репродукции. - Тбилиси, 1988. - С. 229-230.

. 8. Оценка биохимических параметров околоплодных вод в антенатальной охране плода и прогнозировании здоровья новорожденного (С. Л. Юровский, Т. Е Шгорелова). - //Современные формы и методы медицинской помощи новорожденным и детям раннего возраста. - Ы. , 1988. - С. 111 - 113.

9. Особенности пуринового обмена в ткани ворсистого хориона женщин с гипоталамо-гипофизарно-овариальными нарушениями (С. Л. Юровский). - //Перинатология и неонатология (новое в диагностике и лечении). - Я . 1989. - С. 92-94.

10. Особенности обмена адениннуклеотидов в плаценте женщин с галактореей-аменореей (С. Л. Юровский, Т. Е Шгорелова). //Механизмы управления генеративными процессами. Ростов-на-Дону, 1989. - С. 92-94.

11. Гомокарнозин околоплодных вод как показатель'церебральных повреждений плода эндокринного генеза (С. Л. Кров^.шй, Е И. Орлов, Т. Е Шгорелова). - //Акушерство и гинекология. -

1989. - N 9. - ;С. 45-47.

12. Новые методы перинатальной диагностики (С. Л Юровский). - //ХУ Всероссийский съезд акушеров-гинекологов. - Ы. , 1989. -С.. 215-216. . ..

13. Содержание циклических нуклеотидов в плаценте женщин с эндокринными нарушениями . - //Диагностика, лечение, профилактика обменно-эндокринных нарушений матери и ребенка. - М. ,

1990. С. 39-42.

14. Способ диагностики пороков развития плода (Т.Н. Шгорелова, С. Л. Юровский). - //Изобретательство ' и рационализация. РесА сб. науч. трудов. - Ы.,.1990. - С. 148-150.

15. Способ прогнозирования дискоординации родовой деятельности (ЕИ. Орлов, Т. Е Погорелова, С. JL Юровский). - // Изобретательство и рационализация. Респ. сб. науч. .. трудов. - М.

1990. - С. 154-156.

16. Способ индукции овуляции у женщин с эндокринной "патологией (Т. Е Погорелова, С. Л. Невский, R И. Орлов). - //Изобретательство/и рационализация. Респ. сб. науч. трудов. - М.,,

1991. - С. 121-124.

17. Способ диагностики дискоординации родовой деятельности (R И. Орлов, Т. Е Погорелова). - //Изобретательство и рационализация в .медицине. Респ. сб. науч. трудов. - М., 1992. - С. 118-119.

18. Биохимические способы диагностик акте- и интранаталь-иых повреждений мозга плода (Т. С. Длужевская, Т. Е Погорелова, В. И. Орлов, А. А. Афонин). .- //Медико-социальные аспекты перина-тологии и современные технологии родоразрешения. Тезисы докл. 1 Всероссийский сгезд акушеров-гинекологов-и педиатров.. - М.,

1992. - С. 171-172.

19. Активность ферментов .пуринового обмена у беременных, получавших лечение по поводу галактореи-аменореи (Е И. Орлов, Т. R Погорелова. А. А. Афонин). - //Медико-социальные аспекты пе-ринатологии и современные технологии родоразрешения. Тезисы докл. 1 Всероссийский съезд акушеров-гинекологов и педиатров!. - М. , 1992. - С. 226. . /

20. Фэсфолипидный состав мембран синцитйотрофобласта при Фетоплацентарной недостаточности (И. И- Крукиёр, Т. Е Погорелова) . - //Актуальные вопросы экологически обусловленных заболеваний. Сб. науч. трудов. - Ростов-на-Дону, 1993'. - С. 45-47.

21. Активность дезаминаз нуклеотидного обмена у беременных с синдромом галактореи-аменореи и склерокйстозом яичников

(Т. Н. Погорелова, А. Е Кама^в). - //Патология женщин и здоровье-детей. Сб. науч. трудов./- Нальчик, 1993. — С. 17-21.

Изобретения.

1. Способ диагностики энцефалопатии плода (Т. Е Погорело. ва, С. Л. Юровский, R И. Орлов). - //A.c. N 1476381; 3.01.89.

2. Способ прогнозирования развития- гипотиреоза у новорожденных (Т. R Погорелова, С. Л. Юровский, А. А. Афонин). - //А. с. N/

, ' - 39 - ;;

1504600; 1.05.89. ;

3. Способ диагностики пороков развития плода (Т. Е Погоре-дова, С.Л.КЦювский). - //A.c. N 1511691; ,1.06.89.

4. Способ прогнозирования дискоординации родовой деятельности (Е И. Орлов, Т. Е Пэгорелова, С. Л. Юровский). - //А. с. N 1648346; 15." Öl! 91.

5. Способ индукции овуляции у женщин с эндокринной патологией ( Т. Е Погорелова, С. Л. Юровский, ЕИ. Орлов). - //A.c. N 1697750; 15.08.91.

6. Способ прогнозирования антенатальной гибели плода (С. Л. Юровский, Е И. Орлов, Т. Е. Погорелова, И. И. Крукиер), //A.C. N 1822978; 12.10. 92. -

• 7. Способ дифференциальной диагностики анте- и интрана-тальных повреждений (Е И. Орлов, С. Л. Юровский, A.A. Афонин, Т. Е Погорелова). - //A.c. N 1783443; 26.09.91.

8. Способ прогнозирования преждевременного разрыва плодных оболочек (I. Е Погорелова, Е И. Орлов, И. И. Крукиер). - //Решение о выдаче патента от 27.05.92.