Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Антгельминтная и токсикологическая оценка нового отечественного препарата акцарса

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Антгельминтная и токсикологическая оценка нового отечественного препарата акцарса"

РГ5 ОД

' 'МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ИВАНОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ

На правах рукописи А\УХРАНОВ Владимир Васильевич

УДК 619:616.995.1—085 + 619:615

АНТГЕЛЬМИНТНАЯ И ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА НОВОГО ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА АКЦАРСА

Специальность: 03.00.19 — паразитология,

гельминтология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Ппаиопо 1996

Работа выполнена в Самарской научно-исследовательской ветеринарной станции, в хозяйствах Самарской области и Ставропольского края РФ.

Н а у ч н ы е р у к о в о д и т е л и:

заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент

РАСХН, доктор ветеринарных наук, профессор

Петров Ю. Ф., ;

кандидат ветеринарных наук Розовенко М. В.

О ф и ц и а л ь н ы е о л п о н е н т ы;

доктор 'биологических наук, профессор Исаев В. А. (ИВГУ),

кандидат ветеринарных паук Корнева Г. В. (ИГСХА).

Ведущая органнзаци я —

Костромская государственная сельскохозяйственная ака: демпя.

Защита диссертации состоится « . » 1990 г.

на заседании диссертационного совета К-120.31.02 при Ивановской государственной сельскохозяйственной академии.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Иват новской государственной сельскохозяйственной академии.

Адрес: 153001, г. Иваново, ул. Советская, д. 45, ИГСХА.

Автореферат разослан « 11. » . 1996 год п.

Ученый секретарь диссертационного сонета Лоценг

СОРОКИНА И. Б.

В 1! ni Д И 11 1" К

Актуальность тег». Очной к л ведущих отраслеП ki* not iiontin-стла п Сроднен Попплчьп Российской Т.?ncpniiiui япляотсл орцоппд-стпо. В результате рнпокой tpiincmvpnmm хюшмх чивоттте па ограниченной пло'чпли п dtoü лоно- солдял.?* дефицит плогбгп, что выпутает исчольпорать под них раллиирь".; участки, пс ролникр-ют условие для интенсивного лпрлчоннл ороц р^льтмнтг!'«1, ч частности, m.t/.PTomtpnvn и буностокш г.

Успопная борьба о нгматочиролом и буностог.-олог не гочет б|1ТЬ осупсстрлонп fíen РНаНИЯ О П'ЯООТОЛОГГг' лаСолерлчн!5 n К;"»-лой ГОНКрОТНОИ КЛЯМПТО-ГООГрЧ'^ИЧППКОЙ лоно с учетам СИСТПМЬ! подомни -таротнопонстра, р частности, мясного и полочного ско-торопстрп, орцсродстпл , Хотя и литературе пгеется много сообщений о широком распространении на территории Российской т'сдп-рпции нематодирола (К.И.Скрябин, И.ГОплоп, ТО.'М; Д. ¡¡.'Лидкоп, Т°СЛ; ||,Н.Пасклльская,Т°74,10Ю; 0. Л. вагоне пор, ТРК;; Л.й.Лп-сеенкора,Т°б4; Л. А. Сми pi ton, 190?, Т990,19?г, * и др.) и буно-стопора (М.Я.ЛоГГелов,ТРСО; ».С.ГУдакоп, Т9.Ъ; /uiI.To-.cn, Г<М0, ИМ«?; Л.В.Копнр'.ш, П.П.РЬпковп, X.Г.Черникова,Т940; Л.К.%1-кор, Т965; А.Т.;/!а1/одоь,Т960; О.А.;,':arói.;c.aon, T°0G; В.Н.Коллор, Т984, Т985, Т986,'9В7 и пр.) ч условиях Среднего 11опо;г*1.я, п частности, .п Саг/арской области отот вопрос слабо научен.

В последние годы литература обогатилась многочисленны™ работаем по илысканию новых средств дегсльшнтиллцни стачных швотных при нематодироле и буностоколе, а таетсе при пругкх нематодозах челудочно-К1теечного тракта млекопитающих (Ю.П.Си-дакооа,Т96Й; Ю.П.Сиг!№!Вя,тр8Т; Ю.П.Сигачсра и np.,I9G:; С.В. Зерелкина, 1993; С.Н.Берелкина с соавт.,Т980; О.А.Магогедоп, г984; АД.С|мрноп,199Т; В.Н.Козлов, 1987; И.Л.Лрхипоп,!99Г> и 1р.). Тем не менее'в настоящее' премя практические ветеринарные «ботники все ewe не имеют шсокол'№ективних, белпредннх для чтотннх и удобных для применения лнтголы.пштикоп.

Успех дегельминтизации животных лагисит от наличия высо-:оогМ1Сктирных, малотоксичных и общедоступных антгельмннтиков. )собое место среди антгольгинтиков ланимаят проилропные бенли-¡идалола, применение их в ветеринарии пкоокопМ;ектирно и оно-юмически выгодно. В настоящее премя n налей стране и яп рубе-ом пктипно ведется работа по илнегапню новых препаратор клас-п бенликчлплолов, не обладающих эмбриотропныы дейстпчем и пи-

- А -

югепетпческоМ ;iKTnпносп.ю. \l таким препаратам, n частности, относятся бифип, к.убпЛ:!,, пакакур, снпкур, ('>енкур и пругио.

1'с.гь п nnnau.i пс.слопотчшй. Учитывай актуальность пробле-i.-.u борьбы с неиатоииролом и буностомоло!.- и Сроднен Поволжье !*'*■>, и'чкжншн ионик, Ш!ооко:>;М,активных аптгелы,шитиков при отих !шп!.')и>1Х, i-м ропили илуччть елогунии:») «опроси :

- распространение, солонн.ую и гюлрастную динамику нимато-лирола и буностомола л овцеводческих холяГютпах Канарской области ;

- определить п'.уктиши'к'ть нового отечественного препарата акпарса при буносюмоле и пематопироле;

- опренолить пяранотрп острой токсичности акпарса для белых мнпей и овец;

- илучить омбриотоксичеекпо и тератогиннме свойства пина pea;

- плуч.пъ влияние терапевтических ,пот лкцарса на ирга-иилм овец;

- [ia основании собственппх исследовании разработать наставление по применению акцпрсп при немптонироле и буностомоло овец.

Научная нопищm. Илученм распространение, селопная и пол-растнап дина.лит номатолирола и буностомолп и холпйствох Самарской области. кынолепо, что в орцепопчпских холяГ.стнах Самарской области в апреле-мае на Т н^ пастбищ имеется l'O-í'.O ин-вплионпих личинок номатодир и ГИ-ЗЗ личинок буностом, в июно-августо - соответственно и ИЗ-Añ, сентябре-октябре - 37-

ОР. и ЯЬ-;>3 личинок ни.'.-атопир и буностом, что и определяет nuco куп с?(;П(!Ц1> инпалии «вг.чнмх животних отими некптошши

Установлено, что HOB'Jti антгольмлн'тик пкцлре является вн-cokon'jfioktubhiim при номатолпролп и буностомоло хрпчных чипот-!шх. Терапевтической лолой акцарсп или овец при птих инпллиях Является при иниивилупльной дпчо ЬО (по Р.!) по ,/ïï'J мг/кг, а при групповом применении с кормом - СО (30. по иг/кг. Препарат П!1(ЧС(т однократно» иппипипуально n форме суспонлии, группою-)« метопон - в снеси с кормом в соотношении T:U).

Вняплоно, что пкцарс относится к-категории налотокспчпчх веществ: при пероралыюм введении якцпрсп огорть поллпктных мч'ю!1 но наступает дате от лолм Л000- иг/кг. Препарат не обладает пмбриотокспчоскики и тератогенными свойствами. Антгель-минтик s первые ZA часа, после вводен'/я обнаруживается в пече-

im, тюччпх, логку.х, сслолоние, мчиппх, истово!1 ттспнг, в со-дсрчикок тонкого и толстого отлолоп кспсчиякс!, п гТюкялнях; на 6 сутки - в печем;:, почках; но Т0-Т5 сутки - ri органах i* г,кл-imx животного пкп^ро отсутгтвуот.

пияктичрскян цоныость. основании про'вепенннх исслодо-ванпй предложен лля дегельминтизации опои при н^чтолгрот: i: буностомсяе пор";1 препдапт пкцарс, ГУЛ ¡.¡СХ Российской ^дерп-ции ТЗ млп Т993 голо утверпнло технические требования по из го товлению гкцпрся и временные наставления по его применению п чивотнопосстве.

Лпрзбоция рпбрты. Основные положения диссертации долоте-нм и одобренн нп научно-технических конференциях работников сельского хозяйства Спмпрской области (Т99т-то95 гг.), науч-ноП кон'еренции п Краснодарской ¡ГИПС (T09G'1'.

fin защиту - выносятся следующие положения:

I. Особенности лпилоо.тологии немзтолироза и буностомолл овец я хозяйствах СамярскоР области.

?.. Схемы и доли'применения акцареа при нематодироле и бу-ностокозе овец.

3. Результаты изучения параметров острой токсичности як-царсп для лабораторных животных и овец,

4.- Выявление ом*риотоксических и тератогенных cnoiiCTB ак-царсо.

5. Динамика накопления и выведения из организма опец пк-цярса.

Публикация. По материалам диссертации опубликованы работы, которые отря-чявт основное содержание панной работа.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 115 страницах машинописного текста, содер-хит Т8 таблиц. Состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов, практических предложений. Список литературы включает Р0';. источника, ил них Т67 отечественных, 35 иностранных.

т. сбяор литературы

В обзоре литератур!) (ТО страниц машинописного текста) нз-ло-ченч сведения по эпизоотологии буностомозп. и немятодироза овен, изыскании новых средств дегельминтизации при кпиечсых стронгнлятолах. животных.

- б -

2. сокствкиш исслкдовлшл '

2.Т. Материалы и метопы исследований

Кпучение сезонной и возрастной динамики буностомоза и не-ычтодпрола проводили в Т991-Г991) гг.. в 7 овцеводческих хозяйствах Самарской обларти, которые являются наиболее типичными для всей зоны Среднего Поволжья РЕ>.

С этой целью пропели анализ отчетов областной, районных, мекрайониых ветеринарных лабораторий, отчетов главных ветеринарных врачей хозяйств и районов Самарской области. Кроме того, ежемесячно провопили исследования .'М840 проб фецес опец, гельминтологические вскрытия <120 ягнят [-6-месячного, 318 голов молодняка 7-[2-месячного, МО опец [,б-п-летнего возраста. Гель- 1 (/цитологический покрытия проводили »«посредственно п овцеводческих хозяйстлах и на мясокомбинатах области.

Сотрудники лаборатории синтеза и технологии производства химических препаратов кафедры химии Самарского государственного политехнического университета при нашем активном участии синтезировали 2-ацетаминобонлимилапол; патом к этому соединению в качестве наполнителя добавили декстрин в соотношении 1:Т. Полученное вещество мы.назвали акцарсом, который состоит из ЬСЙ действующего веше.ства - 2-ацетаминобензимидазола и наполнителя - декстрина.

' А к ц а р с - светлокоричневий порйшок бея папаха и вкуса, в воде не растворяется, но растрорнется в лиметилсуль^оксиде, диметилформамиде, не слеживается, легко смешивается с кормом.

Антгельминтную эффективность акцарса-ипучили в б, в том числе в 2 .комиссионных опытах на 350 спонтанно инвазированных буностомами и нематодирами овцах. Для опыта отбирали животных, в 5 г фсцес которых содержалось не менее Iii яиц нематодир и ТО яиц буностом. Эффективность препарата определяли путем гельминтологического покрытия желудочно-кишечного тракта овец, убитых спустя ТО дней после дачи антгельминтика, п также путем исследования фецес спустя .1 и .12 дней лечения.

Выявление параметров острой токсичности акцарса'проводили на 90 белых мышах массой 30 г по методу пробит-анализа, пред-ло-кенного Литчфнльдом*и Уилкоксоном в модификации П.Рота (М.Л. Беленький,Т963), который основан на учете смертности животных от вводим ix пол препарата. Акцярс вводили белым мышам лерораль-но в долах Т00-200-З00-<100-Б00-Т0()0-З000-4000-Ь000-6000-7000-

0000 мг/кг.

Выявление омбриотоксических и тератогенных свойств акцар-са проводили на ТОГ- здоровой половозрелой крысе сродной массой тела 200 г. Акцарс в дозе Т20 мг/кг по ДВ самкам крыс вводили перорально с 7-го по ТГз-мо сутки беременности. В основу проведения опытов по оценке эмбриотоксического и тератогенного действия акцарса были положат.! методические указания "Тестирование змбриотоксического и тератогенного действия ветеринарных антгельминтнкоп", М.,.ВДОХНИЛ, 1983.

Влияние терапевтических и попшеннмх лоз акцарса на организм овец изучили в опном опыте на Ш ярках 0-10-месячного возраста. Акцарс животным ввели перорпльно, однократно в виде ТО^-ной суспензии в лозах - 80 (40 по ДВ) - 240 (Т20 по ДВ) -400 (200 по ДВ) - f)60 (200 по ДВ) - 800 (400 по ДВ) мг/кг. У подопытных и контрольных животных определяли клигпческое состояние; изучение гематологических показателей проводили общепринятыми методами.

Для оценки состояния иммунобиологической реактигности животных определяли количество Т-лимфонитоп и В-лигАшнтов. Для чего выделяли мононуклпарные клетки из периферической крови овец по методу Л.Воупт (T98G). Оценку количества Т-лим^оцитоп проводили в реакции спонтанного розеткообразования с ¡эритроцитами быка rio ме^опусД/. j(enJ<xe. (Т972), учитывая рекомендации Д.К.Новикова, В.И.Новиковой (Т9791.

Определенно остаточного количества акцарса в органах и' тканях проводили на 8 овцах, которым препарат ввели однократно в дозе 80 (40 по ДВ) мг/кг. После дачи антгельминтика через f ' T-5-I0-T3 суток убпвэли по 2 гшвотнкх. Для определения остаточного количества 2-ацетаминоСензисилазола (ДВ препарата^ исследовали печень, почки, легкие, .сердце, мозг, селезенку, пгаг.м, содержимое сычуга, тонкого и толстого отделов кипочника, калыме массы.

Пробы подвергали анализу хроматосноктро^отометричесипм методом, принцип которого заключается в хром»тогрп?ировании проб в Тонком слое силикагсля, оллниропании пятен 2-ацотш.гно-бенгшмиднзола и послсдуюлем спектро^отонетриропаним при 20Т !!,',! после извлечения препарата из анализируемых проб отилецетатом, очистки гнеотракта перераспределением в рпстеоо солгшой кислоты, а поело под'пелачиэания в этилацетат. Патна на пластинке выявляли под У*>-среток. Количественное определение проводили

- и -

споктроФотометрически при ïbï IL.1 поело блл.оироьанпя препарата с пластики. *

1>ееь полученный цифровой материал подвергнут мптиматичес-кой о'^юСогке :ю ».'«толу Здиррп-Стыплонто о гсиольпоппшим кри-пнжя- Крмоллшт.

Я.::. РгГУЛЬГАТИ 1!ССЛед()НЛ1ГЛИ

' sí i. г Kío-mjiort i1 пзеш * к. осошшосш ьуностшозл я if,- •

¡/¡ЛТОДМРОЗЛ ОВЙЦ Ii "ХОЗЯЙСТВАХ САМЛРСКСй ÜCJIACT,'

Собственные паразитологические вскрытия овец 1-т2-месяч-íiüi'o, '/-'Л—1-Ь-летнего возрастл покляыв.">т11, что буноетомоз п '¿пиарской области регистрируется н течение всего гола. Ягнята T-3-моснчного возраста Сгобогши от отой iiiui-iru'.n ; колоинпк 4-G-i/.ecí чного возржта инпазнровпн на 70',О-ЮС', при ИИ - 17-Ü46 !жз., -кинотние 9-ТЗ-мосячного возраста - соответственно ну 90-TÛ0t и 47-7вЬ ока., овцы ',о-2-лстного возраста - на 72-ТОЙ и ;-.7-;,'ЛВ окз., животшю З-В-летнего возраст - пл Л0-10(Л и Т4-Ь7.окз. Цик буноетомотной ' инвазии регистрируется f. октябре-январе (ТОО* и I9-0C.C окз.), наименьшая инвазии - в феврале-мае М0-ТГ,0,(У. и Т-41Й от.). Первый польем инвазии набдю-• лаотсн в м>ш-июне, второй - в сентябре-ноябре.

il.-) пастбищах Самарской облвсти личинки .бунос vom Т, ^ и 3 с.тгш-й встречаются в мае-октпбро. Миниммлыю;- число личинок па пастбищах регистрируется в мае (7-8 ок.ч./м' личинок ! стадии, 3—íj пк.з.Д^ личинок отппии, Ч-í! окз./и'' лгч.шок Г! стадии), уморенное число - в июне-августе (соответственно Ttw'ü; [4-30 и Ю-И) пкз./м'~), наибольшее - в сентябре-октябре (3040; 35-4Q и 3Q-liO окз./(/').

Ti хозяйствах Самарской области ягнята Т-З-мсслчного воз-.роста свободны от неиатопир, молодняк 4-В-месячного возраста инвазирован на Т6,4-Г00^ мри ИИ=Т-Т137 г>кз., 9-тЯ-месл"иого -на 32,G-T00* л l-títívíj окз., опцы Т.Ь-Р-летиего возрастл -63,Т.>-Т0(У и Ь7-ТО ЧГ> окз., животные ¿,1>-Ь-летноГо возраста -на 08,4-1 ОС/?, и 1г!-т394В окз. Первый пот,ем инвазии регистрируется в июне-илле, второй - в сентябре-январе.

На пастбищах Самарской области инвазионные личинки нематод; ;р встречаются в течение acoro плгтби ¡¡¡¡ого нормой«, Нини-ыпльное число инвазионных личинок немптолнр регистрируется в мае (Т~е0 ока. на г м~); затем постепенно численность личлпок HOiíftTOix нзртстает (в июне - 7-Ч> зкз., в июле - Т0-,?() экз., н 1

_ о _

ппгусте - IГ.—3íj от., сснтчбрг - 3D-TQ7 лкл., окт^ре - 40-22¡) пкгО.

2.2.2. пзу-í;¡г,Г^ лтгсль.житной гг-'ккткчностп шут гг.! нядапукопш и бу:юст0;.(лк оыл

Лнтгельминтнуы о V'okti'Bhoctb акцарса г1-' илучили п Т??;;-1995 ГГ. в 6 опытах на 3!_>0 спонтанно инрллированнмх ляпах т-Ь-летнего волрлста.

В перрон опыте, гаюльяопял-/ ппо леклретррпчые 'У-орыч акцарса (-\К I и АК Р.^, которые отличались яруг от друга лииь по технологии илготорления, а но К0лн"сстпснн0:у еотсртнню етвуюпего вепоства - Р-яцетлмннобснлиьи^алолл и исполнителя -декстрина они были илентичнымл. В опыте было ?!3 олоц Т,5-голо-ралого вопр-?стп, n Í5 г *сцсс которых содержалось п среднем по 27,8 яиц нематолнр и по т0,7 яиц буностом. пилотных proполили на 7 групп (по Ь голоп в клжпо!5^. Огнак Т группы инчивлдулль-по, однократно, внутрь прели /к г по ВО (40 по ДВ^ мг/кг, второй - АК I по G0 (30-по ДТП ¡т/кг, третьей - A'ií Т по 40 (20 по Д^ мг/кг, четпертой - ДК 2 по 00 ('10 по ДЬ-1 мг/кг, пятой -ЛК 2 по 60 (30 по Др,1 нг/кг, иестой - А К ? по 40 (Г0 по Д!^ мг/кг. "■'.иво.тныо 7 группы антгельмннтика не получали, они служили контролен.

После дачи препаратов никаких отклонен'!!1 в повеаенпи ж;--вотных мы не регистрировали. Аппетит у них сохранится в теиы-нио всего опыта, консистенция и Лорка г-сцес i«o нлм'ччмпсь. Спустя 10 пней всех очей убгли и подвергли гельминтологическому пскрыг/ю.'

Животные Т (АК I по СО мг/кг1 и 2 (АК т по СО мг/кг1 групп были свободны от нематод. В 3 группе (АК Т по 40 мг/кг'* четыре овцы были свободны от гельминтов, а у одной наши 17 лкл. нематодир и 9 экл. буносток. В 4, !) и 6 группах (пропар"" АК 2 по 80-60-40 мг/кг1* все животные окапались свободными от Гельминтов. В седы/,ой, контрольной группе псе животные были инваяированн, нашли у них 4<7С иомг-тоаир и Т2Т0 буносток.'

Таким обралом., ил лпух лекарственных ,т,орм акцарса более элективным окапался ЛК 2, п терапевтические долы его 'Ю-ОО-Ю мг/кг лапт Т00^ ЭЭ при нематодироло и буностомоле овец. Поото-му в следующем опыте мл 35 овцах проверили эффективность лекарственной формы АК 2 при индивидуальном пр'.-t. с^нги их в челах 60 (30 по ДЮ и 40 (20 по ДЮ мг/кг. В Г; г .';.цес овец обнаружили в сродном по 23,4 окл. яиц плотя;;?) и 17,4 окл. яиц

- то -

буностом (по результатам культивирования'личинок). Как и о парном опито, овец разделили па 7 групп, по 5 голов п каждой. Чпвотпым Т группы индивидуально, однократно ввели акцарс п дозе .40 (л 5 по ДЮ ыг/кг, второй - по 40 (20 по ДВ), третьей -по .' О- (2!) по ДВ\ четвертой - по 60 (30 по ДЮ, пятой - по 70 (За по ДЮ, шестой - по 80 (АО по ДВ) мг/кг. Овцы 7 группы были контрольными, их не дегельминтизировали. Через 10 дней всех животных убили и подвергли их гельминтологическое вскрытию.

В контрольной группе иге животные были заражены, нашли у них всего !;867 немитопир и 2786 буностом. В I группе (АК 2 по 30 мг/кг^ все животные были инвапированы, нашли у них всего 606 буностом и 887 нематодир. Во 2 (АК 2 по 40 мг/кг1, третьей (АК Р. по 1)0 мг/кр\ четвертой (АК Р по 60 мг/кг\ пттой (АК 2 по 70 мг/кг) и шестой (АК 2 по 80 мг/кг) группах все животные были свободны от нематод.

На основании результатов двух опытов следует заключить: во-первых, лекарственная Форма акцарсп - АК 2 более эффективна . при нематодирозе и буностомоле овец, чем АК Т; во-вторнх, терапевтической дозой, даюисй при индивидуальном введении ТОСК о^йкт, явдпютсп 40 ( 20 по ДВ) - 50 (25 по ДВ) - 60 (30 по ДВ) - 70 (35 по ДВ^ - 80 (40 по ДВ^ мг/кг. В следующих двух • опытах мы испытали оти дозы акнарсп при применении их групповым методом, с кормом.

ПерЕый опыт провели на 80 овцах годовалого возраста, в пяти граммах Фоцес которых в среднем налши по 37,8 яиц нематодир и 22,6 яиц буностом. Животных разделили на 4 группы, по 20 голов в каждой. Овцам I группы с кормом однократно дали ак-цара в дчяе 40 мг/кг (по 30 мг/кг по ДВ), второй - по 50 мг/кг (по 25 мг/кг по ДВ), третьей - по 60 мг/кг (по 30 мг/кг по ДВ). Животные в течение ТО минут поедали лечебную мешанку. В' поведении животных в течение 10 дней мы не регистрировали отклонений от нормы. 20 овец Л группы были контрольными, им ант-гельминтика не давали. Спустя ТО дней всех животных убили и желудочно-кишечные тракты их подвергли гельминтологическом!' вскрытию. *

В контрольной группе все 20 овец.были заражены нематодами, иагали у них 22870 немптодир и 14660. буностом. В I группе (АК 2 по 40 мг/кг) две овцы- были инвапированы нематодирами (всего 248 экз.) и три овцы - буностомами (227 экэ.\ ЭЭ составила соответственно и 89*, ИЭ - 98,и 98,49^. Во вто- •

- Iт

рой САК по иг/кр) к тертьсй (ЛК 2 по 00 |*.г/кгл группах псе чипотные были свободны от иеглтпп.

В слелупшсм оггмто па !Ю орцпх изучили оЬ'ектнгшость ак-царсп п позах 50 и СО мг/кг (соответстренио :1Ь г 30 мг/кг по ДВ) р сравнении с базовыми препаратами пантопоном (инструкция по борьбе с голмоштоягши широтных от ТР89 г.) и яцстамизолом (аптгельмннтик широкого спектра пейстпп, прнменгстся гля лечения орпц, коз, свиней,, птиц при нег.атополлу; терапевтическая доза = 50 тт/кг по ДМ. В & г Лту.с подопытных овец содержалось п среднем но' Т7,0 яиц немлтотнр и Т4,8 яиц буностом. Чи-ПОТ1П1Х оллделили на 5 групп, по ТО голоп п каждой.

Овцам Т группы рроли лчцарс р доле !>0 (по <Т> по ДВ) иг/кг, второй - окцарс по 60 (по 30 по ДВ) мг/кг, третьей - на^тасон шкрокаисулировлннпй по 0,3 г/кг (0,."4 г/кг по ДМ, четвертой -ацотамилол 50- кг/кг по ДВ. Веем пипотнни препараты давали с кормим группорч;1 методом. Овцы, [*сех подопытных групп в течение ТО г.инут поедали лечебнуп катанку. Лиротныс Г) группы били контрольными, они антгель'уштнка не получали, "орел 10 дней всех овец убили и *елупочно-кип.'с.чный тракт их подвергли гелышнто-логическогу пскрытии.

В контрольной группе все ^ипотнне оказались инрялироелн-нш.'И, нлм:ли у них всего Т0"60 лкл. немптотир и £780 лил. буностон. В Т' групг.е, где орпы получили групповым метопом с кортом акцарс по 50 (£о по ДВ"> иг/кг, одно хиротноо бцдо инрлпи-ровано неиатодиррин (9 гн;з.) и буностомами (3 окл.). данной долы акцпрса при буностомоле составила 90^, 113 - 99,89^, при нематодпролс - соответственно 90^ и 9°,9Т^. Долл. ркцарел по 60 (30 по ДВ) мг/кг дала ТОС^-ный аффект при отнх пнпазиях. Довольно высокими били эффективность базовых препаратов ир.йтт/о-на .(ЭЭ=9<#, КЗ«*» ,78** и ацетамизола (Э3-9(У,,

Учитывая результаты четырех опытов, в сентябос Т99£ I1. на 60 спонтанно йнвялироврнннх олпах провели комиссионный опыт для определения объективности якиярса в срарнсиии с нл^тлмнои. В 5 г фецес подопытных спец содержалось з среднем по т4,8 яиц нематолир и 8,9 яиц буностом (по результатам культивирования личинок). •

Подопытных животных разделили на 3 группы, по 20 голов л наядой. Овцам Т группы ввели акцпрс в доле по 60 (30 по ДВ) мг/кг, 2 группы - наДтамон микрокалсулированный по 0,3 г/кг. Оба препарата давали однократно, с кормом, г'руппорп?/ методом.

- Т2 ■ -

4.;!-.wT!ill.¡ :i I'pyillTl были КОНТРОЛЬНЫМИ, И»! 'антгельмиптики 110 вводили .

Для уч. л л » ;>|)1"!1(ти1чюсти лечения на Г> и Т.'! сутки поело ночи пнтголыг.птикон ирокопили исслопоппнил по Ь г rf.c-цео опец трижды по методу чоллеборпа (плп обнаружении яиц номатпдир). iínoi"! того, по i", г фоцис от каждой овцы к.ульт1 вировяли и тече-п.:е 3 дней при комнатной температуре (+20°С), после чего метолом И;р;."ша-0рлан.1 выделял»; личинок нелчтод, последних определяли no pona (дли учета реактивности препаратов против бунос-том).

11с результатам копр'ологичеоких исследований эффективность акцарса в доле Г;0 (30 rio pi) мг/кг при дач.: с кормом составила ЮС*, na'iTiîMona по 0,3 г/кг - ЭЭ-ОО-ОГ,0/,, ГЗ^О,2-90,<1В".

СлопутоиИ комиссионный опыт пропоЛп в октябре Í9C2 года в колхозе им. Ленина Ставропольского кряя на ^0 овцах породы ас-канийекал но пап Т.w-головалого возраст, спонтанно шшазиро-пнштх немаголирам) (n ü г /£оцсс овец-содержится в пропнем по 2G,8 яиц неиатопнр- и T4,G яиц буностом). %'нотннх разпелили на 3 группы, по 30 голом в каждой. Овцам Г группы опнократно с кормом скормили акцарс в доле fi0 (30 по ДЬ1 мг/кг, 2 группы -ацетамилол по М) мг/кг. Тридцать овец 3 группы были контроль--ннь'И, им антгеы.ьчнтика не лапали.

Копрологическге сеелодовапип, проведенные через Г. и 12 пней после лечения, показали, что » Г и 2 группах все животные освободились от буностом и пеглтодир (у всех IL0 овец в фекалиях'отсутствовали'липа нематод), тогда как количественное содержание яиц гельминтов в фекалиях контрольных животных существенно не изменилось.

На основании проведенных исследований следует заключить, что акцарс является выеокоо'фективныу антгольминтиком при не-мятопирояе и буностомозе овен. Терапевтической дозой препарата при этих инвазиях является при индивидуальном введении h0 (R'i по ДВ1 мг/кг, г. при групповом (с кормом) - по 60 (30 по ДВ) мг/кг.

й.г.з. ияучкш шпшш ткра/ikotí-p¡eükoíí и ломшкюй доз

ЛКМАРСк НА ОРГАНИЗМ ЛАПОРЛТОР! 1!jx ЧШШШ И ОБЩ

2.2.3.[. Выявление параметров острой токсичности акцарса для белых 1.'Ы!:СЙ

Ошпм'по определению параметров острой токсичности акцарса мы проводили по метолу пробит-аналича, предложенного Литч-

- ТЗ -

пильпом и Уилкоксоном п модификации З.Рота (Ь.Л.Биленький, 1963), который основан нп учета смертности животных от вводимых дол препарата. Под опытом находилось 90 полых uunu й -• самцов массой 30 г. Так как п практики акцаре применяется ни морально, то и основной целью наних исследований было научение параметров острой токсичности препарата при пероральпем способе введения лабораторным .животным. Поскольку лкцаре не растворяется п воде, ег о мы вводили в Jiopue суспенчин белым мычлм после 3-часового голодания. ¡¡лблюдсшп; ла животным.: провопил,! п точение ¡3 суток после дачи препарата: учнтпналп их оьиее состояние, прием корма и воды, состояние порстного покрова, поп-вичность. Степень токсичности акцарса определили по классификации вредных ло'чсстп (¡¡.В.Саноцкий, »!.П.Улпловл, 197.';), утвержденной Пленумом секции ПДК. Препарат впопилп в ,юло 100-1:00-300—400—!j(X)— iOOO-:?000-nC()0-4COO-fiOOO-COOC-700a-8000 мг/кг. •

Исследования выявили, что при перорлльном введении пкцлр-са параметры острой токсичности определить нам не удалось, так как смерть попопитнкх животных не наступала да-ад от долы 8000 мг/кг. Более высокую долу акцарса ввести перорлльно белым мышам практически не удалось ил-ла большого объема.

Следовательно, по степени токсичности пкцлрс можно отнести н категории малотоксичнмх вешестя (И.В.Саноцкий, И.П.Улано-ва,Т97Г)).

3.3.3.¡2. Выявление о1,.бриото!{сически,х и тератогенных свойств акцарсч на крысах

Опыт прогели на 18 Г лдоровой половозрелой крысе массой 190-330 р. Дкцарс пропили с седьмого по пятнадцатые сутки беременности, т.о. н период наибольшей чувствительности омбрио-нов крыс к о|,:бр;'отроппому действию З-ацетпминобенчнмипачола.

¡¡осле введения акцарса с седьмого но пятнадцатые сутки беременности н.чруп.омий и общем состоянии и поре ионии крыс не отмечали; уродливые плоди (внешние и внутренние аномалии)- отсутствовали. Плоды от подопытных крыс не отличались от плодов контрольных самок. Показатели пред-, постимпллнтлционной ц 0ñ-тей эмбриональной гибели эмбрионов в опытных группах после введения акцарса не отличались от таковых контрольных тавотных, что подтверждено статистической обработкой. В целом с седьмого гю пятнадцатые сутки беременности уровень преши/.плантчционной гибели эмбрионов в группах, где крысы получали акпаре, колебался в пределах 3,.'!!)-Т - постнмплантапионной гн-

_ ч _

боли - 2,BG-2,0I - Е,30-3,тtí«, общей эмбриональной гибели -t),C>7¿2,4b -'13,33±3^.

В контрольных группах, где крысы но получали препарата, эти показатели колебались п пределах соответственно 2,12*0,12 -10,64*3, И); 2,77*1,94 - G,94*3,02; 7,04*3,06 - 13,82*3,SO*. Средняя масса плодов от крыс, получавших акцлрс, и у контрольных, не получавших препарат, составила соответственно 2,49* 0,04 и 2,1)0-0,04; краниока.улальный ралмер - 2.,02*0,0Т см и 2,83*0,01 см; средняя масса плаценты во всех группах была одинаковой - 0,Í:[-0,01 -г; диаметр плаценты - соответственно Т,30* 0,ОТ и Т,29*0,ОТ см (><0,0Ь).

На основании праведоишпс исследований слезет паклпчить, что акцарс не обладает омбрнотоксическнм и тератогенным действием при введении крысам с 7 по Т5 сутки беременности.

2.2.3.3. Влияние терапевтических и повышенных дол акцарса на организм огец

'.¡лучение влияния терапевтической и повмпенннх дол акцарса на органилм животных провели на 18 ярках 0-Т0-мес.ячного вол-раста, спобояньтх от инвалип и инфекций, и.л которых сФормировали, по принципу аналогов, б групп, по 3 головы в каждой (5 опытных и I контрольная). Клинические наблюдения и лабораторные исследования крови проводили до и на Í-3-L-7-I0 сутки после введения акцарса. Зиготные в период опыта находились в отдельном погоне в одинаковых условиях кормления и содержания.

Лкцарс вводили овцам индивидуально, порорально, однократно в вино десятипроцентной волной суспенлии 3 овцам I группы в доле 80 (40 мг ДВ), второй - по 240 (Т20 мг ДБ), третьей - 400 (200 мг ДЗ), четвертой - 5G0 (280 мг ДВ), пятой - 000 (400 мг ДВ). Чпготные 6 группы были контрольным;!, они препарат не получали .

• Исследования покапали, что акцарс в долах 80-800 мг/кг (по 40-400 мг/кг ДВ) не вызывает каких-либо отклонений в состоянии животных. Во все периода исследований температура тела овец колебалась в пределах 39,Т*0,0Э - 40,4*0,58°С, пульс -72,5*1,05 - 70,5*0,82 ударов, дыхание - 22,3*1,2 - 27,9*1,4 в минуту.

Наблюдения также выявили, что терапевтические полы акцарса (40-80 мг/кг) и долы препарата, превышающие терапевтические в 10 рал, не выпывапт отклонений со стороны крови. Так, количество гемоглобина у опытных и контрольных овец было в преде-

- Го -

лях ТО,4*0,ТО - 1Т,3-0.V Г*, СОП через 24 часа - _ Т, Т°*(), [ -ТЛ-О,?, чгело эритроця-ог. - 8,08*1,6 - П,9*г,0 млн.Лшп; лейкоцитов - 6,Т*0,0о - 0,^0,4 тыс./мм^. Лейкоцитарный чро',;л!. также тю имел достоверных различий о показателями, полученными до введения проплратл, и колебался в пределах Физиологических границ плл птой возрастной группы овоц.

Следовательно, акиаро, введенный в терапевтической поле 80 (40 по ДО) мг/кг и превыча.'огаих ее в 3-;;-7-'0 рал, не околевает отрицательного влияния нч Физиологический статуе овец.

Параллельно мы пропогили изучение влияния терапевтической поли акцлреа (80 кг/кг, или 40 иг/кг по ДВ) при однократном ввеп.ении на иммунологическую реактивность овец, результаты которого представлены в таблице Г.

Таблица I

Сиолнно панныо влияния терапевтической долы акцарса нт иммунобиологические показатели крови овец

Показатели ---Л^^^аний------:----

рения!___3_____!__7 _ __ТО_!__ТИ

Овцы, получи в:т,<0 лкцлрс по 80 мг/кг

Т-лимфоцитн <*-> сб,к±о,9 в* т,1 Я7,о-о,о 2!>,б*Т,8

В-лимФоциты % Т7,4^0,« Т7,8*0,4 Т8,4*Т,2. ТО.О^Т,I

1ц;к Опт.егк ВЗ,2*Т2,0 84,!?*М,0 82,4*16,3 72,6*9,4

Гетерофильные агглютинины • Т ,2*0,4 1,1*0,2 1,2*0,3 Интактные, контрольные ппцы 1,4*0,8

Т-лимФоцитн * 28,0*0,7 27,4*0,8 29,2*0,4 26,2*0,7

Б-лим^оцитн Я У1,6*Т,2 22,8*0,8 [9,0*0,° 19,2*[,4

ц;:к Опт.ед., 80,0*9,8 8Э,4*Т9,2 78,8*11,2 68,8*10,4

Гетерофильные пгглютиншп1 . Т,2*0,3 1,0*0,6 1,4*0,2 1,2*0,2

На основании полученных данных можно заключить, что ак-цлре в дозе 80 мг/кг (по 40 мг/кг по ДБ), введенный однократно, не изменяет уровень иммунного ответа у овец. Некоторой снижение индексов стимуляции в первые дни после введения препарата (однако они были выше 0,8) не позволяет нам отнести это вещество п группу иммунодепре.осантов. По-видимому, в данном случае происходят временные сдвиги иммунных реакций на данный антигенный стимул.

. На основании полученных данных слелует заключить, что

акчлре п доле 00 мг/кг не снижает к не повигаяет иммунный статуе; на нп;:Г тгляп., он практически индифферентен для оргяпип-ма млекопитающих.

'¿.'¿.'¿А. Определение остаточного количества акцарса в органах и тканях опец

Опропеление остаточного количества акцарса в органах и тканях овец сводилось к определению в укатанных тканях 2-ацет-оминобеняимппплола, так- как данное вещество является основным действующим компонентом.

Восьми овцам лкцпрс. ввели однократно в доле 80 (¿10 по ДВ) мг/кг и по 2 животных убивали череп ]—П—ТО—1й суток. Для определения остаточного количества ?-пцотпминобенппыилалола иссле-г.опалн печень, почки, мыигцн,- легкие, сердце, мопг, селезенку, ' содержимое сычуга, тонкого и толстого.отделов кишечника и фекальные массы.

1'ечультатн исследований свидетельствуют (таблица 2), что черт сутки после введения акцарса наиболее высокий уровень препарата регистрируется'в почках, печени и селезенке. В то же время в .мышцах концентрация препарата остается на очень (шоком уровне (0,02*0,0004 мг/кг), в мозге обнаруживаются лишь

слепы 2-ацетаминобенлимидазола. Через 6 сутой 2-ацетаминобен-лимивапол находили только в печени (0,01*0,0008 мг/кг) и почках (0,02*0,ООП мг/кг). Сгхустя 10 и 15 суток после введения акцарса 2-ацетаминобензи/.1ИДазол отсутствовал во всех тканях и органах овеЦ^

Следовательно, после введения овцам терапевтической дозы акцарса (40 мг/кг по ДВ) через сутки уровень 2-ацетоминобенли-мидалоля во многих органах не превышает 0,05 мг/кг (за исключением печени, селезенки и органов желудочно-кишечного тракта); спустя пять суток препарат обнаруживается только в печени и почках, я через Ю-1Ъ суток препарат отсутствует во всех органа:

Т7

И тканях животного.

Таблица 2

Динамика содержания 2-ацетаминобензимидазола в органах

и тканях' овец после введения им акцарса

! Время исследований после введения О п г я н м ' акцарса (сутки) и концентрация 2-^ 1. ацетаминобензимидазола (мг/кг)

__! I ! 6 I 10 I 15

0,01*0,0008 . -

Печень 0,06*0,003

[Точки 0,14*0,016

Легкие С,04*0,0064

Селезенка 0,13*0,018

Мышцы 0,02*0,0004

Сердце . 0,02*0,0000

Мозг следы

Содержимое тонкого-

кишечника 1,01*0,68

Содержимое толстого 5,69*0,103

кишечника

Фецес 7,01*0,42

ВЫВОДЫ

1. Нематодироз является широкораспространенным заболеванием в овцеводческих хозяйствах Самарской области. Ягнята I-3-ме-сячного возраста свободны от нематодир; молодняк 4-8-месячного возраста здесь заражен на 16,4-100,0^ при Ш - 1-П37.экз., молодняк 9-12-мйсячного возраста - соответственно на 32,6-100,0^ и 1-8896 экз., овцы 1,5-2-летнего возраста - на 62,5-100,Ot и 57-19146 экз., животные 2,5-5-летнега возраста - 68,4-IOOt и 123948 экз.

Во всех хозяйствах области наименьшая инвазия-наблюдается в феврале-мае, умеренная - в июне-июле, наивысшая - в сентябре-январе. Ягнята текущего года рождения начинают заражаться немато-дироэом в середине мая. На пастбищах Самарской области инвазионные личинки нематодир встречаются в мае-октябре. Минимальное число инвазионных личинок нематодир на I м^ пастбищ регистрируется в мае- (1-5 экз.), умеренное число - в июне-августе (7-35 экз.) наибольшее - в сентябре-октябре (-40-225 экз.).

2. Буностомоз является широкораспространенным заболеванием в овцеводческих хозяйствах Самарской области. Ягнята до 3-месяч-

- га -

ного возраста свободны от буностом; молодняк 4-8-месячного возраста заражен на 70-100,0% при ИИ - 17-246 экз., молодняк 9-12-месячного возраста - соответственно на 90-100,0$ и 47-785 экз., овцы 1,5-2-летнего возраста - на 72-100,01? .и 27-218 экз., животные 2,5-5-летнего возраста - 48-100,0% и 14-87 экз.

Во всех хозяйствах области наименьшая инвазия регистрируется в феврале-мае, умеренная - в июне-июле, наивысшая - в октяб- . ре-январе. Ягнята текущего года рождения начинают заражаться бу-ностомами в середине мая. На пастбищах Самарской области инвазионные личинки буностом встречаются в мае-октябре. Минимальное число инвазионных личинок буностом на I м^ пастбиш регистрируется. в мае (7-8 экз.), умеренное число - в июне-августе (14-30 экз.), максимальное - в сентябре-октябре (30-50 экз.).

3. Новый отечественный препарат акцарс является высокоэффективным антгельминтиком при нематодирозе и буностомоэе овец. При индивидуальном однократном введении акцарса в дозе 40-5060-70 мг/кг (соответственно по 20-25-30-35 мг/кг по ДВ) достигается 100? эффективность при этих инвазиях. При групповом применении в смеси с кормом доза 40 мг/кг (20 мг/кг по ДВ) дает при буностомозе ЭЭ=85^, ИЭ=98,49^, при нематодирозе - соответственно 90,0% и 98,91«; дозы 50 (25 по ДВ) мг/кг и 60 (30 по ДВ) мг/кг вызывают освобождение животных от всех нематод.

4. По степени токсичности акцарс относится к категбрии малотоксичных вешеств. Пероральное введение дозы препарата 8000 мг/кг не вызывает гибели белых мышей; пероральное введение акцарса в дозах 400-800 мг/кг не вызывает изменений гематологических и биохимических показателей крови овец.

5. Акцарс.в терапевтических дозах (25 и 30 мг/кг по ДВ) не снижает и не повышает имцунный статус овец.

6. Акцарс не проявляет эмбриотоксического и тератогенного действия.

7. После введения овцам терапевтической дозы акцарса через сутки уровень действующего вещества 2-ацетаминобензимидазола во многих органах не превышает 0,05 мг/кг (за исключением селезенки, печени, органов желудочно-кишечного тракта); спустя 5 суток препарат в небольших количествах обнаруживается только в печени и почках, а через 10-15 суток он отсутствует во бссх органах к тканях животного.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДОЖЕНИЛ

1. Совместно с сотрудниками лаборатории синтеза и технологии химических препаратов кафедры химии Самарского государственного университета нами разработаны технические условия производственного изготовления акцарса, которые утверждены ГУВ МСХ РФ (13 мая 1993 года). В настоящее время эти технические условия переданы предприятиям химической промышленности для производства акцарса для ветерпнарпых целей.

2. Разработаны временные наставления по применению акцарса для дегельминтизации овец при стронгилятозах желудочно-кишечного тракта, которые утверждены ГУВ МСХ Р5 (13 мая 1993 года).

Список работ, опубликованных по материалам диссертации:

1. Цухранов В.В. Акцарс - отечественный антгельминтик широкого спектра действия. Труды Краснодарской НИВС. Краснодар, 1996, С.86-90.

2. Мухранов В.В., Розовенко М.В. Антгельминтная и токсикологическая оценка нового отечественного препарата акцарса. Труди МВА. Иваново, 1996 (в печати).