Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Анализ результатов цитогенетических исследований населения, проживающего на радиоактивно-загрязненных территориях после Чернобыльской аварии

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Анализ результатов цитогенетических исследований населения, проживающего на радиоактивно-загрязненных территориях после Чернобыльской аварии"

На правах рукописи

□030В4088

МИХАЙЛОВА

Галина Федоровна

АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ НАСЕЛЕНИЯ, ПРОЖИВАЮЩЕГО НА РАДИОАКТИВНО-ЗАГРЯЗНЕННЫХ ТЕРРИТОРИЯХ ПОСЛЕ ЧЕРНОБЫЛЬСКОЙ АВАРИИ

03.00.01 - радиобиология

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических

АВТОРЕФЕРАТ

наук

Обнинск - 2007

003064088

Работа выполнена в лаборатории радиационной цитогеиетики ГУ «Медицинский радиологический научный центр» Российской академии

медицинских наук

доктор биологических наук, профессор Севанькаев Александр Васильевич

доктор биологических наук, профессор Пелевина Ирина Ивановна доктор биологических наук, профессор Ульяненко Лилия Николаевна доктор биологических наук, профессор Рябченко Николай Ильич

Ведущая организация:

ФГУ «Российский Научный Центр рентгенорадиологии» ФА по здравоохранению и социальному развитию

Защита состоится « 25 » сентября 2007 г в 1100 часов

на заседании совета Д001 011 01 в ГУ «Медицинский радиологический научный центр» РАМН (249036, Калужская обл, г Обнинск, ул Королева, д 4)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ «Медицинский радиологический научный центр» РАМН

Автореферат разослан «2<0» 9\ 2007 г

Научный консультант:

Официальные оппоненты:

Ученый секретарь диссертационного совета

Палыга Г Ф.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования. Прошло уже 20 лет с момента аварии на Чернобыльской АЭС - самой крупномасштабной ядерной катастрофы в истории человечества в мирное время Последствием этой катастрофы явилось радиоактивное загрязнение долгоживущими радиоизотопами огромных территорий, на которых проживают, и, следовательно, подвергаются в той или иной степени постоянному хроническому радиационному воздействию огромные по численности популяции людей Чернобыльская катастрофа породила множество проблем общечеловеческого масштаба экологических, медицинских, социальных, научных и др Решение большинства из них зависит, в первую очередь, от правильной оценки степени радиационной опасности для людей, оказавшихся в ситуации вынужденного проживания на радиационно-загрязненных территориях И здесь на первое место выходит проблема такого понятия как качество жизни и, соответственно, здоровье населения, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях В биоиндикации радиационного воздействия нашли широкое применение цитогенетические методы исследования Культура лимфоцитов человека является одной из обязательных тест-систем при оценке влияния мутагенных факторов окружающей среды Одним из достоинств этой тест-системы является то, что по наблюдаемым типам аберраций можно достаточно определенно идентифицировать тип мутагенного воздействия Так, наличие в спектре наблюдаемых аберраций повышенного уровня дицентриков и центрических колец однозначно свидетельствует о радиационной природе мутагена Повышенный же уровень аберраций хроматидного типа может свидетельствовать о химической или вирусной природе мутагена Использование цитогенетического метода в популяционных исследованиях позволяет выявлять лиц с повышенным уровнем хромосомных аберраций, в особенности, долгоживущих стабильных аберраций, являющихся потенциальным источником малигнизации клеток Следовательно, индивидуальные цитогенетические показатели могут служить объективным основанием для формирования групп повышенного риска с целью последующего углубленного медицинского наблюдения

Дель работы - изучение закономерностей реализации воздействия хронического низкоинтенсивного излучения на наследственные структуры соматических клеток людей, проживающих на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения после Чернобыльской аварии Основмые задачи

1 Исследовать уровень нестабильных хромосомных аберраций у населения, проживающего на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения в результате аварии на Чернобыльской АЭС

2 Исследовать динамику нестабильных хромосомных аберраций у населения, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях в результате аварии на ЧАЭС за период 1989 - 2003 гг

3 Исследовать уровень стабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся в пренатальный и постнатальный период развития во время аварии на ЧАЭС и проживающих, впоследствии, на загрязненных радионуклидами территориях

4 Изучить сравнительный выход нестабильных и стабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся в пренатальный и постнатальный период развития во время аварии на ЧАЭС и проживающих, впоследствии, на загрязненных радионуклидами территориях

5 Изучить сравнительный выход нестабильных и стабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС в различные периоды пренатального развития

6 Сопоставить результаты наблюдаемых цитогенетических эффектов с данными медицинских обследований состояния здоровья исследуемой когорты лиц

Научная новизна. Впервые проведен сравнительный комплексный анализ «мутационного груза» в геноме соматических клеток у лиц, длительно проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях после Чернобыльской аварии, а также подвергшихся внутриутробному облучению на разных стадиях эмбриогенеза, что позволило оценить негативные последствия хронического действия низких доз радиации на популяцию людей, а также внутриутробного облучения, влияющего на морфо-функциональное формирование человеческого организма и последующего его состояния здоровья

Практическая значимость результатов. Проведенное исследование позволило получить научно-обоснованную оценку влияния отдаленных последствий Чернобыльской катастрофы на состояние здоровья населения, проживающего на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения Систематические обследования населения в загрязненных районах позволили выявить людей с повышенной частотой структурных мутаций в соматических клетках и на этой основе предложить формировать группы повышенного канцерогенного риска, подлежащие постоянному диспансерному наблюдению

Положения, выносимые на защиту

1 У детей и подростков, проживающих на радиоактивно загрязненных территориях после аварии на Чернобыльской АЭС, средняя частота нестабильных и стабильных хромосомных аберраций достоверно превышает контрольный уровень

2 Не выявлено корреляции между уровнем цитогенетических нарушений и уровнем загрязненности радионуклидами ,37Cs мест проживания обследуемых лиц в диапазоне от 20 до 1100 кБк/м2

3 У детей и подростков, проживающих на радиоактивно загрязненных территориях после аварии на Чернобыльской АЭС, повышенная средняя частота нестабильных и стабильных хромосомных аберраций сохраняется на протяжении длительного времени

4 Дети, подвергшиеся внутриутробному облучению во время аварии, более радиочувствительные по сравнению с детьми, подвергшимися облучению во время аварии в неонатальный период

5 Уровень цитогенетических нарушений при внутриутробном облучении зависит от стадии эмбрионального развития

6 Отмечается определенная взаимосвязь между повышенным уровнем хромосомных аберраций и большей вероятностью заболевания различными не онкологическими патологиями

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы отражены в 45 публикациях и доложены на практической конференции «Ликвидация последствий загрязнения радионуклидами территории Калужской облаете в результате аварии на Чернобыльской АЭС», (Калуга, 1992 г ), международном семинаре «Проблемы смягчения последствий Чернобыльской катастрофы» (Брянск, 1993 г), международном совещании «Workshop on Determmation of Rachat Doses among Critical Groups of the Population m the ESU after Chemobyl" (Munchen/Neuherberg, 1994 г), 2-ой международной конференции «Отдаленные медицинские последствия Чернобыльской катастрофы» (Киев, 1998 г), экологическом конгрессе «Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности» (Санкт-Петербург, 2000 г ), международной конференции "Проблемы радиационной генетики на рубеже веков" (Москва, 2000 г), научно-практической конференции «Наследие Чернобыля» (Калуга, 2001 г), школе-семинаре «Энергетика-3000» (Обнинск, 2001), международной конференции «Генетические последствия чрезвычайных радиационных ситуаций» (Москва, 2002 г ), международной конференции «Экология человека и природы» (Москва, 2004 г ), международной конференции "Genetic Conséquences of Emergency Radiation Situations" (Russian Fédération, Dubna, 2005), международной конференции «Актуальные проблемы дозиметрии «20 лет Чернобыля» (Минск, Беларусь, 2005 г), V съезде по радиационным исследованиям (Москва, 2006 г ), научно-практической конференции «Наследие Чернобыля» (Калуга, 2006 г ), международной конференции «Чернобыль 20 лет спустя Стратегия восстановления и устойчивого развития пострадавших регионов» (Минск, 2006)

Диссертация апробирована на научной конференции Экспериментального радиологического сектора ГУ «Медицинский радиологический научный центр» РАМН 20 декабря 2006 г (№ протокола 221)

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, четырех глав «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты исследования», «Обсуждение полученных результатов», выводов и списка литературы, включающего 244 источника Работа изложена на 203 страницах, включая 9 рисунков и 53 таблицы

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Материалом для исследования являлись клетки периферической крови контрольных доноров, и лиц, подвергшихся действию ионизирующего излучения вследствие аварии на Чернобыльской АЭС

На протяжении 15 лет после аварии на ЧАЭС проводились цитогенетические обследования групп взрослого и детского населения, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях Брянской, Калужской и Орловской обл В течение данного периода всего было обследовано рутинным цитогенетическим методом 289 взрослых в возрасте 20 - 70 лет на момент обследования и 2355 детей и подростков в возрасте 1-18 лет на момент обследования, из них 60 детей и подростков было обследовано дополнительно методом FISH В качестве контрольных групп было обследовано рутинным цитогенетическим методом 99 взрослых и 142 детей и подростков, проживающих на незагрязненных территориях Брянской и Калужской обл

Исследования, представленные в настоящей работе, были выполнены на культуре лимфоцитов периферической крови человека с использованием стандартного метафазного метода учета аберраций хромосом без кариотипирования Данный метод позволяет производить достаточно полную и точную оценку основных количественных и качественных закономерностей радиационного повреждения генетических структур соматических клеток человека

Методика культивирования лимфоцитов крови и приготовление препаратов хромосом

Культивирование лимфоцитов Кровь отбирали из локтевой вены обследуемых лиц, помещали в стерильную пробирку, содержащую раствор гепарина (200 ЕД/мл крови) В стерильных условиях образцы крови переливали по 0,8 мл в приготовленные для культивирования флаконы Карреля с культуральной средой Состав культуральной среды 6,16 мл среды МЕМ, 1,6 мл инактивированной телячьей сыворотки, 0,08 мл L-глютамина, 0,08 мл р-ра антибиотика, 0,15 мл фитогемагглютинина Флаконы помещали в термостат при 37°С для инкубации клеток в течение 48 ч Для блокирования митоза на стадии метафазы за 2 ч до окончания инкубации во флаконы добавляли раствор демеколцина в концентрации 0,2 мкг/мл среды

Гипотонизация клеток После окончания культивирования культуру клеток переливали в центрифужные пробирки и центрифугировали при 1000

об/мин в течение 15 мин для осаждения клеток Надосадочную жидкость удаляли с помощью водоструйного насоса, добавляли предварительно подогретый до 37°С,гипотонический раствор (0,75 М КС1) и ресуспендировали в нем осадок Далее пробирки с культурой клеток выдерживали на водяной бане (37°С) 10-12 мин По окончании гипотонизации вновь центрифугировали при тех же условиях с последующим удалением надосадочной жидкости

Фиксация клеток Для фиксации клеток осадок ресуспендировали в 1-1,5 мл свежеприготовленного фиксатора (смесь метилового спирта и ледяной уксусной кислоты в пропорции 3 1) на шейкере и доводили его объем до 10 мл Смену фиксатора с последующим центрифугированием производили трижды

Приготовление препаратов хромосом Препараты готовили непосредственно после окончания фиксации Суспензию клеток раскапывали на смоченные дистилированной водой, предварительно охлажденные предметные стекла После высыхания препараты гидролизовали в 5К-ном р-ре НС1 в течение 10 мин Окраска препаратов хромосом проводилась по методу Гимза

Анализ нестабильных хромосомных аберраций с помощью общепринятого стандартного метода исследования

Цитогенетический анализ проводили на световом микроскопе под иммерсией при увеличении 90x10 На каждую точку анализировали от 200 до 1000 метафаз Анализировали все виды аберраций хромосом, распознаваемых без кариотипирования Из аберраций хромосомного типа - ацентрические фрагменты (парные и точковые), центрические кольца и дицентрики Как это сейчас общепринято, к дицентрику и центрическому кольцу относили один сопутствующий парный фрагмент или парные точки (при отсутствии парных фрагментов) Поскольку ацентрические кольца и интерстициальные делении (точки) не всегда удается четко дифференцировать, а также учитывая их общий механизм образования, эти оба типа аберраций были объединены в один класс - ацентрические фрагменты Стандартный метод метафазного анализа, т е без кариотипирования, позволяет регистрировать и определенную часть стабильных аберраций Это, так называемые, аномальные моноцентрики, являющиеся в подавляющем большинстве случаев результатом реципрокной транслокации В нашем исследовании они также учитывались Чтобы уменьшить субъективизм при их идентификации, аномальные моноцентрики принимались за таковые лишь в двух случаях когда имело место удлиннение длинных плеч больших акроцентрических хромосом, либо если перестроенная (аномальная) хромосома имела плечи, превышающие длинные плечи хромосомы #2, обладающей самыми длинными плечами в кариотипе Из аберраций хроматидного типа учитывали ацентрическое фрагменты (одиночные и парные) и обменные аберрации (в целом) К аберрациям хроматидного типа относили одиночные фрагменты, изоделеции (парные фрагменты), симметричные и ассиметричные обмены

Анализ стабильных хромосомных аберраций с помощью метода FISH

В данной работе использовались две модификации метода флуоресцентной m situ гибридизации (FISH) с непрямомеченными и прямомеченными зондами При работе по методу FISH с непрямомеченными зондами использовалась смесь биотинилированных (через PCR) ДНК зондов для хромосом 2 и 3, составляющих 14,9% Перед гибридизацией слайды обрабатывали РНКазой (100 мкг/мл в 2xSSC) в течение 1 ч при 37° С Для денатурации ДНК на слайд под покровное стекло наносили раствор, состоящий из 70% деионизированного формамида, 2xSSC и 10 мМ фосфатного буфера (рН=7,0) Слайд помещали на термостолик при 80°С на 4 мин с последующим проведением через серию разведений этилового спирта 70%, 90%, 100% Затем слайды высушивали Хромосомные ДНК зонды смешивали с гибридизационным буфером и проводили денатурацию в течение 5 мин при 70°С, затем помещали сначала в ледяную воду на 5 мин и после этого на 45 мин в водяную баню при 37°С Смесь ДНК зондов для хромосом 2, 3 и 8 наносили на слайд под покровное стекло и помещали для гибридизации на ночь в термостат при 37°С После гибридизации слайды отмывали в 50% формамиде, затем в 0,lxSSC и в 0,05% Tween 20 Далее проводили иммунохимическое окрашивание, для выявления биотинилированных ДНК зондов использовали Fluorescein Avidm D (Vector Laboratories) и биотинилированный Anti-Avidm D (Vector Laboratories) На слайд поочередно наносили FITS-Avidm D (5 мг/мл, 3x30 мин) и Anti-Avidm D (5 мг/мл, 2x30 мин), инкубировали при комнатной температуре и отмывали в 0,05% Tween 20 (3x5 мин) Затем слайды проводили через серию разведений этилового спирта (70%, 90%, 100%), высушивали и наносили PI-Vectashield

При работе методом FISH с прямомеченными зондами с использованием хромосом 2, 4 и 12 (фирма ONKOR, Франция), составляющими 19% генома, применяли методику окраски, рекомендованную фирмой

Анализ проводился на флуоресцентном микроскопе фирмы Zeiss с дуальным фильтром (AHF), специфичным для FITC и PI, а также DAPI Анализировалось 360 - 1500 метафаз для каждого обследуемого При регистрации аберраций хромосом использовалась классификационная система PAINT (Protocol of Aberration Identification and Nomenclature Terminology) Оценив частоту транслокаций, в образовании которых участвуют окрашенные пары хромосом, частоту транслокаций на геном определяли по формуле, предложенной Lucas J N и соавт

f.=-*-

2,05 fP (1-fp)

где Fg - частота транслокаций на весь геном,

Fp - частота обнаруженных транслокаций в части генома,

fp - фракция генома, включенная в анализ

Статистическая обработка результатов выполнена стандартными методами РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Частота нестабильных хромосомных аберраций в контрольной группе взрослых лиц

В 1993 г было проведено цитогенетическое обследование 99 человек в возрасте 20-65 лет, проживающих на незагрязненных радионуклидами территориях Почепского р-на Брянской обл В обследованной группе не наблюдалось какой-либо возрастной зависимости индивидуальной частоты аберраций хромосомного типа, а также индивидуальной суммарной частоты аберраций хромосомного и хроматидного типа Среднегрупповые частоты отдельных типов аберраций хромосом для мужчин и женщин совпадали в пределах ошибки Полученные контрольные цитогенетические показатели не противоречат таковым, полученным в других лабораториях России и за рубежом Средняя частота аберраций хромосомного и хроматидного типа составляет 0,29+0,03 и 0,36±0,03 (на 100 клеток), соответственно Средняя суммарная частота дицентриков и центрических колец - аберраций-маркеров радиационного воздействия - 0,06±0,01 (на 100 клеток)

Частота нестабильных хромосомных аберраций в контрольной группе детей и подростков

Цитогенетическое обследование детей и подростков в возрасте 7-17 лет на момент исследования, проживающих на незагрязненных радионуклидами территориях проводилось дважды в 1993 г в Почепском р-не Брянской обл и, через 11 лет, в 2004 г в Бобынинском р-не Калужской обл Поскольку обе обследованные гр>ппы детей были однородны, распределения аберраций хромосомного типа в них соответствовали Пуассоновскому и достоверно не отличались друг от друга, то для дальнейших сравнений эти две контрольные группы были объединены в одну Таким образом, средняя частота аберраций хромосомного и хроматидного типа составила - 0,12±0,01 и 0,24±0,01 (на 100 клеток), соответственно Средняя суммарная частота дицентриков и центрических колец - 0,03±0,01 (на 100 клеток) Отношение количества аберраций хромосомного типа к хроматидному соответствовало классическому представлению о спонтанном мутагенезе у человека и составляло 1 2 Каких либо достоверных различий по полу также не обнаружено

Исследование частоты нестабильных хромосомных аберраций у взрослого населения, проживающего в загрязненных радионуклидами районах Брянской обл.

В Брянской обл цитогенетическое обследование взрослого населения проводилось в 1991- 1993 гг в 3-х районах Злынковском, Гордеевском и

Стародубском и в 2003 г в г Клинцы Численность обследованных групп варьировала от 62 до 96 человек Наиболее высокие цитогенетические показатели наблюдались при обследовании в 1991 г (через 5 лет после аварии) в Злынковском р-не, наиболее загрязненном (1080 кБк/м2) средняя частота аберраций хромосом (хромосомного и хроматидного типа) достоверно превышала контрольные значения (р<0,05, ^критерий) в 2,5 раза, а суммарная частота дицентриков и центрических колец - аберраций-маркеров радиационного воздействия - в 3,5 раза В Гордеевском и Стародубском р-нах при обследовании в 1993 г средняя частота аберраций хромосомного типа в обследованных группах была повышена, но от контрольного значения достоверно не отличалась

Исследование частоты нестабильных хромосомных аберраций у детей и подростков, проживающих в загрязненных радионуклидами районах Брянской обл.

В Брянской обл цитогенетическое обследование детей и подростков проводилось в 1991- 1993 гг в 4-х районах Злынковском, Гордеевском, Клинцовском и Стародубском Численность обследованных групп варьировала от 64 до 291 человека Наиболее высокий уровень всех цитогенетических показателей наблюдался при обследовании в 1991 г (через 5 лет после аварии) у детей и подростков, проживающих в Злынковском р-не, наиболее загрязненном средняя частота аберраций хромосомного типа достоверно превышала контрольные значения (р<0,05, ^критерий) в 4 раза, а суммарная частота дицентриков и центрических колец - в 6 раз В Гордеевском, Клинцовском и Стародубском р-нах все цитогенетические показатели достоверно превышали контрольный уровень в 2-3 раза Таким образом, проведенные в 1991-1993 гг цитогенетические обследования детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Брянской обл, позволили установить, что средняя частота нестабильных хромосомных аберраций достоверно превышает контрольный уровень во все сроки обследования и для всех обследованных районов Не обнаружено связи цитогенетических нарушений с уровнем загрязненности радионуклидами '"Се места проживания обследуемых

Исследование частоты нестабильных хромосомных аберраций в группе детей и подростков, проживающих в загрязненных радионуклидами районах Калужской обл.

Исследуемые группы включали детей и подростков, постоянно проживающих в Жиздринском и Ульяновском р-нах Калужской обл В общей сложности обследовали 333 детей и подростков в Ульяновском и 525 - в Жиздринском р-не, всего 858 человек За период наблюдения с 1989 по 2003 гг в Ульяновском р-не было проведено последовательное цитогенегическое

и

обследование 5 раз, в Жиздринском р-не - 9 раз При эгом часть детей и подростков попадали на повторное обследование от 2 до 6 раз В Жиздринском р-не средняя частота нестабильных хромосомных аберраций хромосомного и хроматидного типа была достоверно выше контрольного уровня (р<0,05, критерий) во все сроки обследования Частота аберраций хромосомного типа колебалась от 0,28 до 0,59 на 100 клеток, составляя в среднем за период наблюдения 0,40±0,01 на 100 клеток Следует отметить, что частота радиационных маркерных аберраций (дицентриков и центрических колец) также практически во все сроки наблюдения превышала контрольный уровень (р<0,05, ^критерий) в 3 — 5 раз, варьируя в диапазоне 0,10 - 0,15 на 100 клеток В Ульяновском р-не средняя частота нестабильных аберраций хромосомного и хроматидного типа была также достоверно выше контрольного уровня (р<0,05, ^критерий) во все сроки обследования Частота аберраций хромосомного типа колебалась от 0,33 до 0,46 на 100 клеток, составляя в среднем за период наблюдения 0,39±0,02 на 100 клеток Частота дицентриков и центрических колец также во все сроки наблюдения превышала контрольный уровень (р<0,05, критерий) в 2 - 4 раза, варьируя в диапазоне 0,06 - 0,13 на 100 клеток

Таким образом, проведенный в период 1989 - 2003 гг цитогенетический мониторинг позволил установить, что средняя частота нестабильных аберраций хромосомного типа в лимфоцитах периферической крови детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Калужской обл , достоверно превышала контрольный уровень без какой-либо тенденции к их снижению

Исследование частоты хромосомных аберраций в группе подростков и взрослого населения, проживающего в за! рязненных радионуклидами районах Орловской обл.

Цитогенетическое обследование проведено в 2002 г у 248 жителей Волховского, Мценского, Урицкого и Колпнянского районов Орловской обл Возраст жителей на момент исследования варьировал от 15 до 27 лет Частота всех цитогенетических показателей (хромосомного и хроматидного типа) для жителей всех 4-х районов и для каждого из районов достоверно превышала контрольные показатели (р<0,05, 1-критерий) Для жителей Волховского, Урицкого и Колпнянского р-нов суммарная частота дицентриков и центрических колец достоверно превышала контрольный уровень (р<0,05, 1:-критерий) в 4 раза, для Мценского р-на данный показатель был в 2 раза выше контрольного значения

Анализ работ, посвященных изучению частоты хромосомных аберраций у детей, облучившихся во время аварии на ЧАЭС и впоследствие проживающих на загрязненных радионуклидами территориях, показал, что часть авторов (8а1отаа й а!, 1992, Вага1е е! а1, 1998, Кузьмина и соавт , 2003)

отмечают повышение, по сравнению с контрольным уровнем, цитогенетических нарушений у данного контингента Другие авторы (Пилинская и соавт, 1992, Хандогина и соавт, 1995), при обследовании нескольких групп детей, проживающих в различных по уровню загрязнения n7Cs районах, обнаруживали повышение хромосомных аберраций не для всех обследованных групп, некоторые авторы (Padovani et al, 1993, Testa et al, 1998) не обнаруживали такого повышения вообще Необходимо отметить, что практически во всех этих работах обследованные группы были малочисленны (8-40 детей) В нашем исследовании была изучена частота хромосомных аберраций у 2355 детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами вследствие аварии на ЧАЭС территориях Брянской, Калужской и Орловской обл и было установлено, что средняя частота аберраций хромосомного типа, в том числе суммарная частота дицентриков и центрических колец (аберраций-маркеров радиационного воздействия), в группах обследованных детей, достоверно превышала контрольный уровень на протяжении всего периода наблюдения с 1989 г по 2003 г и не зависела от плотности загрязнения 137Cs места проживания в диапазоне от 20 до 1100 кБк/м2

Исследование частоты нестабильных и стабильных аберраций хромосом у детей, облучившихся внутриутробно в период аварии иа Чернобыльской АЭС

К настоящему времени уже сложилось вполне определенное мнение о том, что наиболее чувствительным к радиационному воздействию является пренатальяый период развития организма Внутриутробное развитие включает в себя ряд важных, последовательно протекающих периодов формирования человеческого организма Любое негативное воздействие на эмбрион и развивающийся плод, к числу которых, несомненно, относится и радиационное воздействие, может в последующем привести либо к его гибели, либо к возникновению врожденных пороков развития, образованию опухолей в детском возрасте и др

Изучение частоты нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно и проживающих на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения Анализ нестабильных хромосомных аберраций в группах детей, подвергшихся облучению во время аварии в период внутриутробного развития, проводился в Брянской, Калужской и Орловской областях В Брянской и Орловской областях проводились однократные обследования в 1992 и 2002 гг , соответственно В Калужской обл обследования проводились неоднократно в период 1990 - 2003 гг в 2-х районах - Ульяновском и Жиздренском Численность обследованных групп варьировала от 31 до 230 человек (табт 1)

Таблица 1 Средняя частота аберраций хромосом (на 100 клеток) у детей облучившихся внутриутробно и проживающих на радиоактивно загрязненных территориях Брянской, Калужской и Орловской обл-тей

область/год число человек число клеток хромосомный тип* хроматид тип

ацентрики дицентр и центрич кольца всего

Брянская/1992 127 35588 0,26±0,03 0,08+0,01 0,34+0,03 0,37+0,03

Калужская/19902003 Ульяновский р-н Жиздринский р-н

68 22942 0,29±0,04 0,17±0,03 0,46+0,04 0,69+0,05

230 10752 2 0,28±0,02 0Д2±0,01 0,40+0,02 0,77±0,03

Орловская/ 2002 31 16049 0,28+0,04 0,15+0,02 0,40+0,05 0,45±0,05

* - без учета аномальных моноцентриков

Как видно из представленных данных, средняя частота аберраций хромосомного типа в обследованных группах достоверно превышает (р<0,05,1;-критерий) в 3 раза контрольный уровень во всех областях Средняя суммарная частота дицентриков и центрических колец достоверно превышает контрольное значение (р<0,05, ^критерий) в 3 - 6 раз Наименьшая частота дицентриков и центрических колец (0,08±0,01 на 100 клеток) наблюдалась в Брянской обл (обследование 1992 г), а наибольшая (0,17±0,03 на 100 клеток) - в Ульяновском р-не Калужской обл (обследование 1990 г) Суммарная частота дицентриков и центрических колец у жителей Орловской и Калужской обл совпадала (в пределах ошибки) и варьировала в пределах 0,12 - 0,17 на 100 клеток

Таким образом, проведенное в 1990 - 2003 гг исследование частоты нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно и проживающих на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения, выявило повышенную, по сравнению с контрольным уровнем, частоту нестабильных аберраций хромосомного и хроматидного типа

Оценка влияния ионизирующего излучения в малых дозах на частоту нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно в период аварии на Чернобыльской АЭС и впоследствии проживающих на радиоактивно загрязненных территориях

В 2007 г сотрудниками Российского государственного медико-дозиметрического регистра (РГМДР, г Обнинск) были любезно предоставлены средние индивидуальные накопленные эффективные дозы внешнего и

внутреннего облучения для 155 детей, облучившихся внутриутробно в период аварии на Чернобыльской АЭС и впоследствии проживающих в Жиздринском р-не Калужской обл Это позволило сформировать две подгруппы лиц 1-е индивидуальными дозами в диапазоне 3,12-9,78 мЗв, средняя доза 7,4 мЗв и II -с индивидуальными дозами в диапазоне 10,00-23,88 мЗв, средняя доза 14,6 мЗв Таким образом, средние индивидуальные дозы в подгруппах отличались в 2 раза Сопоставление средней индивидуальной дозы и средней частоты аберраций хромосомного типа, а также средней суммарной частоты дицентриков и центрических колец в исследуемых подгруппах, представлены в таблице 2 Видно, что цитогенетические показатели достоверно выше в подгруппе с более высокой средней дозой по сравнению с подгруппой с меньшей дозой (р<0,05, t-критерий)

Таблица 2 Сопоставление средних индивидуальных накопленных эффективных доз внешнего и внутреннего облучения и средней частоты аберраций хромосомного типа, а также средней суммарной частоты дицентриков и центрических колец в исследуемых подгруппах

Число лиц Диапазон доз, мЗв Средняя доза, мЗв Частота аберрации хромосомного типа, на 100 клеток Частота дицентрик и центрич колец, на 100 клеток

112 3,12-9,78 7,4 0,36+0,03 0,09+0,02

43 10,00-23,88 14,6 0,47±0,04 0,16±0,03

Таким образом, в группе детей, облучившихся внутриутробно в период аварии на Чернобыльской АЭС и впоследствии проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях наблюдается определенная дозовая зависимость выхода аберраций хромосомного типа, а также суммарной частоты дицентриков и центрических колец - аберраций-маркеров радиационного воздействия - от средней индивидуальной накопленной эффективной дозы внешнего и внутреннего облучения

Динамика нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно и проживающих в Брянской области Дважды, в 1992 г и, повторно, в 2003 г, было проведено ци гогенетическое обследование одних и тех же 21 подростков, подвергшихся в результате аварии на Чернобыльской АЭС внутриутробному облучению, постоянно проживающих в г Клинцы Брянской обл При первичном обследовании в 1992 г практически все цитогенетические показатели (ацентрические фрагменты, дицентрики и центрические кольца, аномальные

моноцентрики и хроматидный тш аберраций) в обследованной группе были достоверно выше контрольных значений (р<0,05, t-критерий), а средняя суммарная частота дицентриков и центрических колец - аберраций-маркеров радиационного воздействия - превышала контрольное значение более чем в 3 раза Практически третья часть обследованной группы (28%) являлись носителями аберраций-маркеров радиационного воздействия При обследовании этих же подростков через 10 лет (в 2003 г) суммарная частота дицентриков и центрических колец снизилась в 2 раза (0,10 и 0,05 на 100 клеток соответственно), за счет центрических колец Частота ацентрических фрагментов уменьшилась незначительно 0,24 и 0,19 (на 100 клеток) соответственно Более чем в 2 раза уменьшилось в обследованной группе и число носителей (11%) аберраций-маркеров радиационного воздействия

В обследовании также регистрировали аномальные моноцентрики, несмотря на то, что в спектре хромосомных аберраций, при так называемом, рутинном цитогенетическом анализе, т е под световым микроскопом и без кариотипирования данный метод позволяет учитывать лишь небольшую, максимум 20%, часть таких аберраций, которые являются, в основном, реципрокными транслокациями (стабильный тип аберраций) При обследовании в 1992 г частота аномальных моноцентриков, хотя и была выше контроля, но достоверно от него не отличалась Число носителей в обследованной группе такого типа аберраций составляло 5,6% При повторном обследовании в 2003 г наблюдаемая частота аномальных моноцентриков увеличилась в 1,5 раза и в 3 раза (17%) увеличилось число носителей такого типа аберраций

Таким образом, результаты проведенного исследования позволяют сделать следующий основной вывод частота нестабильных аберраций хромосомного типа у обследованных лиц, за счет процессов элиминации из периферической крови поврежденных клеток, незначительно снижается со временем, но остается выше контрольного уровня, в то время как частота стабильных аберраций, наоборот, имеет тенденцию к некоторому повышению

Изучение частоты стабильных аберраций хромосом методом FISH у детей, облучившихся внутриутробно и проживающих в Жиздринском р-не

Исследование частоты стабильных аберраций методом FISH было выполнено в 2003 г в Жиздринском р-не Калужской обл Была обследована группа из 39 подростков в возрасте 17 лет на момент обследования, облучившихся во время аварии внутриутробно К сожалению, из-за крайне дорогих реактивов, не было возможности обследовать собственную контрольную группу Поэтому в качестве таковой использовали данные литературы для детей и подростков в возрастном диапазоне 0-19 лет частота транслокаций варьировала в пределах 0-0,19 на 100 клеток генома, вне

зависимости от номеров окрашенных хромосом (Хандогина и соавт, 1995, Воробцова и соавт, 2000, Tucker et al, 1994, Scarpato et al, 1997, Lukas et al, 1999, Chenyan et al, 1999, Whitehouse et al, 2005) В среднем по данным 7 лабораторий частота транслокаций составляет 0,08+0,02 на 100 клеток генома В обследованной группе транслокации были обнаружены у 27 (69%) человек из 39 Индивидуальные частоты транслокаций варьировали в пределах 0 -0,90±0,63 на 100 клеток генома и превышали контрольный уровень от 2 до 11 раз Среднегрупповая частота трансчокаций достоверно превышала средний контрольный уровень (р<0,05, t-критерий) 0,26+0,01 и 0,08+0,02 (на 100 клеток генома), соответственно Помимо транслокаций, у 17 (43%) из 39 обследованных детей встречались делегированные хромосомы Таким образом, у 82% обследованных (32 человека) были обнаружены клетки со стабильными хромосомными перестройками, в то время как в контрольной группе эта величина была в 2 раза ниже и составляла 42% Поскольку у этих же лиц параллельно проводился и анализ нестабильных хромосомных аберраций при стандартной окраске по Гимза, представляло интерес сравнить наблюдаемую у одних и тех же лиц частоту дицентриков и транслокаций, теоретически ожидаемая частота которых должна составлять 1 1 В обследованной группе средняя частота дицентриков составила 0,09±0,01 (на 100 клеток), а транслокаций - 0,26+0,01 (на 100 клеток генома), те частота транслокаций почти в 3 раза превышала частоту дицентриков Аналогичная картина наблюдалась и по числу носителей дицентриков и транслокаций дицентрики наблюдались у 10 человек (25%), а транслокации - у 27 (69%)

Таким образом, частота стабильных аберраций у детей, облучившихся во время аварии внутриутробно и проживающих на загрязненных радионуклидами территориях, достоверно выше, чем у детей, проживающих на незагрязненных территориях Число носителей стабильных аберраций в обследованной группе в 2 раза превышает этот показатель в контрольной группе

Сравнительный анализ выхода нестабильных и стабильных хромосомных аберраций в группах детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития и неонатально

Сравнительный анализ средней частоты нестабильных хромосомных аберраций в группах детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития и неонатально, и проживающих на загрязненных территориях Брянской, Калужской и Орловской обл показывает, что по общей частоте хромосомных и хроматидных аберраций не наблюдается достоверных различий (р>0,05, t-критерий) между сравниваемыми группами во всех обследованных областях Однако средняя суммарная частота дицентриков и центрических колец - аберраций-маркеров радиационного воздействия, в группах детей, подвергшиеся облучению во время аварии в период внутриутробного развития на 20-30% была выше, чем в группах детей,

подвергшиеся облучению во время аварии в неонатальный период во всех 3-х обследованных областях

Сравнительный анализ частоты стабильных хромосомных аберраций (транслокаций) в группах детей, подвергшихся облучению во время аварии в период внутриутробного развития и в неонатальный период, показывает, что по средней частоте транслокаций не наблюдается достоверных различий между сравниваемыми группами 0,26±0,01 и 0,27+0,01 на 100 клеток генома, соответственно Однако число носителей транслокаций в группе лиц, облучившихся внутриутробно, в 1,5 раза выше по сравнению с облучившимися в неонатальный период

Таким образом, дети, подвергшиеся облучению во время аварии в период внутриутробного развития, более радиочувствительны по сравнению с детьми, подвергшимися облучению во время аварии в неонатальный период

Зависимость частоты нестабильных и стабильных хромосомных аберраций в группах лиц, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС в различные периоды пренатального развития С учетом последовательности морфогенеза, в пренатальном развитии человеческого организма выделяют три главных периода эмбриональный (до 8 недель), ранний (с 9 по 28 недели) и поздний (с 29 по 40 недели беременности) фетальные периоды Анализ литературы показал отсутствие работ, направленных на изучение данной проблемы Исследования частоты нестабильных хромосомных аберраций в группах лиц, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС в различные периоды пренатального развития, проводились в г Клинцы Брянской обл в 1992 г, в Калужской обл в период с 1989 г по 2003 г , и частоты стабильных хромосомных аберраций - в г Жиздра Калужской обл в 2003 г Было установлено что, в группе детей, облучившихся во время аварии на ЧАЭС внутриутробно в различные периоды пренатального развития и проживающих впоследствии на загрязненных радионуклидами территориях, наибольшая частота аберраций хромосомного типа, а также суммарная частота дицентриков и колец - аберраций-маркеров радиационного воздействия, наблюдается в 1-ом гестационном периоде развития плода (0-8 недель) Все 100% детей, облучившихся в период аварии на стадии 1-го гестационного периода, оказались «носителями» стабильных аберраций

Учитывая все вышеизложенное, можно предположить, что в условиях длительного воздействия низких доз радиации у детей, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях, а наиболее выражено эти процессы наблюдаются в группе детей, подвергшихся внутриутробному облучению во время Чернобыльской аварии, к спонтанным повреждениям ДНК, возникающих в профелирующих клетках при молекулярно-генетических процессах транскрипции, трансляции, репликации и тд, добавляются

радиационно-индуцированные повреждения Нерепарированные повреждения реализуются либо в хромосомные аберрации, либо остаются в виде потенциальных повреждений, часть из которых могут быть долгоживущими и, как отмечено в работе (Сусков и соавт, 2006 ), долгоживущие потенциальные повреждения могут служить исходным материалом для геномной нестабильности, которая, по мнению многих исследователей, может лежать в основе развития не только радиационного канцерогенеза, но и в развитии отдаленных неканцерогенных соматических заболеваний (Пелевина и соавт, 2006)

Результаты сопоставления наблюдаемых цитогенетических эффектов с данными медицинских обследований состояния здоровья иследуемой когорты лиц

Для проживающего на загрязненных территориях населения после аварии на ЧАЭС характерно устойчивое повышение общей заболеваемости, в особенности прирост заболеваний щитовидной железы Одновременно, как показано выше, у данного населения отмечается повышенный уровень цитогенетических нарушений Хотя пока еще нет прямых доказагельств влияния повышенного уровня мутаций в соматических клетках на здоровье людей, однако накапливается все больше данных об определенном их вкладе в развитие ряда заболеваний

Изучение частоты нестабильных хромосомных аберраций у лиц с выявленной патологией щитовидной железы Исследование выполнено на образцах периферической крови 472 жителей различных районов Калужской и Орловской обл, загрязненных радионуклидами вследствие Чернобыльской аварии В Калужской обл УЗИ щитовидной железы было выполнено у 224 человек, из них не обнаружено отклонений от нормы у 175 (78%) человек Различные формы патологий выявлены у 49 (22%) человек Средний возраст лиц в группе на момент обследования составлял 15 лет, с вариацией от 11 до 31 года В Орловской обл группа из 248 человек для цитогенетического обследования формировалась по методике эпидемиологического исследования - case-control, при этом 121 человек из числа обследованных с помощью УЗИ имели узловые новообразования в щитовидной железе Каждому случаю с патологией щитовидной железы были подобраны 1-2 лица без патологии щитовидной железы сходного возраста, пола и места жительства, которые и составили остальные 127 человек Средний возраст жителей на момент обследования составлял 21 год, с вариацией от 15 до 27 лет Был проведен сравнительный анализ частоты хромосомных аберраций у лиц без патологии щитовидной железы и с узловыми новообразованиями Статистически значимой зависимости между величиной хромосомных аберраций и заболеваниями

щитовидной железы не выявлено при обследовании в обеих областях (р>0,05,1:-критерий) При этом следует отметить, что для средней суммарной частоты дицентриков и центрических колец в группе с патологией щитовидной железы в Орловской обл наблюдался более выраженный цитогенетический эффект 0,13±0,01 и 0,11+0,01, соответственно У жителей Калужской обл эффект был противоположный, те в группе с патологией щитовидной железы частота дицентриков и центрических колец была достоверно ниже по сравнению с группой с нормальной щитовидной железой Возможно, это объясняется тем, что лица с нормальной щитовидной железой проживают в более радиационно-загрязненных деревнях

Был также проведен анализ зависимости относительной доли выявленных патологий щитовидной железы от частоты аберраций хромосомного типа в лимфоцитах периферической крови Для этого группы обследованных ранжировались по индивидуальной частоте аберраций хромосом и подразделялись на две подгруппы с «низким» (0-50% процентиль) и «высоким» (50-100% процентиль) уровнем хромосомных аберраций Доля выявленных патологий щитовидной железы в подгруппе вычислялась как отношение числа патологий к числу обследованных в подгруппе Было установлено, что для обеих областей процент лиц с заболеванием щитовидной железы был выше в группе «высокий» уровень цитогенетических нарушений Наиболее выражено это проявлялось в группе лиц, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС и проживающих в Орловской обл 66,7% и 31,8%, соответственно

Изучение частоты нестабильных хромосомных аберраций у лип с гинекологической патологией В 2003 г было проведено цитогенетическое обследование 62 женщин репродуктивного возраста (28-46 лет), проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях Брянской обл Обследованная группа состояла из 2-х подгрупп 23 женщины с доброкачественными гинекологическими опухолями и 39 клинически здоровых женщин Контрольную группу составили женщины соответствующего возраста, проживающие на незагрязненных территориях Брянской обл и обследованные в 1993 г В группе клинически здоровых женщин все цитогенетические показатели были на уровне контрольных значений (в пределах ошибки) В группе женщин с доброкачественными гинекологическими опухолями частота аберраций хромосомного типа была выше контрольной величины 0,35±0,05 и 0,25±0,04, соответственно При этом суммарная частота дицентриков и центрических колец достоверно превышала (р<0,05, ^-критерий) аналогичный показатель в группе клинически здоровых женщин (0,13+0,03 и 0,04±0,01, соответственно) в 3 раза и контрольную величину в 2 раза Почти половина обследованных женщин (44%) из группы с доброкачественными гинекологическими опухолями являются носителями

аберраций-маркеров, а в группе клинически здоровых женщин - только 13% В таблице 3 приведены результаты анализа зависимости относительной доли женщин с выявленными доброкачественными гинекологическими опухолями от частоты аберраций хромосомного типа в лимфоцитах периферической крови Для этого группа обследованных (женщины с доброкачественными гинекологическими опухолями и клинически здоровые) ранжировалась по индивидуальной частоте аберраций хромосом и подразделялась на две подгруппы с «низким» (0-50% процентиль) и «высоким» (50-100% процентиль) уровнем хромосомных аберраций

Таблица 3 Соотношение частоты хромосомных аберраций (на 100 клеток) и доброкачественных гинекологических заболеваний в группе обследованных женщин Брянской обл в зависимости от уровня аберраций хромосом

Уровень аберраций Аберрации хромосомного типа* Число лиц Число лиц с заболеванием Процент лиц с заболеванием

низкий 0,08±0,02 41 13 31,7+6,2

высокий 0,68+0,08 21 10 47,6±21,8

*- без учета аномальных моноцентриков

Таким образом, количество женщин с заболеваниями доброкачественными гинекологическими опухолями больше на 50% в подгруппе с «высоким» уровнем аберраций, чем в подгруппе с «низким» уровнем хромосомных аберраций В данном исследовании, как было показано ранее, у женщин с доброкачественными гинекологическими опухолями значительно повышена частота дицентриков и центрических колец - аберраций-маркеров радиационного воздействия, что может служить косвенным доказательством связи данной патологии с радиационным фактором.

Анализ взаимосвязи цитогенетических нарушений и выявленных соматических заболеваний В период 1990-2003 гг было проведено цитогенетическое обследование 407 жителей Жиздринского р-на Калужской обл За тот же период времени были проанализированы выявленные в данной группе заболевания, которые потенциально могли бы коррелировать с повышенным уровнем хромосомных аберраций в лимфоцитах крови Был проведен статистический анализ соотношения частоты хромосомных аберраций с выявленной заболеваемостью Выявленные заболевания в группе за период 1990-2003 гг были классифицированы в соответствии с Международной классификацией болезней (таблица 4)

Таблица 4 Классификация различных заболеваний, выявленных за период цитогенетического наблюдения 1990-2003 гг

Кодировка Название класса Число случаев*

С Болезни эндокринной системы (специфические) 7

С* (Б) Болезни эндокринной системы (эндемические) 91

Б Болезни крови и кроветворных органов, включая болезни кровообращения 103

Н Болезни органов пищеварения 38

0 Практически здоров или не классифицирован 202

* - при наличии более одного заболевания один человек может учитываться более чем в одном классе

Для статистического анализа был выбран метод оценки частоты заболеваний в 3 подгруппах, состав которых определялся индивидуальным значением частоты аберраций хромосомного типа Во всей обследованной группе эта частота варьировалась от 0 до 2 аберраций/100 клеток На основании рассчитанного распределения по данной частоте были оценены 33% и 66% процентили, необходимые для определения состава 3-х подгрупп Указанные величины составили 0,20 и 0,50 аберраций/100 клеток, соответственно

Для обследованной когорты не было обнаружено значимой взаимосвязи между частотой аберраций хромосомного типа (суммарная частота ацентриков, дицентриков и центрических колец) и заболеваемостью как для всех видов заболеваний, так и для отдельных их видов (р>0,05, Меритерий)

Дополнительно была проанализирована подгруппа из 120 человек, облучившихся внутриутробно во время аврии на ЧАЭС В таблице 5 представлена классификация различных заболеваний, выявленные за период цитогенетического наблюдения 1990-2003 гг для данной подгруппы

В связи с тем, что группа была небольшая, для статистического анализа был выбран метод оценки частоты заболеваний в 2-х подгруппах, состав которых определялся значением индивидуальной частоты аберраций хромосомного типа

Для обследованной группы лиц, облучившихся во время аварии внутриутробно, не было вьивлено значимой взаимосвязи между частотой аберраций хромосомного типа (суммарная частота ацентриков, дицентриков и центрических колец) и общего количества заболеваний, а из отдельных их форм - для болезней эндокринной системы (эндемических), болезней крови и

Таблица 5 Классификация различных заболеваний, выявленных за период цитогенетического наблюдения 1990-2003 гг для лиц, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС

Кодировка Название класса Число случаев*

С* (1?) Болезни эндокринной системы (эндемические) 27

О Болезни крови и кроветворных органов, включая болезни кровообращения 29

Н Болезни органов пищеварения 15

0 Практически здоров или не классифицирован 55

*- при наличии более одного заболевания один человек может учитываться более чем в одном классе

кроветворных органов, включая болезни кровообращения (р>0,05, ^критерий) Однако для болезней органов пищеварения процент лиц с заболеванием оказался выше почти в 3 раза в группе лиц с «высоким» уровенем хромосомных аберраций Различия между числом заболевших с «низким» уровнем хромосомных аберраций и «высоким» являлись достоверными при 1% уровне значимости ^-критерий)

Анализ взаимосвязи цитогенетических нарушений и выявленных заболеваний органов дыхания в группах детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития и постнатально

Из цитогенетически обследованных 407 жителей Жиздринского р-на Калужской обл были сформированы 2 подгруппы детей и подростков, наиболее систематически посещавших врача в период 1986-2003 гг, для анализа взаимосвязи цитогенетических нарушений и выявленных заболеваний органов дыхания ОРВИ, ангины, бронхиты, тонзилиты, лимфодениты В I подгруппу вошло 108 детей облучившихся неонатально, во II - 76 детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития (таблица 6)

Из представленных данных видно, что средняя частота заболеваний органов дыхания за период 1986-2003 гг в пересчете на человека в группе детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития достоверно выше, чем в группе облучившихся неонатально (р<0,05, ^критерий) Также достоверно выше в группе внутриутробно облучившихся и средняя частота аберраций хромосомного типа 0,38±0,02 и 0,22±0,02 (р<0,05, Окритерий), соответственно

Таблица 6 Средняя частота аберраций хромосомного типа и выявленных заболеваний органов дыхания в период 1986-2003 гг в группах детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития и постнатально

подгруппа облучившихся во время аварии на ЧАЭС Число лиц число клеток Средняя частота аберраций хромосомного типа/100 кл ±ЗЕ Средняя частота заболеваний/ человека+ЭЕ

неонатально 108 66 124 0,22±0,02 3,62+0,02

внутриутробно 76 73290 0,38±0,02 6,3310,03

Таким образом, проведенный комплексный факторный анализ результатов медицинских осмотров и цитогенетических обследований детей и подростков, подвергающихся хроническому воздействию малых доз радиации в загрязненных районах Калужской обл после аварии на ЧАЭС, показывает, что у детей, подвергшихся во время аварии на ЧАЭС внутриутробному облучению, с «высоким» уровнем хромосомных аберраций почти в 3 раза увеличивается риск заболевания органов пищеварения Частота заболеваний органов дыхания в данной группе детей достоверно выше, чем у детей облучившихся неона! ально

24 1

ВЫВОДЫ

1 При популяционно-цитогенетическом обследовании детей и подростков, проживающих в течение 17 лет на радиоактивно загрязненных территориях Брянской, Калужской и Орловской обл после аварии на Чернобыльской АЭС, выявлена достоверно повышенная (в 2-3 раза) частота нестабильных и стабильных хромосомных аберраций по сравнению с контрольным уровнем

2 При динамическом цитогенетическом обследовании в течение 17 лет после аварии детей и подростков Калужской обл установлено, что достоверно повышенный (в 2-5 раз) по сравнению с контрольным, уровень дицентриков и центрических колец - маркерных аберраций радиационного воздействия, сохраняется на протяжении всего периода наблюдения без какой-либо тенденции к их снижению

3 У детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС и проживающих в последствии на территориях Брянской, Калужской и Орловской обл с различной плотностью радиоактивного загрязнения 137С5, выявлен еще более повышенный уровень нестабильных и стабильных хромосомных аберраций, при этом, суммарная частота дицентриков и центрических колец достоверно превышает контрольный уровень в 3 - 6 раз

4 Не обнаружено какой-либо зависимости цитогенетических нарушений от уровня загрязнения радионуклидами |37Сб мест проживания обследуемых лиц в диапазоне от 20 до 1100 кБк/м2 Однако у детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на Чернобыльской АЭС и впоследствии проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях, наблюдается определенная дозовая зависимость выхода аберраций хромосомного типа, а также суммарной частоты дицентриков и центрических колец от средней индивидуальной накопленной эффективной дозы внешнего и внутреннего облучения в диапазоне доз 7,4 — 14,6 мЗв

5 Обнаружены различия в уровне цитогенетических нарушений при внутриутробном облучении в зависимости от стадии эмбрионального развития - наибольшая частота аберраций хромосомного типа, а также суммарная частота дицентриков и центрических колец, наблюдается при облучении в 1-ом гестационном периоде развития плода (0-8 недель) Все 100% детей, облучившихся в период аварии на 1-ой стадии гестационного периода, оказались «носителями» стабильных аберраций

6 Сравнительный анализ результатов медицинских осмотров и цитогенетических обследований детей и подростков, подвергающихся хроническому воздействию малых доз радиации в загрязненных районах Калужской обл после аварии на ЧАЭС, в целом не выявил достоверной взаимосвязи между частотой хромосомных аберраций и заболеваемостью, как для суммы всех видов заболеваний, наблюдаемых в обследованной когорте, так и для отдельных их форм

7 Тем не менее, прослеживалась определенная тенденция такой взаимосвязи в группах лиц с повышенным уровнем аберраций хромосомного типа с заболеваемостью щитовидной железы Наиболее четко это проявлялось в группе детей, облучившихся во время аварии на ЧАЭС внутриутробно количество лиц с патологией щитовидной железы в подгруппе с повышенным уровенем аберраций хромосомного типа было больше на 44% в Калужской обл и в 2 раза - в Орловской обл по сравнению с подгруппой с низким уровнем цитогенетических нарушений

8 Выявлена аналогичная тенденция взаимосвязи циюгенетических нарушений с доброкачественными гинекологическими заболеваниями в подгруппе женщин с повышенным уровенем аберраций хромосомного типа частота этих заболеваний была выше, чем у женщин с низкий уровнем аберраций Учитывая, что у женщин с доброкачественными гинекологическими опухолями достоверно (по сравнению с практически здоровыми женщинами) была выше частота дицентриков и центрических колец -аберраций-маркеров радиационного воздействия, последнее может служить определенным доказательством связи наблюдаемой патологии с воздействием радиационного фактора

9 Достоверно взаимосвязь цитогенетических нарушений с некоторыми формами общесоматической патологии проявлялась у детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС Так, у детей с повышенным уровнем хромосомных аберраций в 3 раза чаще встречались заболевания органов пищеварения и в 2 раза органов дыхания

10 В целом, анализ полученных результатов многолетнего цитогенетического мониторинга населения, постоянно проживающего на загрязненных радионуклидами территориях после аварии на ЧАЭС свидетельствует о том, что наиболее пострадавшей при аварии когоргой населения являются дети, из которых наиболее критической группой, требующей постоянного медицинского наблюдения, являются те, кто подвергся внутриутробному облучению во время аварии

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Севанькаев А В , Жлоба А А , Потетня О И , Завитаева Т А , Козлов В M , Анкина M А , Голуб Е В , Михайлова Г Ф , Поздышкина О В , Епифанова H В , Дьяченко Г Л Результаты цитогенетического обследования детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Калужской области// В сб Материалы к научно-практической конференции Ликвидация последствий загрязнения радионуклидами территории Калужской области в результате аварии на Чернобыльской АЭС - Калуга, 1992 -С 37-40

2 Севанькаев А В , Жлоба А А , Потетня О И , Моисеенко В В , Завитаева Т А , Пятенко В С , Козлов В M , Анкина M А , Голуб Е В , Михайлова Г.Ф , Поздышкина О В , Епифанова H В , Дьяченко Г Л , Кузьмин П О , Ремизов А А , Бомбуров В А Сравнительная частота аберраций хромосом у детей, проживающих на территориях Брянской области с разным уровнем радионуклидного загрязнения//' В сб Проблемы смягчения последствий Чернобыльской катастрофы (материалы международного семинара) -Брянск, 1993 - 4 1 -С 231-234

3 Севанькаев А В , Жлоба А А , Потетня О И , Анкина M А , Голуб Е В , Епифанова H В , Завитаева Т А , Козлов В M , Михайлова Г Ф , Моисеенко В В, Поздышкина О В, Пятенко В С Результаты сравнительного цитогенетического обследования детей и подростков, проживающих в загрязненных районах Брянской области, в зависимости от стадии онтогенеза на момент Чернобыльской аварии// В сб Медицинские аспекты влияния малых доз радиации на организм детей, подростков и беременных -Обнинск, Москва, 1994 -Вып2 - С 60-64

4 Севанькаев А В , Жлоба А А , Потетня О И, Моисеенко В В , Завитаева Т А , Козлов В M , Анкина M А , Голуб Е В , Михайлова Г Ф , Поздышкина О В, Епифанова H В , Дьяченко Г Л Результаты цитогенетического обследования детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Калужской области// В сб Медицинские аспекты влияния малых доз радиации на организм детей, подростков и беременных - Обнинск, Москва, 1994 - Вып 2 - С 54-59

5 Севанькаев А В , Жлоба А А , Потетня О И , Завитаева Т А , Козлов В M , Анкина M А , Голуб Е В , Михайлова Г Ф , Поздышкина О В , Епифанова H В , Дьяченко Г Л Результаты цитогенетического обследования детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Калужской области// Радиация и риск Бюллетень эпидемиологического регистра - 1994 - Вып 4 - С 121-124

6 Sevankaev А V , Zloba А А , Mikhailo\a G F , Moiseenko V V , Potetnya ОI, Saenko V A Results of chromosome aberration rate exammation in persons residmg the terntones polluted after the Chernobyl accident// Int Intern Workshop on Determmation of Radiat Doses among Critical Groups of the

Population m the ESU after Chernobyl Munchcn/Neuherberg, Okt 24-25, 1994 -P 7

7 Севанькаев А В , Потетня О И , Жлоба А А , Моисеенко В В , Потетня В И , Анкина М А , Голуб Е В , Епифанова Н В , Завитаева Т А , Козлов В М , Михайлова Г Ф, Поздышкина О В, Пятенко В С Результаты цитогенетического обследования детей и подростков, проживающих в загрязненных радионуклидами районах Калужской области// Радиобиология Радиоэкология -1995 -Т35 -№5 -С 581-588

8 Севанькаев А В , Жлоба А А, Потетня О И, Анкина М А , Голуб Е В , Епифанова Н В , Завитаева Т А , Козлов В М , Михайлова Г Ф , Моисеенко В В , Поздышкина О В , Пятенко В С Результаты цитогенетического обследования детей и подростков, проживающих в загрязненных радионуклидами районах Брянской области// Радиобиология Радиоэкология -1995 -Т35 -№5 - С 607-611

9 Sevan'kaev А V , Khvostunov I К, Potetnya О I, Mikhailova G F, Golub EV, Poschshkma О V, Pyatenko V S, Zavitaeva T A, Shepel N N, Semeonova T G , Epifatiova N V Cytogenetic effects m population inhabiting areas contaminated with radionuclides after Chernobyl accident// Тезисы Международного конгресса "Энергетика-3000" - Обнинск, октябрь, 1998 -С 78

10 Sevan'kaev А V, Lloyd D С , Edwards А \ , Mikhailova G F , Nugis V Yu , Domracheva E V, Baranov A E , Davtian A A , Gordeeva A A , Gusev J A , Guskova А К , Moiseenko V V, Olshanskaya Yu V Protracted overexposure to a caesium-137 source I-Dose reconstraction// Radiation Protection Dosimetry -1999 - Vol 81 -№2 - P 85-90

11 Севанькаев А В , Эрнестова Л С , Потетня О И , Голуб Е В , Михайлова Г Ф , Хвостунов И К , Семенова Т Г , Шепель Н Н , Цепенко В В Оценка цитогенетических эффектов низких доз радиации у населения, проживающего на радиоактивно загрязненных территориях после Чернобыльской аварии// Труды Международного экологического конгресса «Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности», Санкт-Петербург, 14-16 июня 2000 - Санкт-Петербург Балтийский государственный технический университет, 2000 -Т2 - С 314-316

12 Михайлова ГФ, Цепенко ВВ, Голуб ЕВ Исследование частоты стабильных хромосомных аберраций у детей и подростков, проживающих на радиоактивно загрязненных территориях Калужской области, в плане возможной оценки риска возникновения онкологических заболеваний// Сб материалов конференции «Энергетика-3000», Обнинск, 3-6 декабря 2001 -Обнинск Обнинский институт атомной энергетики, 2001 -С 155-160

13 Севанькаев А В , Потетня О И, Михайлова Г Ф, Голуб Е В , Козлов В М, Поздышкина О В , Пятенко В С , Шепель Н Результаты цитогенетического обследования детей и подростков, проживающих в загрязненных

радионуклидами районах Калужской области, после аварии на Чернобыльской АЭС'/ Наследие Чернобыля Материалы научно-практической конференции (под ред В А № натова) - Калуга "Облиздат", 2001 -С 251

14 Голуб Е В , Михайлова Г Ф , Потетня О И , Цепенко В В , Севанькаев А Сравнительная оценка частоты стабильных и нестабильных аберраций хромосом у детей и подростков, проживающих на загрязненных территориях Калужской области// Наследие Чернобыля Материалы научно-практической конференции (под ред В А Игнатова) - Калуга "Облиздат", 2001 -С 255

15 Михайлова Г Ф , Потетня О И , Хвостунов И К , Шепель Н Н, Голуб Е В , Севанькаев А В, Матвеенко Е Г, Паршин В Частота хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови детей с различными лучевыми нагрузками на щитовидную железу и с различными заболеваниями щитовидной железы в отдаленный период после Чернобыльской аварии// Наследие Чернобыля Материалы научно-практической конференции (под ред В А Игнатова) - Калуга "Облиздат", 2001 -С 253

16 Михайлова Г Ф , Потетня О И , Хвостунов И К , Шепель Н Н , Голуб Е В , Козлов В М , Пятенко В С , Поздышкина О В , Севанькаев А В Частота мультиаберрантных клеток у лиц, подвергшихся радиационным последствиям Чернобыльской аварии// Наследие Чернобыля Материалы научно-практической конференции (под ред В А Игнатова) - Калуга "Облиздат", 2000 - С 254

17Потегня О И, Михайлова ГФ, Голуб ЕВ, Козлов ВМ, Пятенко ВС, Севанькаев А В , Боровикова М П Динамика цитогенетических нарушений во времени у детей и подростков, проживающих в загрязненных радионуклидами районах Калужской области// Наследие Чернобыля Материалы научно-практической конференции (под ред В А Игнатова) -Калуга "Облиздат", 2001 -С 252

18 Михайлова Г Ф , Голуб Е В , Потетня О И , Цепенко В В , Севанькаев А В Сравнительная оценка частоты стабильных и нестабильных аберраций хромосом у детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Ульяновского района Калужской области// Тез докладов Международной конференции "Генетические последствия чрезвычайных радиационных ситуаций", Москва, 10-13 июня 2002 -Москва, Изд-во университета Дружбы народов, 2002 - С 197

19 Михайлова Г Ф , Голуб Е В , Потетня О И , Цепенко В В , Севанькаев А В , Матвеенко Е Г, Паршин В С Частота хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови детей с различными лучевыми нагрузками на щитовидную железу в отдаленный период после Чернобыльской аварии/' Тез докладов Международной конференции "Генетические последствия чрезвычайных радиационных ситуаций",

Москва, 10-13 июня 2002 - Москва, Изд-во университета Дружбы народов, 2002 -С 198

20 Михайлова Г Ф , Потетня О И , Цепенко В В , Пятенко В С , Хвостунов И К , Севанькаев А В Динамика цитогенетических нарушений у детей и подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Жиздринского района Калужской области// Тез докладов Международной конференции "Генетические последствия чрезвычайных радиационных ситуаций", Москва, 10-13 июня 2002 - Москва, Изд-во университета Дружбы народов, 2002 - С 199

21 Севанькаев А В , Потетня О И , Голуб Е В, Михайлова Г Ф , Пятенко В С , Цепенко В В , Шепель Н Н, Хвостунов И К Сравнительное изучение частоты хромосомных аберраций в лимфоцитах крови детей и подростков, подвергшихся радиационному воздействию при Чернобыльской аварии на разных стадиях онтогенеза// Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук - Вып 3 - Калуга, 2002 - С 304-306

22 Севанькаев А В , Потетня О И , Михайлова Г Ф , Хвостунов И К , Пятенко В С, Поздышкина О В, Голуб Е В, Шкаврова Т Г Частота цитогенетических нарушений в лимфоцитах периферической крови у жителей Орловской области, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях после Чернобыльской аварии// Радиация и Риск Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологического регистра - Обнинск-Москва - Спец выпуск - 2003 - С 87-95

23 Севанькаев А В , Замулаева И А , Потетня О И , Голуб Е В , Михайлова Г.Ф , Пятенко В С , Цепенко В В , Шкаврова Т Г , Смирнова С Г, Орлова Н В , Хвостунов И К, Боровикова М П ,Омарасхабов Н О Сравнительное изучение частоты генных и структурных соматических мутаций в лимфоцитах крови детей и подростков, подвергшихся радиационному воздействию при Чернобыльской аварии на разных стадиях онтогенеза // Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук - Вып 5 - Калуга, 2003 - С 244-248

24 Хвостунов И К, Севанькаев А В , Михайлова Г Ф , Потетня О И , Цепенко В В , Шепель Н Н , Боровикава М П ,Омарасхабов Н О Сравнительное влияние неблагоприятной экологической обстановки на здоровье населения, проживающего на радиоактивно-загрязненных территориях Калужской области, на основе проведения систематического цитогенетического мониторинга// Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук - Вып 4 - Калуга, 2003 - С 620-633

25 Галстян И А , Илевич Ю Р , Клещенко Е Д , Михайлова Г Ф , Надежина Н М„ Нугис В Ю , Севанькаев А В , Хвостунов И К Возможности ретроспективного определения дозы при лучевых поражениях// Медицинская радиология и радиационная безопасность - 2004 - Т 49 - № 5 - С 5-13

26 Севанькаев А В , Михайлова Г Ф, Хвостунов И К , Потетня О И , Цепенко В В , Голуб Е В , Поздышкина О В , Пятенко В С , Шкаврова Т Г , Замулаева И А , Смирнова С Г, Орлова Н В , Матвеенко Е Г , Боровикова М П , Омарасхабов Н О Изучение генных и структурных мутаций в соматических клетках детей, проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях Калужской области и подвергшихся внутриутробному облучению в результате Чернобыльской аварии// Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук -Вып 6 -Калуга, 2004 - С 401-415

27 Михайлова Г Ф , Потетня О И , Цепенко В В , Поздышкина О В , Пятенко В С, Севанькаев А В Результаты двукратного цитогенетического обследования внутриутробно облучившихся детей, проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях Брянской области // Материалы международной научной конференции «Экология человека и природы», Москва-Плес, 5-11 июля 2004 г -Москва, 2004 - С 217-218

28 Sevan'kaev, А V , Lloyd, D С , Edwards, А А , Khvostunov, IК, Mikhailova, G F, Golub, Е V , Shepel, N N , Nadejma, N М , Galstian, I А , Nugis, V Yu , Barnos, L , Caballm, M R and Barqumero, J F A cytogenetic follow-up of some highly irradiated victime of the Chemobyl accident// Radiation Protection Dosimetry -2005 -№113 -P 152-161

29 Севанькаев А В , Шкаврова Т Г , Потетня О И, Михайлова Г Ф , Цепенко В В , Голуб Е В , Хвостунов И К , Саенко А С , Гастева Г Н , Нугис В Ю , Молоканов А А Сравнительное исследование структурных и генных соматических мутаций у работников ядерно-химических предприятий 1 Исследование нестабильных и стабильных хромосомных аберраций// Радиационная биология Радиоэкология -2005 -Т45 - №2 - С 149-161

30 Севанькаев А В , Михайлова Г Ф , Потетня О И , Цепенко В В , Хвостунов И К , Голуб Е В , Пятенко В С , Поздышкина О В , Шепель Н Н , Матвеенко Е Г, Боровикова М П , Омарасхабов Н О Результаты динамического цитогенетического наблюдения за детьми и подростками, проживающими на радиоактивно-загрязненных территориях после Чернобыльской аварии// Радиационная биология Радиоэкология -2005 -Т45 -№1 -С 5-15

31 Севанькаев А В , Михайлова Г Ф , Потетня О И , Цепенко В В , Голуб Е В , Поздышкина О В Пятенко В С , Матвеенко Е Г, Боровикова М П , Омарасхабов Н О Изучение спонтанной частоты аберраций хромосом у детей и подростков, проживающих на незагрязненных радионуклидами территориях Калужской области// Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук - Вып 8 - Калуга, 2005 - С 283-286

32 Севанькаев А В , Михайлова Г Ф , Цепенко В В , Омарасхабов Н О Популяционно-цитогенетические исследования населения Калужской области, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях

после аварии на Чернобыльской АЭС// Сб научных работ лауреатов областных премий и стипендий - Вып 1 - Калуга КГПУ им К Э Циолковского, 2005 -С. 61-66

33 Sevan'kaev, А V, Mikhailova, G F , Potetnya О I, Tzepenko V V , Khvostunov, I.K, Golub, E V, Pyatenko V S , Pozdushkma О V The results of cytogenetic follow up study of children and teenagers living on the territories contaminated as a result of Chernobyl accident // International Conference "Genetic Consequences of Emergency Radiation Situations" Russian Federation, Dubna, October 4-7, 2005 - Dubna, 2005. - P 103

34 Севанькаев А В , Михайлова Г Ф , Хвостунов И К , Потетня О И , Цепенко В В , Пятенко В С , Омарасхабов Н О Изучение структурных мутаций в соматических клетках детей, проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях Калужской области и подвергшихся внутриутробному облучению в результате Чернбыльской аварии// Актуальные проблемы дозиметрии Конференция «20 лет Чернобыля» 20-21 окт, 2005 - Минск,

2005 -С 48-51

35 А В Севанькаев, И А Замулаева, Г Ф Михайлова, О И Потетня, В В Цепенко, И К Хвостунов, Е В Голуб, В С Пятенко, О В Поздышкина, А О Верещагина, С Г Смирнова, Н В Орлова, А С Саенко, В С Паршин Сравнительный анализ генных и структурных соматических мутаций у жителей загрязненных радионуклидами районов Орловской области после аварии на ЧАЭС// Радиационная биология Радиоэкология - 2006 - Т 46 -№3 - С 316-322

36 В К Мазурик, В Ф Михайлов, Л Н Ушенкова, Н М Надежина, Н Ф Раева, А В Севанькаев, И К Хвостунов, Г Ф Михайлова, Е В Голуб, Ллойд Д Сопоставление результатов молекулярно-биохимического и цитогенетического изучения клеток крови пациентов в отдаленном периоде после острой лучевой болезни// Радиационная биология Радиоэкология -

2006 - Т 46 - №4 - С 393-409

37 А В Севанькаев, В С Паршин, Г Ф Михайлова, И К Хвостунов, В В Цепенко, О И Потетня, Е В Голуб, В С Пятенко, О.В Поздышкина, Н О Омарасхабов Н О Сравнительный анализ цитогенетических показателей с морфо-функциональным состоянием щитовидной железы у детей и подростков, проживающих с момента аварии на Чернобыльской АЭС на загрязненных радионуклидами территориях Орловской и Калужской областей// Радиация и Риск Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологического регистра - 2006 -Т15 -№1-2 - С 134-145

38 А В Севанькаев, Г Ф Михайлова, В В Цепенко, Матвеенко Е Г, Боровикова М П, Омарасхабов Н О Результаты динамического цитогенетического наблюдения за детьми и подростками, проживающими на радиоактвно загрязненных территориях после Чернобыльской аварии// Наследие

Чернобыля Материалы научно-практической конференции (под ред А Ф Цыба) - Вып 4 - Калуга-Обнинск, 2006 - С 62-65

39 А В Севанькаев, И А Замулаева, Г Ф Михайлова, О И Потетня, В В Цепенко, И К Хвостунов, Е В Голуб, В С Пятенко, О В Поздышкина, С Г Смирнова, А О Верещагина, Н В Орлова, А С Саенко Сравнительный анализ генных и структурных мутаций жителей загрязненных радионуклидами районов Орловской области после аварии на ЧАЭ// Тезисы докладов, V съезд по радиационным исследованиям, Москва, 10-14 апреля, 2006 - Москва, 2006 -Т1 -С 93

40 В К Мазурик, В Ф Михайлов, Л Н Ушенкова, Н М Надежина, Н Ф Раева, В Ю Нугис, А В Севанькаев, И К Хвостунов, Е В Голуб, Г Ф Михайлова, Д Ллойд Сопоставление результатов молекулярно-биохимического и цитогенетического изучения клеток крови пациентов в отдаленный период после острой лучевой болезни // Тезисы докладов, V съезд по радиационным исследованиям, Москва, 10-14 апреля, 2006 -Москва, 2006 - Т 1 - С 61

41 А В Севанькаев, И К Хвостунов, Е В Голуб, Г Ф Михайлова, Д Ллойд, В Ю Нугис, Н М Надежина Долговременное цитогенетическое наблюдение группы лиц с высокими дозами острого облучения при различных радиационных авариях // Тезисы докладов, V съезд по радиационным исследованиям, Москва, 10-14 апреля, 2006 - Москва, 2006 - Т 1 - С 70

42 А В Севанькаев, И А Замулаева, Г Ф Михайлова, И К Хвостунов, С Г Смирнова, Н В Орлова, Омарасхабов НО, АС Саенко Повышение частоты генных и структурных соматических мутаций у лиц, подвергшихся радиационному воздействию in utero в результате Чернобыльской аварии// Материалы Международной конференции «Чернобыль 20 лет спустя» 19-21 апреля, 2006 - Минск, Беларусь, 2006 - С 114

43 Zamulaeva I А , А V Sevan'kaev, Smimova S G, G F Mikhail ova, Orlova N V , Tsepenko V V , Potetnya О I, Omaraskhabov N O , Saenko A S Frequency of gene and structural somatic mutations m inhabitants of radiation-contaminated territjries of Russian Federation// Abstract of International conference «20 Years After Chernobyl» 2006 - Republic Belarus, 2006 - P 94

44 Г Ф Михайлова Сравнительный анализ частоты нестабильных и стабильных хромосомных аберраций у подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях Калужской области после аварии на ЧАЭ СП Материалы III международного симпозиума «Проблемы биохимической, радиационной и космической биологии» - Москва, Дубна, 2006 -С 125-126

45 Г Ф Михайлова Сравнительный анализ нестабильных и стабильных хромосомных аберраций в группах лиц, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС в различные периоды пренатального развития// Радиация и Риск, Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологического регистра -2006 -Т15 -№3-4 - С 157-163

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Михайлова, Галина Федоровна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Спонтанный уровень аберраций хромосом в культуре лимфоцитов человека

1.1.1 Частота нестабильных аберраций хромосом в контрольных группах людей

1.1.2 Факторы вариабельности спонтанного уровня аберраций хромосом в культуре лимфоцитов человека

1Л .3 Частота стабильных аберраций хромосом (транслокаций) в контрольных группах людей

1.2 Аберрации хромосом в лимфоцитах периферической крови человека при хроническом облучении in vivo

1.2.1 Частота хромосомных аберраций у лиц профессионально контактирующих с ионизирующей радиацией

1.2.1.1 Частота нестабильных аберраций хромосом

1.2.1.2 Частота стабильных аберраций хромосом

1.2.2 Частота хромосомных аберраций у людей, проживающих в домах с повышенным уровнем радиоактивности

1.2.3 Частота хромосомных аберраций у людей, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях

1.2.3.1 Частота хромосомных аберраций у взрослого населения, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях

1.2.3.2 Частота стабильных и нестабильных аберраций у детского населения, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях

1.2.3.3 Частота стабильных и нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно

1.2.3.4 Частота аберраций хромосом у детей и подростков с высокой дозовой нагрузкой на щитовидную железу и ее патологиями, проживающих на радиоактивно загрязненных территориях

1.3 Особенности биологического действия малых доз радиации

1.4 Феномен радиационно-индуцируемой нестабильности генома

1.5 Роль цитогенетических нарушений в развитии отдаленных соматических заболевании

Резюме

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Характеристика радиоактивно-загрязненных территорий после Чернобыльской аварии

2.1.1 Радиационная обстановка на территории загрязненных областей

2.1.2 Сценарии облучения обследуемых групп

2.2 Характеристика обследованных групп людей

2.2.1 Брянская область

2.2.2 Калужская область

2.2.3 Орловская область

2.3 Методы исследования

2.3.1 Методика культивирования лимфоцитов крови и приготовление препаратов хромосом

2.3.2 Анализ нестабильных хромосомных аберраций с помощью общепринятого стандартного метода исследования

2.3.3 Анализ стабильных хромосомных аберраций с помощью метода FISH

2.3.4 Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 91 3.1 Уровень хромосомных аберраций в контрольных группах людей, проживающих на не загрязненных радионуклидами территориях

3.1.1 Исследование уровня хромосомных аберраций у взрослого населения, проживающего на не загрязненных радионуклидами территориях

3.1.2 Исследование уровня хромосомных аберраций у детского населения, проживающего на не загрязненных радионуклидами территориях 95 3.2 Исследование уровня нестабильных и стабильных хромосомных аберраций у населения, проживающего на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения

3.2.1 Исследование частоты нестабильных хромосомных аберраций у взрослого населения, проживающего в Брянской обл.

3.2.2 Исследование в 1991-1993 гг. частоты нестабильных хромосомных аберраций у детей и подростков, проживающих в Брянской обл.

3.2.3 Исследование частоты хромосомных аберраций в группе детей и подростков, проживающих в Калужской обл.

3.2.3.1 Динамика нестабильных хромосомных аберраций у населения Жиздринского района при исследовании в период 1990-2003 гг

3.2.3.2 Динамика нестабильных хромосомных аберраций у населения Ульяновского района при исследовании в период 1989-1998 гг.

3.2.3.3 Исследование частоты стабильных аберраций хромосом методом FISH у детей и подростков, проживающих в Ульяновском р-не

3.2.4 Исследование в 2002 г. частоты нестабильных хромосомных аберраций в группе подростков и взрослого населения, проживающего в Орловской обл.

3.2.5 Исследование частоты нестабильных хромосомных аберраций у детей и подростков, родившихся после аварии на ЧАЭС и проживающих на загрязненных радионуклидами территориях

3.3 Исследование частоты нестабильных и стабильных аберраций хромосом у детей, облучившихся внутриутробно в период аварии на Чернобыльской АЭС

3.3.1 Изучение частоты нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно и проживающих на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения

3.3.2 Оценка влияния ионизирующего излучения в малых дозах на частоту нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно в период аварии на Чернобыльской АЭС и, впоследствие, проживающих на радиоактивно загрязненных территориях

3.3.3 Динамика нестабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно и проживающих в Брянской обл.

3.3.4 Изучение частоты стабильных аберраций хромосом методом FISH у детей, облучившихся внутриутробно и проживающих в Жиздринском р-не 130 3.3.5. Сравнительный анализ выхода нестабильных и стабильных хромосомных аберраций в группах детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития и постнатально

3.3.6 Зависимость выхода нестабильных и стабильных хромосомных аберраций в группах лиц, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС в различные периоды пренатального развития

3.3.6.1 Зависимость выхода нестабильных хромосомных аберраций в группе детей, облучившихся внутриутробно в различные периоды пренатального развития, проживающих в Брянской обл.

3.3.6.2 Зависимость выхода нестабильных хромосомных аберраций в группе детей, облучившихся внутриутробно в различные периоды пренатального развития, проживающих в Калужской обл.

3.3.6.3 Зависимость выхода стабильных хромосомных аберраций в группе детей, облучившихся внутриутробно в различные периоды пренатального развития

3.4 Результаты сопоставления наблюдаемых цитогенетических эффектов с данными медицинских обследований состояния здоровья иследуемой когорты лиц

3.4.1 Изучение частоты нестабильных хромосомных аберраций у лиц с выявленной патологией щитовидной железы

3.4.2 Изучение частоты нестабильных хромосомных аберраций у лиц с гинекологической патологией

3.4.3 Анализ взаимосвязи цитогенетических нарушений и выявленных соматических заболеваний

3.4.4 Анализ взаимосвязи цитогенетических нарушений и выявленных заболеваний органов дыхания в группах детей, облучившихся во время Чернобыльской аварии в период внутриутробного развития и неонатально ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Анализ результатов цитогенетических исследований населения, проживающего на радиоактивно-загрязненных территориях после Чернобыльской аварии"

Прошло уже 20 лет с момента аварии на Чернобыльской АЭС - самой крупномасштабной ядерной катастрофы в истории человечества в мирное время. Последствием этой катастрофы явилось радиоактивное загрязнение долгоживущими радиоизотопами огромных территорий, на которых проживают, и следовательно, подвергаются в той или иной степени постоянному хроническому радиационному воздействию огромные по численности популяции людей. Чернобыльская катастрофа породила множество проблем общечеловеческого масштаба: экологических, медицинских, социальных, научных и др. Решение большинства из них зависят, в первую очередь, от правильной оценки степени радиационной опасности для людей, оказавшихся в ситуации вынужденного проживания на радиационно-загрязненных территориях. И здесь на первое место выходит проблема такого понятия как качество жизни и, соответственно, здоровье населения, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях.

В биоиндикации радиоционного воздействия нашли широкое применение цитогенетические методы исследования. Культура лимфоцитов человека является одной из обязательных тест-систем при оценке влияния мутагенных факторов окружающей среды. Одним из достоинств этой тест-системы является то, что по наблюдаемым типам аберраций можно достаточно определенно идентифицировать тип мутагенного воздействия. Так, наличие в спектре наблюдаемых аберраций повышенного уровня дицентриков и центрических колец однозначно свидетельствует о радиационной природе мутагена. Повышенный же уровень аберраций хроматидного типа может свидетельствовать о химической или вирусной природе мутагена. Использование цитогенетического метода в популяционных исследованиях позволяет выявлять лиц с повышенным уровнем хромосомных аберраций, в особенности, долгоживущих стабильных аберраций, являющихся потенциальным источником малигнизации клеток. Следовательно, индивидуальные цитогенетические показатели могут служить объективным основанием для формирования групп повышенного риска с целью последующего углубленного медицинского наблюденя. Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является изучение закономерностей реализации воздействия хронического низкоинтенсивного излучения на наследственные структуры соматических клеток людей, проживающих на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения после Чернобыльской аварии.

В работе предполагается решить следующие задачи:

1. Исследовать уровень нестабильных хромосомных аберраций у населения, проживающего на территориях с различной плотностью радиоактивного загрязнения в результате аварии на Чернобыльской АЭС.

2. Исследовать динамику нестабильных хромосомных аберраций у населения, проживающего на загрязненных радионуклидами территориях в результате аварии на ЧАЭС за период 1989 - 2003 гг.

3. Исследовать уровень стабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся в пренатальный и неонатальный период развития во время аварии на ЧАЭС и проживающих, впоследствие, на загрязненных радионуклидами территориях.

4. Изучить сравнительный выход нестабильных и стабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся в пренатальный и неонатальный период развития во время аварии на ЧАЭС и проживающих, впоследствие, на загрязненных радионуклидами территориях.

5. Изучить сравнительный выход нестабильных и стабильных хромосомных аберраций у детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС в различные периоды пренатального развития

6. Сопоставить результаты наблюдаемых цитогенетических эффектов с данными медицинских обследований состояния здоровья исследуемой когорты лиц. 9

Положения, выносимые на защиту:

1. У детей и подростков, проживающих на радиоактивно загрязненных территориях после аварии на Чернобыльской АЭС, средняя частота нестабильных и стабильных хромосомных аберраций достоверно превышает контрольный уровень.

2. Не выявлено корреляции между уровнем цитогенетических нарушений и

137 уровнем загрязненности радионуклидами Cs мест проживания обследуемых лиц в диапазоне от 20 до 1100 кБк/м .

3. У детей и подростков, проживающих на радиоактивно загрязненных территориях после аварии на Чернобыльской АЭС, повышенная средняя частота нестабильных и стабильных хромосомных аберраций сохраняется на протяжении длительного времени.

4. Дети, подвергшиеся внутриутробному облучению во время аварии, более радиочувствительные по сравнению с детьми, подвергшимися облучению во время аварии в неонатальный период.

5. Уровень цитогенетических нарушений при внутриутробном облучении зависит от стадии эмбрионального развития.

6. Отмечается определенная взаимосвязь между повышенным уровнем хромосомных аберраций и большей вероятностью заболевания различными не онкологическими патологиями.

Заключение Диссертация по теме "Радиобиология", Михайлова, Галина Федоровна

ВЫВОДЫ

1. При иопуляционно-цитогенетическом обследовании детей и подростков, проживающих в течение 17 лет на радиоактивно загрязненных территориях Брянской, Калужской и Орловской обл. после аварии на Чернобыльской АЭС, выявлена достоверно повышенная (в 2-3 раза) частота нестабильных и стабильных хромосомных аберраций по сравнению с контрольным уровнем.

2. При динамическом цитогенетическом обследовании в течение 17 лет после аварии детей и подростков Калужской обл. установлено, что достоверно повышенный (в 2-5 раз) по сравнению с контрольным, уровень дицентриков и центрических колец - маркерных аберраций радиационного воздействия, сохраняется на протяжении всего периода наблюдения без какой-либо тенденции к их снижению.

3. У детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС и проживающих в последствии на территориях Брянской, Калужской и

137

Орловской обл. с различной плотностью радиоактивного загрязнения Cs, выявлен еще более повышенный уровень нестабильных и стабильных хромосомных аберраций, при этом, суммарная частота дицентриков и центрических колец достоверно превышала контрольный уровень в 3 - 6 раз.

4. Не обнаружено какой-либо зависимости цитогенетических нарушений от

137 уровня загрязнения радионуклидами Cs мест проживания обследуемых лиц в диапазоне от 20 до 1100 кБк/м . Однако у детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на Чернобыльской АЭС и впоследствии проживающих на радиоактивно-загрязненных территориях, наблюдается определенная дозовая зависимость выхода аберраций хромосомного типа, а также суммарной частоты дицентриков и центрических колец от средней индивидуальной накопленной эффективной дозы внешнего и внутреннего облучения в диапазоне доз 7,4 - 14,6 мЗв.

5. Обнаружены различия в уровне цитогенетических нарушений при внутриутробном облучении в зависимости от стадии эмбрионального развития - наибольшая частота аберраций хромосомного типа, а также суммарная частота дицентриков и центрических колец, наблюдается при облучении в 1-ом гестационном периоде развития плода (0-8 недель). Все 100% детей, облучившихся в период аварии на 1-ой стадии гестационного периода, оказались «носителями» стабильных аберраций.

6. Сравнительный анализ результатов медицинских осмотров и цитогенетических обследований детей и подростков, подвергающихся хроническому воздействию малых доз радиации в загрязненных районах Калужской обл. после аварии на ЧАЭС, в целом не выявил достоверной взаимосвязи между частотой хромосомных аберраций и заболеваемостью, как для суммы всех видов заболеваний, наблюдаемых в обследованной когорте, так и для отдельных их форм.

7. Тем не менее, прослеживалась определенная тенденция такой взаимосвязи в группах лиц с повышенным уровнем аберраций хромосомного типа с заболеваемостью щитовидной железы. Наиболее четко это проявлялось в группе детей, облучившихся во время аварии на ЧАЭС внутриутробно: количество лиц с патологией щитовидной железы в подгруппе с повышенным уровенем аберраций хромосомного типа было больше на 44% в Калужской обл. и в 2 раза - в Орловской обл. по сравнению с подгруппой с низким уровнем цитогенетических нарушений.

8. Выявлена аналогичная тенденция взаимосвязи цитогенетических нарушений с доброкачественными гинекологическими заболеваниями: в подгруппе женщин с повышенным уровенем аберраций хромосомного типа частота этих заболеваний была выше, чем у женщин с низкий уровнем аберраций. Учитывая, что у женщин с доброкачественными гинекологическими опухолями достоверно (по сравнению с практически здоровыми женщинами) была выше частота дицентриков и центрических колец -аберраций-маркеров радиационного воздействия, последнее может служить определенным доказательством связи наблюдаемой патологии с воздействием радиационного фактора.

172

9. Достоверно взаимосвязь цитогенетических нарушений с некоторыми формами общесоматической патологии проявлялась у детей, облучившихся внутриутробно во время аварии на ЧАЭС. Так, у детей с повышенным уровнем хромосомных аберраций в 3 раза чаще встречались заболевания органов пищеварения и в 2 раза органов дыхания.

10. В целом, анализ полученных результатов цитогенетического мониторинга населения, постоянно проживающего на загрязненных радионуклидами территориях после аварии на ЧАЭС свидетельствует о том, что наиболее пострадавшей при аварии когортой населения являются дети, из которых наиболее критической группой, требующей постоянного медицинского наблюдения, являются те, кто подвергся внутриутробному облучению во время аварии.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Михайлова, Галина Федоровна, Обнинск

1. Аклеев А.В., Алещенко А.В., Антощина М.М., Готлиб В.Я. и др. Цитогенетические последствия облучения жителей Южного Урала // Радиац.биология. Радиоэкология. 2002. - Т.42. - №6. - С.696-699.

2. Альферович А. А., Готлиб В Л., Пелевина И.И. Влияние облучения в малых дозах на выживаемость клеток и их потомства // Изв. РАН Сер. биол. 1995. -№2.-С. 137-141.

3. Анкина М.А., Михайлова Г.Ф. Изучение зависимости доза-эффект для частоты бинуклеарных клеток с микроядрами в культуре лимфоцитов человека после у-облучения // Радиобиология. 1991. - Т.31. - №1. - С.71-75

4. Ахматуллина Н.Б. Отдаленные последствия действия радиации и индуцированная нестабильность генома // Радиац.биология. Радиоэкология. 2005. - Т.45. - №5. - С.680-687.

5. Бейли Н. Статистические методы в биологии. М: Мир, 1964. - 260 с.

6. Блох О.В. Цитогенетические эффекты профессионального облучения медицинских радиологов: Тез. докл. I Всеросс. радиобиолог, съезд. М., 1989.-С.572-574.

7. Бочков Н.П. Хромосомы человека и облучение. М.: Атомиздат. 1971. - 168 с.

8. Бочков Н.П., Журков B.C., Яковенко К.Н., Кулешов Н.П. Культура лимфоцитов как тест-объект для изучения генетических последствий у лиц, контактирующих с мутагенами // Докл. АН СССР. 1974. - Т.218. - №2. - С. 463-465.

9. Бочков Н.П., Попова Н.А., Катосова Л.Д. и др. Необычайно высокий уровень хромосомной изменчивости в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 1999. -Т.35. -№6. - С.838-841.

10. Бочков Н.П., Чеботарев А.Н., Катосова Л.Д., Платонова В.И. База данных для анализа количественных характеристик частоты хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 2001. Т.37. - №4. - С. 549-557.

11. Буланова М, Иванов Б., Христова М. и др. Цитогенетическое обследование лиц, подвергавшихся действию ионизирующих излучений в малых дозах // Рентгенология и радиология. 1981. - Т.20. - № 4. - С.273-280.

12. Булдаков Л.А., Гуськова А.К. 15 лет после аварии на Чернобыльской АЭС // Радиац.биология. Радиоэкология. 2002. - Т.42. - №2. - С.228-233.

13. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н., Горбунова Н.В. и др. Особенности биологического действия малых доз облучения // Радиац.биология. Радиоэкология. 1996. - Т.36. - №4. - С.610-631.

14. Бычковская И.Б., Гильяно Н.Я., Федорцева Р.Ф., Бедгер Ф.С. Об особой форме радиоиндуцированной нестабильности генома // Радиац.биология. Радиоэкология. 2005. - Т.45. - №5. - С.688-693.

15. Верещагина А.О., Замулаева И.А., Орлова Н.В., Смирнова С.Г., Медведев

16. Власов O.K., Годько A.M., Шишканов Н.Г., Щукина Н.В. Реконструкция доз облучения населения Калужской области вследствие аварии на ЧАЭС по уточненным данным // «Наследие Чернобыля». Вып.З. Калуга. - 2001. - С. 30-39.

17. Власов O.K., Щукина Н.В., Годько A.M. Дозы облучения щитовидной131железы от инкорпорированного I для населения Орловской области ) // Радиация и Риск. 2003. - Спецвыпуск. - С.6-19.

18. Возилова А.В., Аклеев А.В., Бочков Н.П., Катосова Л.Д. Отдаленные цитогенетические эффекты хронического облучения населения Южного Урала // Радиац.биология. Радиоэкология. 1998. - Т.38. - № 4. -С.586-590.

19. Вологодская И.А., Курбвтов А.В., Григорьева Е.С. Предрасположенность к мультифакторной патологии у жителей города в зоне предприятия атомной промышленности ПО "Маяк" Урала // Радиац.биология. Радиоэкология. -2002. Т.42. - №6. - С.690-692.

20. Воробцова И.Е. Трансгенерационная передача радиационно-индуцированной нестабильности генома // Радиац.биология. Радиоэкология. 2006. - Т.46. - №4. - С.441-446.

21. Воробцова И.Е., Михельсон В.М., Воробьева М.В. и др. Результаты цитогенетического обследования ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, проведенного в разные годы // Радиац.биология. Радиоэкология.1994. Т.34. - №6. - С.798-803.

22. Воробцова И.Е., Семенов А.В. Комплексная цитогенетическая характеристика лиц, пострадавших в результате аварии на Чернобыльской АЭС // Радиац.биология. Радиоэкология. 2006. - Т.46. - №2. - С.618-625.

23. Воробцова И.Е., Такер Дж.Д., Тимофеева Н.М. и др. Влияние возраста и облучения на частоту транслокаций и дицентриков, определяемых методом FISH, в лимфоцитах человека // Радиац.биология. Радиоэкология. 2000. -Т.40. - № 2. - С.142 - 148.

24. Гераськин С. А. Концепция биологического действия малых доз ионизирующего излучения на клетки // Радиац.биология. Радиоэкология.1995. Т.35. - №5. - С.571-580.

25. Гилева Э.А., Любашевский Н.М., Старичеснко В.И. и др. Наследуемая хромосомная нестабильность у обыкновенной полевки (Mikrotus arvalis) израйона Кыштымской ядерной аварии факт или гипотеза? // Генетика. -1996.-Т.32.-№1.-С.114-119.

26. Горобец В.Ф. Заболеваемость тиреоидной паталогией среди детей из юго-западного региона Калужской области, облученных внутриутробно на различных сроках гестации // Радиация и Риск. 2006. - Т.7. - №1-2. - С.49-58.

27. Дружинин В.Г., Лифанов А.Ю., Головина Т.А. Цитогенетические эффекты у детей-подростков из разных районов Кемеровской области человека // Генетика. 1995. Т.31. - №7. - С.983-987.

28. Дружинин В.Г., Мокрушина Н.А., Волков А.Н. и др. Региональный подход к мониторингу хромосомных аберраций в популяциях человека с использованием метода картографирования генотоксических эффектов // Медицинская генетика. 2004. - Т.4. - №08. - С.З63-369.

29. Дыбская Е. Б. Хромосомные нарушения у детей Ровенской области Украины через 13 лет после Чернобыльской аварии //Проблемы радиационной генетики на рубеже веков. М: Издательство Российского университета дружбы народов. - 2000. - С. 268.

30. Иванов В.И., Бочков Н.П., Гинтер Е.К., Севанькаев А.В. Генетические последствия в популяциях в России, подвергшихся радиационному воздействию в результате аварии на ЧАЭС // Матер, межд. Семинара

31. Проблемы смягчения последствий Чернобыльской катастрофы" 4.1 Брянск. 1993. - С.227-230.

32. Иванов В.К., Цыб А.Ф., Медицинские радиологические последствия Чернобыля для населения России: оценка радиационных рисков. М.: -Медицина. - 2002. - 389 с.

33. Косиченко Л.П., Алексян А.А. Цитогенетическое исследование клеток костного мозга детенышей первого поколения облученных обезьян // Цитология. 1991. -Т.ЗЗ,- №7.- С.117-121.

34. Котеров А.Н. Заклинания о нестабильности генома после облучения в малых дозах // Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2004-№4.-С.55-72.

35. Котеров А.Н. Отсутствие фактов нестабильности генома после воздействия в малых дозах радиации с низкой ЛПЭ на клетки без явных дефектов и организм вне in utero // Радиац.биология. Радиоэкология. 2006. - Т.46. -№5. - С.563-574.

36. Кузьмина Н.С. Изучение геномной нестабильности у детей, проживающих на территориях с радионуклидными загрязнениями // автореферат диссертации на соискание ученой степени к.м.н. Москва. - 2003. - 18 с.

37. Кузьмина Н.С.Сусков И.И. Экспрессирование геномной нестабильности в лимфоцитах детей, проживающих в условиях длительного действия радиационного фактора // Радиац.биология. Радиоэкология. 2002. - Т. 42. -№6. - С.735-739.

38. Лазюк Г.И., Зацепин И.О., Верже П., Ганьер Б. и др. Синдром Дауна и илнизирующая радиация: причинно-следственная связь или случайная зависимость // Радиац.биология. Радиоэкология. 2002. - Т.42. - №6. -С.678-683.

39. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа. 1980. - 292 с.

40. Лосев А.А., Ефимов В.И. К вопросу изучения влияния хронического облучения на деятельность человека // В сб.: Вопросы радиобиологии и биологического действия цитостатических препаратов. Томск.: Томск, унт,- 1971.-С.168-171.

41. Мазник Н.А. Влияние малых доз ионизирующей радиации на частоту структурных нарушений хромосом в лимфоцитах периферической крови человека // Тез. докл. I Всеросс. радиобиолог, съезда М, 1989. - С.616-617.

42. Мазник Н.А. Результаты динамического цитогенетического обследования и биологической дозиметрии у лиц, эвакуированных из 30-километровой зоны ЧАЭС // Радиац.биология. Радиоэкология. 2004. - Т.44. - №5. - С.566-573.

43. Мазник Н.А. Цитогенетическое исследование лимфоцитов периферической крови при профессиональном облучении медицинских радиологов // Цитология и генетика. 1987. - Т.21. - № 6. - С.437-440.

44. Мельнов С.Б., Лебедева Т.В. Молекулярно-генетический статус детей и подростков, проживающих в условиях хронического низкодозового воздействия // Радиац.биология. Радиоэкология. 2004. - Т.44. - №6. - С.627-631.

45. Михайлов В.Ф., Мазурик В.К., Бурлакова Е.Б. и др. Молекулярные проявления радиационно-индуцированной нестабильности генома: возможность химической модификации // Радиац.биология. Радиоэкология.- 2005. Т.45. - №5. - С.561-570.

46. Пел евина И.И., Алещенко А.В., Антощина М.М. и др. Реакция популяции клеток на облучение в малых дозах // Радиац.биология. Радиоэкология. -2003. Т.43. - №2. - С.161-166.

47. Пелевина И.И., Алещенко А.В., Готлиб В.Я. и др. Реакция лимфоцитов крови индивидуумов с соматическими заболеваниями на воздействиерадиации в малых дозах // Радиац.биология. Радиоэкология. 2005. - Т.45. -№4. - С.412-415.

48. Пелевина И.И., Готлиб В.Я., Конрадов А.А. 20 лет изучения последствий Чернобыльской аварии это много или мало для оценки их характера и масштабов? // Радиац.биология. Радиоэкология. - 2006. - Т.46. - №2. - С.240-247.

49. Петрова С.П. Цитогенетический анализ лимфоцитов периферической крови у лиц, подвергавшихся действию ионизирующих излучений в малых дозах // Мед. радиология. 1982. - Т.27. - №3. - С.70-73.

50. Пилинская M.JL, Дыбский С.С. Частота хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови детей, проживающих в районах с различной радиоэкологической обстановкой // Цитология и Генетика. -1992. Т.26. - №2. - С. 11-17.

51. Рождественский JI.M. Pro и Contra пороговости/беспороговости мутагенного (канцерогенного) действия ионизирующего излучения низкого уровня // Радиац.биология. Радиоэкология. 2001. - Т.41. - №5. - С.580-588.

52. Рыжкина И.В., Бочков Н.П., Катосова Л.Д. и др. Уровень хромосомной изменчивости в соматических клетках у детей, проживающих в сельскохозяйственных районах // Доклады Академии Наук. 1998. - Т.358. -№3. - С.428-430.

53. Саенко А.С., Замулаева И.А., Смирнова С.Г. и др. Определение частоты мутаций по локусам гликофорина А и Т-клеточного рецептора: обследование ликвидаторов аварии на ЧАЭС // Радиац.биология. Радиоэкология. 1998. -Т.38. -№2.-С.181-185.

54. Севанькаев А.В. Радиочувствительность хромосом лимфоцитов человека в митотическом цикле. М: Энергоатомиздат, 1987. - 160 с.

55. Севанькаев А.В., Козлов В.М., Гузеев Г.Г., Измайлова Н.Н. Частота спонтанных хромосомных аберраций в культуре лейкоцитов человека // Генетика. 1974. - Т. X. - №6. - С.114-119.

56. Севанькаев А.В., Лучник Н.Б. Влияние гамма-облучения на хромосомы человека YIII. Цитогенетический эффект низких доз при облучении in vitro // Генетика. 1977. - Т.13. - №3. - С.525-532.

57. Севанькаев А.В., Моисеенко В.В., Цыб А.Ф. Возможности применения методов биологичнской дозиметрии для ретроспективной оценки доз в связи с последствиями аварии на Чернобыльской АЭС // Радиац.биология.Радиоэкология. 1994. - Т.34. - Вып.6. - С.782-792.

58. Сипягина А.Е., Балева Л.С., Пулатова М.К., Шарыгин В.Л., и др. Организация медицинской помощи детям различных когорт наблюдения, подвергшимся воздействию малых доз радиации // Радиац.биология. Радиоэкология. 2006. - Т.46. - №3. - С.374-380.

59. Слозина Н.М., Неронова Е.Г., Линская М.Н., Никифоров A.M. О некоторых сложностях в оценке радиационно-индуцированных мутагенных эффектов у человека // Радиационная биология. Радиоэкология. 2002. - Т.42. - №6. -С.684-686.

60. Снигирева Г.П., Новицкая Н.Н., Сидорова В.Ф. и др. Цитогенетические повреждения у жителей, проживающих в районе р.Теча, загрязненной радионуклидами // Тезисы докл. III съезд по радиационным исследованиям. -М.: Пущино, 1997. С.124-125.

61. Солдатова В.А., Кирсанова Г.Н., Солодова Р.А., Львов-ская Э.Н. Состояние здоровья основных групп медицинских работников, имеющих профессиональный контакт с источниками ионизирующих излучений // Труд и здоровье мед. работников. -М., 1979. С.135-141.

62. Спитковский Д.М. Новые биофизические и биохимические аспекты механизмов действия малых доз ионизирующей радиации // Радиац.биология. Радиоэкология. 1999. - Т.39. - №1. - С.145-155.

63. Сравнительная канцерогенная эффективность ионизирующего излучения и химических соединений. Публикация 96 НКРЗ (США): Пер. с англ. М.: Энергоатомиздат, 1992. 192 с.

64. Степаненко В.Ф., Цыб А.Ф., Гаврилин Ю.И., Хрущ В.Т. и др. Дозы облучения щитовидной железы населения России в ерзультате аварии на

65. Чернобыльской АЭС (ретроспективный анализ) // Радиация и Риск. 1996. -Вып.7. - С.225-246.

66. Степаненко В.Ф., Яськова Е.К., Матвеенко Е.Г. и др Дозы внутреннего облучения всего тела у жителей наиболее загрязненных районов Калужской области по данным многолетнего мониторинга // «Наследие Чернобыля». Вып.4. Калуга. - 2006. - С. 32-37.

67. Степанова Е.И., Мишарина Ж.А., Вдовенко В.Ю. Отдаленные цитогенетические эффекты у детей, облученных внутриутробно в результате аварии на Чернобыльской АЭС // Радиац.биология. Радиоэкология. 2002. -Т.42. - №6. - С.700-703.

68. Сусков И.И., Кузьмина Н.С. Полигеномная реализация мутагенных эффектов в организме людей, подвергающихся воздействию радиации в малых дозах // Радиац.биология. Радиоэкология. 2003. - Т. 43. - №2. -С.150-152.

69. Филюшкин И.В., Петоян И.М. Об оценке канцерогенного действия излучения на клеточном уровне // Радиац.биология. Радиоэкология. 1982. -Т.22. - №6. - С.781-786.

70. Флейшман Е.В. Практические выходы молекулярной генетики // Канцерогенез.-М.: Медицина. 2004. - С.483-513.

71. Фурусов B.C. Радиационный канцерогенез // Канцерогенез. М.: Научный мир. - 2000. - С.251-259.

72. Фучич А. Генотоксические исследования популяций, профессионально подверженных воздействию физических и химических агентов в низких дозах в республике Хорватия. // Радиац.биология. Радиоэкология. 2004. -Т.44. - №3. - С. 328-332.

73. Хандогина Е.К., Агейкин В.А., Зверева С.В., Марченко Л.Ф., Мутовин Г.Р., Снигирева Г.П., Ленская Р.В., Буянкин В.М., Шахтарин В.В., Акифьев

74. A.П. Генетическое обследование различных групп детей, проживающих в районах Брянской области, загрязненных в результате Чернобыльской аварии // Радиац.биология. Радиоэкология. 1995. - Т.35. - №5. - С.618-625.

75. Хандогина Е.К., Зверева С.В., Агейкин В.А., Марченко Л.Ф., Шахтарин

76. B.В., Мутовин Г.Р., Акифьев А.П. Частота аберраций хромосом влимфоцитах детей с заболеваниями щитовидной железы, проживающих в Брянской областим // Радиац.биология. Радиоэкология. 1995. - Т.35. - №5.- С.626-630.

77. Хандогина Е.К., Зверева С.В., Агейкин В.А., Марченко Л.Ф., Шахтарин

78. B.В., Мутовин Г.Р., Акифьев А.П. Частота аберраций хромосом в лимфоцитах детей с заболеваниями щитовидной железы, проживающих в Брянской областим // Радиац.биология. Радиоэкология. 1995. - Т.35. - №5.- С.626-630.

79. Хесин Р.Б. Непостоянство генома. М.: Наука, 1985, 472 с.

80. Чеботарев А.Н., Бочков Н.П., Катосова Л.Д., Платонова В.И. Временные колебания спонтанного уровня хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 2001. Т.37. - №6. -С. 848-853.

81. Шевченко В.А., Абрамов В.И., Печкуренков В.Л. Генетические исследования на Восточноуральском радиоактивном следе // Экологические последствия радиоактивного загрязнения на Южном Урале. М.: Наука, 1993.1. C. 258-302.

82. Шевченко В.А., Померанцева М.Д. Генетические последствия действия ионизирующих излучений. М.: Наука - 1985. - 280 с.

83. Шевченко B.A., Семов А.Б., Акаева Э.А. и др. Цитогенетические эффекты у лиц, пострадавших в результате аварии на Чернобыльской АЭС // Радиац.биология. Радиоэкология. 1995. - Т.35. - №5. - С.646-654.

84. Шкаврова Т.Г. Изучение нестабильных и стабильных аберраций хромосом у работников ядерно-химических предприятий и лиц с острой лучевой болезнью в отдаленный пострадиационный период: Автореф. дис. канд. биолог, наук. Обнинск, 2002. - 24 с.

85. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных. М.: Высшая школа. 1988.-424 с.

86. Anderson D, Hughes JA, Cebulska-Wasilewska A, Wierzewska A, Kasper E. Biological monitoring of workers exposed to emissions from petroleum plants // Environ Health Perspect. 1996. - Vol.104. - Suppl 3. - P.609-613.

87. Anderson D., Hughes J.A., Nizankowska E., Graca В., Cebulska-Wasilewska A., Wierzewska A., Kasper E. Factors affecting various biomarkers in untreated lung cancer patients and healthy donors // Environ Mol Mutagen 1997. - Vol.30. - №2. - P.205-216.

88. Andersson H.C. The spontaneous frequency of chromosomal aberrations and sister-chromatid exchanges in cultured peripheral lymphocytes of a single blood donor sampled more than 200 times // Mutat Res. 1993. - V.286. - №2. - P.281 -292.

89. Astakhova L.N., Anspaugh L.R., Beebe G.W. et al. Chernobyl-related thyroid cancer in children of Belarus: a case-control study // Radiation Research. 1998. -Vol.150.-P. 349-356.

90. Awa A.A., Sofuni Т., Honda Т., Itoh M. Neriishi M., Otake M. Relationship between the radiation dose and chromosome aberrations in atomic bomb survivors of Hiroshima and Nagasaki // Radiation Research. 1978. - Vol. 19. - P. 126-140.

91. Balakrishnan S., Rao S.B. Cytogenetic analysis of peripheral blood lymphocytes of occupational workers exposed to low levels of ionising radiation // Mutat Res. 1999. - V.442. - № 1. - P. 137-142.

92. Bauchinger M., Salassidis K., Braselmann H., Vozilova A., Pressl S., Stephan G., Snigiryova G., Kozheurov V.P., Akleyev A. FISH-based analasis of stable translocations in a Techa River population // Int J Radiat Biol. 1998. - Vol.73. -№6.-P. 605-612.

93. Bond V.P. Dose, effect severity and imparted energy in assessing biological effects // Stem cells. 1995. - Vol. 13. - Suppl. 1. - P.21 -29.

94. Booz J., Feinendegen L.E. A microdosimetric Understanding of Low-dose Radiation Effects // Int J Radiat Biol. 1988. - Vol.53. - №1. - P. 13-22.

95. Braselmann H, Schmid E., Bauchinger M. Chromosome analysis in a population living in an area of Germany with the highest fallout deposition from the Chernobyl accident // Mutat Res. 1992. - Vol.283. - №3. - P. 221-225.

96. Breger K.S., Smith L., Tukker M.S., Thayer MJ. Ionizing radiation induced frequent translocations with delayed replication and condensation // Cancer Res. -2004. Vol.64. - №22. - P.8231-8238.

97. Brogger A., Reitan J.B., Strand P., Amudsen I. Chromosome analysis of peripheral lymphocytes from persons exposed to radioactive fallout in Norway from the Chernobyl accident // Mutat Res. 1996. - Vol.361. - №2-3. - P. 73-79.

98. Burak L.E., Kodama Y., Nakano M. et al. FISH examinatoin of lymphocytes from Mayak workers for assessment of translocation induction rate under cronic radiation exposures//Int. J. Radiat. Biol. 2001. - Vol.77. - №8. - P.901-908.

99. Burim R.V., Canalle R., Takahashi C.S., Tavares B.C., Martinelli Ad. Ade L, Sakamoto-Hojo E.T. Clastogenikc effect of ethanol in chronic and abstinent alcoholics // Mutat Res. 2004. - Vol.560. - №2. - P.187-198.

100. Chang W.P., Little J.B. Delayed reproductive death in X-irradiated Chinese hamster ovary cells // Int. J. Radiat. Biol. 1991. - Vol.60. - N3. - P. 483-496.

101. Chen W.L., Taur C.L., Tai J.J., Wuu K.D., Wang-Wuu S. Chromosomal study in lymphocytes from subjects living or working in buildings constructed with radioactively buildings rebar // Mutat Res. 1997. - Vol.377. - № 2. -P.247-254.

102. Chung H.W., Ryu E.K., Kim Y.J., Ha S.W. Chromosome aberrations in workers of nuclear-powder plants // Mutat Res. 1996. - V.350. - №2. - P.307 -314.

103. Doll R., Wakeford R. Risk of childhood cancer from fetal irradiation. Review article // British Jornal of Radiology. . 1997. - V. 70. - P.130-139.

104. El-Zein R., Gu y., Sierra M.S., Spitz M.R., Strom S.S. Chromosomal instability in peripheral blood lymphocytes and rise of prostate cancer // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2005. - Vol. 14. - №3. - P.748-752.

105. Fremlin J.H. Is a radiation good for you? Open lecture delivered in the School of Physics and Cpace Researches: Preprint Birmingham, 1989. - 18 p.

106. Galloway S.M., Berry P.K., Nichols W.W., Wolman S.R., Soper K.A., Stolley P.D., Archer P. Chromosome aberrations in individuals occupationally exposed to ethylene oxide, and in a large control population // Mutat Res. 1986. - V.170. -№1-2. - P.55-74.

107. Ganguly B.B. Cell division, chromosomal damage and micronucleus formation in peripheral lymphocytes of healthy donors: related to donor's age // Mutat Res. -1993. V.295.-№3.-P.135- 148.

108. Garaj-Vrhovac V., Kopjar N., Poropat M. Evaluation of cytogenetic damage in nuclear medicine personnel occupationally exposed to low-level ionising radiation // Arh Hig Rada Toksikol. 2006. - Vol.57. - №1. - P.31-38.

109. Gundy S., Varga L.P. Chromosomal aberrations in healthy persons // Mutat Res. 1983. - V. 120. - №2-3. - P. 187-191.

110. Hahn P., Nevaldine В., Morgan W.F. X-ray induction of methotrexate resistance due to ghfr gene amplification accident // Somat. Cell. Mol. Genet. -1990. Vol.16. - N5. - P. 413-423.

111. Heidenreich W.F., Kenigsberg J., Jacob P., Buglova E., Goulko G., Paretzke H.G., Demidchik E.P., Golovneva A. Time trends of thyroid cancer incidence in Belarus after the Chernobyl accident // Radiation Research. 1999. - Vol.151. -N5.-P. 617-625.

112. Hone P.A., Edwards A.A., Lloyd D.C., Moquet J.E. The yield of radiation-induced chromosomal aberrations in first division human lymphocytes depends on the culture time // Int J Radiat Biol. 2005. - Vol.81. - №7. - P.523-529.

113. Hoyos L.S., Carvajal S., Solano L., Rodriguez J., Orozco L., Lopez Y., Au W.W. Cytogenetic Monitoring of Farmers exposed to pesticides in Colombia // Environ Health Perspect. 1996. - V.104. - Suppl. 3. -P.535 - 538.

114. Jamali M., Trott K.R. Persistent increase in the rates of apoptosis and dicentric chromosomes in surviving V79 cells after X-irradiation mutagens // Int. J. Radiat. Biol. 1996. - Vol.70. - N6. - P. 705-709.

115. Jha A.N. Relative ranking of culture media based on proliferation kinetics and spontaneous chromosomal aberrations in PHA-responsive human peripheral blood lymphocytes // Indian J Exp Biol.- 1992. Vol.30. - №8. - P.751-753.

116. Kadhim M.A., Marsden S.J., Malcolmson A.M. et al. Long-term genomic instability in human lymphocytes induced by single-particle irradiation // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2004. - Vol.64. - №22. - P.8231-8238.

117. Kasuba V., Sentija K., Garaj-Vrhovac V., Fucic A. Chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from control individuals // Mutat Res. 1995. -V.346. - №4. - P.187 - 193.

118. Korblein A. Strontium fallout from Cernobyl and perinatal mortality in Ukraine and Belarus // Радиац.биология. Радиоэкология. 2003. - T.43. - №2. -С. 197-202.

119. Kumagai E., Tanaka R, Kumagai T. et al. Effects of long-term radiation exposure on chromosomal aberrations in radiological technologists // Radiat. Res.- 1990. Vol.31. - № 3. - P.270-279.

120. Lalic H, Radosevic-Stasic B. Chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes in subjects occupationally exposed to ionizing radiation or chemical clastogens // Folia Biol (Praha). 2002. - V.48. - №3. - P. 102 - 107.

121. Lalic H., Lekic A., Radosevic-Stasic B. Comparison of chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from people occupationally exposed to ionizing and radiofrequency radiation // Acta Med Okayama. 2001. - V.55. -№2.-P. 117- 127.

122. Lalic H.Cytogenetic monitoring of medical staff professionally exposedto Gamma and X radiation //Neoplasma. 2005. - Vol.52. - № 4. - P.307-313.

123. Li S.Y., Yandell D.W., Little J.B. Evidence for consident mutations in human lymphoblast clones selected for functional loss of a thymidinkinase gene // Mol. Carcinogen 1992. - Vol.5. - N4. - P. 270-277.

124. Little J.B. Radiation-induced genomic instability accident // Int. J. Radiat. Biol.- 1998.-Vol.74.-N6.-P. 663-671.

125. Little J.B., Gorgojo L., Vetrovs H. Delayed appearence of letal and specific gene mutations in irradiated mammalian cells accident // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 1990. - Vol.119. - N6. - P. 1425-1429.

126. Little J.B., Nagosawa H., Pfenning Т., Vetrovs H. Radiation-induced genomic instability: delayed mutagenic and cytogenetic effects of X-rays and alpha particles // Radiat. Res. 1997. - Vol.148. - №4. - P.299-307.

127. Lloyd D.C., Edwards A.A., Leonard A. et al. Chromosomal aberrations in human lymphocytes in vitro by very low doses of X-ray // Int J Radiat Biol. -1992. Vol.61. - №4. - P. 335-343.

128. Lloyd D.C., Purrott R.J., Reeder E.J. The incidence of unstable chromosome aberrations in peripheral blood lymphosytes from unirradiated and occupationally exposed people // Mutat. Res. 1980. - Vol.72. - P.523-532.

129. Lucas J.N., Awa A.A., Straume T. et al. Rapid translocation frequency analysis in human decades after exposure to ionizing radiation // Int. J. Radiat. Biol. -1992,- Vol.62. -P.53-63.

130. Major J., Jakab M.G., Tompa A. The frequency of induced premature centromere division in human populations occupationally exposed to genotoxic chemicals // Mutat. Res. 1999. - Vol.445. - №2. - P.241-249.

131. Major J.,Jakab M.,Kiss G., Tompa A. Chromosome aberration, sister-chromatid exchange, proliferative rate index, and serum thiocyanate concentration in smokers exposed to low-dose benzene // Environ Mol Mutagen- 1994. -Vol.23.-№2.-P.137-142.

132. Martignov A., Kantarija P. Chromosomal instability of peripheral blood lymphocytes in patients with precancer gastric cases donors // Georgian Med. News. 2006. - №137. - P.51-54.

133. Mendonca M.S., Kurohara W., Antoniono R., Redpath J.L. Plating efficiency as a function of time postirradiation: evidence for the delayed expression of lethal mutations // Radiat. Res. 1989. - Yol.l 19. - N2. - P. 387-393.

134. Mikhalevich L.S., Lloyd D.C., Edwards A.A., Perepetskaya G.A., Kartel N.A. Dose estimates made by dicentric analysis for some Belarussian children irradiated by the Chernobyl accident // Rad. Protect. Dosimetry. 2000. - V.87. -№2.-P. 109-114.

135. Milillo C.P., Gemignani F., Sbrana I., Carrozzi L., Viegi G., Barale R. Chromosome aberrations in humans in relation to site of residence // Mutat Res. -1996,-Vol.360.-№3.-P. 173-179.

136. Mole R.H. Antenatal irradiation and childhood cancer: cuasation or coincidence? // British Jornal of Cancer. 1974. - V. 30. - P.l 99-208.

137. Mole R.H. Childhood cancer after prenatal exposure to diagnostic X-ray examinations in Britain // British Jornal of Cancer. 1990. - V. 62. - P.152-168.

138. Mothersill C., Crean M., Lyons M. et al. Expression of delayed toxicity and lethal mutations in the progeny of human cells surviving exposure to radiation and other environmental mutagens // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - Vol.74. - N6. - P. 673-680.

139. Nakano M., Kodama Y., Ohtaki K. et al. Detection of stable chromosome aberrations by FISH in A-bomb survivors: comparison with previous solid Giemsa staining data on the same 230 individuals // Int. J. Radiat. Biol. 2001. - Vol.77. - №9. - P.971-977.

140. Nelson S.L., Giver C.R., Grosovsky A.J. Spectrum of X-ray-induced mutations in the human hprt gene // Carcinogenesis. 1994. - Vol.15. -N3. - P. 495-502.

141. Oestreicher U, Braselmann H, Stephan G. Cytogenetic analysis in peripheral lymphocytes of persons living in houses with increased levels of indoor radon concentrations // Cytogenet Genome Res. 2004. - Vol.104. - № 1-4. -P.232-236.

142. Oftedal P. Biological low-dose radiation effects // Mutat. Res. 1991. -Vol.258.-№1.-P. 191-205.

143. Padovani L., Caporossi D., Tedeschi B. et al. Cytogenetic study in lymphocytes from children exposed to ionising radiation after Chernobyl accident //Mutat. Res. 1993. - Vol.319. - P.55-60.

144. Pilins'ka M.A., Dybs'kyi S.S. FISH detection of spontaneous level of chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes in persons of different ages // Tsitol Genet. 2004. - Vol.38. - №4. - P. 62-66.

145. Pochin E.E. Radiation and mental retardation // Radiat. Prot. Bull. 1988. -№95. - P.10-12.

146. Pohl-Rulung J., Fischer P., Haas O., et. al. Effect of low-dose acute X-irradiation on the frequencies of chromosomal aberrations in human peripheral lymphocytes in vitro // Mutat. Res. 1983. - Vol. 110. - № 1. - P.71-82.

147. Prabhavathi P.A., Fatima S.K., Rao M.S., Reddy P.P. Analysis of chromosomal aberration frequencies in the peripheral blood lymphocytes of smokers exposed to uranyl compaunds // Mutat Res. 2000. - Vol.466. - №1. -P.37-41.

148. Pressl S, Edwards A, Stephan G. The influence of age, sex and smoking habits on the level of fish-detected translocations // Mutat Res. 1999. - Vol.442. - №2. - P. 89-95.

149. Ramzaev V., Yonehara H., Hille R., Barrovsky A et al. Gamma-dose rates terrestrial and Chernobyl radionuclides incide and outside settlements in the Bryansk Region, Russia in 1996-2003 // J. Environ. Radioact. 2006. - Vol.85. -№2-3. - P.205-227.

150. Ren-Shyan Liu, Wei-Li Chen, Fu-Du Chen Health examination and chromosome aberration analysis of residents living in 60Co-buildings rebar buildings // Int J Radiat Biol. 2002. - Vol.78. - № 7. - P.635-639.

151. Roberto В., Gemignani F., Morizzo C. et al. Cytogenetic damage in lymphocytes of healthy and thyroid tumor affected children from the Gomel region (Belarus) // Mutat Res. - 1998. - Vol.405. - №1. - P.89-95.

152. Rodvall Y., Pershagen G., Hrubec Z. et al. Prenatal X-ray exposure and chilhood cancer in Swedish twins // Inter. Jornal of Cancer. 1990. - V. 46. -P.362-365.

153. Rossner P., Bavorova H., Ocadlikova D., Svandova E., Sram R.J. Chromosomal aberrations in peripheral lymphocytes of children as biomarkers of environmental exposure and life style // Toxicol Lett. 2002. - Vol.134. - Issue 1-3.-P. 79-85.

154. Rossner P., Boffetta P., Ceppi M. et al. Chromosomal abberations in lymphocytes of healthy subjects and risk of cancer // Environ. Health Perspect. -2005. Vol. 113. - №5. - P.517-520.

155. Rozgaj R., Horvat D., Racic J. Cytogenetic damage in persons employed in clinical nuclear medicine departments // Health Phys. 1984. - Vol.47 - № 4. -P.659.

156. Salomaa S., Koivistoinen A., Paile W. et al. Chromosomal aberration analyses of byelorussian children exposed to Chernobyl fallout // IRPA8. 1992. - Vol. 1. -P. 801-804.

157. Salomaa S., Sevan'kaev A.V., Zhloba A.A. et al. Unstable and stable chromosome aberrations in lymphocytes of people exposed to Chernobyl fallout in Bryansk. Russia // Int. J. Radiat. Biol. 1997. - Vol.71. - P.51 -59.

158. Scarpato R., Lori A., Panasiuk G., Barale R. FISH analysis of translocations in lymphocytes of children exposed to the Chernobyl fallout: preferential involvement of chromosome 10 // Cytogenet. Cell Genet. 1997. - Vol.79. - №1-2.-P. 153-156.

159. Scarpato R., Migliore L. Comparison of spontaneous structural chromosome aberration frequency in 48 h-cultured human lymphocytes mitotically arrested by different colcemid treatments // Mutat Res. 1996. - Vol.361. - № 1. - P.35-39.

160. Sorsa M., Wilbourn J., Vainio H. Human cytogenetic damage as a predictor of cancer risk // Mechanisms of carcinogenesis in Risk Identification. Lyon. IARS.- 1992. P.543-554.

161. Spiegler P., Norman A. Unscheduled DNA synthesis at low X-ray doses // Mutat. Res. 1970. - Vol.10 - №4. - P.379-387.

162. Stephan G., Oestreicher U. Chromosome investigation of individuals living in areas of southern Germany contaminated by fallout from the Chernobyl reactor accident times // Mutat Res. 1993. - V.319. - №3. - P. 189 - 196.

163. Stephan G., Pressl S., Koshpessova G., Gusev B.I. Analysis of FISH-painted chromosomes in individuals living near the Semipalatinsk nuclear test site //Radiation Research. 2001. - Vol. 155. - P. 796-800.

164. Stewart A., Kneale G.W. Radiation dose effects in relation to obstetrics X-rays and childhood cancers // Lancet. 1970. - June 6. - P. 1158-1188.

165. Takahashi E., Hirai M., Tobari J., Utsugi T. Radiation-induced chromosome aberrations in lymphocytes from man and crabeating monkey. The dose-responce relationships at low doses //Mutat. Res. 1982. - Vol.108. - №6. - P.630-632.

166. Tanaka K., Iida S., Takeichin N. et al. Unstable-type chromosomal aberrations in limphocytes from individuals living near Semipalatinsk nucleartest site radiation // J. Radiat. Res. 2006. - Vol.47. - P. 159-164.

167. Tawn E.J., Binks К. A cytogenetic study of radiation workers: the influence of dose accumulation patterns and smoking // Radiat. Prot. Dosim. 1989. - Vol.28. - № 3. - P.173-180.

168. Tawn E.J., Whitehouse C.A, Tarone R.E. FISH chromosome aberration analysis on retired radiation workers from the Sellafield nuclear fasility // Radiat Res. 2004. - Vol.162. - №3. - P. 249-256.

169. Tawn E.J., Whitehouse C.A. Stable chromosome aberration frequencies in men occupationally exposed to radiation // J Radiol Prot. 2003. - Vol.23. - №3. - P. 269-278.

170. Taylor M.P., Vennart J., Taylor D.M. Retention and exretion of caesium 137 by man // Phys. Med. Biol. 1962. - Vol.7. - P. 159.

171. Testa A, Padovani L, Mauro F, Appolloni M, Anzidei P, Stronati L. Cytogenetic study on children living in Southern Urals contaminated areas (nuclear incidents 1948-1967) // Mutat Res. 1998. - V.401. - №1-2. - P. 193197.

172. Tucker J.D., Lee D.A., Ramsey M.J. et al. On the frequency of chromosome exchanges in a control population measured by chromosome painting// Mutat. Res. 1994. - Vol.313. - P. 193-202.

173. Tucker J.D., Morgan W.F., Awa A.A. et al. PAINT: a proposed nomenclature for structural aberrations detected by whole chromosome painting // Mutat. Res. -1995. Vol.347.-P.21-24.

174. UNSCEAR. Sources, Effects and Risks of Ionizing Radiation. United Nations Scientific Committee on the Effects of Atomic Radiation. 1988 Report to the General Assembly, with Annexes.N.Y.: United Nations, 1988.

175. Varga D., Hoegel J., Maier C., Jainta S. et al. On the difference of micronucleus frequencies in peripheral blood lymphocytes between breast cancer patients and controls // Mutagenesis. 2006. - Vol.21. - №5. - P.313-320.

176. Verschaeve L., Domracheva E.V., Kuznetsov S.A., Nechai V.V. Chromosome aberrations in inhabitants of Byelorussia: consequence of the Chernobyl accident //Mutat Res. 1993. -Vol.287. -№3.- P. 253-259.

177. Wang Z., Boice J.D., Wei L., Beebe G.W., Zha Y. et al. Thyroid nodularity and chromosome aberrations among women in areas of high background radiation in China // J. National Cancer Institute.- 1990. Vol.82. - №6. - P. 653-659.

178. Wild C.P., Law G.R., Roman E Molecular epidemiology and cancer: promising areas for future research in the post-genomic era // Mutat. Res. 2002. - Vol.499.-№1.-P.3-12.

179. Wolf G, Obe G, Bergau L. Cytogenetic investigations in flight personnel // Radiat Prot Dosimetry. 1999. - V.86. - №4. - P.275 - 278.