Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сравнительная характеристика морфо-функциональных особенностей почек половозрелых и новорожденных доноров при экстракорпоральном подключении в эксперименте

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Автореферат диссертации по теме "Сравнительная характеристика морфо-функциональных особенностей почек половозрелых и новорожденных доноров при экстракорпоральном подключении в эксперименте"

ТБИЛИССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ им.

и.двшшвили

На правах рукописи

кшукудиаи/! ия сезериановна

УДК 591.8+591.81+591.3

сравнительная характеристика шрфо-фушщко-нальных особенностей почек половозрелых и ^ новорогленных доноров при экстракорпорально!/' шдкзиекии в эксперишнте

(03.00.11 - экбркологкя, гистология п пктологя")

а втор е & е р а т диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических у.еук

Тбыисд - 1992

Работа выполнена з отделе патологической анатомии Института экспериментальной морфология /щ.А.Н.Катишзили All Республики Груз л з 'лаборатория, трансплантологии органов Тбилисского научно-иссл дозательского института экспериментальной и клинической хирургии ;:м. зкад. К.Д.Эрпстази г,!3 Республики Грузия

'•Научнее руководители: доктор медщлнскях наук, заслуженный ■ • дзлтзль науки, лрсфзссор У.А.ГАБЛШ

"доктор медицинских наук, профессор Л.Г.МЖАГАДЗЕ

-Сфзпаальные оппонента: доктор медицинских наук, прсшоссор -

З.Г.ЦЛГАРИШ доктор 6иолог лч зек их наук, профессор Г.К.ГОПШДЗЕ

Зедущзе учреждение -. Институт зоологии All Республики Грузия

часов на -заседания специализированного совета К.С-57.03.17 .Тбилисского государственного университета им. И.Дкавахишвили (г. Тбилиси, 38CC4I3, Университетская, 2).

С диссертацией ьгажно ознакомиться в библиотеке университета -

Зашита диссертация состоится

1992 г в

Автореферат разослан " РотрРл.'Т) 1992

г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат биологических наук, доцент

Н.М.ЦИНЦАЦЗЕ

ОБЩАЯ. ZOPAKTEPHCTItKA РАБОТЫ

Актуальность тз:.а. lía современном этапа развитая медицинской науки аллотсананлантацяя потаг является наиболее у^йектяв.там :: действенном методом лечоши терминальной стадия почечной недостаточности. Накоплен большой огит по техническому осуществлению этой операции.

В настоящее время срока ;:изкн реципиентов нередко прзвизазэт 10 я дз:хз 20 лет поело переезда;: почек (О.С.Белорусоз я З.А.Го-ряллов, IS88; Anáren, 1989). Для многих больных пересадка почки о делала возможным аз только продление :глзш, но и социальную и профессиональную реабилитацию, Язкоторне зенщяны-рецяпненти стали мзтержш (А.5.Даренков, 1977; В.Л.Щутлаков, 197Э; M^koivcUi et 1976; Persons éi 1979; Cchar franje eU^.,1989).

Однако более широкое внедрение этой операция в клиническую практику /имитировано нехваткой донорских органов для пересадки (В.И.Щумакоз, 1976-1985; Я.А.Лопаткин, 1980; Л.Г.Манагадзе, 1981; Barnes, 1979; G^Ks el al, 1984; Curbs, И86).

Трансплантация почки от живого родственного донора по понятным причинам не мохет решить проблемы» Все попытки реализация ксеяотраясплантацяи почек от обезьян человеку (Sidr?^ 1963; Híl Keck el a I 1965; Sbans, A/a^riari, 1974) оказались безуспешнымя.

Возрастающая потребность в пересадке почек обусловила ориентацию трансплантология на использование почек трупных доноров.

Возможность успешной трансплантации взрослым реципиентам детских ночек, в той числе почек новорожденных, исследована как в эксперименте, так и в клинике (Г.Д.Иоселиани, Л.Г.Манагадзе,

1973, 1980; К.О.Абдушелшвили, 1981; Л.ГЛ,'.анагадзе, 1981; f е!йС.,1976; СК«ра& е< 1979; 1985). Тем не к<

эта операция все еше не нашла штрокого применения.

По данным ряда авторов (В.И.Клейза с соавт., 1978; В.И, натовский, 1979; Нооск аЦ 1979; Гг(с1татЫ 1981; почки новорожденных в ^ункппоналыю!.: отношении несовершеша сравнению с почки,'.и взрослого организма. Исхода из бтого сч ектся необходимые исследование корфо-функциональных особен! детских дочек и сдвигов, происходящих в них при пересадке I лкг/ решншентам.

В последние годы ьксперкментсльно кзученн закономерное? функциональной перестройки почек новорогдекннх при их транс тецип половозрелым реи,ыгиеитап (К.О.Абго'аелЕпв^и:, 1981; .1. кагадзе, 1981), а твкке характер г^/скетш кетазслпЕМз (!*.'.Б даиеилп, Л.ГЛ.'зкагадэе, 1987). Морфологические т.:е кЕмененил чек в втех условиях практически не изучены.

Рель .к аедвчк исследования. Основное целью настоящего и дозения явилась сравнивайся характеристике кор^о-ёункциок изменений почек половозрелых л яазоровденных доноров черев часе после подключения взрослы;,: реципиентам.

Для доемшгния укагевкой цел;; был;; поставлены следующие ковпне ьгдглх:

1. Изучить и токкгдо структуру печек яолсшокр. ксвсрощтепких допоров.

2. Оде кип- особенности тонкой структуры к штаоолкзпеа с половозрелых п когорог^еяних доноров в рекке;,: псстгрепсплаг пеонеш периоде- (черс-г 3,5 часа) при ее подключении иктактш реципиентам.

3. Оцепить особенности тонкой структура к иетаболпЕиа п<

половозрелых ц яоворсоденных доноров з саннем посттранспланта-цаокнсм периода (через 3,5 часа) ара се подключении реципиентам с почечкой недостаточности.

4. Определить влияние различных сроков тешгаво.1 лзвмли на тонкую структуру а метаболизм почет половозрелых л нозорозденжсс донороз з раннем посттрансплантационном периоде (через 3,5 часа) пра ез подюлзченаз реципиенту с почечаоЛ недостаточностью.

Научная новизна. Работа является первым целенаправленным исследованием по изучению метаболизма я тонкой структуры почек половозрелых л новорожденных доноров.

Впервые исследованы морфологические особеннее та почка ззрос-лых собак а щенков з норме к раннем псоттрэнсплантацнонном периоде (черзз 3,5 часа) при ез подключении интактным реципиентам, так .13 как морфологические особенности почек взрослых собак и щенков при пониженных и повышенных функциональных нагрузках на модели аллотраяееглантащш взрослым реципиентам.

Вперзые определено влияние различных сроков тепловой ишемии на тонкую структуру и метаболизм почка половозрелых и новорожденных доноров в раннем посттрансплантационном периоде (через 3,5 часа) при ее подключении реципиенту с почечной недостаточностью.

Доказана морфологическая пригодность почек новорожденных донороз для трансплантации взрослым реципиентам.

Практическая ценность» Доказана возможность использования трупных почек новорожденных для трансплантации ззрослым реципиентам. Пересадка трупных почек новорозденных будет способствовать снижению дефицита донорских органов и тем самым внедрения операции в клиническую практику.

Апробация работы проведена на расширенном заседании отдела патологической анатомии Института экспериментальной морфологии

им. А.Н.Натшвшш АН Республики Грузия (23.03.1992 г.). Результаты исследований долозкены:

1. На конференции молодых медиков Грузии. Бакуриани, IS8I

2. На конференции мол одах ученых Института эксперименталь морфологии км. А.Н.Натишвили АН Республики Грузия,Тбилиси,188,

3. На конференции совета молодых ученых к специалистов Не; вомайского РК J3KCM города Тбилиси, Тбилиси, 1987 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 научных pai Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из вве, кия, обзора литературы, 5 глав, в которых представлены резуль1 ти собственных исследований, заключения и выводов. Материалы ; сертации изложены на 118 страницах машинописного текста, иллех рированы I таблицей, 36 рисунками. В список литературы включе! 74 работы отечественных и 113 иностранных авторов.

МАТЕРИАЛЫ К МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа основана на анализе результатов 141 експерпыекте нг 242 беспородных половозрелых и новоровдекных5^ (от 2 до 4 нед« собаках. Основной экспериментальной модель» слугжло экетракорх ральпое подключение (ЭКП) почечных трансплантатов реципиентам. Реципиентами во всех опытах являлись половозрелые собаки.

В зависимости от поставленных задач все эксперименты разде ни на 4 группы к 3 серий (см. таблицу).

г/понгалзя некоторую условность откесеккя щенков 14-30 дней у периоду воворохденностн, мк по аналогии с литературой и для удобства изложения пользовались определением "новорогденные доноры" для обозначения шенков 2-4-недельного Eospocia.

Сб:цзя характеристика экспериментального материала

Цель опытов

езоля

Экспериментальная модель

К-во К-зо экспепл- ,?;зот-••онтов ных

Изучение мзтаболиз:.:а гонкой структуры почек исвовозденных и поло-возрэлах доноров

Сравнительная характеристика тонкой стоук-туш я мехаболязуа почек пеловозтзелах и но-зооояденных" доноров в тзаннем посттрзнсплан-тацяоннсм певиоде в условиях шнямальной функциональной нагрузки

Соавнятельяая характеристика тонкой ствукту-га л метаболизма почек половозрелых п яовагюк-денннх доноров в раннем посттсансплантационном периода в условиях по-зышенной функциональной нагрузка

Сравнительная оценка влияния тепловой ишемия на структуру и метаболизм почки половозрелых и новорожденных доноров в раннем посттрансплантационном периоде при ее подключении реципиенту с почечной недостаточностью

Контполь 10 10

ЭХЛ почек половозре- 16 26 лых донооов иитактним реципиентам

ЭКЛ почек новорожден- 13 26 них донооов 'Штактным пецлгнентам

ЭКП почек половозрелых 10 33 доноров реципиентам с почечной недостаточность а после 15-минут-ггой япемяи

ЭКП почек яовооозден- 14 28 них дояотюв сецагшент-там с почечной недостаточностью после 15-мияугяой ишемии

ЭКП почек половозрелых 20 40 доноров реципиентам с почечной* недостаточностью после 60-минутной тепловой ишемия

ЭКП почек новорозденных 10 20

доноров реципиентам с почечной недостаточность» после 60-минутной тепловой ишемии

ЭКП почек половозрелых 10 20

доноров реципиентам с

почечной недостаточностью

после 2-часовой тепловой

ишемии

ЭКП почек новорозденных 10 20

доноров реципиентам с

почечной недостаточностью

после 2часовой тепловой

ишемии

141

242

Для изучения метаболизма и тонкой структуры в норме (I г па) исследовали почки интактных половозрелых к новорожденных бак.

Во П группе (2-я и 3-я серии) опытов проводили сравштел характеристику тонкой структуры и метаболизма почек псловозр и новорожденных доноро». Исследовали и почки в раннем посттр: плантационном периоде в условиях минимальной функциональной ] рузки. Основной эксперкыенгалъной моделью в этой группе ошв было ЭКП почки половозрелому реципиенту. Реципиентами служа кнтактные кивоткые, и функциональная нагрузка на трансплантат ла минимальной из-за наличии собственных почек у реципиента, почечных трансплантатов осуществляли на бедренные сосуды рещ екта на 3,5 часа. У половозрелых доноров для ЭКП забирали ода дочку, у щенке© - обе почки с сегментами аорты и задней поло! вены. Почки не вреля ЭКП помещали б специальную камеру, в коз рой подчеркивали оптимальную температуру (38-39°С) и влажное: Для предотвращения свертывания крови в »кстракорпоральноы кое ре постоянно производили пнйузкоЕную геааринкзацЕЮ. Почечную ткань для исследования брали сразу ге после ЭКП.

В Ш группе (4-я и 5-я серии) опытов повышенную функционал ную нагрузку на трансплантат вызывали предварительной бкнефре томней реципиента. Сравнительную характеристику тонкой структ и метаболизма почки половозрелых и новорожденных доноров в ра нем посттрансплантационном периоде в условиях повышенной: <вунк циональной нагрузки производил!: на модели ЭКП почек реципиент после предварительного моделирования у них почечной недостато ностк билатеральной нефректошеи при сывороточной концеытрацц креатиника, равной 8-10

Б 1У груше (6-я, 7-я, 8-я к 9-я серии) опытов для сравни-

тельной оценки влияния :пло:.спх почек половозрелых и козосо'.сденннх докороз 0131 трансплантата к сосудам реципиента осуществляли посла "С-млнутнои л З-чзсозои тенлозой (температура +13 - +'Л0°С) :шэмлн.

В ошти Я, U л 17 групп почетную тг.аиь для исследования за-бдрзла сразу ;.се по окончании ЭКЛ трансплантата.

Кусочки, сиксироззгпспе в ялдксзгя Каркуз, зд/позяя ичоц-^лясп, серхыз среза толд>гко;1 до 5 мим скрашизолл гэматоксп-ихном я эозином, пикрсфудслнсм по Зан-Гпзону, а тзгссе использовали длл бн-лзяетгя аргярсЬхльныгс волокон, гликогена, гддкояроткиоз л киолн:

1 ЛргирсОЗильнне волокна зялзляля л методом Гоморн, гликоген а гликопротеиды - :;э Чзиадо'-су. Лззто^ерл^сгь --олл глч конi

ссллрозалл я сбработкоД кекоторах серийных срезов ди-лстазоД (SCO мг/i), ярнготозленяоД на 0,85/5 растворе ¿УаО, з течение 20 мин при температуре 37°С, Во всех случаях часть сзряЗжх срезов, окрашенных по Шабадазу, докрашлзаля слаба?! раствором метиленово-го синего. Кислые г лжозатаноглзкзны выявлял:! по методу ХеДля и альцяааозым синим (рН 2,5)о С целью идентификации кислых гликозл-миногликаноз проводили контрольные химические реакции с тестику-лярной и бактериальной глалуронндазаш.

Для электронно-микроскопического исследования кусочки ткани фиксировали я в 1% буферном растзсгое четнрехскиси осмия, приготовленном по Паладе на фосфатном буфере (рН 7,2-7,4) или лее в 2,5:5 растворе глютарэльдегнда с последующей дсфиксапиеи з 1% буферном растворе осмиевой кислом. Обезвачивзняе ткани проводили в спиртах возрастающей концентрация, а заливку - в смеси аралдл-та или эяона - 812 с полимеризацией в течение 24 часов при температуре +58°С. Кусочки во время проводки контрастировали и уранил-

ацетатом, ультратонкие срезы, приготовленные на ультратоке окрашивали цитратом свинца и исследовали в электронном мнкрс "Те¿¿^ БЭ -500" при увеличении от 1000 до 20000. Кегативнъ браненля при печати увеличивали в 3-5 раз.

Электронно-микроокопическоцу исследованию предаеетвовалс чение в световом микроскопе подутонких срезов толщиной I гли расеншк толукдановым сини.;.

Ориентируясь по полутонким срезам, проводили прицельную точку блока с получением ультратонких срезов нуяных участко! целенаправленного изучения изеледуеьих структур.

РЕЗУЛЬТАТЫ МССЛЕДОБАШП 13 )1Х ОБСУЖДЕНИЕ

Исследование ранке::' посттрецсплантадгсонноР йункцж не их ыютракорлоральчого подключения почек ;:нта:тно:лу реципиенту зело, чте гистоструктура лоч-ш пелоьозрелах и нозюро^дбждсс рс:-; через 3,5 часа после «¿и! (2-я п 3-я сорил) в принципе не

лнчеьтся.

В ось::я>: опыт о: капилляры клубочки:; ряездрены, кор.-: :.:изговое юцестьо почки несколько оточяо, гршшзд е.:

четко ашныгяется, в просвете праксЕаалшгг даигяьцев оЗкару:-: ко-ся скхсюпе апикальные чисти цитоплаз:.^ выстллапдего отечи ьпктелия. Е эппуежшлыЕх клетках днетельных канальцев от;:сч ея слзбоьырг::еккая вакуольная дистрофия. Околопакальцев^с сс уверенно расширены переполнены кровью, Ретикулинов е ьолок

ьскруг канальцев создают довольно густую, пкроко разьетЕлсии сеть, состоял:/» иг тонких аргиробильных золоконец дркхрко с ковего диаметра, сбразувдих нежные сплетения. Б стенках крог ню: сосзгдов выявляются неравномерно огрубеЕпне, кззитые, а I.:

г:г фрагментпроза.чта ретикулиновые волокна,

3 толхс пприеталь-юго ласта гсапоула клубочка, з цдтсплазме эплфолкя прсксимэльшх канальцев а в оизэлыюм слое стенка кровеносных сосудов глжоиротохщи а кислые гллкозаулногликаш выяв-ллзтзл з умерэннсм ко^гсествз.

Электсонио-макрсскопаческл со стороны всех изученных нзмл с-труктурних элементов почка з этах е-зраях опытов выявлены довольно злачыгслзныз с.'сзлгд, 1,:сс<ду отдельными гэядо?ел:1оцита:.гл кашшя-роз клубочка отмечена финестрацая, встречаются поры. Мезангааль-:сге клетка набухала, увел:гчэнц з объеме, ядро укрупнено, в цитоплазм з большое ".олач-зстзо рибосом, полисом, разнообразных зклачэ-;гай. Цодоиата визуально изменены мало, однако в них наблюдается активация спбсссмного аппарата. 3 подоцлтах канальцы комплекса Гаявдхз неравномерно рзсапре.ча. Расширены тохае цистерны эядоплаз матичаского ретякулума. Эпителиальные клетка капсулы клубочка теряют свойственную плоскую форму.

Зяателиоцлтн проксимального извитого канальца претерпевают изменения дистрсфгческой направленности. Отмечаются вакуолизация а набухание цитоплазмы, ядро несколько увеличено в объеме. Увеличены з размере макроворсанкя, некоторые ;ге горагментарозаны. Рас даренные канальцы аппарата Гольдаи на этом сроке опыта соприкасаются с набухшими митохондриями. Увеличено количество инвагинаций, пяноцитозных пузырьков.

В этих зе сериях опытов эпителиальные клетки дистального отдела нефрона претерпевают изменения, которые во многом аналогичны такозым проксимальных канальцев, однако она выражены в меньшей степени.

Эпителий прямых а собирательных канальцев почек в обеих сера-

ях заполнен большим количеством светлых мелких пузырьков и : кул. Митохондрии уднее кабух&ие, чем ь пронсющлькок отделе рона. Цистерны комплекса Гольдки ле;сат непосредственно под j кальной длазмалеммоЁ, выглядят расширенный:, с вокруг них г; руются мелкие вакуоли. Детошшсш оогята свобедшкг рибосом полисоиаыш. В собирательных канальцах, распола~еккых в t,:osr< веществе, tekss нарастает отек. Эпителий шглетст уплетенка зальные кекбраны гоютескн. На люгдшальном крае имеется незз тельное количество невысоких кзасроворсинок* Ции'ошшзьш соде; пиноцитозние пузырьки, сьидетельстЕу^хзге об ckïebhcî.: трапс-т

Почечная ткакь после 15-мвлутво£ паенст- (П группе) оте-з как у половозрелых (4-я серия), так з у новоролез-шз-ог докер: (5-я серия). Сосуда раоЕхреш, перекатает: цроьъг', в некого; сосудах отмечаются я&шазя ежа. liavосы, «sncyœ i

благодаря увеличена плоаадс сооужсстсЛ сети. Наряду с стечз встречаются корМЕЛьнке почечные; телшс с ^олостзш клубсчхоы капсулы овальной и серповидной хзгхтаг

отечный, просвети кг-к&льдег; сукап:. Г, дгггог>а.-. вс-псстг.* к:.:а место неоднородное нерпжипне гп1:7С--;'Л ксяьлще:-., ïxoizzz' sv: эпителия канальцев уилояе^ч Во ьссх осашлс хсч:т;уг bp:tip,á. нительно крупного кглкбра незкзчптелыйя кг:::.: -:;

злемЕ-HTbïiïï tj/iioro 1: стенка:; зж

них сосудов peíiiKjviiiiíübue ъолокзэ керазго;:«^;;» угас-'.с-зь*, ол ны, глее тип: (¡ рьгаск TJ .ревака.

Наш; данние нодгЕср^г-гпсг рсьульаг^игп: i'-*:

ленко (IS78), согласно kotüjkk ксзппчн'/ьлпгЕС ~з:>;«;е::л;: кг.п; в ого эпктелия oC-aspyzmssûXDi у..: с ь керв-х чье аз пос^е. плантации.

Надо отметить, чзо ъ 5-й сери;: озпеоь, по сраызекизз с 4-

рией, структурные изменения, описанные наш выше, менее выражены Имеют место лишь некоторое полнокровие сосудов, отек выстилающего их эндотелия, укрупнение клубочков, а такке слабовыраненная вакуольная дистрофия эпителия канальцев и незначительно ьыракен-ный отек мезканальцево!;. соединительной ткани.

Кислые гликозаминогликаны выявляются в почке е основной вокруг сосудов, в виде аморфной субстанции. В толце париетального листа капсулы клубочка почки кислые гликозаминогликаны аналогично 2-й к 3-й сериям опытов наблюдаются в умеренном количестве. Как в корковом, так и в мозговом веществе почки в периваскулярны участках имеет место значительное скопление гликопротекдов.

В 4-и и 5-и. сериях опытов отмечаются выраженные изменения в ультраструктурз всех отделов нефрона, но особенно изменены струк туры гдомерулярного фильтра: эндотелии, базвдышй слой капилляров, мезангиалыше метки, подоциты. иегду экдотелиальными клетка;,® капиллярной сети клубочков имеются расниренше поры. На бол сих увеличениях мссно наблюдать резкое набухание структур цнто-шизам эпителия. Ядро слегка вытянутое, почти не отличается ст хптгктного. Перикуклеаркое пространство расширено, сзгксясбно, ¡мелкозернисто. ¡¿итохондрпи округлены, просветлены, кристы ь ши укорочены, пространство ме~ду нерудной и внутренне:'-: мембранами "*:7схо1црзй расширено. В перикврггоне не обкарукиЕэ^тся свойственнее это:! зеке овальные митохондрии с малым количеством крнсг. Литоллсзмотическнй ретинулум расширен.

5 меЗЕНГиелшкх метках клубочка четко выражены пл.?змалегаа з: другие мембранные структуры клетки. Подоциты набуглие, увеличены в объеме, их педнкулы частично слившиеся, Ядра клетки увеличены б объеме, цитоплазма содержит расширение цистерны эндоплазма-тическсй сети. Комплекс Гольдки занимает обширнузэ зону е цитоплс:

ме. В непосредственной близости к комплексу Гольджи выявляются мультивезикулярные тельца. Подоциты содержат расширенные цистер ны цитоплазматической сети.

Эпителиальные клетки проксимального извитого канальца прете; девают выраженные дистрофические изменения. Отмечаются вакуолиз: ция к набухание цитоплазмы. На концах микровореднок щеточной ка: ш нейроцитов появляется вздутия, а семи млкроворсинки отекают ¡ утолщаются. Базальная мембрана проксимальных канальцев расширен: и просветлена.

Клетки даотельного отдела нейрона претерпевает изменения, ki торые во много:.; аналогичны таковым проксимальных канальцев, одн; ко они шревены в ыенызей степени. Митохондрии эпителиальных кл« ток набухеие, но крпсты сохраняют упорядоченность. Базальная ме: рана канальцев несколько уплотнена к гомогенна.

Эпителий прямых и собирательных канальцев в корковом веществе заполнен большим количеством светлых мелких пузырьков и везикул.

Следует указать, что структурные изменения, развивающиеся в почечной, ткани после 15-минутной иаеиш ЭКП швороедешшх донор; менее выраяены, чем у половозрелых доноров. Известно, что почгл новорожденных имеют такую :::е структуру и такое :;:е количество пес ронов, как и почки половозрелых мквотшх .(ЕЛ."..Ь'вргорин, 1577;

е"( IS78; Hocíe-Cc'mí? ct ¿L, IS8I). Функциональная по: ноцекнозть почки новорожденных квотных обеспечивается не толпа ее морфологической структурой, ко и состояние;.: метасолическ::х процессов (Г,:.В.Имедалвили, 1286; И.С.!.йшкудяЕН!1, IS87). Исходя из этого становятся понятными полученные нами данные о том, что почки новорожденных нквотных аналогично половозрелы:,; реагируют з любые вмешательства, что коррелирует с литературными данный:!

(Д.ДЛ5урванидзе, 1975; И.А.Гормашева и соавт., 1378; В.М.Гонтма-хер, Н.К.Зуфарова, 1964; Стерла е* 1979; Места, Е^ала 1384; Йа/юаНа, 1935).

Таким образом, результата наших исследований свидетельствуют о несомненной пригодности почек новорожденных доноров для трансплантации взрослим реципиентам и целесообразности их широкого использования для пересадки.

При ЭШ1 почек после 60-минутной тепловой (+18 - +20°С) ишешп: (1У группа) показано, что иорйо-функционалъные изменения в длительно шяемизированных почках половозрелых (6-я серия) и новорожденных (7-я серия) доноров усугубляются, по сравнению с животными Ш группы опытов.

В этих сериям: опытов корковое и мозговое вещество поче« резко отс-чно, в некоторых участках отмечается разрыв нервного листа капсулы. Иногда клубочки в спавшемся состачи-'П, вокруг гаи обнаруживается очаговая, чаше дщ^узнгя яг~"§о-Е2Стпоактсркся ин-бмътрация.

Реостате.!е «езду кннвльад;"! увеличено лз-ьа отека почек, Прос р.ети прямых ж нзхятих канальцев расширены, зпктелш; уплощен, пестами вакуедггзпрован. Ядра чауе шижогсяшг. В таких клетках з:г>б-.■ту.ре'юл исчезновение сеточной каешах. Озобешто розгам пзкенсю:-ям подвергаются эпителпоциты црякоЕ части дкстпл1.ных какалх.Цёз.

В ¡зпнтелпи проксимального отдела некоторых канальцев Еыр&~е-ш пекрсбистичесгае изменения, отслоение гп;нсэльиш: концов, что. наряду с вакуольной дг.строапей, по ¡киппо Псы-чН.*. с соезт. (1969), является специфически.! признаком аллотраксплгнтацж.

В отом еснектс ег.-ли данные подтверждаются данными чех авторов (ЮсК.Лопухин и Э.М.Когек, 1975), которые считают, что болкзея чувствительность гпителия проксимального отдела почек к пиемии

связана с большей потребностью клеток этого отдела в энергии высокой ферментной активностью.

Одним из ведущих признаков, характерных для пересаженных чек экспериментальных животных, в этой серии является ликфо-тиоцитарная клеточная ищельтрация ыекду канальцами и вокруг судов, нередко приникашая диффузный характер» Кегканальцеви сосуды резко расширены, в некоторых сосудах наблюдаются явле: стаза, мелкие кровоизлияния. Соединительная ткань вокруг сос; разрыхлена. В некоторых участках отмечается гомогенизация cti

Электронно-микроскопические исследования показали, что в ловнях 60-шжуткой тепловой шемаи почек среди различных тка! компонентов наиболее уязвила микроцнркуляторнвя сеть, зе koti «чедует порЕхение органоодецифическлх структурных элементов.

Признаки отека эндотелиоцитоь клубочкоЕых капилляров резз разены. Haojxr.inie распространяется на все зоны клеток.

В мезангиальш;^ клетках выражены явления гпиерпластпческс типа. Клетки увеличены ь иГ-;еме, мембранные структуры значите но гипертрофированы, ядра укрудчиг:. Цитоплазма содерсит pasi влепную спстег.^ фибриллярных структур с г.-кггочпсленкыш: еклв1 ми плотных гранул'и везикулярных коглонентов. Отр'_-?тки мезаш них клеток набухпие и вакуолизированы.

Ультрашжроскошгческие изменения пододитов захватывают щ де всего цитоподни. Последние утолщены и приобретают иной ре: профилей на ультратошеих срезах. Кроме того, меняется оргакиг цитсплазматпческнх органелл, увеличивается число г.-пкротрубоче ишгрофалаиентов. Набухание подондтоь сопровождается увеличекг толщины цгтоподий, что црЕводгсг к дополнительным нарушениям : стракственной организации фильтрационных целен.

Ш вполне разделяем мнение В.-А.Иахламоьа и Б.В.Шутка (I9E

считзндих, что кратковременная лпземия оставшейся почки вызывает в структурных компонентах стенок клубочковых артериол и фнльтра-цкснно-реарбсорцконного барьера обратимые дистрофические измене-

111'Л.

Ультраструктурно гпителиоцитн проксимальных извитых канальце резко изменены, наиболее пре&ормироьака апикальная их поверхност В отдельных участках микрозорсиню: сеточкой каемки эпителия укорачиваются и слипаются. Цистерн и канальцы цитоилазматической сети и ПЛЕ0ТИНЧ2ТСГ0 комплекса расширены, иногда фраг:.:ентировены Деструкция элементов зернистой цитоплазматическсй сети сопровождается увеличением количества свободных рзсбосом, беспорядочно ле мегях в гиалоплазме поврежденных ке^роцктов.

оялтелий канальцев дистялькых отделов почек отечен. Несоходп-мс отметить сохранение связей кезду сменными клеткс-ми и деструкцию азгикальных отделов.

Ъ згателзельнкх клетках пргла :: собирательных канальцев по-р:ле::х ззихровореикчЕТся эонп цзмолез.:.^, баг&льны:; отдел клеток и г ел клеточки с контяглы. Клет:::: увеличены в объеме глгззв::.' соразсз: га счет набухания. ¡.!итохсндрип хощентрирузх/ея в разных частях или,:';::; з яиленлчм;' дес трущих. Слабо выражен и закуользлл комле-наг: комплекса Голядли, занимехо::? окияоадсряу» зону. Яьно реДо--¡.'Ирвена зл:топ.ллз;:л'кчес:мл: есть. оссбекЕо шрогок.тья часть. ?сг мс улень'гзеко соде; ланне хзолл- :: рибосом.

Походя из Енгегздсгсбнкого, ^л; не мал ем разделить и:е&:в В.П лл-дсто^сз: (ИУе), Дйпстат^рсьиглип отсутствие слогз;-;еез;л:

:л л о;-. л их перес£\:нв£-л::з в течение чась.

^ 5-;" я V—;? сеуззлх опытов грг.:зл::ь; $;е~чдт коркевмм я мозге::::":.: сяол'л' почки нечегкея, мсстсми отертая. Отмечается разрез парум-

::ого лгхзга ¿саазуды. '12сго клубочки славшей я, зсхруг н-сс сбнаг

.•.лБаотзч счагзззл, а .■..¿стамл лл'-.^зязл ллллс-ллзглзцл л

Лллосл^ллл. ЗСглзл ;-:.;/бочксз логзочал-'сл олзллселлле ле::;зллз . .. •; / :;:: ; г :.*.:..; Цлллллазла окдогеллл ллуссплол валуе, злролгла, лдла Я:} о злко ч;гло2~згоозши. ¡?зос-:ся:-:лч цх-:; рзз;со уволлчоло .2-3 г. стеха почэ::. Лссззет казал.

злл уп-:од;Ц, :,:-зог-а:;н зз.-:/а-ди:ооБа:». Нелрсблс г: лл оз.чзгаиеае :: зокпст.чз.чрозегЕШе кзллоцлты чэуе найтщзатоя ' и рокои: тальках отдела:: канальцев. :£зсты случаи разрыхления л с лознлл доточней хае.чхи эллтелля, 3 ряде ланалъцез пролслмалъл с гдзла л ссильках отделов кг^рсиоз обрз'дазт на себя зллмаллз 7лч:;оа или полное о'.'слсенжг эллтелля 01 подле змцсй ::зг.йрапи, вегы г:эл:,л!х л сс<5;1рп2гльна< канальцев рагацреиз, оплгеллл утл дек, местами елутден. В мозговом вздестве йчйлюдзугоя точзчше места:.-.! более хрупкие кровоизлияния. ¡.!елкяе л среддае сосуда обеих а^лх сериях часто резко рассиреяы, лкогда с явлениями с за. Отзк соединительнол ткани наиболее варазел в корковом слс

Лрглрсфлль.чиз волокна в стенках каналщзз л кровеносных с доз резко л неравномерно утолщены, часто фрагментирозаны.

Г;п1копротепдп выявляются в неравномерном количестве как I топлазме нефроцятов я базальном слое канальцев, так а в стеш кровеносных сосудов а зохрут них. Содержание :ке кислых глпко: ногликанов, по сравнению с предыдущий сериями опытов, утлены Следует указать, что в некоторых, особенно в некробиотически мененкых эпителиальных клетках, выстилащих канальцы, в отлн от предыдущее серии опытоз, начинают выявляться мелкие зерна г.огена.

Установленные нами на светооятическом уровне изменения а телия капилляров клубочка имеют в своей основе определенные

раструктурные сдвиги в виде большого количества везикул, обусло! ленные, вероятно, прекращением транскапиллярного кровотока. На лнминальноЁ поверхности эндотелиоцитов появляются выросты и скл£ кн, которые у интакткых кивотных практически отсутствуют. Кроме того, в периферических зонах эндотелиальных клеток увеличивается количество истинных пор, что связано с разрушением диафрагм, заг рываших внутриклеточные фенестры.

¡Лезангиальные метки значительно увеличены в объеме в основном за счет отека, они как бы сдавливают петли капилляров и умен кают их просвет. Ядра мезангкальных клеток с глубоки",и; инвагинациями, придавщкмл ядру необычную ферму. Цитоплазма подоцитов насыщена разнообразными по форме, величине и плотности включения.1."! лизосомами и сравнительно больмим количеством фибриллярных с тру к тур. Педикулы отделены от йрагмеЕтироваккых трабекул, и их части цы заполняют подоцктарное пространство. Ядра подоцитов приобрела ют вытянутую, причуджвуо форму, глыбкп хроматика образуют осьс.о Сильные зоны. Часто педикуль: укорочены, трабехулы врегрзхенк ь истонченные нитевидные стрости:. Цитоплсзыа некоторых подоце^оь становится гомогенной, а ядра-пикнотзгчшмх.

Электрошс-шы:роскопкчесглы: анализ описанных Еыце структурных изменение клубочков показал, что последние приводят к кьруис-нею процесса фильтрации, что, очевидно, является пгнчнчо;: отлео;-ния глыбчатого бежа в полос?:-: капсулы клубочка.

Наиболее выраженным удьтраструктуркым игиенешгям подвергается клетки канальцев проксимального отдела вешрокв. Ка пппкалъноп поверхности ряда нефроцптов наблюдается частичное или полное разрушение цеточнсИ каемки. Нарушена характерная организация sch эпителиальных контактов. I,Митохондрии набухшие, внутренние перегороди: в них часто разрушены, наружные оболочки разорваны.

3 эпителии канальцев дистальяых отделов отмечаются полпмо] ;.:;лзм л отек митохондрий, ларупеяив их упорядоченной „токализад; з ::я5гкз. !',1з,=:кле?очаое зэдэстпо соединительно!} ткани просзетл; но, пгдзэт у-эсто раз?зкенпз йг.Зралллряих структур, что езддетз. сгпуэт об огэкз л изманзшгд уроэпл транспортных процессов. Кр< то^'о, з эплтелисцдгэх проксимального и дзстального отдедоз не-, :п тбнару.чнзээтся ныУсма сеззестрацил цитоплазмы.

3 еоблр-ггельыых а прямых нзяэльцзх под эоягзляем вылзллзт! отек мезуточяоЗ ткани. Просвет этих канальцев я ме.ткаяальцззы: :«аггушроз расаирэл. Зыстллатсдий их эпителий яабухалд, а пикала оубз пикальяэя области клетки содержат много пинопитозных пу: коз, цитоссмальных образований, вакуолей.

Сосудистые элементы резбсорбционных барьэроз почки подпар; ;отсл значительным из.\;знэнияц, что наиболее рано проявлю ¿ел н; упозгГ-э меякзнэльцззнх капилляров.

Аналогичные данные получены М.В.Бкленко (1978). По ее дан; з первые 6 часов после эллотрансплантации наблюдается умеренж усиление сброса контрастной кассы через дилатированныз выносят сосуда.

3 8-й и 9-й сериях обращают на себя внимание нарушения ре; логических свойств крови, выражающиеся в стазах. В эндотелиал; клетках сколоканальцзвых капилляров наиболее изменены их перид рлческиз истонченные части. Отмечаются дистрофические изменен; эндотзлиоцптов кровеносных сссудоз мелкого калибра, иногда ра; шение стенкп перитубулярного крозеносного капилляра.

7льтраструктура стенок сосудов капиллярного типа дает осяс кие говорить о регионарных нарушениях процессов мпкроциркулящ выражающихся в явлении прилипания кровяных элементов к стенке судов я миграции последних аз кровяного русла в периваскулярнз

соединительную ткань.

Анализ литературы (Е.Е.Мельман и Б.В.Шутка, 1976; БШ.Шутка,

ные наблюдения по ЭКП почек новорожденных щенков взрослым реципиентам в условиях различной функциональной нагрузки показали полную сопоставимость результатов исследований с данными, полученными у половозрелых доноров по всем наиболее важнкм параметрам.

Тепловэя ишемия во всех группах и сериях опытов вызывала одинаковые изменения структуры и метаболизма почек половозрелых и новорожденных доноров.

На основании наших исследований могло также заключить, что изменения в почечной ткани при 15-минуткой к часовой тепловой ишемии носят обратимнй характер, тогда как при 2-часовой пиемии сдвиги более интенсивно вкракены, а в большинстве случаев необратимы как у половозрелых, так и у новорожденных доноров. Результата проведенных наш исследований полностью соответствуют данным М.В.Билекко (1370, 1971, 1978), полученным у половозрелых доноров при одинаковых условиях эксперимента.

Таким образом, особенности мор£о-функш:окальных изменений при экстракорпоральном подключении почек новорожденных докеров взрослым реципиентам, выявленные взакмоконтролирующкми исследсва ниягл! (сравнительная характеристика ранней посттрансплзнтаппокно морфологии почек половозрелых и новорожденных доноров в условиях минимальной и повышенной функциональной нагрузки к сравнительная опенка влияния ишемии на морфологию почек половозрелых и новорожденных доноров), свидетельствуют о пригодности почек новорожденных доноров для трансплантации взрослым решш;ентам.

с соавт., 1960; ^сги? 1970) и собствен-

3 Ы 3 о л ы

Г. Сравнительная тарто-дункднональная характеристика по ленксз л псдозсзрзлагх ссбах свидетельствует о мзтаболнческо подкоделяосгн поч-зк азнаоз и их пригодности дяя трансяланта

2. 3 раннем лосттрзиспланташояпом периода (3,5 часа по С-К11) морто-функпион-1льяое состояние почки половозрелых я но дзпных доноров при се подключении лятактним реципиентам не ллчаегся и характеризуется слабым расстройством кикроциркул и обратимыми дистрофическими изменениями как со сторона стр;

эя-змзятоз капилляров и кзнальцэз, так л оргэноспемлфлче* кдзтод л ;;х органзлл.

3. 3 рэннед: восттрзямкантзтюянры периоде (3,5 часа пси морфо-хуякпнональное состояние почки половозрелых и но*

данччх доноров при ее подключении реципиентам с почечной не; таточностыо характеризуется расстройством микрсциркуляции, I роз зыракается в повреждения проницаемости стенки сосудов, s демся основной причиной дисметабодических, а в дальнейшем и рофлческих изменений паренхиматозных элементов.

4. Интенсивность морфологических и метаболических измене почек находится в прямой зависимости от срока и характера Э1 римеята. По мере продолжительности эксперимента (15-, 60-мш нэя и 2-часовая тепловая ишемии) в почках как половозрелых, и новорожденных доноров при ЗКП с почечной недостаточность» ¿онрункционалъные изменения постепенно нарастают.

5. 15-, 60-минутная и 2-часовая тепловая ишемия одинаков влияет на структуру и метаболизм дочек половозрелых и новоро ных доноров. Однако эти изменения обратимы до 60-минутной те

вой ишемии.

6. Сравнительная характеристика ранней посттрансплантацкон-ной морфологии почек половозрелых и новорогэденннх доноров в условиях минимальной и повышенной функциональной нагрузки, с одной стороны, и сравнительная опенка влияния квемии на морфологлю почек половозрелых и новорожденных доноров, с другой, позволяют прийти к заключению о морфологической пригодности почек новорожденных доноров для трансплантации взрослым реципиентам.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Возрастные гистологические особенности почечной ткани при ее трансплантат::;. - Груда конферешзв молодых медиксв Грузии. Тбилиси, 1881, 223 с.

2. Морфологические особенности почечкой ткани при ее траиспл&ктг-цпн. - Тезисы докладов юбилейной конференции молодых ученых

г. Тбилиси, посвященной 60-летию установления советской власти в Грузинской ССР и 40-летк» со дня основания АН ГСС?. Тбилиси, 1981, с. 373-374.

3. Морфологические изменения в корковом веществе почни при. ыхт-рэкорпоральном ее подключении, - Труды конференции молодых ученых Института экспериментальной морфологи;: им. А.Н.Неи'ляг.-ли Ж ГССР, посвященной 60-летию образования СССР к ¿ОО-летию подписания Георгиевского трактата. Тбилиси, 1РВЙ, с. 66-81.

4. Гистохимические изменения в корковом веществе почки при ее экстракорпоральном педклгченпн. - Материала докладов конференции совета молодых ученых к специалистов Первомайского РК ЛКС" города Тбилиси, посвященной 70-летив Великой Октябрьской со-

цлаллстлчзско:) рззолгзцля. 'Мллисл, 198?, с. 39.

5, .Морго-^унзцзоналънаэ лслзнеяля почзн поел) эзстракорпора

го зодздхиэния здорового рецлсделта л репгпиеата о почэч

s ~

недостаточностью. Сообщения -АН Грузлд 14/ , Гг I, J.292, с 192 (соззг. У Л.Глбуллл, Я.Г.^алагздзз).