Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ОБМЕН БЕЛКОВ В СИСТЕМЕ ГЕМАТО-ЭНЦЕФАЛИЧЕСКОГО БАРЬЕРА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ОБМЕН БЕЛКОВ В СИСТЕМЕ ГЕМАТО-ЭНЦЕФАЛИЧЕСКОГО БАРЬЕРА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА"

А-з-ут

министерство сельского хозяйства и продовольствия .' * российской федерации .

санкт-петербургская государственная академия .... ветеринарной медицины

На правах рукописи

ПАНОВА Наталия Александровна

удк 619 : 612.015.3 : 81 636.2

ОБМЕН БЕЛКОВ В СИСТЕМЕ ТЕМАТО-ЭНЦЕФАЛИЧЕСКОГО БАРЬЕРА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА .

03.00.13 — физиология человека и животных

автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

■ч

\

санкт-петербург ^ 1996

Работа выполнена на кафедре физиологии сельско'хозяй-• ственных животных Санкт-Петербургской; государственной академии ветеринарной медицины.

Научный руководитель—.Заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных- наук, профессор КУЗНЕЦОВ А. К.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук^ профессор .КОКОРИНА Э. П.; " . ' • кандидат ветеринарных наук, про-

. . . . : фсссор ДУГИН г. л.

Ведущее предприятие: Санкт-Петербургский ; государст-г венный аграрный университет.

Защита диссертации состоится « » .CPjh-*t>,яч> ^«.я.. 1996 г. в 13 часов на заседании диссертационного совета К 120.20.01 в Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины (196084, С.-Петербург, ул. Черниговская, 5). '■ :г ■■'■'■ ' у

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургской государственной. академии.ветеринарной медицины,- '

Автореферат разослан «

Ж

> . . 1996.года.

Ученый секретарь' Специализированного совета .>

доцент ЭПСЫМОНТ Т. А.

1. ОШЦЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЛПОТЫ

___Возникшеев 29-х Года* нашего столетия, благодаря работам академика JLC,ffiTepti и fee учеников, учение о гемато-янцефалическом : Барьере продолжает оставаться ваэкной фундаментальной пробленой биологической науки:

Большой вклад в jDO^BitTHe учения 0 гемато-эицефалическом -барьере внесли ^многие; как' ЪтечествеНные (Кйссиль Г Л., 1037; Фридман А.П., 1957; МаЙэёлИс МЛ.,1В?3; í>o«m Я.A.; J077; Шам-буров Д.А., 1094; Макаров А.Ю-,1ВТЗи др.). та« и оарубежиые (Ма к-И л ьве йнГ,, 1862; Davsoii П., 1070! Bredbery ■ м,, 1В79; Wood J.H.. 1980; ЭШкитейа OJ»., 1908 и др.). .-■.;'*

В результате ыногочисленныхисследований, относящихся в основном к человеку И лабораторным ЬкнвстЫй, Накоплен (значительный матерная О структуре и скшовныхвакононериостях функционирования ГЭВ, о формировании it составе ЦСЖ> Вместе с тем имеется много ещепереШеННЫх вопросов И Противоречивы* суждении. ,""''...■.■■ : :;" '* , '/' . • - •••' ■•'■.•< • 1 Функция ГЭВ у сельскомзяйетвенныкжмвотных .'научена ¡гедостаточна Немногочисленные литературные сообщения дли: тельное время касались только способов иол у Чения'Л л квора у ?ки-вотнЫх й изу Чен и него, состава {СИнеп A.B.,Í935; Федотов A. It, 1951; ФрИДмаН АЛ, 1971]. В пис ледт«Г> одьг На кафедре физиологии С.-ЙетерОургсКоЙ йкадемни ветеринарной-медицины выполнен ряд исследований на" Крупном рогатом скоте по изучению-обмена минеральных веществ (ЙонкйЬ (1Á^19B7), углеводов (Кочу^иа H.Á., 1091), липндов (СмалиНА-Г. 1901), faHtaMHHoe (Гамова ЕЮ., 109Й). \ ■Выполненная НаМн работа Посвященй изучению обмена Бел- -ков в ■ системе ГЭВ. АктуалЬностЬ1емы определяется важной ролью Оелгав в деятельности голоойош мозгёи-У большинства животных ■' Сел КМ составляют около половины сухого- веса мозга, у . взрослого Человека до- 35'Д> {Мак-Ильвейн .Г., 1962). ОиИ- входят в структуры Нервных клеток, в состав ,фермеП1х>в,гормонов, непо-Ьредетвенно учЬствуют fa обмеиных процессах. Моэга.' Виесте с тем обмен белков в Mwty у сельскохозяйственных.,животных.'не изучало п.-1Í моющиеся .отдельные сведения .рсодержании белков в ЦС?К и данные о белковом составе л ерш[гери ческой крови недочета точны-Для раскрытия основных: закономерностей метаболизма белка в системе

Цель й ваяачц'исследования. Основной цельк^нсслед^паний л мялось научение p^^i^l'^jJ^^fjeite' ое I ков, в rcyjoí|! юм моз|у у НАУЧНАЯ БИБЛИОТЕКА Моск. со„ь:;Ю)«М а: а додан

i л

крупного рогатого скота.

Для достижения поставленной цели были поставлены следующие задачи.

1. Определить содержание общего белки, белковых фрашшй к активность ашшотрансфераз (ACT и ДЛТ) и лшсворе, в сыворотке притекающей к мозгу артериалы1о<) крови и оттекающей от , ¿сего венозной кради, установить ttx ар^ерио-венозную разницу для всего мозга и проницаемость ГЭБ у крупного рогатого скота разнога возраста и пола. .

.-■■■■ 2. Исследовать влияний fia обыец белков в системе ГО Б физиологического состояния коров в разные периоды вЬспроизводи-тельНоп> цикла (яловост^, беременность,' /(актация). ■

3, Изучить у бычков обмен белкоа. а системе ГЭ£ при возбуждении ЦНС, вызванном кофеином, й при кетам иновом +ормо-нсбкии. ' .■ '*.'"■' . .

-, Работа выполнена В соответствии с самостоятельным разделом комплексной темы X» 7 плана НИР С.-Пет<ербургской академий ветеринарной медицины на 1091-1095 гг. Mi государственной регистрации Û1860070332. : ' '■ •

Нау^нар, новизна. В результате комплексного исследования впервые определены гомеостатические уровни общего белка, белковых фракций и активности аминотранефёраа в ЦСЖ, в притекающей К Моогуи обтекающей от него крови у крупного рогатого скота раэноп> возраста'Й рс^а,1 Определена артерио-веноэнал разница укапанных показателей'всего Мозга. Установлено* что головной мозг в нормальных физиологических условиях больше выделяет в о+тошющую венозную Кровь рбЩего белка » белковых фракций, чем получаем их ий артериальной крови. Определены npoiirt-цаемост!. ГЭС для общего белка И белковых фракций, альбушто-глобулиновый коэффициент И корреляционные связи между содержанием ; белков ' в крови ■ и ЦСЖ, между активностью ACT ii АЛТ в крови и ЦСЖ. 1|3УЧеновДияниенз обмен бел коз физиологического состояния коров в периоды воспроизводительного цикла, при котором установлен более интенсивный обмен белков во вторую половину стелЬнЬсти и при лактации. Выявлены противоположно направленные изменения интенсивности обменных процессов в -мозгу в связи изменением функционального состопния ЦНС: повышение.интенсивности.обмена белков при возбуждении и , его уменьшение при торможений.

.> Практическая значимость.' Установленные' уровни сод* ржа-Him общего белка, белковых.¿Ьпакцнй и активности амшютрансс|ю-

раз в ЦСЖ, в притекающей к мозгу.артериальной крови И В оттекающем от него венозной крови у: крупнот рогатого скота. могут быть использованы В качестве нормальных гомеостатически х пока- -зателей - в диагностической И лечебнйй работе 8 ветеринарной практике и при научных исследованиях. С . S

Теоретически'? разработки й ма^ермлы дйссерТОДОИ) имеющие характер фундаментальных данных о функции ГЭВ, рекомендуется использовать В учебной работе, itpM Hatiwcartnit учебной1 и монографической литературы. ОНИ Внедрены В учебный процессна ряде кафедр С-ПетербургсКой государственной академии Ветеринарной медицины и в работу Ленинградской областной ветеринарной лаборатории. - ' V";.v: У1' ■'■..■ , : ;';:

Дпр^амйя равдты. Основные ПвдоЖени^ диссертаций доло-' »сены И Получили положительную оценку imtpex,научных конференциях профессорско-преподавательского .состава С-Летер-бургской академии ветеринарной медицин^ {1093; .1804, 1093 гг.), на научной конференций молодых уЧейЫх (10ЭЗ Г.), а также на кафедре физйоЛогйИ академии (1996 Г.).. ; ■ - - •' * . :

Публикации. Основные материалы диссертационной работы опубликованы в трех научных статьяхи двух теаисах в сборниках, научных рабЬт С,-Петербургской академии ветеринаркой медицины. ... Л . '*; .

Структуро й объем диссертации. ДИссертпПия включает разделы: введение; обзор ЛИтературЫ, Мйтерйалый методы исследований, результат^ собственных исследовайийй йх обсуждение, выводы ti практические Предложения, список литературы, йрило-' женин. ■ ■; /Л\ ■;-'. '.."'.'. V":-'

Работа изложена на 179 ст|х машинописного текста, содержит 16 таблиц, Ю рисуйкой, О приложений. В списке литературы приведены 123 работы отечествеШ1ЫХ И 91 работа зарубежных авто-' )к>в. ' ' "Л'*'■'..'..'■■ .'■'' ;• '

' Вопросы; вЫпосимЫе на защиту;' ■ ' ! 1 f . '

1. Основные закономерности обмена белков В системе ГЭВ, вытекатн^е из'результатов ком11Лекс1Юго йсслелрваник содержания оСщегоболка, белковых фракций/активности еминотрансфе-раз в ДСЖ; в притекающей к мозгу и оттекающей от нега Крови, определения ' их проницаемости * в; системе "ЦСЖ/Л" я артерио-' венозной разницы всего мозга,1 ' г ; ■""■

2. Влияние физиологического состоя пил коров в разные-периоды воспроизводительного циклаДплопость, беременность,''Лак- * тацин) на обмен белков » системе ГЭБ.'

- 3. Результаты опытро о влиянии функционального состояний ЦИС (возбуждение, торможение) на метаболизм белков ц головном мозгу.- ■-' ■ 4 ',*■.',. ',"'._..-'.■■,-.'.".': - '

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫХ1С СЛЕДОВАНИИ

Экспериментальная часть. ра5оть| выполнена в 1001-1084 гг на крупном рогатом- скоте черно-пестрой породы а совхозах "Ленсоветовский", "Ручьи", "ВаскеловскиЙ", И также поступившем для убоя на мясокомбинат фирмы "Сайсон" из хозяйств Ленинградской области. Ла бора торн ые исследованы япрове ден ы в условиях кафедры физиолог)»* вкцдемии. < ■.'.." '

В опыта* использовались клинически здоровые животные хорошей й удовлетворительной упитанности.

Кормление живстных в совхозах проводилось по хозяйственный рационам/Составляемыми в соответствии со Справочным па-собием "Нормы и рационы, кормления сельскохозяйственных животных": поД редакцией А-П- Калашнинова и Клейменова (1585).'Жиаот»ые мясокомбината содержа лиеь впредубойномцехе и включались в опыты, ^¿крравилс), на 2-3 день их поступления. Рацион вэрослого крупно«* рогатого ркотавнлктл'М кг сена и Ч-5 кг концентратов, длямододняй&-4-й кг сена и 1-9 кг концентра-тоа: / 'У.-1'" '■ ;; '; V- V ' ' ; - В соответствии с задачами исследований проведены три серии опытов. ; '-'ч'V'"-'*,'■' " 15 ■ ■*■■'.'

*В первой серии Изучался обйег} белка в системе ГЭВ у крупного рогатого скота. По'сходству признаков (возраст, пая, масса тела, упитанность) было сформировано по Р групп телочек и бычков в возрасте 7-Н дней'1; 2,3/6, В, 12,1 Йи24 месяцев и две 1руга1ы коров 5-6 и 10-12 'летнего возраст«.' В Пробах ЦОК, притекающей к моагу артериальной и оттекающей от него'венозной крови определялись ;содержание общего белка; белковых фракций и активность ' аспартатаминотрансфераэы иаланйнаминотрансферааь! По а рте- / рио-венозной разнице' определяли суммарное поглощение белка к белковых фракций ;все(м головным мозгом. О проницаемости ГЭВ судили по соотношению содержания белка в ЦСЖ ипритё кающе й к мозгу* артериальной крови ("ЦСЖ/А"^.'. ■ ' . ' ■ '

Использованный вопытахметодартерйо-венозной разницы, '/ по мнению .Г.Н. Кассиля (1С63),' позволяет изучить 'обмен'живого мозга, а. не состав мертвой или переживающей ткани и даёт возможность, судить о, физиологических ррбцеесах, происходящих в

головном мозгу. * .'."..* .. '

■ Во" второй серии опытов нзучаласьдйнамика показателей белкового обмена у крупного рогатого скота в системе ГО В в связи с tlx физиологическим состоянием в периоды еоспрокзводительного цикла. Были сформированы Четыре опктныс группы по 11-12 коров каждая в возрасте 5^7 лет. В первую rpytmy. входил ияловые пелактирующие коровы, ро вторую - нелактирующие - коровы в первую половину стельности; в третыо - нелагстйрующие ■ коровы па 7-8 месяцах стельности, в четвертую - лактпрующие яловые коровы. Стельность Коров уетнайлнвалйсь пН данным-зоотехнического учета,-сроков осеменения коров И результатов Исследований на беременность, проводимых Ьетспециалпсгтамихьзяйств. В необходимых случаях нами проводилось ректальное исследование для уточнения сроков стелЬносТи. \ "'.; ■ • ■

■ t В третьей: серии научалось влияние на белковый обмен в си-. ' стеме ГЭВ функционального состояпия центральной Нервной-системы. Опыты проводились па двух tpyrmax откормочных бычков в возрасте 6-6,5 месяцев .too 10 голов каждая. В первой группе изучалось влиянне возбуждения ЦНС, вызванного подкоиЫый введе-, нием кофеиИ-Йензоат натрия в доэё 0,013 г/кг МйСсЫ .тела бычков, во-второй группе - влияние Торможенйя в ЦНС, вызванного внут- . рл венным введение И кета м инавдозе 8 мг/кгмассМ тела.Наркоэ поддерживался'повторным Введением кеТамииа через 20-30 минут в дозе, составляющей 1/3 первоначальной: Схема постановки Опытов при этом Была одинаковой.. Перед введение^ того или 'другого фармакологического препарата одновременно брали-артериальную, венозную кровь И t|CJK, Полученные при этой уройНи Сйдерзкания показателей белкошно оЗмеЙа Принимались за йсходиЫе показатели. Затем, после1 применения возбуждающего ШШ тормозного препарата, последующие исследований Проводили через 19, 3D минут, 1, 2, 3, 6 и,12.часов. - . • •< .. :•

Регулярно проводилось клиническое обследование животных, при котором определялись: общее состояние Иивотных, частота дыхания, пульса, температура тела.; . . , • . ,

Взятие* крови и ЦСЖ для исследований Проводили в .одно-и то jko время суток; Преимущественно В утренниечасы Й натощак. Артериальную Кровь получали пз Орюшной аорты lijrteM Пункции ик-ьекциоиной иглой И-33 по методу IIJ-L Воронина {1937). Место yictwia распологалось на: уровне ■ Верхнего, контура - ЫдвЬдои1ко-рсберной мышцы лево») cropoiibi. непосредственно спереди! последнего ребра* Венозную кррвь получали из яремной ■ РеИы, при этом •

местоекаланглы располагали - u cauoii доршмие части мрсмнош желоба, ближе к ее 'луковш*е< »бразиому расширению, ЦСУ К извлекали из ■ церебро-сшшалышй цистерны имга путей субокцкпн-шыюй пункции по метолу АА Синева (1935) и ЛП. Фридмана (1957). Пробы крови и ЦСЖ в День itx взятия исследоцалн в лаборатории кафедры физиологии.

Содержание общего белка в.сыворотке артериальной, ъеиоз-ноЛ кроак и в ЦСЖ определяли методом O.ltLowry (1951). Белковые фракции определялись методом диск-злектрш^юреза в полиакрила мидиом геле с помощью прибора ПЭФА-1. Активность ас-парта та минотра нсферааы (АСТ, 2.6.1.1.1) и алашшаыинотрана)«-разы (АЛТ, 2.6.1.2) в исследуемых биологических жидкостях определяли При npMOiiiH набора химических реактивов ЛЛХЕМА "БиоТест", Каталитическую активность ферментов . быражади в ммкат/л. Оптическою плотность растворов при определении концентрации общего белка И активности ферментов, фотомет pupo вали на спектрофотометре СФ-4В. Количественные значения фракций читались на самопишущем денситометре при длине волны 60(1 нм и выражались в абсолютных (г/л) и относительных (ОД величинах. ■.

В опытах использовано 295 голов крупного рогатого скота, взято 870 проб крови и 435лнквора, проведено 1+910 анализов.

Полученный экспериментальный материал обработан статистическим методом биометрического анализа tía калькуляторе Т1 -35SL1Í Вычислялись: средняя арифметическая (М), кьадратиче-ская ошибка среднего (м), степеиь достоверности (р), коэффициент корреляции (г).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОНЛИИЛ

- XI» Обмен Белков в системе ГЭВ у крупном» рига юг о

'". ' * ''..■''.■■' скита" ' • . - " '

14 результате исследований установлены средние гомеостати-чёские показатели содержания общего белка и белковых фракций в сыворотке артериальной, иеноэной крова и в ЦОК (табл.1

Установлено,1 что головиой мозг, больше выделяет в опекающую венозную кровь общего>белка к белковых (фракций,'чем получает их из притекающей артериальной кропи.' Артерш»-сеноанал разница ихбыда отрицательной, cocía ил ала для общего белка -3,65В±0,496 г/л, 'дчя'альбуминов, -t,779±0,21S, для альфа-

\V

>V ' У

Тавлмпа l

Ссс*;жанис of пего в ь ft л sa.,. {«якояыч Фра кии >1, s сыворотке »сериальной, stioiao« хроая к » ЦСК у «рупйзго pora toro сяота (срманв дек awe по 20 «oipacTww группа*l,B"19í.'Mje

nojtaja-Tí л к Sa. DIM.. ' СыаорЬтка артериалтоЛ кроан." * CttiopoTxa ' «ехзтся кроаи ' 7T ~ " « • ИСЖ ■ "A-6" ' ■" рняисд ; ЗСо*4фм««иг ■ "lOt/A"

С8=иА валок г/л 70,38714,208 74,04)14.059 0,30811,046 . -3,65810,49«:' * 3,0045 .

альвукиик ■ г/л 35,43313,615 Ï7,01712,754 0,19810,057 . .-1,77910,315 ; 0,0960

• . \ ; 50,049í0,í2í 49,96210,588 ' Í7,3Í313,1Í3 . ■ ■ " i'

а-гловулииы г/л * <,344*1,045 7,33611,165 0,02910,004 : -0,39210,129 .0,0042

% 10,183*2,557 10Дв212,Чв6 ■ 9/21511,190 '

Pi <0,001 ; ; :Pi <0,001 " Pl <0,05 ■ Pj <0,001 ,.

В-глобулины г/л' i,13îi0,îîi . í,45S±0,275 0,04410,007 : -0,31940,090; 0,0071

8,8J«M60 8,83811,148 14',13412,32«

-.Pl<0,001. . ' <0,001 ' Pi <0,05 . . Pi <0,001

?:>0,05 ■ ' ?j >0,05 . Pj >0,05v ?2 >0,05 í''

у-гловулял« г/л 33,00ϱÎ,'Î5 ' 23,74515,221. 0,03910,005. -0,740+0,39; ' 0 joÓl4 ; .•

% . 30,93114,IOS : 30,99714,016 9,18S±0,3S4

. - ' ' «0,05 Pt ' <0,05. Pl <0,05 ; Pj<0,05 ■ '. ,

>г <o,os Pj <0,0s\ Pj >0,05; Pj >O,0¿ ' *

Pj «0,03 ■ Pj <0,05 ■ ?3 >0,05 ' РЗ' >o,'o5: ■ .. - ^. ' "

А/Г *0*4¿»uH*tfT ' -Gf97810,039 ' 0,98710,033 3,09910,373 ■

Прнкечаякел яосттерюсть ра»личий| Pj-no cp« вавки е.мьву пинами, 'р^-ло ере» в» »то в а-гловуямаин; ïj-no сра»пвя*в о втлоеулкиамк, , - ,

Г^оиулиноа -0(aea±0,lE9, длн бегга-глобулинов 0,319±íl,0»0 ■« гам-ыа-глобулинов-O,74Û±0,2i)2 г/л.

Отрицательна» артерио-венозная разница общего белка и белковых фракций, а тьюке низкие коэффициенты проницаемости В системе "ЦСЖ/А", равные дляобщегобелка 0,0045 г/л, для эль-бумииоа . 0,0060, а-глобул иноа 0,0042, р-гл обули нов. 0,0071 и у-гл обул иное 0,001* г/л, показывают, что белки не то лько поступают в мозг из притекаювдей к ишу артериальной крови, но в основном имеют ойдогениое происхождение, т.е. образуются в тканях мозга из ашшокислот и продуктов распада белков.

- Следует отметить очень низкую коицеграцию общего белка и бел1(овых фракциЙ в ЦС>К. Концентр4щ)я общего белка в ЦСЖ ; иеныце 6 220. раа тга сравнению с артериальной кровью и в 210 раз lio сравнению с венозной. : '.."

При корреляционном анализе выявлена средняя степень корреляции между содержанием общего беЛКа в артериальной крови И В ЦСЖу телочек (r«+0.64S, P<0,Q5), бычков (г=+0,772,Р<0,01) и очень высокую у 5-6 лвтнкх коров {^+0,887, Р<0,01) и 1Q-12 летних Коров Р<0>01). Корреляционная связь Между концентрацией Общего белка £ венозной кровИ и 'в ЦСЖ была средней степени у телочек (г=+0,Б09, Р<0,06), у бычков (г=+0,745, Р<0,02), 6-6 летних KopoB {r=+d16lá, P<0,0fi} n 8UcüKoH у 10-12 летних коров (Г=+0,ВЗв, Р<0,01). ; . , . .

• 15 результате исследований определено абсолютное и относительное содержание белковых фракций в крови и в ЦСЖ у крупного рогатого скота; (таблД). Концентрация альбуминов в ЦСЖ меньше,чем общего белка в 1,5 раза, альфа-глобулинов в 10,6 раз, бета-глобулинов - в 7,0 раза и гамма-глобулинов в 16,6 раз. Аль-бу м йно-глобуЛиновыЙ коэффициент в артериальной кровисоста-вил 0,97а±0,039, в венозной - 0,»67±0,020 и в ЦСЖ - 2,099±0,273. ,

Актиипость амипотрацсфераз в кроеи н ЦСЛС

,: Данные об активностиACT И АЛТ в физиологических жид-, костях головного мозга, представленные в табл.2 указывают на их активное участие в обмене белков в системе ГЭБ. • - -

' " Из таблицы видно, что активность ÁCT достоверно ныне активности АЛТ во всех исследованных 'жидких средах мсюга..Активность ACT lio сравнению с активностью АЛТ была ьыше в артериальной крови в 3,65 раса, в венозной - п 3,00 рая и в ЦСЖ - в 1,5 раза, - * ' . '

А ртерно-веноаная разница а мннотрансфераа отрицательная. Коэффициент проницаемости в системе "ЦСЖ/А" АСТ в 2,5 раза меньше, чем для АЛТ. ' .. .... . . . * 1 ■

. .' ; . ..Таблица' 2.

Средние данные об активности ACT и АЛТ в крови и ЦОК для крупного рогатога скота (п=198, М±шУ

Объект исследования. Активность, мккат/л Р .

ACT АЛТ

сыворотка артериальной крови 1,33210,335.. .0,365*0413 <0,001 .

сыворотка венозной * крови 1,36640,310 0,377*0,001 <0,001

ЦСЖ 0,157*0,010 0,104±0,010 <0.001 ■

"А-В" разница • .:.- -0,02410.020 -0,014±0,01I <0,001 -

"ЦСЖ/А" ' : 0,127 0,322 ■ <0.05

Корреляционная связь активности АСТ между артериальной кровью и ЦСЖ и мела отрицательное значение у телочек (гя-0,909,' Р<0,01), у бычков положительное (г™+0,840,'Р<0,01), а АЛТ,- отрицательная как у телочек (г=-1,01Р<0,01}> так и у бычков (г=-0,818, Р<0,0Ц • . >

3.3. Плиание возраста и пила на обмен белков в системе " .

• ■'.; гэв. - ■*■■■•- ' ■

Представленные в диссертации материалы свидетельствуют о влиянии возрастных и половых факторов на обмен белков в системе ГЭБ. ''■'.•■ "■;:'' • '.;■ ' ■- '' • ' / ' ...... ;'''■' '

,' ......Концентрация Ъбщел) белка как у телочек, так и у бычков в

артериальной И венозной крови с возрастом повышалась. Наиболее низкий уровень общего белка в крови наблюдался у 1-месячных телочек и 7-14 дневных бычков, а максимальный у телочек в 18-ти месячном, у* Быков в'24-х месячном возрасти'Концентрация общего белка'у коров 5-6 и 10-12 летнего ьозраста несколькопон ижала съ, по была достоверно более высокой пи сравнению с 7-10 дневнеми толнтами (Р<0,1Ш1). ' ' ' '• ""*, _.*-'.'

Концентрация общего белка в'ЦСЖ с возрастом, наоборот, уменьшалась, у телочек с 0,379±0,022 г/л в 7-14 дпенном возрасте

до 0,25310,010 г/л в 9-ти месячном возрасте, у бычков соответ-crpeifHo ■ с 0,385±0,024 г/л до' 0,24010,008 г/л у . IP месячных -(Р<0,001). Проницаемость общего белка в жстеме "ЦСЖ/Л" 'с вырастем животных также уменьшалась с O.OOGti у 7-14 дпевных телочек до 0,0032 у 18-ти месячных и соответственно у бычков с O.OOCF до 0,0032.. v

Возрастная динамика белковых ({[»ракций у крупного рогатого -скота отличалась рядом особенностей: Концентрация альбуминов п гамма-глобулинов в артериальной и венозной криви с возрастом' . , животных повышалась, а-р-t л обул иное снижалась. Концетрация всех фракций в ЦСЖ с возрастим уменьшалась. Снижались с возрастом также показатели а ртерио-венозной разниц й проницаемости фракции в системе "ЦСЖ/А". Следует отметить, что изменения уровней концентрации белковых фракщн! наблюдалось, как правило, у животных в 1Й-24-Х месячном возрасте, т.е. с наступлением половой и общей зрелости организма. "

: Активность ACT и АЛТ в сыворотке артериальной и веноэ-пой крови, а также в ЦСЖ как у телочек, так м бычков с увеличением возраста повышалась. Активность ACT в артериальной кроки у 7-14 дневных телочек составляла 0,712*0,046 иккат/л, у 24-х месячных нетелей 1,00510,013 мккат/л, в венозной кдтви спответ-CTBeHHo trr 0,816±0,l37 до 1,81510,013 мккат/л, в ЦСЖ - от 0,142±0,011 до 0,17210,0«» мккат/л. Аналогичная направленность изменения активности наблюдалась и у АЛТ.

Минимальный уровень активности ACT и АЛТ в артериальной и венозной крови наблюдался у телят в одномесячном возрасте, а в ЦСЖ - у 7-14 дневных телят. Максимальная активность амннотрансфераз Отмечается у 24-х месячных нетелей и быков. , .

Достоверных различий исследованных показателей обмена белков в головном мозгу в связи с полом крупного Богатого скота не выявлено. Наблюдалась тенденция к более высокому уровню общего белка в крови у телочек, в в ЦСЖ у бычков, а также более высокая артерио-венооная разница у бычков.

3.4. Обмен белков В mcrtite ГЭС в связи с физшмпгячт-' ским состоянием корой в периоды воспроизводительного пИкла.

Среди факторов, влияющих на метаболизм белков в системе ' ГЭБ, заслуживает Внимание физиологическое состояние житины* в периоды беременности, лактации," сухостоя.

IS'

. Исследования второй серии опытов показали, что у коров'во вторую половину стельности и в период лактации были достоверно -выше, чем у яловых нелактирукнцих taipoa артерио-венозная разница и содержание облиго белка в ЦСЖ (Р<0,001).

Артерко-венозная разница У «ороа всех четырех опытных " групп была отрицательной и колебалась, составляв у поров ьо вторую полоинну стельности -5,209±0,160 г/я, у лактируюндих яловых коров -4,13110,142, у яловых нелактирукнцнх -3,01410,165 и у нел актирующих в первую половину стельности -3,20710,150 г/л. Проницаемость общего белка в системе "ЦСЖ/А" была очень низкой, она колебалась у коров всех 4-х опытных rpynij от 0,0038 до 0,0010.

Значительная по объему работа выполнена но определению белковых фракций в крови и в ЦСЖ, ал ьбумино-глобул«нового ко-аффицмента, артерио- венозной разницы и пронш(аемости их в системе "ЦСЖ/А", результат которых (представлен в диссертации. ■ Установлено, что изменения уровней a-, ß- и у-глобулиноп в артериальной, венозной Kpouii и в ЦСЖ у коров в периоды воспроизводительного цикла недостоверны. Наблюдалась лишь тенденция к их Повышению в указанных биологических жидкостях.

Активность ACT у корой в периоды воспроизводитсяыюго цикла колебалась в артериальной крови от 1,50810,030 до 1,65010,082' мккат/л, в венозной крови от 1,52010,028 до 1,60810,040 и в ЦСЖ от 0,155±0,005 до 0,17810,008 мккат/л! Активность АЛТ колебалась в указанных средах соответственно от 0,38310,012 до 0,49510,012 мккат/л. от 0,3081:0,010 до 0,53310.012 мккат/л и от 0,09010,008 до 0,12010,009 мккат/л. Наиболее высикие уровни АЛТ наблюдались у коров'во triopyw половину стельности; наименьшие у коров в первую половину стелыиигш.

3.5. Млншше фупкциопалыюп! стошнм ЦП Сна обмен белкой в системе ГЭГ» у Гшмков.

В опытах третьей серии при экспериментально вызванных фарыа югяогическиыи препаратами возбуждении и 'торможении выпалена определенная зависимость обмена белотщ в г<кЛ овном мозгу <гт фу н кциоиа лыюго состоя Hg^l^HC. ¿¿¿ц' f* --1 '

. Концент|ыция общего белtSrtkiebi Шйсь в эрггриалытй К|хь ви ОТ 63,12!112,078 т/л : До 65,01911,555 - <;л,«1311,443 ü -ге'кжнц б-тн часов наблюдений, - в выюштй jtpubh cootimvtrchh«! . от r.ii,?;>6l2,8«3 г/л до «8,09511,388 - 67,12511,331 г/л, в ЦСЖ - от

0,283¿0,003- г/л до 0,317±0,003>s 0,285±0,001г/л (рис. I). Отрицательная артерио-вемозная разница уменьшалась с -3,62710,612 г/л до -2,6В0±0,467 г/л 1 па , 15 минуте: опыта, ' до -3,177±U,595, -3,662±0,713 г/л в последующие в часой опыта. Проницаемость общего -белка; в системе "ЦСЖ/А" Повышалась незначительно (0,0045 в исходном уровне до 0,0048 - 0,0047 на 1 и 2 часах опыта).

■ Головной мозг выделял В оттекающую венозную кровь боль- ; шебелковых 'фракций,1 Чём получал их из притекающей артери-. альноЙ крови как Перед Введением кофеина, так и в течение всего опыта.'АртернО-венознай разница альбуминов Перед введением кофеина равнялась -1,в85±0(2!Э 'г/л, а при возбуждении ЦНС колебалась от -1,0E4±0,12S до-1,875±1),15б г/Л, а-глобулштов соответ-'. ственно;-0,447*0,063, от -0,330*0,091 до -0,456±0,045, р-глобулинов -0,290*0,030; от -0,2331:0,035 до -0,517±О,О48 - г/л и т-глобулинов -1,040±0,052, от -0.7Cli0.054 до-1,051±0,044 г/л. Выделение-мозгом белковых фракций » Ьенвдную кровь а течение 2-х часюв после введения кофеина увеличивалось, а в'последующие периоды опыта уменьшалось. '"■■.:■

• - Активность ACT в ДСЖ, артериальной и венозной крови при возбуждении ЦНС повышалась и была достоверно более высокой по сравнению С иЬхоДным уровнем в течение всего периода наблкй дений. Наибольшей повышение активности ACT наблюдалось в период с ГпоЗ час после введения кос|>сяна как в артериальной (2,В4Р±0,010 - 2,810i0,012 мккат/л), так и в венозной крови (2,9ll±0,0l2 - 2,Й40±0,010 мккат/л), в ЦСЖ ---- на 2-м часу 1 (0,356±0,002 мккат/л). Разница активности ЛОТ между артериальной и венозной кровью увеличивалась от -0,0l4±0,011 в исходном состоянии до -0,06210,01? в первый час .Наблюдений, а ■ проницае* мость в системе ГО0 сЬответств^Нно от 0,104 дь 0,134.

Активность AJ1T при возбуждении Ш1С в артериальной, венозной кроЬИ й в'ЦСЖ также Повышалась, Разница активности АЛТ между яр!е|)иальйой й^венозной кровью была очень низкой: до введения кофеина «оставляла -0,01 £¿0,005 мккат/л, к 1 часу опыта возрастала до -0,ОЭЙ±О,О11 {Р<0,001). Коэффициент проницаемости вЧечение первых.трех часов.опыта повышался с 0,250 ■ .до 0,265 -(1,308.- v-'..■..„..-,.,,.'. л ,

ПрИ кетамийовом торможении в ЦИСконцентрация рСицего белка в сыворотке артериальной крови снижалась с 63,23242,347 г/л в ;исходИом~Сос+ояний'до Ы(583±1,4Ю"'г/л 'па 30-й минуто опыта ,({><0,001) в венозной Крови соответственно с 66,683*2,385 . г/л до' 64,3451:1,290 • г/л (Р<0,001), в ЦСЖ - с 0,284d0,U0g до

0,210±0,<Н1Тг/л (Р<0,001) (рис-2). Отрццательная пртерио-венозная разница, уменьшалась с-3,451±0,254; г/л ; до ,-2,4Э0±0,340 г/л, т.е. ; была более низкийПо сравнению с возбужден йеЫ. в ЦНС. Коэф-, фициент, проницаемости общего белка снижался с 0,0015 до 0,0033 к Î-му часу опыта. Абсолютное содержание всех исследованных фракций белков й артериальной И венозной крови Имели тенденцию^« снижению, à в ЦСЖ снижалось. Артерио-венозная разница .также уменьшалась. - *■

Активность ACT при торможении в ЦНС снижалась как в артериальной и в венозной крови, так и в ЦСЖ. Наиболее низкие показатели ACT Наблюдались На 2-ом часу опыта. Активность-АЛТ в артериальной и вейозной крови, а также ё ЦСЖ достоверно снижалась, также уменьшались Показатели артерио-ЬеНоэиой разницы и коэффициента Проницаемости. ■ ;

Достоверных Изменений альбумино-глобулииового коэффициента в крови и ЦСЖ на фоне торможения^ как H возбуждения, не выявлено. ' ' '

Таким образом, При окспериМеНтальном возбуждении и торможении в ЦНС большинство Исследованных Показателей обмена белков В системе ГЭВ изменились не оДНонаtiравленно. При возбуждении повышались уровни общего белка и белковЫх фракций в ЦСЖ, в артериальной и венозной крови, Коэффициент проницаемости в системе "ЦСЖ/А" и активность амипотранс^раз. При торможении, вызванном кетамийом, указанные показатели уменьшаются. Вышеизложенное, а также кПалйз показателей артерио-венозной разницы указывают на более Интенсивней обмен белков в системе ГЭЕ при возбуждений ЦНС! по сравйению с торможением. 1 ( . ч ,*. . - . ? '

оыЬодм

1. ,1*емато-энцефалический барьер у крупного рогатого скота поддерживает гомеостаз белков В ЦСЖ и крови, динамически изменяющийся В связи с потребностями мозга при разном физиологическом состоянии организма (возраст, ! пол, беременность, яловость, "лактация) и функциональным состоянием ЦНС (воэбуэКдение, торможение). ' , , ' . ^ .

2. ГоЛовноЙ мозг крупного рогатого скота <в нормальных физиологических условиях больше выделяет В обтекающую венозную кровь общего белка и белковых фракций, чем получает их из артериальной крови. Артерио-венозная разница общего белка со-

era вл лет -3,65010,406 , г/л, альбуминов ■-1,77010,205, ■ альфа-глобулинов -0,38210,12», бета-глобулинов -0,3 J &10,036, гамма-глобулииов -0,740Ю.202 г/л. ■■:' ;'•• • •

3. Концентрация общего белка в ЦСЖ равна 0,30010,046 г/д. Соотношение общего белка В ЦСЖ к сыворотке артериальной крови составляет 1:228, к сыворотке вецазной -1:240. В ЦСЖ содержится 67,36213,162% альбуминов, 9,31511,100% альфа-глобулинов, 14,234±2,Э2ед бета-глобулина В и ¿,10910,354% гамма-глобулинов.

4. Альбумино-глобулиновый коэффициент в сыворотке артериальной крови равен 0,07310,038, в сыворотке венозной крови 0,08710,028, в НСЖ - 2,00910,273. :. > '; : ; V

- 5. Активность ACT в крови и ЦСЖ выше активности АЛТ. Корреляционная связь активности ACT Между артериальной кровью и ЦСЖ у телочек отрицательная (г--0,в00, р<0,01),'у бычков положительная (г=+Й,В40, Р<0,01),' а АЛТ - отрицательная как у телочек (г=-1,0, Р<0,01), так I» бычков (гв-0,818, Р<0,01). ■■".'■■

6. С возрастом животных концентрация общего белка в артериальной и венозной крови повышается, а в ЦСЖ - уменьшается.

- Абсолютное и относительное' содержание, альбуминов и гамма-глобулинов в крови й ЦСЖ повышается^ а альфа- и бета-глобулинов - уменьшается. Головной, мозг увеличивает выделение общего белка, что при наблюдаемой низкой проницаемости белка в системе ГЭВ свидетельствует об усилений его синтеза тканями мозга. ■.'■''■.'■''■ ' . - ■■■"'' ' '

7. Достоверных различий исследованных показателей обмена белков в головном мозгу в связи с полом крупного рогатого скота не выявлено. Наблюдалась тенденция к более высокому уровню общего белка в крови у телочек, в ЦСЖ * у бычков, а также более высокая артёрио-венозная разница у бычков. , .*

, 8. Физиологическое состояние .коров.в периоды воспроизводите л ьнот 1щкла влияет на интенсивность обменных процессов в головном мозгу. У коров во вторую половину стельности и в период лактации достоверна выше, по сравнению с яловыми нелактирую-щйми коровами, содержание общего белка в ЦСЖ, его артерио-венозная' разница и активность аминотраисфераз (Р<0,001), Наблюдается тенденция к более высокому уровню общего белка, альбуминов и глобулинов в крови и ликвор>е.

9. Функциональное состояние ЦНС оказывает влияние на * ре гули рун и г tyio функцию ГЭБ, при возбуждений, вызванном Kotjie-• ином, усиливается интенсивность обмена белков в головном мозгуг а при кстамиповом торможении уменьшается.

' Л рактические предложения ■ ■

' *1 - ' 1. Установленные нами уровни общего белка, белковых фрак' • ций и активности аминотрасфераз в артериальной, венозной крови ■ и ликворе у крупного рогатого скота в связи с его возрастом, полом и физиологическим состоянием рекомендуется использовать в качества нормальных Гоиеостатйчсских Показателей в диагности-; - ческой: и лечебной работе, а также при проведений эксперимент тальных исследований.

1 • ч 2. Новые теоретические материалы диссертационной работы о функционировании ГЭЗ и обмене белКов в головном мозгу у крупного рогатого скота могут, использоваться в учебном процессе ветеринарных и зоотехнических вузах. ;

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1.Панова Н.А. Содержание амннотрансфераз (ACT it.AJET) в . ликворе крупного рогатого скота разного возраста и пола // Науч.

'. конф. проф.-препод. состава, науч. сотр. и аспир. С.-П6. вет. ин-та: Tea докл. - С.-П6., 199а С. 56. ,

2.Панова ILA. Обмен белков 'в системе:: ..гемато-энцефалическога барьера у крупной рогатого скота // Науч. конф

. проф. - препод, состава, науч? сотр. и аспир. С.-П6. вет. ин-та: Tea докл. -С.-П6., 1993. С 58. 7 . -

, 3, Панова 11.Л. Активность а м и нотра нсфераэ в ликворе и icpo-ви крупного рогатого скота // C6t. науч. тр. / С,-IIб. вет. ин-т. 1993. Вып. 120. Ч. I. С 17 -20. .

, 4. Панове.. Н.А. Обмен, общего ' белка в системе, гемато-энцефалического барьера у крупного рогатого скота// Сб. науч. .'тр, J C.-H6. вет. интт. 1993. Вып.1120. Ч, 1. С. 21-24.

. , 5. Панова UJV. Содержание общего белка и белковых фракций в ликворе, артериальной, венозной крови у крупного рогатого скота // Сб. науч.тр. / С.-П6. BfT. HiiTT.'l994. Вып. 121. С. 86-89,

' ' .Подписано к печати 27.06.96 г, * Формат бОХЭО'Ле. П. л. 1. Зак. 77ря. Тираж 100.

Типография С.-Петербургского государственного аграрного университета, г/Пушкин, уд. Садовая, 14.