Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Нарушения микробиоценоза, морфоструктуры кишечника и системы иммунитета при раздельном и сочетанном воздействии пестицидами (которан, хлорат магния) и сальмонеллами

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Нарушения микробиоценоза, морфоструктуры кишечника и системы иммунитета при раздельном и сочетанном воздействии пестицидами (которан, хлорат магния) и сальмонеллами"

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР МОСКОВСКАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ имени И. М. СЕЧЕНОВА

На правах рукописи

МУХАМЕДОВ Иламан

УДК 616.981.48-008.87

НАРУШЕНИЯ МИКРОБИОЦЕНОЗА, МОРФОСТРУКТУРЫ КИШЕЧНИКА И СИСТЕМЫ ИММУНИТЕТА ПРИ РАЗДЕЛЬНОМ И СОЧЕТАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ПЕСТИЦИДАМИ (КОТОРАН, ХЛОРАТ МАГНИЯ) И САЛЬМОНЕЛЛАМИ

03.00.07 — Микробиология

Автореферат

диссертации на соискаиие ученой степени доктора медицинских наук

Москва 1991

Работа выполнена в Первом Ташкентском ордена Трудового Красного Знамени государственном медицинском институте.

Научние консультанты:

академик АМН СССР, лауреат Государственной премии СССР, доктор медицинских наук, профессор А. А. Воробьев;

академик АН УзССР, заслуженный деятель наук УзССР, доктор медицинских паук, профессор К. А. Зуфароп.

О ф и ц н а л ь н ы е оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор А. С. Быков; доктор медицинских наук, профессор С. С. Афанасьев; доктор медицинских наук, профессор Л. И. Аруии.

Ведущее учреждение — 2-ой Московский ордена Ленина медицинский университет имени Н. И. Пирогова.

Защита диссертации состоится « 991 г.

в «. » часов на заседании специализированного совета

Д.074.05.010 при Московской медицинской академии имени И. М. Сеченова (г. Москва, Б. Пироговская ул., д. 2/6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской медицинском академии им. И. М. Сеченова (Зубовская пл., д. 1).

//

Автореферат разослан « . . . » / 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук,

доцент А. Ю. Миронов

ОНЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

-'.ЦКЙ

' Актуальность проблемы. В последнее десятилетие пестициды занимают все большее место в хлопкосехдих регионах республик Средней Азии, среди которых наибольший удельн-.; вес приходится Узбекистану. Освоение отечестваиной промышленностью производства этих препаратов и вовлечение в технологический процесс большого количества работающих ввдвинуло в качестве важной задачи сохранение здоровья и поддержание высокой трудоспособности лиц, занятых в их производстве. Это тем более необходимо, что действующее в СССР санитарное законодательство предусматривает обязательную токсикологическую паспортизацию всех соединений, используемых иди внедряемых в промышленность. Мезду тем, подавляющее большинство исследований, посвященных характеру действия пестицидов на макроорганизм, носят токсикологическую направленность, что недостаточно для разработки санитарно-гигиенических нормативов на эта препараты.

Длительное воздействие на организм даже малнх концентраций химических веществ способствует возникновению скрытых, малосимп-тоиных форм хроничеоких интоксикаций, что делает оообенно необходимым поиск новых путей изучения их патогенеза, а также разработку новых методов диагностики и профилактики. •

Пестициды, поступающие в макроорганязм различными путями, -оказывают определенное отрицательное воздействие в целом на весь. организм. В то Ев время наиболее чувствительными системами макроорганизма , отвечающими определенными реакциями, являются нормальная мищ)Офяора Евлудочно-кишачвого тракта (ГОТ), морф"структура оляеиотой кишечника и иммунная.

Макрофлору ЖКТ на современной этапа наших знаний следует рассматривать как важнейшую систему человека и кавотных, норм^ьяое функционирование которой в определенных уоловиях поддерживает их гомаоотаа.

Однако, воля воздействующие факторы, прямо или косвенно влияющие па процеооы фикааэдй, выживали© йди функционирование представителей нормальной, добавочной и случайной микрофлоры, по соей интенсивности превышаю! компенсаторные механизма экосистемы, то они будут индуцировать микроэкологичеокяе нарушения, характер проявления, степень вырааеннооти и длительность которых будет яависеть от до&ы, продолжйтельаооти воздействия.

Признание вышеуказанной роли нормалыпй микрофлоры поднимает перед органами здравоохранения ва&ный вопрос разработки принципов и методов выявления и оценки реакции нормальной микрофлоры на воздействие биологически активных соединений промышленного, битового и другого происхождения, изучения производств на предает опасности их воздействия на нормальную микрофлору, установления закономерностей развития систематических реакций на воздействие производственных факторов у различных контингентов работающих.

Многолетние клинические наблюдения (К.А. Беюл, К.Б* Куваева, 1986; Вге^ег вt &1., 1937), а также экспериментальные исследования, проведешша в нашей стране и за рубежом (М, Нелиус, 1984; •К.Е. Лизько» 1987; И.З. Зэльцер, 19&8; И.Я.Квятковокая, 1968; А.В. Лапчинская, 1920; В.М. Коршунов и др., 1991; М,Б. Тюрин, Б.А. тендеров, Х991), показали, что одним из ранних проявлений негативного аффекта длительного применения различных химических . препаратов является нарушение нормальной микрофлоры кишечника человека и ййботяых. Учитывая многообразие функций, выполнязшх нормальной микрофлорой (0,Н. Ностюковокая я др., 1983; И.Б. Кува-ева, 1985; ВоигШол et а1., 1984), но приходится сомневаться, что макроэкодогическиа нарушения, вызываемые пеотицидами, могут привести и серьезным последствиям как фушадионадьнбго, так и структурного характера» Целенаправленные исследования по экспериментальный аспектам действия пестицидов л некоторых их полупродуктов на нормальную шкрофлору кишечника до настоящего времени выполнялись в недостаточном объеме, что неадекватно уаоштабам их производства н кслодьаованкч. Так, нэяоно, каше, группы микроорганизмов в кишечника претерпевают изменения под действием пестицидов, нз выявлены и формы реагирования шкрофдоры на их длительное ила кратковременное интрагаотральное воздействие; а также ш разработаны методы коррекции микроэкологичеокях нарушений, вызываемых йайткщцами. Исследования в этих направлениях позволяет расширить представления о характере действия пестицидов иа шкрооргвняэи а его нормальную микрофлору, что позволит разработать мероприятия по профилактике я лечению даобиозов, вызываема пйсгйцидшй» -

Одяягл из чувотвятельпых показателей вреднего влияния химических соединений является изменение иммунологической реактивности организма, которой моазт проявляться раньше многих других па-тологдчзок.гх изменений (0,Н. Грен л к,' 1975;. А. Штанберг и др.,

I975i Street , Sharma , 1975; DeM. ot al., I960).

В настоящее время изучений иммунного статуса приобретает первостепенное значение, так как многие патологические процессы у человека могут быть как следствием, так и причиной различных нарушений тонкого отатуса - вторичных &..лунодейицитных состояний (?.В. Петров, IS76; Ф.Ю. Гариб, 1984; P.M. Рузыбакиов, IS86 и др.).

В последние годи накопилось .достаточно фактов, позволяющих считать, что пестициды могут оказывать шдунодепреесивное действие на макроорганиам (Л.А. ХовзеВа, А. Штенберг, 1976; P.M. Рузы-бакиев, 1986; Street , Sharma , IS75J lovae , IS83; Kollar,I9S4).

Слизистая ЕКГ в процессе эволюционного развития приобрела функции чрезвычайно.мощных защитных барьеров, препятствующих проникновению во внутреннюю среду организма микробов и других антигенов. Изучение проблемы взаимоотношения макро- и микроорганизма неразрывно связано о вопросом о проницаемости слизистой ЖТ для микроорганизмов и их антигенов» Однако, этот вопрос, особенно его морфологические аспекты, до настоящего времени остаются недостаточно изученный.

Сальмонвллез справедливо относят к одной из наиболее сложных проблем современной микробиологии. Рост числа заболеваний сальмо-неллозом, отчетливо наиетивчшйоя в последние годы во многих странах, в том числа и в СССР, л продолжающийся до настоящего времени^ придает оообун актуальность всестороннему изучении этой инфекций. Наряду о этим следует подчеркнуть, что в процессе жизни чаще всего происходит заражение оальмонеллезом уже на фоне определенной интоксикации пестицидами.

Вмэоте с тем изучение микробиоценоза, морфоструктуры ЖКТ и иммуно'логичеокой реактивности при раздельном и сочетанием ws-действии пестицидами и сальмонеллами отстает от современного уровня развития науки. По существу отсутствуют сведения о состоят:;! микробиоценоза кишечника, Т- и В-систем иммунитета, в процессе развития острого и хронического воздействия пестицидами.

В связи о вышеизложенным экспериментально-натурное изуеяие влияния раздельного и сочетанного воздействия пестицидами и сальмонеллами на микробную экологию и морфоогруктуру кишечника и на иммунную систему хозяина является весьма актуальным.

Приведенные предпоонлкн обуславливают целесообразность проведения настоящего экспериментального и натурного ясс-здования

микроэкологии и иммунного статуса, основная часть которые выполнена в рамках плановых научных исследований в Ташкентского Государственном медицинском институте.

Цзль и задачи исследования. Основное цоль настоящей работы. - изучить особенности микробной экология, и цат оархите ктоники кишечника при раздельном и сочотанном воздействии пестицидами и сальмонеллами в эксперименте, а таигке этих же систем у рабочие, занятых производством пестицидов. На основа обнаруженных закономерностей рекомендовать наиболее эффективные опоообы коррекции микреэкологии и иммунитета.

Для достижения поставленной цели бичи определены следующие конкратные задачи:

- изучить микроэкологшо различных отделов кишечника и отрук-турно-хинетические аспекты взаимодействия сальмонелл о клетками слизистой;

- .исследовать микробиоценозы, морфоструктуру слизистой желудочно-кишечного тракта я нватцпфтветю фактора защити у крыс пра раздельном и сочетанноы воздействии пестицидами и сальмонел-лаш;

- изучить возможность и эффективность биологической коррекции, дисбактериальных нарушений, вызванных пестицидами;

- изучить технологический процесс производства которана и хлората' магния;

- проанализировать заболеваемость рабочих, занятых производством которана и хлората магния;

- изучить микробную „крлогйи кшечнака и иммунный статус рабочих, занятых производством- которана е. хлората магния.

Научная новизна работы определяется следующими основными результатами:

1. Разработана унифицированная ш^одика оценки количественного состава аэробной и анаэробной, микрофлоры кишечника для целей токсикологического азуадшя,

2. Впервые проведано изучение микроакологии, морфОогруктуры слизистой 2КТ, неспзцифечзоких факторов иммунитета ара раздельном и сочаганном воздействии пестицидами (которая и хлорат магния) и сальмоишшшй в остром и хроническом эксперименте.

3. Епервьа установлены фазы й формы реагирования микрофлоры кишечника хозяина ва раздельное и сочетанйое воздействие сальмонеллами -й кз«?тицада.'Дй.

4. Впервые проведено изучение количественных и качественных изменений микрофлоры кишечника у рабочих, занятых производством пестицидов (которана и хлората магния).

5. Впервые изучено состояние клеточного и гуморального иммунитета у рабочих, занятых производством к-, .юрана и хлората магния, я установлено наличие у них Т-иммунодефицита. Одновременно активность В-сяотеыы иммунитета у рабочих значительно повышается.

6. Впарзые определены закономерные дисбактериальные изменения, происходящие под воздействием пестицидов. Показано, что которая обуславливает дефицит кишечной палочки я бифидобактерий, а хлорат магния - дефицит лактобактерий.

7, Выявлена фазиооть изменений в составе микрофлоры: наиболее ЕУра:-:аянкз изменения наблюдались на 3-7 сутки от момента введения яссмцадсв» нормализация происходила к 30 дао исследования.

8, Показано, что сочетанное воздействию пестицидами и саль- . монелдаш приводило к более выраженным изменениям в составе микрофлору а удлинению сроков восстановления.

9, Ооновиваясь на полученных данных впервые рекомендованы наиболее эффективные способы коррекция нарушений микроэкологии ц иммунитета, обусловленных воздействием пестицидов'.

Практическая значимость работа. На основании полученных данных разработаны методические подходы бактериологического изучения микробной экологии и цитоархитектоники кишечника, а также дана оценка состояния системы иммунитета при раздельном и сочетанием воздействии пестицидами и сальмонеллами в условиях эксперимента и у рабочих, занятых производством которана я хлората чагняя,

Материалы легла в основу методических рекомендаций:

X. Нарушения шкробноцаноза ншечкика н иммунного статуса у лиц,' имеющих контакт о пестицидом которан, юс коррекция, Ташкент, 1991 г.

2, Особенности дисбактериоза кишечника и нарушения в система иммунитета у лиц,. имеющих контакт , о пестицидом хлорат магния, и пути их коррекции. Ташкент, 1991 г.

На основании методических рекомендаций осуществляется ' юло-гичецкая коррекция у рабочих на: Ферганоком производственном объединении "Дзот" и Навоийнском электрохимичэоком предприятии, а также у лиц, имеющих контакт о котораном и хлоратом магния в республиках Средней Азии и Казахстана.

Материалы работы внедрены в учебный; процесс на кафедрах микробиологии, вирусологии и иммунологии, гкстологии ТапМИ й I и й 2, в Ташкентском педиатрическом медицинском институте.

На защиту выносятся следуздие полоаазия работы..

1.'Формирование дксбиотяческого ответа кжючно,'! микрофлоры на, раздельное к сочетанное воздействие ппотяцидами (которая, хлорат магния) и сальмонеллами.

2. Нарушения в микробиоценозо а системе' иммунитета у рабочих химических заводов, произзодшдос пестицида.

3. Влияние раздельного и сочетаняого воздействия пестицидами и сальмонеллами на морфоструктуру слизистой кдпечкика.

Апробация работа. Материалы диссертации были дслокены и оЬ— ,суздены яа: П конференция физиологов Узбекистана (Самарканд, 1974), Всесоюзной конференции "Реактивность и пластичность соединительной ткани" (Свердловск, 1974), Всесоюзно;; конференции "Гно-тобионты и органные культуры как метод лабораторного исследования" (Тбилиси, 1976),. I Всесоюзном симпозиуме "Ищуносупрессия при ад-лотрансплантации" (Ташкент, 1977)» Безсоюзном съезде патофизиологов (Ташкент, 1976), 17 Республиканской конференции ЦШ'Л медвузов (Ташкент, 1978), Всесоюзном съезде-гигиенистов, микробиологов д эпидемиологов (Ташкент» 1280), Вбклайной конференции Башкирского медицинского института (Уфа, 1983), Республиканской конференции колодах ученых (Ташкент, 1983), Республиканской конференции по клинической иммунологии (Ташкент,- 2984), I съезде микробиологов, эпидемиологов и гигиенистов Туркменистана (Ашхабад, 1986), Юбилейной конференции ТааГосйй (_ашсект, 1989), I Республиканском съезде иммунологов и аллергологов Узбекистана (Самарканд, 1991).

Публикация, По тема диссертации опубликована 41 работа.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы* методов исследования, экспериментальной части, обследования рабочих химических еэводов, обсуждения результатов и выводов (374 страниц машинописного текста). Список литературы включает 243 отечественных и 151 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 62 таблицами й 45 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ йосоль ш..объем,проведенных ксследозан-д-

. Дйя peasîMS поставленных задач нами ''или проведены экспеок-кеитшшо a натурные доследования.

Проведшн Ш серия экспериментальных исследований (табл. I).

Эксперт,юнт» пеовоИ сепии били проведены для решения вопроса о начальных ала раняих этапах воздействия сальмонелл на состояние с.чйзлстоЯ обохочш и «акройиоцеиоза »мечника. 3 этой серая окспапамсняа крыса баай разделены на три группы: первую группу (4Э).составляла йвтаатннв xpt'ot,. крыс второй группы (47) зара-азйа 1С ЧаесзоЗ культурой Sain, tyyhinurium , Материалом для за-pàssn:i.«i слуза.1 смыв агаровой кулшури сальмонелл. Крысам, голо-дегг.гл э vevaime 3-Й 'езеов, чгрзз рот с помощь» специального sc:ws взод'Уйсь 5 щ. раствора бикарбоната натрия, через 30 мин 2 1*л (X iispa» uffitpttteoîo стандарта) культуры сальмонелл. Б третье:! сскоакоЛ ~£руш& СЗВ93 ярасш аезде вскрития п?д эфирным наркозом йршой ososrâ на osgasos яодаздсаяой кашка, отступив 7-6 см от шюогшкая&но.то уяла, аааяаяввая« дзз нелкошв .лигатуры на расстоянии S-10 са друз? os друга a s просвет датированной петли шприцем вводила 0,2 мд испытуемой культуры оедьмокелл (опыт) или 0,2 ¡¿я отзридьноаро фазяодерячзокего раствора (контроль). 2ивот.чкх ааФшааа дзкзя1кэдяай черев 3, .6> .12, ?А часа после заражения.

^РЩ^-гШ"*?,здапарзшзнтов составили крысы, которым ока-еывалоо'ь сотрое.-п: 23?опачоское воздействие пестицидом которан, В острых' влагая :;;5i<ea:d одаокра-гнр ларорадьво зводила Р' личные дозы аоаяфааа дозяровон, рекомендованных- тохоикологамя я га-

гштсфамй). а в опытах крысам давала яотораяо^тю зо-

лу Cbmsoïo с&г-шоИ)'* В одной из*групп вгих исследований изучали , вездойо-ижё кояорзйй з ¿От9«ашг'8«1яи. tysMaurim . В этих целях гаавогнш ошгада• азодаж• которая, 'затем через 2'часа проь.-ди-sa I»атамшшццз »шмшадамя,. Щп. ссщнпс ошгтах крыс подвергали мттзхщ* чорза 1Г 3, 7/14, 30 дязй, а пра хронических - через t> 2,'.3* 4'¿шошШ'*... • • ,. . .•':"

-, - 3.' gФит экопериментоэ. яивошм оказывали острое а

хроапчэоков вейдейотзие аеотзцздем' хлорат магния. При остри ощг-«ax'içke яодваргаяияв:шшй.'ащш через X, 3, 7, 14 и 30 дней, при

I серия

Распределение крыс по сериям экспериментальных исследований

Таблица X

Виды воздействия

Ввды исследований

микро- ; гкстолс-'.электрон-'авгора-биолом-: гпчес- .'номикро- ;диогра-ческое ; кое '.скоакчес-'.фическое, : : йое :

Всего

Интактные 41 35 8 12 49

Пероральное заражение сальмонелл ачх 39 39 12 - 47

Введение1 в петлю: - физиологического раствора 54 37 14 12 56

- кулътурх сальмонелл 49 121 26 .23 127

Итого 163 232 60 47 279

П серия

Ш серия Хлорат магния

Виды воздействия

Которая

доза вводимого препарата

Иктактные

Максаыально-пеоеаосимая

доза

Порог острого действия

Порог острого

действия и его 30 кг/кг-

коррекция

Порог острого ' ' ' дейсгвия л- куль- 30 мг/кг тура сальмонелл

1000 §

30 мг/кг

Хроническое воздействие

Итого

Г,2 мг/кг

кол-во животных

*" 120 "

57

56

58

61

45 397

доза :кол-во вводимого :ак£ог-пэепарата : кь'х

58

2100 §

1269 мг/кг 57 1269 мг/кг 56

1269 мг/кг 20 мг/кг

59

41 381

Всего

* 230 ~ 115

ИЗ Ш

120

86 778

к - 2 х 1Сг сальмонелл

хронических - через I, 2, 3, 4 месяца.

После установления особенностей иикробиоцвноза при воздействии когораном и хлоратом магния у части крыс проводили профилактическую коррекции выявленных нарушений. В этих целях крысам в течение 7 дней вводили биологические препараты, затем пестициды - которан или хлорат магния в дозе порога острого действия. В Долях коррекция котоданового даобактериоза использовали бифвдум-бактерпн» хлорат магниевого дисбоктериоза - лактобактерин, по 3 дозы каждого ежедневно.

Воздействие которана а дозах 1000 мг/кг (1-я группа) и 30 мг/кг {П группа) на микрофлору кишечника при однократном перораль-ном введении исследовали на 113 крысах. Воздействие хлората магния в дозах 2IG0 мг/кг (I группа) и I26S мг/кг (П-группа) исследовали на 115 крысах. Оба пестицида .животным вводили внутрь с помощь» металлического зонда.

Длительное воздействие'которана и хлората магния на микробиоценоз изучено соответственно на 45 и 41 крысах. Животные в течение 4-х .месяцев употребляли ежедневно вместо обычной воды воду ö растворенными в ней пестицидами в концентрациях 1,2 да/л которана и 20 'мг/л хлората магния«

Таким'образом», всего в эксперименте использовано 1057 крыс, ■ из которых 279 при контаминации сальмонеллами, 397 в различных группах которанового воздействия я 381 при воздействии хлоратом , магния, • -

Исследования влияния пестицидов на кишечную микрофлору проводили з модельном эксперимента при внутрияелудочном "днократ- . вам л дательном вззденш препарата. 'Ö правомерности.использова-. нкя внутригшлудочйого вааденая пестицидов (вместо ингаляционного) Möiffio'еуДитьi исходя яз, следующих положений. Известно,.что .¿ра эгштаяйй аэрозоля даштаграцяя примерно половина ингалируемой. дозы,препарата заглатывается д.поступает в ЖКТ (И,Л.- Прохорову, 1972; О,В». "Чазавв- a Spi.» IS86). Далза, при. вдыхании грубодиояерс-зкх аэрозолей (а именно г? тазовым относятся пестицида) крупные ' . аэрозольпш частицы величиной более 10 míos полностью оседаг- в посовцх ходах а носоглотке. В случае низкой растворимости вещает- • ва осевшие, на слизистой оболочне частицы .при действии мерцательного зпятаяая в. процессе самоочвдешщ доатальных путей.ретроградно поступают в глотку, а вместе со слюной попадают :в ЖКТ', И, наконец, при любом парентеральном способа введения (в том числе и ин-

галяцяонном) большая часть воосавпегося гшсшцда • вдаодатса дз организма с яелчьв, то есть такие поступает в SÍT.

Кроме экспериментальных исследований, били проведай кщр-ные исследования у рабочих,. занятых производством шеггяадов из-торано и хлората магния. .В этих целях a IS8S, 123? к XS3B гедгй. осуществлены экспедиционные внездц в йарзгавскоз проквсдстгзкиса объединение "Азот" и Навоийнский влектрсошиическкй завод (распределение рабочих приведено в табл. 2)» После кгучэкдя технолога-. ческого процесса производства пестааддои была яаучака вдайшаа«-' мость рабочих с временной утратой трудоспособности .за; последов насколько лет. В дальнейшем осуществлен отбор штшгоктд рабочих, подлеяааих исследований»,

'.. Тсбйгдз Е

Сводные драные по обследовала» ладей,, рабошсед« • на химических заводах

Группа обследованных

Фергаяскоо производств* ЕазовЁясккй аямаро-веякоз объединение - : хетадай "Азот" ; взвод

i з ток числе : i s coí: ч;:сла коли" - - ---: кола- :---- -

i т. ] «в. I \ kjz. \ am.

:

: :

Здоровые води 3S 25 12 \ S5 31 24 Рабочие цеха 65 34 • S2 IOS 6? 35

Итого: ICS 60 43 158 S3 60

• 'Мтитяшь^ттл штшш^штштШт

кишечника. Во всех еершас экспартшнт£.еь81а; доследований забой крыс осуществляла в услоэ^лх бактериологического бокса о соблюдением всех правил асеатякй й антисе&хаки. При всех периодах исследования улвотике подвергалась декзгштахщн,- при этом забирала кровь для праиедшшл издйсаозхяаскюс исследований, а такке I мл содержимого тоаей а 2 г оадеркшого толстой £Ю для микробиологических йсйдедовааий, .

Прй обследования. рабочих хякическах есводоз у отобранных лиц, кзк ирав-дяо, в одно а то га время шэдг 9 к 10 часами утра на бз$<з зсдоистшнйон мздякосанитараой части о соблюдением всех

правил асептики и антисоптпки забирали венепункцией кровь (в количество 8-10 мд) и фекалии. Взятый материал быстро доставлял:-! в бактериологическую лабораторию областных санитарно-эпидемиологических станций, где в дальнейшем осуществляй проведение иммунологических и микробиологиче ских исследова-лй.

.Для проведения исследования микрофлоры кишечника фекалии (I г) тщательно порэмешивал'! 5 S мл свежерегеяерирозанного трио-гликолевого буфера и после 10-кратных разведений в регенерированном триогликолевом буфере высевали капельнда методом на селективные а дифферещивльно-диагноотическке среды, состав которых и условия культивирования, рекомендованные к тестировании микроорганизмов, приведены в таблице 3. Видовую и групповую принадлежность изолированных микроорганизмов определяли на основании данных микроскопии мазков, окрашенных по Гразд', роста на селективных и даф^еренциально-диегностических средах и биохимических характеристик (W.O. Биргер, 1981; A.A. Ленцнар и др., 1988).

В целях изучения фермеятйтквной активности у выделенных штаммов микроорганизмов нами выборочно как при экспериментальных, так л при натурных исследованиях у ладей проведено изучение некоторых ферментов агрессии. Изучена плазмокоагулкруккдая способность, гемолитическая, фибринолятическая, гиалуронидазная, лециткназная и каталазная активность. Зти исследования проведены общеизвестными методами. 1

Одним из наиболее перспективных направлений современной микробиологии является раскрытие адгезивного процесса микроорганизмов. Адгезия во многом обеспечивает начальные' этапы, характер и течение инфекции (М.В. Далин, Н,Г. Фш, 1985;'Ю.В. Ез«дчук,1985; В.И. Бриляс и Др., 1985; С.С. Гизатуляна и др., 1991; Beacfcey , XS8I; 'Wardell st al. , Х983), Лишившиеся адгезивной способности микробы, как правило, не способны вызвать инфекцию (silverba , Х974; Boachay , 1981). Поэтому адгезивность рассматривается в качестве фактора вирулентноотя патогенного микроорганизма (Bsachey, 1981). '

Учитывая вышеизложенное, нами выборочно при экспериментальных и натурных исследованиях у людей проведено изучение адгезивных свойств у .выделенных штаммов микроорганизмов.

Методы оценки иммунного статуса. При воех ab следованиях нами проведено изучение механизмов естественной (неспецифичаской) ре-

, Таблица 3

Среда и условия культивирования микроорганизмов, используемые при изучении

кишечной микрофлоры .

Изучаемые группы микроорганизмов

Питательные среда

Метод

культивирования

.Разведения

Бремя и условия культивирования

Общее количество аэробных бактерий

Общее количество анаэробных бактерий

Ечфадобгшерии

Бактероиды

Лактойохтерив

Стафилококки сотерококки КшБннне пало-чм

кровяной агар

анаэробный агар* с кровью

анаэробный агар с азидом натрия

анаэробный агар с дезогссгхоля-гэк натрия

MPC - 4

мшшитно-солевой агар

еаидовая среда ореда Ээдо ■

среда Сабуро

капельный

1СР-Ю8 ю4-ю9

IC^-XÛ10 IC^-IO9

ю4-ю8

IC^-IO5 IC^-IO6 IC^-IO8 itf-IO4

24 часа аэробный

120-144 часа анаэробный

72-120 час анаэробный

72-120 час анаэробный

48-72 час анаэробный

24-48 час аэробные

48-72 часа аэробные 24 часа аэробные

72 часа аэробные

й - Анаэробные условия создавали в ^¡аэростатах и западных целофалоьых мешочках

застентноота организуя: определенно активности лиэоцима и фагоцитарной актиэности лейкэцитов крови.

Определение активности лизоцкма. сыворотки крови производили методом диффузии в агар (З.В. Ермольева, 1966), основанном на способности лизоцимз диффундировать в агар v., задерживать рост содержащихся в нем микрококков.

Определение озгоцитарчой активности нейтрофилов крови производили по Н.В. Васильеву, О.Н. Одинцову и О.В. Федорову (1972).

Оценку количества.Т-ляифоцжтов проводили методом спонтанного розвтяообразования - 2-РОХ по методу J ondai at al. (1972) с учетом рекомендаций ?ung et al. (1974) с дополнениями Р.В. Петроза и др. (1976). .

Количественную оценку В~лимФоцатоз проводили методом комплементарного розеткообразован&я - SAG-РОК по методу Mendes et al. (1972) о дополнениями Р.В. Петрова й др. (1976).

Дул "нулевых* лимфоцитов, не несущих маркеров Т-'и В-лимфо-цитоз, определял!! косвенным методом (Prbland , lia-tvig , 1973) путем знчитания числа Т- и В-клеток от общего количества лимфоцитов. ................

Определение рогулятошидс субпотгтпшй Т-лимфоцитов. Т-оупрес-соров. Сущность метода заключалась в выявлении числа Т-лимфоцитов, несущих рецепторы к ^-фрагменту igo, и основана на реакции ЕА-розоткообразования с использованием эритроцитов, нагруженных анти-эрйтроцитардыми антителами класса igG (Moretta et al. , 1977).

Количественное определение ж.вд.чо г лобулинов методом радиальной иммуноякйфузии в геле. В основу этого метода полонен метод Манчинй (1963), который основан на измерении диаметра кольца преципитация, образущагося при внесении исследуемой сыворотки в лунки, вырезанные в слое агара, в котором предварительно д ¡пар-гирована моноспецифическая антисыворотка. . .

Гистологические. авторздиографичэокие,- электронномикроокопи-. ческие и люминесцентные методы» После декапитации и вскрытия t/рш-ной полости экспериментальных животных забирали сегменты тощей, подвздошной и толстой кишки длиной 0,5-1,0 см и фиксировали в жидкости Карнуа, 12% нейтральном формалине и 80% спирте. Материал проводили по общепринятой, методике а заливали в парафин.

Гистологические препараты готовили толщиной 5-6 микрон. Срезы готовили с соблюдением строгой ориентация ворсинок и крипт так, чтобы на препарате не менее половины ворсинок и крипт были среза-

ны строго продольно.

Авторадиография: контрольным и экспериментальным кивотнш Одновременно в 9.00-9.10 утра внутрибршккно вводили Н3-тимядин из расчета 0,5 мккюри на I г веса зшзотного. Гистологические препараты депарафинировали и покрывали эмульсией типа "М" (ГосНШ хшфотопроект). Экспозиция в течение 20-;i8 дной, о крас га гематоксилином по Карачи.

Индекс меченных ядер (1ЫЯ) определяли путем подсчета 10001500 меченых и немеченых ядер эпителиальных'.клеток соответствен-' но в криптах,к на ворсинках и выракали в процентах.

Одновременно подсчитывали среднее количество клеток, содержащихся на продольных и поперечных срезах крипт, с лоследувдим подсчетом среднего количества клеток в них (Wember » bemerton , '1963). Подсчитывали такхе число бокаловидных клеток на продольных срезах ворсинок и.количество клеток Панета в криптах.

Электронная микроскопия: кусочки тканей брались из тех яе отделов, что и для световой микроскопии. Фиксация в 1% растворе oso^ на фосфатном буфере, проводка материала по общепринята методикам, кусочки зализалнсь в смесь метакрилатоз, аралдит и Эпон-812. Все соззы контрастировали уранкл-ацетатом свинца. Просмотр производился на электронных микроскопах JE.Y-?.

Гистохимия: нейтральные мукополисаг.ариды выявлялись реакцией ЕИК (по-Ыак-Ыанусу), кислые гфкополксахариды - по XelLny (Пирс, 1Э52). Изучалось распределение кукополпеахаридаого материала в эпителиальных, бокаловидных клетках (содержащие нейтральные и кислые мукополисахарзды).

Лкминясцентн ая m кпоо копия: в ряде случаев для выявления сальмонелл а подгверяиеняя их специфичности, обнаруженных в препарате, мы использовали прямой и непрямой метод Кунса. С этой целью кусочки заливали в блоки по способу Sain-te Maryae (I9S2).

Обнаружение микробов в срезах: для выявления в срезах сальмонелл и других энтеробактерий применяли, главным образом, комбинированный способ окраски по Грам-Вейгерту (Г.А. Меркулов,1956),

Статистическая обработка полученных данных. Все результаты исследований подвергали статистической обработке с вычислением среднеарифметической величины М, ошибки средней арифметической + ш. Оценку достоверности различий средних величин проводили по 'величине аргумента распределения "t" (student ). Для характеристики статистической значимости изменений был взят уровень досто-

верности Р < 0е05,

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССУЗДШАКИЯ

■ и их сбсэдэш

I, Экспериментальные исследования

1,1, Изучение мияроэ колоти кидачнико. В последние года с • расширением информации о побочных эффектах пестицидов на макроорганизм все больаео внимание уделяется изучению новых аспектов их негативного влияния, в частности, на микроэкологию человека и животных. Это обусловлено, с одной стороны, все возрастающим пониманием значимости микробной экологии для поддержания здоровья и возникновения заболеваний человека, а с другой - убедительными экспериментальными а клиническими наблюдениями, свидетельствующими о том, что наиболее ранним и специфическим нарушением со стороны макроорганизма при.воздействии пестицидами являются изменения 'Эго микрофлоры (А.Х. Арсланова, 1974; А.Н. Алешня, 1978; Б.А. Бориоенко, 1982; И.О. Молочаева, 1983).

. Собственный опыт токсикологического изучения пестицидов свидетельствует о.том, что нарушение микробного статуса макроорганизма в большинстве случаев является лимитирующим показателем . . вредного действия указанной группы биологически активных соединений (K.M. Ыухамедов, 1986, 1988), Это предопределило необходимость рекомендовать в качества обязательного раздела исследований в комплексной .токсикологической оценке пестицидов установление пороговых концентраций (доз) по действию на нормальную микро-" флору.

Известно, что в сложившейся в процессе эволюции экологической системе "макроорганизм -'аутофдора" микрофлора являете, фактором, оказывающим влияние на саше разнообразные процессы, совершающиеся в организме» Среди многочисленных микробиотошв организма важнейшая роль отводится микрофлоре кишечника, которая, благодаря многообразии выполняемых, ею функций, рассматривается как важнейший фактор гомеостаза (Б.А. тендеров, 1987).

. Исследованиями ряда авторов (И.М. Манохина и др., 1988; Б.А. Шендеров, 1988; СагЪеоп , 1986) показано, что флора кишечника является высокопластичным и достаточно чувствительным индикатором на различные вредные воздействия внешней среды и изменения в физиологическом состоянии макроорганизма. В этой связи микро-

биоценоз кишечника предлагается в качестве тест системы при изучении повревдакщего действия пестицидов на аутофлору организма (В.Г. Петровская, О.П. Марко, 1979).

В соответствии с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось комплексное изучение в условиях эксперимента, так и при натурных исследованиях состояния микробиоценоэа и морфоструктуры кишечника, иммунного статуса при раздельном инфекционном и пестицид ном воздействии, а также в условиях их сочетанного воздействия при этом разработать критерии ранней диагностики и предложить ряд рекомендаций по осуществлению профилактической коррекции.

Проведенные нами микробиологические исследования содержимого подвздошной кишки у интактных крыс овшгзтельствуют о том, что наиболее частыми.обитателями из группы аэробных энтеробактерий являются кишечная палочка, энтерококка, дроэкевые и дрсетеподобные грибы, причем они находятся в определенных количественных взаимоотношениях.

Однако, при различных патологических состояниях и экспериментальных вмешательствах (наложение петли, резекция кишечника, изменение диеты и др.) наряду с известными иы'.екенпями секреторной, моторной, всасывательной и других функций киаечника, изменяется и его микрофлора, то есть создаются,состояния, которые приняти называть дисбактериозом (Б.А* Еевдеров, 1385).

Традиционно при диагностике дпсбакте риоза кишечника используется комплекс бактериологических исследований, позволяэдкх определить количественные и качественные изменения в различных группах микроорганизмов. Прк^отои диапазон рекомендуемой, различны:® авторами микробиологических показателей ларьирует в достаточно . широких пределах (ВопЬ- ¿озМп! а1. , 1986; ¡Шзиока , 19В6). Вместе с тем существует мнение, что он определяется не реальным значением того или иного микроорганизма в развитии патологии, а техническими возможностями исследователе!! (И.И. Прохорова, й.З. Зельцер, 1888),

В зтой'связи мы попытались изучить характер изменений микрофлоры кишечника белых крыс пра внутряжелудочном введении пестицидов в различных дозировках и оценить значимость отдельных показателей в качестве критериев дисбиоза, вызываемого определенным пестицидом.

Основными причинами возникновения дисбактериозов калачника являются условия, которым подвергается человек при длительном пре-

быванш в нехарактерных для него зонах обитания, промышленные отходы, загрязняющие окружающую среду, в том числе производственную (пестициды, растворители, химические удобрения), заболевания ЖКТ инфокционно и неянфвкционной этиология, злокачественные новообразования, воздействия ионизирующей радиации; и мн. др.

В большинстве работ, посвященных изучению дисбактериозов кишечника при лучевой болезнг. (Б.В, Пинегин и др., 1984; Л.А. Ро~ манчук и др., I99X; Кол* et al.,. 1968; Kleiner et al., 1969), показано, что облучение мшей, крао, кроликов, собак, обезьян или человека вызывает выракенное увеличение в тонком кишечнике числа кишечной палочки, протея, энтерококков, дрожжей-и уменьшение количества лактобактеряй, причем интенсивность и скорооть изменения микроорганизмов, за иокличенаем энтерококка, зависели от дозы облучения.

В то же время в наших исследованиях, проведенных на крысах, при ноздействии пестицидом котораном в различных дозировках, начиная о максимально-переносимой и кончая предельно-допустимой концентрацией, нами на отмечено определенных закономерностей, зависящих от доз воздействия. Хотя мояно отметить, что доза пестицида оказывала определенное влияние на время развития дисбактери-оза. Так, доза в предельно-допустимой' концентрации вызывала определенные измененйя только в поздние сроки воздействия, где-то на 3-4 месяце. ...

Кроме того, которая в любых концентрациях оказывал определенное воздействие, которое характерно для это?0 ■вещества. Так,.при всех наших исследованиях характерной особенностью котопанового воздействия явилось, в первую очередь, изменение со стороны бифидобактерий и кишечной палочки. При этом наиболее характерным признаком было уменьшение количества бифидобактерий и лакт^опо-зитивных штаммов эшерихий вплоть до их элиминаций, и на этом фоне. резкое возрастание .количества биологически измененных штаммов ;пае-рихий. Причем, эта картина у крыо наблюдается как в проксимальных, так и в дистальных разделах кишечника.

Которая оказывает существенное влияние на количество ггчоро-генно-анаэробных микроорганизмов: так почти во воех исследованиях и во всех разделах кишечника (тощая и толстая кишка) наблюдались однотипные изменения. Эти изменения выражались в том, что происходило уменьшение числа бифидобактерий и увеличение количества бактероидов. Вместо о тем увеличение отдельных групп г.«пкроорганиз-

мов в тощей кишке обусловлено обратной контаминацией микробов иэ толстой кишки.

Видимо, эти изменения можно объяснить тем, что облучение влияет одновременно как на яшунаую систему, так я на микрофлору кя-иечника, в то же время пестицид которая а начальных этапах оказывает прямое воздействие на .микрофлору, а в последующем оказывает опосредованное воздействие, вызывая определенные изменения в иммунной системе.

Интересные данные приводятся в исследованиях, проведенных H.H. Лг.эько (198?). Так, в результате выполненных исследований установлена причастность изучаемых факторов к формированию дисбак-териоза. Обнаружено, что при йервно-эыош'.ональном напряжении имеет место снижение уровня бифадобактераЛ и лактобацилл (в отдельных случаях - до полной элиминации).

Подобная реакция бифидофлорц выявлена уже на "онидание" воздействия, например, при имитации аварийны: ситуаций. Вслед за изменениям в указанных группах микроорганизмов наступают перестройки в аэробной флоре со сменой яодкоцеяяух в ферментном отношении рас кишечных палочек на лактозонегатквлке.

При анализе полученных данных иы попала к выводу, что сущест-венипмк- особенностей! котораяового "дисбактериоза во всех случаях экспериментальных исследований явились резкие изменения микроорганизмов •группы бифэдобектерий, вкраазадкеся в том, что при различных воздействиях котораном резко снизится, а иногда' подвергаются элиминации.

Исходя из полученных ; -шкх, нами проведена профилактическая коррекция которанового цисбаятераозз путем использования бифидуа-бактерана. При этом отмечено, что профилактическая коррекция отзывала эффективное воздействие на количественное соотношение ас-: рогенных анаэробов & лактобактерий. Исследования показали, что аопорогеннао анаэроба и лактобактерии почти во все сроки набшх;-ния и на всех обследованных отрезках ки&зчника не подвержены су -щественнкм изменениям, лишь в некоторых случаях, отмечено незл* тзльное возрастание количества бактероидов (рас. X),

Общеизвестно, что по сравнению о раздельным воздействием и ределеннах факторов, сочетаяное воздействие'оказывает более oa-v. ное влияние на микроорганизм, особенно когда вещества обладают способностью к индуцированию* .

Такое воздействие, на нэи взгляд, было проявлено при сочет. •

Рис.1 Содержание некоторых сшйзробных и аэробных

6нКТЕРИЙ ПРИ КОРРЕКЦИИ К ОТО РЯ НОВОГО ДИСБЯК-ТЕРИОЗЯ БИФИДОБЯКТЕРИНОМ.

9-8-Ь 6-

5-4-1

3-

4-

и

I

£

контроль

I

- бифидобактчрии Щ-лактобактЕрии

1

-ЭШЕрИЛИИ

ш

I

1

ш

£

£

ном введении крысам которана и сальмонелл.

При этом воздействии нами обнаружены сильные изменения во все сроки и во всех отрезках кишечника. Однако, при этом характерной особенностью является то, что лактозопозитивные штаммы имеют тенденцию то к возрастанию, то к уменьшено в количестве, и в то же время биологически измененные итамш элерихки имеют постоянную тенденцию к увеличению в количестве. Одной из характерных особенностей данного эксперимента является то, что если при раздельном воздействии которанок, явления дисбактвриоэа имели выраженную картину только на 3-7 сутки, то при сочетанием воздействии дисбакте-риоз сохранялся и на 30-е сутки исследования.

Другой немаловажной особенностью сочетанного воздействия, на наш взгляд, является то, что если при раздельной контаминации крыс сальмонеллой они выделялись до 14 дня, то пои сочетанием воздействии сальмонеллы из содержимого кишечника продолжали высеваться и на 30 сутки исследования и довольно в большом количества. Возможно, этим в какой-то степени можно объяснить случаи формирования при этой инфекции длительного бактерионосительства.

Интересные данные получены нами при изучении у вычаленных штаммов в различных экспериментах способности вырабатывать так называемые ферменты патогенности: фибринолизин, гиалуронидазу, плазыокоагулазу, лецитиназу, каталазу и гемолизин. Полученные данные показали, что микроорганизмы кишечника крыс при воздействии котораном отличаются от одноименных представителей у интакт-ных крыс своей выраженной способностью образовывать комплекс ферментов агрессия. Это явление имеет место даже в тех случаях, когда особых отличий в видовой составе бактерий содержимого кишечника крыс при воздекстьг ; котораном обнаружить не удается. Видимо, это обусловлено тем, что которая вызывает у микробов мутационную изменчивость.

• Микробиологические исследования, проведенные в группе острых и хронических экспериментов при воздействии на организм крыс пестицидов хлорат магния, показали, что такяе наблюдается развитие дисбактвриоэа. При этом дисбактеряоз, развившийся на фоне воздействия хлоратом магния, имеет много общего с которановым дисбакте-риозом, хотя имеются и некоторые отклонения.

Эти отклонения в основном касаются следующих вопросов. Во-первых, пестицид хлорат магния оказывает свое действие более быстрее и сильнее, да и время ого действия более длительное. Так, про-

ведение хронического эксперимента, когда крысам вводили хлорат магния в предельно-допустимой концентрации, показало, что изменения со стороны микрофлоры начали проявляться на 2 месяце, в то время как при воздействии котораном они начали проявляться только на 3 месяце. Видимо, эти проявления можно -Объяснить тем, что хлорат магния по сравненш с котораном более токсичен, а также у хлората магния более выражена стособнооть к кумуляции.

Во-вторых, не основании проведенных групп острых и хронических экспериментов можно оплатить четкую коррелятивную связь происходящих сдвигов в аутофлоро кипочника, наступающих под воздействием хлората магния. Эти исследования позволяют отметить особенности дисбактериоза кишечника, которыми являются увеличение количества биологически измененных штаммов эшерихий, но наиболее существенным сдвигом в сторону значительного уменьшения числа микроорганизмов, относящихся к лактобактериям.

Таким образом, проведя группу острых и хронических экспериментальных исследований при воздействии на организм крыс хлоратом магния и обнаружив при этом характерные сдвиги аутофлоры, происходящие в проконмальиом и дистальном отделе кишечника, мы поставили перед собой задачу провести биологическую коррекцию выявленных нарушений. Учитывая полученные данные и основываясь на том, что главной особенностью дисбактериоза кишечника при воздействии хлоратом магния является дефицит лактобактерий, мы в целях профилактической коррекции попользовали препарат лактобактерин.

Проведение этих исследований убедительно показало, что биологический препарат лактобактерин можно с успехом примем тгь для коррекции дисбактериоза, наступающего под воздействием хлората магния.

Х.2. Морфологические исследования. Как показывают наш., исследования, сальмонеллезное воздействие оказывает существенное влияние на архитектонику слизистой, однако, ультраструктура энтеритов» особенно на ворсинке, не подвергается существенным изменения 1

Для проникновения сальмонелл, введенных в просвет подвздошной шшпш,'после перорального заражения в эитероцитн, им не^ходи--мо пцевде всего преодолеть клеточные плазматические мембраны с му-копротеадным покровом, так называемый гликокалико. Исследователи указывают, что гликокалико монет играть определенную роль в зещи-та клетки от-внедрения чужеродных агентов (Ю.М. Васильев, А.Г. Мч

ленков, ISoB; К,А. Цуфаров, U.U. Байбеков, 1974; Ito, 1969). Особое значение он мокет «мать в кишечнике с его богатой микрофлорой.

Наши исследования показывают, что сальмонеллы-в эпителиальные клетки внедрятся в крмтах, где экте;?0'дити лишены гликокалик-са, или он выражен незначительно {Bennet , 1963). Разрушению этого барьера, по-видимому, способствует у сальмонелл наличие комплекса ферментов агрессии, и в первую очередь, бактериальных десмо-лаз, особенно активно вырабатываемых патогенными видами микроорганизмов (H.H. Мельников и др.,1569; А.О. Фолиянц, A.B. Каспаров,. 1972).

Интересно отметить, что Takeuchi (1S37, 1971), изучивший взаимодействие сальмонелл (Sala, typhimurluai) с энтероцитгми морских свкнок, показал, что внедрение микробов в клетку у них происходит, главным образодг, на ворсинках. Следует подчеркнуть, что &н-тероциты на ворсинках у морских свинок не имеют выраженного глико-каликса ( ito , 1965), Эти данные лишний раз подчеркивают существенную роль гликокаликса в защитной функции слизистой кишзчникд,

Для внедрения в эпителиальную клетку микробу необходимо преодолеть еще одно препятствие в виде апикальной плазматической мембраны. Она монет быть разрушена под действием ферментов и ток-< синов, которым обладают микроорганизмы (Г.Н. Чистович, 1961; Нае- ' nei . 1962). Преодолению этих структур сальмонеллам способствует, видимо, выработка ими гиалуронадазы и ряца других ферментов (К,И, Мельников а др., 1969; A.B. Каспарова, IJ72).

Сальмонеллы, локализуясь в криптах, вызывают, наряду со стимуляцией, образования л вы: ¡ления секрета бокаловидными клетками и выраженные изменения секреторной активности клеток Панета. Они усиливают выделение секреторных гранул в просвет крипты. Это, видимо, обусловлено тем, чтт секреторные гранулы клеток Панета обладают способностью бактериостатическогс действия на микробы, до- , павшие в просвет кишечной крипты (Senke et Mol , 1964; Erland-веп, 1970). ;

Наш при электронномикроскодяческих исследованиях также отмечено, что при контакте сальмонелл и других микроорганизмов в просвете кишечника с гранулами клеток Панета у первых обнаруживаются признаки двгрануляцаа.

Зачастую выделение секрета клетками Панета происходит Путем клазматоза. Несмотря на повышенное выделение секрета в просвет, цитоплазма клеток кз опустошается, что свидетельствует об усила-

и теша образования секрета.

В наших исследованиях при взаимодействии сальмонелл с энтеро-цятами как при пероральных, так и пш введении в'Просвет апикальная часть энтероцитов подвергалась гидропическим расстройствам в виде потоцитозинх образований, приводящим к разрыву мембраны и пе-нетрацик сальмонелл в клетку.

Проникшие в энтероциты сальмонеллы могут бить в них подвергнуты перевариванию в лизосомах. В образовании последних, как известно, принимают участие в той или иной маре все внутриклеточные структуры (К.А. Зуфаров и др., 1972).

Однако, как показывают наши исследования, микроорганизмы и, в частности, сальмонеллы в цитоплазме энтероцитов крыс но оказывают влияния на органеллы клеток к сами при этом Не подвергаются видимым изменениям.

Внутриэпители&льная локализация сальмонелл отмечается, главным образом, через 6-12 часов. Введение сальмонелл вызывает значительные изменения базальта частей многих клеток крипт. Эти изменения выражаются в проявлении большого числа вакуолей различного размера, заполненных эдехтроняопроницаемым содер.-:ш.шм с большим ила меньшим числом свободных рибосом ц полисом, иногда с мембранными структурами.

Эти вакуоли отшнуровываотся от клетки й Через базальную мембраны проникают в собственную соедянлтелькогканяу» пластинку слизистой наряду с микробами. Механизм этого процесса наломянает эхэоцитоэ.

Общепризнано, что слизистая кшчняка является важным имцуяо-яомпатентным образованием. Структуры, пряншззде непосредственное участие в неспецифических шэдукнше процессах» сосредоточены в собственной соединительнотканной аласяшка слизистой. К таким структура!,! относятся плазматические клетки, ¿¿шфоцпти, макрофага, эозкнофшш, тучные и друтеэ клетки.

На основании проведенных исследований № полагаем, что сальмонеллы, проникшие в собственна соединительнотканную пластинку слизистой кишки, частично захватываются макрофагами (В.Л, Белянин, 1969), в то время как основная масса проникав? во внутреннюю среду организма. Об этом говорит внеевзаие нами салалонелл аз гемо-культуры через 12-24 часа после зараясния.

Однако, на пути микробов, в частности, сальмонелл, располагается еще один структурно определяем;* борьор, прапягстаукций

проникновению з циркуляции, это станка капилляров, где основную роль играют, очевидно, эндотелиальные клетки с их мукополисахарид-нш/. слоем (базальной мембраной) (H.A. Зуфаров, U.U. БаИбоков,1974)

При инфекционном воздействии эндотелий капилляров подверга-етср изменениям, заключающимся в утолщении эвдотелиальных клеток, увеличении в их цитоплазма эндо- и экэоцитозных возикул. Сущест-вонно утолщается базальный слой, который тесно переплетается с волокнами соединительной ткани. Лимфатические капилляры, где ба-зальний слой отсутствует (Б.А. Иахламов, I97X) или, как показывают наши дашше, выражен незначительно, они более проницаемы для крупномолекулярнкх частиц, а стало быть и микроорганизмов. Однако, лшфзтичоскиа капилляры впадают в лшфатичеокио узлы, в которых барьерио-задитная функция является основной (Л.Н. Фонтадии, 1968).

Изменение темпа пролиферации и миграция является одной из наиболее стереотипных реакций эпителия. Toner <1968), Lipkln (IS73), К.А. Зуфаров и др. (1974) и другие четко связывают наличие нормальной микрофлоры с томном обновления эпителия. У беэмик-робких животных теш пролифоращш и миграции энтероцитоа в 2-3 раза шике, чем у рбычньх животных (О.В. Чахава, 1973). Видимо, микрофлора оказывает существенное влияние на пролиферацию и миграцию энтероцитоа*

Проведенные наш исследования изучения включения Н3-тиг,гадина в энтероциты в более рааиие сроки (чераз 2, 12, 24 часа) посла введения сальмонелл в просвет кишечника показывают, что непосредственный контакт оальмонелл с эпителием не вызывает существенных изменений пролиферации, но оказывает, видимо, значительное влияние на экструзию онтероцатов. По всей вероятности, это направлено на иь-авление клеточной популяции от энтароцитов, пенетрированних микроорганизмами. Это согласуется с общепринятым принципом, что сопутствующим признаком при энтеритах и энтероколитах различной этиологии является ускорение деоквамации (H.A. Шадыгина, 1969; Л.И. Аруил, 1970, Formal et al., 1967).

Усиленная экструзия сопровоздается усиленной миграцией анте-роцитов По ворошке. Ток, если в нормальных условиях энтероцитн достигают зоны зкотрузии к 4Ü часам поело введения меченого вещества, то после введения сальмонелл происходит в 2 раза быстрее, то ооть чорез 24 часа. Причем, следузт отметить, что темп миграции возрастает во все сроки эксперимента. При этом относительные показателе ИМЯ (индекс меченых ядер) были через 12 часов у копт-

рольных крыс на ворсинке 3,9^0,2, в крипта БО,9+0,6, тогда как при введении в просвет сольмонодл - на ворсянке"31,4+0,7, в крип-то 50,0+0,3, что значительно выше таковых у контрольных животных, я лииь при сопоставлении с уменьшением юю точного пула крипты t удалось выявить абсолютное уменьшение пролифератнвного пула. Видимо, проли^ератишше процессы в криптах подвздошой кишки на в состоянии обеспечить необходимый уровень обновления без увеличения саоех'о клеточного пула, чем и оправдывается состояние атрофия глазастой при инфекционном воздействии.

Обработка препаратов специфической антисальыоиеллезной фаэ-эреоципуэдей сывороткой по Кунсу доказала специфичность обнаруженного в очагах поражения кишечника возбудителя. Это представлявт-зя особенно важным, поскольку в кишечнике постоянно обитает больное количество микробов, в то« числе грамотрицательных палочек [Н.П. Клемпэрская, P.A. ¡¡¡эльноча, 'I96S). Доказательством того,что Жданные в кишечника микробы-сальмонеллы, являются такке обнаружением тех ке самих бактерий, как в люминесцентном микроскопе, ?ак и в световом микроскопе после окраски срезов по Грам-Бейгер-■У.

Таким образом, наши наблюдения позволяют предположить, что ¡алшонедлы или продукты их метаболизма вызывают локалыше гидро-¡ическиз расстройства эпителиальных меток крипт, способствующие кгзрнву плазматической мембраны и проникновению микробов' в клат-У.

Изучение состояния морфоструктуры слизистой оболочки кишзч-ика как при раздельном, так и при сочетакном пероральном воздгй-твии котораном и сальмонеллами показало, что сам по себе которая е оказывает существенного влияния на морфоструктуру кишечника, ыявленные нами отдельные изменения, которые выраааются в увели-ении количества бокаловидных клеток и клеток Пакета, а такие в озраотаний количества митотическях фигур, являются следствием омпенсаторно-приспособитсльных реакций со стороны макроорганиз-а на дисбиотические изменения а составе микрофлоры кишечника.

Однако, при сочетанном воздействии иа организм крыс котора-ом и сальмонеллами нами отмечены существенные изменения в архл-ектонике слизистой оболочки кишечника. При этом эти изменения аще всего выявляются в слизистой оболочка тощей и подвздошной ишки и выражаются в развитии воспалительной реакции, отока и алл-зративных процессов на апикальной поверхности ворсинок.

Кроме того, при этом отмечено интенсивное выделение секрета бокаловидных клеток, расширение микрососудов и активная инфильтрация собственной пластинки пхазмоцитэми и особенно лимфоцитами.Наиболее интересно отметить то» что многие нарушения в архитектонике слязчстой оболочки кишечника сохраняются и в поздние сроки наблюдения, то есть и на 30 сутки,

Мы полагаем, что при сочетанном воздействии котораном а сальмонеллами проявляется их синергизм, вследствие чего сила повреждающего действия резко усиливается з удлиняется в сроках воздействия.

Нами проведено также изучение состояния морфоструктуры слизистой оболочки кишечника как при раздельном, так и при сочетан-ном пероральном воздействии хлоратом магния и сальмонеллами. Проведенные исследования показали,-что хлорат магния сам по себе не обладает способностью цитотоксического действия. Вследствие чего нами во все сроки исследования не удалось выявить существенных изменений в состоянии архитектоники различных отделов кишечника.

В то же время при сочетанном воздействии хлоратом магния и сальмонеллами почти во всо сроки исследования, начиная с ранних и кончая поздними, наш выявлены резко выраженные сдвиги в архитектонике кишечника. Эти изменения в основном касались того, что происходит развитие альтерации знтероцитов, особенно в апикально! части ворсинок, интенсивное выделение секрета бокаловидными клетками, повышенная инфильтрация строш клетками лейкоцитарного ряда, отмечается резкое расширение лимфатических капилляров. Больше того, эти'процессы в последующем приводят к развитию атрофича ких процессов слизистой оболочки. Причем эти изменения наиболее вырад .¡ы в слизистой оболочка тощей и подвздошной кишки и почти не проявляются в золотой кишке. Кроме того, самое интересное то, что эти изменения сохраняются и на 30 сутки исследования.

Таким образом, полученные морфологические данные позволяют нам вскрыть те интимные процессы, которые происходат в макроорга низме при сочетанном воздействии хлоратом магния и сальмонеллами Эти данные позволяют по-новому рассматривать многие стороны пате генеза и особенно формирования длительного носительства, которое очень часто сопровождает оальмонеллезную инфекция.

»

2. Обследование рабочих химических заводов

2.1. Характеристика процесса производства пестицидов и заболеваемость рабочих. Одним из крупных химических заводов Узбекистана является расположенной в Назолйнской области электрохимический завод. Б настоящее время на заводе действуют 4 крупных цеха,. в которых производят: ноторан, изофен, фозолон а трифлэн. Работают на производстве этих химических пропаратов более 3000 человек. Среди имеющихся цехов» самым крупным, как по валовому продукту, так я по числу занятых рабочих, является цех по производству ко-тора.ча, где трудятся около 600 рабочих.

Наш проведено изучение заболеваемости рабочих, занятых производством которана. 3 течение последних нескольких лет, как видно из рисунка 2, общая заболеваемость рабочих которзяового цеха составляла 72,11, при этом 40% из этого числа заболеваний приходилось на инфекционную заболеваемость.' В последующие годы общая ча-болеваемость, как правило, колзйлзтоя. При это:.: самая высокая заболеваемость отмечена в 1235 году, когда она составила 81%, причем в этом же году отмечен и рост инфекционной заболеваемости, когда она достигла 62$. Характерной особенностью показателей заболеваемости рабочих которанозого цзха является то, что во все изученные годы, как правило, инфекционная заболеваемость значительно знав соматической заболеваемости»

Ферганское производственное объединение "Азот" является од-нш из крупных химических заводов Узбекистана, которое насчитывает в себе-6 цехов по производству; аммиака, карбомяда, селитры, хлорат магния, азотной кислота и триацетат целлюлозы. Объем производства различных химических препаратов о кандым годом имеет тенденцию к росту, естественно отмечается и рост количества работающих в данном объединений, так на 1937 г. количество рабочих завода составляло более 5000 человек.

Одним из крупных цехов данного объединения является цех по производству дефолианта хлората. магния» количество работающих в котором составляет более £00 человек.

В процессе работы наш проведено изучение заболеваемости рабочих хлорат магниевого цеха Ферганского производственного объединения "Азот" в 1983-1987 гг. Как видно из рисунка 2, заболеваемость рабочих стоит на высоком уровне, при атом в 1985 г. инфекционная заболеваемости рабочих фактически з три раза выше, чем

1987

№6

1985

годы

19М

1981

а

а

а

о

Ю 20 50 +0 50 СО 70 80 90

Рис. 2

/о

Динамика общей и инфекционном заболеваемости у равочих цеха которая и хлорат магния в Ферганском и Иаьоииском хттеских заводах

сгз общая а) /сотоган

шш инфекционная 6) хлорат мэгния

соматических заболеваний. При атом, как видно из рисунка 2, в последующие годы отмечается медленное снижение инфекционной заболе ваемости, но на атом фоне идет постоянное возрастание соматической заболеваемости. Однако, несмотря на эти закономерности, все не общая заболеваемость составляет большой процент, да и инфекционная заболеваемость снизилась в течение 2 лет всего примерно на 20$, по сравнению с 1985 годом.

2.2. Микробиоценоз кишечника к система иммунитета рабочих химических, заводов. Проведение натурных исследований у рабочих в Навоийнском электрохимическом заводе к Ферганском производственном объединении "Азот", занятых производством которана я хлората магния, позволило выявить определенные сдвиги, происходящие в микробиоценозе кишечника и иммунном статусе. ' . .

Изучение микробиоценоза кишечника у рабочих которанобого цеха показало, что при этом отметаются дисбяотические изменения в микрофлоре. Характерной особенность» происходящих при этом дисбио-тических сдвигов является существенное снижение количества лакто-зопозцтивных штаммов эшерихяй и бифэдобактеряй и на этом же фоне возрастание количества биологически измененных штаммов кишечной палочки (табл. 4).

Изучение этих же параметров у рабочих, занятых производством хлората магния, свидетельствует, что характерной особенностью этих дясбкотических сдвигов является резкое увеличение биологически измененных пгеаммов - эшерихяй и достоверное снижение числа лак-тобактэряй (табл. Б).

Известно, что количественный л качественны!-! состав микрофлоры кишечника ¡шеет свои определенные отклонения в зависимости от пола. Группировка имеющегося материала б этом аспекте показала, что у рабочих, занятых производством которана как у мужчин, так и у женщин, происходят однотипные днебиотические сдвиги, однако, у мужчин эти сдвиги более выражены по сравнения с кенщинами.

Рассматривая эти ке вопросы у рабочих, занятых производством хлората магния, можно отметить, что в общем они однотипны таковым происходящих у рабочих мужского полз. Однако, эти сдвиги, происходящие у женщин, имеют и некоторые особенности, которые касаются того, что в общем эти сдвиги коррелируй? мезду собой, в то же время они менее выражены по сравнения с данными у мужчин. Ви- ■ димо, эти характерные сдвиги, происходящие у яиц мужского и женского пола, можно объяснять с айатомо-ч^аэиологй^ашалк особенное-

Микрофлора испражнений (1в КСЕ/г) у рабочих, занятых производством котораиа на Навоийнском электрохимическом заводе

Таблица 4

Микроорганизмы

Количество адкробов на I г испражнений (М + т )

контрольная рабочие « •

груша (л в 55) \а = 103)

10,30+0,2 6,60+0,3 £.0,01

7,30+0,2 8,30+0,2 г: 0,01

9,60+1,1 5,50+1,2 <10,01

э.боГх.г 10,85^1,7 >0,05

7,30*1,2 7,46+0,7 >0,05

4,60+1,1 4,78+0,8 >0,05

6,30+1,2 4,85+0,5 >0,01

3,20+0,9 3,50+0,3 >0,05

7,30+1,1 5,30+1,1 >0,01

■ 1,47+0,1 3,60+0,5 ¿0,01

1,ЗСЫ),1 4,4е7о,7 <0,01

Общее количество анаэробных бактерий

Общее количество аэробных, бактерий

Бифидобахтерии

Бактероиды

Лактобактерии

Стафилококки

Энтерококки

Грибы

Киаечныз палочки:

- лактозопозатявные

- слабоферментативные

- лактозонегативныа

к а - количество обследованных людей

тями, присущими женскому полу, у которых процессы адаптации осуществляются быстрее по сравнению о организмом мужчин.

'„.лш было уж отмечено, что на изменение состава кишечной, микрофлоры оказывает определенное влияние и длительность действия того или иного фактора. Анализ имеющихся сведений в этом аспекте показывает, что наиболее выраженные дисбиотическиа сдвиги в микрофлоре кишечника у рабочих как которанового, так и хлорат маг ниевого цеха происходят при отаже до'5 лет и более 10 лет, в то время как при стаже от 5 до 10 лет эти изменения не столь выражены. Видимо, у рабочих со станем от 5 до 10 лат это промежуток, когда организм обладает.мощным комплексом развития компенсаторно-приспособательных процесоов, по сравнению с начальными и поздними периодами работы.

Таблица 5

Микрофлора испражнений ( 1еКШ/г) у" рабочих цеха "Хлорат магния" на ферганском производи ственном объединении "Азот"

)бщее количество 'наэробных бактерий 10,60+0,5 6,30+0,5 4:0,01

!б!зее количество

пробных бактерий 7,00+0,3 6,30+1,1 >0,01

»ифидобактеряя 10,00+0,5 е5бо+о,б <0,01

Зактеропды 9„7о7о,6 Х0,30?1»1 >0,05

Гактобактерия 7,00+0,.3 3*60+0,3 <о,оох

Стафилококки 4,85+1,3 5,30+0,3 > 0,05

Энтерококка 5,30^1,1 4,60+0,5 >0,05

Грибы 3,00*0,3 4,85+0,3 <0,01

Кишечные палочки:

- лактозопозятивныз 5,60+0,3 > 0,01 -

- слабофзрмеатативныа 1,30+0Д 4,60£0,5 <0,0Г

- лактозонегативные ■1,00+0,£ 3,95+0,3 <0,01

н я ~ количество обследованных людей

В литературных данных приводится много сзедений о том, что -количественный я качественный состав аутофлорн кишечника подвергается определенным сдвигам и з возрастном аспекта. Группировка материала в этом аспекта у рабочих, занятых производством хлората магния, нам не удалась. Однако, ата группировка осуществлена у рабочих, занятых производством которана, прй этом нами установлено, что наиболее выраженные дисбяотяческко сдвиги в дакрофдоре кишечника наблюдаются в молодом и стареем зозрзстаых группах, и менее всего она проявляются у рабочих орздногв возраста. Видимо, эти сдвиги - закономерный этап эволюционного развития организма,. когда У лиц среднего возраста наиболее выражены возможности компенсаторно-приспособительны х процессов.

Как показывают исследования последних лот, наиболее чувствительной на воздействие пестицидов является система ищунитета, что обусловлено высокой частотой активно проляфериру кхцих клеток. Причем, изменения параметров нммунной систеш моке.т служить пред-пост'1кой для возникновения различных болезной человека.

Учитывая вышеизложенное, памп проведено изучение состояния иммунитета как при экспериментальных, так и натурных исследованиях.

Анализ полученных данных, в эксперименте при воздействия на организм крысы - котораном и хлоратом магния, а также исследование у рабочих, занятых производством этих пестицидов, с высокой степенью достоверности свидетельствуют о снижении неспецифической защиты, в частности, фагоцитоза и уровня лизоцима в сыворотке кро ви.

Изучение клеточного и гуморального иммунитета у рабочих, занятых производством которана, показало, что у данной группы людей наиболее значительные изменения отмечены на уровне лимфоцитов, поскольку их содержание было достоверно увеличено. На основании этого можно полагать, что наиболее информативным тестом было абсолютное содержание лимфоцитов. При анализе числа отклонений иммунологических Параметров от кормы установлено, что у рабочих цеха "Которан" из 12 изученных параметров изменения отмечались в шести (рио. 3).

У рабочих, занятых производством хлората магния, по сравнению с контрольной группой, такке тлелись отклонения в системе иммунитета. При анализе числа отклонений иммунологических параметров от нормы установлено, что у рабочих цеха "Хлорат магния" из 17 изученных параметров изменения наблюдались в девяти - досторер но увеличивалось количество лейкоцитов, относительное и абсолютное число лимфоцитов, достоверно снижалась активность фагоцитоза и содержание лизоцима, уменьшалось относительно© и абсолютное количество Т-лямфоцитов, достоверно увеличивалось число В-лимфоци-т'ов (рис. 3).

Таким образом, анализ полученных данных о состоянии иммунного статуса у рабочих, занятых производством которана и хлората магния, свидетельствует, что отклонения в работе систеш иммунитета в основном коррелируют 'между собой, Однако, у рабочих, занятых производством хлората магния, эти отклонения более выражены.

Итак, обобщая полученные результаты исследований, следует

! * со

70 60 50 to

JO ¿o to

л

f

I______t - Т-/)Р!М<РЩИТЫ

- P -MtMPoqxráS 1 ~crl - О - JHMVoqttrif

t

-b

КОНТРОЛЬ

/(ОТО РАИ

ХЛОРАТ МАГНИЯ

Со^еРЖАНие Т-,3-,0-А*мфоцитов Ô периферической ЯРОМ У PA6CV//X, ЗАНЯТЫХ ПРОИЗВОДСТВОМ ¿C07GPAHA И ХЛОРАТА Л*А ГШ Я.

ХЛОРАТ МАГМЯ

СщежАнт ттмоглошиноз & cmorm"^ лроа/т У rMowx, ЗАНЯТЫХ /гроизёРАСТейИ КОТОМКА ЯЖАШШ/МЯ О jé m & В А В CïAMt/.Mfo?

заключить, что пестициды которзн и хлорат магния, поступая в организм, модут приводить к изменения:.! в микробной экологии. Клиническими и экологическими последствиями воздействия пестицидов на нормальную микрофлору могут быть формирование и распространение R-уотойчивых (резистентных) микроорганизмов, возникновение и циркуляция в природе атипичных штаммов, формирование новых микробннз сообществ. Кроме того, возможно увеличение числа и спектра микроорганизмов, вовлекаемых в инфекционные процессы, расширение спею ра патологических состояний, рост эндо- и суперинфекций, снижение ■эффективности химиотерапии. Все вышеперечисленное имеет значение не только при применении пестицидов в народном хозяйстве, но, и что особенно важно, при его производстве, когда профессиональном; контакту подвергается значительный контингент работающих. Это, в свою очередь, еще раз подтверждает необходимость изучения дисбио. тического действия при токсической оценке пестицидов, а также пр: проведении периодических медицинских осмотров рабочих с целью вы явления ранних признаков профессионального воздействия и разрабо1 ни профилактических мероприятий.

Таким образом, анализ проведенных микробиологических, морфо логических и иммунологических исследований как в эксперименте, так и при натурных исследованиях рабочих позволяет выявить четку единую коррелятивную связь имеющихся нарушений, происходящих.в макроорганизме под действием пестицидов которана и хлората магни Интересно то, что нарушение в одной системе обязательно сопровда дается цепочкой нарушений в других системах, это опять-таки явля ется наглядный свидетельством о единстве гомеостаза макроорганиг ма.

^¿¿явленные наш нарушения в различных параметрах макроорганизма'позволяют не только вскрыть те интимные процессы, которые происходят в макроорганизме при воздействии котореном и хлорато?. магния, но дают возможность наметить конфетные пути микробиоло! ческой и иммунологической коррекции выявленных нарушений и там с Шш сохранить организм людей от многих патологических процессов,

В Ы В ,0 д ы •

X» Разработаны методические подходы бактериологического из? чения микробной экологии кишечника и оценки работы системы имму! тета у рабочих химических заводов и в условиях токсикологичеоко: эксперименте по гигиеническому нормированию веществ, обладающих

'' -.".. Г • : 35 ' '

»

апт&мэдробной активностью. .

3. С щшшношам унифицированного комплекса методов при пс-следованза фзкаляй у рабочих-'химических заводов,-а такке в эксперимента микробиоценоза, морфоструктурн кишечника и ш*уаного ста-4 туса уотзповлоио, что под воздействием язстшщдов (которяяа я хлората шпшя) наступают нарушения: ¡пкпоойой окологш, цатоархптвк-тондяп кккочнлка и возникают гля^'йсдафкцятиые состояния. .''

3. Показатели дасбяоза кинотек» у рабочих котораиового цеха к при воздействии яотораном в эксперименте являются уменьшение общего количества-.анаэробов, бифядофкмрай, зшврихий, лактобакте- . рай''и уволлчвшв содержания условно-патогенных микробов - цредста-¿кгояой'родов §tephylooooo«e, .candida Й Baotoro.i.düs , что азш~ вт?. соотношение аназробов к аэроб;.« б сторону дойшшраванкя по! ■■ 4,-Изучение тврофкори фг;«ллй у тгоечж: цеха "Хлорат шшия", s атпврпиввтояш» асоя^девшпя, лроввдояяы? при воздейгт-■тх: '"ojc^oií »-¿агавя, сввдатогьсrssyas о развитии дасбактериоза, ха-ркторной оообзниостьв- которых ягяязгоя дзбацй? летстобактерпй-,

5. Сочоталноо воздействие котсраксм з сальмонеллами для но хлорзтед клЪгш я сэльмоаелдаиг спсссйо'.-?зузт успяешэ дксбиотцчес-шс еф$э:;';сз, что цодтвэрйдаяооь болзо зкрхЕевшш колячествешш-нз пп;.'.з;!онг«г'.',л з составе макрсфдорн д здлейззея сроков воостаиовд-

ТЗЛЬПОГО П'ЗрЛОДЗ. ' -

6» Шгакш боктзрзЙ» вцдалошшэ as пспряжнвняй'.рабочих цеха "Которан" и "Хюрзг наглая", я тлглэ es ккшсчляка крыс, подвергнутых зоздоСстзаз о?ях сзотйцаясэ» твтпэхто чаще вырабатывают ферменты агрзослд я з токольхо раз яогасрда под адгоадвиостд по сравнении с гз ковка у :сонтролихих групп сбгявдоваиая.

7. Иопользойаайз с езльэ профаяазист -бубаотяков: бифидумбак-терияа при воздзйотвиз астораяом, лапзобзктзрина при воздействий хлоратом магаия'логзэало ах выоог^з вйанкансои для нормализации мякробкоценова.

8. йллупологячвсгла яосяедоваайя* правадсише у рабочих цеха "Хлорат магния" и "Которзз" позволяло выявят» олздуациз нарушения-в системе иммунитета: достовериоз ухзйдчснне зяямэотва лейкоцитов, относительного я абсолютного числа ягмфсцггоз, сшшеняе. количества Т-ошмфоцитов я .увзякчзндз абсолютного числа _3~лныфоцатов. -Наиболее рэзко вырвязнисз. сяйшяяа отэчта со огороды нвопецифи-ческих факторов запиты - фагоцитоза и лазос»«* Наряду о этим ука-

зано, что вез эти нарушения в работе системы иммунитета болао выражены у рабочих цаха "Хлорат магния" по сравнения с рабочими цеха "Которая".

9. Введение в просвет подвздошной клики крыс сальмонелл со-про-окдается резко выраженным дисбактариозом толстой кишки и изменением е архитектоника слизистой. Последнее проявлялось а укорочении ворсинок и крипт, инфильтрации соединктвльно-тканшш , клетками и миграции их в просвет кишечника. Эти изменения наиболее значительны спустя 12 часов поело заражения.

10. Авторадиографическое изучений пролиферации и миграции ай-тероцитов показало, что черэа 12 часов после инфицирования сальмонеллами слизиотой снижается пролиферативная способность клеток крипт, а скорость миграции я экструзии возрастает, что обуславливает депопуляцию эпителия,

11. Электронно-шкроокопичаокио, лдашшецентпыа и светоопти-1ческиа наблюдения свидетельствуют, что пенетрация сальмонеллами

эпиталня происходит в основном черээ шлодиф^еранцароваялыз зелат-крипт чораз 6-12 часов поело заражения.

12. Сочвтанное воздействие котораном и сальмонеллами, а так-■ аз хлоратом магния к сальмонеллами оказываэт наиболее выраженное

воздействие на'архитектонику.слизистой оболочки кишечника, кото-роо выражается в развитии воспалительной рэакцш с' явлениями ат-рофпи. Большз того, эти изменения в архитектонике сляькатой оболочки кшзчшзка сохраняются а на 30 сутки исследования,

/

■ Щ'ШИЧБСКИВ'ШСМЕЦДАВДЯ X.

Лровадашше в комплекса микробиологические и шыунологичер-• киа исследования у рабочих, вшдаых производством которана и хлората магния, позволяло установить закономэряш нарушения, происходящие как в количественном, так п качественном отношении со ом ронк шкро^лорн юааэчнака, а такце нарувания работы в системе иммунитета. При етой, наиболее интересные данные получены при изучении указанных, нарушений у рабочих в аспекте пода, возраста и стажа работы,, Основываясь на аткх особенностях, рекомендуем: I. Мэтодаческяе .'ракомзвдации:

- "Нарушешя шшробиоцансза кишечника и иммунного статуса у лиц, ямзйцях контакт о пестицидом которая я их коррекция",

- "Особенности дисбактариоза кишечника и нарушения в систем

иммунитета у лиц, имеющих- контакт с пестицидом хлорат магния и пути их коррекции",

Методические рекомендации разосланы руководителям санитарно-эпидемиологической слукби республик Средней Азии п Казахстана. ■

2. Материалы диссертация попользуются в учебном процессе на кафедрах микробиологии, гистологии и профессиональной патологии медицинских вузов Узбекистана.

Основное содержание диссертации опубликовано в следующих работах:

X. О роли макрофагов соботвенной пластинки слизистой кишечника в барьерной функции // Таз. дока. П конференции физиологов Узбекистана. - Ташкент, IS73. - С. Ы-оЗ (в соавт. с 11.И. Ташход-зкаевнм, И.М» Байбоковым).

2. О структурных основах бар&врно-защатной функции- слизистой кишечника // Клеточные механизмы прйсгтособктзльных процессов. - -Ташкент, 1974. - С. 49-60 (в соавт. с ü.M. Вайбековым, A.B. Оолл-янц).

3. Ультраструктура эктвроцитов при введения сальмонелл в петля кшки *// Приспособительные процессы оргаяав пищеварения в условиях клиники и эксперимента. - Тсшкант» I&74- - С. 158-160 (в соавт. с И.М. Байбаковым, Л.Д. НуруллаоаняК

4. Некоторые морфологические я фушааюнаяыше механизмы проникновения микробов через слизистую кящечгшка // Приспособительные процессы органов ггщеяарзняя в условиях шшки и эксперимента. - Ташкент, 1974. - 0. 188-ISO (з созв?* с А3. Золдянц, И.М. . Байбаковым).

5» Реакция имцуноданоа ¡ошзчкой стеййк эдояйков на микробное воздействие // Сборник ваучяо-шзоледоззгельсккх работ ЦНИЯ мезвузов Узбекистана. - Самарканд, 1974* - С.. 158-159 (в соавт. о П.И. Теиходглевш, И.М. Байбвковщ)-

6. О взаямодейотвий зпигалкалйных а соедамягвяакот.канннх клеток слизистой кишечника при зкспорямен'гзльпоЯ инфекции // Реактивность и пластичность эпителия а ооедйяашявоа ткани в нормальных, экспериментальных, натологячэсшс условиях* ~ Свердловск, 1974, - С. 97-99 (а соавт. с K.Ä. Зуфзрогкм, й.ьЦ БаЗбэновым, Ш.Й. Заяевым). ■

7. Морфологические основы ютазгояйввжз Höitotojia йитераль-

ньк микроорганизмов // Мед. ~/рпал Узбекистана. - 1974. - JS 5. -0. 63-68 (в соавт, о Л,В» ёолкяпц).

8, Цитологические изменения клеток слизистой кишчняка у крыс при воздействии салшозеллаш // Вопросы инерзавдоикой я ва-инфлкционной патологии. - Ташкент, 1975. - С, I0S-I03.

9. Электронно;,шкроскезлчеекоз изучение взаимодействия сальмонелл с эпителием подаздоюной кишки // Архив патологии. - М.,

1975. - )в 7. - С, 125-129 (в соавт. о И.М. Байбеновым),

10. Реакция слизистой кишки гиотобионтных и обычных крыо при - микробной инвазии Л Возсозээная конференция "Гнотобионты", органные культуры как метод лабораторного исследования. - Тбилиси,

1976, - 0, 39-43 (в соавт, с И.М. Байбаковым).

11. Некоторые иммунологические аспекты слизистой подвздояао! кишки при микробной кодгашшаадя // Всесоюзный съезд патофизиологов. - Ташкент, 1976. - С. 53-55.

12. Характеристика аэробной микрофлоры желудочно-кишечного тракта крыс при кммуносупрессии // I Всесоюзный симпозиум имыуно супрессии при алдотрансплантации. - Ташкент, 1977. - С» 77-82. (в соавт. с H.A. .Ама новым). - .

13. Количественная и качественная характеристика микрофлоры подвздошной кишка у экспериментальных крыс // Сборник ЩЙП мад. вузов. Узбекистана. - Теакент, 1977. - С. 75-77,

14. Реакция клзток ооодлгшгольной ткани на {нфзкцйсккоэ воз действие // Актуальные вопросы бактериальных инфекций, - Тайке;; 1979. -г С. 132-135 (з соазт» с Т.У. Пзрнавпроиам, Д.А. Уба.йдуд-лаавой). ." ■ . . ..

25« Некоторые аспекты взаимодействия шшробоа о кдэакаш cj зисто.* кипит // Елеточша неханязщ приспособительных процессов, Ташкент 1979. - О, 63-S5.

.16. Состояние »точной микрофлора после обширной резекции дистального ее отдала // Воаооазннй съезд гигиенистов, шисробют гов и эпидемиологов. - Ташкент, 1879. - С. 35-38.

17. Характеряотяна аэробной и анаэробной микрофлоры галудо1 но-шаечного тракта у шшктяых крыо // Сборник научных трудов УзНИИЕМ. - Ташкент, 1981. - С. 71-73, '. .. 18. Состояние макрофлоры толстой кишки после qömpHot раза ции тонкой кишки у крыо //.Клеточные механизма пряспоообительны процессов. - Ташкент, 1981. - С. 43-45. •

19. Состояние шшэчной микрофлоры и архитектоники олизйсто

т

*

ставшейся части кишки после обширной резекции диотального ее отела // Актуальные вопросы морфологии. - Ташкент, 1982. - С. 479 (в соавт. с А,11. Паршювим, А.Ю. Юлдатевым, М'.У, Усмановой).

20. Изучение особенностей пастицидного дисбактериоза в эксперименте // Актуальные проблемы желудочно-кишечной патологии. -ашкент, 1983. - С. 77-79 (в соавт. с Д.Ю. Намазовнм).

21. Количественная и качественная характеристики аэробной утофдоры кишечника крыс при контаминации сальмонеллами // Клеточ-ые механизмы, приспособительных процессов. - Ташкент, 1903. - С. 1-14 (в ооавт. о З.К. Ботировой, Д.Ю. Намазовш).

22. Изменение нормальной микрофлоры кишечного тразста крыс в роцессе пестицидной интоксикации // Актуальные вопросы желудочно-ишечной патологии. - Ташкент, 1983. - С. 6-8 (в соавт. с Щ.К. Ады-овым, Д.Ю. Намазовнм).

23. Изучение чувствительности некоторых микроорганизмов к естицидам в условиях V // Использование ишуно-огических и токсикологических методов при изучении патологичес-их состояний. - Ташкент, 1983. - 0. 118-120 (в соавт. о Ш.Р.' лиевым).

24. Влияние пеотицядэ которана на состояние яядягенной микролоры кишечного тракта а эксперименте // Клеточные механизмы при-поообительных процессов. - Ташкент, 1984. - С. 38-40 (в соавт.

Д.Ю. Намазовш, А.П, Самооновнм).

25. Состояние микрофлоры и неопецифлческих факторов защиты ри интоксикации пеотицида?,« // Юбилейный сборник ТашГосМИ. ашкент, 1984. - 0. 23-24 (в соазт. о Д,Ю. Намазовнм, Ш.К. Адыло-ым).

26. Изучение особенностей дисбактериоза, вызванного пестици-зми // Мед. журнал Узбекистана. - 1385. - й 3, - 0. 55-66 (в оавт. с Д.Ю. Намазовнм).

27. Особенности которанового дисбвктеряоза и его профилакти-э // I съезд микробиологов, эпидемиологов и гигиенистов Туркме-астана. - Ашхабад, 1986. ~ С. 45-46.

23. Состояние аутофлорн кзлудочно-кшачного тракта крыс при ятокоикации пестицидами // Актуальные вопросы бактериальных ин-зкций. - Ташкент, 1986. - С, 20-34 (в ооавт* с Д.Ю, Намэзовым).

29. Состояние микробиоценоза.кишечника у крко в норме и при • атравке хлоратом магния // Материалы итоговой конференции ТашГос -I. - Ташкент, 1987. - С, 54-66.

30. Характеристика микрофлоры кишечника крыс при контаминации сальмонеллами на фоне затравки хлоратом магния // Труды УзНШ! • санитарии, гигиены и профзаболеваний. - Ташкент, 1988. - С. 121123.

31. Особенности аутофдоры кишечника крыс при воздействии хлоратом магния //■ Юбилейный сборник. - Барнаул, 1988. - 0. 37-40»

32. Характеристики заболеваемости и соотояния микрофлоры испражнений у рабочих химических заводов, занятых производством пестицидов // Всесоюзная научно-практическая конференция. - Ташкент, 1988. - 0. 372-374.

33. Дисбактериалыше особенности кишечника крыс при воздействии хлоратом магния и их коррекция // Сборник научных трудов УзНИИЭМ.'- Ташкент, 1990. - С. 55-57.

34. Нарушения в системе иммунитета у рабочих, занятых производством пестицидов. // Актуальные вопросы клинической иммунологии и региональной аллергологии: I Республиканский съезд иммунологов Узбекистана. - Ташкент, 1991. - С. 99-100.

35. Показатели иммунного статуса у рабочих, занятых производством хлората магния в зависимости от пола, возраста и ста:яа работы // Сборник УзНКИ санитарии, гигиены и профзаболеваний. - Ташкент, 1990. - С'.' 69-71.

. 36. Нарушения макробиоценоза кишечника крыс и его коррекция // Сборник научных трудов ГашШИВС. - Ташкент, 13Ш. - С, 59-61 (в соавт. с Д.И. Хамзиной).

37. Состояние морфоструктуря слизистой кишечника крыс при раздельном и" оочетанном воздействии котораном и сальмонеллами // Сборник научных трудов ТашНИИБО. - Ташкент, 1990. - С. 112-116 (в соавт. с А,П. Цорпиевым).

38. Способность микроорганизмов, выделенных из кишечника крыс при воздействии котораном, образовывать ферменты агрессии // Клзточны" механизмы приспособительных процессов. - Ташкент, 1991. - С, Ь9-62.

39. Ферментативная активность микроорганизмов, ввделенных из кишечника рабочих, занятых производством которава // Актуальные вопросы гигиены труда и-профзаболеваний. - Ташкент, 1991. - С. 151-153.

40. Микробиоценоз кишечника у рабочих, занятых производством пестицида которана // Структурные основы функциональной деятель--ности кишечника. - Ташкент, 1991. - 0. 91-93.