Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ДЕНИТРИФИКАЦИИ В ПОЧВАХ

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ДЕНИТРИФИКАЦИИ В ПОЧВАХ"



МОСКОВСКИЙ ОРДША ЛЕНИНА» ОРДША ОКТЯБРЬСКОЙ , РЕВОДЩЙ И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЭКАМБНИ ■ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ вмени m.b..k>uohocoba ..

Ва правах руюшад

кромка мирослав

удк 6Э1.41

зкодогичвоиив особенности дшитгадагаади в почвах Спепнальвеюгь o0.oo.ô7 -шкройвомпвл

А в торе фêрас дноовргааяв на соискание ученов степени яакмвдата01могмчв01шхнаук

Работа выполнена на кафедра биологии почв факультета ;. почвоведения Московского государственного университета вмени

М.В. Ломоносова« ' -.'.'.. у ;..; ^.-'/ * ■ 'V'¿V .'■' *:■

: ; ■■ Научные руководитель: доктор биологических наук, -

л'* профессорМ.М.УМАКЮ ::' ' : .' ^ ;

Ч '.".' 'Социальные оппоненты: доктор'биологаческих науя : ■

-" '■;■.■ С.В.ЛСТУНСВА :: '

■'>.'■■'4""^ " -кандядаг йиологичвских наук ■ Д".^

;.д;' и.я.вбщенина . . • с" ■'л'

Ведущее учреждение: Московская сельскохозяйственная > ;

академияиы.К.А.Тимирязева'"

. ■ ; Защита диосергаши состоится•"21 * ноября 1989 г.' :

1 в 15 чао.30 мин. на'заседании специализированного совета ' ■;■ К-053.05.86 в ИГУ им.Ц.В.Ломоносова

Адрес:^19699, Москва,ГСП,Ленинские горы, МГУ, факультет Почвоведения, Ученый совет. ■■ /'."'■' V". •-ь^;.'.-

■ ■ г С дисоертсциеЯ можно оэнакоються в библиотеке факультета ,

Почвоведения ЫГУ1 • .■■•.'

' .-* ■ Автореферат" разослан " .■"■■ г ■ ' ■ ■' Т989 г. : ^ ■ Приглашаем Вас принять участие в обсуждении диосерташи на ; . ; заседании спепиалиэированнбго совета, а отзывы на автореферат ■ •'..» 3-х экземплярах цроовн направить'по адресу: 119899, Ыэоква, > 'ГСр» 'Ленинские тор«,'МГУ," факультет Почвоведения, Ученый совет.".

Ученый секретарь : -

специализированного совета :. И.П.Бабьева

■■ ■ *** ■^ч, ц, 1 -' г '-' X ^ -

■¿у:''

' Актуальность тема. По цепе иитенафякапии- сельскохозяйствен-

■ "■ • наго производства все острее вогает проблема шенкя экологочес-»•' ких последствий применения азотных' удобрений, включая газообраэ-.

- ные продукты, что невоэможноОез количественного определения ак- ; „ тввности денигри^пкашд в различных акосастемах. Очевидна кеобхо-ь ' .. димость выяснения основных вкологичеоках. факторов,'влияодах на',''.

двнитрифшируацае микроорганизма в почве , б е эчего невозможна вы- работка стратегия направлеяного'воздействия аа них о пелъю снивв-■.■■■; ния отрипательвого «ффекта в конкретных условиях среды. Поэтому _ главной задачей нашей работы было изучение завися мости денитриЗя-кашш от различных экологических факторов, характерных: для почв.

• К Настоящему • времени имеются: отрывочные сведения овлияния температуры, рН, паролального давления кислорода»: влакносгя надекитри-фоцарушцпз активность лиаь некоторых почв.^ Однако действие каждо- - ' . го аз этих факторов изучалось по-отдельности и.поэтому остается не [

.: 'ясным, каковы наиболее благоприятные "сочетания условий для протека- ; 5 : ния денигрифякашив, по чвах.раэ лячншс,г япав. В литература нет свв-

, дений о том, существует ли .'единый оптиму м этих' факторов для де- у . ■ . . патрафскааии неэавксимо от типа почвы,- или различия, в: активности' \де нитрификации осредедягаоя оообенностяш комплекса' деаитрифиш-^ .1 :. руирк макроорганизмов в каждоЗ почве. Полностью отсутствует дан- ■'.'■■ ные о биомассе денптри^агааругвдйх микроорганизмов в почвах'разных '-. ■ • 'типе® и ее изменениях в зависимости от температуры, влажности,

давления О2 и др. факторов.:• УУ-'-УХ ■■У-У^У"' ■ ' ■'.'■')' - ;•.■

Г., Целью работы'являлось изучение эколопческих особенностей, про-"

• текания денитряфикашт- в почвах различных типов. '-• ; : . ' : ' '

В задача исследований - втмддо: ' ;'у'-- У./I'У. ■ •; I. Разработать новый метол определения денвтря^йкспаи.

■ 2. Изучить особенности де:1ятрафика13!2 в почвах различных типов. •

цект.-^Г.^лп гглгтая-

г.. г,:.::-' " " И.Д. "г:. ¡а ".гззоз ■.

3. Изучить влиялае температура/ влажности, паршального давления

; .' кислорода на'протекание деяитрификапии в почвах разных типов .> ^

4.; Разработать метод определения;беомаосы шкроорганиэмоэ-денигрн-фа Кагоров в почве* ;-.- "Л::': ■ V:.

.". .'' Научная' новизна:' О помощью разоаботанных мат'одовйггределення ""'' активности денитрифйкалии и бпомассыденитрифиавруоциг микроорганизмов,' "осуществляидах разные этапы процесса денитрафакашя' в ;: почве, выявлены вкологяческае особенностяфунмшонярования комп- . - -лекса денитрй(1ипзр?ющих микроорганизмов в каадой из18 типов почв Европейской части СССР*Установлено, что в засоленных' почвах (солонце исолоичаке)денятрифи калия протекает преимущественно доэа-киса азота. ОЗнаружево существование;температурного оптимума для денитрифякаиаи 'в каждом типе почвы. Показано/, что практически вое-денигрнфикаторьг(Э2#) способна восстанавливать закись аэота.Взвг-зисиыостя ог типа почва на' долю денятрификаторов приходится от '.■'до; 775 от общей биомассы гетеротрофных шкрсюргаяиэмов в почве, • ; Г: Практичеока^ пенноду^! Дредлохен новый метод измерения де-нитрификации в почве, • о по*мощью которого определена денлгрифош-"; > рувщая активность основных типов почв Европейской части СССР. Реа^ работая кинетический, метод определения биомассы денитрифятрущих■'. ки.крооргвяр.змов, осуществляющих разные атапы продесса денитрифика-г .пии. иатерзали диссертшки ыогут; быть использованы в иеследовениях т'по шкробиологии, Йиогеохимйп, агрохикии, 'при олтишзашш доз вае^ 'сения азотных удобрений, . прогвозироЕакии. экологй могах последствий их применения, .для создания импташонпых - математических моделей» Подгчзнвие результа^^ вспсльэуются в курсе лекпяа по йиологаапочв, читаемых ка.факультете.почвоведение 117. • '■■■■' . - : ■ '; 'X

■ ' . Публикация. -Па *аме работы .'опубликовано 4 работы. .

Апдобшшя раоот^" Основные положаимя ряЛлг» пилпжвям на Е0№;

фер еашш • "Би одинами ка почв".(Таллин, 1988), "l-olt ЫвщяяроцноА не-« . учной конференции чехословацких'аспирантов п студентов в СССР с • .;. участием молодых ученых соиаалвотЕческих стран" (Москва, 1988), ' : . .' 5-ом Семянаре; чехословацких аспирантов: я студент©?, обучаэдзхоя ¿'

. в ГДР (Илменау; 1Э88), 9-тон Уввдународном симпозиуме по бвогео-,:. химии окрувавдей среды (Москва, 1969). .: ау'.Ь

' Од^ен работу. Диссертация состоит э введения, обзора лягв-.':'• ратуры, экспериментальной части, закятеняяд:выводов. ^Материала ; **;■.!. - диссертации иэлохепы на 94 стр. машинописного текста, сшсок лите^ ' . .• ратуры из 160 названий, иэ них 129эарубекные; • : ' ' .;

.• '. obiektu и методы иссящшшя у ууу'''"-"уi ;

; .'■. v Работу проводили на образцах 18 основных типов почв Европейо-кой части СССР, отобранных в и кие-июле 1987 г» Характеристика : Л,.:;.- почв приведена в дисоертапии на стр.27-28. • ; Vv :■;■ I.'

Vj ¿нвлиэ г^эув ( со2, 02, яг0, яг ) прозодаля fea' газовом хрома-

тографеЦосковскаго'опыгного завода "Хроматограф" модель 3 V0O/4, v4- Использовала колонки-р. э нержавеющей стала диаяетром'З мм, длиной'; ■ 3 ы.' Колошщ заполняли для определения С0г и нг0 - едсорбен- . .• том "Шлисорб-1" (80-1СЮ мет); для определения 02 и ш2 ~ молеку--; .

v- лярным ситом Са' 5а (80-100 меа) ■ предварительно активированном в ■ л \ '■■• теченае часа при 350°С. Температура катароыетра I00°C, температура '' . -V иэмйрйтелышх олементов' 150°С; ток измерительных .элементов.: 148 мА, • температура термостата 40°С,.температура-.камеры вираска 100°С. Про-; бы вводили медяпп неким впрацем объемом 0,5 мл яла с помощью доза- ' ^ .тора (объем-петли -0,092 WU. Скорость потока газа-нссптеля'(ге- .

.ляй) - зо мл миа"^. , . V'-i'-'-^r'-V^;-:;.'-

' ' "' : КЬнцентпагшв в почве определяла' яонселективныш злек-

тродами в водкой вытяхке.о'помощью потенциометра рК-340. .•;.• • : \ . .•.v.':Т.' Определение ^дзаэссы* аэробных гетег|отро^кьч • ми кг> со or a be э «ов :

-'¡Л V проводили: кинетическим : методом (Паников, Палеева, 1Э86) .

"*' - Г Одре явлени е биомассы'яенйтрадякаторов.во^ан^в^иваигдт'нят- ;.

' раты остиествляли'киветическимыетодон. Для ©того. .10 г. почвы увла-- княли 20 ид раствора' глюкозы и нитратов" из расчета 2,5 мг глюкозы } • и 0,1 мг - Н-ЛО^ ¿на грамм почвы Почву помещали во флвконй ; объ&- -Ч. ком 50 мл; 'герметично'закрывали резиновыми пробками о закимамл и "4: > , в течение часа продувала инертным газом {±г ) • После' этого вводи-ля; 1мл ацетилена (беэкиелорода) помещали в термостат о темпера-туроЛ 34°С и в течение в часов о'интервалом в"! чао отбирали пробы' для определения^ концентрации ¿¿о /;-. иа газовом хроматографе; Из по- ' ■ . ■ лучешшх данных определяли параметры скорости: эмиссии 020 ; т0 \> ; 'начальную скорость эмиссии' в20 и ' -^.удельную.скорость роста..', V ■■;■■ Экономический кое&исиент (; тс ) рассчитывали»» формуле: /•'''

, "• ■/• у-о ^С-биомассы '•' у-. ,•.. :.•' • .' -.• . ^^V-.-/-;:' ■

;^-'-Н^:;V,. ^^'.^»г^а0.^ '

> • Црярост биомассы денигрифякаторов 1 ¿С^вп^^01Ц1еделяла ясосодя ' . 1. - из предположения, что внеоевиоя глюкоза расходуется на баосинтегв-

.Vческяе потребности микроорганизмов и окисляется до со, ' » т»е.' Г' "■

' " " -'■'■>' ■■■■:■'. ■ -'".-."-. '-'.■•■ •■ ■: ' ■ " ' до -глюкозы я аС -биомассы + ДС-СО- -'-ч■ ' '

-.-■ : '-•* -•»■■■у"--!--'.' ■■■■-■ ■ :;г •-..:

V"" Ы ::,"•:; Коясентоапию глюкозы до и после окончания эксперимента опое- "

,:.г .сГ. деляли в водной вытяжке методом скигакая в сернохромовой смеси ■';*' ■

>' • ■ Бяондсс^'денатоп^дкатеров/ восстанквлявавпш; иг п опреде- : • ляля аналсо^ичяэ^ подсгевляя вместо реяу^татов по. »шссии н^о дан-

вые по восстановлению ягО . ! ■ ..Г!;.

-РЕЗУЛЬТАТЫ и ОБСУЖДЕНИЕ л■■ ■ • I. Новый метод определения активности денитрифякаоии в почве

,-В настоящее время' извеотвд несколько' способовизмерения 'айн ' ; тивнооти д¿нитрификации в почве -" балансовый, -изотопный и. энэнма-'■*■>.'..' тачесжай.; * г- / "■■ 'л' ";:-1."7;:Лл;-/ *

■ Г -Наибольшее распространение получили методы/ основанные на из- -меренид энзиматической активности почв методом газовой хромат огра-фйЯ ( 1902 «Ь - ; ■': Г"' -

■г/ ■ К 1шм относятся: - "<-1' -'■■■*:.'■'.'.'•■ -

' ' \ ■ I* Оценка активности денитрификации по скорости эмпссиизака- " ;

- V ся азота в .присутствии ацетилена.Матод основан на принципе ингв-бирования редуктазы закиси азота апетилепом,открытым Р.И.фсдоро- -

■ вой (1973)» и применен дня определения денитрл$якапии в почве ря- -■ ' ^ V дом авторов (: 1овЫйагА,Кав«1вв, 197б| ВаШгв<т ^ а!-,1976

. . 2. 0пр«делен7.е активности денигрл-^.кбпви по скорости редук-V--' пия ааккси аэота( предложенный Гарсия ( Оего!«. , 1974 )» /.. : _ .. . Метод о применением апетилена в качестве ингибитора редукта- V '• зы закяса азота, несмотря на преимущества, имеет и ряд недостатков» . "Показано, что асетилен может использоваться как источник''углерода .- -для макрооргйнпэмов ( торр,в«тоа » 1Эвб •)♦ В его присутствии про- ■; ..■ : и сходг?_ ускорение процесса разрушения, азотсадержещюе веществ

; вене, ВеаиоЪещр, 1992 ) »'В анаэробных условиях апеткден вызывает

■ . аакоплепие оргэнгческах кислот {ШяЛяпвЪ», Ьв0итап,1930). Дм'по- ■ выкешя чувствительности необходимо вносить в почву нитраты.' фоме „ того, атот иетон не позвмяег ¿и££«рен2Ероэать закись азота, вцде- ' •. • • "лявзусся в результате'денитрйфркацЕЯ, от зоккса. образуицейся в' -.;•,'"'. ; '• результате другкг 'проц?ссоз,гаяих:;,кая, яятрп$якадия,".цяссзьзлянион- '

•.* • • Более перспективным для цроведеняя зкодогичесгах ясследово» . . най, по нашему мнений являегся штод, основанный аа измерения . , : скорости вое становления закиси' азота. Егопреимущество состоят в ; ' повышена»!очности определения» так как .отпадает необходимость вне^-. сеняя нитратов и инкубации с ацетиленом.;0н также овлективен.поз— ; | воляет определять собственно активность деквтрифякапив. ■

Этот метод пока не получил шроггаго распространения в почво- 1' -ведения/ посколько до настоящего времени отсутствует методика его

иопользоваяия.фоывтого, остается не ясным, все ли де натри фи ка- '' у - торы способны к восстановление замеси азота. Поэтому одной из оо- !

• новных эадач нашей работы являлась-модификашя «того метода азме- |

' •рения денатрификагия, ■ применительно к почва«,;а определение доли Л/Ц

• денитрифпкаторов, восстанавливающих эшсясь азота. . . ' ; ; Для разработки методики провела ряд вкспервментов. На первом '

• втапе'была изучена зависимость вмиссая в потребления закиси азота ' |' : от наличия энергетического собстрата (глккозы) в акцептора влек-" /

; тронов (нитрата или закися азота). . .'•

* / ■ -Из полученных результатов (. рис.I) следует, что заметная. эмион. /

сия ®20 наблюдалась только после . 12; часов инкубирования в атмоо-фере о^ я только в'вариантах,' - содержащих нитраты. В Т(£е время ^ " ■ потребление' -; н2о . было отмечено о. первых часов опыта во всех вак'. { -.'.'; раантах опыта. ■■ /-лЛ -* ;'7-'т■""-"' -"V '

' Увеличение концентрация п^О в присутствия нитратов указы- ;/:..' вает на невозможность измерения гтлм методом скорости восстаков- • -ддения закиси азота в~ почвах, "содерк&щах, высокие конпентрашш нит- » .' ратов.' ■ ; '

; , • Была выявлена корреляция мекду выделением оог в потребление '•• | ем »20 . кик потребление иг0 ., так я выделение сог " имеют зко- ; ; поневплальный характер. . . : • ■

мм «»о.»"1 - ;;

- И. ; _

. - . . . • wM соа-г1

is le . го^ at V

ол

:в 12 M » о . ♦ • 12 : ао

ffcc.I Выделение н потребление В20 ;■ в■ эмиссия С02 из чернозем

обыкновенного в зависимости от наличия энергетического оуб^ . • • . страта а акиептopa1 электронов: ;■

."A- ^стиАлированная вода . v:- 'Одной из- при чпнпот е;ь вго из ; re э oboS" ■ фаза ■ почвможе т : бытьч Д.

> a -

•г адсорбция. ■ Поэтому. ш оценивали размеры адсорбции в специальном ... \ : -' опыте со: стерильной почвой, когда влияние ' биологических факторов1 ; ^ было заведомо исключено. Эти вкеперименты показали (рис.2), .что -снижение коннентрапив ¿20 происходит главным образом в реэуль-, тате деятельности микроорганизмов,, а не ее адсорбции почвой. ?

ми

! 700

600

■ eoo

.,-400

• : • ;.-• 300

: 200

щщ;:

s <uc.

Л . О I 2 y. , 5 . 4 ,5 в „■■ 7/¡S;;

„V .;. Рас. 2 Потребление ' ж2о : стерильной в нестерильной, почвой -, ^ . : •: I . (чернозем типичный) . ; . ; ^ / -'•".-;. : Г- ; 'О ;- л': ■.

А-стерильная почва*, - •>•• \ -Г/ 'v;;l' v " ••"• .V" нестерильная почва " i. .' '' ;:;..*,,'".'< лЛ v •

Необходимо было • также : оценить нижний ' предел насыщения почв • ' Г ';■; "субстратом (Я2о .), при котором уже нет.тормокенал пропессаиз-iii ■

за его недостатка* Изучение эависи«ости скоростп . потребления и„о

.-Г'- --:". > • " ' ■ -. V ' Г. ".i. ; i. ■".-'■ '-т,- î'i----'.=. ■■ j ...» ч?

\ : от ее начальвойконпентрации/позволило установить, что при концент- -:-рааии О, S мкМ В20. г-* почт скор осгьТвос становления' уха не зависать ^ - ' от концентращш * J^O.^. (рио.З) » . ; у - . г,::-'. '' .'■'-

:•'•- На основании втих экспериментов на^ю была разработана следую-'V; Цая методика определения-активности денлтрпфикациа_по скорости.воо— ;';, .-; - становления *20 .Навеску почве (5 г) помещает -а'' штгипиллиновый: ;: фяакон (20 мл},: добавляет 5 мл дистиллированной воды и инкубирует : _>г

- э-

Ряс.З Зависимость скорости потребления *2о от ее начальной яонпевтрипяи (чернозем типичный^ '.. в0~ начальная коннентрапая я20 ; (нИ.г~*) : » - скорость потреблекяя >2о : .

при 28° в течение суток. Через 24 часа добавляют,- I «л раствора глюкозы (конд.12,5 мг.мл-*), закрывают резиновой пробкой в фякси-• руют ее металлическим заюшом. Для создания анаэробных условий • д • воздух вытесняют инертным газом (Лх )»вводят 0,2 мл к20 и инкубируют пря 28°С. Измерение кониентрапая к2о и ■ со2 проводят о ■'"■■.- интервалом в I чао; Активность денитри^кедаи (скорость восстанов- ^ ления В2о ) определяет по формуле: ' : • - ■;_ хгх7 -■'■"■:■'Л,'.."у/. • . -

где: »'.- скорость восстановления . . "

консентрасия д.-1-й чао после его введения Ч'лй.■■■.■V.--'' Ху - конпзнтр&сия в20 - через 7 часов после:его'введе- ■ ■;'■ ' : ' НИЯ (Ы.г"1;. • ■: Т/^'Ь''':'---V'. ■ V' ■'

1 '■■'К';"' -Новая йртсдика'характеризуёгся хоросей воспроизводимостью в

параллельных определениях и деег :возйояяссть:' оценивать потевппаль-'.

Jную активность деннгря^икааии в почвах разных типов.' Оцяаяо-'вая-■ ■ больший практический иктерео-представляет.ооенка гаэообразных тоь; . " терь азота в' ре зультате" денитрифккалии. непосредственно в е от а от-, ,,. . »- венных условиях ( в поле) . На сегодняшний 'день ,не существует ; доо-; - :. " таточно точного и простого метода определения палевой активности - - - денитриЛекааяа в почвеПри использовании ингибиторов деняграфика-v ши (аиетиленовый метод) необходимым у сл ови ем^явлвется то, чтобы-

скорость эмиссия "закиси "азота .превышала скорость ее потерь в поч-.' .-.--ве за:сче?:адсорбпяиграстворего1я и диффузии. Предложенный Гарсия • . ( 0»rei«i,l974 ) ' метод' о использованием показателя скорости восста-* 4 ноЕления эакася азота предполагает "лраменение в качества ¿нутре»-;;". Л* . . Него стандарта инертного газа (криптон;, физические характеристи- / . /ки котораго существенно отличаются от закиси азота (растворив

• ^ размеры молекула и связанные с этим скорость адсорбшш, даффуэип '

* • и др.)» что сникает точность определения..Поэтому наш был разра-

,. ботая метод,"позволяющий,использовать:закись;азота не только как/ -■ ^ ■ (. субстрат^ дляденитрифширушиах шкрооргашзшв.нон: как ваутрен- ' ■'

- -' виО стандарт {показатель ■ скорости; диффузия). Основан,' он на извест-; -Ч / : ном:явлении быстрого иягибирования ацетиленом редуктазы заквси азота. -В серия модельных акопериментов Сила подробно исследована' кине-^ j ';-. • ^'-л. -тька этого пропесса. Некоторые из этих 'данных приведеныв таблице I. > ■ , .• • Очевидно,' что как в'чернозеие. так в темно-серой лесноЗ поч- ; .': ве ""ацетилен-полностью ингибирует,восстановление l н^о : • При отсут- ■ ,- v.-vv,i,';*otbhh ацетилена в "системе (таблапа-1,"вариант■ A) i потреблением имело экопонёкпвгльный характер.; В случае, у когда ' ацетилен былвве—"' J ден с начале опыта,' оогребленгя- н20 : - не-наблшалось (вариант *. 'Г".;В).: Вариант, "В" демонстрирует мгновенное ингиОирущее действие аое^'' ■: i f ['■;'тилеяа* В начале опыта (ацетилен ore,;, лвуег)'наблюдалось быстрое:'" - . восстановление зекаск азота, ? которое. прекратилось сразу" после вве-!; /

...;. .y-, .ч.'.-..;.у-\ " - 11 ■-.■ : УУ/. У ■

дения ацетилена (I чао иосле начала инкубапии о .»го ) ♦

Л'"";-: -V -'УУ':^." 'У 'У Таблика ■ '

1 ■ Скорость потребления закиси азота при наличие '

• апетилеяа и в его отсутствии ':.•■■■"■■ V" *

í\ Л' У.У УУ-.'- ' УУУ у (НМН20. Г-« . ., У у У." -У . ' '

■ ■■ '..■ время инкубации с : 8,0 (часов) ■ • ■ ■ - '

Почва вариант ——---*-:-„ ■

-'■•■■■ : 0.0 0.5 1.0 ; : 1,5 2,0 2.5 .

А 324,12 114,32 97,52 85,11 72,52 64,51 ' Í . ' Б 116,12 109.55 108,00 112,45 114,37 110,54 у:.,.- У'^ В 167,45- 120,21 105,78 : 88.24 88.92 89,42 . -■

. 188,73 180,91 171,34 104,31 151,69 148,23 ' . 2 Б 143,84 '145,75 . 145,52-; 352,26 149,42 151,'08 У ' ■',':■• .182,56 149,74 106,36 88.09 86.89 89,08 .'"/

- I- черноэем обикноьенний, 2- тешо-серая лесная почва; ; А- без апетилена,.Б- ацетилен присутствовал.о начала опыта,

■ В- ацетилен введен после I часа инкубами

. На основании' этих опытов был предложен следу щий способ ои-релеления нолевой.актив'носта денитрификапии» 'В реакционную камеру ; постоянного объема, врезанную в почву (ряо.1), вводитоя »-о из "расчета 5!» от объема камеры. Определение изменения ее кошентра-пии осуществляется через 101 40 минут. После' этого вводится асе- ' : тялен ( около Н£ от объеме) V определяется концентрация закиси • азота, соответственно, через,50 и 80 минут после начала опыта.Ait- * тиьность денитркёпкапли рассчитывается гга'форууле:

■у У; :

1 :.■ ■ ь Аднтр :: . •. :У.У->У-'■*■■. '-. 8 у у - ■.. -. \ , , ; У/У - *;-■ ■■

.где: Oj...c4 -концентрация закиси азота во время tj. ... t¿

" V . - объем реакционной камеры • '•'.-.. , .- ■■:■■-.,-У

"У" ■ * .\"..î ; - объем етобрчниой-пробы . ' • . У-У ^ ' .

..ч. •. s '. У - плогаядь почвы .'.■ УУУ-У-УУлУ; „У .У-.У.. -уу; ■, ■:■';;■ .У. ; С. пелъю; оценка "работоспособности".этого метода ив*а'была on-".

■.'.*. редедена полевая активность денитрифакадия в почвах некоторых ти-

• ■ . пов ( табл.2). • . . • ' ■■'■.; ■'у'У

• у ';- .у'.;' "¿..у:.■■ .уаблипд 3 ■■-■'у,

• Полевая (актуальная) активность денитрифкаоин а * .. ; •'• л-почвах некоторых типов у-.;■■ у.

.'■. Почва ;■.у-.'.■.-■ ■■■■■■ . активность.1 г Яа .га"*1ч:~1; .-г-

светло-серая лесная . 1,782*0,348 ... V'.-.

серая лесная темноокраяенная • 0,850*0,104 ' ' ■

. -"У . серая лесная . . • • 0,816*0,111- -1 -

лугозо-черноземная 0,503*0,074 у у г'.' .у;

темно-серая лесная 0,470*0,093 УУ'/у" ;... .у. у

чернозем обыкновенный - -. >;.; 0,439*0,002 • ' V,'- — .ГУ

-Г " ' ' * - ..,'

' Полученные данные следует считать'предварительными! ониимевт оценочный характер (реперная опенка) . Полевые наОдедения долкка проводиться о обязательным учетом пространотвеннойнеоднородностиу г; ("пестроты") почв в временной дянаинот процесса. Лишь при выполнении атих требований можно получить объективную картину. Нами были проведены отдельные . наблюдения, ■ что не позволяет о уверенность!) „V < рассчитать газообразные-потери азота в естественных уоловиях.- •

2. Активность денптрификапии в почвах основных топов '

: '■■■-г Европейской..части СССР , ' V,- '

V* : Активность денитри^икалин определяли различными методами: ' , ' по уменьшение нокиентрапии нитратов, по «миссии 9^0 -'я по око- ' росте восстановления ■ н^о ; Результаты измерений цриведены а таб. лице 3« Согласно полученным данним, независимо от метода ¿соледо-' вания,/обнеружеяа общая закономерность. 'V' :Уу V:!.;

' ! ' Наблюдается снижение активности деиитрификапЕИ от дерново» •'<';

.. 'подзагястых почв к серым лесным почвам, затем, по мере передвияе- г ; , Ния на юг,, скорость восстановления '' в^о оцять увеличивается до. .'

: 138,89 нМ г в2о. г^.п-! в черноземе обыкновенном. Для каштановых

у.*;-г у. ^ /*•••'<• • „У -. I'. ' ^С-'"^''■:■•'■'..'.■<' •'■

■ /у-;'-^'Л >у ■:"■■*'табдша з

; : Потенояальная актявность д«нитрификации в основныхтипах ;■■. V;. почв Е^ропейокоА.части СССР, измеренная разными мотодами -

Почва

. восстанлго^ . эмиссия ягО восстав. К20 НМ Г^Ч**1 ■: • Н1Л г^ч"1 нМ г"*,"1

дерново-подзоли стая ■

светло-серая лесная.

серая ле сная -„у ■;: ■ ■^

: сер.лес.темноокраш.-

. генно-серая лесная

чернозем обыкновенный ч.:.-^-.;^. V., ■

.: 185.31*5,21 88,9*4.52 138,03*8,21 у 199,26*4,55 . 83,97*3,14- 118,31*6,51 т 187,03*10,19 75.90*10,79 1X3,99*11,77 183,37*3,07 78,27*20,00 112,62*5,67 ; 296, 76*0,93 94,19*11,77 125,47*14,13

203,05*5,22 84,77*7,13 138,89*5,44 '■ дугово-черноэемная . , 235,57*16,19 74,52*14,15 104,94*13,93

; 182,12*3,22 5о,51*2,36 81,86*8,16

^224,79*6,94 74,76*0,59 у! 83,59*20,02

^ 187,23*7,56 63,57*7,06 • 102,43*6,12Н

165,46*5,17 76,59*16,03 134,9*9,55

119,49*8,27 "95,74*20,07 ЮО,61*2,35

• 200,52*2,12 83,19*6,84 102,43*7,00

-'каштановая¿~:у}',

каштаново-луговая„,■'.;'

■■:'кадтансвая-средна-'■ > -: суглинистая .

коричневая У:уЧ''ч-у

. горно-луговая 'у!.

лугово-аллеви аяьная

" дерновая среднемопь-

■- ная..- -у -у

солонеа каштановый

солонеп лугово-чер-нозешый ■.'.:■

солодь луговая_ у.:

солончак вторичные

221,53*6,02 91,83*2,36 66,34*10,29 194,58*3,83 106,17±5, II 61,22*11,85

215,32*17,99 101,51*4,18 64,35*8,78 . 207,67*4,80 62,63*8,85 138,76*23.03 : ' 147,03*4,29 " 83,59*10.68 40,03*5,29

пота характерна более низкая активности порядка 80 нМ В'К0ртчвев6А''п0«в ова 'раавй'1Э4(9 нЫ..В засоленных почвах скорость ..у 'потребления эахлел азота резко снижается.".,!;: ч■'■ ■'. ...

' ' Л . ■"' .'-'."И,- "V"'' •"■'■ г- ''

, Эта же таблица иллюстрирует преимущество предложенного вами .метода. Нак можно видеть, результаты определения активности де-' натрификапай по скорости восстановления нитратов являются завышен-'' вымя, так как аэот нитратов включается в конструктивный метаболизм ; ... клеток, "восстанавливается до окиси азота,аммония и т.д. рпределе-ние денитряфикашш; по скорости вшссии закисл азота в присутствия ; ацетилена-может быть неточным вследствие вклада в поток запаса азо- -та из;почвы таких процессов как автотрофная и гетеротрофная нитри-* факнсйя.'двссимиляпионное восстановление,нитратов в аммоний и дру-

гик (Веденина; Лебединский,;;1Э84). С другой стороны, результаты -

■ могут быть занииенныАй.из-за. длительной иикубапив обраэпов в атмос-" "фере апетилена.(как известно, апетилен является ингибитором многих

■ метаболических.цронеосов)• Поэтому"определение де натри ^капии по : скорости потребления закиси азота, с нашей точки зренйя отражает

истинную аятявность денитрифякаши»так как в анаэробных условяяс " . закись" азота восстанавливается только в результате денитрификепия» _ ■ ,

Практически, во всех почвах, за исключением засоленных,' скорость восстановления превышает скорость эмиссии эегаси азота. Эти .'• дан1швпоэБоляст'Сделатьвывод,.чтсимеаноточвыявля1Л'сяосповныц:' биологическим стоком н20 в природе. Смеете о тем в засоленных почвах • наоборот наблюдается'белее высокая скорость эмиссии н20 . по сравнение" с ее потреблением. Возникает вопрос - является ли аго постоянней характеристикой этих почв пли следствием различия эколо-* гичеоких.фжкторой?. Если верно первое .предположение, то* в почве има-, ' -

■ стся группы шкрооргйнезмов, осуществляющие, подобно автотрофной вит-. ■ *' ряфимшаЛ разные стадяи этого процесса. Тогда преобладание эмиссии

■ ялп восстановления Я20 - в разных почвах зависят от .численности гл:: агаавчостг. этих групп.' - 1 <' "

. ■ ПрйЮ^цлальио важным является текке вопроо о ттрауроченности • .,''

■ деяитрафиоиру щей активности к определенный генетическим гориаон-'" ' гаи почв.' Как известно^ эти горизонты'могут существенно 'отличаться - по многим -показателям — химическим, физическим, биологическим, что ; является главным диагностическим признаком почв.-:Однако до насто- ■ Р г 'ящего времена нет' сведений об их различиях: по уровню денитрпфика-гаи. Распространено мнение/?что в нижних горизонтах почв активу . ность^денитрифякапиа.наиболее высока, так как в них аккумулируется нитраты в создаются анаэробные условия. Согласно'подученным наш .;" данным 'для лугово-черноземной почвы, /'активность денитрифякапии -быстро убывает с глубиной^ приурочена'к верхним, насыщенным кор-■ нями растений горизонтам (рис.4)" V - /, ■■ '. ■. -';■■ " /

: Горюет, гхубяш (си) . ■

■.-1.-1

[ 1 •

V,- '

♦; '."• ' V '' •'• г" п ' </' .'. ■• г

ЛЛ5-601 # ■ '.--' • V 1.'" • '/ :.

Л % ., </. .-'С .

Л* V-. ---Н .'>. -;. '/

.V* *: X • ; двбоеш V (Ь ' V "

Г ' , г1\ II" 71 -

в еь«1 - ^ •

^ 1 ,

■. ■ Рас.4 Активность денитрифякапии в разных горизонтах/

. : лугово^чераозешой" почвы V,'Ч"-

' ... ^ . . . Ч"..л; ч .... по^скорости восстановления, м^о

. .-' - -У -.у.-' —- по скорости едассив н0о. -I

*-* - . - _: Следовательно,. наши данные хорошо.согласуются;« известным ■ \«''. положвнлемГ'что скорость, де нитрификации ^определяет сяне только. ~ " :. концедтрашаей нитратов, которые всегда имеются в' любой почве, а

прежде всего наличием легкодоступного энергетического материала в виде корневых выделений я поэтому приурочена к корнеобитаемому ' горйзонту. Бероятно. гмент втим 'обьяснягася высокие потери азо-' : та из прикорневой зоны сельскакоэяйстБенныхрастениЙ при внесении манералызлс азотных удобрений (Шаваев и др.1909). • .

3. Влияние различных экологических факторов на денитрн$а- • парущую активность в различных типах почв

: ЭЛ. Влияние температуры на денитрифяпируидув . .

активность почв ■ ■■"■.X".-

Влияние температуры изучали на образцах -дерново-псдзолистой, ......

оерой лесной почвы, чернозема обыкновенного,каштановой,коричне-вой почвы,, солонца лугово-чернозешого исолончата вторичного* ' Результаты.исследований приведены на рис.5. Согласно;полученным данным, скорость" эмиссии увеличивается с роотом температуры, доо- ? тягает максимума в диапазоне 32-40°, причем этот максимум активности различен у разных поче^- Далее;* при возрастании температура до 55-60°, набдвдается второй максимум аотивностц, для которого характерны низкие начальные скорости эмиссии и высокие конечные скорос-, тя, прячем почти для всех почв после некоторой задеркки. Нет сомнения» что второй.максимум является результатом протекания хемоденит-:■ рявкании, о чем уке сообщалось (КУрэкова, Умяров, 1Э83). Наличие, .температурного опгпдуш активности.денитрпфпкапяи, неодинакового ' для поча резных типов,- выявлено впервые. Он свидетельствует,или о • своеобразной температурной.адаптации иикрооргандэмов-денитри^вкато-1 ров, дли о.различии их;популяций в квядом типе почвы. : -X

.'■■.■ 3.2. Влляппе вл£?.ности на активность .У" ' :■ Д 'Д/'-:;

- ;. ^ ■'. деиЯТрП'ЗжКЙПМП » почве ' . .' - Д

'■1Мхя исследования бнлв- отобрана перечясленные выае"образцы готе.-Влажность почвы"изменяли:в/пределах от 35.до 100$ от веса-

1>ио. 5. ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ НА:АКТИВНОСТЬ ДЕНИТРИФИКАЦИИ : Г ' • • • : V В РАЗЛИЧНЫХ' ТИПАХ ПОЧВ "

1-АЕРНОеО-ПОДзЬлИСТАЯ ПОЧВА 2-СЕМЯ АССНДЯ ПОЧВА ч". 3-ЧСРНОЗЁМ ОБЫКН^- Г; 4-«АШТАНОВАЯ ПОЧВА .5-*0РИЧНЕвДИ ПОЧВА ' ~ 1 / : ^ :' 8ЕННЬ1а . 6-^НЧАк' вТ01^ЫА у; 7-СОАОКБЦ Ч£«Ю31МН0-АУГ080Й ■ < ; .Си

^ ■ Л1 .¿Л ^ ^ ^ Г - :" V--, , *■,-*. -

'абсолютно сухой почвы. Образш инкубировали при;температуре 34С, поскольку в цредвдущем опыте установили, что вта температура соответствует максимальной активности у исследованных нами почв <3240® ]L Определение проводили.в аэробных условиях. Результаты вэ-" мерений приведены на pao.6. :■./..' '■*.■■'■■"■

V-V Uoxho отметить» что в образцах всех изученных типов почв о 0 увеличением влажности растет активность денитрифакаоии. В дерново-' подэолиегой,сероя-лесной,каштановойпочвах и,черноземе обыкновен-'; ■ ном 8Мясоия Я2о наблюдалась только' при влэжностях,' превышающих ! 50fS от веса абсолютно сухой почвы, в остальных (коричневой поч-ве,:солончаке*вторичном и оолошечерноземно-луговом) выделение • протекало ухе'при влахности 35$ от-веса абсолютно сухой почвы. По .нашему мнению/'вти различия обусловлены различиями во вла-■. гоемкосги почв», что в свою очередь;определяется их механичеоким 'составом. В почвах с относительно низкой влагоёмкостью (коричневая, солончак, солоней) при увлажнении до от веса абсолютно сухой' почва почва практически заточена,, тогда как в почвах о более высокой влагоемкостью (дерново-подзолистая, серая-лесная, чернозем обще ^новенннй, каштановая)^ соотояние затопления наблциалось только при увлажнении выше 50Й от -веса абсолютно сухой почвы, f; .■■■■ .

3.3. -Влияние:парциального давления кислорода на'-• активность декитрифекаиии в почвах различных типов

Для выяснения влияния парциального давления кислорода опрвде-. ленив, ¡активности денитряфикапии■ проводили при темлературе 34°, ; близкой к оптимальной для всех почв,и влакности 50Й от веса абоо-* лютно сухой почвы. Результаты измерений представлены по рас.7. '* Активность деттряфи калии резко.; снижалась по мере увеличения: кон-оентрациа кислорода в среде. Цра концентрации кислорода равной . активность денатри^икашш била на пределе обнаружения прибора, я ;.

в дерново-подэодп стой почве отсутствовала, уу • V..- у •.•.•••; 'у.'' л.:,"-.;.':'Таким образом,;активность денигрвфэкашш в почвах разных тя—'; ' пов мокет меняться в широких 'пределах и эависит от условий - тем-;■У

■ пературы» влажности'и ссцрякевкой /о ией аэрации.;Независимой! ти- у 1 ■ ' папочв.наиболывая актявность ' денигрификапля наблвдалась при - ми- у

У У у гамалъном содержании кислорода в;почве, что;соответствует,рекиму ■ ••. .у у

• '*' полного затопления. Резкое снигенде.активности'денитри*®калии'при; . ■ * ; увели че нии. парой альн от о давления' - ки слорода ставит, под .сомнение ~ т е- „ , У ■

■ Узаоо существовании, т .н. аэробной дегатрификадии ( Febig- ,' Ottow, .

.' у 1982). С другой стороны", при обеспечении анёэробных'усшовий, 'ках- '. к,., -}" Двя почва имеет свой' температурный оптимум. денитри$«каШ1и,что,- :ду у ; ' у... вероятно,- .свидетельствует ' о различиях в количественном и качествен- ' ' > у у • ном составе попу ляпай денигри^каторовькаадой аз исследованных ? ' *. ;.. о^^ОЧВ.у.-ЧУуу^ ' ., .'■

■"■■V,-4. Биомасса денатрифшируицах микроорганизмов в почвах'-' • •

■ "У-: г?:'::-у .г различных типов ууууу у "■ У.:--'/; .'■'■■:' "

.: -;• . .'..Различая в активности денатрг.фикашш в почвах разных типов '-••'-' *■ : - правели нао к необходимости выяснения ^ численности и биомассы де- ' у.У-

■ л. . питрифширупцах шкрооргшшзмов. - • У. .у ;у.'У/ У". ■;■>- . V.j ;''. -.'. отмечалось, до настоящего времена не существует надежно-у ■ - -у >;у':< го метода определения численности в бвомасси.микроорганизмов в поч- -.

■У -уу;:-У вэНами - был, разработан кинетический; метод определения биомассы де- у ' * " -у', натрифякаторов, основанный наизвестнсВэависимоств скорости 'мета-

• • ' болического превращения любого суботрата от его кошгентрацки в сро- '

• у:у де'(Паников;'.Папеева, I9Q5K 'у^ ^ у' .. : "1 :

-, В ходе экспериментов была азучеяа' сгехсометрия и динашка восста-

• • новлепия закиси азота в почвах различных типов, на основания чего -Г. . , ,были получены'кине'тическзе характеристики,У необходямне дад.опреде-'- _ . .':>■:,Г^лчная биомарсы* Подробно методика описана в диссертапки. % угу . '

■.... Как следу етиз полученных наш данных (таблипа 4), биомасса дештрпфацирущвх микроорганизмов, восстанавливащих нитраты до ■¿о » в разных типах почв различна.: Цри этом минимальной бяомаоса -У/ 'денигрифлкаторов. оказалась в чернозема обыкновенном (10,3 мкг С

у '-.1 УуУу'--. 7у, - ';..'. / ХШййаЛ. ' ; .

у У- Биомасса гетеротрофных- микроорганизмов в почвах ■ ; ■■.'у-■ ; ; раздичнистипов (мкг С У У - 'УУУ'У; ■■-'".^УУ:' - ."■У' ■

■ »аггад ' сИстар' дегатри$якаторов : денитри$якаторов У

• • ,аи • «ищая восстанавливавших восстанавливаодих V

У '/V' ■ ,У:.уУ':- ВОГ ДО Я20 ■ - •ДО. : «г

дери ово-подэ ола ст ая у 144,37 : . • 26,95 УУуу': - 23,55 •

серая лесная ■ у'у'У 169,59 Г . 34,20 ; у. ' .31,34 7

чернозем обыкновенный ■ : .; ...;.. 191,13 10,25- У::■■ -8,17

какгшговая' Уу ■ - ■ -у у у 66,24 У'- > 51,02 У У" Уу • 44,32 •

коричневая ' ■ " ;'Л- 80,25 - ■■ 41,76 : У : 4б,и у

солончак вторичный '41,79 . . ЕВ» 01 Ю,оз '

солонец чернозсиноду говой . 56,93 " 33,70 • У, • ч • 18,14

■ Каибояыаего; значения она достигала в каштановой и коричневой почвах (51,0 и 47,8 мкг С г'1, соответственно)Биомасса декат^фака- : торов, госстанавлавапцах яго" до , в целом совпадала с био-лзссой дештрнфаашрущпх.'кикрооргашэмов,1 .восстанавливашда-вО^» за исклсчекием почв засаленного ряда - солончака в солонпа. В : . этих пзчвах бломасса деиатрафекаторов, восстанавливащих В20 ¿ у*;'":* овсгасл-ад всего половсну (54-5о#/ от общей биомассы дегштря^иди- . \ " русе^х мякроорганпэмов (вссстанавливатозх ко^ )• Зто позволяет . сделать в ывед об особенностях функционирования комплекса деиитра- •

кагоров в засолекгкх почвах,' что внрскается в преимущественном яротеканг'а денитрафгкацкя ;'в втвх почвах до'. ?20 « Для раскрытия: ' причин^ этого явлакия требуется специальное исследование. Однако у . -ухе сейчас можно утверждать о большой роля гадофтшх архебактервй,

В частности из рода H»lob6ot«rluü ( Hochsteln et al., 1985 ), обладавших именно такими свойствами Из сказанного такЕб следует,, что способ определения активности денитри$ккапии по скорости восстановления нго , отражает активность всей био/лассы денитрвфдка-торов в' почве и может быть использован на почвах лйбых типов, кро-меэасолетшх* ■;■■. - ■ ■ *'''■■: ■^./"г"

: Особый интерес представляло определение доли деватрифпкаго-Ч ров в общей биомассе гетеротрофных микроорганизмов в'разных типах почв. Как показали паши исследования/доля денитрафипирущвх микроорганизмов, восстанавливагщах нитриаты, составляет 5-20^ в черноземе, дерново-подзолистой и серой десной почвах; до 43-77& в солончаке с солонце, а такхз в каштановой и коричневой почвах! Bio-' масса денигрифйкаторов, восстаназливапцих S20 (таблица 4), колеблется в зависимости от типа почвы в пределах от4-Щ5 до 24-67£, Црв .этом общий правилом является возрастание-доли денятрифпкагоров вгидроморфных почвах (солонце и солончаке), а также в слитнх почвах временного переувлажнения (каштановой и коричневой). Относительно невысокая биомасса денитрифякаторов в дерново-подзолистой в серой лесной почвах^ вероятно, определяется^значительным " вкладом грибов в общуо биомассу гетеротрофных микроорганизмов* ^ - . IIa основании полученных данных можно о достаточной уверенно-,сгы> связывать различия в. активности денитрифякапди в почвах разных типов.с различиями в количестве осуществлявших атот прозеоо бактерий.; . . -. ' Ч.: ' ■ V.' - ■ ■ "'.

i V; I. Цредложен новый метод: определения полевой я потенпвяль- , ной активности денятрифакадпя в почве. В орав нательное аспекте ^определена потенциальная активность денутрификапии в 18 типах почв Европейской части ОССР. Обнаружено существенное различие в протв-д

кании денигрификасви,в почвах разных типов,.как но уровне актив- . г кости денитрификати, ^ так ив отношении газообравных продуктов де--ннтрификапии,;что свидетельствует о спехшфике денитрифиварущего -сообщества в;каядОЙ почве. ' ':-V.'-'■".' 'О,

2. Разработан кинетический метод определения биомассы денит- /■* рифишрувцих микроорганизмов, позволягщих провести ддфференциро-ванное определение"биомассы денитрификаторов, осуществляющих раэ-"^ ные этапы провесов денитрифккадиз. ■ -■' .■""■:'■"■

3« Определена биомасса денитрифицирующих микроорганизмов в разных потаах. В эавпашости от типа почвы она составляет 10-51. % мкр почш, т.е. колеблется от 5-20 до 43-775 от общей био-'

массы гетеротрофных микроорганизмов в почвах.'Остановлено, что практически вое денитрифккаторы способны восстанавливать закись. $зота;' за исключением денитрифякаторов' засаленных пбчв.; ^ ...=

'■:"■■ 4. Обнарукена специфика протекания дени графакаши в'засоленных почках. Показано, что процесс денагрифккшши'в' втих почвах .Л.л едет преимущественно до зокг.св азота. Биомасса микроорганизмов, осуществлякхадх восстановление я^о до я^» составляет 10-18 икр ■ -С.Г"1,почвы" или 54-56^'от общей биосаммы'денитряфипирусщих мякро-орглиизмов в данной почве. Л / ".'■;'■';."■ - ■ л':.

5. Установлено,что аеэаэасямо от тнпа почвы наабодьаая'активность депятрзфякаспа наблвдаегся поз мяначальном содержания-лисло^: рода в почве, 'что соответствует режиму полного зато пленяя, аресте' с те«, впервые установлено, что;при обеспечении енозробнкс усло^.; . ■впС, х-г-вдая почва ямеет своя. температурной' оптяк/м' депитрифякапия.

0. Па призере 'лугово-черноз емкой почвы покезано сигвение ак~ ; тгвногтв денигрпфакаяяи о глубякой и пряуроч^ностью этого процесса к вйркнгм,:коркеобигаедам горизонтам почвы. - ' • '•

; По материалам диссертапии опубликована слё^ущрв работа: ■ '1. Д|1намика1Ютребления зага1Си азога в различныхтипах почв СССР '• // Тезисы докладов III Воеооозиого симпозиума "Биодинамика почв".-Таллин,-1988.-С.39 (соавт. М.М.Умаров, А.Л.Степанов, Е.В. Егорова). v У ;.-. '■:■'■■. - v'

Выделение и потребление почвами различных хлоов // Тезисы 9-го Международного симпозиума по биогеохиша окружащей среды.-иосква.-1989.-С.18 (соавт. и.и.Умаров, А.Л.Степанов).

3. Определение денитряфяцирупдеа активности почв методом редукции , закиси азота // В кн.: Тезисы 1-Й Цеждупарадной научной конференции чехословацких аспирантов и студентов в СССР о участием молодых ученых солиалистяческах стран.-Москва1-1988.-С.1гО. Btologictí- flxáel«atino efínwbo dusílta a plyané etrety duaíka в ройу do átooeíéry // Roe-tl. rrroba.-1988.-34 9.-р. 927-934.

• КРОМКА МИРОСЛАВ ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ДШИГРИФИКАШСТ ~

yvv:';^:;:^ почвах :

(А вторе ф е р ai.) Ч-

~ Подписано к печати 01.11.89 Формат 60x90 1.7 п:л. . :

" Уч.изд.л.1.5 Тираж IQ¿ Заказ 1059 Беоплатно

Ротапринт ИАСИ(М73-31Ш).1092а),Москва,Автозаводокая.16 |