Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Биотехнические методы корректирования репродуктивной функции коров и телок
ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных
Автореферат диссертации по теме "Биотехнические методы корректирования репродуктивной функции коров и телок"
'' 11а правах рукописи
: •■ п )
-;. V ."о
ТШШШ ЕЕгешй Александрович
ШЯЕХШПЕСШ МЕТОД! ХОРЕИПКРаБАШЯ- . РЕШРСИШИЗГОа вУНВДИ КСР® И ТЕЛОК
06.02.01, Разведение, селекция, генетика п восяроззвэдсно сельскохозяйственных
32е0тнкх
АВТОРЕФЕРАТ
дкссергецт! ы созсканле учоюЗ сменена доктора, биологических наук
Научный консультант - заслуавиды* деятель пауки РосспГ-ско.1 Осдерасга, доктор биологических тук, профессор Н.И.СЕШЕВ
Дубровицц - 1998
Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте животноводства. ; •
Научный консультант - заслуженный деятель науки Российской Федераций, доктор биологических наук, профессор Н.И.СЕРГЕЕВ.
Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Е.Д.ШКЕЕВ, '. * доктор биологических наук, профессор А .Н,УСПЕНСКИЙ,
доктор биологических наук, ппофессор Н, Ы. РЕШЕТНИКОВА.
Ведущее учреждение - Вологодская ГМХА
Защита диссертации состоится " 1998 г,
в 10 часов, на заседании диссертационногосове/а Д 020,16.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте животноводства.
Адрес института: 142012 п. Дубровици, Подольского р-на, Московской обл.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЖа.
■ Автореферат разослан " 1998 г.^
Ученый секретарь диссертационного совета, к,с.-х. наук у^^^^У Ю.И.Шмаков
I. Общая характеристика работы
Актуальность темы. Научно-технический прогресс существенно влияет на характер и направление развития агропромышленного комплекса, где непрерывно возрастает роль и значение внедрения научных достижений при разработке и реализация различных технологий и отдельных элементов производства сельскохозяйственной про- . дукции,'Характерным для его развития является то, что темпы уво-^Т* -лкчения производства молока я кяса значительно опережают роль численности скота. В ведущих странах Европы, США. и Канады о восьмидесятых годов наметилось устойчивое сокращение общего поголовья н доли молочных коров, но одновременно увеличился шлейф. При атом возросла продуктивность, а общее производство продукции осталось практически стабильным. В России с 1991 г. происходит также jrc- ; тойчявое сокращение поголовья, которое, однако, сопровождается повшеншл доли коров в стаде при одновременном уменьшении илей-|а, что снижает возможности увеличения производства молока. В -отих условиях, придают большую актуальность мероприятия, наирав- • йеняка на интенсификацию ведения скотоводства, благодаря улучшении огранизадии воспроизводства на основа современных технологий (Д.Л,Левантян, 1335,1997). Особое значение приобретают биотехнические методы воспроизводства яа базе применения биорегуляторов. Сывороточные, плацентарные я гипофязарныэ гонадотропины, синтетические релизивг-Факторн и простагландинн, представляют, собой реальную основу кнтенснфикацая воспроизводства.
Новые метода управления биологическими процессами позволяет проводить мероприятия по сближению эволюция репродуктивных iponeccóB с технологическими и экономическими требованиями. Pea- . газацию практического влияния контролируемого воспроизводства ¿панируют.в значительной степени экономию затрат труда.(М.И.Про- , софьев, 1395). '
Новым оредстаом интенсификации воспроизводства служит метод; срансслантации эмбрионов крупного рогатого скота. В решении дан-' юй задачи существенным резервом являетбя генофонд коров, обла-г:-идцих уникальными хозяйственно-полезными признаками. С этой '. • *елья в последние десятилетия совершенствуют я. в ряде .регионовг:.
практически используют метод воспроизведения крупного рогатого скота, связанный с технологией трансплантации зародышей. Известные достижения в этой области ужа сейчас превзошли ожидаемые эффекты как в теоретическом, так и практической смысл'. (Е.АЛяпу-гин, 1994). Однако, несмотря на очевидные достижения науки в области физиологии и патологии воспроизводства, лежащие в основе современннх биотехнических приемов размножения, потенциальные во модности биотехнологий в практике воспроизводства стада крупного рогатого скота используют далеко не полностью. Успех применения биотехнического метода трансплантации эмбрионов на 50:2 зависит от организационных мероприятий, оценку которым может дать учет по стаду индекса осеменений. Становится очевидны.«, что организационные мероприятия по внедрению и использовании современных би@ технических приемов воспроизводства нельзя ограничивать узки®! • рамками подготовки животных для проведения искусственного осема-
• нения и получения эмбрионов. Необходим комплекс биотехнических мероприятий по корректировке репродуктивной функции при искусства к ном осеменении, получении и трансплантации эмбрионов,
Биотехнические приемы в производственных услогиях, несмотря на интенсивнее исследования с целью совершенствования к упрощена технологии, остается ецо очень дорогостоящими,
. Настоящая работа преследовала цель - усовершенствовать биотехнические метода корректирования рзпродуктивпой Функции самок крупного рогатого скота на основе применения-биорегуляторов. , ■ • Для достижения целя были поставлены следующие задачи: ..
- на основании дэшисс литература и собственных исследований проанализировать и повысить эффективность применения биорегулято ров о целью индуцирования полоипх циклов самок крупного рогатого
-скота; : ■ ■ V'" - ; '
- изучить факторы, вляягадие на показатели суперовуляцм и -ускоренное завершение восстановительного периода после .извлечения эмбрионов; .ч . '■ ^
• ; -исследовать эндокринные 'аспекты, лежащие в осно'ье • биотехнических методов воспроизводства крупного рогатого скота;:
- усовершенствовать метода профилактики н восстановления репродуктивной функции при ее нарушениях;
- проанализировать целесообразность я эффективность методов подготовки телок в качестве реципиентов;
- оценка эффективности традиционных методов селекции в сравнении о практическими результатами применения метода трансплантации.
Цаучная новизна. Усовершенствованы и научно обоснованы методы управления репродуктивной функцией коров и толок на основа применения современных гормональных препаратов, Определены факторы, влияюцяо да показатели оплодотворяемости, Разработаны методы овариостимуляцал с целью ускоренного завершения послеродового периода. Изучены эндокринные факторы, лежащие в основе биотехнических методов управления половим циклом коров. Разработаны метода физиотерапевтических лечебно-профилактических шоздейетвий при патологии органов репродуктивной системы,.'обосновано их значение как неотъемлемой часта биотехнических приемов воспроизводства крупного рогатого окота.
Практическая значимость. Совершенствование методов управления репродуктивной функцией позволяв? шреко планировать я 9$фбк«шно проводить .«оиусогвейяое осеменение п индуцирование полаовуляции у короа-доновов для получения эмбриолез, Ускоренное восстановле-наз репродуктивной функции .тактирующих коров-доноров после извлечения позволяет получать змо'ряонн за период времени ке превышающий .экономически обоснованный оервис-пераод. Овариостямуляция в ранний послеродовый период мозэт быть прадложена как биотехнический метод» позволяющий реально снизить сервис-период при традиционной технологии воспроизводства. Патогенетически'обоснованное восстановление репродуктивной функции коров с оваряопагологяей ■ позволяет их успешно искусственно осеменять, а также гквяо использовать а качестае доноров эмбрионов.
Разработанные физиотерапевтические методы лечения и профилактики бесплодия, вводимые как элемент биотехнических методов воспроизводства, позволяет за счет снижения уровня выбраковки ценных коров существенно расширить селекционно-генетический по-
генциан в скотоводстве. Проведенные широкомасштабные работы во трансплантации экспортированных из Канада эмбрионов дали возможность в соответствующих зонах разведения скота осуществить комплектование станций искусственного осеменения высокоценными производителями.
Реализация результатов исследований. Основные щшзгения я практические предложения вошли в комплексные системы по размножению высокопродуктивных животных методом трансплантации эмбрионов в Тульской, Вологодской, Ндаогородской я Московских областях. Материалы научных исследований вошли в основу составления Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства Российской Федерации методических рекомендаций во борьбе с бесплодней крупного рогатого скота на основе современных биотехнологий в хозяйствах страны.
Апробация работы. Материалы диссертация дологенц е одобрены на заседаниях ученых советов Вологодской ВША, Северо-Западном КИЙМиШХ, ЩК, ва двенадцати Всероссийских, зональных и республиканских конференциях (Москва, Москва-Дубровицн, Оренбург, Нижний Новгород, Вологда, Элиота, Дуаанбэ, Владикавказ, Воронеж, Вологда (1982-1996 гг.).
Публикации. Основные научные результатыт вклвченные в днсовр тацию, опубликованы в 48 печатных работах , 3 пструкцияад I методическом пособие.
Материалы и метода исследований. Научные исследования проведены в 1983-1997 гг. (по прилагаемой схеме) в племенных хозяйствах Московской, Тульской, Нижегородской, Вологодской областей на коровах и телках черно-пестрой породы.
Корцление животных соответствовало нормам, разработанным БИК. Индуцирование половых.циклов, вызывание суперовуляция, проведение 'операций по извлечению и пересадке, определение в$фвк-г тивносги разных препаратов, осеменение коров и.телок осуществляли по методикам и инструкциям ВИХэ.'
Коццентрацша гормонов в крови крров определяли радаодкмуно-ло?ичес$шч методом. Стиыуляцир активнорти яичников в ранний до-
слеродовый период проводили на 450 коровах. Использование В качестве доноров эмбрионов выбракованных высокопродуктивных коров-на 80 животных.
Реципиентами» в основном, были телки живой массой 350-380 кг, а также коровы, преимущественно первого отела. Трансплантировав эмбрионы на 7-8-й день астрального цикла с обязательным наличием у реципиентов с хорошо выраженным желтым телом в одном из яичников
Разработки по УВЧ терапии и профилактике гинекологических • заболеваний проведены на ЮОживогяых. '
Статистическую обработку проводили по Е.К.Меркурьевой (1970, 1983).
В качестве источника информации использовались племенные карточки коров с законченной первой лактацией. При графическом изображении зависимости селекционных признаков вспользовапся метод взвешенной скользящей средней. Расчеты в процессе исследований проводились по формуле:
• У = М + а* в + (ав) + в,
где: У - величина селекционируемого признака для конкретной гра-.дации фактора;
М - среднее в подконтрольном массиве; ; , а, в, ав - влияющие факторы и их взаимодействие; ■е.— влияние неучтенных факторов.
Оценку линий и . быков в стадах указанных хозяйств проводили с помощь® программного комплокса НШ1 (методика профессора Прозорова A.A.), адаптированного на персональный компьютер IBM PC . XT/AT. Исследования проведены на поголовье 2300 животных.
2. Результаты собственных исследований
■ 2.1. Метода корректировки половых циклов .. самок кр; .лого рогатого скота '.
. ■ . : Испытание отечественных препаратов простатландина - клат-рапроотяна, эстуфалана и суперфана сравнительно с эстрофаном (контроль) позволяет копстатировать их равную эффективность. .
Высокую эффективность препаратов при однократном введении следует ожидать, если инъекцию проводить в оптимальней период - о 10 по 12 день цикла при хорошо выражением желтом теле в одном из яичников.
Увеличение продолжительности интервала до 13-ти дней на протяжении полового цикла, в который проводили инъекции о целью синхронизации, приводило к значительному снижению числа кивотьых, приходивших в охоту при удовлетворительном проценте плодотворных осеменений. Это снижение компенсировалось за счет животных, пришедших в охоту после второй инъекции простагландина, проведенной через интервал в II дней, что приводило к результатам, равнозначным результатам, полученным на животных отобранных по хорошо выраженному желтому телу в. одном из яичников. Обстоятельство прея-полагает преимущество метода синхронизации охоты двукратным, о интервалом II дней, введением простагландина. Причем, первую инъекцию можно проводить фронтально, затем фиксировать охоту и проводить осеменение, а животных, не проявивших признаков охоты, обрабатывать вторично и осеменять по мере прихода в охоту.
Дальнейший анализ показал, что оптимальный срок проявления признаков охоты - это 48 часов после введения препарата (табл. I), За счет уменьшения и увеличения этого интервала происходит резкое снижение результатов осеменения.
Введение простагландинов в сочетании о гонадотропинами сни-аает рассеянность сроков проявления охоты, улучшая тем самым показатели оплодотворяемости, но не приводит к абсолютно синхронному проявлению охоты через '48 часов у всех обработанных животных (табл. 2). .
Снижение показателей осеменения компенсируется взеде.. еы синтетических ишадолиберияов или овогон-ТИО (ДГ), которые корректируют процесс овуляции в случав возможных его нарушениях. Эффективность осеменения, существенно возрастает (до 80-85/2) • (тайл. 3).
х Таблица 1
Результат осеменения в зависимости от времени прихода коров в охоту
_^__Время прихода в. охоту, час._
Препарат 24_4§_■_72
-осеменено стслъяых осеменено стельных осеменено стельнцх
коров п. коров п /0 коров п
Первая инъекция 60,0
Клатрапростия з . ' I 33,3 10 6 3 I 33,3
Эатуфадан 2 2 100,0 Э 4 44,4 3 I 33,3
Суперран 3 I 33,3 10 5 ' 50,0 2 I 50,0
. Эсгротал .3 I 33,3 9 а 4 55,6 2 - - . 1 00
Всего II 5 . 45,5 38 20 52,6 10 3 30,0 1
Вторая инъекция
Яжатрапростгн 2 2 100,0 8 4 . 62,5 I : - .
Эсхуфалан I V. - 8 5 75,0 I -'
Суперен г ■ - 8 5 62,5 ■ - .
Эстрсфан I - 6 6 100,0 2 I 50,0
Всегр 6 2 . 33^3 30 20 об ,6 4 I . 25,0
Эффективность применения простагландинов для синхронизации охоты у коров
Клатра- Эстуфалан Суперфан Показатель простил
______________*___П___%.
ГСЖ (500 ИЕ) . Обработано коров 40 40 40
Пришли в охоту- 36 90,0 35 87,5 32 80,0
в т.ч. через:
24 часа 6 15,0 4 10,0 5 12,5
48 " 28 70,0 29 72,5 24 60,0
72 " 2 5,0 2 4,9 3 7,5
Оплодотворяемость в 25 69,4 25 . 71,4. 23 71,9
индуцированную охоту
воллитрошщ (300 ад.)
Обработано коров 40 40 40
Пришли в охоту 36 90,0 37 92,5 37 92,5
в т„'ч, через:
24 часа 5 12,5 4 10,0 5 12,5
48 " 29 72,5 . 32 30,0 31 . 77,5
72 ' • 2 5,0 I 2,5 I 2,5
Оплодотворяемость в 26 72,2 26 70,3 . 27 72,9
индуцированную охоту
Эффективность осеменения коров и телок при введении перед осеменением гонадо-либерйнов шш ЛГ (овогон-ТИО)
Синтетический гонадолкберин Овогон-ТИО
дирагестран
сурфагок
осемене- получэ-но- но
Показатель живот- мель-
но ко- но но ко- но ров стель- ров стель-
ностей ностей
ных
коотей
п п % п п % П л %
Коровы
Дростагландин 20 Р, 80,0 20 17 85,0 20 16 80,0
Дростагландин + ГСНК 20 17 85,0 20 17 85,0 .20 16 80,0
Простаглан- • дин + фол-литропин 20 16 80,0 20 16 80,0 20 16 80,0
Дростагландин 20 X? 85,0 : 20 16 80,0 20 16 80,0
Дроотаглан-ДШ1 + ГСЖК 20 16 80,0 20 17 85,0 20 16 80,0
Простаглан- ■ дня + фол-литропин 20 17 85,0 20 17 85,0 20 16 80,0
Наиболее качественную охоту, как у коров, тая и у телок получили при обработке животных с хорошо выражениям желтым телом В одном из яичников. Такое оптимальное физиологическое состояние яичников приходится на период с 10 по 12 день полового цикла, ' когда физиологические механизмы яичника наиболее полно обеспечи-
вают лютевлитическоа функциональное состояние. Незначительные отрицательные показатели, полученные при обработке животных о хорошо выраженным желтым телом на 10-12 день цикла, обусловлены, по-видимому, тем, что в случае проведения фронтальной обработки в их число попадают животные, находящиеся в периоде, когда внутрияички-ковые механизмы еще не обеспечивают оптимальной чувствительности желтого тела к действию экзогенного простатлащцша.
Снижение результатов синхронизации охоты при наличии желтого тела и фолликула обуславливается тем, что обработку проводят на животных, физиологическое состояние которых соответствует концу второй половины лютеальной фазы полового цикла. Снижение результатов мозвдо объяснить неполноценностью желтых тел, которые не со- • здают достаточного уровня прогестерона, необходимого для проявления "феномена сенсибилизации" гипоталамических центров, который в своп очередь необходим для выделения яичниками оптимального количества эстрогенов.
Отрицательные результаты синхронизации охоты,- получаемые на животных, у которых б яичниках старое желтое тело н фолликул, ли-Йо только фолликул, саязаны с тем, что желтые тела находятся на разных стадиях регрессия, а фолликулы в состоянии различных стадий развития. Это обусловливает издивядуальнуп овуляторнута реакцию в отношении продолжительности и сроков овуляции. В целом, фронтальная обработка яростаглаидином в сочетании с гонадотропинами 10 нонет привести к четкой синхронности проявления■охоты у всех , эбрабатываемых животных, Необходимо отметить преимущество комбинированных методов синхронизации охоты.
Можно предполагать, что индуцирование охоты в период до 10-то и после 12-го"дня спонтанного полового циана яичники не споооб-ш раагировать на экзогенный простаглаядян, что приводит к раосе-: !ваяию сроков проявления охоты. В этой ситуации увеличивается ве->оятнооть нарушения процесса овуляции. Это подтверждается данными щтерзтуры,'согласно которым, в противоположность естественному, даклу, базальная концентрация ЛГ не,повышается перед индуцировании эсгрусом, а предовуляторкый пик ЛГ монет не достигать необхо-1имой для нормального процесса овуляции величины, В. нашей работе .
введоние синтетического гонадолиберина перед осеменением всегда оказывало нормализувдее влияние на предовуляторную концентрацию ЛГ и, тем самым, стабилизировало показатели оплодотворонности животных в индуцированную охоту.
Целью синхронизации охоты у коров для последующего использования из в качестве доноров и телок, для использования в качест-. ве реципиентов является получение качественного индуцированного цикла. Качество же индуцированного цикла определяется функциональной полноценностью желтого тела на начало гормонального воздействия для получения суперовуляция или на момент пересадки ембрионов, При итом необходимо учитывать, что эффективное индуцирование суперовуляции возможно лишь при ее стимуляции в оередине цикла.
Таким образом, эффективность обработок зависит не от типа применяемых препаратов, а от фазы цикла, в которую проводится обработка, функционального состояния яичников, обрабатываемых животных и исходного гормонального фона. В зависимости от перечисленных факторов следует разграничивать два показания к применению обработок с целью управления половым циклом: I - индуцирование синхронного проявления охоты у. коров и телок о целью последующего проведения искусственного осеменения; 2 - индуцирование охоты с целью получения определенного числа животных с синхронным течением индуцированного цикла для получения эмбрионов и их пересадку. ' .
:, Исследованиями подтверждена возможность целенаправленно стимулировать овариальную активность в послеродовый период (табл. 4), что имеет большое производственно-экономическое значение, так как : этот биотехнический прием предполагает значительное сокращение . оервно-периода. Однако, в практической работе следует учитывать степень функциональной активности яичников на момент обработки, возможные осложнения во вреМ5 вдов и т.д. В свете этого, стиму-• лирование овариальной активности можно рассматривать и как лечеб-но-дрофилактический прием. При выборе конкретного метода стимуляции следует исходить из того, чтобы индуцированная овуляция про-: .. изошла на 1.5-й или сразу после 15-го дня после родов. Для а-гого ' наиболее эффективна комплексная аппликация препаратов. .
Результата стимулирования овараальной активности яичников после отела
Группа
Общее число
Число животных , о наличием в яичниках на день живот- обработки
кых
желтого желтого те
тела ла и фолля- родов
бере- кула или
менноо- только фол-
ти ликула
Срок первой овуляции
живот- живот-
интервал ные с ныв с '
после овуля- овуля-
"0Ы1а цией цией .
до 15 после 15
.дней дней
после после
родов, ро.£ов,
Опыт I
Контроль 50 21 29 20,0 + 4,0 20,0 80,0
ЙГЯ 30 12 18 ' 18,4 + 62,1 37,9
$3® 30 18 12 19,4 ¿4,1 61,3 38,7
Фоллитро-пин 50 22 28 17,2 + 5,0 80,0 20,0
ГШ + проста- гландин 50 27 23 14,9 +4,4 60,0 40,0
Сур?агон 30 15 15 . Опыт 2 16,4 + 5,4 67,? 32,3
Контроль 50 27 23 20,1 ± 3,4 20,0 . 30,0
Фоллятро- ■ пин + сурфагон 30 12 ■ 18 18,1 £ 4,0 20,0 80,0
гсжк + сурфагон 50 27 23 17,4 £ 3,4 37,6 62,4
Фоллитра-пин+сурфагон +простаглан-дин 30 16 14 16,4 + 2,1 37,2 62,8
ГСЖК+проста- -глйндин+ сурфагон 40 26 . и 16,4 ± 3,1. 4С;0 60,0
Р '< 0,05
Есть еще один существ енннй аагапт, в свете которого возрастает значимость стимуляция овариальной активности. Это введение ее как элемента тезнология получения эмбрионов. По данным большинства исследователей эффективное индуцирование суперовуляции возможно в 3-4-й после отела цикл, или более чем через 60 дней после отела. При этом необходимо учитывать, что согласно инструкции к индуцировали» оуперовуляции следует приступать, устава- ' . вив правильность чередования половых циклов, для чего требуется как минимум 42 дня. Поэтому, практически, корову в качестве донора используют через 100 дней после отела. Однако, овариостиму-дация позволяет значительно сократить этот непроизводительный период,.
2.2. Вызывание' оуперовуляции "у коров
Проведенные исследования показывают,что вызывание полиову-. лящш э индуцированный цикл предполагает получение' результатов аналогичных, что и в спонтанный. Таким образом, предварительное введение препаратов ЬСГ при синхронизации половых циклов не ока, зывает существенного влияния на эффективность суперовуляции. Более того, на основании проведенных довольно большого объема исследований выявлен существенный фактор, влиящиё на показатели синхронизации охоты у коров-доноров. Дело в том, что от 20 до 30% .коров не проявляют реакции на гонадотропин, которая обусловлен^, наследственными факторами. В свете этого очевидно, что положительная реакция на обработку с целью синхронизации охоты с большой вероятностью гарантирует и положительную суперовуляторку» реакцию (табл. 4).
Основным критерием вачала введения гипофизарных гонадотро-пинов на 9-10 день цикла для получения суперовуляции служит точеный учет времени наступления предшествующей охоты. По нашему мнению, можно считать, что принципиально не аакным будет ли это 910- ила 11-м днем цикла, но ваяно, чтобы день начала обработки являлся серединой цикла. Поэтому введение гонадотропинов при синхронизации охоты, дающее положительный эффект, не только гарантирует наличие у животных способности положительно реагировать на
гокадотропин, но и унифицирует время прихода животных в охоту при условии дополнительного введения гонадолиберина. В свою очередь это дает возможность программировать одновременную обработку большого числа яизотных. В случае спонтанной'охотн правильный выбор времени начала обработок весьма проблематичен. Это обосновывается тем, что яри фиксации спонтанной охоты по ряду причин в ' 40-50$ могут быть ошибки. ' '
..При. всех методах направленного индуцирования полового цикла,, если .тавотные проявляют индуцированную охоту ранее или позднее оптимального срока (48 часов) после обработки, то последующее •• 5индуцирование суперокуляции оказывается на эффективным даже в том, ¿случае, если в .одном из яичников обнаруживали хорошо выраженное •• желтое тело (табл. 5).
.'. '' '" Таблица' 5
. ,, Уровень суперовуляций в зависимости от состояния яичников в день напала синхронизированной ;•-•,■ обработки ( п - % )
. Показатель /'..- ■ ' - ■ - . • ГРУШШ .:''." '' . '
' . '-.: ■. ',х „, ., , г , ■•, з
Обработано животных ■/..•/•18 - 19 , : 16
•Реагировало сузтерову- '/•-•.••' • , ■
линией V 18 - т>° . ,19 ~ ЮО.О,. II - 68,7 .
3 том числа о желтыми .. / •"•:"■/
твлат: .. V _ •.,. ■■." ../ ..¡-/- ■ . -,•■••/ '
• ■ 9 и больше ' • ч8 - 44¿4 5 - 26,3 2 - 12,5 ■•' .6 -8- - '38,9 . 8 - 42,Г 3 -.18,7 .
• I т 4 Г i: 3 - 16.Ф. .6 - 31,6 6 -.37*4
Это говорит о том', что морфологическая характеристика желтого тела, не всетда характеризует эго'функциональное качество и о том, что отклонение срока индуцированной охоты от оптимума пред-'
полагает функциональную неполноценность индуцированного желтого тела.
Аппликация препаратов ФСГ в различных дозировках дала достоверно различные результаты овариальной реакции коров-доноров. .' Повышение дозировок ФСГ от 920 ед. до 1080 ед. (фоллитропин) Е ФСГ-п о,28 мг до 32-40 мг.сопровождалось улучшением показателей ' супэровуляцйи. Общие дозы фоллятропина - 1200 ед. и ФСГ-п - 50 мг мохно считать высокими, при которых происходит депрессия показателей суперовуляции. При этом существенно снижается число интакт-.. них эмбрионов и увеличивается число' дегенерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток, В 8том фрагменте повышения дозировки нашими расчетами зафиксирована негативная корреляция (-£ = -0,65) между дозой ФСГ на I кг яивой массы и .числом овуляций. -Расчеты показали, что оптимальной дозой фодл'итрогшна на I кг ян-':-вой массы могут быть - 2,1-2,2ед. к ФСГ-п - 0,08-0,09 от. :
Механизм негативного влияния высоких дозировок на овулятор- ' .ную'реакцию еще во многом не выяснен. Вероятно, что при высокой ■ дозировке гипофизарного ФСГ на фоне ограниченной концентрации • -прогестерона и одновременно высокой концентрации эстрогенов происходит десенсибилизация гипотоламо-гипофизарных центров по от- Г Ношению.к последним. Это способствует недостаточному выбросу ЛГ,-концентрация которого на может привести к своевременной овуляция ^ аолликулов, В противоположность этому, повыиеяная концентрация - прогестерона приводит к сенсебилизации гипс*}«за относительно ест-рогеноа. Однако, и в этом случае повышенная дозировка ФСГ-п вызывает нарушения в секреции ЛГ и овуляции у 50$ животных. Таким - -.' образом отчетливое нарушение' выброса ЛГ может быть взаимосвязано ■ но повыиенной концентрацией прогестерона во время индуцирован- : ного эструса.'Следует обратить снимание на то, что в таких случаях причину высокой концентрации прогестерона.во время индуцированного .вструса при отсутс.тлд желтого тела необходимо рассматривать», как эшо на парадоксально на первый взгляд, в индуцированных к росту фолликулах. Под влиянием высоких доз гонадотропина . хлечки внутренней теки увеличивают продущдоо теотостерона. Активность этих клеток превосходит, предположительно, общую актив-
ность клеток гранулезн таким образом, что отсутствует возможность образования нужных количеств'эстрогенов. При повышенной концентрации гонадотропинов тестостерон служит инициатором образования прогестерона в клетках гранелез|л, через пока еще до конца не выясненный механизм стимуляции превращения холестерина в прегнено-лон. Повышенная концентрация прогестерона во время эотруса неблагоприятно влияет не только на механизм обратной связи, она такяв оказывает негативное влияние на показатели оплодотворяемости. Высокая дозировка гонадотропинов, наряду с повышенной интенсивностью продуктивных процессов в фолликулах, приводит к "утомляемости" фолликулярных рецепторов, в результате чего даже при качественном выбросе JO? по причине редукции ФСГ и ЛГ-рецепторов '. происходит предотвращение созревания и овуляции фолликулов.
В рамках исследований по индуцированию суперовуляцид большое значение придают исследованиям сроков наступления и продолжительности охоты, считая, что проявление этих факторов отражает степень эффективности осеменения, то есть влияет на показатель оплодотворяемости. Большое количество противоречивых суждений по проблеме является производным одностороннего исследования факторов техники искусственного осеменения без учета и анализа эндокринного аспекта критических фаз,-которые составляют основу и предпосылки плодотвор/ного осеменения. Только на основе анализа параметров техники осеменения в контексте с анализом данных по динамике эндогенных и экзогенных факторов, сопутствующих осеменении коров-донороф, возможны объективные выводы об эффективности параметров осеменения. При комплексном подходе следует исходить из того, что в норме ограниченный интервал выделения ЛГ предполагает определенные рроки овуляции и, следовательно, соответствуйте режимы осеменения. В данной, ситуации col ршенно логичны^ рекомендации осеменять доноров через 48 часов после инъекции простагландина на всем протяжении охоты с интервалом 12 часов. Однако, оплодотворяемооть яйцеклеток зависит от продолжительности индуцированной охоты (табл. 6). Процент оплодотворяемости повышается о увеличением продолжительности охоты от 12 до 24 чаоов, а следовательно с увеличением кратности осеменений до
?рех. Увеличение продолжительности охоты до 36 часов сопровождалось снижением оплодотворяемости яйцеклеток. Такая тендовция связана с тем, что при растянутой во времени охоте увеличивается степень' разновременности овуляций. При этом увеличивается вероятность выхода большого количества яйцеклеток, либо не прошедших периода окончательного созревания, либо потерявших факторы, ответственные за оплодотворение. Увеличение продолжительности охоты сопровождается также неодновременным оплодотворением яйцеклеток, чаете которых попадает в неблагоприятную для. развития среду, что предполагает получение при вымывании разных по разви-. тив дегенерирован!шх эмбрионов. Двукратное осеменение, без учета продолжительности охоты, через 48 и 50 часов после ингекции ■ простагландана или проведение осеменения через 50 и 70 часов, -рекомендуемые рядом авторов, не во всех случаях приведет к кела-емнм результатам.-По нашему мнению четкая регламентация парамеа-'■■ ров осеменения не может быть рекомендована из-за сильной вариа-•■' бельности продолжительности времени охоты.
Таблица 6
■ ' Продолжительность охоты, кратность осеменения
и оплодотворяемость яйцеклеток
Продолжи- Ч исло Число озу- - Число . Оплодот-Группа тельность коров- ляций на ооемэ- воряе-охогд.час. доноров I донора кий мость, %
-ь*» -
12 4 7,5 + 2,8 2 85 »0-
фоллитропин 24 ю 8,0 + 0,6 3 93,9
1 36' " 6 8,7 + 1,0' • 4 68,7
12 8 ' 5,9 1 1,8 2 85,7
ФСГ-п 24 7,3 + 1.8 3 93,6
36 7 8,4 £ 2,8 4 64,6
Наш исследования убедительно показали возможность и целесообразность восстановления репродуктивной функции коров после индуцированной суперовуляции (табл. 7).
Таблица,7 ■
Сроки осеменения коров после индуцированной суперовуЛявди и извлечения эмбрионов
Период, Группу
день конт- эстро- ремо- клатрап- эстуфа-
роль фан $ан . ростян . лая
15,2+1,5 18,113,1 21,113,4 19,2+3,4 36',5+6,6 34,917,2 37,3+5,6 39,6+4,3 127е0±5,5 119,1+7,8 121,9+8,6 130,8+6,4
Р<0,05 •
Наиболее эффективные показатели суперовуляции будут в' том . случае, если ее индуцировать на 60-80 день после 'отела,;Расчета показывают, что сопряжение этого условия с .условием восстановлен. яяя репродуктивной функции коровы после извлечения эмбрионов дает по сравнению о контролем экономический эффект, равный 718000 руб. (в ореднем на донора).
Профилактика эндометритов - один из ваяшйпих аспектов,.сп- -ределяпдих конечную эффективность биотехнологии воспроизводства
От извлечения до первой
охоты 31,212,5
' От извлечения . до плодотворного осеменения . 78,3+2,5
От отела до шходотворно-. го'осемене- - • ная 164,6+13,1
которому, по нашему мнению, должного внимания уделяют недостаточно. Причем, этот аспект необходимо исследовать ассоциативно с вопросами профилактики репродуктивной системы и организма в делом. С целью профилактики эндометрита; в охоту, предшествующую началу стимулирования полиовуляции и после извлечения зародышей, проводили санацию матки путем вкутриматочной .инфузии. антибиотиков, йодосола, люголя или другие препараты этого ряда в сравнении с УВЧ-про^-ялактйкой.
- ■ В своих исследованиях мы сопоставили зависимость уровня суперовуляции-от сезона года (табл. 8) .','..■'-. .: : - : Таблица 8
, Зависимость уровня суперовуляции от соэона года
Показатель
Период'года
летнии
осенне-зимний
зимне-весенний
Обработано коров
Реагировало на обработку, а - %■
Число' овуляций на 'донора
Число зародышей ■ на донора
Кз них; '•
нормальных ■ дегенерировании
25
23 92,0 5,4 1 0,4 '2,5 ; 0,3
1,1 + 0,6 0,5 ± 0,5
неоплодотворенных яйцеклеток 0,910,4
15 -12 - 80,0 8,9 1,4,0' 7,5 1 0,4
3,4 + 0,2 2,8 1 0,4
. 28 27 - 96,4 '
9,6 ; о,б
8,2х 1,2
• 4,7 + 0,8 2,2 1 0,6 ,
1,3+0,2 1,310,3
Однако в ходе детального анализа по месяцам (1088-1927) закономерно постоянного влияния сезонного.фактора не выявили, но установили -отрицательное влияние страссовнх повышений температуры окружающей среды. ,
Нами выяснены различия в показателях концентраций прогестерона к эстрадиола в ходе полового цикла у коров в стрессовых и нормальных условиях. По данным литературы концентрации кортизола в сыворотке крови может значительно увеличиваться у животных в условиях термального стресса. А корткзол и•регулятор его продукции - гипофизарннй гормон кортикотрошш обладают способностью тормозить активность "полового центра" гипоталамуса. В таких случаях количество пульсаций уровня ЛГ на 5-й день полового цикла снижается, а на 12-й возвращается к пределам норш. Это дает основание считать, что термальный стресс может подавить выработку ЛГ в гипофизе, не оказывания существенного влияния на секрецию ' ■ яичниками стероидных гормонов. Поэтому можно считать установлен-. * ным непрямое влияние изменений уровня тиреоидных гормонов, силь-' но зависяцих от колебаний температуры внешней среды, на оплодот- . воряемость у коров. Положение находится в соответствии с данными, согласно которым йодосодержащие тироидные гормоны влияют на теинизирущую функцию гипофиза. Для нормального функционеров;.»' • системы гипоталамус-гипофиэ-гонады влияние на гипоталамус гормонов щитовидной гкелезн необходимо обязательно. Объективно необходимость такого влияния подтвервдена экспериментами, когда было показано, что отсутствие овуляции, связанное с резким снижением лютенизируицей функции гипофиза в свою очередь связано с низкой а!., активностью щитовидной железы. Таким образом, прослеживается направленная обусловленность процесса овуляций от температурного фактора внешней среда через посредство сложной взаимосвязи щитовидная железа - гипоталамус - гипофиз - гонады при определенно1? роли надпочечников (учитывая повышение концентрации кортизола <• сыворотке крови при термальном стрессе).
Низкая концентрация прогестерона в середине цикла является следствием повышенной секреции эндометрием лактирующих коров .■ простагландина, который ингибйрует развитие и гормональную активность желтого тела. Это происходит из-за увеличения чувствительности эндометрия к окситоциру в ответ на действие которого и осудостзляется дополнительный знброс маточного простагландина. Повышение же чувствительности к экситоцину происходит из-за на-
рушения ьиутриматочного равновесия температуры в условиях термального стресса. Правильность выдвигаемой концепции подтверждают данные, полученные на коровах-донорах, не давших в условиях термального стресса позитивной сулеровуляторной реакции, но позитивно прореагировавших в нормальных условиях. Б целом мы пришли к выводу, что термостресс один из главных факторов, негативно влияющих на воспроизводительную функцию в соответствующие сезоны года, который однако можно нивелировать за счет оптимизации условий содержания.
2.3. Эндокринные факторы, лежащие в основе применения биотехнических методов корректирования воспроизводительной функции
Репродуктивная функция у самок крупного рогатого окота на протяжении периода половой зрелости подтверждена циклической эволюции овогеиетических и эндокринных процессов в яичниках, находящая проявление в половом цикле, начало которого соответствует дню охоты, обозначенному нулевым днем цикла. Центральную роль периодической функциональной деятельности яичника и вместе с тем периодичности половых процессов играет оауляиМ, которая разделяет фолликулярную и прогестативну» фазу морфологических изменений. Таким образом, овуляция занимает главную роль в рамках полового цикла в качестве механизма, дающего пригодную для оплодотворения "яйцеклетку и обуславливающего гормональную ситуацию, соответствующую плодотворному осеменению, подготавливающую организм к бе- ' ременноста. Продолжительность цикла - величина не постоянная и может в значительной степени.варьировать в широких пределах. Тем не менее, обобщив большое число данных, полученных в результате собственных исследований, мы сделали вывод, что в среднем продолжительностью полового цикла у коров следует считать 21 день, у телок (к периоду случки) - 20 дней. Собственный опыт показывает, что минимальная вариабельность продолжительности цикла встречается в возрасте коровы между 3-6 лактациями, когда воспроизводитель?-пая функция наиболее "точно отрегулирована", причем точность ра-
стет к предела оптимума воспроизводительного периода. Увеличение степени вариабельности продолжительности цикла (в сторону уменьшения) наиболее выражено у старых животных.
Исследования относительно продолжительности фолликулярной и прогестативной фаз указывают на более постоянный характер последней, что объясняют значительно лучшей регуляцией продолжительности прогестативной фазы в связи с выполнением ею существенной роли в подготовке организма к возможной беременности. До настоящего, временя лет единой точки зрения на механизм этой регуляции, кото-, рым можно было бы объяснить эволюцию жачтого тела у разных животных. Прежде всего это относится к необходимой степени гипофизарной поддержки функционирования желтого тела на разных стадиях развит тия, т.к. в ряду случаев гилофизарная поддержка необходима только в определенное время, вне рамок которого развитие становится автономным. Общепризнано, что у крупного рогатого скота для реализации лютеотропной функции необходимо обязательное присутствие ЛГ, тогда как неясно способен ля,так называемый, чистый Л' играть ^ ' лютеотроцнуг|эоль. Ясно только, что в эксперименте для этой функции необходимо его достоянное введение в составе с пролангатором' (адъюванг Фрейда). .
В границах положительных механизмов обратной связи следует особо отметить положительный эффект эстрогенов на выделение ЛГ, выполняющего важную роль, обусловливающую нормальное течение как спонтанного, так и индуцированного овуллторного процесса. Причем зстрогекн не оказывают действия положительной обратной связи на внедрение '£СГ, а то время как прогестерон при адекватных условиях может обусловить рзст концентрации ФСГ и ЛГ.
Исходный фолликулярный рост отмэчается на поздней лютеаль-ной фазе под воздействием прогрессивного роста ФСГ, опредеяемого'V сокращением концентрации прогестагснсв- регрессирующим, лелтыи тэ-лом. В начале,^олликулярянй рост не сопровождается повышением кон-; центрации эстрогенов в плазме, но затем под комбинированным воз-, действием ФСГ я ЛГ, растущие Фолликулы начинают выделять эстроге- ■ нн. Повышающийся уровень эстрогенов достигает максимума незадолго до овуляции, непосредственно которой предшествует пиковое значе- • нйе концентрации ЛГ (рис. I).
Рис. I, Иллюстрация к тексту: эволюция коацентраци прогестерона, эстрадиола н ЛГ в соответств с эволюцией .фолликула и желтого тела
Приведенные обобщения по овогенетическому циклу приводят к выводу, что■эффективность гормонального индуцирования полиовуляции в первую очередь будет зависите от генетической лредпасполо-яенности. конкретное выражение которой проявляется в размерах популяций антральных фолликулов на протяжении цикла. Причем эти размеры колеблется в широких пределах как у разккх животных, таи и у одного и того же животного. Это и другие иолопсенля в конечном-счете позволят' считать современные дозировки и режимы проведения биорегуляторов вполне приемлемыми для направленного корректирования воспроизводительной функции.
Гормональные исследования относительно функционального состояния репродуктивной системы показали правильность стимулирования овариальной активности во время критической послеродовой фазы, причем это ценно не только при практическом использовании технологии трансплантации эмбрионов, но я в целом для зоотехнической я ветеринарной работы, касающейся решения проблем по воспроизводству. Первая овуляция наступает между 14-м и 38-м днем после отела. У 50$ коров она монет но проявляться симптомами течки и охоты ("тихая охота"), но может быть зафиксирована регуляторным определением концентрации прогестерона. Своевременно зафиксированная овуляция, не сопровождавшаяся клинически выраженными признаками, представляет собой реальную возможность для снижения средне-статистического показателя сервис-периода в стаде и мэет большое производственно-экономическое значение. Исследования иллюстрируют, что первый половой цикл после отела у части животных молет быть укороченным и только с третьего цикла следует считать циклическую деятельность яичников стабилизированной. Вместе с тем, эндокринологические аспекты аргументируют объективность данных, полученных при проведений исследований по стимуляции деятельности яичников а ранней послеродовой период,-а также доказывают возможность и обоснованность проведения биотехнических мероприятий о целые более раннего (после 'отела) как осеменения, так и индуцирования суперовуляции для получения эмбрионов (рис. 2). Характер гормональной кривой показывает нормальную эндокринную функци*|келтого тела с первого же цикла после предшествующей стимуляции овариаль-
- ЙО -
ошБота в спонтанный
ЦИКЛ ПОСЛЕ ЙНЛУЦИРОВЛННОГО -(позитивные показатели;
20 зо 40 д^о .! бо
Рис, 2. Изменения концентрации прогестерона, указы. вакщие на восстановление нормсциюшчности, при которой возможно индуцирование суперовуляции
ной функции. Таким образом, сведения о концентрации прогестерона в послеродовой период могут служить ватаейгаей информацией о степони пригодности коров для своевременного использования в целях воспроизводства.
Для понимания сущности процессов, лежачих а основе регуляции половых циклов большое значение имоет выяснение роли мекэст-ральных фолликулов. Предпосылки к вызыванию охота у животных зависят не только от возраста желтого тела и его функционального состояния, но и от степени развития фолликулов и размера их популяции на протяжении всей лютеальной фаза. Введение простаглан- ■ дина перед серединой полового цикла прерывает лютеиновую фазу т только при наличии маленького фолликула, а от того овулировал ли преобразованный фолликул или образовавшийся в результате лизиса желтого тела под действием экзогенного яростагландина, за-, висит продолжительность периода мезду прерыванием спонтанного цикла и последующей индуцированной охоты, данное положение им-ет исключительное значение, гак как объясняет вахиейщю яричк1 приводящую к рассеивании сроков прихода в охоту коров, обработанных простагландинами и теоретически обосновывает и введение в схему индуцирования синхронизированной охоты у хивотных гонадо-тропинов при фронтальных обработках простагландинами. Гонадотрс-пины будут способствовать унификации процессов в яичниках относительно роста, созревания и овуляции фолликулов. Становится очевидно!! закономерность прихода в охоту большинства тавотных через оптимальный 48-часовой интервал. В этой связи большое значение приобретают виясненные нами взаимоотношения концентраций эсярадиола и прогестерона перед обработками с целью синхронизации охоты. С точки зрения теории они доказывают и обосновывают правильность выдвигаемых нами положений, с точки зрения практики определение исходного гормонального статуса дает информацию ос1' исходных овариальных процессах в яичниках, позволяющих регламед- . тировать режимы обработок. Таким образом, синхронизация введения только простагландина будет эффективной при концентрации прогестерона 3,1 кг/мл и эстрадиола •- 20,9 пг/мл, характерных для середины полового цикла. При концентрациях, характерных для пэрио-
дов цикла с 6-го по 3-й и с 13-го по 16-й день целесообразно в обработку вводить гонадотропины.
Теоретически, гормональное вызывание суперовуляций возможно проводить с 5 по 15 день полового цикла, так как в этот отрезок времени яичники способны реагировать на сочетание экзогенных го-надотропинов и простатландиноз. Б приводимой работе определение концентраций прогестерона перед обработкой у доноров показало подъем средних концентраций со дня 0 (день индуцированной охоты) по 10 день цикла (рис. 3). Высоких стандартных отклонений мы не на-• блвдали. Отсутствие значительного разброса в величине показателей к наших исследованиях связано с тем, что коров о отсутствием пальпируемого желтого тела либо с плохо выраженным желтым телом из эксперимента исключали. Тестом для выбора животных служили и клинические признаки предшествующей охоты, которые тщательно фиксировали и подвергали анализу. При этом проводили определение признаков охоты, качества желтого тела, концентрации прогестерона. Учет всего комплекса и признаков должен находиться в соответствии с правильным течением полового цикла. В случае отсутствия такого соответствия брать животное в обработку не имеет смысла. В то же время, отсутствие только одного признака, например, желтого тела 'размером 1,0-1,5 см или четко выраженных признаков течки, ила -охоты достоверно не прогнозирует отрицательной суперовуляторяой реакции у конкретного донора, но достоверно гарантирует снижение . статистических показателей у большой группы животных.
Мы установили взаимосвязь между исходной ковдентрацией прогестерона и выходом зародышей, в то же время взаимосвязи исходных концентраций эстрадиола и показателями выхода зародышей не выя-вели (табл. 9). Определено, что минимальное число неовулировав-:тих фолликулов у доноров можно ожидать в спонтанный половой цикл при исходной концентрация эстрад;:.>ла 27,3-30,7 пг/мя, в нндуци-' рованный - 21,6-26,9 пг/мл. . •;. .-'•
При оптимальных размерах в нормальной функциональной актив-.-. ' аостя желтого тела на 10 день никла, к началу индуцирования су-' теровуляции, происходит рост дополнительного числа фолликулов. вместе с тем продуцирование допрлнительного количества эстра-
Рдо. 3.
Нормальный варяанг градации концентраций прогестерона в крояи поола синхронизированной охоты
Таблица Э
Показатели исходных значений концентраций прогестерона и эстрада ода з крови коров-доноров, в соответствии с уровнем
полученных результатов _I группа
£
Показатель
Уровни реак- _
ций поляову-. ляшш я аз- ^^ влечения , эмбпионов
П группа
концентра-бот- ция про-ных гес^ерона, ' кг/мл
концентра- число концент- концент-ция эстра- живот- рация рация диола, ных прогес- эстрада-пг/мл терона ола
нг/мл пг/мл
Число овуляций .'(желтых тел)
Число эмбрионов, пригодных для пересадок
12 15 3,1 + 1,2 2Э,7 + 2,6 26 4,0 + 1,7 23,5 + 1,6 1 03 о
8-11 ' 25 2,9 + 0,3 24,7 ± 2,8 40 3,2 + 1,7 19,8 + 1,4
4- 7 30 2,6 + 0,3 29,0 ± 2,0 30 2,9 + 0,7 18,3 + 1,2
3 ' ' 12 1,2 + 0,3 26,7 1 2,3 16 1,2 .и 0,8 19,1 + 1,2 !
9 8 8,4 + 0,2 33,6 ± 5Ч, 0 12 4,0 1,9 21,5 + 5,7
5- 8 ' 15 2,9 + 0,4 23,8 ± 2,3\ 23 3,4 + 0,7 20,6 + 1,5
I- 4 15 2,5 + 0,4 26,0 ± 2,4 \17 2,8 + 0,3 17,3 + 1,2
Отсутствие 6 1,2 + 0,3 29,0 ± 2,8 16 -1*3 + 0,4 17,3 + 1,0
г рсо^га
диола. Поэтому эстрогенная вершина в предовуллторньгй период должна быть значительно выше, чем в период, характерный для обычной течки. Параллельно этому, вследствие воздействия экзогенного про-стагландина происходит быстрый лизис желтого тела. Концентрация прогестерона закономерно снижается до базального уровня, соответствующего концентрации, характерной для спонтанной половой охоты, и начинается умеренный и далее, с 3-го дня быстрый и крутой подъем к 7-му дню индуцированного цикла, что обусловлено значительной общей массой лютеальной ткани, образующейся в результате овуляция большого числа фолликулов. Характер описываемого процесса качественно должен повторять динамику изменений концентраций эстрадиола и прогестерона в крови коров, происходящую в соответствующий период спонтанного полового цикла (рис. 4).
Количественное и качественное снижение показателей суперовуляции может быть обусловлено целым рядом факторов.-Одним из них может быть неполный, ли<$о недостаточно быстрый лкзие желтого тела. При этом, обратная реакция выделения гипофизом Ы1 на действие эстрогенов, хотя и позитивна, но видимо не достаточна для овуля-. ции всех вызванных к росту фолликулов. Одновременно, не исключена возможность преждевременного резкого возрастания концентрации прогестерона, чему способствует прождевременная овуляция части фолликулов. Это, в своп очередь, сопровоадается преждевременным проникновением яйцеклеток в матку и впоследствии высоким процентом их перерождения. В наших исследованиях негативная суперовулятор-ная реакция сопровождалась именно резкой сменой дадондя концентрации прогестерона в день 0 его подъемом. Аналогичное объяснение справедливо и для случаев существенно большого числа'индуцируемых к росту фолликулов на основе достаточно большой популяции аятраль^ ных фолликулов. Косвенно это находиг подтверждение данными лите- ■ ратуры, в которой исследователи сообщают о корреляции большого числа иэдуцироэашшх к росту фолликулов с увеличением числа, полу-" чаемых после извлечения, дегенерированных .эмбрионов и неоплодотво-' репных яйцеклеток.. _ .'.■'■
Следует отметить, что при увеличенном числе индуцированных желтых тел, значительно повивается концентрация прогестерона в 1
20
А. Спонтанный чикл (контроль)
Эстрадная, пг/кл
5 Р<п,а1
4
Прогестерон,
5 иг/мл
О 4 £
В- Негатианад рсгиш^«|В.ГЬйит>№над реакции
Зстрадиол, пг/мл
ЭстрзАиал, пг/мл
Прогестерон,
НГ/МА
-1 3
■ % .
Прогестерон, нг/мл
—?- О 1-Т
Дна -цикла
Г Позитивная реа>£ци* Зстрзйивл , пг/мл
Введение
йиытетичеыгесо Г-ояаАЬлиеерина
Пропи-тврон, «Г/МА
0 Т
?ес# 4. Гору-экагьте прокат сутзеровуллрупцих'коров.
8 1
- аз -
день извлечения зародышей. У отдельных тавотных наблюдают отступление от этой тенденции, причиной этого явления, по-видимому, является тс, что в день извлечения (день 7) максимального зкачеккя концентрация прогестерона еще не успевает достичь. Возможно также образование после овуляций очень мелких желтых тел с незначительной ебцей лютеальной .массой, обуслапливандей кизкув прогеств-рон-синтезирундую активность. Хорошей реакции обычно соответствуют следуицие параметры: увеличение размеров яячникоз до 10,0 х 10,С см каэдого, обеее число желтых тел - 10-15, отсутствие неову-лировавяях цолликулов. Но бывают исклэтения - при незначительно увеличенных ялчижах и очень маленьких, практяческя непальпнруе-мых яедтше телах (величиной с просяное зерно) получили 10-15 я даже 25 эмбрионов. В таких случаях всегда получала эмбрионы только отличного и хорошего качества (по морфологической оценке) при I0C?-ноЛ оплодотворяемссти яйцеклеток. Причинач. явленкя пока ив выяснена.
Неполный лизис желтого тела после воздействия экзогенного простагланднна может являться вал'лешей причиной отсутствия позитивной реакции яичклков на гонадотропин. Остаточная активность не полностью лизированного желтого тела, оневлдно,. о:саэкзает негативное влшшяе на развитие и оплодотворение яйцеклеток, это под-черкивате п большом число публикаций. ,
Таким сбразш, испытанные режимы обработок с применением ЗСГ ила ЛГ прямо влияют на оптимизацию врамени начала и продолжительность периода, в который проходят овуляция индуцированных к росту (Т.олллкулов. 3 результате в опытных группах основное кола- . чсство кнтакткнх эг.брноноп составляли поздние мору ли к ралпдо ЗлаСт. тоцпстн. Введение аналогов гонадолиберина или ЛГ в схени абработоя можно аргументировать целесообразность двукратного осеменения коров-доноров через 48 а 60 часов после инъекции простагландияа. ' При рекомендуемых параметрах учитывается: жизнеспособность яйцеклеток - 8 часов, живучесть спершев в половых путях - 24 часа, для- • тельпость продвижения ях к ыесту оплодотворения - около 12 часов. Благодаря этим фак-то|Х1М* возможные незначительные сдвиги выброса пяка ЛГ я,"связанные с этим изменения продолжительности овулятор-ных процессов в небольших временных границах существенного негативного влпяная на окажут. М . "
• 2.4. Восстановление репродуктивной функции коров на основе применения биорегуляторов и профилактика заболеваний органов репродуктивной системы при проведении биотехнических мероприятий
Наши выводы соответствуют положениям отечественных ученых о том, что бесплодие - сложное биологическое явление и причины, вызывающие ого, многообразны. Вследствие чего применение биорегуляторов для воостановления половой функции додано быть в соответствии с показапиши и одновременно с устранением отрицательных (факторов, служащих-причиной нарушения плодовитости.
Наилучшие результаты устранения овариопатологии могут быть достигнута при одновременных воздействиях на матку. Необходимость комплексного лечения диктует взаимообусловленность нарушений циклической деятельности яичников с патологией матки и наоборот. •
Следует принимать во внимание и экзогенные Факторы, обуславливающие данную патологию. Учитывая, что частота проявления ова-риальных патологий имеет выраженный сезонный характер.(рис. 5), следует предположить причину ео возникновения в неправильных ратинах кормления. Причина может быть заключена и а высокой молочной продуктивности коров, при которой также повышается вероятность ошибки при составлении рационов кормления, особенно в отношении сбалансированности концентратов а комбинированных кормах, составлявших рационы молодых коров. Нельзя исключить и возможность повышенной предрасположенности высокопродуктивных коров к дистрофическим процессам в яичниках вследствие недостатка определенных питательных веществ.
Благодаря регулярным гик дологическим исследованиям нами .было установлено, что'в ряде случаев первая индуцированная овуляция у проблемных коров.монет протекать бе? характерных проявлений симптомов течки а охоты. Образующееся при этом желтое тело имоег атипичное гормональное функционирование, которое проявляется в укорачивании полового цикла до 10 дней.
Кжичксгво kopofc
7S0-ТОО-
eso 60c J50
/00 ДО-
-400' ¿50■ JOD 250 ¿t» 150 100
so
йчвилтлх.
овлАспл
i í »1- w 5 vi vu vw {je * t\\ wb»u>
- » - - - — ГОЛА
Рис. 5. Динамика задержания желтых тел в яичниках
у бесплодных коров
Б наанх исследованиях лечение озариодиетрофии аналогам го-дадшшберииа и ГШС било менее эффективным по сравнению с сочетанием ФСГ и ХГЧ, При этом эффективность лечебно-профилактического применения сочетания антибиотиков и кислорода бнло аналогичным. Более вырааеннув эффективность ФСГ и ХГЧ можно объяснить, вероятно, тен, что эти пропараты обладают более качественными Слялшдаостаь^лируициы действием, а сочетание препаратов его еще балызз усиливает.
гЛахно считать, что подтверждена возможность эффективного использования коров в качестве доноров после устранения патологии репродуктивной системы.
Улучпение показателей суперозуляторной реакции в направлешш от 1-го к более поздний циклам после восстановления репродуктивной функции связано с тем, что болев длительный контроль за правильной цикличностью относительно продолжительности интервала позволял яскягзчить из обработок коров с укороченными или удлиненными циклаш. Этих глзотних искусственно осеменяли. Необходимо отме-зигъ, что укороченный перед осеменением цикл, к»зк правило не влиял отрицательно на результативность осеменения. Мы в своих исследованиях, исключение коров- с неправильным чередованием циклов обосновали яелозмо:шостыо правильно определить сроки для начала обработок с целью индуцировать суперовуляцию.
Взаимообусловленность овариопатологки и воспалительных процессов шиш усло:ашется патологически-,; влиянием воспалительна! процессов молочной железы. Отсутствие учета такого влияния при лечении эндометритов и оваряолатологии в рада случаев не дает ожидаемых результатов. Поэтому в комплекс мероприятий по борьба с бесплодием необходимо вводить диагностику и лечение маститов. Ябченме яри этом только эндометрита не приведет к выздоровлению, т.к. патологический процесс распространится в обратном направлении Возникает, так называемый патофизиологами, "порочный круг". В дополнение, обязательно надо учитывать, что при любой патологии яичников гистологически оделяют ту или иную степень патологии евдомзгряя. Поэтому становятся понятными причины в трудностях выявления охоти, определяемых ее стертыми признаками, Но это обстоятельство является причиной увеличения межотельных интервалов.
Нами установлена целесообразность многократного использования в качестве доноров выбракованных коров, учитывая существующую деталь - отсутствие положительной реакции на обработку не является абсолютным показанием для исключения животного из числа доноров. Наши исследования аргументируют это позитивными результатами, когда целью ставятся восстановление репродуктивной функции коров на основе дифференцированного диагноза и адекватного воздействия, проведение которого патогенетически обосновано.
На практике это представляет собой объективную трудность, а в некоторых случаях определить исходный рубеж патологического процесса не представляется возможным. Поэтому только комплексная система профилактических и терапевтических мероприятий монет гарантировать положительные результаты, что доказывает эффективность комплексной УВЧ-терапии и профилактики.
2.5, Аспекты пересадка эмбрионов реципиентам
Исследования по подготовке телок-реципиентов выявили ряд преимуществ комбинированного метода синхронизации охоты с применением препаратов гонадотрошша, лросгаглаядина и гондцолибери- . на (табл. 10).
Расчеты доказывают полную состоятельность и обоснованность выдвигаемого нами тезиса о необходимости проводить а рассматривать 'технологию трансплантации эмбрионов в рамках производственных задач по воспроизводству. Надо подчеркнуть, что фронтальная обработка двукратным, о интервалом II дней, введением простаглан-дина программирует приход в охоту среднестатистически, в лу-;ем случае, не более-50$ обработанных животных. Объясняется это твердо установленным фактом, что пришедшие в охоту животные после первой инъекции, после второй в охоту не приходят. Есть публика- ■ ции, в которых указывают,'что индуцированное в результате воздействия, экзогенным простагландином желтое тело не всегда ллзирует-ся после вторичного воздействия. Вероятно, причины этого явления
ЗДпектквность синхронизации с целью подготовки телок-реципиентов, а - %
Группа
Показатель
I - аструмат (с интервалом , II дней)
П - ГСЖК 300 ИЕ+ астрофан 500 шг
Обработано животных . 100,, . ХрО
Проявили признаки охоты ■ .'50 - 50,0 . 80 / 80,0
в том числе: •; . ', „••'"'
через 24 часа ' , \ . /5-5,0 7 - 7,0
, 48 часов.. . ; , .. 35 - 35,0 60 - 65,0
, 72 часа ' '.-" ; : 10 - 10,0 " 8 - 8,0
Оказались пригодными• ""•'•'
для пересадок .,, ? 25 - 25,0 . 40 - 40,0
Число стельных' •
реципиентов ...'■'.' ■ - 12,- 12,0 , 19 - 19,0
могут быть следующими: а первую фронтальную обработку непременно попадает часть животных, желтое тело которых, не. реагирует на про-отаглзядик. Тем не менее, они приходят в спонтанную охоту, начало которой различно в зависимости от индивидуального функционального состояния. Вследствие этого животных в охоте сразу после первой обработки регистрируют на >отяяении 5-7 и более дней. •Поэтому,- закономерно, что какая-то часть этих животных к момэн-уу второго введения про'стагландина будет иметь яелтоэ тело, которое в функциональном отношении реагировать на простагландан не . способно. Совершенно очевидно, что число таких животных будет, ..' . воегда сильно варьировать из-за всегда различного.исходного функционального состояния. Следует отметить, что при вторичной обра-т 15п'гк0 можно так же применять комбинированный метод, однако, если
при первой инъекции вводили ГС1ХК, то при второй необходим гипо-физарный гонадотрошш, либо гипофазарный гонадотропин при первом и втором введении.
Таким образом, собственные исследования дают методическую основу реально управлять биологическими процессами {в производственной практике трансплантации эмбрионов в скотоводстве) в направлении сближения эволюция репродуктивных процессов с технологическими и экономическими требованиями. .
2.6. Традиционные методы селекции и
результаты трансплантации эмбрионов
Стадо ллемзавода "Куркино" - это сложившаяся в результате длительной направленной селекционной работы система, представленная ее структурными единицами - линиями, имеющими свои особенности в периодах развития, стабилизации или регрессе. Линии, в свою очередь представлены потомством отдельных быков, обладающих спецификой племенной ценности и используемых на определенных этапах селекции.
При анализе сочетаемости линий лучшие варианты обильномолоч* ности отмечены при подборе голштинских линий со стороны матери, и отца или с одной из сторон. При чистопородном разводении лучшие показатели сочетаемости имеют: Тантэлус х Аннас-Адема, Хар-тоя х Кулика, Кулика х Тантэлуса, Аннас-Адема х Аннас-Адема,
Анализируя динамику удоя, по года?,\. отмечается его рост при ежегодном генетическом прогрессе 20 кг молока в год. Отмечено достоверное влияние фактора месяца отола на величину удоя (2 = 8,5), разница в удое за лучшие и худшие месяиы составляет 400500 кг молока, самими неблагоприятными месяцами оказались июнь и июль, наиболее благоприятными ноябрь, декабрь, январь. Достоверного влияния сезонности отела на жирномолочность и живую массу не отмечено.
Анализ результатов отбора по продуктивности матерей показал прямую зависимость величины удоя дочерей от уровня обильномолоч» ности их матерей за наивысшую лактацию: Црл повышении удоя мате-
рей на 1000 кг дает рост продуктивности дочерей 150 кг. Эффективность отбора в стаде по уровню удоя матерей отцов носит криволинейный характер. Увеличение удоя матерей отцов на 1000 кг дает прибавку дочерей на 150-160 кг, при этом наибольший эффект достигается при повышении удоя матерей отцов до 8500 кг, в дальнейшем ■ отмечается процесс стабилизации.
Удой по первой лактации современного стада состсавил 4200 кг ( = 921 кг, С = 21,8) при жирномолочности 3,92$ ( -с = 0,25$, С = 5,8). Использование голштинских быков в стаде не только не снизило показателей в удое, но и увеличило жирномолочность в стаде. Отмечено увеличение показателя изменчивости жирномолочности, что позволяет эффективно вести селекцию по данному признаку, лактацию при одинаковых условиях кормления и содержания. Диагноз стаЕили на основании наблюдений за динамикой полового цикла и данных ректальных исследований. При неправильном че- • редовании стадий полового цикла, наличии в яичниках флюктуирующих образований диаметром до 2,0 см и отсутствии выраяенннх желтых тел ставили диагноз - фолликулярная киста. При плотной консистен-. ции аналогичного образования и отсутствии поведенческих проявлений циклической деятельности репродуктивной системы предполагали образование лютеальной кисти. Если дачники бкли небольших раз, меров, примерно 0,5 см в диаметре, плотной консистенции с гладкой поверхностью - ставили диагноз овориодистрофии, или гипофункции.. Ректальные исследования повторяли до 2 раз с интервалами 5-10 дней. ..'''. • •
Коровам с'Фолликулярной кистой вводили аналоги простаглан-дина и сурфагои в дозе 5,0 мл с интервалом 8 дней, коровам с лютеальной кистой 3,0 мл суперфана. При гипофункции яичников вводили по I0QQ НЕ ФСГ (фоллитропнн) и ХГЧ. Во П группе при тех же заболеваниях аналогичное лечение проводили в комплексе с внутри-маточным введением препаратов ГАМ1 и трициллина. После возобновления цикличности, начиная с первой охоты, проводили осеменение ректоцершкальннм методом оттаянной спермой с учетом признаков ■ течки, полового возбуждения и четко, выраженного ретлокса неподвижности. При использовании коров после торфофункционалъного
восстановления яичников в качестве доноров индуцирование полпо-вуляняи проводили фоллятропином и простагландином по четырехдневной схеме.
Сокращение восстановительного периода у коров-доноров изучали на основе применения отечественных синтетических просгаглан-дянов - клатрапростинз и эстуфалана. Извлечение и пересадку эмбрионов проводила по инструкции (1287). '
В процессе дисперсионного анализа вшшлеко достоверное влияние фактора быка-отца по селекционируемым признакам дочерей. При этом влияние фактора быка на жирномолочность (Р - 9,4) превосходит степень влияния на удой (3? = 5,7) при Р<0,999. '
При оценке влияния фактора быка на уровень продуктивности подбираемых к нему маток отмечено наличие целенаправленного подбора в подконтрольном массиве, по уровню Р = 1,7, по жирномолочности F = 3,2 при Р<0,99. '■'".Анализ влияния доли кровности по голштинской породе показа з, что наибольший уровень удоя характерен для животных 1/2, 3/4, 5/8 по голштинской породе, снижение доли кровноотя по улучши- j порода сопровождается уменьшением величины удоя. Факторное алиям яиэ доля кровности на величину удоя я жирномолочность. Анализ развития животных в различные возрастные периоды от рождений до возраста I лактации показал, что животные в возрасте 10 месяцев . я старше в современный период по сравнений с другими годами имеет живую массу на 10-15 кг выше. Сезонность рождения но оказала достоверного влияния на величину яиаой массы до 12-мосячного воэ-. раста. Зависимость удоя от живой массы -ноаат криволинейный характер, роот живой массы до 540 кг сопровождается повышенном удоя/ дальнейший рост sisой массы на данном этапе селекции соответат вует процессу стабилизации уровня удоя.. . • : .Таким образом, оценка я отбор животных, особенно на осиовь их оценки по качеству потомства - процесс сложный и длительный.-Оценить по генотипу коров, как правило, на основе традиционных'.-методов селекции, не представляется.возможным, так как от них '. ' нельзя.получить достаточное число потомков. При оценке и отбора коров для.племенного использования обращают внимание на фенотя-
пические признаки: продуктивность матерей по удою за 305 дней лактации, процент жира и белка в молоке, пригодность к машинном} доению. А так как отбор коров ограничен, то основная роль в до. стижении генетического прогресса (60-80/S) отводится правильной оценке, отбору и использованию быков-производителей.
Использование программного комплекса НКШ, адаптированного йа персональный компьютер I ВМ PC XT/AT, позволяет интенсифицировать работу селекционера со стадем. Проведение дисперсивного, > корреляционного, регрессивного анализов позволяет прогнозировать селекционную работу и оперативно па нее реагировать
В результате совместной работы специалистов шгемзавода, Рос-влемобъедйнешшг ВйКа, Канадской фирмы Тэстерн Бридерэ Интернешнл Лтд" в-1207 г. получено 180 телят от канадских коров. ' В качестве доноров использовались высокоценные животные канадской селекции ведущих линий голштинской породы ВИс Айдиала . S33I22, ..Салинг Трайджун Рокита 252803, Рефлекшин Соверинга 198998 Молтвик Чифтейна 95679. Средняя продуктивность коров-доноров со-■ ставила 9765 кг молока и 391 кг молочного жира, в том числе по - голгатинам черно-пестрой масти, соответственно - 9918 кг и 396 кг, .' црасно-яестрой ыаоти - 8752 кг а 359 кг. Максимальная продуктивность черно-пестрых коров-доноров 12300;кг. молока и 499 кг молочного жира, красно-пестрого, соответственно - 8579 кг и 354 кг. .
V: Закончили парвую лактацию 52 коровы-трансплантантки. В сред; нем от каждой первотелки получено по 6480 кг молока с содержанием жира 3,6# и выходом молочного жира 234 кг. Их удой превзошел . удой сверствниц на 721 кг, коровы-трансплантантки канадской се-'лэкции имели более равномерное распределение удоев по месяцам,: ' лучшую скорость молокоотдачи и коэффициент молочности.
Из 52 первотелок от 2 надел . более чем по 8500 кг молока, • от 13 голов 7000-8000 кг, от 23 юлов 6000-7000 кг, , от 13 голов Й50-6000 кг и от одной 4765 кг молока. Среднесуточный удой за ' , все месяцы лактации составил 25,5 молока, наивысший 34,5 кг и оамый низкий 28,5 кг. Это подтверждает высокую степень наследу-; рмостй животных молочной продуктивности.
Продуктивность траисплантанток находится в зависимости от . принадлежности к линии (табл. II).
Продуктивность коров-трансплактанток в зависимости от принадлежности к линии
Линяя
К-во голов
Продуктивность
удой, кг жир, %
Сялинг ТраИмун Рокит 252803 Рефлекшн Соверинг 198998
Бис Айдиал 333122
Монтвик Чифтейн 95679
28 6309
9 6255
9 6160
6 5402
3,6? 3,48
3,69
4,36
Лучшей по продуктивности а наиболее многочисленной оказалась линия Силинг Трайдаун Рокит 252803.
Степень достоверности влияния фактора линии на удой матерой и матетей-матерей определялась по величине критерия Зиаэра, который составил, соответственно 3? = II при Р = 0,929 и ? = 4,6 при Р = 0,995. Влияние фактора лиши на удой матерей отца и дочерей (коров-трансплантаток) оказалось не достЬверно. Степень влияния фактора линии на жирномолочность коров-траисплантанток сасокодо-стоверна, критерий Фишера 3? = .9,1 при достоверности Р = 0,959..
В своих исследованиях мы проанализировали, как влияет уровень продуктивности женских предков коров-траисплантанток на ах продуктивность по первой лактации (табл. 12),
Влияние носит крвоволянейный характер с повышением продуктивности матерей-отцов. до 5000 кг молока-идет рост продуктивное!-ти, но затем идет резкое вниженив я при уровне продуктивности свыше 13000 ¡кг начинается рост продуктивности трансплантатов (табл. 13.). ' '
Рост, продуктивности матерей-матерей до уровня 10000 кг молока сопровождается ростом яродунмшностн коров-трансилантанток (табл. 14).
Продуктивность женских предков коров-трансплантан-ток в зависимости от принадлежности к линии
Продуктивность
Линия голов мать мать-матери _ мать -отца
кг % пг % ' кг %
СИлинг Трайджун Рокит 252803 28 .8447 4,07 7055 4,07 10561 3,99
Рефлекш Соверинг 198998 3 7439 4,15 7283 4,18 10132 4,22
Вис Айдаал 933122 9 9956 3,97 10371 3,77 11536 4,16
Монтвик Чифтейн 95670 6 8230 3,99 7702 3,95 11300 4,20
Таблица 13
Влияние'уровня продуктивности матерей отцов на продуктивность коров-грансплантанток
Уровень продуктивности . Количество Удой коров-транс- .
■матерей-отцов голов плантанток
9000 ' - .. 10 6243
10000 ' | " 15 ' 6529
11000. 10 5707
12000 I . 5168
13000 4 5475
'14000 . .'2. 6116
Влияние уровня продуктивности матерей-матери■ на продуктивность коров-трансплантантс-к ' "
Уровень продуктивности Количество матерей-катерн голов
Удой коров-траяо-илантанток
5000 ' 6000 ' 7000 • 8000 9000' 30000 ; 11000 . 15000 ;
4 10 10 6
• д Л' .
. 2 ''
■ 5213; 5729' 5790, 6125
.7363 6739 5647.
Рост уровня продуктивности. матерей до"8000-9000 кг моле», предполагает рост продуктивности дочерей (короа-траноплантанток), Влияние Фактора уровня! вирйомолочности матерей ка жнрномолоч--, ность коров-трансплантанток достоверно при критерии Фишера Р в 4",9 и достоверности М),Э9Э (табл. 15). . .
_ • • - . • ' ...,-. Таблица 15
V" Влияние продуктивности матерей на продуктивное^., короз-трансплаятанток
Уровень продуктивности Количество ';-. Удой коров-траяс-! матерей голов - плантантбк.
• 6000. ' • •' 4 ' . 6143 , - ' " - .1 7000 V 18 ' '' 6041
8000 1£ 4 6407
9000 13 /,6301,ч
• 10000 4 ' 5811, 12000;. 1 .5450.-
При анализе продуктивности женских предков коров-трансплан-танток канадской селекции< в условиях племзавода-колхоза им. В.ИДеиина, мояно заключить, что наиболее желательно закупать ' эмбрионы с уровнем Продуктивности матерей 8000-9000 кг и бабушек 10000 кг молока за лактацию.
Бычки трансплантанты по показателям спермопродукции не уступают бачкам, полученным обычным способом, как по объему, так и по подвижности,' концентрации л оллодотзорлицей способности •'• сперш (табл, 16);. .
' В ноябре 1988'года в племенном колхозе им. В.М.Ленина со-'г' стоадся первый;Всесоюзный аукцион бычков голштинской породы, полученных методом трансплантации. Было представлено для продажа В7 голов*, в том числе 66 голов черно-пёстрой'масти и 21 голова .; красно-пестрой масти. : х ;
• . По линейной принадлежности быки распределялись таким обра-" зом! Бмс Айдиала 933122 - 39 голов, Силинг Трайдяун Роки га 252803 33 головы, РесЛлекшн Соверинга 198998 - 10 голов, Монт-. вик .Чифтейна 95679 - 5 голов. Красно-пестрые быки представлены линиями Сшмнг Трайдйун Рокита 252803 и Рефлекшн Соверинга 19399«
Продано 63 бычка: 42 черно-пестрой масти я 21 красно-пест-' ■ рой. География распределения проданных бычков составляет обпшр-яые районы (табл. 17). 14 бычков были реализованы через племсио-. тему в ведущие племзавода страны. '■ ' - . , ; -
" •/; ' Таким образом, подтверждена возможность трансплантации эмбрионов крупномасштабно влиять на популяцию крупного рогатого скота", а'быка, происходящие из ведущих линий голштиной породы, имеющих исключительно высокую молочную продуктивность хенских предков, будут улучаагвлЕг/и селекционируе^ос признаков. ••"•.''••' Эмбрионы донных в племенном отношения коров пересаживают'в преобладащем большинстве не - -чышм в генетическом отношении реципиентам, Возникает проблема,, ваялючащаяся в том, что потомкам от аыбрлотрансфера наносится ушерб, т.к. генетически менее ценные. вываливающие коровы или телки в большинстве случаев подержатся при аеоптимальных условиях. В соответствии с постановкой вопроса к возможными выводами в интересах селекции мы проанализировали ■ информацию по коровам черно-пэстрой породы* полученных методом трансплантации» . . ..:-,'}•-V ';-'■•/■• "'."
Результаты использования быков-трансплантантов ведущих лилий, проданных с аукциона
Линия Номер быка Активность спе^-ляев» Объем эякулята, кг ■ Концентрация, млрд. Получено доз На каком поголовье использ., голов Сколько получено потомста голов
Бис Айдиал ■ 383 90 - 95 3,9 1,1 67000 5192 4113 .
- - 414 90 - 95 4,5 1,0 55000 60 26
448 90 - 25 3,2 1,1 40000 2571 1538
Силшг Тр.Роккт 440 90 - 96 4,2 1,01 39250 . 8571 7288
433 95 - 97 4Д . 1,0- 40553 33744 38S4
388 80 - 85 4,7 1.0 43Г76 6470 5509
РеЗшекшн Соверинг 558 Э6 - 99 3,8 1,0 • 42190 4841 4139
411 80 - 85 4,0 1,01 55IS4 - -
439 80 - 85 5,0 1.0 86816 3669 1427
Монтвик ' Чифтейн 431 90 - 95 3,7 ■ 1,0 50000 1957 254
453 90 - 95 3,1 1.4 72000 - -
.441 ~ 80 - 85 4,0 0,9 12115 245 153
Таблица 17 География распределения проданных о аукциона бнчков
Название шгеыобъединения
Кол-во голов
Принадлежность £ линии
1, Брянское ■
2, Волгоградское
3» Восточно-Казахстанское
4, Днепропетровское -
5, Ивановское ;6, Казанское
7» Киевское
8. Курганское,
9. Кокчетавское
10. Могялевскоэ, Ш. Орловское
.12, Саратовское 1
* . ^ -
13, Смоленское
14, Тульское »
15, Тамбовское■
16, Челябинское
2 • Вио Айдиал I Вис Айдиал
I' Силингхрайдаун Рокит
X Рефаекпи Соверинг
3 .Бис Айдиал
1 Вис Айдиал
6 Силинг Трайджун Рокит
2 Силинг Трайдкуй Рокит
2 Силинг Трайджун Рокит
1 . Рефлекшн Соверинг
5 Вис Айдиал
9 Силинг Трайджун Рокит
2 Моктвик'Чйфтеш ■ 2 Рефлекшн Соверинг
I Монтвиль Чифтейн
1 Вио Айдиал
2 Вис Айдиал
I Силинг Трайджун Рока?
2, Вис Айдиал' •
1 . Вис Айдиал
2 . Вис Айдиал '
I Силинг Трайджун Рокит
I Рефлекшн Соверинг
I Силинг Трайдаун Рокит
,X Вио Айдиал
1 ■ Силинг Тайджун Рокит
2 Рефлекшн Соверинг
2 Вис Айдиал
2 Силинг Трайдаун Рокит
Эмбрионы были получены от отобранних биков я коров аысокой селекционной оценки по признаку молочной продуктивности (масса молока, жира, белка). Для проведения исследований по сравнению селекционной ценности и испытания молочной продуктивности в качестве доноров отбирали коров со средними селекционными показателями выше, чем в среднем по полуляции.
На рис. 6 приведена селекционная оценка бычков-производителей, полученных методом трансплантации, отчетливо вше, чем при естественном спаривании. Та же картина, но в меньшой мере, наблюдается в отношении селекционной оценка дочерей. Превосход- ' ство, однако меньше ожтдаемого по молоку, диру, белку в противоположность потомкам, полученным после естественной стельности. По всем трем признакам шесте эффект ниже ожидаемого - третий ряд столбиков относительно ко второму. При анализе шел значение учет материнского эффекта, корова-эффект, т.а. индивидуальные отклонения продуктивности коровы от ее отцовских полусесте'р. Он отражает я то генетическое отклонение, которое приводит к регрессии вследствие индивидуального эффекта животного. Значение . регрессии селекционной ценности матерей вследствие коровы-эффекта колеблется от 0,03 до 0,11.
Предпосылкой для проведения анализа показателей матерэй, как дочерей после естественной стельности, так и дочерей после трансплантации послужил факт ухудшения лактации. Редуцирование, базовых показателей произошло на матерях вследствие различий • потомков, произведенных как собственными матерями, так и друга-ми коровами. Хотя для трансплантации использовали коров с внсо-; кой селекционной ценностью, группы потолков, полученные от ре- ' цилиенгов, были селекционно менее ценными, чем матери. * ''
репродуктивной продуктивности реципиента для всех трех признаков несколько выше. Таким образом, имеет йесго уменьшение в обеах ' группах потомков по массе молока, жира, белка. Для всех трех признаков характерно стандартное отклонение в пределах 0у4 (табл. 18); .
CO-otu&b
со -ap4b.t>aú
КЛАССА ЖМ?Л,КГ
40-V\AT6PEÚ
СО-отцоь
со-дочм"«» MAICA BÏAKA.W
cß-h*tevbv»
УАТ UVAAVWVÄ
ожналйиьл v»4>çkt «яг
Phcí 6. Селекционная ценность родителей . и их дочерей.
Таблица 18
Среднее число (х) и стандартное отклонение ( ) для показателей селекционной ценности матерей (п=П7) и эффект-коровн дочерей, полученных от собственных матерей (п=17?) или от реципиентов (п=1£6)
Признак
произведены от Реципиенты
Масса молока, кг
матери
реципиенты
Масса жира, кг
матери
реципиенты
Масса белка, кг матера
Селекционная
оценка
матери
ЗТфект-коровы на продуктивность
дочерей I). Дифф.
х
482
X
43,6
135,3 5,0
2,3
280,2
440,7 258,2 28,0 12,0
14,5 7,9
91,7
174,3
109,5 11,1
4,6
5,4
2",6 '
I)
Селекционная оценка.значения дочерей представлена в форме эффекта-коровы.
' За исключением признака массы жира, признаки двух групп , потомков с признаками матерей одинаково близки. Тенденциалыю коэффициент регрессии достигался за счет потомков от мате>ч>й. Однако, отчетливо различие.в аддитивной конотанте, так называемой абсолютной дифференциации селекционной ценности. Значение этого заключается в том, что при равном производственном уровне матерей дочери от естественной стельности всегда превосходят, т.е. различия в селекционной цонности матерей имеют тенденцию к увеличению (высокие коэффициенты регрессии), Указанное
различие в аддитивной константе регрессии коровы-эффекта дочерей от селекционно ценных матерей в отношении отдельных признаков меньше, чем по таблица 18.
Учет происхождения матерей (случайный эффект в определенном смысле) по группам различных потомков не выявил взаимосвязи с продуктивным потенциалом матерей и дочерей (табл..19,20),
Таблица 19
Корреляция (ч) между селекционной оценкой дочерей и матери и регрессия коровы-эффекта (КД) дочерей на селекционную ценность матерей в зависимости от типа вынашивания (мать или реципиент)
Родилось от?
' Признак
реципиентов п = 106
соботв.матерей, п=477
'Масса молока, кг КД - 4,2
Масса жира, кг КД 0,96
Масоа белка, кг КД 0,71
0,16
+ 0,10
0,17 + 0,14
0,16 + 0,11
0,17
76,6 + 0.13 0,24
4,1 + 0,21
0,16 3,1 I 0,13
. Таблица 20
Влияние вынашивания на регрессию продуктивности дочерей в зависимроти от продуктивности матерей
Признак
) Дифференциация выяв- Регрессия дочерей
шивания в зависимое- матерей от реципи-
ти от реципиента ентов от матерей ■или матери
Масса молока, кг Масса жира, кг Масса белка, кг
78,6 4,4 2,4
0,023 К.Д. 0;047 н.Д.
0,006 н.Д. 0,106 Н.Д.
0,036 Н.Д, 0,012 Н.Д,
н.д. - не достоверно, ••• - Р>0,001
Таким образом, параллельный анализ полученных наш данных в исследованиях современных методов градационной селекции и селекции с применением метода■трансплантации эморконов подтверждает предооложение о большой эффективности и лрогоссивности второго метода. Это согласуется с данными большинства источников литературы при их сравнительном изучении.
Ожидаемая ценность генетического потенциала продуктивности потомков от эмбриотрасфора'вше, чем от потомков, полученных естественном путем. Причина - в четкой более высокой селекционной ценности отцов, полученных в рамках ьмбриотрансфера. На прак-Еике, однако, превосходство в продуктивности несколько ннхо слипаемого .
Причинами 'различий могут быть: различия з пренатальном злияниа материального эффекта истинных матерей и реципиентов, ■ з различия в условиях содержания животных. Это означает, что аавотные, предназначенные для Э'Г в качестве реципиентов с ограниченной продуктивностью менее толерангкы, чем другие высо-юпродуктивные. Поэтому нельзя не дооцонизать значение общего физиологического статуса реципиентов, т.к. они являются сущео-нзенным фактором для яоелодуюдего, более позднего продуктивного потенциала.
вывода '
1. Эффективность обработки с целью синхронизации'зависит >т фазы цикла, в которую проводится обработка и функционально-'0 состояния яичников, которое определяет исходный гормональ-шй статус в крови обработанных животных.
2. Необходимо разграничение двух показаний при управлении соловым циклом - индуцирование охоты с целью осеменения мивот-!ых, индуцирование охоты с цель» получения определенного чис-а жизотных с синхронным' течением индицированного цикла, в ко-'орый их используют как доноров или реципиентов.
3, При обоих показаниях синхронизации гонадотропины, вводимые, в комплексе с простагландином, унифицируют овариальные процессы в период с 6 по 17 день цикла, что дает возможность обработку проводить фронтально. Однако при осеменении препарат гонадотропина следует вводить в начале фиксированной охоты, а при использовании животных в качестве доноров и реципиентов - через 48 часов- после введения простгландина.
• 4, Исследованиями подтверждена возможность корректировать овариальную активность в послеродовый период, что имеет большое производственно-экономическое значение^ т.к. этот биотехнический прием позволяет'значительное сокращение сервис-периода, а при возможных отклонениях в функциональной деятельности яичников и эндометрия служит как лечебно-профилактическое мероприятие.
5. Обобщающие соображения по овогене'тическому циклу приводят к выводу» что эффективность гормонального индуцирования суперовуляции в первую очередь зависит от генетической пред-расположенности, конкретное выражение которой проявляется в разМерах популяция антральных фолликулов на протяжении цикла, которые Имеют широкие пределы колебаний, как у разных, так и у одного И того же животного. Это и другие положенс ■ позволяют считать существущие дозы биорегуляторов вполне приемлемыми, а широкая вариабельность суперовуляторной реакции вполне законов--мерна. . ' ' ' . ' • "
6. Для достижения возможной эффективности гормонального воздействия необходима корректировка режима обработки в ходе процесса созревания и овуляции большого числа фолликулов в зависимости от изменений динамики гормонального фона,
7. Определением концентрации прогесторона в крови возможно - правильно оценить овариальную активность после родов; -уточнить данные клинического контроля перед синхронизацией охоты и индуцированием суперовуяяциих •
8.,Изучение динамики гормонального фона доказывает целесообразность включения в режимы обработок для получения оуперову-ляции гонадотропина или ЛГ и служат методической основой дик унификации параметров искусственного осеменения: двукратно с
интервалом 12 часов, начиная через 48 ч после введения проста-гландина.
9. Отрицательно влияет на воспроизводительную способность и следовательно и на эффективность биотехнических мероприятий стрессовое повышение температуры окружающей среда, что доказывает установленное нами состояние гормонального дисбаланса.
10. Выбракованных и проблемных коров после устранения ова-раопатологии можно эффективно использовать в качестве доноров эмбрионов,
11. Основная причина, снижающая возможность использования . коров как доноров эмбрионов после устранения различных форм овариопатологии - это неравномерная цикличность в деятельности яичников. Компенсировать этот негативный фактор можио за счет . искусственного осеменения коров, которые не подходят к исполь- ; зов шин в качестве доноров. На эту возможность указывает уста-. : новленный нами факт, что укороченные циклы отрицательно не влияют на эффективность осеменения.
12. Взаимообусловленность направления патогенеза' яичника -эндометрий - молочная железа, а также объективный трудности в , •'• диагностике (особенног,если в одном из элементов системы патологии имеет скрытый характер хронического течения) давтует необходимость обязательного введения в биотехнические методы воспроизводства элемента мвтифилактических мероприятий.
13. Только комплексная система профилактических меронрия« тий может гарантировать положительные результаты восстановления репродуктивной активности на основе применения биорогулято-ров, что доказывает элективноеть комплексной УВЧ-терапии а профилактики,
14. Данные главы 6.2.1» доказывает экономическое прешущест-20 двукратного метода синхронизация телок-при подготовке их в качестве реципиентов.
15. Для повышения эффективности эмбриопересадок необходимо всестороннее проведение лабораторных тестов потенциальных реципиентов.
16« Ценность генетического потенциала потомков, полученных методом трансплантации, в области селекционной работы выше, чем потомков, получаемых естественным методом.
1?, Превосходство генетического потенциала по.продуктивности потомков, получаемых после эмбриотрансплантации как правило, ниже ожидаемого. Причина следующая: различия в пренаталь-ном влиянии истинной матери к матери-реципиента, т.е. реципиентами являются менее ценные в генетическом отношении животные с отличительной толерантностью к условиям технологии кормления, содержания и эксплуатации, чем высокопродуктивные животные, т.е. .некоторое несоответствие физиологического статуса.
Практические предложения
1. С целью профилактики и улучшения общепринятых показателей плодовитости коровам после отела следует проводить коррекцию функциональной активности яичников введением комплекса
■ препаратов: простагландина, гонадотропина, гонадолиберина на П-й, 13—й и 15-й день после родов, соответственно.
2. При проведении биотехнических мероприятий на выбракованных и проблемных коровах в комплексе с гормональными стиму-
■.ляторами следует проводить УВЧ воздействий одновременно на эндометрий и молочную железу.
3. Выбракованных коров как доноров эмбрионов следует использовать многократно, учитывая высокий суммарный показатель за несколько извлечений.
4. При подготовке большого числа телок-рецтшентов синхронизацию прозодить простогландино.м и препаратом ФСГ гипофиаар-ного происхождения. Кивотных но подошедших под пересадки синхронизировать вторично' теми : • препаратами по мере прихода в охоту осеменять. ' . 4
Списав
основных научных работ, опубликованных по ¡заторзагзм диссертация
1. Богданов A.A., Тялугш Е.А. Продуктивность коров раз-" личных дикий чорво-аэсггрого скота // {¿злачное я кяснозгското-водстао. - 1992. - 3. - С. 27-29.
2. Хнлькеякч С.Н., Тяпугия Е.А. Экономические асзезта трансплантации эмбряояоа // Молочное п isschos скэтоводэзэо. -1Э92. - Я 5-6. - С. 16-18.
3. Хильвевач СЛ., Саыодслкзн А.Г., Тшугая В .А. Ввсчет эфренюгвностя нетодоз селекции с яс^оэдв прохргл'лшохте еокззуз:-оа // Достижения науке я техники. - 1993. -3 2. - С. 20-21.
4. Хилькезич СЛ. Сгиоделкнн ¿.Г., Тяпутан ЕЛ. Сшво-низацяя подовых циклов а ппограьгго трепсялантацяа эйрзшэз // Зоотехния, - 1993. -5 4. - С. 24-25.
5. Тяпугвн Е.А., 1аяькевлч С.Е. Босстансвленпя ргярагуг-Тевяой функции хоров // Ветеринария. - 1994. - 5 6, С. 28-32.
6. Тяпугия S.A., Хаяькевич СЛ. Роль тпанеягаагагсия заб-рионов в сатекциопной ребсто // Полочное н шгсяое скотоводство. 1394. - 4.-С. S-II.
7. Тянутая ЕЛ., Лояарев В.И. Прогаозирезаллз еря огбора _ коров—реципиентов дяя успешной яшшантацвя язбрзспоз // Сборник научных материалов. - Воронеж. - I9C4. - С. 2SI-2S2.
8. Хилькевич СЛ., Тяпугин 3.Ä., Сауоделхин А.Г., Шряеа
B.И. Горцональный профиль у коров при суперовуляцка // Доклада Российской якддвияк сельскохозяйственных наук. - ISS5. — *3. -С. 38-39.
9. Ельчаштов В.В., Тяпугин БД. Зориирозание репродуктивной функции у самцов ■ саыок сальскохозяЕственних жи*../пшх в патогенезе // Учебное пособив. - й>сква, АОЗТ "2 со сааза*. - I9S5 -7,5 усд.печ.л.
10, Сергеев Н Л., Тяпугин В.А., Лебедев В Л. - ЭЕфактав-ность применения метода трансплантация вибрионов в шштаог скотоводстве // Сб. научных трудов. Киров. - I9S5. - т. 3 -
C. 65-69.
11. Тядутан E.A., Хилькевич С.Н. Проблемы биотехнологии размножения животных // Зоотехния. - 1996. - JS 3. - 0. 26-28.
12. Тяпугин Е.А., Гавриков A.M. Метода улучшения приживляемое™ эмбрионов // Зоотехния. - 1996. - J» 5. - С. 24-26,
13. Тяпугин Е.А., Самоделкин А.Г., Калягин A.A., Гавриков A.M. Прикивляемость замороженно-оттаяшщх эмбрионов у телок о индуцированной охотой // Молочное в мяоноа скотоводство. - I9S6.
~ й 4. ~ С. 24-26. • . *
14. Тяпугин Е.А., Илозечцеа Е.П., Валковой И »И. Нетрадиционный метод лечения эндометритов у коров // Тезисы докладов 2-ой Международной научно-практической кснфаренцак» - Москва, -Ишь ISS?. - С. 185-186,
15. Тяпугин Е.А. Физический метод стимуляции сократительной функции матки у коров //. Теэаса докладов 2~оа Международной научно-практической конференции, - Москва. - Ишь 1S9?, -- С. 133-137.
16. Тотугин Е,А., Хшшкевич С.Н,, ХплькевЕЧ Н.С, Воспроизводительная' активность коров после овариопагологаи //.Зоотехния, - 1997. - Is 12, С, 22-23.
17. Тялугия Е,А,; Хилькевич СЛ., Хилькевич У,С., Хубаез Т.Е. Эффективность йояинааа при гинекологических болезнях коров // Ветеринария. - 1997, - £ 12. - С. 36-37
18. Балиоаей И.И., Иноземцев BJI.s Тялугия В.А, Лазерная терашщ в ветеринарной акушерской практика // Вагаршаркя, -1993. - й 2. - С. 33-34, ■
19. Тяпугин Е.А., АгалакоНа Т.В.. Переткова JI.B, Качесгас-зародышей у коров-доноров разных пород, возраста и состояние эндометрия // Зоотехния, - IS98. - № 6, ~ 26-28,
20. Тнпугйн Е.А., Хвлькевйч С.Н. Стимулирование овариаль-ной активности в послеродовый период // Зоотехния, - 1998, -
й 7. - С. 24-26.
- Тяпугин, Евгений Александрович
- кандидата биологических наук
- Дубровицы, 1998
- ВАК 06.02.01
- Использование гормональных регуляторов для повышения результативности искусственного осеменения
- Технологические и селекционные аспекты воспроизводительной способности коров и телок черно-пестрой породы в стаде интенсивного типа
- Регуляция функции размножения лабораторных и сельскохозяйственных животных с использованием дельтостима
- Воспроизводительная функция коров симментальской породы и ее коррекция в условиях Республики Башкортостан
- Воспроизводительная активность коров симментальской породы и ее коррекция в условиях Республики Башкортостан