Базальный уровень ионов кальция и его регуляция в волокнах постуральной мышцы крысы и монгольской песчанки в условиях гравитационной разгрузки

Алтаева, Эржена Григорьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Базальный уровень ионов кальция и его регуляция в волокнах постуральной мышцы крысы и монгольской песчанки в условиях гравитационной разгрузки
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Базальный уровень ионов кальция и его регуляция в волокнах постуральной мышцы крысы и монгольской песчанки в условиях гравитационной разгрузки"

На правах рукописи

АЛТАЕВА Эржена Григорьевна

БАЗАЛЬНЫЙ УРОВЕНЬ ИОНОВ КАЛЬЦИЯ И ЕГО РЕГУЛЯЦИЯ В

ВОЛОКНАХ ПОСТУРАЛЬНОЙ МЫШЦЫ КРЫСЫ И МОНГОЛЬСКОЙ ПЕСЧАНКИ В УСЛОВИЯХ ГРАВИТАЦИОННОЙ

РАЗГРУЗКИ

03.03.01 - физиология 03.01.02-биофизика

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 4 О'

-и'П

Москва-2011

4855746

Работа выполнена в Учреждении Российской Академии Наук Государственном научном центре Российской Федерации - Институте медико-биологических проблем Российской Академии Наук

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор Шенкман Борис Стивович

кандидат физико-математических наук Огнева Ирина Владимировна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Оганов Виктор Сумбатович доктор биологических наук, профессор Рубцов Александр Михайлович

Ведущая организация: Биолого-почвенный факультет Санкт-Петербургского государственного университета

Защита диссертации состоится «у// » /Л [> 2011 г. в часов на заседании

диссертационного совета Д 002.111.01 в Учреждении Российской Академии Наук Государственном научном центре Российской Федерации - Институте медико-биологических проблем Российской Академии Наук по адресу: 123007, Москва, Хорошевское шоссе, д. 76 а.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Российской Академии Наук Государственном научном центре Российской Федерации - Институте медико-биологических проблем Российской Академии Наук.

Автореферат разослан « » 2011г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

М.А. Левинских

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Одной из основных медицинских проблем, препятствующих длительным космическим полетам, является снижение работоспособности, в том числе в силу атрофических изменений скелетных мышц. Скелетная мышца - один из наиболее пластичных органов, способный адаптироваться к изменению условий функционирования, воздействующих как на мышцу, так и на организм в целом. Длительное снижение функциональной активности постуральных мышц, особенно, камбаловидной мышцы, в условиях снижения гравитационного стимула (пребывание в условиях невесомости, устранение опоры на все или только задние конечности, переход в горизонтальное положение), так называемой гравитационной разгрузки, приводит к глубокой структурной и функциональной перестройке мышечной ткани. Снижение функциональных характеристик скелетных мышц - одно из важнейших проявлений гипогравитационного синдрома (Oganov et al., 1976; Козловская и др., 1984; Edgerton et al., 1998; Adams et al., 2003; Shenkman, Nemirovskaya, 2008). В литературе имеются данные о снижении сократительных характеристик мышечных волокон млекопитающих (силы и работоспособности), жесткости мышцы и ее волокон (Mounier et al., 1989; 2000; Stevens et al., 1993; Widrick et al., 1999; Ogneva et al., 2009, 2010). Изменение сократительных свойств мышц связывают с уменьшением площади поперечного сечения мышечных волокон (атрофия) (Оганов и др., 1982; Riley et al., 2002) и соответствующим изменением объема миофибриллярного аппарата (Stevens et al., 1993; Kozlovskaya et al., 1996; Desplanches et al., 1997; Mounier et al., 2000; Fitts et al., 2000). Также невесомость приводит к разрастанию соединительнотканных структур (Karpakka et al., 1991; Miller et al., 2001), трансформации миозинового фенотипа волокон в сторону увеличения экспрессии быстрых изоформ тяжелых цепей миозина (Caiozzo et al., 1994; 1998; 2000; Edgerton et al., 1995; 1998), деградации ряда цитоскелетных белков (Chopard et al., 2001; Гасникова и др., 2006). В основе мышечных перестроек лежит направленное изменение экспрессии большого числа генов, формирование нового целостного, так называемого, «атрофического» паттерна экспрессии (Kandarian, Stevenson, 2002).

Эти данные позволяют предположить, что реализация «атрофической» программы осуществляется, прежде всего, на клеточном уровне - на уровне мышечных волокон. Причем, ее запуск осуществляется путем последовательной активации протеолитических систем, и в первую очередь системы кальций-зависимых протеаз - кальпаинов (Kandarian, Stevenson, 2002; Shenkman, Nemirovskaya, 2008). Активность кальпаинов отмечается уже после первых суток функциональной разгрузки (Enns, Belcastro, 2007), по всей видимости, эти изменения в условиях снижения

гравитационного стимула связаны с увеличением базального уровня ионов кальция внутри мышечных волокон (Ingalls et al., 1999,2001).

Ионы кальция имеют большое значение для скелетных мышц, так как выполняют регуляторную и сигнальную функции в клетке. Они играют важную роль в электромеханическом сопряжении, обеспечивая передачу сигнала о мышечном сокращении на миофибриллы. Однако до сих пор динамика накопления кальция в условиях разгрузки остается практически неизученной.

Помимо этого, остаются неясными механизмы поступления избыточного кальция в миоплазму мышечных волокон и его удаления в условиях разгрузки. Существуют предположения, что ионы кальция могут поступать внутрь клетки через сарколемму из межклеточного пространства посредством медленных кальциевых каналов L-типа, которые специфически блокируются нифедипином. Кроме того, показано, что их экспрессия в условиях разгрузки увеличивается (Kandarian et al., 1992). С другой стороны, большое значение имеет и механизм элиминации ионов кальция из миоплазмы мышечных волокон. Ответственной за этот процесс является кальциевая АТФаза саркоэндоплазматического ретикулума - SERCA, функционирование которой 6 условиях гипогравитации также мало изученно. Однако слаженная работа кальциевых каналов и Са2+-АТФазы саркоплазматического ретикулума обеспечивает поддержание кальциевого гомеостаза в клетке, который очень важен, так как в настоящее время увеличение внутриклеточного содержания кальция рассматривается как один из основных пусковых факторов в реакции мышечных волокон на изменение гравитационного стимула (Kandarian, Stevenson, 2002). Таким образом, исследование физиологической роли базального содержания ионов кальция в миоплазме мышечных волокон и биофизических механизмов его поступления и элиминации представляет собой актуальную задачу современной гравитационной биологии. Цель работы

Изучить динамику накопления ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы грызунов и роль базального уровня ионов кальция в активации протеолитических процессов при моделируемой гравитационной разгрузке. Задачи исследования:

1. Проследить динамику изменения уровня кальция в камбаловидной мышце на разных сроках вывешивания.

2. Проверить гипотезу о ключевой роли медленных кальциевых каналов L-типа в накоплении ионов кальция в миоплазме мышечных волокон.

3. Исследовать изоформный состав кальциевой АТФазы саркоэндоплазматического ретикулума - SERCA в волокнах камбаловидной мышцы в условиях функциональной разгрузки.

4. Изучить влияние накопления базального кальция в миоплазме волокон на активацию

кальпаиновой протеолитической системы на начальных этапах функциональной разгрузки.

5. Сравнить динамику накопления и элиминации ионов кальция в миоплазме постуральных

мышц при гравитационной разгрузке у крысы породы \Vistar и монгольской песчанки.

Научная новизна работы:

- увеличение базального содержания ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы крысы и монгольской песчанки происходит уже после первых суток гравитационной разгрузки;

- применение нифедипина, селективного блокатора медленных кальциевых каналов Ь-типа, приводит к снижению интенсивности накопления внутриклеточного содержания ионов кальция в волокнах камбаловидной мышцы крысы в условиях разгрузки;

- моделируемая разгрузка приводит к увеличению доли мышечных волокон, экспрессирующих быструю изоформу кальциевой АТФазы саркоплазматического ретикулума, на ранних сроках: у крысы после 3-х суток, у монгольской песчанки уже после первых.

- в условиях кратковременной функциональной разгрузки увеличение базального внутриклеточного содержания ионов кальция непосредственно влияет на содержание как мембранной, так и цитоплазматической фракций кальпаинов в миоплазме волокон камбаловидной мышцы крысы;

Теоретическая и практическая значимость работы

Проведенное исследование расширяет представления о физиологической роли ионов кальция, о механизмах, влияющих на изменение кальциевого гомеостаза в камбаловидной мышце млекопитающих, а именно крысы и монгольской песчанки, в условиях гравитационной разгрузки. Подобное исследование в условиях снижения гравитационного стимула имеет большое значение в решении вопроса поддержания функциональной активности скелетных мышц в условиях длительных космических полетов. Применение в данной работе селективного блокатора дигидропиридиновых кальциевых каналов позволило достоверно снизить базальное содержание ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы на ранних сроках моделируемой разгрузки. Возможно, развитие этого подхода в дальнейшем позволит найти способ для, по крайней мере, частичного предотвращения негативных последствий невесомости на функциональное состояние постуральных мышц.

Положения, выносимые на защиту:

1. Увеличение базального содержания ионов кальция в миоплазме мышечных волокон камбаловидной мышцы - один из наиболее ранних эффектов гравитационной разгрузки. Показано участие медленных кальциевые каналов L-типа в этом процессе.

2. Изменение паттерна экспрессии изоформ Са2+-АТФазы саркоэндоплазматического ретикулума вносит вклад в механизм элиминации ионов кальция из мышечного волокна в условиях разгрузки.

3. Показано влияние увеличения базального уровня ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы на активацию цистеиновых кальций-зависимых протеаз -кальпаинов in vivo на ранних сроках гравитационной разгрузки.

Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы были представлены и обсуждались на 12-м Европейском симпозиуме студентов биологов (Коимбра - Авейро, Португалия, 2008); 9-ой Конференции молодых специалистов, аспирантов и студентов, посвященных Дню космонавтики (Москва, 2010); Международном симпозиуме «Биологическая подвижность» (Пущино, 2010); 31-м Международном симпозиуме по гравитационной физиологии (Триест, Италия, 2010).

Диссертация апробирована на заседании секции Ученого совета ГНЦ РФ - ИМБП РАН «Космическая физиология и биология» (протокол № 7 от 02.11.2010 г).

По теме диссертации опубликовано 26 печатные работы. В том числе 9 статей в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Связь работы с научными программами. Работа выполнена при поддержке программы фундаментальных исследований ГНЦ РФ - ИМБП РАН, программ Отделения биологических наук РАН, грантов РФФИ 10-04-00106-а, 04-04-49044-а, 07-04-00763-а.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов, обсуждения, выводов, списка литературы. Текст диссертации изложен на 139 страницах, иллюстрирован 27 рисунками и 4 таблицами. Список литературы включает 336 источников.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследования служила камбаловидная мышца крысы породы Wistar (100 половозрелых самцов) и монгольской песчанки (Meriones unguiculatus) (73 половозрелых самца). Все эксперименты на животных были одобрены Комиссией по биомедицинской этике ГНЦ РФ -ИМБП РАН.

Методы исследования

1. Определение изменения содержания ионов кальция в одиночных мышечных волокнах проводили в день взятия биоматериала. Выделенную камбаловидную мышцу помещали в раствор Рингера на 40 минут, затем препараты фиксировали, инкубируя целую мышцу в растворе R (Stevens et al., 1993) смешанном в соотношении 1:1 с 4%-ным раствором формалина. После отмывки от формалина выделяли единичные мышечные волокна, которые окрашивали флуоресцентным кальциевым зондом Fluo-4AM (Molecular Probes, США). Уровень содержания кальция оценивали по интенсивности флуоресценции, которую фиксировали с помощью флуоресцентного микроскопа Leica (Германия).

2. Определение доли мышечных волокон, экспрессирующих быструю и медленную изоформы Ca1*-А ТФазы саркоплазматического ретикулума (SERCA). Поперечные криостатные срезы толщиной 10 мкм окрашивали моноклональными антителами против быстрой и медленной изоформ SERCA I и II (Sigma и Novocastra Laboratories, США) по стандартной методике. Для проявления использовали вторичные поликлональные антитела конъюгированные с флуоресцина изотиоцинатом (FITC) (Sigma, США). Подсчитывали количество волокон, окрашенных SERCA I или SERCA II, к общему количеству волокон на срезе, таким образом подсчитывали процентную долю волокон, экспрессирующих быструю или медленную изоформу Са2+-АТФазы саркоплазматического ретикулума.

3. Определение доли волокон, экспрессирующих медленную и быструю изоформы тяжелых цепей миозина (ТЦМ). Поперечные криостатные срезы мышечной ткани толщиной 10 мкм окрашивали первичными моноклональными антителами против медленной и быстрой изоформ тяжелых цепей миозина (Novocastra Laboratories, США) по стандартной методике. Для проявления использовали вторичные поликлональные антитела конъюгированные с FITC (Sigma, США). Подсчитывали отношение окрашенных волокон к общему количеству волокон на срезе, тем самым, определяя процентную долю волокон, экспрессирующих медленную или быструю изоформу ТЦМ.

4. Оценку площади поперечного сечения (ППС) мышечных волокон проводили на поперечных криостаных срезах, окрашенных антителами против медленных и быстрых миозинов. Чтобы определить ППС медленных мышечных волокон измеряли площадь неокрашенных волокон на срезах, окрашенных антителами против быстрой изоформы ТЦМ, и, наоборот, для определения ППС быстрых мышечных волокон. В среднем анализировали 100 волокон с каждого среза.

5. Определение активности кальпаинов в камбалоеидной мышце проводили в соответствии с методом Enns, Beicastro (2006). Образцы скелетных мышц гомогенизировали, выделяли цитоплазматическую и мембраносвязанную фракции белка. Активность кальпаинов определяли спектрофотометрически на приборе СФ 2000 (ЗАО «ОКБ-Спектр», Россия), используя

в качестве субстрата щелочно-денатурированный казеин. Из каждой пробы отбирали аликвоты, в которых определяли остаточное содержание белка по методу Брэдфорд (1976). Активность кальпаинов измеряли при длине волны 595 нм. Для растворимой и мембраносвязанной фракций активность кальпаинов выражали как относительный прирост по сравнению с контрольным значением для каждой фракции.

Статистическая обработка результатов проведена с использованием пакета математического анализа MS Excel. Оценку значимости различия средних значений показателя в независимых выборках проводили по t-критерию Стьюдента. Различие средних значений показателя в сравниваемых выборках считали достоверным при уровне значимости р20.05. Результаты представлены в виде М±ш, где М - среднее значение, ш - ошибка среднего значения.

Организация экспериментов

1. Антиортостатическое вывешивание животных проводили согласно стандартной модели Ильина-Новикова (1981) в модификации Morey-Holton (2002).

2. Динамика накопления ионов кальция в камбаловидной мышце крысы и монгольской песчанки на разных этапах гравитационной разгрузки. В первой серии эксперимента участвовали 40 половозрелых самцов крысы породы Wistar массой 180-220 г. Животные были разделены на 5 групп: группа №1 - «Контроль» (К), группа №2 - «Вывешивание 1 сутки» (1HS), группа №3 - «Вывешивание 3 суток» (3HS), группа №4 - «Вывешивание 7 суток» (7HS), группа №5 - «Вывешивание 12 суток» (12HS). Во второй серии участвовали 40 половозрелых самцов монгольской песчанки массой 40-50 г, которые аналогично были поделены на 5 групп. Животные групп «Контроль» находились в течение всего эксперимента в обычных виварных условиях. Взятие биоматериала осуществляли под нембуталовым наркозом (10 мг/кг веса животного), усыпление животных - с помощью внутрибрюшинного введения летальной дозы нембутала (120 мг/кг веса животного). В этом эксперименте оценивали динамику изменения базального содержания кальция в миоплазме т. soleus вывешенных животных, изменение соотношения изоформ кальциевой помпы, трансформацию миозинового фенотипа и изменение площади поперечного сечения мышечных волокон.

3. Организация космического эксперимента на борту биоспутника «ФОТОН- М №3». В 2007 году на борту биоспутника «ФОТОН-М №3» 12 самцов монгольской песчанки на протяжении 12 суток находились в условиях воздействия реальной гравитационной разгрузки. Животные содержались в специализированном модуле малого объема «Контур» с автономной системой жизнеобеспечения. Параллельно с этим в виварных условиях находилась контрольная группа животных. Взятие биологического материала проводили через сутки после приземления

биоспутника. В камбаловидной мышце анализировали уровень накопления ионов кальция, трансформацию фенотипов SERCA и ТЦМ, также оценивали степень атрофии мышечных волокон.

4. Динамика накопления ионов кальция в камбаловидной мышце крысы на фоне системного введения нифедипина. Исследование мышечной ткани в рамках данного эксперимента проводилось у 32 половозрелых самцов крысы, произвольным образом разделенных на 4 группы: «Контроль» (К); «Контроль + нифедипин» (KN); «Вывешивание 1 сутки + нифедипин» (1HSN); «Вывешивание 3 суток +нифедипин» (3HSN). Нифедипин животным вводили перорально из расчета 10 мг/кг веса животного (Feng, Yu, 2005). Введение препарата начали за 7 дней до вывешивания и продолжали вводить в течение всего срока разгрузки ежедневно.

5. Локальная доставка кальций-связывающего агента ВАРТА-АМ и нифедипина. В соответствии с методикой Vrbova (1995) были изготовлены из силиконового геля (3140RTV, Dow Corning, США) имплантаты, которые затем в стерильных условиях были введены под камбаловидную мышцу. В этом исследовании использовали 28 самцов крысы породы Wistar, которых случайным образом разделили на 4 группы: «Контроль (К)»; «Вывешивание 3 суток» (HS); «Вывешивание 3 суток с нифедипином» (HSN); «Вывешивание 3 суток с ВАРТА-АМ» (HSB). В пробах мышечной ткали анализировали уровень ионов кальция и активность кальпаинов цитоплазматической и мембрансвязанной фракций по методу Enns, Belcastro (2006).

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Динамика базального содержания ионов кальция в миоплазме камбаловидной мышцы на разных сроках гравитационной разгрузки. На изолированных единичных волокнах камбаловидной мышцы крысы и песчанок с помощью флуоресцентного зонда F!uo-4AM (Molecular Probes, США) нами было показано увеличение базального содержания кальция.

Согласно полученным результатам увеличение уровня ионов кальция в миоплазме камбаловидной мышцы крысы происходило уже после суток антиортостатического вывешивания в 2.8 раза по сравнению с контрольным значением. Высокое содержание кальция сохранялось на протяжении трех суток, после чего начинало постепенно снижаться, но уровня контроля к 12-м суткам не достигало (рис.1).

Рис.1. Динамика изменения уровня ионов кальция в камбаловидной мышце крысы на разных сроках гравитационной разгрузки * - достоверные отличия от группы «Контроль», (р<0.05) & - достоверные отличия от группы «Вывешивание 1 сутки» (р<0.05)

Эти результаты согласуются с ранее опубликованными данными ЬщаНв и соавторов (1999, 2001), которые в аналогичных экспериментах показали увеличение концентрации кальция у мышей после двух суток вывешивания.

В 2007 году после миссии аппарата «ФОТОН-М №3» новым объектом гравитационной физиологии стала монгольская песчанка. На борту биоспутника был проведен уникальный космический эксперимент с 12-суточным экспонированием этих животных.

В результате этого эксперимента не было обнаружено достоверных отличий в содержании ионов кальция в волокнах т. яокт животных, подвергавшихся воздействию микрогравитации, относительно животных контрольной группы (рис.2).

=г 6 И

0 5

1 . « II 3

Б ^ 2

0 *•

1 1 I О

Рис.2. Базальный уровень кальция в миоплазме камбаловидной мышцы монгольской песчанки после 12-ти суточного космического полета.

контроль полет

экспериментальные группы

В литературных источниках нет информации о том, что происходит с базальным уровнем ионов кальция в волокнах скелетных мышц песчанки в условиях гипогравитации. Поэтому сделать однозначные выводы, касаемые изменения этого показателя у песчанки, весьма проблематично: с одной стороны, возможно, что к этому моменту еще ничего не изменилось в системе, но с другой -возможен вариант более ранних изменений, которые к моменту взятия биоматериала были уже незначимы. Чтобы решить этот вопрос нами был проведен эксперимент в лабораторных условиях, в котором песчанки подвергались антиортостатическому вывешиванию. В результате

проведенного эксперимента нами было установлено, что увеличение базального уровня ионов кальция в 4.5 раза относительно контроля у песчанки, так же как и у крысы, произошло уже после первых суток инактивации (рис.3).

Рис.3. Динамика

изменения уровня ионов кальция в камбаловидной мышце монгольской

песчанки на разных сроках гравитационной разгрузки * - достоверные отличия от группы «Контроль»,

(р<0.05)

& - достоверные отличия от группы «Вывешивание 1 сутки», (р<0.05)

Высокий уровень ионов кальция в миоплазме т. ю/еш сохранялся в течение трех суток, после чего он снижался, но не достигал значений контрольной группы. Некоторые расхождения наземного эксперимента с результатами полетного эксперимента могут быть обусловлены тем, что забор материала происходил только через сутки после приземления. Кроме того, условия содержания песчанок на борту «ФОТОН-М №3» были более стесненными, нежели при стандартном антиортостатическом вывешивании. Тем не менее, учитывая тенденцию к существенному снижению содержания ионов кальция в волокнах камбаловидной мышцы песчанок после 12-суточного вывешивания и отсутствие достоверных отличий после космического полета * можно полагать, что восстановление этого параметра у песчанки происходит быстрее, чем у крысы. Последнее может быть связано с особенностями водно-солевого обмена, характерными для монгольской песчанки, в частности, практически полной реабсорбцией воды в почках и, как следствие, повышенной осмолярностью внутренних сред.

Опираясь на полученные данные, можно сделать заключение о том, что динамика изменения уровня ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы сходна для крысы и песчанки, но у песчанки этот процесс имеет более интенсивный характер.

Механизм накопления и элиминации ионов кальция остается малоизученным. Существуют предположения, что увеличение базального уровня кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы в условиях отсутствия гравитации возможно за счет его поступления через наружные кальциевые каналы Ь-типа (Капс1апап е1 а1., 1992). Последующее снижение концентрации ионов кальция в миоплазме мышечных волокон во время разгрузки может быть обусловлено изменением

скорости работы систем электромеханического сопряжения, в частности, системы элиминации кальция - кальциевой АТФазы саркоплазматического ретикулума.

Роль медленных кальциевых каналов Ь-типа в накоплении ионов кальция в миоплазмс постуральных мышц в условиях гипогравитации. Одним из возможных путей поступления ионов кальция в миоплазму т. эо1еш может быть их поступление из внеклеточного пространства через медленные кальциевые каналы Ь-типа (дигидропиридиновые рецепторы). Проведенный нами трехсуточный эксперимент с использованием крыс в качестве объекта исследования с введением нифедипина, блокатора дигидропиридиновых каналов, показал, что его применение снижало уровень ионов кальция в миоплазме камбаповидной мышцы в условиях антиортостатического вывешивания. Так, после суток вывешивания на фоне нифедипина не происходило увеличения содержания базального уровня кальция, по сравнению с вывешиванием без нифедипина, где имело место увеличение в 2.8 раз относительно контроля. Достоверное увеличение уровня ионов кальция отмечалось после трех суток и всего в 1.5 раза (рис.4).

Рис.4. Динамика изменения уровня ионов кальция в камбаловидной мышце крысы на ранних сроках гравитационной разгрузки на фоне перорального применения нифедипина * - достоверные отличия от группы контроль (р<0.05) & - достоверные отличия от группы «Контроль с нифедипином», (р<0.05)

Таким образом, можно сделать предположение о том, что дигидропиридиновые каналы вносят существенный вклад в поступление ионов кальция из внеклеточного пространства в миоплазму волокон при разгрузке.

Тем не менее, механизм, обеспечивающий поступление ионов кальция в волокно в условиях отсутствия гравитационной нагрузки, до сих пор остается неясным, хотя некоторую роль дигидропиридиновых каналов можно считать доказанной. Возможно, результаты исследования процессов, протекающих в мембране мышечного волокна при разгрузке, могут внести значительный вклад в понимание механизмов работы кальциевых каналов. Ранее было показано, что после трех суток вывешивания отмечается деполяризация мембраны мышечных волокон (Кривой и др., 2008), снижение потенциала происходит за счет уменьшения элекгрогенного вклада Ыа-К-АТФазы. Снижение мембранного потенциала покоя на ранних сроках гравитационной разгрузки позволяет предположить, что проницаемость сарколеммы для ионов кальция увеличивается. Известно, что медленные кальциевые каналы Ь-типа потенциал-зависимые

контроль ШЭ ЗН£

продолжительность эксперимента, сутки

—< "без нифедипина —нифедипин

(Нойпапп е! а1., 1999), поэтому снижение МПП при разгрузке может привести к активации хотя бы части из них (СайегаП \У., 1995; Кривой И. и др., 2008), а также к увеличению проницаемости сарколеммы для ионов кальция. С другой стороны было показано увеличение экспрессии дигидропиридиновых каналов в условиях функциональной разгрузки (Капс1апап е! а1., 1992).

Однако при подобном способе введения препарата сложно отделить влияние системного эффекта на результаты эксперимента. Для выявления местного эффекта был поставлен эксперимент, в котором доставка нифедипина осуществлялась локально, непосредственно к камбаловидной мышце. Полученные данные свидетельствовали о том, что у животных групп «Вывешивание + нифедипин» и «Вывешивание + ВАРТА-АМ» уровень ионов кальция внутри волокон камбаловидной мышцы снизился примерно в 1.4 раза по сравнению с группой «Вывешивание» (рис.5). Раньше было показано, что внутрибрюшинное введение таких хелаторов кальция как ЭГТА и ЭДТА также снижало увеличение ионов кальция в миоплазме т. эокиз при 14-суточной разгрузке (ЗЬепкшап е! а1., 2002; Литвинова, 2005).

Рис.5. Динамика изменения уровня ионов кальция в условиях кратковременной разгрузки

*- достоверные отличия от группы «Контроль», (р<0.05) &-достоверные отличия от группы «Вывешивание», (р<0.05)

Таким образом, наши данные свидетельствуют, что медленные кальциевые каналы Ь-типа играют немаловажную роль в процессах накопления базального уровня ионов кальция в миоплазме камбаловидной мышцы.

Механизм элиминации избыточного количества ионов кальция из миоплазмы в саркоплазматический ретикулум с помощью работы кальциевой АТФазы саркоплазматического ретикулума - вЕЯСА в условиях гравитационной разгрузки.

В условиях функциональной инактивации наряду со значимостью механизма поступления ионов кальция, не менее важным является механизм его элиминации. В связи с этим в микрогравитационной среде существенное значение имеет работа кальциевой АТФазы саркоплазматического ретикулума.

В нашей работе показано, что в условиях разгрузки происходила трансформация изоформ кальциевой АТФазы в быструю сторону. Так, у крысы уже после трех суток вывешивания

относительно контрольного уровня происходило достоверное увеличение на 10% доли волокон, экспрессирующих быструю изоформу БЕЯСА (рис.6).

Рис. 6. Процентное соотношение волокон, экспрессирующих

быструю и медленную изоформы кальциевой АТФазы СР в т.^о/ещ крысы

'-достоверные отличия от группы «Контроль», (р<0.05)

Ранее в условиях антиортостатического вывешивания у крысы было показано увеличение экспрессии мРНК быстрой изоформы кальциевого насоса CP (Peters et al., 1999, Mitchell-Felton et al., 2000). Ранее было показано увеличение доли волокон, экспрессирующих быструю SERCA I в образцах мышечной ткани двух космонавтов, пребывавших в условиях невесомости 180 суток (Литвинова, 2005). В нашем эксперименте количество волокон, содержащих медленную изоформу SERCA, снизилось на 7% после трех суток вывешивания. При этом увеличилась доля волокон, содержащих одновременно и быструю и медленную изоформы кальциевой помпы СР. По данным Литвиновой (2005) в мышечных образцах, взятых у космонавтов, после пребывания в условиях длительного космического полета, также происходило уменьшение доли волокон, экспрессирующих медленную изоформу кальциевого насоса СР.

У монгольской песчанки изменение паттерна экспрессии изоформ Са2+-АТФазы происходило

Рис. 7. Процентное соотношение волокон, экспрессирующих

«быструю» и «медленную» изоформы кальциевой АТФазы СР в т.$о1ет песчанки ♦-достоверные отличия от группы «Контроль», (р<0.05)

уже через сутки антиортостатического вывешивания (рис.7).

1HS 3HS 7HS

экспериментальные группы и"/.SERCAI о% SERCA IISERCA 11 BV.SERCA11

После первых суток доля волокон, содержащих быструю изоформу увеличивалась на 10%, максимальное увеличение на 17% отмечалось после третьих суток. Далее, в течение более длительного срока вывешивания количество волокон, экспрессирующих быструю SERCA, оставалось высоким. Параллельно с этим происходило уменьшение количества волокон, экспрессирующих медленную изоформу кальциевой помпы на 8%, после первых суток и на 16% после третьих суток. Однако к 12-суткам разгрузки происходит возвращение к уровню контроля.

Также во время вывешивания происходило увеличение доли волокон, которые экспрессируют и быструю и медленную изоформы.

В эксперименте, проводимом на борту биоспутника «ФОТОН-М №3», где песчанки экспонировались в условиях реальной невесомости на протяжении 12 суток, нами были получены достоверные изменения в процентном соотношении волокон, содержащих быструю изоформу кальциевого насоса саркоплазматического ретикулума (рис.8).

60% 40% 20% 0%

Рис.8.Процентное соотношение волокон,

экспрессирующих быструю и медленную изоформы БЕЯСА у песчанок в условиях космического полета * - достоверные отличия от группы «Контроль», (р<0.05)

контроль полет

а ЭЕИСА 1тилз о ЭЕЯСА Итилов ивЕИСА Птица

В эксперименте с участием крыс, которым перорально вводили нифедипин, также отмечалось увеличение количества волокон, экспрессирующих БЕЯСА I, после трех суток разгрузки, несмотря на то, что накопление ионов кальция в миоплазме т. ¡о1еш было менее интенсивно, чем в эксперименте с чистым вывешиванием (рис.9). Возможно, что экспрессия БЕЯСА чувствительна к снижению сократительной активности мышцы и снижение гравитационной нагрузки приводит к перераспределению экспрессии изоформ кальциевой помпы уже на ранних этапах микрогравитации.

Рис.9. Процентное

соотношение волокон, экспрессирующих быструю и медленную изоформу 8ЕЯСА, у крысы при разгрузке на фоне нифедипина

* - достоверные отличия от нруппы «Контроль»,

р<0.05

Влияние кальций-связывагощего агента ВАРТА-АМ па активации кальианновой протеолитической системы на раннем этапе функциональной разгрузки. В условиях разгрузки наблюдается активация различных протеолитических систем, одной из первых активируется

кальпаиновая протеолитическая система (Еппэ, ВеказЦо, 2006). Согласно нашим результатам, активация капьпаинов отмечалась после трех суток вывешивания. Отмечалось увеличение активности цитоплазматической фракции в 2 раза и в 4 раза - мембраносвязанной фракции у вывешенных крыс по сравнению с контрольными (рис.10).

растворимая фракция

600

■g 500

| 400

ш 300 ¿

Й 200

100

мембраносвязанная фракция

Рис.10. Содержание капьпаинов в цитоплазматической и

мембраносвязанной фракциях в камбаловидной мышце при краткосрочной разгрузке

* - достоверные отличия от группы «Контроль», р<0.05

# - достоверные отличия от группы «Вывешивание», (р<0.05)

Существуют предположения, что при разгрузке запуск кальпаинов (кальций-зависимых ферментов) непосредственно связан с увеличением концентрации ионов кальция в миоплазме мышечных волокон, однако данных, напрямую подтверждающих это, нет. Целью эксперимента с хелатором кальция ВАРТА-АМ была проверка гипотезы о том, что увеличение концентрации ионов кальция в условиях снижения гравитационной нагрузки непосредственно влияет на активность кальпаинов. Нами были получены данные, свидетельствующие о том, что действительно количество ионов кальция в миоплазме мышечных волокон является триггерным механизмом для активации кальпаинов. У животных группы «Вывешивание + ВАРТА-АМ» происходило не только снижение уровня ионов кальция в миоплазме мышечных волокон, но и уменьшение активности мембраносвязанной фракции кальпаинов в 2 раза, а цитоплазматической фракции до контрольного уровня, по сравнению с животными группы «Вывешивание». Таким образом, in vivo было показано, что увеличение содержания кальция напрямую влияет на активацию кальпаиновой протеолитической системы.

Изменение миозинового профиля в условиях гравитационной разгрузки. Согласно результатам экспериментов, у крысы достоверные изменения трансформации миозинового фенотипа в сторону увеличения доли волокон, экспрессирующих быструю изоформу, происходили после 12 суток вывешивания (рис.11), что согласуется с более ранними экспериментальными данными (Booth, Kelso, 1973; Desplanches et al., 1990; Caiozzo et al., 1996),

л___Е!

Ш|| :

J__[

ЗНЭ 7НЭ

экспериментальные группы

0% МНС I □ % МНС 1/МНС II ■% МНС II

Рис. 11.Процентное соотношение волокон, экспрессирующих быструю и медленную изоформы тяжелых цепей миозина в т. зо1еш крысы

* - достоверные отличия от группы «Контроль», (р<0.05)

Однако у монгольской песчанки после 12-ти суток реального космического полета достоверных изменений сдвига миозинового профиля в быструю сторону не было обнаружено (рис.12). Объяснение этого явления было найдено в эксперименте с вывешиванием песчанки: изменение экспрессии изоформ тяжелых цепей миозина у этих животных происходило значительно раньше, чем у крысы (рис.13). Уже после трех суток вывешивания у песчанки наблюдалось уменьшение количества волокон, содержащих медленную изоформу миозина, на 12 % по сравнению с контрольным значением, в то же время происходило увеличение доли волокон с быстрой изоформой миозина на 14%. Однако процентное отношение медленных волокон уже к седьмым суткам возвращалось к контрольному значению.

70% 60% 50% 40% 30% 20% 10%

Я Щ-Щ в в

Рис. 12.Процентное соотношение волокон, содержащих быструю и медленную изоформы тяжелых цепей миозина в т. $о!ет песчанки

Рис. 13.Процентное соотношение волокон,

экспрессирующих быструю и медленную изоформы тяжелых цепей миозина в т. 5о1еш песчанки '-достоверные отличия от группы «Контроль», (р<0.05)

В настоящее время достоверное неизвестно, активация какого сигнального пути приводит к изменению экспрессии изоформ ТЦМ при снижении двигательной активности. Вероятно, что одним из стимулов активации сигнального механизма служит изменение концентрации кальция в миоплазме мышечного волокна, это подтверждается в эксперименте с вывешиванием крыс на фоне нифедипина в течение 14 суток. Было показано предотвращение трансформации мышечных

волокон т. soleus в быструю сторону и снижение экспрессии мРНК тяжелых цепей миозина быстрого типа (Мухина и др, 2006; Feng et al., 2005).

В условиях функциональной разгрузки наряду с трансформацией миозинового фенотипа мышечных волокон в быструю сторону происходила атрофия скелетных мышц. Уменьшение площади поперечного сечения (ППС) наблюдалось и в медленных и в быстрых мышечных волокнах (табл.1). У крысы достоверное снижение площади поперечного сечения волокон медленного (I) типа отмечалось после трех суток вывешивания. Уменьшение ППС мышечных волокон быстрого (II) типа происходило после седьмых суток. У монгольской песчанки изменение ППС волокон I типа происходило к третьим суткам вывешивания, что интересно у песчанок происходило увеличение площади поперечного сечения к седьмым суткам разгрузки по сравнению с контролем и возвращение этого показателя к контрольному уровню после 12 суток. ППС быстрых волокон на протяжении всего эксперимента не менялась, однако на седьмые сутки также наблюдалось некоторое ее увеличение по сравнению с площадью поперечного сечения у контрольных животных.

Таблица № 1

Площадь поперечного сечения (ППС) мышечных волокон медленного и быстрого типов

контроль 1HS 3HS 7HS 12 HS

КРЫСА

ППС MB медленного типа (мкм2) 1611±62 1529±71 1347±26* 1237±47» 977±54*

ППС MB быстрого типа (мкм2) 1274±65 1193±49 1162±43 1053±39» 866±73*

МОНГОЛЬСКАЯ ПЕСЧАНКА

ППС MB медленного типа (мкм2) 1090±61 996±25 923±42* 1283±39* 1073±37

ППС MB быстрого типа (мкм2) 864±52 863±36 828±54 971±49 892±33

* - достоверные отличия от группы «Контроль», р<0.05

Таким образом, данные, полученные при исследовании камбаловидной мышцы песчанки, свидетельствуют о том, что гипогравитационные эффекты у этих животных проявляются интенсивнее, чем у крысы. При этом изменение уровня электромиографической активности в условиях гравитационной разгрузки было одинаковым для крысы и песчанки, что обеспечивала стандартизация условий антиортостатического вывешивания задних конечностей и одинаковый выбор исследуемой мышцы - камбаловидная. Тем не менее, накопление избыточного кальция у монгольской песчанки протекает более интенсивно, нежели у крысы. Также у песчанки по

сравнению с крысой отмечается более ранняя трансформация изоформного состава мышечных волокон в быструю сторону. Возможно, это связано с большим градиентом изменения концентрации ионов кальция в волокнах т. ¿окм монгольской песчанки относительно крысы, в связи с измененным водно-солевым балансом, что приводит к более ранней активации факторов, обусловливающих экспрессию быстрой изоформы кальциевого насоса и ТЦМ. Постепенное снижение концентрации кальция в миоплазме мышечных волокон приводит к уменьшению градиента и динамике в сторону контрольного уровня. Тем не менее, полной элиминации ионов кальция из миоплазмы камбаловидной мышцы не происходит. Это может быть связано с уменьшением уровня экспрессии БЕЯСЛ, с недостатком АТФ, возможно вызванным уменьшением числа митохондрий или снижением их АТФ-синтезирующей функции. Также возможно постоянное поступление ионов кальция в мышечное волокно на протяжении всего периода разгрузки. Остается неясным ответ на вопрос, достаточно ли имеющегося уровня кальция в миоплазме волокон через 12 суток разгрузки для постоянной активации протеолитических систем или же атрофические изменения достигли своего предела и образовавшийся ионный состав адаптирован к разгрузке.

ВЫВОДЫ

1. При моделируемой гравитационной разгрузке происходит увеличение базалыюго содержания ионов кальция в миоплазме мышечных волокон камбаловидной мышцы крысы и песчанки уже в первые сутки. При этом тенденция к снижению базального содержания ионов кальция у крысы наблюдается к 12-м суткам моделируемой разгрузки, а у монгольской песчанки -к 7-м суткам.

2. Применение селективного блокатора медленных кальциевых каналов Ь-типа -нифедипина на фоне функциональной разгрузки приводит к достоверному снижению интенсивности накопления внутриволоконного кальция в камбаловидной мышце крысы, как при пероральном, так и при локальном введении.

3. Антиортостатическое вывешивание задних конечностей крысы и песчанки приводит к изменению изоформного состава Са2+-АТФазы саркоэндоплазматического ретикулума в сторону увеличения доли волокон, экспрессирующих быструю изоформу.

4. Локальное применение внутриклеточного кальций-связывающего агента ВАРТА-АМ приводит к достоверному снижению базального содержания ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы крыс при краткосрочной разгрузке и достоверно снижает содержание кальпаинов, как мембраносвязанной, так и цитоплазматической фракций.

5. Динамика накопления и элиминации ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы в целом у крысы и монгольской песчанки схожи, однако, у песчанки эти явления имеют более выраженный характер.

Благодарности. Автор искренне признателен всем сотрудникам лаборатории миологии, способствовавших выполнению данной диссертационной работы, особенно Е.В. Пономаревой, В.А. Курушину; коллективу Института медико-биологических наук РАН и предприятия «Прогресс», обеспечивших проведение космического эксперимента на борту биоспутника «ФОТОН-М №3»; сотрудникам, JI.A. Лысенко и Н.П. Канцеровой, и заведующему, H.H. Немовой, лаборатории экологической биохимии Института биологии КАР НЦ. Особую благодарность автор выражает руководителям - д.б.н., проф. Шенкману Б.С. и к.ф.-м.н. Огневой И.В.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи, опубликованные в журналах рекомендованных ВАК РФ

1. Роль кальциевых каналов L-типа в накоплении Са2+ в волокнах m. soleus крысы и изменении соотношения изоформ миозина и SERCA при гравитационной разгрузке / Мухина A.M., Алтаева Э.Г., Немировская Т.Л., Шенкман Б.С. // Росс. Физиол. журнал. -2006. - Т. 92. -№ 11. -С.1285-1295.

2. Сократительные свойства изолированной musculus soleus и ее скинированных волокон на ранних этапах гравитационной разгрузки: факты и гипотезы / Пономарева Е.В., Кравцова

B.В., Качаева Е.В., Алтаева Э.Г., Вихлянцев И.М., Подлубная З.А., Кривой И.И., Шенкман Б.С. //Биофизика,-2008. -Т.53.-№ 6. - С. 1087-1094.

3. Снижение электрогенного вклада Na-K-АТФ-азы и мембранного потенциала покоя как возможный механизм накопления ионов кальция в волокнах m.soleus крысы при кратковременной гравитационной разгрузке / Кривой И.И., Кравцова В.В., Алтаева Э.Г., Кубасов И.В., Прокофьев A.B., Драбкина Т.М., Никольский Е.Е., Шенкман Б.С. // Биофизика. - 2008. - Т. 53. -№ 6. - С.1051-1057.

4. Effect of short-time gravitational unloading on rat and Mongolian gerbil muscles / Ogneva I.V., Kurushin V.A., Altaeva E.G., Ponomareva E.V., Shenkman B.S. // J. Muscle Res. Cell Mot. -2009.-V. 30.-P.261-265.

5. Электрогенная активность Ыа-К-АТФазы и содержание ионов кальция в волокнах т. soleus крысы и монгольской песчанки при моделировании гравитационной разгрузки / Кравцова В.В., Огнева И.В., Алтаева Э.Г., Разговорова И.А., Тяпкина О.В., Никольский Е.Е., Шенкман Б.С., Кривой И.И. // Авикосм. и экол. медицина. - 2010. - Т.44. - № 2. -

C.35-44.

6. Базальный уровень кальция в волокнах камбаловидной мышцы крысы при гравитационной разгрузке. Механизмы его увеличения и роль в активации кальпаинов / Алтаева Э.Г., Лысенко Л.А., Канцерова Н.П., Немова H.H., Шенкман Б.С. // Доклады академии наук.-2010. -Т. 433. -№1. - С.138-141.

7. Динамика накопления ионов кальция и изменения изоформ Са-АТФазы саркоэндоплазматического ретикулума (SERCA) в волокнах камбаловидной мышцы крысы и монгольской песчанки в ходе моделирования гравитационной разгрузки различной длительности / Алтаева Э.Г., Огнева И.В., Шенкман Б.С. // Цитология. - 2010. -Т. 59. - № 9. - С.770-775.

8. Влияние нифедипина на механические свойства сарколеммы и модуляция динамики накопления ионов кальция в волокнах камбаловидной мышцы крысы в условиях кратковременной гравитационной разгрузки / Огнева И.В., Алтаева Э.Г. // Биофизика. -2010.-Т. 55. -№ 5.-С.918-925.

9. Сравнительный анализ структурно-функциональных характеристик камбаловидной мышцы крысы и монгольской песчанки в условиях гравитационной разгрузки различной длительности / Огнева И.В., Курушин В.А., Глашев М.М., Михайлова М.М., Пономарева Е.В., Алтаева Э.Г., Кривой И.И., Шенкман Б.С. // Биофизика. - 2010. - Т. 55. - №6. -С.1117-1123.

Публикации в материалах конференций

1. Effects of intracellular calcium decrease by nifedipine administration on myosine heavy chain and serca transformation in m.soleus under hindlimb unloading in rats / Mukhina A.M., Altaeva E.G., Nemirovskaya T.L., Shenkman B.S. // International symposium «Biological motility». -Pushchino,2006.-P. 129.

2. Resting intracellular calcium level as a triggering signal for soleus fiber alterations during unloading / B.S. Shenkman B.S., Mukhina A.M., Litvinova K.S., Altaeva E.G., Nemirovskaya T.L. // J. Gravit. Physiol. - 2006. - V. 13. - № 1 - P.73-74.

3. Dystrophin in unloaded and strained slow muscle. Does it affect fiber atrophy and membrane permeability / Shenkman B.S., Gasnikova N.M., Tarakina M.V., Altaeva E.G., Turtikova O.V., Litvinova K.S. // Biochemistry of Exercise, 13th International Conference - Seul, 2006 - P. 3839.

4. Functional alterations of single muscle fibers of m. soleus at the early stage of unloading / E. Kachaeva, E. Ponomareva, E. Altaeva, B. Shenkman // J. Muscle Res. Cell Motil. - 2007. -V.28. -P.105

5. Cellular mechanisms involved in the soleus fiber alterations during gravitational unloading / Turtikova O., Shenkman В., Altaeva E., E. Kachaeva В., Tarakina M., Nikolsky E., Nemirovskaya T. // J. Muscle Res. Cell Motil. - 2007. - V.28. - P.472.

6. Alterations in basal myoplasmic calcium level in rat soleus muscle, effects of short-term gravitational unloading / Altaeva E.G. // The 12th annual symposium for biology students of Europe. - Coimbra-Aveiro. - 2008. - P.5

7. Early adaptations in rat soleus under simulated gravitational unloading (contractility and cytoskeletal proteins) / Ponomareva E.V., Kachaeva E.V., Altaeva E.G., Vikhlyantsev I.M., Podlubnaya Z.A., Shenkman B.S. // Journal of gravitational physiology - 2008. - V. 15. - P.I

8. The fiber contractility and cytoskeleton losses after 3-day hindlimb unloading / Ponomareva E., Vikhlyantsev I., Podlubnaya Z., Altaeva E„ Kachaeva E. // J. Muscle Res. Cell Motil. - 2008. -P.132.

9. Changes of transverse stiffness, contractile properties and resting calcium level in myofibres of postural muscles in Mongolian gerbils after 12-day simulated gravitational unloading / Ogneva I.V., Kurushin V.A., Ponomareva E.V., Altaeva E.G., Shenkman B.S. // 30th Annual International Gravitational Meeting. - Xian, China. - 2009. - P. 105.

10. Regulation of calpain activities and ubiquitin-ligase expression in rat soleus during hindlimb unloading / Shenkman B.S., Kachaeva E.V., Altaeva E.G., Lysenko L.A., Kantserova N.P., Nemova N.N. // 14th International Conference Biochemistry of Exercise. - Guelph. - 2009. -P.74.

11. Electrophysiological and contractile characteristics of rat and mongolian gerbil soleus muscle after hindlimb unloading / Krivoi 1.1., Kravtsova V.V., Razgovorova I.A., Mikhailova E.V., Glashev M.M., Altaeva E.G., Ogneva I.V., Shenkman B.S. // 17th IAA Humans in space Symposium. Book of abstracts. - 2009. - Moscow. - P. 73.

12. Signaling mechanisms, involved in the regulation of proteolysis in rat soleus during gravitational unloading / Shenkman B.S., Kachaeva E.V., Altaeva E.G., Bondareva L.A., Kantserova N.P.,

Nemova N.N. // 17th LAA Humans in space Symposium. Book of abstracts. - 2009. - Moscow. P.118.

13. The state of two main proteolytic systems in the model of postural muscle disuse / Kachaeva E.V., Lysenko L.A., Altaeva E.G., Shenkman B.S. // J. Muscle Res. Cell Motil. 38th Eur. Muscle Conf.-Lille.-2009.-P.53.

14. Effect of short-time gravitational unloading on rat and Mongolian gerbil muscles / Ogneva I.V., Kurushin V.A., Altaeva E.G., Ponomareva E.V., Shenkman B.S. // J. Muscle Res. Cell Motil. 38th European Muscle Conference. - Lille. - 2009. - P. 58.

15. Изменение базального уровня кальция в миоплазме камбаловидной мышцы крысы и эффекты кратковременной гравитационной разгрузки / Алтаева Э.Г., Канцерова Н.П. // IX Конференция молодых ученых, специалистов и студентов, посвященная Дню космонавтики. - М. - 2010. - С. 14-15.

16. Alteration of myosin phenotype in rat and Mongolian gerbil soleus under gravitational unloading / Altaeva E.G., Ogneva I.V. // Biological motility. From fundamental achievements to nanotechnologies.-Pushchino. -2010.-P.14-15.

17. Dynamics of changes in resting calcium level and SERCA isoforms in myoplasm of soleus muscle in rat and Mongolian gerbil under gravitational unloading / Altaeva E.G., Ogneva I.V. // 31 Annual ISGPMeeting.-Trieste.-2010.-P.83.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

МПП - мембранный потенциал покоя ППС - площадь поперечного сечения ТЦМ - тяжелые цепи миозина

SERCA - Са:+-АТФаза саркоэндоплазматического ретикулума

Подписано в печать: 17.01.11 Объем: 1,5 усл.п. л. Тираж: 100 экз. Заказ № 769735 Отпечатано в типографии «Реглет» 119526, г. Москва, пр-т Вернадского,39 (495) 363-78-90; www.reglet.ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Алтаева, Эржена Григорьевна

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 .Роль кальция в скелетных мышцах

1.1.1. Регуляторная роль кальция

1.1.2. Гомеостаз кальция

1.1.3. Дигидропиридиновые каналы

1.1.4. Молекулярные основы функционирования Са2+-канала

1.1.5. Са2+-АТФаза саркоплазматического ретикулума - 8ЕЯСА

1.1.6. Изоформы Са -АТФазы саркоплазматического ретикулума

1.1.7. Реакционный цикл Са -АТФазы

1.1.8. Регуляция активности Са2+-АТФазы

1.2. Физиологическая роль ионов кальция в клетке

1.2.1. Участие ионов кальция в протеолизе

1.2.2. Роль кальпаинов в мышечном протеолизе

1.2.3. Структура кальпаинов

1.2.4. Свойства кальпастатина

1.3. Миозины 37 1.3.1. Изоформы миозина

1.4. Эффекты гравитационной разгрузки

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования

2.2. Материалы исследования 54 2.3 Методы исследования 53 2.3.1. Метод определения изменения содержания кальция в одиночных 54 мышечных волокнах

2.3.2. Иммуногистохимический анализ мышечных срезов, окрашенных 55 моноклональными антителами против быстрой и медленной изоформ Са2+-АТФазы (ЯЕЯСАI и БЕЯСАII)

2.3.3. Иммуногистохимический анализ мышечных срезов, окрашенных 57 моноклональными антителами против быстрой и медленной изоформ тяжелых цепей миозина (ТЦМI и ТЦМII)

2.3.4. Анализ полученных препаратов

2.3.5. Определение активности кальпаинов в камбаловидной мышце

2.3.6. Статистическая обработка результатов 60 2.4. Экспериментальные подходы

2.4.1. Метод антиортостатического вывешивания

2.4.2. Динамика накопления ионов кальция в камбаловидной мышце 61 крысы и монгольской песчанки на разных этапах гравитационной разгрузки

2.4.3. Организация космического эксперимента на борту биоспутника 62 «ФОТОН-М №3»

2.4.4. Динамика накопления ионов кальция в камбаловидной мышце 64 крысы на фоне системного введения нифедипина

2.4.5. Метод локальной доставки кальций-связывыающего агента 66 ВАРТА-АМ и блокатора кальциевых каналов нифедипина непосредственно к камбаловидной мышце

2.4.6. Использование кальций-связываюгцего агента и блокатора 67 кальциевых каналов с целью изменения уровня внутриплазматического кальция в камбаловидной мышце крысы на ранних этапах разгрузки. Возможная роль ионов кальция в активации кальпаинов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Динамика накопления базальной концентрации ионов кальция на 68 разных этапах гравитационной разгрузки в камбаловидной мышце крысы

3.2. Эффекты реальной невесомости на волокна камбал обидной 72 мышцы монгольской песчанки

3.3. Динамика накопления базального кальция в камбаловидной мышце 74 у монгольской песчанки на разных сроках гравитационной разгрузки

3.4. Вывешивание крыс в сочетании с пероральным введением 79 нифедипина

3.5. Влияние блокаторов медленных кальциевых каналов и кальций- 82 связывающего агента на накопление ионов кальция в миоплазме мышечных волокон в условиях краткосрочной разгрузки

3.6. Роль внутриклеточного хелатора кальция ВАРТА-АМ в активации 84 кальпаинов

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Динамика базального уровня ионов кальция в миоплазме волокон 85 камбаловидной мышцы на разных сроках гравитационной разгрузки

4.2. Роль медленных кальциевых каналов Ь-типа в накоплении 89 избыточного количества ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы

4.3. Механизм элиминации избыточного количества ионов кальция из 93 миоплазмы в СР с помощью работы кальциевой АТФазы СР - БЕЯСА в условиях гравитационной разгрузки

4.4. Влияние кальций-связывающего агента ВАРТА-АМ на активацию 96 кальпаионовой протеолитической системы на начальном этапе функциональной разгрузки

4.5. Изменения миозипового профиля в условиях разгрузки

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Базальный уровень ионов кальция и его регуляция в волокнах постуральной мышцы крысы и монгольской песчанки в условиях гравитационной разгрузки"

Актуальность проблемы

Одной из основных медицинских проблем, препятствующих длительным космическим полетам, является снижение работоспособности, в том числе в силу атрофических изменений скелетных мышц. Скелетная мышца - один из наиболее пластичных органов, способный адаптироваться к изменению условий функционирования, воздействующих как на мышцу, так и на организм в целом. Длительное снижение функциональной активности постуральных мышц, особенно, камбаловидной мышцы, в условиях снижения гравитационного стимула (пребывание в условиях невесомости, устранение опоры на все или только задние конечности, переход в горизонтальное положение), так называемой гравитационной разгрузки, приводит к глубокой структурной и функциональной перестройке мышечной ткани. Снижение функциональных характеристик скелетных мышц - одно из важнейших проявлений гипогравитационного синдрома (Oganov et al., 1976; Козловская и др., 1984; Edgerton et al., 1998; Adams et al., 2003; Shenkman, Nemirovskaya, 2008). В литературе имеются данные о снижении сократительных характеристик мышечных волокон млекопитающих (силы и работоспособности), жесткости мышцы и ее волокон (Mounier et al., 1989; 2000; Оганов и др., 1991; Оганов и др., 1991; Stevens et al, 1993; Widrick et al., 1999; Ogneva et al., 2009, 2010). Изменение сократительных свойств мышц связывают с уменьшением площади поперечного сечения мышечных волокон (атрофия) (Оганов и др., 1982; Riley et al., 2002) и соответствующим изменением объема миофибриллярного аппарата (Stevens et al., 1993; Kozlovskaya et al., 1996; Desplanches et al., 1997; Mounier et al., 2000; Fitts et al., 2000). Также невесомость приводит к разрастанию соединительнотканных структур (Karpakka et al., 1991; Miller et al., 2001), трансформации миозинового фенотипа волокон в сторону увеличения экспрессии быстрых изоформ тяжелых цепей миозина (Caiozzo et al., 1994; 1998; 2000; Edgerton et al., 1995; 1998), деградации ряда цитоскелетных белков (Chopard et al., 2001, 2005; Гасникова и др., 2006). В основе мышечных перестроек лежит направленное изменение экспрессии большого числа генов, формирование нового целостного, так называемого, «атрофического» паттерна экспрессии (Kandarian, Stevenson, 2002).

Эти данные позволяют предположить, что реализация «атрофической» программы осуществляется, прежде всего, на клеточном уровне — на уровне мышечных волокон. Причем, ее запуск осуществляется путем последовательной активации протеолитических систем, и в первую очередь системы кальций-зависимых протеаз — кальпаинов (Kandarian, Stevenson, 2002; Shenkman, Nemirovskaya, 2008). Активность кальпаинов отмечается уже после первых суток функциональной разгрузки (Enns et al., 2007), по всей видимости, эти изменения в условиях снижения гравитационного стимула связаны с увеличением базального уровня ионов кальция внутри мышечных волокон (Ingalls et al., 1999,2001).

Помимо этого, остаются неясными механизмы поступления избыточного кальция в миоплазму мышечных волокон и его удаления в условиях разгрузки. Существуют предположения, что ионы кальция могут поступать внутрь клетки через сарколемму из межклеточного пространства посредством медленных кальциевых каналов L-типа, которые специфически блокируются нифедипином. Кроме того, показано, что их экспрессия в условиях разгрузки увеличивается (Kandarian et al., 1992). С другой стороны, большое значение имеет и механизм элиминации ионов кальция из миоплазмы мышечных волокон. Ответственной за этот процесс является кальциевая АТФаза саркоэндоплазматического ретикулума - SERCA, функционирование которой в условиях гипогравитации также мало изученно. Однако слаженная работа кальциевых каналов и Са2+-АТФазы саркоплазматического ретикулума обеспечивает поддержание кальциевого гомеостаза в клетке, который очень важен, так как в настоящее время увеличение внутриклеточного содержания кальция рассматривается как один из основных пусковых факторов в реакции мышечных волокон на изменение гравитационного стимула (Kandarian, Stevenson, 2002). Таким образом, исследование физиологической роли базального содержания ионов кальция в миоплазме мышечных волокон и биофизических механизмов его поступления и элиминации представляет собой актуальную задачу современной гравитационной биологии.

Цель работы

Задачи исследования:

1. Проследить динамику изменения уровня кальция в камбаловидной мышце на разных сроках вывешивания.

4. Изучить влияние накопления базального кальция в миоплазме на активацию кальпаиновой протеолитической системы на начальных этапах функциональной разгрузки.

5. Сравнить динамику накопления и элиминации ионов кальция в миоплазме постуральных мышц при гравитационной разгрузке у крысы породы \Vistar и монгольской песчанки.

Научная новизна работы:

- применение нифедипипа, селективного блокатора медленных кальциевых каналов Ь-типа, приводит к снижению интенсивности накопления внутриклеточного содержания ионов кальция в мышечных волокнах камбаловидной мышцы крысы в условиях разгрузки;

- моделируемая разгрузка приводит к увеличение доли мышечных волокон, экспрессирующих быструю изоформу кальциевой АТФазы саркоплазматического ретикулума, на ранних сроках: у крысы после 3-х суток, у монгольской песчанки уже после первых.

Теоретическая и практическая значимость работы

Положения, выносимые на защиту:

1. Увеличение базального содержания ионов кальция в миоплазме мышечных волокон камбаловидной мышцы — один из наиболее ранних эффектов гравитационной разгрузки. Показано участие медленных кальциевых каналов L-типа в этом процессе.

Л I

2. Изменение паттерна экспрессии изоформ Са -АТФазы саркоэндоплазматического ретикулума вносит вклад в механизм элиминации ионов кальция из мышечного волокна в условиях разгрузки.

3. Показано влияние увеличения базального уровня ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы на активацию цистеиновых кальций-зависимых протеаз - кальпаинов in vivo на ранних сроках гравитационной разгрузки.

Структура и объем диссертации

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Алтаева, Эржена Григорьевна

выводы

1. При моделируемой гравитационной разгрузке происходит увеличение базального содержания ионов кальция в миоплазме мышечных волокон камбаловидной мышцы крысы и песчанки уже в первые сутки. При этом тенденция к снижению базального содержания ионов кальция у крысы наблюдается к 12-м суткам моделируемой разгрузки, а у монгольской песчанки — к 7-м суткам.

2. Применение селективного блокатора медленных кальциевых каналов Ь-типа - нифедипина на фоне функциональной разгрузки приводит к достоверному снижению интенсивности накопления внутриволоконного кальция в камбаловидной мышце крысы, как при пероральном, так и при локальном введении.

3. Антиортостатическое вывешивание задних конечностей крысы и песчанки приводит к изменению изоформного состава

Са -АТФазы саркоэндоплазматического ретикулума в сторону увеличения доли волокон, экспрессирующих быструю изоформу.

4. Локальное применение внутриклеточного кальций-связывающего агента ВАРТА-АМ приводит к достоверному снижению базального содержания ионов кальция в миоплазме волокон камбаловидной мышцы крысы при краткосрочной разгрузке и достоверно снижает содержание кальпаинов, как мембраносвязанной, так и цитоплазматической фракций.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Алтаева, Эржена Григорьевна, Москва

1. Абрамова Е.В., Шарова Н.П., Карпов В.Л. Протеосома: Разрушать, чтобы житью // Молекуляр. Биология. 2002 - Т. 32(5). - С. 761-776.

2. Бондарева Л.А., Немова H.H., Кяйвяряйнен Е.И. Внутриклеточная Са2+-завиеимая протеолитическая система животных. // Издательство «Наука». 2006. - 294с.

3. Гасникова Н.М., Шенкман Б.С. Состояние дистрофинового слоя и макромолекулярная проницаемость сарколеммы волокон камбаловидной мышцы крысы в условиях функциональной разгрузки. // Биол. Мембраны. 2006. - Т. 23. - С.461-470.

4. Закс Л. Статистическое оценивание. М. 1976

5. Ильин Е.А., Новиков В.Е., Стенд для моделирования физиологических эффектов невесомости в лабораторных экспериментах с крысами. // Косм. Биол. и Авиакосм. Мед. 1980. - Т.З. - С.79-80.

6. Козловская И.Б., Григорьева Л.С., Гевлич Г.И. Сравнительный анализ влияния невесомости и ее наземных моделей на скоростно-силовые свойства и тонус скелетных мышц человека. // Косм. Биол. Авикосм. Мед. 1984. - Т. 18. - С.22-26.

7. Литвинова К.С. Диссертационная работа «Влияние гравитационной разгрузки и тренировки на характеристики кальций-механической связи в изолированных волокнах скелетных мышц». — 2005. — С.1-123.

8. Ю.Мак-Комас А.Дж. Скелетные мышцы. К.: Олимпийская литература, 2001.-408с.

9. Рубцов A.M. Роль саркоплазматического ретикулума в регуляции сократительной активности мышц. // Сорос. Журнал. 2000. - Т. 6(9). -С. 17-24.

10. Рубцов A.M., Батрукова М.А. Кальциевые каналы (рианодиновые рецепторы) саркоплазматического ретикулума: Структура и свойства // Биохимия. 1997. - Т. 62(9). - С. 1091-1105.

11. Степанова В.В., Попова И.А., Архипенко Ю.В. Транспорт Са2+ саркоплазматическим ретикулумом скелетных мышц крыс в восстановительный период после 40-суточной разгрузки задних конечностей. // Бюлл. эксп. биол. мед. 1994. - V. 68. - Р.591-595.

12. Фундаментальная и клиническая физиология: Учебник для студ. высш. учеб. заведений под ред. А.Г. Камкина, А.А. Каменского. М.: Издательский центр «Академия», 2004. - 1072с. Vander et al

13. Юнкеров В.И., Григорьев С.Г. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. СПб.: ВМедА. 2002. 266.

14. Adams В.А., Beam K.G. Muscular dysgenic in mice: a model for studying excitation-contraction coupling. // FASEB J. 1990. - V. 4. - P.2809-2816.

15. Adams G.R., Caiozzo V.J., Baldwin K.M. Skeletal muscle unweighting: spaceflight and ground-based models. // J. Appl. Physiol. 2003. - V.95(6). -P. 2185-2201.

16. Alderton, Steinhardt, 2000b; Baker, Margolis, 1987; Wang, Forsberg, 1998; Spencer M.J., Croal D.E., Tidball J.G. Calpains are activated in necrotic fibers from mdx dystrophic mice. // J. Biol. Chem. 1995. - V. 270. -P.10909-10914.

17. Allen D.L., Sartorius C.A., Sycuro L.K., Leinwand L.A. Different pathways regulate expression of the skeletal myosin heavy chain genes.// J. Biol. Chem. -2001. V.276(47). - P. 43524-43533.

18. Almers W., Fink R., Palade P.T. Calcium depletion in frog muscle tubules: the decline of calcium current under maintained depolarization. // J. Physiol. 1981. - V. 312. - P. 177-217.

19. Andersen J.L., Aagaard P. Myosin heavy chain IIX overshoot in human skeletal muscle. // Muscle Nerve. 2000. - V. 23. - P.1095-1104. - a

20. Andersen J.L., Klitgaard H., Saltin B. Myosin heavy chain isoforms in single fibres from m. vastus lateralis of sprinters: influence of training. // Acta. Physiol. Scand. 1994. -V. 151. - P. 135-142.

21. Andersen J.L., Schjerling P., Saltin B. Muscle, genes, and athletic performance. // Sci. Am. 2000. - V. 283. - P.48-55. -b

22. Arai M., Otsu K., MacLennan D.H., Periasamy M. Regulation of sarcoplasmic reticulum gene expression during cardiac and skeletal muscle development. // Am. J. Physiol. 1992. - V. 262. - P.614-620.

23. Arutyunyan R.S., Kozlovskaya I.B., Nasledov G.A., Nemirovskaya T.L., Radzyukevich T.L., Shenkman B.S. The contraction of unweighted fast and slow rat muscles in calcium-free solution. // Basic and Appl. Myology. -1995.-V. 5(2). -P.169-175.

24. Askanas V., Engel W.K. Distinct subtypes of type I fibers of human skeletal muscle. // Neurology. 1975. - V. 25. - P.879- 887.

25. Aubier M., Viires N. Calcium ATPase and respiratory muscle function. // Eur. Respir. J. 1998. - V. 11. - P.758-766.

26. Baldwin K.M. Effects of altered loading states on muscle plasticity: what have we learned from rodents? // Med. Sci. Sports Exerc. 1996. - V. 28. -P.101-106.

27. Baldwin K.M., Haddad F. Effects of different activity and inactivity paradigms on myosin heavy chain gene expression in striated muscle. // J. App. Physiol. 2001. - V. 90. - P.345-357.

28. Baldwin K.M., Haddad F. Skeletal muscle plasticity: cellular and molecular responses altered physical activity paradigms. // Am. J. Phys. Med. Rehabil. 2002. - V. 81. - P.40-51.

29. Barrett A.J., Rawlings N.D., Woessner J.F. Handbook of proteolytic enzymes. L.: Academic, 1998.

30. Bastide B., Conti A., Sorrentino V., Mounier Y. Properties of ryanodine receptor in rat muscles submitted to unloaded conditions. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. - V. 270(2). - P.442-447.

31. Belozerova I.N., Nemirovskaya T.L., Shenkman B.S., Savina N.V., Kozlovskaya I.B. Structural and metabolic characteristics of human soleus fibers after long duration spaceflight. // J. Gravit. Physiol. 2002. - V.9. -P.125-126.

32. Berchtold M.W., Brinkmeier H., Muntener M. Calcium ion in skeletal muscle: its crucial role for muscle function, plasticity, and disease. // Physiol. Rev. -2000. V. 80. - P. 1215-1265.

33. Berridge M.J., Bootman M.D., Lipp P. Calcium: a life and death signal. // Nature. 1998. - V. 395. - P.645-648.

34. Bezanilla F. The voltage sensor in voltage-dependent ion channels. // Physiol. Rev. 2000. - V. 80. - P. 555-592.

35. Biolo G., Ciocchi B., Lebenstedt M., Barazzoni R., Zanetti M., Platen P., Heer M., Guarnieri G. Short-term bed rest impairs amino acid-induced protein anabolism in humans. // J. Physiol. 2004. - V. 558. - P.381-388.

36. Blanchard H., Grochulski P., Li Y., Arthur J.S.C., Davis P.L., Elce J.S., Cygler M. Structure of a calpain Ca -binding domain reveals a novel EF-hand and Ca -induced conformational changes. // Nature Struct. Biol. -1997. -V.4. P. 532-538.

37. Bohley P. Intracellular proteolysis. // Hydrolytic enzymes/ Ed. By A. Neuberger, K. Brocklehurst. N.Y. etc.: Elsevier, 1987. P. 307-332.

38. Booth F.W., Giannetta C.L. Effect of hindlimb immobilization upon skeletal muscle calcium in rat. // Calcif. Tissue Res. 1973. - V. 13. - P. 327-330.

39. Borsotto M., Barhanin J., Fosset M., Lazdunski M. The 1,4-dihydropyridine receptor associated with the skeletal muscle voltage-dependent Ca2+-channel. Purification and subunit composition. // J. Biol. Chem. 1985. -V. 260.-P.14255-14263.

40. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for quantitation on of microgram quanties of protein utilizing the principle of protein-dye binding. // Anal. Biochem. 1976. - V. 72. - P.248-254.

41. Brandl C.J., Green N.M., Korczak B., MacLennan D.H. Two Ca2+ ATPase genes: Homologies and mechanistic implications of deduced amino acid sequences. // Cell. 1986. - V.44. - P.597-607.

42. Brandl C.J., DeLeon S., Martin D.R., MacLennan D.H. Adult forms of Ca2+-ATPase of sarcoplasmic reticulum expression in developing skeletal muscle. // J. Biol. Chem. 1987. - V.262. - P.3768-3774.

43. Briggs F.N., Lee K.F., Feher J.J., Wechsler A.S., Ohlendieck K., Campbell K. Ca-ATPase isozyme expression in sarcoplasmic reticulum is altered by chronic stimulation of skeletal muscle. // FEBS Lett. 1990. - V. 259. -P.269-272.

44. Briggs F.N., Poland J.L., Solaro RJ. Relative capabilities of sarcoplasmic reticulum in fast and slow mammalian skeletal muscles. // J. Physiol. 1977. - V.266. - P.587-594.

45. Brini M., Carafoli E. Calcium signaling: a historical account, recent developments and future perspectives. // Cell. Mol. Life. Sci. 2000. - V. 57. — P.345-370.

46. Bullard B., Sainsbury G., Miller N. Digestion of proteins associated with the Z-disc by calpain. // J. Muscle Res. Cell Motil. 1990. - V. 28. - P.271-279.

47. Burns K., Michalak M. Interactions of calreticulin with proteins of the endoplasmic and sarcoplasmic reticulum membranes. // FEBS Lett. 1993. -V. 318.-P.181-185.

48. Caiozzo V.J., Baker M.J., Baldwin K.M. Novel transitions in MHC isoforms: separate and combined effects of thyroid hormone and mechanical unloading. // J. Appl. Physiol. 1998. - V. 85. - P.2237-2248.

49. Caiozzo V.J., Baker M.J., Herrick R.E., Tao M., Baldwin K.M. Effect of spaceflight on skeletal muscle: mechanical properties and myosin isoform content of a slow muscle. // J. Appl. Physiol. 1994. - V. 76. - P. 17641773.

50. Caiozzo V.J., Haddad F., Baker M.J., McCue A., Baldwin K.M. MHC polymorphism in rodent plantaris muscle: effects of mechanical overload and hypothyroidism. // Amer. J. Physiol. 2000. - V. 278. - P.709-717.

51. Campbell A.K. Intracellular calcium: its universal role as regulator. // John Wiley and sons, Chichester. 1983.

52. Carafoli E., Klee C. Calcium as a cellular regulator. // Oxford University Press, New York. 1999.

53. Catterall W.A. Excitation-contraction coupling in vertebrate skeletal muscle: a tale of two calcium channels. // Cell. -1991. V. 64. - P.871-874.

54. Catterall W.A. Structure and function of voltage-gated ion channels. // Ann. Rev. Biochem. 1995. - V. 64. - P. 493-531.

55. Catterall W.A. Structure and function of voltage-sensitive ion channels. // Science. 1988. - V. 242. - P.50-61.

56. Catterall W.A. Structure and regulation of voltage-gated Ca2+ channels. // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2000. - V. 16. - P.521-555.

57. Chopard A., Pons F., Marini J.F. Cytoskeletal protein contents before and after hindlimb suspension in a fast and slow rat skeletal muscle. // Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 2000. - V. 280. - P.232-330.

58. Clarke M., Caldwell R., Feeback D. Modulation of sarcoplasmic reticulum cholesterol content during mechanical unloading-induced muscle atrophy. // Abs. XIIIIAA "Human in Space", Santorini Greece. 2001. - P. 241-244.

59. Clarke M., Khakee R., McNeil P. Loss of cytoplasmic basic fibroblast growth factor from physiologically wounded myofibers of normal and dystrophic muscle. // J. Cell. Sci. 1993. - V. 106. - P. 121-133.

60. Cong J.Y., Goll D.E., Peterson A.M., Kapprell H.P. The role of autolysis in9.4activity of the Ca -dependent proteinases (jj.-calpain and m-calpain). // J. Biol. Chem. 1989. - V. 264. - P.10096-10103.

61. Connold A.L., Greensmith L., Tyc F., Vrbova G. A simple method for local delivery of various substances to the rat neuromuscular system. // Brain Research Protocols 1. 1997. - P.79-82.

62. Coppolino M.G., Dedhar S. Calreticulin. // Int. J. Biochem. Cell. Biol. -1998.-V. 30. — P.553-558.

63. Costelli P., Tullio R.D., Baecino F.M., Melloni E. Activation of Ca2+-dependent proteolysis in skeletal muscle and heart in cancer cachexia. // Br. J. Cancer. -2001. -V. 84. P.946-950.

64. Costello B., Chadwick C., Fleischer S. Isolation of the junctional face membrane of sarcoplasmic reticulum. Methods Enzymol. — 1988. V. 157. -P. 46-50.

65. Curtis B.M., Catterall W.A. Phosphorylation of the calcium antagonist receptor of the voltage-sensitive calcium channel by cAMP-dependent protein kinase. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - V. 82. - P.2528-2532.

66. Curtis B.M., Catterall W.A. Purification of the calcium antagonist receptor of the voltage-sensitive calcium channel from skeletal muscle transverse tubules. // Biochemistry. 1984. - V. 23. - P.2113-2118.

67. Dahl H.A., Roald L. How unequivocal is the muscle fibre type concept? // Anat. Embryol. 1991. - V. 184. - P.269- 273.

68. Danko S., Yamasaki K., Daiho T., Suzuki H., Toyshima C. Organization of cytoplasmic domains of sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase in E(1)P and E(1)ATP states: a limited proteolysis study. // FEBS Lett. 2001. - V. 505. - P.129-135.

69. Darr K.C., Schultz E. Hindlimb suspension suppresses muscle growth and satellite cell proliferation. // J. Appl. Physiol. 1989. - V. 67(5). - P. 18271834.

70. Dayton W.R., Goll D.E., Zeece M.G., Robson R.M., Reville W.J. A Ca2+-activated protease possible involved in myofibrillar protein turnover. Purification from porcine muscle. // Biochemistry. 1976. - V. 15. -P.2150-2158.

71. Dayton W.R., Reville W.J., Goll D.E., Stromer M.H. A Ca2+-activated protease possibly involved in myofibrillar protein turnover: Partial characterization of the purified enzyme. // Biochemistry. 1976. - V. 15. — P.2159-2167.

72. De Meis L. Ca transport: pumps and channels. // Biosci. Rep. 1995. - V. 15.-P. 241-408.

73. De Meis L., Vianna A.L. Energy interconversion by the Ca2+-dependent ATPase of the sarcoplasmic retuculum. // Ann. Rev. Biochem. 1979. - V. 48. — P.272-292.

74. DeLuca C.I., Davies P.L., Samis J.A., Elce J.S. Molecular cloning and bacterial expression of cDNA for rat calpain II 80-kDa subunit. // Biochim. Biophys. Acta- 1993.-V. 1216. -P.81-93.

75. Demirel H.A., Powers S.K., Naito H., Hughes M., Coombes J.S. Exercise-induced alterations in skeletal muscle myosin heavy chain phenotype: dose-response relationship. // J. Appl. Physiol. 1999. - V. 86. - P.1002-1008.

76. Denardi C., Ausoni S., Moretti P., Gorza L., Velleca M., Buckingham M., Schiaffino S. Type 2X-myosin heavy chain is coded by a muscle fiber type-specific and developmentally regulated gene. // J. Cell. Biol. 1993. - V. 123.-P.823- 835.

77. Dennison S.R., Dante S., Hauss T., Brandenburg K., Harris F., Phoenix D.A. Investigations into the membrane interactions of m-calpain domain V. // Byophys. J. 2005. - V. 88. - P.3008-3017.

78. Desplanches D., Kayar S.R., Sempore B., Flandrois R. Skeletal muscle ultrastructure after hindlimb suspension. // J. Appl. Physiol. 1990. - V. 69. - P.504-508.

79. Desplanches D., Mayet M.H., Sempore B., Flandrois R. Structural and functional response to prolonged hindlimb suspension in rat muscle. // J. Appl. Physiol. 1987. - V. 63. - P. 558-563.

80. Diaz B.G., Moldoveanu T., Kuiper M.J., Campbell R.L., Davies P.L. Insertion sequence 1 of muscle-specific calpain, p94, acts as an internal propeptide. // J. Biol. Chem. 2004. V. - 279(26). - P. 27656-27666.

81. Duan C., Delp M.D., Hayes D.A., Delp P.D., Armstrong R.B. Rat skeletal muscle mitochondrial Ca . and injury from downhill walking. // J. Appl. Physiol. -1990.-V. 68.-P.1241-1251.

82. Dupont-Versteeglen E.E., Knox M., Gurley C.M., Houle J.D., Peterson C.A. Maintenance of muscle mass is not dependent on the calcineurin-NFAT pathway. // Amer. J. Physiol. Cell. Physiol. 2002. - V. 282(6). - P. 13 871395.

83. Ebashi S. Calcium binding activity of vesicular relaxing factor. // J. Biochem. 1961. - V. 50. - P.236-244.

84. Ebashi S. Third component participating in the superprecipitation of natural actomyosin. // Nature. 1963. - V. 200. - P.1010.

85. Ebashi S., Endo M., Ohtsuki I. Calcium in muscle contraction. In Calcium as a cellular regulator. Carafoli E., Klee C. eds. 1999. - P.579-595. Oxford Univercity Press, NY.

86. Eble D.M., Spragia M.L., Ferguson A.G., Samarel A.M. Sarcomeric myosin heavy chain is degraded by the proteosome. // Cell Tissue Res. -1999.-V. 296. P.541-548.

87. Edgerton V.R., Roy R.R. Neuromuscular adaptations to actual and simulated spaceflight. // Handbook of physiology. Environmental Physiology. Bethesda, MD: Am. Physiol. Soc. 1996. - V. II. - P. 721-763.

88. Edgerton V.R., Roy R.R. Spaceflight experiments and international collaborations. // J. Gravit. Physiol. 1998. - V. 5. - P. 185-187.

89. Ellis S., Nagainis P.A. Activity of calcium activated protease in skeletal muscles and its changes in atrophy and stretch. // Physiologist. -1984.-V. 27. — P.73-74.

90. Emori Y., Kawasaki H., Imajoh S., Kawashima S., Suzuki K. Isolation and sequence analysis of cDNA clones for the small subunit of rabbit calcium-dependent protease. // J. Biol. Chem. 1986. - V. 261. - P.9472-9476.a

91. Emori Y., Kawasaki H., Sugihara H., Imajoh S., Kawashima S., Suzuki K. Isolation and sequence analyses of cDNA clones for the large subunits of two isozymes of rabbit calcium-dependent protease. // J. Biol. Chem. -1986. V. - 261. - P.9465-9471.b

92. Enns D.L., Belcastro A.N. Early activation and redistribution of calpain activity in skeletal muscle during hindlimb unweighting and reweighting. // Can. J. Phisiol. Pharmacol. 2006. - V. 84. - P.601-609.

93. Enns D.L., Raastad T., Ugelstad I., Belcastro A.N. Calpain/calpastatin activities and substrate depletion patterns during hindlimb unweighting and reweighting in skeletal muscle. // Eur. J. Appl. Physiol. 2007. - V. 100. -P.445-455.

94. Feng H.Z., Yu Z.B. Effect of nifedipine on myosin heavy chain (MHC) isoforms transition in unloaded soleus. // Space Med. Eng. (Beijing). 2005. - V. 18(2). - P.89-93.

95. Fernandez-Montalvan A., Assafalg-Machleidt I., Pfeiler D., Fritz H., Jochum M., Machleidt W. // Biochem. J. 2004. - V. 382. - P.607-617.

96. Fitts R.H. Widrick J.J. Muscle mechanics: adaptations with exercise-training. // Exerc. Sport Sci. Rev. 1996. - V. 24. - P.427-473. .

97. Fitts R.H., McDonald K.S., Schluter J.M. The determinants of skeletal muscle force and power: their adaptability with changes in activity pattern. // J. Biomech. 24, Suppl. 1991. - V.l. - P. 111-122.

98. Fitts R.H., Riley D.R., Widrick J.J. Functional and structural adaptations of skeletal muscle to microgravity. // J. Exp. Biol. 2001. — V. 204. - P.3201-3208.

99. Fitts R.H., Riley D.R., Widrick J.J., Physiology of a microgravity environment. // J. Appl. Physiol. 2000. - V. 89. - P.8283-8289.

100. Fitzsimons D.P., Bodell P.W., Herrick R.E., Baldwin K.M. Left ventricular functional capacity in the endurance-trained rodent. // J. Appl. Physiol. 1990. - V. 69. - P.305-312.

101. Franco S., Perrin B., Huttenlocher A. Isoforms specific function of calpain 2 in regulated membrane protrusion. // Exp. Cell Res. 2004. - V. 299.-P. 179-187.

102. Garcia Diaz B.E., Gauthier S., Davies P.L. Ca2+ dependency of calpain 3 (p94) activation. // Biochemistry. 2006. - V. 45. - P.3722-3720.

103. Geesink G.H., Nonneman D., Koohmaraie M. An improved purification protocol for heart and skeletal muscle calpastatin reveals two isoforms resulting from alternative splicing. // Arch. Biochem. Biophys. -1998.-V. 356. -P.19-24

104. Gissel H. The role of Ca2+ in muscle cell damage. // Ann. N.Y. Acad. Sci.-2005.-V. 1066.-P. 166-180.

105. Goll D.E., Thompson V.F., Li H., Wei W., Cong J. The calpain system. // Physiol. Rev. 2003. - V. 83(3). - P. 731-801.

106. Goll D.E., Thompson V.F., Taylor R.G., Zalewska T. Is calpain activity regulated by membranes and autolysis or by calcium and calpastatin? // Bioessays. 1992. - V.14. - P.549-556.

107. Haddad F., Roy R.R., Zhong H., Edgerton V.R., Baldwin K.M. Atrophy responses to muscle inactivity. II. Molecular markers of protein deficits. // J. Appl. Physiol. 2003. - V. 95. - P.791-802.

108. Harridge S.D., Bottinelli R., Canepari M., Pellegrino M., Reggiani C., Esbjornsson M., Balsom P.D., Saltin B. Sprint training, in vitro and in vivo muscle function, and myosin heavy chain expression.// J. Appl. Physiol. -1998.-V. 84. P.442-449.

109. Hasselbach W., Makinose M. Die calciumpumpe der "Erschlaffungsgrana" desmuskels und ihre abhangigkeit von der ATP-spaltung. // Biochem Z. 1961. - V. 333. - P.518-528.

110. Heilbrunn L.V., Wiercinsky F.J. Action of various cations on muscle protoplasm. // J. Cell. Physiol. 1947. - V. 19. - P.15-32.

111. Hershko A., Ciechanover A. The ubiquitin system. // Annu. Rev. Biochem. 1998. - V. 67. - P. 425-479.

112. Higalgo C., Gonzales M.E., Garcia A.M. Calcium transport in transverse tubules isolated from rabbit skeletal muscle. // Biochim. Biophys. Acta. 1986. - V. 854. - P.279-286.

113. Hochachka P.W., Stanley C.5 Merkt J., Sumar-Kalinowski J. Metabolic meaning of elevated levels of oxidative enzymes in high altitude adapted animals: an interpretative hypothesis. // Respir. Physiol. 1983. -V. 52. — P.303-313.

114. Hofmann F., Flockerzi V., Nastainczyc W., Ruth P., Schnider T. Themolecular structure and regulation of muscular calcium channels. // Curr.

115. Top. Cell. Regul. 1990. - V. 31. - P.223-239.

116. Hofmann F., Lacinova L., Klugbauer N. Voltage-dependent calcium channels: from structure to function. // Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol. -1999.-V. 139. P.33-87.

117. Holy X., Mounier Y. Effects of short spaceflights on mechanical characteristics of rat muscles. // Muscle & Nerve. 1991. - V. 14. - P. 7078.

118. Honda S., Marumoto T., Hirota T., Nitta M., Arima Y., Ogawa M. Activation of m-calpain is required for chromosome alignment on the metaphase plate during mitosis. // J. Biol. Chem. 2004. - V.279. -P.10615-10623.

119. Hong D.H., ForsbergN.E. Effects of dexamethasone on protein degradation and protease gene expression in rat L8 myotube cultures. // Mol. Cell Endocrinol. 1995. - V. 108. - P.199-209.

120. Hosfield C.M., Elce J.S., Davies P.L., Jia Z. Crystal structure of calpain reveals the structural basis for Ca -dependent protease activity and anovel mode of enzyme activation. // EMBO J. 1999. - V.18. - P.6880-6889.

121. Huang J., Forsberg N.E. Role of calpain in skeletal-muscle protein degradation. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - V. 95. - P.12100-12105.

122. Hughes G., Starling A.P., Sharma R.P., East J.M., Lee A.G. An investigation of the mechanism of inhibition of the Ca ATPase by phospholamban. // Biochem. J. 1996. - V.318. - P.973-979.

123. Ilyina-Kakueva E.I., Pportugalov W., Krivenkova N.P. Space flight effects on the skeletal muscles of rats. // Aviat. Space Environ. Med. 1976. -V. 47.-P. 700-703.

124. Imajoh S., Aoki K., Ohno S., Emori Y., Kawasaki H., Susihara H., Suzuki K. Molecular cloning of the cDNA for the large subunit of the high-Ca2+-requiring form of human Ca2+-activated neutral protease. // Biochemistry. 1988. -V. 27. -P.8122-8128.

125. Imajoh S., Kawasaki II., Suzuki K. The amino-terminal hydrophobic region of the small subunit of calcium-activated neutral protease (CAPN) is essential for its activation by phosphatidylinositol. // J. Biochem. 1986. -V. 99. -P.1281-1284.

126. Inesi G. Mechanism of calcium transport. Annu. Rev. Physiol. 1985. -V. 47.-P. 573-601.

127. Ingalls C.P., Warren G.L., Armstrong R.B. Intracellular Ca2+ transients in mouse soleus muscle after hindlimb unloading and reloading. // J. Appl. Physiol. 1999. - V. 87. - P. 386-390.

128. Ingalls C.P., Wenke J.C., Armstrong R.B. Time course changes ino I

129. Ca .j, force and protem content in hindlimb-suspended mouse soleus muscles. // Aviat. Space Environ. Med. 2001. - V. 72(5). - P. 471-476.

130. James P., Inui M., Tada M., Chiesi M., Carafoli E. Nature and site of1. Viphospholamban regulation of the Ca pump of sarcoplasmic reticulum. // Nature. 1989. - V. 342. - P.90-92.

131. Jan L.Y., Jan Y.N. Cloned potassium channels from eukaryotes and prokaryotes. // Annu. Rev. Neurusci. 1997. - V. 20. - P.91-123.

132. Johnson B.D., Scheuer T., Catterall W.A. Convergent regulation of skeletal muscle Ca channels by dystrophin, the actin cytoskeleton, and cAMP-dependent protein kinase. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2005. -V. 102. -P.4191-4196.

133. Kadi F., Eriksson A., Holmer S., Butler-Browne G.S., Thornell L.E. Cellular adaptation of the trapezius muscle in strength-trained athletes. // Histochem. Cell Biol. 1999. - V. 111. - P. 189-195.

134. Kamada T., Kinoshita H. Disturbances initiated from the naked surface of muscle protoplasm. // Jap. J. Zool. 1943. - V. 10. - P. 469-493.

135. Kandarian S., O'Brien S., Thomas K., Schulte L., Navarro J. Regulation of skeletal muscle dihydropyridine receptor gene expression by biomechanical unloading. // J. Appl.Physiol. 1992. - V. 72(6). - P.2510-2514.

136. Kandarian S.C., Stevenson E.J. Molecular events in skeletal muscle during disuse atrophy. I I Exerc. Sport Sci. Rev. 2002. - V. 30(3). —P. 111116.

137. Kapprel H-P., Goll D.E. Effect of Ca on binding of the calpains to calpastatin. // J. Biol. Chem. 1989. - V.264. - P.17888-17896.

138. Karpakka J., Virtanen P., Vaananen K., Orava S., Takala T.E. Collagen synthesis in rat skeletal muscle during immobilization and remobilization. // J. Appl. Physiol. 1991. - V. 70. - P.1775-1780.

139. Kawasaki H., Kawashima S. Regulation of the calpain-calpastatin system by membranes. // Mol. Membr. Biol. 1996. - V. 13. - P.217-224.

140. Kimura Y., Kurzydlowski K., Tada M., MacLennan D.H.I

141. Phospholamban regulates the Ca ATPase through intramembrane interactions. // J. Biol. Chem. 1996. - V. 271(36). - P.21726-21731.

142. Koohmaraie M. The role of Ca -dependent proteases (calpains) in post mortem proteolysis and meat tenderness. // Biochimie. 1992. - V. 74. - P.239-245.

143. Kozlovskaya I.B., Shenkman B.S. Muscle Structure and Metabolism. // Space Biology and Med. Joint US Russian Publication. 1996. - V.3. -P.231-246.

144. Krause K., Michalak M. Calreticulin. // Cell. 1997. - V. 88. - P.439-443.

145. Kuboki M., Ishii H., Kasama M. Characterization of calpain I-binding proteins in human erythrocyte plasma membrane. // J. Biochem. 1990. -V. 107.-P.776-780.

146. Lamb G.D. Excitation-contraction coupling in skeletal muscle: comparisons with cardiac muscle. // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2000. -V. 27(3).-P. 216-224.

147. Larsson L., Moss R.L. Maximum velocity of shortening in relation to myosin isoform composition in single fibres from human skeletal muscles. // J. Physiol. (Lond) 1993. - V. 472. - P.595-614.

148. Lecker S.H., Jagoe R.T., Gilbert A., Gomes M., Baracos V., Bailey J., Price S.R., Mitch W.F., Goldberg A.L. Multiple types of skeletal muscle atrophy involve a common program of ghanges in gene expression. // FASEB J. 2004. - V. 18. - P.39-51.

149. Lee A.G. Ca -ATPase structure in the Ei and E2 conformations: mechanism, helix-helix and helix-lipid interactions. // Biochem. Biophys. Acta. 2002. - V. 1565. - P. 246-266.

150. Lee A.G. How lipids interact with an intrinsic membrane protein: the case of the calcium pump. // Biochim. Biophys. Acta. 1998. - V. 1376. — P.381-390.

151. Litvinova K.S., Vikhlyantsev I.M., Podlubnaya Z.A., Shenkman B.S. Effects of Ca2+-binding agent EGTA on fiber contractility and content of sarcomeric cytoskeletal proteins of hindlimb suspended rats. // J. Gravit. Physiol.-2005.-V. 12(1).-P. 159-160.

152. Lompre A-M., Anger M., Levitsky D. Sarco(endo)plasmic reticulum calcium pumps in the cardiovascular system: function and gene expression. 1994.-V. 26. -P.l 109-1121.

153. Lytton J., MacLennan D.H. Sarcoplasmic reticulum. In: The Heart and Cardiovascular System, second edition. Fozzard I-I.A. et al., eds. // New York, Raven Press Ltd., 1990. pp.1203-1222.

154. Lytton J., Westlin M., Burke S.E., Shull G.E., MacLennan D.H. Functional comparison between isoforms of the sarcoplasmic or endoplasmic reticulum family calcium pumps. // J. Biol. Chem. 1992. - V. 267. — P.14483-14489.

155. Lytton J., Zarain-Herzberg A., Periasamy M., MacLennan D.H. Molecular cloning of the mammalian smooth muscle sarco(endo)plasmic reticulum Ca2+ATPase. // J. Biol. Chem. 1989. - V. 264. - P.7059-7065.

156. MacLennan D.H. Ca2+ signaling and muscle disease. // Eur. J. Biochem. 2000. - V. - 267. - P. 5291-5297.

157. MacLennan D.H., Abu-Abed M., Kang C-H. Structure function relationships in Ca cycling proteins. // J. Mol. Cell. Cardiol. 2002. - V. 34. -P. 897-918.

158. MacLennan D.H., Brandl C.J., Korczak B., Green N.M. Amino acid sequence of a Ca2+Mg2+"dependent ATPase from rabbit muscle sarcoplasmicreticulum, deduced from its complementary DNA sequence. // Nature. — 1985. -V. 316.- P.696-700.

159. MacLennan D.H., Rice W.J., Green M.N. The mechanism of Ca2+ transport by sarco(endo)plasmic reticulum Ca ATPases. // J. Biol. Chem. -1997. V. 272. - P.28815-28818.

160. MacLennan D.H., Toyofiiko T. Regulatory interactions between calcium ATPases and phospholamban. // Soc. Gen. Physiol. Ser. 1996. -V. 51.-P.89-103.

161. Maki M., Kitaura Y., Satoh H., Ohkouchi S., Shibata H. Structures, functions and molecular evolution of the penta-EF-hand Ca2+-binding proteins. // Biochim. Biophys. Acta. 2002. - V. 1600. - P.51-60.

162. Maki M., Ma H., Takano E., Adachi Y., Lee W.J., Hatanaka M., Murachi T. Calpastatins: biochemical and molecular biological studies. // Biomed. Biochim. Acta. 1991. - V. 50. - P. 509-516.

163. Maki M., Narayana S., Hitomi K. A growing family of the Ca2+-binding proteins with five EF-hand motifs. // Biochem. J. 1997. - V. 328.- P.718-720.

164. Martin T.P., Edgerton V.R., Grindeland R.E. Influence of spaceflight on rat skeletal muscle. // J. Appl. Physiol. 1988. - V. 65. - P. 2318-2325.

165. Martonosi A. Animal electricity, Ca2+ and muscle contraction. A brief history of muscle research. // Acta Biochim Polon. 2000. - V. 47. - P.493-516.

166. Martonosi A., Pikula S. The network of calcium regulation in muscle. // Acta Biochim Polon. 2003. - V. 50. - P.l-29. a.

167. Martonosi A., Pikula S. The structureof the Ca2+-ATPase of sarcoplasmic reticulum. // Acta Biochim Polon. . 2003. - V. 50. - P.337-365. b.

168. Martonosi A.N., Feretos R. Sarcoplasmic reticulum. II. Correlation between adenosine triphosphatese activity and Ca uptake. // J. Biol. Chem.- 1964. V. 239. - P.659-668.

169. Meissner G. Isolation and characterisation of two types of sarcoplasmic reticulum vesicles. // Biochim. Biophys. Acta. 1975. V. 389. -P.51-68.

170. Meissner G., Lu X. Dihydropyridine receptor-iyanodine receptor interactions in skeletal muscle excitation-contraction coupling. // Biosci. Rep. 1995. - V. 15. - P.399-408.

171. Meilgren R.L., Lane R.D., Kakar S. A sarcolemma-associated inhibitor is capable of modulation calcium-dependent proteinase activity. // Biochem. Biophys. Acta. 1987. - V. 930. - P. 370-377.

172. Melloni E., Michetti M., Salamino F., Minafra R., Pontremoli S. Modulation of the calpain autoproteolysis by calpastatin and phospholipids. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. - V. 229. - P.193-197.

173. Miller T.A., Lesniewski L.A., Muller-Delp J.M., Majors A.K., Scalise D., Delp M.D. Hindlimb unloading induces a collagen isoform shift in the soleus muscle of the rat. // Am. J. Physiol. Regul. Integr Comp Physiol.-2001. -V.281.-P.1710-1717.

174. Mintz E., Guillain F. Ca transport by the sarcoplasmic reticulum ATPase. // Biochim. Biophys. Acta. 1997. - V. 1318. - P.52-70.

175. Mitchell-Felton H., Hunter R.B., Stevenson E.J., Kanarian S.C. Identification of weight-bearing responsive elements in the skeletal muscle sarco(endo)plasmic reticulumCa2+-ATPase (SERCA1) gene. // J. Biol. Chem. -2000. V. 275. - P.23005-23011.

176. Moldoveanu T., Hosfield C.M., Lim D., Elce J.S., Jia Z., Davies P.L. A Ca2+ switch aligns the active site of calpain. // Cell. 2002. - V. 108. -P.649-660.

177. Moller J.V., Juul B., Le Maire M. Structural organization, ion transport and energy transduction of P type ATPases. // Biochim. Biophys. Acta.-1996.-V. 1286.-P. 1-51.

178. Morey-Holton E.R., Globus R.K. Hindlimb unloading rodent model: technical aspects. // J. Appl. Physiol. 2002. - V. 92. - P.1367-1377.

179. Mounier Y, Holy X, Stevens L. Compared properties of the controctile system of skinned slow and fast rat muscle fibers. Pflugers Arch. 1989.415: 136-141.

180. Murachi T. Intracellular regulatory system involving calpain and calpastatin. // Biochem. Int. 1989. - V.18. - P.263-294.

181. Musacchia X.J., Steffen J.M., Fell R.D., Dombrowski M.J. Skeletal muscle response to spaceflight, whole body suspension, and recovery in rats. // J. Appl. Physiol. 1990. - V.69. - P.2248-2253.

182. Nagai R.N., Zarain-Herzberg A., Brandl C.J. et al. Regulation of myocardial Ca2+-ATPase activity and phospholamban mRNA expression in response to pressure overload and thyroid hormone. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - V. 86. - P.2966-2970.

183. Newton T., Black J.P., Butler J., Lee A.G., Chad J.E., East J.M. The calcium pump SERCA1 is maintained in the endoplasmic reticulum by a retrieval signal located between residues 1-211. // Biochem J. 2003. - V. 371. - P.775-782.

184. Nishimura T., Goll D.E. Binding of calpain fragments to calpastatin. // J. Biol. Chem. 1991. - V. 266. - P. 11842-11850.

185. Oganov V.S., Potapov A.N. On the mechanisms of changes in skeletal muscles in the weightless environment. // Life Sci. Space Res. 1976. - V. 14. — P.137-143.

186. Oganov V.S., Skuratova S.A., Potapov A.N., Shirvinskaya M.A. Physiological mechanisms of adaptation in rat skeletal muscles to weightlessness and similar functional requirements. // Physiologist. 1980. -V.-23.-P. 16-21.

187. Ogawa Y., Kurebayashi N., Murayama T. Ryanodine receptor isoforms in excitation-contraction coupling. // Adv. Biophys. 1999. — V. 36. - P. 27-64.

188. Ogneva I.V., Kurushin V.A., Altaeva E.G., Ponomareva E.V., Shenkman B.S. Effect of short-time gravitational unloading on rat and Mongolian gerbil muscles // J. Muscle Res. 2009. - V. 30. - P.261-265.

189. Ogneva I.V. Transversal stiffness of fibers and desmin content in leg muscles of rats under gravitational unloading of various durations. // J. Appl. Physiol. 2010. - V. 109(6). -P.1702-1709.

190. Ohira Y., Jiang B., Roy R.R., Oganov Y.S., Ilyina-Kakueva E.I., Marini J.F., Edgerton V.R. Rat soleus muscle fiber responses to 14 days of spaceflight and hindlimb suspension. // J. Appl. Physiol. 1992. - V. 73. -P. 51-57.

191. Ohira Y., Yoshinaga T., Yasui W., Ohara M., Tanaka T. Effects of hindlimb suspension with stretched or shortened muscle length on contractile properties of rat soleus. // J. Appl. Biomech. 2000. - V. 16. -P.80-87.

192. Ohno S., Emori Y., Imajoh S., Kawasaki H., Kisaragi M., Suzuki K. Evolution origin of a calcium-dependent protease by fusion of genes for a third protease and a calcium-binding protein? // Nature. 1984. - V. 312. -P.556-570.

193. Ohno S., Minoshima S., Kudoh J., Fukuyama R., Shimuzu Y., Onmi-Imajoh S., Shimizu N., Suzuki K. Four genes for the calpain family locate on four distinct human chromosomes. // Cytogenet. Cell. Genet. 1990. - V. 33. — P.225-229.

194. Ohtsuka H., Yajima H., Maruyama K., Kimura S. The N-terminal Z pereat 5 of cennectin/titin binds to the C-terminal region of alpha-actinin. // Biochem and Biophys. Res. 1997.- V. 3. - P. 1-3.

195. Oishi Y., Yamamoto H., Miyamoto E. Changes in fibre-type composition and myosin heavy-chain lid isoform in rat soleus muscle during recovery period after hindlimb suspension. // Eur. J. Appl. Physiol. 1994. -V. 68. -P.102-106.

196. Okitani A., Goll D.E., Stromer M.H., Robson R.M. Intracellular inhibition of a Ca2+-activated protease involved in myofibrillar protein turnover. // Federation Proc. 1976. - Y.35. - P. 1746.

197. Orlova E.V., Serysheva I.I., Van Heel M., Hamilton S.L., Chiu W. Two structural configurations of the skeletal muscle calcium release channel. //Nat. Struct. Biol. 1996. - V. 3. - P. 547-552.

198. Otsu K., FM., Fujii J., Periasamy M., Difilippantonio M., Uppender M., Ward D.C., MacLennan D.H. Chromosome mapping of five human cardiac and skeletal muscle sarcoplasmic reticulum genes. // Genomics. -1993.-V. 17. -P.507-509.

199. Otsuka Y., Goll D.E. Purification of the Ca -dependent proteinase inhibitor from bovine cardiac muscle and its interaction with the millimolar Ca2+-dependent proteinase. // J. Biol.Chem. 1987. - V. 262. - P.5839-5851.

200. Parise G., O'Reilly C.E., Rudnicki M.A. Molecular regulation of myogenic progenitor populations. // Appl. Physiol. Nutr. Metab. 2006. -V. 31 (6). - P.773-781.

201. Peters D.G., Mitchell-Felton H., Kandarian S.C. Unloading induces transcriptional activation of the sarco(endo)plasmic reticulum Ca21-ATPase 1 gene in muscle. // Am. J. Physiol. 1999. - V. 276 - P.1218-C1225.

202. Pette D. Historical Perspectives: plasticity of mammalian muscle. // J. Appl. Physiol. 2001. - V. 90. - P. 1119-1124.

203. Pette D., Staron R.S. Cellular and molecular diversities of mammalian skeletal muscle fibers. // Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol. 1990. - V. 116.-P.1-76.

204. Pickering J.D., White E., Duke A.M., Steele D.S. DHPR activation underlies SR Ca release induced by osmotic stress in isolated rat skeletal muscle fibers. // J. Gen. Physiol. 2009. - V. 133. - P.511-524.

205. Pie-Hong Zhu, Vrbova G. The role of Ca2+ in the elimination of polyneuronal innervation of rat soleus muscle fibres. // Eur. J. Neurosci. — 1992.-V. 4. P.433-437.

206. Putney J.W. Jr. ed. Calcium signaling. // CRC Press, Boca Raton. -2000.

207. Radzyukevich T.L., Heihy J.A. Regulation of dihydropyridine receptor gene expression in mouse skeletal muscles by stretch and disuse. // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2003. - V. 287. - P. 1445-1452.

208. Rapcsak M., Oganov V.S., Szoor A., Skuratova S.A., Szilagyi T., Takacs O. Effect of weightlessness on the function of rat skeletal muscles on the biosatellite "Cosmos-1129". // Acta Physiol. Hung. 1983. - V. 62. -P.225-228.

209. Ricoy J.R., Encinas A.R., Cabello A., Madero S., Arenas J. Histochemical study of the vastus lateralis muscle fibre types of athletes. // J.Physiol. Biochem. 1998. - V. 54. - P.41-47.

210. Ringer S. A further contribution regarding the influence of the blood on the contraction of the heart.// J. Physiol. 1883. - V. 4. - P. 29-43.

211. Rios E., Brum G. Involvement of dihydropyridine receptors in excitation-contraction coupling in skeletal muscle. // Nature. 1987. -V.325. -P.717-720.

212. Rivero J.L., Talmadge R.J., Edgerton V.R. Interrelationships of myofibrillar ATPase activity and metabolic properties of myosin heavy chain-based fiber types in rat skeletal muscle. // Histochem. Cell Biol. -1999.-V. 111. — P.277-287.

213. Robinson P.F. Metabolism of the gerbil, Meriones unguiculatus. // Science. 1959. - V. 130. - P.502.

214. Rosenberg R.L., Hess P., Reeves J.P., Smilowitz H., Tsien R.W. calcium channels in planar lipid bilayers: insights into mechanisms of ion permeation and gating. // Science. 1986. - V. 231. - P.1564-1566.

215. Roy R.R., Zhong H., Talmadge R.J., Bodine S.C., Fanton J.W., Kozlovskaya I., Edgerton V.R. Size and myonuclear domains in Rhesus soleus muscle fibers: short-term spaceflight. // J. Gravit. Physiol. 2001. -V.8. -P.49-56.

216. Saito A., Seiler S., Chu A., Fleischer S. Preparation and morphology of sarcoplasmic reticulum terminal cisternae from rabbit skeletal muscle. // J. Cell. Biol. 1984. - V. 99(3). - P. 875-885.

217. Salanova M., Schifll G., Blottner D. Atypical fast SERCAla protein expression in slow myofibers and differential S-nitrosylation prevented by exercise during long term bed rest. // Histochem. Cell Biol. 2009. - V. 132. -P.383-394.

218. Sanchez J.A., Stefani E. Inward calcium current in twitch muscle fibers of the frog // J. Physiol. 1978. - V. 283. - P.197-209.

219. Schiaffino S., Reggiani C. Molecular diversity of myofibrillar proteins: gene regulation and functional significance. // J. Physiol. Rev. -1996.-V. 76. — P.371-423.

220. Schollmeyer J.E. Possible role of calpain I and calpain II in differentiating muscle. // Exp. Cell. Res. 1986. - V. 163. - P.413-422.

221. Schulte L.M., Navarro J., Kandarian S.C. Regulation of sarcoplasmic reticulum calcium pump gene expression bu hindlimb unweighting. // Am. J. Physiol.- 1993. -V.264. -P.1308-1315.

222. Shenkman B.S, Kozlovskaya I.B., Kuznetsov S.L., Nemirovskaya T.L., Desplanches D. Plasticity of skeletal muscle fibres in space-flown primates. // J Gravit Physiol. 1994. - V. 1. - P.64-66.

223. Shenkman B.S., Lee P., Belozerova I.N., Nemirovskaya T.L. Structural and metabolic characteristics of rhesus monkey m.soleus after space flight. // J. Gravitat. Physiol. 2000. - V. 7. - P.39-42.

224. Shenkman B.S., Moukhina A.M., Litvinova K.S., Nemirovskaya T.L. Non-uniform shifts in mhc and serca isoform patterns in unloaded rat soleus. Effects of Ca-binding agent. // Journal of Gravitational Physiology. 2005. -V. 12.-P.l 19-120.

225. Shenkman, B.S., Nemirovskaya. T.L. Calcium-dependent signaling mechanisms and soleus fiber remodeling under gravitational unloading. // J. Muscle Res Cell Motil. 2008. - V.29. - P.221-230.

226. Sieber M., Nastainczzyk W., Zubor V., Wernet W., Hofmann F. The 165-kDa peptide of the purified skeletal muscle dihydropyridine receptorcontains the known regulatory sites of the calcium channel. // Eur. J. Biochem. 1987. — V. 167.-P. 117-122 .

227. Simmerman H.K., Jones L.R. phospholambam: protein structure, mechanism of action, and role in cardiac function. // Physiol. Rev. 1998. -V. 78. -P.921-947.

228. Smith T.P.L., Simmen F.A., Zhao G., Vallet J.L. Rapid communication: nucleotide sequences of two isoforms of porcine micromolar calcium-activated neutral protease 1 cDNA. // J. Anim. Sci. -2001.-V. 79. — P.552-553.

229. Soares J.M.C., Duarte J.A.R., Carvalho J., Appell H.J. The possible role of intracellular Ca2+ accumulation for the Development of immobilization atrophy. // Int. J. Sports Med. 1993. - V. 14(8). - P.437-439.

230. Solomon V., Goldberg A.L. Importance of the ATP-ubiquitin proteasome pathway in the degradation of soluble and myofibrillar proteins in rabbit muscle extracts. // J. Biol. Chem. 1996. - V. 271. - P.26690-26697.

231. Sorimachi H., Ishimura S., Suzuki K. Structure and physiological function of calpains. // Biochem. J. 1997. - V. 328. - P. 721-732.

232. Spencer M.J., Lu B., Tidball J.G. Calpain II expression is increased by changes in mechanical loading of muscle in vivo. // J. Cell. Biochem. -1997. V.64. — P.55-66.

233. Spurway N. Interrelationship between myosin-based and metabolism-based classifications of skeletal muscle fibers. // J. Histochem. Cytochem. -1981.-V. 29. P.87- 90.

234. Stange M., Tripathy A., Meissner G. Two domains in dihydropyridine receptor activate the skeletal muscle Ca release channel. // Biothys. J. -2001.-V. 81. P.1419-1429.

235. Stephenson D.G., Lamb G.D., Stephenson G.M. Events of the excitation-contraction-relaxation (E-C-R) cycle in fast- and slow-twitch mammalian muscles fibers relevant to muscle fatigue. Acta. Physiol. Scand.- 1998. V. 162. - P.229-245.o i

236. Stevens L., Mounier Y. Ca movements in sarcoplasmic reticulum of rat soleus fibers after hindlimb suspension. // J. Appl. Physiol. 1992. - V. 72. -P.1735-1740.

237. Stevens L., Mounier Y., Holy X., Falempin M. Contractile properties of rat soleus muscle after 15 days of hindlimb suspension. // J. Appl. Physiol. 1990. - V. 68. - P.334-340.

238. Stevens L., Holy X., Mounier Y. Functional adaptation of different rat skeletal muscles to weightlessness. // Am. J. Physiol. 1993. - V. 264. -P.770-776.

239. Stevenson S.W., Dudley G.A. Dietary creatine supplementation and muscular adaptation to resistive overload. // Med. Sci. Sports Exerc. 2001.- V.33.-P.1304.

240. Stokes D.L., Green N.M. Modeling a dehalogenase fold into the 8 Aj idensity map for Ca -ATPase defines a new domain structure. // Biophys. J. 2000. - V. 78. - P. 1765-1776.

241. Striessing J., Knaus H.G., Grabner M., Moosburger K., Seitz W., Glossman H. Photoaffinity labelling of the phenylalkylamine receptor of the skeletal muscle transverse-tubule calcium channel. // FEBS Lett. 1987. -V. 212. - P.247-253.

242. Stuhmer W., Parekh A.B. The structure and function of Na+ channels. // Curr. Opin. Neurobiol. 1992. - V. 2. - P.243-246.

243. Sutko J.L., Airey J.A. Ryanodine receptor Ca2+ release channels: does diversity in form equal diversity in function? // Physiol. Rev. 1996. - V. 76(4).-P. 1027-1071.

244. Suzuki K. The structure of the calpains and calpain gene. In: Intracellular Calsium-Dependent Protelysis, edited by Mellgren R.L. and Murachi T. Boca Raton, FL: CRC. 1990. - P.25-35.

245. Suzuki K., Imajoh S., Emori Y et al. Calcium-activated neutral protease and its endogenous inhibitor. // FEBS Lett. 1987. - V. 220(2). -P. 271-277.

246. Suzuki K., Ohno S., Emori Y. Primary structure and evolution of calcium-activated neutral protease (CAPN). // J. Protein. Chem. 1987. - V. 6(1).-P. 7-15.

247. Swynghedauw B. Developmental and functional adaptation of contractile proteins in cardiac and skeletal muscles. // Physiol. Rev. 1986. -V. 66. - P.710-771.

248. Szymanska G., Kim H.W., Kranias E.G. Reconstitution of the skeletal sarcoplasmic reticulum Ca -pump: influence of negatively charged phospholipids. // Biochim. Biophys. Acta. 1991. - V. 1091. - P. 127-134.

249. Tada M., Katz A.M. Phosphoiylation of sarcoplasmic reticulum and sarcolemma. // Annu. Rev. Physiol. 1982. - V. 44. - P.401-423.

250. Tada M., Yamamoto T., Tonomura Y. Molecular mechanism of active calcium transport by sarcoplasmic reticulum. // Physiol. Rev. 1978. - V. 58(1).-P. 1-79.

251. Taillander D, Bigard X, Desplanches D, Attaix D, Guezennec GY, Arnal M. Role of protein synthesis and fiber distribution in the unweighted soleus muscle. // J. Appl. Physiol. 1993. - 75. - P. 1226-1232.

252. Takahashi M., Seagar M.J., Jones J.F., Reber B.F., Catterall W.A. Subunit structure of dihydropyridine-sensitive calcium channels from skeletal muscle. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - V. 84. - P.5478-5482.

253. Talmadge R.J. Myosin heavy chain isoform expression following reduced neuromuscular activity: potential regulatory mechanisms. // Muscle Nerve. 2000. - V. 23. - P.661-679.

254. Talmadge R.J., Roy R.R., Caiozzo V.J., Edgerton V.R. Mechanical properties of rat soleus after long-term spinal cord transaction. // J. Appl. Physiol. 2002. - V. 93. - P. 1487-1497.

255. Talmadge R.J., Roy R.R., Edgerton V.R. Distribution of myosin heavy chain isoforms in non-weight-bearing rat soleus muscle fibers. // J. Appl. Physiol. 1996. - V. 81(6). -P.2540-2546.

256. Tanabe T., Beam K.G., Adams B.A. Region of the skeletal muscle dihydropyridine receptor critical for excitation-contraction coupling. // Nature. 1990. - V. 346. - P. 567-569.

257. Tanabe T., Beam k.G., Adams B.A., Niidome T., Numa S. Regions of the skeletal muscle dihydropyridine receptor critical for excitation-contraction coupling. // Nature. 1990. - V. 346. - P.567-569.

258. Tanabe T., Beam K.G., Powell J.A., Numa S. Restoration of excitation-contraction coupling and slow calcium current in dysgenic muscle by dihydropyridine receptor complementary DNA. // Nature. — 1988. — V. 336. — P.134-139.

259. Tang H., Choung W.M., Ip F.C., Ip N.Y. Identification and characterization of differentially expressed genes in denervated muscle. // Molecular and Cellular Neuroscience. 2000. - V. 16. - P. 127-140.

260. Tatsumi R., Sheehan S.M., Iwasaki H., Hattori A., Allen R.E. Mechanical stretch induces activation of skeletal muscle satellite cells in vitro. // Exp. Cell Res. 2001. - V. 267. - P. 107-114.

261. Taylor R.J., Geesink G.H., Thompson V.F., Koohmaraie M., Goll D.E. Is Z-disk degradation responsible for postmortem tenderization? // J. Ann. Sci. 1995. - V. 73. - P.1351-1367.

262. Thompson V.F., Saldana S., Cong J., Goll D.E. A BODIPY fluorescent microplate assay for measuring activity of calpains and other protease. // Anal. Biochem. 2000. - V. 279. - P.170-178.

263. Tidball J.G., Spencer M.J. Expression of a calpastatin transgene slows muscle wasting and obviates changes in myosin isoform expression during murine muscle disuse. // J. Physiol. 2002. - V. 545. - P.819-828.

264. Tidball J.G., Spencer MJ. Expression of a calpastatin transgene slows muscle wasting and obviates changes in myosin isoform expression during murine muscle disuse. // J. Physiol. 2002. - V. 545. - P.819-828.

265. Tidball J.G., Spencer M.J., Wehling M. and Lavergne E. Nitric-oxide Synthase Is a Mechanical Signal Transducer That Modulates Talin and Vinculin Expression. // J. Biol. Chem. 1999. - V. 274(46). - P.33155-33160.

266. Tischler M.E., Rosenberg S., Satarug S., Henriksen E.J., Kirby C.R., Tome M., Chase P. Different mechanisms of increased proteolysis in atrophy induced by denervation or unweighting of rat soleus muscle. // Metabolism. 1990. - V. 39. - P.756-763.

267. Tischler M.E., Henriksen E.J., Munoz K.A., Stump C.S., Woodman C.R., Kirby C.R. Spaceflight on STS-48 and earth-based unweighting produce similar effects on skeletal muscle of young rats. // J. Appl. Physiol. 1993. -74.-P. 2161-2165.

268. Tompa P., Emori Y., Sorimachi H., Suzuki K.5 Friedrich P. Domain III of calpain is a Ca2+-ragulated phospholipid-binding domain. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. - V. 280. - P. 1333-1339.

269. Toyofuku T., Kurzydlowski K., Tada M., MacLennan D.H. Identification of regions in the Ca2+ATPase of sarcoplasmic reticulum that affect functional association with phospholamban. // J. Biol. Chem. 1993. -V. 268. - P.2809-2815.

270. Toyoshima C., Nakasako M., Nomura H., Ogawa H. Crystal structure of the calcium pupm of sarcoplasmic reticulum at 2.6A resolution. // Nature. 2000. - V. 405. - P. 647-655.

271. Toyoshima C., Nomura H. Structural changes in the calcium pump accompanying the dissociation of calcium. // Nature. 2002. - V. 418. - P. 605-611.

272. Toyoshima C., Sasabe H., Stokes D.L. Three-dimension cryo-electron microscopy of the calcium ion pump in the sarcoplasmic reticulum membrane. // Nature. 1993. - V. 362. - P.469-471.

273. Verboomen H., Wuytack F., deSmedt H., Himpens B., Casteels R. Functional differences between SERCA2a and SERCA2b Ca2+ pumps and their modulation by phospholamban. // Biochem. J. 1992. - V. 286. -P.591-596.

274. Wagatasuma A., Fujimoto K., Yamada S. Effect of treatment with nifedipine, an L-type calcium channel blocker, on muscular atrophy induced by hindlimb immobolization. // Scand. J. Med. Sci. Sports. 2002. - V. 12. — P.26-30.

275. Wei L., Zhou W., Wang L., Schwartz R.J. Beta(l)-integrin and PI 3-kinase regulate RhoA-dependent activation of skeletal alpha-actin promoter in myoblasts. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2000. - V.278. -P.1736-1743.

276. Weiss A., Schiaffino S., Leinwand L.A. Comparative sequence analysis of the complete human sarcomeric myosin heavy chain family: implications for functional diversity. // J. Mol. Biol. 1999. - V. 290. -P.61-75.b

277. Whipple G., Koohmaraie M. Degradation of myofibrillar proteins by extractable lysosomal enzymes and m-calpain, and the effects of zinc chloride. // J. Anim. Sci. 1991. - V. 69. - P.4449-4460.

278. White C.M., Vrbova G. Recovery of rat skeletal muscle after partial denervation is enhanced by treatment with nifedipine. // Brain Res. 1998. -V. 779. -P.125-135.

279. Williams A.B., Decourten-Myers G.M., Fisher J.E., Luo G., Sun X., Hasselgren P.-O. Sepsis stimulates release of myofilaments by a calcium-dependent mechanism. // FASEB J. 1999. - V. 13. - P. 1435-1443.

280. Winiarski A.M., Roy R.R., Alford E.K., Chiang P.C., Edgerton V.R. Mechanical properties of rat skeletal muscle after hindlimb suspension. // Exp. Neurol. 1987. - V. 96. - P.650-660.

281. Wu K.D., Lytton J. Molecular cloning and quantification of sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase isoforms in rat muscles. // Am. J. Physiol. 1993. — V.264. — P.333-341.

282. Wuytack F., Dode L., Baba-Aissa F., Raeymaekers L. The SERCA3-type of organellar Ca2+ pumps. // Biosci. Rep. 1995. - V.15. - P.299-306.

283. Xie X., Dwyer M.D., Swenson L., Parker M.H., Botfield M.C. Crystal structure of calcium-free human sorcin: a member of the penta-EF-hand protein family. // Protein Sci. 2001. - V. 10. - P. 2419-2425.

284. Yoshimura N., Murachi T., Heart R., Kay J., Jasand B., Newman G.R. Immunogold electron-microscopic localization of calpain I in skeletal muscle of rats. // Cell Tissue Res. 1986. - V. 244. - P.265-270.

285. Yoshioka T., Shirota T., Tazoe T., Yamashita-Goto K. Calcium movement of sarcoplasmic reticulum from hindlimb suspended muscle. // Acta Astranaut. 1996. - V. 38. - P.209-212.

286. Zarain-Herzberg A., MacLennan D.H., Periasamy M. Characterization of rabbit cardiac sarco(endo)plasmic reticulum Ca2+ATPase gene. // J. Biol. Chem. 1990. - V.265. - P.4670-4677.

287. Zubrzycka-Gaarn E., Korczak B., Osinka H., Sarsala M.G. Studies on sarcoplasmic reticulum from slow-twitch muscle. // J. Muscle Res. Cell. Motil. 1982. - V. 3. - P.191-212.

Информация о работе

Алтаева, Эржена Григорьевна
кандидата биологических наук
Москва, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Базальный уровень ионов кальция и его регуляция в волокнах постуральной мышцы крысы и монгольской песчанки в условиях гравитационной разгрузки - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы