Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Влияние генотипа, условий выращивания и применения регуляторов роста в культуре пыльников пшеницы при получении исходного материала для селекции

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Влияние генотипа, условий выращивания и применения регуляторов роста в культуре пыльников пшеницы при получении исходного материала для селекции"

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО НАРОДИ и/яУ ОБРАЗОВАНА

ОРДЕНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ имени НАТРИСА ЛУМкБЫ

На правах рукописи

РАГУБОВА СУДШЕТ ДКАмАЛ КНЗЫ

ВЛИЯНИЕ ГЕНОТИПА^ УСЛОВИЙ ВЫРАЩИВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА В КУЛЬТУРЕ 11ШЬНИК0В ПШЕНИЦЫ ПРИ ПОЛУЧЕНИИ ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ

(06.01.05. - селекция и семеноводство>

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Москва - 1990 г.

'' Работа выполнена ко кафедре бозаакхя я финолог«« растеняй сельскохозяйственного факультета Универсатетв дружбы . народов «ывви Патрнса Луыуибы к г Научно-нсследоватедьскфы институте союзного хозяйства ЮгоЧроетока(г.Саратов) ; Научш^й руководитель:доктор биологических нау^ ' ;

профессор В.В.Кефели <

Официальные оппонент: доктор сельскохозяйственных

наук,профессор П.Ф.Кононков >, ;

. . • доктор биологических наук * I

• • . В.В.Нааин > ' ,. ) :

Ведущая организация - Главный ботанический сад АН СССР;

Защита состоится "2-6* декабря 1990 года в чаорв Гна заседании специализированного совета К 053.22;22 в Университете дружбы народов имени Патриса Луыумбы по адресу:113093, Москва,ул.Павловская,д, 8/5,ауд,228. . 'г •

; 0 диссертацией иожно ознакомиться в научной библиотеке Университета друкбы народов имени Рзтриса Луыуибы по адресу: 117198 »Москва ,ул.Циклухо-Цаклая, д. 6.

^Автореферат разослан п2$п ноября 1990 г.

Актуальность проблемы. Б современных условиях наблюдается Меднение генофонда, что ограничивает возможности селекции, юскольку успехи ее в значительной степени зависят от богатства и разнообразия генофонда. В связи с этим актуальное значено приобретает разработка методов, способствующих увеличению . истоты л спектра новообразований и ускоряющих процесс получе-1ия гомозиготных форм с комплексом хозяйственно-ценных признаки. Одним из таких методов является метод культуры пыльников.

Достижения культуры пыльников и развитие успехов гормоно-югии предоставили селекции уникальную возможность получать

исходный материал при создании более высокопродуктивных сортов и гибридов. Метод культуры пыльников позволяет !зучить свойства партнеров с п - набором хромосом (гаплоиды). Гаплоиды, полученные методом культуры пыльников, стали объектом как генетических (обнаружение сцепления и взаимодействия генов, оценка генетической изменчивости количественных призн • ков), Так и физиологических исследований ( loo et al., 1985). Здним из достоинств культуры пыльников является регенерация -растений из растений со стерильной пыльцой, которая позволяет юхранять генетический и видовой фонд диких и культурных растений, размножать полученные ценные формы растений, ранее не -существовавшие в природе С Pieard , 1982).

Кроме того, возможность культивирования пыльников ускоряла ход селекционных процессов. При этом сроки создания новых сортов сократились с 8-12 лет до 4-5 лет, что делает обсуждаемую проблему особенно актуальной (Лукьянюк, 1983; Anonymous , 1976; bellce , 1985).

Цели и задачи работы. I. Найти возможные пути совершенствования приемов получения андрогенетических регенерантов (гаплоидов); 2. Выяснить некоторые закономерности морфогенеза в культуре пьгьников ппеницы.

Для достижения указанных целей необходимо было реши» следующие задачи: I. С целью ускоренного получения гомозиготных линий изучить влияние генотипа на процесс регенерации растений из пыльников пшеницы; 2. Изучить влияние регуляторов роста на интенсивность и направленность индукции регенерантов из пыльников пшеницы; 3. Изучить влияние условий выращивания донорных растений на андрогенегичесяил потенциал и выход регенерантов в культуре пыльников пшеницы; Д. Изучить влияние раз-

.*' личных сочетаний генотипа, условий выращивания и регуияторо» роста на пути регенерации гаплоидов в культуре пыльников пшеницы. . '.

Научная новизна. Установлен дифференцированный эффект 6-5АП и 2,4-Д на индукции зеленых регенерантов из пыльников, что поз.; волает значительно ускорить процесс получение гомозиготных линий в селекции пшеницы.

Установлена завис.ииость ^еген^ЕаЦМ гаплоидов из пыльников пшеницы от сроков посева донорных растений. ;/ Впервые показано, что в условиях поздних сроков посева ; . растений-доноров в поле (июнь месяц) продуктивность пыльни^ * : ков и индукция регенерантов из пыльников' была одинакова о ин-г

тенсивносхьс этих процессов в тепличных условиях. \

•; Практическая ценность. Получены 42 гомозиготные линии яровой ; мягкой пшеницы, которые переданы в лабораторию селекции и семеноводства яровой пшеницы НИИСХ Юго-Востока для изучения йо важным хозяйственно-ценным признакам. . ' Установлены оптимальные сроки для выращивания доноров, которые позволяют получить максимальное число гаплоидных рас-

■у тений. г '

■ ■ '

Для^культивирования пыльников пшеницы наиболее пригодной является картофельная питательная среда РОТАТО-И со следующими дозами и сочетаниями гормонов:

I) для менее отзывчивых генотипов (Саратовская-29) -; 2,4-Я - 2,0 иг/л; , ;: 2) для высокоотзывчивого генотипа (семья 35/84) - ,

2,4-Д - 2,0 иг/л и 6-бензиламинопурин - 0,3 иг/л. : ; Апробация работы. Материалы диссертации доложены на Научной ; конференции молодых ученых (Москва, 1988), на II конференции ¿ научно-учебного центра физико-химических методов исследования (Цосква, 1989), на 1У конференции молодых ученых (Пущино, 1988). По теме диссертации опубликовано 4 работы. -Структура и объем работы. Диссертация состоит из шести глав, : в которых приведены: обзор литературы и методов исследования, • а гакхе основные результаты и их обсуждение, выводы. Работа изложена на ; 1'ЗФстраницах машинописного текста, содержит 15 таблиц,'18 иллюстраций. Список литературы включаетво--, ючников, в том числе/¿^Ь иностранйых авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В экспериментах по изучению влияния генотипа, регуляторов >оста и условий выращивания на интенсивность регенерации гап-¡оидов из пыльников были изучены различные генотипы пшеницы, из ¡оллекции НИИСХ Dro-Востока (г.Саратов) и отобраны сорт Сараевская 29 и сеиья (или линия) 35/84, различающиеся по продуктивности пыльников.

Сорт Саратовская 29 получен методой сложной ступенчатой 'ибридизации от скрещивания Альбидуы 24 х Лотесценс 55/11. Это ¡амый пластичный сорт яровой пшеницы. В 19*73 г. он возделывал-:я в СССР на площади более 18,4 млн.га.

Сеиья 35/84 получена на ЕршовскоЯ опытной станции (селек- • ионер Козлов О.Д.) от скрещивания Jnia 66 х Кавказ. Форма грулноколосая, многоцветковая. Из-за позднеспелости не был юйонирован. Для культивирования пыльников, использовалась картофельная среда с добавлением 2,4-Д, хинетин и б-ЕАП в разных :онцентрациях.

Для регенерации растений из эибриоидов и каллусов применись среда Блейдза или J6 6. Вне зависимости от минерального остава они обладают тремя отличительными особенностями: I). ¡онцентрация сахарозы по сравнение с индукционной средой (9#) ¡нижается до 2-3?» при пересадхе как эмбриоидов, так и каллу-ов; 2) для выращивания змбрибядов из среды регенерации исклю-гали 2,4-Д и использовали более слабый ауксин (ЯУК, ИУК -),2-0,5 иг/л); 3) для зибриокдов в среде регенерации железо- и (атряй-содержацие соединения уменьшают в два раза.

Е ходе внрацяваняя донорных растений в теплице поддерхи-1али следующий режим: температура 25°С днем и 18°С ночью," 16- . ¡асовой фотопериод, освещенность 30 тысяч люкс на уровне поч-1Ы. Растения поливали 2-3 раза в недело. В течение вегетации |роводилн подкормку минеральными удобрениями.

Побеги, у которых влагалище предпоследнего листа яаходкт-!я на уровне центральной части колоса (♦ I см), срезали г л ровне почвы. Местоположение колоса в листовой обертке определяй наоцупь (Суханов, 1962). В колосьях по указанному морфоло-'ическому признаку пыльники двух нижних цветков в средней час-и колоса содержали вакуолизированные микроспоры. Среданные.по-¡еги помещали в сосуд с водой, а затем в холодную камеру с тем-

: пературай +3° - .

После предобработки холодом побеги обрезали, а колосья вместе с листовой оберткой стерилизовали в боксе. В качестве стерилизатора использовали хлорные препараты. Е растворе хло-. рашша колосья стерилизовали 5-7 минут, а затеи промывали 4-5 порциями стерилизованной и автоклавированной воды. Пос : ле промывки с колосьев снимали листовую обертку с помощью пин цега и их помещали в стерильную и слегка влажную емкость.

Анализ структур проводился под стереоскопическим микроскопом Ш5С-2. За время культивирования пыльников проводили не менее трех анализов. Первый анализ - через 4 недели после начала культивирования. После анализа полученные эмбрлоиды и каяяусы переносили на среду регенерации. 1. Для развития эмбриоидов использовали пониженные положительные температуры (+10-12 °С). Для этой цели были использованы камеры БКЙ. В камере поддерживали 16-часовой фотопериод, освещенность 50 тысяч.люкс. В таких условиях из хорошо сфорш рованных эмбриоидов (при хорошо развитом щитке и колеоптиле) растение регенерирует на 4-5 день.

Каллусы субкультивировали на питательной среде Блейдза с • содержанием - 2,0 мг/л. После появления очагов морфогене за (эмбриональных центров), морфологически различаемых как участки плотной белой ткани, их перлосили на среды для регенерации растений.

'Во время культивирования эмбриоидов и каллусов проводил! контроль за их состоянием под лупой МБИ-2 и оценивали плот: ность морфологических структур. _

После завершения всех анализов для каждого генотипа учитывали общее количество эмбриоидов, каллусов, а также зелены: и альбиносных растений. ;; ЗАВИСИМОСТЬ ИНДУКЦИИ РЕГЕНЕРАНТОВ В КУЛЬТУРЕ

',:: ■: ПЫЛЬНИК® ПШЕНИЦЫ ОТ КОНЦЕНТРАЦИИ. 2, Ц-1

,■ 'Результаты исследования влияния 2,4-Д на формирование :андрогенных структур и регенерацию растений приведет, и таб-• "лице и рисунках I, 2, 3.. В нашей работе 2,4-Д была использована со следующий концентрациями: 1,0 и 2,0 мг/л. Поскольку отсутствует эффективная технология для одноступенчатого полу> чения гаплоидов, изучение влияния 2,4-Д и других гормонов на андрогеназ в культуре пыльников проводился двухэтапно: I) из;

чение продуктивности (отзывчивости) пыльников, эмбриоидогене-за и кал'лусогенеза; 2) изучение путей регенерации растений из эмбриоидов и каллусов.

Отмечена специфика реакции генотипов на действия 2,4-Д з различных концентрациях. По мере увеличения концентрации ' 2,4-Д от 1,0 до 2,0 мг/л увеличивается отзывчивость пыльников I .частота индукции структур у сорта Саратовская 29, а у семьи 35/8Ц резко падаиг вьшеотмеченные показатели.

Влияние 2,4-Д особенно хорошо прослеживается на второй лапе исследований. Если с увеличением концентрации 2,4-Д от [,0 иг/л до 2,0 мг/л внход эмбриоидов у сорта Саратовская 29' гвеличивался незначительно, то регенерация зеленых и альбинос-шх растений увеличивалась в 2-3. раза. У семьи 35/84 с увели-1ениеы концентрации 2,4-Д частота индукции зеленых растений тдает от 3,79£ до 0,2%, что свидетельствует о гербицидном (вйствии высоких концентрации 2,4-Д для этого генотипа (табл

Механизм действия гормонов на типы морфогенеза на клеточ-юи уровне до конца не выяснен. Предполагается, что в кулыгуре [аходятся отдельные клетки-мишени, которые компетентны по от-юшенкп к гормонам. Роль гормонов при этом своди-ся к снятия Юрфогенетического блока ( Мегв1г!8,А1-СЬа1аМ , 1986).

Для индукции регекерантов необходимо использование двух оследовательных сред: первичной - с ауксином (2,'»-Л), которая пособствует ишшированию й поддержании культуры, и второй -ез гормонов, способствующей развитию эмбриоидов и прохождении ми всех стадий развития, вплоть до стадии взрослого растения.

Таким образом, одна 2,4-Д способна при вариации концент-ации от 1,0 мг/л до 2,0 мг/л у сорта Саратовская 29 увеличить астоты индукции пндрогенетических структур и регенерации рас-ений, кок зеленых, так и альбиносных, в любое время года (без чета сезонности). У семьи 35/84 2,4-Д в тех же концентрациях еэко подавляет развитие андрогенеза и регенерацию растений з пыльников.

ХАРАКТЕР ЩЦУКЦШ! ШПЬШ'ЖЮнХ РАСТЕНИИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СОЧЕТАНИЯХ Ю1Ш1ША II 2,4-Д

Помимо 2,4-Д в состав питательных сред входили <1>1тогормо-« из группы Цитокининов - кинетин и безиламинопурин (П-1Ш1).

Один кинстш!, в отличие от 2,4-Д, не был способен ргиять т андрогенез и индуцировать омбриоилы и каллус».

*|

Влияние сезонности на частоты индукции зеленых гаплоидных растений у сорта Саратовская 29 (С-29) и семьи 35/84 (С-35/84)

Концентрация гормонов, иг/л

. Частота индукции.зеленых растений (£)

Яетний-1

С-29 : С-35/84

Летний-Б : Зимний

С-29 :. С-35/84 : С-29 ' С-35/84

'• з

Контроль 2,4-Д - 2,0

кинетин - 0,5 0,85+0,21 1,94+0,24 0,29+0,16 1,59+0 . 0,1 + 0 0,21+0,1

2,4-Д -1,0 -------

кинетин - 1,0 0,99+0,28 2,08+0,21 0,62+0,16 . 1,42+0,28 0,1+0 , О

2,4-Д - 1,0

кинетин - 2,0 0,49+0,34 1,69+0,05 0,2+0 0,74+0,29 — - О О

2,4-Д -2,0

кинетин - 1,0 0,4+0,06 3,18+0 0,3+0,1 1,87+0,12 0 0,97+0,06

2,4-1 - Р,0

кинетин - 0 0,9+0,42 4,98+0 .0,98+0,32 2,24+0,33 0 0,42+0,06

2,4-1 - Г, 0 1,9+0,86 5,2+0,32 - '1,0*й,1Б 3,88+0,21 -О ■ 1,23+0,18

ö-ЗАП

Продолжение таблицы 5 : 6 : 7

2,4-Д - ¿,0 ¿,41+0,2 0,34+0,26 2,7+0,43 0,28+0 0,31+0,15 0,12+0,06

2,4-Д - 1,0

3-БАЛ - 0,1 0 0,26+0,11 0 0,64+0,26 О 0,23*0,06

- 2,0

- 0,1 0 3,17+0,69 0 5,94+0,07 О 0,58+0,13

2,4-Д - 1,0

5-БАД - 0,3 О 3,98+0,24 0 5,1+0,34 0 - 0,55+0,21

г,4-я - 2,Q

S-БАЛ - 0,3 0,13г0 16,17+0,34 0,18+0,1 10,24+0*16 0 1,54+0,06

HŒP 1,44 ' 1,64 I,Г7 0,96 0 . 0,54

?" " Как видно из таблицы, продуктивность пыльников и индукция регенерантов в зависимости от применения кинетина довольно низкая, это особенно четко проявилось у сорта Саратовская 29. Самый высокий выход зеленых растений (0,77£) у сорт^ Сара* ; товская 29 отмечен при сочетании 2,4-Д - 1,0 ыг/л и кинетин - ■' ,1,0 мг/л, а у семьи 35/84 этот показатель достигал 2,98£ при 2,4-Д - 2,0 мг/л и кинегин - 2,0 иг/л. При преобладании концентрации кинетина над 2,4-Д в питательной среде (2,4-Д - 1,0 мг/л и кинегин - 2,0 ыг/л) резко снижается выход зеленых растений у обоих генотипов.

Можно предположить, что пыльники пшеницы сорта Саратовг екая 29 и семьи 35/84 содержат изначально большее количество ' эндогенных.циюкининов. Поэтому увеличение концентрации кине-'тина в питательной среде приводит к спаду продуктивности и ре-.генерационной способности пыльника ик витро. В то se время в сочетании с 2,4-Д увеличивается регенерациониая способность' V пыльников,.которые содерхат больиее количество эндогенных ци~ • ' токининов.

; ВЫХОД ЗЕЛЕНЫХ РЕГЕНЕРАНТОВ В. КУЛЬТУРЕ ПЫЛЬНИКОВ 11ИЩШЦЫ Í ' • •■ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАЗЛИЧНЫХ СОЧЕТАНИЙ 6-БАП с 2,4-Д . '

, Замена кинетина на бензиламинопурин (6-БАП) отразилась. 1 на результатах опыта; 6-БАП примени-t в концентрациях ОД мг/л , и 0,3 мг/л.

В ходе анализа данных по отзывчивости (рис. I) отмечено, что' применение 6-БАП у сорта Саратовская 29 резко сникает ко-. ; личество продуктивных пыльников, а у семьи 35/84 наблюдался .обратный эффект.

Действие 6-БАП особенно сильно наблюдалось при регенерации растений из пыльников. У семьи 35/84 резко увеличилась ; V,- частота индукции зеленых растений - 16,(2,4-Д - 2,0 ыг/л и. 6-БАЛ - 0,3 мг/л). Если с применением 6-БАП у семьи 35/84 увеличивался морфогенетический потенциал пыльников, то у-сорта '> ."Саратовская 29 обнаруаивалась обратная реакция. Позто: у 6-БАП .:" болёе эффективно применять для более высокоотзывчивых генотипов, причем выход 'зеленых растений в отдельных случаях достигал 2056- и более.. Параллельно с увеличением выхода зеленых растений увеличивался выход альбиносов и ризогенных новообразова-- ний (рис. I и 3).

т

частом иифшции рм»огсмнмх форм'

о»

-Ш

С-М. I ол, |»ЛГ мвН

десоомй

.а

5

МЖПЛ 1

II

'яс. I. Сезонная специфика изменения чагготн индукция ризогспннх форм и отзывчивости пыльников.

орт Саратовская 29 КБ

С-29) 2,4-Д -2,0 мг/л

емья 35/8'| кинегин - 0,5 иг/л

С-35)

2,4-Д - 2,0 иг/л

2,4-Д - 2,0 иг/л б-БЛП- 0,3 иг/л

' Менял бблпне гормонов в среде, мы тем самым можем регулировать процесс возникновения золеных растении в культуре пыльников пшеницы саратовской селекции, что может быть связано с действием гормонов но выражение гена, так как у семьи 35/8'4 этот признак пол действием гормонов окспрессируется активнее, чем у сорта Саратовская 29.

Вместе с тем, опыты по изменению уровней гормонов в пите тельной среде выявили еще один Доктор, который в нашей работе не проверялся. Это уровень эндогенных гормонов и ингибиторов, который мог меняться от генотипа к генотипу и от сезона к сезону, что, в частности, выразилось в различных типах морфогенеза и формировании регенерпнтов. Цожно предположить, что выражение активности генов обеспечивается уровней эндогенных фи тогормонов (открывание программы) и ингибиторов (блокировка). Вот почему с помоцы) одного (2,'»-Д) или двух (2,4-Д + цитокк-кипи) гормонов удавалось менять выход эибряоидов, каллусов, зеленых и альбияоеных растении в культуре пыльников.

ОСОБШГССТК ЙНДУКЩП АИДГОГШШХ РАСТЕШЫ

в зшсдоости от ус лор;: л ьшщишии донорннх

ГАСГП1ВЙ

Во время наших исследований были проведены 4 посева в различных условиях выращивания: 2 тепличных и 2 полевых посева. Результаты исследования влияния тепличных и полевых условий выращ" ания приведены в таблице и на рисунках I, 2, 3. Наблюдали повышение количества андрогенных структур. При выращивании донорных растений в естественных условиях наиболь-иая разница при регенерации гаплоидов проявилась на эоклпчи-гвльном этапе. Если в тепличных условиях выращивания у сорта Саратовская 29 в»ход зеленых растений составлял 2,5*-, то в полевых условиях регенерация зеленых растений увеличивалась до (табл., рис. 3). У семьи 35/8<» при выгачивании в естественных условиях регенерация зеленых растении увеличивалась в два раза.

Следует отметить, что вопрос о влиянии условий выропивп-кия ив регенерацию растений является спорным. Одни авторы считают, что полевые условия выращивания растений уп?личирают выход регенератов (особенно эеленнх) ( Гвгагп!, 193'+;

Оиувпк в! , 1983), другие же отмечаит, что гчппд р';гечс-

рантов при выращивании доноров в естественных условиях не . всегда увеличивается ( Вцувег , 1981; Bullock , 1982),';

ВЛИЯНИЕ СЕЗОННОСТИ ВиРЛЦЮШШ ДОНОРНШС PACTEIKU M ИНДУКЦИЙ ГАПЛОИДНЫХ РЕГЕНЕРАНТШ ¡13 1ШЛЫШШ ПШШЩ

Изменение сезона виращнванин донорных растении особенно сильно влияло на индукции андрогешшх структур и регенераций растений. Результаты влияния сезоннос~и приведены в табл.¡и рисунках 1, 2, 3. !

Если сравнить все 4 посева по количеству продуктивных г пыльников, частоте индукции структур и рвгенерантов, то наб- i. людается следующее: I) по отзывчивости пыльников и регенерации растении второ,'! полевой посев был менее благоприятный, чей первый; 2) зимние условия очень сильно затормаживали аяд-' рогенез пыльников (особенно у сорта Саратовская 29). Если в,.. весеннем тепличном посеве индукция зелвных растений у семьи . 35/84 составляла то в зимнем посеве этот показатель

снизился до I,5S». , ;

Наблюдали резкий сдвиг путей морфогенеза у изучаемых ге-т 1 нотипов при изменении сезона вырацивания донорных растений. Так, у семьи 35/84 в зимних тепличных условиях индукция ризо-генных новообразований отсутствовала (рис. I), в то же время у сорта Саратовская 29 она наблюдалась практически во всех изученных вариантах. .

На основании изучения влияния сезонности на андрогенез пыльников можно сделать следующие заключение: I) Изменение сезона резко изменяет урожай пыльников к их иорфогенетическую активность, независимо от условий выращивания донорных растений (тепличных или полевых) и от применения регуляторов роста; ' 2) изменение сезонности может усиливать или уменьшать действие других факторов (генотипа, гормонов) на андрогенез пыль- . никой пшеницы.

Сопоставление условии выращиьояня и рааяции пылышкоа разных генотипов на гормоны показывает, ч~о процессы развития гаплоидов есть результат тесного взаимодействия renom с вне-- ■ ними факторами: I) условием питания и гормонов; 2) сезонности культивирования донорных решений.

, ОСОПШОСЕ! ПРОЦЕССА РЕГЕНЕГИШ РАСТЕНИЙ

23 ШШЛ'ЖШ ПЕШШ В ЗАЕИСШССТИ ОТ ГЕНОТИПА

йорфогенетические потенции культивируемых клеток расте-: в ли реализуется яри определенных условиях, в зависимости от

особенности генотипа. Одним из методов исследования генетиче-; ской регуляции процесса регенерации растения из пыльников яв-1 ляется сравнительное изучение генотипов с разной способностью х образованию анярогенных структур- Поэтому нами специально была подобраны гелотши, резко отдичавздеся по индукции андро-генных структур в культуре пыльников: сорт Саратовская 29 -слабоотзывчявый (т.о. пыльники менее продуктивные), а семья 35/84 - високоотзывчквая.

" ■ Отзывчивость пыльников семьи 35/84 в 4-5 раз выше, чем у • -сорта Саратовская 29, а по индукоаи структур в 8-9 раз к бодь-' "ле {рис. I, 2Ш 3). Семья 35/84 более склонна х образование «шусол, чем сорт Саратовская 29.

Если провести такой, хо анализ шехду регенерацией зеленых ж альбаноелих растении у капого генотипа, могло отметить, что у юрта Саратовская 29 яр .¿Опадают зеленые растения, а соотнпзенив зеленых растений эс альЯиносам независимо от сезо-яа аыраяивания доиорши растсяиЯ «двигается в пользу первых. Ш с смотря иа тв, что выход регенерантов у семья 35/64 в 5-6 раз : йольие» чем у сорта Саратовская 29, первый генотип дает более аисокна зшход пльЪштсвв. Кроне тото,, у семья 35/84 додж рнзо-¡гвняых форм ¡выше» нем у второго генотипа.

.Влияние генотипа сказывается -ла всех этапах получения гаплоидных регЕнерантов в культура пыльников шаеницы. Но сох зоадеИствием других факторов (услозия выращивания донорных фает&нкй,, регуляторы роста) мышо измелить отзывчивость пыль' ликов я выход ре..адерантов а ¡пользу зеленых растения.

.жшволн

I. В результате пряменеякя культуры пыльников получены 42 хоиознгоншх шп яровой мягкой пшеницы, хоторые переданы л лабораюрнл селекции я семеноводства ЙКНСХ Сго-Востоха для язу«ения хозяйственво-аднних .признаков я использования как исходного селекционного материала. Полученные линии целесообразно ясаользолать я таплоиднод технологии в качестве доноров признаков 'образолание андрогенных структур я регенераций раствНЕй".

2. Выявлен ярко выраженный дифференцировании»! эффект / .ействия б-БАЯ и 2,4-Д на индукции регенеронтоь аз пышшсов. рииенекие 6-БАП у семьи 35/84 резко увеличивало выход зелени*-, астений (16*), а у сорта Саратовская 29 этот показатель бил \ ' рачительно низке. Выход зеленых растение при применения аоборот, был выше у сорта Саратовская 29 по сравнении с :еыьей 35/84. | ^

3. В культуре пыльников пиеницы цохьо регулировать' прр—' 1£сс образования тех или иных андрогешшх структур мепдя соотр юшеная концентрации кинетика и 2,4-Д в питательной среде«.;,-1ри преобладании кинетина над 2,4-Д наблюдала увеличение ш1г;М; [укции риэогенных форы, а выход зеленых регенерантов при отри ¡нихался у обоих генотипов.

4. При изучении влияния всех трех регуляторов роста была имечено, что с возрастанием их концентрации в питательное-'й,/. :реде увеличивается выход альбаносных растений. ' ; ',{!.

5. Впервые показано, что в условиях поздних сроков пос«;-».*.; >а донорных растений в воле (иснь месяц) продуктивность пыль—, шков и регенерация растений была одинаковы с интенсивностью^ /: них процессов в тепличпых условиях. ; л' .'

6. Регенерацконнаа способность пыльников пвеница зависе-та от сезона выравдваная донорных растений. При весеннем поее-1е (тепличном) донорных растейий выход регенерантов был значительно выше, чем при аимвец (тепличной) посеве. ,!

7. Установлено, что наиболее высокий выход регенерантов Л 13 пыльников пшеницы приходится на ранне-весенний полевой по-¡ев донорных растений (посев - конец апреля - начало ига).

8. Отмечено влияние генотипа на все этапы получения* галоидов ппеницы ин витро. Однако влияние генотипа можно регу- ' тировать условиями выращивания донорных растений, а такте раз-шчньши сочетаниями и концентрациями регуляторов роста.

.Список опубликованных работ по теме диссертации

; 1. Рагубова С.Д. Гормональная регуляция эмбриогенеза в культуре гаплоидов пшеницы.//Материалы научной конференции молодых ученых:Пути повышения эффективности сельскохозяйственного производотва.-М.,УДН,1988.-С.32-33.

2. Рагубова С.Д. Влияние регуляторов роста на выход зеленых ж альбиносках растений.//II конференция научно-учебного центра $язисо-хаиичеоких методов исследования:Тез.докл. 21-24 февраля 1939 г.-М..УДН.1989.-С.201.

3. Рагубова С.Д. Роль генотипа в процеосе морфогенеза шиь . киков пшеницы.//III кооферещия научно-учебного центра

,."Применение фазяко-хямичесгах методов исследования в науке технике":Тез.докл.Часть II.Меддко-биологические а агро-бдалолческнв науки. 20-23 февраля 1990 г.-Ы.,УДН,1990.~СДб8

Тематический слан 1990 г., S 417

Подяюаяо х печати 26.11.90. Формат 60x90/16. Ротвпринтная п wi, 1,0. Уч.-взд.л. 0,96. Усл.кр.-отт. 1,125.

Тира* 100 экз. Заказ ЭТ2. Бесплатно Издательство Универентэта дружбы народов

_II7S??« reO-I./lPCfog., ТЛЛИВМДЯИС.^_

Типография Издательства УДН II7923, ГСП-I, Ыосква, ул.Орджоникидзе,3