Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Обмен нуклеиновых кислот в регенерирующей печени крыс при экспериментально-индуцированных дислипопротеинемиях и их коррекции

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Обмен нуклеиновых кислот в регенерирующей печени крыс при экспериментально-индуцированных дислипопротеинемиях и их коррекции"

РТ Б ОН

1 г га ^

МИНСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

ДАНЧЕНКО Елена Олеговна

ОБМЕН НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ В РЕГЕНЕРИРУЮЩЕЙ ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ИНДУЦИРОВАННЫХ ДИСЛИПОПРОТЕИНЕМИЯХ И ИХ КОРРЕКЦИИ

03.С0.04 - биохимия

А ВТОРЕФЕРЛТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Минск -1994

Работа выполнена на кафедре биохимии Витебского ордена Дружбы народов медицинского института Республики Беларусь

Научный руководитель - доктор биологических наук,

профессор ЧИРКИН A.A. Научный консультант - доктор биологических наук

АБАКУМОВА О.Ю.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор КОЛБ В.Г. доктор биологических наук, старший научный сотрудник Б У КО В.У.

Ведущая организация: Смоленская Медицинская академия

Защита состоится "_ "_1994 г. в_час.

на заседании Специализированного Совета К.077.01.02 по присуждению ученой степени кандидата медицинских наук в Минском ордена Трудового Красного Знамени медицинском институте (220116, г. Минск, проспект Дзержинского, 83)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Минского ордена Трудового Красного Знамени государственного медицинского института.

Автореферат разослан "_"_1994 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат биологических наук,

старший научный сотрудник Л.А.МЕЛЕНТОВИЧ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ. Актуальность проблемы. Несмотря на то, что молекулярные меха-,?ы регенераторных процессов в печени изучены достаточно де-эно. до настоящего времени существует важная научно-приклад-проблема управления восстановительными процесса;®* в органе огерА.Ф., 1980; Лопухин Ю.М. и соавт. 1983; Абакумова О.Ю.. 1; Осочук С.С., 1992 и др.) Особенно ванным является поиск пук ее решению в последние годы в связи с постоянно увеличивайся вероятностью неблагоприятных воздействий на печень: реет тических повреждений печени (травмы, операции), действие разных гепатотоксических химических веществ (гепатотоксины, гепа-зопные лекарства), хроническое действие алкоголя (В.У . Зуко, П, ионизирующего излучения (П.П. Чаяло 1988-1994, А. А.Чиркни 3-1594) и других Факторов. При решении этой проблемы вазлю поение двуединой цели: получение информации о молекулясны.с анизмах регенеранконного процесса в печени и Функциональная 1?:теристика этих механизмов. В связи с этим целесообразно оце-э процессы, связанные с делением (митотическая сага регзнера-1-3 суток) и гипертрофией гепатоцитоз (гипертрофическая фа-:егенерации, 5-14 сутки). Оценка процессов в митотическущ фа-эегенерашш осуществляется путем выявления морфологически.:: знаков деления клеток и особенностей биосинтеза нуклеиновых :;от (репликация ДНК. транскрипция). Изучение процессов з гн-грофическую Фазу регенераторных процессов возмозно путем пс-цозакил параметров липидтранспортной системы, ведущие компоты которой синтезируются в печени и экспортируются в кровенос-русло (А.А.Чиркни и соазт., 1988-1994, Н.Э.Коновалова, 1994). гязп с выщзизло::сенным целесообразно исследование по схема: :тзие фактора, иницпирущщего повреждение печени (наприхзр, пу-шшпиаиш процессов свободно-радикального окисления - тетрах-гтзн, ионизирующее излучение, алкоголь и др.) - период сазви-езлзакной с посещением печени дислипспротеикемин (в это:-! пэ-г,э везмощно исследование действия лекарственных препаратов; -зацкя частичной гепатэктомии (тест на Функциснальное ссстсл-клеток печени и печени как органа).

Цель и задачи работы. Цельо исследования было выявление вгаи-зязи мезду параметрами обмена нуклеиновых кислот в пзчеви и эвннки показателями липидтранспортной спстег» креви при рзг:з-■шной регенерации печени з условиях воспроизведения дислипсп-гинемий свободно-радикального генеза и их коррекции. В ::о:

ветствии и этой целью в диссертационной работе поставлены след шие задачи:

1. Исследовать обмен нуклеиновых кислот и параметры липидтр спортной системы при регенерации печени в условиях острой токсикации тетрахлорметаном, действии внешнего гамма-обл! ния и хронической алкогольной интоксикации.

2. Изучить молекулярные механизмы действия гепатотропных препг тов при регенерации печени крыс в условиях моделирования I липопротеинемий свободно-радикального генеза.

3. Обосновать применение теста цитотоксичности для биохимичес го обоснования применения гепатотропных препаратов с целью равлекия восстановительными процессами в печени крыс при периментально-индуцированных дислипопротеинемиях.

Научная новизна результатов. Впервые приведены докг тельства наличия связи между процессами, характеризующими реге рацию гепатоцитов, и параметрами липидтранспортной системы сь ротки крови. Описан ряд новых неизвестных ранее фактов:

- При стимуляции ПОЛ введением тетрахлорметана модифицируй скорость регенераторных процессов в печени; дополнительное е дение танафлока и флакозида перед операцией частичной тепа: томней потенцирует ингибрруккцие регенерацию эффекты тетрах/ метана. Предполагается, что флакозид тормозит синтез мито> дриальной ДНК, а танафлон ускоряет транспорт РНК в цитозоль ингибирует синтез ядерной ДНК.

- Ретенционная гиперхолестеринемия спустя 24 часа после опере частичной гепатэктомии выражена сильнее у крыс, затравленны? рахлорметаном. Этот эффект связан с изменением липопротеинс го спектра сыворотки крови и указывает на сниженную эффе ность рецепторопосредованного захвата апо-В содернащих лиг теинов и лкполитическую трансформацию ЛПОНП.

- Модель репаративной регенерации печени позволяет выявить эфЗ тивность гепатотропной терапии в условиях острой интокс* тетрахлорметаном. По показателям липидтранспортной системы положительное действие препаратов в митотическую фазу реге цпк, исчезающее в гипертрофическую фазу процесса.

- Однократное внеынее гамма-облучение крыс (0.25-5.0 Гр) ведет проявлению физиологической и репаративной регенерации печеш

совпадающем по срокам с развитием транзиторной I ц::-индуцированной дислипопротеинемии.

Однократное внешнее гамма-облучение в диапазоне доз 0.5-5.0 Гр ведет к синхронному повышению уровней холестерина и ДНК печени (17 сутки), что мскет свидетельствовать о ванной роли повышения количества холестерина в гепатоцитах в механизмах физиологической и репаративной регенерации печени.

Гепатотропные препараты с разню механизмом действия (флакозид, танафлон. ЗФЛ) в печени интакткых крыс вызывают однотипные сдвиги в содержании холестерина, ДНК, частично FKK и белков. Предварительное гамма-облучение модифицирует действие гепатотропных препаратов на содержание липидов и нуклеиновых кислот в печени крыс.

В китотическуз фазу регенерации у интакткых крыс обнаружена ги-похолестеринемия, у предварительно облученных крыс в дозе 0.25 Гр кормохолестеринемия и 0.5 Гр - гипахолестеринемия. Танафлон и флакозид не оказывают влияния на содержание холестерина в сыворотке крови облученных крыс в состоянии репаративной регенерации. Установлено, что при действии ионизирующего излучения танафлон и флакозид влияют положительно на те показатели липидтранспор-гной системы, которые были изменены под действием облучения. Те компоненты липидтранспортной системы, которые шли устойчивы к радиации, не изменяются при действии гепатотропных препаратов, "иперхолестеринемический эффект флакозида при дозе 0.25 Гр, воз-ю:::но, связан со стимуляцией регенераторных процессов в печени. 1репарат эссенциальных фосфолипидоз наиболее эффективен для тредотвращендя развития радпационно-индушфсванных дислипопротеи-ieinm в широком диапазоне доз ионизирующего излучения (0.25-5.0 Гр) фоническая алкогольная интоксикация ведет к уменьшению содержания РНК з клетках неповрежденней печени и замедляет биосинтез IHK в регенерирующей печени.

1репарат эссенциальных фосфолипидоз способен восстанавливать :корость биосинтеза ДНК в регенерирующей печени адкоголнзирован-;ЫХ крыс.

Есследование параметров лнпидтранспорткой систем при острой итокешеацаи алкоголем свидетельствуют об пнтенспфнхащп! прямого 'ранспорта холестерина в клетку и ослаблении его оттока из клет-" печень. При хронической интоксикации алкоголем развнзается-':-:~охолестер:ше:^!я как результат сниженного экспорта из печени 20НП.

репарат эссенциальных фосфолипидоз при хронической интохсика-пи алкоголем нормализовал индекс атеоогенности, гпрнскислотный

спектр липопротеинов и увеличил количество ЛНВП.

- Препарат эссенциальные фосфолипиды был наиболее эффективным пр коррекции показателей липндтранспорткой системы в гипертрофиче кую фазу регенерации печени алкоголизированных крыс.

- С помощью метода цитотоксичности на линиях клеток L-929 и L-4 показаны возможные механизмы, ленащие в основе эффективности патотропных препаратов в условиях дислипопротеинемий свободно-дикального генеза.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований показывают, что любое стимулировани

процессов физиологической или репаративной регенерации печен сопряжено с синхронным увеличением содержания свободного холесте рина в сыворотке крови и интенсивностью кнтотической активност гепатоцитов или с увеличение;: содержания холестерина в плазме стимуляцией включения моченого тк-зцц-ша б ДЧК. По&дерг«:Бается точка зрения (Лопухин Ю.!.;. к соавт., 1953), что кс::сдкнпе конца?. трацаи холестерина является сигналом дяд пролг.Сзративных процес ссз в печен;:. Обоснована необходимость дальне;::";;:: фундамен тальных исследований по оценке рол;: холестерина гепатоцитов н ли попротеиноЕых транспортир: Фор;: в нодуляц-;;: пролис аративко;; а:; тивности клеток печени. Обоснована необходихостс ладькеваоф раз работки подходов к оценке экспортной функции паче:-:::, как наибо лее эффективного способа изучения Функциональной зрелости пегене рируюыих гепатоцитов.

Практическая ценность работы определяется кс::ет„тац::еФ Факт, негативного эффекта ко;;5::кац:;н Сапторог;, ьроцосо.

ПОЛ ь печен;:, к препаратов, обдвда:::;:;-; гепдй.тродн:::: доФстт ЭТИХ УСЛОВИЯХ ЕЫФСР КВИбОЛЗО полезных И ЗС^еКТИВН;:/ (ПЪлОТ:- дол i ен требовать исследования цитотоксичности пподлагаехого поепара та в клеточных енстенах, кетаСолпзкрувфкх i; ненстаьоднэхэфдт:'. этот препарат.

Zjjí дальнейшего зкспернкентально-клпннчесхего испытан;:,; целэ сообразно рекомендовать:

1. Дифференцированное применение препаратов в зависимости от ста па регенераторных процессов в печен;; (китстическая пл.: гипзр трофическая фаза).

2. Более еирокое применение препаратов зссенциальных фосфолипи дев при алкогольных и радиациокно-нндуцпрованных повреждения печени.

рацию удаления 70% массы печени производили в соответстви: классическим методом Хигинса и Андерсона (1931). Контрольные вотные подвергались лонной операции, включая лапаратомию без : ления долей печени. Острую интоксикацию тетрахлорметаном выз: ли введением 0.7 мл гепатотоксина в смеси с оливковым маслом (об/об) трехкратно в желудок через зонд с интервалом 48 ч, между введениями. Однократное облучение осуществляли на гамма тановке УГУ-420 с мощностью дозы 2.7*ю~4 Гр 1 с и фокусным р; стоянием 3 м в дозах 0.25, 0.5, 1.0 и 5.0 Гр. Хроническую а гольную интоксикацию вызывали введением в течении 8 недель в: рихселудочно через зонд этанола в дозе 3.5 г/кг массы тела, трую алкогольную интоксикацию вызывали введением однократно нола в такой же дозе внутрибршинно. Операцию частичной гепа1 томии производили через через 16 суток после облучения (пе; максимального развития транзиторной радиационной дислипопроте: мин) (А.А.Чиркин и соавт. 1990-1994), через сутки после после, го введения алкоголя и через неделю после введения тетрахлорм на. Часть тавотных в течение семи дней после облучения и инто: кации тетрахлорметаном получала препараты: танафлон в доз мг/кг, флакозид 100 мг/кг и препарат ЗФЛ 300 мг/кг (эссенциал фосфолипиды фирмы "Рон-Пуленк Рорер", Германия). В серии с хр ческой алкогольной интоксикацией ЭФЛ вводили ежедневно б теч 8 недель. Животных забивали - через 24 часа и на 6 сутки после патэктомии.

Обмен нуклеиновых кислот изучали в'образцах печени, зам ненных в кидком азоте. Интенсивность синтеза ДНК оценивали включению 3Н-тимидина, который вводили за Z часа до декагшт животных в дозе 100 мкКи/крыса (0. Ю. Абакумова и соавт.,1989). личество ДНК и РНК определяли спектрофотометрически (Blobel Potter V.R., 1968). Для определения радиоактивности нуклеин кислот использовали Фильтры "Владипор", КФА-КА II 5, сцннцнляц кую кидкость КС-8 и сцикщ!ляцконный счетчик. "Бета-2". Удел активность рассчитывали на 1 мг ДНК соответствующей фракции, рэделение лнпидов в печени осуществляли после их экстракции методу Фолтча.

3 сыворотке крови определяли содержание триацилглицерино сбщлх яапидов с помощью наборов фпрмы "Лахема". Липопротеины делялп прэципктааконнш методом Ш.В.Перова) и определяли со канне холестерина ЛПВП, ЛШШ, ЯПОЙП (В. Г. Колб, В. С. Камыш 1932}. Индекс атерогеккости рассчитывали по формуле а. Н.Клзк

Белково-липидный состав основных липопротеинов исследовали по прописи М."П. Антонова и соавт., 1986. Подсчет митозов и дзуядерных клеток производили в срезах, окрашенных гематоксилин-эозинсм. Для определения цитотаксичностя использовались линии клеток L-9Z9 и L-41. которые культивировались в среде 193 с добавлением 1GJ бычьей сыворотки. Препараты добавляли к ионослое клеток в дозах 59. 100. 200, 400 и 1000 икг/ш! среды и инкубировали в течении 1-4 суток. Подсчет клеток в конаслое производили па методике S.J. Gillies, 1986. Синтез ДНК и РНК оценивали па включении I4C-rroot-дина и 14С-уридина, который добавляли в дозе 2.5 мкКи/ют среды. Секрецию фактора некроза опухоли определяли по методике Flsíi и Glfford 1983, Статистическая обработка данных производилась с использованием критерия Стьюдента с использованием специального пакета программ на IBM-386.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСТЛННИЕ.

При изучении регенерации нормальной печени после гепатзкта-нии установлено, что с первых суток регенерации отмечается усиление митотической активности гепатоцитов. которая увеличивается более, чем в 3 раза к третьим суткам регенерации. Исследование динамики холестеринемии выявило три фазы: 1-е сутки - снижение в 1.5-раза содержания холестерина. 2-4 сутки - нормализация. 6-1С сутки - снова отмечается гипохолестеринемия. Через 24 часа после гепатзктомии уровень свободного холестерина не изменился, а через 48 часов количество незстерифицярованного холестерина превышало контрольный уровень в 1.5 раза и совпадало с пиксл митотической активности гепатоцитов. Возможно. концентрация незстериЗи-цированного холестерина в сыворотке крови является своеобразны:* сигналом для вступления гепатоцитов в деление {к. М.Лопухин.1983). На первые сутки после частичной гепатзктомии интоксикация тетрах-лорметаном вызвала увеличение содержания РНК в roscaгенатах и ядрах на 22% и 755» соответственно и ДНК в гошгенатах на 25% по сравнению с их содержанием в регенерирующей изначально неповрежденной печени. Возможно, действие гепатотоксина привала к усилению транскрипции и выходу РНК в цитозоль для биосинтеза белков и ферментов, необходимых для репликации (S.B.Rao. 1989). Транспорту РНК в цитозоль монет такге способствовать таврездение мембран в результате активации ПОЛ. вызванное тетрахлорметаясм (A. ¡I. Арча-ков. 1972, D.Bagchl, 1993). Удельная радиоактивность ДНК з зтст срок не изменилась по сравнении с нормальной регенерирующей не-

ченью. Танафлон вызвал увеличение содержания ДНК на 47% и РНК 27% в ядерной фракции печени и уменьшение, уровня РНК в гомоге тах на 11%. Флакозид увеличил только содержание ядерной ДНК 32%. Выявлено снижение удельной радиоактивности ДНК в гомоге тах при применении танафлона в 1.9 раза и флакозида в 1.5 ра танафлон также снизил удельную радиоактивность ядерной ДНК в раза . Отсюда следует, что танафлон ингибирует, вероятно, син ядерной ДНК, а флакозид - ДНК митохондрий, поскольку удельная диоактивностЬ ДНК ядер при прйменёнии этого препарата ке изме лась, а гомогенатов - уменьшилась. К 6-м^ядрах при интоксика тетрахлорметаном остается повышенным на 59%. Исследование уде ной радиоактивности показало, что скорость включения меченого мидина в обе фракции печени в 1.5-1.8 раз снижена по сравнени: контролем, а в гомогенатах удельная радиоактивность ДНК на снижена по отношению к интактным животным. При применении тан; лона содержание нуклеиновых кислот практически не отличалось контроля. Удельная радиоактивность ДНК была снижена и состав: 76% от контроля в гомогенатах и 67% в ядерной фракции. Следо] тельно. можно предположить, что ингибирующее действие танафЛ( на регенерацию продолжается до 6-х суток после гепатэктомки. Ф. козид вызвал снижение в 2.3 раза содержания РНК в ядрах и на ; ДНК в гомогенатах. Скорость, включения 3Н-тимидина в ДНК не от. чалась от контроля. Полученные результаты показали, что препарг танафлон и флакозид. возмокно. замедляют регенерацию печени фоне ее токсического поранения тетрахлорметаном.

Регенерация изначально неповрежденной печени на 1-е су: протекает на фоне гипохолестеринемии, обусловленной снижением < держания холестерина в липопротеинах, синтезируемых в печ« (ХС-ЛПВП на 296% и ХС-ЛПОНП на 106%). Уровень холестерина Л повышен на 70%, что, вероятно, связано с низкой эффективное; рецепторопосредованного захвата липопротеинов регенерирующей I ченью. В составе ЛПВП приблизительно в 2 раза снижено содержав белка, что свидетельствует о нарушении белоксинтезирующей функ1 печени. К 6-м суткам характер изменения липидного спектра сьц ротки аналогичный, наблюдаемому на 1-е сутки. В составе апо-В с держащих липопротеинах отмечается снижение содержания белков 742 и увеличение на 42% содержания липидов, что может быть при1 ной нарушения захвата юс клетками и увеличения времени их цир* ляпни в крови.

Регенерация печени в 1-е сутки после токсического поражен

тетрахлорметаном протекает на фоне выраженной гиперхолестеринемии с увеличением общего холестерина в 3.4 раза, повышением содержания холестерина ЛПОНП на 4855 и ЛПНП на 71% без изменения уровня ХС-ЛПВП, повышением уровня триацилглицеринов на 48%. Это обусловило увеличение индекса атерогенности в 1.5 раза. Увеличение содержания апо-В содержащих липопротеинов и гипертриацилглицерине-мия позволяют предположить нарушение метаболизма липопротеинов, возможно, вследствие снижения липолитической активности сыворотки крови (В.А.Куликов, 1993) или нарушения рецепторного аппарата плазматической мембраны. К нарушению рецепторного захвата атерс-генных липопротеинов печенью может приводить изменение в белко-во-липидном составе данных липопротеинов: наблюдается увеличение в 2.5 раза содержания липидов и менее выраженное (в 1.2 раза) увеличение белков, что приводит к снижению белково-липидного коэффициента в 2.2 раза. В составе ЛПВП тетрахлорметан вызвал уменьшение содержания липидов в 1.3 раза, но не влиял на содержание белков. К 6-м суткам гиперхолестеринемия сохраняется, хотя менее выраженная (з 1.2 раза) и обусловлена она увеличением содержания ХС-ЛПБП в 2.2 раза. Возможно, это свидетельствует о восстановлении функции печени. Состав основных классов липопротеинов аналогичен наблюдаемому на 1-е сутки. Таким образом, тетрахлорметан вызывает гиперхолестеринемию. за счет задержки в кровеносном русле атерогенных липопротеинов и изменения их белково-ли-пидного состава. Танафлон и флакозид в 1-е сутки регенерации вызывали снижение уровня холестерина сыворотки на 24-49%. уменьшая ХС-ЛПНП в 3.5-4.5 раза, и увеличение альфа-холестерина на 35-50%. Поскольку танафлон уменьшил на 59% содержание ХС-ЛПОНП и на 71% уровень триацилглицеринов. можно думать об активации под действием этого препарата липолитической трансформации липопротеинов. что согласуется с данными литературы об образовании ЛПВП из ТГ-богатых липопротеинов (T.M.Porte. 1979, A.R.Tâll, 1979). К 6-м суткам содержание общего холестерина на 38% превышает уровень контрольных животных за счет увеличения при применении танафлона на 200% фракции ХС-ЛПНП. и на 78% ХС-ЛПВП при введении флако'зида. Возможно, танафлон, являясь желчегонным препаратом, стимулирует синтез собственного холестерина, что приводит к снижению рецепто-ропосредованного захвата липопротеинов печенью. Оба препарата изменяли белково-липидньгй состав основных классов липопротекнсз. На 1-е сутки уровень липидов повышается в 1.2-1.5 раза в составе ЛПВП и снижается в 1.7 раза (в случае танафлона) и в 3.6 раза (з

случае флакозида) в составе атерогенных липопротеинов. Танафли повышал на 73% уровень белков в ЛПВП. К 6-м суткам оба препарат оказывали однотипный эффект: снижение липидов (приблизительно в раза) и белка (в 1.8 раза) в ЛПВП ; снижение в 3.5 раза (флако зид) и 6.4 раза (танафлон) липидов и повышение белка в апо-В со держащих липопротеинах. Таким образом, препараты препятствус развитию гиперхолестеринемии в митотическув фазу регенерации пе чет.

Изучение воздействия ионизирующего излучения на процессы физиологической и репаративной регенерации показало, что облучение в диапазоне доз 0.25-5.0 Гр не оказывает заметного влияния на обмен нуклеиновых кислот на 10-е сутки после облучения. В этот период отмечается снижение содержания фосфолипидов на 42% и 272 после действия облучения в дозах 1.0 и 5.0 Гр. Возможно, что снижение содержания фосфолипидов обусловлено действием свободных радикалов. образующихся при облучении, на компоненты мембран (Б.С.Фоменко. 1984). К 17-м суткам отмечается увеличение содержания ДНК в 1.3-1.5 раза при облучении дозами 1.0 и 5.0 Гр. а к' 30-м суткам содержание ДНК снизилось на 34-6435 при действии всех доз, кроме 5.О Гр. свидетельствующие о завершении процессов регенерации. Полученные результаты можно объяснить стимуляцией процессов регенерации под действием облучения. Подтверждением этого являются результаты гистологического исследования срезов печени. Обнаружено, что после облучения в дозах 0.25-1.0 Гр отмечена стимуляция митотической активности гепатоцитов в 4-8 раз уже через 72 часа, после действия облучения, а также увеличение числа ги-перхромных клеток при облучении в дозе 0.5Гри1.0Гр-в2.2 раза. При действии высокой дозы число митозов не изменяется, а гиперхронных и двуядерных клеток уменьшается в 2 раза, что говорит о возможном ингибировании регенерации под действием высоких доз облучения (Н. Я. Гильяно. 1990. А.М.Полищук, 1983). Увеличение количества белка на 2155 к 30-м суткам при действии относительно малых доз облучения (0.25 и 0.5 Гр) может свидетельствовать о восстановлении белоксинтезирующей функции печени к концу первого месяца после облучения. При облучении высокой дозой (5.0 Гр) ре-паративные процессы, вероятно, еще не завершены. Одновременно с повышением содержания ДНК отмечается увеличение количества холестерина в печени на 27-46Х при действии всех доз облучения. Возможно, холестерин играет важную роль в механизмах физиологической и репаративной регенерации после облучения. К 30-м суткам содер-

вание холестерина возвратилось к неходкому уровнв.

Приненение танафлона и флаказяда у интактных животных вызвало ювышение содержания холестерина а печени; на 24% к 385£ саатветс-гвенно. возможна. за счет усиления его синтеза. Препарат ЭФЛ выз-зал снижение содержания холестерина в печени после облучения: все-ш дозами и у интактных животных в 2.1-2.3 раза и содержание фос-?олипидов в 1.3-1.5 раза. Возможно, данный: эффект связан с выведением холестерина в составе липопротеинавнх комплексов, а доггол-штельное введение фосфолипидов может угнетать синтез, собственных ипидов печенью. Флакозид оказался эффективным при действий 0.5 ■р и вызвал: снижение содержания холестерина в: 1.? раза и: повыше-же фосфолипидов в 1.3 раза. При остальных дозах облучения флако-ид не оказал. сун?ественнага влияния на обмен липядов. Применение анафлона снизило содержание холестерина в печени при дозе 1.0 Гр> 1.2 раза к фосфолипидов в '1.2 я 1.6 раза при: облучении дозами1 . О и 5.0 Гр соответственно. Препараты практически не влияли на ровень общих липвдов в печени облученных животных. Введение та-афлона и флакозида интактныкс гавотнш вызвало повышение содеряа-1Я ДНК в 1.2-1.4 раза и" параллельное незначительное увеличение эличества белка. Необходимо отметить, что изменение содержания элестерина при применении препаратов (также как и при действии Элучения) сопровождалось аналогичным изменением в содержании СС, что предполагает наличие взаимосвязи между холестериновым: 5иеном к регенерационными процессами.

При оценке действия радиации на процессы репаративной регене-щии установлено, что облучение в дозе 0.5 Гр на 1-е сутки уве-гчивает содержание РНК и ДНК в гомогенатах и ядерной фракции геток печени" на 17-21%. что говорит о возможном стимулирующем шянии данной дозк на обмен нуклеиновых кислот в печени, йссле-¡вание удельной Р^о^ктивноста^^Кш^ет^ла^ашое предотло-¡ние: скорость включения меченного^! - 56% в ядрах печени обменных в дозе 0.25 к 0.5 Гр животных. К 6-м суткам после облу-ния в дозе.- 0.25 Гр в гомогенатах уменьшается содержание ДНК и К в 1.3-1.5:раз. что может свидетельствовать, о замедлении про-ссов. репликации и транскрипции в гипертрофическую фазу регене-ции. Воздействие дозы 0.5 Гр не изменила содержание нуклеиновых злот в гомогенатах. но снизило содержание РНК в ядрах на 25%.. тенение танафлона к флакозида после облучения в дозе 0.25 Гр звало на 1-е сутки после гепатэктомии повышение содержания ДНИ 30-32% и 11-19% соответственно в гомогенатах и ядрах, а флака-

зид увеличил и содержание РНК на 16% в гомогенатах и 35% в ядра) Исследование удельной радиоактивности ДНК показало, что на фо* повышенного содержания ДНК в гомогенатах и ядрах, применение тг нафлона вызвало уменьшение включения/крыс дозой 0.3 Гр снижен* удельной радиоактивности наблюдалось при использовании обоих пре паратов на 47-52%. К 6-м суткам регенерации действие препарате на содержание нуклеиновых кислот оказалось однотипным: снижен*: содержания РНК в ядрах на 13-52% без изменения в гомогенатах.

_Для функциональной оценки печени исследовались показатели ли пидтранспортной системы (основные компоненты которой синтезируют ся в печени) после облучения и воздействия препаратов. Регенера ция после облучения в диапазоне доз 0.25-5.0 Гр протекает на_фон гиперхолестеринемии. Уровень общего холестерина повышен на 22-3S и обусловлен увеличением ХС-ЛПНП при облучении в дозе 0.25 Гр н 413%, 0.5 Гр - на_263%, 1.0 Гр - на 213%, 5.0 Гр - на 113% пр одновременном снижении содержания ХС-ЛПВП на 32-48%. Увеличени содержания' атерогенных липопротеинов можно объяснить, если пред положить нарувекие рецепторного захвата ЛПНП поврежденной ионизи рующей радиацией печенью. Этому процессу может способствоват также и изменение белково-липидного состава апо-В содержащих ли попротеинов: увеличивается количество липидов при облучении дозо 1.0 Гр - в 1.7 раза, 0.5 и 5.0 Гр - в 2.8 раза, 0.25 Гр В 7.4 ра за. Перераспределение холестерина вызвало при всех дозах облуче ния увеличение индекса атерогенности в 2.6-4.1 раз. Отмечадос увеличение в содержании белка в ЛПВП на 36% при облучении 0.25 Г и снижение на 74% при облучении 1.0 Гр. Полученные результат подтверждают концепцию о радиационно-индуцированной дислипопроте инемии, развивающейся на 17-е сутки после облучения (A.A.Чиркик Н. Ю.Коневалова, 1989-1994) , что может быть связано с нарушение обмена липидов в печени.

Из применяемых препаратов, наибольшей эффективностью обладав ЗФЛ, которые, введенные в дозе 300 мг/кг , предотвращали развит* дислипопротеинемии. Содержание общего холестерина сыворотг уменьшалось на 12-32% при облучении дозами 0.25-5.0 Гр. за счс уменьшения холестерина атерогенных классов липопротеинов при дс зах облучения 0.25 Гр на 91%, 0.5 Гр - 176%. При увеличении до: облучения эффект снижения уровня холестерина атерогенных классс липопротеинов становился менее выраженным и составил 7% при до: облучения 1.0 Гр. а при действии высокой дозы облучения 5 Гр о-началось повышение ХС-ЛПНП на 10%. Возможно, высокая доза облуч

пия вызывает глубокие поражения печени, которые не могут быть нормализованы эссенциальными фосфолипидами. Гипохолестеринемичес-кий эффект танафлона проявлялся при применении после облучения в цозах 0.25 и 5.0 Гр: уровень холестерина уменьшился на 93% и 54% соответственно. Однако, при дозе 0.25 Гр отмечалось значительнее снижение ХС-ЛПВП на 114%. Необходимо отметить, что данный препарат изменял белково-липидный состав атерогенных липопротеинов, :нижая содержание липидов при облучении всеми дозами, кроме 0.5 "р. в 4.5-5.7 раза. Это привело к повышению белково-липидного коэффициента в апо-В содержащих липопротеинах в 1.9-8.3 раза во зеем диапазоне доз облучения. Такое изменение состава данного сласса липопротеинов может способствовать • лучшему рецепторному захвату их клетками. Танафлон не оказывал влияния на белково-ли-шдный состав ЛПВП. Флакозид усиливал атерогенные изменения в ли-шдном спектре сыворотки крови при применении после облучения до-!0й 0.25 Гр: уровень ХС-ЛПВП снизился на 173%, а ХС-ЛПОНП увели-шлся на 30%. Возможно, наблюдается синергизм в действии облуче-гия и данного препарата. Флакозид оказывает нормолипидемическое действие при облучении выше 0.5 Гр: общий холестерин сыворотки :нижается до уровня интактных животных; ХС-ЛПВП повышается на :8-50% в диапазоне доз 0.5-5.0 Гр; при дозе облучения 0.5 и 1.0 'р содержание ХС-ЛПНП резко уменьшается на 550% и 810% соответс-■венно. а при облучении 5.0 Гр на 103 % снижен уровень ХС-ЛПОНП. ! составе апо-В содержащих липопротеинов уменьшалось содержание ¡елка при всех дозах, кроме 1.0 Гр. в 2.0 и 2.2 раза (0.25 и 0.5 'р) и в 7.5 раза при дозе 5.0 Гр.

Предварительное облучение в дозе 0.25 Гр вызывает после гепа-•эктомии повышение содержания общего холестерина сыворотки на 43% ¡о значений интактных животных за счет увеличения ХС-ЛПОНП на 50% : ХС-ЛПНП на 36%, что приводит к увеличению индекса атерогенности 2 раза. Возможно, данная доза облучения стимулирует холестери-огенез в печени. В составе ЛПВП на 68% увеличено содержание бела. При увеличении дозы облучения до 0.5 Гр регенерация протекала а фоне выраженной гипохолестеринемии и холестериновый профиль ыворотки не отличался от такового при регенерации неповрежденной ечени. Возможно, увеличение дозы облучения привело к дополни-ельным повреждениям структуры печени и. задержке холестерина для осстановления мембран.

В следующей серии опыта была поставлена задача оценить влия-. ие длительного воздействия фактора-активатора свободно-радикаль-

ного окисления - алкоголя - на регенерацию печени и показ; липидтранспортной системы сыворотки крови.

Хроническая алкогольная интоксикация привела к достовер} хотя не очень выраженному уменьшению содержания РНК в гомоге! и ядрах печени на 12% и 19% соответственно. Применение ЭФЛ в 300 мг/кг массы привело к увеличению уровня РНК на 3655 в m натах и 23% в ядрах. Возможно, длительное применение алко1 приводит к ингибированию транскрипции и биосинтеза белков (А. 1988).

Изменения в содержании нуклеиновых кислот на 1-е и 6-е с после ЧГЭ на фоне хронической алкогольной интоксикации по ср; нию с интактными животными были аналогичны наблюдаемым при _f нерации изначально.неповрежденной печени: на 1-е сутки сния содержания ДНК в гомогенатах и ядрах на 2235 и 24% соответстве и повышение РНК на 26%; на 6-е сутки - повышение уровня Р обоих фракциях на 18%. Обнаружено снижение удельной радиоак ности ДНК в 2 раза на 1-е сутки и ее увеличение в 1.5 раза на сутки регенерации. Можно думать, что хроническая алкогольная токсикация ингибирует и увеличивает время регенерации печени ле гепатэктомии (A.M.Blehl. 1990). Применение эссенциальных фолипидов снизило содержание РНК в гомогенатах на 13%. а в я - на 26% в первые сутки регенерации. Удельная радиоактивность в 1-е сутки была снижена в гомогенатах на 99% без изменения в рах. а на 6-е сутки - на 83% по сравнению с алкоголизирова» животными, но не отличалась от удельной радиоактивности ДНК поврежденной печени. Можно предположить, что эссенциальные фо липида ускоряют регенерацию в гипертрофическую фазу регенера Танафлон в 1-е сутки регенерации вызвал снижение содержания Р гомогенатах на 11% и увеличение содержания ДНК на 15%. на сутки - снижение содержания РНК в ядрах на 19%. Можно предан жить, что препарат ингибирует процесс транскрипции и выход Р штсзоль. Применение танафлона привело к снижению удельной р оактивности ДНК в 2.8-3.1 раза в обоих фракциях на 1-е сутки генерации и в 3.2 раза в ядерной фракции на 6-е сутки, т.е. нафлон усугубляет ингибирующее влияние алкоголя на регенер печени. Флакозид не изменил содержание нуклеиновых кисло' удельную радиоактивность ДНК в регенерирующей печени на 1-е < ки, но. несмотря на увеличение содержания ДНК в гомогенатах и рах на 15/5, удельная радиоактивность ДНК была значительно сню к 6-м суткам в 3.4 раза в гомогенатах и в 2.1 раза в ядрах.

позволяет думать, что флакозид ингибирует регенерацию печени в гипертрофическую фазу регенерации.

Исследование состояния липидтранспортной системы при острой алкогольной интоксикации показало уменьшение на 54% содержания ХС-ЛПВП при одновременном повышении уровня ЛПНЛ и ЛПОНП на 42%. общих липидов сыворотки и триацилглицеринов в 3 раза. Повышение уровня холестерина ЛЛНП и ЛПОНП возможно связано с недостаточной активностью липолитических ферментов, либо со снижением рецептор-ного захвата их клетками печени (как и при остром воздействии тетрахлорметана). Увеличивается содержание белка в 1.3 раза и уменьшается содержание липидов в 1.5 раза в составе апо-В содержащих липопротеинов. В составе ЛПВП отмечается противоположный эффект: увеличение содержания липидов в 1.5 раза и незначительное увеличение количества белков. Результаты показали, таким образом, что острая алкогольная интоксикация оказывает проатерогенный эффект, что согласуется с результатами других исследователей (Г.Х.Божко, 1992, Д.И.Бельченко, 1988).

Хроническая алкогольная интоксикация вызвала снижение уровня общего холестерина сыворотки на 15%, за счет уменьшения ХС-ЛПОНП на 54%. Возможно, хроническая алкогольная интоксикация снижает синтез ЛПОНП печенью и экспорт их в кровь, что подтверждается уменьшением содержания холестерина в печени на 12%. Уменьшения содержания холестерина можно объяснить уменьшением его синтеза, либо повышенным использованием его для восстановления мембран, поврежденных продуктами метаболизма этанола (B.G.Devi, 1993). Поскольку уровень триацилглицеринов сыворотки, уменьшился в 1.6 раза, а в печени не изменился; можно думать об активации алкоголем липопротеинлипазы (P.T.Willams, 1985, M.Valimaki, 1986). В составе- ЛПВП увеличилось на 32% содержание пальмитоолеиновой кислоты. В составе апо-В содержащих липопротеинов отмечалось увеличение липидов в 2.2 раза, пальмитоолеиновой и эйкозатриеновой кислот на 47% и .50% соответственно и уменьшение содержания полиненасыщенных жирных кислот - линолевой на 46%, арахидоновой на 31%. Снижение содержания полиненасыщенных жирных кислот может привести к изменению свойств мембран. Наблюдаемые изменения могут быть результатом активации ПОЛ, вызываемого этанолом (Р. В. Г'сСау, 1S92). Препарат ЗФЛ в дозе 100 мг/кг усилил гипохолестеринемичос-кий эффект, вызванный алкоголем и уменьщил содержание общего холестерина сыворотки на 28% за счет уменьшения в 1.6 раза ХС-ЛПНП. При применении препарата в дозе 300 мг/кг массы уровень холесте-

рина сыворотки повысился до значений интактных животных и 6bíj обусловлен увеличением на 34% ХС-ЛПВП и на 25% ХС-ЛПОНП, что может быть связано с нормализацией функции печени и повышенным синтезом данных классов липопротеинов. Снижение на 39й уровк5 ХС-ЛПНП является, вероятно, результатом улучшения рецепторопосре-дованного" захвата липопротеинов клетками, чему может способствовать повышение на 24л содержания белка в атерогенных липопротеи-нах. Препарат способствовал нормализации жирнокислотного составе ЛПНП, снижению в 1.7-2.2 раза индекса атерогенности.

При хронической алкогольной интоксикации регенерация печеш на 1-е сутки протекала на фоне более глубокой гипохолестеринеми; (уровень холестерина уменьшился на 157% по сравнению с интактным; животными и составил 6755 от контроля), и был обусловлен уменьшением содержания ЛПВП в 8 раз. Возможно, длительное применение алкоголя вызывает более глубокие нарушения структуры печени, дд; восстановления которых необходимо большее количество холестерин: и, следовательно, замедляется синтез дипспротеинсз. В состав; ЛПВП отмечается увеличение на 166% содержания белкоз без изменения количества липидов, что характерно для-насцентных липопротеинов. В составе апо-В содержащих липопротеинов изменен;:;! не каблз-далось. К 6-м суткам уровень холестерина повышается и достигает значений интактных животных за счет увеличения на Ш ХС-ЛПОНП. Учитывая повышение в 2.4 раза уровня трпацилгдицерпкоз можнс предположить снижение активности диполитических ферментов. В составе ЛПВП отмечалось снижение количества белка, что, вероятно, является результатом задержи:: этанолом восстановления бэлоксинте-зируадей функции печени. Введение 2ФЛ привело к увеличен!» содержания холестерина сыворотки в 1.9'раза за счет увеличения в 2 раза количества ХС-ЛПВП ив 1.4 раза ЛПОНП. В составе ЛПВП увеличивается на 27% содержание липидов, что могно объяснить включение: Э-ГЛ з их состав. В сыворотке отмечается гппертрпацпдгднцоринемпя, что объясняется увеличением ЛПОНП. К 6-м суткам содержание сывороточного холестерина не отличалось от значений интактных животных, но отмечалось увеличение в 2.5 раза ХС-ЛПНП и снижение уровня триацилглицеринов в 1.5 раза, что предполагает актпвапив синтеза ЛПВП из ТГ-богатых липопротеинов. В бедхсво-днпиднсм состав; ЛПВП и апо-В содержащих липопротеинов изменений не наблюдалось.

Применение Флакозида не вызвало изменений в днпидхен спектр; сыворотки крови на 1-е сутки, а танаФлон повысил содержание холестерина на 36% и снизил количество белка на 71Ф в составе ЛПНП.

i-м суткам уровень холестерина при применении обоих препаратов отличался от контроля, но повысились количество ЛПВП на 44 % [ применении танафлона и на 39% - флакозида. При этом танафлон !ыснл содержание ЛПКП на 74% и уменьшил количество ЛПОНП и три-:лглицеринов на 45%, что может говорить об усилении липолиза 'НП. Возможно, танафлон, являясь желчегонным препаратом, акти->ует синтез холестерина печенью, что .может вызвать снижение :ла рецепторов к апо-3 содержащим липопротеинам и, как следс-е, накопление ЛПКП. Действие флакозида проявлялось в увеллче-: на 39% ЛПВП, содержащих повышенное количество белка (на 27%), характерно для нзсцентных форм липопротеинов. Поскольку танаОлсн и флакозид оказывал}! пнгибирующее влияние регенбраккз печени, был проведен тэст на цитотоксичность с ис-ьгсваниен систен in vitro.' Исследование дгготокслчксста поха-о. что зссекцт:альш:з фосфолипиды не оказали влияния на реет ток L-929 i: 1-41. Танафлон и флакозид проявил:! щ:?о?окекческ~:л етег для клеток L-929, начинал с дозы 200 мкг/мл: рост клеток таг-^гл £5.7;' и -'2.5;; от контроля соответственно. Цктотокскчео-з:1::.? г:се:;л дсзозавхсгнгГ; характер и при дозз -1СС гкг/кг

(воз"свз;Э, клзт;;-;; несколько ''адзпткззвалззз" к ззззеу ггзгз-у), тте Ссззз подавлял рос? злзтен их кст.;:-;язт?з

тззклз 20.2% ст контроля. Пот у:;е::ь::-:н:::: хэдхчестзз ззззрот:::; ерздз (О.зз) :у:тотс:;е;гчсск;::1 ззузнг ^лакозкдз стал ::з;;зз зкзз-

зтъ ц::?стокс;1чзск1;,: зуУзкт Г-лакозкда. ОСнзрут'зно, что танго;:;:; "ттзт гптстткон'-нзстсн для клеток L-41, кстсзтя ;:сз;:.т" тззззт-

/нг. ;со ннгУл ;; 102-0 ••кг/;'.'! соответственно. Олзкогнд по сз-л л гнютснсучнезтьт; две данного типа квзтек. С2а нв-пегвта взвит сзвззгнн Оквсза некроза опухоли пзрвттнеальн;;'::: ::ро-знв. Показано, чгс нктотскспчзенпЛ ттузвт препаратов сбузон-пнгув;:рсваниз:: синтеза нуклеиновых ввело?. Пр:; нензуез^взн::.: ::в глоток 1-3,23 винзлено , что Г-тгноз;:;, ннвнзвруо; скнтез Л'Г', блвзнтзльно з одинаково:! стопе;::: нвн всех иепонвзуенин ;;зз в: -а к-.:-; - на 92.5-04.5%. При действ;:;: тангфлока отмоч-ал-дозогаЕпешкЯ зфтзкт. На клетках L-41 олакознд стимулировал тез ДЫК при всех дозах на 200% и РНК при использован::;: дез £00

мкг/мл и 400 мкг/мл на 40-50%. Танафлон ингибировал синтез ну. иновых кислот и при использовании клеток L-41%: синтез ДНК coi вкл при дозах 200 мкг/мл. 400 мкг/мл и 1000 мкг/мл соответств. 42.2%. 2.63% к 3.57%, а РНК - 26.24%, 6.36% и 3.69%. Таким о( зом, танафлон и флакозид обладают прямой цитотоксичностью в следуемых дозах: танафлон - для обоих клеточных линий, флакоз! только для L-929, обусловленной ингибированием синтеза нукле* вых кислот.

ВЫВОДЫ.

1. Регенерация печени в условиях острой интоксикации тетрахло^ таном характеризуется более высоким содержанием РНК в гомогенг и ядрах гепатоцитов и снижением удельной радиоактивности ДНИ гипертрофическую фазу процесса. Гепатотролные препараты тана£ и флакозид оказывают ингибирующее влияние на обмен нуклеино кислот в митотическую фазу регенерации печени.

2. При операции частичкой гепатэктомии установлены структ но-функциональные изменения гепатоцитов, инициированные введен тетрахлорметана и вызвавшие гиперхолестеринемию за счет задер в крови атерогенных классов липопротеинов. Танафлон и флако препятствуют развитию гиперхолестеринемии и, сохраняя уровень лестерина ЛПВП в митотическую фазу регенерации, способствуют : коплению атерогенных классов липопротеинов в гипертрофическую \ зу регенерационного процесса.

3. В периоде максимального развития транзиторной радиациокно-i дуцированной дислипопротеинемик выявлены признает биохкмическ стеатоза печени (17 сутки, 0.5-5.0 Гр), синхронное повышение < держания холестерина и ДНК в печени, Предварительное гамма-об. чение модифицирует действие гепатопротекторных препаратов на < держание липидов и нуклеиновых кислот в печени.

4. Ионизирующее излучение в дозах 0.25 и 0.5 Гр стимулирует б; синтез ДНК в митотическую фазу регенерации печени и замедли нормализацию изученных параметров обмена нуклеиновых кислот в i пертрофическую фазу. Танафлон и флакозид частично снимают зффг облучения только в митотическую фазу регенерации печени.

5. Частичная коррекция радкационно-индуцированной дислипопротг немки достигается с помощью танафлона только при высокой дозе с лучения (5 Гр). Флакозид оказывает нормолипидемпчоекое дейсть при внешнем гамма-облучении в дозах выше 0.5 Гр. При дозе 0.25 Маког;:д усиливает гиперхолестеринекические эффекты облучеш

репарат эссенциальных фосфолипидов препятствует развитию радиа-ионно-индуцированной дислипопротеинемии в диапазоне доз облуче-ия 0.25-5.0 Гр.

: Репаративная регенерация печени у крыс предварительно облучен-ых в дозе 0.25 Гр протекает на фоне нормохолестеринемии, а в до-е 0.5 Гр - гипохолестеринемии. Препараты танафлон и флакозид. веденные облученным крысам до операции частичной гепатэктомии, е оказали существенного влияния на изученные параметры липидт-анспортной системы.

. При хронической алкогольной интоксикации уменьшается содержа-ие РНК в гомогенатах и ядрах клеток печени. Препарат эссенциаль-ых фосфолипидов предотвращает этот эффект алкоголя. По включению Н-тимидина в ДНК доказано, что предварительное введение алкоголя амедляет процессы репаративной регенерации в печени. Препарат ссенциальных фосфолипидов стимулирует регенерационные процессы в ечени крыс, длительно получавших алкоголь, в гипертрофическую азу; флакозид, уменьшая синтез ДНК в гипертрофическую фазу реге-ерации, не влиял на него в митотическую фазу. Танафлон усугубля-т тормозящее регенерат® действие алкоголя. . При острой интоксикации этанолом происходит перераспределение олестерина между фракциями лилопротеинов по атерогенному типу, роническая алкогольная интоксикация характеризуется гипохолесте-инемией, гипотриацилглицеринемией и снижением уровня полиненасы-енных жирных кислот (линолевой и арахидоновой) в составе ЛПВП. репарат эссенциальных фосфолипидов (300 мг/кг) оказывает норма-изующее влияние на химический 'состав и соотношение основных лассов липопротеинов при хронической алкогольной интоксикации. . Репаративная регенерация печени у крыс после хронической алко-ольной интоксикации протекает в ^митотическую фазу на фоне зы-аженной гипохолестеринемии за счет уменьшения количества ЛПВП; ыявлены изменения состава ЛПВП (по насцентному типу). В гиперт-офическую фазу регенерации отмечено накопление ЛПОНП в крови, репарат эссенциальных фосфолипидов способствовал нормализации екоторых параметров липидтранспортной системы в гипертрофическую азу регенерации печени. Танафлон усиливал накопление атерогенных антиатерогенных классов липопротеинов. а флакозид не сказывал идимого эффекта на показатели липидтранспортной системы. 0. Прямой цитотоксический эффект танафлона выявлен для линий леток 1-929 и 1-41. а флакозида - только для Ь-41. Препарат зс-енциальных фосфолипидов не обладает прямой цитотоксичностьа. Все

изученные препараты не влияют на секрецию макрофагами фактор некроза опухоли, а их свойство подавлять рост клеток связано ингнбированием синтеза нуклеиновых кислот.

(7,

Практические рекомендации.

1. При использовании гепатотропных препаратов в условиях tokcü ческого алкогольного или радиационного поражения печени следуе учитывать возможность аддитивного негативного действия поврекдак щих агентов и гепатотропных фармпрепаратов.

2. Для оценки предполагаемой эффективности гепатотропного ripens рата рекомендуется тест цитотоксичности с использованием культу клеток, способных и неспособных к метаболизированию этого гепа тотропного препарата.

3. Сред;: испытанных гепатотропных препаратов наиболее зффекгивнь является препарат эссенциальных фосфолипидсз (действующее нача-j яаюстабива и эссенциале), способный сказывать положительное вл; кале как на метаболизм нуклеиновых кислот в печени, так и на cot тсяние ллпидтранспортной системы в кровеносном русле.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ. •

1. Канязалава Н. ¡0.. Данчанка Е. 0., Чыркша I.A., Чырк1н LI 0стзрь:ф1кацня халестэрыну у крзвяносным русле пры рэгенератарнг ПпертрафИ печан! у пацукоу //Вест АН БССР, сер. 61ял.не БУК, 1939. -II 4. -С. 83-90.

2. Чнркнн A.A., Воронов Г.Г., Гребенников И.Н.. Данченко Е.О. др. Радиационно-индуцироваккая днслнпопротеинемия и "зссенциал! ныэ фосфэдллиды" //"Зссенциальные фосфолипиды". Лкпостабил. Мате риалы научной конференции 11-12 ноября 1992'года, М.: Рон-Пулеь Рорер, 1992., с.107-115.

3. Данченко Е.О., Осочук С.С. Действие биофлазоноидов на обме нуклеиновых кислот в регенерирующей печени крнс при акткващ процессов свободно-радикального окисления // Влияние загрязаою радионуклидами окружающей среды на здоровье населения.-Сб.ш уч. трудов, - Витебск, 1993. - С. 31-37.

4. Чиркина И. А., Ольшанникова В. В., Осочук С. е., Данченко Е.( Особенности Физиологической и репаративной регенерации печени облученных крыс // Там se. С.65-69.

5. Орлова Л.Г., Данченко Е.О. Обмен липидов в печени при зкего риментальном радиационном поражении // Там ще, С.53.

6. Chirkina I.A.. Danchenko Е.О., Olshannikova V.V. Liver се

iroliferation and its pharmacological correction under gamma-ir-•adiatlon //Hepatology conference " Interdisciplinary problems of lver transplantation", 1994, Szczecin, P.27.

7. Abakuraova O.Y., Chirkln A.A., Fedorova L. N., Danchenko E. 0, t.al. Hepatotropic growth factor Isolated from pancreatic and lver cell stimulate rat liver regeneration // Там же. С. 23.

8. Chlrkin A. A., Abakuraova 0. Y.. Konevalova N. Yu., Danchenko 0 et.al. Serum lipid transport system state and liver growth ■generation //Там ке. С. 26.

9. Chirkin A.A., Abakuraova 0. Yu., Konevalova N. Yu. ,K.-J. Gunder-nn, Danchenko E.0. Liver growth regulation and serum lipid ansport system state //Falk Symposium N 78 Cytokines and the ver. 1994, P. 58.

10. Chirkln A.A., Abakuraova 0.Yu., Konevalova K.Yu., Danchenko ). Serum lipid transport system state and liver growth regula-)n //J. Hepatology, 1994. -vol.21,Suppl. 1.-S.153.

.1. Abakuraova 0. Yu.. Chirkln A. A., Kutsenko N. G., Danchenko

1. et.al. Hepatotrophic growth factor isolated from pancreatic liver cell stimulate rat liver regeneration //J.Hepatology,

4. -vol. 21, Suppl. 1. -S. 152.

2. Орлова Л.Г.. Данченко Е.О. Влияние липостабила на обмен ли-ов в печени при экспериментальном радиационном поражении //Ак-пьные вопросы гепатологки .-Тез.докл. Первого Белорусского гозиума гепатологов. -Гродно, 1994., С.30.

Ответственный за выпуск Данченко Елена Олеговна Подписано в печать "9" ноября 1994 г. Заказ N МЗ Тирая 100 экз. Объем 1.0 п.л. Формат 1/16 Ротопринт ВГМЙ. Витебск, пр-т Фрунзе, 27. Бесплатно