Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Реактивность липидтранспортной системы крови при холестеринопатиях

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Реактивность липидтранспортной системы крови при холестеринопатиях"

ИНСТИТУТ РАДИОБИОЛОГИИ АКАДЕД1 ИИ НАУК БЕЛАРУСИ

с Г* •■» На правах рукописи

['0 О Л

.КО НЕ ВАЛ ОВД Наталья Юрьевна

РЕАКТИВНОСТЬ ЛИПИДТРАНСПОРТНОЙ СИСТЕМЫ КРОВИ ПРИ ХОЛЕСТЕРИНОПАТИЯХ

03.00.04 — биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Минск — 1994

Работа выполнена на кафедре биохимии Витебского ор-паня Дружбы народов медицинского института Республики Беларусь и в Институте радиобиологии АН Беларуси.

Научный консультант — доктор биологических наук, профессор Чиркни А. А.

О ф и ц н а л ь н ы е оппонент ы:

доктор медицинских наук, профессор Кухта В. К.;

доктор биологических наук Буко В, У.;

доктор биологических наук Милютин А. А.

Ведушая организация — НИИ биомедпцпнскоп химии, РЛМН. "

Защита состоится — 1994 в^Час.

на заседании специализированного совета Д.006.30.01 по защите диссертации па соискание ученой степени доктора биологических наук в Институте радиобиологии АН Беларуси по адресу: 220600, г. Минск, ул. Жодинская, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института радиобиологии АН Беларуси.

Автореферат разослан __]994 г.

Ученый секретарь специализированного совета

кандидат биологических наук А. М. ХОДОСОВСКАЯ

ОБШАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность пооблеки. в процессе метаболизма гидрофильные пищевые и депонированные молекулы через ацетил-КоА превращаются в гидрофобную молекулу холестерина. Для транспоста холестерина в клетке и вне ее требуются специальные неханиз-ны- В настоящее вреня главное несто принадлежит биохимическим подходам к оценке механизмов прямого и обратного т{ 1нс-порта холестерина, химического состава основных классои ли-попротеинов и Функционирования системы эстериФикации холестерина в сыворотке крови. Наряду с Ферментами липолитическоя трансформации липопротеинов! группой трансферных и некоторых других белков, эти процессы и механизмы образуют липид-транспортную систену (ЛТС), нарушения которой ведут к мно-гин заболеваниям сердечно-сосудистой, гепатобилиарнои. эндокринной и других систен организма (работг школ Б-И- Чазова. Г-И- Сидоренко. Н-В. Перовой, А. II. Климова. В-Н. Турина, ф. 3. Мейерсона и нн. др.). условно относиных к группан хо-лестериноэа и холестериндеФииитов (С. Н. Лопухин. А. И. Арча-ков и др., 1983).

На Фоне многолетней постоянной тенденции к росту заболеваемости различными клинически! .( формами атеросклероза! идущей параллельно с урбанизацией общества, в постчернобыльском периоде появились новые условия, которые ведут к дополнительному увеличению частоты и более раннему проявлению этих заболевании (Е. Ф. Конопля и соавт-. 1990-(993; П- П. Чаяло и соавт.. 1986-1993; А-А- Чиркин и соавт.. 1990-1993). Перед биологией и медициной выросла новая проблема - проблема радиаиионноиндуцированного атеросклероза ( развитие атеросклероза, сопряженного с действием радиационно - окологи-

Принятыв сокращения: АПО - апопротеины; АТД - атерогенная диета; ЛЛП - дислипопротеинемия; ИБС - ишемическая болезнь сердца; ЛХАТ - лецитинхолестерин-ацилтрансФераза; ЛТС -липидтранспортная система; ли - липопротеины; лпвп - липо- • протеины высокой плотности; ЛПНП - липопротеины низкой плотности; ЛПОНП - липопротеины очень низкой плотности; СХС

- свободный холестерин; ТГ - трианилглицерины; ТХМ - тет-рахлорметэи; ФСП - Факторы стимулирующие пролиферацию; ХС

- холестерин; ХС-ЛПВП - холестерин липопротеинов высокой плотности; ХС-ЛПНП - холестерин липопротеинов ниэкои плотности; хс-ЛПОНП - холестерин липопротеинов очень низкой плотности; ЧГЭ - частичная гепатэктомия; ЭФЛ - эссенциаль-ные ФосФолшшпы; эхе - зФиры хопестерина.

чвских и стрессовых факторов ) . требующая незамедлительного решения, поскольку она касается здоровья сотен тысяч человек. в тон числе и подрастающих поколения- Ключевую роль в решении этой проблемы играют молекулярные механизмы развития ведущего фактора риска атеросклероза - атерогенных дислипопротеинемия ( А. Н- Климов. 1984; В-с. Репин. 1989; Т. И. Торховская. 1888: И- в>- Чернядьева, 188?).

До настоящего времени не определены гранили возможных изменений отдельных показателей лтс при действии разнообразных факторов (например, ралиаоиокно-экологических) иди при развитии холестериноза (например, атеросклероза) и холестерин дефицитов (например, некоторых опухолей)- в связи с этим в практическом отношении было бы целесообразно ввести понятие реактивности ЛТС и наполнить его строгими общими л специфическими ваковонерностяни изненения показателей транспорта липидов в сыворотке крови при той или иной патологии- Открытие и Формулирование таких закономерностей возможно при анализе больших массивов Фактического материала, полученного с использованием однотипных, доступных к воспроизведению и распространенных методов, и обработанного компьютерными программами нногофакторного статистического анализа и матенати-ческоя верификации образов- Отсутствие, систематизированных знания об обоих молекулярных основах реактивности лтс при развитии холестериноаов и холестеринодефицитов, а также о специфически1' особенностях реагирования показателей лтс при действии радиапиоино-экологических и стрессовых Факторов не позволяет точно прогнозировать развитие атеросклероза и разрабатывать адекватные принципы коррекции длп у жителей " чистых " и загрязненных радионуклидами регионов-

Цель работы « Изучить закономерности реагирования ли-пидтранспортноя системы с учетом Функционирования экспортных белков печени при экспериментальных и клинических проявлениях холестериноза и холестеринодеФидитных состояний-Задачи работы:

1- Изучить общие и специфические особенности реактивности лииидтранспортной системы при алиментарных, радиационное тетрахлорметаг- и стресс-индуцированных дислипопротзи-немиях и лислипопротеинемиях, вызванных сочетанным действием этих Факторов.

2- Исследовать молекулярные механизмы Функционирования системы эстериФикапии холестерина в кровеносном русле, как" основного элеиента обратного транспорта холестерина при экспериментально индуцированных дислипопротеинемиях.

3- Определить молекулярные механизмы реагирования компонентов липидтранспортноп системы при экспериментально индуцированных дислипопротеинемиях на действие гепатотропных. гиполипидемических и антиоксидантных лекарственных препаратов.

Оценить роль радиационного Фактора в развитии дис-липопротеинемий у людей. Провести сравнительный анализ состояния липидтранспортной системы у лиц. подвергавшихся и не подвергавшихся действию неблагоприятных радиационно-экологических и стрессовых Факторов аварии на члэс.

5-, Установить, обладает ли радиационный фактор модифицирующим действием на молекулярные неханиэм^. коррекции ЛЛП с помощью современных и перспективных эндогенных и экзогенных гиполипидимических препаратов.

Научная новизна результатов. Впервые в экспериментальных и клинических наблюдениях оценена реактивность липидтранспортной системы с учетом роли системы эстериФикашш холестерина в сыворотке крови прь действии Факторов, лежащих в основе Форнулируеноя концепции ускоренного развития атеросклероза у людей, которые подверглись действию комплек- ' са радиаиионно-экологических и стрессовых Факторов. Ланы описание, компьютерная обработка, определена молекулярно-биологическая и медицинская значимость ряда новых, неизвестных ранее Фактов:

- атерогенные типы ЛЛП возникают у крыс при действии однократного облучения в дозах 0,25 -5.0 Гр; сочетании внутреннего облучения цезием-137 и хронического внешнего облучения; токсическом повреждении печени тетрахлорнетанон ( ТХН ) и сочетании его с предварительным облучением и ате-рогенноа диетой; гипокинезии в течение 17 суток;

- устойчивость ЛТС крыс к пишевой нагрузке холестерином ножно снять предварительным гамма-облучением животных в любой доае (0,25 - 5.0 Гр) или сочетанием атерогенной диеты с повреждением печени ТХН или с удалением до массы печени;

- состав ЛПВП более устойчив к действию повреждаю-

тих факторов, чем состав апо-В-содерясаоих липопротеинов;

- действие поврежд&хщих Факторов приводит к появлению в сосудистом русле частил лл. богатых лилидами;

- сочетание действия ионизирующего облучения с другими повреждающими гепатотрощшни факторами меняет реактивность ЛТС на действие ионизирующего облучения!

- действие повреждающих Факторов на зстериФидирующую активность сыворотки крови чаше всего приводит к подавлению активности ЛХАТ. в случае активации этой системы механизмы ее разные и зависят от вида повреждающего «актора:

- регенерация печени на фоне действия дополнительных Факторов приводит к изменению реактивности лтс) гипоальФахо-лестеринения в втих условиях - отражение не регенераторного процесса, а сигнал нарушения катаболизма апо-В-содержаших ЛП. что в условиях активации бета-ЛХАТ создает условия для развития в дальнейшем холестериноэа;

- предварительное облучение, вне зависимости от дозы. (0.25 - S. О Гр> способствует нормализации состава ллвл при регенерации печени, при токсическом действии на печень тхм;

- в условиях холестериноэа (при действии ТХИ. пищевой нагрузки 5* холестерином, гипокинезии) компенсаторной реакцией является повышение содержания белка в апо-В-содержа-ших ЛП для стимуляции их рецепторного захвата;

- предварительное хроническое облучение не изменяет реактивности ЛТ~ на последующую пищевую нагрузку холестерином;

- в условиях разнонаправленного действия Факторов, модулирующих холестериногенез в печени, изменяется реактивность ЛТС и. вне зависимости от дозы облучения (0,25 - 5,0 Гр). развиваются атерогенные изменения ЛТС при содержании животных на диете с ненывин содержанием холестерина;

- специфичность реагирования ЛТС на гамма-оолучение выражается в формировании на 3-10 сутки после облучения особого холестеринового проФиля. основным признаком которого является относительно высокое содержание хс в лпвп. причиной появления такого ХС профиля служит выброс в ранние сроки пос.$э облучения в кровеносное русло ЛПВП богатых белками (типа наспентнк^). что приводит к активации системы эстерификашш холестерина и обратного транспорта ХС;

- истощение адаптации ЛТС к действию гамма-облучения

проявляется в подавлении общей скорости эстс риФикапии и активации бета-ЛХАТ. что приводит к Формированию атерогенных типов ЛЯП в поздние сроки наблюдения (7 месяцев после облучения);

- специфичность деистрия дозы облуче/ия О. 1 Гр на показатели ЛТС проявляется в том, что во все сроки после облучения строго контролировались уровни лйпидов в ЛПБП (их вктад в систему обратного транспорта у интактних животных составляет 92%) и содержание белков в апо-В-содержаших липопроте-инах (96 У- вклада в прямой транспорт); при действии больших доз излучения эти показатели не контролировались;

- в условиях стресса (3-й сутки гипокинезии! жестко контролируется состав и количество ЛПВП. возножно. это связано с ролью ЛПВП как источника ХС для синтеза стероидных гормонов;

- в условиях депрессии ЛХАТ возможность удаления ХС с плазматических нембран поддерживается путем уменьшения количества свободного холестерина в сыворотке крови;

Впервые проведена сравнительная оценка эффективности влия"ия природных и синтетических гкполипиденических антиок-сидантных гепатопротекТорных препагатов на показатели транспорта липидов и систему эстериФикаиии в сыворотке крови при экспериментально индуцированных ДЛП и холестеринопатйях.

теоретическая ■ практическая значимость работы- Впервые определены закономерности реактивности ЛТС при внешнем, внутреннем и хроническом действии ионизирующего излучения, регенерации печени после хирургической резекции и лействия гепатотоксина. иммобилизационном стрессе, содержании животных на атерогенных диетах и сочетании этих Факторов, которые моделируют действие комплекса радиааионно-экологических и стрессовых факторов в постчернобыльском периоде. Впервые в 1990 году (Будапешт. 20-я конференция Федерации Европейских Биохимических Обществ) сформулировано понятие о радиаиионно-экологических дислипопротеинсмиях-

Впервые сочетание методологий дискриминантного и кластерного анализов позволило дать детальные классификации состояний ЛТС при холестериноэах, 'холестеринде щитах и в условиях коррекции нарушении ЛТС. При атом показано, что влияние изолированных радиационного, стрессового и гелатотокси-

ческого Факторов на реактивность ЛТС отличается от действия сочетания sтих факторов, а также в условиях обогащения пиши холестеринон- Уникальное наблюдение на людях . проживавших в течение 5-30 лет в ломах с повшешшм гамма-Фоном в г. Витебске (нет загрязнения радионуклеидани). доказало самостоятельную роль изолированного радиационного фактора в Формировании дислилопротеинении атерогеннмх типов-

Практическая значимость работы определяется следующими Фактическими данными и обобщениями-*

- холестериновый профиль не поддается коррекции при применении гепатотропных. гиподипиаемических и антиокси-ааитных препаратов : И в случае развития На типа ЛЛП при содержании крыс на атерогенноя диете с предварительным облучением и оря сочетании атерогенноя диеты и токсического поврежден» печени . г) в случае гипоальфалилопротеинемии. возник атей при регенерации печени. Применение факторов стимулирующих пролиферацию гепатодитов в этом случае вызывает переход гипоальфалипопротеинемии в На тип ЛЛП:

- в ответ на действие вшеперечисленных препаратов в составе апо-в-содержаяих липопротеинов наиболее часто отнеча-лись следушие типы изменения : 1) уменьшение количества ли-пидов при нормальном количестве белка; 2) увеличение количества и липидов и белков; 3) увеличение количества липидов при нормальном содержании белка- Отсюда наиболее вероятна нормализация состава апо-В-содержаяшх ЛП в случаях, если в контрольных группах животных в составе лпонп»лпнп было уменьшено или увеличено количество липидов при нормальном количестве белка или было снижено содержание и липидов и белка- Препараты будут наименее эффективны, если в ало-'в-содержаших ЛП контрольных групп будет увеличено количество балка при нормальной количестве липидов ;

- под влиянием препаратов чаше всего состав ЛПВП неняется следуипин образом : (1 уменьшается количество липидов и "увеличивается количество белков, 2) уменьшается количество липидов при нормальной количестве белка. 3) увеличивается количество липидов и уменьшается количество Релка. Отсюда наиболее вероятна нормализация состава ЛПВП в случаях. если у контрольных животных в составе ЛПВП увеличено количество липидов и уменьшено количество белка, а также при

обратных взаимоотношениях; увеличено только количество липнлов при нормальной содержании белка. Препараты будут наименее эффективны, если в ЛПВП контрольных групп будет увеличено количество белка при нормальном количестве липидов:

- истинная активация ЛХАТ при применении препаратов наблюдается, если она сопровождается нормализацией основных параметров ЛТС. в остальных случаях она вторична вследствие повывеиной потребности в эстериФикаиии холестерина при ги-перхолестеринемии-

У части лиц. подвергшихся действию радиационно-экологических Факторов, возможно развитие адаптационных типов ДЛП. сопряженных с повышением содержания ХС-ЛПВП ( в эксперименте 10-е сутки после облучения крыс. 15 ликвидаторов, жители радиационных ломов);

- при действии радиаиионно-экологических факторов (РЭФ) у людей Формируются атерогенаые типы ДЛП ; гипоальфа-липопротеинемия у переселенцев с норнальной функцией щитовидной железы и IV тип ЛЛП у переселенпео с измененной функцией щитовидной железы и ликвидаторов;

- при действии РЭФ как на Фоне холестеринопатии. так и без нее. в составе апо-В-содержащих ДП наблюдаются проате-рогенные изменения увеличивается содержание белков и уменьшается содержание липидов;

- при действии РЭФ на Фоне халестеринопатий имеется тенденция к нормализации состава ЛПВП. причем при холестери-нодефиоите это совпадает с обшям действием РОФ (уменьшается содержание липидов). а при холестеринозе происходят изменение реактивности - содержание липидов в ЛПВП увеличивается-

Разработаний алгоритм исследования ЛТС и системы эстериФикаиии холестерина используется в течение 5 лет в липид-ном диагностическом центре, и 0ТМ0 "Кардиология" г.Витебска В Яогилевском областном кожно-венерологическом диспансере, в лаборатории регуляции обмена липидов Института биохимии ан Беларуси- Предложенные методы коррекции ЛТС при регенерации печени используются в лаборатории биохимических методов исследования Ш1ИЛ Минского мединститута-

Теоротичоские результаты работы включены в лекционные курсы кафедр биохимии Витебского. Гродненского, Смоленского медицинских ипстг "УТОП-

Основные положения. выносимые ца публичную защиту-

1- Изолирование радиационный Фактор способен индуцировать развитие лисдипопротеинения атерогенного типа.

2. Радиапионно-вкологические дисдипопротеинемии возникают при сочетании радиационных, гепатотоксических. стрессовых факторов и усугубляются при алиментарной гиперхолестери-вемии-

3- важнейший органом, определяющий реактивность липид-транспортной системы вообще и системы зстериФикапии холестерина в сыворотке крови в частности, является печень, что обосновывает стратегию применения гепатотропных эндогенных (ростовые вещества) и экзогенных (корректоры ЛЛП) факторов-

4- Радиационный фактор оказывает модифицирующее влияние ва реактивность липидтранспортнои системы при холе.тери-нозах и холестериндефшштах. что обосновывает создание сети специализированных липидно-диагностических лабораторий-

АлроОаадя работ« я публикации- Основные положения диссертации доложены и обсуждены на всесоюзных симпозиумах по биохимии лишшов (Алма-Ата. 1987). по проблемам клинической внэимологии (Москва. }889ь 7-м и 8-м съездах Белорусского физиологического общества (Витебск. 19 87i Минск. 1991). 4-и научном съезде по клинической лабораторной диагностике (Гродно. 18921. 2-м съезде дерматологов и венерологов (Могилев. 1892). Всесоюзных конференциях по последствиям аварии ва ЧАЭС (Минск, 1991 г- ; с- -Петербург. 1992). по продолжительности жизни (Киев.' 1891). нежоународных конференциях-по клинической Фарнакологии-(Волгоград. 1S90; Чита. 1891), республиканских конференциях по проблемам энзимоло-ПШ (Харьков. .1989), по радиобиологии и радиоэкологии (Минск. 18(0: 1881; Гомель. 1932), 14-м и 15-м международных биохимических конгрессах ( Прага, 1888; Иерусалим. 1991).' 20-й. конференции ФЕБО (Будапешт. 1980). 9-м международном конгрессе по заболеваниям печени (Базель. 1992). 28-й конференции европейской ассоциации по исследованиям печени (Париж. ,1993). .

По материалам диссёртации опубликовано 64 работы, из них 18 статей. 8 международных публикашш-

Структура и объем работы- .Диссертационная работа состоит ~иэ введения, позора литературы, описания .материалов и

негодов исследования. 6-и глав результатов и обсуждения собственных исследования, общего заключения, выводов, основных практических рекомендаций, списка литературы- Работа изложена на SOS страницах машинописного текста, содержит S9 рисунков. 83 таблицы- Список цитированной литературы включает 156 отечественных и 233 иностранных источника-

Эксперименталышс новели, методы исследования и клинические наблюдения- в опытах использовались крысы-самцы кассой 180-200 г. содержащиеся на стандартном рационе вивария- Все экспериментальные исследования бгчи выполнены на 1534 беспородных белых крысах, распределенных на 5 серий экспериментов.

Для выяснения роли радиационного фактора в развитии ДЛП были поставлены эксперименты на 536 крысах, облучение крыс проводили в Институте радиобиологии ан Беларуси. Внешнее однократное гамма-облучение животных производили на гам-на-установке УГУ-420 с мощностью дозы 2.7. 10'* Гр/с и Фокусным расстоянием 3 н в дозах О. 1; 0.25; 0.5; 1 О и 5,0 Гр (группы i-22) • Животных декапитировали на 3. 10. 1? и 30 сутки после облучения- Отдаленные последствия (7 Mecí, (ев после облучения) были исследованы при дозах облучения О.5 ГР и 1.0 Гр- Контрольные крысы (группа 23) содержались в таких же условиях, как и подопытные животные. Внешнее хроническое облучение производили в течение 30 суток с помощью установки Гаммарид - мощность дозы 0.04 рентген/час, суммарная лоза 0.25 Гр (группа 53). Эффект внутреннего облучения изучен на трех группах крыс: животным группы 54 ежедневно в течение 16 суток вводили по 20 кБк цезия-13 (суммарная активность 320 кБк) и в опыт брали спустя 120 суток (поглощенная доза внутреннего облучения крыс составила 0.25 Гр). крысам группы 55. помимо введения цезия по аналогичной схеме, делали нагрузку jl31 с обшей активностью 500 кБн (поглощенная лоза внутреннего облучения крыс от цезия 0. 25 Гр и щитовидной железы от иола - 94. 7 Гр) и животных группы 56 после нагрузки цеаием-137 (320 кБк) вывозили на 1 месяц о 30-километровую зону ЧАЭС (поина р. Припять), поглощенная доза внутреннего облучения от цезия-137 составила 0.25 Гр и эквивалентная лоза внешнего облучения равнялась 13.0 Бэр. Для крыс с хроническим облучением контролем служили кшсы в возрасте 6-7 месяцев (группа 57).

Лая моделирования гиперхолестеринении использовали атерогенные диеты (атд) группы s8-ei; (I серия экспериментов. количество животных - 213- состав атд-1 : 2,5* ХС. ЗОИ подсолнечного наела от количества пиши в стандартном лабораторной корме, нетилтиоураоил о. 12/. и витании a¿ (ISO тыс. ед на too г корма). атд-8 и -з-отличались от атд-1 содержанием ХС - 5 и 10% вместо 52. животные содержались на атд в течение зо дней. часть животных сразу декапитировали. а часть -через 90 днея после начала кормления- Группы крыс 64-69 одновременно содержались на атд-2 и подвергались внешнему хроническому облучению в течение 30 суток, (суммарная доза 0.25 Гр). Кормление дтд-2 предварительно однократно облученных крыс в дозах о. 25 - 5. р гр (группы 70-73) начинали на Ю-е сутки после облучения в течение £0 дней, после чего животных декапитировали.

Хронический ннмобилиэашошшя стресс моделировали путем ограничения подвижности крыс, помешал их в индивидуальные зажимные клетки (группы 82-96. Iii серия экспериментов, обшее количество животных - 180 крыс). В зтих условиях крысы находились 3. 10 и 17 суток- Животные групп 90-92. облученные в дозе 1.0 Гр. спустя 10 суток после гамма-облучения, помешались в индивидуальные клетки-пеналы на 17 суток, крыс декапитировали на 3. 10 и 17 сутки после гипокинезии-

В IV серии вкспериментов (группы 97-141) количество животных - 313) доследовали репаративную регенерацию печени после операции частичной гепатэктомии (ЧГЭ). операцию чгэ (70*. гр. 87-101) проводили по методу Хиггинса и Андерсона. животных декапитировали через 1. 4. 6. № и 20 суток после операшш. Крысам групп 103-105 вводили внутри6рюшинно аа 84 часа до операшш ЧГЭ продигиозан в дозе 1 мл 0.005?. раствора, животным группы 106-108 вводили пятикратно внутри-брюишнно рибоксин в дозе 1 мл 20% раствора, с интервалом в 24 часа нежду введениями, животные групп Ю9-П1 получали одновременно цродигиозан и рибоксин- Крыс декапитировали на 4. 6. 10 сутки после операции- Животным группы 112 сразу после' операшш ЧГЭ внутрибрюшинно вводили 5 мл препарата

с *

ФСП-1. а крысы группы 113 получали препарат ФСП-11. дек .цитация через- 6 суток .после операции. Для предварительного повреждения печени тетрахлорнетан вводили трехкратно в же л у-

док через зонд в смеси с оливковым маслом 1:1 (об/об) по О!7 ил смеси на крысу с интервалом 2 суток между введениями, операцию чгэ производили спустя 3 суток после последнего введения ТХМ. Крыс декапитировали через 1. 4. 6. 10 суток после операции (группы 114-117)- крысам группы 122-124 после введения ТХМ перед операцией чгэ вводили пропигиозан в той *е дозе, как и крысам без токсического повреждения печени, лекапитапия через 4. 6. 10 сутки после чгэ. группа крыс 125 сразу после операции ЧГЭ содержалась в течение 20 суток на АТЛ-2- Крысан групп 126-127 операцию ЧГЭ проводили на 10-е сутки п еле предварительного однократного облучения в лозах 0.25 -5.0 Гр. лекапитапия через 6 и 20 суток после операции. Коррекцию возникающей ллп проводили препаратами фсп-1 (группы 134-136) и фсп-И (группы 137-139). Крысам, облученным в дозе 0.25 Гр (группа 140) и в дозе 5.0 гр (группа 141) на 10-е сутки после облучения проводили операцию чгэ й эа^ен в течение 20 суток содержали на АТЛ-2.

Для изучения влияния токсического повреждения печени на показатели лте, провели пятую серию экспериментов (группы 142-173. количество животных - 292)- Тетрахлорнетан вводили по обычной схеме, лекапитапия на 1. 3, 7. 20 сутки после последнего введения (группы 142-145). Контрольным крысам (группа 146) в такой же количестве .. по такой же схеме, вводили Физраствор- группа крыс 151 после последнего введения тхи в течение 20 суток содержалась на АТЛ-1- Крысам, облученным однократно в ^озах 0,25! 1.0 и 5,0 Гр на 10-е сутки после облучения вводили однократно ТХМ, лекапитапия на 7 и 20 сутки после введения (группы 153-158). Группы крыс 162 - 165 на 10-е сутки после облучения получали ТХМ по обычной схеме и содеряались на АТД-2 в течение 20 "уток-

So всех сериях экспериментов для коррекции возникающих ЛЛП использовали препараты т .наФлон (50 мг/кг). Флакозид (100 мг/кг), метадоксил (30 мг/кг). пробукол (100 мг/кг), ЭФЛ (300 мг/кг), которые вводили через зонл в желудок- В I серии экспериментов дополнительно использовали антиокислите-льныя комплекс витаминов С, Е, А, который вводили подкожно : витамин С - 0.2-0.3 мг/г, витамин Е - 0,08-0,09 мг/г, витамин А - 0,001-0,002 мг/г-

для изучения действия рэф на организм здорового и бо-

льного человека было проведено 4 серии исследований, охвативших 724 человека- В 1 серии исследований (174 человека) было изучено влияние хронического многолетнего действия малых доз внешнего гамма-излучения на состояние лтс сыворотки кро- .. ви людей, проживающих в г.Витебске в донах с повышенным в 210 раз гамма-Фоном. а также натерев и детей семей, отселенных из контролируемых районов- Во 1I серии исследований было изучено состояние лтс у лиц, принимающих участие в ликвидации последствия аварии на ЧАЭС- Е..ло обследовано 224 человека. из которых сформировали 5 групп, в 1 группу вошли непосредственно ликвидаторы, в качестве контроля была использована группа доноров из г- Витебска и группа из постоянных жителей загрязненных радионуклидами районов иогилевской области (дозы по СИЧ от 0.05 до 2.0 Мккюри). для оценки возможности развития острых изменений ЛТС под влиянием радиационного Фактора были обследованы две группы мужчин - 62 сотрудника ГАИ МВД, которые направлялись на 2-3 месяца в контролируемые районы Могилевской области и строители (14 человек), которые были лаправлены на работу в неконтролируемые районы Ногилев-скол области (контроль). В iii серии исследований для опенки реактивности ЛТС у лиц с имеющимися холестеринопатиями на Оо.че действия радиационного Фактора, были с'ормированы контрольные группы из постоянных жителей г. Витебска- Было обследовано 241 человек, из которых сформировали шесть групп: Ю4 здоровых мужчин с наличием Факторов риска ИБС. 22 больных с токсическим гепатитом, больные хроническим глоиерулонефритои. больные с опухолями желудочно-кишечного тракта, больные псориазом й прогрессирующей и стационарной стадиях, кроме этого, было произведено Фенотипирование ЛЛП у 1500 лиц с ИБС- В IV серии исследования было изучено состояние ЛТС у лиц с вторичными ЛЛП. проживающими в загрязненных радионуклидами районах Могилевской области- Было обследовано 85 человек, из которых было сформировано четыре группы t больные токсичес-. кин гепатитом, больные с опухолями желудочно-кишечного трак-.та, больные псориазом- Все больные подбирались в такой же стадии заболевания, как и жители г. Витебска.

Определение показателей лтс проводили в сыворотке крови- Для характеристики липидного спектра крови определяли содержание общего.хс по Абелю, тг и общие липиды определяли

с помопыо наборов хинических реактивов Фирмы "Лахема" (Чехословакия), количество ФосФолипидов определяли по свенбергу и свеннерхолму- Для выделения ЛПВП использовали нетод химической преципитации апо-В-содержаших ЛП пол действием гепарина в присутствии ионов марганца, содержание ХС в ЛПВП определяли методом' Абеля £Н-В. Перова, 1983г.). Методом, нефелометрии оценивали уровень апо-В-содержащих ЛП, а после их выделения в них определяли количество хс. содержание Хс и ТГ выражали в ммоль/л. При анализе соотноиения белков и липилов в составе основных классов ЛП использовали подходы, рекомендованные М. П. Антоновым 11988). количество белкового и липи-дного компонента ЛП выражали в г/Л- Ра-деление основных классов ЛП проводили методом электрофореза в полиакриламид-ном геле по Ё. П. Иаграчевоя, количественную оценку писк-эле-ктроФореграим лп проводили по методу в. г. Колба и в. о. Ка-мышникова [1979, 1982). Для характеристики системы эстериФи-капии холестерина в сыворотке крови ферментативным нетодом с помощью наборов Фирмы Вако (Япония) определяли содержание СХС, для выделения ЭХС использовали осаждение СХС дигитопи-ном [A.A. Покровский, 1969). Активность Фермента ЛХАТ исследовали тремя способами: 1) изучали скорость превращения меченого ХС в эФиры с помоиыо обоатимого ингибитора ЛХАТ -ЛТШ по stoKKe, hömlh [1974); 2) определение скорости эсте-риФикапии холестерина по методу добиашевоп 11983) проводили с помощью наборов, выпускаемых Пражским институтом радиобиологии! 3) исследовали активность ЛХАТ с использованием искуа-ственного субстрата - протеолипосом по Chen, Albers (1982). при получении протеолипосом оылн-применены методы ультрацентриФугирования и прецититааии для выделения ЛПВП и препарата

г.

апопротеинов tE- Н. Иванова, А. А. Никифорова, Е. Г. Алкснис, 19851- Выделение и очистку Фермента ЛХАТ из крови интактных и подопытных крыс проводили по методу KitauataKi [1988).

При исследовании регенерации печени оценивали митоти-ческую активность гепатоиктов. количество двуядерных клеток, относительную массу органа и морфологическую картину ткани.

В клинкко-лабораторных исследованиях содержание диеновых конъюгатоп определяли по прописи В- Б. Гаврилова и соавторов [1988) и выражали в мкн/мг липида. Содержание ТНК-позитивных веиеств. по который судят о содержании малонового

диальлегида, определяли по прописи Л- и. Андреевой и выражали в мкноль/л. Антиокислительную активность сыворотки крови определяли по нетоду Г-П. Клебанова и соавторов [19881 и выражали в у.. Количество трияодтиронина. тироксина и кортизола определяли с понотыо радиоинунных наборов ИБОХ АН Республики Беларусь и выражали в нноль/л (РИ0-т3-ПГ. РИ0-4-ПГ. СТЕРОН). содержание апопротеинов А-1 и в (мг/нл) оценивали с помощью иммуноФерментного метода на базе ВКНЦ АМН СССР с участиен А-М- Каменевой И9891.

Статистическая обработка данных, нногонерный статистический анализ и математическое моделирование производили с помощью специального пакета программ на 1ВН - 286-Использованы были следующие методы: регрессионный и корреляционный анализы. двухФакторный дисперсионный анализ, пошаговый лискриминаитныя анализ, анализ главных компонент, кластерный анализ (Г- АФиФи. 1982).

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Реактивность ЛТС изучалась на 173 группах животных, где основными действующими Факторани были 1) операция "частичная гепатэктония", 2) токсическое повреждение печени тетрахлорме-танон. 3) атерогенная диета. 4) действие ионизипушего облу-5) гипокинезия. 6) сочетания перечисленных выше Факто-рса. 7) действие Фармпрепаратов и эндогенных Факторов роста.

Кластерный анализ проводили раздельно по 4 группам по-киателеи. Первая группа показателей характеризовала холестериновый профиль сыворотки крови и включала показатели содержания ХС в сыворотке крови и основных классах ЛП- Вторая и третья группы показателей характеризовали состав основных классов ЛП (белки, липиды. отношение белок/липиды). Четвертая группа показателей характеризовала систему эстериФика-пии ХС (Фракционная и молярная активности ЛХАТ. количество свободного и эФирносвяэанного холестерина).

овше я специфические мехавквмы реактивности ЛТС при холестеввшлаткях. Во всех случаях воздействия исследуемых Факторов у животных развивалась ЛЛП. за исключением группы животных, находящихся на атерогенноя диете с 2. 5у хс, когда спустя з месяца от начала эксперимента их ХС профиль не отличался от интактных животных. В остальных случаях удалось

воспроизвести у крыс варианты ЛЛП. имевшие сходство с основными типами ялп у человека. Ныло выделено 7 кластеров ХС профиля- у крыс наиболее легко воспроизводилась гипоальФахо-лестеринения (35 групп. V кластер). Наиболее трудно было смоделировать типы ЛЛП. сопровождающиеся накоплением ЛПОНП в крови. Накопление ЛПОНЛ (I кластер. IV тип ЛЛП) отмечалось у 4-х групп крыс - на 3 сутки после облучения в дозах о.5 и 5.0 Гр. через 7 месяцев после облучения 1.0 Гр и на 17 сутки гипокинезии. I!в тип ЛЛП был воспроизведен в 3-х группах крыс - однократное облучение в дозе 1.0 Гр - 3 сутки и о. 5 Гр - 7 месяцев после облучения, сочетание внутреннего облучения цезием и внешнего хронического облучения (накопление ЛПОНП+ ЛПНП. II кластер), па тип ЛЛП (накопление ЛПНП) был воспроизведен в 16 группах животных, причен в 7 группах он был не-нее. а в девяти - резко выражен (III и IV кластеры). Эти кластеры были сформированы из групп с токсическим повреждением печени и сочетаний его с предварительным облучением' и АТЛ- Отдельно был выделен VI кластер, состоящий из групп, у которых в ХС профиле ведущим признаком было увеличение уровня ХС-ЛПВП- Основу его составляли группы крыс из серии "действие ионизирующего облучения" со всеми дозани облучения (10 сутки), а также группы с гипокинезией на 3 сутки (как облученные, так и необлученяые крысы)- такое объединение групп крыс с ранними сроками действия ионизирующего облучения и группы с гипокинезией в один кластер свидетельствует В пользу значительного вклада стресс-реакпии в Формирование валиапионно-индупированных ЛЛП-

По вариантам состава апо-В-солержаших ЛП было сформировано 5 кластеров, самыми многочисленными оказались I и II кластеры, ведущим приг»чакон которых было уменьшение отношения белок/липилы. В I кластере это уменьшен! г было свя-* зано с увеличением липилов в апо-В-ЛП (27 групп животных), а во II кластере (29 групп) - с уменьшением белкового компонента. III и IV кластеры сформировали группы, для лпонп и ЛПНП которых было характерно повышенное отношение белок/ли-пилы. В Hl кластере этот эффект был связан с уменьшением содержания липидов в апо-В-ЛП (И групп тавотных), в IV кластере - с увеличением количеством белка в ЛП- состав апо-В-солерасаиих ЛП не менялся у крыс с ЧГЭ на 1 и 10 сутки

после операции и при чгэ на 6-е сутки после операции при предварительном облучении в дозе О. 5 Гр. а также у крыс без облучения, содержащихся на диете с 10* хс (3 нес) и у крыс с хроническим внешним облучением, содержащихся на такой же диете (V кластер).

По составу ЛПВП было сформировано 5 кластеров по тому же принципу, что и в случае апо-в-солержаших лп- приблизительно 3-я часть всех групп (24 группы) были включены в V кластер вместе с интактными животными, что позволяет думать об относительной устойчивости отого класса ЛП к действию повреждающих Факторов. В ЛПВП. как и в апо-В-содержаших ЛП, наиболее чувствительным к действию Повреждающих Факторов был белковый Конпонент : Г кластер, в группах которого происходило значительное снижение количества белка в ЛПВП, был са-ным многочисленным (25 групп)-

По показателям системы эстериФикации холестерина было выделено 7 кластеров- Причем основная масса групп вошла в кластеры 1 - IV» для которых было характерно подавление Фракпиг ониой и молярной активности Фермента ЛХАТ, и только 18 групп сформировали кластеры У-УП. где отнечалась активация ЛХАТ. Еаагю! отличиен групп ii кластер* от групп, входяпих в i клаттер. было уменьшение уровня СХС и эхе в крови на Фоне ..оиавления активности Фермента, т.к. если подавление ЛХАТ-•^¡•кгага сочетается с увеличением уровня СХС в крови (1 кластер), то исключается возможность снятия ХС с плазматических мембран не только с помощью ЛХАТ-реакпии. но и путем Физико-химического обнена- кинетические исследования ЛХАТ-реакнии показали, что при повреждениях печени на этапе транзиторнои гиперхолестеринемии увеличивается роль бета-ЛХАТ- В разные сроки Регенерации печени из сыворотки крови крыс был выделен Фермент ЛХАТ и частично очищен- Он обладал более чем в 2 Раза низкой активностью, более низкой Ушах и высокой Кт, чем фермент интактных крыс (рис- 1)- В качестве субстрата использовались липосомы. содержащие ХС и лецитин и протеолипо-ломы. содержащие дополнительно смесь апопротеинов ЛПВП- Установлено, что зависимость скорости реакции от концентрации субстрата О) носит сложный характер (рис- 1а). В области низких концентрация схс протеолипосон (близких к концентрации ХС в.сыворотке крови). Форма кинетических кривых подчи-

няется уравнению Нихаэлиса-Ментен. При дальнейшей повышении сг) кинетическая кривая приобретала вид пика, такая Форма кривой Может быть объяснена наличием, как минимум, двух молекулярных Форм ЛХАТ. При использовании в качестве субстрата липосом обнаружены резкое уменьшение активности Фермента и отсутствие гиперболической зависимости в левой части кинетической кривой. В правой части кривой пик активности фермента Сия также ниже, следовательно, можно предположить, что препарат апо-ЛПВП необходим Для активации обелх молекулярных Форм ЛХАТ. для исследования кинетических свойств Фермента, выделенного из крови крыс после чгэ, в качестве субстрата использовали протеолипосокы. но характер полученных кривых На 2. 4 и 10 сутки регенераиии напоминал кривые, характеризующие Фермент интакткых крыс, когда в качестве субстрата использовали липосомы (рис. (в), можно предположить. что в периоды быстрого прироста нассы печени в сыво-

жо

....... А

г » а « о.о1 иЫ/» ч

„„ У х 6 х 0.01 мМ/л ч

ВО -—-Г—'-

В

1в

[5] х 0.05 мм/л

"' ......С

,0* "МЛ 4_____

о ю го яо *о

5о о ю го яо 40 во, [5] X 0.09 мМ/л

Рис. 1. Зависимость скорости реакции очищенного фермента ЛХАТ от конценгь.щйй СХС протеолипосом

А- у интакг.крыс!

1- субстрат поотеолипосомы

2- липосоны

в- в разные сроки регенерации

печени у крыс:

1- 2-е сутки.2- 4-е сутки, 3 - ¿О-е сутки.

О 10 20 33 49 60 И мМ/А

с- у людей; 1- доносы,

2- новорожденные

3- метастазы в печени,

4- инф. гепатит.

18 '

сотке крови функционирует Фернент. частично потерявший чувствительность к активируюшену действию апопротеинов ЛПВП-Было проведено изучение зависимости скорости ЛХАТ-Реакпии от 1Э1 у доноров, а также у людей, в печени которых имеются признаки Физиологической (новорожденные) и репаративной (инФ гепатит, метастазы опухолей в печень) регенерации-Установлено, что по' величине лика в правой части кине-' тических кривых все обследованные лица распределяются в следующей последовательности: донор^. > инФ- гепатит > метастазы опухолей в печень > новорожденные (рис- (с)- следовательно, существует обратная зависимость между выраженностью регенеративных процессов в печени и величиной пика ЛХАТ-реакшш-

Специфичность ответа ЛТС на действие ионизирующего излучения состояла в том. что по хс профилю основное количество групп животных этой модели входило в особый VI кластер, ведущим признаком которого было относительно высокое содержание ХС-ЛПВГ1. Этот профиль возникал на 3-е сутки после действия ионизирующего облучения в дозах о. 1 и о. 25 Гр и на !0-г сутки после гамна-облучения в дозах 0.5-1.0-5.0 Гр-Причиной возникновения такого хс профиля может быть стимуляция выброса ЛПВП с высоким отношением белок/липиды. что наблюдалось на 3-е сутки после облучения в дозах 0.5 - 5.0 Гр-Такие ЛПВП. обладают хорошими субстратными свойствами, что в условиях стимуляции активности лхлт способствует повышению содержания ХС в ЛПВП на 10-е сутки- на 17-30 сутки пос-. ле однократного гамна-облучения происходила смена ХС профиля и группы объединялись в V кластер - гипоальФахолестеринемия. что можно рассматривать как истощение системы адаптации ЛТС к действию облучения вследствие уменьшения содержания белка в ЛПВП и замедления эстериФикапии хс- Истощение системы адаптации приводит к Формированию в поздние сроки наблюдения (7 несяпев после облучения) атерогенных типов длп - IV (доза ■ 1.0 Гр) и Пв (доза 0.5 Гр). Большая атерогенность дозы 0.3 у Гр ножет быть связана с вызываемым под ее Действием уменьше-' нием количества белка в апо-В-солержаших лп. что затрудняет их репепторный захват, а действие дозы 1.0 Гр. наоборот, вызывало увеличение в этих лп содержания белка. Изменения состава аяо-В-содержаших лп были дозозависимыми во все сроки наблюдения. Реактивность ЛТС при действии дозы 0. 1 Гр имела

свои особенности- Во все срони после облучения, в отличие от действия других доз. состав апо-В-содержаших ЛП и ЛПВП у крыс, облученных в дозе 0.1 Гр. не менялся, а именно эти показатели определяют механизмы обратного и прямого транспорта хс. Профиль системы эстериФикапии ХС на ю. 17 и 30 сутки после облучения в лозе 0.1 Гр соответствовал 11 кластеру (депрессия' ЛХАТ). эти изменения аналогичны данным, полученный при сепаративной регенерации печени (4-10 сут. после ЧГЭ).

Предварительное облучение крыс изменяло реактивность ЛТС на действие гепатотропных Факторов, за исключением ответа лтс на последующую алиментарную нагрузку холестеринон (рис. 2). Предварительное однократное гамма-облучение крыс в диапазоне лоз 0. 25 - 5.0 Гр способствовало нормализации состава ЛПВП при репаративной регенерации печени, вызванной хирургическим (ЧГЭ) или интоксикационным Фактором (ТХМ). при

ГС Бел »си ЛПВП, г/л_g Липиды ЛПВП, г/л

Рис. 2- Действие поврежда-

ИМ/А

кших Факторов на Фоне облучения

---- - доверительный

интервал лля интакт-ных крыс

хс-лпвт! хс-лптт хс-лпонп

□ без облучения jg с об/~чениемЦ,0 I р)

гипокинезии (гк). хс профиль изменялся при сочетании гипокинезии и предварительного облучения : не Формировался IV тип ллп; при совместном деяствии ТХМ и облучения происходило снижение уровня хс-лпвп, в то время как при деяствии только тхн происходило увеличение уровня хс-лпвп.

Действие препаратов исследовалось в условиях Формирования ДЛП. напоминающих Па и IV типы гиперхолестеринемии и гипоальФалиполротешплию. Под действием препаратов происходило изменение холестеринового "ооФиля - эффективнее всего было применение препаратов при IV типе ЛЛП, ненее эффективно - при Па типе и они практически не влияли на развитие гилоальФалипопротеинемии.

IV тип ЛЛП воспроизводился при гипокинезии продолжительностью 17 суток. Этот тип легко переходил в гипоальФалипо-протеинемию при применении ЭФЛ. танаФлона. метадоксила и пробукола.

Ведущим признаком холестеринового профиля для групп животных. находившихся на атерогеннои диете в сочетании с предварительным облучением, лля крыс с токсическим повреждением печени и облученных однократно в дозах 0. I - 5.0 Гр на 17 сутки являлось увеличение уровня «С-ЛПНП и уменьшение уровня лс-ЛПВП. Применение препаратов танаФлон при токсическом повреждении печени в течение 5 х дней, Флакозида и ЭФЛ в тече-н;е 7 диеп на ю-е сутки после облучения в лозе о. 5 Гр, а Флакозида и при облучении в дозе 1,0 Гр, полностью нормализовало содержание холестерина в основных классах ЛП- Уменьшение количества холестерина в ЛПНП происходило п^и введении продигиоэана за сутки перед операцией ЧГЭ 1ри токсическом повреждении печени на 10-е сутки после операции, при использовании пробукола и ЭФЛ в группах животных, подвергающихся действию однократного облучения, атерогеннои диеты и тетрахлор-метана (исключение - при дозе облучения 1,0 Гр - где оба препарата были неэффективны). Витамины (А. Е, С) снижали содержание ХС-ЛПНП при применении на 10-е сутки после облучения в гозах о, 1 - 1 Гр, танаФлон - после облучения в дозах 0.25 и 5,0 Гр и ЭФЛ - после облучения в дозе 0,5 Гр (если его давали в течение 20 дней)■

Повышение уровня ХС-ЛПВП происходило при применении Флакозида в течение 3 суток после токсического повреждения

печени тетрахлорметаном. при однократной облучении такой хе эффект окаэьюали неталоксил, пробукол (вне зависимости от лозы облучению. ЭФЛ - при лозах облучения 0.25 Гр, 1.0 Гр и 5,0 Гр. танаФлон - при дозах о. 5 и 1.0 Гр и Флакозил - при облучении в дозе 5.0 Гр.

Не поддавался коррекции Па тип ЛЛП в следующих случаях : применение танаФлона и Флакозида при регенерации токсически поврежденной печени на 1 сутки, ЭФЛ не был эффективен при сочетании атерогенной диеты с токсическчн повреждением печени, ЭФЛ и пробукол не влияли на развитие Па типа ЛЛП л группах животных, находившихся на атерогенной лиете. при сочетании предварительного облучения вне зависимости от дозы и атерогенной лиеты, а также в группе ьрыс облученных в лозе 1,0 Гр, с токсическим повреждением печени и находившейся на атерогенной диете. хс профиль не изменялся при облучении в лозах О, 25 Гр и введении Флакозида, в дозах 0. 5 Гр и 1,0 гр и использовании ЭФЛ в течение 20 дней в лозе 300 мг или в лозе 600 иг в течение 7 дней, витанины были не эффективны при дозе облучения 5,0 Гр. ГипоальФалипопротеинемия была характерна яля групп модели "регенерация печени" и для групп крыс облученных в лозе 1,0 Гр в сочетании с гипокинезией на 17 сутки обездвиживание крыс. Только введение проли-гиоэана перед операцией ЧГЭ Норнллизовало хс профиль на 4 сутки после операции, в остальных случаях препараты не влияли на развитие гипоальФалипопротеинемии, а использование Факторов стимулирующих прглиФерапию при регенерации печени на б сутки и при регенерации печени предварительно облученных ' животных вызывало возникновение Па типа ЛЛП вместо гипоальФалипопротеинемии.

Действие испытанных гиполипидемических и антиоксидан-тных препаратов зависело от исходного состояния ЛТС. Испытанные лекарственные препараты вызывали 3 основные типа изменения в составе апо-В-содержаших ЛИ : 1) уменьшение количества липилов при нормальном количестве белка, 2) увеличение количества и белка и липидов, 3) увеличение количества липилов при нормальном количестве белка (рис. За). Все испытанные препараты были эффективны при обратном составе лп (рис. Зв) и неэФФектив1 и если в апо-В-солеряаших ЛП на Фоне нормального количества липилов было увеличено количество

В

Рис.3. Влияние гиполипидени-ческих препаратов на состав ano-В-содержащих ЛП А- типы изненений состава ЛП под действием препаратов В- варианты состава ЛП. когда препараты эффективны С- варианты состава ЛП. когда препараты не эффективны

инт-ктньк! крысы —" интахтю^р крысы

¡35 липиды □ белки

белка (рис. зс). Такие же закономерности были характерны и для состава ЛПВП.

Особенности реактивности лтс крови "доровых и больных с вторичным ЛЛП подвергшихся действию радиапиопно-экологических Факторов (РЭФ). Лля оценки влияния РЭФ на показатели ЛТС обследуемых людей был применен дискриминантный анализ-Предварительно, по методу главных компонент, было определено. что изменения в ХС профиле под действием РЭФ связаны, главным образом, с содержанием хс-ЛПОНП и хс-лпвп. Наибольший под: ем ХС-ЛПОНП отмечался в группах переселенцев с измененной функцией щитовидной железы и у ликвидаторов, среднее положение занимали группы жителей ломов с повышенным гамма-Фоном, а группы жителей загрязненных районов по ХС Профилю были близки к груше доноров г.Витебска (рис. 4)- При наличии хслрстеринолефииита (рак толстой кишки) ХС профиль

жителей загрязненных районов менялся, исчезала гипоальфали-попротеинекия. Поя влиянием РЭФ состав апо-В-соиержаших ЛП или не менялся, или в них происходило увеличение содержания белка до верхней границы нормы (исключение - группа ликвидаторов. где это увеличение было значительным и группа переселенцев с нормальное Функцией щитовидной железы, где происходило уменьшение содержания белка в апо-В-содержаших• ЛП). Содержание липидов апо-В-ЛЛ было снижено до нижней границы нормы (исключение - переселенцы с нормальной функцией щитовидной железы, где это уменьшение было значительным). Увеличение содержания белков и уменьшение количества липидов означает повышение плотности частиц апо-В-содержаших ЛП и, уменьшение их размеров. Такие частицы были обнаружены у лип с ИБС, гипертриацилглиперинемией й гипоальФалипопротеипе-нией (А-С. Кузнецов. 1990). И, действительно, прослеживает-

ХС - ЛПОНП

КС -ЛПВП

Рис.4. Результаты дискриминантного анализа ХС профиля обследованных людей

ДВ - доноры, Витебск; ЛИ - доноры, Могилев; ОВ - сольные раком толстой кишки, Витебск: он - больные раком толстой кишки. Могилев; ПсВ - больные псориазом. Витебск; ПсМ - больные псориазом, Могилев; л - ликвичаторы*. РД- кители радиационных домов; П-Н - переселенцы с нормальной Функцией щитовидной железы; П-И - переселенцы с измененной функцией щитовидной железы

ся четкая тенденция сближения состава апо-В-содержаших ЛП групп с действием радиаиионно-экологических «акторов с составом этих частиц г больных ИБС. особенно был близок с ними состав ЛПОНП ♦ лпнп у ликвидаторов «рис. 5). При действии РЭФ на Фоне холестеринопатии реактивность ЛТС не изменялась по отношению к составу апо-В-содержащих ЛП : происходило уменьшение содержания белков и липидов при стационарной . стадии псориаза, только липидов при прогрессирующей стадиии, а также у больных ракой толстой кишки.

Под действием РЭФ в составе ЛПВП. также как и в деюнп ♦ ЛПНП. происходило увеличение содержания белка ло верхних границ нормы и выше, оно было особенно значительным в группах переселенцев с измененной Функцией щитовидной железы и жителея домов с.повышенным гамма-Фоном- Содержание липидов в ЛПВП снижалось, исключение составили жители загрязненных районов, в составе лпвп которых содержание липидов было значительно увеличено. Лискрининантный анализ состава ЛПВП показал, что ЛПВП группы ликвидаторов по своему составу-приближались к ЛПВП больных ИБС; ЛПВП групп переселенцев, кителей домов с повышенным гамма-Фоном, жителея загрязненных

Лпаилы

Белки

Рис. 5. результаты яискрининантного анализа состава апо-Б-содержаших лп обследованных людей

районов резко отличались от состава ЛПВП и больных ИБС, и доноров г.Витебска (рис. 6 )• Возножно. эти изменения в составе ЛПВП можно рассматривать как компенсаторные в ответ на атерогенный сдвиг состава апо-В-содержаших ЛП. При наличии холестеринопатии менялась реактивность ЛТС на действие рэф ! у больных псориазом в прогрессирушей стадии происходило увеличение содержания в ЛПВП липидов, а у онкологических больных этот показатель уменьшался.

действие рэф вызывало г типа реакции системч эстериФк-капии хс: активация (жители донов с повышенным ганна-Фоном) и снижение эстерифипирушей активности (ликвидаторы и жители загрязненных районов). Такие изменения системы эстериФи-капии хорошо согласовывались с данными по составу лпвп: улучшение субстратных свойств лпвп у «ителея донов с повышенным гамма-Фоном (увеличение содержания белка), ухудшение субстратных свойств (накопление лйпидов) лпвп у жителей .загрязненных районов и состав лпвп у ликвидаторов, подобный составу лпвп больных ибс. действие рэф на состав лпвп при холестеринозе сопровождалось нормализацией Фракционной активности лхат.

Липиды

Рис. 6- Результаты гчскрининантного анализа состава ЛПВП обследованных людей

26 '

Таким обраэон. математическая и компьютерная обработка позволили раскрыть понятие реактивности липидтранспортной системы, а кластерный анализ дал возможность рассмотреть классификацию вариантов реакция лтс в норме, при воспроизведении дислипопротеинемия в эксперименте и реальных условиях постчернобыльского этапа у населения республики. Наличие классификации типов ответа лтс на действие повреждающих Факторов позволило Рекомендовать алгоритмы обследования пациентов и обосновать принципиальные подходы к коррекции нарушения ЛТС посредством воздействия гииолипиденических. антиок-сидантных гепатопротекторов природного и синтетического происхождения. а также эндогенных Факторов, стимулирующих про-лиФеративныи пул гелатопитов.

ВЫВОДЫ

1. Атерогенные типы дислипопротеинемия возникают как транзиторные гиперхолестеринемии после однократного внешнего гамма-облучения в дозах 0,25! 0.5; 1.0 и 5, о Гр; введения гепатотоксинов (тетрахлорметан) и при гипокинезии у крыс, которыо являются устойчивыми к воспроизведению экспериментального атеросклероза. Гиперхолест^ринемия сохраняется спустя 7 месяцев после внешнего гамма-облучения в дозах 0. 5 и 1.0 Гр. при сочетании внутреннего облучения /нкорпорирован-;!ыи изотопом цезия и хронического внешнего облучения (суммарная доза облучения 0.25 Гр). при сочетанием воздействии гамма-облучения, гепатотоксина и атерогенных диет.

2- Химический состав липопоотеинов высокой плотности более устойчив к действию радиационных, токсических, стрессовых Факторов, чем состав апо-Б-содержащих липопротеинов. Наиболее лабилен при Деяствии данных повреждающих Факторов белковый компонент липопротеинов, что приводит к Формированию и накоплению обогашеннйх липилами частип.

3. Деяствие радиационных, токсических, стрессовых повреждающих Факторов сопровождается однотипными изменениями показателей системы эстериФикации холестерина в сыворотке крови, приводящими к уменьшению скорости реакции эстериФикации холестерина в крови и изменению изоФеРментного спектра лепитинхолестеринацилтрансФераэы. Наблюдаемая в немногочисленных случаях активация реакции зстериФикапии спепиФич-

на для каждого вида действующего Фактора.

4- Доказано наличие обратной зависимости между выраженностью регенерапиоиных процессов в печени и активностью бета-Формы лепитинхолестеринацилтрансферазы, субстратом для которой служат апо-в-содержащие липопротеины-

5- При острой гипокинетическом стрессе количественное содержание и химический состав липопротеинов высокой плотности являются такими же. как и у интактных животных, что может быть связано с ролью липопротеинов высокой плотности как источника холестерина для биосинтеза стероидных гормонов. Присутствие в одном кластере по профилю холестерина животных с иммобилизационным стрессом и облученных животных в ранние сроки после воздействия доказывает значение стрвсс-реакпйи в Формировании радиапионно-индупированных яислипопротеинекий.

б. к доэозависимын эффектам действия ионизиругаего излучения следует отнести изменения холестеринового профиля -и содержания белкового компонента в основных классах липопротеинов. особенностью реактивности липидтранспортной системы при действии гамма-облучения является высокое содержание холестерина в липопротеинах высокой плотности в интервале 3 -10 сутки после воздействия- истощение адаптационных возможностей липидтранспортной системы к действию иониэирушего излучения проявляется подавлением о-яей скорости эстериФи-кации холестерина и активацией бета-Формы лепитинхолестерин-апилтрансФеразы-

7- Предварительное одюкратное или хроническое облучение крыс в малой дозе модифицирует реактивность липидтранспортной системы на последующее действие токсических и стрессовых повреждающих Факторов-

8- Эффективность гиполипилемичесних препаратов зависит от исходного состава основных классов липопротеинов и состояния обратного транспорта холестерина, в условиях активации последнего препараты Па эффективны-

д. Гиполипидемические препараты могут активировать ле-цитинхолестерннапилтрансберазу только в случае, если их действие сопровождается нормализацией основных параметров яи-пидтранспортноя системы- Если после действия препаратов ги-перхолестесинения сохраня. ась. изменения уровня активности данного Фермента не наблюдалось-

10- При действии радиационно-экологических Факторов Формируются атерогенные типы лислипопротеинемий (ГипоальФахо-лестеринемия у переселенцев с неизмененной функцией щитовидной железы и IV тип лислипопротеинемий у переселенцев с измененной Функцией щитовидной железы и ликвидаторов).

. Ц. При действии ралиационно-экологических Факторов на

т с

Фоне холестеринодефииитных состояний нормализуется состав ли-попротеинов высокой плотности и не развивается гипоальфахоле-стеринемия. Действие этих Факто. ов при наличии холестерино-патип или без них сопровождается стереотипными проатероген-ныни изменениями состава апо-В-содержаших липопротеинов (увеличение содержания белков и уменьшение количества лйпидов).

12. Обосновано создание липилной лаборатории для раннего выявления атерогенных типов лислипопротеинемий на доклиническом этапе, своевременной профилактики и эффективной коррекции нарушений липидтранспортной системы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. в связи с аварией на ЧАЭС среди населения Республики Беларусь создались условия для ускоренного развития атеросклероза, являющегося причиной кажлой второй смерти и определяющего рост инвалидизаиии Работоспос бного населения.

Для раннего выявления атерогенных ДЛП на доклиническон своевременной профилактики и эффективной коррекции 'пруиепип ЛТС у лиц, подвергшихся действию радиационно-эко-логических Факторов, предложен алгоритм обследования людей.

2- Экспериментально обоснованы алгоритмы применения гиполипидемических и антиоксидантных препаратов с учетом реактивности ЛТС : наиболее вероятна нормализация состава апо-В-солеряаших лп в случаях нормального или сниженного содержания апопротеинов и измененного количества липидов; пре-■ параты не эффективны при увеличении количества белков в апо-В-содержаших липопротеинах:

- наиболее вероятна нормализация состава ЛПВП при Увеличении липилного компонента на Фоне сниженного или нормального содержания апопротеинов; препараты не эффективны, если в составе ЛПВП повышена доля белкового компонента;

- коррекция показателей системы эстериФикапии холестерина в сыворотке крови сопряжена с нормализацией количест-

венного содержания и химического состава ЛПВП:

- для углубленного анализа состояния системы эстериФи-капии холестерина в сыворотке крови целесообразно проведение кинетического анализа ЛХАТ с использованием возрастающих концентраций неэстериФицированного холестерина в субстрате реакции;

- 'коррекция нарушений параметров ЛТС при вторичных лислипопротеинемиях требует восстановления морФоФункпиональ-ного состояния гепатобилиарной системы.

СПИСОК ОСНОВНЫХ ПУБЛИКАЦИЯ по МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИЯ

1. И-Г. Сачек. А. А. чиркин. Н. Ю. Коневалова. П. с. шихолай. способ определения метастазов в печень при онкологических заболеваниях. Автор, свидет. СССР N 1380442 А1. 8 ноября 1987г.

2- А. А. Чиркин, Н. 10. Коневалова- эстериФикапия холестерина в кровеносном русле как первый этап контроля холесте-ринемии при повреждении печени//Теэ. докл. симпозиума "Особенности липилного обмена в условиях Сибири и дальнего востока с учетом бытовых и питовых Факторов". - Чита. 1987 г. - С. 63-69.

3. н. ю. коневалова, И. А- Чиркина, А. А. чиркин. Действие питоплазматических Факторов из регенерирующей печени на систену эстериФикашш холестерина в плазме крови//Сб. научн. трудов "Актуальные вопросы гастроэнтерологии". - Ленинград, 1987. - С. 56-624. А. А. Чиркин, Н. кз. Коневалова. Липопротешм плазмы крови при восстановлении поврежденной печени //Тез- докл. Всесоюзного симпозиума по биохимии липилов. - Алма-Ата, 1987. - С. 223.

5. н. ю. коневалова. особенности холестеринемии при различных типах повременил печени //Тез. докл. "Седьмой съезд ' Белорусского Физиологического общества". - Витебск 1987- -с. 1136. Н. ю. Коневалова, А. А- Чиксин. Действие питоплазматических Факторов из регенерирующей печени на зстериФикапию холестерина в сыворотке крови крыс при повг вялении печени . тетрахлорметаном //Виол. язуки- - 1987. - N 3. - с. 25-30.

7• н. ю- Коневалова, д. А. Чиркин. Содержание липидов в сыворотке крови крыс при поврездении печени тетрахлорметаном //Весп1 АН БССР. - 1987- - II 3. - С. 90-938. А. А. чиисин. И. ю. коневалова. Методы исследования системы эстериФикациИ холестерина в плазме крови //лае. дело. - 1987. - N 5. - с. 323-323.

9- А. А. Чиркин. Н. ю. Коневалова. Действие ©акторов, стимулирующих пролиферацию, на процесс эстериФкяапии холестерина в сыворотке :!рови крыс при острой интоксикации тетрахлорметаном //ВОПР. мел. хим'ш. - 1987.- И 6.- С. 124-128.

10. И. и. сипаров, д. А. Чиркин, я. ю. коневалова, В. е. Мед-велскка, п. с. Еихолай. диагностика метастазов опухолей.в печень/ Метод, рекомендации. Мин. здравоохранения БССР. - Витебск.

30

1908 Г. - С. 1-10.

11. A- A. Chlrkln, Ы- Tu. Konevalova, Definition of lecl-tln-cholesterol асу1 transferase (LCAT) In tne liver regeneration// 14th International congress of biochemistry, Prague Chechoslovakia, 1988.- N 603-- p. 21412. h. ю. Коновалова, в. Д. Белиженко, а-а-Чиркин. Искусственный субстрат для определения активности лецитин-хо-лестеринапилтрансФеразы в сыворотке крови //Лаб. дело. - 1988. - N 8. - С. 12-1413- н. ю. Коневалова. а. а- Чиркин- Действие Факторов, стимулирующих пролиферацию, на систену эсгерификаиии холестерина в кровеносном русле //Сб. научн. трудов "Современные аспекты теории и практики Фармации". - Ленинград. - 1988- - С. 122-12614. Н. Ю-Коневалова, и- а. Чиркина, л. А. Чиркин. Действие Факторов, стимулирующих пролиферацию гепатоцитов, на процесс эстериФикаиии холестерина в сыворотке крови при регенерации печени //Вопр. нед-хинии. - 1989.- N 2- - С. 37-42.

15. А-А-Чиркнн, 11-Ю. Коневалова. Действие термостабильных Факторов из цитозоля клеток регенерирующей печени на процесс эстериФикаиии холестерина в сыворотке крови крыс после введения этионина //Биол. науки- - 1989-- N8.- С. 21-27.

16. н-Ю-Коневалова, Е-И-Данченко, И. а-Чиркина, а- а- чиркин. ЭстериФикапия холестерина в кровеносном русле при регенераторной гипертрофии печени у крыс //Весц! ан БССР. - 1989- - N 4- - С. 86-9017- н. ю. Коневалова, а. м- Каменева. а- а- Чиркин- Сравни- -

тельная характеристика иммунофернентного и химического методов определения белков в липопротеидах при различных вариантах дислипопротеинемия //Тез. докл. республ- научн. конФ- " Применение иммуноферментного анализа в недицине" - - Харьков, 1969- - С- 21-2210- А. А-Чиркин. Н. Ю. Коневалова. Активность лецитин-г.слестеринацилтрансФеразы крови в норме •. при патологии //Тез. докл. всесоюзного симпозиума "Проблемы клинической эн-эимологии". - Москва, 1989- - С- 157-15819. Н-Ю. Коневалова. Н-Г. Луд. а. А. Чиркин. Показатели ли-пиатранспортноп системы сыворотки крови у больных опухоляни желудка и кишечника /Деп. ВИНИТИ, Д18633, 1989.

20- A. А- Чиркин, Г- Г. Воронов, Н- Ю- Коневалова, Н- Г. Луд, С. Я- Соколов, Ю- Б- Белоусов- Антиоксидантное и гипо..олестери-немическое действие Флакоэида у больных с синдромом укороченного кишечника //Тез- докл. XV Конференции по клинической Фармакологии с международным участием- - Волгоград, 1990. - С-156-15721. Chlrkln A-A-, Konevalova N. Yu. The role of liver functional state In dislipoproteinemia development //20th Meeting of tne FEBS- Abstracts. - Budapest, 1990- - P- 108.

22- H- В- Железняк, H- Ю- Коневалова- Частота обнаружения аномального липопротеида при ишемическоя болезни сердца//Сб-научн- трудов "Физиологические и биохимические аспекты патологических процессов". - Смоленск 1990, МЗ БССР, ВОДННИ. - С. 73-75.

23- Н. Ю. Коневалова, С. С- Осочук, Ю. В- Сараев. Состояние липидтранспортноя системы при репаративноя регенерации нормальной и патологически измененной печени //Там же, С- 77-8224- А. А- Чиркин, Н- Ю. Коневалова, Воронов Г- Г- , Янушевс-

киа Д. С- .Применение эссенииальных ФосФолипидов для коррекции

радиационной дислипопротеинении в эксперименте//Тез.доил. Республиканской научно-практической конференции по радиобиологии и радиоэкологии. - Минск. 1990. - С. 11625- Н. Ю- Коневалова- Влияние ионизирующего излучения на систему эстериФикании холестерина сыворотки крови крыс //Так же. С- 9126. Е- Ф- Конопля, а. а. Чиркин. Воронов Г- г.. Н- ю- коневалова. Л-С. Янушевский. Ю-' Белоусов. мег.локсил увеличивает антиоксидантную и эстериФицирующую холестерин активности плазмы при действии малых доз ионизирующего излучения //Там же. С. 92

27. А-А. Чиркин, Н. Ю-Коневалова. Л- г. Гидранович- Характеристика леиитин-холестерол-аиилтрансФеразноа реакции в сыворотке крови при регенерации печени //Биол. науки. -1990. -N И. - С. 26-34.

26. н. г. Луд, Н- Ю- Коневалова, А- А. Чиркин. изменение показателей липидтранспортнои системы сыворотки крови у больных раком толстой кишки //Вестник хирургии. - 1990. - N 11. -54-55.

29. Н- Ю- Коневалова, А- А. Чиркин. Исследование пострадиационных изменений липидтранспортноя системы крови челове-ка//Тезисы Республ. конФ- "Научно-практические аспекты сохранения здоровья людей, подвергшихся радиационному воздействию в 1 результате аварии на Чернобыльской АЭС". - Минск. 1991-с. 115-116.

30. е. Ф. Конопля. К. и. Степаненко, н. г- сачек, а- а. Чиркин- Н. Ю- Коневалова, г. г. Воронов. Л- с. янушевский. П- д. Васильев. в. В- Батов. Создание инфраструктуры и обоегюание способа для Фармакологической коррекции радиационных дислипопротеинении атерогенного характера //там же. С- 243-24531. A-A- OUrKlp, N-Yu. Konevalova. The roJe of lipid

transport system liver exported pi jteins in the pathogenesis of the atherogenic type secondary dislipoproteinemia //constituent congress international society for pathophysiology. MosKow, may 28 - June. 1991. Abstracts. N 9.2-05.- P. 219.

32- H-О. Коневалова- ЭстериФикаиия холестерина в сыворотке крови при радиационной дислипопротеинении и пути ее фармакокоррекиии//Тез. докл- 111 международной конференции "Экологическая патология и ее Фармакокоррекция"- - Чита. 1991- - Ч. II. С. 150-15133. у. у. Voronov, N. yu. Копеvalova, A-A- Chirkln. Meta-doxll Increases blood serum ant Ioxldation activity and cholesterol esterlfled activity in rats exposed to little, dose radiation// J5th international congress of Biochemistry. Jerusalem, Jsrael, august 4-8. 1991, Abstracts. - p. 270.

34. 11.10. Коневалова. Повреждение печени вызывает развитие дислипопротеинении атерогенного типа//Тез. докл. Восьмой съезд Велор. Физиол. общества им. И. П. Павлова. - Минск. 1991- С- 5835- А. А. Чиркин, Н-Ю. Коневалова, Г.Г.Воронов. Д. С. Янушевский. Г- М. Любина. И- А- чиркина. В-А. Куликов- Развитие дислипопротеинении свободно-радикального генеза - возможный путь к сокращению продолжительности жизни //Тез. докл. Всесоюзной конференции "Продолжительность жизни: механизмы, прогнозы, пути увеличения", 15-17 октября 1991.- Киев--С. 129-13036. н- Ю- Коневалова. Г- Г- Воронов. Д. С- Янушевский. А. А- Чиркин. Приненегле эссенииальных ФосФолипндов для кор-

рекшш радиационной транзиторноя лислипопротеинемии в экс-периненте//Тез. докл. Всесоюзной конференции "радиобиологические последствия аварии на Чернобыльской АЭС" 30 октября -1 ноября 1991г.- Минск» 1991.- С- 5737. Ю- В. сараер, л. с. янушевскии. к. т. летинкин. н. Ю- ко-невалова. д. А. Чиркин. Фариакологическая коррекция фосфоли- , пидного состава ЛПВП при трэнэиторноп радиационной дисли-попротеинении // Тан же. С- 12438- А- А- Чиркин, Н- Ю- Коновалова. л- С- Янушевский, Л- Г- Орлова, Е- о. ланченко- выявление транзиторноя радиационной дислипопротеинении в эксперименте- //Тан же, с. 14739- Н- И. степаненко. И- Г- сачек. А. А- Чиркин. П- Л- Васильев. В В Батов, Н- Ю- коневалова. Г-Г-воронов- Организация работы и перспективы развития лечебно-диагностического центра по обнену липилов //здравоохранение Белоруссии- - 1991-N е. - С- 44-4640. А- А- Чиркин. Н- Р- Коневалова. В- А- Куликов, г- и- лю-бина- Вклад гормональных Факторов в развитие радиаиионно-экологическюс дислипопротеинении//сб- научн- трудов "Эндокринные и имунные механизмы регуляции гомеостаза". - из бсср. Витебскил мединститут, 1991- - С- 61-6741. А- А- Чиркин. Е. Ф- Конопля. Н- И- Степаненко, н. Г- сачек. Н- & коневалова. В- А- Куликов и др- Роль радиационного Фактора в формировании дислипопротеинении в эксперименте и у населения Беларусь- Подходы к медиканентоэноя терапии выявленных типов дислцлопротеинемий //Катастрофа на чернобыльской АЭС и опенка состояния здоровья населения республики Беларусь- - сб-научн-трудов- - Нинск. 1991- с- 170-18642- А-А-Чиркин. Г- Г- Воронов Н- Ю- Коневалова- обоснование Фармакологической коррекции радиапионно-экологических дислипопротеинении //Тез. докл. "оздоровление и санаторное лечение лип. подвергшихся радиационному воздействию". Минск-гонель. 1902. - с. 111-11243- в- с- Коневалова. Н- Г- луд. В- И- Козин. А- А- Чиркин-Характеристика липидтранспортной системы сыворотки крови лип, подвергшихся действия радиапионно-экологических Факторов //Тез- докл- 3-й республ-конФер- "Научно-практические аспекты' сохранения здоровья людей, подвергшихся радиационному воздействию в результате аварии на чернобыльской АЭС". Гонель, 15-17 апреля 1992 Г. - Ч-2-- с. 52-5444- Н И- Степаненко, а- А- Чиркин. В-Н-Лекторов, П- л- Васильев. И- Ю- Коневалова. Г. г. Воронов. с- с- осочук, Ю- в- Сараев. В- А- куликов. И- Н- Гребенников, Г- Н- Любина. опыт организации работы липидного диагностического дентра//Теэ-докл- Четвертый научный съезд специалистов по клинической лабораторной диагностике республики Беларусь- - Гродно, 19Я!?- -С. 265-2745- А- А- Чиркин. Н-1> Коневалова, в А- куликов, и- а Яд-ройцева- Дискриминантный анализ при исследовании липидтранс-портной систены сыворотки крови лиц, подвергшихся действию радиапионно-экологических Факторов//тан же, с. 25-2746- А-А-Чиркин. Н- Ю- Коневалова, В-И-Козин. В-С-Карелин- Характеристика липилтрэнспортной и эстериФицируюше холестерин систем сыворотки крови больных псориазом при действии радшйшонно-экологических Факторов//Патогенез и терапия кожных и венерических заболеваний--Тез-докл. П съезд дер.з-тологов и венерологов республики Беларусь. 1-2 октября 1992Г-. Могилев Минск, 1992 г- - с- 186-186-

47- A-A- ChlrKln. N-Y-Konevalova, s S-QsochuK. So»e hepatotroplc factors stimulate nucleic acids 'synthesis in the regenerating cells of rat liver and normalize blood serum lipid transport state // IX International congress of liver diseases "Extrahepatlc manifestations in liver diseases" Basel (Svlzerland), October 15-17. 1992. Abstracts. FalK Symposium. - N 69. - P- 2848- Л-с. ЯНУШЭУСК1. H. Ю- Канявалаьа. А. в. житное 14. А-М-Дэяштин. А. А. Чирк in. Лзеянне нал их доз 1ан1эуючага випрамянення на паказчык!* Л1п1дтранспартнаи i халестэгнн-эстэрыФ1куючаи сютэмы KPUOf1' 1 субфракиийны састау Псчону Hj клетон печан1 пацукоу: карэляпыя з узроставын1 эмяненням1 //вест АН Беларусь - 1992.- М 3-4-- С- 46-5049. А-А. Чш>к1н. Л-С-янушэуск1. Г-г. воранау. Н-Ю-Каня-валава. кхв-Сараеу. я-Ф-канопля- лзеянне полшенасичанага ФасФатыдылхал1ну на паказчык1 Л1п1дтранспартная сютэмы сиваратк! kpubi апранененых папукоу // Тан же, С. 50-3550- Я- Ф- канапля. А- А- Чырк1н. Н- О- Канявалава, Г- Г. вора-нпу. Л-С. Янушэуск1, 0 В-Сараеу. Ю- Б- Белавусау. Карыпруючае лзеянне метадакс1ду при экспериментальная Радыяаыянай дысл1-папратэ1нэм11 // Там же. С. 55-5951- а. А-Чиркин. М-К-Азаренок. И- Н- Гребенников. Н-Ю-Ко-невалова. В. А. куликов. Г- Н- Любила. Ю- В- Сараеь. И- А- Чиркина, Л- С. Янушевскип- Действие гамма-облучения и его сочетания с гепатотоксическими и стрессовыми Факторами на состогчие ди-■ пилтранспортной системы//Ускореное старение, связь с возрас- ' тнои патологией - Тез. докл- 13-15 окт- 1992. Киев-- С- 13752- А. а-Чиркин. Н-И-степаненко. В- Н- Лекторов. Н-1 Ко-невалова. н- К- Азаренок. И- И- Гребенников. в- а- Куликов. Г- М- Любина- Некоторые молекулярные механизмы развития патологических процессов у людей, подвергшихся хроническому действию малых доз облучния//Тез. докл. X научной конф- . ноябрь 1992. "Восстановительные и компенсаторные процессы при лучевых поражениях*. - С- -Петербург. 1992- - С- 208-209.

53- С- с- осочук. Н- о- Коневаяова.. а- а- Чиркин- влияние продигиозана и рибоксина на обмен нуклеиновых кислот и состояние липидтранспортнои системы при регенерации печени у облученных крыс //Сб. научн- тр. 'Роль наследственных Факторов в патогенезе заболевания человека". - Витебск, 1992- - С- 98-9954- П- Л- Васильев, л-В-Папкович. н-ю-Коневалова. И-А-Яд-ройцева. а- а- Чиркин- Система Реабилитации больных ИБС на базе отделения восстановительного лечен"я ОТНО "Кардиология" //Ненедикаментозные метопы лечения сердечно-сосудистых заболеваний- Матер- респ. кон®.. Минск. 1993- - с. '1455- А- а. Чиркин. Ю- а. Рабкин. н. Ю- коневалова. Эффективность дозированных Физических нагрузок при реабилитации больных инФарктон миокарда в зависимости от состояния липидтранспортнои системы //Тан же. С. 8456- А-А- ChlrKln, М-Yu. Concv.Tlov.T.. J. A. Chlt-IUna. Radiation - related hepatic injury and po 1 yenephosph.it 1 -dl 1 clio 11 no (ГРС) //J- Цррл«л1ову. -T393- V. 18- - S'lpll-l. • T-96-

j7- A-A- ChliKln, M Y". Kr-nev-ilova, 3. S- OsochuK. The ha'-ierial r,nly-.i'-h.iridi гго<11яЮ2апе м limit ate nuclelne acids nynih".Tis 111 i-Pfftntrjilne lives and normalize blood lipid 'ran.':port E/.-ira state // J. Hepatology. - 1993.- V- 18. Suppi. 1• -T 9758- A-A mii'liln Ml. GrehennlKov, N. Tu. Konevalova.

The beta-naphtul-caprllate fermentative hydrolysis in lives eel]* and lipolytic enzymes activity at radiation - induced bowel injury // FalK syeposium, France, 1993- -G3-

59- НЮ- Коневалова- характеристика липидтранспортной системы при холестериноэе и холестеринодеФипите (лабораторная диагностика)/Справка РОНИИ. ИЗ Беларуси, 1993 г. - С- 1-660- Н- IX Коневалова- функциональная активность эстери-Фикашш холестерина при действии радиапионно-экологических Факторов //Тез- докл. Радибиол. съезда. - Киев, 1993. - т. 2. -с. 49061- Б- 9- Конопля, А-А-Чиркин, Н- Ю- Коневалова, Л- С. Яну-шевския. реактивность липидтранспортнои и сопряженных с ней систен ПОЛ. эстериФикапии холестерина и липолитическоя трансформации липопротеинов при внешнем гамма-облучений крыс // там же. С- 495-