Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Культурно-морфологическая характеристика микрофлоры мяса и эндокринно-ферментного сырья в Республике Бурятия

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Автореферат диссертации по теме "Культурно-морфологическая характеристика микрофлоры мяса и эндокринно-ферментного сырья в Республике Бурятия"

На правах рукописи

Бохоев Виктор Анатольевич

Культурально-морфологическая характеристика микрофлоры мяса и эндокринно-ферментного сырья в Республике Бурятия.

Специальность 03 00 23 - биотехнология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Улан - Удэ, 2008

003446956

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Бурятская Государственная сельскохозяйственная академия им В Р Филиппова» на кафедре микробиологии, вирусологии и ветеринарно-санитарной экспертизы

Научный руководитель

заслуженный работник высшей школы РФ, доктор ветеринарных наук, профессор ЦыдыповВ Ц

Официальные оппоненты

доктор биологических наук, профессор Лебедева С Н

кандидат биологических наук, Лаврентьева Е В

Ведущая организация

Иркутская государственная сельскохозяйственная академия

Защита диссертации состоится 9 октября 2008 года в 10 часов на заседании диссертационного совета ДМ 212 039 02 при ГОУ ВПО «Восточно-Сибирский государственный технологический университет» по адресу 670013, г Улан-Удэ, ул Ключевская 40В

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВСГТУ и на сайте www esstu ru

Автореферат разослан «_» сентября 2008 г

Ученый секретарь „ ^

диссертационного совета д т н. проф ЫХамнаева Н И

Общая характеристика работы

Актуальность темы

Качественный микробиологический анализ сырья животного происхождения - мясо, поджелудочная железа - особенно необходим в связи с тем, что сырье после биотехнологической переработки может использоваться для изготовления лекарственных препаратов, биологически активных добавок Поэтому органы животных, подлежащие переработке, не должны являться носителями патогенных н условно-патогенных микроорганизмов

Рынок мяса в республике Бурятия характеризуется наличием продукции, поступающей из животноводческих хозяйств республики, а также регионов РФ Кроме этого, поставщиками мясной продукции являются и другие страны Отсутствие надлежащего микробиологического контроля поступающей мясной продукции в значительной мере способствует возникновению и распространению эмерджентных инфекций среди населения

Из множества микроорганизмов, находящихся в мясе и эндокринно-ферментном сырье, санитарно-эпидемиологическое значение имеют патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, способные размножаться в пищевых продуктах и вызывать развитие инфекционного процесса Escherichia coli, Bacillus cereus, Enterococcus faecalis, Clostridium botulmus, perfrmgens, Staphylococcus aureus, Salmonella и другие Поэтому своевременное определение подобных микроорганизмов представляется наиболее важным в свете решения проблем использования качественного сырья для производства лекарственных препаратов

Цель и задачи исследований Целью работы являлось изучение культурально-морфологических и биохимических характеристик микрофлоры мясных туш, поджелудочных желез сельскохозяйственных животных на основе микробиологического мониторинга мясного рынка Республики Бурятия

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи-

• выявить современные факторы, обеспечивающие биологическую безопасность мяса и определяющие его ассортимент на потребительском рынке г Улан-Удэ,

• исследовать эпидемиологическое состояние в Республике Бурятия,

• определить объем микробной обсемененности мяса и поджелудочных желез сельскохозяйственных животных, сделать сравнительный анализ,

г*

\\

• изучить свойства, видовой и родовой состав, структуру выделяемых культур микроорганизмов, описать биологическую характеристику отдельных микробных культур

Научная новизна. На основании проведенных экспериментов расширены представления о видовом многообразии микрофлоры мяса, мясного сырья и ее влиянии на биобезопасность Изучены факторы, определяющие ассортимент мясной продукции на потребительском рынке города Улан-Удэ Подтверждена вероятность заноса и возникновения разнообразных инфекций посредством ввозимого из других стран мяса Проведен анализ критических контрольных показателей на этапе «рынок -потребитель» на основе микробиологического мониторинга микрофлоры мясных туш сельскохозяйственных животных, а также поджелудочных желез крупного рогатого скота, что является начальной ступенью контроля биобезопасности на всех этапах от первоначального производства, переработки и хранения, до маркетинга и потребления На основе культурально-морфологических и биохимических характеристик выявлен спектр условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, относящихся к типичным родам Proteus, Bacillus, Enterobacter, Streptococcus, Staphylococcus, Clostridium, Salmonella. Обнаружены не характерные для данного сырья виды Citrobacter, Shigella, Klebsiella, Edwardsiella, представляющие риск возникновения инфекции среди населения, а также оказывающие влияние на качество поджелудочных желез, предназначенных для получения гормональных и ферментных препаратов

Практическая значимость работы.

Материалы исследований используются в учебном процессе на кафедре «Микробиологии, вирусологии и ВСЭ» по курсу микробиология Разработаны методы микробиологической оценки биобезопасности мяса и эндокринно-ферментного сырья, участвующих в производстве лекарственных препаратов Методы используются в диагностической работе специалистами ветеринарных лабораторий и ветеринарно-санитарной экспертизы, что подтверждено актом о внедрении и использовании методической рекомендации Государственной ветеринарной службы Республики Бурятия от 08 02 2008

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на

V Сибирском международном ветеринарном конгрессе (Новосибирск, 2004), Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких домашних животных» (Троицк, 2005), Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и биотехнологии» (Оренбург, 2006), Международной научно-практической конференции,

посвященной 100-летию профессора Ивана Андреевича Спирюхова «Актуальные вопросы экологической, сравнительной, возрастной и экспериментальной морфологии» (Улан-Удэ, 2007), Вестник БГСХА им В Р Филиппова «Улан-Удэ, 2007»

Публикации. По теме диссертации опубликованы пять печатных работ, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 118 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, собственных исследовашш, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения Диссертация иллюстрирована 16 рисунками и 22 таблицей Список литературы включает 158 источников отечественной и иностранной литературы.

Материалы и методы исследования

Объектом исследования в экспериментах служили 73 пробы мяса сельскохозяйственных животных в охлажденном виде, а также 10 проб поджелудочных желез крупного рогатого скота в свежем виде

Исследования проводили на кафедре микробиологии, вирусологии и ВСЭ «Бурятской ГСХА им BP Филиппова», в лаборатории рынка «Центральный» города Улан-Удэ

Отбор проб мяса и поджелудочных желез производился в соответствии с (ГОСТ 21237 - 75), (ГОСТ 11285 - 93) Для световой микроскопии использовали микроскопы МБИ-6 (Кондратьева, 1982) Подвижность бактерий определяли просмотром висячей и раздавленной капли (Герхард, 1983) Протеолитические свойства микроорганизмов определяли путем установления способности разжижать желатин на МПЖ и свертывать молоко (Биргер, 1983) С целью идентификации и дифференциации изучали биохимические свойства, применяли систему индикаторных бумажек (СИБ) для идентификации микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae ФГУП НПО «Микроген» МЗ РФ Постановку опыта проводили согласно инструкции, использовали среды Гисса Пользовались определителями микроорганизмов (Сидоров, 1995; Бердже, 1936, Цион, 1948, Штибен, 1955) Чувствительность к антибиотикам определялась методом диффузии в агар с применением стандартных дисков, содержащих антибиотики (Чайковская, Гивенталь, Резван, 1984) При изучении патогенных свойств микроорганизмов выявляли гемолитические и плазмокоагулирующие способности бактерий Учет реакций производили после 20-24 часов инкубации в термостате при 37° С (Герхард, 1983)

Цифровой материал работы обрабатывали общепринятыми методами вариационной статистики Исследования были проведены в соответствии со схемой, представленной на рисунке 1

Рис 1 Схема проведения исследования

Основные результаты исследований

География и динамика поступления мяса на примере рынка «Центральный» г. Улан-Удэ Ассортимент мяса на потребительском рынке в г Улан-Удэ в основном формируется за счет мяса, поставляемого Джидинским, Тарбагатайским, Прибайкальским, Бичурским, Еравнинским, Закаменским, Кяхтинским и Мухоршибирским животноводческими хозяйствами Так, в

2004 году из районов Республики поступило 79,2%, в 2005, 2006 годах -78,6% и в 2007 - 77,5% от общего количества поступившего мяса Дополнительно в республику мясо поступает и из других регионов РФ Новосибирской, Омской, Читинской, Иркутской областей, Алтайского края В 2004 году на их долю пришлось 19,8% мяса, ввозимого в республику, в

2005 - 19,2%, в 2006 - 19% и в 2007 году - 19,7% Количество импортного мяса (свинины) из Бразилии в 2004 году составило 1% от общего количества мяса, в 2005 - 2,2%, в 2006 - 2,4% и в 2007 году - 2,8 процента

Данные исследования показали, что основными поставщиками являются районы Республики Бурятия, регионы РФ, Бразилия Сравнение процентных соотношений уровней поставок мяса выявило относительно

небольшую редукцию ввозимого мяса из районов Республики, а импортного - напротив стабильное увеличение (рис. 1).

•районы Республики —К—-регионы РФ

Дальнее Зарубежье (Бразилия)

Рис.2 Динамика поступления мяса на рынок "Центральный" г. Улан-Удэ аа 2004-2007 гт.

Оценка эпидемиологического состояния в Республике Бурятия по токсическим инфекциям

Острые кишечные инфекции неустановленной этиологии в период с 2004 по 2007 годы перенесли 21708 человек, из них 63% приходится на г. Улан-Удэ, 4,1% - Селенгинский район, 1,9% - Прибайкальский район, 2,8% -Кяхтинский район, 4,5% - Кабанский район, 2,7% - Иволгинский район, 2,8% - Закаменский район, 3% - Заиграевский, 2% - Баунтовский и 2,2% -Баргузинский район.

Острые кишечные инфекции установленной этиологии в данный период перенесли 1700 человек, из них 58,8% в столице Республики, 3,6% -Хоринский район, 5,9% - Кабанский, 5% - Иволгинский, 5,2% - Кяхтинский, 3,1% - Прибайкальский и 3,2% - Северо-Байкальский район (рис 2)

Полученные данные показали, что наблюдается значительный рост острых кишечных инфекций неустановленной и установленной этиологии, а также других заболеваний, связанных с пищевыми отравлениями

Степень контаминации микроорганизмами мяса и поджелудочных желез. Согласно СанПин показатель КМАФАнМ или КОЕ/г, который характеризует общее количество микроорганизмов, контаминирующих мясо убойных животных (в тушах, полутушах, четвертинах), не должен превышать 1 104 в 1 грамме продукта Увеличение КМАФАнМ свидетельствует о размножении микроорганизмов

Таблица 1 - Количество микробных колоний в мясе

№ Район поставщик Вид мяса Количество проб КМАФАнМ КОЕ/г

говядина 8 0,8 104 -1,2 10"

свинина 2 0,4 10" -1,5 10"

1 Джидинский баранина 2 1,2 104- 1,3 104

конина 4 0,5 104-1,1 104

2 Закаменский говядина 6 1,3 104- 1,4 104

конина 2 0,9 104- 1 10"

3 Бичурский говядина 6 0,3 104- 1,5 104

баранина 2 0,8 104-1 10"

4 Селенгинский говядина 4 0,7 104- 1,2 104

5 Еравнинский говядина 5 0,6 104- 1,1 104

6 Прибайкальский свинина 12 0,2 104- 1,2 104

7 Тарбагатайский свинина 4 0,8 104 - 1,1 104

8 Кяхтинский говядина 4 0,5 104-0,9 104

9 Мухоршибирский говядина 3 0,8 104-1,2 104

10 Алтайский край свинина 9 0,6 104-1,3 104

Таблица 2 - Количество микробных колоний в поджелудочной _железе крупного рогатого скота _

№ Район поставщик Количество проб КМАФАнМ

КОЕ/г

1 Кабанский р-н 6 6-0,8 10J

2 Прибайкальский р-н 4 9-1 102

Микробиологические показатели 73 проб мяса и 10 проб поджелудочных желез крупного рогатого скота свидетельствуют о допустимой норме общей и патогенной микрофлоры КМАФАнМ от 6 до

I,5 104 и не превышении предельно допустимых концентраций, предусмотренных гигиеническими нормативами по микробиологическим показателям (табл 1, 2) Отражая степень обсемененности мяса, КМАФАнМ не учитывает качественный состав микробиоты, в том числе патогенные и условно-патогенные микроорганизмы Сравнение общей микробной обсемененности мяса и поджелудочных желез указало на меньшую степень обсеменения поджелудочные железы, так как забор происходит непосредственно при забое животного Специфика поджелудочной железы объясняется неустойчивостью находящихся в ней белковых биологически активных веществ

Культурально - морфологические, биохимические свойства выделенных микроорганизмов

При проведении качественного анализа из 73 проб мяса различных видов животных было выделено 118 культур микроорганизмов Из мяса говядины Джидинского района - 18 культур, Закаменского - 12, Бичурского -

II, Еравнинского - 10 Свинина Прибайкальский район - 14 культур, Алтайский край - 10, Тарбагатайский - 6 Конина Джидинский район - 7 культур, Закаменский - 3 Баранина Джидинский- 5 культур и Бичурский- 3 культуры

Из результатов изучения культурально - морфологических свойств культур, представленных в таблице 3, видно, что 34,7% это грамположительные кокковидные, 28,8% - грамотрицательные неспорообразующие палочковидные, 12,7% - грамположительные спорообразующие палочковидные, 11,9 % - палочковидные грамположительные неспорообразующие и грамотрицательные спорообразующие Неподвижностью обладали 67% культур, а подвижностью - 33 процента По характеру роста на МПА выделили и определили колонии микроорганизмов с ровными краями (S-формы) 83,1%, с шероховатыми краями (R-формы) -16,9 процентов

Таблица 3 - Культурально-морфологические свойства выделяемых культур из _ проб мяса__

Культурально - морфологические свойства количество процент %

8 - формы 98 83,1

Я - формы 20 16,9

Гр +, кокковидные 41 34,7

Гр +, спорообразующие 15 12,7

Гр +, неспорообразующие 14 11,9

Гр спорообразующие 14 11,9

Гр неспорообразующие 34 28 8

Неподвижные 79 67

Подвижные 39 33

В процессе бактериологического исследования 10 проб поджелудочных желез крупного рогатого скота было выделено 17 культур микроорганизмов 12 культур из поджелудочных желез крупного рогатого скота Кабанского района и 5 культур с Прибайкальского района

Изучение культурально - морфологических свойств выделенных микроорганизмов выявило присутствие 6 грамположительных кокковидных микробных культур, 6 - грамотрицательных неспорообразующих палочковидных и 5 - палочковидных грамположительных спорообразующих Неподвижностью обладали 11 культур, а подвижностью шесть По характеру роста на МПА определили колонии с ровными краями (Б-формы) 14 культур, с шероховатыми краями (Я-формы) три (таб 4)

Таблица 4 - Культурально-морфологические свойства выделяемых культур из

поджелудочных желез крупного рогатого скота

Культурально -морфологические свойства количество процент %

в - формы 14 82,4

Я-формы 3 17,6

Гр +, кокковидные 6 35,3

Гр +, спорообразующие 5 29,4

Гр неспорообразующие 6 35,3

Неподвижные 11 64,7

Подвижные 6 35,3

Рассматривая биохимические свойства культур (табл 5), следует заметить высокий уровень ферментативной активности всех выделенных микробных культур

Так, положительный тест на каталазу в микробных культурах, выделенных из мяса, отмечался у 67% микробов, а в микробных культурах, выделенных из поджелудочных желез, - у 47% Тест на уреазу - в 37,3% и 35,3% выделенных культурах, тест на В-галактозидазу - у 34,7% и 35,3% микробных культур

Таблица 5 - Биохимические свойства культур выделенных из мяса и _ поджелудочных желез крупного рогатого скота_

Вид сырья Пробы мяса различных видов Пробы поджелудочных желез

сетьскохозяиственных животных крупного рогатого скота

Количество Число Количество Число

положительно положительных положительно положительных

Тесты реагирующих культур от реагирующих культур от

культур общего культур общего

количества в % количества в %

Сорбиг 68 57,6 10 58 8

Инозит 45 38,1 8 47

Сахароза 98 83 16 94,1

Аргинин 48 40,7 5 29,4

Оксндаза 45 38,1 1 6

Катал аза 79 67 8 47

Уреаза 44 37,3 6 35,3

В-галактозидаза 41 34,7 6 35,3

Сероводород 27 22,9 4 23,5

Индот 15 12,7 2 11,8

Был продемонстрирован высокий уровень сахаролитической активности Тест на сахарозу в микробных культурах, выделенных из мяса, отмечался у 83% микробов, а в микробных культурах, выделенных из поджелудочных желез, - у 94,1% Тест на сорбит - в 57,6% и 58,8% выделенных культурах, на инозит - у 38,1% и 47% В процессе исследования микробные культуры отличались высокой степенью протеолитической активности Способностью разжижать желатин обладало 32,2% культур, выделенных из мяса, и 47% - из поджелудочных желез Положительную реакцию на сероводород, который выделяется при расщеплении белка, дали 22,9% и 23,5% микробные культуры

Родовая принадлежность выделенных микробных культур

На основании изученных культуральных, морфологических и биохимических свойств все выделенные 135 микробных культур отнесены к следующими родам (табл 6) Proteus, Bacillus Enterobacter, Streptococcus, Staphylococcus, Clostridium, Salmonella, Listeria monocytogenes, Escherichia, Citrobacter, Shigella, Klebsiella, Edwardsiella, Yersinea, Erysipelothrix Доминантами в микробоценозах являлись типичные представители родов

Staphylococcus Enterobacter, Bacillus, Listeria monocytogenes, Citrobacter, Shigella, Klebsiella Нехарактерными для данных видов сырья явились некоторые микробные культуры, относящиеся к родам Citrobacter, Shigella, Klebsiella, Edwardsiella, Yersinea

Таблица 6 - Родовая принадлежность выделенных микробных культур

Мясо различных видов Поджелудочные железы

Определенные сельскохозяйственных крупного рогатого скота

рода животных

Количество культур

Staphylococcus 36 4

Bacillus 16 4

Listeria monocytogenes 13 -

Klebsiella 13 -

Enterobacter 9 3

Shigella 7 -

Citrobacter 6 1

Streptococcus 5 2

Escherichia coli 4 1

Proteus 4 1

Salmonella gallinarum 2 -

Edwardsiella hoshiae 1 -

Yersinea pseudotuberculosis 1 -

Erysipelothrix rhusiopathiae 1 -

Clostridium perfringens - 1

Всего 118 17

Были проведены имеющие важное теоретическое и практическое значение исследования по восприимчивости микробов к различным видам антибиотиков Культуры, выделенные из мяса, проявляли различный уровень чувствительности торбамицин подавлял рост у 88% микробов (34,7% -Staphylococcus, Streptococcus, 28% - Shigella, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Edwardsiella, Yersmea, Proteus , Escherichia, Salmonella, 25,4% -Listeria, Bacillus), цефазолин проявлял эффективную задержку роста колоний в 82% случаях, больше всего у Shigella, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Edwardsiella, Yersmea, Proteus, Escherichia, Salmonella - 38,1%

В процессе определения восприимчивости микробных культур, выделенных из поджелудочных желез, получены следующие результаты торбамицин подавлял рост всех микроорганизмов, левомицитин был эффективен для 15 культур, амоксицилин и цефазолин давали задержку роста 14 культур Не давали эффективной задержки роста бензилпенициллин, ампициллин, тетрациклин и эритромицин

Таким образом, тщательный анализ сырья на основе культурально -морфологических и биохимических свойств культур, выделенных из мяса и поджелудочной железы, позволяет определить не только различные экологические и таксономические группы культур, но и их относительно подробную характеристику, руководствуясь которой возможно не допустить к использованию некачественного сырья в пище и в производстве лекарственных препаратов

Выводы

1 выявлены основные факторы, обеспечивающие биологическую безопасность мяса и влияющие на его ассортимент на потребительском рынке города Улан-Удэ Большая часть говядины, свинины, конины и баранины, поступает из районов республики Бурятия В последнее время отмечается рост поступления мяса из других регионов Поэтому роль анализа динамики поступления мяса, информированность о поставщиках неоспорима с точки зрения безопасности продуктов питания

2 Исследовано эпидемиологическое состояние по пищевым отравлениям в Республике Бурятия Наблюдается значительный рост заболеваемости по токсическим инфекциям с алиментарным путем заражения населения острыми кишечными инфекциями установленной и неустановленной этиологии

3 Установлен объем микробных колоний 73 проб мяса и 10 проб поджелудочных желез, который позволяет сказать, что общая и патогенная микрофлора (КМАФАнМ) не превышала предельно допустимых концентраций, предусмотренных гигиеническими нормативами по микробиологическим показателям Тем не менее, данный показатель, установленный нормативными актами и применяемый не только на рынках города, но и в процессе технологических, биотехнологических производств, не раскрывает качественного состава микробиоты Проведен сравнительный анализ микрофлоры мяса и поджелудочной железы, который показал низкий уровень обсемененности микробами указанных желез Следовательно, биотехнологический потенциал эндокринно-ферментного сырья (поджелудочной железы), участвующего при разработке качественных медицинских препаратов, намного выше мясного

4 Расширены представления о видовом многообразии микрофлоры мяса и эндокринно-ферментного сырья используемые в биотехнологии На основании изученных свойств определен родовой состав 135 микробных культур, которые относятся к 16 родам и 36 видам микроорганизмов Часть из них являются типичными представителями родов Proteus, Bacillus, Enterobacter, Streptococcus, Staphylococcus, Clostridium, Salmonella и энтеропатогенные штаммы Escherichia coli Выявлены нехарактерные виды Yersmea, Citrobacter, Shigella, Klebsiella, Edwardsiella для данного сырья, которые не регламентируются СанПином и возможно играют определенную роль в возникновении пищевых токсикоинфекций, а также на качество поджелудочных желез, предназначенных для изготовления гормональных и ферментных препаратов

Список опубликованных работ по теме диссертации

1 Шубин А П, Цыдыпов В Ц, Лыгденов Ч А, Бохоев В А Распространенность и видовая характеристика сальмонелл в Бурятии // V Сибирский международный ветеринарный конгресс - Новосибирск, 2004 С 215-216

2 Бадмажапова Р Н, Цыдыпов В Ц, Бохоев В А Экологическая характеристика скотомогильников в Кяхтинском районе // Материалы IX научно - практической конференции, посвященной 75 - летию УГАВМ -Троицк, 2005 С 51-52.

3 Бохоев В А , Мархакшинова Л В , Цыдыпов В Ц Анализ ветеринарно-санитарной экспертизы реализуемых мясных туш различных видов и микробиологическая оценка на Центральном колхозном рынке ЛВСЭ №1 г Улан - Удэ // Актуальные проблемы ветеринарной медицины и биотехнологии - Материалы международной научно - практической конференции - Оренбург, 2007 С 15-17

4 Бохоев В А , Мархакшинова Л В , Цыдыпов В Ц Микробиологическая оценка и ветеринарно-санитарная экспертиза реализуемых мясных туш различных видов на Центральном колхозном рынке г Улан - Удэ И Актуальные вопросы экологической, сравнительной, возрастной и экспериментальной морфологии - Материалы международной научно -практической конференции, посвященной 100 - летию профессора Ивана Андреевича Спирюхова - Улан - Удэ, 2007 С 129-132

5 Бохоев В А, Мархакшинова Л В, Цыдыпов В Ц Санитарно -гигиенический и микробиологический контроль качества мяса в Республике Бурятия // Вестник Бурятской ГСХА им В Р Филиппова - № IV (9) — Улан -Удэ, 2007 С 4 - 10

Список используемых сокращений

МПА мясо-пептонный агар

МПБ мясо-пептонный бульон

МПЖ мясо-пептонная желатина

КМАФАнМ количество мезофильных, аэробных и факультативно

анаэробных микроорганизмов

КОЕ/г колониеобразующие единицы

табл таблица

рис рисунок

Б-формы поверхность колоний гладкая

Я-формы поверхность колоний шероховатая

Гр + грамположительные микробы

Гр- грамотрицательные микробы

р-н район

Подписано в печать 8 09 2008г Формат 60*84*1/16 Печать операт, Бумага писч Уел Печ Л 2,16 Тираж 100 экз

Издательство ВСГТУ 670013, г Улан-Удэ, ул Ключевская, 40в

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Бохоев, Виктор Анатольевич

ВВЕДЕНИЕ.

1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Состояние российского рынка мяса.

1.2. Микробиология мяса как среда обитания микроорганизмов.

1.3.Инфекционные болезни, передающиеся через мясо, мясные продукты.

1.4. Пищевые токсикоинфекции и токсикозы микробного происхождения.

1.5. Эндокринные органы животных.

1.5.1. Структура и функции поджелудочной железы.

1.5.2. Некоторые вопросы микробиологии поджелудочной железы.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1.Материалы и методы исследований.

2.2.Результаты исследования.

2.2.1. Динамика и география поступления мяса сельскохозяйственных животных на рынок «Центральный» г. Улан-Удэ.

2.2.2. Эпидемическая ситуация по токсическим инфекциям населения Республики Бурятия.

2.2.3. Степень контаминации микроорганизмами образцов проб.

2.2.4. Культурально - морфологическая характеристика выделенных микроорганизмов.

2.2.5. Биохимическая и вирулентная характеристика микроорганизмов.

2.2.6. Родовая принадлежность выделенных микроорганизмов.

2.2.7. Восприимчивость выделенных микроорганизмов к некоторым антибиотикам.

2.2.8. Биологическая характеристика отдельных микробных культур возбудителей пищевых токсикоинфекций.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Культурно-морфологическая характеристика микрофлоры мяса и эндокринно-ферментного сырья в Республике Бурятия"

Актуальность темы. Проблема экологической безопасности и высокого качества продуктов питания является важнейшим государственным и научным приоритетом, так как пища относится к одному из главных факторов, влияющих на здоровье населения.

Качественный микробиологический анализ сырья животного происхождения - мясо, поджелудочная железа - особенно необходим в связи с тем, что, кроме употребления в пищу, сырье после биотехнологической переработки может использоваться для изготовления лекарственных препаратов, биологически активных добавок. Поэтому органы животных, подлежащие переработке, не должны являться носителями патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.

Рынок мяса в республике Бурятия характеризуется наличием продукции, поступающей из животноводческих хозяйств республики, а также регионов РФ. Кроме этого, поставщиками мясной продукции являются и другие страны. Отсутствие надлежащего микробиологического контроля поступающей мясной продукции в значительной мере способствует возникновению и распространению эмерджентных инфекций среди населения.

Из множества микроорганизмов, находящихся в мясе и эндокринно-ферментном сырье, санитарно-эпидемиологическое значение имеют патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, способные размножаться в пищевых продуктах и вызывать развитие инфекционного процесса: Escherichia coli, Bacillus cereus, Enterococcus faecalis, Clostridium: botulinus, perfringens, Staphylococcus aureus, Salmonella и другие. Поэтому своевременное определение подобных микроорганизмов представляется наиболее важным в свете решения проблем использования качественного сырья для производства лекарственных препаратов.

Ввиду того, что существующий контроль мясного сырья в лабораториях ветеринарно-санитарной экспертизы ограничивается только органолептическими, биохимическими показателями и микроскопией в случаях подозрения на инфекционные болезни, практическая реализация новых положений изложена в нормативных и законодательных документах, связана с разработкой концепции оценки микробиологических показателей пищевых продуктов. Оценка осуществляется по всей пищевой цепочке на основе строго научного подхода, требующего не только знаний технологий производств, но и сведений о биологических процессах, протекающих в продуктах питания [149].

Цель и задачи исследований. Изучение культурально-морфологических и биохимических характеристик микрофлоры мясных туш и поджелудочных желез сельскохозяйственных животных на основе микробиологического мониторинга мясного рынка Республики Бурятия. В соответствии с поставленной целью определены следующие задачи:

1. выявить современные факторы, обеспечивающие биологическую безопасность мяса и определяющие его ассортимент на потребительском рынке г. Улан-Удэ;

2. исследовать эпидемиологическое состояние в Республике Бурятия;

3. определить объем микробной обсемененности мяса и поджелудочных желез сельскохозяйственных животных, сделать сравнительный анализ;

4. изучить свойства, видовой и родовой состав, структуру выделяемых культур микроорганизмов, описать биологическую характеристику отдельных микробных культур.

Научная новизна. На основании проведенных экспериментов расширены представления о видовом многообразии микрофлоры мяса, мясного сырья и о его влиянии на биобезопасность. Изучены факторы, определяющие ассортимент мясной продукции на потребительском рынке города Улан-Удэ. Подтверждена вероятность заноса и возникновения разнообразных инфекций посредством ввозимого из других стран мяса.

Проведен анализ критических контрольных показателей на этапе «рынок-потребитель» на основе микробиологического мониторинга микрофлоры мясных туш сельскохозяйственных животных, а также поджелудочных желез крупного рогатого скота, что является начальной ступенью контроля биобезопасности на всех этапах от первоначального производства, переработки и хранения, до маркетинга и потребления. На основе культурально-морфологических и биохимических характеристик выявлен спектр условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, относящихся к типичным родам: Proteus, Bacillus, Enterobacter, Streptococcus, Staphylococcus, Clostridium, Salmonella. Обнаружены не характерные для данного сырья виды Citrobacter, Shigella, Klebsiella, Edwardsieila, представляющие риск возникновения инфекции среди населения, а также оказывающие влияние на качество поджелудочных желез, предназначенных для получения гормональных и ферментных препаратов.

Практическая значимость работы. Материалы исследований используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре «Микробиологии, вирусологии и ВСЭ» по курсу микробиология, ветеринарно-санитарная экспертиза. Разработаны методы микробиологической оценки биобезопасности мяса и эндокринно-ферментного сырья, участвующих в производстве лекарственных препаратов.

Методы используются в диагностической работе специалистами ветеринарных лабораторий и ветеринарно-санитарной экспертизы, что подтверждено актом о внедрении и использовании методической рекомендации Государственной ветеринарной службы Республики Бурятия от 08. 02. 2008.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на V Сибирском международном ветеринарном конгрессе (Новосибирск, 2004); на Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких домашних животных» (Троицк, 2005); на Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и биотехнологии» (Оренбург, 2006); на Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию профессора Ивана Андреевича Спирюхова «Актуальные вопросы экологической, сравнительной, возрастной и экспериментальной морфологии» (Улан-Удэ, 2007); Вестник БГСХА им В.Р. Филиппова «Улан-Удэ, 2007».

Публикации. Основные результаты научных исследований отражены в пяти печатных работах.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, практические предложения, список литературы и приложения. Список литературы включает в себя различные источники, в т.ч. зарубежные. Работа иллюстрирована таблицами, рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Бохоев, Виктор Анатольевич

4. ВЫВОДЫ

1. выявлены основные факторы, обеспечивающие биологическую безопасность мяса и влияющие на его ассортимент, на потребительском рынке города Улан-Удэ. Большая часть говядины, свинины, конины и баранины, поступает из районов республики Бурятия. В последнее время отмечается рост поступления мяса из других регионов. Поэтому роль анализа динамики поступления мяса, информированность о поставщиках неоспорима с точки зрения безопасности продуктов питания.

2. Исследовано эпидемиологическое состояние по пищевым отравлениям в Республике Бурятия. Наблюдается значительный рост заболеваемости по токсическим инфекциям с алиментарным путём заражения населения острыми кишечными инфекциями установленной и неустановленной этиологии.

3. Установлен объем микробных колоний 73 проб мяса и 10 проб поджелудочных желез, который позволяет сказать, что общая и патогенная микрофлора (КМАФАнМ) не превышала предельно допустимых концентраций, предусмотренных гигиеническими нормативами по микробиологическим показателям. Тем не менее, данный показатель, установленный нормативными актами и применяемый не только на рынках города, но и в процессе технологических, биотехнологических производств, не раскрывает качественного состава микробиоты. Проведен сравнительный анализ микрофлоры мяса и поджелудочной железы, который показал низкий уровень обсемененности микробами указанных желез. Следовательно, биотехнологический потенциал эндокринно-ферментного сырья (поджелудочной железы), участвующего при разработке качественных медицинских препаратов, намного выше мясного.

4. Расширены представления о видовом многообразии микрофлоры мяса и эндокринно-ферментного сырья используемые в биотехнологии. На основании изученных свойств определен родовой состав 135 микробных культур, которые относятся к 16 родам и 36 видам микроорганизмов. Часть из них являются типичными представителями родов Proteus, Bacillus, Enterobacter, Streptococcus, Staphylococcus, Clostridium, Salmonella и энтеропатогенные штаммы Escherichia coli. Выявлены нехарактерные виды Yersinea, Citrobacter, Shigella, Klebsiella, Edwardsiella для данного сырья, которые не регламентируются СанПином и возможно играют определенную роль в возникновении пищевых токсикоинфекций, а также на качество поджелудочных желез, предназначенных для изготовления гормональных и ферментных препаратов.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Полученные результаты проведенных исследований мы рекомендуем использовать: при написании соответствующих разделов справочной и учебной литературы по санитарной микробиологии, ветеринарно-санитарной экспертизе;

• в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами факультета ветеринарной медицины, технологии производства пищевых продуктов, зооинженерного и биологического факультетов высших учебных заведений;

• в лабораториях НИИ, изучающих качество пищевых продуктов;

• в диагностической работе специалистами ветеринарных лабораторий республики и ветеринарно-санитарной экспертизы, а также работниками биофабрик при производстве лекарственных и биоферментных препаратов;

• в процессе разработки профилактических мероприятий в случаях заражения и распространения инфекционных болезней среди людей;

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Бохоев, Виктор Анатольевич, Улан-Удэ

1. Абдулин, Х.Х.Сибирская язва Текст./ Х.Х. Абдулин, Ш. X. Харисов — М. :Колос, 1976.- 251 с.

2. Авакян, А.А. Атлас анатомии бактерий, патогенных для человека и животных Текст./ А.А.Авакян, Л.Н.Канц ,И.Б. Павлов . — М.: Медицина, 1972.- 184 с.

3. Автократов, Д.М. Анатомия домашних животных Текст./Д.М.Автократов. -М.: Сельхозгиз, 1949. 158 с.

4. Агульник, М.А. Микробиология мяса, мясопродуктов и птицепродуктов Текст./М.А. Агульник, И.П. Корнеев. — М.: Пищевая промышленность, 1972.-272 с.

5. Акаевский, А.И. Анатомия домашних животных Текст. /А.И.Акаевский. -М.: Колос, 1975.-276 с.

6. Александрова, Н.М. Обнаружение спор возбудителя сибирской язвы во внешней средеТекст./Н.М.Александрова, Т.Х.Фаизов //Ветеринарная патология. 2003. -№1.-С.139- 141.

7. Алимов, В.А. Выявление Listeria monocytogenes в объектах ветеринарного надзора Текст./ В.А.Алимов // Ветеринарная патология. 2003. - №1. - С. 141 - 143.

8. Анатомия домашних животных Текст./ И.В.Хрусталева [и др.]. М.: Колос, 1994.-466 с.

9. Аносов, Н.Р.Микробиология Текст./Н.Р.Аносов. М.: Колос, 2001. - 352 с.

10. Ю.Бактериальные инфекции: Справочник Текст./ Б.И.Антонов [и др.]. М.: Агропромиздат, 1986. - 352 с.

11. П.Бакулов, И. А. Листериоз сельскохозяйственных животных Текст./ И.А.Бакулов М.: Колос, 1967. - 73с.

12. Бакулов, И.А. Новая страница в изучении листериоза Текст./ И.А.Бакулов, В.М.Котляров // Вестник РАСХН.-1999. №31. - С.14-15.

13. Бакулов, И.А. Токсикоинфекции и токсикозы. Вопросы профилактики заболеваний Текст./ И.А.Бакулов, A.M. Смирнов, Д.А. Васильев. -Ульяновск, 1997. 42 с.

14. Бакулов, И.А.Чувствительность штаммов Listeria monocytogenes к антибиотикам Текст. /И.А. Бакулов, Ю.В. Числов, В.М. Котляров// Ветеринария. 1989. - №6. - С. 29.

15. Бердже, Д. Определитель микробовТекст. /Д.Бердже . — Киев. :ПеетП. Наук. УССР,1936.- 770 с.

16. Биргер, М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования Текст./М.О.Биргер. — М.: МедицинаД983. -445 с.

17. Благосклонная, Я.В. Эндокринология Текст. / Я.В. Благосклонная, Е.В.Шляхто, А.Ю.Бабенко. СПб.: СпецЛит, 2007. - 273 с.

18. Богданова, Л.И. Микробиологический контроль на мясокомбинатах Текст./Л.И.Богданова. М.: Агропромиздат, 1958.- 137с.

19. Ветеринарная микробиология Текст./Е.В.Козловского, П.А. Емельяненко. М.: Колос, 1982. - 300 с.

20. Вимкер, Л.А.Чувствительность возбудителя рожи свиней к антибиотикам Текст./ Л.А.Вимкер// Ветеринария. 1968. - №7. - С. 111

21. Волина, Е.Г. Экология лептоспир Текст. / Е.Г.Волина, Л.Е.Суруханова// Ветеринарная патология. 2004. - №4. - С. 24 — 27.

22. Волина, Е.Г. Биохимические и генетические аспекты патогенности лептоспир Текст. / Е.Г.Волина, Л.Е.Саруханова, П.Е.Шкарлат// Аграрная Россия. 2002. - №2. - С. 42 - 47.

23. Вракин, В.Ф. Морфология сельскохозяйственных животных Текст. /В.Ф.Вракин, М.В.Сидорова. -М.: Агропромиздат, 1991. 370 с.

24. Гасанов, Н.Г. Биологические свойства стафилококков, выделенных из секретов вымени коров Текст. / Н.Г.Гасанов// С.-х. биология. — 1988. №4. — С. 131 - 133.

25. Галиуллин, А.К. Обнаружение возбудителя сибирской язвы в патологическом материале Текст. / А.К.Галиуллин// Ветеринарный врач. — 2004.-№1.-С. 40-42.

26. Ганам, M.JI. Токсигенность и патогенность эшерихий Текст./ М.Л.Ганам, М.А.Сидоров// Ветеринария. 1986. - №2. - С. 66 - 67.

27. Герхард, Т.Ф. Методы микробиологических исследований Текст. /Т.Ф.Герхард.— М.: Мир, 1983. 535 с.

28. Гершун, В.И. Листериоз сельскохозяйственных животных Текст./ В.И.Гершун. Алма-Ата, 1982. - С. 45 - 46.

29. Гершун, В.И. Жизнеспособность листерий в воде Текст. / В.И.Гершун// Сиб. Вестник с.-х. науки. 1979. - №6. - С. 48 - 50.

30. Головченко, М.В. Адаптация и выращивание культур Mycobacterium paratuberculosis на питательных средах Текст. / М.В.Головченко// Ветеринарная патология. -2006. №2. - С. 114-116.

31. Горбатов, В.М. Производство эндокринно-ферментных препаратов в Болгарии и ФранцииТекст./ В.М.Горбатов, В.А.Гуров, Л.С.Пожаринская. -М.: ЦИНТИпищепром, 1962.-207 с.

32. Гордеев, А.В. Тезисы доклада министра сельского хозяйства РФ Текст. /А.В.Гордеев // Птицефабрика. 2006. - №3. - С. 8 - 12.

33. Горелов, Ю.М. Среда для культивирования клостридий Текст. /Ю.М.Горелов, А.С.Орешкин// Ветеринария. 1980. - №10. - С. 29 - 30.

34. ГОСТ 21237 75 Мясо. Методы бактериологического анализа Текст.-М.: Стандартинформ, 1975.- 40с.

35. ГОСТ 11285 93 Железы поджелудочные крупного рогатого скота и свиней замороженные. Технические условия Текст. - М., 1995.- 22 с.

36. Губарев, Ф.А. Микробиология мяса и мясопродуктов Текст. /Ф.А.Губарев, Н.М.Страхова. М.: Пищепромиздат, 1958. - 80 с.

37. Гуров, В.А. Производство органопрепаратов Текст./В.А.Гуров. — М.: Пищевая промышленность, 1968. — 195 с.

38. Гуров, В.А. Медицинские препараты из животного сырья Текст./ В.А.Гуров -М.: Изд-во ВСХВ, 1957. -53 с.

39. Гуров, В.А. Справочник по производству органопрепаратов Текст. / В.А.Гуров, М.А.Иноземцев, А.Б.Замиховский. — М.: Пищевая промышленность, 1970. 285 с.

40. Гуров, В.А. Производство органопрепаратов в Чехословакии Текст./

41. B.А.Гуров, М.А.Иноземцев. -М.: ЦИНТИпищепром, 1960. -205 с.

42. Дальнейшее совершенствование системы мероприятий по профилактике и борьбе с сибирской язвой животных Текст. /И.А.Бакулов [и др.]. — Ветеринария.- 1997 №5. - С. 21.

43. Данко, Ю. Туберкулез: возбудитель меняет хозяина Текст. ЯО.Данко // Аграрный эксперт. 2006. - №1. - С. 60-61.

44. Денисова, Е.А. Изменение морфологии клеток Staphylococcus aureus придействии антибиотиков Текст./ Е.А.Денисов// Ветеринария. 2000. - №5. —1. C. 24-26.

45. Дерябин, Д.Г. Стафилококки: экология и патогенность Текст./ Д.Г.Дерябин. Екатеринбург: УрОРАН, 2000. - 238 с.

46. Дятчук, Т.И. Экологическая оценка мяса по микробиологическим показателям Текст. / Т.И.Дятчук, В.Н.Кисленко// Практик. 2006. - №4. - С. 32-35.

47. Ерофеева, Ю.К.Обнаружение листерий в мясном сырье и его санитарная оценка Текст./ Ю.К.Ерофеева, К.С. Янковский, Ю.Г. Костенко // Все о мясе. 2003. - №3. - С. 31 - 32.

48. Ефимочкина, Н.Р. Выделение Listeria monocytogenes из молока и молочных продуктов Текст. / Н.Р.Ефимочкина, С.Н.Карликанова// Молочная промышленность. 2004. - №5. - С. 36 - 38.

49. Жарикова, Г.Г. Микробиология продовольственных товаров. Санитария и гигиена Текст./Г.Г.Жарикова. -М.: Академия, 2005. 300 с.

50. Игнатов, П.Е. Некоторые аспекты патогенности бруцелл Текст./ П.Е.Игнатов// Бактериальные и вирусные болезни с.-х. животных и птиц в хоз-вах Сев. Кавказа. Новочеркасск. - 1983. - С. 66 - 74.

51. Идрисов, Г.З.Морфологические аспекты патогенеза сибирской язвы Текст. / Г.З.Идрисов, С.А.Осипова, А.К.Галиуллин // Ветеринария. 2006. -№2. - С. 28 - 32.

52. Ильина, З.М. Выживаемость и сохранение вирулентных свойств бактериями рожи свиней при длительном их хранении Текст./ З.М.Ильина// Сб. науч. Работ СибНИВИ. 1978(1979). - Т. 10. - С. 32 -33.

53. Индикация возбудителя сапа у экспериментально зараженных животных Текст./ А.К.Галиуллин [и др.]// Ветеринария.- 2003. №7. - С. 24 - 30.

54. Ипатенко, Н.Г. Изменчивость ВасШа АщИгааз Текст./ Н.Г.Ипатенко, Т.Н.Яковлева // Ветеринария. 2003. - №10. - С. 9 - 11.

55. Капралова Л.Т. Морфофункциональное состояние поджелудочной железы новорожденных ягнят и поросят Текст./ Л.Т.Капралова // Биологические основы периода новорожденности. М.: Наука, 1968. - Т. 29. - С. 123.

56. Кайшев В.Г. Мясная индустрия России в 2004 году: состояние и тенденции Текст. / В.Г.Кайшев, В.В.Дойков // Мясная индустрия. 2005. -№3. - С. 10-15.

57. Кауфман, Ф. Семейство кишечных бактерий Текст. / пер. с англ. И.В. Голубевой, Е.М. Доссер. М.: Медгиз,1959. - 356 с.

58. Керинов, Ч.И. Выживаемость бруцелл и эшерихий в навозе Текст./ Ч.И.Керинов // Ветеринария. 1983. - №2. - С. 23.

59. Кирьянов, Е.А. Профилактика лептоспироза животных Текст. / Е.А.Кирьянов// Приморский с.-х. ин-т. 1984. — С. 49.

60. Кирьянов, Е.А. Патологическая роль кишечной палочки Текст./ Е.А.Кирьянов, В.Т.Больных// Земля сиб. Дальневост. 1984. - №1. - С. 36 — 37.

61. Коваленко, Д.С. Использование эндокринно-ферментного сырья для производства органопрепаратов Текст. / Д.С.Коваленко, Г.П.Савашникова. — Киев.: Техника, 1966. 36 с.

62. Козак, В.Л. Они уступают только отравлениями сальмонеллезами Текст./В.Л.Козак// Практик. 2006. - №4. - С. 42 -44.

63. Козеева, О.В. Повышение микробиологической устойчивости мясных продуктов Текст./ О.В.Козеева // Мясная индустрия. 2007. - №2. - С. 29 -31.

64. Колычев, Н.М. Ветеринарная микробиология и иммунология Текст. / Н.М.Колычев, Р.Г.Госманов. М.: Колос, 2003. - 365 с.

65. Кондратьева, С.И. К оценке метода дифференциации грамположительных и грамотрицательных бактерий при помощи 3%-ного раствора КОН Текст. /С.И.Кондратьева // Лабораторное дело. 1982. - N1. — С.54.

66. Контроль безопасности продуктов питания в Республике Беларусь Текст. /В.П.Филонов [ и др.] // Вопросы питания. 2001. - №6. - С. 19 -24.

67. Кочемасова, З.Н. Санитарная микробиология и вирусология Текст./ З.Н.Кочемасова, С.А.Ефремова, А.М.Рыбакова. -М.: Медицина, 1987. 352 с.

68. Краткий определитель бактерий Берги Текст./ пер. с англ. — М.: Мир. — 1980.-495 с.

69. Кузин, А.И. Вопросы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота Текст./ А.И.Кузин, Л.В.Семина// Ветеринарная патология. 2004. - №12. -С. 48.

70. Кузьмичева, М.Б. Российский рынок мяса в 2005 г. Текст. /М.Б.Кузьмичева // Мясная индустрия. 2006. - №5. - С. 10 - 15.

71. Кузьмичева, М.Б. Состояние российского рынка свинины в 2004 г. Текст. / М.Б.Кузьмичева // Мясная индустрия. 2005. - №7. - С. 10-14.

72. Кузьмичева, М.Б. Состояние российского рынка конины, оленины и крольчатины в 2006 г. Текст. /М.Б.Кузьмичева // Мясная индустрия. 2007. -№2.-С. 14-18.

73. Кузьмичева, М.Б. Состояние российского рынка баранины в первом полугодии 2004 г. Текст. / М.Б.Кузьмичева // Мясная индустрия. — 2004. -№11.-С. 10-13.

74. Куликовский, A.B. Структурно-функциональные изменения стафилококка при воздействии высокой температуры Текст./ А.В .Куликовский, Н.Н.Вишнякова// ВНИИ Оеет. санитарии. 1979. - Т. 63. - С. 143 - 146.

75. Леонтьева, И.А. Биологические особенности эшерихий, выращенных на разных питательных средах Текст./ И.А.Леонтьева// Тр. УзНИВИ. 1986 (1987).-Вып. 38.-С. 33-36.

76. Лисицын, А.Б. О техническом регулировании безопасности мяса и мясных продуктов Текст./ А.Б.Лисицын, П.П.Веселова // Мясная индустрия. 2004. -№11.-С. 28-30.

77. Лисицын, А.Б. Рынок мяса и мясных продуктов в 2005 г. Текст./ А.Б.Лисицын, Т.Н.Леонова, Н.А.Юмашева // Всё о мясе. 2006. - №2. - С. 5 — 8.

78. Лыско, С.Б.Чувствительность микоплазм и эшерихий к антибактериальным препаратам Текст./ С.Б.Лыско, Н.Ф.Хатько, О.А.Сунцова // Ветеринария. 2006. - №3. - С. 31 - 32.

79. Лютинский, С.И. Патологическая физиология сельскохозяйственных животных Текст./ С.И. Лютинский. -М.: Колос, 2001. 496 с.

80. Ляйстнер, Л. Мясу мир Текст./ Л.Ляйстнер // Сфера: мясо, мясопереработка. - 2006. - №9. - С. 26 - 28.

81. Макаренкова, Г.Ю. Эффективное определение и мониторинг критических контрольных точек Текст./ Г.Ю.Макаренкова // Мясная индустрия. 2007. -№2. -С. 7-10.

82. Макаров В.А. Ветеринарно-санитарная экспертиза с основами технологии и стандартизации продуктов животноводства Текст. / В.А.Макаров, В.П.Фролов, Н.Ф.Шуклин.-М.: Агропромиздат, 1991.-155 с.

83. Маркова, С.И. Чувствительность штаммов эшерихий и сальмонелл к антибиотикам Текст./ С.И.Маркова// Профилактика инфекц. Болезней животных в Узбекистане. Ташкент, 1984. — С. 43 — 46.

84. Микробиологические основы ХАССП при производстве пищевых продуктов./ В.А. Галынкин и др..- СПб.: Проспект науки, 2007. 288 с.

85. Микробиология продуктов животного происхождения Текст./ Г.Мюнх [и др.] М.: Мир, 1985. - 592 с.

86. Мясное сырье: состав и свойства // О форме со вкусом. 2006. - №1. - С. 6 -7.

87. Напримеров, В.А. Влияние некоторых лекарственных трав на кишечную палочку и стафилококк Текст. /В.А.Напримеров // Проблемы экологии АПК: Материалы науч. практ. конф./ Новосибирский ГАУ. - Новосибирск. -2004.-С. 151-154.

88. Нахмансон, В.М. Дифференциальная диагностика инфекционных болезней сельскохозяйственных животных Текст./ В.М.Нахмансон, Л.Г.Бурба. -М.: Росагропромиздат, 1990. 254 с.

89. Органопрепараты Текст./ Х.Х.Владос [и др.]. М.: Пищепромиздат, 1941.-21 с.

90. ЮО.Панин, А.Н. Биологические свойства стрептококков, выделенных от свиней Текст./ А.Н.Панин, Е.В.Малик // Вестник с.-х. науки. 1991. - №3. -С. 139- 142.

91. Патогенные микроорганизмы: Учеб. Руководство / под. Ред. В.П. Миронова. -М., 1997. 280с .

92. Передача возбудителя бруцеллезной инфекции Текст. // Ветеринарный консультант. 2003. - №18. - С. 8.

93. Пилипейко, В.Г. Антибиотико-чуствительность возбудителей кишечных инфекций в птицехозяйствах Текст./ В.Г.Пилипейко, А.Г.Мындря, О.П.Татарчук // Птицефабрика. 2006. - №4. - С. 48 - 49.

94. Почва основной резервуар возбудителя сибирской язвы Текст. / Н.Г. Ипатенко [и др.] //Ветеринария. - 1991. - №12. - С. 23 - 26.

95. Производственно-ветеринарный контроль в мясной промышленности Текст. / Л.Л.Кухаркова [и др.] М.: Пищевая промышленность, 1964. - 143 с.

96. Радчук, H.A. Ветеринарная микробиология и иммунология Текст./ Н.А.Радчук. -М.: Агропромиздат, 1991.-202 с.

97. Руководство по ветеринарно-санитарной экспертизе и гигиене производства мяса и мясных продуктов Текст./ под ред. М.В. Бутко, Ю.Г. Костенко. -М.: РИФ «Антиква», 1983. 545 с.

98. Руководство по ветеринарно-санитарной экспертизе и гигиене производства мяса и мясных продуктов Текст./ под ред. М.В. Бутко, Ю.Г. Костенко. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. - 433 с.

99. Руководство по ветеринарно-санитарной экспертизе и гигиене переработки животных продуктов Текст./ под ред. И.В. Шура. М.: Колос, 1965.- 111 с.

100. Сажинов, Г.Ю. Мясная промышленность России в 1999 году Текст./ Г.Ю.Сажинов, В.В.Дойнов // Мясная индустрия. 2000. - №2. - С. 6 - 11.

101. Сенченко, Б.С. Ветеринарно-санитарная профилактика пищевых токсикоинфекций и токсикозов Текст./ Б.С.Сенченко // Мясной бизнес. -2004.-№10.-С. 58-61.

102. Серёгин, И.Г. Ветеринарно-санитарная экспертиза с основами технологии переработки эндокринно-ферментного сырья Текст./ И.Г.Серёгин, А.Т.Волков. М.: МГУПБ, 2005. -77 с.

103. Серёгин, И.Г.Ещё раз о профилактике сальмонеллеза у убойных животных Текст./ И.Г.Серёгин, А.Л.Яцута// Мясная индустрия. 2001. - №1. -С. 43-46.

104. Серёгин, И.Г. О болезнях, которые не диагностируют на боенских предприятиях Текст./ И.Г.Серёгин, Г.И.Брагин, И.Г.Логинов // Мясная индустрия. 2005. - №12. - С. 49 - 54.

105. Сидоров, М.А. Микробиология мяса, мясопродуктов и птицепродуктов Текст./ М.А.Сидоров, Н.В.Билетова, Р.П.Корнелаева- М.: Агропромиздат, 1986.-201 с.

106. Сидоров, М.А. Микробиология мяса и мясопродуктов Текст./ М.А.Сидоров, Р.П.Корнелаева. М.: Колос, 2000. - 240с.

107. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов Текст./ М.А.Сидоров, Д.И.Скородумов, В.Б.Федотов.-М.: Колос, 1995. -318с.

108. Смирнов, A.M. Проблемы качества и безопасности мяса и мясопродуктов Текст./ А.М.Смирнов // Ветеринарный консультант. 2006. - №13. - С. 10 — 12.

109. Совершенствование лабораторной диагностики туберкулеза Текст. /

110. B. А. Аникин и др. // Ветеринарная патология. 2004. - №1 - 2. - С. 30 - 32.

111. Сравнительная оценка питательных сред для индикации микобактерий туберкулеза Текст./ Н.А.Донченко [и др.] // Сиб. Вестник с.-х. науки. -2004.-№3.-С. 88-91.

112. Станислав, В.И. Выживаемость индикаторных бактерий и сальмонелл в жидком помете и почве Текст./ В.И.Станислав // Ветеринария. 1988. - №7. -С. 25-26.

113. Степанов, А. В. Морфофункциональная характеристика желез внутренней секреции Текст. / А.В.Степанов, В.Г.Казакова; ФГОУ ВПО « Бурятская ГСХА им. В.Р. Филиппова. Улан-Удэ: Изд-во ФГОУ ВПО БГСХА, 2006. - 30 с.

114. Технологические инструкции по заготовке эндокринно-ферментного сырья Текст./ под ред. В.М. Горбатова. -М.: ВНИИМП, 1976. -93 с.

115. Тюрин, В.Г. Выживаемость микобактерий в навозе, стоках и современные методы их обеззараживания Текст./ В.Г.Тюрин, Г.А.Мысова // Ветеринарная патология. 2004. - №1 -2. - С. 163 - 165.

116. Устенко, B.C. Изучение выживаемости бактерий рожи свиней в разных видах почв Текст./ В.С.Устенко, Н.А.Кольченко // Всесоюз. НИИ Пеет. санитарии. Т.59. - С. 89 - 92.

117. Ушаков, В.А. Факторы патогенности Е. Coli, выделенных от телят Текст./ В.А.Ушаков, А.Н.Головко // Ветеринария. 1992. - №4. - С. 23 - 24.

118. Фаизилов, Т.Х. Индикация патогенных сальмонелл в пищевых продуктах Текст. / Т.Х.Фаизилов, Л.И.Зайнулин, Н.М.Александрова// Ветеринария. — 2004. №8. - С .50

119. Хангажинов, A.C. Лептоспироз меры профилактики Текст. / А.С.Хангажинов // БАИН. 2003. - №2. - С. 21 - 22.

120. Характеристика сибиреязвенного микроба, выделенного из органов павших животных. / Г.Б. Муруева и др. // Ветеринарная газета. — 2000. -№18. С. 2.

121. Цион, P.A. Определитель микробов Текст./ Р.А.Цион. — М.: Сельхозгиз, 1948. 492 с.

122. Чайковская, С.М. Стандартизация методов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам Текст./ С.М.Чайковская, Н.И.Гивенталь, С.П.Резван // Лабораторное дело. — 1984. -№5.-С. 299-302.

123. Чиров, П. А. Санитарная безопасность как фактор надежности биотехнологических процессов переработки мясных продуктов Текст./ П.А.Чиров // Пища. Экология. Человек: Материалы 3-й междунар. Науч.-технической конф. М.: МГИПБ, 1999. - С. 165.

124. Чистяков, Ф.П. Микробиология Текст./ Ф.П.Чистяков, К.Л.Мудрецова-Висс. -М.: Госторгиздат, 1962. 158 с.

125. Шаталов, В.Ф. Изменение биологических свойств бактерий рожи при длительном воздействии температуры 37°С. Текст./ В.Ф.Шаталов / Сб. науч. Работ // ДагНИВИ 1978 (1979). - Т. 10. - С. 32 - 33.

126. Шатохин, Н.Г. Физиологическая характеристика и биологические типы стафилококков Текст./ Н.Г.Шатохин// Науч. Тр. Самарского СХИ. 1973 (1974).-Т. 30.-С. 44-47.

127. Шахбанов, A.A. Строение возбудителя лептоспироза сельскохозяйственных животных Текст. / А.А.Шахбанов// Тр. ВНИИВС. -1972.-Т. 42.-С. 11 13.

128. Энтеробактерии: руководство для врачей Текст. / под. Ред. В.И. Покровского. — М.: Медицина, 1985. 321с.

129. Юдичев, Ю.Ф. Железы внутренней секреции домашних животных Текст./ Ю.Ф.Юдичев, Г.А.Хонин. Омск, 1995. - 27 с.

130. Hyytianen, М. Uber mikrobiologische Untersuchgsmethoden und über Qualitatsbeurteilung des Fleisches Text./ M. Hyytianen, M.S. Poja, A. Niskanen // Fleischwirtschaft.- 1975. №55. - P. 549 - 552.

131. Probst, A- Anatomie des pancreas beim schwein in der medizinischen forschungText./ A.Probst ,W. Henninger ,M. Willmann ,H. Bergmeister, U.CT. Lorest // Wein. Tierarztl. Mschr. 1998. - № 85. -P. 352 - 358.

132. Sisson, S. The anatomy of domestic animals Text./ S. Sisson ,J.D. Grossman W. B. Saunders company. - 1938. - P. 475 - 477.

133. Tacas,J. Microbiologie der Wurst Text./ J.Tacas // Der Fleischermeister. -1966.-Bd. 20.-№8.-200 p.

134. Thompson, R.A. Recent advances in clinical immunology Text./R.A. Thompson. London and New York, 1980. - P. 253 -296.

135. Untermann ,F. Hygieneanforderungen an die Verarbeitung von Fleish Text./ F.Untermann // Fleishwirtschaft. 1993. - Bd. 73.- №4. - P. 389

136. Список используемых сокращений.

137. РФ Российская Федерация МПА - мясо-пептонный агар МПБ - мясо-пептонный бульон МПЖ - мясо-пептонная желатина

138. КМАФАнМ количество мезофильных, аэробных и факультативноанаэробных микроорганизмов

139. КОЕ/г — колониеобразующие единицытабл. таблицарис. рисунок8.формы — поверхность колоний гладкая с ровными краями Я-формы — поверхность колоний шероховатая с шероховатыми краями Гр.+ грамположительные микробы

140. Гр.--грамотрицательные микробыр-н район

141. Ведомство включает в себя МВД, УИН, войсковые части ОКИ - острые кишечные инфекции