Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Коррекция функционального состояния печени у кроликов и собак с использованием транскраниальной электростимуляции

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Коррекция функционального состояния печени у кроликов и собак с использованием транскраниальной электростимуляции"

На правах рукописи

003467061

АКСЁНОВ АЛЕКСЕЙ АЛЕКСЕЕВИЧ

КОРРЕКЦИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПЕЧЕНИ У КРОЛИКОВ И СОБАК С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТРАНСКРАНИАЛЫЮЙ ЭЛЕКТРОСТИМУЛЯЦИИ

03.00.13 - физиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Белгород - 2009

003467061

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. ИВАНОВА»

Научный руководитель: заслуженный ветеринарный врач РФ, доктор биологических наук, профессор Сеин Олег Борисович

Официальные оппонента: доктор биологических наук,

профессор Кулаченко Владимир Петрович;

доктор биологических наук, профессор Масалов Владимир Николаевич

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет им. Глинки»

часов на заседании дис-

Защита состоится « » ¿¿¿¿Ы? 2009 г. в « /О » сертационного совета Д 220.004.01 при ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» но адресу: 308503, Белгородская область, белгородский район, нос. Майский, ул. Вавилова, д.1. тел./факс 8(4722)39-22-62

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО Бел ГСХА

Автореферат разослан »

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент ! "( Ю.Н. Литвинов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В 90-х годах прошлого столетия и результате многолетних исследований, проведенных группой ученых во главе с доктором медицинских наук, лауреатом Государственной премии и премии Правительства РФ в области науки и техники, профессором В.П. Лебедевым, была показана возможность стимуляции защитных механизмов мозга посредством неинвазивного транскраниаиьного воздействия электрическим током определенных параметров. Был установлен и доказан опиагаый механизм этой стимуляции, изучена роль её серотонин- ергического, ГАМК-ергического и холинергического звеньев (В.П. Лебедев и др., 1998). В дальнейшем В.П. Лебедевым и сотр. были разработаны специальные модели аппаратов для проведения транскраниалыюй электростимуляции (ТЭС) под общим названием «Трапсаир».

В настоящие время метод ТЭС широко используется в медицинской практике. Его применяют для нормализации психофизиологического статуса и снижения утомляемости (B.II. Лебедев и др., 2001; 2003; 2005), нормализации системной и региональной гемодинамики (О.С. Медведев и др., 2005), стимуляции неспецифической резистентности организма (A.B. Рубцовенко и др., 1998; Н.Л. Груцкевич и др., 2005).

В последние годы метод ТЭС приатек внимание и ветеринарных специалистов. В литературных источниках имеются сведения о применении ТЭС с целью регуляции половой функции у свиней (О.Б. Сеин, 1991; 1994; 2008), для лечения телят, больных диспепсией (М.В. Беседин, 1999; 2000) и анемией (Д.В. Скачков, 2007), кастрации самцов (IO.B. Храмов, 1998), выполнении хирургических операций (Д.Ф. Давлетбердин и др., 2002), стимуляции функционального состояния желудка у свиней и овец (С.А. Ки-зилов, 2004; О.Б. Сеин и др., 2008). В то же время во всех этих работах авторы используют различные способы наложения электродов, параметры постоянного и импульсного тока, продолжительность и кратность ТЭС. Всё это свидетельствует о том, что метод 'ЮС в пракгике ветеринарной медицины находится на стадии становления и требует дальнейшего изучения и производственных апробаций.

Что касается влияния ТЭС на функциональное состояние печени у животных, то сведения, встречающиеся в источниках литературы, не многочисленны и зачастую носят противоречивый характер. Поэтому требуются дополнительные исследования гепа-токоррекгорных эффектов ТЭС с применением комплексных подходов.

Цель и задачи исследований. Учитывая вышеизложенное, целью настоящих исследований являлось изучение влияния ТЭС на морфофункционалыюе состояние печени у кроликов и собак в норме и при ее дисфункции. Исходя из этого, были поставлены следующие задачи:

1.Изучить физиологический статус у кроликов и собак при использовании разных режимов ТЭС;

2.0пределить гематологические показатели, отражающие функциональную активность печени у кроликов и собак после ТЭС;

3.Выявить морфологические особенности печени у кроликов и собак после ТЭС;

4.Изучить биохимический статус у кроликов и собак при дисфункции печени и

ТЭС;

5.Изучить морфологические особенности печени у кроликов и собак при дисфункции и после проведения ТЭС.

Научная новизна. На основании клинических, физиологических и морфологических исследований впервые проведён комплексный анализ многостороннего влияния ТЭС на морфофункциональное состояние печени в норме и при дисфункции. В ходе решения этого вопроса были изучены: клинические и гематологические показатели, отражающие функциональную активность печет; установлены изменения морфологической структуры печени у кроликов и собак в норме, при дисфункции и после применения ТЭС; подтверждена связь эффектов ТЭС с опиоидпыми системами организма.

Отличие результатов исследователей от результатов, полученных другими авторами, заключается в том, что на основании комплексных исследований, выполненных на двух видах животных, получены результаты, подтверждающие гомеостатическую направленность действий ТЭС.

Теоретическая и практическая новизна работы. Результаты комплексных исследований морфофункционалыгых особенностей печени у кроликов и собак после ТЭС дополняют существующие данные о роли аитиноцицептивной системы и способах воздействия на неё неинвазивными методами.

На основании полученных данных разработан новый способ восстановления функциональной активности печени у собак при ее дисфункции.

Внедрение результатов исследований. Разработанный способ восстановления функциональной активности печени у собак используется в государственных и частных ветеринарных клиниках г. Курска, а также в учебном процессе на факультетах ветеринарной медицины в Курской ГСХА.

Материалы диссертационной работы вошли в рекомендации «Использование транскраниальной электростимуляции в практике ветеринарной медицины» (Курск, 2008).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При рекомендованных режимах ТЭС не оказывает отрицательного влияния па организм, переносится животными хорошо и вызывает повторяемые клинические эффекты, без побочных действий.

2. Результаты клинических, физиологических и морфологических исследований, которые отражают гепатокорректорные эффекта ТЭС.

3. Гепатокорректорные эффекты ТЭС, обусловленные эндорфииергическими механизмами, которые при введении налоксона уменьшаются и потенцируются ингибитором энкефалиназ D-фенилаланином.

4. Способ восстановления функциональной активности печени у собак с использованием ТЭС.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на:

- международной научно-практической конференции ветеринарных терапевтов и диагностов «Современные проблемы ветеринарной терапии и диагностики болезней животных» (Троицк, 2007);

- международной научно-производственной конференции «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород 2007);

- международной научно-практической конференции «Научные проблемы производства продукции животноводства и улучшения ее качества» (Брянск, 2007);

- Всероссийской научно-практической конференции «Ветеринарная медицина -теория, практика и обучение» (Санкт-Петербург, 2007).

- международной конференции «Трансферт инновационных технологий в животноводстве» (Орел, 2008);

- международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины», посвященной 125-летию образования ветеринарной службы в Курской области (Курск, 2008);

- Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы развития животноводства и пути их решения», посвященной 55-летию образования зооипженерного факультета Курской ГСХА (Курск, 2008);

- международной научно-производственной конференции «Селекционно-технологические аспекты повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в современных условиях аграрного производства», посвященной 25-летшо кафедры частной зоотехнии, технологии производства и переработки продукции животноводства Брянской ГСХА (Брянск, 2008);

- международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы повышения эффективности агропромышленного комплекса» (Курск, 2008);

- научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Курской ГСХА (2006-2008).

Публикации результатов исследований. По материалам работы оггубликовано одиннадцать научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 137 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных иссле-

дований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Текст иллюстрирован 10 таблицами и 25 рисунками. Список литературы включает 204 источника, в том числе 79 иностранных авторов.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Диссертационная работа выполнялась в условиях межкафедральной научно-исследовательской лаборатории факультета ветеринарной медицины, ветеринарной клиники и вивария Курской ГСХА в период 2005-2008 гт.

Лабораторные исследования проводили на кафедре терапии и акушерства, биохимического отдела больницы скорой медицинской помощи г. Курска, научно-исследовательской лаборатории Курской биофабрики.

Объектом исследования являлись кролики породы советская шиншилла и беспородные собаки, которые содержались в ветеринарной клинике и виварии. Кормили животных по рационам, сбалансированным по питательным, минеральным и витаминным компонентам.

Экспериментальная часть работы состояла из четырёх серий опытов.

Переса серия опытов была посвящена изучению влияния различных режимов ТЭС на физиологический статус у кроликов и собак. Для этого из каждого вида животных было сформировано по одной опытной группе. Первая группа включала кроликов (7 голов). Во вторую группу входили собаки (5 голов). ТЭС проводили с использованием аппаратов «Трансаир - 2» и «Трансаир - 3».

В период и после ТЭС за подопытными животными вели наблюдение, учитывали поведенческие реакции, определяли основные клинические показатели (температура тела, пульс, дыхание).

До ТЭС, а также через 30 и 60 мин после последнего сеанса эдектро стимуляции у всех животных брали кровь, в которой определяли содержание общих гематологических показателей (СОЭ, гематокрит, эритроциты, лейкоциты, гемоглобин) и (3-эндорфина.

Вторая серия опытов предусматривала изучение функционального состояния печени у кроликов и собак после ТЭС. Для этого было сформировано по две группы соответственно каждому виду животных.

Первые группы кроликов (7 голов) и собак (5 голов) подвергались ТЭС трижды через день. Вторые группы соответственно были контрольными, им электростимуляция не проводилась.

Режим ТЭС как для кроликов, так и для собак предусматривал использование постоянного тока (3,5 мс) и импульсного тока, величина которого достигала 70 гЦ, длительность 3,5 мс, амплитуда 3,0 мА. Продолжительность сеанса составляла 30 минут.

У всех животных до и после окончания последнего сеанса ТЭС брали кровь. В крови определяли СОЭ, гематокрит, содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, общего белка, белковых фракций, свободных аминокислот, общих лшшдов, глюкозы, билирубина, АлАТ, АсАТ и ЩФ.

Третья серия опытов была посвящена изучению у кроликов и собак морфо-функционального состояния печени при дисфункции и ТЭС.

Исследования проводили на тех же животных, которые участвовали во второй серии опытов, после 10-сушчного уравнительного периода.

У кроликов и собак первых (опытных) групп вызывали дисфункцию печени путём пероралыюго введения четырёххлористого углерода в оливковом масле в течение 6 дней в дозе 1,0 мл/кг. При этом кроликов подвергали ТЭС в режиме, используемом во время проведения второй серии опытов. У контрольных кроликов и собак также вызывали экспериментально дисфункцию печени, как и у кроликов опытной группы, но ТЭС не проводили.

У всех подопытных кроликов и собак до начала эксперимента и непосредственно после его окончания брали кровь, и которой определяли те же компоненты, что и во второй серии опытов.

После взятия крови у кроликов их убивали и проводили отбор проб печени для гистологического анализа.

В четвертой серии опытов изучали гепатокорректорные эффекты ТЭС после введения антагониста опиоидных пептидов налоксона и ингибитора энкефалиназ 1> фенилаланина.

Опыты проводили на двух группах собак по 5 голов в каждой с использованием метода периодов (за контроль брались показатели, полученные до начала эксперимента). Предварительно у всех животных экспериментально вызывали дисфункцию печени ранее описанным методом. ТЭС проводили в режиме, используемом во второй серии опытов.

Собакам первой группы перед каждым сеансом ТЭС вводили внутрибрюшшшо налоксон в дозе 1,0 мг/кг дважды с интервалом 15 мин. Собакам второй группы за два часа перед сеансом ТЭС внутрибрюшишю вводили Г)-феиилалашш в дозе 300 мг/кг.

У всех подопытных животных брали кровь до начала эксперимента, а также через 12 и 24 час после последнего сеанса ТЭС. В крови определяли общие гематологические и биохимические показатели, отражающие функциональное состояние печени.

В ходе проведения экспериментов использовали комплекс методов, включающий клинические, гематологические, гистологические и биометрические исследования.

Клинические методы предусматривали определение у подопытных животных температуры тела, частоты пульса и дыхательных движений.

Гематологические методы. СОЭ определял! с использованием аппарата Пан-ченкова, гематокрц- - на микроцентрифуге Шкляра Содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина устанавливали общепринятыми методами (Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии - М., 1985). Содержание общего белка определяли на рефрактометре РЛУ-1, белковые фракции - методом электрофореза на мембранах «Владипор» МФАС-ОС-1 (сканирование электрофореограмм проводили на денситометре при длине волны 540 им). Идентификацию свободных аминокислот в крови осуществляли методом ионообменной хроматографии па аминокислотном анализаторе KLA-3B фирмы «Hitachi». Содержание (3-эндорфина определяли иммуноферментным методом. Содержание глюкозы, общего билирубина, общих липидов, ферментативной активности АлАТ, АсАТ, ЩФ определяли с использованием наборов фирм «Лахема» и «Хуман».

Гистологические методы. Изготовление гистологических препаратов го тканей печени проводили по общепринятой схеме, включающей фиксацию материала, обезвоживание в спиртах возрастающей концентрации (50-100°) и ксилоле, заливку в парафин, приготошюние и окрашивание срезов (Г.А. Меркулов, 1969; Д.С. Саркисов и др., 1996). Морфометрические измерения гистологических объектов осуществляли с использованием винтового окуляр-микрометра, фотосъемку гистопрепаратов проводили с применением микроскопа МБИ-15 и цифровой фотокамеры.

Гистологические исследования выполняли на кафедре терапии и акушерства Курской ГСХА и Курском областном бюро патологической анатомии.

Биометрические методы. Полученные в ходе проведения экспериментов данные подвергшись биометрической обработке (П.Ф. Рокицкий, 1973) с использованием ПЭВМ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ПЕЧЕНИ У КРОЛИКОВ И СОБАК ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ ТЭС

Целью данной серии опытов являлось исследование общих гематологических показателей, а также шггерьерпых показателей, отражающих функциональную активность печени у кроликов и собак, подвергавшихся ТЭС.

Результаты исследований представлены в таблице 1, из данных которой следует, что большинство изучаемых показателей, полученных до и после ТЭС, существенных различий не имело. Статистически достоверные различия были выявлены только в содержании эритроцитов, глюкозы, а- и у-глобулинов.

При идентификации свободных аминокислот, содержащихся в крови кроликов, было установлено, что преобладающее их большинство после ТЭС повысилось (гисти-дин, аргинин, треонин, пролип, аланин, валин, метионин, лейцин, тирозин, аспаралино-вая и глютаминовач кислоты).

Таблица 1 - Гематологические показатели у кроликов и собак после проведения ТЭС

Показатели Кролики Собаки

До проведения ТЭС После проведения ТЭС До проведения ТЭС После проведения ТЭС

СОЭ, мм/ч 1,8010,06 2,010,08 2,310,57 2,510,45

Гемагокриг, % 38,815,11 40,5±6,17 42,015,85 45,514,76

Эртроцигы, *1012/л 6,210,10 6,8±0,12* 5,810,09 6,510,07«

Лейкоциты, * 10'7л 7,1±0,73 6,710,56 8,710,45 9,310,57

Гемоглобин, г/л 108,0±7,80 111,5 ±8,40 135,618,9 144,Ш=103

Глюкоза, мыоль/л 2,8±0,17 3,410,19* 3,610,09 3,910,11»

Общие галщцы, г/л ЗД40Д1 3,210,17 3,510,83 3,310,67

Билирубин общий, ашголь/л 2,05±0,44 1,85±0,53 2,210,53 2,010,65

АлАТ, нмоль/с*л 136,6115,4 129,4±14,0 140,511 и 129,0110,5

АсАТ, имаи/с*л 68,819,9 62,5М,4 82,717,6 72,718,9

ЩФ, нмоль/с*л 424,5147,2 454,0152,6 489,0138,8 466,5141,5

Общий белок, г/л 68,516,40 69,915,04 63,514,20 65,913,80

Альбумины, % 59,814,70 60,515,30 52,514,75 53,414,00

а-глобулины, % 12,510,95 10,710,88 14,510,66 12,0Ю,42*

р-глобулины, % lI.StO.74 Н,0±0,45 18,010,24 17,810,55

у-глобулины, % 16,210,28 17,810,23* 15,010,22 16,810,18*

Примечание: * при р<0,05 по сравнению с показателями, полученными до проведения ТЭС

При этом достоверное увеличение (р<0,05) было только аргинина, треонина, метиони-на, тирозина, ашарагиновой и глютаминовой кислот. В то же время содержание лизина, серина, глицина, изолейцина и фснилаланина после ТЭС уменьшилось. Однако данное понижение было статистически недостоверным (р>0,05).

3.2. ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ У КРОЛИКОВ И СОБАК

С ДИСФУНКЦИЕЙ ПЕЧЕНИ ПОСЛЕ ПРОВЕДЕНИЯ ТЭС В данной серии опытов изучали интерьерные показатели у кроликов и собак при дисфункции печени и после проведения ТЭС. С этой целью у подопытных животных экспериментальным путем вызывали временное нарушение функциональной активности печени. У всех подопытных животных исследовали гематологические показатели до и после ТЭС.

В ходе проведенных исследований было установлено (табл. 2), что содержание большинства изучаемых показателей крови у животных с функциональным расстройством печени после ТЭС нормализовалось. При этом повышение содержания эритроцитов, глюкозы, общих липидов, ферментативной активности АсАТ и АлАТ после ТЭС

Таблица 2 - Гематологические показатели у кроликов и собак с дисфункцией печени после

проведения ТЭС

Показатели Кролики Собаки

До проведения ТЭС После проведе1шя ТЭС До проведения ТЭС После проведения ТЭС

СОЭ.мм/ч 2,240,19 1,8±0,18 3,340,40 2,940,45

Гсматокрит, % 38,5±5,65 41,7±6,05 42,046,6 45,445,8

Эритроциты, *10и/л 5,9±0,08 6,8±0,11* 5,7±0,11 6,0±0,09*

Лейкоциты, *10у/л 8,440,92 7,240,85 9,1±0,14 8,5±0,22*

Гемоглобин, г/л 108,0410,9 129,0±12,4 120,847,9 135,549,8

Глюкоза, ммоль/л 2,8540,15 3,25±0,20* 3,0±0,08 3,4±0,10*

Общие лшщды, т/л 3,040,16 3,240,11* 3,1±0,12 3,440,20*

Билирубин общий, мкмоль/л 3,0540,27 2,0840,24* 3,6±0,11 2,740,14*

АлАТ, 1шоль/с*л 149,9410,4 118,0±9,7* 189,5±13,3 150,8±15,4*

АсАТ, нмоль/с*л 88,548,2 63,7±7,4* 98,549,6 68,848,0*

ЩФ, нмоль/с*л 486,0430,7 437,5±38,5 507,3±30,6 457,7±41,5

Общий белок, г/л 64,5±5,6 72,8±4,9 59,5±2,84 64,442,65

Альбумины, % 54,546,6 58,7±5,7 48,3±2,98 53,5±2,87

а-глобулины, % 14,140,73 14,7±0,83 10,541,76 11,041,52

р-глобулины, % 10,9±0,28 9,840,49* 24,9±2,93 22,842,34

у-глобулины, % 20,541,05 16,841,17* 16,340,55 12,740,46*

Примечание: * при р<0,05 по сравнению с показателями, полученными до проведения ТЭС

и уменьшение содержания лейкоцитов (у собак), общего билирубина, р-глобулинов (у кроликов) и у-глобулинов было статистически достоверным (р<0,05). Исследование свободных аминокислот показало, что суммарное их содержание в крови подопытных животных с дисфункцией печени составляло 2,17±0,09 ммоль/л. При этом на долю незаменимых аминокислот приходилось 1,22±0,07 ммоль/л, а заменимых аминокислот — 0,95±0,12 ммоль/л. После проведения ТЭС содержание аминокислот повысилось соот-ветствешю до 2,50±0,11; 1,43±0,04 и 1,07+0,07 ммоль/л. Увеличение суммы аминокислот происходило за счет гисгадина, метионина, аспараппювой и глютаминовой аминокислот, увеличение содержания которых было достоверным (р<0,05). В то же время содержание треонина, серина, аланина, изолейцина и тирозина после ТЭС уменьшалось, однако данное уменьшение было статистически недостоверным (р>0,05).

Полученные результаты при проведении данной серии опытов свидетельствуют о том, что ТЭС обладает тепатокорректорными эффектами.

3.3. МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА ПЕЧЕНИ У КРОЛИКОВ

ПРИ ЕЁ ДИСФУНКЦИИ И ПОСЛЕ ТЭС

При исследовании гистологической структуры печени у кроликов, которым ТЭС не проводили, у многих животных были выявлены изменения, которые у кроликов опытной группы не встречались. В частности в печени выявлялась ячеистая структура, в некоторых случаях отмечались расширения пространства Диссе. Имели место микро-циркуляторпые нарушения, центральные вены заполнены форменными элементами крови. В гепатоцитах уменьшалось количество гликогена, а количество жировых включений, наоборот, увеличивалось. При этом архитектоника балочной структуры гепато-цитов сохранялась и не отличалась от таковой у кроликов опытных групп.

Проведенные нами исследования указывают на то, что ТЭС повышает дезштгак-сикационную функцию печени. Эффекты ТЭС, по-видимому, связаны с воздействием па опиоидные рецепторы, которые по данным М.И. Кузина (1984) и сотрудников обнаружены в печени. Не исключено, что опиоидные пептиды, в данном случае, выполняют триггерпую роль. То есть «включают» механизмы, блокирующие образования свободных радикалов, которые образуются из четыреххлористого углерода с участием цито-хромов. Именно эти свободные радикалы путем перекисиого окисления повреждают фосфолипидные мембраны эндоплазматического ретикулума с образованием токсических продуктов, разрушающих гепатоциты. Однако не исключены и другие механизмы позитивного гепатотропного воздействия ТЭС.

Таким образом, проведённые нами гистологические исследования свидетельствуют о том, что ТЭС обладает гепатопротекторными свойствами и оказывает положительное влияние на морфофункциональное состояние печени при её дисфункции.

3.4. ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ У СОБАК ПРИ ДИСФУНКЦИИ И ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ ТЭС В КОМПЛЕКСЕ С НАЛОКСОНОМ

Учитывая, что налоксон является антагонистом опиоидных пептидов, нами были проведены эксперименты по выяснению его влияния на гепагокорректорные эффекты ТЭС. С этой целью собакам перед элотростимуляцией вводили виутрибрюшшшо налоксон в дозе 1,0 мл/кг дважды с интервалом 15 мин. У всех животных брали кровь во время постановки их на опыт и в конце эксперимента. В крови определяли общие гематологические показатели и показатели, отражающие функциональную активность печени.

Анализ данных, представленных в таблице 3, свидетельствует о том, что у собак с дисфункцией печени после ТЭС изменения содержания изучаемых гематологических показателей не имели достоверных различий (р>0,05), за исключением содержания глюкозы и (3-глобулинов (р<0,05).

Таблица 3 - Гематологические показатели у собак с дисфункцией печени поете введения

налоксона и проведения ТЭС

Показатели До начала эксперимента Через 12 час после ТЭС Через 24 час после ТЭС

СОЭ,мм/ч 3,4*0,12 3,4±0,14 3,30,16

Гематокрит, % 43,5±6,4 44,0±5,8 43,0±4Д

Эритроциты, *10|2/л 5,6±0,18 5,7±0,22 5,51:0,30

Лейкоциты, *\0ч1п 9,34.0,15 9,5±0,17 9,61:0,22

Гемоглобин, г/л 115,0*8,2 11б,8±7,9 116,0±9,9

Глюкоза, ммоль/л ЗД±Ю,09 3,6±0,07* 3,5±0,15

Общие липиды, г/л 3,2±0,26 ЗД±0Д0 3,0±0,17*

Билирубин общий, мкмоль/л 3,8±0,17 3,8±0,18 3,7±0,16

АлАТ, нмоль/с*л 178,3±14,0 170,5±11,2 182,5±12,0

АсАТ, нмоль/с*л 89,6±8,7 88,0±7,3 85,5±9,8

1ЦФ, нмоль/с*л 489, ШО, 9 495,6±21,1 480,3±30,1

Общий белок, г/л 61,4±5,22 60,8±7,33 60,0±5,99

Альбумины, % 50,5±3,07 49,7±3,11 48,8±2,09

а-глобулины, % 14,7±0,55 15,8±0,63 15,0«),54

Р-глобулины, % 1б,4±0,73 17,8±0,59 18,210,47»

у-глобулины, % 18,4-0,82 18,7±0,74 18,0±0,48

Примечание: * - при р<0,05 по сравнению с соответствующими показателями, полученными до начала эксперимента

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что гепатокорректорные эффекты ТЭС непосредственно связаны с шгошоцицеягавной системой мозга.

3.5. ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ У СОБАК ПРИ ДИСФУНКЦИИ И ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ ТЭС В КОМПЛЕКСЕ С Г>-ФЕНИЛАЛАНИ1ЮМ Известно, что О-аминокислоты являются ингибиторами энкефалиназ, в частности карбоксипептидазы А, мембраносвязывающего фермента, расщепляющего преимущественно энкефалин. Учитывая это, нами были проведены эксперименты по изучению влияния П-фенилалшшна на гепатокорректорные эффекты ТЭС.

Как свидетельствуют данные, представленные в таблице 4, у собак с дисфункцией печени после введения О-фенилаланина гепатокорректорные эффекты усиливались. Так, содержание эритроцитов, глюкозы, общего белка, у-глобулинов, ферментативной активности АсАТ и АлАТ достоверно повысилось (р<0,05), а содержание лейкоцитов, общего билирубина и р-глобулинов уменьшилось.

Полученные нами данные в этой серии опытов подтверждают участие эндогенных опиоидных пептидов в гепатокорректорных эффектах ТЭС.

Таблица 4 - Гематологические показатели у собак с дисфункцией печени после введения Г^-фаг1 чаланина и проведения ТЭС

Показатели До начала эксперимента Через 12 час после ТЭС Через 24 час после ТЭС

СОЭ, мм/ч 3,210,08 3,0±0,05 3,010,07

Гематокрит, % 43,714,0 44,5±4,7 45,615,2

Эритрощггы, *10,2/л 5,410,15 5,810,17 6,3±0,12*

Лейкоциты, *109/л 8,610,12 8,010,14* 7,410,10*

Гемоглобин, г/л 118,5±8,0 125,018,7 133,0110,0

Глюкоза, ммоль/л 2,8Ю,07 3,010,06* ЗД±0,09*

Общие липиды, г/л 3,010,19 3,3±0,24 3,310,17

Билирубин общий, мкмоль/л 3,710,12 3,310,11* 3,010,17*

АпАТ, нмоль/с*л 178,5110,2 167,5±11,6 148,019,7

АсАТ, 1!м0ль/с*л 90,514,8 70,0±9,9 64,415,3*

ЩФ, нмоль/с*л 503,01:27,5 486,4123,0 466,0±20Д

Общий белок, г/л 58,412,77 62,212,15 63,011,88

Альбумины, % 48,8±2,77 50,4±3,20 51,713,00

а-глобулины, % 10,210,56 12,1±0,74 13,410,66

Р-глобулины, % 18,610,21 17,1±0Д4 16,410,33*

у-глобулины, % 22,410,33 20,4±0,69 18,510^8*

Примечание: *- при р<0,05 по сравнению с соответствующими показателями, полученными до начала эксперимента

3.6. СПОСОБ ВОССТАНОВЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ПЕЧЕНИ У СОБАК ПРИ ЕЕ ДИСФУНКЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТЭС

На основании результатов проведенных исследований гепатокорректорных эффектов ТЭС нами был разработан способ восстановления функциональной активности печени у собак при её дисфункции.

Способ включает применение ТЭС в комплексе с введением Б-фенилаланина. С этой целью собакам с нарушением функциональной активности печени за 2 часа до начала сеанса электростимуляции вводят внутрибрюшинно О-фенилаланин в дозе 300 мг/кг. Затем проводят трижды через день ТЭС с использованием аппарата «Трансаир-2» или «Трансаир-3».

Для этого на голову собаки накладывают электроды в лобной (катод) и затылочной (анод) области. Между электродами и кожей головы помещают фетровые прокладки, смоченные водопроводной водой. Закрепляют электроды с помощью резинового фиксатора-оголовья.

При проведении ТЭС вначале на электроды подают постоянный ток, который медленно в течение двух минут увеличивают от 0 до 3,0 мА, затем на электроды в той

же полярности подают прямоугольные импульсы с частотой 70 Гц и длительностью 3,5 мс, амплитуду которых медленно увеличивают в течение двух минут до 3,0 мА. Электростимуляцию проводят три раза через день. Продолжительность сеанса 30 минут.

Апробация способа была проведена на 10 собаках, у которых экспериментально вызывали дисфункцию печени путём скармливания чеяыреххлористого углерода. Экспериментальную дисфункцию печени и результаты применения ТЭС подтверждали путём проведения лабораторного анализа крови, в которой определяли компоненты, отражающие функциональную активность печени.

Результаты проведенных исследований представлены в таблице 5, из данных которой следует, что у собак с дисфункцией печени, которым проводили ТЭС, происходило восстановление ее функциональной активности. Так, у собак опытной группы после ТЭС показатели содержания глюкозы, билирубина общего, белка, общих липидов, ферментативной активности аминотрансфераз, ЩФ практически возвращатись к фоновым значениям. У собак контрольной группы, которым ТЭС не проводили, исследуемые компоненты крови соответствовали таковым у собак до начала эксперимента.

Таким образом, применение разработанного нами способа позволяет нормализовать функциональную активность печени у собак. В связи с чем способ можно рекомендовать к использованию в практике ветеринарной медицины.

Таблица 5 - Гематологические показатели у собак при использовании ТЭС для восстановления функциональной активности печени при её дисфункции

Показатели До скармливания чс-тырбххлор истого углерода После скармливания четырёххлористого углерода После применения способа

опыт контроль опыт кошроль опыт кошроль

СОЭ, мм/час 2Д±0,6б 2,0±0,59 з,зю,п 3,110,12 3,0±0,14» 3310,09

Гематокриг, % 43,014,4 42,5±6,8 44,515,0 44,816,7 45,4±5,7 44,316,2

Эритроциты, *10|2/л 5,710,11 5,4±0,16 6,110,37 6,210,52 6,810,22* 6.0Ю34

Лейкоциты, *109/л 83Ю.56 8,010,72 9,910,50 9,710,46 8,510,62 10,510,78

Гемоглобин, г/л 120,5*7,0 118,718,8 108,517,4 104,018,9 119,5110,3 100,5111,8

Глюкоза, мм оль/л 3,110,12 3,310,18 2,5010,55 2,6710,42 3,041037* 2,7510,40

Билирубин общий, мкмоль/л 2,1±0,42 2,010,68 3,710,15 3,610,21 3,110,16* 3,710,12

Общий белок, г/л 64,0±4,8 63,8±6,2 59,513,62 58,312,16 63,013,18 59,412,43

Общие липиды, г/л 3,6±0,31 3,410,26 3,010,28 2ДЮ.24 ЗЗЮ.19* 2,910,11

АлАТ, нмоль^с*л 144,0± 14,2 138,6113,4 2053±1 и 197,8110,2 150,0110,4* 188,5110,5

АсАТ, нмоль/с*л 67,019,2 70,518,4 1183114,2 109ДЫ2.5 69,8±9,0* 111,7110,8

ЩФ, кмоль/с*л 476,5130,8 484,5137,2 516,5124,0 508,5129,5 430,2125,5* 514,7120,2

4. ВЫВОДЫ

1. 'ГЭС не оказывает отрицательного влияния на физиологический статус кроликов и собак и сопровождается активизацией антиноцицептивных механизмов мозга, о чем свидетельствует динамика содержания р-эндорфина в крови подопытных животных, уровень которого через 30 мин после окончания сеанса ТЭС увеличивался у кроликов в 3,2 раза, а у собак - в 3,5 раза.

2. При нормальном состоянии печени у кроликов и собак ТЭС не оказывает выраженного влияния на её функциональную активность:

- у кроликов и собак после ТЭС изменения СОЭ, гематокрита, содержание в крови лейкоцитов, гемоглобина, билирубина, общих липидов, общего белка, белковых фракций, незаменимых и заменимых аминокислот, ферментативной активности ами-нотрансфсраз и ЩФ находились в пределах физиологических норм и были статистически недостоверными (р>0,05) по сравнению с фоновыми показате.тями;

- повышение содержания в крови кроликов и собак эритроцитов, глюкозы, у-глобулинов и уменьшение содержания у собак а-глобулинов было статистически достоверным (р<0,05).

3. 'ГЭС обладает гепатокорректорным действием:

- у кроликов с дисфункцией печени после электростимуляции нормализовалось содержание в крови эритроцитов, глюкозы, билирубина, общих липидов, р- и у-глобулинов, а также ферментативная активность аминотрансфераз и ЩФ, при этом вы явленные изменения были статистически достоверными (р<0,05);

- после электростимуляции у кроликов с дисфункцией печени повышалось в крови содержание лизина (на 0,01 ммоль/л), аргинина (на 0,08 ммоль/л), аснарагиновой кислоты (на 0,08 ммоль/л), серина (на 0,01 ммоль/л), глютаминовой кислоты (на 0,11 ммоль/л) и уменьшалось содержание аланина (на 0,09 ммоль/л);

- у собак с дисфункцией печени после электростимуляции нормализовалось содержание в крови эритроцитов, лейкоцитов, глюкозы, общего билирубина, у-глобулинов, общих липидов, а также ферментативная активность аминотрансфераз и ЩФ, при этом выявленные изменения были статистически достоверными (р<0,05);

- после электростимуляции у собак с дисфункцией печени отмечалось достоверное повышение (р<0,05) в крови гистидина (на 0,09 ммоль/л), аспарагиновой кислоты (на 0,08 ммоль/л), глютаминовой кислоты (на 0,03 ммоль/л), мешонина (на 0,07 ммоль/л).

4. ТЭС оказывает положительное действие на морфологическую структуру печени:

- у кроликов с дисфункцией печени и подвергавшихся ТЭС структура органа преимущественно представлена светлыми гепатоцитами, печёночные дольки сформи-

рованы, границы долек хорошо различимы, печёночные балки и синусоидальные капилляры просматриваются на протяжении всей дольки;

- у кроликов, которым ТЭС не проводили, в печени имела место ячеистая структура, встречались микроциркуляторные нарушения, заполнение центральных вен форменными элементами, уменьшение в гепатоцитах гликогена.

5. Гепатокоррекгорные эффекты ТЭС связаны с биологическим действием эндогенных опиоидных пептидов. При введении антогониста опиоидных пептидов налоксо-на гепатокорректорное действие элекгростимуляции снижается. Содержание глюкозы, общего бежа, общего билирубина, альбуминов, а также ферментативная активность АлЛТ, АсАТ и ЩФ в крови собак с дисфункцией печени не имели достоверных различий с соответствующими показателями, полученными до начала эксперимента.

6. Внутрибрюпшнное введение ингибитора эшсефалиназ D-феиилаланина усиливает гепатокоррекгорные эффекты ТЭС. После применения ТЭС в комплексе с D-фепилаланином в крови собак с дисфункцией печени достоверно повышается содержание эритроцитов в среднем - на 0,9*1012/ji, глюкозы - на 0,4 ммолъ/л, общего белка - на 4,6 г/л и понижается содержание лейкоцитов - на 1,2*10%, общего билирубина - на 0,7 мкмоль/л, ß-глобулинов - на 2,2 %, у-тобулинов - на 3,9 %, ферментативная активность АлАТ - на 30,5 нмоль/л*с, АсАТ - на 26,1 нмоль/л*с.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

• Для коррекции функционального состояния печени у собак рекомендуете» применение ТЭС в комплексе с D-фенил аланином. С этой целью трижды через день проводят ТЭС, перед каждым сеансом которой внутрибрюшшшо вводят D-фенилалашш в дозе 300 ж/кг. При этом ТЭС используется в режиме, включающем подачу на электроды, расположенные на голове животного, вначале постоянного тока медленно нарастающего от 0 до 3,0 мА, а затем импульсного тока с частотой 70 Гц и длительностью 3,5 мс. Продолжительность сеанса электростимуляции составляет 30 мин.

• Полученные результаты экспериментальных исследований могут быть использованы в учебном процессе при преподавании курса физиологии животных на факультетах ветеринарной медицины.

6. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Аксенов A.A. Гематологические показатели у кроликов при остром отравлении четыреххлористым углеродом / A.A. Аксёнов, B.C. Сеин // Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: Материалы XI международной научно-производственной конференции. - Белгород, 2007. - С. 217.

2. Сеин О.Б. Экспериментальное изучение эффектов транскраниальной электростимуляции при острой интоксикации кроликов / О.Б. Сеин, A.A. Аксёнов, Б.С. Сеин // Научные проблемы производства продукции животноводства и улучшения её качества: Материалы международной научно-практической конференции. - Брянск, 2007. -С. 465-468.

3. Аксенов A.A. Биохимические компоненты крови у кроликов при острой интоксикации и транскраниалыюй электростимуляции / A.A. Аксенов // Ветеринарная медицина - теория, практика и обучение: Материалы второй Всероссийской научно-практической конференции. - Санкт-Петербург, 2007. - С. 4-5.

4. Аксенов A.A. Белковый спектр крови при острой интоксикации / A.A. Аксёнов, Б.С. Сеин // Системные исследования в науке и образовании: Сборник научных трудов. - Курск, 2007. - С. 56-57.

5. Аксенов A.A. Влияние транскраниалыюй электростимуляции на ферментативную активность крови / A.A. Аксенов // Естествознание и гуманизм. Современный мир, природа и человек: Межвузовский сборник научных трудов. - Томск, 2007. - Т. 4. -№ 4. - С. 83.

6. Сеин О.Б. О применении транскраниальной электростимуляции при острой интоксикации / О.Б. Сеин, A.A. Аксенов // Трансферт инновационных технологий в животноводстве: Материалы международной конференции. - Орел, 2008. - С. 173-175.

7. Сеин О.Б. О возможности применения транскраниальной электростимуляции в практике ветеринарной медицины / О.Б. Сеин, Б.С. Сеин, A.A. Аксёнов И Актуальные проблемы ветеринарной медицины: Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 125-летию образования ветеринарной службы в Курской области. - Курск, 2008. - С. 359-361.

8. Сеин Б.С. Транскршшальная электростимуляция как новый метод воздействия иа организм животных / Б.С. Сеин, A.A. Аксёнов // Актуальные проблемы развития животноводства и пути их решения: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 55-летию образования зооинженерного факультета Курской 1'СХА. - Курск, 2008. - С. 133-137.

9. Сеин О.Б. Экспериментально-клиническое изучение возможностей применения транскраниальной электростимуляции в ветеринарии / О.Б. Сеин, М.В. Беседин, С.А. Кизилов, Б.С. Сеин, A.A. Аксёнов, A.B. Пайденков // Селекционно-технологические аспекты повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в современных условиях аграрного производства: Материалы международной научно-производственной конференции, посвященной 25-летию кафедры частной зоотехнии, технологии производства и переработки продукции животноводства Брянской ГСХА. - Брянск, 2008. - С. 34-36.

10. Аксенов A.A. Содержание аминотрансфераз у кроликов при транскраниальной электростимуляции / A.A. Аксёнов, B.C. Сеин // Актуальные проблемы повышения эффективности агропромышленного комплекса: Материалы международной научно-практической конференции. - Курск, 2008. - С. 167".

11. Сеин О.Б. Перспективы использования транскраниалыюй электростимуляции / ОБ. Сеин, Б.С. Сеин, A.A. Аксёнов // Аграрная наука. - 2008. - № 9. - С. 37-38.

Сдано в набор 1 S.03.2009 г. Подиисано в печать 18.03.2009 г. Формат 60x84 V^. Бумага «Снегурочка». Гарнитура Times New Roman Cyr. Усл. иеч. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 672.

Отпечатано: ПБОЮЛ Киселева О.В. ОГРН 304463202600213

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Аксёнов, Алексей Алексеевич

Общая характеристика работы

1. Обзор литературы

1.1 Печень и ее роль в организме

1.2 Опиоидные пептиды как регуляторы физиологических функций организма

1.3 Транскраниальная электростимуляция как новый неинвазивный метод воздействия на антиноцицептивную систему человека и животных

2. Собственные исследования 43 2.1 Материал и методы исследований 43 2.2. Результаты исследований

2.2.1 Влияние различных режимов ТЭС на физиологический статус кроликов и собак

2.2.2 Содержание p-эндорфина в крови кроликов и собак при использовании разных режимов ТЭС

2.2.3 Функциональная активность печени у кроликов и собак после применения ТЭС

2.2.4 Гематологические показатели у кроликов и собак с дисфункцией печени после проведения ТЭС

2.2.5 Морфологическая структура печени у кроликов при её дисфункции и после ТЭС

2.2.6 Функциональное состояние печени у собак при дисфункции и после применения ТЭС в комплексе с налоксоном '

2.2.7 Функциональное состояние печени у собак при дисфункции и после применения ТЭС в комплексе с D-фенилаланином

2.2.8 Способ восстановления функциональной активности печени у собак при её дисфункции с использованием ТЭС Обсуждение результатов исследований Выводы

Практические предложения Список литературы Приложения

СОКРАЩЕНИЯ И ОБОЗНАЧЕНИЯ

АсАТ - аспартатаминотрансфераза

АлАТ - аланинаминотрансфераза

АЭ - анальгетический эффект

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт

ОП - опиоидные пептиды

ПФС - психофизиологическое состояние

СОЭ — скорость оседания эритроцитов

СХУ - синдром хронического утомления

ТЭС — транкраниальная электростимуляция

ЦНС — центральная нервная система

ЩФ - щелочная фосфатаза

ЭКГ - электрокардиограмма

ЯМР - ядерномагнитнорезонансная томография

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Коррекция функционального состояния печени у кроликов и собак с использованием транскраниальной электростимуляции"

Дальнейшие исследования показали, что эффекты электростимуляции некоторых отделов головного мозга не ограничиваются только анальгезией, характеризуются также общей саногенетической направленностью на защиту организма от повреждающих воздействий. Так возникло новое понятие анти-ноцицептивная система. Эта система обеспечивает нормализацию психофизиологического статуса, стимулирует репаративную регенерацию повреждённых тканей, купирует болевые синдромы и поддерживает нормальные иммунные реакции организма.

Исследование механизмов возникновения вышеуказанных гомеостати-ческих эффектов привело учёных к обнаружению опиатных рецепторов, широко представленных во всех органах и тканях, и связывающихся с ними ли-гандов - эндогенных опиоидных пептидов, вырабатываемых собственным организмом.

Важнейшим из эндогенных опиоидных пептидов является р-эндорфин - нейропептид, широко представленный в мозге и во всем организме.

Установлено, что Р-эндорфин может в организме выступать одновременно в качестве гормона, нейротрансмиттера и нейромодулятора (Э. Коста, М. Трабуки, 1981). Помимо Р-эндорфина указанными свойствами обладают также и другие эндогенные опиоидные пептиды — энкефалины, серотонин. Именно антиноцицептивная система вместе с эндогенными опиоидными пептидами и опиатными рецепторами составляют систему защитных механизмовмозга.

В 90-х годах прошлого столетия в результате многолетних исследований, проведенных группой ученых во главе с доктором медицинских наук, лауреатом Государственной премии и премии Правительства РФ в области науки и техники, профессором В.П. Лебедевым, была показана возможность стимуляции защитных механизмов мозга посредством неинвазивного транскраниального воздействия* электрическим током определенных параметров (ТЭС). Был установлен и доказан опиатный механизм этой стимуляции, изучена роль её серотонинергического, ГАМК-ергического и холинергического звеньев (В.П. Лебедев и др., 1998). В дальнейшем В.П. Лебедевым и сотрудниками были разработаны специальные модели аппаратов для проведения ТЭС под общим названием «Трансаир».

В настоящее время метод ТЭС широко используется в медицинской практике. Его применяют для нормализации психофизиологического статуса и снижения утомляемости (В.П. Лебедев-и др., 2001; 2003; 2005); нормализации системной и региональной^ гемодинамике (О.С. Медведев и др., 2005); стимуляции неспецифической резистентности организма (А.В. Рубцовенко и др., 1998; Н.Л. Груцкевич'и др., 2005).

В последние годы метод ТЭС привлек внимание и ветеринарных специалистов. В литературных источниках имеются сведения о применении ТЭС для регуляции половой функции у свиней (О.Б. Сеин, 1991; 1994; 2008), для телят, больных диспепсией (М.В. Беседин, 1999; 2000) и анемией (Д.ВЛ. Скачков, 2007), кастрации самцов (Ю.В. Храмов, 1998), выполнении хирургических операций (Д.Ф. Давлетбердин и др., 2002), стимуляции функционального состояния желудка у животных (С.А. Кизилов, 2004; О.Б. Сеин и др., 2008). В то же время во всех этих работах авторы используют различные способы наложения электродов, параметры постоянного и импульсного тока, продолжительность и кратность ТЭС. Всё это свидетельствует о том, что метод ТЭС в практике ветеринарной медицины находится на стадии становления и требует дальнейшего изучения и производственных апробаций.

Что касается влияния ТЭС на функциональное состояние печени у животных, то сведения, встречающиеся в источниках литературы, не многочисленны и зачастую' носят противоречивый характер. Поэтому требуются дополнительные исследования гепатокорректорных эффектов ТЭС с, применением комплексных подходов;

Цель и задачи исследований. Учитывая- вышеизложенное, целью? настоящих исследований* являлось изучение: влияния; ТЭС на морфофункцио-нальное* состояние печени: у кроликов и? собак; в норме и при дисфункции. Исходя из этого, были поставлены следующие задачи:

1. Изучить физиологический статус у кроликов собак при использовании разных режимов 'ГЭС;

2. Определить гематологические показатели, отражающие функциональную активность печени у кроликов и собак после ТЭС;

3'. Выявить морфологические особенности: печени; у кроликов и- собак после ТЭС;

4.-Изучить.биохимический статус у кроликов .шсобак придисфункции печени и ТЭС;

5. Изучить морфологические особенности печени у кроликов и собак при дисфункции и после проведения ТЭС;

Научная новизна. На основании клинических, физиологических и морфологических исследований впервые проведён комплексный анализ многостороннего влияния ТЭС на морфофункциональное: состояние печени в норме и при дисфункции. В ходе решения этого вопроса были:

- изучены, клинические и гематологические показатели, отражающие функциональную активность печени; . - установлены изменения, морфологической структуры печени у кроликов и собак з норме, при?дисфункцииш после применения ТЭС;

- подтверждена связь эффектов ТЭС с опиоидными системами организма.

Отличие результатов исследователей от результатов, полученных другими авторами, заключается в том; что на.основании комплексных, исследований, выполненных на двух видах животных, получены данные, подтверждающие гомеостатическую направленность действия ТЭС.

Теоретическая и практическая- новизна работы. Результаты комплексных исследований морфофункциональных особенностей печени у кроликов и собак после ТЭС дополняют существующие данные о роли антино-цидептивной системы и способах воздействия на неё неинвазивными методами.

На. основании полученных, данных разработан новый способ восстановления функциональной активности печени у собак при ее дисфункции.

Внедрение результатов исследований. Разработанный способ восстановления функциональной активности печени у собак используется в государственных и частных ветеринарных клиниках г. Курска, а также в учебном, процессе на факультетах ветеринарной медицины в Курской ГСХА и Воронежского FAY.

Материалы диссертационной работы; вошли в рекомендации «Использование транскраниальной; электростимуляции в практике ветеринарной, медицины» (Курск, 2008).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При рекомендованных режимах ТЭС не оказывает отрицательного влияния на организм, переносится животными хорошо и вызывает повторяемые клинические эффекты, без побочных действий.

2. Результаты клинических, физиологических и морфологических исследований, которые отражают гепатокорректорные эффекты ТЭС.

3. Гепатокорректорные эффекты. ТЭС, обусловленные эндорфинерги-ческими механизмами, которые при: введении налоксона-уменьшаются и потенцируются ингибитором энкефалиназ D-фенилаланином.

4. Способ восстановления функциональной активности печени у собак с использованием ТЭС.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на:

- международной научно-практической конференции ветеринарных терапевтов и диагностов «Современные проблемы ветеринарной терапии и диагностики болезней животных» (Троицк, 2007);

- XI международной научно-производственной конференции «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2007);

- международной научно-практической конференции «Научные проблемы производства продукции животноводства и улучшения ее качества» (Брянск, 2007);

- второй Всероссийской научно-практической конференции «Ветеринарная медицина - теория, практика и обучение» (Санкт - Петербург, 2007).

- международной конференции «Трансферт инновационных технологий в животноводстве» (Орел, 2008);

- международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины», посвященной 125—летию образования ветеринарной службы в Курской области (Курск, 2008);

- Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы развития животноводства и пути их решения», посвященной 55-летию образования зооинженерного факультета Курской ГСХА (Курск, 2008);

- международной научно-производственной конференции «Селекционно—технологические аспекты повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в современных условиях аграрного производства», посвященной 25-летию кафедры частной зоотехнии, технологии производства и переработки продукции животноводства Брянской ГСХА (Брянск, 2008);

- международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы повышения эффективности агропромышленного комплекса» (Курск, 2008);

- научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Курской ГСХА (2006-2008).

Публикации результатов исследований. По материалам работы опубликовано одиннадцать научных статей.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 137 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Текст иллюстрирован 10 таблицами и 25 рисунками. Список литературы включает 204 источника, в том числе 79 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Аксёнов, Алексей Алексеевич

4 ВЫВОДЫ

1. ТЭС не оказывает отрицательного влияния на физиологический статус кроликов и собак и сопровождается активизацией антиноцицептивных механизмов мозга, о чем свидетельствует динамика содержания Р-эндорфина В'крови подопытных животных, уровень которого через 30 мин после окончания сеанса ТЭС увеличивался у кроликов в 3,2 раза, а у собак - в 3,5 раза.

2. При нормальном состоянии печени у кроликов и собак ТЭС не оказывает выраженного влияния на её функциональную активность:

- у кроликов и собак после ТЭС изменения СОЭ, гематокрита, содержание в кровшлейкоцитов, гемоглобина, билирубина, общих липидов, общего белка, белковых фракций, незаменимых и заменимых аминокислот, ферментативной активности аминотрансфераз и ЩФ находились в-пределах физиологических норми были - статистически недостоверными (р>0,05) по сравнению с фоновыми показателями;

- повышение содержания в крови кроликов и собак эритроцитов, глюкозы, у-глобулинов и уменьшения у собак а-глобулинов было статистически' достоверным1(р<0,05);

3. ТЭС обладает гепатокорректорным действием:

- у кроликов с дисфункцией печени после электростимуляции нормализовалось содержание в крови эритроцитов, глюкозы, билирубина, общих липидов, Р" и у-глобулинов, а также ферментативная активность аминотрансфераз и ЩФ, при этом выявленные изменения были статистически достоверными (р<0,05);

- после электростимуляции,у кроликов с дисфункцией печени-повышалось в крови содержание лизина (на 0,01 ммоль/л), аргинина (на 0,08" ммоль/л), аспарагиновой кислоты (на 0,08 ммоль/л), серина (на 0,01 ммоль/л), глютаминовой кислоты (на 0,11 ммоль/л)>и уменьшалось содержание аланина на 0,09 ммоль/л); t

- у собак с дисфункцией печени после электростимуляции нормализовалось содержание в крови эритроцитов, лейкоцитов, глюкозы, общего билирубина, у-глобулинов, общих липидов, а также ферментативная активность аминотрансфераз и ЩФ,- при этом выявленные изменения были статистически достоверными (р<0,05);

- после электростимуляции у собак с дисфункцией печени отмечалось достоверное повышение (р<0,05) в.крови гистидина (на 0,09 ммоль/л), аспа-рагиновой кислоты (на 0,08 ммоль/л), глютаминовой кислоты (на 0,03 ммоль/л), метионина (на 0,07 ммоль/л);

4. ТЭС оказывает положительное действие на морфологическую структуру печени:

- у кроликов с дисфункцией печени и подвергавшихся ТЭС структура органа' преимущественно представлена светлыми гепатоцитами, печёночные дольки сформированы, границы долек хорошо различимы, печёночные балюг и синусоидальные капилляры просматриваются на протяжении всей дольки;

- у кроликов, которым ТЭС не проводили, в печени имела место ячеистая структура; встречались микроциркуляторные нарушения, заполнение1 центральных вен форменными элементами, уменьшение в.гепатоцитах гли- • когена.

5. Гепатокорректорные эффекты ТЭС связаны с биологическим действием^ эндогенных опиоидных пептидов. При введении антогониста опиоидных пептидов - налоксона, гепатокорректорное действие электростимуляции снижается. Содержание глюкозы, общего белка, общего билирубина, альбуминов, а также ферментативная активность АлАТ, АсАТ и ЩФ в крови собак с дисфункцией печени не имели достоверных различий, с соответствующими показателями, полученными до начала эксперимента.

6. Внутрибрюшинное введение ингибитора энкефалиназ D-фенилаланина1 усиливает гепатокорректорные эффекты ТЭС. После применения ТЭС в комплексе с D-фенилаланином в крови собак с дисфункцией пече

12 ни достоверно повышается содержание эритроцитов в среднем на 0,9*10 /л, глюкозы - на 0,4 ммоль/л, общего белка - на 4,6 г/л и понижается содержание лейкоцитов на 1,2* 109/л, общего билирубина - на 0,7 мкмоль/л, Р-глобулинов - на 2,2 %, у-глобулинов - на 3,9 %, ферментативная активность АлАТ — на 30,5 нмоль/л*с, АсАТ — на 26,1 нмоль/л*с.

5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для коррекции функциональной активности печени у собак рекомендуется применение ТЭС в комплексе с D-фенилаланином.

С этой целью трижды через день аппаратом «Трансаир—2» или «Тран-саир-3» проводят ТЭС, перед каждым сеансом которой внутрибрюшинно вводят D-фенилаланин в дозе 300 мг/кг. При этом ТЭС используется в режиме, включающем подачу на электроды, расположенные на голове животного, вначале постоянного тока медленно нарастающего от 0 до 3,0 мА, а затем импульсного тока с частотой 70 Гц и длительностью 3,5 мс. Продолжительность сеанса электростимуляции составляет 30 мин.

2. Полученные результаты экспериментальных исследований могут быть использованы в учебном процессе при преподавании курса физиологии животных на факультетах ветеринарной медицины.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Аксёнов, Алексей Алексеевич, Курск

1. Акимов Г.А. Применение транскраниального электрического воздействия для лечения болевых неврологических синдромов / Г.А. Акимов,

2. Лебедев В.П., Шапкин В.И., Одинак М.М., Волков А.К., Кацнельсон Я.С. // Военно-медицинский-журнал. — 1986. 3. -с: 27-28.

3. Акимов Г.А., Транскраниальное электровоздействие в лечении вегето-сосудистой дистонии / Г.А.-Акимов, В.А. Заболотных, В.П. Лебедев и др. Журн. невропатол. и психиатр, им. С.С. Корсакова. 1991. 91 (7): -с. 75-78;

4. Ашмарин И.П. Нейропептиды в синоптической передаче / И.П. Ашма-рин, М.А. Каменская // Итоги науки и техники. Серия. Физиология человека и животных. ВИНИТИ-М., 1988 Т. 34 -184 с.

5. Бабичев-В.Н. Нейрогормональная регуляция овариального цикла/В.Н. Бабичев. -М.: Медицина, 1984. -278 с.

6. Бахирёв В.Д. Клиническая нейрофизиология регуляторных пептидов: -. Свердловск, 1989;

7. Беседин М.В. Применение транскраниальной электростимуляции для лечения телят, больных , диспепсией / М.В:. Беседин: Автореф: дис. канд. биол. наук.-Курск, 2000.- 19 с.

8. Блюгер А.Ф. Прижизненное морфологическое изучение печени /А.Ф. Блюгер, М.Г. Синельникова. — Рига: Изд-во- акад. наук Латвийской-СССР, 1962.- 159 с. '

9. Блюгер А.Ф. Тайны и парадоксы печени /А:Ф. Блюгер. — М:: Знание; 1988.-221 с. .

10. Богданова Ю.А. Динамика иммунного статуса в послеоперационном периоде- при использовании- транскраниальной электростимуляции: / Ю.А. Богданова, А.Х. Каде, Р:А. Ханферян // Int. J. Immunorehab 2002. 4(1):-с. 137.

11. Вернигора А.Н. Об участии некоторых ферментов обмена нейропепти-дов в механизмах эмоционального стресса / А.Н. Вернигора, М.Т. Ген-гин; Н.Н.Никишин // Фйзиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1995. -Т. 81. -№5.-С. 103-111.

12. Вернигора А.Н. Очистка, и физико-химические свойства? растворимой; карбоксипептидазы из головного мозга кошки / А.Н: Вернигора, М.Т. Генгин, Н.Н. Никишин // Биохимия. 1992. - Т. 57, № 11. - С. 17121719.

13. Гепатопротекторная активность оксиметилурацила: Автореф. дис.канд. мед. наук: 14.00.25 / Т. Р. Мирсаев; Башкир, мед. ун-т. -Уфа, 2002. 20 с. - Библиогр.: с. 21 - 22.

14. Гомазков 0:А. Нейропептиды универсальные рецепторы / О.А. Го-мазков // Наука в^России: -1993. -№ 2. - С. 18-20.

15. Гомазков О.А. Регуляция биосинтеза энкефалинов: биохимические и физиологические аспекты / О.А. Гомазков, О.О. Григорьянц // Успехи современ. биологии. 1989." - Т. 108, вып. 1. - 109-124 с.

16. Гомазков О.А. Функциональные и прикладные проблемы современного' исследования регуляторных пептидов / О.А. Гомазков // Вестник Российской АМН. 1995. - № 2. - С. 10-12.

17. Гриненко А.Я. Использование транскраниального электрического воздействия для купирования алкогольного абстинентного синдрома / А.Я. Гриненко, Е.М. Купицкий, В.П. Лебедев // Физиология человека. -1988.-Т. 14, №2.-212 с.

18. Гуде 3:Ш. О взаимосвязи тиамина, микроэлементов в организме животных / З.Ш. Гуде // Автореф. дис.докт. биол. наук. — Киев, 1966. — 38 с.

19. Давлетбердин Д.Ф. Применение транскраниальной электростимуляции для повышения продуктивности молодняка коз оренбургской пуховой породы / Д.Ф. Давлетбердин, Ю.В. Храмов // Вестник ветеринарии. -Оренбург, 2002.- Вып. 5.- С. 60-61.

20. Дикенсон Э. О локализации и механизмах действия опиоидов / Э. Ди-кенсон // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1994. - Т. 57.-№6.-С. 3-12.

21. Дмитриев А.Д. Опиоидные пептиды и их рецепторы / А.Д. Дмитриев -М., 1982.-С. 7-40.

22. Дорофеев Г.Н. Циклические нуклеотиды и адаптация организма / Г.Н. Дорофеев, Л.А. Кожемякин, В.Т. Ивашкин Л.: Наука, 1978. - 264с.

23. Евтюхин А.Е. Опыт применения транскраниальной электростимуляции у онкологических больных / А.Е. Евтюхин, A.M. Бакман, И.В. Дунаевский, A.M. Шабут // Юбилейный сб. науч. работ гор. онкол. диет -СПб. 1996; -С. 270-273.

24. Ефанов Л.И, Защитные механизмы организма. Иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных / Л.И. Ефа-нов, Е.Т. Сайдулин. Воронеж: ВГАУ, 2004. - 391 с.

25. Ильинский, О.Б. Влияние стимуляции- антиноцицептивных: структур • мозга, на процессы регенерации / 0;Б. Ильинский, Е.С. Кондрикова, С.Е. Спевак // В сб.: Новые методы транскраниальной электроанальгезии. Ред. Лебедев В.П.-Наука, 1987:-С. 51.

26. Калюжный; Л.В. Центральные механизмы- контроля болевой чувствительности / Л.В. Калюжный; Е.В: Голованов // Успехи.физиол. науки. .— 1980.-№3.- С. 85-115. "

27. Карпенко Л.Ю. Функции-и биохимические аспекты роли печени в организме собак в норме и при патологии / Л.Ю. Карпенко, В.В. Тиханин

28. Тезисы шестой международной конференции по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных. — М., 1998. — С. 50—55.

29. Кацнельсон Я.С. Транскраниальная электроанальгезия как компонент анестезиологического пособия и средство купирования болевых синдромов (Разработка и экспериментально-клиническое исследование) / Я.С. Кацнельсон // Автореф. канд. дисс. Л., 1985. -18 с.

30. Кацнельсон Я.С. Оценка эффективности метода транскраниальной электроанальгезии в клинической анестизиологии / Я.С. Кацнельсон,

31. B.А. Леоско // В: Новый метод транскраниального электрообезболивания. Теоретические основы и практическая оценка: Тез докл. Ленинград: Наука, 1987. - 20-22.

32. Кияткин Е.А, АКТГ, кортикостерон и эндорфин в плазме крови* крыс в условиях длительного иммобилизационного стресса / Е.А. Кияткин, Ю.В. Полынцев, Н.Е. Кушлинский, Н.Г. Амирагова // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1985. - Т. 100, № 8. - С. 157-160.

33. Конышев В.А. Питание и регулирующие системы организма. — М.: Медицина; 1985.-224 с.

34. Корнеева Е.А. Стресс и функции иммунной системы / Е.А*. Корнеева, Э.С. Шхинек // Успехи физиол. науки. 1989. — Т. 20. - С. 3-20.

35. Коста Э. Эндорфины / Э. Коста, М. Трабуккш- М.: Мир, 1981.- 368 с.

36. Кузин М.И, Авруцкий М.Я, Шлозников Б.М. и др. Бюлл. экспер. биол., 1984. - Т. 47, № 5, - С. 515-516.

37. Кустаров В.Н. Новый немедикаментозный-метод лечения предменструального синдрома/ В.Н. Кустаров, В.П. Лебедев, С.А. Сиднева // В сб.: Новые подходы к решению проблем женского здоровья. СПб.: Изд. Дом МАПО, 2002. - С. 42 - 47.

38. Кустаров В.Н. Опыт применения транскраниальной электростимуляции при лечении предменструального синдрома / В.Н. Кустаров, В.П. Лебедев, С.А. Сиднева // Журн. акушерства и женских болезней. 2002. 51 (1): - С. 61-64.

39. Лебедев В.П. Об опиатном механизме транскраниальной электроанальгезии у крыс и мышей / В.П. Лебедев, А.Б. Савченко, Н.В. Петряевская // Физиол. журн. СССР.- 1988.- 74(9). С. 49-56.

40. Лебедев В;П. Влияние транскраниальной электростимуляции в аналь-гетическом режиме на сомато-симпатические рефлексы / В.П. Лебедев,

41. A.В; Красюков, Я.С. Кацнельсон, А.Б; Фан // Физиол. журн. им: И:М. Сеченова.- 1992.- 78 (11). С. 49-54. .

42. Лебедев В.*Н. 0б'Опиатном механизме транскраниальной электроанальгезии / В;П. Лебедев, А.Б: Савченко, Я;С. Кацнельсон; Н.В: Петряев-ская;// Сб.: Транскраниальная!электростимуляция: Экспериментально-клинические исследования.-СПб., 1998.-С.; 91-105.

43. Лебедев-; В.Ш. Транскраниальная электростимуляция: новый подход /

44. B.П. Лебедев // Сб.: Транскраниальная электростимуляция. Экспериментально-клинические исследования. СПб., 1998:,- С1.22-38.

45. Ленинджер А. Биохимия. Молекулярные основы структуры и функций* клетки // М.: Мир, 1974. 956 с.

46. Лишманов Ю.Б. Влияние энкефалинов на активность стрессовых гормонов при острой ишемии миокарда / Ю.Б. Лишманов, В.Д. Слепуш-кин, И.А. Прум // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1985. - № З.-С. 22-24.

47. Лишманов Ю.Б. О механизме антистрессорного действия D-ala2-лейаргб-энкефалина / Ю.Б. Лишманов, Л.Н. Маслов, М.И. Титов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1985. - Т. 100, № 9. - С. 268-270.'

48. Минушкин О.Н. Клиническая эффективность гепатосана и энтеросаиа — медикаментозных препаратов на натуральной основе / О.Н. Минуш-кин, Г.А. Елизаветина, Л:В- Масловский и др. //Кремлевская медицина. Клинический вестник. 2000; - №1. - С. 100;v .

49. Найденков А.В. Влияние транскраниальной электростимуляции на сократительную моторику сычуга / А.В. Найденков // Системные исследо- . вания в науке и образовании: Сборник научных трудов^- Курск, 2007.- С.зо-з1. ; ■

50. Панченко Л.Ф. Метаболизм энкефалинов при:различных функциональных и патологических состояниях организма / Л.Ф. Панченко, Н.В. Митюшина, Н.В. Фирсова, М.Т. Генгин // Вопросы мед. химии. Т. 45, вып. 4. - 1995. - С.277-289.

51. Папин А.А. Опиатные рецепторы эндорфина и их антагонисты / А.А. Папин, А.А. Карелин // Анестезиология и реаниматология. 1984. - № 2. - С. 52-61.

52. Персианинов Л.С. Электроанальгезия в акушерстве и гинекологии / Л.С. Персианинов, Э.М; Каструбин, Н.Н. Расстригин.- М.: Медицина, 1978.-240 с.

53. Подымова С.Д. Болезни печени / С.Д. Подымова. М.: Медицина, 1984. — 480 с.

54. Поленов А.А. Взаимодействие пептидных и ионоаминовых нейрогормонов основной принцип двойной нейроэндокринной регуляции /1

55. А.А. Поленов // Успехи физиол. науки. 1979. - Т. 10. - № 1. - С. 28-53.

56. Поповт А.С. Сравнительная характеристика влияния тауфона и транскраниальной электростимуляции на кардиогемодинамику интраопера-ционного периода у лиц с сердечно-сосудистой патологией / А.С. Попов // Автореф. канд. дисс. Волгоград, 1999. - 20 с.

57. Постников B.C. Лечение коров при функциональных нарушениях печени / B.C. Постников, Ф.Н. Насибов // Ветеринария. 1993. - № 12. -С. 49-50.

58. Постников B.C. Неспецифическая резистентность организма коров при гепатозах / B.C. Постников, Н.М. Пудова // Ветеринария. 1990: №6. - С. 49-50.

59. Розенблюм А.С. Опыт применения нейропептидов для лечения больных с нейросенсорной тугоухостью / А.С. Розенблюм, Е.М. Цирульников, М.С. Шатилова и др. // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1987. - № 6. - С. 31-36.

60. Савченко А.Б. Влияние транскраниальной электростихмуляции на эндогенный фон радиорезистентности лабораторных мышей / А.Б. Савченко, C.F. Чефу, В.В. Прокофьева, А.Д: Наздрачев // Докл. Акад. наук. 1996. 351 (2). - С. 278-280.

61. Сёин О Б: Физиологические особенности становления половой функции у свиней / О Б. Сеин: Автореф. дис. докт. бйол. наук. Белгород, 1996.-34 с.

62. Сеин О.Б. Транскраниальная электростимуляция как новый метод воздействия на организм животных и человека / О.Б. Сеин // Вестник Курской ГСХА.- 2008.- № 1. С. 30-35.

63. Славнов В:Н. Некоторые механизмы действия бета-эндорфина на секрецию гипофизарных гормонов / В-Н. Славнов, Г.В.Валуева, Е.В. Лу-чицкий и др. // Проблемы эндокринологии. 1986. — Т. 32, № 1. - С. 4952.

64. Сорокоумов В.А. / В.А. Сорокоумов, С.И. Грецов, Р.И. Войтенко и др. // В сб.: Комплексное лечение неврогенных болевых синдромов. (Респ. сб. науч. трудов / Лен. нейрохирург, ин т.). - Л., 1984. -С. 49—51.

65. Сухинин В.Н. Лечение маститов у коров с применением электроанальгезии / В.Н. Сухинин // Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных: Тез. докл. Междунар. коорд; совещ. -Воронеж, 1997. С. 432.

66. Уша Б.В. Клинико-функциональные и морфологические исследования в изучении патологии печени крупного рогатого скота: Автореф. дис.докт. вет. наук. -М:, 1974. -40 с.

67. Уша Б.В. Ветеринарная гепатология / Б.В. Уша. — М.: Колос, 1979. — 263 с.

68. Фармакологические и технологические аспекты разработки новых ге-патопротективных препаратов природного происхождения: Автореф. дис.д ра фармац. наук: 14.00.25; 15.00.01 / B.C. Чучалин; Пятигор. фармац. акад. - Пятигорск, 2003. - 38 с.

69. Хазанов А.И. Функциональная диагностика заболеваний печени / А.И. Хазанов. М.: Медицина, 1988. - 301 с.

70. Хеннинг А. Минеральные вещества, витамины, биостимуляторы в кормлении сельскохозяйственных животных: Пер., с нем. М.: Колос, 1976.-С. 308-313.

71. Храмов Ю.В. Электростимуляция коз (наложение электродов "ухо -ухо") / Ю.В. Храмов, И.В. Ненашев // Актуальные вопросы ветеринарии. Оренбург, 1997.- С. 76-77.

72. Храмов Ю.В. Иммунологические и биохимические показатели крови при электрообезболивании / Ю.В. Храмов, А.И. Смолягин, Н.М. Никитина // Ветеринария. 1998.- № 4.- С. 42-46.

73. Храмов Ю.В. Клинико-иммунологические показатели коз при электрообезболивании / Ю.В. Храмов, Е.И. Бовбас, Н.М. Никитина // Овцы, козы, шерстное дело. 1998.- № 1.- С. 35-37.

74. Чазов Е.И. Клинико-экспериментальное изучение нейропептидов / Е.И. Чазов, М.И. Титов, В.А. Виноградов // Вопросы мед. химии. -1984.-№3.-С. 47-51.

75. Aita М. The peptides of the immuno-neuro-endocrine sistem / M. Aita // Eur. I. Histochem. 1993. - Vol. 37. - P. 10.

76. Atweh, S. Autoradiographic localization of opiate receptor in rat brain. I. Spinal cord and .lower medulla / S. Atweh, M. Kuchar // Brain res. 1977. -Vol. 24. - P. 53-67.

77. Azarian A.V. Opioid destruction in brain structures / A.V. Azarian, V.Y.H. Hook // FEBS Lett. 1994. - V. 341, № 1. - P. 197-202.

78. Bach F.W. Beta-endorphin in the brain. A role in nociception / F.W. Bach // Act Anasthesiol. Scand. 1997. - Vol. 41, № 1 (Pt. 2). - P. 133-140.

79. Bakman A. Manichas G. Management of chronic pain (MCP) in oncological patients (OP) by transcranial electroanalgesia (TEA). / A Bakman // Paradigm of pain, 4th Internat. Congr. of the Israel Pain Associations. Tel Aviv, Israel, 1994. p. 100.

80. Basbaum A.I. Endogenous pain control systems: brainstem spinal pathways and endorphin circuitry. / A.I. Basbaum, H.L. Fields // Annu. Rev. Neurosci., 1984. 7, p. 309-338.

81. Bayon„ A. Regional distribution of endorphin, met-enkephalin and leu-enkephalin in the pigeon brain / A. Bay on, L. Koda, E. Battenberg et al. // Neurosci. Lett. 1980. -V. 16, № 1. - P. 75-80.

82. Bakman A. Wjalshina C. Palliative care and cancer pain relief. European School of oncology. Kishinev, 1993. p. 80.

83. Bernan Y. Defective prodimorphin inmice lacking prohormont cjnvertase PC2 / Y. Bernan, N. Mzhavia, A. Polonskaia at al. // Jurn. Neurochem. -2000.-Vol. 75, №4. -P. 1763-1770.

84. Bilski E.J. Enkefalin glycopeptides analogues with reduced dependence liability / EJ. Bilski, R.D. Egleton, S.A. Mitchel et al. // Jurn. Med. Chem. -1000. -Vol. 43, № 13. P. 2586-2590.

85. Bohn L.M. Potentiated-opioid analgesia in the norepinephrine transporter knock-out mice / L.M. Bohn, F.Xu, R.R. Gainetdinov, M.G. Caron // Jorn. Neurosci. 2000. - Vol. 20, № 24. - P. 9040-9045.

86. Bolme P. Cardiovascular effects of morphini and opioid peptides following intracisternal administration in chloralose- anesthetized rats / P. Bolme, K. Fuxe, L. Agnati et al.// Eur. J. Pharmacol. 1978. -V. 48, № 2. - P. 319-324.

87. Braekkan O.R. Influence of dietary fat on-liver storage of vitamin A in chics / O.R. Braekkan //Intern. Z. Vitaminforsch. 1962. - V. 32. - p. 284296.

88. Cahill F.J. Antagonism of nitric oxide antinociception in mice bi intrathe-cally administered antisera to endogenous opioid peptides / F.J. Cahill, E.A. Elenberg, J.L. Mueler et al. // Jurn.Bioned.-2000.-Vol.7, № 4. P. 299-303.

89. Camardgo M.D. Protease-mediated enkephalin destruction / M.D. Camardgo, A.C.M. Gomes, O. Toffoleto et al. // Neuropeptides. 1994. -Vol. 26, № 2. - P. 284-287.t i

90. Coffrey G.L. Enkephalin, catecholamine interactions in cardiac, skeletal, and intestinal muscle / G.L. Coffrey // Jurn. Amer. Osteopath. Assoc. 1984. -Vol.84, № 1, Suppl. -P. 135-142.

91. Conti F. Decreased immunoreactive beta — endorphin in mononuclear leucocytes from patients with chronic fatigue syndrome / F. Conti, V. Pittoni, P. Sacredote et al. // Clin. Exp. Rheumatol. 1998. V. 16. № 6. P. 729.

92. Corder R. Simultaneous release of neurotensin, somatostatin, enkephalin and cateccholamines from perfused cat adrenal glands. / R. Corder, P. Mason, D. Perret et al. //Neuropeptides.-1982. Vol. 3, № 1. - P. 9-17.

93. Denavit-Saubil M. Effects of opiates and methionine-enkephalin on pontine and bulgar respiratory neurons of the cat / M.Denavit-Saubil, J.Champagnat, W.Zieglansberger-Brain Res., 1978. Vol. 155. - P. 55-67.

94. Diplock A.T. The biological function of vitamin E and nature of the interaction of the vitamin and selenium / A.T. Diplock //Wld. Rev. Nutr. Diet. -1978.-V. 31.-P. 178-183.

95. Dolganski L. Studies on earli changes in the liver of rats treated with vari-ons toxics agents, with special references to the vascular lesions / L. Dolganski, A. Rosen // Amer. J. Path., 1984. V. 20. P. 945.

96. Feszt T. Influence of vitamin К of the ensimic aktiviti of hepatic tissue with experimental lesiens / T. Feszt, M. Gundisch, S. Alsasi // Acad. Rep. Populare.Inst. Med. Interns Studi Careetari Med. Intuna. 1960. V. 1. - P. 711-716.

97. Filds H.L. Pain modulation: expectation, opioid analgesia and virtual pain / H.L. Filds // Prog. Brain Res. 2000. - Vol. 122. - P. 245-253.

98. Fisher G. Alterations within the endogenous opioid in mist with targeted deletion of the neutral endopeptidase ('enkefalinase') gene / G.Fisher,

99. R.Zenig, O.Schuligoi et al. // Regul. Pept. 2000. - Vol. 96. № 1-2. - P. 5358.

100. Fontana F. Opioid peptide modulation of circulatory and endocrine response to mental stress in humans / F. Fontana, P. Bernardi, E.M. Pich et al. //Peptides.-1997.-Vol. 18, №2.-P. 169-175.

101. Foo H. Activation of- kappa receptors in the rostral ventromedial medulla blocks stress-induced antinociception / H. Foo, H F. Jelmstetter // Neurore-port. 2000. - Vol. 11, № 15.-P. 3349-3352.

102. Frecska E. The opioid model in psychiatric research / E. Frecska, K.L. Davis // Neuropeptides and' psychiatric disoders / Ed. Nemeroff C.B. Washington: American psychiatric press, 1991. P. 169.

103. Giannini A.J. Symptoms of premenstrual syndrome as a function'of beta — endorphin: two subtypes / A.J. Giannini, S.M. Melemis, D.M. Martin, D.J. Folts // Progr. Neuropsyhopharmacol. Biol. Psychiatry. 1994. V. 18. № 2. -P. 321.

104. Gilmore W. Identification of Opioids in dopaminergic pathways ib subcortex / W. Gilmore //Neuroimmunology. 1988. - Vol. 18. N.2. - P.' 125.

105. Goihl I. Allovable selenium levels in weanling pig diets / I Goihl // Feed-stuffs. 1984. 56, 33:20.

106. Harber V.J. Endorphins and exercise / V.J. Harber, J.R. Sutton // Sport Med. 1984. V. 1. № 2. P. 154.

107. Hennig J., Laschefski U., Opper C. Biopsychological changes after bungeejumping: beta endorphin-immunoreactivity as a mediator of euphoria ? //Neuropsychobiology. 1994. V. 29. № 1. - P. 28.

108. Hughes J: Identification; of two relatied pentapiptides from' the brain with patent opiate agonist activite / J: Hughes, T.W. Smit, HiF. Kosterltz et al. -Nature (London), 1975. Vol. 258. - P. 577-579.

109. Hughes Ji The distribution1 of methionineenkaphalin and- leucine-. enkaphalin in the brain and peripheral tissuer / J.Hughes, H.F.Kosterlitz, T.W:Smith // Br: J. Pharmacol 1977. - Vol; 61. - P: 639-647.

110. Kade A. Kh. Transcranial electrical stimulation as a'method of immunore-habilitation/ A. Kh. Kade, A.V. Rubtsovenco // Int. J'. Immunorehabilit. 1995. jV« 1, Suppl.: 59.

111. Koch B. 1963. Приведен no T.Mc. Donald et. al. // «Journal of Animal Sci.» 1966. - 25. N. 4. - P. 1024 -1028.

112. Koski G. The role of endorphin in stressevilence and speculations / G.Koski, W.A. Klee, B.A. Stereaty // The role of peptides in neuronal function. New-York. 1980. - P. 215-220.

113. Kruh I. Biochimie /Биохимия. Мёдицинские и биохимические проблемы. Перев. с франц. - М.: Медицина, 1979. - 510 с.

114. La Buda" L.J. Stress-induced^ analgesia in. mu-opioid receptor knockout mice reveal function of the delta-opioid receptor system*: / L.J. La Buda; I. Sara, G.R. Uhl, P.N. Fuchs// Brain.Res. -2000.-Vol .869; № 1-2. P. 1-5.

115. Laubie M. Central sites and1 mechanisms of the hypertensive and bradi-cardie effects of the narcotic agent, fentanil / M. Laubie, H. Schmitt, M. Promillat //Nannyn Schimiedibergs Ard. Pharmacol. 1977. - Vol. 276. - P. 255-260.

116. Leduc S. Production du sommeil et de l'anesthesia generale et local par les courans electrique / S. Leduc // C.R. Acad. Sci., 1902. 135, p. 199 - 200.

117. Limoge A. An introduction to electro anesthesia. Baltimore, Park Pres, 121 P

118. Ling N. Isolation, primary structure, and synthesis of alpha-endorphin and gamma-endorphin, two peptides of hypotalamic-hypopsialmorigin with* morphinomimetic activity / N. Ling, R. Burgus, R. Guillemin. Proc. Nat.

119. Acad. Sci. USA, 1976. - Vol. 73. - . 3942-3946.i

120. Lohmann A\B. ATP-gated K+ chanell openers enhance opioid antinocicep-tion: indirect evidence for the release of endogenous opioid peptides / A.B. Lohmann, S.P. Welch //Eur.Jurn.Pharmocol. 1999. - Vol. 385, № 2-3. - P. 119-127.

121. Mac Sween R. Histopathology of viral hepatitis and its sequalae / R. Mac Sween //Clin., exp. Obstet. Genec., 1983. V. X. P. 13-19.

122. Mc.Murrau W.C. Esseutials of Humman Metabolism / W.C. Mc.Murrau //Обмен веществ у человека.: Перев. с англ. Горкина В.З. М.: Мир, 1980.-366 с.

123. Miller R. The enkephalins / R.Miller // Handbook Psichopharmacology. -1983.-Vol. 16.-P. 107-207.

124. Mizogichi H. Met 5-enkephalin and delta2-opioid receptors in the spinal cord are involved in the cold water swimming-induced antiniciception ib the mouse / H. Mizogichi, M. Narita, J.P. Kampine et al. // Life Sci. 1997. -Vol. 61, №7.-P. PL 81-86.

125. Mogil J.S. disparate spinal and sipraspinal opioid antinociceptiv responses in beta-endorphin-deficient mutant mice / J.S. Mogil, J.T. Grisel, M.D. Hayward et al. //Neuropeptides. 2000. - Vol. 101, № 3. - P. 709-717.

126. Nakagawasai O. Changes in Beta-endorphin and stress-induced analgesia in mice after exposure to forced walking stress / O. Nakagawasai, K. Tadano et al. // Methods Fend Exper. Clin Pharmacjl 1999. - Vol.21, № 7 -P.471-476.

127. Ogawa N. Beta-endorphin concentration in the brain of in tract and hypophy-sectomized rats / N. Ogawa, A. E. Paneral, S. Lee et al. Life Sci., 1979. - Vol. 25.-P. 317-326. '

128. Onadera K. Differential involvement of opioid receptors in stress-induced antinociception caused by repeated to forced walking stress in mice / K. Onadera, S. Sakurada, S. Furuta et al. // Pharmocology. -2000. Vol.61, № 2.-P. 96-100.

129. Pohoresky L.A. Effect of chomic social stress on dilta-opiod receptor function in the rat / L.A. Pohoresky, A. Skindas, X. Zhang et al.// Jurn. Pharmacol. Exper.Ther. -1999. Vol. 290, № 1. - P. 196-206.

130. Reynolds D.V. Surgery in the rat during the electrical analgesia induced by focal brain stimulation. Science, 1969. 164, p. 444-445.

131. Richter G. Vitamin A - und - E - Versorgung bie der Aufsucht und Hal-tung von Legehennen / G. Richter, E. Marckwardt, B. Schelhorn et al. //Mn. Veter. Med. - 1986. Jg. 41, H. 13. - s. 443-445.

132. Robert Cohn M. Metabolic Disease / M. Robert Cohn, K.S. Rots // A Guide to Earey Recocuition 1983. - 640 p.

133. Rosen A. Central changes in nociceptin dinorphin В and Met-enkephalin-Arg-Phe in different models of nociception / A. Rosen, T. Lundeberg, B. Buther et al. // Brain.Res. 2000. - Vol. 857, № 1-2. - P. 212-218.-.■ 130 : : . • .

134. Schar G. Enkephalin effects on blood pressure, heart rate and baroreceptor reflex / G. Schar, W. Stock, M. Siinon et al//Hipertensiom 1980: -Vol. 2, -№ 4. - P. 395-407.

135. Sher L. Exercise, wellbeing, and endogenous molecules of mood / L. Sher // Lancet. 1996. V. 348. № 9025. P. 447.

136. Silberring G; Enkefalin degradation / G. Silberring, M.E. Castello, F.G Nyberg // Biol: Chem. 1992. - Vol.267, № 8. - P. 21324-21328. :

137. Sokol R.J. Fat soluble vitamins and their importance in patients with cholestatic liver disease / R.J:,SokolW Pediatric^Gastroenterology 1994::23:1. P. 673-705. " .л'--" .

138. Stiles G. L. Hormone-sensitive adenylate cuclase / G. L. Stiles, R. J. Le-fkowitz // V. Biol. Ghem. -1982: Vol: 257. - № 11. - P: 6287-6291:

139. Valverde; O. Reduction of stress-indiced; analgesia» but not of exogenous opioid effects in mice lacking CB1 receptors / O. Valverde, C. Ledent, B.B eslot et al. //Eur. Journ. Neurosci. 2000. - Vol. 12, № 12. - P. 533-539.

140. Yang H. Opioid peptides in adrenal gland / H. Yang, T. Hexum, E. Costa // Life.Sci. -1980. Vol. 27, № 8. - P . 1119-1125.

141. Yong A.H. Basal activity of the hypothalamic pituitaryadrenal axic in patients with chronic fatigue syndrome (neurasthenia) / A.H. Yong, M. Sharpe, A. Clements et al. // Biol. Psychiatry. 1998. V. 43. № 3. - p. 236.

142. Yound D.W. Molecular forms of P-endorphin in the canine pituitary gland / D.W. Yound, R.J Kemppainen // Amer. J. Vet. Res. 1994. - V. 55. - № 4. -P. 576-571.

143. Zorilla E.P. High self esteem, hardiness and affective stability are associated with higher basal pituitary - adrenal hormone levels / E.P. Zorilla, R.J. DeRubies, E. Redei // Psychoneuroendocrinology. 1995. V. 20. № 6. - P. 591.