Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение биологически активных веществ растений рода Amaranthus L.

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Изучение биологически активных веществ растений рода Amaranthus L."

КАЗАНСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОЮ КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени В. И. УЛЬЯНОВА-ЛЕНИНА

ХАЗИЕВ Рамиль Шамилевич

ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ РАСТЕНИЙ РОДА АМАНАМТН1Б [_.

03. 00. 04 - биохимия

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

На правах рукописи

Автореферат

КАЗАНЬ - 1993

Работа выполнена в научно-исследовательской лаборатории биотрансформации органических соединении Казанского ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственного университета ил;.В.И.Ульянова-Ленина.

доктор химических наук, ведущий научный сотрудник ОФИЦЕРОВ E.H.

кандидат химических наук, старший научный сотрудник КАРАСЕВА А.Н.

доктор медицинских наук, старший научный сотрудник ПОПОВА Л.Г.

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник ГАФАРОВА Т.Е.

Ведущее учреждение: ' НПО "Биотехнология"

(г.Москва)

Защита состоится " 1993 г. в /У часов

на заседании Специализированного ученого Совета К 053.23.19 в Казанском ордена Ленина и ордена Трудового'Красного Знамени государственном университете им.В.И.Ульянова-Ленина по адресу: 420008, Казань, ул.Ленина, 8.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке им.Н.И.Лобачевского Казанского государственного университета им.В.И.Ульянова-Ленина (Казань, ул.Ленина, 18),

Автореферат разослан " v 1993 г,-

Научный руководитель:

Научный консультант:

Официальные оппоненты:

Ученый секретарь специализированного Совета, * . А.Н.АСКАРОВА

кандидат биологических наук ¿/и^/^ '

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Все возрастающие масштабы внедрения в сельскохозяйственную практику в Татарстане и России новой кормо-еой культуры - амаранта, вызывают интерес к нему как к потенциальному сырьевому источнику биологически активных веществ, могущих найти применение в различных областях народного хозяйства. Этот интерес усиливают необычайно высокие урожаи (средними в условиях Татарстана считаются урожаи на уровне 550-600 ц зеленой массы с га, рекордными до 1500 ц/га) и различные виды, биологической активности, описанные для амарантов, используемых в народной медицине.

Поиск новых источников возобновляемого растительного сырья на смену традиционным не|5ти, газу, углю и древесине, а также безотходное использование имеющихся производств переработки растительного сырья являются общемировой тенденцией последних десятилетий. Поэтому выбор амаранта, новой для нашей страны кормовой культуры, как объекта изучения в качестве такого растительного сырья, в этих условиях является естественным и необходимым.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы было изучение химического состава надземной части амарантов, культивируемых в Татарстане, и поиск в них веществ с различны).® видами биологической активности.

В задачи исследования входило:

1. Провести первичный скрининг на присутствие в амаранте различных групп биологически активных растительных соединений.

2. Препаративно выделить обнаруженные биологически активные вещества и установить их химическое строение.

3. Дать количественную оценку содержанию биологически активных веществ (при необходимости с разработкой методик количественного определения).

4. Разработать способы практического получения веществ с ценными биологически активными свойствами, пригодными для промыт-пенного освоения.

Научная новизна. Впервые изучен флавоноидный состав А. згиепЬиэ. Разработан экспрессный метод количественного определе--шя ценного биологически активного флавсноида - рутина, определено его содержание в 15 видах и разновидностях амаранта, выяв-чены перспективные для получения^ рутина виды, разработан способ

его получения.

Впервые частично изучен состав растительного воска А. cruentus; обнаружено 8 новых каротиноидов, из которых 2 идентифицировано (у-каротин и ееаксантин). Впервые из надземной част A. cruentus выделено 2 токоферола, один из которых идентифицирован как ы. -токоферол.

Практическая значимость. По результатам работы A. cruentus и A. paniculatus предлагаются в качестве нового растительного источника рутина - ценного лекарственного препарата, применяющегося в медицине при многих заболеваниях. Разработан способ получения рутина из травы амаранта (патентный приоритет от 28.07.92) \ подготовлена необходимая документация (лабораторный регламент с нормативно-технической документацией на сырье) для опытного производства.

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались ) конференции молодых ученых и специалистов Казанского медицинского института "Молодые ученые - отечественному здравоохранению' (Казань. 1991); Всесоюзной конференции "Амарант - агроэкология переработка, использование" (Казань, 1992); 3-ей Межрегионально научно-производственной конференции "Амарант - проблемы возделы вания и использования" (Екатеринбург, 1992); 1-ам научно-практи чееком семинаре "Кормовые растения, в том числе нетрадиционные кормлении, питании, лечении" (Москва, 1992); итоговой научно конференции КНЦ РАН (Казань, 1993); 2-ой Всероссийской конфэрен щш "Амарант: агроэкология, переработка, использование" (Казан?) 1993); итоговой научной, конференции КГУ (Казань, 1993).

Публикации. - Ito материалам диссертации опубликованы 3 работ и 3 находятся в печати. Подана заявка на патент (приоритет с 28. 07. 92).

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 126 .стр. содержит 29 таблиц и 36 рисунков., библиография - 12 стр. Бибш ография включает 111 источников, из которых 56 иностранных. Дис сертация состоит из введения, обзора литературы, описания мате риалов и методов, изложения собственных результатов, i обсуждения, заключения и выводов.

- 5 -

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для препаративной работы использовалась надземная часть А. cruentus,заготовленная в 1989-92 гг. в совхозах Татарстана. Для аналитических исследований A. paniculatus, A. cruentus No 23, No 27, No 218, A. species К 388, A. mantegazzianus, A. cruentus (мексиканский), A. spinach получены' из ботанического сада Казанского университета, A. caudatus, A. caudatus spp. mantegazzianus, A. aureus, A. atropurpureus, A. tampala поручены из ботанического сада Уральского университета (г. Екатеринбург).

Для выделения индивидуальных соединений из амарантов использовали препаративную колоночную хроматографию на силикагеле и полиамиде и препаративную тонкослойную хроматографию (ТС.Х) на силикагеле. Для аналитических качественных и количественных исследований использовали ТСХ на пластинках "Silufol" и "Silufol UV -254" (La Chema, ЧССР) и бумажную хроматографию (ЕХ) на бумаге "FN-1" (ГДР) и "Ленинградская М" (СССР). Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) проводилась на хроматографах LP (ЧССР) и "Милихром-1" (СССР). Газожидкостную хроматографию с масс-спектрометрией (ГЖХ-МС) проводили на хроматографе с масс-спектрометром Incos 50В Finnigan-Mat (СМ). Для установления природы выделенных продуктов использовались спектроскопические методы: УФ-спектры записывались на приборах "Specord М-40" и "Specord UV-VIS" (ГДР), КК-спектры на приборе "Specord IR-75" (ГДР). Аминокислотный анализ проводили на аминокислотном анализаторе АААТ-339 (ЧССР). Определение содержания влаги, золы, органической и минеральной примеси, измельченности сырья при разработке нормативно-технической документации на траву амаранта проводили по методикам Государственной фармакопеи XI издания (ГФ XI).

Для достоверности экспериментальных данных расчеты вели по коэффициенту Стьюдента. Статистически достоверными считали различия между сравниваемыми величинами, при которых коэффициент достоверности был не более 0,05.

- 6 -

РЕЗУЛЬТАТЫ -И ОБСУЖДЕНИЕ Исследование состава лигыдов А. сгиепЪиБ. 1. Компоненты растительного воска. Для иззлечения липидов 1 кг сухих листьев А. огиегЛиэ экстрагировали гексаном в аппарате Сокслета. При концентрировании экстракта выпал осадок, который очишдли перекристаллизацией из этилацетата (т. пл. 183-1.85°С). ИК -спектроскопия полученного продукта показала, что это либо жирная кислота,либо смесь близких жлрных кислот. Кислоты метилировали диазометаном и хроматографировали в газовом хроматографе с масс-спектрометром. Аналиу масс-спектрсв, в сравнении о библиотекой данных, показал, уто это омесь смесь высшх .«ирных кислот -компонентов растительного воска (таблица 1).

Таблица 1

Состав высших жирных кислот листьев А. сгизгЛиэ в % от суммы.

Кислота Формула % от суммы

Пентакозановая С25%002 1,9

Гексакозановая

(церотиковая) С26Н52°2 42,2

Гептькозановая С2?%4°2 - 3,2

Октаковановая

(монтановая) С28%6°2 48,2

Нонакозановая

(меллисиновая) ' 1,1

Триаконтановая С30%0°2 3,4

Колоночной хроматографией гексанового экстракта на силика-геле гексаном и смесями гексана с бензолом были.выделены еже 9 продуктов - компонентов растительного воска, которые по резуль-

татам ИК-спектроскопии и ГЖХ-МС были отнесены к классам жирных спиртов (3), кетонов и альдегидов (6).

2. Каротиноиды. Колоночной хроматографией на силикагеле последовательно смесями гексака с бензолом, бензолом и хлороформом, с последующей препаративной ТСл той же гексаноьой фракции были выделены 9 соединений делтой и оранжевой окраски. По данным УФ-слектроскопии они были отнесены к каротинсидам. Каротиноидные соединения К1 ( Л «ах - 424, 452, 483 нм), К2 ( Л тах = 431, 462, 494 нм), К9 ( л пах = 424, 45?, 488 нм) по данным УФ-спектроскопии (УФ-спектры на рис.1) и хроматографическому поведению на силикагеле в сравнении с литератупными данными были идентифицированы соответственно как ^ -каротин, а -каротин и эеаксантин.

Остальные каротиноиды однозначно идентифицировать не удалось. 5. Токоферолы. Препаративной колоночной-хроматографией с 'ГСХ на силикагеле из гексаковой фракции были выделены два вещества, которые по данным МК-спектроскопии были отнесены к классу токоферолов (Т1 и Т2). По данным ГЖХ-МС в сравнении с библио-

из аз К о

350

400

450

500

550, ш

Рис. I УФ-спектры (в гексанв) вещества К1 -каротина )(1), вещества К2 ( ¿С -каротина)(2), вещества К9 (зеаксан-тина)(3).

текой данных вещество Т2 было идентифицировано как ос- токоферол.

ос -токоферол

Исследование флавоноидного состава К. сгиепЬиз. Скрининг водно-спиртовых извлечений (70 % этанол) уз травы А. сгиепЬиз позволил обнаружить на "Силуфоле" 3 вещества флавоноидной природы с КГ - 0,19; 0,26; 0,50 в системе хлороформ-метанол (8:2). Обнаружение проводилось 1% спиртовым раствором А1С1з (желто-зеленая флуоресценция в УФ-свете).

Для препаративного выделения флавоноидов экстрагировали 1 кг сухих листьев А. огиеп1из 70% этанолом при кипячении на водяной бане в течение 2 чйсоб. После отгонки спирта под вакуумом, водный остаток очищали от лигофильных примесей хлороформом и извлекали флавоноиды последовательно этилацетатом и бутанолом. Зтила-цетатиу» фракцию хрсматографировали на колонке с полка»,шдом, элюируя хлороформом и смесями хлороформа с метанолом с 1<с?раста-щей концентрацией последнего (5-20%).

Выделили Еещество флаЕоноидной природа 1 (ИГ в системе хлороформ-метанол (8:2) - 0,60)) и 2 (- 0, £6).

Для установления структуры выделенных фпавоноидов записали их УФ-спектры в метаноле, а также в присутствии ионизирующих и комплексообразующих добавок (в качестве примера УФ-спектры вещества 1 приведены на рис. 2).

Анализ УФ-епекгров вещества 1 показал, что это вещество фла-воноловой структуры (основной и дополнительный максимумы поглощения 255 и 370 нм), с гидроксилом в 7-ом положении (батохромный сдвиг с ацетатом натрия на 18-19 нм), с гидрсксилами в 3-ем и (или) 5-ом положениях и в кольце В.(батохромный сдвиг дополнительного максимума на 85 км с А1СЗз) и диоксигруппировкой в кольце В (гипсохромяый сдвиг дополнительного максимума на 27 нм в смеси с А1С1з при прибавлении НС1). По данным УФ-спектроскопин и хроматографическому поведению в различных системах в присутс-

\

и4 fr«

8

X

S

ч с

<4

cö К о

S Irl

1-1 О

250

HM

Рис.

300 350 400 450 500,

¿ УФ-спектры флавоноидного соединения I (кверце^ина). I - в СНбОН, 2 - в СНзОН + СНЛООЙа, 3 - в СНвСН + AKIs, 4 - б СНвОН + АК1я + HCl

твии достоверного образца свидетеля вещество идентифицировали как кверцетин.

ОН О

кверцетин

Хроматографическое поведение ка "Силу¿юле" вещества 2 свидетельствовало о его глнкозидной природе. Для получения цополни-тельной информации о строении агликона и сахарного остатка вещество 2 гидролиоовали 1% раствором НС1 при нагревании на кипящей водяной бане з течение 2 часов. Агликон извлекли диэти-.ловым эфиром и записали УФ-спектр в мет&чоле и в присутствии ионизирующих и комплексосбразующих добавок. Анализ УФ-спектра и хроматография в различных системах в присутствии достоверного образца свидетеля позволили идентифицировать агталон как кемпфе-рол. В маточном растворе посае нейтрализации методами ЕХ в системе пиридин- н-бутанол-вода (4:3:3) к ТСХ на сшшкагеле, импгег-нировачном 0,1н., НзВОз в системах ацетон-уксусная кислота-метанол (6:2:2) и метанол-уксусная кислота-бензол (6:2:2) была обнаружена галактоза. Флавоноидное вещество 2 идентифицировали как кемпферол-З-халактозид или трифолин.

сн о

трифолин

Флавоноидное вещество 3 было выкристаллизовано иэ бутаноль-ного раствора при стоянии в виде желтых кристаллов (т. пл. 185-187°С). Для установления природы вещества был записан УФ-спектр в метаноле и з присутствии ионизирующих и комплексообрааующих цобаЕок и его агликона после гидролиза 11 НС1 в течение 2 часов [три нагревании на кипящей водяной бане.

Анализ УФ-спектра агликона показал, что это кверцетин, а в гидролизате методами БХ и ТСХ были обнаружены глюкоза и рамноза.

Флавсноидное вещество 3 идентифицировали как кверце-тин-З-глюкорамяозид или рутин.

Содержание рутина в растениях p. Arnaranthus. Для количественной оценки содержания флавоноидов в амаранте и прежде всего рутина - ценного лекарственного препарата с Р-витаминной активностью, был разработан экспрессный метод его количественного определения с использованием обращеннс-фаэного варианта ВЗЖХ В процессе разработки метода были решены вопросы выбора степени ивыельченнссти сырья, экстрагента, режима экстракции и условий хроматог-рафического разделения.

Ло методике сырье трижды экстрагируют 70% этанолом на ¡сипящей водяной бане с обратным холодильником и 5 мкл полученного извлечения хроматографируют на хроматографе "Милихром" е следующих условиях: колонка с сепароном C^g (1 мм х Ь см), элюирование

смесью воды-ацетонитрила-уксусной кислоты (82:18:1), расход элх> ента 0,5 мл/мчн, УФ-детектирование при 365 нм.

В качестве стандартного раствора используют 0,01% раствор рутина (Государственный стандартный образец) в метаноле , который хроматографируют в тех же условиях: Расчет количественного содержания рутина в сырье производят методом абсолютной калибровки.

Относительная ошибка определения £ = + 3,54, при Р= 0,9-5 (Лакин, 1990).

Типичная ВЭЖХ-хроматограмма разделения флавоноидов амаранта приведена на рис. 3.

ОН

се о

рутин

I

0 5 10 15 20 мин

Рис. 3 Разделение флавоноидов А. cruentus методом ВЭЖХ.

1 - рутин, 2 - трифолин, 3 - кверцетин.

Разработанный метод количественного определения рутина позволил определить его содерлание в различных видах и разновидностях растений р. Amaranthus, а татке отследить динамику накопления рутина по фазам развития растений. Полученные результаты суммированы в таблице 2.

Таблица 2

Содержание рутина в % от массы сухого сырья в листьях растений рода АтагапИчиз Ь.

Фаза развития

Вид Вегетация Бутонизация Цветение Плодоношение

1991 г. • A. paniculatus 1,07 A. cruentus N 27 0,20 A. cruentus N 218 0,72

A. cruentus N. ¡¿3 0,09

A. cruent.us( мексиканский) 0,98 A., mantegazzianus 0,30 A. species

К 358 0,63

A. spinach 0,08

A. paniculatus (г. Чимкент) A. gangeticus

199П г. A. aureus (26786)* A. aureus (26495)* A. caudatus (25501)* A. caudatus (25896)* A. atrcpurpu-reus (25685)* A. caudatus spp. mantegazzianus (23971)* A. tampala (25826)*

1,16 0,62

1,04

0.12

1,33

0,53

0,86 0,10

0,51

2,15 1,42

2.39

0,76

1,37

1,12

1,20 0,16

0,88

0,25 0,30 0,10 0,09

0,37

0,13 0,25

не обнаружен 0,004

не обнаружен

0,48

0,005

0,05 0,75

Примечание: 1. Образцы 1992 г. после установления динамики

накопления рутина по фазам развития отбирались только в фазе цветения. 2. * - нумэрация Ботанического сада Уральского университета (г. Екатеринбург).

Полученные результаты свидетельствуют о том, чю накопление рутина возрастает от фазы вегетации к бутонизации и достигает максимума в фазу цветения и резко падает б' фазу плодоношения.

Распределение рутина по органам растения исследовалось на примере А. сгиепЬ^э (таблиц?. 3). В растении рутин локализуется в листьях и соцветиях.

Таблица 3

Содержание рутина з различных органах А. сгиегЛиэ в фазе цветрния в % от веса сухого сырья.

лист соцветие стебель трава

1,7 * 1,9 0,2 1,2

Выявлены виды перспективные для возможного промышленного получения рутина, а также для селекционной работы по выведению сортов с повышенным содержанием рутина - A. cruentus 2x3 и А. pañiculatus.

Разработка способа получения рутина из травы амаранта. Основным источником голучеш:л рутина являются бутоны софсры японской, из которых его получают экстракцией горячей водой с последующие осаждением я очисткой. Это сырье поступает по импорту и потребность в рутине в России из-за нехватки сырья удовлетворяется на 1СХ. Учитывая высокую урожайность надземной массы ама-занта и относительно высокое содержание в ней рутина (1-2%). мы чровели исследования по разработке способа получения рутина из ?paFbi амаранта, с целью использования ее в качестве нового оте-jecTBeHHoro источника этого препарата.

Были апробированы. 2 принципиально различных способа:

1. Способ, при котором из сырья удаляются ыешаюшие примеси ' юследовательной обработкой органическими растворителями с воз-

растакяцей полярностью, затем искомые вещества экстрагируются подходящим растворителем с последующей очисткой и осаждением.

В рамках такого подхода траву амаранта экстрагировали в аппарате Сокслета гексаном, хлороформом, этилацетатом и затем извлекали рутин метанолом. Для выделения рутина из мотанольного раствора вновь требовалась очистка органическими растворителями. В целом такой подход оказался длительным, многостадийные и малоэффективным.

2. Способ, при котором производится суммарная экстракция полярным органическим растворителем с последующей очисткой экстракта.

В рамках второго способа исследованы 2 подхода.

а) Первичная экстракция водно-спиртовыми смесями (70 % метанол и этанол). Траву амаранта экстрагировали при нагревании 70% спиртом. Спирт отгоняли до водного остатка, который очищали от примесей последовательно хлороформом и этилацетатом и извлекали рутин смесями этилацетата с низшими спиртами, кз которых при стоянии открксталлизоЕывали рутин. Выход рутина роставил 60701 от теоретического. Принципиальная схема выделения рутина этим способом показана схемой на рис. 4.

б) Первичная экстракция водой была апробирована р целях удешевления производства и исключения из технологической схемъ спирта (метанола, этанола).

При водной экстракции полноты извлечения рутина из сырья удавалось достичь лишь при многократной смене растворителя чистыми порциями в процессе экстракции. Далее использовалась та ш схема очистки, что и в случае а). Выход рутина £0-40%. от теоретического.

На основе способа с водно-спиртовой экстракцией был разработан модифицированный способ получения рутина и подана заявка на патент (приоритет от 28. 07. 92).

Разработка проекта нормативно-технической документации (НГД) на лекарственное сырье - траву амаранта. При разработке лабораторного регламента на производство рутина из предлагаемого нового растительного сырья - травы амаранта, встала необходимость НТД на новое лекарственное сырье.

Нами был разработан проект технических условий (ТУ) на тра-

Рис. 4

Способ выделения рутина из травы амаранта методом водно-спиртовой экстракции.

¡Трава амаранта, с содержанием рутина

с

¡Водный остаток с содержанием рутина 1%

¡Водный остаток с содержанием рутина 1%;

¡Водный остаток с содержанием рутина 0,9%[

70% метанол, этанол

эфир, хлороформ

•Ыалополярные примеси !- хлорофилл и др.

эгилацетат

■Кзерцетин, трифолин,! ¡частично рутин и ¡среднеполярные прим.!

зтилацетат + метанол (этанол, изопропанол)

Рутин

Кристаллизация из воды

Г

ву змаранга, согласно требованиям ОСТ 42-1-71 "Порядок разработки, согласования и утверждения НТД на лекарственные средства и лекарственное сырье" и ГФ XI.

В качестве лекарственного сырья предложена трава 2-х видов амаранта - А. сгиеп1из и А рап1си1аЬиз, гаготовленьая механизированным способом в фазу цветения.

Раздел ТУ "Внешние признаки" разработан для двух ви^ов сырья - цельного и измельченного.

Для микроскопической диагностики сырья наш выделены детали анатомического строения листа, позволяющие надежно идентифицировать сырье в измельченном виде - аномоцитнь'й тип расположения околоустьичяых клеток, многоклеточные головчатые волоски по жилкам, в мезофилле листа многочисленные крупные друзы оксадата кальция и клетки с кристаллическим песком оксалата кальция вдоль жилок, образующие цепочки.

Разработаны числовые показатели, регламе.чтирущие качество сырья:, содержание рубина, влоги, зспы общей, органической и минеральной примеси, содержание листьев в сырье; для измельченного сырья показатели, регламентирующие нужную степень измельченности.

Количественное определение рутина в траве амаранта согласно проекту ТУ мсжетпроизводиться 2 способами: 1. методом ВЭЖХ и 2. методом хрсматоспектрофото^етрии на основе ТСХ Второй метод был разработан нами и включен в проект КТД ввлду отсутствия оборудования для ВЭЖХ в больЕинстае заводских лабораторий.

Метод хроматоспектрофотометрии позволяет проводить определение рутина в траве амаранта на отечественных спектрофотометрах с использованием готовых пластинок для ТСХ. Относительная ошибка метода £ = ± 6,7% при Р=0,95.

Исследование состава свободных аминокислот А сгиег^иБ. I работе изучен состав свободных аминокислот листьев А. crue.nt.us, которому другие авторы, изучавшие химический состав амаранта, уделяют значительно меньшее внимание, чем ^инокислотному составу белков амаранта. Результаты определений' суммированы в таблице 4.

Обращает на себя внимание тот факт,что среди свободных ами нокислот А. сгиепЬи? доминируют 2 аминокислоты фенольной природь фенилалапин и тирозин, в сумме составляющие около 501 всех сво-

бодньх аминокислот.

Таблица 4

Содержание свободных аминокислот в листе А. огиэп1и5.

<л

Аминокислота Содержание свободных аминокислот в %

от массы сухих от суммы амино-

листьев кислот

1. Аспарагинозая к-та 0,055 4,9

2. Треонин 0,04 3,^

3. Серии 0,09 8, Л

4. Глутаминовая к-та 0,10 8,8

с: и. Пролин 0,056 <,9

6. Глицин 0,02 1,?

?. Алании 0,09 8,2

8. Валин 0,07 6,3

9. Изо-.лейцин . 0,03 2,5

10. Лейцин 0,04 3,7

11. Тирозин 0,36 31,5

12. Фгнилчланин 0,17 15,2

13. Лизин 0,006 0,4

ВЫВОДЫ:

Впервые проведено систематическое изучение биологически ак-'ивных соединений растений Атаг&пЬЬиз Ь. в результате которого:

1. Из травы А. сгиепЬиэ выделено 15 компонентов растительно-о воска, 6 из которых идентифицировано; 9 кэротиноидов, 3 из .оторых идентифицировано (^-каротин, ¿г-каротин, зеаксантин); 2 окоферола, один из которых идентифицирован («¿-токоферол).

2. Из травы А. сгиеп1из выделены и идентифицированы 3 фла-оноида - кверцетин, трифолин, рутин.

3. Растения рода амарант предложены в качестве нового ле-арственного сырья для промышленного производства рутина.

4. Разработан экспрессный метод количественного определения утина в траве амаранта и установлено, что рутин в амаранте ло-злизуется в листьях и соцветиях, максимально накапливаясь в фа-

зу цветения. Обследовано 15 видов и разновидностей растений рода амарант и установлено, что наиболее богаты рутином из обследованных видов A. cruentus No 218 и A. paniculatus (более 2Z).

5. Разработан экстрактивный способ получения рутина из травы амаранта (патентный приоритет от 28. 07. 92).

6. В рамках создания лабораторного регламента получения рутина из травы амаранта разработан проект НТД на новый вид лекарственного сырья.

7. Проведено определение состава свободных аминокислот листьев А. cruentus и установлено преобладание ароматических аминокислот тирозина и фенилаланина (около 50% от суммы аминокислот) .

1. Гарусов А. В. , Хазиев P. 11L , Офицеров Е. Е Анализ флавоно-идных соединений амаранта багряного методом ВЭ5КХ. // Конференция молодых ученых и специалистов Казанского медицинского института "Молодые ученые -отечественному здравоохранению". Тезисы докладов. Казань, 1991, с. 82.

2. Хазиев P. Ill , Гарусов А. В. Изучение флавоноидного состава амаранта багряного. Там же, .с. 95-96.

3. Хазиев P. UL , Гарусов А. В. , Офицеров Е. Н. Содержание рутина в Amaranthus cruentus L. , выращиваемом ь Татарстане. // Растительные ресурсы. 1992, вып. 2, с. 63-66.

4. Коновалов А. И. , Офицеров Е. П. , Карасевй А. Н. , Хазиев Р. Е Получение низкомолекулярных физиологически активных веществ из амаранта. // Материалы Всесоюзной конференции "Амарант: агроэкология, переработка,_ использование", 4-5 февраля 1992. Казань. Е печати.

5. Хазиев P. III , Калашников С. К , Офицеров Е. Н. , Караоева А. Е , Барсуков IL Г. , Коновалов А. И. Содерпние рутина в растениях p. Amarantus. // 3 -я Межрегиональная научно-практическая конференция "Амарант - проблемы возделыьания и использования". Екатеринбург, 24-29 августа 199?. Тезисы докладов. В печати.

6. Хазиев P. Ill , Офицеров Е. Н. , Караоева А. Н. , Коновалов А. И. Флавоноидный состав Amaranthus cruentus. Там же.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЯ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИЙ