Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологические свойства простейших Blastocystis hominis и их влияние на микроэкологию кишечника

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Квасова, Наталья Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Патологии, вызываемые бластоцистами.

1.2. Экология бластоцистоза.

1.3. Морфофункциональная организация бластоцист.

1.4. Нормальный микробиоценоз кишечника и его нарушения

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований.

ГЛАВА 3. Клиническая характеристика обследованных больных.

3.1. Выделение клинических изолятов простейших B.hominis.

3.2. Характеристика кишечного микробиоценоза здоровых людей.

3.3. Микроэкологическая характеристика кишечного биоценоза людей при бластоцистозе.

3.4. Характеристика кишечного микробиоценоза людей, ин-вазированных бластоцистами.

3.5. Пространственная структура и иерархия экологических групп в кишечном микробиоценозе здоровых людей и инвазированных бластоцистами.

ГЛАВА 4. Биологические свойства простейших B.hominis.

4.1. Морфологическая организация бластоцист.

4.2. Культуральные свойства простейших B.hominis.

4.3. Патогенность клинических изолятов бластоцист.

4.4. Энтеротоксическая активность простейших B.hominis.

ГЛАВА 5. Экспериментальная модель бластоцистоза.

5.1. Воспроизведение кишечного бластоцистоза.

5.2. Изменение микрофлоры кишечника при экспериментальном бластоцистозе.

5.3. Количество лейкоцитов в периферической крови у экспериментальных животных.

5.4. Морфологические изменения толстой кишки опытных животных при экспериментальном бластоцистозе.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биологические свойства простейших Blastocystis hominis и их влияние на микроэкологию кишечника"

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. В настоящее время широкое распространение получила «новая» протозойная инфекция - бластоцистоз, обусловленная паразитированием преимущественно в толстой кишке простейших Blastocystis hominis (F.F.Reinthaler et al, 1988; C.H.Ziert et al., 1988; H. А. Чайка, 1992).

Исследованиями C.H.Zierdt et al. (1967, 1978, 1988, 1991) была впервые установлена протозойная природа B.hominis, определена их таксономия, получены указания на возможную этиологическую роль этих микроорганизмов в возникновении оппортунистической инфекции - бластоци-стоза у лиц с иммунной недостаточностью, названное болезнью Зиердта-Гаравелли (Н.А.Чайка, 1992).

В России протозойная природа бластоцист была подтверждена Л.М.Беловой (1992) и Т.В.Сахаровой (1999). Однако, эти исследования проводились авторами на основании обследований различных видов диких и домашних животных. В отечественной литературе имеются лишь единичные работы, посвященные изучению распространения бластоцист у людей (Н.П.Торопова, Н.А.Сафронова с соавт., 1998).

До недавнего времени B.hominis не рассматривались как этиологический фактор патологических состояний человека. Более того, некоторые исследователи вообще сомневались в патогенных потенциях B.hominis и считали бластоцитоз не заболеванием, а безвредным транзиторным носи-тельством непатогенных микроорганизмов (A.M.Johnson et al., 1989; C.H.Zierdt., 1991). Заболевания, вызванные B.hominis, обычно рассматривали как экзотические протозойные инфекции, связанные с путешествиями в тропические и субтропические страны (E.K.Markell, M.P.Udkow,1986; Н.А. Чайка, 1992; P.Lendry et al., 1997).

В то же время, и в странах с умеренным климатом поражения кишечника, обусловленные B.hominis, вовсе не так уж редки, как об этом думали совсем недавно. В настоящее время эти паразиты обнаружены не только в Африке и Азии, но и в Европе, Северной и Южной Америке, Австралии, то есть расселение В. hominis можно считать всесветным (R.Mercado et al., 1991; I.Kobayashi et al., 1995). В последние годы накопилось достаточное количество эпидемиологических и клинических материалов, а также лабораторных данных, подтверждающих как потенциальную, так и реальную этиологическую роль B.hominis в патологии человека, развивающейся на фоне снижения резистентности макроорганизма. Основными клиническими проявлениями бластоцистоза являются диарея и абдоминальные боли. Заболевание развивается по типу энтерита, энтероколита или колита (P.L.Garavelli et al., 1991; O.Cirioni et al., 1999).

Многочисленные сообщения убедительно свидетельствуют об этиологическом и патогенетическом значении бластоцист в развитии диарейно-го синдрома. Так, например, проведенное в 1986 году в Югославии целенаправленное паразитологическое исследование подтвердило высокую частоту обнаружения бластоцист при хронических заболеваниях, когда диарей-ный синдром имел рецидивирующее течение и продолжался не менее одного месяца (J.Logar et al., 1994; C.Camli et al., 1999).

Особенно актуальной проблема бластоцистоза становится в связи с резким увеличением числа ВИЧ-инфицированных и больных СПИДом, так как у иммунокомпрометированных людей B.hominis легко вызывают хронические поражения пищеварительной системы (J.M.Llibre et al., 1989; O.Brandonisio et al., 1999; K.N.Prasad et al., 2000).

Естественным резервуаром бластоцист являются, вероятно, животные, так как нередко обнаруживаются у птиц и млекопитающих, особенно у человекообразных обезьян (M.Soledad Gomez, et al., 1996; A.Duda et al., 1998), они же часто являются источником заражения человека.

Способность реализовывать патогенность B.hominis убедительно доказана при интрацекальном введении паразитов экспериментальным животным, а также в опытах на безмикробных морских свинках (B.P.Philips, C.H.Zierdt, 1976; E.Markell et al., 1986). У всех животных развивалась не только колонизация, но и инвазия кишечника бластоцистами, сопровождающиеся диареей.

В настоящее время накоплен большой фактический материал о роли микрофлоры в жизнедеятельности человека (О.В.Чахава с соавт., 1982; В.Ф.Коляденко с соавт., 1988; С.И.Сытник, 1992). Известно, что наружные покровы и слизистые оболочки организма с первых мгновений жизни обсеменяются микроорганизмами, численность и разнообразие которых определяется множеством факторов внутренней среды организма и внешнего окружения. Несмотря на это, существуют индивидуальная и анатомическая специфичность состава микроорганизмов, населяющих конкретный биотоп. Она является залогом динамической стабильности микрофлоры и способствует поддержанию надлежащего уровня барьерных функций кожи и слизистых оболочек (В.С.Крамарь, 1966, 1971; И.М.Миронов с соавт., 1986; Г.И.Гончарова с соавт., 1987; И.А.Бочков с соавт., 1991).

Современные представления о микрофлоре как о совокупности микробиоценозов (С.И.Сытник, 1991) требуют поиска биоценотических подходов к ее оценке. Несмотря на образование новой науки микроэкологии, рассматривающей надорганические уровни организации бактерий, реализация ее принципов характеристики микробных экосистем кишечника ограничивается популяционным уровнем и редко затрагивает изучение микробных сообществ и биоценозов. К тому же имеющиеся сообщения не затрагивают влияния простейших на микроэкологию кишечника.

Анализ литературы, посвященной B.hominis и вызываемым ими заболеваниям, свидетельствует о превалировании работ, носящих эпидемиологический характер. До настоящего времени остаются не изученными многие биологические свойства бластоцист, том числе, определяющие их патогенно сть, а также их действие на микробиоценоз кишечника. Само заболевание до сих пор остается известным лишь узкому кругу специалистов.

Вышеизложенное свидетельствует о необходимости дальнейшего изучения биологических свойств B.hominis, а также механизмах их воздействия на макроорганизм.

ЦЕЛЬ: Определение биологических свойств простейших Blastocystis hominis и их влияния на микроэкологию кишечника.

ЗАДАЧИ:

1. Выявить частоту встречаемости B.hominis в кишечнике больных и практически здоровых людей;

2. Изучить структурные особенности морфологических форм бластоцист и их соотношение в исследуемом материале;

3. Исследовать выраженность патогенных свойств клинических изо-лятов B.hominis;

4. Выявить наличие энтеротоксической активности бластоцист;

5. Дать экологическую оценку микрофлоры кишечника в норме и при патологии пищеварительного тракта.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ:

Впервые показана высокая степень инвазивности простейшими В. hominis больных с патологией органов пищеварения.

Определена степень патогенности клинических изолятов B.hominis, выраженность которой коррелировала с тяжестью вызываемого ими кишечного бластоцистоза.

Выявлено наличие у патогенных бластоцист энтеротоксической активности, подтвержденной:

- дилатацией изолированных сегментов тонкой кишки кроликов;

- наличием в них экссудата, нередко с примесью слизи и крови;

- патоморфологическими изменениями стенок зараженных сегментов.

Установлено, что вакуолярные формы бластоцист вызывают экспериментальный кишечный бластоцистоз, сопровождающийся:

- развитием внешних признаков инфекционного процесса;

- увеличением количества лейкоцитов в периферической крови;

- дисбиотическими изменениями микрофлоры толстой кишки;

- патоморфологическими изменениями толстой кишки.

Дана сравнительная характеристика экологической оценки микробиоценоза кишечника в норме и при инвазии бластоцистами, свидетельствующая об их участии в нарушении биоценотических связей.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ:

Высокая выявляемость B.hominis при таких заболеваниях, как язвенная болезнь, хронический гастрит и хронический гепатит (В, С) позволяет рассматривать бластоцисты как этиопатогенетический ко-фактор развития данных патологий, что предполагает возможную эффективность применения антипротозойных препаратов в их лечении.

Высокая выявляемость бластоцист при заболеваниях пищеварительного тракта диктует необходимость широкого внедрения в практику лабораторий практического здравоохранения исследований по выделению и идентификации данных простейших.

Различная степень выраженности патогенных свойств клинических изолятов B.hominis свидетельствует о неоднозначности их участия в развитии патологического процесса, что следует учитывать при диагностических исследованиях.

Результаты исследований позволяют совершенствовать процесс преподавания по курсу биологии, медицинской микробиологии и смежных дисциплин.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Простейшими Blastocystis hominis инфицировано 68,75% обследованных с хроническими заболеваниями органов пищеварения. Существенных различий в инфицированности между мужчинами и женщинами, а также взрослыми и детьми не обнаружено.

2. В клиническом материале и в культуре выявлены вакуолярные, реже гранулярные формы, амебоидные клетки обнаружены только в культуре.

3. Клинические изоляты B.hominis имели патогенные свойства различной степени выраженности, что свидетельствует об их неодинаковой этиологической значимости в развитии патологического процесса.

4. Blastocystis hominis обладают энтеротоксической активностью, что, по-видимому, является чрезвычайно важным фактором в развитии кишечного бластоцистоза.

5. Инвазия кишечника бластоцистами сопровождается глубокими изменениями микробиоценоза данного биотопа, что выражается увеличением частоты встречаемости транзиторной микрофлоры на фоне снижения доминирования и флористической значимости основных симбионтов.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы работы были доложены на Российской научно-практической конференции «Актуальные вопросы педиатрии и детской хирургии» (Ульяновск, 2000), Международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам (Москва, 2000), Научно-практической конференции "Новые технологии в медицине" (Ульяновск, 2000), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы мониторинга экосистем антропогенно - нарушенных территорий» (Ульяновск, 2000), Второй российской научно-практической конференции «Актуальные проблемы экологии, экспериментальной и клинической медицины» (Орел, 2001), XXXVI научно - практической конференции, посвященной 200-летию Ульяновской ОКБ №1 (Ульяновск, 2001), Заседании областного отделения всероссийского общества эпидемиологов и микробиологов, Ульяновск, 2002.

ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ.

ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация изложена на 147 страницах. Состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения, выводов и списка литературы. Библиография содержит 181 источник, из них 50 отечественных и 131 иностранных. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 21 рисунком.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Квасова, Наталья Анатольевна

ВЫВОДЫ:

1. У больных с патологиями пищеварительного тракта бластоцисты были выявлены в 68,75% наблюдений, тогда как у практически здоровых этот показатель составлял 5%.

2. В клиническом материале выявлено наличие двух форм бластоцист: вакуолярной и гранулярной. Вакуолярные формы преобладали и в исследуемом материале (84,5%) и в культурах (70,9%). Гранулярные формы обнаруживались чаще в культурах (22,7%), чем в фекалиях (15,4%). Амебоидные формы были выявлены только в культуре (6,3%).

3. Степень проявления патогенности клинических изолятов значительно варьировала, что необходимо учитывать при определении этиологической значимости бластоцист.

4. Опытами на изолированных сегментах тонкой кишки кроликов выявлено наличие энтеротоксической активности бластоцист выражающейся в дилатации, изменении архитектоники стенки зараженных сегментов, а также накоплении в них экссудата, нередко с примесями слизи и крови.

5. Инвазия кишечника простейшими B.hominis приводит к изменению микробиоценоза данного биотопа. Это проявляется снижением доминирования и флористической значимости основных симбионтов, а также увеличении частоты встречаемости транзиторной микрофлоры, что сопровождается структурной перестройкой ценотипа, сменой абсолютных доминант и появлением условно-патогенных микроорганизмов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Квасова, Наталья Анатольевна, Ульяновск

1. Барановский А.Ю., Кондрашина Э.А. Дисбактериоз и дисбиоз кишечника. Санкт-Петербург, «Питер», 2000.- 209 с.

2. Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. М., 1982. - 46 с.

3. Белова JI.M. Мировая фауна и морфофункциональная организация бластоцист. // Труды ЗИН РАН.- 1992.- Т.224.- 53 с.

4. Бондаренко В.М., Учайкин В.Ф., Мурашева А.О. и др. Дисбактериоз. -М.: 1994.-22 с.

5. Бондаренко В.М., Учайкин В.Ф., Мурашева А.О., Абрамов Н.А. Дисбиоз. -М.: 1995. 20 с.

6. Бочков И.А., Овчарова Н.М. Бактериальная колонизация и сукцессия у новорожденных детей в аспекте проблемы госпитальных инфекций // Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1991. -№10.-С. 19-22.

7. Брилис В.И. Адгезивные свойства лактобацилл: Автореф. Дис. . канд. Мед. Наук. Тарту, 1983. - 21 с.

8. Ван-дер-Ваай Д. Пищеварительный тракт как главный эндогенный источник бактериальных и грибковых инфекций. Важность поддержания колонизационной резистентности // Антибиотики и химиотерапия. 1992. - Т. 37, №6. - С. 36-41.

9. Воробьев А.А., Несвижский Ю.В., Буданова Е.В., Иноземцева JI.O. Популяционно-генетические аспекты микробиологического фенотипа кишечника здорового человека//ЖМЭИ.-1995.-№4.-С.30-35.

10. Воробьев А.А., Пак С Г., Савицкая К.И. и др. Дисбактериозы у детей: Учебное пособие для врачей и студентов. М., 1998.- 64 с.

11. Генис Д.Е. Медицинская паразитология. М.: Медицина, 1979. - 344с.

12. Гончарова Г.И., Соколова К.Я., Смолянская А.З. др. Микроэкология кишечника в норме и при патологии // Колонизационная резистентность и химиотерапевтические антибактериальные препараты. М., 1988.-Ч. I.-C. 12-13.

13. Горская Е.М., Лизько Н.Н., Ленцнер А.А. и др. Биологическая характеристика штаммов лактобацилл, перспективных в качестве эубиоти-ков // Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1992. -№3. - С. 17-20.

14. Григорьев П.Я., Яковенко Э.П. Нарушение нормального состава кишечной микрофлоры, клиническое значение и вопросы терапии.-Москва, 2000. 16 с.

15. Дажо Р. Основы экологии: Пер. с фр. М., 1975. - 412 с.

16. Дельфин М, Санхурхо Э. и др. Cryptosporidium sp. у детей, больных диареей, на Кубе. // Медицинская паразитология. 1989. - № 4. - С. 3639.

17. Дерновская Л.В. Стафилококковая флора человека: Автореф. Дис. . канд. Мед. Наук. Л., 1978. - 16 с.

18. Домбровский A.M. Изучение бактериальных ассоциаций как экологическое исследование // Колонизационная резистентность и химиотерапевтические антибактериальные препараты. М., 1988. 4.1. - С. 99100.

19. Крамарь B.C., Крамарь. Л.В., Чижикова Т.С. и др. Колонизационная резистентность пищеварительного тракта. Волгоград, 1992. - 18 с.

20. Крамарь B.C., Перов Ю.А., Крамарь О.Г. и др. Дисбактериоз. Причины возникновения. Лечение и профилактика. Ростов-на-Дону, 1988. -25 с.

21. Краткий определитель бактерий Берги: Пер. с англ. / Под ред. Дж.Хоулта. М.: Мир, 1980. - 495 с.

22. Красноголовец В.Н. Дибактериоз кишечника. Москва, 1989. - 208 с.

23. Куваева И.Б. Обмен веществ организма и кишечная микрофлора.-М.: Медицина, 1986.- 248 с.

24. Куваева И.Б. Ладодо К.С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей -М., «Медицина»,-1991.

25. Ленцнер А.А. Микроэкология и некоторые актуальные направления исследований, диктуемые запросами практического здравоохранения // Колонизационная резистентность и химиотерапевтические антибактериальные препараты. -М., 1977. -Ч. I. С. 14-15.

26. Ленцнер А.А., Ленцнер Х.П. Микроэкология человека и проблема внутрибольничных инфекций // Актуальные проблемы нозокомиаль-ных инфекций и лекарственная устойчивость микроорганизмов: Тез. Докл. Всесоюз. Конф. Минск, 1986. - С. 147-148.

27. Ленцнер А.А., Ленцнер Х.П., Микельсаар М.Э. и др. Лактофлора и колонизационная резистентность // Антибиотики и мед. Биотехнология. 1987. - Т. 32, №3. - С. 173-179.

28. Микельсаар М.Э., Тюри Э.И., Ленцнер А.А. К вопросу о формировании резидентной микрофлоры // Успехи мед. Науки: Тез. докл. Тарту, 1986.-С. 54-55.

29. Наткевичайте-Иванаускене М.П. Количественные соотношения встречаемости и константности групп видов в растительных сообществах // Науч. докл. высш. шк. биол. науки. 1985. - №8. - С. 63-68.

30. Одум Ю. Основы экологии. М.: Мир, 1975. - 740 с.

31. Одум Ю. Экология. -М.: Мир, 1986. Т. 2. - 376 с.

32. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека -М.: Медгиз, 1962.

33. Пинегин Б.В., Мальцев В.Н., Коршунов В.М. Дисбиозы кишечника. -М., 1984.

34. Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология.-Москва,1999.-1184 с.

35. Сахарова Т.В., Гордеева Л.М., Сергиев В.П. Изучение морфологии бластоцист низших обезьян с помощью световой микроскопии // Медицинская паразитология.-1997.-№ 2.-С.24-27.

36. Сытник С.И. Подавление адгезивных свойств мукозной микрофлоры при язвенной болезни // Антибиотики. 1984. Т. 29, №2. - С. 127-129.

37. Сытник С.И Стафилококки в кожном микробиценозе молочных желез здоровых женщин // Журн. микробиолгии. 1986. - №8. - С. 28-32.

38. Сытник С.И Популяционные характеристики и биологические свойства микрококков, населяющих кожу молочных желез // Журн. микробиологии. 1988. - №6. - С. 16-20.

39. Трапезов Е.В., Урдабаев Ж.К., Бондаренко В.М., Родионов А.В. и др. Формирование микробиоценоза кишечника у новорожденных в норме и при антибиотикотерапии // Журн. микробиологии. 1990. - №10. -С. 48-53.

40. Чахава О.В. Гнотобиология о микрофлоре организма хозяина и антибиотикотерапии // Антибиотики и мед. биотехнология. 1987. - Т. 32, №3. - С. 170-173.

41. Чахава О.В., Горская Е.М., Рубак С.З. Микробиологические и иммунологические основы гнотобиологии. М., 1982. 160 с.

42. Чайка Н.А. Бластоцитоз и СПИД //Медицинская паразитология.-1992.-№ 4.-С.48-51.

43. Уиттекер Р. Сообщества и экосистемы: Пер. с англ. М., 1980. - 217 с.

44. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора человека и некоторые вопросы микроэкологической токсикологии // Антибиотики и мед. биотехнология. 1987. - Т. 32, №3. - С. 164-167.

45. Шендеров Б.А. Биологические свойства и антибиотикочувствитель-ность не ферментирующих грамотрицательных бактерий: Обзор // Антибиотики и мед. биотехнология. 1988. - Т. 33, №2. - С. 141-147.

46. Шендеров Б.А. Некоторые первоочередные задачи отечественной микроэкологиибзор // Колонизационная резистентность и химиотера-певтические антибактериальные препараты. М.: 1988. -Ч. I. С. - 7-9.

47. Шендеров Б.А., Глухова Е.В., Вядро М.М. Микробная экология лабораторных животных как модель при оценке иммуномодулирующих и антимиробных агентов // Антибиотики и мед. биотехнология. 1992. -Т. 37, №8.-С. 39-43.

48. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здороья человека // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол. и колопрок-тол.- 1998,- Т.7.- №1,- С.61-65.

49. Albrecht Н., Stellbrink H.J., Koperski К. et al. Blastocystis hominis in human immunodeficiency virus-relatrd diarrhea // Scand. J. Gastroenterol.-1995. V.30. - №9. - P. 909-914.

50. Amin A.M. B.hominis among apparently healthy food handlers in Jeddan // J.Egypt.Soc.Parasitol.- 1997. V.27.-P. 817-823.

51. Albrecht H., Stellbink H.J., Koperski K., Greten H. B. hominis in human immunodeficiency virus related diarrhea // Scand.J.Gastroenterol.- 1995.-V.30. - №9. - P. 909-914.

52. Amenta M., Colomba C., et al. Intestinal protozoa in HIV-infected patients: effect of rifaximin in C.parvum and B.hominis. // J Chemother.- 1999. -V.ll. -P.391-395.

53. Bohm-Gloning В., Knobloch J., Walderich B. Five protozoa of B. hominis from symptomatic and asymptomatic patients revealed by restriction site analysis of PCR -amplified // Trop.Med. Int. Health.-1997,- V.2. №8. - P. 771-778.

54. Boreham P.F., Dunn L.A., Upcrofit S.A. Protein and DNA evidence for twodemes of B. hominis from humans // Int. J. Parasitol.-1992.-V.22.-№l.-P.49-53.

55. Boreham P., Stenzel D. Blastocystis in human and animals: morphology, biology and epizootiology // Adv. Parasitol.-1993.-V.32.-P.l-70.

56. Brites C., Barberino M.G., Bastos M.A. et al. // Blastocystis hominis as apotential cause of diarrhea in AIDS patients // Braz. J. Infect. Dis.-1997.-V.l.-№2.-P.91-94.

57. Brumpt E. B.hominis, sp. et. formes voisines // Bull. soc. Pathol. Exot.1912.-V.5.-P.725-730.

58. Camli C., Blum J. Hymenolepis nana. 45-year-old refugee from the Kosovoregion with epigastric pain and detection of Hymenolepis nana and Blastocystis hominis in the stool//J. STD AIDS.-1999.-V.10.-P.780-784.

59. Carbajal S.A., del-Castillo L., Lanusa M.D., Villar J., Borras R. Karyotypicdiversity among B.hominis isolates //Int. J. Parasitol.-1997.-V.27.-№8.-P.941-945.

60. Carbajal J.A., Villar J., Lanuza M. D.Significacion clinica de la infeccionpor B.hominis: estudio epidemio epidemiologico // Med.Clin.Barc.-1997.-V.108.-P.608-612.

61. Cassidy M., Stenzel D., Boreham P. Electron microspory of surface structures of Bl. sp. from different hosts // Parasitology.-1994.-V.80.-P.505-511.

62. Cegielski J.P., Msengi A.E., Dukes C.S. et al. Intestinal parasites and HIVinfection in Tanzanian children with chronic // AIDS.-1993.-V.7.-№2.-P.213-221.

63. Church D.L., Sutherland L.R., Gill M.J. et al. Absence of an association between enteric parasites in the manifestations and pathogenesis of HIV enteropathy in gay man // Scand. J. Infect. Dis.-1992.-V.24.-№5.-P.567-575.

64. Cimerman S., Cimerman В., Lewi D.S. Prevalence of intestinal parasitic infections in patients with acquired immunodeficiency syndrome in Brazil // Int. J. Infect. Dis.-1999.-V.3.-№4.-P.203-206.

65. Cirioni O., Giacometti A., et al. Prevalence and clinical revalence of Blastocysts hominis in diverse patient cohorts // Eur J Epidemiol. 1999. - V.15. -P.389-393.

66. Clark C.G. Extensive genetic diversity in B. hominis // Mol. Biochem.

67. Parasitol.-1997.-V.87.-№l.-P.79-83.

68. Cotte L., Rabodonirina M., Piens M.A. et al. Prevalence of intestinal protozoans in Freeh patients infected with HIV // J. Acquir Immune Defic. Syndr.-1993.-V.6.-№9.-P. 1024-1029.

69. Dawes R.F., Scott S.D., et al. B.hominis: an unusnal cause of diarrhoea // Br

70. J Clin Pract. 1990. -V.44. - P.714-716.

71. Devera R.A., Punos G.N., et al. Prevalence of B.hominis infection from Bolivar City // Bol Chin Parasitol. 1997. - V.52. - P.77-81.

72. Doyle P.W., Helgason M.M. et al. Epidemiolodgy and pathogenicity of

73. Blastocysts hominis // J. Clin. Microbiol.-1990.-V.28.- P. 115-121.

74. Dunn L.A., Boreham P.E., Stenzel D.S. Ultrastrutural variation of B. hominis stocks in culture // Int. J. Parasitol. 1989.-V.19.-P.43-56.

75. Epelde Gonzalo F. Chronic diarrheic syndrom from Blastocystis hominis //

76. Med Interna. 1996. V.13.-P.407-408.

77. Escobedo A., Nunez F.A. Blastocystis hominis infection in Cuban AIDS parentis //Mem. Inst. Oswaldo Cruz.-1997.-V.92.-№3.-P.321-322.

78. Fleta-Zaragozano J. The clinical manifestations profuces by B. hominis inchildhood//Med. Clin. Barc.-1998.-V.110.-№12.-P.478-479.

79. Garavelli P., Scaglione L., Rossi M., Bicocchir R., Libanere M. Blastocystisin Italy//Ann. Parasit. hum. comp.-1989.-V.64.-P.391-395.

80. Garavelli P., Scaglione L., Rossi M., Bicocchir R, Libanere M. Blastocystis:a new disease in the acquired immundeficiency syndrom // Int. S. STD. AIDS.- 1990.- P.134-135.

81. Garavelli P., Scaglion L. Blastocystis: a new disease in patients with leikemia // Haematologica. -1991 .-V. 76. -P. 76-80.

82. Garavelly P., Scaglion L. Blastocystis hominis and blastocystosis // Ital.

83. J.Gastroenterol.-1993.-V.25.-P.33-36.

84. Garavelli P.L., Scaglione L., Bicocchi R., Libanore M. Genomic polymorphism among B. hominis strains and development of subtype-specific diagnostic primers //Mol. Cell. Prob.-1998.-V.12.-№3.-P.153-159.

85. Gericke A.S., Burchard G.D., Knobloch J., Walderich B. Coenzyme patternsof B. hominis patient isolates derived from symptomatic and healthy carriers//Trap. Med. Int. Health.-1997.-V.2.-№3.-P.245-253.

86. Giacometti A., Cirioni O., et al. Irritable bowel syndrome in patients with

87. Blastocystis hominis infection // Eur Clin Microbiol Infect. 1999. - V.18. -№6.- P.436-439.

88. Ghosh K., Agyaril M. Acute GVHD involving the gastrointestinal tract andintestation with B. hominis in a patient with chronic myeloid leukaemia folloing allogenic bone marrow transplantation // Bone Marrow Transplant. 1998,- V.22.-№1 l.-P. 1115-1117.

89. Guirges S. G., Al-Waili N.S. B. hominis: evidence for human pathogenicityand effectiveness of metronidasole therapy // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. (Australia).-1987.-V. 14.-P.333-395.

90. Guignard S., Arienti H., et al. Prevalence of enteroparasites in a for children

91. Cordoba Province, Argentina // Eur J Epidemiol. 2000. - V.16. -P. 287293.

92. Herwaldt B.L., de Arroyave K.R., et al. Multiyear prospective study of intestinal parasitism in a cohort of Peace Corps volunteers in Guatemala // J Clin Microbiol. 2001.- V.39.- P.34-42.

93. Hussain R., Jaferi W., Zuberi S., Bagai R., Abrar N., Zaman V. Significantlyincreased IgG2 subclass antibody levels to B. hominis in patients with irritable bowel syndrome //Am. J. Med. Hyg.-1997.-V.56.-№3.-P.301-306.

94. Horiki N., Maruyama Т., et al. Intestinal blockage by carcinoma and Blastocystis hominis infection // Am J Med Hyg.- 1999. V.60. - №3. - P.400-402.

95. Iang L.Q., lap E.H., Singh M. et al. In vitro response of B. hominis againsttraditional //J. Ethophrmacol.-1996.-V.55 ,-№l.-P.35-42.

96. Ioshikawa H., Kuwayama N., Enose I. Histochemical detection of carbohydrates ofB. hominis //J. Eukaryot. Microbiol.-1995.-V.42.-№l.-P.70-74.

97. Ioshikawa H., Hayakawa A. Freeze-frature cytochemistry of membrane cholesterol in B. hominis // Int. J. Parasitol.-1996.-V.26.-P. 1111-1114.

98. Ioshikawa H., Nagano J., Wu Z. et al. Genomic polymorphism among B.hominis strains and development of subtype specific diagnostic primers // Mol. Cell. Probes.-1998.-V. 12.-№3.-P. 153-159.

99. Kain K.C.,Noble M.A., Freeman H.J., Barteluk R.L. Epidemiology andclinical features associates with B. hominis // Diagn. Microbiol. Infect. Dis.-1987.- V.8.-P.234-244.

100. Koperski K., Greten H. et al. B.hominis immunodeficiency virus-related diarrhea. // Scand. J. Gastroenterol.-1995.-V.30.- P.909-914.

101. Keenan T.W., Huang C.M., Zierdt C.H. Comparative analysis of lipid composition inaxenic strains of B. hominis // Сотр. Biochem. Jul.-1992.-V.102.-№3.-P.611-615.

102. Keenan T.W., Zierdt C.H. Lipid biosynthesis by axenic strains of B. hominis

103. Сотр. Biochem. Physiol. Biochem. Mol. Biol.-1994.-V.107.-№4.-P.525-531.

104. Keenan T.W., Zierdt C.H. DNA polymorphism reveales by arbitrary primerspolymerase chain reaction among Blastocystis strains isolated from humans, achicken and a reptile // J. Eukaryot. Microbiol.-1996.-V.43.-№2.-P.127-130.

105. Konig G., Muller H.E. B. hominis in animals: incidence of four serogroups

106. Zentral. Bacteriol.-1997.-V.286.-№3.-P.435-440.

107. Kruger K., Kamilli I., Schattenkirchner M. Rheuma-Einheit und Mediz-inische Poliklinik // Z. Rheumatol.-1994.-V.53.-№2.-P.83-85.

108. Kruger K., Kamilli I., Schattenkirchner M. B. hominis als seltener arthrito-gener Erreger // Z. Rheumatol.-1994.-V.53.-№2.-P.83-85.

109. Lanusa M.D., Carbajal J.A., Borras R. Identification of surface coat car-bonytrates in B. hominis by lectin probes // Int. J. Parasitol.-1996.-V.26.-5,-P.527-532.

110. Lanusa M.D., Carbajal J.A., Villar J., Borras R. Description of an improved metod for B.hominis culture and axenization // Parasitol. Res.-1997.-V.83.-№1.-P.60-63.

111. Larry K.P., Georges P., Carol J.B. et al. 2000 Red Book: Report of the Committee on Infectious Diseases // 25th ed. 2000, P. 188-189.

112. Lee M.G., Rawlins S.C. et al. Infective arthritis due to B.hominis. // Ann. Rheum. Dis.-1990.-Vol.49.-P. 192-193.

113. Lee J.D., Wang J. J., et al. A survey on the intestinal parasites of the school children in Kaohsiug Country. // Gaoxiong Yi Xue Ke Za Zha. 2000. -Y.16. -№9. - P.452-458.

114. Llibre J.M., Tor J., Manterola J.M., CabonellC., Faz M. B. hominis chronic diarrhea in AIDS patients // Lancet.-1989.-№1.-P.221.

115. Maggi P., Brandonisio O., et al. Intestinal protozoa in HIV-infected patients in Apulia, South Italy // Epidemiol Infect. 1999. - V.123.- P.457-462.

116. Mac Pherson D.W., Mac Gueen W.M. Morphological diversity of B. hominis in sodium acetate-acetic acid-formalin-preserved stool samples stained with iron hematoxylin // J. Clin. Microbiol.-1994.-V.32.-№l.-P.267-268.

117. Mansour N.S., Mikhail E.M., el-Masry N.A., Sabry A.G., Mohareb E.W. Biochemical characterization of human isolates of B. hominis // J. Med. Microbiol.-1995.-V.42.-№4.-P.304-307.

118. Markell E.K., Udkow M.P. B.hominis Pathogen or fellow traveller? //Am. J. Trop. Med. Hyg.-1986.-V.35,- P. 1023-1026.

119. Matsumoto I., Iamada M., Ioshida I. Light microscopical appearance and ultrastructure of B.hominis, an intestinal parasite of man // Zentral. Bakte-riol. Mikrobiol. Hyg. A.-1987.-V.264.-P.379-385.

120. Mendes O.C., Szmulewicz G., Menghi C. et al. comparison of intestinal parasite infestation indexes amang HIV positiv and negative populations // Medicina.-1994.-V.54.-№4.-P.307-310.

121. Miller R.A., Minshew B.H. B. hominis an organism in search of a disease // Rev. Infect. Dis.-1988.-V.10.-P.930-938.

122. Мое K.T., Singh M., Ho L.C., Tan S.W. Atiologie von Durchfallser-krankungen bei immunkompetenten und HIV-positiven Patienten. //Schweiz. Med. Wochenschr.-1990.-V.120.-P. 1253-1256.

123. Мое K.T., Singh M., Howe J., Ho L.C., Tan S.W., Hg G.C., Chen X.Q., lap E.H. Observations on the ultrastructure and viability of the cystic stage of B. hominis from human feces //Parasitol. Res.-1996.- V.82.-№5.-P.439-444.

124. Muller H.E. Staatliches Medizinalunt ersuchungsamt B. hominis // Int. J. Med. Microbiol. Virol. Parasitol. Infect. Dis.-1994.-V.280.-№3.-P.403-408.

125. Nacamura Y., Hashimoto Т., et al. Phylogenetic position of Blastocystis hominis that contains cytochrom-free mitochondria, inferred from tre protein phylogeny of elongation factor 1 alpha // Mol Biochem Parasitol. -1996.-V. 11.- P. 241-245.

126. Nagler J., Brown M., et al. Blastocystis hominis in inflammatory bowel disease // J Clin Gastroenterol. 1993. - V. 16. - №2. - P. 109-112.

127. Ng G.C., Ho L.C., Singh M., lap A.L., Мое K.T. Axenic culture of Blastocystis isolates in monophasic medium and speciation by karyotypic typing // Parasitol. Res.-1996.-V.82.-№2.-P. 165-169.

128. Nimri L.F. Evidence of an epidemic of Blastocystis hominis infections in preschool children in nortern Jordan // J Clin Microbiol. 1993.- V.31. -№10. - Р.2706-2708/

129. Pakandl M. Occurrence of Blastocystis sp. In pigs // Parasitol. Res.-1991.-V.38.-№4.-P.297-301. 42.

130. Pakianathan M.R., Millan A. Intestinal protozoa in homosexual men in Edinburgh//Schweiz Rundsch Med Prax.-1999.-V.88.-P.877-879.

131. Perez de Suarez E., Guzman de Rondon C. Morphology of B. hominis in feces and evaluation of parasitological methods // GEN. 1994.-V.48.-№4.-P.226-231.

132. Philips B.P., Zierdt C.H. B. hominis: pathogenic potential in human patients and in gnotobiotes // Exp. Parasitol.-1976.-V.39.-P.358-364.

133. Pikula Z.P. B. hominis and human disease (letter) // J. Clin. Microbiol.-1987.-V.25.-P.1581.

134. Prasad K.N., Nag T.N., et al. Inentification of enteric in HIV-positive patients with diarrhoea in northern India // J Health Popul Nutr. 2000. -V.18. -№1. - P.23-26.

135. Qadri S.M.H., Al-Okaili G.A., Al-Dayel F.C. Clinical significance of B. hominis //J. Clin. Microbiol.-1989.-V.27.-P.2407-2409.

136. Reinthaler F.F., Mascher F., Math E. Blastocystis hominis intestinal para-sit or commensal // Wien Med Wochenschr. - 1988. - VI5. - P. 545-552.

137. Rengpien S., Bailey G. Differetiation of Entamoeba: a new medium and optimal conditions of axegenic encystations of E. invadens // J. Parasitol.-1975.-V.6.-P.24-30.

138. Ricci N., Toma P., Furlani M. et al. B. hominis: a neglectes cause of diarrhoea // Lancet.-V.l-P.966.

139. Riverdo-Rodriguez Z., Diaz I., et al. Intestinal parasites in school cgildren at a pablic institution in Maracaibo municipality // Invest Clin. 2000. -V.41. - P.37-57.

140. Russo A.R., Stoun S.L., Taplin M. E. et al. Presumptive evidence for B. hominis as a cause of colitis // Arch. Inter. Med.-1988.-V.148.-P.1064.

141. Salavert M., Roig P., Nieto A. et al. Enterocolitis caused by Blastocystis hominis and HIV infection // Enferm. Infec. Microbiol. Clin.-1990.-V.8.-№1.-P.63-64.

142. Singh M., Suresh К., Ho L.C., Yap A.L. et al. Elucidation of the life intestinal protozoan Blastocystis hominis // Parasitol. Res.-1995.-Vol.81.-P.446-450.

143. Singh M., Ho L.C., Yap A.L. et al. Axenic culture of reptilian Blastocystis isolates in monophasic medium and speciation by karyotypic typing // Parasitol. Res.-1996.-Vol.82.-P. 165-169.

144. Stenzel D.J., Boreham P.F. A cyst-like stage of B. hominis // Int. J. Parasi-tol.-1991.-V.21.-№5.-P.613-615.

145. Stenzel D.J., Boreham P.F. B. hominis revisited // Clin. Microbiol. Rev.-1996.-V.9.-№4.-P.563-584.

146. Steinmann E., di-Gallo A., Dubach V.C. et al. Atiology of diarrheal diseases in immunocompetent and HIV-positive Patients // Schweiz. Med.Wochenschr.- 1990.-Vol.120.-P. 1253-1256.

147. Stenzel D.J., Dunn L.A. Endocystosis in cultures of Blastocystis hominis // Int. J. Parasitol.-1989.-V.19.-№7.-P.787-791.

148. Stenzel D.J., Boreham P.F., McDoygall R. Ultrastructure of B. hominis in human stool samples // Int. J. Parasitol.-1991.-V.21.-№7.-P.807-812.

149. Stenzel D.J., Boreham P.F. A cyst-like of Blastocystis hominis // Int. J. Parasitol.-1991.-V.21.-№5.-P.613-615.

150. Stogaard M., Lauren A.L., Anderson P.L. The occurrence of Blastocystis hominis in HIV-infected patients // AIDS.-1996.-V.10.-№4.-P.444-445.

151. Suresh K., Ng G.C., Ramachandran N.P. In vitro encystment and experimental infections of B. hominis // Parasitol. Res.-1993.-V.79.-№6.-P.456-460.

152. Suresh K., Howe J., Ng G.C. et al. Ultrastructural changes during in vitro encystment of Blastocystis hominis // Parasitol. Res. 1994. V. 80.-№4.-P.327-335.

153. Suresh K., Howe J., Ng G.C. et al. A multiple fission-like mode of asexual reproduction in B. hominis //Parasitol. Res. 1994. V. 80.-№6.-P.523-527.

154. Suresh K., Chong S.I., Howe J. et al. Tubulovesicular elements in B. hominis from the caecum of experimentally infected rats // Int. J. Parasitol.-1995.-V.25.-№1.-P. 123-126.

155. Svenungsson В., Ekwall E., et al. Enteropatogen in adult patiens with diarrhea and healthy control subjects: a 1-year prospectiv study in a Swedish clinic for infectius diseases. // Clinic Infect Dis. 2000. - V.30. - №5. -P.770-778.

156. Tan S.W., Singh M., Thong K.T. et al. Clonal growth of B. hominis in soft agar with sodium thiogly collate // Parasitol. Res.-1996.-V.82.-№8.-P.737-739.

157. Tan S.W., Ng G.C., Howe J., Ramachandran N.P., Yap E.H., Singh M. Blastocystis hominis: A simplified, high-efficiency method for clonal growth on solid agar // Exp Parasitol. 2000. - V.96. - №1. - P. 9-15.

158. Tasova Y., Sahin В., et al. Clinical significance and frejuency of Blastocystis hominis in Turcish patiens with hematological malignency // Acta Med Okayama. 2000. - V.54. - №3,- P. 133-136.

159. Thepsuparungsikul V., Seng L., Baily G.B. Differential of Entamoeba: en-cystation of E. invadens in monoxenic and and axenic cultures // J. Proto-zool., V.57.-P. 1288-1292.

160. Tsang Т.К., Levin B.S., Morse S.R. Terminal ileitis associased with B. hominis infections //Am. J. Gastroenterol.- 1989.- V.85.-P.795-799.

161. Upcroft J.A., Dunn L.S. et al. Chromosomes of Blastocystis hominis // Int J Parasitol. 1989. - V. 19.- P. 879-883.

162. Vannatta J.B., Adamson D., Mullican К. B. hominis infection presenting an recurrent diarrhoea//Ann. Inter. Med.-1985.-V.102.-P.495-496.

163. Vdovenco A.A. Blastocystis hominis: origin and significance of vacuolar and granular forms //Parasitol. Res.-2000.-V.86.-№l.-P.8-10

164. Viller R.A., Minshen B.H. B.hominis an organism in scarch of a disease // Infect. Dis.-1988.-V.10.-P.930-938.

165. Viller R.A., Carbajal J.A. In vitro encystation of Blastocystis hominis: a kinetics and cytochemistry study // Parasitol. Res.-1998.-V.84.-№1.-P.54-58.

166. Yoshikawa H., Kuwayama N., Enose Y. Histochemical of carbohydrrates of Blastocystis hominis // J Eukaryot Microbiol. 1995. - V. 42. - №1. - P. 70-74.

167. Yoshikawa H., Nagano I. et al. Genomic polymorphism among of Blastocystis hominis strains and develpment of subtype-specific diagnostic primers // Mol Cel Probes . 1998. - V. 22. - №3. - P. 153-159.

168. Yoshikawa H., Saton J., Enose Y. Light and microscopic localization of lipids in Blastocysts hominis // J Eukaryot Microbiol. 1995. - V. 44. -№1. - P. 100-103.

169. Zaci M., Zaman V., et al. Resistence of Blastocystis hominis cysts to chlorine // J Рас Med Assoc. 1996. - V.46. - №8.- P. 178-179.

170. Zaman V., Howe J., Hg M. Ultrastructure of B. hominis cysts // Parasitol. Res.-1995.-V.81.-№6.-P.465-469.

171. Zaman V., Howe J., Hg M. Observation on the surface coat of B. hominis // Parasitol. Res.-1997.-V.83.-№7.-P.731-733.

172. Zaman V., Howe J.,Hg M. Variation in the cysts morphology of B.hominis //Parasitol.Res.-1997.-V.83.-P.306-308.

173. Zaman V., Howe J.,Hg M. Scanning electron microscopy of Blastocystis hominis cysts // Parasitol.Res.-1997.-V.84.-P.476-477.

174. Zaman V., Zaki M., Manzoor M., Howe J., Ng M. Postcystis development of Blastocystis hominis // Parasitol.Res.-1999.-V.85.-P.437-440.

175. Zdero M., Cabrera G., Pons de Leon P. Parasitosisen una peblacion adulta con trastornos gastrointestinales cronicos // Acta Gastoenterol. Latinoam.-1997.-V.27.-P.67-73.

176. Zierdt C. Studies of B. hominis //J. Protozool.-1973.-V.20.-P. 114-121.

177. Zierdt C.H. B.hominis- Past and future // Clin. Microbiol. Rev.-1991.-V.4.-P.61-79.

178. Zierdt C.H., Tan H.K. Ultrastructure and light microscope appearance of B. hominis in a patient with enteric // Z. Parasitenk.-1976.-V.50.-P.277283.

179. Zierdt C.H. Blastcystis hominis an intestinal protozoa parasite of man // Publ. Hlth.Lab.-1978.-V.36.-P.147-161.

180. Zierdt C.H. Blastocystis hominis, a longmisunderstood intestinal pathogen //Parasitol. Taday.-1988.-V.4.-P. 15-19.

181. Zierdt C.H., Rude W.S., Bull B.S. Protozoan characteristics of B.hominis.// Am.J. Clin. Pathol.-1967.-V.48,- P.495-501.

182. Zierdt C.H. Cytochrom-free mitochondria of an anaerobic protozoan В lastocystis hominis.//J. Protozool.-1986.-V.33.- P.67-69.

183. Zierdt C.H., Swan J. et al. In vitro response of Blastcystis hominis to anti-protozoa drugs // J. Protozool.-1983.-V.30.-P.332-334.

184. Zierdt C.H., Zierdt W.S. et al. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of serum antibody to B.hominis in symptomatic infections // J. Parasitol.-1996.-V.81.-P. 127-129.

185. Zuckerman M.J., Ho., Hooper L. et al. Frequency of recovery of B. hominis in clinical practice // J. Clin. Gastroenterol.-1990.-V.12.-№5.-P.525-532.

186. Zuckerman M., Watts M. Т., Ho H. et al. B. hominis intestinal injury // Am. J. Med. Sci.-1994.-V.308.-№2.-P.96-101.

187. Walderich В., Bernauer S., Renner M. et al. Cytopathic effects of B. hominis on clinese hamster ovary (CHO) and adenocarcinoma HT29 cell cultures // Trop. Med. Int. Health.-l998.-V.№.-№5.-P.385-390.1. Т ."•■- V