Комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии

Захаров, Александр Алексеевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии"

На правах рукописц

Захаров Александр Алексеевич

КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СТАТУСА НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ ПРИ БЛАСТОЦИСТНОЙ ИНВАЗИИ

03.03.01 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 ИЮН 2011

Ульяновск - 2011

4849005

Работа выполнена на кафедре анатомии, физиологии и гигиены в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ульяновский государственный педагогический университет имени И.Н. Ульянова»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Ильина Наталья Анатольевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Генинг Татьяна Петровна

доктор биологических наук, профессор Тихомирова Елена Ивановна

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение

высшего профессионального образования «Чувашский государственный педагогический университет имени ИЛ. Яковлева»

Защита состоится ИЛ 2011 года часов на

заседании диссертационного совета Д 212.278.07 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Ульяновский государственный университет по адресу: Набережная реки Свияги, 106, корп.1, ауд.703.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ульяновского государственного университета, а с авторефератом на сайте вуза http://uni.ulsu.ru

Отзывы на реферат направлять по адресу: 432000, г. Ульяновск, ул. Л.Толстого, 42, Ульяновский государственный университет, управление научных исследований.

Автореферат разослан СМ&А 2011 года.

Ученый секретарь

диссертационного совета, к.б.н., доцент

Пантелеев С.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы.

Нейтрофильные гранулоциты являются одним из основных компонентов неспецифической системы иммунитета и мобилизируются организмом уже на начальных этапах защитных реакций.

По современным данным, нейтрофильные лейкоциты, подвергаясь каскадным влияниям различных цитокинов, способны изменять свой количественный и субпопуляционный состав, перестраивать свою функциональную активность, секретировать многочисленные ферменты, медиаторы (в том числе и цитокины), активные формы кислорода, чтобы в конечном итоге реализовать свой физиологический потенциал - фагоцитоз и киллинг, уничтожая вирусы, бактерии, аллергены, неопластические клетки (Антонаева И.И.; 2007, Нестерова И.В., 2005; Romani L., 1997).

Бластоцисты относят к условно-патогенным микроорганизмам (Белова Л.М., 1992; Zierdt С.Н., 1988). Находясь в кишечнике, они участвуют в формировании микробиоценоза данного биотопа. При снижении резистентности макроорганизма бластоцисты способствуют созданию благоприятных условий для развития патологических процессов (Потатуркина-Нестерова Н.И. с соавт., 2004; Rivera W., Tan M., 2005; Iguchi A. et al., 2007).

Известно, что слизистая оболочка кишечника является местом первого контакта с большим числом потенциальных антигенов (эндотоксинов, вирусов, протеингликанов бактериальной оболочки и др.) (Ардатская Н.Д. с соавт., 2001; Бондаренко В.М. с соавт, 2003; Гасанова Т.А. с соавт, 2007).

Актуальность данного исследования определяется тем, что условно-патогенные микроорганизмы, в частности бластоцисты, в последние годы рассматриваются как одна из причин, вызывающая патологические процессы в толстой кишке (Онищенко Г.Г., 2002,2007; Романенко H.A., 2002).

Занимая одну из самых активных позиций в системе клеточно-гуморальной кооперации, нейтрофильные лейкоциты периферической крови выступают высокочувствительным индикатором нарушений гомеостаза. В то же время, секреторная активность нейтрофилов при бластоцистной инвазии до настоящего времени не изучена.

Вышеизложенное диктует необходимость комплексного изучения показателей функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов периферической крови в динамике развития бластоцистоза.

Целью работы является комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов периферической крови при бластоцистной инвазии.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи: 1. Выявить роль бластоцистной инвазии в возникновении ларазитозов у

свиней в Ульяновской области.

2. Получить модель экспериментального бластоцитоза на мышах и изучить динамику количественных показателей периферической крови в динамике развития бластоцистной инвазии.

3. Оценить состояние фагоцитарной активности нейтрофилов на различных этапах бластоцистной инвазии у мышей.

4. Дать характеристику кислородзависимых и кислороднезависимых механизмов биоцидности нейтрофильных гранулоцитов в динамике бластоцистной инвазии.

Научная новизна работы.

Впервые проведено комплексное исследование показателей функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов периферической крови при экспериментальном бластоцистозе.

Установлено, что при развитии экспериментального бластоцистоза происходит фазное изменение количественных и функциональных характеристик нейтрофильных гранулоцитов периферической крови, свидетельствующих об активации неспецифического звена иммунитета.

Получены оригинальные данные о структуре паразитоценоза кишечника свиней в Ульяновской области, установлено превалирование протозойных паразитов, среди которых доминируют Д/да/осу^ ¡рр.

Впервые показано, что изменения функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов носят разнонаправленный характер. Установлено, что в основе изменения содержания микробицидных компонентов и метаболической активности нейтрофилов лежит угнетение катионных белков на фоне повышения активности миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз, а также возрастания количества активных нейтрофилов НСТ-теста и фагоцитоза.

Впервые установлено, что все изменения активности компонентов микробицидной системы фагоцитов различаются по характеру и глубине проявлений на разных этапах компенсаторной реакции организма. Практическая значимость работы.

Результаты проведенных исследований позволяют использовать полученные результаты в повышении эффективности свиноводства, т.к. являются основой для проведения лечебно-профилактических мероприятий по борьбе с паразитарными инвазиями животных.

Установленные данные по нарушению микробиоты кишечника, увеличению общего количества лейкоцитов и нейтрофильных гранулоцитов периферической крови, внешним проявлениям патологического процесса целесообразно применять при оценке здоровья поголовья свиней в животноводческих хозяйствах.

Установленные фазные изменения количественных показателей и функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов, связанные с последовательными этапами развития бластоцистоза, позволят достоверно оценивать функционально-метаболический статус этих клеток, являющихся важнейшими клеточными элементами внутренней среды, которые мобилизуются организмом в защитных реакциях.

По материалам диссертационной работы написаны практические рекомендации: Методы исследования функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов. Захаров А., Ильина H.A., Практические рекомендации. Ульяновск. 2009 г. 17 е., Изменение физиологического статуса макроорганизма (на примере свиней) при бластоцистной инвазии. Захаров А. Практические рекомендации. 2009 г. 25 с.

Результаты исследования используются в процессе преподавания физиологии и паразитологии на естественно-географическом факультете ГОУ «Ульяновский государственный педагогический университет имени И.Н. Ульянова» (Акт о внедрении от 15.09.2010 г.). Основные положения, выносимые на защиту:

1. При экспериментальном бластоцистозе у мышей имеет место увеличение абсолютного и относительного количества нейтрофилов периферической крови на пике патологического процесса.

2. Показатели базального и стимулированного фагоцитоза нейтрофилов периферической крови при экспериментальном бластоцистозе у мышей зависели от фазы патологического процесса, при этом показатели стимулированного фагоцитоза в течение всего исследуемого периода были значительно ниже нормы.

3. Активация системы «кислородного взрыва», развивающаяся на 9-12 сутки экспериментального бластоцистоза, сменяется дальнейшей ее супрессией (16 сутки и далее), в то время как для кислороднезависимых механизмов характерно разнонаправленное действие - повышение активности щелочной и кислой фосфатаз на фоне снижения уровня катионных белков.

Апробация работы.

Результаты работы были представлены на: Международном Форуме по проблемам науки, техники и образования. III тысячелетие - новый мир (Москва, 2008, 2009), Всероссийской заочной электронной научной конференции «Современные проблемы науки и образования» (Москва, 2008), Международном молодежном научном форуме «Университетское образование: традиции и инновации» (Ульяновск, 2009, 2010), III Международной телеконференции «Фундаментальные науки и практика» (Томск, 2010), Международная научная конференция «Приоритетные направления развития науки, технологий и техники» (Москва, 2010), VII Международной научно-практической интернет-конференции «Наука и современность» (Новосибирск, 2010), III Международной научно-практической дистанционной конференции «Экология и медицина: современное состояние, проблемы и перспективы» (Москва, 2010). Публикации.

По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 3 в журналах рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 133 страницах. Состоит из введения, обзора литературы, описания объектов, материалов и методов исследования, двух

глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Библиография содержит 214 источников, из них 112 отечественных и 102 иностранных. Работа иллюстрирована 8 таблицами и 23 рисунками.

ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объект исследования

При изучении паразитоденоза кишечника и характера его проявлений было обследовано 263 свиньи на свиноводческих фермах Ульяновской области. В ходе исследования наблюдали за общим состоянием животных, производили периодическое взвешивание и отмечали характер стула. Контрольную группу составили 72 здоровых свиней, у которых отсутствовали паразитарные инвазии.

Для исключения влияния суточных ритмов на результаты исследований проводили в одно и то же время суток, обычно в утренние часы, как у опытных, так и контрольных животных.

Изучение паразитоценоза проводили в соответствии с Методическим указанием МУК 4.2.735-99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов», утвержденных главным государственным санитарным врачом РФ 25.02,1999 г.

Изоляты ярр. получали из фекалий свиней. Выявление

бластоцист в препаратах проводили путем микроскопии нативных и окрашенных мазков.

Культивирование бластоцист проводили с использованием сред БитсвИ СЕМ, и Павловой. Среда БигезЬ СЕМ (БигезЬ ег а!., 1994) содержит

экстракт дрожжей, однозамещенный фосфорнокислый калий и двузамещенный фосфорнокислый калий, лошадиную сыворотку, бактериальнорастворимые продукты. Для культивирования бактерий и микроскопических грибов применяли искусственные питательные среды, рекомендуемые Приказом №535 от 22.04.1985 МЗ РСФСР.

Создание экспериментальной модели.

Эксперименты по изучению функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов периферической крови при экспериментальном бластоцистозе проводили на нелинейных лабораторных мышах массой 23 - 25 г, которых содержали в условиях постоянного температурного режима (20°-25°С) и стабильной освещённости. Животные получали полноценное питание. Перед проведением экспериментов и опытные, и контрольные группы находились в карантине. В этот период наблюдали за общим состоянием животных, производили периодическое взвешивание. Для исключения влияния суточных ритмов на результаты экспериментов все манипуляции (введение культуры, взятие крови и т.д.) проводили в одно и то же время суток, обычно в утренние часы, как у опытных, так и контрольных животных. Перед началом эксперимента у всех опытных мышей определяли общее количество лейкоцитов и лейкоцитарную

формулу. В работу брали только тех животных, у которых количество лейкоцитов соответствовало норме. Экспериментальный бластоцистоз воспроизводили по методике К.Т. Мое (1997) на мышах-самцах, массой 2325 г. С целью контроля на наличие бластоцист у этих животных, их испражнения засевали на питательные среды.

Воспроизведения экспериментального бластоцнстоза.

Экспериментальный бластоцистоз воспроизводили по методике К.Т. Мое (1997) на мышах-самцах, массой 23-25 г. С целью контроля на наличие бластоцист у этих животных, их испражнения засевали на питательные среды.

Определение количества лейкоцитов периферической крови у экспериментальных животных.

Содержание количества лейкоцитов в крови было изучено по методу Н.М. Николаева в счетной камере Горяева.

Расчет лейкоцитов проводили, учитывая разведение крови, число сосчитанных квадратов и объем одного большого квадрата (1/250 мкл, так как сторона квадрата 1/5 мм, высота 1/10 мм) (Меньшиков с соавт.,1987).

х = а-250-20, т.е. х = а-50,где

х - число лейкоцитов в 1 мкл; а - число лейкоцитов в 100 больших квадратах.

Определение фагоцитарной реакции полиморфноядерных лейкоцитов крови.

Принцип метода основан на количественном определении поглощенных и переваренных нейтрофилами микроорганизмов при совместной инкубации исследуемой крови с ми1фобной тест-культурой {Staphylococcus aureus).

Показатели фагоцитарной реакции полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) крови определяли, используя тест-систему, предложенную НПКО «Реакомплекс».

Для определения поглотительной способности нейтрофилов из полученной взвеси готовили мазки на предметных стеклах, затем препараты высушивали на воздухе, фиксировали в смеси Никифорова 10 минут и окрашивали по Романовского-Гимза.

Подсчет поглощенных микробов вели в 200 нейтрофилах. Поглотительную способность фагоцитов оценивали по фагоцитарному индексу, то есть проценту фагоцитов из числа сосчитанных нейтрофилов, и фагоцитарному числу микробов, поглощенных одним активированным нейтрофилом (Карпищенко А.И., 1999) Тест с тетразолием нитросиннм.

Метод основан на цитохимическом выявлении темно-синих гранул диформазана, которые образуются в цитоплазме нейтрофила в результате восстановления нитросинего тетразолия (Земсков В.М.,1988), Подобная реакция обозначается как спонтанный тест НСТ, она осуществляются благодаря активации кислородзависимой биоцидности фагоцита.

Мазок крови окрашивали дважды: по Паппенгейму и второй раз тетразолиевым нитросиним. Окраска по Паппенгейму наиболее качественный метод окраски и представляет собой комбинацию методов Мая - Грюнвальда и Романовского-Гимзы.

Определения уровня катионных белков нейтрофильных гранулоцитов.

Катионные белки лизосом нейтрофилов в нейтральной среде способны связывать анионный краситель бромфеноловый синий. Степень гранулярного синего окрашивания цитоплазмы пропорционально содержанию катионных белков в клетках. Поскольку катионные белки обладают протеолитическими и бактерицидными свойствами, по количеству гранул и по интенсивности их окраски можно судить о состоянии кислороднезависимой биоцидной системы нейтрофилов. Снижение ее показателей ниже 2,4±0,25 свидетельствует о дефектности кислороднезависимых антимикробных систем нейтрофилов.

Анализировали интенсивность окрашивания цитоплазмы 100 нейтрофилов и вычисляли средний цитохимический коэффициент (СЦК) (Карпшценко, 1999).

Определения активности миелопероксидазы в нейтрофильных гранулоцитах.

Активность фермента определяется по появлению в цитоплазме нейтрофилов (п=100) окрашенного продукта пероксидазной реакции -оксибензидина. Оксибензидин окрашивает места локализации пероксидазы в желто-коричневый цвет, под микроскопами эти участки выглядят как жёлто-коричневые гранулы. Степень окрашивания цитоплазмы нейтрофилов пропорциональна активности миелопероксидазы. Результат вычисляли через средний цитохимический коэффициент (СЦК) (Карпищенко, 1999).

Методика выявления кислой фосфатазы.

Мазки крови исследовали под микроскопом в иммерсионной среде. В местах локализации кислой фосфатазы отмечалось окрашивание в коричневый цвет. Анализировали интенсивность окрашивания цитоплазмы 100 нейтрофилов, вычисляли средний цитохимический коэффициент (СЦК) (Шубич М.Г., 1980).

Методика выявления щелочной фосфатазы.

Места локализации щелочной фосфатазы определялись в виде гранул коричневого цвета. Анализировали интенсивность окрашивания цитоплазмы 100 нейтрофилов, вычисляли средний цитохимический коэффициент (СЦК) (Шубич М.Г., 1980).

При проведении цитохимических исследований применялась оценка результатов по L.S. Kaplow (1955) в модификации G. Astaldi и L. Verga (1957), основанная на выявлении специфической окраски различной степени интенсивности в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов.

Картина распределения и количества осадка позволила разделить клетки на четыре типа по степени активности фермента:

«0» - отсутствие фермента, цитоплазма не окрашена

«1» - слабое диффузное окрашивание, единичные гранулы в цитоплазме «2» - диффузная окраска с умеренным количеством гранул «3» - сильно положительная реакция с многочисленными гранулами Повышенная активность фермента находит отражение в увеличении среднего цитохимического коэффициента (СЦК). Для определения СЦК количественное выражение результатов проводилось путём подсчёта 100 нейтрофилов с их дифференцировкой по описанному выше принципу. Число клеток с одинаковой активностью окраски умножали на цифру, соответствующую данному типу степени активности фермента. Сумма этих произведений, делённая на 100, и представляет собой СЦК для одной клетки: _..„ 0ха + 1хг>+2хс+3х</

Готовые мазки периферической крови исследовали под микроскопом в иммерсионной среде объективом *90, окуляром х 10.

Методы статистического анализа.

Статистическую обработку результатов исследований выполнили с помощью программы Stata 6.0. Достоверными считались различия при уровне вероятности менее 5% (р<0,05). Графическая обработка материалов выполнена с помощью пакета прикладных программ Exel-2000.

ИССЛЕДОВАНИЕ ВИДОВОГО СОСТАВА ПАРАЗИТОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА СВИНЕЙ

На основе анализа эффективности известных диагностических методов в качестве программы мониторинга паразитоценоза кишечника этих животных была использована диагностическая система КТ-ФЭО-МЦН, так как она вследствие использования консерванта Турдыева (КТ) позволяет длительное время сохранять морфологию всех стадий развитая кишечных паразитов.

Исследование видового состава паразитоценоза кишечника свиней выявило более выраженную инвазированность животных простейшими по сравнению с другими группами паразитов. Так, простейшие были выявлены у 92,6% свиней, тогда как гельминты - лишь у 12,9% животных. Часть поголовья (4,2%) была не инвазирована, а 9,7% поражена одновременно и простейшими, и гельминтами.

Ввиду высокой инвазированности свиней простейшими, был проведен анализ их родового состава, который выявил 7 родов. Одноклеточные были представлены саркодовыми: Blastocystis spp., Entamoeba spp., Endolimax nana, Iodamoeba butschlii, жгутиковыми: Lamblia intestinalis, инфузориями: Bahntidium coli и кокцидиями: Cryptosporidium parvum (табл. 1).

Таблица 1 - Встречаемость кишечных паразитов у обследованных свиней (п=163)

Выделенные паразиты Встречаемость паразитов

... абс. %

Простейшие 151 92,6

1. Саркодовые 144 88,3

1.1. Blastocysts spp. 135 82,8.

1.2. Entamoeba spp. 89 54,6,

1.3. Endolimax nana 46 28,2

1.4. lodamoeba spp. 23 14,1

2. Жгутиковые 8 4,9

2.1. Lamblia intestinalis 8 4,9

3. Инфузории 5 3,1

3.1. Balantidium coli 5 3,1

4. Кокцидии 3 1,8

4.1. Cryptosporidium parvum 3 1,8

Таким образом, в ходе проведенных исследований была выявлена высокая распространенность у обследованного поголовья свиней простейших бластоцист, они были обнаружены у 82,8% обследованных животных, что превышало показатели инвазированности всех остальных групп паразитов.

В ходе проведенных исследований были выявлены три формы бластоцист: вакуолярная, гранулярная и амебоидная, выявленные в ходе исследований. Вакуолярные формы В1шосу$Н$ врр. обнаруживались в 58,6% препаратов из фекалий, на гранулярную приходилось 28,7%, обе формы бластоцист среди обследованных были выявлены у 12,7% животных. Амебоидная форма в биоматериале не обнаружена.

Следует отметить, что амебоидные формы простейших были обнаружены только в препаратах, приготовленных из культуры простейших, выращенной на искусственных питательных средах (3,9%). Одновременно все три формы бластоцист встречались в культуре в 2,3% случаях.

Таким образом, преобладающими формами ШаяТосу^Ь ярр., как в препаратах из фекалий (58,6%), так и из культуры (42,1%) являлись вакуолярные.

Собственные исследования показали, что размеры простейших варьировали в широких пределах. В фекалиях преобладали бластоцисты размером от 8 до 21 мкм (67,6%), клетки размером менее 8 мкм встречались в 15,3% наблюдений и более 21 мкм - у 17,1 % инвазированных.

В препаратах, приготовленных из культуры, размеры бластоцист, как иакуолярной, так и гранулярной форм, также варьировали (табл. 2).

Таблица 2 - Размеры бластоцист

Формы бластоцист Размеры бластоцист (мкм)

Менее 8 От 8 до 21 Более 21

Вакуолярная: из фекалий 15,3% 67,6% 17,1%

из культуры 4,6% 77,5% 17,9%

Гранулярная: из фекалий 14,2% 63,8% 22,0%

из культуры 9,7% 59,2% 31,1%

Полученные результаты свидетельствуют о том, что среди выделенных простейших ШазЮсуьйв ¡рр., как в препаратах из фекалий, так и в культуре, превалировали клетки размером от 8 до 21 мкм. Вакуолярная форма бластоцист характеризовалась округлой формой, наличием центрального тела (ЦТ), занимающего большую часть клетки. Полученные результаты показали, что простейшие с центральным телом, занимающим более 90% объема клетки, составили 29,3%. Установлено, что на долю бластоцист, где ЦТ занимало 70-90% всей клетки, приходилось 54,7% от общего количества бластоцист вакуолярной формы, обнаруженных в фекалиях. При окрашивании бластоцист железным гематоксилином центральное тело прокрашивалось с разной интенсивностью, от слегка голубого до интенсивно синего цвета. Раствор Люголя придавал простейшим желто-коричневый оттенок. Редко встречались клетки с неокрашенным центральным телом. Эта структура на препаратах, приготовленных из свежих фекалий, выглядела гомогенной (78,6%), реже зернистой (24,3%). По периферии бластоцист тонким слоем обнаруживалась цитоплазма, в которой различались ядра (от 1 до 10) в виде плотных скоплений. Расположение ядер преимущественно полярное. В одной клетке встречались ядра разных размеров. При окраске железным гематоксилином ядра принимали темно-синий цвет.

Таким образом, при изучении выделенных бластоцист были обнаружены две формы простейших: вакуолярная и 1ранулярная. Преобладающими формами ШсяЮсухНв хрр., как в препаратах из фекалий (51,85%), так и из культуры (45,4%) являлись вакуолярные. Бластоцисты амебоидной формы были обнаружены нами только в культуре (3,9%) при пересеве на питательных средах. При хранении культуры, количество амебоидных форм увеличивалось.

Размеры простейших варьировали в широких пределах. Простейшие размером менее 8 мкм встречались в 15,3% случаев, размером от 8 до 21 мкм - в 67,6% случаев и более 21 мкм - в 17,1% случаев. Бластоцисты, в которых центральное тело занимало, более 90% всей клетки составили 29,3%, от 7090% клетки - 54,7% и менее 70% - 16% от общего количества вакуолярных форм.

Основными проявлениями кишечного бластоцистоза у экспериментальных животных являлись вялость, потеря аппетита, жажда,

изменение состояния шерсти, ахолия фекалий, развитие диареи с примесью крови и слизи. Признаки бластоцистной инвазии отмечались уже через 24 часа после заражения животных бластоцистами. Максимальное их развитие наблюдалось на 12 сутки от начала эксперимента. В последующем отмечалось улучшение состояния подопытных животных, наступало их выздоровление.

ВЛИЯНИЕ БЛАСТОЦИСТНОЙ ИНВАЗИИ НА ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ

Динамика количественного содержания нейтрофнльных гранулоцитов.

В связи с тем, что нейтрофилы играют ведущую роль в механизмах реализации неспецифической резистентности организма, нами была изучена динамика изменений их количественного содержания у животных контрольной и опытной групп.

Результаты абсолютного количества нейтрофнльных лейкоцитов периферической крови представлены на рисунке 1.

•109/л

сутки

Рис. 1. Динамика абсолютного количества иейтрофильных гранулоцитов в периферической крови мышей при бластоцистной инвазии (Т09/л).

При экспериментальном бластоцистозе у инвазированных животных происходило выраженное повышение содержания нейтрофнльных гранулоцитов в периферической крови до двенадцатых суток, когда

показатели увеличились до 7,75±0,29-109/л. В последующие сроки наблюдений количественное содержание нейтрофильных гранулодитов периферической крови животных опытной группы снижалось и к двадцать восьмому дню эксперимента статистически достоверно не отличалось от значения показателя в контрольной группе (З.О^ОДбЧО'/л и 3,08±0,11-109/л соответственно, р>0,05).

Показано также, что при экспериментальном бластоцистозе у инвазированных животных происходило выраженное повышение содержания нейтрофильных гранулоцитов в периферической крови до двенадцатых суток, когда показатели увеличились до 7,75±0,29-10 /л (табл. 3). В последующие сроки наблюдений количественное содержание нейтрофильных гранулоцитов периферической крови животных опытной группы снижалось и к двадцать восьмому дню эксперимента статистически достоверно не отличалось от значения показателя в контрольной группе (3,01±0,16-109/л и 3,08±0,1 МО'/л соответственно, р>0,05).

Таблица 3 - Динамика относительного количества нейтрофильных гранулоцитов периферической крови у мышей при бластоцистной инвазии (%)

Группы животных Стат. показатели Сроки наблюдений (в сутках)

3 6 9 12 16 21 28

Опыт (п=92) М±ш 45,8 ±0,6 42,8 ±0,4 50,1 ±0,3 62,9 ±0,4 32,7 ±0,3 29,3 ±0,4 35,6 ±0,4

Контроль (п=40) М±ш 37,6 ±0,7 38,1 ±0,8 38,1 ±0,9 38,1 ±0,8 37,9 ±0,9 38,6 ±0,8 38,1 ±0,8

Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

Таким образом, установлено, динамика показателей относительного содержания нейтрофильных гранулоцитов в целом повторяет динамику абсолютного количества нейтрофилов у опытных животных.

Изучение фагоцитарной активности при бластоцистной инвазии.

Поглотительную способность нейтрофилов оценивали по фагоцитарному индексу, т.е. проценту фагоцитов из числа сосчитанных нейтрофилов, и фагоцитарному числу, т.е. среднему количеству микробов, поглощенных одним активным нейтрофилом.

Резервную возможность показателей фагоцитарной реакции определяли по отношению показателей фагоцитарной активности при стимуляции липополисахаридом - продигиазаном к аналогичным в базальных условиях. Все показатели определяли в динамики на 3,6,9,12,16, 21,28 сутки после заражения животных бластоцистами.

Результаты определения фагоцитарного индекса.

На 3 сутки от начала эксперимента у животных опытной группы наблюдалось достоверное увеличение показателей фагоцитоза (57,5±0,3%) по сравнению с контролем (49,5±0,2%), данное различие было статистически достоверным (р<0,05). На 6 сутки от начала заражения показатель

фагоцитарного индекса возрос до 65,1 ±0,4%, в то время как уровень данного показателя животных контрольной группы практически не изменился и составил 50,1±0,2% (р<0,001). На 9 сутки повышение базального фагоцитоза достигло наибольших значений 69,7±0,8% (р<0,05).

Показатель достоверно динамически увеличивался в опытной группе с 3 по 9 сутки (с момента заражения), а к шестнадцатым суткам произошло резкое снижение фагоцитарного индекса до минимальных значений, причем показатель составил 44,5+0,6%, что было в 1,1 раза ниже, чем у интактных животных (49,5±0,4%, р<0,001). В дальнейшем показатели базального фагоцитоза нарастали вплоть до 28 суток от начала эксперимента, когда данный показатель у мышей опытной группы составил 49,9+0,8% (р>0,05) при отсутствии достоверности статистического различия между группами (рис. 2).

% 80 70

60 50 40 30 20 10 0

3 6 9 12 16 21 28 сутки □ Опыт Ш Контроль

Рис. 2. Динамика показателей базального фагоцитоза у мышей при бластоцистной инвазии.

Результаты исследований показателей стимулированного фагоцитоза у инвазированных и интактных животных представлены в таблице 4.

Как видно из таблицы, уровень стимулированного фагоцитоза у здоровых животных составил, в среднем - 49,8±0,9%. У инвазированных животных на 3 сутки после заражения показатели стимулированного

9 12 16 21 28 оугш ЕЗ Опыт ® Контроль

фагоцитоза уменьшились в 2,1 раза и составили 23,8±0,4% (р<0,001). На 6 сутки различия оставались статистически достоверными, однако показатель фагоцитарного индекса несколько повысился, составив 26,9±2,7%, что было в 1,8 раза ниже показателя здоровых животных (рис. 3).

Рис. 3. Изменение показателей стимулированного фагоцитоза нейтрофилов мышей при бластоцистной инвазии.

В дальнейшем показатели фагоцитоза нарастали до двенадцатых суток от начала эксперимента, когда уровень стимулированного фагоцитоза в опытной группе составил 32,1±1,7% при сохранении статистически достоверного различия между группами. К 16-22 суткам показатели стимулированного фагоцитоза у инвазированных мышей снизились до минимальных значений, ее показатель снизился до 17,8±1,2%, что было в 2,8 раза ниже, чем у контрольных животных.

Таким образом, наличие бластоцистной инвазии способствовало снижению уровня стимулированного фагоцитоза. Следует отметить, что

даже в период максимальной его активизаций показатели стимулированного фагоцитоза не достигали соответствующих величин у здоровых животных.

Показатели базального фагоцитоза свидетельствуют о том, что происходит его активизация, максимум которого приходится на 9 сутки эксперимента, к 16 суткам наступает депрессия, сменяющаяся медленным подъемом показателей.

Уровень стимулированного фагоцитоза свидетельствует о статистически достоверном его снижении у инвазированных животных. Однако на фоне общего падения происходит его некоторая активация, также достигающая максимума на 9-12 сутки, которая затем сменяется снижением показателей.

Характеристика способности фагоцитов к поглощению возбудителя.

Фагоцитарное число интактных животных составило, в среднем -1,7±0,2 условных единиц. У опытных мышей фагоцитарное число изменялось волнообразно (рис. 4).

у.е.

28 сутки

0 Опыт

В Контроль

Рис. 4. Изменение показателей фагоцитарного числа у мышей при бластоцистной инвазии,

Как видно из рисунка, фагоцитарное число интактных животных составило, в среднем - 1,7±0,2 условных единиц. У опытных мышей число изменялось волнообразно.

Нарастание фагоцитарного числа к двенадцатым суткам у животных экспериментальной группы можно объяснить мобилизацией компенсаторных механизмов. Это, по-видимому, может быть связано с увеличением в этот же срок относительного (62,910,4%) и абсолютного (7,7510,29-109/л) количества нейтрофильных гранулоцитов периферической крови. Механизм нейтропении, возможно, обусловлен усиленной миграцией нейтрофильных гранулоцитов из периферической крови в очаг воспаления, развивающегося в кишечнике при бластоцистозе.

Рзультаты определения завершенности фагоцитоза.

Бластоцистная инвазия сопровождалась изменением в динамике эксперимента показателя завершенности фагоцитоза. Так, в первые сутки после заражения происходило его увеличение до 72,7±3,4% (в контроле 62,513,3%; р<0,001), в период разгара, на 6-12-е сутки, показатель завершенности снижался до 63,814,2% (р>0,01), в период реконвалесценции опять наступало его повышение (67,216,8%), которое, однако, не было достоверным по сравнению с контролем (р>0,05).

Таким образом, экспериментальная бластоцистная инвазия у мышей сопровождалось изменением содержания нейтрофилов в периферической крови и их фагоцитарной активности. Установлены фазные изменения уровней базального и стимулированного фагоцитоза, а также показателей завершенности фагоцитоза.

ХАРАКТЕРИСТИКА КИСЛОРОДЗАВИСИМЫХ И

КИСЛОРОДНЕЗАВИСИМЫХ МЕХАНИЗМОВ БИОЦИДНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ В ДИНАМИКЕ БЛАСТОЦИСТНОЙ ИНВАЗИИ

Оценка кислородзависимой биоцидности нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии.

Результаты определения активности «респираторного взрыва» НСТ-тестом показали фазное изменение показателей у экспериментальных животных при бластоцистной инвазии, что свидетельствует об активации кислородзависимой биоцидности нейтрофилов в первые сутки после заражения животных, сменяющейся ее депрессией в период разгара бластоцистоза. Затем наступало незначительное увеличение показателей НСТ-теста и опять их понижение в период выздоровления.

Результаты активности миелопероксидазы (МПО), представленные на рисунке 5, свидетельствуют, что у контрольных животных средний цитохимический коэффициент (СЦК) активности миелопероксидазы составил 2,18±0,02 условных единиц, через трое суток от начала

эксперимента значения СЦК у мышей опытной группы повысилось незначительно (2,28±0,04 у.е.; р<0,05).

Максимальное значение показателя СЦК в группе опытных мышей было отмечено на девятые сутки. В это время активность МПО у опытных животных увеличилась на 33%, что составило 2,90±0,07 у.е, от исходного уровня, и было статистически высоко достоверным (р<0,001).

Через двенадцать дней данный показатель снижался, но оставался выше контроля на 26,6% (2,76±,06 у.е.; р<0,001). В последующие сроки наблюдений отмечалось дальнейшее достоверное снижение данного показателя.

В Опыт 11 Контроль

Рис.5. Изменение активности миелопероксидазы у мышей при бластоцистной инвазии.

Таким образом, было показано, что при экспериментальном бдастоцистозе у лабораторных животных обнаружено достоверное увеличение среднего цитохимического коэффициента миелопероксидазы, достигающих максимальные значения к 9-12 суткам от начала эксперимента. В дальнейшем показатель возвращался к значениям, незначительно превосходящим исходный уровень.

Характеристика кислород независимой биоцидной системы нейтрофилов.

Показатели катионных белков, кислой и щелочной фосфатаз были изучены в динамике на 3, 6, 9,12, 16, 21 и 28-е сутки от начала заражения животных простейшими ВЬяЮсухШ $рр. Результаты выражали через средний цитохимический коэффициент.

Установлено, что бластоцистная инвазия приводит к значительному повышению уровня щелочной и кислой фосфатаз. Результаты изучения активности ЩФ и КФ представлены на рисунке 6 и 7.

Как видно из рисунка 6, уже на третий день исследований уровень ЩФ животных, инфицированных бластоцистами, был выше контрольного почти в 1,2 раза (2,11±0,05 и 1,77±0,02 соответственно, р<0,001). Дальнейшее динамическое повышение показателя мы отмечали до 12 суток, при этом уровень ЩФ в контрольной группе составил 2,66±0,05 (р<0,001). В дальнейшем уровень ЩФ снижался и к 28 дню от начала эксперимента уровень щелочной фосфатазы оставался незначительно повышенным (1,94±0,04 и 1,8±0,03 соответственно, р<0,01).

3 6 9 12 16 21 28 сУ*и В Опыт Ш Контроль

Рис. 6. Изменение активности щелочной фосфатазы в нейтрофилах мышей при бластоцистной инвазии.

Аналогичным образом изменялась активность кислой фосфатазы (рис.7). Как видно из рисунка, динамика активности кислой фосфатазы была аналогична изменениям показателей щелочной фосфатазы: уже на 3 сутки после заражения статистически достоверно превосходил таковой в контрольной группе (0,91±0,04 и 0,82±0,02 соответственно; р<0,05).

И Опыт 0 Контроль

Рис.7. Изменение активности кислой фосфатазы в нейтрофилах мышей при бластоцистной инвазии.

В последующем уровень кислой фосфатазы достоверно динамически возрастал и на 12 сутки эксперимента составлял 1,73±0,05 (р<0,01). В дальнейшем содержание кислой фосфатазы в крови имело тенденцию к снижению и к концу эксперимента значение показателей статистически не отличалось от уровня данного фермента в контрольной группе (р>0,05).

Наряду с увеличением показателей активности миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз при экспериментальном бластоцистозе было установлено снижение уровня катионного белка у животных опытной группы (рис. 8).

Как видно из представленной диаграммы, через трое суток от начала эксперимента у животных экспериментальной группы уровень катионных

белков снижался и составил 1,98±0,04 условных единиц, что было в 1,1 раза ниже, чем у животных контрольной группы (2,22±0,03; р<0,05).

усл. ед.

сутки

□ Опыт В Контроль

Рис.8. Изменение показателей катионных белков в нейтрофилах мышей в динамике бластоцистной инвазии.

Минимальное значение показателя в группе опытных мышей было отмечено к девятым суткам от начала эксперимента. В это время уровень катионных у опытных животных составил 1,23±0,07 условных единиц, при этом различие в показателях по сравнению с контрольной группой было статистически достоверным (р<0,05).

В дальнейшем отмечалась тенденция к увеличению уровня КБ у инвазированных животных. Так, на двенадцатые сутки СЦК катионных белков у опытных мышей превышал показатель контроля в 1,6 раза (1,40±0,09), к шестнадцатым суткам - в 1,3 раза (1,65±0,07), к двадцать первым суткам - в 1,3 раза (1,70±0,1). Все указанные показатели высоко статистически достоверно отличались от уровня контрольных групп (р<0,05). К концу эксперимента значения СЦК катионных белков составили 1,96±0,05 (р<0,05).

Таким образом, изучение ферментативной активности нейтрофильных лейкоцитов в динамике экспериментального бластоцистоза выявило изменение активности миелопероксидазы, щелочной фосфатазы, кислой фосфатазы и уровня катионных белков. Так максимальное угнетение КБ, на фоне повышения значений активности МПО, ЩФ, КФ, нами отмечено на двенадцатые сутки эксперимента. В дальнейшем наблюдались разнонаправленные сдвиги показателей МПО, ЩФ, КФ и КБ в сторону их нормализации, т.е. повышался уровень катионных белков при динамическом снижении миелопероксидазной и фосфатазной активности лейкоцитов, направленных на отграничение и удаление из организма чужеродного антигенного материала. Повышение активности этих ферментов также коррелировало со степенью выраженности проявлений экспериментального бластоцистоза.

выводы

1. Установлено, что 82,8% поголовья свиней с кишечными протозоозами заражено простейшими В1ШосузИй ¡рр., что значимо превышает показатели инвазированности всеми остальными группами паразитов.

2. Получена модель экспериментального бластоцитоза мышей, характеризующаяся морфологическими и функциональными изменениями толстой кишки, характерных для неспецифического воспаления, а также увеличения абсолютного и относительного количества нейтрофильных гранулоцитов на высоте патологического процесса.

3. Показано, что период повышения показателей базального и стимулированного фагоцитоза, достигавший максимума на 9-12 сутки, сменялся их депрессией (16 сутки) и повторным подъемом. Показатели стимулированного фагоцитоза даже в период максимальной его активизации не достигали соответствующих величин у здоровых животных.

4. Установлено значимое повышение на начальных стадиях патологического процесса числа активированных нейтрофилов в НСТ-тесте и уровень активности МПО по сравнению с контролем, а также повышение уровня активности щелочной и кислой фосфатаз при одновременном выраженном снижении количества катионных белков.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ

1) *Захаров A.A., Карпеева Е.А. Характеристика ферментативной активности нейтрофильных лейкоцитов при экспериментальном бластоцитозе. / A.A. Захаров, Е.А. Карпеева // Вестник Чувашского государственного педагогического университета им. ИЛ. Яковлева -2010.-№4(68).-С. 75-78.

2) *Захаров A.A., Ильина H.A. Морфологические формы бластоцист свиней. / A.A. Захаров, H.A. Ильина // Естественные и технические науки - 2010. - №5(49). - С. 88-90.

3) *Захаров A.A. Оценка кислородзависимой биоцидноста нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии. / A.A. Захаров // Естественные и технические науки-2011. -№1(51). -С. 70-72.

публикации в других изданиях

4) Захаров A.A., Ильина H.A. Морфологическая картина толстой кишки при бластоцистной инвазии. / A.A. Захаров, H.A. Ильина // Сборник научных работ с материалами трудов участников 3-ей Международной телеконференции «Фундаментальные науки и практика» - 2010. - Т. 1. -№4. - С. 90.

5) Захаров A.A., Ильина H.A. Изменение количества лейкоцитов периферической крови при бластоцитозе. / A.A. Захаров, H.A. Ильина // Академический журнал Западной Сибири - 2010. - №3. - С. 17.

6) Захаров A.A., Ильина H.A. Оценка фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов при бластоцитозе. / A.A. Захаров, H.A. Ильина//Молодой ученый-2010.-Т. 1. - №8(19). - С. 182-185.

7) Захаров A.A., Ильина H.A. Изменение микрофлоры толстой кишки при бластоцистной инвазии. / A.A. Захаров, H.A. Ильина // Молодой ученый - 2010. - Т. 2. - №8(19). - С. 193-196.

8) Захаров A.A., Ильина H.A. Клинические проявления бластоцистной инвазии. / A.A. Захаров, H.A. Ильина // Современные наукоемкие технологии - 2010. - №9. - С. 88-90.

9) Захаров A.A. Характеристика фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии. / A.A. Захаров // Экология и медицина: современное состояние, проблемы и перспективы - 2010. -№1. - С. 12-17.

10) Захаров A.A. Динамика количественного содержания нейтрофильных гранулоцитов при экспериментальном бластоцитозе. / A.A. Захаров // Наука и современность -2010.-Ч.1.-С. 13-15.

Подписано в печать 12.05.2011 г. Формат 60x90 1/16 Бумага офсетная. Печать оперативная. Усл.печ.л. 1,2_Тираж 120 экз._Заказ № 978_

Ротапринт Ульяновского государственного Педагогического университета им. И.Н.Ульянова 432700 г.Ульяновск, пл. 100-летия со дня рождения В.И.Ленина, д. 4

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Захаров, Александр Алексеевич

Введение.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Характеристика бактерицидных свойств нейтрофилов.

1.2. Функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов при паразитозах.

1.3. Патофизиологические аспекты бластоцистной инвазии.

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований.

2.1. Материалы исследований.

2.2. Методы исследований.

ГЛАВА 3. Воздействие бластоцист на макроорганизм.

3.1. Характеристика бластоцист.

3.2. Проявления кишечного бластоцистоза у экспериментальных животных.

ГЛАВА 4. Влияние бластоцистной инвазии на функционально-метаболическую активность нейтрофильных гранулоцитов.

4.1. Динамика количественного содержания нейтрофильных гранулоцитов.

4.1.1. Абсолютное количество нейтрофилов.

4.1.2. Показатели относительного количества нейтрофильных гранулоцитов.

4.2. Оценка фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов.

4.2.1. Результаты определения фагоцитарного индекса.

4.2.1.1. Изменение показателей базального фагоцитоза.

4.2.1.2. Динамика уровня стимулированного фагоцитоза.

4.2.2. Характеристика способности фагоцитов к поглощению возбудителя.

4.2.3. Результаты определения завершенности фагоцитоза.

4.3. Оценка кислородзависимой биоцидности нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии.

4.3.1. Результаты определения активности «респираторного взрыва» НСТ-тестом.

4.3.2. Характеристика активности миелопероксидазы.

4.4. Характеристика кислороднезависимой биоцидной системы нейтрофилов.

4.4.1. Уровень щелочной и кислой фосфатазы.

4.4.2. Изменение показателей кислой фосфатазы.

4.4.3. Изменение уровня катионного белка.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.;.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии"

Бластоцисты относят к условно-патогенным микроорганизмам (Белова JI.M., 1992; Zierdt С.Н., 1988). Находясь в кишечнике, они участвуют в формировании микробиоценоза данного биотопа. При снижении резистентности макроорганизма бластоцисты способствуют созданию благоприятных условий для развития патологических процессов (Потатуркина-Нестерова Н.И. с соавт., 2004; Rivera W., Tan M., 2005; Iguchi A. et al., 2007).

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов периферической крови при бластоцистной инвазии.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Выявить роль бластоцистной инвазии в возникновении паразитозов у свиней в Ульяновской области.

2. Получить модель экспериментального бластоцистоза на мышах и изучить динамику количественных показателей периферической крови в динамике развития бластоцистной инвазии.

3. Оценить состояние фагоцитарной активности нейтрофилов на различных этапах бластоцистной инвазии у мышей.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ:

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ:

По материалам диссертационной работы написаны практические рекомендации: Методы исследования функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов. Захаров А., Ильина Н.А., Практические рекомендации. Ульяновск. 2009 г. 17 е., Изменение физиологического статуса макроорганизма (на примере свиней) при бластоцистной инвазии. Захаров А. Практические рекомендации. 2009 г. 25 с.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Результаты работы были представлены на: Международном Форуме по проблемам науки, техники и образования. III тысячелетие - новый мир (Москва, 2008, 2009), Всероссийской заочной электронной научной конференции «Современные проблемы науки и образования» (Москва, 2008), Международном молодежном научном форуме «Университетское образование: традиции и инновации» (Ульяновск, 2009, 2010), III Международной телеконференции «Фундаментальные науки и практика» (Томск, 2010), Международная научная конференция «Приоритетные направления развития науки, технологий и техники» (Москва, 2010), VII международной научно-практической интернет-конференции «Наука и современность» (Новосибирск, 2010), III Международной научно-практической дистанционной конференции «Экология и медицина: современное состояние, проблемы и перспективы» (Москва, 2010).

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация изложена на 132 страницах. Состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Библиография содержит 214 источников, из них 112 отечественных и 102 иностранных. Работа иллюстрирована 8 таблицами и 23 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Захаров, Александр Алексеевич

107 ВЫВОДЫ

1. Установлено, что 82,8% поголовья свиней с кишечными протозоозами заражено простейшими В^госузИБ ярр., что значимо превышает показатели инвазированности всеми остальными группами паразитов.

2. Получена модель экспериментального бластоцистоза мышей, характеризующаяся морфологическими и функциональными изменениями толстой кишки, характерных для неспецифического воспаления, а также увеличения абсолютного и относительного количества нейтрофильных гранулоцитов на высоте патологического процесса.

3. Показано; что период повышения показателей базального и стимулированного фагоцитоза, достигавший максимума на 9-12 сутки, сменялся их депрессией (16 сутки) и повторным подъемом. Показатели стимулированного фагоцитоза даже в период максимальной его активизации не достигали соответствующих величин у здоровых животных.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Захаров, Александр Алексеевич, Ульяновск

1. Антонишкис Ю.А. Сегментация ядер нейтрофилов: новый взгляд на природу явления // Клиническая лабораторная диагностика. 2006. -№8. - С.22-25.

2. Ардатская М.Д., Дубинин A.B., Минушкин О.Н. Дисбактериоз кишечника: современные аспекты изучения проблемы, принципы диагностики и лечения// Терапевтический архив. 2001. - № 2. - С. 72.

3. Арискина О.Б. Функциональная активность мононуклеаров и нейтрофильных гранулоцитов периферической крови как показатель эндогенной интоксикации при травматической болезни: Дис. канд. биол. наук: СПб.: 2005. 201 с.

4. Артемова А.Г. Реакция торможения миграции лейкоцитов в капиллярах// В справочнике «Медицинские лабораторные технологии» / Под ред. А.И. Карпищенко // СПб.: 1999. Т2. - С.302-303.

5. Арутюнян Н.М., Лалаян A.A., Алексанян Ю.Т. Биологические свойства условно-патогенных энтеробактерий выделенных от здоровых и больных людей // Микробиология. 2001. - №2. - С. 124-125.

6. Асадов Ч. Д., Нумерова Л. С Мирзоева М. Э. Связь между фагоцитарной функцией и цитохимическими показателями нейтрофилов крови. //Лаб. дело. 1990. - №3.- 19-21.

7. Асатиани B.C. Ферментные методы анализа // М.: Наука. 1969. - 740 с.

8. Астафьев Б.А. Иммунологические проявления и осложнения гельминтозов. М.: Мед. издат., 2005. - 124 с.

9. Багрянцева О.В. Возможность использования общего анализа крови для диагностики дисбактериоза кишечника, осложненного бактериемией // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2002. - №3. - С.106-110.

10. Белобородова Н.В., Черневская Е.А. Оценка функциональной активности нейтрофилов in vitro у новорожденных с ВПС.// XII Ежегодная сессия НЦ ССХ им. А.Н Бакулева РАМН с Всероссийской конференцией молодых ученых.- 2007.- Т.9.- №3.- С. 152.

11. Белова JI.M. Мировая фауна и морфофункциональная организация бластоцист (Protista, Rhizopoda) // Тр. ЗИН РАН. 1992. - Т.244. - 53 с.

12. Бельмер C.B. Лямблиоз у детей // Русский медицинский журнал. 2004.- Т.12, №3. С.141-143.

13. Бондаренко В.М. «Острова» патогенности бактерий // Микробиология.- 2001. №4. - С.67-74.

14. Бондаренко В.М., Воробьев A.A. Дисбиозы // Микробиология. 2004. -№1. - С.84-92.

15. Бондаренко В.М., Грачева Н.М. Дисбиотические состояния и лечебные мероприятия при них // Вестн. РАМН. 2005. - №12. - С.23-29.

16. Бронштейн A.M., Малышев H.A. Гельминтозы органов пищеварения: кишечные нематодозы, трематодозы печени и ларвальные цестодозы (эхинококкозы) // Российский медицинский журнал. 2004. - №4. -С.208-211.

17. Бухарин О.В., Лобакова Е.С., Немцева Н.В., Черкасов C.B. Ассоциативный симбиоз // Екатеринбург. УрО РАН. - 2007. - 264 с.

18. Верещагин И.А., Стародуб И.С., Скородумова Н.П. Некоторые показатели биохимических и иммунологических сдвигов у детей при лямблиозном ангиохолецистите // Охрана здоровья детей и подростков.- Вып.20. Киев.: Здоров'я, 1989. - С.68-70.

19. Винокуров М.Г., Юринская М.М., Садикова Д.Г., Беляева Т.В., Суликов A.B., Печатников В. А. Действие ионов ртути на респираторный взрыв и регуляцию апоптоза нейтрофилов человека // Цитокины и воспаление. 2002. - Т.1, №2. - С.8.

20. Воробьев A.A., Бондаренко В.М., Лыкова Е.А., Григорьев A.B., Мацулевич Т.М. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция бифидосодержащими пробиотиками // Вестник РАМН. 2004. - №2. - С.13-17.

21. Воробьев A.A., Лыкова Е.А. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции // Микробиология. 1999.- №6. С.102-105.

22. Гасанова Т.А., Ларионов C.B., Хачатуров К.А., Усынина О.С., Щедрина E.H. О некоторых особенностях лабораторной диагностики протозоозов в современных условиях // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2007. - №2. - С. 16-19.

23. Генис Д.Е. Медицинская паразитология // М.: Медицина. 1991. -240 с.

24. Герасимов И.Г., Калуцкая O.A. Кинетика реакции восстановлениянитросинего тетразолия нейтрофилами крови человека // Цитология. -2000.-42 (2). С.160-165.

25. Герасимов Н.Г., Игнатов Д.Ю. Функциональная неравнозначность нейтрофилов крови человека: генерация активных форм кислорода // Цитология. 2001. - Т. 143. - №5. - С.34-36.

26. Городин В.Н., Зотов C.B., Лебедев В.В. Каталазная активность эритроцитов у больных тяжелой формой лептоспироза // Вестник интенсивной терапии. 2000. - №5-6. - С.203.

27. Горчаков A.M., Кручинский Н.Г., Горчакова Ф.Т., Коростелева И.Н. Метод комплексной оценки фагоцитарной активности нейтрофилов крови.// Научно-исследовательский институт экологической и профессиональной патологии.- 2003. Регистрационный №29-0203.-15с.

28. Губжокова Е.Б. Цитохимия катионного белка при острых пневмониях // «Успехи современного ествествознания». 2004. - №1. - С.49.

29. Гумаюнова Н.Г., Потатуркина-Нестерова Н.И., Магомедов М.А. Новые подходы к диагностике кишечного дисбиоза у пациентов с псориатической болезнью // Вестник РУДН. Серия «Медицина». 2009. - №2. - С.93-97.

30. Давыдовский, А.Г. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантные процессы в печени при бактериальной эндотоксемии // Минск. «Holur». - 2004. - 104 с.

31. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз // Екатеринбург. УрО РАН. - 2001. - 284 с.

32. Ефимов Б.А. Характеристика микроорганизмов, колонизирующих кишечник // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии-2002. №5,- С.98-104.

33. Ефимов Б.А., Кафарская Л.И., Коршунов В.М. Современные методыоценки качественных и количественных показателей микрофлоры кишечника и влагалища // ЖМЭИ. 2002. - №4. - С.72-78.

34. Звягинцева Т.Д., Сергиенко Е.И. Дисбактериоз кишечника: клиническое значение и перспективы лечения // Экспериментальная клиническая гастроэнтерология. 2003. - №3. - С.70-74.

35. Зинкин В.Ю., Годков М.А. Способ количественной оценки кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов человека // Клин, и лаб. диагностика. 2004. - №8. - С.26-29.

36. Зурочка В.А. Изучение влияния «Бестима» на различные параметры иммунной системы человека in vitro.// Сборник научных трудов «Интеллектика, логистика, систематология».- Челябинск, 2006.- выпуск 16.- С.125-132.

37. Ириков O.A. Коваленко Ф.П. Экспериментальная модель активированной инфекции Lamblia (Giardia) mûris белых мышей // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2007. - №3. - С. 7-11.

38. Каримова Р.Ш., Бердиев Н.Б. Структурное преобразование нейтрофилов после завершения переваривания микробов при различных видах патологии // Вестник Авиценны. 2006. - №3-4. -С.118-121.

39. Карнаухова Е.Ю. Динамика факторов неспецифической резистентности при дизентерии.// Российский биомедицинский журнал Medline.ru.-2007.- Т.8 (ст. 2).- С.8-17.

40. Киреева H.B. Тактика ведения пациентов с нарушениями микробиоценоза кишечника в сочетании с кожными проявлениями / Материалы шестой международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» // М.: 2005. С.227-228.

41. Киселева Н.М., Арион В.Я., Зимина И.В., Москвина С.Н., Иноземцев А.Н. Тимус и стресс-лимитирующая система.// Аллергология и иммунология,- 2009.- Т. 10.- №3.- С.365-367.

42. Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Клеточные механизмы прайминга и активация фагоцитов // Успехи современной биологии. 1999. - №5. -С.461-474.

43. Козлов С.С., Ласкин A.B. Кишечные простейшие и их роль в патологии желудочно-кишечного тракта человека // С.-Петербург-Гастро. 2006. -№1-2. - С.70.

44. Кравцов А.Л., Шмелькова Т.П., Лоцманова Е.Ю., Клюева С.Н., Щуковская Т.Н. Феномен внеклеточной бактерицидности нейтрофилов и механизмы защиты бактерий от действия лейкоцитарной эластазы // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2007. - №1. - С.49-52.

45. Кратнов А.Е., Бородин А.Г., Кратнов A.A., Углов Е.С., Шилова О.В. Эндотелиальная дисфункция и «окислительный стресс» при нестабильном течении ишемической болезни сердца // Медицинская иммунология. 2005. - Т.7. - №.5-6. - С.569-574.

46. Куваева И.Б., Ладодо К.С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей // М.: Медицина. 1991. - 240 с.

47. Кудрин A.B., Скальный A.B., Жаворонков A.A., Громова O.A.// Иммунофармакология микроэлементов.- КМК «Москва».- 2000.- 540 с.

48. Кульберг А .Я. Рецепторы клеточных мембран // М.: Высш. шк. 1987. -103 с.

49. Куропатенк М.В., Бандурина Т.Ю., Безушкина H.A. Паразитозы, лямблиоз и аллергические заболевания в детском возрасте // РМЖ. -2003. №3. - С.3-6.

50. Лысенко А.Я., Владимова М.Г., Кондрашин A.B. Клиническая паразитология // Женева. 2002. - С.65-66.

51. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге // Новосибирск : Наука. 1989. - 340 с.

52. Маянский А.Н., Маянский H.A., Заславская М.И., Позднеев Н.М., Плескова С.Н. Апоптоз нейтрофилов // Иммунология. 1999. - №6. -С. 11-20.

53. Мирошник O.A., Редькин Ю.В. Иммуномодуляторы в России.// Справочник.-Омск.- 2004.- 343 с.

54. Моисеева Е.Г. Исследование действия ИЛ-4 на функциональные свойства нейтрофилов. //Вестник РУДЫ.- 2006.- №3 (35), С.65-68.

55. Моисеева Е.Г., Пасечник A.B., Дроздова Г.А., Фролов В.А. Возможные механизмы регуляции апоптоза нейтрофилов при аллергическом воспалении. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.// 2007,- Т. 141.- №3.- С.273-275.

56. Нагоев Б.С., Абидов М.Т., Нагоева М.Х. Состояние лизосомального катионного белка и активности миелопероксидазы у больных ангинами различной этиологии // Успехи современного естествознания. 2005. -№7.-С.40-41.

57. Никанкина Л.В., Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В. Различия в активности НАДФН-оксидазы лейкоцитов новорожденных и взрослых доноров // Иммунология. 2001. - №4. - С.29-32.

58. Никулин Б.А. Оценка и коррекция иммунного статуса // М. ГЭОТАР-Медиа. - 2007. - 376 с.

59. Новицкий В.В. Дизрегуляционная патология кроветворной и иммунной систем при инфекционном процессе / В.В. Новицкий, О.И. Уразова // Успехи физиологических наук,- 2004.- Т.35.- №1.- С.43-52.

60. Озерецковская H.H. Органная патология в острой стадии тканевых гельминтозов: роль эозинофилии крови и тканей, иммуноглобулинемии Е, G4 и факторов, индуцирующих иммунный ответ // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2000. - № 3. - С.3-8.

61. Онищенко Г.Г. Заболеваемость паразитарными болезнями в

62. Российской федерации и основные направления деятельности по ее стабилизации // Медицинская паразитология. 2002. - №4. - С.3-102.

63. Орлова Е.Г., Ширшев C.B. Модуляция лептином функциональной активности нейтрофилов и моноцитов периферической крови женщин.// Журнал «Цитокины и воспаление».- 2007.- Т.6.- №3.- С.44.

64. Отраслевой Стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» / ОСТ91500.11.0004-2003 // Приказ МЗ РФ №231 от 09.06. 2003.

65. Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов // Постановление Главного государственного санитарного врача РФ. 25.02.1999. - МУК №4.2.735-99.

66. Парфенов А.И. Синдром раздраженного кишечника. В кн.: Избранные главы клинической гастроэнтерологии / Под ред. Лазебника Л.Б // М.: Анахарсис. 2005. - С.272-276.

67. Пасечник A.B., Фролов В.А., Моисеева Е.Г. Анализ воспалительного процесса в параметрах функции нейтрофилов // Вестник РУДН. 2001. - №3. - С.33-37.

68. Пикуза О.И., Маянский А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза // Казань: Магариф. 1993. - 192 с.

69. Черноголовка. 2007. - С.304.

70. Постникова Е.А., Пикина А.П., Кафарская Л.И., Ефимов Б.А. Изучение качественного и количественного состава микрофлоры кишечника у клинически здоровых детей в раннем возрасте // Микробиология. -2004. №1. - С.62-67.

71. Пыльцев М.А. Введение в молекулярную медицину // М.: Медицина. -2004. - 496 с.

72. Радаева O.A., Новикова Л.В. Провоспалительные цитокины и нейтрофильные гранулоциты при эссенциальной артериальной гипертензии // Материалы межрегиональной научной конференции «Актуальные проблемы медицинской науки и образования». Пенза. -2007. - С.86.

73. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica // М.: МедиаСфера. -2002.-312 с.

74. Романенко H.A., Малышева Н.С. Среда обитания человека и паразитарные болезни // М.: 2002. 63 с.

75. Савицкая К.И., Мельникова Е.Ф., Воробьев А.А., Загальская Н.В. Оценка микроэкологии содержимого толстой кишки у больных хроническим панкреатитом // Вестник Рос. АМН. 2002. - №4. - С.20-23.

76. Сальникова С.И. Фармакотерапия гельминтозов у детей // Российские аптеки. 2006. - №6. - С.33-35.

77. Сахарова Т.В., Гордеева J1.M., Сергиев В.П. Изучение морфологии бластоцист низших обезьян с помощью световой микроскопии // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1997. - №2. -С.24-27.

78. Семенова Н.Н., Колчина А.Ф. Иммунотропные свойства препарата «Пребиостим»// Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных: матер. Междунар. науч.-произв. конф.-Воронеж.- 2006.- С.977-982.

79. Сергеев В.П., Лобзин Ю.В., Козлов С.С. Паразитарные болезни человека (протозоозы и гельминтозы) // Руководство для врачей. -СПб.: 2006. 586 с.

80. Сергиев В.П., Лебедева М.П., Фролова А.А. Паразитарные болезни человека, их профилактика и лечение // Эпидемиол. и инф. болезни. -1997. №2. - С.8-12.

81. Сидоренко Н.В., Филимонов Н.Ю., Анацкая О.В., Свежова Н.В., Бейер Т.В. Реакция клеток паренхимы печени крыс на заражение кишечным протозойным патогеном Cryptosporidium parvum (Sporozoa, Coccidia) // Цитология. 2004. - T.46, №2. - С. 114-124.

82. Славинский А.А., Никитин Г.В. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов: миелопероксидаза // Клин. лаб. диагностика. 2000. - №1. - С.21-24.

83. Справочник «Медицинские лабораторные технологии» / Под ред. А.И. Карпищенко // СПб.: 1999. Т.2. - 656 с.

84. Тарасов А.Е., Яременко М.О. Фагоцитарно-клеточная защита у больных с ожоговой травмой на фоне применения иммуномодулятора «тинростим».// Современные наукоемкие технологии.- 2005.- №7.-С.58-59.

85. Тарасов, А.Е., Яременко М.О., Григорян B.C. Состояние фагоцитарной активности нейтрофилов мышей при экспериментальной ожоговой травме.// Фундаментальные исследования.- 2004.- №4.- С.86.

86. Тельнюк Я.И., Сетдикова Н.Х., Карсонова М.М. Особенности иммунной системы больных хроническим рецидивирующим фурункулезом и влияние на нее иммунотропной терапии.// Иммунология.- 2003.- №1.- С.20-23.

87. Токмалаев А.К. Гельминтозы человека // Русский медицинский журнал. 2001. - Т.9. - №16-17. - С.690-693.

88. Торопова Н.П., Градинаров A.M., Сафронова H.A. Атопический дерматит и лямблиоз у детей // Республиканская конференция «Медицинская и социальная реабилитация детей-инвалидов, страдающих дерматозами» Тезисы докладов. Екатеринбург. - 1995. -С.43.

89. Торопова Н.П., Сафронова H.A., Гордеева JI.M. Паразитарная фауна кишечника у детей, страдающих атопическим дерматитом: Аспекты диагностики и патогенеза // Российский журнал кожных и венерических болезней. 1998. - №2. - С.27-32.

90. Умаров Ш.Р., Мадалиев И.Н. Каримова Р.Ш. Особенности влияния Echinococcus granulosis на течение стадии завершенности фагоцитарного процесса при эхинококковой болезни.// Вестник АН РТ.- 2008.-№1.- С.73-78.

91. Фрейдлин И.С., Чернова A.A., Старикова Э.А., Бурова JI.A. Влияние лизатов стрептококков разной вирулентности на функциональную активность моноцитоподобных клеток ТНР-1// Аллергология и иммунология.- 2009.- Т. 10.- №3.- С.393-394.

92. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология.// М.: Медицина.- 2000.- 432 с.

93. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные представления о защите организма от инфекции. //Иммунология. 2000. - № 1. - С.61-64.

94. Иммунная система человека от защиты к патологии / А. П. Цибулькин // Казанский медицинский журнал. — 2006. — Том 87,N 1 . — С. 1-7.

95. Хитрик Н.М., Малашенкова И.К. Состояние фагоцитарной функции нейтрофилов у больных вирусом простого герпеса.// Материалы II международной научной конференции «Современные аспекты реабилитации в медицине» Ереван.- 2005.- С.375.

96. Циммерман Я.С. Дисбиоз (дисбактериоз) кишечника и/или «синдром избыточного бактериального роста» // Клиническая медицина. 2005. -№4. - С. 14-22.

97. Циммерман Я.С. О сущности понятия «дисбактериоз» («Дисбиоз кишечника») и о правомерности использования этого термина // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. 2000. - №1. - С.81-84.

98. Чайка Н.А. Бластоцистоз и СПИД // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1992. - №4. - С.48-51.

99. Ш.Шилов Ю.И., Орлова Е.Г. Адренергические механизмы регуляции функций фагоцитирующих клеток периферической крови крыс при остром стрессе.// Медицинская иммунология.- 2002.- Т.4.- №1.- С.29-36.

100. Akao N., Ohyama Т., Ohkawa Т., Kondo K., Hirokawa Y., Ito S., Takeguchi A., Matsuzaki M. A survey of intestinal parasites of the foreign labrers (Indonesians and Filipinos) in Ishikawa Prefecture // Kansenshogaku Zasshi.- 1992. Vol.66. - P.1256-1261.

101. Albrecht H., Stellbrink H.J., Koperski K., Greten H. Blastocystis hominis in human immunodeficiency virus related diarrhea // Scand. J. Gastroenterol.- 1995. Vol.30. - N9. - P.909-914.

102. Almeida M.M., Arede C., Marta C.S., Pinto P.L., Daniel I., Peres I., Nogueira J.A., Pinto J.R. Atopy and enteroparasites // Allergie et Immunologic. 2001. - Vol.30, N9. - P.291-294.

103. Amin A.M. B. hominis among apparently healthy food handlers in Jeddan // J. Egypt.Soc.Parasitol. 1997. - Vol.27. - P.817-823.

104. Arienti H. Prevalence of enteroparasites in a residence for children in the Cordoba Province, Argentina // Eur. J. Epidemiol. 2000. - Vol.16. - P.287

105. Aucott J.N., Ravdin J.I., Omobing N., Moore M., Eotu H., Ettari G. Amebiasis and "nonpathogenic" intestinal protozoa // Infect Dis Clin North Am. 1993. - Vol.7. - N3. - P.467-485.

106. Boreham P., Stenzel D. Blastocystis in human and animals: morphology, biology and epizootiology // Adv. Parasitol. 1993. - Vol.32. - P.61-70.

107. Brites C., Barberino M.G., Bastos M.A. Blastocystis hominis as a potential cause of diarrhea in AIDS patients // Braz. J. Infect. Dis. 1997. - Vol.1. -N2. - P.91-94.

108. Brumpt E. B. hominis, sp. et formes voisines // Bull. Soc. Pathol. Exot. -1912. Vol.5. - P.725-730.

109. Carbajal J.A., del-Castillo L., Lanusa M.D., Villar J., Borras R. Karyotypic diversity among B. hominis isolates // Int. J. Parasitol. 1997. - Vol.27. - N8.- P.941-945.

110. Cassidy M., Stenzel D., Boreham P. Electron microspory of surface structures of Bastocystis spp. from different hosts // Parasitology. 1994. -Vol.80.-P.505-511.

111. Church D.L., Sutherland L.R., Gill M.J., Visser N.D., Kelly J.K. Absence of an association between enteric parasites in the manifestations and pathogenesis of HIV enteropathy in gay man // Scand. J. Infect. Dis. 1992.- Vol.24. N5. - P.567-575.

112. Cimerman S., Cimerman B., Lewi D.S. Prevalence of intestinal parasitic infections in patients with acquired immunodeficiency syndrome in Brazil // Int. J. Infect. Dis. 1999. - Vol.3. - N4. - P.203-206.

113. Cirioni O., Giacometti A., Drenaggi D., Ancarani F., Scalise G. Prevalence and clinical relevance of Blastocystis hominis in diverse patient cohorts // Eur. J. Epidemiol. 1999. - Vol.15. - P.389-393.

114. Clark C.G., Diamond L.S. Methods for cultivation of luminal parasitic protists of clinical importance // Clinical Microbiology Reviews. 2002. -Vol.15.-P.329-341.

115. Cotte C., Blum J. Hymenolepis nana. 45-year-old refugee from the Kosovo region with epigastric pain and detection of Hymenolepis nana and Blastocystis hominis in the stool // J. STD AIDS. 1993. - Vol.10. - P.780-784.

116. Debat Zoguereh. Postcystis development of Blastocystis hominis // Parasitol. Res. 1995. - Vol.85. - P.437-440.

117. Devera R., Azacon B., Jimenez M., Puños G.N., Velasquez V.J., Catenese J.A., Meneses R.G. Blastocystis hominis in patients at the Ruiz y Paez University Hospital from Bolivar City, Venezuela // Bol. Chil. Parasitol. -1998. Vol.53. - P.65-70.

118. Devera R., Requena I., Velásquez V., Castillo H., González R. Cerdos como reservorios de Blastocystis spp. en una comunidad rural del Estado Bolívar, Venezuela // Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. 1999. -Vol. 17. - P.422.

119. Doyle P.W., Helgason M.M., Russo A.R., Stoun S.L., Taplin M.E. Epidemiolodgy and pathogenicity of Blastocystis hominis // J. Clin. Microbiol. 1990. - Vol.28. - P.115-121.

120. Duda A., Stenzel D.J., Boreham P.F., Shiotani A., Graham D.Y. Detection of Blastocystis sp. in domestic dogs and cats // Vet. Parasitol. 1998. -Vol.31.-P.9-17.

121. Eckburg P.B., Bik E.M., Bernstein C.N. Diversity of the human intestinal microbial flora // Scince. 2005; 308. - P. 1635-1638.

122. Escobedo A., Nunez F.A. Blastocystis hominis infection in Cuban AIDS patientis //Med. Inst. Oswaldo Cruz. 1997. - Vol.92. - N3. - P.321-322.

123. Garavelli P. Blastocystis: a new disease in the acquired immundeficiency syndrom//Int. S. STD. AIDS. 1990. - P.134-135.

124. Garavelli P., Scaglione L., Rossi M., Bicocchir R., Libanere M. Blastocystis: a new disease in patients with leukemia // Haematologica. 1991. - Vol.76. -P.76-80.

125. Garavelli P., Scaglione L., Bicocchir R., Libanere M. Genomic polymorphism among B. hominis strains and development of subtype-specific diagnostic primers // Mol. Cell. Prob. 1998. - Vol.12. - N3. -P.153-159.

126. Gelfand J.M., Troxel A.B., Lewis J.D., Kurd S.K., Shin D.B., Wang X., Margolis D.J., Strom B.L. The risk of mortality in patients with psoriasis: results from a population-based study // Arch. Dermatol. 2007. - 143(12). - 1 P.1493-9.

127. Goldsby R.A. Immunology (5th Edition).// W.H. Freeman & Company.-2002.- P.39.

128. Guignard S., Arienti H., Freyre L., Lujan H., Rubinstein H., Frasi M. Prevalence of enteroparasites in a residence for children in the Cordoba province, Argentina//European Journal of Epidemiology. 2000. - Vol. 16.1. P.287-293.

129. Horiki N., Maruyama M., Fujita Y., Yonekura T., Minato S., Kaneda Y. Epimiologic survey of Blastocystis hominis infection in Japan // American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. 1997. - Vol.56. - P.370-374.

130. Horton J. Treatment of parasitic diseases // Parasitology. Cambridge University Press. - 2000. - P. 113.132.

131. Hunter J.O., Madden J.A. A review of the role of the gut microflora in irritable bowel syndrome and the effects of probiotics // Br.J.Nutr. 2002. -88(suppl.l). - P.67-72.

132. Jayathirtha M.G., Mishra S.H. Preliminary immunomodulatory activities of methanol extracts of Eclipta alba and Centella asiatica.// Phytomedicine.-2004.-Vol.ll.-P.361-365.

133. Jeddy T.A., Farrington G.H. Blastocystis hominis complicating ulcerative colitis // J. Soc. Med. 1991. - Vol.84. - P.623.

134. Jelinek T., Peyerl G., Loscher T., von Sonnenburg F., Nothdurft H.D. The role of Blastocystis hominis as a possible intestinal pathogen in travelers // J. Infect. 1997. - Vol.35. - P.63-66.

135. Kain K.C., Noble M.A., Freeman H.J., Barteluk R.L. Epidemiology and clinical features associates with B. hominis // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. -1987. Vol.8. - P.234-244.

136. Keenan T.W., Huang C.M., Zierdt C.H. Comparative analysis of lipid composition in axenic strains of Blastocystis hominis // Comparative Biochemistry and Phisiology. 1992. - Vol.102. - P.611-615.

137. Keenan T.W., Zierdt C.H. DNA polymorphism reveales by arbitrary primers polymerase chain reaction among Blastocystis strains isolated from humans, achicken and a reptile // J. Eukaryot. Microbiol. 1996. - Vol.43. - N2. -P.127-130.

138. Keenan T.W., Zierdt C.H. Lipid biosynthesis by axenic strains of Blastocystis hominis // Comparative Biochemistry and Physiology. 1994. -Vol.107. -P.525-531.

139. Kelly D., Conway S., Aminov R. Commensal gut bacteria: mechanism of immune modulation // Trends Immunol. 2005. - Vol.26. - P.326-333.

140. Kobayashi J., Hasegawa H., Forli A.A., Nishimura N.F., Yamanaka A., Shimabukuro T., Sato Y. Prevalence of intestinal parasitic infection in five farms in Holambra, San-Paulo, Brazil // Rev. Inst. Med. Trop. 1995. -Vol.37.-P.13-18.

141. Konig G. B. hominis in animals: incidence of four serogroups // Zentral. Bacteriol. 1997. - Vol.286. - N3. - P.435-440.

142. Kruger K., Kamilli I. B. hominis als seltener arthritogener Erreger // Z. Rheumatol. 1994. - Vol.53. - N2. - P.83-85.

143. Labro M.T. Antiinflammatory activity of macrolides: a new therapeutic potential?//J. Antimicrob. Chemother. 1998. - 41(suppl. B). - P.37-46.

144. Lakhanpal S., Cohen S.B., Fleischmann R.M. Reactive arthritis from Blastocystis hominis // Arthritis and Rheumatism. 1991. - Vol.34. - P.251-253.

145. Landry P., van Saanen M. Routine cases in intestinal parasitology // Schweiz Med. Wochenschr. 1997. - Vol.29. - P.535-540.

146. Lanusa M.D. Description of an improved metod for B. hominis culture and axenization // Parasitol. Res. 1997. - Vol.83. - N1. - P.60-63.

147. Loppnow H., Werdan K., Buerke M. Invited review: Vascular cellscontribute to atherosclerosis by cytokine and innate-immunity-related inflammatory mechanisms // Innate Immunity. 2008. - 14(2). - P.63-87.

148. Mac Pherson D.W., Mac Gueen W.M. Morphological diversity of B. hominis in sodium acetate-acetic acid-formalin-preserved stool samples stained with iron hematoxylin // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol.32. - N1. -P.267-268.

149. Maggi P., Brandonisio O. Intestinal protozoa in HIV-infected patients in Apulia, South Italy // Epidemiol Infect. 1999. - Vol.123. - P.457-462.

150. Mansour M.J., Poucell S., Patherton J., Valencia P. The B. hominis II New York. 1995. - 236 p.

151. Mathewson I.I., Salameh B.M., DuPont G.L., Jaing Z.D., Nelson A.S., Arduino R. Variation in the cysts morphology of B. hominis // Parasitol. Res. 1998. - Vol.83. - P.306-308.

152. Matsumoto I., Iamada M., Ioshida I. Light microscopical appearance and ultrastructure of B.hominis, an intestinal parasite of man // Zentral. Bakteriol. Mikrobiol. Hyg. 1987. - Vol.264. - P.379-385.

153. Mercado R., Arias B. Blastocysts hominis: frequency of infection in ambulatory patients from the northern section of Santiago, Chile // Bol. Chil. Parasitol. 1991. - Vol.46. - P.30-32.

154. Mercado R., Otto J., Perez M., Jimenes M. Seasonal variation of intestinal protozoa infections in outpatients of the north section of Santiago, Chile // Bol. Chil. Parasitol. 1999. - Vol.54. - P.41-47.

155. Moe K.T. Development of Blastocysts hominis cysts into vacuolar forms in vitro // Parasitol Res. 1997. - Vol.85. - N2. - P. 103-108.

156. Moe K.T., Singh M., Gopalakrishnakone P., Ho L.C., Tan S.W., Chen X.Q., Yap E.H. Cytopathic effect of Blastocystis hominis after intramuscular inoculation into laboratory mice // Parasitology Research. 1998. - Vol.84. -P.450-454.

157. Monis P.T., Andrews R.H., Saint C.P. Molecular biology techniques in parasite ecology // International Journal for Parasitology. 2002. - Vol.32. -P.551-562.

158. Muller H.E. Four serologically different groups within the species Blastocystis hominis //Zentralbl. Bakteriol. 2003. - Vol.280. - P.403-408.

159. Nagler J., Brown M. Blastocystis hominis in inflammatory bowel disease // J. Clin. Gastroenterol. 1993. - Vol.16. - N2. - P.109-112.

160. Ng G.C., Ho L.C., Singh M., lap A.L., Moe K.T. Axenic culture of Blastocystis isolates in monophasic medium and speciation by karyotypic typing // Parasitol. Res. 1996. - Vol.82. - N2. - P. 165-169.

161. Nijsten T., Rolstad T., Feldman S.R., Stern R.S. Members of the National Psoriasis Foundation: more extensive disease and better informed about treatment options // Arch Dermatol. 2005. - Jan;141(l) P.19-26.

162. Nimri L., Batchoun R. Intestinal colonization of symptomatic and asymptomatic schoolchildren with Blastocystis hominis // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol.32. - P.2865-2876.

163. Pakand M. Occurrence of Blastocystis sp. in pigs // Parasitol. Res. 1991. -Vol.38. - N4.-P.297-301.

164. Perez de Suarez E., Guzman de Rondon C. Morphology of B. hominis in feces and evaluation of parasitological methods I I GEN. 1994. - Vol.48. -N4. -P.226-231.

165. Philips B.P., Zierdt C.H. Blastocystis hominis: pathogenic potential in human patients and in gnotobiotes // Exp. Parasitol. 1976. - Vol.39. -P.358-364.

166. Rajah S.H., Suresh K.G., Vellayan S., Mak J.W., Khairul Anuar A., Init I., Vennila G.D., Saminathan R., Ramakrishnan K. Blastocystis in animal handlers // Parasitol. Res. 1999. - Vol.85. - P. 1032-1033.

167. Sherchand J.B., Larsson S., Shrestha M.P. Intestinal parasites in children and adults with and without abdominal discomfort from the Kathmandu area of Nepal // Trop. Gastroenterol. 1996. - Vol.17. - P.15-22.

168. Sherchand J.B., Larsson S., Shrestha M.P. Intestinal parasites in children and adults with and without abdominal discomfort from the Kathmandu area of Nepal // Trop. Gastroenterol. 1996. - Vol.17. - P.15-22.

169. Shlim D. Blastocystis hominis in Kathmandu, Nepal // N. Engl. J. Med.1995. -Vol.28. -P.1419.

170. Singh M., Ho L.C., Yap A.L., Ng G.C., Tan S.W., Moe K.T., Yap E.H. Axenic culture of reptilian Blastocystis isolates in monophasic medium and speciation by karyotypic typing // Parasitology Research. 1996. - Vol.82. -P.165-169.

171. Singh M., Suresh K., Ho L.C., Ng G.C., Yap E.H. Elucidation of the life cycle of the intestinal protozoan Blastocystis hominis // Parasitology Research. 1995. - Vol.81. - P.446-450.

172. Soledad Gomez M., Gracenea M., Montoliu I., Feliu C., Monleon A., Fernandez J., Ensenat C. Intestinal parasitism protozoa and helminthes - in primates at the Barcelona Zoo // J. Med. Primatol. - 1996. - Vol.25. - P.419-423.

173. Stenzel D.J., Boreham P.F. B. hominis revisited // Clin. Microbiol. Rev.1996. Vol.9. - N4. - P.563-584.

174. Stenzel D.J., Boreham P.F., McDougall R.M. Ultrastructure of Blastocystis hominis in human stool samples // International Journal for Parasitology. -1991.-Vol.21.-P.807-812.

175. Sui J., Leighton S., Busta F. 16S ribosomal DNA analysis of faecal lactobacilli composition of human subjects consuming a probiotic strain Lactobacillus acidophilus NCFM // J Appl Microbiol. 2002; 93(5). - P.907-912.

176. Suresh K., Chong S.Y., Howe J., Ho L.C., Ng G.C., Yap E.H., Singh M. Tubulovesicular elements in Blastocystis hominis from the caecum of experimentally-infected rats // International Journal for Parasitology. 1995. - Vol.25.-P.123-126.

177. Suresh K., Howe J., Chong S.Y., Ng G.C., Ho L.C., Log A.K., Ramachandran N.P., Yap E.H., Singh M. Ultrastructural changes during in vitro encystment of Blastocystis hominis // Parasitology Research. 1994. -Vol.80. - P.327-335.

178. Suresh K., Howe J., Ng G.C. A multiple fission-like mode of asexual reproduction in B. hominis II Parasitol. Res. 1994. - Vol.80. - N6. - P.523-527.

179. Suresh K., Ng G.C., Ramachandran N.P., Ho L.C., Yap E.H., Singh M. In vitro encystment and experimental infections of Blastocystis hominis // Parasitology Research. 1993. - Vol.79. - P.456-460.

180. Tan H.K., Zierdt C.H. Ultrastructure of Blastocystis hominis // Zeitschrift fur parasitenkunde. 1996. - Vol.42. - P.315-324.

181. Tan S.W., Singh M. Clonal growth of B. hominis in soft agar with sodium thiogly collate // Parasitol. Res. 2002. - Vol.82. - N8. - P.737-739.

182. Temmreman R. Identification and antibiotic susceptibility of bacterial isolates from probiotic products // Int J Food Microbiol. 2003. - Vol.81(l). -P.l-10.

183. Vdovenko A.A. Blastocystis hominis: origin and significance of vacuolar ( and granular forms // Parasitol. Res. 2000. - Vol.86. - P.8-10.

184. Villar D.J., Boreham P.F., McDoygall R. Ultrastructure of B. hominis inhuman stool samples // Int. J. Parasitol. 1998. - Vol.21. - N7. - P.807-812.

185. Yoshikawa H., Abe N., Iwasawa M., Kitano S., Nagano I., Wu Z., Takahashi Y. Genomic analysis of Blastocystis hominis strains isolated from two long-term health care facilities // J. Clin. Microbiol. 2000. - Vol.38. -P.1324-1330.

186. Yoshikawa H., Hayakawa A. Freeze-frature cytochemistry of membrane cholesterol in B. hominis II Int. J. Parasitol. 1996. - Vol.26. - P.l 111-1114.

187. Yoshikawa H., Nagano I., Wu Z., Yap E.H., Singh M., Takahashi Y. Genomic polymorphism among of Blastocystis hominis strains and develpment of subtype-specific diagnostic primers // Mol. Cel. Probes. -1998. Vol.12. -N3. - P.153-159.

188. Zaki M., Manzoor M., Howe J., Ng M. Postcystis development of Blastocystis hominis //Parasitol.Res. 1994. - Vol.85. - P.437-440.

189. Zaman V., Howe J., Ng M. Zaki M., Manzoor M. Variation in the cyst morphology of Blastocystis hominis // Parasitol Res. 1997. - N3. - P.306-308.

190. Zaman V., Howe J., Ng M., Zaki M., Manzoor M. Ultrastructure of Blastocystis hominis cysts // Parasitol Res. 1995. - N6. - P.465-469.

191. Zdero M. Parasitosisen una peblacion adulta con trastornos gastrointestinales cronicos // Acta Gastoenterol. Latinoam. 1997. - Vol.27. - P.67-73.

192. Zierdt C.H., Rude W.S., Bull B.S., Echeverría P., Blaser M.J., Pitarangsi C., Blacklow N., Cross J. Protozoan characteristics of B. hominis // Am. J. Clin. Pathol. 1967. - Vol.48. - P.495-501.

193. Zierdt C.H. Blastcystis hominis an intestinal protozoa parasite of man // Publ. Hlth. Lab. 1973. - Vol.36. - P.147-161.

194. Zierdt C.H. Ultrastructure and light microscope appearance of B. hominis in a patient with enteric // J. Parasitenk. 1978. - Vol.50. - P.277-283.

195. Zierdt C.H. Blastocystis hominis, a longmisunderstood intestinal pathogen // Parasitol. Taday. 1988. - Vol.4. - P. 15-19.

196. Zierdt C.H. B. hominis past and future // Clin. Microbiol. Rev. - 1991. -Vol.4. - P.61-79.

Информация о работе

Захаров, Александр Алексеевич
кандидата биологических наук
Ульяновск, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы