Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И АЦИЛАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ УГЛЕВОДОРОДОКИСЛЯЮЩИХ МИКРООРГАНИЗМОВ В ПОЧВАХ АРМЯНСКОЙ ССР

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И АЦИЛАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ УГЛЕВОДОРОДОКИСЛЯЮЩИХ МИКРООРГАНИЗМОВ В ПОЧВАХ АРМЯНСКОЙ ССР"

. АКАДЕМИЯ НАУК АРМЯНСКОЙ ССР ОТДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

На правах рукописи

ХАЧАТУРЯН АННА АРШАВИРОБНА

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И АЩЯЛЗНАЯ

АКТИВНОСТЬ УГЛЯВОДОРОДОКИСЛЯЮОЩ МИКРООРГАНИЗМОВ В ПОЧВАХ А КОНСКОЙ ССР

Диссертация на русском языке { 03.00.07-микробиология)

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ереван - 1972

o

АКАДЕМИЯ НАУК АРМЯНСКОЙ ССР ОТдаЯЕШЗ -БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

На правах рукописи

ХАЧАТУРЯН АННА АРШАВИРОБЙА '

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И АШЛАЗНАЯ

АКТИВНОСТЬ Я'ЛЛВОДОРОДСКИСиШШЖ МЖРООРГАШЗМОВ В ПОЧВАХ АЙШСКОЙ ССР

Диссертация на руссксм языке ,(03.00.07-микробиология)

Автореферат

диссертации на соискание учзной степени кандидата биологических наук

ШШГ

Ереван - 1972

:*' Работа выполнена в Лаборатории спорообразумок бактерий :, Института микробиология Академии Наук Армянской ССР. ^ - V ."

Научный руководитель- - ■■/ -г ■: •- ■

: доктор биологических наук Э.К.Африкян

■ Официальные'оппоненты:. ■'

• доктор биологических наук, профессор Л.Г.Логитва

' доктор биологических наук, .'-> заел.деят.науки Арм.ССР . ■ - Ф.Г.Саруташт

Ведущее предприятие - Институт вдкробисдогиии вирусологии: , им.акад.Д.К.Заболотиого АН УССР ;"'.-":

-: Работа состоит из 6 глав, изложенных яа 152 страницах, -включающих 20 таблиц и .16 рясушов, из 20 приложений и J списка литературы, "содержащего; 324 названия, в том числе ~-220 работ отечостленшх авторов. \ Л-': 'о-

■■'-■'>■ - Автореферат- разослав 1972г. .

• Защита состоится "

и- yJt/jfq/Щ 1973г. на заседании-"Ученого Совета К 2 Отделения Биологических Наук АН Арм.ССР. ."/

. ■ С-диссертацией ысшю озиакомитьсяв библиотеке Отдаления -."- : Биологических наук АН Арм.ССР (Ереванj ул.Пушкина, 12)

v ..'л

; -.Отзывы направлять по адресу: г.Ерепан-I, ул.Абовяна,15, Kots.JJ 1?, Ученому секретарю Совета it 2 Отделения Биологических Нэз-тс АН Apr..ССР т.Чубаряну Т.Г. ■."'"■:....■ ;- ..

jr4Qiiiitl секретарь Соьета. кандидат с.х.наук Т.Г.Чубарян

'""'-Г'/"В в V дV н в е.;::~ •|ч-•

.'.;.-. 'За передние года достигнуты исключительно'важные успехи в' •• • ~ области использования микроорганизмов для 1фомшленного произ- ] : > •';. -'• • водства белков, витаминов, антибиотиков; гормонов"и"Другюгпран-

" - тячееки гошшх: продуктов^ Особый интерес в этом .отношении - првд-* ^.;; 7": --'

ставляет: пршданенив .микроорганизмов .усваивающих углеводорода^ ; " "-- нзфти'и природных гаэов. В нашейстраневпервые :организовано I;'■ ~промышленное производство в крупных масштабах, белжово-витамин- V •

- них кондантратов на сырьевое Сазе продуктов нефти, й эта* от-..-..?. • = • . радиопромышленности развивается усиленными темпами. . •' . .'. _ У,/".' • • г' • В настоящее.время ведутся интенсивные работа по' получению,! *.-•;_• *• : ... ."с помацью углеводородокисляющих микроорганизмов многих Зизио- (-/.-"„у ' ' „ "-'' логически активных соединенийаминокислот (Коротчвнко и"др. ,\ . " 1965; Иерусалимский и др.", 1966; Самойлов и др., 1967; Квасников." -; . . И др. ,1967; 1^»ИГ0рян,~ Горская,1970; ТаквЬааЭД «Ь а!.,1963; •'

в1*.1565, .19661 ЗЬаЬ »г а1.,1957 ^), витаминов'и гормо- \ -- • • нов (Бобкова,19&5; Чепиго и др.,1967; Перцовская, 5роиин,1967;..

г .. Квасников а др., 1967; Робышева; Дшшнская, 1969; т«швка, Тики^., *'\ • • : ; 1957; Н1го»ы> Тик1има,19&9), антибиотиков'(Поморцева,1965; • ..:/'.'

:'Савченко, Гаркавенко,1968; Позмогова,197I), а,ферментов (Новикова идо.,1969; Квасников, Тыньянова,1970; такаЬмЫ.«« >1»'-,° .1963).'Многие;исследования в этой области носят поисковый ха-

рактер, но они, несомненно, заслуживают большого;внимания^В;: • ->^

■ V - * -.■

( л.

этсм направлении-весьма,перспективными является работы по__. " ■ .' ч пользованию углеводородокисляющих бактерий для; получения, дан-^" ,-

.: ' ных ферментов. Особенно важное ■ значение'может иметь получение\ ; ■ тг > микробных ацилаз для оргагаэации хишжо-к^обиологичаского . ] '•''•. С ' - производства.аминокислот и других веществ. ■ ■': ." - • .. •• • ';.' -•' / Ч - "г: В Армянской ССР ранее не проводалось работ по выявлении и Л"; V. :.,.".•'-

. изучение углеводородркислявдих микроорганизмов.. Вместе с тем в . ' О-' этой горной республике;" благодаря ¡резкой пересеченности ре льет " ; фа, на небольшой территории имеются разнообразные эколого-кли- |: ' ' матичвекив условия, в разных высотных зонах резко варьирует ~

* климат, характер почвенного и растительного покрова.•Поэтому д).'4 • -а здесь существует.'большая вероятность нахождения разнообразных . --'"-.' пггайлов микроорганизма, которые, наряду"с другими полезными ' ? , '

.•V'"• г-.'

■ ' - ;г . •.:

свойствами, .будут обладать способность» ^окислять углеводородыУ-с образованием биологически активных метаболитов. - -;-; ^ " В результате'проведенных исследований нами были изучены . - у распространение-ибиологическиа особенности углеводородокисля— ющкк иггамаов ^ микроорганизмов V относящихся к в«в 1«г1ша ^ Мусо- "-. ъасгвтАим; Ао11п1луо«в и по который лругим формам шщроорга-ч нлзмов.* Морфо^физиологическая характеристика згих штаммов, по— служимая основой для ихидектифпкации,1 показала; что "углево-^: дородокисляющив свойства приурочены к отдельным категориям и в ряде случаев могут служить подспорьем дляопре деления видовой принаглежмости микроорганизмов. Ряд выделенных штаымов описи- • ваетсянами как новые' разновидности и.вида! ч'яУ

' «••. • Приводимые в работе особенности физиологшг питания и биохимические" свойства выделенных вами углеводородокислящих иик-': роорганяэмов являются»:на наш взгляд; ценной основой для ' ис-1> пользования их в целях шлучениябелково-витамияннх конпвшра-тов и дау1^'<№зйологипески данных соединений. • . - -С? ''" Конечнойцелью данной диссертационной работы явилось" вы-: деление 'угле водородскислявдих микроорганизмов; продудирушдах -* * ашлазыг В - результате выполненных работ выявленряд перспектив-шя'штаммов ^ активно* образующих различные' апилазы, "а некоторые; „из ?них могут ■■ быть рекомендованы дни практического применения с "цельго' даапялярования'ацилпройэводнкг разных "аминокислот ядругих ■ ацилпродуктов; Особого внимания • з аслуживают вэтом отноаю -нии' продуце нты э псилон-<>е нзоил- - X; -лизивашлаз ы в связи с ор-ганйзашеЙ в Армянской ССР и внашей стране Промышленного'получения лизина. '1 ч - • • •' - -М ; -'Л,- ; *:• Исходя из поставленных задач,; диссертационная работа , - у:-;включает разработку следующих разделов: у- V"^З^'С ; выделение из почв Арменииидругих субстратов углеводород •окисляющих микроорганизмов и изучение их распространения в зависимости от разлкташс эколотю^географячвскиг условий^- ■ -

;':У>У морфо-физиологяческая характеристика и идантвфакадия у-выделенных штаммов; --.у ^"у^у-у-О-у:-. "изучение углеводородокисляицих свойств разных видов^спо-;' • рообраэуюздх"бактерий; - '

'^"У-," выяснение специфики усвоения индивидуальных углеводородов у выделенныхштаююв в связи с их систематической принадлеж- -^

. :яосты>:

• ;I^выявление среда штаммов,■ выдэленныг,из' почвАрмении,;угле- ;..■-_

.у,^водородоетсляицнх мякроорганизыов ; продуцентов'ацалаз*, уста-. j' ■у • .давление типов и спектра: их действия; ? .• '/.',' - .: у*' } ■ V'. у . выделение продуцентов эпсилон-бензоел- ь-лизинацвлаз и •

установление оптимальных. условий синтеза.этого фермента. . г " 1 .{

; Ч; . • 1 Объекты и метода исследований ''.-'"у-:t^^ír'^r|

;■„■ vЧ' • -выявление' углеводородсжисляющих, микроорганизмов, проводи-, |: ■ . 1лось на материале разных типов почв из 17 районов Армянской . ' уЧ-' ССР. Всего был обследован 251 образец'почв. Изученные"образцы j ' ^ "'i отражали¡все основные эколого-почваннш зоныпо вертикальнойу ¡

: зональности.в типы почв.Армении. ; ... , ■.;-'- ..-Ч. | —

^ .-'"--i Нами изучалис ь также образцы по^в ряда других - районов'... а J-.

СССР/и некоторых зарубехша стран.^ • ■■■■.у»ш» и некоторые.естественные субстраты - конский навозкро- , .

личий помет;- лечебные грязи - в общей сложности 104. образца. , ] -уу -Чвндвление углеводородокясляющих 'микроорганизмов ^проводи- ; р:; :*".

'лось методом накопительны* культур.^Использовалась синтетичес- Ч у у ;кая среда; в которую в качестве источника углерода добавлялась 1- уЧ .4-4 смесь парафиновых углеводородов. В вариантах выделения споро- - « V Ч ■Ч; образующих бактерий в среду добавлялись гидролизат.казеина, ; ' 1 * •

Ч освобожденный от витаминов, и смесь витаминов группы В.-Инку- i у - бапия проводилась глубинной ферментацией до'14 суток;при тем-г пературе 30°, а для выдэления сж>рообраэующих"бактериЙ- при - * j.'. • Ч37?. Для'учета числа бактерий использовались ША и МПА сусло.I Vy (1:1), а для актиномицзтов и микобактерий.применялась сйнтети-.'!уЧ ".у ...ческая'среда CP-I {{фасильников;1950) о заменой источника уг--. лерода на углеводороды. vfl

' *; у;. В работе,испытана такяэ способность окислять углеводорода -большой коллекции музейных штаммов аэробных спорообразусщих .г ; ".--бактерий Института микробиологии АН Арм. ССР .В число этих штаммов входили многие коллекционные культуры из других стран.

- "Из всего обработанного материала выделено около 400 штаммов микроорганизмов. способных окислять углеводорода нефря.\ л >Палучавные культуры^сгруппированы по морфологическим," культу-"

_ ■ ^ — ■ ■■ ^ ^ ■ , ■ - ^--„.»ъ г- - ^ ■ . г- у

•• : 4'ральним а физиолого-биохиыпче ским признакам, типичные1 прадста- ^

;вители идентифицированы по определителям Красальникова'.(1949, : ^1970), Берге ( вге«а в* »1. ~,1957) и представлены в работе.-X ;..'. ''чопределении спектра потребления'углеводородов в■ мине-~ ральную:срсдо'в качестве- единственного источника [ угле рода 'вно-Х " • сили.раэличше -углеводорода .в количества.эквивалентаом гек-л '.-.'• \~;7 садекана ? С по углероду). Применялись ■ углеводороды, -выцускаемые : : у* -- Ковочеркасским заводом синтетических цролуктов..В опытах ^ по.."-изучению усвоения углеводородов,'спорообразущиш; бактериямиис-*: '■^" .. г- ''*- тюш>зовалиоь ■внеокоочипеиные ; нормальше углеводорода ;о душюйуУ-СУ углеродной ■цепи от С^ до С^ фирмы.Кодак и Фирмы - ТоигягЧ & • • . ; Маг1(;поп,'иЗА.'С:'.1' ;. 'V .^ЛГ.К ;

^>н*}'®КС1Ш'е"КИв ' биомассы на^ углеводородахощ« деляга ^весомм^;;< '^.-л: ■УУУ ' мс тодом по. Ер ошину, (1964) , 'оптнче окую плотностисуспензии: куль^" ' - 71; .. .. тур па глюкоза•- на ФЭК-56.; ' ; ~ ' ' ^ . :

:. Деацалирукщая способность наиболее активных углеводород- '- ,•'..'•

" - окисляю:(рос микрооргаш'.змов иэучалась'с.использованием методов, .' ••■'ж. /•'••; опасонных в литературе { смъ«г« в« ; Киь^ра>• Афикян, г1"".;».;*

1967)',~В опытах приме пяг'сь 19; химически: чистых ац&лпроизводныхч". ' - аминокислот, выпускаемых венгерской фирмой »яе«иа1» ;а гаетй;: у— г" "' японские реакттеы, любезно" предоставленные нам доктором Ю.Кяму-',:. У . % ,.4}. рой.;- '; \ л'.;.*.- '"'у'': .'. " У...- •• .'.

; Гидролиз испытуемого вещества констатировался;го:наличию:УУ-Х'-

ют штидринп сложите льдах пятен "аминокислот;'а в отношении эпси- ' г "у • •. •:*.. " лон-беюзоил- 1. -лизина '-. по появлению пятен:лизина прн разгон- ■■ 1" не 1 хромат ограммы в системе растворителей ;л-бутанол- уксусвая у

/кислота -; водаК4:1:5) и проявлением в 0 ,2% растворе1нингидри-- --

V •' "• .на в бутанолз. '.• ; г" ;■■"-■''"' ■

•. •, = } - *Окончательный вывод об отсутствии ацилазной активности де-„- . . "• . - '-^лался у бактерий на б-й день, у микобактерий- на 7-й, а у акта-, . , но:.«цетов- на 9-й дань инкубации.': .. ^ '-1'-'"V;"У'С;' •

'.V- ' целях количестве иного определения эпсилон-бе нзоил- ь ".'.

: -^-'Ш -^ лззинацилазной. активности изучаемых ьмкрооргакизмов использова- - • : ~ "ли реакционную смесь* содеряатую 10 мг/мя субстрата'и около ; : 100 иг влажной биомассы. Активность определялась;по количеству

выдел1шшегоря лизина в I мл реакционной'смеси с последу!И(им по-Г- V- V "Э^Ог'Т^г^'.^рес^том^в^^от/.теоретического полного расшшюния'рапешта.>;.'^."^*-{ - -\ . (смь»*« «г »1, 1957; РубанХарцхаева.1968). Количество"лиэи-

'"^■^^''••О .'"-•Ч-^ '-К'.

ш оирвдаяялос% по Пасхиной (19&4).'->7 : Г Ч « . • '1. ;

; Для дифференциации типа бензошшдэшашлазы пршвшиась . *Ь -дизиндекарбоксвлаза; получанкаяиз -в.ваЛа»вг1» <Кусава" " др.,1965). .. .

' ' ; Экология углвводородокисдягшшх микро. : ; ; „■..-. организмов £ почвах Армянской ССР.

..' В результате, проведанных исследований углеводородакиоляю-": '.>■; щне ынкроорга низмы были выделены из почв ,вс ех обследова иных | / районовреспу блики, а подробному. изучэнив подверглась иоллек- Г ция культур из 221 штамма, : . '-■."';=■■ 'Г> <.•'. *. '/[ ;

"-'■-.'г~: По систематическое положению эти -культуры распределяются:-„ по родам следующим образом: Иу«оЪ*в"к«г1ш1-103, BMt6rl.ua -55, Р »еиДоа опав —35, Аа11псевуав« —15 ,рг о •Иасшуо в а .■„.■. -в,- ; ^ Уил^х . '..-7 штаммов. 'Несмотря, на примененную,специальную мет о-ддку. ни в одном образца не было обнаружено ни одного штамма "•« спорообразующих бактерий, усваиватота углеводорода. Эти рззуль-. ;■'. таты согласуются с денными Иерусалимского и Скрябина - (1955), а'; ". такхе Степановой (1970). ' ^ ■ Х

Как показывают данные таблицы I и рисунка I, наибольшее ■■ - -^количество углвводородокисляющх микроорганизмов выделяется из':* 'черноземных и горво-луговыг почв, "меньше- из' бурых и каштано- г. ' ^ ■ выхи еще меньше- из;лесных и торфянисто-болотистых. Такое рас-Определение закономерно, ибо и общее содержание;почвенной микро- -

фдоры такжесоответственновыше в черноземных и горно-луговых ; , л почвах, как более структурных г мощных и богатых гумуссм и^бед- 1 • " лее в бурых, каштановых и других типах почв (Мишустин/1950). ;• ' По таксономической принадлежности углеводородоЕшеляпцих ; Г " - : микроорганизмов во всех типах почв преобладают минобактерии. / Штаммы из рода * Вао1еП«т; чаще всего ветре чаютсяв чернозем- ,: них, несколько ража в бурых, меньше- в лесных" почвах и весьма • --незначительно- в торфянисто-болотистых. Актиномицетов больше . ] V всего в бурых почвах, в остальных типах они встречаются ре дао ,* „"¿-Л а в'торфяшстотбологиотых'-'очень' мало. . ".■"■';■■ ^ '' " ■ ; / I- -.- .."

■. Рассматривая число углеводородокисляпцих микроорганизмов I .: из .образцов разных горизонтов почвы, следует отметить. что по> -отдельным типам почв мы получаем различную картину (рис.2,3,4),

■-■■. V-; ■■

• ■. I -I' -

гЛм' -Л- ' ,

Ч

- ' г ■:. ■■ <■ 'V ■

■Л ..- . ■■'■ ■■ к :; ■'■■■'■■!. 1'. / '.> ■ ■.-'■■■ ,'

Распространение^ угла водородокисляющях в развшс типах почв *

.(количество штаммов

I ; нязмов по родам) : у

1Ш111

■/V . ; Тайлвца I

м . .■,.

■<т:

со

, -.

\ :. . • * Тисц иочв I

" *' «

всего ■: обследо ванных

'"'■ П0ЧВ8К-НЮС Об' разцов

-" "Йз них вы- Всего

- делено уг-' выделе : леводород-, но 1 /Я

окисляющих ■ культур/

- ИИКПООПГЯ- У . У

.. ."Всего культур микроорганизмов I а

микроорга-

:НИЗМОВ

на I обоазеп

•н п

г ЯЛ

В ,

¿1 ^

■>■■■. -г-'. < -I "■>

Бурые ; ; • 45

Кастаковш.:

Ш: . .....

, Черноземные/'

'Я ^! ■ Горко-лугоэкэ

¿■■и,'' ;. .Лесные

у-^ЬЛ ^ Торфянисто-'-' Кболотистые <--.■!■

.'■.■л'-.1 ; ■:. .'... 1 •

■:, 24 : • 43 '

> 8;

61/1,4 ' о ' \ 13 19 2.. ■ - 9 4

40/1,5 . 0 ; ■ 13 ■''*; 3 ■■■ 20 I;; .2 I

' . 39/1,7 % 0 15 • 16 1 ■.■■'г; 0

: . 37/1,6 \ 7 У; 18:; I. г I

36/0,9': 0. ' .6 ;', 23 > 0 г' Ь Л!: 0

■ о : . 1 > Ч 0 . 0 '■о; ■I'

V. ■. \ ;

■ .. {

Рис.1.- Распространение угле во- : ДОрОДОЕШСЛЯЯЦИХ никр осрга низыов в различных типах почв Армении (по вертикали отложено среднее количество выдалаиных штаммов углеводородокисляпцнх микроорганизмов из одного почвенного образца). '.-V \ > V - - 1

I - бурив почвы, 2- каштановые, 3 - черноземные, 4- горно-луговые, 5 - лесные, 6- торфянисто-болотистые. - " ■

ойусловлаиную режимом аэрапии разных типов почв, т.к. усвоение углеводородов связано с оетслительными процессами и требует на-. ; литая достаточного количества кислорода в среде. . ^

Нами выяснено такие, что в окультуренных почвах почти всех типов число углеводородокисляицих микроорганизмов. вдвое или более превышает таковое иэ'неокультуренных почв. Исключение составляет чернозем, в котором в варианте под луговой степью с довольно богатой травянистой растительностью число выделенных штаммов фактически равняется количаству их в почве, занятой посевом пшеницы* . - 4

•.Выделение углеводородокислякщих микроорганизмов проводилось также из почв некоторых других местностей'вне Армении (Московской, Ленинградской областей, окрестностей Мин-вод,.Ставрополя, Батуми, тундровой почвы Кольского полуострова, песчани-' ■ на Египта)' и различных почвенных субстратов (конского навоза, -кроличьего помета, лечебной грязи Анкавана Арм.ССР). Все без исключения образцы исследованных почв разнообразных климатических зоне разными почвенными типами содержат не спороносные уг-леводсродсжислявдае микроорганизмы. Последние были найдены и вовсехисследованшк природных субстратах,

- Приведению выше данные свидетельствует,о тот, что углево-' дрроджислшощие- микроорганизмы широко представлены в природе, . т.к., по;—видимому, это свойство, характерно для большого числа . таксономических групп. Распространение их коррелирует с распределением' от дельных таксономичв оких групп и видов ыщфоорганиэ-мов почв в разныхэколого-геогра$ичаских условиях. I

I

..... 10 • Л \

А « и •

* • : 5 - - *

"10

« - V »

■ «В '

Жур

Тйрфлмшсяп' яколгастые

- Рис.2'

Рйс.З

Рио.4

Распространение углеводородакисляющих .: , микроорганизмов в.различных горизонтах ; .разных типов почв Трис.2,3,4). Масштаб. ; и обозначение те ле, что игна рис.1.

■■-- г" 'Изучение способности спорообразую-- • : -. г- V: оих бактерий к окислению углеводов:. - :: - '

'•: Г • V -- ' ' Л РОДОВ , •¿■Г^ .

"ч- •• -.¿.литературе имеются'противоречивые указания о способности с порообраэ ующих бактерий окислят ь; угле водорода нефти, Нзкоторш •авторы выделили из разншс источников отдельные культуры этих '.-.''• . бактерий, окисляющие н~алкани ( таааЛа «г -

К1и(;>Маг!со->ге1з,1%7; ТаппеаЪвиш,Ма-Ьв1в»;' 1956; ;:.;•„ •'Квасниковдр.', 1971; Позмогова, 1971).' Другие исследователи .V" _. ■ отрицают эту возможность '(Иерусалимский; Скрябин, 1965; Сте'пано- .V'

• ва,1970). : '•'';'../' /-"^Н'г:-' ,'у;. -'т'и ■ ■■>. ^ • Несмотря на' особое внимание,, которое было уделено' спорэоб- >

г:,разующим бактериям,; ни из одного испытанного образца'почв-Арме- ^ . . нли и "других местностей," а такзкефругях субстратов • нам не • уда' .'..-..'.лось выделить бактерий, способных использовать алифатетесшег; -Л"."' _.'•.; '4.-;-/- углеводороды в качестве единственного" источника-углерода "" "

• (табл.1); -; . ■__'»

• --ч. V -Г"" -• : ' —' -

• ... >7 .. . '• . *?, ".. •* II .- "

~ V' ; - Отдельны! раздел той «в работы Лл оосвящэв:иош1вниг *спо- / .V ; собности имепцжхся в вашй 'дабо^втория щузэави! культурспоро- ; -обрзэущах' бактерий усваивать ащцпддумъныа аяифаиявскив уг— - * : ; .1-0 " леволэроди нефти. ВервнмэтвпжэтихвсследэваниС бала провела- ; ' . - - вне серии опытов по вырзщнваних) спорообрззупоих бактерия в вид— -,-О-1. * кой среда на фоне различных коищетрадяЯ лрсижввого автоддзата,

содержащего 500 кг/% амилногоазота (2,5?1,25?, .--/.

0,15£, 0,07?) .Такиц образом, была проверен углэводородокяо-г " ' ' ляпиая способность больной коллекция ттшчныхвультур спорооб- -: - Я^'-!/' рэзупщх с5актер1гА. Этв опнтн показала, что микросргализш. лава-'.:?*.

, •' ' , ' ли рост;только в вариантах свшояш прошитом дрожжевого:авто-' Я . о лязата в ереда, что свидетельствовало об использовании в'качз--° ; • 'стве источника углерода белковых и друтюсорганичееяос соедаше^ Я Я ; . -,. гас»- входтаях в его состав. В вариантах,, где вонцзнтращя авто-'ЯЯ, • лязата снижалась до 0,15£ (минимальная ростовая ронцентрапвя), • ;• : ^ рост резко подавлялся, а щ>и концентрации 0,07^'И ниже роста . '' • ' '

Я- Я...' .--бактерий не наблюдалось« ~ ' . .. •> - • ■ ' .• ¿Ял

у:»-'? я* - : ■ ~ 3 дальне йщх опытах по изучению усвоения углеводородов ■, - -ЯЯ, '; - с порообразувдимн бактериями оша.вцрвдивались в тег же условиях,"; • ~ • • - что и в предыдупэтх.ошоах, во вместо дрожжевого автолизата Ж -

: 0 среду вносились сызсь витаминов грутПш В и гидро^зат казеина.

.'Я- - ; (250 масг/мл)а в качества источника'углерода добавлялись вы- • ;; • • сохоочвтюшв шортдыш углеводорода). Способность окислять "' --К. "

- •'' г • углеводороды изучалась у втакмов почти всех извеотяых видов ; "' • " : , сгарообразухцих бактеркАОсобое вниианяе было наш уделено . . '- г . изучению углеводэродокисляпчвй способности энтоиопатогеннЕЗЦ^ ■ ■■ Лорм спорообразуютсх бактериЛ, в особешости штаммов ' .<;-. г!п<1впя1и .. го отдельным серотипаы, полученным о Н-антигенсм -' : ;• " (ЧИЛ-аиопян, 1970).

^'■"д"--- Систематическое распредолвриз изученша: итамюв аледущев; :'• '■ Г у.».'. Я - , В«о.оег»ив—1Ьиг1й41«11»1(> — 163 ШтаММЗ»ацЫ1И«-т»«всагог1оч»;

53, -В»о- ад, Б«в.ав4»*«'1вм - 21, ;

•;> ' ' ивг»1и» .-.16, -В*с.Ю1»1уту*» - 1&,':Вм»Ъ1о11111.- ' ВввГ -г V 6, ~ 3, В«а.<1гпиа - 3,'

Я'Д 'Г 7 3,\Вм'»»»Ь**г1«и» - Вм^аХМАи*^ 2, '

В*«;ьл11ив гВм»«1г*и1а>>« - 2;, Б»».воАви1апв%- г, В»в.вРап : М1«ю».- г, ВмЛМ«гв«»вП1* — 2/ Ва^^ша^п-т**' - Вм.а^гаа-

•>•. ." .;•;., "_>:>±»'-'1^.'ваа«1»а*ва - 1, 1 югамм. . • } ■

■ ".г----" - '^ ■-* .■■■ - -■--■ -- -""Т"* ^ г . ■■. ■ . ;

■ •'к •::•*■ • г■ ^ ■;.■■.■■'•■■-. • ?

Полученным на терзал по изучали» способности окислять раз-дичше зысисоочиЕганныэ углеводороды у 398_коллекционных ;куль- -тур спэрообраэугшэс бактерий скидзтельстлует об отсутствии. . этого свойства у всех испытанных бапиллярных видов.. ;. • -

Отсутствие способности усваивать углеводорода вегататив-ныыи зметеа™!спсрообразу1Шх;бактераЯ,;возможно, связано с отс^ствиеысойтветсгтвуюашх фгрмзвтативнах систем, в частности, как полагает Сенез (1964), аддгггивных пермеаз, позволяющих. ■ углеводороду проникать я бактериальную клетку. ,-.- .. * ¡-V^V

■' Л' г -. Биологические особе шюстл и идентификация -"■■;■'■■

7- жгамглов:1кжрооргашзмов, окислякалх углеводороды

--; ' Иденткфлкзиая выделенных вами углзводородокислязощих мяк-', роорганатжов проводилась ft учетом морфологических; культураль-ш, ■¡Тщзиолсгических'и С;юхшкческих признаков. Длянитсобакте-.v рий и."актиномицетов учитывалясь также";: антагонистическяо dsAh- ^ моотнешйтош с даугйми'мяярозрганазыэгш^ ~ .-.'-■■..'•''•: - . Названия лдавтифацирова'нных "микроорганизмова, тзкжа опи-"^ -санных вами новых" разновидностей и одного вида привада ^

таблице 2. Всесторонняя'характеристнка этих культур"дана в дне-, сертагаокпой работе. -'-•''.-^¡"V. •-' {--У- ...у-

: ~ :'В процесса ис&лг'ярваиий'мы попытались' выяснить-наличие

в1 использовании-углеводородов"с разным строением;и; f■■■:: длишё "углеродной цепи г^дсташтелями отдельных "родов и видов, и вопрос :"Ь; том может:*ли отношение;к углеводородам. служить" -систематическим признаком дач выделенных органа шов^ :■ Г

; Изу^ниг' ежктра отаюлвная7 н-алканов,; циклических и неко-" ' торж друтах углеаодородов мшэбактериями,'" актиномадатамя и " .бактершяда выявило нахичза овредегашой закономерности в окис--/".' .лавш!'указавшее1 соединений. Так; минобактерии; относящиеся к,: видам Mjreob.eoeliacim, М»пмЪИия.' M.nueoeura, Ч.рвггидов«® "e^banlaum, Я.alluvialurn, Ч. grml.nl», H.Teetrletum,'Miflerwn, «.lOijtiooiiiB хорошо растуs на алифатичееккх углеводородах и не развиваются на дакдзческих соедивениях; Все указанашмяко-: бактерии хоршо; растут ва жидком парафине е дизельном "топливе, Полученные данные1 даот основание считать окисление" апифатичес-X "так'углеводорода® неспособность усваивать ароматические ,:уг- " й

леводороды специфическим свойством шречисла нваг видов микойак—"" терий. • Эти результаты совпадаю с выводами^ отечественных авто— I * ров (Скрябин а др., 1969, 1972). Из алифатических: углвводородоь-? большинство кикобактерий растет ва к-алкаяах от декана да тетра— "козана, гексая, гептан угнетают рост микобактерий, штая а нонан усваиваются слабо. -, Иэсюктав (триметалпентан) ни одшпГиз изу- Г ченных микобактерий ш усваивается.' Примерно аналогичная картина ^наблюдается в у пре дртавителзЙ бактерий л актнномицвтов.' '■ .1"'

" Относительно вакошюкия бисййассн представителями разных видов ыикобактерий и бактерий выинеоальной среда с углеводоро-' ' - дами (и дня сравнения с глпюзой) в качестве едзвстветюго ис- | точнша углерода также наблюдается определенная заяонсыервост& у (табл.2). . .• ~ V ■ г >

• ■ V' ТабЛШ!Д 2 " р

Накопление биомассы культурами» разаагащишТ-'• ' .• 7 углеводороды, в синтетической среде с разными: : : ^ источниками углерода .... .. :..-....' ■• | .

Испытанные штаммы

Бисм^ссз в мг/шг, среди : _ -глю— гекса- пара—. дизель—■

-Л " - ' ' ■ : коза дгкан ■ фИН ;* ' нов топ— --■■

^ г ' ЛИБО 1 -■

2 3 ■ 4 ' 5

- МуооЪ, к11ит1*2цш шт.540 8,5 . 12,3 : о~8" 3,4 Г:.-".'

ИТ.661 - 2Г7 16,6- 2,8 . 2,3 : .*.,:

К. «о»ХЛ*еи> ~ _.шт.636 - 2,9 „ 13,6 5д ■ 3.2

ИТ .615х ОД ^ 0,6 . 1.3

• ' ■.- -. и 1 пгг.6251 слабый 7,3 4.8 ; 0,9 - \

... ;' ; ' . . : ШТ.бЗТ* . рост -• • • •• •,

■■-.: ■' ч ■■ ■ ■.. ' . 2.1 11.2 4,4 ' 2,5.' ;.

Н. £г«а1п1в шт.597 9.8 20,0 3.3 3,0

. М. вмокп■-.:.' шт.577 4 4,0 ' 14.7, 4.5 1.0 % :

. шт.617 3.3 13,9 4.0 : 3.4 • , , : "

2,3" 11,0 6.7 .1,4

■- --V'-.. ~ п . " о ' ят.егаг 2,3 13.3 ' - зд - 1,7 Г'::: Г':-."'.

• шт.629х- 10,0 .5.4 зд

^шг.647* 2,0 8,4 4 Л-\ 0,7

М. г«я1а>1о4и1» ^ ■ тт.678 - 13,3 44,6 7.8 ... 2,5

■ '. " - ;

/.-•".'.Г.-; -':' '.у'*. ',. " ■

- ■'""■'■"■■• - ;s ........... ; ■ ..-i Л"

V i Г- ' ' : ■. * • , ' s *•■ ; г - - .1 ■!

> " • • - • -------r ■ -V '.и 2 3- , 4 4 - ''б

.;. • • H*r*»trl*t«i '•• в»,678 44,6 7,8 -,

nr.674х "5,7 год •6,8 :. . з,б-

■s .604 M кд 8,0 U

K.aallTtfliá ~ " ^ BIT.635 ,3.7 20,0 11,2 .

та.бЗЕ^ 3.5 ■16,7 10,1 8,1 , - *ÍV '

- vi"* Í V■•f.'í» "í"- or.641х: 2.7 10,2 7,5 " 5,3 , • • V

И.60Х* 3.4 'J 15,6 8,8 6,5

' r « - ' ' - : " -i. ет.бвг* , зд э.в 5,3 •

I. ' í. ^ т^.: l- ' ' _ " ;L ■ и*.687* : 2,8 • 18,6 9,7 . -5,9

, M « aaajpmtl« - " .' ДЧ -Д nr.632 V ЗД /6.3 1,8 :.

7 10,0 . 9.? ; ■ '- ' -'i ■ ^

и.660 ; 13,4 . 1,6 . • ч í ' - • 4

I?- v'H.grl*«tá *ib*p.aljLDha^ ':. U»» aap.a. t.v,: ит.583< 20,0 ^ 5,0 - í-г/-

-4 ■'., H Л wUCOltt* «иЪ«р. * * .,'Г-'*' ■■,*,'-

^«tgvMta : . - Ю.58Х, 7.2 32,0 7,3 -; ' 7.

Ь; K.l*rtl«oX«l subap.laetl- ' ■ г •н ; ' ' . - 3,2 '

Г-- -, p«Dtoslfaei«i» «99.a* r* ВТ.649 ; 8,8 18,9 ,2,2 'Jrv: ■ - -' -

^ •7 . R.XMil««lvn attrttt- . ! V* ' . > ' - : 6,5 ;

'.-■.;. reduettr« ««un. ? шт.625' 10,5 25,2 3,4 ^

■ М.аиЪИи*7«ubap*«ll9ïut-~ 15,0 V,- .;

-L'.-'.y Наш aap«!!» .;-„■■■-'■ ■- от>648 : 7.7 '2,8 ; .2,5 - -

i« t. par «Minor ep lau«~~ шт ,673х 3.7 8,9 .7,0 -3,3.-.

Aei.p*r»tfiBorapidua" KC.S23 ;; ' Г:/ *r * У ' • -Л-"4:' '^sL. . Vr- - ;

■ub«p.hu»laulaa aap »a. 4.0 9,5 7,0 г .3,0 ; "

-r * Bee.o»ntropun»tatue ; шт .582 10,5 20,0 10,3 - i' ■

Д'. . Bakterium «gil* : v_'" -' шт.бМ 13.0 Г -14,7 0,2 ;

-.V'.^ B.aliphetlow» шт.572 34,2 6*6 2 > ' v :

* ■ ~ ; J 'I -. ■ .' ■ . . "T t'W'J. ■ ■' * рост ■ _ ''¿-í'-V.^'-.

- . V 'cjrv"- " Vv'^Vé^ шт.ббй1 I.I - 15,0 2,1 г. â,o

i - : »'"';••"' , 'i-• : '•'*. шт.баб1 0,4 20,7 ю,4 ; •' 3,7 v-••:...

lb • • B»*T«le9lwt«a ' - \ л . / Д...-'" .'.;'• '• " mt»520 . 3,0 ; . 18.8 7,5 ''-"■7,1: jt;" «

;шт*579 5,5 53,0 л-8,1- ';-5,5 : ;•

; ; B.^uttaW» V'". r : i : ','. - ит.516 5.7 I . 16,3 13,2 , 4 7,2'

V .,- B^ontaaun «p « ii« ; , ^ . atroeob»*t»rÍK«* --y: , . : ; - •• oblorua r' -í. шт.586 12,3 Д •30,5 6,3 3,3 • '.. i

ПТ.5дО ; 1.3 12,6 '7,9 '

'ОЬг.ЛФ^Фгап* ." . - — ; '.- - ВТ.607* ■¡ ■ 2.3 -, 13.6 8,3-- - 9,9 -., .

Í-j : j. Ож«т1(впа* ■ ^ вт:б09 ' ;..0;8 : * 14,8 .12,5 i 10,1% '

* •" ' А' и, 1 • íi-

- ■*'■';■-X.: -— 1> i * - ' i -■>. Г i S'vii-T ^ ^ г-*1 л-^ f '-r

. • ;.у i

.'."..-• • ' - 4 ;- "Г'"' ■ . _ ' O J -, ■■'■'■' " Чт J.' ' ' •'' ; ■ у

" ч " . . , ■ ; -у."; :r« :' 15 ;. • "•.' . s:;-'и-У. --

■■■-I- -V.Ï- * 2 ' 3 4

yï" РммАяопш em«iylM -■:1ПТ.515' сда0нЯ ■ 16,8 1,4

• РОСТ. . •• "*-'"'• . . У .-..s '„■',:

■ ; dvaaolytJLeuiy . •у шт;502 : 2,9 ус 17,2 ; : 2,2 - ; 0,8 ; у.

..■y-;-,'■ «l'^ebergil - w ИЯ.5Т7 ■ .^3,3 ;.-■ 15,6 5,2 ь ■ • ■'-J» "Т ^ ; ;,• :_"r

■ •. ' *. . fe» •Ulpeold«« i'-,. шт. 519 слабый ; 9.3 h ■2,0 1.2 ••;.„,; -Jl i p* \ ■ х-.,,

■:< уг ..рост . ; :., ..■■y '.Г'1 "и, у'

y-.. Pe. llqtwfMlVna y-V >;y ii-I шт.683у , 4,2. 12,4 Í.5 V. 0,7 ; '• «'íjls, '■-•••

I«, olMTerut -y-'j-'i.-'i--: ~ шт.512 ; -5,7 12,5 1,3 0,5 Д-;- ; -14 i

'"'У '"'-'-'У V .-■■ ■ ' - .-■у..;-. .. ■ ^ 'У?¿* ':

■■i'.:-- ^^ífí^-'i.'Uí.^'" '. "i * i -

> ; ' Х) Штаммы т»р<ууцщ>у1>» агт^цдгд-Лчиягит»--T—rtpiinMtyjiHaj

. ..'Всв изучэише счзгш ^змы образуют ыаксямальщго биомассу т- '• • 4,1 ' (ДО S3 Mr/its) Ha н-гексадекат нкишшаяьцую (до 13 ícr^ii)-:*Vr''.^;. ■ ^ :на глшазе iBa пнрафюв а д извдьвом топлгав культуры иддвготш-уу ¡ J s .. . ввют áicuacoy в коди«стве, лрЬтвгахцаа сродаих велзгвга.Так; .^у^уу' у максимальное количество Авсмассы из н-гексадекане образует .•'. -.у ^

; вмг/мх: В.а«1м«гт»в" пт.579- 53,0,Bjreot>.ï-ertrl«t«i иг;678- : -.-44,6, B.«lish»tieii« " nrl572- 34,21B^»at*Äii» »p.B, шт.586-'уу" . , ; . ;Г30,5 ^'Техе штаиш нагликозе накапливай* незшчитвлънавкая- : угг^. 'У ] \ отва : биомассы.'? ч; ' ; ^ yí \ -уу i: у : > ' -'vyy

i .у ; Таким обрааом,' одучевше давше выямяют оцродоювдую. ;у;

СПШ^Пу dOiee Tipftfll >>ЧТИТЯЯМЧТО ywnnattirtf■p^nrnfyiy ^цд,-Пдя— . ■";'. '"■ ; . г видао. микроорганизмы, выделанные ва гвксадвкаш,4бшд бодав V,^'.--"'1 ,' ^адаптированы к данасцу уишаддороду. \V- u*•: *• Л г'

<-• . ' ~}уИз приведенваго материала явствует,^что свойство мйкро^ у Л , - ! t; С одашгак» усваяЁать углвводор0да т;мОаот, елутать системам-- :

критерием дня разграничения крупный группы родов.так у/ W-'., : ик они встречается у квотах из ни. Однако^это свойотво. каа > : - -

" у бнолигнчвсхнЯ признак, хораятврноди некоторых вцутржвждовых • ' грушшровск н, во всяком случае; дан 'яд^жмигг "тг"< а тавв'^ у^у ; ■■у У; у рвэнсввдяоотеи в : поусцу. мажет быть'гоаеанш ладоирдтадывм vO: -^у - : у у сисгоишгиоии критерием, a в дредрлат некоторых вддпв— отхн— • •

¡щмгаввяов джя разтрашгаввяярвэдоввддостеВ.;У'^у^^ч^^уу

j'y- «- --'."^^^Aiytl^yy'C^'' f^y'-e- " '7 ''~ - .-Vi'""--:.'1 -■ * \ , - " " - r .i " - 1 . - - ■ ^ ^ -r ■ ^f — - ^ ■. ^ • ^-^ . ( /*•■■ ( .■., , • _ ■ - , -, ■ . г . ,

-"^y.y. . ' • - .

;•?.-;■:>. ¿i.: i. Г;. y -t-• V'" ; " '■" i'-'",í ' -• "-У -;"-'L

^ ..i. •..': •. ••; • ■ ■ ^ : • ; V . ..y -.-..y • : • ,-y

. Образование" ацвяаз углеводород-v. окислятраш микроорганизмами У:

Изучению ащшаэ микробного происхождения^ используемых ~ ■:

для получения оптически надавленных изомеров аминокислот, :

уделяется большое внимание как у вас в стране, так и за рубежей

(Африкян,1967; Кимура, Африкян, 196?; Рубан, Харгааева,1968;г. ■

Chíbate et al.,1956,1957 а,Ъ,е,«,«; 1%о а,Ъ, 1%г~, c1964; Iehi-

tawa «t al.,1%2 К1мцга,1959, 1962, 1%3. 1%6). ~

Однако, в литературе нет сведений об использовании раэлич-..

них углеводородов для выращивания-культур микроорганизмов ,цро-

дударующих ашлазы. L '

Способность ассиметричесхи гидролизовать оптические рацэ-

"маты -производных аминокислот изучалась у всех углеводородокис-

лявдюс "штаммов микроорганизмов, выделенных вами яз разных.почв.-;

Армянской ССР. Выявление спектра действия апилак.углеводород-:

окисляющих микроорганизмов, принадлежащих к разным таксономическим группам, проведено на материале 208 культур.. "

Полученные данные (табя.З) показывают, что активные; продуценты ацилаэ встречаются среда всех изученных-;' . микро-организмов а что спектр действия «тих энзимов уразных таксоно—: мическах групп различен. Г ."'-..'-

Таблица 3 .

*■"■Распространение и спектр действия ацилаэ ;4. ■ • . - разных групп микроорганизмов . :. * V*

V. (Инкубация на ПА при 30° в течение 48 часов)

; - . , . ' '' Количество продуцентов, апдлаз среди ,

Субстраты Bacterium ..■'" Peeu dea о пая Myoobaote- - Доtino-._■ _ . rial муоеа

■ - ИЗ 55 "if <t _ ИЗ 1Ш rf ИЗ 1& <t -

ИСПЫ- ■ ИСПЫ- • * ИСПЫ- '"" • ИСПЫ- *

'•'<■■„ .■■. - тан. . тап. тайных тан.

1пггам- :'■ ■ «там- "" ■ штам- '- • штам- ...,-.

■ - - ' - нов • мор - -MOB • MOW ' ■

■■■ 1 ■ ■: . 2 3 - . 4 S 6:7, 8 9

13 23,6 2 5,7 20 19,4 0 0 '-. 20 36,4 S 14,3 70 68,0 2 13,3^

V у—ацетил—да— ГИДрО— Di— .■ алашга

Апвтил- иь - • валив ■ , . ■

-Г? -

1т-.-I ' 2 3 4 - 5' в • 7 •• 8' 9 . ^

Ацетил- 1 - ' ■'■;,''.".' ^ ' •••"•"• ч. "'•

гастидин - - :0 О О ■■-■--.-.- О О О О ' О • -

■'-' Ацетнл-зисилои- >-;.. -'"'У/." - • • • '•.": '„••■'

аминокапроновая л у-----'-

кислота • -3 • 5,5 „ О ~ О 17. 16,50,0-:

Ацетил-колистин 0. О"' О '' О О О 0*>•. 0

'Ацетил- м- '-:■■'■^ "■ ■." '" -V' -. ''■

: ;• легдая,-•. . .• - "20 36,4 .з. а.е 61 59,2 о :о-.

Ацетил- м, - * - . . '• ■ * ■'"■ " • ,'. •

ыетионин : 25. 45,5. 7 -.20,0. 75 71,5 }9 60,0 : •

Адатил-вь -нор- ■■■"■ " ■'- < ; • . •• - --

лейцин 16 ; 29,1 5" 14,3 50- 48,5; 2 • 13,3 "

• '•*' Ацетил-сь-грип- - '' ■Ь.". ■-.■■х

тофан .. • - • 0 ' ■ . О ; • • 0 ' о .- - О О • О . О

: Ацетил- ы.-Фе- * : •'•„• V

:нилалания. •; ' . 12 21,8 . 2 -5,7 22 - 21,4 О О . ;

Безокл-х-аспа- '■-.-■ - — - • -... ■ .:.>■>■..--рагин •;•••■. . •" О О 0. • 0 • 0' • . 0( 0 •. .Г

• Бензолламяяова- ■ - - ~ ; --■'Г '■"■ "••'"/ „ •" .'•. \ лая - " . 10 .- 18,2 8 22,9ж 22 • 21,4;/ 0 ^ ••••;

- - Беиэоил-ь-гио- • •< 'V "" • ". •.

тидин - - 0 ■ 0 0 ....' О . 0. О ; .0 .. О"

Натройензол-• х- - • -'■...: . . . г--=:::.г.

' " глутамановая : ' ' ■ .. ■ 1

.кислота . О О О 0 . О . ; 0^. • О" ' О. •

• - Бекзоил-9нейлон- . И*';-

аминокапроновая . - - -д: " ■■■■ ■

•кислота .2 ' 3,5' ■ о ; о .- 3 2,9 О О■

Вензоял-вь-лай- . " ■'■■ ; >

цин.. .. • . .23 • 41,8; - 5 , . 14,3 -65 .СЗД О - 0 ;

, Эпсилон-бепзо- ■ ' 4... ; ;

" ил- В1Т-ЛЯЗИН ; .. 20 . 36,4 ; 15; 42,9 63 ,61,2 I 6,0

Бевзоил-ьь -ме- " "? ■" - . -- ."■ _ .

.. ТИОБИН ^... ; . 23 . 41,8 17:- 48,6 69. 67,0 ' 5 *33,3. ;

Капршаыянокап- : " - ^ '" ' - '• " •-;.'.' " ■■■: .роновая кислота 0 ■ 0 -у. О О 0 .. О . . О ..0 -" •

• . Объектами дальнейшх исследований явились сродуиенты эп-

■';. силон-бензоил-' ь-лззинацилаз, как перспективньгх для оптическо-л : го разделения рашвиатов лизина и.получения х-лизина. Работа' ' ". проводилась с 16 италаамя, вцделёшпдш из почвешаис образцов,

кпф«уугаддзмов резных родов, обхалзгпргт ипиболъаай бавааак->w " я';.,; ляатцщаэноА актчвиияд шгортоднш агаре* Эл кухьурн ю— .-.-..■:':' л^свв росли в ва апфмашяшх углвмод^юдах, образуя ва гвксаде— •

■ • каяа х rwpaftna др20,7н 10.4 т/ж (taotaeca соответственно Г-

\ (тай*.2). .'"V/^jv-.1 ; : ' " ' •/'

Црк вцрацяваняи вакрооргагазмоя да н-гексадакава. (2,5^) я "."'м парафов (2,5 об.?) в

качестве единственного нсточнгса угле— -. рода проявляется НЭСВОДЬКО ЕПОЭ спшггр ДВЙСТВИЯ 8ЦИДНЗНЫХ 8НЗН-■V

■ нов, 4811 ори вцрацававкв KjibTjp ва из тонной вода -в 5¡í тлхво^' "-/.»ой (табж.4). Приведенные вцборочпдаданнюсвидвтельствуют о ' ' ■

^то угла водорода оказывает довожьно ваиютное стимудиру инее.. - ; ^ ■>"V; виоошка ва образозаниэ ацвжазннг ввэямов изученными штаммами. . ' . Например. в™*?* 628 и 633 напептонноа вадэ слабо гвдрояивова- ~ .-•••ля ахятя-вь-дввцнв.'тагдв-sos ва теколдокакэ ацддязгеш актив—: ностьбажа'внражвнаавдчнтвлью.Пгаимы 682 и 687 на шпгоиной. " -вода слабо раацвплшга апртяя-вь-валкн.'а на гексадокананнтен-cvBsouTb расэдшюнин розко повнсигась. При росте иа гарафнш^г--' ;

аятявность почтя всех штаммов1 значительно1 повышается ;

пря проверке оо са адатжя^вь-норлайшгаиагдатлд-м,-валяна^

V > 1 . .В шлях подбора оптимальных сред и условий дая накоплвния ■ : бксмассы и образования василон-чЗекэсяд- ь-лизннаццази, одна.. л • из активных культур Myeob.e**e»eti», шт.632 инкубировалась в- -

ряда сред. Результаты приведенных в табл.5исследованпй иоказы-;;' • '.вавт. чго H«a**cp*tie .*. V вт.632 хорошо растет ва всех исшлвв-г • ^ ныг срелах, потребляд в качестве источника углврода как глеко-эу» тая я гексадвкан. Отмечается такквщмобладашгагодошюния' , ,бисыаесн и ее большая ацилазваяактивпость в услошях лучшей '7 , а«рв1яя при культивировании на качалкена пятые сутки роста. . ' .Dp« испожьзованяи в качестве источника азота сернокислого ам-•г : асшня относятельно хорошие результаты по бисуассе и адикаявой ; ■Я'-аятаввостя получаются в варжантах с добавлением микроэлвмэнтов ^ч/ я лрсжхввого автолхзата, а в отнооеняя источников углерода - » -Г - варяавтвх с гексадаяавсм.- Гексадакан оказался в данном случае,. ; . рМУКИРДПИ! ГДЖ088? '■v:

' -^V; ; Ваня изучалась тосхв дщиамяка язмвненяя адилазвой актив- ' - - ' ш£тя»; ■;a.«i«i«tu нт.632 я B.alá»b&Uewt :.шт.652цш 1 ^ рнг^^уугг" »^ среде Чибата (гексалэкан вмес-.

M да*

'í Ш

• Ч" if-íítí

"■i /.VSVíj.

\\ - У1; «.If' ■

. ч -'

' ' I.'

V'ri 1 ^ ;

'.......11 1 '¿^^^¿¿^ï^^'i^Xï

активности углеводороджиогщщга -

- Субстраты - >',., - . A u е-т л. л Vj ¡ \ . -'С • Б e h э о и л - '■■;■

Штамюг' ' • ; : ; ', м-лбйщя вь-норлейган i<;. м.-валин М-метиоюга ^валия" '4 ■ Ы-лизин -

V :'-„ у. ■. --:■ ;-,. .-w.--.-'.: ^ >.;,:■ -'(■Я^ ví'-v ' о •"• в « '• у -я » : } v g/ g 11 il . s. 1 si a : í» ^ 11 ■■■■ • - • •."•g £g § g g • g gft- S- s 'I : s N:. IS - i*r S ' = I ^ a í в ï a i s

■:'V.:. >

2 .-3 ■ •■'4 : ■ 5 ' : 6 . 7 8 7 9- ■ 10 ■ II 12 ЛЗ' 14 15 16 17 18 19

' i V ■¡■"■1 ■■ 1 ,. л" ¿ ■ КуооЪ . o o »Ii aio ua 615 'i ... ■ ■ ^ .V-v,1' ■■ .i ■■■ + : ':.V -V +++ > V ''+++ Ï++ í ■f+H +++ ■ ' -Н r - .í : ч+

- : v _h,L, : tr \ . 825 'У t "л'- 'i* + : ■ •■ + ■-1 ++ V ++ ; + -, ■ r ] > • - ■"•+ J

' ■ * - V, ' * ,; V - , ■ ' 637 i"-:, t ■■ ¡■' + 1 l-r- ! ! +,1 ; ++ ■ К ;<-v +H r -f+ ..

■■.;. ethanicu» : • i •3 ■ 628'- •m . r. + . ■ :J 1 • <\-S . . , ++ i++4 " V .' - Í' 4 i ■ ;. + +H h.1'-,++ ■Ó.'i •, - г-

•/■ ' ' , . t " ...... 1 • • • V -, r, > -b 629 £ V- + "i "V . '+++' +++ -'+ ; -H T ++ - >+ ++

647 ; .-i.-! •;++ ++; +t, . ft-' ■r !+■ ■ f.1-

638: + + w i ++ л ++ ■+++ + , + • +• k'ff +4H fí''^" ,1'. - ■

14 ■ -■ ' v' !-,t Î '■ -ц: ■ ■ ■ . . ■. . .■,-. 641 681 ' ' + .... * i1."' : ■ i : ; ++ i- .'■' V . ; '' "+++ .'í+Vy+H к ' ++ ii ' - •1 '

■ ri'-:] ■'.■л,'-! f - 682; , + ■H; ■ + ■ +t+ 4 • : Г++'-,

-,''■ ■.'■' и" ' : ■!. ■■-.' L ч. h ■ 'г . V, /' ■- 687 V V': • 1 • ** '* .V+ . T'V +

.- v. V.b. 'i ■';:■: ■■■ . ■"■■,4'. -, 'i -N' ; . y-; / { ' ■ : > ■■„íV ■ í • -f í ' '• i V ■ * " H .' V. í . ' \ . . ц. -■V V ■¡ 1 .i1; ni-. • : r ' "v ,

: -----у.

f

4

■■■ .■ ' ■ 2'., а 4- 5' &

H.meçiatîs 532 + + ++ f +

'//""'■л''' »«restrict«» 674 . + + + +

B«alipb»tleui» 652 - + ++ - + +++

" •• • : ■■ : 685 v- ' ' - : + ■'

iettperafilao-

residue 673 + ' - ; +

: V

8

v, ü a- ш и v¿ тэ-и ib'ia i?.-цгвг.

+++ .+ ++ ++ +++ + ++ ++

■+.++- ++ . + - + +++ + + ;

- ++. + . .-..-. ' + ■ - ++, '4 .- -V?

+

- ; +'

- +++ . - ■' + . ■ - +++.' + ,;',+ '

: ^ ''..Л.'-- .С'-Я':

'■',7*-хг'-V':" ч Образование эпсдлоч-бенэовл- I -ляэанавдлазм культурой• ' ;■->. <'■(■: ■ ■'¡■г (Состав основной, солевой среды: К^О^.О; КН^^-З^; •'.'•• '■

: Кстоадш • ^ : - Нов- ^: Биомасса в ит/иж ' • '-> Б—мюижяапюиямя активность биомассы утлеэоля . >> 5ор- рушгавая ^ стационар- мубштая ферментация ;сгащонаоный рост

те

2-й день .;5-й дань'-'- "2-й'двнь 5-й дань

'„"■¡775:К:. ;":Л, V V; "7: ДЗНЬ- день • Г-й" ■ день -~5-й ч ^ * 1 ' М4Ч от ' эяна к-во ВЦП. , I лизина ыг/мл % от к-во % от к-во тео- ввд. тво- вад., . рвтич,ь*ла- рбт,ь-ли-V:: : зива. . зина мг/«л 71 . ЫГ/МЛ % ОТ V 100- ■ РЗ-7 ' . .■тет.1:.-. ■ .

I • ■: V;,..- 3' - 4 5 § * • 7' 8 ? ■V)А[ •• II : ТЗ ■ ■ 14

■■■.;. ,) ■■■ И амяо-,':':' яийный азот ■ . 'I 7. 2- . : 0,1 : 0,1 . ш 0 - 0 1 -,з'о ■ ( 0 0 \ 0 0 ■ Г ■■2,4' 2,8 48 56 '>0 "Ч • о '. 0 . 0 :' 0 . 0 0 .0 1 ; 1 7. о:-

- ■ П. Глтоза и аммонийный азот, - ш 1,'з ■ •115 3,15 3,93 . х,з 9>8 -2,37 ■У, 1»65 0- 0 •о -.0 36 ; 32 0 ■■ о ■;'. ■ 0' • 0 0

}'.'}.: ш. Глюкоза я ам-' монийный азот, микрозхекаяЕЫ ■ I Г 2 1,8 ■2,0'-:;; 2,24 ■3 24.' V ■■ о"1 0,7 4 0,6 1»75 ■■ 0 . 0 , 0 ;/: 0 7 1.5 1,7 7. 30 34 0 • 0 . 0 ■: •. 0 ; о - . 0'' 0 ;

ХУ.- Глгеоза'и ам- ■■■',..'■' - 77 ■■■ ■-■>■ {■■■;, ';;■..;■' 7 ■ ■ ,■ .г- 7 ■■ ■ .у ■ ■;■-.■■ V ■: =".». ' шлейный азот, I ■ г,Ъ ' 5,5 • .0,8 1,9 0 0 • 2,8 :;56Л 0 ' 0 • - 0: 0 • ■■*.: .... $85р«и» 2 2,4 ..;•. 3,94 • 1,1 : 2,0 0 .. О • 2,8 56 • 0 . 0 О V О

:

^■■¿■■Уг.

¡у..,-у у

■-л ЛЛ.-:

■ г - .. г. ■ .: '

■:'. .-" I

11-.

!■'. ■ У-.

в

I

3 ' ■ ; "4-

5 (у 7 ' 8 '9 -' 10

И '12 ' ТЗ

Ш-

да

II

{'.'у-''

>.

У, .(¡^аммонийный J : | р

азот, микро-/. 2 0,9 ' 1-элзмвнты —^уу-г

У1. С^, аммонийный' 1 д д

'.азот, микроэлз- 2 о!?5 ;■: меяты,.дрояже- - -."!. :■--■ вой автелизат . - ' ■ -

УП. Глюкоза я I 2,3 пептон _ ; .2. ■■■■ 2,5 ..:.

УН). СТс и пептон I 3,5 '.16 . . . . 2 3,8 :.■

9,27 0,8 3,79 ; О 0 2,5 6,65 0 .1,63 , 0 . 0 2,9

3,95 0 ' 1,1 0 ,0 2,8. 3,66 0,5 2,33 0 ; 0 . 2,7 :

! -.1 ■■ '

...

10,8 ' 1;8. '8,7-. 2,4 ;48 3,2

11,3 2,0 9*2 2,4 48 3,5

13,0 2,0.':,: 9,0 : ; 2,3 '46' 3,0 :

13,5 2,7. 9,5 2,2 .44 3,2.

50 56

56 • 54 • .

■ I.

64 й' 70

60 ;64

О

О

.0 ' <Ь:

Их 1:з

1,0 ■1.1

о : От

. О , 0..

о . о

■■до; 0..

22; 1,5

26-; 1,2

20 .1,2'

22 1,2;

О "■ 0- ■

уУ)/--'¿У-

.у

гТ-'"-'.':-.

■-г^уу';

./а -

.-■'■.■¡л. ■

■'■' ': '"" '■■''¡С*

. .. /-. • -.. 'Я:-•••'•• ;;/-г7• .-••* .7./->: /-^'^/Я.;-7/7 • ^Г: то 'глюкозы).7 Как показывают данные, у. микобактерии активность 7- фермента нарастает,, начиная со вторых суток и достигая .своего у ■ максимума на пятые ;сутки, снижается к седьиш суткам. У; бак-

77 : яскилосъ, что культуры из родов МуооЪаогед-Здп» • к•В»гегАиг»'': -. _ г . Г'-.' г обладают довольно широким спектром апилазноД активясютя,.котск.-^ 7 ..

•• рый'в _некоторых случаях повышается под влиянием гексадекаиа н •

'•"* '•" 77парафина.-Внесение;в среду эпсилон-бепзогл-;1)1>-лизина в качэ-7,7" ■ " •

^ . • ..-ачилазы .; для я. .. шт.632. . .оказалась глгкозо-

" 7- • пептонная среда Чибата.' Замена глюкозы на гексадекан в эква- ;7 - -. • валентном количестве почти не отражается на »пеило11ч5еязоы-. / ..:. Я"-.ь-лизинавдлазной активности штампа.,;:*,^'' •. " -. •" .7 -;„'7 ~

..'. .7 -г^г* ;.' . • "•.'•/'• " 7; V 7^' 7-•^•"л". - -V 7';/ - ""

- : ^-77 -'.' .' •• " •'•'Вув о л:вл:Я • *•* Л; ' "

. Ч\ч- \ В процессе микробиологических анализов 355 образда " 7 *7 .: ;Тпоч» и 'других субстратов,выделен 221 вггаьы■углеводородотасляю-"" * . - .. .' . "-щих- микроорганизмов,"которые по^систематическо^ половвпию рас-; . 7 7; ' ' _- пределяптся по родам следагкцим образам: йусоЪвс 1ег1ш» .-103, 7. • • 7 .• .7 V'В®» 7 ' -55, ГзеиЛ<яолаз 7: -35» ..Л0**1*3"*0?® 7 " -

• -77 ргоасгАпошуо'»»"^». . РиввА *- 7. культур.7.. *:7 * -7/ ••'• Т: 2. Установлено, что углеводородоотсляодие микроорганизмы ." распространены в различшх типах почв не1 одинаково:' паябольнзе ■Я 7 7 количество углеводородсжислямщих микроорганизмов выделяется из черноземных^ и; горяо-луговых/почв ;7 несколько меньше- из бура, и > -77' ' ; каштановых^л еще ыаныае^ - из лесных и торфшисто-болотнстих. В 7: -; почвах,/1 богатых^шкрофлорой, количество углеводрродошсляпвдх "•'•• /V

; 1шфо<чэга1шзмов'увеличивается. . V / ■ "

• •• _ ' •• По таксономическим группам углеводородокислямцих кикрс>7х -, • í .-у" организмов вовсех типах почв преобладают микобактерии;. угле- «=/>

■ водородокисляющке штаммы_из.рода Бас terina " чаще всего. вст-..; ре чаются в черноземных,-несколько реяе - в бурых, еще шиш-~- , ' 'i * - : \ в лесник почвах и отсутствуют в торфянисто-болотистых; актино— . \ манатов'больше всего в бурых почвах, в остальных типах'они • . . . -. .встречаются редко, а в торфяписто-болотистшс отсутствуют.. ... iS 'I;3- Распространение углеводородокисляшцсс микроорганизмов 7

. . в различных горизонтах почвы различно. В бурьсх и каштановых ■ " - r ¡

• ' ": почвах максимальное количество штаммов всех групп углеводород-, . ^

'""оявсляпшх микроорганизмов .выделяется из: поверхностных слоёв ^ ' 7'v

(0- 20 см), ва глубине до 50-100 см содержание этих;организмов", ... значительно уменьшается.: В черноземных и горно-луговых почвах~ " V -": углеводородокисляющие мшфооргашзмы ■ обнаруживаются в больших. т . v i ; количествах до глубины' 100 см. В лесных шчвах углеводррод- " .. - .* .окисляющие' штаммы встречаются по сравнению с другими типами/. 7 • :почв реже и число обнаруживаемых шташов" постепенно уменьшается - ~ - *" по ызро углубления взятия почвенного образца'.В торфянистскбсн- '. .■■:.,:.■/■- лотистых почвах во всех слоях выделено оданаковое количество ;

/ * углеводородокисляодах штаммов, которые, ■ в основном, относятся ]■'-■ '■■■-.■..< к микобактериям. "■:;.■.'/"■■^■"tí^V-

т В окультуренных шчвах отмечается повышенное содержание угяеводородакислшхщх микроорганизме®:' почти вдвое бальт, чем/, в веокультуренных. / .. ;

.г: : Обследованные намк образш почв разных климатических - '

; W J зон из1 некоторых доугих местностей вне Армении (Московская об-^у > . • • ' ласть, Ленинградская область, Карельский перешеек, - Ставрополь, У .

■ Кин^вода," Батуми, Кольский полуостров, почвы,Египта), образцы. ' - . , некоторых природных субстратов (конского навоза, .кроличьего

% пшета), а также лечебнойгрязи Анкавана содержали нвспороноо»" ' ; . ные углеводрродокисляющие микроорганизмы. •' / / V-V:"--'^'.

'. 5. Специальными исследованиями установлено, что среда вы-=' / деленных' углеводородокисляющих микроорганизмов совершенно отт / . '•', - сутствуют спорообразуицие бактерииг Они не были обнаружены^ ни : г.. • ; •. .'в образшх почв, ни в других природных субстратах. • "~.;V;.'.V-6. Изучение 398 культур аэробные сиорообразуицих бактерий

. j

- - L .

■ * i

ЕЭ'дазшгсвшюкциВ-яа способность их усваивать в-алкаян даяо '. ¿ ^отрицательный результат., В число обследованных,видов входили

представители'~вас.о«гвив г}1шг1а£1евв1в - 163 штамма, вас. • V ; : ■ ®иМИ1в-»еввп*«г1сив -'53^ Вае,яуео1Й«а - 46, Вае^п«gatcrl.ua - ^ Г^'-'г« '. " . 21, Вав;1Ловив-а<;в1стоегаЪ1а - . Вас уха - 16,"Ваб«ЭДо'*1а1 ••'«• Л

- 12, Вае.Ъг«т1в - 6, Вае,а1тв1 - 3, Вао.Пхтив - 3, Вав»вав1*1- . : сапа —Вас.рдаНиа -*3, Вас.афЬавгЧсив ~ вас;ааЬаегевв -. - .. .

: 2, Вас.вйЫЛла -'г, Bac.badl.us ~ 2» Вао,с*гси1ваг' "* 2С Вас.соаг- . -ви1ааа — 2, Вао.£Е>ашаоеиа - 2, Вас.З^вгоарогив .-'2, Васласе— .

• У"...... таю — 2, Вав.авгеа!!» - Вас.1епЪ*8 - 1; Вас »ра1т1?ао1епя —

• - • I штамм. " ; ■■*■'.' У.

, 7. Идентификация выделенных" нами углеводородотагсляющих ?; >.

- микроорганизмов,' проведенная на основании морфологических, "X " ' культуральшЕС,' физиологических и'биохимических признаков, 'по— '¿у:2,:' — •' казала, что они относятся к разным группам. Всего идаити^циро-:_ • . ;'.

Л I: вано 27 видов; один вид, 6 разновидностей микобактерий и одна ■ ■

'разновидность актЬномицета на* основании комплекса морфо-^изио^ 1 логических. особенностей выделяется в ■ новые таксономические ка- -. .

• тегории. ;'• • •".'•*•,•:•.";' . ' ; '7 ' "

8. Спектр углеводородокасляяцей способности выделенных ; / Л; " ;культур"обнаруживавт ¿пределеиную специфику у исследованных...''; ' у:;...-С микроорганизмов: Ыикобактерии, относящиеся к.видам'МусоЪ.с®«- ';*,>. . ' .-••,-. Наси»^. М.пиЪЦцш, М.тисовип, И.регпцоэил »■Ииийоиа, М.аИиг-• ^ VI а!цт,М.егага1а±а,М.гев Ъя*.П¿гт¿М . 1 ео«.001*» -хорошо : _ -'л;. растут на алифатичэских углеводородах; жидком, трафгае и-дизель— ' .. ном топливе, но не развиваются на циклических соеданениях. Из ••.. алифатических углеводородов ■ большинство микобактерий растет на ".;='_¡..тг, " ~ "" и-^алканах от. декана до тетрадакапа;: гексан и гептан угнетают ' : ; рост микобактерий, октан и нонап усваиваются слабо. Изооктан ни . • ".-одним иэ:изученяых штаммов микобактерий^не усваивается. Пример-

• : " •^но аналогачная картина наблюдается и у представителей бактерий.

г- - и- актиномкщтов.г : ' . ^ У . ' " ^'л"".-:

• ^ - 9. На примере изученных.штаммов микроорганизмов установлю-; "

•• : но,- что свойство'усваивать углеводороды" не может слукять'систе-! ^ . :

• : матиче'ским ьфитерисм для разграничензм крупных групп и родов.-«- ь •- !

- Однако," эта бсобешюотУ/как бй^огическиЕ1физнак,.ачтаяяв :спё- :г. ,н ^ . цкфшеа в использовании углеводородов с разным строе гаем и дли- / '

ной углеродной щш характерны дкя некоторых внутриродових ■ ' "у группировок, видов в разновидностей," а потс*^. макет служить у -"•' 'у Г- '• . 'иодезш« критерием для их разграничения.-.. ' ; ; ^

'•" " .10. Вцделепшв штаммы углеводрродокясляюящх микрооргаииз- • , . . мсш накапливают биомассу пряростена минеральной питательной' у ;

... среда с углеводородами в качестве единственного источника угле- у

' . '"рода с разной интенсивностью, причем более "интенсивно, чем на : - ^ : ■ - ' глюкозе. Наибольший выход'Сиомассы на н-гексадекане образуют - . - . У .. птеюо)' Васг.в^Ыаста», В.а11рЬвЛ1сид, В.топЧапит ар.ьот. >и ..'

. - ,Мусоь,гев«гю1т." у ... . .',.'■". -у.Лу -.. ;■ ' .т" 'у . " . II. Установлено, что многие выделенные из почв Армении- . . .' - .углвводородокисляпдие штаммы микроорганизмов способны цродуни- - / ; ■ - ровать ащлазы, разлагающие производные аминокислот и органиче- , у -У.: у- скхх кислот., Ашхазная активность свойстванна представителям • ■ У ■ г. х . разных видов бактерий, микобактерий и актиномкцетов; Более! : :: ражена ацялазчзя активность по отношению к ацетил- и бензоил- У ¡^¡'-'"У''^, производном штионина, лейцина, норлсбдона, а также эпсилон-^' Л..-' ' :

• бенэоил-ы,-лизину. Изученные микроорга!шзмы не обладали спо-. •; • • • у £собностью гждролизовать-апилпроиэводные гистидива, триптофана,: 'У"'.'." ' аспарагина, глутаминовоВ и каприламинокапроновой кислот. • \ • •

<,12. На основании морфсь^изиологического исследования 16. > „

• 'Л.Г. ктаиюв- продуцентов эпсилон-бепзоия- ь-лизинашлаз, перепёк- •_•• ..• ^

' тнпяшс для оптического гидролиза рацэкатов лизина и получения' -. -у 'у ; - ь-лязнпа, от несены-нами к видам НуооЬ.сови.аойт, м.ааНта- .^^У/! У;.^.:;'; Г-,-'-''■;■ V. М.реггщоэил «4Ьап1о\п, .В.'УУУг;'^

- /аИрНаЗДош, Ас4.рягаГГ1»>огад1<1ив., ^ -У^/'-. . ">/ •

'уУДЗ. Алифатические углеводороды (0^6 и смесь н-алканов) ока- ::: ^ -. .зьвапт заметное'стимуллрупкее влияние на образование ацилазных % л:: * 1У"-'у энэгиов у изученных углеводородокисляккцих штаммов!, У у ../" -у'-*;'.';'/ У -у'у * V .г - 14*.' Оптимальной средой для образования эпсилон-бензоил-•..•"•• : 'Ь-длзипашмазы и накопления максимального количества биомассы :'.„V ^ . культурой . шт.632г1фи глубинном вщ>ащквании в с'-1"-

течение 5 суток при 30°, является среда Чибата (пептон, глюко-; ■ "

' за, ), где глюкоза может быть заменена 2,5£ гексадекана. . Л. Наибольшая активность штата проявляется на пятые сутки б реак- -. --;>1?101Ш01 сиесл с рН - 7,2. •. . / У;; '.'.У ^ | "

' ' Список. " - ■■'': ■ .■'■'

работ», опубликованных Ä> материалам дкссартавди ■

I. Выделение из. почв бактерий, усваиваюпщ: углеводорода-нефти. I9G4, ¡Материалы Х11У научной сосся" Ереванского Государственного Университета, Ёреван. -Г ^.vi j

. 2. Распространение углеводородусваиваюцих микроорганизмов в почвах Армении.', 1966, "Биологический журнал Армении",

12. э. • -^'v-y

3; Изискание продуве ктов банзоиллизкнацилаз микробного > происхождения. 1969, Тезисы докладов научной шк^ерен- ... : цяи по биосинтезу.лизина и глутаминовой кислоты, Ереван.

4. Образование акзлаз углеводородокислявщиии микрооргэниз- " -■. мтыя. .1970, "Биологический аурнал Армении"» 7 (в ;. . соавторстве с Сапченко P.A.). 'У"; -

'^Х 5.; Выделение и изучение биологических особеЕЕостей ввкого-" рых углеводородокисляшшх бактерий. 1971,'Тезисы докладов научно-технической контореноги молодах учевих,-/ ■ ;" Ерсрзн (в соавторстве! с.'Савченко P.A.) ' *-' ■ ■ ''■■■.'. "

Заказ 92_ВФ 04509 Тираж 250

Печатио- множительная лаборатория Ереванского медицинского института, Ереван,Кирова-2