Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОВ ВИЛОЧКОВОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ЭПИФИЗА И ГИПОФИЗА НА ИММУНИТЕТ И ГЕМОСТАЗ (Экспериментально-клиническое исследование)

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОВ ВИЛОЧКОВОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ЭПИФИЗА И ГИПОФИЗА НА ИММУНИТЕТ И ГЕМОСТАЗ (Экспериментально-клиническое исследование)"

На правах рукописи

КУСТОВСКАЯ ЕВГЕНИЯ МИХАЙЛОВНА

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОВ ВИЛОЧКОВОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ЭПИФИЗА И ГИПОФИЗА НА ИММУНИТЕТ

И ГЕМОСТАЗ (Экспериментально-клиническое исследование)

00 03 13 - Физиология

14 00 16 - Патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

о 4 №ггт

Чита - 2008

003445840

Работа выполнена в ГОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия Росздрава"

Научный руководитель

Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор

Научный консультант

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

кандидат медицинских наук, доцент

Кузник Борис Ильич

Малинин Владимир Викторович

Цыбиков Намжил Нанзатович Альфонсова Елена Вадимовна

Ведущая организация: Государственное учреждение "Гематологический

научный центр РАМН", г Москва

Защита диссертации состоится " " ¿уы[' 2008 г

в "часов на заседании диссертационного совета Д 208 118 01 при ГОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия Росздрава" (672000, г Чита, Горького 39а)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия Росздрава"

Автореферат разослан " /Г~" а^гуск^О., 2008 г

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 208 118 0 кандидат медицинских наук

О.В.Кузьмина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Важнейшими регуляторами иммунной системы являются комплексы полипептидов, получившие наименование цкго-медины (Хавинсон В.Х , Морозов В Г.,1983, 2002, 2003, Анисимов В Н. и соавт, 1985 - 2007, Кузник Б И, и соавт 1989, 1998, 2004, Малинин и др, 2000,2001) Установлено, что цитомедины образуются в самых разных органах, тканях и клетках Их специфическая функция направлена на коррекцию деятельности того органа, из которого они выделены В то же время неспецифические влияния цитомединов весьма многообразны и распространяются на иммунитет, неспецифическую резистентность организма, систему гемостаза, перекиспое окисление липидов, регенерацию тканей (Хавинсон BJC, Морозов В Г, 1983, 1985-2005, Кузник Б И и соавт, 1989-2004, Малинин В.В и соавт, 2002, и др)

За последние годы на основании изучения аминокислотного состава цитомединов тимуса, эпифиза, гипофиза и других эндокринных органов, методом целенаправленного синтеза получены олигопептиды, обладающие чрезвычайно широким спектром действия и названные цитогенами (Хавинсон В.Х, Морозов В Г, 1989-2003, Малинин В В и соавт., 2000,2001, Анисимов В.Н и соавт, 2002, Патеюк А В и соавт, 2007, Khavinson VKh, 1999, Khavinson VKh, Malinm VV, 2003) Одним из основных их свойств является способность в значительной степени заменять специфические цитомедины

Вместе с тем, установлено, что многие пептиды обладают антиагрегаци-онным действием, замедляют свертывание крови и стимулируют фибриволиз (Макаров В А и соавт, 1999 - 2007, Пасторова В Е и соавт, 1999, Ашмарин И П и соавт, 2002,2004, Петросян М Т., 2002, Bajusz S и соавт, 1995).В то же время практически не существуют соединений, которые одновременно могли бы стимулировать иммунитет, обладать антиагрегационным и антикоа-гулянтным действием, а также стимулировать фибринолиз. Более того, прямые и непрямые антикоагулянты, как правило, вызывают депрессию клеточного и гуморального иммунитета (Кузник Б И и соавт, 1989, 1998, 2004).

Вот почему поиск низкомолекулярных соединений, способных одновременно стимулировать иммунитет и предотвращать ДВС-синдром является чрезвычайно актуальной задачей для современной медицины

Цель исследования - изучить действие пептидов, синтезированных на основе исследования аминокислотного состава цитомединов, полученных из тимуса, эпифиза и гипофиза, на иммунитет и гемостаз в эксперименте и клинике

Задачи исследования:

1 Исследовать влияние пептидов, синтезированных на основе изучения ами-

нокислотного состава цитомединов, выделенных из вилочковой железы, эпифиза, передней и задней долей гипофиза, на показатели клеточного и гуморального иммунитета, свертывание крови и фибринолиз в опытах in vitro и m vivo

2 Изучить, как действуют вилон (Lys-Glu) и эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly) при сахарном диабете 1 типа на состояние иммунитета, свертываемость крови и фибринолиз

3 Установить, как влияет дипептид вилон на показатели клеточного и гуморального иммунитета у неоперабельных больных раком различной локализации

Научная новизна. Показано, что в опытах m vitro пептиды Ile-Trp, Lys-Glu-Val-Trp и Lys-Glu (вилон) значительно стимулируют экспрессию рецепторов тимоцитов, обработанных трипсином Пешиды Ile-Trp, Lys-Glu, Glu-Lys, Glu-Trp (тимоген) стимулируют экспрессию рецепторов на клетках CD4+ крови больных с иммунодефицитами, тогда как Ile-Trp одновременно усиливает экспрессию рецепторов на лимфоцитах CD4+ и CD8+

У больных с вторичными иммунодефицитами под воздействием Lys-Glu-Asp-Gly увеличивается количество общих и активных Т-лимфоцитов Под влиянием Gly-Glu-Asp-Ala у больных с ожогами отмечается рост числа В-лимфоцитов Тетрапептиды Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala проявляют антикоагулянтный эффект и стимулируют тотальный эуглобулиновый фибринолиз

Выяснено, что эпиталон эффективнее, чем вилон, нормализует состояние иммунитета, свертывания крови и фибринолгоа у больных сахарным диабетом 1 типа И вилон и эпиталон в о гношении лимфоцитарно-тромбоцитар-ной адгезии обладают модулирующим действием В то же время под воздействием вилона значительно увеличивается абсолютное содержание лимфо-цитарно-тромбоцитарных агрегатов, тогда как под влиянием эпиталона их число возвращается к норме

Впервые показано, что вилон предотвращает падение абсолютного и относительного числа лимфоцитов и их субпопуляций у неоперабельных больных раком различной локализации

Теоретическая и практическая ценность работы. Полученные данные значительно расширяют наши представления о механизме действия ди-пептидов и тетрапептидов, синтезированных на основе изучения аминокислотного состава цитомединов, выделенных из различных органов

Предложено применять вилон или эпиталон при сахарном диабете 1 типа в дозе 10 мкг на инъекцию на протяжении 10 дней У неоперабельных больных раком различной локализации рекомендуется использование вилона в дозе

1 мг на инъекцию на протяжении 10 дней

Внедрение в практику. Результаты работы внедрены в педагогический процесс на кафедрах нормальной и патологической физиологии Положения, выносимые на защшу:

1 Пептиды Ile-Trp, Lys-Glu-Yal-Trp и Lys-Glu (вилон) в опытах m vitro значительно стимулируют экспрессию рецепторов тимоцитов, обработанных трипсином Пептиды Ile-Trp, Lys-Glu, Glu-Lys, Glu-Trp (тимоген) стимулируют экспрессию рецепторов на клетках CD4+ крови больных с иммуно-дефицитами, тогда как Ile-Trp одновременно усиливает экспрессию рецепторов на лимфоцитах CD4+ и CD8-t- Под воздействием пептида передней доли гипофиза - Lys-Glu-Asp-Gly увеличивается количество общих и активных Т-лимфоцитов в крови, полученной от здоровых людей и больных с ожогами Под влиянием пептида задней доли гипофиза - Gly-GIu-Asp-Ala отмечается рост числа В-лимфоцигов Тетрапептиды Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala проявляют антикоагулянтный эффект и стимулируют эуглобу-линовыи фибринолиз Тимоген и в меньшей степени вилон у крысят оказывают стимулирующее действие на рост эксплантатов тимуса Тимоген в этих условиях отчетливо стимулирует рост эксплантатов ткани селезенки крыс

2 При введении мышам вилона в дозе 0,01 мкг/кг массы увеличивается процентное содержание Т-лимфоцитов в селезенке, возрастает хемотаксичес-кая активность и фагоцитоз стафилококков нейтрофилами Тимоген лишь в дозе - 1 мкг/кг веса стимулирует фагоцитоз и хемотаксис нейтрофилов Использование эпиталона вызывает торможение хемотаксиса нейтрофилов

3 Использование у больных сахарным диабетом 1 типа вилона и эпиталона на фоне традиционной терапии приводит к уменьшению числа Т-хелперов и соотношения CD4+/CD8+, количества Т-зависимых и Т-независимых NK-клеток, а также активных Т-лимфоцитов, нормализации числа В-клеюк и уровня IgA Одновременно биорегулирующие препараты нормализуют состояние свертывающей системы крови и лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию, проявляя выраженный модулирующий эффект Вместе с тем, вилон, в отличие от эпиталона увеличивает абсолютное и относительное число лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов

4 Вилон у неоперабельных онкологических больных предупреждает уменьшение числа лейкоцитов, лимфоцитов и их популяций и субпопуляций, увеличивает продолжительность и качество жизни этих пациентов

Апробация работы. Результаты работы неоднократно докладывались на заседаниях кафедры нормальной физиологии Читинской государственной медицинской академии, Читинского отделения Всероссийского физиологического общества имени академика И П Павлова, а также на Всероссийской

конференции "Перспективы фундаментальной геронтологии" (Санкт-Петербург, 2006), ХХ-м съезде физиологического общества имени И П Павлова "Влияние биорегуиирующей терапии на состояние иммунитета и гемостаза при заболеваниях, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами и хроническим ДВС-синдромом" (Москва, 2007), Международной научно-практической конференции "Роль физиологии в современном естествознании", (Чита, 2007) Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 работ, в т ч 2 статьи в ведущих научных журналах и изданиях, определенных ВАК Министерства образования и науки РФ

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, двух глав собственных данных, обсуждения, выводов, списка цитируемых источников литературы, включающего 240 наименование (200 отечественных и 40 зарубежный автор) Работа иллюстрирована 15 таблицами

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Методы исследования системы гемостаза Активированное частичное тромбопластиновое время - АЧТВ (по J Gaen et al ,1973 ) протромбиновое время (Quick A J , 1943), тромбиновое время (Syrmai Е , 1957), время ре-кальцификации плазмы (Bergerhof Н D , Roka L, 1954), концентрация фибриногена (Klaus S , 1992), тотальный эуглобулиновый и хагеманзависимый фиб-ринолиз (KowarzykН , Buluk L, 1964, ЕреминГ Ф иАрхиповаА Г, 1982), активность антитромбина III (Баркаган 3 С,МомотА П,2001) Все перечисленные методы вошли в руководства по исследованию свертывающей системы крови (Баркаган 3 С , Момот А П , 2003)

Определение иммуноглобулинов классов А, М и G осуществлялось им-муноферментным методом с использованием тест-наборов ООО "Вектор-Бест" (Новосибирск), подсчет основных субпопуляций лимфоцитов производился на проточном цитометре Epics XL-MCL фирмы Beckman Coulter (реактивы Immunotech, поставка компании "Биохиммак") с выявлением поверхностных маркеров лейкоцитов CD3+, CD4+, CD8+, CD14+, CD16+, CD19+, CD45+, CD56+, HLA-DR+ Процентное содержание Т- и B-лимфоцитов в суспензии спленоцитов определяли в методе непрямой иммунофлуоресценции (Шторх В , Эммрих Й , 1987)

Для изучения фагоцитарной активности крысам за 2,5 часа до окончания эксперимента вводили внутрибрюшинно 10% стерильный пептон для получения максимального выхода нейтрофилов (95-98%) Концентрация клеток пе-ритонеального экссудата служила критерием оценки хемотаксической актив-

ности нейтрофилов в ответ на индуктор В качестве объекта поглощения использована суточная культура Staphylococcus albus В мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, определяли фагоцитарный показатель (процент нейтрофилов, участвующих в фагоцитозе) и фагоцитарный индекс (количество микробов, захваченных одним нейтрофилом) Лимфоцитарно-тромбоцитар-ную адгезию исследовали по методу Витковского Ю А и др , 1999

Статистическая обработка материала выполнена при помощи электронной программы (Windows Vista Microsoft Excel 2003) Достоверность полученных данных определяли с помощью критерия Стьюдента

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Сравнительная оценка иммуноактивных свойств синтетических пептидов in vitro

Данный раздел работы выполнен под руководством д м и, профессора Малинина В В на базе ГУ "Гематологический научный центр РАМН", г Москва

Для сравнительного изучения m vitro использовали пептиды, выделенные из тималина Glu-Trp (тимоген), цикло-Glu-Trp, Lys-Trp, Ile-Trp, Arg-Glu-Trp, Lys-Glu-Trp-Tyr, Lys-Glu-Val-Trp, His-Glu-Trp, а также Lys-Glu (вилон) и Glu-Lys С этой целью использовали тимоциты 12 интактных морских свинок Установлено, что синтетические пептиды Ile-Trp, Lys-Glu-Val-Trp, Lys-Glu во всех исследуемых концентрациях стимулировали экспрессию рецепторов тимоцитов, обработанных трипсином (р<0,05) Вместе с тем, иммуноак-тивные свойства выявлены и у других пептидов, но не в таком широком диапазоне концентраций

Пептиды Ile-Trp, Lys-Glu, Glu-Lys, Glu-Trp оказывали наиболее выраженное стимулирующее воздействие на экспрессию рецепторов на CD4+ лимфоцитах крови больных (р<0,05), но не вшили на CD8+ - клетки, за исключением Ile-Trp Другие исследуемые пептиды подавляли экспрессию CD8+

Влияние тимогена, вилона и эпиталона на рост органотипической культуры тканей

Тимоген (Glu-Trp), вилон (Lys-Glu) и эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly) вносили в культуральную среду в концентрациях 1,10,20,50,100,200,400 иг/мл, в которой загем культивировали фрагменты тимуса и селезенки 21 -дневных крыс линии Вистар в течение 3 и 7 дней Критерием биологической активности слу-

жил индекс площади (ИП), значения которого выражали в процентах, контрольное значение ЙП принималось за 100%

Установлено, что у 21 -дневных животных тимоген оказывал стимулирующее действие на рост эксплантатов ткани тимуса (Р < 0,05), тогда как при использовании вилона отмечалась лишь тенденция (Р<0,2) к увешгчепшо роста эксплантатов Эпигалон на рост ткани тимуса крыс разных возрастных групп влияния не оказывал Использование тимогена в эффективной концентрации стимулировало рост эксплантатов ткани селезенки крыс (Р < 0,05)

По-видимому, особенности действия тимогена и вилона на рост лимфо-идной ткани определяются структурными характеристиками этих дипептидов

Влияние тимогена, вилона и эпиталона на показатели иммунитета и фагоцитарной активности лейкоцитов в опытах ш vivo

В работе было использовано 50 мышей - самцов СВА массой 18-20 г, которым ежедневно однократно внутрибрюшинно в течение б дней вводили вилон (Lys-Glu) в дозе 0,01 мкг/кг и эпшалон (Ala-Glu-Asp-Gly) в дозе 0,01 мкг/кг В качестве препарата с известными иммуномодулирующими свойствами для сравнения использовали тимоген (Glu-Trp) в до-зах 1 мкг/кг и 0,01 мкг/ кг Животным контрольной группы по той же схеме вводили апирогенный физиологический раствор. Все животные были разделены на две части - по 25 мышей В первой части животные не подвергались никаким дополнительным воздействиям, во второй - получали внутрибрюшинное введение пептона Животных забивали методом цервикальной дислокации и в суспензии сплено-цитов определяли процент содержания Т- и В-лимфоцитов в непрямом методе иммунолтоминесценции Кроме i ого, определяли фагоцигарный показатель и фагоцитарный индекс нейтрофилов

Оказалось, что под влиянием вилона увеличивалось процентное содержание Т-лимфоцитов в селезенке (Р<0,05) В остальных группах изменения содержания Т- и В-лимфоцитов в селезенке не наблюдалось Кроме того вилон обладал способностью усиливать хемотаксическую активность и фагоцитоз стафилококков (Р <0,05)

Тимоген в дозе 0,01 мкг/кг не обладал способностью стимулировать нейгрофилы Однако, в большой дозировке - 1 мкг/кг массы тимоген также стимулировал фагоцитоз и хемотаксис нейтрофилов (Р<0,05) Использование эпиталона вызывало торможение хемотаксиса нейтрофилов (Р<0,05)

Следует заметить, что вилон оказывал сильное иммуностимулирующее влияние на показатели иммунитета и фагоцитарную активность в дозах в 1001000 раз меньших, чем тимоген При использовании эпиталона отмечалась тенденция к подавлению функциональной активности нейтрофилов

Влияние пептидов Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala на иммунитет

В экспериментах использована кровь 10 здоровых людей и 10 больных с ожоговой болезнью, у которых зарегистрировано наличие клеточного иммунодефицита и внутрисосудистое свертывание крови О степени воздействия на иммунитет судили по экспрессии рецепторов Т и В-лимфоцитов, инкубируемых с Lys-Glu-Asp-Gly или Gly-Glu-Asp-Ala в дозе 0,01 мг на протяжении двух часов В контроле полипептиды заменяли таким же количеством трисбу-фера, на котором разводили изучаемые препараты

Используемые тетрапептиды не влияют на экспрессию рецепторов лимфоцитов здоровых людей В то же время у больных с вторичными иммуноде-фицитами под воздействием Lys-Glu-Asp-Gly значительно увеличивается количество общих и активных Т-лимфошггов (р<0,001), хотя их число не доходит до нормы Под влиянием Gly-Glu-Asp-Ala у больных с ожогами отмечается тенденция к увеличению общих Т-лимфоцитов и рост числа В-лимфоци-тов (р<0,001) Наиболее интенсивное действие на экспрессию рецепторов Ти В-лимфоцитов проявляется при совместном впесении в культуру клеток Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala (р<0,001)

Влияние пептидов Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala на свёртывание крови и фибринолиз

В следующей серии наблюдений мы проследили, как влияют на основные показатели свертывания крови и фибринолиза тетрапептиды Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala Для этого использовалась кровь здоровых людей и больных с ожогами При исследовании к 0,1 мл плазмы добавляли 0,01 мг тетрапептвда, растворенного в 0,1 мл трисбуфера

Оказалось, что используемые тетрапептиды на плазме здоровых и больных людей удлиняют время рекальцификации, АЧТВ, протромбиновое и тром-биновое время, что, скорее всего, объясняется способностью изучаемых пептидов связывать тромбин (табл 1)

На плазме здоровых людей антикоагулянтное действие наиболее интенсивно проявляется под влиянием Gly-Glu-Asp-Ala (Р<0,001) Вместе с тем, Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala в одинаковой степени стимулируют тотальный эуглобулиновый фибринолиз (Р<0,001) и не оказывают влияния на лизис сгустка, активированного стрега окиназой и каолином

Полученные факты позволяют допустить, что исследуемые полипептиды обладают свойствами активатора плазминогена и не способны заменить плазмин

Следовательно, синтезированные на основании изучения аминокислотного состава цитомединов передней (ПДГ - Lys-Glu-Asp-Gly) и задней (ЗДГ -

Таблица 1

Влияние пептидов Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala на свертываемость крови и фибринолиз людей с ожогами (М±т)

Изучаемые показатели 1 п=10 2 п=10 3 п=10 4 п=10

Время рекальцификации плазмы, с Р 54,7+5,2 72,3+4,8 <0,001 74,5+5,6 <0,001 86,4+5,3 <0,001

1ромбиновое время, с Р 10,6+2,1 14,7+2,9 15,1+2,4 16,8+3,6 <0,05

Протромбиновое время, с Р 12,6+2,4 20,6+3,5 <0,001 23,4+4,2 <0,001 24,9+4,4 <0,001

АЧТВ, с Р 33,5+4,3 48,8+5,1 <0,05 50,244,7 <0,001 54,6+5,6 <0,001

Эу1лобулиновый фибринолиз, мин р 420,0+18,7 165,8+16,4 <0,001 174,8+15,6 <0,001 172,4+17,5 <0,001

Примечания 1 плазма с физиологическим раствором, 2 плазма с Lys-Glu-Asp-Gly, 3 плазма с Gly-Glu-Asp-Ala, 4 плазма одновременно с Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala, Р - достоверность различия между 1 и 2,3,4

Gly-Glu-Asp-Ala) долей шпофиза тетрапептиды, усиливают экспрессию рецепторов на Т-общих, Т-активных и В-лимфоцитах, замедляют свертываемость крови и стимулируют фибринолиз Антикоагулянтное действие в большей степени присуще тетрапептиду задней доли гипофиза Установлено, что Lys-Glu-Asp-Gly действует преимущественно на Т-, a Gly-Glu-Asp-Ala - на В-лимфо-циты

КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Влияние вилона и эпиталона на состояние иммунитета и гемостаза у больных сахарным диабетом первого типа

Всего под нашим наблюдением находилось 77 больных - 34 мужчины и 43 женщины в возрасте от 15 до 57 лет Длительность заболевания составляла от 0,5 до 32-х лет, в среднем около 10 лет 1-й тип диабета подтверждался анамнезом, видом лечения, уровнем С-пептида от 0,1 до 0,8 нг/мл (норма 1,1-3,6 нг/мл) Все больные поступали в стадии декомпенсации с уровнем сахара крови натощак от 3,5 до 37,5 ммоль/л и содержанием гликированного гемоглобина от 6,8 до 16,1% (в среднем - 9,8%) В качестве контроля обследовано 50 относительно здоровых людей разных возрастных групп

Все наблюдаемые больные с момента диагностики СД получали генно-

инженерный инсулин 3-х ведущих фирм-производителей (Ново Нор диск -Дания, Эли Лили - США, Авентис - Германия)

Помимо инъекций инсулина, всем больным проводилась диетотерапия и обучающая программа с методами самоконтроля Доза инсулина, корригирующая углеводный обмен, составляла от 14 до 80 единиц, в среднем 47 ЕД в сутки

Все исследования осуществлялись утром при поступлении в стационар больных, находящихся в стадии декомпенсации, а также после оконч ания курса тер апии

10 исследуемых больных находились на обычной стандартной терапии Достижение компенсации у них достигалось главным образом за счет увеличения дозы вводимого инсулина 15 больным кроме стандартной герагши назначали вилон и 9 эпиталон из расчета 10 мкг на инъекцию на протяжении 8-10 дней(табл 2)

Число лейкоцитов и лимфоцитов у больных СД-1 оставалось в пределах нормы, тогда как процентное содержание лимфоцитов у больных оказалось значительно повышенным Абсолютное количество зрелых Т-лимфоцитов (СБЗ+) у больных СД-1 было резко увеличено Вместе с тем, относительное содержание клеток, несущих маркеры С03+, у больных СД-1 оставалось в пределах нормы Кроме того, у больных отмечалось увеличение как относительного, так и абсолютного содержания Т-хелперов (СБЗ+С04+), тогда как абсолютное количество СТЬ (С03+С08+) оставалось без изменений, а их относительное число уменьшалось При этом резко возрастало соотношение С04+/СБ8+ что свидетельствовало о значительном усилении хелперной активности, и, следовательно, возможности развития аутоиммунных процессов Как относительное, так и абсолютное количество Т-независимых >Ж-клеток (СОЗ-СО 1б+С056+) при СД-1 уменьшалось, ауровень Т-загшси\шх ЫК-кле-ток (СОЗ+СБ16+СБ56+) резко возрастал, что говорит о повышенной способности этих клеток распознавать чужеродные агенты Абсолютное число активных Т-лимфоцитов (СОЗ+НЬЛ-1Ж) лишь слегка повышалось, тогда как относительное их количество не изменялось

Представленные данные свидетельствуют о том, что при СД-1 имеется значительное усиление клеточного иммунитета При этом резко преобладает хелперная активность В процессе традиционной терапии отмечалась практически полная нормализация клеточного иммунитета Однако у таких больных выявлялось повышение числа моноцитов, и оставалось увеличенным соотношение С1)4+/'С08+, что свидетельствует об усилении хелперной активности и, следовательно, об аутоиммунной агрессии

При использовании в »лона на фоне традиционной терапии сохранилось

Таблица2

Состояние клеточного иммунитета у больных СД-1, получавших стандартное лечение и терапию с применением вилопа и эгшталона (М+ш)

Исследуемые показатели Контроль (здоровые) п=50 Больные до лечения п=25 Станд лечение п=10 Станд лечение + вилоп п=15 Станд лечен + эпиталон п=9

Лейкоциты / мкл 6156±197 6337±134 6120±234 5785±109,5 5890±111,3

Лимфоциты (абс) / мкл 2011±210 2366±94 1827±109 2156±99 2006,9±217

Лимфоциты, % Р. 31,4±1,3 38,2±2,1 <0,05 29,6±1,7 <0,01 34,0±2,5 34,1 ±3,6

СОЗ+ / мкл Р. Р2 1302±51 1812±71 <0,001 1351±126 <0,01 1658±71 <0,05 1692,5^228

СОЗ+, % р, р2 74,9±0,7 75,9±2,0 74,1±1,6 80,5±1,7 <0,05 82,7±1,8 <0,05 <0,05

СОЗ-СГ) 4+ / мкл Р, Рг 731±32 120б±78 <0,001 791±126 <0,001 1020±76 <0,01 <0,05 1075,1±187 <0,05

Т-хелперы (СОЗ+СШ+), % Р, р3 41,3±0,8 51,0±1,8 <0,001 43,8±1,4 <0,001 47,2±1,9 <0,001 53,5±3,7 <0,001

СОЗ'СЭ 8+)/ мкл 51¡±22 562±68 504±74 499±40 558,3±99,0

СТЬС03+С08+, % Р. 29,1±0,7 23,3±0,9 <0,01 25,3±1,4 <0,05 24,6±1,3 <0,05 27,8±2,6

СШ+/С08+ Р. 1,5±0,0б 2,3±0,17 <0 01 1,9±0,27 2,0±0,13 <0,01 <0,1 1,81±0,2 <0 05

СЭЗ-СО 16-КЛ)5 6+ / мкл Р. Р; 213,0±17,0 170,0±?5,6 207,5±31,4 127,4±18,5 <0,05 <0,1 97,2±23,6 <0,001 <0,05

СОЗ-СО!6+-, С056+ % Р, Р, 12,0+0,8 7,45±1,0 <0,05 10,0±1,3 5,64±0,3 <0,001 4,8±1,1 <0,001 <0,001

С03-КЮ16+С056+ /мкл Р, 38,5±5,0 103,6±11,5 <0,001 49±8,8 <0,01 70,2± 11,8 <0,05 <0,05 112,9±38,6 <0,01

С03-Ю016-Ю05б+, % Р, Р; 2,5±0,3 4,3±0,3 <0,05 2,4±0,5 <0,05 3,9±0,6 5,9±2,3

СОЗ+НЬА-ПЯ+/ мкл Р, Р, 84,7±8,3 106,5*10,9 81,4±16,4 77,0±12,0 <0,05 33,4112,0 <0,01 <0,001

Продолжение таблицы 2

Исслед>емые показатели Контроль (здоровые) п=50 Больные до лечения п=25 Станд лечение п=10 Станд лечение + вилон 1Г15 Стапд лечен + эпиталон п=9

СШ+Н1АЛЖ+, % Р, Р, 4,8±0,4 4,8±0,7 4,5±ОД 4,0-1:0,3 1,7±0,6 <0,001 <0,001

С03-С019+/мкл Р, Р2 201±13 359,8±23,3 <0,001 233,4±33,7 <0,05 252,4±24,7 <0,01 213,6±25,6 <0,001

СЮ-С019+-, % Р, 11,5±0,5 15,3±1,3 15,2±3,5 12,4±1,3 <0,05 11 7± 1,1 <0,05

СЭЗ+/СЛ19+ 6,5±1,1 5,05±0,8 5,7±0,7 6,5±0,9 5,04±0,7

Примечания: Р, - достоверность различий между здоровыми и больными, Р2- между больными до и после лечения

повышенным содержание зрелых Т-лимфоцитов (СБЗ+), но уменьшилось число Т-хелперов (СБ4+), тогда как соотношение С04+/СВ8 проявило лишь тенденцию к снижению, оставаясь на высоких цифрах (до лечения 2,3±0,17, после терапии 2,0±0,13, Р<0,1, у здоровых людей 1,5¿0,06)

После лечения вилоном у больных уменьшилось содержание как Т-за-висимых, так и Т-независимых №С-лимфоцитов, хотя их число не достигло нормы Вместе с тем у таких больных практически приходило к норме содержание Т-активных лимфоцитов

Полученные данные свидетельствуют о благоприятном влиянии вилона на состояние клеточного иммунитета, ибо при этом отмечается снижение соотношения С04+/СЕ)8+, что говорит о явном уменьшении иммуноагрессии При использовании эпиталопа число лейкоцитов и лимфоцитов у больных практически не менялось, в то время как у них возрастало относительное содержание Т-лимфоцитов (СБЗ+) В процессе лечения у таких больных не изменялось относительное и абсолютное содержание ТИ и СТЬ, но уменьшалось количество Т-независимых МК-клсток Резко падает у таких больных относительное и абсолютное содержание Т-активных лимфоцитов (С[)3+Н[.А-Следует обратить внимание на то, что у больных СД-1 после лечения эпиталоном наблюдается снижение соотношения С[)4+/СЭ8+

Представленные данные говорят о том, что у больных СД-1 при стандартной терапии с применением вилона или эпиталона со стороны иммунограммы наблюдаются явные благоприятные сдвиги, свидетельствующие о значительном уменьшении аутоагрессии

У больных СД-1 типа имеется выраженная гиперкоагуляция, сопровож-

даемая резким уменьшением концентрации основных естественных антикоагулянтов - AT-III и протеина С Одновременно у таких больных резко возрастала концентрация фибриногена, и почти в 3 раза повышалось содержание РФМК (значительно сокращалось время их регистрации) Кроме того, у больных СД-1 пожилого возраста тормозился хагеман-зависимый фибринолиз

Полученные данные говорят о том, что у пожилых больных СД-1 резко усиливается постоянное внутрисосудистое свертывание крови, вплоть до развития хронической формы ДВС-синдрома

У больных СД-1 пожилого возраста традиционная терапия не оказывает существешюго влияния на изучаемые тесты системы свертывания крови и фибринолиза Под воздействием традиционной терапии, сочетаемой с вило-ном или эпиталоном, приближается к норме АЧТВ, слегка увеличивается концентрация протеина С, сокращается время появления РФМК (р<0,05) и наблюдается тенденция к нормализации фибринолиза Существенной разницы в действии вилона и эпиталона на состояние системы гемостаза у пожилых больных СД-1 мы не обнаружили

Лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия (JITA) у больных сахарным диабетом 1 типа

Исследования были проведены на 48 больных различного возраста В качестве контроля были взяты результаты исследований, полученных на 50 здоровых молодых людях В процессе традиционного лечения количество JITA не изменяется Если же применяется вилон или эпиталон, то число таких агрегатов, по сравнению с усредненными цифрами, явно возрастает (р<0,001) Следует отметить, что если число агрегатов было больше средней величины, то в процессе лечения оно снижалось, если же меньше, то не зависимо от применяемой терапии не изменялось или слегка возрастало

Мы считаем, что полученные в процессе терапии сдвиги лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии вполне закономерны У одних больных имелось повышенное количество лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов и это является адекватной ответной реакцией на развитие патологического процесса (1 стадия) При тяжелом течении заболевания большинство образующихся ко-агрегатов о гправляются в ткани, где выполняют свои основные функции осуществление местного иммунитета, усиление репаративных процессов, местный гемостаз и др (2 стадия процесса) По аналогии с коагулопатией потребления при развитии ДВС-синдрома, в этом случае мы можем говорить о лим-фопатии потребления

Прежними наблюдениями (Витковский Ю А и др , 2006, Savion N , 2005, Shenkman В , 2006, Solpov А , 2006, Vitkovsky Yu, 1999, 2001) установлено,

что в ЛТА в основном принимают участие лишь Т-хелперы и ИК-клетки, активированные ИЛ-2 Вот почему в следующей серии исследований мы рассчитывали не только процент ЛТА, но и их абсолютное количество Кроме того, нами высчитывалось, какой процент ЛТА образуют лимфоциты, несущие маркеры С04+ изолированно и совместно с СБ16+СБ56+

Установлено, что абсолютное и относительное количество ЛТА у дестабилизированных больных СД-1 остается в норме В процессе традиционного лечения количество лимфоцитов, адгезирующих тромбоциты, значительно снижается Если же применяется вилон, то процент и число таких агрегатов, по сравнению с усредненными цифрами, явно возрастает (р<0,001)

Вместе с тем, если рассчитывать абсолютное и относительное число лимфоцитов среди Тх изолированно или совместно с МК-клетками, то вырисовывается несколько иная картина

Оказалось, что относительное число Тх, способных присоединять кровяные пластинки, при СД-1 значительно снижено и практически не изменяется при традиционной терапии Однако вилон не только резко увеличивает абсолютное число ЛТА (р<0,001), но и нормализует их относительное количество Приблизительно аналогичные результаты получены при расчете относительного содержания ЛТА к суммарному содержанию Тх и N К-клеток

Между тем, нами не обнаружено существенных различий в действии эпи-талона и стандартной терапии на показатели лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии

Применение вилона в лечении больных с неоперабельными формами рака

В комплексном исследовании участвовало 30 человек -11 женщин и 19 мужчин - в возрасте от 39 до 76 лет (в среднем 59 лет) преимущес твенно с 3 и 4стадией рака Срок пребывания больных в стационаре колебался от 30 до 76 суток Больным установлены следующие диагнозы рак легкого - 8, рак пищевода - 6, рак прямой кишки - 3, рак молочной железы - 6, рак бронхов - 2, рак желудка -1, рак толстого кишечника -1, рак надпочечников -1, рак яичников - 1, рак небной миндалины - 1 Наличие опухоли соответствующей локализации подтверждено визуально (эндоскопия), рентгенографически и гистологически Все больные имели сопутствующие заболевания, из которых наиболее часто встречались ИБС и симптоматические гипертензии

Больным проводился радикальный курс гамма-терапии на аппарате "Агат-С" на пораженную область и регионарные лимфоузлы в суммарной дозе 60 Гр Контроль состояния опухоли проводился в конце курса облучения

Пациенты с раком надпочечников и яичников получали химиотерапию, а

больному с диагнозом "Рак желудка, IV стадия" была проведена ревизионная лапаротомия с отказом от радикального вмешательства

Все пациенты также получали препарат "Вилон" внутримышечно по 1 мг в сутки на протяжении 10 дней После 10-дневного перерыва курс повторялся Общая доза вилона для одного больного составила 20 мг

Контролем служили 12 пациентов (8 мужчин, 4 женщины) с аналогичными локализациями ракового процесса, в возрасте от 50 до 82 лет, получавшие вместо вилона плацебо (изотонический раствор натрия хлорида)

Нами изучалось действие вилона на состояние клеточного и гуморального иммунитета у больных неоперабельным раком различной локализации (табл 3)

Оказалось, что после проведенного лечения наступала иммунодепрес-сия с угнетением Т-хелперной популяции, что вполне объяснимо побочными эффектами лучевой и химиотерапии на Т-звено иммунитета Вместе с тем, у больных, получавших вилон, обнаружен устойчивый рост процента СБ 16+

Таблица 3

Динамика некоторых показателей иммунитета при различных вариантах терапии неоперабельных онкологических больных (М+т)

Изучаемые показатели Здоровые До лечения Спустя 1 месяц после лечения Достоверность различий между группами после лечения

С витоном Контроль

СОЗ+, % 58,0+0,8 42,4+1,3 40,3+1,3 33,5+1,8* р<0,05

СОЗ+, в 1 мкл 1000-1500 757,2+94,8 604,8+84,7 391,0+21,5* р<0,05

С04+-клетки, % 36,0 ± 0,9 36,0+1,5 28,2+1,3* 27,8+1,6* -

СБ4+, в 1 мкл 700-1100 648,1+82,7 437,0+60,5* 325,2+22,7* -

СБ8+, % 35,7 ± 0,6 30,2+1,0 31,7 +2,2 26,5 +1,3* р<0,05

СБ8+, в 1 мкл 500-700 533,5+61,5 487,1+85,7 313,0+27,4* р<0,05

СО 16+, % 12,6+0,3 11,1+0,7 15,8+0,9* 12,3+0,9 р<0,05

СБ 16+, в 1 мкл 200-400 199,1+29,5 237,2+28,8 136,2+8,4 р<0,05

С022+, % 32,1 ± 0,6 28,7+1,3 26,9+1,1 23,2+1,9* р<0,05

СВ22+, в 1 мкл 600-1000 513,5+66,9 432,0+67,3 273,7+31,5 р<0,05

Лимфоциты, % 25-40 34,1+3,4 31,9+2,2 26,5+3,1 -

ДО, г/л 9,90+0,48 23,06+1,86 16,43+2,1* 14,43+1,1* -

г/л 0,98+0,06 3,12+0,66 2,66+0,39 1,98+0,27 -

г/л 1,05+0,05 0,73+0,08 0,66+0,06 0,52+0,08* -

Примечания: * - достоверные изменения 16

клеток Кроме того, в опытной группе снижение не коснулось абсолютного и относительного числа клеток, несущих маркеры CD3+, CD8+ и CD22+, тогда как количество лимфощггов CD3+, CD8+, CD16+, CD22+ и уровень IgM в контроле после лечения оказались достоверно ниже

Терапия с применением вилона действует опосредованно, преимущественно изменяя взаимосвязи между клеточными и гуморальными показателями системы крови Наиболее реальной для объяснения полученных данных представляется концепция регуляторного пептидного каскада, где сам иммуномо-дулятор служит индуктором последующей цепи сложных реакций (Кузник Б И и др, 1998, 1999, 2004, Смирнов ВС и др , 1998) Механизм действия вилона непосредственно на конкретную клетку трудно проследить, однако из наших данных наиболее вероятными мишенями являются NK-клетки, моноциты и эозинофилы

Обнаруженная клиническая динамика, коррелирующая с активацией неспецифической противоопухолевой защиты, аргументирует использование вилона в практической онкологии

ВЫВОДЫ

1 Пептидные тимомиметики Ile-Trp, Lys-GIu-Val-Trp и Lys-Glu (вилон) в опытах m vitro значительно стимулируют экспрессию рецепторов тимоцитов, об-рабог анных трипсином Другие исследуемые тимомиметики - Arg-Glu-Trp, Lys-Glu-Trp-Tyr, His-Glu-Trp, и Glu-Lys -проявляют в меньшей степени им-муноактивные свойства Пептиды lle-Trp, Lys-Glu, Glu-Lys, Glu-Trp (тимо-ген) стимулируют экспрессию рецепторов лимфоцитов, несущих маркеры CD4+ в крови больных с иммунодефицитами, тогда как Glu-Trp одновременно усиливает экспрессию рецепторов на клетках CD4+ и CD8

2 1 имоген и в меньшей степени вилон у крысят оказывают стимулирующее действие на рост трансплантатов тимуса Тимоген в этих условиях отчетливо стимулирует рост эксплантатов ткани селезенки крыс

3 Вилон (0,01 мкг/кг) и тимоген (1 мкг/кг) увеличивают процентное содержание Т-лимфоцитов в селезенке и повышают хемотаксическую активность и фагоцитоз стафилококков нейтрофилами Использование эпиталона вызывает торможение хемотаксиса нейтрофилов

4 При инкубации крови больных с вторичными иммунодефицитами с пептидом передней доли гипофиза - Lys-Glu-Asp-Gly - увеличивается количество общих и активных Т-лимфоцитов Под влиянием пептида задней доли гипофиза - Gly-Glu-Asp-Ala - у больных отмечается рост числа В-лимфо-цитов Тетрапептиды Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala в опытах m vitro проявляют ангикоагулянтный эффект и стимулируют тотальный эуглобули-

новый фибринолиз

5 Вилон и эпиталон нормализуют состояние клеточного и гуморального иммунитета, а также процесс свёртывания крови и фибринолиза у больных сахарным диабетом 1 типа. И вилон и эпиталон в отношении лимфоцитар-но-тромбоцитарной адгезии обладают модулирующим действием В то же время под воздействием вилона значительно увеличивается абсолютное содержание ЛТА, тогда как под влиянием эпиталона их число возвращается к норме

6 Вилон предотвращает падение абсолютного и относительного числа лимфоцитов и их популяций и субпопуляций у неоперабельных больных раком различной локализации

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

Для уточнения состояния клеточного иммунитета рекомендуется определение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА) Уменьшение ЛТА является неблагоприятным признаком и свидетельствует о значительных нарушениях клеточного иммунитета

При сахарном диабете 1 типа рекомендуется применять эпиталон или вилон в дозе 10 мкг на инъекцию на протяжении 8-10 дней

При неоперабельных формах рака различной локализации в случае применения химиотерапии рекомендуется вводить вилон в дозе I мг на инъекцию на протяжении 10 дней

Применение указанных препаратов значительно улучшает состояние больных, способствует нормализации иммунитета и гемостаза

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Кустовская Е М Влияние пептидов, синтезированных на основе изучения цитомединов, на некоторые показатели свертывания крови и фибринолиз/ ЕМ Кустовская//Забайкальский медицинский вестник -2004 -№4 -С 49-50

2 Влияние биорегулирующих препаратов на состояние иммунитета и гемостаза у больных с гнойной инфекцией / И Д Лиханов, X Р Абдуллаев, Ю И Пинелис, Д Ц Нимаева, И В Ланда, Е М Кустовская, Ю А Витковский, Б И Кузник // Аллергология и иммунология - 2006 - том 7, № 3 - С 372

3 Патеюк А В Влияние пептидов Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala на иммунитет, свертывание крови и фибринолиз в опытах ш vitro / А В Патеюк, Б И Кузник, Е М Кустовская // Забайкальский медицинский вестник - №2 - 2006 г - С 4-7

4 Состояние лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии при различных заболе-

ваниях ( Ю А Витковский, И Д Лиханов, Н Н Ключерева, А В Солпов, О Г Максимова, Н В Малеева, Е Б Порушничак, Ц Б Хамаева, Е М Кус-товская, Б И Кузник //Аллергология и иммунология - 2006 - том 7, № 3 -С 436

5 Кустовская Е М Влияние вилона и эпиталона на иммунитет и гемостаз / Е М Кустовская, В В Малинин // Роль физиологии в современном естествознании тез докл Международная научно-практическая конференция -Чита, 2007 - С 47-49

6 Влияние биорегулирующей терапии на состояние иммунитета и гемостаза при заболеваниях, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами и хроническим ДВС-синдромом /ИД Лиханов, Ю А Витховский, О В Гвоздева, А В Долина, Э М Загородняя, Н Н Ключерева, Л Р Колесниченко, Е М Кустовская, О Г Максимова, Н В Малеева, И Ф Малкова, И С Пи-нелис, В Ю Погребняков, Е Б Порушничак, Т В Савельева, Ц Б Хамаева, Б И Кузник // XX съезд физиологического общества имени И П Павлова тез докл - г Москва, 2007 - С 308-309

7 Кустовская Е М Влияние вилона на иммунитет и гемостаз у гипофизэкто-мированныхптиц/Е М Кустовская, А В Патеюк.ЛМ Баранчугова//Перспективы фундаментальной геронтологии тез докл Всероссийская конференция - Санкт-Петербург, 2006 - С 77-78

8 Влияние вилона на состояние иммунитета и лимфоцитарно-тромбоцитар-ную адгезию у больных сахарным диабетом Tima 1 / Б И Кузник, Ю А Витковский, НН Ключерева, ЕМ Кустовская, А В Солпов//Иммунология -2007 - том 28, №5 - С 290-296

9 Патогенетические механизмы биорегулирующей терапии/Б И Кузник, В Ц Батожаргалова, Ю А Витковский, О В Гвоздева, А Б Долина, М Ю Захарова, Н Н Ключерева, Е М Кустовская, И Д Лиханов, Е Б Порушничак, Н В Хасанова // Бюллетень Восточно-сибирского научного центра Сибирского отделения РАМН -2007 - №5 - С 123

10 Влияние вилона на сосудисто-тромбоцитарный гемостаз и лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию при сахарном диабете I типа / Б И Кузник, Ю А Витковский, Н Н Ключерева, Е М Кустовская, А В Солпов // Тромбоз, гемостаз и реология - 2007 - №3 - С 19-26

11 Применение вилона в лечении онкопатологии у пожилых больных с неоперабельными формами рака / В Я Розенберг, С В Корсаков, Б И Кузник, ЕМ Кустовская//Дальневосточный медицинский журнал -2008 -№1 -С 80-81

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

AT-D1 - антитромбин III

АЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое время

две - диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови

ЕД - единицы действия

ИЛ (IL) -интерлейкин

Иф - интерферон

кД - килодальтон

Л1А - лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия

НК (NK) - натуральные киллеры

РФМК - растворимые фибринмономерные комплексы

сд-1 - сахарный диабет 1 типа

ТАП - тканевой активатор плазминогена

ТПДГ - тетрапептид передней доли гипофиза

ТЗДГ - тетрапептид задней доли гипофиза

Тк - Т-киллеры

Tx(Th) - Т-хелперы

ЦТЛ(Тс) - цитотоксические лимфоциты

CD - кластер дифференцировочных антигенов

IL -интерлейкин

Ig - иммуноглобулин

Лицензия ИД №03077 от 23 10 00 Подписано в печать 02 07 08 Бумага офсетная Формат 60 х 84 '/|6 Уел печ л-1,0 Тираж 100 Заказ № 952008

Отпечатано в информационно-издательском центре ЧГМА 672090, Чита, ул Горькою, 39а

tP

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Кустовская, Евгения Михайловна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Пептидергическая регуляция гомеостаза.

1.2. Цитомедины и их характеристика.

1.3. Синтетические короткие пептиды (цитогены).

1.3.1. Тимоген (Glu-Trp).

1.3.2. Вилон (Lys-Glu).

1.3.3. Эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly).

1.4. Пептиды и гемостаз.

1.5. Механизмы действия пептидов.

ГЛАВА

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1 .Объекты изучения.

2.2.Методы исследования системы гемостаза.

2.3 .Иммунологические методы исследования.

2.4. Методы исследования органотипических культур.

2.5. Статистическая обработка материала.

ГЛАВА

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДНЫХ БИОРЕГУЛЯТОРОВ НА

ИММУНИТЕТ И ГЕМОСТАЗ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ.

3.1. Сравнительная оценка иммуноактивных свойств синтетических пептидов in vitro.

3.2.1. Влияние тимогена, вилона и эпиталона на рост органотипической культуры тканей.

3.2.2. Влияние тимогена, вилона и эпиталона на показатели иммунитета и фагоцитарной активности лейкоцитов in vivo.

3.3. Влияние пептидов Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala на иммунитет, свёртывание крови и фибринолиз в опытах in vitro.

3.3.1. Влияние пептидов Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala 78 на иммунитет.

3.3.2. Влияние пептидов Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala 80 на свёртывание крови и фибринолиз.

ГЛАВА

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДНЫХ БИОРЕГУЛЯТОРОВ НА ИММУНИТЕТ И ГЕМОСТАЗ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ.

4.1. Влияние вилона и эпиталона на состояние иммунитета и гемостаза у больных сахарным диабетом первого типа.

4.1.1.Влияние вилона и эпиталона на состояние клеточного и гуморального иммунитета у больных сахарным диабетом 1 85 типа.

4.1.2.Влияние вилона и эпиталона на коагуляционный гемостаз у больных сахарным диабетом 1 типа.

4.1.3. Влияние иммуномодулирующей терапии на состояние лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии у больных сахарным 92 диабетом 1 типа.

4.2. Применение вилона в лечении больных с неоперабельными формами рака.

ГЛАВА

ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОВ ВИЛОЧКОВОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ЭПИФИЗА И ГИПОФИЗА НА ИММУНИТЕТ И ГЕМОСТАЗ (Экспериментально-клиническое исследование)"

Актуальность проблемы. Важнейшими регуляторами иммунной системы являются комплексы полипептидов, получившие наименование цитомедины (Хавинсон В.Х., Морозов В.Г.,1983, 2002, 2003, Кузник Б.И., и др. 1988, 2002, 2003). Установлено, что цитомедины образуются в самых разных органах, тканях и клетках. Их специфическая функция направлена на коррекцию деятельности того органа, из которого они выделены. В то же время неспецифические влияния цитомединов весьма многообразны и распространяются на иммунитет, неспецифическую резистентность организма, систему гемостаза, перекисное окисление липидов, регенерацию тканей (Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 1983, 1985-2005; Кузник Б.И., и др., 1989-2004; Малинин В.В., и др., 2002, и др.).

За последние годы на основании изучения аминокислотного состава цитомединов тимуса, эпифиза, простаты и других эндокринных органов, методом целенаправленного синтеза получены олигопептиды, обладающие чрезвычайно широким спектром действия и получившие наименование цитогены (Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 1989-2003, Малинин В.В. и др. 2000, 2001, Анисимов В.Н. и др. 2002, КЪаушвоп У.КЬ., 1999; КЪаутэоп У.КЬ., МаНшп 2003). Одним из основных их свойств является способность в значительной степени заменять специфические цитомедины.

Вместе с тем, установлено, что многие пептиды обладают антиагрегационным действием, замедляют свёртывание крови и стимулируют фибринолиз (Макаров В.А. и др., 1995 - 2007; Пасторова В.Е и др., 1999; Ашмарин И.П. и др., 2002, 2004; Петросян М.Т., 2002; Ва^г Б. е! а1., 1995). Каждое из указанных свойств зависит от определённой последовательности аминокислот в синтезируемом пептиде. В то же время практически не существуют соединений, которые бы одновременно могли бы стимулировать иммунитет, обладать антиагрегационным и антикоагулянтным действием, а также стимулировать фибринолиз. Более того, все прямые и непрямые антикоагулянты, как правило, вызывают депрессию клеточного и гуморального иммунитета (Кузник Б.И. и др., 1989; 1998, 2004).

Вот почему поиск низкомолекулярных соединений, способных одновременно стимулировать иммунитет и предотвращать диссеминированное внутрисосудистое свёртывание крови является чрезвычайно актуальной задачей для современной медицины.

Цель исследования. Изучить действие цитогенов, синтезированных на основе исследования аминокислотного анализа цитомединов, полученных из тимуса, эпифиза и гипофиза, на иммунитет и гемостаз в эксперименте и клинике. В связи со сказанным нами решались следующие задачи:

1. Исследовать влияние цитогенов, синтезированных на основе изучения аминокислотного состава цитомединов, выделенных из вилочковой железы, эпифиза, передней и задней долей гипофиза, на показатели клеточного и гуморального иммунитета, свёртывание крови и фибринолиз в опытах in vitro и in vivo.

2. Изучить, как действуют вилон и эпиталон при сахарном диабете 1 типа на состояние иммунитета, свёртываемость крови и фибринолиз.

3. Установить, как влияет тимомиметик дипептид вилон (Lys-Glu) на показатели клеточного и гуморального иммунитета у неоперабельных больных раком различной локализации.

Научная новизна. Впервые показано, что в опытах in vitro пептиды Ile-Trp, Lys-Glu-Val-Trp и Lys-Glu (вилон) значительно стимулируют экспрессию рецепторов тимоцитов, обработанных трипсином. Другие исследуемые пептиды - Arg-Glu-Trp, Lys-Glu-Trp-Tyr, His-Glu-Trp, и Glu-Lys - иммуноактивные свойства проявляют в меньшей степени. Пептиды Ile-Trp, Lys-Glu, Glu-Lys, Glu-Trp (тимоген) стимулируют экспрессию рецепторов на клетках CD4+ - крови больных с иммунодефицитами, тогда как Пе-Тгр одновременно усиливает экспрессию рецепторов на лимфоцитах СБ4+ и С08+.

У больных с вторичными иммунодефицитами под воздействием Ьуэ-01и-Азр-01у увеличивается количество общих и активных Т-лимфоцитов. Под влиянием С1у-01и-Азр-А1а у больных с ожогами отмечается рост числа В-лимфоцитов. Тетрапептиды Ьуз-01и-А8р-01у и С1у-С1и-Азр-А1а проявляют антикоагулянтный эффект и стимулируют тотальный эуглобулиновый фибринолиз.

Впервые показано, что эпиталон эффективнее, чем вилон, нормализует состояние клеточного и гуморального иммунитета, а также процесс свёртывания крови и фибринолиза у больных сахарным диабетом 1 типа. И вилон и эпиталон в отношении лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии обладают модулирующим действием. В то же время под воздействием вилона значительно увеличивается абсолютное содержание ЛТА, тогда как под влиянием эпиталона их число возвращается к норме.

Впервые показано, что вилон предотвращает падение абсолютного и относительного числа лимфоцитов и их субпопуляций у неоперабельных больных раком различной локализации.

Теоретическая и практическая ценность. Полученные данные значительно расширяют наши представления о механизме действия дипептидов и тетрапептидов, синтезированных на основе изучения аминокислотного состава цитомединов, выделенных из различных органов.

При сахарном диабете 1 типа рекомендуется применение вилона или эпиталона в дозе 10 мкг на инъекцию на протяжении 10 дней.

У неоперабельных больных раком различной локализации рекомендуется применение вилона в дозе 1 мг на инъекцию на протяжении 10 дней.

Внедрение в практику. Результаты работы внедрены в педагогический процесс на кафедрах нормальной и патологической физиологии, фармакологии и Читинского областного онкологического диспансера.

Апробация диссертации. Результаты работы неоднократно докладывались на заседаниях кафедры нормальной физиологии Читинской государственной медицинской академии, Читинского отделения Всероссийского физиологического общества имении академика И.П.Павлова, а также на всероссийской конференции «Перспективы фундаментальной геронтологии» (Санкт-Петербург, 2006), ХХ-м съезде физиологического общества имени И.П.Павлова «Влияние биорегулирующей терапии на состояние иммунитета и гемостаза при заболеваниях, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами и хроническим ДВС-синдромом» (Москва, 2007), международной научно-практической конференции «Роль физиологии в современном естествознании», (Чита, 2007).

По материалам диссертации опубликовано 11 работ, в т.ч. 2 статьи в ведущих научных журналах и изданиях, определенных ВАК Министерства образования и науки РФ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Пептиды Ile-Trp, Lys-Glu-Val-Trp и Lys-Glu (вилон) в опытах in vitro значительно стимулируют экспрессию рецепторов тимоцитов, обработанных трипсином. Пептиды Ile-Trp, Lys-Glu, Glu-Lys, Glu-Trp (тимоген) стимулируют экспрессию рецепторов на клетках CD4+ крови больных с иммунодефицитами, тогда как Ile-Trp одновременно усиливает экспрессию рецепторов на лимфоцитах CD4+ и CD8+. Под воздействием пептида передней доли гипофиза — Lys-Glu-Asp-Gly увеличивается количество общих и активных Т-лимфоцитов в крови, полученной от здоровых людей и больных с ожогами. Под влиянием пептида задней доли гипофиза - 01у-01и-Азр-А1а отмечается рост числа В-лимфоцитов. Тетрапептиды Ьуз-01и-Азр-С1у и 01у-С1и-Азр-А1а проявляют антикоагулянтный эффект и стимулируют эуглобулиновый фибринолиз. У 21-дневных крысят тимоген и в меньшей степени вилон оказывает стимулирующее действие на рост трансплантатов тимуса. Тимоген отчетливо стимулирует рост эксплантатов ткани селезенки 21-дневных крыс.

2. При введении мышам вилона в дозе 0,01 мкг/кг массы увеличивается процентное содержание Т-лимфоцитов в селезенке, возрастает хемотаксическая активность и фагоцитоз стафилококков нейтрофилами. Тимоген лишь в дозе - 1 мкг/кг веса стимулирует фагоцитоз и хемотаксис нейтрофилов. Использование эпиталона вызывает торможение хемотаксиса нейтрофилов.

3. Использование у больных сахарным диабетом 1 типа вилона и эпиталона на фоне традиционной терапии приводит к уменьшению числа Т-хелперов и соотношения С04+/С08+, количества Т-зависимых и Т-независимых НК-клеток, а также активных Т-лимфоцитов, нормализации числа В-клеток и уровня ^А. Одновременно биорегулирующие препараты нормализуют состояние свёртывающей системы крови и лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию, проявляя выраженный модулирующий эффект. Вместе с тем, вилон, в отличие от эпиталона увеличивает абсолютное и относительное число ЛТА.

4. Вилон у неоперабельных онкологических больных предупреждает уменьшение числа лейкоцитов, лимфоцитов и их популяций и субпопуляций.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Кустовская, Евгения Михайловна

выводы

1. Пептидные тимомиметики Ile-Trp, Lys-Glu-Val-Trp и Lys-Glu (вилон) в опытах in vitro значительно стимулируют экспрессию рецепторов тимоцитов, обработанных трипсином. Другие исследуемые тимомиметики - Arg-Glu-Trp, Lys-Glu-Trp-Tyr, His-Glu-Trp, и Glu-Lys - проявляют в меньшей степени иммуноактивные свойства. Пептиды Ile-Trp, Lys-Glu, Glu-Lys, Glu-Trp (тимоген) стимулируют экспрессию рецепторов лимфоцитов, несущих маркёры CD4+, в крови больных с иммунодефицитами, тогда как Ile-Trp одновременно усиливает экспрессию рецепторов на клетках CD4+ и CD8.

2. При инкубации крови больных с вторичными иммунодефицитами с пептидом передней доли гипофиза - Lys-Glu-Asp-Gly - увеличивается количество общих и активных Т-лимфоцитов. Под влиянием пептида задней доли гипофиза - Gly-Glu-Asp-Ala у больных отмечается рост числа В-лимфоцитов. Тетрапептиды Lys-Glu-Asp-Gly и Gly-Glu-Asp-Ala в опытах in vitro проявляют антикоагулянтный эффект и стимулируют тотальный эуглобулиновый фибринолиз.

3. Тимоген и в меньшей степени вилон у крысят оказывают стимулирующее действие на рост эксплантатов тимуса. Тимоген в этих условиях отчетливо стимулирует рост эксплантатов ткани селезенки крыс.

4. Введение вил она в дозе 0,01 мкг/кг массы в течение 6 дней мышам приводит к увеличению массы селезенки. Инъекции тимогена в аналогичной дозе сопровождается снижением массы тимуса и селезенки. Под влиянием вил она (0,01 мкг/кг) увеличивается процентное содержание Т-лимфоцитов в селезенке, возрастает хемотаксическая активность и фагоцитоз стафилококков нейтрофилами. Тимоген лишь в дозе - 1 мкг/кг веса стимулирует фагоцитоз и хемотаксис нейтрофилов. Использование эпиталона вызывает торможение хемотаксиса нейтрофилов.

5. Вилон и эпиталон нормализуют состояние клеточного и гуморального иммунитета, а также процесс свёртывания крови и фибринолиза у больных сахарным диабетом 1 типа. И вилон и эпиталон в отношении лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии обладают модулирующим действием. В то же время под воздействием вилона значительно увеличивается абсолютное содержание ЛТА, тогда как под влиянием эпиталона их число возвращается к норме.

6. Вилон предотвращает падение абсолютного и относительного числа лимфоцитов и их популяций и субпопуляций у неоперабельных больных раком различной локализации.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для уточнения состояния клеточного иммунитета рекомендуется определение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА). Уменьшение ЛТА является неблагоприятным признаком и свидетельствует о значительных нарушениях клеточного иммунитета

При сахарном диабете 1 типа рекомендуется применять эпиталон или вилон в дозе 10 мкг на инъекцию на протяжении 8-10 дней.

При неоперабельных формах рака различной локализации в случае применения химиотерапии рекомендуется вводить вилон в дозе 1 мг на инъекцию на протяжении 10 дней.

Применение указанных препаратов значительно улучшает состояние больных, способствует нормализации иммунитета и гемостаза.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Кустовская, Евгения Михайловна, Чита

1. Акмаев И.Г. Современные представления о взаимодействиях регулирующих систем: нервной, эндокринной и иммунной / И.Г. Акмаев // Успехи физиологических наук. 1996. — том 27, № 18. - С. 3-19.

2. Анисимов C.B. Влияние мелатонина и тетрапептида на экспрессию генов в головном мозге мышей / С.В.Анисимов, В.Х.Хавинсон, В.Н.Анисимов //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2004, том 138- № 11-С. 570-576.

3. Анисимов В.Н. Влияние мелатонина и эпиталамина на активность системы антиоксидантной защиты у крыс / В.Н. Анисимов, A.B. Арутюнян, В.Х Хавинсон // Докл. РАН.- 1997.- Т. 352, № 6.- С. 831833.

4. Анисимов В.Н. Эпиталон замедляет старение и тормозит развитие аденокарцином молочной железы у трансгенных мышей HER-2/NEU / В.Н. Анисимов, В.Х. Хавинсон, И.Н. Алимова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2002.- Т. 134, №8. - С. 215-218.

5. Анисимов В.Н. Влияние полипептидных факторов тимуса и эпифиза на радиационный канцерогенез/ В.Н. Анисимов, Г.И. Мирецкий, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Бюл. эксперим. биологии и медедицины. 1982. № 7. С. 80-82.

6. Анисимов В.Н. Увеличение продолжительности жизни и снижение частоты опухолей у мышей СЗН/Sn под влиянием полипептидных факторов тимуса и эпифиза / В.Н.Анисимов, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон //Докл. АН СССР. 1982. Т. 263, № 3. С. 742-745.

7. Анисимов В.Н. Функция эпифиза при раке и старении / В.Н. Анисимов, Р. Рейтер // Вопр. онкологии. 1990. Т. 36, № 3. С. 259-268.

8. Анисимов В.Н., Соловьев М.В. Эволюция концепций в геронтологии/ В.Н. Анисимов, М.В. Соловьев // СПб.: Эскулап, 1999. 130 с.

9. Ашмарин И.П. Глипролины как самостоятельные регуляторы и стабилизаторы других пептидов/ И.П. Ашмарин, A.A. Каменский, JI.A. Ляпина, Н.Ф. Мясоедов, Г.Е. Самонина // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. — 2002. №1. — С. .

10. Ашмарин И. П., Обухова М. Ф. Регуляторные пептиды, функционально-непрерывная совокупность//Биохимия. 1986. Т. 51, № 4. С. 531-545.

11. Балаболкин М!И. Сахарный диабет / М.И.Балаболкин. М.: Медицина, 1994. -С. 383.

12. Балаболкин М.И. Патогенез сосудистых осложнений сахарного диабета. / М.И.Балаболкин // Тезисы докладов 1-го Российского диабетологического конгресса. — Москва. — 1998. С.36.

13. Балаболкин М.И. Диабетология / М.И.Балаболкин Москва, 2000. -С. 672.

14. Балаболкин М.И. Патогенез ангиопатий при сахарном диабете / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская // Сахарный диабет. — 1999.-№ 1-2.-С. 3-15.

15. Балаболкин М.И. Почечно-ренальный синдром у больных сахарным диабетом / Г.Г. Мамаева, А.Б.Евграфов, Л.И. Людина, H.A. Бишщеле // Актуальные проблемы эндокринологии: Тез. докл. III Всероссийского съезда эндокринологов. Москва, 1996. — С. 32.

16. Балуда В.П. Биологические ритмы системы гемостаза человека / В.П. Балуда, В.А. Исабаева, Т.А. Пономарёва, A.C. Адамчик. Фрунзе: Издательство «Илим», 1978. -С. 198 .

17. Балуда В.П. Физиология системы гемостаза / В.П.Балуда, М.В. Балуда, И.И. Деянов, И.К. Тельпушков. Москва, 1995. -С. 250 .

18. Балуда В.П. Претромботическое состояние. Тромбоз и его профилактика / В.П. Балуда, М.В. Балуда, А.П. Гольдберг, П.Л. Салманов// Москва-Амстердам: Из-во ООО «Зеркало-М», 1999. -С. 298 .

19. Балуда М.В.Состояние антитромбогенной активности стенки сосудов у больных сахарным диабетом и способы её коррекции / М.В. Балуда, И.В. Новикова // Патология гемокоагуляции. М., 1995. Часть 1. — С. 18-20.

20. Баранцевич Е.Р. Оценка микроциркуляции у больных с диабетической полиневропатией / Е.Р. Баранцевич, Е.С. Алексеева // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. -2005. -№1 (13). С. 25-26.

21. Баркаган З.С. Геморрагические заболевания и синдромы / З.С. Баркаган. -М.: «Медицина», 1988. -С. 528 .

22. Баркаган З.С. Механизмы формирования и маркеры предтромботического статуса у пожилых людей / З.С. Баркаган // Клинич. геронтология. 1996. - № 6. - С. 53-56.

23. Баркаган З.С. Введение в клиническую гемостазиологию / З.С. Баркаган. -М.: «Ньюдиамед», 1998. -С. 46 .

24. Баркаган З.С. Основы нарушений диагностики гемостаза / З.С. Баркаган, А.П. Момот. М.: «Ньюдиамед», 1999. - 220 с.

25. Баркаган З.С. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза./ З.С. Баркаган, А.П.Момот М.: «Ньюдиамед», 2001. -300с.

26. Бышевский А.Ш. Тромбоциты / А.Ш. Бышевский, С.Л. Галян, И.А. Дементьева, A.A. Нелаева, В.Г. Соловьёв. — Тюмень, 1996. -С. 250 .

27. Баркаган З.С. Основы диагностики нарушений гемостаза/ З.С. Баркаган, А.П. Момот. М.: Ньюдиамед-АО, 1999. - 224с.

28. Белокрылов Г.А., Попова О.Я., Сорочинская Е.И. Сходство иммуно- и фагоцитозмодулирующих антитоксических свойств дипептидов и составляющих их аминокислот// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - том 127, №6. - С. 674-676.

29. Бокарев И.Н. ДВС-синдром. Когда применять этот термин при постановке диагноза / И.Н Бокарев // В кн: Атеротромбоз проблема современности. М. 1999. - С. 203-204.

30. Бокарев И.Н., Щепотин Б.М., Ена Я.М. Внутрисосудистое свёртывание крови. Киев. «Здоровья». 1989. 238 с.

31. Будажабон Г.Б. Взаимосвязи иммунитета и гемостаза в клинике: автореф. дисс. докт. мед. наук: / Г.Б. Будажабон. Л., 1988. - 39с.

32. Венчиков А.И. Основные приёмы статистической обработки результатов наблюдений в области физиологии/ А.И. Венчиков, В.А. Венчиков. -М.: Медицина. 1974. - 152с.

33. Витковский Ю.А. Влияние интерлейкинов 4 и 10 на систему гемостаза in vitro/ Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, Д.А. Еделев, A.B. Солпов // Иммунология. 2001. № 1. С. 43-45.

34. Витковский Ю.А. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розеткообразования / Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, A.B. Солпов // Иммунология. 1999. - № 4. - С. 35-37.

35. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов A.B. Влияние цитокинов на лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию // Медицинская иммунология. 2002. - Т. 4, № 2. - С. 135-136.

36. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов A.B. Взаимодействие лейкоцитов и тромбоцитов с эндотелием и ДВС-синдромом // Гемостаз, тромбоз и реология. 2006. — № 1. — С. 15-28.

37. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов A.B., Шенкман Б.З. Влияние интерлейкинов lß, 2, 10 и 16 на взаимодействие лейкоцитарно-тромбоцитарных агрегатов с экстрацеллюлярным матриксом // Иммунология. 2006. - № 3. - С. 141-143.

38. Витковский Ю.А. Патогенетическое значение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии/ Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, A.B. Солпов // Медицинская иммунология. 2006. - Т. 8, № 5-6. — С. 745-753.

39. Голодных Ю.В. Патогенетическое обоснование использования ронколейкина при тяжелом течении пневмонии. Автореф. дисс. канд. мед. наук. Чита. 2002. 20 с.

40. Голубева М.Г. Влияние нейрогипофизарных С-концевых олигопептидов на агрегацию тромбоцитов/ М.Г. Голубева, В.П. Голубович, О.В. Мельник, В.П. Мартинович // Тромбоз, гемостаз и реология. 2007. - №3. - С.27-31.

41. Гомазков О. А. Полифункциональность регуляторных пептидов и правило «что — где — когда» как принцип их упорядоченного действия. М.: Высшая школа. 1991, № 11. С. 5—19. (Научные доклады высшей школы «Биологические науки»).

42. Гомазков О. А. Физиологически активные пептиды: справочное руководство. М.: ИПГМ, 1995. 144 с.

43. Гомазков О. А. Современные тенденции в исследовании физиологически активных пептидов//Успехи соврем, биологии. 1996. Т. 116, № 1.С. 60-68.

44. Гомазков O.A. Функциональная биохимия регуляторных петидов// Гомазков O.A. М.: Наука, 1992. - 160с.

45. Гомазков O.A. Нейротрофические и ростовые факторы мозга: регуляторная специфика и терапевтический потенциал// Успехи физиологических наук. 2005. - том 36, №2. — С. 22-40.

46. Говырин В.А. Лиганд-рецепторные взаимодействия в молекулярной физиологии/ В.А. Говырин, Б.С. Жоров. СПб.: Наука, 1994. - 240с.

47. Гончарова Н.Д. Пинеальная железа и возрастная патология (механизмы и коррекция)/ Н.Д. Гончарова, В.Х. Хавинсон, Б.А. Лапин. СПб.: Наука, 2007. - 168с.

48. Гречко А.Т. Нейротропная активность природных иммуномодуляторов// Экспериментальная клиническая фармакология. -1998. -Т. 61, №4, С. 14-16.

49. Григорьев Е.И., Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Григорьев А.Е., Кудрявцева Т.А. О роли водной среды в механизмах действия иммуноактивных пептидов в сверхмалых дозах// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. - том 136, № 8. - С. 173-176.

50. Гроссман М. Краткая история эндокринологии пищеварения. Желудочно-кишечные гормоны и патология пищеварительной системы. М.: Медицина, 1981. 223 с.

51. Дедов И.И. Особенности дебюта и прогноза сосудистых осложнений у больных медленно прогрессирующим диабетом взрослых / И.И. Дедов.-М, 2003.-С.З8.

52. Дедов И.И. Новые возможности компенсации сахарного диабета типа 1 и профилактика его сосудистых осложнений (пособие для врачей) / И.И. Дедов, М.И. Балаболкин. Москва, 2003г., -С. 36 .

53. Дедов И.И. Сахарный диабет: патогенез, классификация, диагностика и лечение / И.И. Дедов, М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская, Т.Е. Чазова. Москва, 2003г. — С. 170.

54. Дедов И.И. Особенности клеточного иммунитета у больных с впервые выявленным сахарным диабетом / И.И. Дедов, Л.А. Гущина, О.М. Смирнова // Проблемы эндокринологии. 1994. - № 1. — С. 17-20.

55. Дедов И.И. Эндокринология / И.И. Дедов, Г.А. Мельниченко, В.В. Фадеев. М.: «Медицина». - 2000. - С.632 .

56. Дедов И.И. Введение в диабетологию /И.И. Дедов, В.В. Фадеев -Москва, 1998. -С. 200.

57. Дедов И.И., Генетические аспекты развития диабетической нефропатии / И.И. Дедов, М.В.Шестакова, М.Е. Мозговая //Терапевический арх. 1993. - 10. - С. 45-50.

58. Дедов И.И. Диабетическая нефропатия. / И.И. Дедов, М.В. Шестакова. Москва, 2000. -С. 240.

59. Дедов И.И. Сахарный диабет: ретинопатия, нефропатия. / И.И. Дедов, М.В. Шестакова, Т.М. Миленькая. Москва, 2001. -С. 176.

60. Дедов И.И. Сахарный диабет / И.И.Дедов, М.В.Шестакова// М. -«Универсум». 2003. - 455 с.

61. Дедов И.И. Федеральная целевая программа "Сахарный диабет" / И.И. Дедов, М.В. Шестакова, М.А. Максимова Москва, 2003. -С. 88.

62. Дедов И.И. Идиопатический диабет / И.И.Дедов, К.И.Табеева, Т.В. Никонова, О.М. Смирнова //Проблемы эндокринологии //, 2005.- № С. 41-43.

63. Дедов И.И., Е.М. Балаболкин, В.М. Клебанова. Сахарный диабет: патогенез, классификация, диагностика и лечение. — Москва, 2003. -170с.

64. Демидов С. В. Молекулярно-генетические и клеточные механизмы фармакологического действия препаратов из тимуса (тималина, тимогена, вилозена): Автореф. дис. . д-ра мед. наук. Киев,1991.45 с.

65. Долгов Г.В. Биорегулирующая терапия в акушерстве и гинекологии/ Г.В.Долгов, Ю.В.Цвелёв, В.В. Малинин. СПб.: ООО «Издательство Фолиант», 2004. - 144с.

66. Еделев Д.А. Влияние интерлейкинов 4 и 10 на свертывание крови и фибринолиз / Д.А. Еделев, Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник // Тромбоз, гемостаз и реология. 2002. - № 3. - С. 33-34.

67. Ерошенко Т.М., Титов С.А., Лукьянова Л.Л. Каскадные эффекты регуляторных пептидов// Физиология человека и хивотных/ ВИНИТИ. М., 1991.-204с.

68. Зак К.П., Малиновская Т.М., Тронько Н.Д. Иммунитет у детей, больных сахарным диабетом. Киев: Книга плюс, 2002. С. 112.

69. Зак К.П. Состояние иммунной системы у детей, больных сахарным диабетом 1 типа // К.П. Зак, Т.Н. Малиновская, Б.В. Болынова-Зубковская // Эндокринология. 2001. - С. 191-203.

70. Замятнин A.A. Физико-химические особенности эндогенных олигопептидов, обладающих морфогенетической активностью// Онтогенез. 1988. -том16, №5. - С. 593.

71. Замятнин A.A. Общие функциональные особенности эндогенных регуляторных олигопептидов// Физиологический журнал. 1992. -том 178, №9. -С. 39-51.

72. Зубаиров Д.А. Молекулярные механизмы свёртывания крови и тромбообразования / Д.А. Зубаиров. Казань: «ФЭН». - 2000. - 360 с.

73. Зубаиров Д.А., Контактная фаза свёртывания крови у птиц (кур, уток, голубей) / Д.А. Зубаиров, Л.Г. Попова // Современные методы исследования в клинике и эксперименте: сборник. Казань, 1969. - С. 48-50.

74. Имамбаев М.С. Влияние масла крапивы на функцию гемостаза/ М.С. Имамбаев, P.C. Кузденбаева, В.А. Макаров, Г.Н. Петрухина, Г.Г. Белозерская, Л.С. Малыхина и др.// Тромбоз, гемостаз и реология. -2005.-№2.-С. 51-54.

75. Иммунологические методы/ под ред. Г. Фримеля (H.Friemel). М.: Медицина, 1987. - 472с.

76. Кветной И.М. Гормональная функция нейроэндокринных клеток: роль нового биологического феномена в регуляции гомеостаза /И.М. Кветной, И.Э. Ингель // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000.- Т. 130, № 11. - С. 483 - 487.

77. Ключерева H.H. Патогенетическое обоснование применения вилона при сахарном диабете первого типа: Автореф. канд. медицинских наук. 14.00.16. Чита, 2005. - 24 с.

78. Козина Л.С. Влияние биологически активных тетрапептидов на свободнорадикальные процессы// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2007. - том 143, №3. - С. 690-692.

79. Козинец Г.И. Исследование системы крови в клинической практике / Г.И. Козинец, В.А. Макаров. М.: Триада-Х, 1998. - С.480 .

80. Колесниченко JI.P. Саногенетические аспекты действия эпиталона на состояние системы гемостаза и уровень инсулина у больных сахарным диабетом 1 типа / Автореф. дисс. канд. мед. наук. Чита. — 2006. 22 с.

81. Корнева Е.К. Гормоны и иммунная система/Е.К. Корнева, Э.К. Шхинек.-JI., 1988.

82. ЮО.Коркушко О.В. Пинеальная железа: пути коррекции при старении/ О.В. Коркушко, В.Х. Хавинсон, В.Б. Шатило. СПб.: Наука, 2006. -204с.

83. Коркушко О.В., Хавинсон В.Х., Шатило В.Б., Антонюк-Щеглова И.А. Геропротекторный эффект пептидного препарата эпиталамина у пожилых людей с ускоренным старением// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2006. - том 142, № 9. — С. 328-333.

84. Кудряшов Б. А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и её свёртывания. М. "Медицина". 1975. - 488 с.

85. Кузник Б.И. Аутоиммунные механизмы регуляции системы гемостаза / Б.И. Кузник, H.H. Цыбиков // Сибирский онкологический журнал. -2005. -№ 1 (13). С.88-95.

86. Кузник Б.И. Влияние тималина и вилона на уровень про- и противовоспалительных цитокинов при отморожениях / Б.И. Кузник, Ю.А. Витковский, В.Х. Хавинсон // Иммунология. 2001. - № 6. - С. 42-45.

87. Кузник Б.И., Витковский Ю.А., Солпов A.B. Адгезивные молекулы и лейкоцитарно-тромбоцитарные взаимодействия // Вестник гематологии. 2006. - № 2. - С. 42-55.

88. Кузник Б.И. Иммунитет, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И. Кузник, Н.В. Васильев, Н.Н Цыбиков М.: Медицина. - С.320.

89. Кузник Б.И., Колесниченко JI.P., Ключерева H.H. и др. Влияние вилона на состояние гемостаза у больных сахарным диабетом 1 типа разного возраста // Успехи геронтологии. 2006. - В. 19. - С. 107-115.

90. Кузник Б.И., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Цитомедины и их роль в регуляции физиологических функций//Успехи совр.биологии. 1995. -Т.115, вып. 3. - с. 353-367.

91. Кузник Б.И. Продукция провоспалительных цитокинов коррелирует с нарушениями системы гемостаза при атеросклерозе и ишемическойболезни сердца / Б.И. Кузник, Ю.А. Витковский, А.И. Фёдорова // Атеротромбоз — проблема современности. — М., 2001. — С. 68-70.

92. Кузник Б.И. Применение пептидных биорегуляторов в стоматологии / Б.И. Кузник, И.С. Пинелис, В.Х. Хавинсон // СПб.: Эскулап, 1999. -С. 142 .

93. Кузник Б.И. Физиология и патология системы крови/ Б.И. Кузник -Чита: Поиск, 2001. 284с., ил.

94. Кузник Б.И. Форменные элементы крови, сосудистая стенка, гемостаз и тромбоз / Б.И. Кузник, В.П. Скипетров М.: Медицина, 1974. -С. 320 .

95. Кузник Б.И., Хавинсон В.Х., Витковский Ю.А., Пинелис С.И., Сизоненко В.А. и др. Применение пептидных регуляторов в хирургии и онкологии. Чита. 2001. 352 с.

96. Кузник Б.И. Цитомедины. 25-летний опыт экспериментальных и клинических исследований / Б.И. Кузник, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон Санкт-Петербург: Наука, 1998. - С.310 .

97. Кузник Б.И., Цыбиков H.H., Витковский Ю.А. Единая гуморальная система защиты организма // Тромбоз, гемостаз и реология. 2005. -№2.-С. 3-16.

98. Курбанов Т.Г., Кальбаева Б.М., Закиева Г.Г. Эффективность применения тималина при сахарном диабете у детей // Проблемы эндокринологии. 1989. - № 6. - С. 7-9.

99. Лабунец И.Ф., Бутенко Г.М. Влияние пептидных факторов эпифиза на возрастные изменения цирканнуальных ритмов функционального состояния тимуса, иммунной системы и коры надпочечников у животных// Иммунлогия. 2007. - №3. - С. 183-186.

100. Ляпина Л. А. Глипролины, тафцин и семакс как модуляторы противосвёртывающей системы крови // Российский симпозиум по химии и биологии петидов. тез. стендовых сообщений. - Москва, 2003. - С. 80

101. Ляпина Л.А., Пасторова В.Е., Оберган Т.Ю. Динамика изменений показателей гемостаза при интраназальном введении пептида Pro-Gly-Рго//Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2007. -том 144, №10. - С.369-371

102. Макацария А.Д. Тромбофилии: противотромботическая терапия в акушерской практике // А.Д. Макацария, В.О. Бицадзе — М.: «Триада-X», 2003.-С.904 .

103. Макацария А.Д., Бицадзе В.О. Тромбофилические состояния в акушерской клинике. М. 2001. 704 с.

104. Макацария А.Д. Мищенко А.Л. Значение и возможности исследования тромбоцитарного звена системы гемостаза в акушерско-гинекологической практике // Акушерство и гинекол. 1985. № 10. С. 71-75.

105. Малинин В.В. Влияние тимогемалина на систему иммунитета / В.В. Малинин, C.B. Серый // Сб. Роль пептидных биорегуляторов (цитомединов) в регуляции гомеостаза.- Ленинград, 1987.- С. 61.

106. Харинцева C.B. Влияние ретилина на содержание провоспалительных цитокинов в слезной жидкости больных диабетической ретинопатией / C.B. Харинцева, А.Ш. Гармаева, Д.Ц. Нимаева // Забайкальский медицинский вестник. 2001. - № 2. - С. 70-71.

107. Целюба Е.А. Патогенетическое обоснование биорегулирующей терапии при эндометриозе / Е.А. Целюба // Автореф. дисс. . кандидата медицинских наук. Чита, 2002. -С. 22 .

108. Цыбенова Б.Ц. Патогенетическое обоснование иммуномодулирующей терапии хронических воспалительных заболеваний лёгких у детей. Авторефрат канд. мед. наук. 2003. Чита. 20 с.

109. Чипенс Г.И. Структурные основы действия пептидных и белковых иммуномодуляторов// Г.И.Чипенс, Н.И.Веретенников, Р.Э. Вегнер и др. Рига: Зинатне, 1990. - 329с.

110. Чиркунов A.B. Влияние тималина, тимогена и вил она на некоторые показатели иммунитета и гемостаза / A.B. Чиркунов // Автореф. диссертации канд. медицинских наук. Чита, 2000. -С. 22 .

111. Шитикова A.C. Лабораторное исследование тромбоцитов в клинической практике. Л. 1984. 56 с.

112. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. СПб. 2000. 225 с.

113. Хавинсон В.Х. Применение эпиталамина при инсулиннезависимом сахарном диабете/ В.Х. Хавинсон, Т.С. Шутак // Санкт-Петербург, 2000. - 62 с.

114. Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы и старение / В.Х. Хавинсон, В.Н. Анисимов. СПб.: Наука, 2003. -223с.

115. Юрчук Е.В. Влияние пелоидотерапии на лимфоцитарно-тромбоцитар-ную адгезию и экспрессию тканевого фактора моноцитами периферической крови // Забайкальский мед. вестник. 2003. № 2. С. 12-14.

116. Anisimov V. N., Khavinson V. Kh., Morozov V. G. Effect of synthetic dipeptide Thymogen (Glu-Тф) on life span and spontaneous tumor incidence in rats // The Gerontologist. 1998. Vol. 38. P. 7—8.

117. Anisimov V. N., Khavinson V. Kh., Morozov V. G. Immunomodulatory synthetic dipeptide L-Glu-L-Trp slows down aging and inhibits spontaneous carcinogenesis in rats // Biogerontology. 2000. N 1. P. 55-59.

118. Anisimov V. N., Khavinson V. Kh., Morozov V. G. Twenty years of study on effects of pineal peptide preparation: Epithalamin in experimental gerontology and oncology // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. Vol. 719. P. 483493.

119. Bajusz S., Barabas E., Fauszt J. et al. Active site-directed Thrombin inhibitors: alpha-hydroxyacyl-prolyl-arginin/ New orally active stable analogs of D-Phe-Pro-Arg-H // Dioorg. Med. Chem. 1995. - V.3, №8. -P. 1079-1089.

120. Bajusz S., Ronai A.Z., Szekely J.I. et al. A superactive antinociceptive pentapeptide, (D-Met2, Pro5)-enkephalinamide// FEBS letters. 1977. -Vol. 76, N1.-P. 91-92.

121. Ferroni P. Platelet activation in type 2 diabetes mellitus / P. Ferroni, S. Basili, A. Falco, G. Davi // J. Thromb. Haemost. 2004. - V. 2. - P. 12821291.

122. Glusa S. Stand und Entwicklungsbendenzen auf dem Gebiet der Thrombozyten functions hemstoff // Folia. Haematolog./ (DDR)/ 1984. -V. Ill, №4,-S. 575-579.

123. Kaplar M., Kappelmayer J., Veszpremi A. et al. The possible association of in vivo leukocyte-platelet heterophilic aggregate formation and the development of diabetic angiopathy // Platelets. 2001. - V. 12. - P. 158.

124. Kaplar M. The possible association of in vivo leukocyte-platelet heterophilic aggregate formation and the development of diabetic angiopathy / M. Kaplar, J. Kappelmayer, A. Veszpremi et al. // Platelets. -2001.-V. 12.-P. 158.

125. Karlsson M. GAD-peptide increase mRNA expression for cytokines in mononuclear cells of children with IDDM / M. Karlsson, J. Ludvigson // Diabetologia. 1996. - V. 39, Suppl. 1. - A98. - P. 99.

126. Khavinson V.Kh. Gerontological Aspects of Genome Peptide Regulation / V.Kh Khavinson, V.V. Malinin // Karger. 2005. - 104 p.

127. Kini R.M., Evans H.J. A novrl approach to the design of potent bioactive peptides by incorporation of proline brackets: antiplatelete effects of Arg-Gly-Asp peptides // FEBS Letters. 1995. - V.375. - P. 15-17.

128. Kuznik B.I. Cytokines, Immunoglobulins and Hemostasis / B.I. Kuznik, N.N. Tsibikov // Hematol. Rev. 1996. - V. 7, Part 2. - P. 43-70.

129. Kvetnoy I. M., Yuzhakov V. V., Raikhlin N. T. APUD cells: modern strategy of morpho-functional analysis // Microscopy and Analysis. 1997. Vol. 48. P. 25-27.

130. Li N., Ji Q., Hjemdahl P. Platelet-lymphocyte conjugation differ between lymphocyte subpopulation // Journal of Thrombosis and Haemostasis. — 2006.-Vol. 4.-P. 874-881.

131. MorozovV. G., Khavinson V. Kh. Pharmaceutical preparation for the therapy of immune deficiency conditions. United States Patent № 5, 538, 951. 1996.

132. McEver R.P. Adhesive interaction of leukocytes, platelets, and the vessel wall during hemostasis and inflammation // Thrombosis and Haemostasis. — 2001.-Vol. 86. -№ 3. P. 746-756.

133. Ojima J., Chacravarty S., Dong Q. Antithrombotic agents: from RGD to peptide mimetics // Bioorg. Med. Chem. 1995. - V.3, №4. - P. 337-360.

134. Perutelli P. Desintegrins: potent inhibitors of platelete aggregation // Recenti. Prog. Med. 1995. - V.86. - P. 168-174.

135. Petruzzi E. ATF rellase by osmotic shock Na+, K+ and Ca++-ATFase activités, in liabetic erytrocyte / E. Petruzzi, R. Rabini, R. Staffolani et al. // Diabetelogia. 1995. - V. 38, N 1. - P. 995.

136. Phillips D.R., Scarborogh R.M. Clinical pharmacology of eptifibatide // Am. J. Cardiol. 1997. - V. 80, №4 A. - P. 11B-20B.

137. Santengelo C. Suppressors of cytokine signaling (SOCS) in cytokine-induced human islet cell damage / C. Santengelo, P. Marchetti, L. Marselli et al. // Diabetologia. 2001. - V. 44, suppl. 1. - P. A41.

138. Schafer A. Antiplatelete therapy with glycoprotein Ilb/IIIa receptor inhibitors and other novel agents // Tex. Heart. Inst. J. 1997. - V.25, №2. -P. 90-96.

139. Schulman S.P., Goldshmidt-Clermont P.J., Topol E.J. et al. Effect of integrelin, a platelete glycoprotein Ilb/IIIa receptor antagonist, in instable angina. A randomized multicentral trial // Circulation. 1996. - V. 94, №9. - P. 2083-2089.

140. Sheu J.R., Yen M.N., Peng H.C. et al. Triflavin, an Arg-Gly-Asp-contaning peptide, prevents platelete plug formation in vivo experiments // Eur. J. Pharmacol. 1995.-V. 294, №1.-P. 231-234.

141. Solpov A. Influence of monocyte on lymphocyte-platelet adhesion // Thrombosis and Haemostasis. Suppl. - Abstr. XIX Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis. Birmingham, UK. -July, 2003.-P. 60.

142. Topol E.J., Plof E.F. Clinical Trials of platelet receptor inhibitors// Thrombos. Haemostas. 1993. V. 70, №1. - P. 94-98.

143. Vahanian A., Garbarz E. Modern «antiplatelete agents» in instable angina // Arch. Mai. Coeur. Viass. 1996. - V. 89. (11 suppl.) P. 1521-1526.

144. Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. Interleukin 2 influence on platelet-lymphocyte adhesion // Thrombosis and Haemostasis. — Suppl. — Abstr. XVII Congress of the ISTH. Washington D.C. August 14-21, 1999. - P. 141-142.

145. Vitkovsky Yu., Kuznik B., Solpov A. Role of interleukin-2 in lymphocytes rosette formation with platelet // Platelets 2000 Symposium. 18-22 May 2000, Ma'ale Hachamisha, Israel. P. 32.

146. Vitkovsky Yu., Kuznik B., Solpov A. Cytokine influence on lymphocyte-platelet adhesion // Thrombosis and Haemostasis. Suppl. - July, 2001. -P. 2711.

147. Vitkovsky Yu., Ilynykh L., Kuznik B. et al. Lymphocyte-platelet adhesion in IL-2 therapy of patient with laryngeal carcinoma // Journal of Leukocyte Biology. Suppl. - 2001. - P. 66.

148. Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. Cytokine effects on lymphocyte-platelet adhesion // Haemostasis. Suppl. - 17th International Congress on Thrombosis. - Bologna, Italy. June, 2002. - P. 155.

149. Малинин B.B. Механизмы действия синтетических пептидных тимомиметиков / В.В. Малинин // Автореф. дис. . докт. мед. наук.-СПб., 2001.- 40 с.

150. Морозов В.Г. Пептидные тимомиметики/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин. СПб.: Наука, 2001. - 158с.

151. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения). СПб.: Наука, 1996. 74 с.

152. Мищенко В.П. Физиология системы гемостаза / В.П. Мищенко, И.В. Мищенко. Полтава, 2003. -С. 124 .

153. Мищенко В.П. Физическая активность, гемостаз и здоровье / В.П. Мищенко, E.JI. Ерёмина, И.В. Мищенко. Полтава, 2004. - С. 144 .

154. Мураневич С.А.Только ли через рецепторы осуществляется моделирующее действие нейропептидов? // Физиол. журн. СССР им. И. М. Сеченова. 1993. Т. 79, № 4. С. 9-29.

155. Онкология (Электронный учебник, версия 1.0, под ред. академика РАМН В.И.Чиссова). Уфа: Лаборатория медицинской информатики кафедры онкологии БГМУ, 2000.

156. Пасторова В.Е., Ляпина Л.А., Смолина Т.Ю., Ашмарин И.П. Антикоагулянтные и фибринолитические эффекты простейших пролинсодержащих пептидов// Известия РАН, сер. биол. 1998. №3. -С. 1-5.

157. Пасторова В.Е., Ляпина Л.А., Черкасова К.А., Ашмарин И.П. Пептиды как ингибиторы свёртывающей активности тромбина и агрегации тромбоцитов//Успехи физиологических наук. 1999. - т.30, №2. - С. 80-91.

158. Патеюк A.B. Роль гипофиза в регуляции иммунного ответа у птиц / A.B. Патеюк //Стресс и иммунитет: Тез. докл. Всес. конф. "Стресс ииммунитет (психонейроиммунология)" // Ростов н/Д.: 1989. С. 136137.

159. Патеюк A.B. Сравнительная оценка влияния препаратов гипофиза, тимуса и бурсы на течение экспериментального перитонита у крыс / Симпозиум: Пептидные биорегуляторы цитомедины / A.B. Патеюк // СПб. 1992. С. 113-114.

160. Патеюк A.B. Влияние пептидов гипофиза на состояние иммунитета у цыплят с одновременно удаленными тимусом и бурсой / A.B. Патеюк // Успехи физиологических наук. 1994. Т. 25, №4. С. 10.

161. Патеюк A.B. Гипофиз, иммунитет и гемостаз / A.B. Патеюк, Б.И. Кузник // International Journal on Immunorehabilitation. 2002. V. 4, № 2. P. 251-252.

162. Патеюк A.B. Влияние цитомединов гипофиза на состояние системы гемостаза у гипофизэктомированных кур различного возраста / A.B. Патеюк, Б.И. Кузник // Тромбы, кровоточивость и болезни сосудов. 2003. № 2. С. 54-55.

163. Патеюк A.B. Применение цитомединов передней и задней долей гипофиза для лечения калового перитонита в эксперименте / A.B. Патеюк, Б.И. Кузник // Медицинская иммунология. 2003. Т. 5. № 3-4. С. 317.

164. Патеюк A.B. Влияние цитомединов из передней и задней долей гипофиза на иммунитет и гемостаз у гипофизэктомированных цыплят / A.B. Патеюк, Б.И. Кузник // Иммунология. 2003. № 4. С. 213-216.

165. Патеюк A.B. Сравнительное действие тималина и бурсилина на иммунитет и гемостаз неонатально гипофизэктомированных цыплят / A.B. Патеюк, Б.И. Кузник // Иммунология. 2003. № 4. С. 216-218.

166. Патеюк A.B. Новые данные о роли гипофиза в регуляции клеточного и гуморального иммунитета / A.B. Патеюк, Б.И. Кузник, М.А. Джулай // Аллергология и иммунология. 2003. Т. 4, № 2. С. 199.

167. Патеюк A.B. Гипофиз, иммунитет и гемостаз / A.B. Патеюк, Б.И. Кузник, М.А. Джулай. Чита.- «Поиск», 2003,- 121с.

168. Патеюк A.B. Роль пептидных факторов гипофиза, тимуса и сумки Фабрициуса в регуляции иммунитета и гемостаза / А. В. Патеюк// Автореф. дисс. докт. мед наук. 030013, 140016. Чита. 2004. 34 с.

169. Патеюк A.B. Экспериментальная и клиническая иммунология на Востоке страны: Сборник научных трудов. Красноярск. 1988. Т. 1. С. 104.

170. Патеюк A.B. Стресс и иммунитет: тезисы докл. Всес. конфер. "Стресс и иммунитет (психонейроиммунология)". Ростов н/Д. 1989. С. 136137.

171. Патеюк A.B. Успехи физиологических наук. 1994. Т. 25, № 4. С. 10.

172. Патеюк A.B. Роль гипофиза в регуляции иммунитета и гемостаза: Автореф. дис. канд. мед. наук. Чита. 1995. 17 с.

173. Патеюк A.B., Кузник Б.И. Влияние синтетических олигопептидов на иммунитет, свёртывание крови и фибринолиз в опытах in vitro// Тромбоз, гемостаз и реология. 2003.- №4. - С. 39-42.

174. Пептидергическая регуляция гомеостаза / В.Х.Хавинсон и др.; СПб.: Наука, 2003.- 194с.

175. Пептидная регуляция адаптации организма к стрессовым воздействиям / А.В.Лысенко и др.; под ред. В.Х.Хавинсона. СПб.: Издательство BMA, 2005. - 208с.

176. Пептидные биорегуляторы: применение в травматологии, хирургии, стоматологии и онкологии/ Б.И. Кузник и др.; под ред. Б.И. Кузника и В.Х. Хавинсона. — М.: Вузовская книга, 2004. — 400с.: ил.

177. Пептидные препараты тимуса и эпифиза в профилактике ускоренного старения / О.В.Коркушко, В.Х.Хавинсон, Г.М.Бутенко, В.Б.Шатило -СПб.:Наука, 2002. 202с.

178. Петросян М.Т., Розенфельд М.А., Петров А.К. и др. Взаимодействие синтетических пептидов с отдельными компонентами системы свёртывания крови // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1983ю - Т. 107, №2. - С. 57-59.

179. Применение пептидных биорегуляторов в хирургии и онкологии/ Б.И. Кузник и др.; под ред. Б.И. Кузника. Чита: Степанов М.А., 2001. -352с.

180. Пятериченко И. А. Клинико-иммунологический статус больных с пороками сердца ревматической этиологии после операций на открытом сердце и возможности иммунокоррекции тимогеном: Автореф. дис. .канд. мед. наук. СПб., 1991. 22 с.

181. Рисин С.А., Рисина Д.Я., Миронова Г.И. Тималин как фактор коррекции гомеостаза при проведении лучевой терапии // Пути повышения лучевого воздействия при лечении онкологичесих заболеваний. Минск, 1988. Т. 2. С. 72-76.

182. Рыжак Г. А. Геронтокосметология: профилактика и коррекция возрастных изменений кожи / Г.А.Рыжак, Т.Н.Королькова, Е.В.Войтон. СПб.: ООО Фирма КОСТА, 2006. - 160.

183. Северин A.C., Шестакова М.В. Нарушение системы гемостаза у больных сахарным диабетом // Сахарный диабет. 2004. - № 1. - С. 62-67.

184. Смирнов B.C. Клиническая фармакология тимогена / В.С.Смирнов -СПб.: ФАРМиндекс, 2004. 172с.

185. Смирнов В. С, Селиванов А. А. Биорегуляторы в профилактике илечении гриппа. СПб.: Наука, 1996. 69 с.

186. Смирнов B.C., Хавинсон В.Х., Яковлев Г.М. Коррекция радиационных иммунодефицитов. СПб., 1992. 65 с.

187. Солпов A.B. Влияние цитокинов на лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию // Тромбоз, гемостаз, реология. 2002. - № 1. - С. 34-36.

188. Солпов A.B. Механизмы лимфоцитарно — тромбоцитарной адгезии /A.B.Солпов//Автореф. канд. мед. наук.03.00.13. Чита. 2005.-С. 22 .

189. Степанов A.B. Пептидные регуляторы гуморального иммунитета/ A.B. Степанов, B.JI. Цепелев, С.Л.Цепелев, О.Д. Аюшиев. Чита: Поиск,2002.-160с.

190. Струкова С.М. Гуморальные гемостатические системы при воспалении / С.М. Струкова // Воспаление. — М.: Медицина, 1995. С. 57-80.

191. Струкова С.М. Протеиназы системы свёртывания крови и фибринолиза как клеточные регуляторы / С.М. Струкова, В. А. Ткачу к // Биохимия. 2002. - Т. 67, вып. 1. - С. 3-5.

192. Струкова С.М., Дугина Т.Н., Самаль А.Б. Иммунорегулятор а 1-тимозин ингибитор ферментативной активности а-тромбина // Бюл. Экспер. биол. и мед. 1995. Т. 306, № 1. С. 229-232.

193. Струкова С.М. Современные представления о механизмах свертывания крови / С.М. Струкова // Тромбы, кровоточивость и болезни сосудов.- 2002.- № 2.- С. 21-26.

194. Тканевые регуляторные пептиды (теоретические основы и перспективы практического применения) / Л.Э.Веснина и др.; под ред. И.П.Кайдышева, В.П.Мищенко, В.К.Рыбальченко К.: Здоров'я,2003.-392с.

195. Трапезников H.H., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ. М., 2001. 295 с.

196. Трофимов A.B. Нейроэндокринные клетки желудочно-кишечного тракта в моделях преждевременного старения/А.В. Трофимов, И.В.Князькин, И.М. Кветной. СПБ.: Издательство ДЕАН, 2005. -208с.

197. Трофимова C.B. Регуляторное действие пептидов сетчатки / С.В.Трофимова, И.Б. Максимов, В.В. Нероев; СПб.: ООО Фирма КОСТА, 2004.-160с.

198. Трофимова C.B. Возрастные особенности регуляторного действия пептидов при пигментной дегенерации сетчатки / C.B. Трофимова // Автореферат дисс. доктора мед. наук. 14.00.53 и 14.00.08. Санкт-Петербург. 2003.-С. 40.

199. Хавинсон В.Х., Бондарев И.Э., Бутюгов A.A., Смирнова Т.Д. Пептид способствует преодолению лимита деления соматических клеток человека// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2004. том 137, №5. -С. 573-577.

200. Хавинсон В.Х. Влияние вилона на показатели биологического возраста и продолжительности жизни мышей / В.Х. Хавинсон, В.Н. Анисимов, Н.Ю. Заварзина // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2000. - № 7.-С. 88-91.

201. Хавинсон В. X., Кветной И. М., Попучиев В. В., Южаков В. В., Котлова Л. Н. Влияние пептидов пинеальной железы на нейроэндокринные взаимосвязи после пинеалэктомии // Арх. патологии. 2001. № 3. С. 18-21.

202. Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Тимофеева Н.М., Егорова В.В., Никитина A.A. Влияние эпиталона на активность ферментов желудочно-кишечного тракта молодых и старых крыс// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2002. Том 133, №3. — С. 337-339.

203. Хавинсон В.Х. Регулирующее влияние эпиталона на эндокринные клетки желудка пинеалэктомированных крыс/ В.Х. Хавинсон, В.В. Попучиев, И.М. Кветной, В.В. Южаков, JI.H. Котлова // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. Т. 130, № 12. С. 651—653.

204. Хавинсон В.Х. Пептидергическая регуляция гомеостаза / В.Х. Хавинсон, И.М. Кветной, В.В. Южаков и др. // Санкт-Петербург: «Наука», 2003. С. 196.

205. Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы в лечении диабетической ретинопатии / В.Х. Хавинсон, В.М. Хокканен, С.В.Трофимова. -СПб.: ИКФ Фолиант, 1999. 120с.

206. Харинцева C.B. Влияние ретилина на течение экспериментальных тромбозов сосудов конъюнктивы и сетчатой оболочки / C.B. Харинцева // Цитомедины: Сб. научных трудов. Вып. второй. — Чита. — 1996.-С. 89-90.

207. Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Тимофеева Н.М., Егорова В.В., Никитина A.A. Влияние эпиталона на активность ферментов желудочно-кишечного тракта молодых и старых крыс// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2002. Том 133, №3. - С. 337-339.

208. Хавинсон В.Х. Регулирующее влияние эпиталона на эндокринные клетки желудка пинеалэктомированных крыс/ В.Х. Хавинсон, В.В. Попучиев, И.М. Кветной, В.В. Южаков, JÏ.H. Котлова // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. Т. 130, № 12. С. 651—653.

209. Хавинсон В.Х. Пептидергическая регуляция гомеостаза / В.Х. Хавинсон, И.М. Кветной, В.В. Южаков и др. // Санкт-Петербург: «Наука», 2003.-С. 196.

210. Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы в лечении диабетической ретинопатии / В.Х. Хавинсон, В.М. Хокканен, С.В.Трофимова. -СПб.: ИКФ Фолиант, 1999. 120с.

211. Харинцева C.B. Влияние ретилина на течение экспериментальных тромбозов сосудов конъюнктивы и сетчатой оболочки / C.B. Харинцева // Цитомедины: Сб. научных трудов. Вып. второй. Чита. -1996.-С. 89-90.

212. Харинцева C.B. Влияние ретилина на содержание провоспалительных цитокинов в слезной жидкости больных диабетической ретинопатией / C.B. Харинцева, А.Ш. Гармаева, Д.Ц. Нимаева // Забайкальский медицинский вестник. 2001. - № 2. — С. 70-71.

213. Целюба Е.А. Патогенетическое обоснование биорегулирующей терапии при эндометриозе / Е.А. Целюба // Автореф. дисс. . кандидата медицинских наук. Чита, 2002. -С. 22 .

214. Цыбенова Б.Ц. Патогенетическое обоснование иммуномодулирующей терапии хронических воспалительных заболеваний лёгких у детей. Авторефрат канд. мед. наук. 2003. Чита. 20 с.

215. Чипенс Г.И. Структурные основы действия пептидных и белковых иммуномодуляторов// Г.И.Чипенс, Н.И.Веретенников, Р.Э. Вегнер и др. Рига: Зинатне, 1990. - 329с.

216. Чиркунов A.B. Влияние тималина, тимогена и вил она на некоторые показатели иммунитета и гемостаза / A.B. Чиркунов // Автореф. диссертации канд. медицинских наук. — Чита, 2000. -С. 22 .

217. Шитикова A.C. Лабораторное исследование тромбоцитов в клинической практике. Л. 1984. 56 с.

218. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. СПб. 2000. 225 с.

219. Хавинсон В.Х. Применение эпиталамина при инсулиннезависимом сахарном диабете/ В.Х. Хавинсон, Т.С. Шутак // Санкт-Петербург, 2000. - 62 с.

220. Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы и старение / В.Х. Хавинсон, В.Н. Анисимов. СПб.: Наука, 2003. - 223с.

221. Юрчук Е.В. Влияние пелоидотерапии на лимфоцитарно-тромбоцитар-ную адгезию и экспрессию тканевого фактора моноцитами периферической крови // Забайкальский мед. вестник. 2003. № 2. С. 12-14.

222. Anisimov V. N., Khavinson V. Kh., Morozov V. G. Effect of synthetic dipeptide Thymogen (Glu-Тф) on life span and spontaneous tumor incidence in rats // The Gerontologist. 1998. Vol. 38. P. 7—8.

223. Anisimov V. N., Khavinson V. Kh., Morozov V. G. Immunomodulatory synthetic dipeptide L-Glu-L-Trp slows down aging and inhibits spontaneous carcinogenesis in rats // Biogerontology. 2000. N 1. P. 55-59.

224. Anisimov V. N., Khavinson V. Kh., Morozov V. G. Twenty years of study on effects of pineal peptide preparation: Epithalamin in experimental gerontology and oncology // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. Vol. 719. P. 483493.

225. Bajusz S., Barabas E., Fauszt J. et al. Active site-directed Thrombin inhibitors: alpha-hydroxyacyl-prolyl-arginin/ New orally active stable analogs of D-Phe-Pro-Arg-H // Dioorg. Med. Chem. 1995. -V.3, №8. - P. 1079-1089.

226. Bajusz S., Ronai A.Z., Szekely J.I. et al. A superactive antinociceptive pentapeptide, (D-Met2, Pro5)-enkephalinamide// FEBS letters. 1977. -Vol. 76, N1.-P. 91-92.

227. Ferroni P. Platelet activation in type 2 diabetes mellitus / P. Ferroni, S. Basili, A. Falco, G. Davi // J. Thromb. Haemost. 2004. - V. 2. - P. 12821291.

228. Glusa S. Stand und Entwicklungsbendenzen auf dem Gebiet der Thrombozyten functions hemstoff // Folia. Haematolog./ (DDR)/ 1984. -V. 111,№4.-S. 575-579.

229. Kaplar M., Kappelmayer J., Veszpremi A. et al. The possible association of in vivo leukocyte-platelet heterophilic aggregate formation and the development of diabetic angiopathy // Platelets. 2001. - V. 12. - P. 158.

230. Kaplar M. The possible association of in vivo leukocyte-platelet heterophilic aggregate formation and the development of diabetic angiopathy / M. Kaplar, J. Kappelmayer, A. Veszpremi et al. // Platelets. -2001.-V. 12.-P. 158.

231. Karlsson M. GAD-peptide increase mRNA expression for cytokines in mononuclear cells of children with IDDM / M. Karlsson, J. Ludvigson // Diabetologia. 1996. - V. 39, Suppl. 1. - A98. - P. 99.

232. Khavinson V.Kh. Gerontological Aspects of Genome Peptide Regulation / V.Kh Khavinson, V.V. Malinin // Karger. 2005. - 104 p.

233. Kini R.M., Evans H.J. A novrl approach to the design of potent bioactive peptides by incorporation of proline brackets: antiplatelete effects of Arg-Gly-Asp peptides // FEBS Letters. 1995. - V.375. - P. 15-17.

234. Kuznik B.I. Cytokines, Immunoglobulins and Hemostasis / B.I. Kuznik, N.N. Tsibikov // Hematol. Rev. 1996. - V. 7, Part 2. - P. 43-70.

235. Kvetnoy I. M., Yuzhakov V. V., Raikhlin N. T. APUD cells: modern strategy of morpho-fimctional analysis // Microscopy and Analysis. 1997. Vol. 48. P. 25-27.

236. Li N., Ji Q., Hjemdahl P. Platelet-lymphocyte conjugation differ between lymphocyte subpopulation // Journal of Thrombosis and Haemostasis. -2006.-Vol. 4.-P. 874-881.

237. MorozovV. G., Khavinson V. Kh. Pharmaceutical preparation for the therapy of immune deficiency conditions. United States Patent № 5, 538, 951. 1996.

238. McEver R.P. Adhesive interaction of leukocytes, platelets, and the vessel wall during hemostasis and inflammation // Thrombosis and Haemostasis. — 2001.-Vol. 86. — № 3. P. 746-756.

239. Ojima J., Chacravarty S., Dong Q. Antithrombotic agents: from RGD to peptide mimetics // Bioorg. Med. Chem. 1995. - V.3, №4. - P. 337-360.

240. Perutelli P. Desintegrins: potent inhibitors of platelete aggregation // Recenti. Prog. Med. 1995. - V.86. - P. 168-174.

241. Petruzzi E. ATF rellase by osmotic shock Na+, K+ and Ca++-ATFase activités, in liabetic erytrocyte / E. Petruzzi, R. Rabini, R. Staffolani et al. // Diabetelogia. 1995. -V. 38, N 1. - P. 995.

242. Phillips D.R., Scarborogh R.M. Clinical pharmacology of eptifibatide // Am. J. Cardiol. 1997. - V. 80, №4 A. - P. 11B-20B.

243. Santengelo C. Suppressors of cytokine signaling (SOCS) in cytokine-induced human islet cell damage / C. Santengelo, P. Marchetti, L. Marselli et al. // Diabetologia. 2001. - V. 44, suppl. 1. - P. A41.

244. Schafer A. Antiplatelete therapy with glycoprotein Ilb/IIIa receptor inhibitors and other novel agents // Tex. Heart. Inst. J. 1997. - V.25, №2.- P. 90-96.

245. Schulman S.P., Goldshmidt-Clermont P.J., Topol E.J. et al. Effect of integrelin, a platelete glycoprotein Ilb/IIIa receptor antagonist, in instable angina. A randomized multicentral trial // Circulation. 1996. - V. 94, №9.- P. 2083-2089.

246. Sheu J.R., Yen M.N., Peng H.C. et al. Triflavin, an Arg-Gly-Asp-contaning peptide, prevents platelete plug formation in vivo experiments // Eur. J. Pharmacol. 1995. -V. 294, №1. - P. 231-234.

247. Solpov A. Influence of monocyte on lymphocyte-platelet adhesion // Thrombosis and Haemostasis. Suppl. - Abstr. XIX Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis. Birmingham, UK. -July, 2003.-P. 60.

248. Topol E.J., Plof E.F. Clinical Trials of platelet receptor inhibitors// Thrombos. Haemostas. 1993. V. 70, №1. - P. 94-98.

249. Vahanian A., Garbarz E. Modern «antiplatelete agents» in instable angina // Arch. Mai. Coeur. Viass. 1996. -V. 89. (11 suppl.) P. 1521-1526.

250. Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. Interleukin 2 influence on platelet-lymphocyte adhesion // Thrombosis and Haemostasis. Suppl. - Abstr. XVII Congress of the ISTH. Washington D.C. - August 14-21, 1999. - P. 141-142.

251. Vitkovsky Yu., Kuznik B., Solpov A. Role of interleukin-2 in lymphocytes rosette formation with platelet // Platelets 2000 Symposium. 18-22 May 2000, Ma'ale Hachamisha, Israel. P. 32.

252. Vitkovsky Yu., Kuznik B., Solpov A. Cytokine influence on lymphocyte-platelet adhesion // Thrombosis and Haemostasis. Suppl. - July, 2001. -P. 2711.

253. Vitkovsky Yu., Ilynykh L., Kuznik B. et al. Lymphocyte-platelet adhesion in IL-2 therapy of patient with laryngeal carcinoma // Journal of Leukocyte Biology. Suppl. -2001. - P. 66.

254. Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. Cytokine effects on lymphocyte-platelet adhesion // Haemostasis. Suppl. - 17th International Congress on Thrombosis. - Bologna, Italy. June, 2002. — P. 155.