Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние некоторых физических, химических и биологических факторов на физико-химические свойства эритроцитов крови животных

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние некоторых физических, химических и биологических факторов на физико-химические свойства эритроцитов крови животных"

■9 Ц я

Российская Академия медицинских наук

Научно-исследовательский институт общей патологии и патологической физиологии

На правах рукописи

СВИРИДОВА Татьяна Григорьевна

ВЛИЯНИЕ НЕКОТОРЫХ ФИЗИЧЕСКИХ, ХШИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА ЖЗИКО-ХШИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЦИТОВ ШХШ ЖИВОТНЫХ

03.00.13 - физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 1992

1'нРота выполнена в 1рен0ургском государственном медицинском институте.

Научный руководитель - доктор медицинских наук, профессор

Ь.А.иоронцов

Официальные оппоненты - доктор медицинских наук, профессор

II .Ь.Александров - доктор Сгчлогических наук, профессор Л.И.Иржак

Ведущее учреждение - Научно-исследовательский институт нормальной физиологии им. П.К.Анохина при Российской Академии медицинских наук

Защита диссертации состоится " 7' " С^Р/^- ¡992 г< в ^^ часов на заседании Специализированного совета Д 001.03.01 при НИИ общей патологии и патологической физиологии АМ1 СССР (1&315, Москва, Балтийская ул., В)

С диссертацией можно ознакомиться в Научной части Института Автореферат разослан _/У ^¿м^^Л-_1992 г.

Учений секр( арь Специализированного совета кандидат медицинских наук Л.Н.Скуратовская

^ I ОЭДАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

' Акт'уапы-псть темы. В связи со сложной экологической сигу-ией в стране, постоянными контактами людей с агрсссипмыми мическими и физическими производственными факторами, широким т/енением физиотерапевтических процедур, увеличением арсена. химиотерапевтических препаратов,, несомненную актуальность шобретает проблема поиска объективных и надежных критериев [Я ранней диагностики неблагоприятных влияний на «ивой орга-!зм экзогенных факторов различной природы.

В этом плане особое внимание исследователей привлекает во-ложность использования эритроцита периферической крови в качо-гве тест-объекта в токсикологических и клинико-гигиснических ^следованиях (Г.А.Чуич и др.,19и1; Г.И.Сидоренко, 19<35; В.В.Со-злов, Р.А.Габулгалимова,19ио; Ь.А.Воронцов и др.,19оО; сы гпв - И1ге ее а1., 1990)о

В последние года получены убедительные данные о высокой увствительности эритроцитов периферической кропи к лекарством-ому воздействию (ЕЖСелезнев, В.И.Кряков,19ой; Л.¿.Зверев, .А,Цемахович,198й; СМррегхЧеЫ» 1905; I). ВпсЪ сЪ п1 „4 98В), действию факторов физической природы (Ь.И,Соболевский* 987; Р. Кег<5ап1е1е 1983) . Описано в литературе формирование ко-ичественных и качественных сдвигов с популяции эритроцитов при анцерогенезе (Е.Д.Гольдберг и др.„19оЗ; В.П.И&лепов и др.»19Ь7{ . Огп1г.с , 1963)8 нарушениях кислородного режима организма (Л.И. [ржак и др.,1985; ЛД1,Крулицкая(19Ь9; В.П.Агафонов, В.М.Алексе-.'В, 1990; Н„Н ..Великий и др.,1990; И.В.Глыбина и др.,1990; л, ир-а1а,-1983$ Нояйеу et а1.в 1903)5 алкоголизации (Д.И.Бель-шнко, Н.Я-Ханина,,168а; К. ЯиЬИпг в* в!,, 1987? СМ 1апг -е* а!.» 1990)с

Вместе с тем, нельзя не отметить, что содержащиеся в этих работах сведения носят разрозненный характер, касаются лись ограниченного количества показателей филико-химических свойств эритроцитов, не содержат данных о наиболее информативных параметрах, изменяющихся под влиянием конкретных экзогенных воздействий различной природы и, как правило, не отражают динамики этих изменений» Обращает на себя внимание также значительная вариабельность данных, полученных в разных лабораториях* что существенно снижает возможность их широкого использования для

сцошсн сдвнгоп, возникающих в живом организме под влиянием внешних роздейстний и при патологии. Имеющиеся в литературе раэноре-т/л'ь:е сведения могут быть обусловлены рядом объективных и субъективных причин, среди которых наиболее существенными являют-ея как использование различных методов исследования, так и относительная неточность традиционных гематологических методик (И.Тодорон, l'jôO; Б.Б,Соколов, ií.A.Грибова, 1972; Vana, 197^; R.J.L. I)av3 d".cm, P.J. Hnmilton, 1970).

Б связи с этим особое значение приобретает проблема выбора применяемых методик, отбора наиболее информативных показателей, чувствительных к физическим, химическим и другим воздействиям (Г.П.Ко:з;5нец,199С),

Все ото послужило причиной достаточно широкого внедрения я различные сферь: медицинских и биологических исследований оптических методов, обтадаюдих не только существенно большей разрешг кицей способностью, но и' нз искажающих свойств среды и обеспечивающих объективность получаемых данных об ансамбле живых клеток Í В.К.Хугапг-а, П-В.Александров,I9Ü2; А.Н.Хайруллкна,19Ь6; С.Н.Че-ренкевич и др. ,I9t>ó; З.А.Воронцов и др.,1965; "i. Groner et al., 19dói П.?. Wang et ni.» 1901: P. .Latimer, 1984; K. Lesçhonski,, 1984; D. Tycko et al., 1985; J.M. Steinke, A.P. Shopherd, 1988).

Исходя из этого, представляется ватой перспектива, базируясь на возможности современных методических подходов изучения физико-химических свойств эритроцитов периферической крови, провести комплексное исследование основных закономерностей реагирования циркулирующих форменных элементов крови на действие экзогенных факторов физической, химической и биологической природы, по интенсивности соответствующих тем воздействиям, которым организм подвергается в естественных условиях, а также в процессе стационарного к амбулаторного лечения. Такие данные могут оказат существенную помощь при оценке влияния неблагоприятных факторов внешней среды на'организм, а также способствовать устранению неверной трактовки гематологических исследований в процессе медикаментозной и нелекарственной терапии.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей.работы явилось изучение некоторых общих закономерностей реагирования эритроцитов периферической крови животных на воздействие наиболее часто встречающихся в естественных условиях либо применяемых с лечебными целями физических, химических и биологических факторов, а

акле выяснение наиболее информативных показателе" физкко-хнми-еских свойств эритроцитов при конкретном ряде экзогенного гоз-ействия.

Для достижения поставленной цели п 1649 экспериментах на *.и-отных с помощью метода спектра мутности были релеки следующие сдачи :

1. Осуществлена рационализация метода спектра мутности, г.оголившая автоматизировать процесс расчета параметров фпзико-хими-иеким свойств эритроцитов с использованием ЭВК.

2, Проведена комплексная оценка изменения физико-химических войств эритроцитов при действии следующих факторов:

а) физических (постоянное магнитное поло, электростимуляция) ;

б) химических (сульфаниламидные препараты, диуретики, алкоголизация);

в) нарушении газового режима организма (острые нормсбаричсс-кие гипоксия, гипероксия, гиперкапния);

г) биологических (воспроизведение канцерогенеза).

Научная новизна. Проведено комплексное изучение влияния на

жзико-химические свойства эритроцитов экзогенных факторов раз-;ичной природы и проанализированы особенности этих изменений в »ависимости от модальности воздействия.

Впервые изучены и выделены наиболее информативные параметры )изикс~химических свойств эритроцитов, претерпевающих изменения ¡ри действии конкретных экзогенных факторов. Проведено СОП О ('Т^В — генис сравнительной чувствительности эритроцитов к действию раэ-[ичных факторов внешней среды.

Апробирован усовершенствованный метод гематологических чередований для комплексной оценки физико-химических свойств эритроцитов с разработкой формул расчета основных показателей.

Теоретическая и практическая значимость работы. Дана кемп-гексная характеристика изменений физико-химических евойсто эритроцитов периферической крови при контакте организма с наиболее распространенными в естественных условиях и применяемыми г лечебных целях физическими, химическими и биологическими воздействиями. Выделены наиболее информативные параметры, лрзгерпевшцаз изменения при действии конкретных факторов. Полученные данное могут бить использованы в качестве дополнительных диагностических и прогностических тестов в экспериментальных условиях, практнчс-с-

кой медицине и ветеринарии, а также служить основой для дальнейших исследований.

Показана адекватность и информативность метода определения параметров физико-химических сеойств эритроцитов по спектру мутности при изучении влияния экзогенных факторов различной природ! на кипой организм.

Осуществлена рационализация метода расчета основных параметров физико-хямичееккх свойств эритроцитов по данным спектра мутности, даю'цяя возможность экспресс-диагностики и повышающая точность оценки функционального состояния зритрона.

Основные положения, выносимые на защиту. I. Физико-химические параметры эритроцитов периферической крови являются чувства тельным тестом влияния экзогенных факторов физической, химической и биологической природы, действующих на целостный организм.

2. Характер и выраженность сдвигов комплекса физико-химиче ких свойств эритроцитов периферической крови зависит от вида де: ствующего фактора, его интенсивности и времени,.

Апробация работы. Результаты работы доложены на I съезде физиологов Уральского региона (Уфа, 19об), В Всесоюзной конференции по физиологии почек и водно-солевого обмена {Харьков,190 научно-практической региональной конференции "Электрофорез клет к и" (Уфа, 1909).

Объем и структура диссертации. Диссертация написана на 143 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, главы материалов и методики исследования, 4 глав с изложением » обсуждением результатов, заключения, выводов и указатели литере туры0 включающего 434 источника, из них 239 на русском языке и 195 на иностранных языках. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 14 рисунками.

' МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Для решения поставленных задач было проведено 1649 исследований на 76 кроликах "Серый великан", 59 крысахВиетар" и 17 белых беспородных крысах.

3 качестве физических факторов было использовано: а) 20 -минутная экспозиция в постоянном магнитном поле индукцией 2ССМ б) элекгростимуляция [1-образным импульсным током в режиме 10 -минутной злектроаналгезии (П„П.Сундуков, Н.Я.Начато®,1982). Кр( получаемая из краевой вены уха кроликов в объеме 0,02 мл, иссл!

опплагь сразу послс воздействия, через 1,2,3,4,5,0,24 часи, ,4,5,6,7,13,9 и 10 сутск.

В качестве химических факторов: п) однократное порорачьиоо ведения сульфачонг/мотоксина в дозах С,ci. г/кг и 0,fa г/кг; ) однократное внутривенное введение лазпкес в дозе С,3 м-г/кг; ) однократное внутрибркпинное введение о'Ж этинового спирта в озо 2 г/кг» Первое исследование крови кроликов проводилось в ериод максимальной концентрации » ней вводимого препарата и дл-ее ежедневно в точение 7-10 дней, ¡¡осле введения лаяикса :< ал-оголизации, кроме того, кровь исследовалась с интервалом i? нее-олько часов в течение первых сутск.

Изучение изменения комплекса физико-химических спсйств ари-рсцитов при нарушен;::! газового рожиуа организма осуществлялось а крысах "Зистар", Исследование крови, получаемой и.з хвостовой сны, проводилось сразу послс воздействия; с интервалом в нес-олько часов в течение первых суток; ежсдн».'Ено в течение двух одель. Состояние острой нормоежрической гипоксии создавалось утем 15- и ¿5-минугного пребывания крыс в проточной камере, со-ер.кащей Ь* кислорода в азоте.

Для осуществления гилероксии крысы помечались на 15 или 60 инут в камеру, продуваемую чистым кислородом.

Состояние острой нормсбарнчеексЯ гиперкапнии создавалось утем помещения крыс на 30 минут в камору, продуваемую атносфер-ым воздухом с добавлением 4?' CO-j.

Воспроизведение канцерогенеза осуществлялось путем перзвив-и белым беспородным крысам асцитной гепатомы Зайделл. Исследс-анке крови осуществлялось ежедневно вплоть до гибели животных.

При изучении физико-химических свойств эритроцитов был ис-ользован один из методов светорассеяния - метод спектра мутное-и, продемонстрировавший высокую надежность и информативность в яде исследований последних лет (З.И.Кленин и др.,197В; А.Г.Без-уког, О.А.Роэенберг, 19Б1; А.Б.Хайруллина,IS8.3; В.А.Воронцов и р.,1985; Л.В.Степовкк,193Ь; А.Б.Хайруллина и др.,1986).

После соответствующих измерений на спектрофотометре №-¡¿6 круглой диафрагмой у. микроскопе !лБИ с микроокуляром M0B-I5 по ормулам вычисляли относительный показатель преломления зритро-итов: пг = {+ P,096j (при длине волны 805 нм), концентрацию ;ухих веществ в эритроците: С% - 60SfO (п. -/) ('/,) , содержание

сухого вещества г. эритроците: С - .3,t¿t(m-f)dL (пг), конце

трацию роди v. эритроците: Св = ICO - 453,75(/тг- I) (%}, плотность эритроцита: Р ~ С 1 i,SfZ(fíl~f}]-/C>-i (Kl/tus)t объем эритроцита: V- С, SZ3 концентрацию зритроцито1

в крови: Sí- tf,C¿ -IOf¿- Z>sc5j!tl-fr/KJfj-f* ('/л), концент-ряцию гемоглобина в кропи: US = //J.

С целью повышения точности расчетов параметров физико-химических свойств эритроцитов по данным спектра мутности и сокращения времени нп их проведение осуществлена рационализация метода поэпочшдаад исключить необходимость использования эмпирических тяблиц зависимости от п и К от J> , и автоматизировать процесс расчета с применением ОБК«.

Полученный цифровой ь-аторнат обработан статически с применением метода прямых разностей. (Г.^.Лакин,I9ü0). Дяя выяснения существенности различий по отношению к фону испопьзоевн критерий Сгьюделта. Различия считали достоверными при ?¿G,Q5.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЭДОЬАНШ

В серии опытов по изучения олияния на физико-химические свойства эритроцитов (ФХСЭ) постоянного магнитного поля (ШЛ) установлено, что в первые минуты после воздействия происходит увеличение концентрации эритроцитов и гемоглобина в крови на 7$ и соответственно. Зги сдвиги кратковременны и быстро нивелируются, однако через 6-6 часов данные показатели вновь превышают уровень фона» Следовая реакция на действие ПШ, развивающаяся через несколько дней, характеризуется увеличением концентрации сухих веществ в эритроците, его плотности, показателя прело мления, некоторым увеличением концентрации эритроцитов в крови и, в конце недели, - .возрастанием размеров клеток, сопровождаю-¡цимся увеличением количества гемоглобина в них.

Первичная стресс-реакция на электростимуляцию ОС) идентична таковой при воздействии П»Л - кратковременное увеличение концентрации эритроцитов и гемоглобина в крови на I4;í и 11$ соответственно, без существенной модификации их морфофункциональ-ных свойств. Однако дм следовой реакции на ЭС характерен закономерный рост концентрации эритроцитов и гемоглобина в крови, что свидетельствует об активизации эритропоээа. Прирост популяции эритроцитов происходит за счет клеток, обладающих качествеь ними особенностями - они имеют относительно малые размеры, г.овь

1ую концентрацию сухих веществ, плотность и показатель гре-ления, при антенной концентрации подо и уменьшении содер*«-гемоглобина в одном эритроците.

Таким образом, в первые ыинутн поено действия физических торов индикатором ролкции орилропп йогу? служить только коли -твенные сдвиги в популяции эритроцитов - увеличение концпнт-ии эритроцитов I! гомоглоСшм г крон;:. В отличие от этого, для допой реакции характерно сочетание сдсигоэ монофункциональных Коти ьрмтроцитов с роэрястанисм их числа в единице объема кроВ сприи опытов по изучению влияния на уХСЭ факторов хими-кей природа установлено, что характер возникающих сдвигов в ¡читальной мере связан с видом и интенсивностью воздействия. :, через 24 часа после введения сульфамонометокиина в дозе )5 г/кг отмечалось уменьшение размеров эритроцитов. Одноври-пю регистрировалось снижение содержания гемоглобина в одном !троцитс, обусловленное, по-видимому, микроцитозом, так как щентрация сухих веществ в клетке в этот период, напротив, про-шет тенденцию к увеличению, приобретающую достоверный харак-■) ко вторым суткам; что в свою очередь приводит к увеличению этности и показателя преломления эритроцитов. Данный комплекс зигов сохранялся доконца срока наблюдения (7 дней). Концентра-л гемоглобина в крови на протяжении эксперимента существенно ментась, несмотря на уменьшение содержания гемоглобина в ном эритроците, в связи с тем, что число эритроцитов в едини-объема крови несколько превышало исходный уровень»

Введение сульфамонометоксина в дозе 0,5 г/кг вызыняет иные в известном отношении, противоположные сдвиги физико-хими-еннх свойств эритроцитов. Так, через С часов после введения епарата регистрируется снижение концентрации гемоглобина в оси, достигающее через суток 13,5 %.

Через 24 часа наблюдается увеличение размеров эритроцитов и держания в них гемоглобина, сочетающееся с падением концонтра-!и эритроцитов в крови. Одновременно проявляется тенденция к мененню соо'ноаення сухих веществ к воды в эритроците, прпоб-.'Тяющйя С1 атлетически значимый характер ко вторым суткам зкепе-'.мента, что приводит к сни*енк» плотности и показателя прелом-:ния эритроцитов. Сдвиги в соотношении .».идкой и плотной фаь в зитроците оказались наиболее устойчивыми и сохранялись до конца

ti

срока наблюдения (7 дней). Концентрация эритроцитов и гемоглобина в кропи дозпрпщаеття к уровни фона к 3-м суткам.

В серии экспериментов по изучению влияния лазикса на ФХСЗ установлено, что через 1С' минут после его внутривенного введения отмечается увеличение объема эритроцитов, связанное» очевидно, с набуханием. Сб этом, е частности, свидетельствует увеличение концентрации воды в эритроците, что закономерно приводит к уменьшение его показателя преломления и плотности. Одновременно регистрируется. возрастание концентрации эритроцитов и гемоглобина в кре пи, достигающее через 30 минут 6,9% и 12,5% соответственно. Этот феномен, согласующийся с двнньаж В.¿.Булычева с соавт. (I9bû), подтверждает вывед И.Г.Длусской (I9¿3) о том, что диуретический эффект лазикса развивается за счет выведения жидкости из сосудистого русла. Более значительный прирост концентрации гемоглобина обусловлен возрастанием количества гемоглобина в одном эритроците, Наиболее устойчивыми сдвигами ФХСЭ, регистрируемыми как в период прямого действия лазикса, так и в процессе"развития следово{ реакции, является изменение корфефункциональных свойств циркулирующих эритроцитов - размеров, концентрации сухих веществ и воды, плотности и показателя преломления, содержания гемоглобина в клетке. В отличие от этого, увеличение концентрации эритроцитов и п мог-лобина в крови является кратковременным и может быть использовано в качестве индикатора воздействия только в течение часа посла внутривенного введения лазикса, т.е. лишь для оценки непосредственного действия препарата.

В серии опытов по изучению влияния острой алкоголизации на ÍXC3 установлено, что через час после введения этанола происходит снижение концентрации эритроцитов и гемоглобина в крови, сопровождающееся увеличением концентрации сухих веществ в эритроците, его плотности и показателя преломления, а также содержания гемоглобина d одном эритроците. Через 24 часа содержание гемоглобина в эритроците, концентрация эритроцитов и гемоглобина в крови не отличатся от исходного уровня, однако сдвиги в соотношении жидкой и плотной фаз в эритроците, сопровождаясь относительным микрецитозом, сохраняются в течение 4 дней.

В экспериментах по изучению влияния на ÍXC3 нотмобарической гипоксии установлено, что выраженность, направленнаяь v продолжительность развивающихся сдвигов зависят ог интенсивности гипок гического воздействия. Так, сразу после 1Б-минутнсг0 сеанса ги-

ссии отмечалось кратковременное увеличение концентрации эритритов в крови, сопровождающееся возрастаниям концентрации вов эритроците при уменьшении концентрации сухих веществ, гтлот-зти, показателя преломления. Стедсв&я реакция после краткосрочной гипоксии, проявляющаяся лпаь в конце первой недели пост-поксического периода, характеризуется относительной стимуляци-эритропоэза, проявляющейся увеличением концентрации в перифе-ческсГ. :грови более мелких эритроцитов, содержащих пониженное

во гемоглобина. Сочетание этих двух противоположных сдви-в обеспечивало поддержание концентрации гемоглобина в крови на носктелы'о стабильном уровне.

Сразу после 25-минутного сеанса гипоксии регистрируется шь компенсаторное увеличение концентрации эритроцитов и гемо-обина в крови. Следовая реакция после 25-минутной гипоксии, про-ляющаяся с 3 дня постгипоксического периода, выражается з уве-чении концентрации эритроцитов уменьшенных размеров, содержащих :и*енное количество гемоглобина при повышенной концентрации его клетке.

Заслуживает внимания четко выраженный двухфазный характер ■акции эритроцитов периферической крови на■однократную дозиро-шную гипоксию, а также наличие довольно продолжительного "ла-;нтного" периода, в течениэ которого значения всех изучаемых па-адетров ФХСЭ неотличима от исходных.

При дозированной гипероксии также развиваются существенные ;виги &ХСЭ. 15-минутннй контакт с чистым кислородом, не Екзывая )азу после экспозиции количественных сдвигов в популяции зритро-1тов, отражается на их морфофункциональних характеристиках. Окапаются достоверно уменьшенными средний диаметр и объем эрктро--1тов, содержание в них воды; концентрация сухих веществ в эрит-зците, его плотность и показатель преломления, пзг.ротив, воэрас-тт. Эти сдвиги кратковременно и быстро нивелируются. Через нес-олько часов после сеанса гипероксии регистрируется снижение кон-ентрации эритроцитов и гемоглобина в крови, удерживающееся до онца срока наблюдения. На 2-е сутки отмечалось достоверное умень-ение концентрации веды э эритроцитах за счет нарастания кокп^н-рации сухих веществ, увеличение плотности и показателя прело,мле-ня теток, а с третьих - уменьшение размеров эритроцитов и псдоив содержания эндоэритроцитарного гемоглобина.

1С

В отчичке от этого, сразу после 60-минутного сеанса гиперок сии обнаружено достоверное уменьшении.концентрации гемоглобина в крови, которое бистро нивелировалось.

Однако через 24 часа госл.> однократной гилсроксия вновь регистрируется снижение концентрации эритроцитов и гемоглобина в кропи, а с третьих суток постгипероксического периода оказывается измененными все параметры, характеризующие корфофункциональны свойс. га г»рктрпц;:тов: отмечался микроцитоз, оогропсждай-цийся уве личепиам концентрации сухих веществ в эритроците, показателя пре ломления V плотности его при сниженном содержании вода и гемогло бина в клетке:.

Однонаправленность сдвигов содержания гемоглобина в одном эритроците и числя эритроцитов в единице объема крови приводит ь более выраженному падению концентрации гемоглобина в крави го сравнению с концонтршией эритроцитов, что делает этот гокавател более информативным в постгипороксическом периоде;

Сггдует отмстить более глубокое, и' продолжительное снижение концентрации эритроцитов в крови после 15—¡.чинугной гиперокеии пс сравнению с более длительн.ыу воздействием.

Исследования по влиянию нормобарической гиперкапнии на ¿ХС'с ' юказали, что сразу после перевода животных на дыхание атмосферным возду хом количество эритроцитов , и гемоглобина и единице объема крови оказывается сниженным на 11% и 15$ соответственно. Более выраженное падение концентрации гемоглобина по срагнени» с числом эритроцитов обусловлено уменьшением.содержания гемоглобина в одной клетке, составляющим сразу после воздействия Снижение содержания гемоглобина в эритроците коррелирует с уменьшением его объема, в результате чего концентрация сухих веществ и воды в клетке, плотность и показатель преломления .эритроцитов практически не меняются. При восстановлении к четвертому часу постгиперкяпничееного периода объема эритроцитов до исходной величины, концентрация сухих веществ в эритроците, плотность и показатель преломления его оказывается достоверно сниженными, а концентрация воды, напротив,' увеличена. Количество гемоглобина : расчете на один эритроцит к этому времени восстанавливается до исходного уровня.

Через 24 часа после гиперкагнического воздействия концентрация эритроцитов к геуоглобнна в крови нормализуется, однако сохраняются сдвиги параметров ¿ХСи, сведете иствуадие об их на-с;ух ьнк:? (увеличение размеров клеток и хеииенлрации в них воды

ри гниении концентрации сухих вецеств, плотности и показателя реломтения). Оти сдвиги оказались весьма устойчивыми и репетировались в течение восьми суток постгиперкапнического периода.

В процессе развития эсцитно!! гегатомы 'Оайдслл происходит регрессирующее уменьшение концентрации эритроцитоп и гемогло-ина в кропи, причем достоверное снижение этих параметров отме-ается у*е на 2-е сутки, а в терминальной стадии достигает СЪ% о сравнению с исходным уровнем.

Количественные сдвиги в популяции эритроцитов сопровождается существенными изменениями их меррофункционлльных свойств, ыражающн'/ися г достоверном уисньвонин, начиная го вторых суток, лотности эритроцитов, показателя преломления, концентрации су-их взщестя Г) них и возрастании концентрации воды. Одновременно тмсчалась тенденция к увеличению диакстра и объема эритроцитов, риобретаящзя достоверный характер к 5 суткам развития онухоти.

Особого внимания запугивает фазность изменений ¿л СО н процессе развития опухоли - постепеннее нарастание сдвига этих спой-:тв в течение 2-4 суток после перевивки и резкое, скачкообразное ¡вменение всех изучаемых параметров на 5-6 сутки эксперимента, ¡то в определенней мере коррелирует с динамикой прогрессировали опухоли.

Проведенные исследования показали, что с одной стороны,, изученный комплекс физико-химических свойств эритроцитов грн воздействии экзогенных факторов разной модалыюсти претерпевает не-соторые общие для всех использованных воздействий закономерные .-"донги, а с другой стороны эти изменения косят относительно специфический характер для каждого из факторов физической, химической и биологической природы. Анализ полученных данных позволил обнаружить определенную общую фазность изменений комплекса физико-химических параметров эритроцитов независимо от вида воздействия (табл. I).

Направленность и выраженность сдвигов <ЖЭ, характерных для каждой из рыделенных фаз, кеиндентичны (табл. 2; последовательность параметров на оси: диам.етр, объем, показатель преломления, концентрация сухих вещест.в, плотность, концентрация воды, содержание сухих веществ, концентрация эритроцитов в крови, концентрация гемоглобина в крови), в связи с чек в различные сроки после

воздействия какс'огсее информативными оказываются изменения различиях параметров. Так, в первые минуты после воздействия (первоначальная стресс-реакция) наиболее информативными показателями можно считать концентрацию эритроцитов и гемоглобина в крови, в наиболее стабильней - содержанке гемоглобина в одном эритроците.

Таблица I

Разность реакции эритроцитов на действие экзогенных факторов

! Наименование фазы ! Продолжительность

т X в Первоначальная стресс-реакция Ь течение I часа

О Результат прямого или опосредован-

ного действии экзогенного фактора 1-6 часов

•j о « Ранняя следовая реакция 1-2 сутки

Начало стимуляции или окончание

гемолиза 3-4 сутки

о. Выраженная стимуляция б—tí сутки

Б. Постепенная нормализация 9-10 сутки

3 период I-ó часов сдвиги ¿гХСЗ отмечены только в 6 сериях экспериментов из 12. Наиболее стабильными параметрами оказались средние диаметр и объем эритроцитов, содержание в них гемоглобина.

Б период 1-2 суток (ранняя следовая реакция) сдвиги ОХСЭ нарастают, наиболзэ информативными показателями являются покагагеи преломления и плотность эритроцитов, концентрация в них сухих веществ .и воды. Наиболее стабильные параметры -.содержание гемоглобина е одном эритроците и концентрация его в крови.

Дня периода начала стимуляции или окончания гемолиза (3-4 сутки) характерными являются сдвиги в соотношении жидкой и плотной фаз б эритроцитах, сопровождающиеся, как правило, изменениями размеров клеток. Концентрация гемоглобина в крови оказывается наименее информативным показателем.

В период развития стимуляции эритропоэза (6-8 сутки) сдвиги ¿XC3 регистрируются после всех применяемых воздействий. Причем, наряду с показателем преломления, плотностью, диаметром, объемом

оритроцитов, концентрацией в них сухих веществ и воды в больши етве сери!) опытов изменение претерпевает содержание гемоглобин, в одном эритроците.

'Таким образом, физико-химические параметры эритроцитов пе форичсокой крови являются чувствительным тестом влияния экэоге: факторов физической, химической и биологической природы, деКст ющих на целостный организм, Действие экзогенных'факторов харак ризустся фазностыо и определенным комплексом сдвигов физико-хн ческпх свойств эритроцитов, что позволяет использовать эти сдв в качестве дополнительного теста для оценки неблагоприятных эк генных воздействий на организм.

ВЫВОДЫ

1. ¿ломко-химические параметры эритроцитов периферической крови являются чувствительным тестом влияния экзогенных фактор! физической, химической и биологической природы, действующих на цепостный организм.

2. Действие экзогенных факторов1 характеризуется фазностыо и определенным комплексом сдвигов физико-химических свойств эр] роцитфв, что позволяет использовать эти сдвиги в качестве допс. нательного т-ста для оценки неблагоприятных экзогенных воздейе вий на организм,

3. Реакция оритроцитов периферической крови на воздейстгнк факторов физической природы (электростимуляция, постоянное магнитное поле) имеет двухфазный характер: первоначальное кратков] менное увеличение концентрации оритроцитов и гемоглобина в кро; без существенной модификации морфофункциональных свойств краем клеток и последующее изменение большинства изучаемых параметра физико-химических свойств эритроцитов спустя 2-3 дня. Следовая реакция на элекгростимуляцию характеризуется микроцитозом, con] вотдающимся снижением количества гемоглобина в эритроците. Пос. однократного воздействия магнитного поля происходит увеличение размеров эритроцитов и содержания в них гемоглобина.

4. Динамика сдвигов в популяции оритроцитов периферическо) крови после воздействия химических факторов характеризуется nej воначальными существенными изменениями физико-химических спойся эритроцитов с последующей постепенной нормализацией. Выраженно< и характер развивающихся изменений зависят от вида действуйтеп агента и интенсивности воздействия (дозы препарата).

5. Реакция эритроцитов периферической крови на нарушение кис-эдного ре*има организма характеризуется двухфазчостьп: кратко-«енным изменением физико-химических свойств эритроцитов сразу

те перевода животных ня дыхание атмосферным воздухом и следовоИ сции, развивающейся через о суток. Направленность сдвигов физи-симических свойств эритроцитов ври первичной стресс-реакции на кок и недостаток кислорода во вдыхаемом воздухе противоположна: застание посте гипоксии концентрации эритроцитов и гемоглобина зови, сопровождавшееся (при 15-минутном воздействии) увеличени-{онцентроции пода в эритроците, снижением его плотности м пока-5чя преломления; снижение при ОО-минутной гипероксии концентра-гемоглобина в крови, уменьшение «идкой фазы в эритроците, повыше его плотности и показателя преломления (после 15-минутной зроксии). 3 отличие от этого характер сдвигов морфофункционпль-сбойств эритроцитов при развитии следовой реакции поело гипок-п гиперокс/и идентичен: микроцитоз, согровождаоцийся снижением гржпння гемоглобине в одно» эритроците при возрастании его кон-грации в клетке, увеличением показателя преломления и плотности гроцита.

6. Развитие в организме асцитной гепатомы Зайдете (биологи-кий фактор) сопровождается прогрессирующим падением концентрации зглобина V эритроцитов в крови, сочетающимся с возрастанием сования воды в эритроците, уменьшением его плотности н показателя томления, увеличением размеров клеток.

7. Через 3-4 дня после электростимуляции ь нарушения кислород-о режима' организма (гипоксии и гиг.ероксии) в популяции эрктро-ов -периферической кропи развивается комплекс количественных и остренных изменений, свидетельствующий о стимуляции эритропоэ-

6. Однократное экзогенное физическое, химическое и био'логи-кое воздействие даже умеренной интенсивности вызывает суцест-ные и длительно нексмпенсируемые сдвиги в популяции эритроци-периферической крови, что способно исказить результаты гэма-огических исследований после физиотерапевтических процедур или арсгвекной терапии.

9. Изменения физико-химических свойств эритроцитов перифери-кой крови, изученные с использованием метода спектра мутности, ут служить чувствительным индикатором воздействия на организм ючеаьих, химических и биологических экзогенных факторов.

СПИСОК РАБОТ,, 'ОПУШККОЬШЩХ ПО ТЕкЕ ДИССЕРТАЦИИ:

I , Изменение физико-химических свойстп эритроцитов при некоторых опухолевых заболеваниях. //Патсл.физиология и эксперим. терапия. I9ü3.4s 6.-С.3-5. Соавторы: В.А.Воронцов, А.Б.Хайруллина, Л.В.Ст повик, Р.Б.Ткачепко, Б.Д.Рябов.

2. К методике повышения объективности изучения физико-химических свойств эритроцитов периферической крови человека. /Д.еханизмы физиологических функций: Тез.док/r. к I съезда- физиочогов Уральск го региона.-Уфа, I98G.-C.140-142. СояЕторы: А.Б.Хайруллина, Л.В. Степовик, Г.В.Ткаченко.

3. ¿изико-химическкб свойства эрит-рогитов пвргферической крови при некоторых экзогенных воздействиях на организм. /Деханиэмы физиологических функций: Тез. докл. к I съезду физиологов Уральского региона.-Уфа,I9Sb,-C,I53u-I58. Соавторы: В.А.Воронцов, P.A. Ортман, А.Л.%ков.

4. К механизму регуляции рсабсорбции в канальцевом аппарате поч< //Тез.докл. к 6 Всесоюзной конференции по физиологии почек и во; но-солевого обмена.-Харьков,1989.-С.170-171. Соавторы: B.A.Bopoi тов. А.Б.Хайруллина, Л.В,Степовик.

о„ Изменение ЭШ и физико-химических свойств эритроцитов при ос рой нормобарической гкпоксической гипоксии. //Электрофорез клет Тез.докл. научно-практ. Региональной конференции.-Уфа,I9d9.-С,в Соавторы: В.Л.Воронцов, И.Я.Кясников, А.Б.Хайруллина» Л.В.Степо

6. Влияние острой гипоксии и гипероксш на физико-химические ев ства эритроцитов крови. //Компенсаторно-приспособительные реакц организма при гипоксии: Сб. науч. трудов.-Куйбыпев»I9QS.-С.60-6 Соавторы: И.Л.Мясников, А.Б.Хайруллина, Л.В.Степовик.

7. Характеристика физико-химических свойств циркулирующих эритр цитов в постгипоксическвй период. //Физиологический журнал.-I9S Т.Зб.-Р I.-С.100-103. Соавторы: В.А.Воронцов, А.Б.Хайруллина, Л,¿.Степовик.

U, Действие олектроетимуляции на физико-химические свойства эр! роцитов животных. //Ветеринария.-1990.-РЗ.-С.56-58. Соавторы: Б.А.Еоронцов, А.Б.Хайруллина, Л.В.Степовик, А.Юуков. 0. »'изико-химичэские свойства эритроцитов крыс с асиитной гега" мой Зайделл. //Эксперимента1ьная онкология. Деп. в БШИГИ 20.Ct У 4703 - E9Ü. Соавторы: Б.А.Воронцов, А.Б.Хайруллина, Л.В.Crem А.П.Зпобин.

Влияние острой алкогольной интоксикации на морфофункциональные 1ства эритроцитов периферической крови. //Биологические науки, ), 8(320) .-С. 19-25. Соавторы: В.А.Воронцов, А.Б.Хайруллина, Степовик.

Получено положительное решение по заявке № 3316592 на изоб-)ние "Способ дифференциальной диагностики язвенной болезни и I желудка" от 16,07.81. Соавторы: А.Б.Хайруллина, В.А.Воронцов, Степовик, Г.Б.Ткаченко.

Р'и4ионализаторское предложение "Рационализация способа расче-1араметров физико-химических свойств эритроцитов по данным спек-мутности". Соавторы: А.Б.Хайруллина, В.А.Воронцов, Н.И.Колосо-1). В. Нефедов.

Рационализаторское предложение "Дополнительный диагностический агностический тест для оценки состояния животных при лечении >леваний, осложненных гипоксией". Соавторы: В.А.Воронцов, А.Б.Хай-[ина, Л.В.Степовик, А.П.Жуков.