Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Влияние иммуномодулятора "Миксоферон" на качество спермы и резистентность хряков-производителей
ВАК РФ 06.02.06, Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

Автореферат диссертации по теме "Влияние иммуномодулятора "Миксоферон" на качество спермы и резистентность хряков-производителей"

На правах ру^писи

0050474ЭЭ

г-

Носова Анастасия Александровна

Влияние иммуномодулятора «Миксоферон» на качество спермы и резистентность хряков-производителей.

06.02.06 - ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата ветеринарных наук

2 О ДЕК 2012

Москва-2012

005047495

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ).

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Петров Алексей Михайлович

доктор ветеринарных наук, профессор Федотов Сергей Васильевич

Официальные оппоненты: Гнездилова Лариса Александровна - доктор ветеринарных наук, ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина, профессор кафедры диагностики болезней и терапии животных

Равилов Михаил Николаевич - кандидат

биологических наук, ФГБУ

«Всероссийский государственный Центр

качества и стандартизации лекарственных

средств для животных и кормов», ведущий

научный сотрудник отдела качества и стандартизации

фармакологии лекарственных средств для животных.

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова».

Защита состоится <4$ января 2013 г. в «¿/» часов на заседании диссертационного совета Д. 220.042.05 при ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23, тел. 8 (495) 377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»

Автореферат разослан у^ 2012 г. и размещен на сайте

1Шр:/Аулулу. vak.ed.gov.ru V

Ученый секретарь диссертационного совета

Волчкова Л.А.

Общая характеристика работы

Актуальность темы.

В мировом производстве и потреблении мяса всех видов свинина занимает ведущее место, причем производство неуклонно увеличивается. В программе Союза российских производителей свинины намечено довести производство свинины к 2015 году до 3,2 млн. тонн. В 2009 г в России производство свинины составило 2169 тыс. тонн, что на одного человека в год составило 15,3 кг, тогда как в Дании на одного человека произведено 186,4 кг, в Канаде - 56 кг, в Белоруссии - 45 кг, в Германии - 64,4 кг (А.Т. Мысик, 2012).

Для получения большого количества качественной продукции в свиноводстве необходимо постоянно заниматься интенсификацией воспроизводства стада.

Главная задача воспроизводства - получение максимального количества высококачественных поросят от каждой свиноматки в год, а также интенсивное выращивание приплода и ремонтного молодняка. Её успешное решение зависит от правильной организации воспроизводства, уровня интенсивности использования маток и хряков, условий кормления и содержания животных и ряда других факторов (А.Г. Нарижный, 2008; Г.С. Походня, 2008 и др.).

Объемы и технология воспроизводства определяются типом свиноводческого хозяйства и его направлением.

В племенных хозяйствах, занимающихся производством чистопородного высококлассного племенного молодняка, стадо характеризуется наличием в нем основных и проверяемых маток, хряков-производителей, ремонтного молодняка, племенного молодняка для продажи, поросят-сосунов и отьемышей.

з

В товарных хозяйствах с полным (завершенным) производственным циклом, задачей которых является производство свинины, большую долю в стаде занимает откормочное поголовье, предназначенное для убоя. Имеются различия в составе родительского стада по породному признаку.

В крупных специализированных свиноводческих предприятиях, широко применяющих искусственное осеменение, имеются существенные различия в соотношении маток и хряков, а также животных других половозрастных групп в зависимости от уровня продуктивности маточного поголовья и задач по выращиванию поросят и откорму свиней.

Несмотря на то, что показатели иммунитета и репродуктивные функции у свиней достаточно хорошо изучены (Л.М. Пивовар, 1985; A.M. Петров, 1985, 2007; В.В. Зайцев, 1998; С.М. Борунова, 2007; Н.В. Болдырева, 2009 и др.), тем не менее, до настоящего времени вопросы функционирования иммунной системы, её коррекция с использованием иммуномодулирующей терапии и её влияние на качество спермы хряков-производителей, её хранение при плюсовой температуре до конца не решены.

Это связано, прежде всего, с тем, что свиньи относятся к животным с маточным типом осеменения. Большой объём эякулята и содержание большого количества в сперме секретов придаточных половых желёз затрудняют её глубокое замораживание. В связи с этим необходим поиск эффективных методов её хранения в бытовых условиях при плюсовой температуре, что, несомненно, должно положительно повлиять на её качество, а поэтому и на оплодотворяемость животных и выход поросят в помётах свиноматок.

Цель и задачи исследований.

Целью наших исследований было изучение влияния иммуномодулятора «Миксоферон» на резистентность хряков-производителей и качество спермы при её хранении без глубокой заморозки при температуре 2-5° С.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить влияние иммуномодулятора "Миксоферон" на воспроизводительные способности хряков-производителей и оплодотворяемость свиноматок.

2. Определить влияние препарата "Миксоферон" на клеточные и гуморальные факторы иммунитета хряков-производителей.

3. Изучить содержание лизоцима в сыворотке крови, бактерицидную активность сыворотки крови хряков-производителей, фагоцитарную активность и фагоцитарный индекс нейтрофилов крови, как основных показателей естественной резистентности при введении иммуномодулятора.

4. Определить общее количество лейкоцитов в крови хряков-производителей с целью исключения воспалительного процесса у подопытных животных.

5. Изучить влияние иммуномодулятора «Миксоферон» на выживаемость спермиев в глюкозо - хелато - цитратно - сульфатной среде, активность спермиев, процентное содержание живых спермиев и их резистентность.

Научная новизна

Изучены показатели резистентности хряков-производителей при использовании иммуномодулятора «Миксоферон», а также активность, выживаемость, резистентность спермиев в синтетических средах при хранении без глубокой заморозки при температуре +2...+5° С. Применение миксоферона способствовало улучшению параметров резистентности и улучшению качества спермы при её хранении при температуре +2...+5° С в течение 4-5 суток.

Теоретическая и практическая значимость.

Впервые были изучены показатели резистентности и качество спермы хряков-производителей при использовании иммуномодулятора

5

«Миксоферон». Установлено, что введение данного иммуномодулятора способствовало улучшению показателей резистентности у хряков-производителей опытной группы, а также улучшению качества спермы, повышению оплодотворяемости свиноматок и получению большого количества поросят в помётах свиноматок.

Для разбавления спермы в условиях свиноводческих хозяйств целесообразно добавлять миксоферон в глюкозо - хелато - цитратно -сульфатную среду.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

- показатели резистентности у хряков-производителей при введении в их организм иммуномодулятора «Миксоферон»;

- выживаемость, резистентность, процент живых и мёртвых спермиев в

глюкозо - хелато - цитратно - сульфатной среде при температуре +2...+5°С при добавлении препарата «Миксоферона»;

повышение качества спермы хряков-производителей, оплодотворяемости свиноматок и улучшения качества их приплода при использовании иммуномодулятора «Миксоферон»

Апробация работы.

Основные результаты диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина (2009-2010); в материалах Всероссийского семинара «Опыт создания и работы сервисных центров по производству сельскохозяйственных животных в рамках реализации Государственной программы развития сельского хозяйства» 2224 сентября 2009г.; во Всероссийском научно-исследовательском институте

б

животноводства РАСХН в п. Дубровицы; в материалах Международной научно-практической конференции на тему: «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения» (выпуск 16) РАМЖ 16-17 июня 2010 г. (п. Быково, Московской обл.); в материалах Международной научно-практической конференции «Современные проблемы ветеринарной медицины и зоотехнии», посвященной 250-летию ветеринарного образования 4-5 ноября 2011 г.; в Витебской государственной академии ветеринарной медицины; в материалах Международной научно-практической конференции «Проблемы биологии продуктивных животных» 22 декабря 2011 г.; во Всероссийском научно-исследовательском институте животноводства РАСХН в п. Дубровицы Московской области.

Публикации.

По результатам собственных исследований с 2009-2011 гг. опубликовано 8 статей, в том числе 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения выводов, практических предложений, приложения и списка литературы. Работа иллюстрирована 11 рисунками и 15 таблицами.

2. Собственные исследования.

2.1. Материалы и методы исследований.

Диссертационная работа была выполнена в 2009-2012 годах на кафедре акушерства, гинекологии и биотехники репродукции животных Московской

7

государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И.Скрябина) и в лабораториях федерального государственного учреждения «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»), так же в СПК «Гора» Орехо -Зуевского района Московской области.

Объектом исследования служили хряки-производители средней живой массой 230 кг и свиноматки крупной белой породы в возрасте 2-х лет. Животных подбирали по принципу аналогов. Искусственное осеменение свиней проводили спермой от подопытных хряков-производителей (30 голов). Сперму, разбавляли средой ГХЦС по ГОСТ 17637-72 в соотношении 1:3.

Предметом исследования явились сперма хряков - производителей, а также кровь и сыворотка крови хряков-производителей, иммуномодулятор "Миксоферон".

Испытывали препарат Миксоферон® (Mixoferon®) - лекарственное средство для сельскохозяйственных животных, представляющее собой смесь белков интерферона альфа 2Ь. Во время производственных испытаний использовали технологическое оборудование для искусственного осеменения свиней фирмы Hein (ФРГ).

В работе проводили исследования активности лизоцима в сыворотке крови в модификации О.Н. Грызловой, П.А. Емельяненко, В.Н. Денисенко, 1980; определение фагоцитарной активности нейтрофилов крови (метод В.М. Бермена, Е.М. Славской, 1958); определение лейкоцитов, лимфоцитов в крови в описании Е.С. Воронина, A.M. Петрова, М.М. Серых и др. (2002); определение Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) в описании Е.С. Воронина, A.M. Петрова, М.М. Серых, Д.А.Девришова (2002); определение B-лимфоцитов методом розеткообразования с эритроцитами барана в системе ЕАС в описании Е.С. Воронина, A.M. Петрова, М.М. Серых, Д.А.Девришова (2002); определение

8

активности спермиев (И.И. Соколовская, 1960); определение резистентности спермиев (В.К. Милованов, А.И. Короткова, 1951); определение абсолютной выживаемости спермиев (В.К. Милованов, 1932); определение бактерицидной активности сыворотки крови (по Мишелю и Трефферс, 1956, в модификации И.Ф. Храбустовского и Ю.М. Маркова и др., 1974.); определение микробной контаминации спермы по ГОСТ 20909.2-75 и методическим указаниям по ветеринарно-санитарному контролю качества спермы производителей (1999).

Экономическую эффективность применения препарата «Миксоферон» определяли согласно «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (М., 2002).

Экспериментальные данные обрабатывали по Ашмарину И.П. и Воробьёву A.A. (1962), а также методами корреляционного, вариационного и факторного статистического анализа с использованием компьютерной программы «Statistica 6,0».

3. Результаты исследований.

Для реализации цели исследований изучали резистентность хряков-производителей, а также влияние иммуномодулятора «Миксоферон» на выживаемость спермиев в глюкозо - хелато - цитратно - сульфатной среде, активность, процентное содержание живых спермиев, их резистентность, влияние на оплодотворяемость и качество приплода у свиноматок.

3.1. Динамика показателей естественной резистентности хряков- производителей при введении иммуномодулятора «Мнксоферон».

Хрякам-производителям подкожно вводили по 5 мл иммуномодулятора "Миксоферон" в течение 7 дней (4-106 МЕ). При изучении влияния иммуномодулятора на лизоцимную и бактерицидную активности сыворотки

крови, а также на количество лейкоцитов в крови хряков-производителей получили следующие результаты (таблицы 1,2, 3).

Таблица 1. Динамика общего количества лейкоцитов в крови у хряков-производителей \\'ВС - *109/л

Группы животных

Сроки контрольная опытная Р

исследования п=30 п=30

До введения 11,12*10^0,02*10'* 11,16*10Ч±0,13*ЮУ р>0,05

препарата

1ссутки 11,18*109±0,11*10у 11,10*109±0,09*10у р>0,05

10е сутки 11,03 *109±0,06*10* 11,05*10"±0,03*109 р>0,05

2Г сутки 11.09* 109±0,14* 10У 11,13*109±0,07*10ч р>0,05

Анализ таблицы 1 позволяет отметить, что общее количество лейкоцитов в крови хряков-производителей опытной и контрольной групп на всех этапах исследования существенных различий не имело. Так на 10е сутки количество лейкоцитов в крови хряков опытной группы составило 11,05* 109±0,03* 109/л против 11,03*109±0,06*109/л в контрольной. Это свидетельствует о том, что иммуномодулятор «Миксоферон» не влияет на общее количество лейкоцитов в крови животных.

Из данных таблицы 2 видно, что концентрация лизоцима в сыворотке крови у хряков-производителей контрольной группы на всех этапах исследования не изменялась. Вместе с тем, у хряков-производителей опытной группы данный показатель был достоверно выше, чем у животных контрольной группы. Это является следствием влияния на данный показатель иммуномодулятора «Миксоферон». Наиболее высокое содержание лизоцима в сыворотке крови хряков-производителей опытной группы наблюдалось на 10е сутки исследований.

ю

Таблица 2. Содержание лизоцима в сыворотке крови хряков-производителей (мкг/мл)

Сроки исследования Группы животных

контрольная п=30 опытная п=30 Р

До введения препарата 55,1±1,26 54,3±1,29 р>0.05

1е сутки 57,4± 1,14 56,8±1,36 р>0,05

10е сутки 59,9± 1,02 78,9±1,17 р<0.01

21е сутки 67,2±0,80 82,0±0,28 р< 0,01

Таблица 3. Динамика бактерицидной активности сыворотки крови хряков-производителей (%)

Сроки исследования Группы животных

контрольная п=30 опытная п=30 Р

До введения препарата 65,4±2,1 66,41±],98 р>0,05

Г сутки 64,0± 1,3 67,4±1,9 р>0,05

10е сутки 65,2±2,0 82,9±1,7 р<0,05

21е сутки 64,1±1,2 80,9±2,8 р< 0,01

Результаты исследований, представленные в таблице 3, показывают, что до введения иммуномодулятора «Миксоферон» у животных как опытной, так и контрольной групп показатели бактерицидной активности были одинаковыми. На 10-е и 21-е сутки исследований уровень значений бактерицидной активности сыворотки крови у животных опытной группы был выше (р<0,05), чем у животных контрольной группы. На 10е сутки данный показатель у животных, получавших препарат, составил 82,9±1,7%.

Как показывают результаты исследований применение иммуномодулятора «Миксоферон» способствует повышению значений бактерицидной активности сыворотки крови у животных опытной группы особенно на 10-е сутки исследований.

3.2. Влияние препарата «Миксоферон» на клеточные и гуморальные факторы иммунитета хряков-производителей.

Нами была проанализирована динамика изменений показателей клеточного и гуморального иммунитета хряков-производителей после введения иммуномодулятора «Миксоферон».

Из данных таблицы 4 видно, что содержание иммуноглобулинов класса в и М в сыворотке крови хряков-производителей опытной группы не имеет существенных различий с данным показателем у животных контрольной группы.

Тогда как на 10-й день уровень ^О в сыворотке крови хряков-производителей опытной группы, которым применяли «Миксоферон», превышает уровень в сыворотке крови животных контрольной группы на 6,94 мг/мл.

На 2 Г сутки после применения иммуномодулятора уровень в сыворотке крови хряков-производителей в опытной группе незначительно понизился и составил 22,1±0,15 мг/мл.

Таблица 4. Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови хряков-производителей при введении препарата «Миксоферон (мг/мл)

Группы животных Дни после введения препарата Показатель

ДО ^м

контрольная (п=30) 1 15,60±1,67 2,00±0,25

10 17,86±1,58 2,50±0,10

21 18,86±2,0 2,50±0,21

опытная (П=30) 1 15,76±2,12 2,08±0,15

10 24,8± 1,01* 3,53±0,1*

21 22,1±0,15* 3,5±0,11*

*р<0,1

Результаты наших исследований отражают тот факт, что применение иммуномодулятора «Миксоферон» повышает концентрацию и ^М в крови хряков-производителей на 10-й день после его использования.

По результатам таблицы 5 видно, что количество Т- и В- лимфоцитов в 1-й день применения не имеет отличительных границ между обеими группами животных. На 10-й день количество Т-лимфоцитов в крови у хряков-производителей опытной группы, которым применяли иммуномодулятор «Миксоферон», превышает их количество у хряков-производителей контрольной группы на 15%.

На 21-й день после применения иммуномодулятора происходит незначительное снижение количества Т-лимфоцитов в крови по сравнению с 10-м днём после введения данного препарата хрякам-производителям, но в

опытной группе этот показатель был выше, чем в контрольной на 6,4%.

13

Таблица 5. Относительное содержание Т- и В- лимфоцитов в крови хряков-производителей при введении препарата «Миксоферон»(%>

Группы Дни после Показатель

животных введения Т-лимфоциты В-лимфоциты

препарата

контрольная 1 26,8±2,5 12,5±0,2

(п=30) 10 24,2±0,61 12,57±0,2

21 30,1±3,0 12,47±0,1

опытная 1 27,3±1,2 13,9±1,4

(п=30) 10 39,2±1,1** 20,3±1,12**

21 36,5±2,0** 18,9±1,6**

**р<0,05

Относительное содержание В-лимфоцитов в крови у хряков-производителей, после применения препарата «Миксоферон» на 10-й день был выше, чем у хряков контрольной группы на 7,73%.

Как видно из данных таблицы 6, показатели фагоцитарной активности, фагоцитарного индекса нейтрофилов (по отношению к непатогенной кишечной палочке) в первый день после применения иммуномодулятора у хряков-производителей контрольной и опытных групп не имеют существенных различий.

Однако уже на 10-й день после введения препарата мы видим, что фагоцитарная активность нейтрофилов в крови у хряков-производителей опытной группы, которым применяли «Миксоферон», превышает аналогичный показатель у животных контрольной группы на 15,4%.

14

Таблица 6. Динамика фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса нентрофилов крови хряков-производителей при введении нммуномодулятора «Миксоферон»

Группы животных Дни после введения препарата Показатель

Фагоцитарная активность, % Фагоцитарный индекс

контрольная (п=30) 1 45,66±1,35 4,23±0,66

10 47.8+3.0 4,03±0.12

21 46,15±1,80 4.03±0.54

опытная (п=30) 1 47,83±1,15 4,13±0,54

10 63,2±3,6** 5.13±0.03**

21 59,1+0.33** 5.16+0.14**

**р<0,01

На 21-й день после применения нммуномодулятора фагоцитарная активность нейтрофилов в крови у хряков-производителей опытной группы превышает этот показатель у животных контрольной группы на 12.95%.

Рис. I. НеПтрофилы, фагоцитирующие кишечную палочку в крови хряков-производнтелей, стадия поглощения.

Показатель фагоцитарного индекса на 21-й день у хряков-производителей опытной группы превышает аналогичный показатель у хряков-производителей контрольной группы на 1,13.

Анализируя динамику факторов клеточного и гуморального иммунитета хряков-производителей, отмечаем положительное влияние препарата «Миксоферон» на организм самцов.

3.3. Влияние препарата «Миксоферон» на воспроизводительные способности хряков-производителей.

Для определения влияния иммуномодулятора на качество спермы вводили «Миксоферон», по предложенной нами схеме, подкожно в дозе 5 мл в течение 7 дней хрякам-производителям опытной группы.

Таблица 7. Сравнительная оценка влияния иммуномодулятора «Миксоферон» на качество спермы, полученной от хряков-производителей на 10'сутки исследований

Ы/п Показатели спермы Группа животных

контрольная (п=30) опытная (п=30) Р

1 Объём эякулята, мл 343,6±6,8 642,9±7,2 р>0,05

2 Концентрация спермиев, млн/мл 182,2±2,6 210,0±3,4 р>0,05

3 Общее количество спермиев в эякуляте, млрд. 62,6±0,8 122,6±1,1 р>0,05

4 Активность спермиев, балл 6,9±1,4 8,1±0,9 р<0,05

5 Количество спермодоз в эякуляте 6 7 р>0,05

6 Процент живых спермиев, % 92,9±0,8 99,0±0,1 р<0,05

7 Резистентность спермиев, тыс. 2500,3±0,7 2920±0,6 р<0,05

8 Выживаемость спермиев в разбавленной сперме, часы 800,6± 1,4 926,4±1,7 р<0,05

Как можно видеть из таблицы 7 объём эякулята, концентрация спермиев, общее количество спермиев в эякуляте у животных опытной группы в 2 раза превышает соответствующие показатели у животных контрольной группы, а концентрация спермиев, активность, процент живых спермиев, резистентность не имеет достоверных различий с данными показателями у животных контрольной группы. В то же время, такие показатели как количество спермодоз в эякуляте, выживаемость спермиев в разбавленной сперме у животных опытной группы доминируют над показателями в сравнении с животными контрольной группы.

Данные о действии иммуномодулятора "Миксоферон" как отдельного автономного компонента синтетической среды представлены в таблице 8.

Таблица 8. Активность спермиев хряков-производителей в зависимости от состава синтетической среды при температуре +2 +5 С°.

Ы/п Наименование среды Активность спермиев в баллах при хранении, сут.

1 2 3 4 5

1 Глюкозо - хелато - цитратно -сульфатная среда 6,9 6,2 5,0 1,1 0

2 Глюкозо - хелато - цитратно -сульфатная среда с добавлением иммуномодулятора 8,1 7,7 7,1 5,6 1,3

Из таблицы 8 можно видеть, что у животных контрольной группы, сперму которых разбавляли глюкозо - хелато - цитратно - сульфатной средой активность спермиев при температуре +2 +5 С° составляла 3е суток, тогда как у хряков-производителей опытной группы, сперму которых разбавляли глюкозо - хелато - цитратно - сульфатную среду с добавлением препарата

17

«Миксоферон» активность спермы сохранялась на достаточно высоком уровне 4 суток.

Таблица 9. Результаты осеменения свиноматок спермой, разбавленной глюкозо - хелато - нитратно - сульфатной средой с добавлением «Миксоферона»

Группа животных Кол-во свиноматок Среда Срок хранения спермы, сут. Оплодотво-ряемость свиноматок, % Получено поросят на одну свиноматку, гол.

1 Контрольная 10 Глюкозо -хелато цитратно сульфатная 3 70 9

2 Опытная 10 Глюкозо -хелато -цитратно сульфатная с добавлением миксоферона 4 80 11

Результаты исследований, представленных в таблице 9, показывают, что введение хрякам-производителям иммуномодулятора и разбавление глюкозо - хелато - цитратно - сульфатной средой с добавлением препарата способствовало увеличению срока хранения спермы при температуре +2 +5°С в течение 4х суток. При этом, оплодотворяющая способность спермиев сохранялась на достаточно высоком уровне (80%), что способствовало получению 11 поросят в помётах свиноматок опытной группы на один опорос, тогда как данные показатели составили у животных контрольной группы соответственно - 70% и 9 голов.

Анализ данных таблицы 10 показывает, что на свинокомплексе

«Гора» при применении препарата «Миксоферон» в количестве 40 доз на

18

одно применение ГХЦС среды опоросилось 90% осемененных свиноматок, а без применения иммуномодулирующего препарата - всего 77,1 %, при этом получено поросят на одну матку - соответственно 11 и 9.

Таблица 10. Результаты осеменения свиноматок спермой хряков-производителей, разбавленной глюкозо - хелато - цитратно -сульфатной средой с добавлением «Миксоферона».

Наименование препарата Доза препарата в среде на Осеменено свиноматок Опоросилось свиноматок Получено поросят

одно применение всего Повторно пришедших в охоту число % всего На одну матку

Число %

Свинокомплекс «Гора»

Миксоферон 40 600 120 20 540 90 5670 10,5

Контроль — 140 32 22,9 108 77,1 1026 9,5

При применении спермы хряков, разбавленной глюкозо - хелато -цитратно - сульфатной средой с добавлением "Миксоферона" увеличивается эффективность осеменения свиноматок на 12,9%.

Таким образом, проведенные исследования выявили более высокую эффективность испытуемого препарата «Миксоферон» на оплодотворение свиноматок и применение его в качестве иммуномодулирующего препарата позволяет получать от хряков-производителей сперму высоко биологического качества.

Выводы:

1. Введение иммуномодулятора «Миксоферон» в глкжозо - хелато -цитратно - сульфатную среду способствовало увеличению срока хранения спермы при температуре +2 +5 С° в течение 4х суток. При этом оплодотворяющая способность спермиев сохранялась на достаточно высоком уровне (80%), что способствовало получению 11 поросят в помётах свиноматок опытной группы на один опорос.

2. Установлено, что введение подкожно иммуномодулятора "Миксоферон" в дозе 5 мл в течение 7 дней хрякам-производителям опытной группы способствовало повышению содержания лизоцима в сыворотке крови и составило на 10е сутки исследований 78,9 мкг/мл, что на 19.0 мкг/мл больше чем в контроле. На 10е сутки отмечена активизация бактерицидной активности сыворотки крови, повышение фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса нейтрофилов крови у животных опытной группы в сравнении с контрольной группой на 17,7%; 15,4% и 1,1 соответственно.

3. При исследовании установлено повышение концентрации Т-лимфоцитов в крови на 15%, В-лимфоцитов на 7,73% на 10 день исследования, а также на 10е сутки зафиксировано заметное повышение уровня 1§ в в сыворотке крови на 6,94 мг/мл и уровня ^ М на 1,03 мг/мл, которым вводили иммуномодулятор "Миксоферон", что свидетельствует о положительном эффекте данного препарата на клеточные и гуморальные факторы иммунитета.

4. Общее количество клеток белой крови (лейкоцитов) как у животных контрольной, так и опытной групп не изменялось на всём протяжении исследования, что свидетельствует об отсутствии воспалительного процесса в организме хряков.

5. В связи с проведёнными нами научными исследованиями было установлено, что концентрация спермиев, общее количество спермиев в эякуляте у животных опытной группы в 2 раза превышает соответствующие показатели у животных контрольной группы, а концентрация спермиев,

20

активность, процент живых спермиев, резистентность не имеет достоверных различий с данными показателями у животных контрольной группы. В то же время, такие показатели как количество спермодоз в эякуляте, выживаемость спермиев в разбавленной сперме у животных опытной группы доминируют над показателями в сравнении с животными контрольной группы.

Практическое использование полученных научных результатов

• Для улучшения качества спермы, повышению оплодотворяемости свиноматок и получения большего количества поросят в помётах рекомендуется применять иммуномодулятор «Миксоферон» в дозе 5 мл п/к в течение 7 дней.

• Для разбавления спермы хряков-производителей на станциях искусственного осеменения целесообразно использовать глюкозо -хелато - цитратно - сульфатной среду с добавлением иммуномодулятора «Миксоферон» из расчета 40 доз на литр среды.

• Результаты исследований, изложенные в диссертационном материале, позволяет их применять для чтения лекций и проведения лабораторно-практических занятий в институтах повышения квалификации АПК по специальностям: «Ветеринарии» и «Зоотехния».

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

Колобаева, A.A. «Влияние иммуномодулятора Миксоферон на качество спермы хряков-производителей» // A.A. Колобаева / «Зоотехния». №1. 2012.-С. 30-31.

Колобаева, A.A. «Влияние иммуномодулятора миксоферон на иммунную систему хряков-производителей». // A.A. Колобаева / «Ветеринария» №1.2012.

Колобаева, A.A. «Проблемы биологии продуктивных животных» // Петров A.M., Петров М.А., Ванюкова О.И., Колобаева A.A., Деринов A.A. / Научно-теоритический журнал (спецвыпуск) «Клеточные факторы иммунитета при бесплодии у коров». - Боровск, ВНИИФБиП. №4. 2011. - С. 100-103.

Колобаева, A.A. «Основные этиологические факторы иммунного бесплодия коров» // Петров A.M., Петров М.А., Ванюкова О.И., Колобаева A.A./ Научно-практический журнал «Ученые записки» учреждения образования «витебская ордена «знак почета» государственная академия ветеринарной медицины» Том 47. выпуск 2. часть 2. (июль-декабрь) 2011.- С. 94-97.

Колобаева, A.A. «Влияние органических кислот на выживаемость и оплодотворяющую способность спермиев животных при плюсовой температуре» // Петров A.M., Ванюкова О.И., Колобаева А.АУ Научно-практический журнал «Ученые записки» учреждения образования «витебская ордена «знак почета» государственная академия ветеринарной медицины» Том 47. выпуск 2. часть 2. (июль-декабрь) 2011г. - С.97-99.

Колобаева, A.A. «Качество спермы хряков-производителей при использовании иммуномодулирующей терапии» // A.A. Колобаева / Сборник научных трудов молодых ученых «Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии». - Москва, выпуск 7. 2011. - С. 194-198.

Колобаева, A.A. «Возможность коррекции иммунной системы хряков-производителей иммуномодулятором «Миксоферон» // A.A. Колобаева / Сборник научных трудов молодых ученых «Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии». - Москва, выпуск 7. 2011. - С.198-203.

• Колобаева, A.A. «Влияние осмотического давления и pH на качество спермы баранов-производителей» // A.A. Колобаева / Материалы международной научно-практической конференции «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения». Московская обл., пос. Быково. ГЦВ. Выпуск 16. 2010. - С.144-147.

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Носова, Анастасия Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Спермиогенез.

1.2. Искусственное осеменение в свиноводстве.

1.3. Влияние внешних факторов на спермии вне организма животных.

1.4. Оценка качества спермы хряков-производителей.

1.5. Технологические особенности подготовки спермы хряков-производителей.

1.6. Использования иммуномодуляторов для повышения резистентности животных и улучшения качества их спермы.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Динамика показателей естественной резистентности хряков-производителей при введении «Миксоферона».

3.2. Влияние «Миксоферона» на клеточные и гуморальные факторы иммунитета хряков-производителей.

3.3. Определение уровня инфицирования спермы хряков-производителей различными микроорганизмами.

3.4. Влияние иммуномодулятора «Миксоферон» на качество спермы, полученной от хряков-производителей.

3.5. Показатели выживаемости спермиев в зависимости от состава синтетической среды.

3.6. Оплодотворяемость свиноматок спермой хряков, разбавленной различными средами.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Влияние иммуномодулятора "Миксоферон" на качество спермы и резистентность хряков-производителей"

Актуальность темы.

В мировом производстве и потреблении мяса всех видов свинина занимает ведущее место, причем производство неуклонно увеличивается. В программе Союза российских производителей свинины намечено довести производство свинины к 2015 году до 3,2 млн. тонн. В 2009г. в России производство свинины составило 2169 тыс. тонн, что на одного человека в год составило 15,3 кг, тогда как в Дании на одного человека произведено 186,4 кг, в Канаде - 56 кг, в Белоруссии - 45 кг, в Германии - 64,4 кг (А.Т. Мысик, 2012).

Для получения большого количества качественной продукции в свиноводстве необходимо постоянно заниматься интенсификацией воспроизводства стада.

Главная задача воспроизводства - получение максимального количества высококачественных поросят от каждой свиноматки в год, а также интенсивное выращивание приплода и ремонтного молодняка. Её успешное решение зависит от правильной организации воспроизводства, уровня интенсивности использования маток и хряков, условий кормления и содержания животных и ряда других факторов (А.Г. Нарижный, 2008; Г.С. Походня, 2008 и др.).

Объемы и технология воспроизводства определяются типом свиноводческого хозяйства и его направлением.

В племенных хозяйствах, занимающихся производством чистопородного высококлассного племенного молодняка, стадо характеризуется наличием в нем основных и проверяемых маток, хряков-производителей, ремонтного молодняка, племенного молодняка для продажи, поросят-сосунов и отъемышей.

В товарных хозяйствах с полным (завершенным) производственным циклом, задачей которых является производство свинины, большую долю в стаде занимает откормочное поголовье, предназначенное для убоя. Имеются различия в составе родительского стада по породному признаку.

В крупных специализированных свиноводческих предприятиях, широко применяющих искусственное осеменение, имеются существенные различия в соотношении маток и хряков, а также животных других половозрастных групп в зависимости от уровня продуктивности маточного поголовья и задач по выращиванию поросят и откорму свиней.

Несмотря на то, что показатели иммунитета и репродуктивные функции у свиней достаточно хорошо изучены (J1.M. Пивовар, 1985; A.M. Петров, 1985, 2007; В.В. Зайцев, 1998; С.М. Борунова, 2007; Н.В. Болдырева, 2009 и др.), тем не менее, до настоящего времени вопросы функционирования иммунной системы, её коррекция с использованием иммуномодулирующей терапии и её влияние на качество спермы хряков-производителей, её хранение при плюсовой температуре до конца не решены.

Это связано, прежде всего, с тем, что свиньи относятся к животным с маточным типом осеменения. Большой объём эякулята и содержание большого количества в сперме секретов придаточных половых желёз затрудняют её глубокое замораживание. В связи с этим необходим поиск эффективных методов её хранения в бытовых условиях при плюсовой температуре, что, несомненно, должно положительно повлиять на её качество, а поэтому и на оплодотворяемость животных и выход поросят в помётах свиноматок.

Цель и задачи исследований.

Целью наших исследований было изучение влияния иммуномодулятора «Миксоферон» на резистентность хряков-производителей и качество спермы при её хранении без глубокой заморозки при температуре 2-5° С.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить влияние иммуномодулятора "Миксоферон" на воспроизводительные способности хряков-производителей и оплодотворяемость свиноматок.

2. Определить влияние препарата "Миксоферон" на клеточные и гуморальные факторы иммунитета хряков-производителей.

3. Изучить содержание лизоцима в сыворотке крови, бактерицидную активность сыворотки крови хряков-производителей, фагоцитарную активность и фагоцитарный индекс нейтрофилов крови, как основных показателей естественной резистентности при введении иммуномодулятора.

4. Определить общее количество лейкоцитов в крови хряков-производителей с целью исключения воспалительного процесса у подопытных животных.

5. Изучить влияние иммуномодулятора «Миксоферон» на выживаемость спермиев в глюкозо - хелато - цитратно - сульфатной среде, активность спермиев, процентное содержание живых спермиев и их резистентность.

Научная новизна.

Изучены показатели резистентности хряков-производителей при использовании иммуномодулятора «Миксоферон», а также активность, выживаемость, резистентность спермиев в синтетических средах при хранении без глубокой заморозки при температуре +2.+5° С. Применение вышеуказанного иммуномодулятора способствовало улучшению параметров резистентности и улучшению качества спермы при её хранении при температуре +2. .+5° С в течение 4-5 суток.

Теоретическая и практическая значимость.

Впервые были изучены показатели резистентности и качество спермы хряков-производителей при использовании иммуномодулятора «Миксоферон». Установлено, что введение данного иммуномодулятора способствовало улучшению показателей резистентности у хряков-производителей опытной группы, а также улучшению качества спермы, повышению оплодотворяемости свиноматок и получению большого количества поросят в помётах свиноматок.

Для разбавления спермы в условиях свиноводческих хозяйств целесообразно добавлять «Миксоферон» в глюкозо - хелато - цитратно -сульфатную среду.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

- показатели резистентности у хряков-производителей при введении в их организм иммуномодулятора «Миксоферон»;

- выживаемость спермиев, резистентность, процент живых и мёртвых спермиев в глюкозо - хелато - цитратно - сульфатной среде при температуре +2. .+5°С при добавлении «Миксоферона»;

- возможность повышения качества спермы хряков-производителей, оплодотворяемости свиноматок и улучшения качества их приплода при использовании иммуномодулятора «Миксоферон»

Апробация работы.

Основные результаты диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина (2009-2011); в материалах Всероссийского семинара «Опыт создания и работы сервисных центров по производству сельскохозяйственных животных в рамках реализации Государственной программы развития сельского хозяйства» 22-24 сентября 2009г.; во Всероссийском научно-исследовательском институте животноводства РАСХН в п. Дубровицы; в материалах Международной научно-практической конференции на тему: «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения» (выпуск 16) РАМЖ 16-17 июня 2010 г. (п. Быково, Московской обл.); в материалах Международной научно-практической конференции

Современные проблемы ветеринарной медицины и зоотехнии», посвященной 250-летию ветеринарного образования 4-5 ноября 2011г.; в Витебской государственной академии ветеринарной медицины; в материалах Международной научно-практической конференции «Проблемы биологии продуктивных животных» 22 декабря 2011г.; во Всероссийском научно-исследовательском институте животноводства РАСХН в п. Дубровицы Московской области.

Публикации.

По результатам собственных исследований с 2009-2011 гг. опубликовано 8 статей, в том числе 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения выводов, практических предложений, приложения и списка литературы. Работа иллюстрирована 11 рисунками и 15 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных", Носова, Анастасия Александровна

5. ВЫВОДЫ

1. Введение иммуномодулятора «Миксоферон» в глюкозо - хелато -цитратно - сульфатную среду способствовало увеличению срока хранения спермы при температуре +2 +5 С° в течение 4х суток. При этом оплодотворяющая способность спермиев сохранялась на достаточно высоком уровне (80%), что способствовало получению 11 поросят в помётах свиноматок опытной группы на один опорос.

2. Установлено, что введение подкожно иммуномодулятора "Миксоферон" в дозе 5 мл в течение 7 дней хрякам-производителям опытной группы способствовало повышению содержания лизоцима в сыворотке крови и составило на 10е сутки исследований 78,9 мкг/мл, что на 19,0 мкг/мл больше чем в контроле. На 10е сутки отмечена активизация бактерицидной активности сыворотки крбви, повышение фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса нейтрофилов крови у животных опытной группы в сравнении с контрольной группой на 17,7%; 15,4% и 1,1 соответственно.

3. При исследовании установлено повышение концентрации Т-лимфоцитов в крови на 15%, В-лимфоцитов на 7,73% на 10 день исследования, а также на 10е сутки зафиксировано заметное повышение уровня ^ С в сыворотке крови на 6,94 мг/мл и уровня ^ М на 1,03 мг/мл, которым вводили иммуномодулятор "Миксоферон", что свидетельствует о положительном эффекте данного препарата на клеточные и гуморальные факторы иммунитета.

4. Общее количество клеток белой крови (лейкоцитов) как у животных контрольной, так и опытной групп не изменялось на всём протяжении исследования, что свидетельствует об отсутствии воспалительного процесса в организме хряков.

5. В связи с проведёнными нами научными исследованиями было установлено, что концентрация спермиев, общее количество спермиев в эякуляте у животных опытной группы в 2 раза превышает соответствующие показатели у животных контрольной группы, а концентрация спермиев, активность, процент живых спермиев, резистентность не имеет достоверных различий с данными показателями у животных контрольной группы. В то же время, такие показатели как количество спермодоз в эякуляте, выживаемость спермиев в разбавленной сперме у животных опытной группы доминируют над показателями в сравнении с животными контрольной группы.

6. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ И РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИХ ПРИМЕНЕНИЮ

1. Для улучшения качества спермы, повышения оплодотворяемости свиноматок и получению большего количества поросят в помётах рекомендуется применять иммуномодулятор «Миксоферон» в дозе 5 мл п/к в течение 7 дней.

2. Для разбавления спермы хряков-производителей на станциях искусственного осеменения целесообразно использовать глюкозо -хелато - цитратно - сульфатную среду с добавлением «миксоферона» из расчета 40 ед. активности на литр среды.

3. Результаты исследований, изложенные в диссертационном материале рекомендуем применять для чтения лекций и проведения лабораторно практических занятий в институтах повышения квалификации АПК по специальностям: «Ветеринарии» и «Зоотехния».

116

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Носова, Анастасия Александровна, Москва

1. Акатов, В.Д. Роль искусственного осеменения в заражении коров трихомонозом. /В.Д. Акатов//. Труды киргизского с.-х. института.-1954.-вып.8.-С.235-239.

2. Алтухов. Н.М. Краткий справочник ветеринарного врача. /Н.М. Алтухов, В.И. Афанасьев, Б.А. Башкиров// Москва.-Агропромиздат.-1990.-С.574.

3. Балашов, Н.Г. Ветеринарно-санитарные требования к сперме при искусственном осеменении животных. /Н.Г. Балашов, А.К. Бутаков, В.Н. Родина// МСХ СССР.-1977.-С.6.

4. Балашов, Н.Г. Ветеринарно-санитарные требования к сперме при искусственном осеменении животных. /Н.Г. Балашов, А.К. Бутаков, В.Н. Родина, Н.Ф. Чуклов. М.-Колос.-1977. - 224 с.

5. Балашов, Н.Г. Ветеринарный контроль при искусственном осеменении. /Н.Г. Балашов//. Животноводство.-1978.-№1. С. 42-44.

6. Балашов, Н.Г. Ветеринарный контроль при искусственном осеменении. /Н.Г. Балашов. М.-Колос.-1980. - 432 с.

7. Балашов, Н.Г. Выживаемость лептоспир при различных температурах хранения в экспериментально зараженной разбавленной сперме и разбавителях. /Н.Г. Балашов, В.Н. Родина//Тр. ГНКИ.-1967.- т. 14.-С.371-377.

8. Балашов, Н.Г. Выживаемость лептоспир при различных температурах хранения в экспериментально зараженной разбавленной сперме и разбавителях. /Н.Г. Балашов, В.Н. Родина// Тр. ГНКИ.- 1967.-t.14, С.371-377.

9. Величко, И.М. спермы производи Автореферат. ~ Хар20.Величко, Ю.Л. СовIпроизводителен пр^ кандидатской диссе21.Войтов, Б.В. Энд!Iпроизводителей. /Е 68-70.

10. Войтов, Б.В. Энд /Б.В. Войтов// Тр. К

11. Волосков, П.А. I бесплодия животметодической коне)1.Iосеменению и пате1. С.43. '

12. Воронин, Е.С. Им. Д.А. Девришов.

13. Гавриков, A.M. | Гавриков, A.A. И. №10.-С.84-85. 1

14. Голубева, Е.Д. К спермы. /Е.Д. Го, академии. Минск

15. Голубева. Е.Д. i спермы. /Е.Д. Гол) академии».-Минск28.Гончаров, В.П. Oci

16. Балашов, Н.Г. Эффективность действия пенициллина, стрептомицина и стрептоцида, применяемых в средах для разбавления спермы животных. /Н.Г. Балашов, М.Е. Евсюков, В.Н. Родина//. Тр. ВГНКИ.- 1980.-№16.-С.365-368.

17. И.Балашов, Н.Г. Эффективность действия пенициллина, стрептомицина и стрептоцида, применяемых в средах для разбавления спермы животных. /Н.Г. Балашов, М.Е. Евсюков, В.Н. Родина// Тр. ВГНКИ.- 1980.-№16.-С,365-368.

18. Борунова, С.М. Полимиксин-М, применяемый для санации спермы /С.М. Борунова // Матер. XV Московского международного ветеринарного конгресса. М.: ЗАО «Издательский Дом». - 2007. - С. 155.

19. Бриан, JI.E. Бактериальная резистентность и чувствительность к химиопрепаратам. /JI.E. Бриан//Москва.-1984.

20. Бриан, JI.E. Бактериальная резистентность и чувствительность к химиопрепаратам. /JI.E. Бриан. М., 1984. - 234 с.

21. Гончаров, В.П. Основные показатели и оценка качества спермы производителей. /В.П. Гончаров, З.И. Гришина, Д.А. Черепахин// Методические указания. ФГБОУ ВПО МГАВМиБ им.К.И. Скрябина,-2005.- 19 с.

22. Гончаров, В.П. Основы техники и способы получения спермы от производителей животных. /В.П. Гончаров, A.M. Петров, З.И. Гришина, Д.А. Черепахин. М.- ФГБОУ ВПО МГАВМиБ.-2005.-С.25.

23. Гончаров, В.П. Профилактика и лечение гинекологических заболеваний коров. /В.П. Гончаров, В.А. Карпов. М.- Росагропромиздат.-1991.-С.190.

24. Горшков, Г.И. Повышение эффективности искусственного осеменения свиноматок. /Г.И. Горшков, П.И. Бреславец, Е.Г. Яковлева, Е.Г. Поморова// БГСХА.- Белгород. 342 с.

25. ГОСТ 24168-80 «Сперма жеребцов замороженная». 48 с.

26. Железнев, A.B. Микрофлора семени быков производителей. /A.B. Железнев// Вестник сельско хозяйственных науки. Алма-Ата.-1966.-№8.-С.44-47.

27. Зб.Зайцев, В.В. Действие экзо и эндогенных факторов на воспроизводительную функцию хряков. /В.В. Зайцев// Автореферат диссертации доктора биологических наук. Дубровицы.-1998.-С.36.

28. Захарова, М.Н. Гигиена производителей при искусственном осеменении. /М.Н. Захарова// Научные труды Ставропольского сельско хозяйственного института.-195О.-вып. 5.-С.217.

29. Зверева, Г.В. Микробиологическая загрязненность спермы быков при разных методах хранения. /Г.В. Зверева// Молочное и мясное скотоводство.-1966.- №7.-С.56-61.

30. Зверева, Г.В. Тезисы докладов XXI Всемирного ветеринарного конгресса. /Г.В. Зверева// Москва.-1979. Т. 3.- С. 134-136.

31. Квасницкий, A.B. Новое в практике искусственного осеменения свиней. /A.B. Квасницкий, Л.А.Конюхова// Научные труды Полтавского НИИ свиноводства.- 1960.-t.21. С. 121-124.

32. Козло, Н.Е. Учебная книга техника по искусственному осеменению животных. /Н.Е. Козло, А.Н. Варнавский, Р.И. Тихая// М.-Агропромиздат.-1987.- 256 с.

33. Козлов, Г.Г. Осмотическое давление спермы быков и сред, применяемых для ее разбавления. /Г.Г. Козлов// Диссертация кандидата ветеринарных наук.-М.-1971.- 249 с.

34. Корбан, А.И. Методические рекомендации по низкотемпературной консервации спермы хряков. /А.И. Корбан. Л,-1980. - 34 с.

35. Колобаева, A.A. «Влияние иммуномодулятора Миксоферон на качество спермы хряков-производителей» // A.A. Колобаева / «Зоотехния». №1. 2012.

36. Колобаева, A.A. «Влияние иммуномодулятора миксоферон на иммунную систему хряков-производителей». // A.A. Колобаева / «Ветеринария» №1. 2012.

37. Колобаева, A.A. «Качество спермы хряков-производителей при использовании иммуномодулирующей терапии» //A.A. Колобаева /Сборник научных трудов молодых ученых «Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии». Москва, выпуск 7. 2011.

38. Короан, А.И. Методические рекомендаций по низкотемпературной консервация спермы хряков. /А.И. Короан// Л.-1980.

39. Косарев, С.Р. Изучение действия бактерицидных веществ на спермиев и разработка способа санации спермы хряков. /С.Р. Косарев// Автореферат кандидатской диссертации.-1988. 23 с.

40. Косарев, С.Р. Изучение действия бактерицидных веществ на спермиев и разработка способа санации спермы хряков. / С.Р. Косарев// Автореферат кандидатской диссертации.-1988. 23 с.

41. Кремлев, Е.П. Условнопатогенная микрофлора, как причина абортов у коров. /Е.П. Кремлев// Зооветеринарные мероприятия при воспроизводстве сельско хозяйственных животных в условиях интенсивного животноводства. Тезисы докладов. Львов.-1981.-С. 110.

42. Кувшинова, З.Я. Бактериальная флора спермы быков и хряков-производителей. /З.Я. Кувшинова// Воспроизводство.-1979. с. 68-69.

43. Кувшинова, З.Я. Бактериальная флора спермы быков и хряков-производителей и ее деконтамииация. /З.Я. Кувшинова/// М. автореферат кандидатской диссертации. 1980. - 25 с.

44. Курбатов, А.Д. Криоконсервация спермы птиц. /А.Д. Курбатов. Д.-1988. - 148 с.

45. Левин, К.Л. Физиология и патология воспроизводства свиней. /К.Л. Левин// Москва.- Росагропромиздат.-1990.- 225 с.

46. Левин, К.Л. Эффективность стимулирования нейрогуморальной регуляции воспроизводительной функции хряков. /К.Л. Левин// Диссертация кандидата ветеринарных наук. Москва.-1966.- 160 с.

47. Логвинов Д.Д. О чувствительности микрофлоры к антибиотикам. /Д-Д. Логвинов// Вестник сельскохозяйственных наук.-1976.-№ И.-С.72.

48. Логвинов, Д.Д. Влияние условнопатогенной микрофлоры на половой аппарат у свиноматок. /Д.Д. Логвинов// Вестник сельскохозяйственных наук.-1976.-№ 11.-С.70.

49. Логвинов, Д.Д. О чувствительности микрофлоры к антибиотикам. /Д.Д. Логвинов// Молочное и мясное скотоводство.-1968.-№2.-С.26-27.

50. Лопырин, А.И., Логвинова H.B. Влияние пенициллина и глицерина на переживаемость и оплодотворяющую способность спермы барана. /А.И. Лопырин, Н.В. Логвинова// Бюллетень НТИ.- 1955.вып.З.-№2. С. 344.

51. Лучко, М.А. Инфекционные аборты крупного рогатого скота. /М.А. Лучко.- М.-1972. -212 с.

52. Майер, П.К. Значение качества спермы хряков в профилактике бесплодия и малоплодия свиней. /П.К. Майер// Автореферат кандидатской диссертации.- Москва.-1973. 24 с.

53. Маринов, П.И. Исследование сапрофитной микрофлоры семени быков. /П.И. Маринов// Экспресс-информ. с-х иностр. Литературы. -М.- № 2112. -С. 65.

54. Методические рекомендации по технологии взятия, глубокого замораживания и использования спермы баранов-производителей при искусственном осеменении овец. ВНИИ племенного дела, М.,-1980, -44 с.

55. Методические рекомендации по технологии взятия, глубокого замораживания и использования спермы баранов-производителей при искусственном осеменении овец. ВНИИ племенного дела. М.-1980. 38 с.

56. Милованов В.К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. /В.К. Милованов, И.К. Соколовская// Москва,-1962. 324 с.

57. Милованов В.К. Причины эмбриональной смертности и новые возможности воспроизводства стад. /В.К. Милованов, И.И. Соколовская// Животноводство.-1964.-№6.-С.75-83.

58. Мирзахметов, Ш.Р. Эффективность различных методов лечения эндометрита коров в Таджикистане. /Ш.Р. Мирзахметов// Автореферат диссертации доктора ветеринарных наук. Москва. 2006.-С.40.

59. Михайлов, H.H. Роль условнопатогенной микрофлоры в этиологии нарушения репродуктивной функции у животных. /Н.Н.Михайлов, В,А.

60. Зудилин// Материалы конференции по профилактике бесплодия сельскохозяйственных животных.- Новочеркасск.- 1974.-С.77-80.

61. Михайлов, H.H. Условнопатогенная микрофлора и воспроизводительная функция самок. /H.H. Михайлов// Ветеринария.-1980.- №12.-С.74.

62. Мороз, А.Ф. Синегнойная инфекция. /А.Ф.Мороз. Медицина.-1988. - 324 с.

63. Нарижный А.Г. Повышение продуктивности хряков. /А.Г.Нарижный, В.И.Водянников, Е.Г. Поморова, В.М. Бреславцев// крестьянское дело. -Белгород.- 2001. С.208.

64. Нарижный А.Г. Стимуляция воспроизводительных функций у свинок при их выращивании. /А.Г. Нарижный, Е.Г. Поморова// Проблемы животноводства: Сб. науч. тр. —Белгород.- 2002. С.25-28.

65. Никитин, В.Я. Практикум по акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных /В.Я.Никитин, М.Г. Миролюбов, В.П. Гончаров// Москва.-КолосС.-2003.- 208 с.

66. Пантюхова, О.И. Влияние микроорганизмов и бактериостатических веществ на переживаемость и оплодотворяющую способность спермиев./ О.И. Пантюхова. М. «Колос» -1966. - 231 с.

67. Петрянкин, Ф.П. Условнопатогенные бактерии и их роль в нарушении репродуктивной функции животных. /Ф.П. Петрянкин// Кандидатская диссертация. 1977. - 156 с.

68. Плишко, Н.Т. Противомикробные и стабилизирующие свойства ЭДТА. /Н.Т. Плишко//Свиноводство. 1975.- №1.-С.26-27.

69. Плишко, Н.Т. Способ продления жизни и оплодотворяющие способности половых клеток хряка. /Н.Т. Плишко// Свиноводство. 1965.- № 6.-С.37-41.

70. Полянцев, Н.И. Обеззараживание спермы /Н.И. Полянцев, А.Р. Буланкин // Свиноводство. 1971. - №10.-С.22-25.

71. Поморова, Е.Г. Влияние качества криоконсервированной спермы на оплодотворяемость свиноматок / Е.Г. Поморова, В.И. Савинов, Г.С. Асканьян, А.Г.Нарижный// Проблемы животноводства. 2002. С. 1-22.

72. Поморова, Е.Г. Влияние числа подвижных спермиев в дозе на оплодотворяемость и многоплодие свиноматок при однократном их осеменении /Е.Г. Поморова// Проблемы животноводства. 2002. С. 29-30.

73. Поморова, Е.Г. Зависимость оплодотворяемости, многоплодия и крупноплодности свиноматок от доз свеже взятой и криоконсервированной спермы и кратности осеменения. / Е.Г. Поморова// Автореферат диссертации канд. биол. наук. 2003. -22 с.

74. Поморова, Е.Г. Кратность осеменения свиноматок / Е.Г. Поморова, Е.Г. Яковлева// Научно прикладные аспекты состояния и перспективы развития животноводства и ветеринарной медицины: Материалы международной научно -практической конференции. - 2001.- С.50.

75. Поморова, Е.Г. Оптимизация дозирования спермы хряков //Е.Г. Поморова// Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: Материалы 6-й международной научной производственной конференции. - 2002. - С. 181.

76. Поморова, Е.Г. Осеменение свиноматок дозой спермы с различным числом спермиев /Е.Г. Поморова // Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: Материалы 3-й международной конференции, 1999. - С. 117-118.

77. Порфирьев, И.А. Акушерство и биотехника репродукции животных. /И.А.

78. Порфирьев, A.M. Петров// Учебное пособие. Санкт Петербург.-Лань.-2009.- 352 с.

79. Родин, И.Н. Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. /И.Н. Родин, Л.Н. Смирнов, H.A. Флегматов// Москва.- Колос.-1973. 231 с.

80. Родина, Ю.А. Лечение коров, больных эндометритом с учетом чувствительности микрофлоры к антибиотикам. /Ю.А. Родина, В.У. Давыдов// Материалы 51-й научной конференции молодых ученых и студентов С.Петербург.-1997.-С.33-34.

81. Семиволос, A.M. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных. /A.M. Семиволос, B.C. Авдеенко, A.M. Петров// Учебно-методическое пособие ФГБОУ ВПО Саратовский ГАУ.-2009.-С.92.

82. Сердюк, С.И. Микрофлора спермы и воспроизводительная функция маток. /С.И. Сердюк// Свиноводство. 2005.- № 54.-С.31-33.

83. Середин, В.А. Разработка синтетических сред для разбавления и хранения спермы быка при плюсовых температурах с учетом их влияния на обменные процессы в спермиях./В.А, Середин// Диссертация кандидата ветеринарных наук. Москва.-1972.- 180 с.

84. Смирнов, И.В. О мерах по улучшению санитарного состояния, пунктов искусственного осеменения с/х животных. /И.В. Смирнов// Киев.-Урожай.-1964.-С.89-93.

85. Советкин, C.B. Санитарные и биологические показатели замороженной спермы хряков-производителей. /C.B. Советкин, В.И. Родина, В.Т. Смирнов, М.Е. Евсюков // Тр. ВНИИ свиноводства.-1998. -С. 121-122.

86. Советкин, C.B. Объективность применения комплексных антимикробных препаратов для санации спермы быков. / C.B. Советкин,

87. B.И. Родина, В.Т. Смирнов, М.Е. Евсюков // Тр. ВНИИ свиноводства.-1998.- С. 123-124.

88. Советкин, C.B. Санация спермы хряков полигеном и гампом. /

89. C.B. Советкин, В.И. Родина, В.Т. Смирнов, М.Е. Евсюков, Д.Р. Нарижный,

90. B.Ф. Мишин// Зоотехния.-2000.-№4. С. 45-46.

91. Страгунский, Л.В. Новые возможности антибиотиков и новые проблемы. /Л.В. Страгунский// Медицинский курьер.-1998.-№10.1. C. 136-137.

92. Студенцов, А.П. Ветеринарное акушерство и гинекология. /А.П. Студенцов, B.C. Шипьелов, Л.Г.Субботина, О.Н. Преображенский. М.-Агропромиздат.-1986.- 480 с.

93. Студенцов, А.П. Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника размножения/А.П. Студенцов, В.С.Шипилов, В.Я. Никитин, М.Г. Миролюбов. М.-Колос.-2005.- 495 с.

94. Тарабрин, В.В. Взаимосвязь репродуктивных функций хрячков с морфофизиологическими показателями крови, параметрами микроклимата и сезонами года. /В.В. Тарабрин// Автореферат диссертации кандидата биологических наук. Самара.-2006.-18 с.

95. ФАО Всемирная организация по сельскому хозяйству. Доклады Европейской комиссии.-1958. 564 с.

96. Федоренкова, Н.И. О бактерицидной загрязненности и переживаемости спермы барана. /Н.И. Федоренкова, Н.С. Дарицин// Овцеводство.-1971.-№10.- С.37.

97. Филатов, A.B. Научные основы и практические методы применения озона и биологически активных веществ для повышения воспроизводительной способности свиноматок и хряков-производителей.

98. A.B. Филатов// Автореферат диссертации доктора ветеринарных наук. -Саратов.-2005.- 38 с.

99. Харенко, Н.И. Микробная контаминация спермы хряков-производителей и меры ее профилактики в условиях промышленных: автореф. канд. дис. /Н.И. Харенко. Ставрополь, 1977. -23 с.

100. Шергин, Н.П. Биохимия сперматозоидов сельскохозяйственных животных. /Н.П. Шергин. М.-1967. - 321 с.

101. Шипилов, B.C. Практикум по акушерству, гинекологии и искусственному осеменению с.-х. животных /В.С.Шипилов, Г.В. Зверева, И.И. Родин, В.Я. Никитин. М.-Агропромиздат.-1988.- 335 с.

102. Шипилов, B.C. Физиологические основы профилактики бесплодия коров. /B.C. Шипилов. М.-Колос.-1977.- 336 с.

103. Щербаченко, Д.Ю. Применение препаратов «Ровабио™ ЕКСЕНС» И «ДАФС-25» для коррекции репродуктивной функции у свиноматок: автореф. канд. дис. /Д.Ю. Щербаченко. — Саратов,- 2006.- 20 с.

104. Яблонский, В.А. Микробное загрязнение спермы и его влияние на обмен веществ сперматозоидов быков-производителей. /В. А. Яблонский// Вестник сельско хозяйственной науки. - 1963. - №12. - С. 99-101.

105. Яковлев, Т.Е. Влияние антибиотиков на некоторые физиологические свойства спермы быков и хряков : автореф. канд. дис. / Т.Е. Яковлев. М. 1969. - 23 с.

106. Baier W. Deutseh Jicrarztliche Woohunschnilt. /W. Baier, R. Walser//.-1971.-№4.-P. 78.

107. Bangham A.D. New method for counting live and death bull spermatozoa. / A.D. Bangham., E. A. Hancock // Nature. 1955.-№ 4483.-P.176.

108. Bonadonna J. Necesitle metodi techici per riduzze le cause di iuguinamento del materiale spermativo. /J. Bonadonna// Zootechne veteran.-1969,-24.-№ 1-2.-up.8-13.

109. Bonadonna T. Sur I'identification des spermatozoids vivants et morts de Bos taurus par la bromo-phenol et nigrosine. / T. Bonadonna// Ree. Med. Vet.-1954.-P.130.

110. Burfening P. Effect of ram stimulation on estrous activity and bambing fate in two shrrp sreeds in the sierra of Peru. / P. Burfening., M. Carpió., R. Alencastre // Small Ruminar. Res 1989. V. 2. - N I. - P.27-33.

111. Cahill L. P. Total fofficular population in ewes' high and low ovulation rates /L.P. Cahill., I.C. Mariana., P. Mauleon. // Reprod. Fertill. 1979. V. 55. -N 1.-P.27-36.

112. Caldora C. Infection dell apparato reproduftivo degli ovini capnini, aspetti eziologici ed anatomopatalogici. /C. Caldora., Z. Dorigo., E. Scanziani., Fr. Turri., E.Torretta., L. Gioia.//' Clin. Vet. 1985. V. 108. - N 6. -P.403-110.

113. Daney G.M., Effects of pre mating environmental stress. ACTH, cortian acetate or metyrapone on oestrus and ovulation in sheep. /G.M. Daney// J.

114. Agrie. Sei. Camb. 1976.-V. 87.- N 1.- R 127-132.

115. Foot R.H. Motility of spermatozoa and control of bacteria in bovine semenextenders containing sulfanilamide, penicillin, streptomycin and polimyxin. /R.H. Foot. R.W. Bratton// J. Dairi Sci.-1975.-P.33.

116. Foot R.H. Motility of spermatozoa and control of bacteria in bovin semen extenders containing sulfanilamide, penicillin, streptomycin and polimyxin. /R.H. Foot, R.W. Bratton // J. Dairi Sci.-1975.- P.33.

117. Freemartimsm in sheep. A. Ohistological analysis of the reproductive system /T. Dabrowski., P. Sysa., L. Kazimierz., K.Lerzy.// Anam. Sci. Pap. and Repts. 2000. V.18. - N 1. - P. 43-63.

118. Hoppe K.F. The effect of exposure to teaser rams on lamsing performane of hampshire and Columbia ewes. / K.F. Hoppe., A.Z. Slyter // Proceeding and research reports. 1987. 13-14. Sheep day Brookings S. Dak.-1987. P.150-155.

119. Hunter R. Sperm transport, storage and release in the sheep oviduct in relation to the time of ovulation / R. Hunter// Brit. Veter. J. 1982. V. 138. - N 3. -P. 225-232.

120. Kelley R. Reproductive performance of comercial sheep flocks in South Island districts. I. Flock performance and sources of mastage netween joining and tailing /R. Kelley//N.Z.I agr. Res. 1982. - V. 25. - N 2. - P.175-183.

121. Kremer Gan. The sperm cervical mucus contact test: A preliminary report Fertility and Sterility. /G. Kremer., 1. Siemen.//1976. - V. 27. - N 3. - P. 335-340.

122. Levasseur M.C., Thibauh C. Recentes acguisitions sur le transport desspermatosoidrs dans les voies genitales feminines. Contracept fertile -sex. / M.C, Levasseur., C. Thibauh//1975.- V.3.-N1.-R 23-28.

123. Momani Shaker M. The effect of ewes agr on reproduction characteristics and growth intersity of lambs, the Charollais Sreed. /M. Momani Shaker M., L. Staic L., // Zivoc. vyroda 1994. V. 39. - N 12. - P. 1021 -1028.

124. Perek M. Bacterial flora of semen and contamination of the reproductive organs of the hen following artificial insemination Res. /M. Perek. M.Elian, E.D. Heller//Veterin. Sci.-l969. № 10. -P. 1331-1332.

125. Poulton, A.I. The response of rams and ewes of trree breeds to artificial photoperiod / A.I. Poulton, T. Y. Robinson // J. Reprod Fertil, 1987. V. 79. -N 2. -P. 609-626.

126. Rokwot B.l.The role of pheromones and biostimulation in animal reproduction / B.l. Rokwot, P.I. Ogwu, D. Ovedipe, E.O.,Sckoni // Anim. Reprod. Sci. -2001.-V. 65 .-N 3-4.-P. 157-170.

127. Rusetskaya O. Effect of Antioxidants Dinophenum and or Amoxium on the Boar Semen Cryoresistance. /O. Rusetskaya, A. Kuripko, E. Pomorova// Reproduction in Domestic Animals. 2002. - Vol. 37. - №4. - P. 243.

128. Salisbury G.N. Physiology of Reproduction and Artificial insemination of c cattle. /G.N. Salisbury., N.I. Van Demark// University of Illinois San

129. Francisco and London. -1961. № 34. - P.675-676.

130. Smith O.H. Beesistonce factor-mediated spectinomycin nesistance. / O.H.

131. Smith IIYnfect Immunob.-1970.-P.120-127.

132. Wolster Radcliffe M.C. Artifical vagina vs a vaginal collection val for collecting semen from rams / M.C. Wolster - Radcliffe., M.A. Williams., I.N. Stellflug., G.S.Lewis.//1. Anim. Sci. - 2001. - V. 79. - N 12. - P.2964-2967.