Влияние фитоиммуномодуляторов на устойчивость к биотическим факторам и продуктивность гороха и пшеницы

Бородин, Дмитрий Борисович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние фитоиммуномодуляторов на устойчивость к биотическим факторам и продуктивность гороха и пшеницы
ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "Влияние фитоиммуномодуляторов на устойчивость к биотическим факторам и продуктивность гороха и пшеницы"

На правах рукописи

Бородин Дмитрий Борисович

ВЛИЯНИЕ ФИТОИММУНОМОДУЛЯТОРОВ НА УСТОЙЧИВОСТЬ к БИОТИЧЕСКИМ ФАКТОРАМ И ПРОДУКТИВНОСТЬ ГОРОХА И

ПШЕНИЦЫ

□03473818

03.00.12. - физиология и биохимия растений

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

1 8 ИЛОЯ 2009

Орел-2009

003473818

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Орловский государственный аграрный Университет» и ГНУ ВНИИЗБК.

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Павловская Нинэль Ефимовна

Официальные оппоненты:

доктор сельскохозяйственных наук Новикова Надежда Евгеньевна

кандидат биологических наук Голышкипа Любовь Владимировна

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Орловский государственный Университет»

Защита состоится

2009

года

Л*

✓о

часов на заседании

диссертационного совета ДМ 220.052.01. в Орловском государственном аграрном университете по адресу: 302019, г. Орел, ул. Генерала Родина, 69.

С диссертацией можно ознакомиться в читальном зале библиотеки Орел ГАУ (г.Орел, Бульвар Победы, 19)

Автореферат разослан «¿с/^2009г. и опубликован в сети Интернет на сайте университета И О р: //\у\у\у/о ге 1 б аи. ги

Просим принять участие в работе совета или прислать отзыв в двух экземплярах, заверенных печатью, по адресу: 302019 г. Орел, ул. Генерала Родина, 69, Орел ГАУ, ученому секретарю диссертационного совета ДМ 220.052.01 Л.П. Степановой

Ученый секретарь диссертационного совета доктор сельскохозяйственных наук, профессор 0/х^/^ Л.П.Степанова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время сельскохозяйственные растения постоянно находятся в условиях экологического стресса, поскольку страдают от болезней и вредителей (в годы эпифитотий потери урожая достигают 80%). В таком состоянии растения иммунодефицитны. Никакие пестициды не могут заменить иммунную систему, а в ряде случаев способны её подавить. Таким образом, химическое и инфекционное давление на растения часто превышает порог их возможной адаптации. Неудивительно, что иммунная система, которая защищает растения от болезней и стрессов, в настоящий момент сама нуждается в защите. Поэтому сейчас особенно важна разработка различных средств фитоиммунокоррекции, с тем, чтобы эффективно контролировать иммунный статус растения для преодоления его дефицитности (Озерецковская,1999).

Одним из наиболее многообещающих способов защиты растений является индуцирование их устойчивости. Этот способ основан не на прямом подавлении патогенов, а на усилении естественного потенциала растительной ткани по тому образцу, как это происходит в природе. Это приобретает большую актуальность, особенно при возделывании неустойчивых и среднеустойчивых сортов, усиление устойчивости у которых к вредителям и болезням имеет решающее значение с экономической и экологической точек зрения (Ковалёв, Янина, 1999).

Изучение механизмов формирования защитных и ростостимулирующих свойств у гороха и пшеницы под действием новых фитоиммуномодуляторов позволит пролить свет на механизмы возникновения устойчивости, а также дать научное обоснование практического использовании новых средств защиты растений.

Цель и задачи исследования. Цель - изучить физиолого-биохимические аспекты применения новых фитоиммуномодуляторов и их влияние на урожайность и устойчивость к биотическим факторам гороха и пшеницы.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

• Выделить биологически активные вещества из биогумуса, грибов и растений;

• Изучить биологическую активность фитоиммуномодуляторов на тест-системах (антиоксидантных ферментах).

• Изучить влияние фитоиммуномодуляторов на развитие болезней, распространенность вредителей на горохе.

• Исследовать действие фитоиммуномодуляторов на продукционный процесс посевов гороха и пшеницы.

• Разработать рекомендации по применению фитоиммуномодуляторов на горохе и пшенице;

• Дать экономическое обоснование использования фитоиммуномодуляторов.

Положения, выдвигаемые на защиту.

1. Природные компоненты клеток: лектины семян пшеницы и сои, биофлавоноиды гречихи, липиды мицелия гриба АзсоскуШ активное вещество биогумуса обладают иммуномодулирующими свойствами и могут служить основой для создания новых средств защиты растений.

2. Ферменты антиоксидантной системы клеток: супероксидцисмутаза и пероксидаза являются диагностическим тестом на выявление биологической активности и подбор эффективных концентраций препаратов.

3. Созданные нами препараты на основе лектинов, биофлавоноидов, липидов и биогумуса усиливают пероксидазозависимый иммунитет и повышают продуктивность гороха и пшеницы.

Научная новизна. Впервые были получены фитоиммуномодуляторы на основе лектинов пшеницы, лектинов сои, липогликопротеидного комплекса гриба рода Ascochyta Pisi, биофлавоноидов гречихи. Исследована антиоксидантная система гороха и пшеницы при обработке фитоиммуномодуляторами. Усовершенствована тест-диагностика иммунизирующих и стимулирующих свойств биологически активных веществ. Подана заявка на изобретение «Способ приготовления стимулятора роста растений» №.2009111734/12(016000).

Практическая значимость работы. Выделены биологически активные вещества из природных источников, обладающие иммунокоректирукнцим действием на растение, на их основе могут быть созданы новые эффективные экологически безопасные средства защиты растений. Установлена биологическая активность фитоиммуномодуляторов на антиоксидантной системе гороха и пшеницы. Представлены рекомендации по применению иммуномодуляторов на горохе и пшенице.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены: на региональной научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов «Вклад молодых ученых в реализацию приоритетных направлений развития АПК» (Орел, 2007), на региональной научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов «Актуальные направления развития сельскохозяйственной науки» (Орел, 2008), на региональной научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов «Роль молодых ученых и специалистов в повышении эффективности растениеводства» (Орел, 2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 163 листах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, предложений для производства, списка литературы, включающего 96 отечественных и 52 иностранных источников. Работа иллюстрирована 39 таблицами и 35 рисунками.

Материалы и методы исследований

Диссертационная работа выполнена в период с 2005-2008 гг.

Экспериментальная работа проводилась в Орловском региональном центре биотехнологии Орел ГАУ и лаборатории иммунитета и защиты растений зернобобовых культур ГНУ ВНИИЗБК в рамках программы РАСХН:

04.02.01.01. Разработать методы оценки запасных белков семян проса, сои, фасоли, пшеницы и диагностики устойчивости гороха к Fusarium oxyssporum f.sp на основе изучения антиоксидантной системы гороха на устойчивость к болезням и вредителям.

05.02.03.01. Изучить биологическую и хозяйственную эффективность фитоиммуномодуляторов против вредителей и болезней зернобобовых культур.

Объектом исследований служили сорта гороха с разной степенью устойчивости к болезням и вредителям: среднеустойчивый сорт гороха на зерно «Норд», среднеустойчивый сорт «Батрак» и устойчивый сорт «Фараон». При изучении действия биогумуса на рост и развитие пшеницы был взят сорт «Дарья».

В лабораторных и полевых опытах были исследованы:

• щелочная вытяжка из копролитов компостного червя «Старатель»;

• фитоиммуномодулятор на основе лектинов пшеницы;

• фитоиммуномодулятор, полученный из лектинов сои;

• фитоиммуномодулятор из липогликопротеидного комплекса гриба рода А.чсос1ту1а Пят,

• фитоиммуномодулятор на основе биофлавопоидов гречихи.

Щелочная вытяжка из биогумуса получена в результате жизнедеятельности

промышленной линии дождевых червей - Владимирский гибрид «Старатель». Условия выращивания: влажность 60-70%, температура 18-24°С, рН-6,5 - 7,5. Выращивали червей на конском компосте. (Мельник, Карпиц, 1988).

За основу метода выделения и очистки лектинов была принята методика, разработанная Алексидзе и др. (1983), Косенко (2002) на бобовых культурах в модификации Гагариной И.Н. (2005). Для получения чистой культуры гриба рода /\iicochyta №/, использовалась среда Чапека. Липиды из ЛГП-комплекса выделены по Фолчу. Фитоиммуномодулятор на основе биофлавоноидов гречихи был получен по оригинальной методике (Горькова И.В., 2002).

Определение активности каталазы проводили газометрическим методом по методике А.И. Ермакова (1987) с модификациями Л.Е. Иваченко (1997). Активность пероксидазы определяли по методу Бояркина (Плешков, 1985, Мокроносов, 1994). За единицу активности принимали величину оптической плотности, отнесенную на сухую массу, в условных единицах (у.е).

Наблюдения, учеты и анализы выполняли согласно «Инструкции по протравливанию семян сельскохозяйственных культур»(1986), «Методическим указаниям по государственному испытанию фунгицидов, антибиотиков и протравителей семян сельскохозяйственных культур»(1985), методики учета распространенности и интенсивности развития корневой гнили проводили по В.В. Котовой (1979), Т.М. Кирпичевой (1987), учет динамики численности насекомых по В.Ф.Палию (1979) стандартным энтомологическим сачком. Учет надземной и корневой фитомассы проводили по методике Г.С. Посыпанова (1991). Сухую массу растения устанавливали весовым методом после высушивания при температуре 105°С. Изучение структуры урожая у растений, отобранных в фазу полной спелости, проводили согласно методике Госсортсети (1981).

На горохе изучены фитоиммуномодуляторы на основе щелочной вытяжки из биогумуса, лектинов пшеницы, лектинов сои, ЛГП-комплекса гриба рода /\scochyta Рш, биофлавоноидов гречихи в концентрациях 10"3%-10"6%. На пшенице было изучено биологически активное вещество биогумуса и совместное применение вытяжки из биогумуса и химического протравителя «Винцит, СК».

Опытный материал выращивали в условиях полевого опыта на делянках площадью 10 м2 в 4-х кратной повторности при норме высева 1,2 млн. шт./га. Размещение делянок - рендомизированное. Уход за посевами выполняли в

соответствии с «Методическими рекомендациями по выращиванию гороха в Орловской области» (Орлов, 1985).

Обработку растений фитоимунномодуляторами проводили путем предпосевного замачивания семян и двукратного опрыскивания в период бутонизации и цветения.

Исследования проводились на поле с инфекционным фоном по методу «заражения чистой культурой патогенных грибов, растений, корней или почвы».

Исследование фотосинтетической продуктивности проводили по A.A. Ничипоровичу (1961), JI.A. Синякову, А.И. Иванову (1981). Полученные данные статистически обработаны по Б.А. Доспехову (1985) на персональном компьютере в программе Exel.

Преобладающий тип почв опытного участка - серые лесные, среднесуглинистые по механическому составу. По данным агрохимического анализа почва участка темно-серая лесная среднесуглинистая с содержанием гумуса 4,3-5,6%, азота - 0,21-0,26%, фосфора - 8,4-9,3 мг/100 г почвы, калия - 8,513,8 мг/100 г почвы, pH - 5,0-5,4.

Годы исследований по условиям вегетации растений существенно различались. Погодные условия в 2006 г. по увлажнению и температурному режиму в целом отвечали биологическим требованиям культуры гороха и пшеницы, хотя и не были оптимальными. В 2007г. отмечалась типичная засуха: в период со 2 декады мая по 2 декаду июня, когда происходил активный вегетативный рост растений, количество выпавших осадков было в 2 раза меньше среднемноголетнего значения. Аналогичная ситуация складывалась и в период генеративного развития растений. Погодные условия весенне-летнего периода 2008 г. были наиболее благоприятными для роста и развития растений гороха и пшеницы.

пероксидаза

каталаза

супероксиддисмутаза

Испытание биологической активности

Активное вещество биогумуса

Биофлавоноиды гречихи

Чистая

продуктивность фотосинтеза

Липогликопротеидный комплекс из гриба рода Ascochyta Pisi

Лектины пшеницы и сои

Фотосинтетический потенциал

[Учет поражаемости болезнями и вредителями] Рис. 1. Схема эксперимента.

Урожайность

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Выделение биологически активных компонентов:

1.Лектины пшеницы и сон: фитоиммуномодуляторы получены путем экстрагирования перемолотых семян пшеницы или сои хлористым натрием. Выход составил 4,1 мг сырого лектина из 100 г измельченных семян пшеницы. Выход из семян сои составил 5,2 мг сырого лектина.

2. Липогликопротеидный комплекс из гриба рода Ascochyta Pis'r.

иммуномодулятор получен путем экстракции липидов из мицелия гриба рода Ascochyta Pisi . Выход составил 205 мл липогликопротеидного комплекса, содержащего 0,026% липидов, из 180 г. мицелия гриба.

3. Биофлавононды гречихи: биофлавоноиды из гречихи были получены путем кипячения в течение 1 часа соломы гречихи, измельченной до размера 0,5-Змм. Выход составил 1,8 мг общего содержания биофлавоноидов из 70 г соломы гречихи.

4. Биологически активное вещество биогумуса: фитоиммуномодулятор из конского компоста готовится путем экстрагирования биогумуса NaOH, с дальнейшей фильтрацией. Выход активного вещества составил 3,25 мг с 1кг биогумуса. В состав активного вещества биогумуса входят гумнновые, фульвовые и гиметомелановые кислоты (Даниленко и др., 2005).

Выявление биологической активности фитоиммуномодуляторов на тест-системах.

Перед испытаниями в полевых условиях изучалась биологическая активность фитоиммуномодуляторов на тест-системах по активности антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазе, пероксидазе и каталазе) (Павловская и др. 2002). Измерение пероксидазной активности здоровых тканей гороха применяется как диагностический метод выявления комплексной устойчивости сортообразцов гороха к специфическим и неспецифическим грибам - патогенам. Динамика оксидазной активности -явление неспецифическое, но характерно отражает процессы, связанные с накоплением активных форм кислорода, процессами устойчивости растений к неблагоприятным факторам.

На основании проведенных исследований (рис.2) было установлено, что на третьи сутки активность пероксидазы при обработке среднеустойчивого сорта гороха «Норд» иммуномодулятором на основе лектинов пшеницы в концентрации 10"5% максимальна (167,2 у.е), в контроле активность фермента составляет 35,1 у.е.

Рис. 2. Влияние фитоиммуномодуляторов на активность пероксидазы в побегах (А) и корнях (Б) гороха сорта «Норд» (2006 г.). 1-Контроль (вода); 2-Контроль («Нарцисс»), 1 л/т; 3- Контроль («Винцит,СК»), 2 л/т; 4 - Биогумус, 1,5*10"3%; 5- Биогумус, 1,5*10'4%; 6-Лектины пшеницы, 10"5%; 7-ЛГПК 10~5% 8- Лектины пшеницы, 10"6%; 9- Л ГПК 10'6%.

К пятому дню происходит ее резкое увеличение при обработке лектинами пшеницы до 1562,1 у.е., в контроле активность осталась низкой (92!,6 у.е.). При обработке ЛГП-комплексом в концентрации и активность

пероксидазы увеличивается на 48,7% и 28,8% соответственно, по сравнению с контролем. Высокая активность пероксидазы под действием фитоиммуномодуляторов указывает на усиление пероксидазозависимого иммунитета клеток гороха. К седьмому дню исследований активность фермента максимально повышается в варианте с обработкой лектинами пшеницы в концентрации 10"5% и составляет 2324,2 у.е., что на 73,3% больше контроля. В контроле активность минимальна и составляет 1141,5 у.е. На десятые сутки активность пероксидазы в побегах гороха увеличивается во всех вариантах, кроме контрольного и с обработкой препаратами «Нарцисс» и «Винцит, СК», в них идет небольшое снижение активности пероксидазы (рис.2). Увеличение активности пероксидазы в побегах у обработанных фитоиммуномодуляторами вариантах на всем этапе прорастания объясняется тем, что иммуномодуляторы усиливают пероксидазозависимый иммунитет растения. Высокий уровень активности фермента служит диагностическим методом выявления комплексной устойчивости к специфическим и неспецифическим грибам-патогенам. Резкое увеличение активности пероксидазы к пятым суткам, указывает на ответную реакцию растения на грибную инфекцию.

У среднеустойчивого сорта «Норд» активность пероксидазы во всех вариантах на порядок больше, чем у устойчивого сорта «Фараон». Это объясняется тем, что в устойчивых сортах сильно развита конституционная устойчивость, которая без дополнительного усиления помогает растению защищаться от патогенов.

Исследования показали, что на третьи сутки наибольшее увеличение активности пероксидазы в корнях гороха «Норд» под действием

иммуномодуляторов происходит в варианте с лектинами пшеницы в концентрации 10°% (155у.е). В контроле активность фермента составляет 77 у.е. К седьмому дню также наблюдается закономерное увеличение пероксидазной активности, кроме варианта с обработкой препаратом «Винцит, СК». К десятым суткам во всех вариантах происходит увеличение активности пероксидазы. Максимальное увеличение происходит в варианте с обработкой лектинами пшеницы в концентрации 10~5% (95 у.е.), в контроле активность фермента составила 144 у.е. Обработка фитоиммуномодуляторами сохраняет уровень пероксидазы в побегах на достаточно высоком уровне, что позволяет растению защититься от болезней на этапе развития, когда иммунитет понижен.

Обработка неустойчивых и среднеустойчивых сортов гороха фитоиммуномодуляторами усиливает активность пероксидазы, в отличие от устойчивых сортов с высокой конституционной устойчивостью.

Установлено, что активность супероксиддисмутазы в побегах гороха сорта «Батрак», обработанного иммуномодуляторами, была наибольшей в вариантах с обработкой лектинами пшеницы и биофлавоноидами гречихи (15221 и 15225 у.е. соответственно). Низкая активность фермента наблюдалась в контроле (11023 у.е.) (рис.3). Стимуляция фитоиммуномодуляторами активности СОД подтверждает способность их к детоксикации активных форм кислорода и позволяет предположить, что они обладают антиоксидантными свойствами.

16000 14000 Ч12000

Í юооо £ 8000 £ 6000 4000 2000

¡II

2 3 4 5 варианты

|шЗ сутки I ш 5 сутки I 7 сутки irMOcyTKHi

Рис. 3. Влияние фитоиммуномодуляторов на активность супероксиддисмутазы в побегах (А) и корнях (Б) гороха сорта «Батрак» (2007 г.). 1-Контроль (вода); 2-Контроль («Нарцисс»), 1 л/т; 3- Контроль («Винцит,СК»), 2 л/т; 4-Биогумус, 1,5*10"4%; 5-ЛГПК 10"5%; 6-Лектины пшеницы, 10"5%; 7-Биофлавоноиды гречихи, 10"4%; 8-Биофлавоноиды гречихи, 10~5%.

Активность супероксиддисмутазы в корнях гороха сорта «Батрак», обработанного фитоиммуномодуляторами, по мере прорастания повышается, но уже к 5 дню происходит снижение, это указывает на то, что растение само может бороться с активными формами кислорода. На седьмой день по некоторым вариантам отмечается тенденция к повышению, а к 10 дню резкое возрастание до 3213 у.е. активности супероксидисмутазы в варианте с обработкой ЛГГ1 -

1 2 3 4 5 6 7 8 варианты

3500

комплексом, что показывает активацию фермента под действием иммуномодулятора. Степень разведения фитоиммуномодулятора на основе биофлавоноидов гречихи существенно не повлияло на активность супероксиддисмутазы, что указывает на возможность применения более низких концентраций.

Установлено, что растения, обработанные фитоиммуномодуляторами, обладают высокой активностью пероксидазы. Из рисунка 4 видно, что на третьи сутки в контроле (вода) активность самая низкая (22,5 у. е.), в образцах, обработанных фитоиммуномодуляторами, активность пероксидазы высокая (200-350 у.е.), что указывает на усиление пероксидазозависимого иммунитета. Наибольшая активность пероксидазы при обработке фитоиммуномодуляторами наблюдается в варианте с биофлавоноидами гречихи в концентрации 10"5% (75,8 у.е), что связано с активацией иммунной системы на первом этапе прорастания.

400-щ» 350 ЯЁ

о °

11501 "" 1001

§1 "11

" ]

;й

г 11 ■11

50 =—Г

йяМММ

I, 1

I1' I ¡1 '

ли

|яЗсутки| сутки| |с7 сутки [;ГЧ 0 сутки,

л 200 - н

■ 150«

^ ■ 3 сутки ш 5 сутки', | г, 7 сутки 5Г10 сутки

Рис. 4. Влияние фитоиммуномодуляторов на активность пероксидазы в побегах (А) и корнях (Б) гороха сорта «Батрак» (2007 г.). I-Контроль (вода); 2-Контроль («Нарцисс»); З-Контроль («Винцит, СК»); 4-Биогумус, 1,5*10"4%; 5-ЛГПК, 10"5%; 6-Лектины пшеницы, 10"5%; 7-Биофлавоноиды гречихи, 10"4%; 8 -Биофлавоноиды гречихи, 10"5%.

Высокая активность пероксидазы в корнях гороха, обработанного иммуномодуляторами, сохраняется на протяжении всего этапа прорастания, что в дальнейшем приведет к индуцированию устойчивости к патогенам. Обработка лектинами пшеницы усиливает пероксидазозависимый иммунитет, на десятые сутки активность фермента в этом варианте составляет 240 у.е., в контрольном варианте 101 у.е. Уменьшение концентрации иммуномодуляторов на основе биофлавоноидов гречихи до 10"5% незначительно уменьшает активность пероксидазы по сравнению с концентрацией 10~4%, следовательно, возможно использовать низкие концентрации фитоиммуномодуляторов, что экономически целесообразно.

В побегах гороха сорта «Батрак», обработанного биофлавоноидами гречихи в концентрации к 5-10 суткам происходит наибольшее

увеличение активности каталазы (на 18,4 %). Биологическая роль каталазы

заключается не только в защите от образующейся в ходе метаболизма перекиси, но и снабжении растений кислородом.

Активность каталазы в корнях гороха сорта «Батрак» во всех вариантах по мере роста проростков снижалась, это объясняется конкурентным действием пероксидазы, активность которой возрастает. Однако, действуя одновременно, оба фермента не нарушают свои специфические функции, так как каталаза разрушает ту часть перекиси водорода, которая не может быть использована пероксидазой для окислительных процессов.

Установлена зависимость активности ферментов в проростках гороха, обработанных фитоиммуномодуляторами, от сортовой устойчивости. На устойчивом сорте «Фараон» исследовались оптимальные концентрации фитоиммуномодуляторов, установленные в предыдущие годы исследований.

Установлено, что на третьи сутки активность пероксидазы в побегах гороха сорта «Фараон» наибольшая при обработке биофлавоноидами гречихи (58,4у.е.). в контроле активность фермента составила 14,5 у.е. На протяжении всего этапа прорастания семян наибольшая активность пероксидазы в побегах наблюдалась при обработке биофлавоноидами гречихи. На десятые сутки она составляет 303,9 у.е., в контроле активность фермента 92,1 у.е. (рис5.) По результатам изучения активности пероксидазы в проростках гороха «Фараон» под действием фитоиммуномодуляторов, можно сделать выводы, что в устойчивых сортах иммунный статус растения высокий и растения меньше реагируют на неблагоприятные факторы.

Рис. 5. Влияние фитоиммуномодуляторов на активность пероксидазы в побегах (А) и корнях (Б) гороха сорта «Фараон» (2008 г.).

1-Контроль (вода); 2-Контроль («Винцит, СК»); 3- ЛГПК, 10~5%; 4-Лектины пшеницы, 10"5%; 5-Биофлавоноиды гречихи, 10"4%; 6-Лектины сои 10"5%; 7- Контроль («Нарцисс»).

Наибольшая активность пероксидазы в корнях устойчивого сорта «Фараон» наблюдалась на третьи сутки при обработке биофлавоноидами гречихи (29 у.е.), в контроле активность фермента составляет 8 у.е. К пятым суткам активность пероксидазы в корнях гороха «Фараон» наибольшая при применении лектинов сои (55 у.е.), в контроле активность минимальна (10 у.е.).

3 4 5 варианты

К десятым суткам активность фермента максимальна при обработке биофлавоноидами гречихи (82 у.е.), в контроле активность фермента 55 у.е. Обработка фитоиммуномодуляторами усиливает антиоксидантную защиту растения, позволяя защищаться от грибной инфекции на первых этапах прорастания. В устойчивых к болезням сортах иммунный статус растения находится на высоком уровне и растения меньше нуждаются в индуцировании устойчивости, чем среднеустойчивые сорта.

Анализируя свойства пероксидазы, КравецА.Ф. (1979) сделал вывод о том, что защитная реакция и у пшеницы в целом зависит от уровня пероксидазной активности. Нашими исследованиями на пшенице сорта «Дарья» было установлено, что максимальная активность пероксидазы в побегах на третьи сутки наблюдается в варианте с совместным применением вытяжки из биогумуса и химического протравителя «Винцит, СК» (119 у.е.), в контрольном варианте активность низкая (76 у.е.). В процессе прорастания пшеницы активность фермента увеличивается и максимальная величина наблюдается в контрольном варианте с препаратом «Нарцисс» (248 у.е.), в варианте с обработкой щелочной вытяжкой из биогумуса активность пероксидазы составляет 199 у.е. На седьмые-десятые сутки активность фермента заметно увеличивается (238 у.е.) при совместной обработке вытяжкой из биогумуса и химическим протравителем «Винцит, СК» - максимальна (249 у.е.), в контроле 183 у.е. Высокая активность пероксидазы под действием биологически активного вещества биогумуса в проростках пшеницы предполагает участие фермента в метаболических процессах, происходящих во время активного прорастания зерновок (рис.6).

§ 100 50 0

3 4 5 варианты

3 4

варианты

3 сутки □ 5 с/тки г I 7 сутки

Рис. 6. Влияние биологически активного вещества биогумуса на активность пероксидазы в побегах (А) и корнях (Б) пшеницы «Дарья» (2007-2008). 1- Контроль, (вода); 2- Контроль («Винцит, СК»); 3- Контроль («Нарцисс»); 4- Биогумус, 1,5*10"4%; 5- Биогумус, 1,5*10~4+ «Винцит, СК»

Установлено, что на третьи сутки наибольшая величина активности пероксидазы в корнях пшеницы сорта «Дарья» наблюдается при совместной обработке биогумусом и химическим протравителем «Винцит, СК» (58 у.е.), в контроле показатель наименьший (15 у.е.). На 5 сутки прорастания активность

пероксидазы в корешках пшеницы наибольшая при обработке вытяжкой из биогумуса (68у.е.), в контроле активность фермента составляет 32 у.е. К седьмым- десятым суткам наибольшая активность фермента наблюдается при совместной обработке вытяжкой из биогумуса и химическим протравителем «Винцит, СК» (88у.е.). Обработка активным веществом биогумуса сохраняет уровень пероксидазы в побегах на достаточно высоком уровне, что позволяет растению пшеницы защититься от болезней на этапе прорастания, когда иммунитет понижен. Следует отметить что совместное применение биогумуса и химического протравителя «Винцит,СК» наибольшим образом усиливает пероксидазозависимый иммунитет во всех органах проростков.

Влияние фитоиммуномодуляторов на возбудителей болезней гороха.

В борьбе с вредителями и болезнями сельскохозяйственных культур часто приходиться применять двух, а иногда и трехкратное опрыскивание посевов пестицидами, что, в свою очередь ведет к загрязнению окружающей среды, сельхозпродукции и нарушению биоценоза в целом. В связи с этим назрела необходимость изыскания приемов, направленных не на полное истребление вредных объектов, а на снижение их численности до уровня порога вредоносности и повышения защитных свойств самих растений. Такими приемами могут служить агротехнические мероприятия, применение биологических препаратов и фитоиммуномодуляторов.

В годы проведения исследований посевы гороха в разной степени подвергались поражению болезнями. Горох в большей степени поражался корневыми гнилями, бледнопятнистым и темно-пятнистым аскохитозом, мучнистой росой, ржавчиной, пероноспорозом.

В рейтинговой оценке фитоиммуномодуляторов против семенной инфекции ведущее место принадлежит иммуномодулятору на основе биофлавоноидов гречихи (табл. 1).

Таблица 1

Влияние фитоиммуномодуляторов на зараженность патогенной микрофлорой семян гороха «Батрак» (2007-2008гг.)_

Варианты Зараженность семян, %

2007 год 2008 год Средняя

Обработка семян + оп рыскивание растений

Контроль (вода). 16,8 14,9 15,85

Контроль («Нарцисс») 9,8 10,6 10,2

Контроль («Винцит, СК») 0,5 0,9 0,7

Биогумус, 1,5*10"4% 17,3 15,3 16,3

ЛГПКЛ0:'% 9,0 7,1 8,05

Лектины пшеницы, 10"5% 9,8 8,8 9,3

Лектины сои, 10°% - 6,8 -

Биофлавоноиды гречихи, 10"4% 9,3 - -

Биофлавоноиды гречихи, 10'5% 7.3 6,9 7,1

НСР05 5,9 6,3 6,1

Уменьшение заражения патогенной микрофлорой семян гороха происходит за счет усиления иммунитета, что было показано в лабораторных опытах при изучении антиоксидантной системы гороха. Общая зараженность семян на данных вариантах по годам составляла 6,9-9,3%, что на 53,4% ниже контрольного показателя. При этом эффективными были обе концентрации биофлавоноидов.

Снижение зараженности семян до уровня биологического контроля препарата «Нарцисс» произошло в варианте с применением иммуномодулятора на основе ЛГП-комплекса (8,05 %) и лектинов пшеницы (9,3%), что показывает эффективное действие исследуемых препаратов на повышение иммунного статуса растения во время прорастания, когда развитие грибковой инфекции в проростках гороха наиболее опасно и влечет за собой сильное поражение болезнями во время вегетационного периода.

Было проведено исследование действия фитоиммуномодуляторов на развитие корневой гнили, одного из опаснейших заболеваний гороха, снижающей в отдельные годы урожай этой ценной зернобобовой культуры более чем наполовину (табл. 2).

Таблица 2

Влияние фитоиммуномодуляторов на развитие корневой гнили в посевах гороха сорта «Батрак» (2007 - 2008 гг.)__

Варианты 2007 год 2008 год

Развитие корневой гнили, %

Бутонизация. Плодообра-зование. Бутонизация. Плодообра-зование.

Обработка семян + опрыскивание растений

Контроль (вода) 47,2 67,5 52,1 71,5

Контроль («Нарцисс») 31,6 69,3 33,0 68,4

Контроль («Винцит,СК») 27,.4 55,8 26,4 51,2

Биогумус, 1,5*Ю"4% 37,4 76,4 35,1 76,4

ЛГПК, 10"5% 35,9 62,7 32,6 62,7

Лектины пшеницы, 10"5% 40,1 64,6 42,3 64,6

Лектины сои, 10"5% - - 29,5 52,4

Биофлавоноиды гречихи, 10"4% 39,5 47,3 - -

Биофлавоноиды гречихи, 10"5% 26,9 60,8 27,3 53,1

НСР05 13,1 20,0 12,3 16,0

Развитие корневой гнили на вариантах с применением иммуномодулятора на основе биофлавоноидов гречихи в концентрации 10"5% существенно ниже, чем на других вариантах (26,9-27,3%) и не превышает контрольный вариант с биопрепаратом «Нарцисс» в фазу бутонизации (31,6-33,0%).

В фазу плодообразования существенной разницы между вариантами в развитии болезни не наблюдалось и только иммуномодулятор на основе

биофлавоноидов гречихи в концентрации 10"4% достоверно снижал развитие болезни, включая фазу зеленого боба (47,2%). Эффективное действие фитоиммуномодулятора на основе биофлавоноидов гречихи на развитие корневых гнилей на горохе объясняется антиоксидантными свойствами биофлавоноидов и содержанием в иммуномодуляторе прежде всего таких важных для иммунной системы элементов, как цинк, селен, кобальт.

В результате применения иммуномодуляторов на горохе устойчивого сорта «Фараон» наблюдалось снижение таких болезней, как аскохитоз и ржавчина. Снижение развития аскохитоза при использовании иммуномодуляторов произошло на 6,3-18%. Наибольшее снижение развития болезни наблюдалось в варианте с применением лектинов сои, что близко к контрольному варианту с применением препарата «Нарцисс» - на 11,7%. Развитие ржавчины в начале зеленой спелости гороха не превышало предела вредоносности по всем вариантам - процент развития составил 1-4,5%. Через 2 недели, к концу зеленой спелости гороха, на контроле ее развитие составило 36,7 %. Из всех иммуномодуляторов наиболее эффективными были лектпны сои, снизившие развитие болезни гороха на 10 % по сравнению с контролем.

Таким образом, применение фитоиммуномодуляторов на горохе способствует снижению развития болезней за счет повышения пероксидазозависимого иммунитета.

Влияние фитоиммуномодуляторов на распространение вредителей на горохе.

Наряду с болезнями большой вред посевам гороха наносят вредители, в связи с чем было исследовано действие фитоиммуномодуляторов на поражение растений и распространенность в посевах основных вредителей.

В результате применения иммуномодуляторов на горохе сорта «Фараон» зафиксировано снижение численности такого фитофага как гороховая тля - на 7,7-57,6% в зависимости от препарата по сравнению с контролем (табл.3).

Таблица 3

Действие иммуномодуляторов на заселенность посевов гороха «Фараон»

тлей (2008г.)

Количество экземпляров на 10 взмахов сачком

Вариант До Через 10 дней Через 20 дней

опрыск. после опрыск. после опрыск.

Обработка семян + опрыскивание растений

Контроль (вода) 107,25 321,25 136,00

Контроль («Винцит, СК») 107,00 279,50 109,25

Л ГПК, ю -5% 77,00 214,50 182,00

Лектины пшеницы, 10" % 45,50 305,00 124,00

Биофлавоноиды гречихи, 10 "5% 91,25 319,75 79,75

Лектины сои, 10 "5% 54,00 364,50 102,20

Контроль («Нарцисс») 66,25 355,00 128,50

Наибольшее снижение численности гороховой тли перед опрыскиванием наблюдалось в вариантах с обработкой семян иммуномодуляторами на основе лектинов пшеницы и сои - на 57,7 и 49,6% по сравнению с контролем, соответственно, в контрольных вариантах с применением в качестве протравителей препаратов «Нарцисс» - на 38,2%, «Винцит, СК» - на уровне контроля.

Через 10 дней после опрыскивания наименьшая численность вредителя наблюдалась в вариантах с применением иммуномодулятора на основе ЛГП-комплекса, на 47,4 % ниже контроля. Использование фитоиммуномодулятора на основе ЛГП-комплекса при обработке семян снизило численность тли только на 5,1% по сравнению с контролем.

Через 20 дней после опрыскивания численность тли сократилась по всем вариантам, включая контроль, что связано с достижением горохом фазы «полной спелости», когда питание и размножение вредителя на горохе затруднено. Однако тенденция в сокращении численности вредителя сохранялась в вариантах с применением иммуномодуляторов на 3,12-27,21% по сравнению с контролем.

Оценка влияния фитоиммуномодуляторов на численность трипсов на горохе устойчивого сорта «Фараон» показала, что наименьшее количество фитофага (на 43,6 % ниже контроля) зафиксировано в вариантах с применением иммуномодуляторов на основе биофлавоноидов гречихи и лектинов сои. Через 10 дней после опрыскивания в вариантах с применением иммуномодулятора на основе лектинов сои наблюдалась нулевая численность трипсов. Значительное снижение численности (на 79,88 %) зафиксировано в варианте с обработкой ЛГП- комплексом.

Установлено также, что в вариантах с фитоиммуномодуляторами происходит снижение поврежденности бобов гороха вредителем. В опытных вариантах поврежденность в наибольшей степени была снижена (на 8,75 % по сравнению с контролем) при использовании иммуномодулятора на основе лектинов сои, на основе лектинов пшеницы и биофлавоноидов гречихи снижение поврежденности произошло на 3,5-5,2 %.

Анализ поврежденности семян гороха сорта «Батрак» гороховой плодожоркой и зерновкой выявил эффективность биофлавоноидов гречихи. Процент повреждения семян плодожоркой на данных вариантах был наименьшим и составил 17,5-43,5 %. Поврежденность гороха зерновкой не превышала 2,0-3,8 %.

Уменьшение количества фитофагов и снижение степени поврежденности растений гороха можно объяснить усилением иммунитета за счет повышенного синтеза лигнина, лектинов и других веществ конституционной устойчивости. Клеточные стенки при повышении содержания этих веществ становятся механически прочнее и менее доступны для фитофагов.

Влияние фитоиммуномодуляторов на посевные качества гороха.

Всхожесть и энергия прорастания семян являются самыми важными показателями их посевных качеств. Всхожесть семян имеет большое

производственное значение, определяя их пригодность для посева и норму высева.

Эффективность протравливания как одного из факторов, способствующих снижению пораженности гороха болезнями и повышению продуктивности культуры, определяется, прежде всего, всхожестью. Поэтому оценку эффективности протравливания фитоиммуномодуляторамн начинали с оценки всхожести растений.

Биологически активные вещества природного происхождения очень часто используются для повышения всхожести семян (Михно, 1997). В зависимости от природы они могут регулировать протекание метаболических процессов, активировать или ингибировать различные ферменты, влиять на проницаемость мембран клеток. Среди этой группы следует выделить иммуномодуляторы, обладающие антиоксидантной активностью. Обладая разным механизмом действия, фитоиммуномодуляторы активировали энергию прорастания и всхожесть гороха, действуя на растения даже в низких концентрациях.

Исследованиями установлено, что при обработке гороха «Батрак» ЛГП-комплексом, повышается энергия прорастания до 95,5 % и лабораторная всхожесть до 98,5%, что показывает высокие ростостимулирующие свойства препарата. В контроле энергия прорастания составила 91,5 %, а лабораторная всхожесть 94,5%.Г1ри обработке лектинами сои энергия прорастания и лабораторная всхожесть составила 98,0 и 98,5 % соответственно (табл.4).

Таблица 4

Влияние фитоиммуномодуляторов на посевные качества гороха сорта «Батрак» (2007 - 2008 гг.) __

Варианты 2007 год 2008 год •

Энергия прораст.,% Всх-сть лаб,% Энергия прораст.,% Всх-сть лаб.,%

Обработка семян + опрыскивание растений

Контроль (вода) 92,8 96,5 92,5 95,8

Контроль («Нарцисс») 97,0 97,5 96,1 96,9

Контроль («Винцит, СК») 89,5 95,5 94,4 95,7

Биогумус, 1,5*10"4% 93,5 96,0 95,3 96,6

ЛГПК, 10-'% 98,0 98,5 97,1 96,4

Лектины пшеницы, 10"3% 97,5 98,0 95,8 96,0

Лектины сои, 10"5% - - 98,0 98,5

Биофлавоноиды гречихи, 10"4% 90,5 95,5 - -

Биофлавоноиды гречихи, 10"5% 94,5 96,5 96,2 97,7

НСР05 3,5 2,4' 3,1 1,9

Повышение всхожести семян можно объяснить усилением деления клеток, происходящим в результате активации биохимических процессов под действием фитоиммуномодуляторов.

Одним из главных условий получения высоких урожаев является наличие оптимальной густоты стояния растений (Терехов, 2000). На основании проведенных исследований густоты стеблестоя гороха сорта «Батрак», обработанного фитоиммуномодуляторами, установлено, что в опытных вариантах с биогумусом в концентрации 1,5*10"4%, лектинов пшеницы в концентрации 10"5% и биофлавоноидов гречихи в концентрации 10"4%, произошло увеличение показателя на 10,1; 8,4 и 5,2 % соответственно, по сравнению с контролем. Сохранение высокой густоты стеблестоя перед уборкой сохраняется благодаря уменьшению негативного влияния биотических факторов за счет усиления иммунитета растений.

Влияние фитоиммуномодуляторов на урожай гороха.

Результаты исследований показали, что фитоиммуномодуляторы на основе лектинов сои и биофлавоноидов гречихи оказали положительное влияние на продуктивность гороха «Батрак»: увеличилось количество бобов на 1 растение и масса 1000 семян (табл. 5).

Таблица 5

Влияние иммуномодуляторов на структуру урожая гороха сорта «Батрак» (2007-2008гг.).____

Варианты 2007 год 2008 год

Кол-во бобов на 1 раст., шт. Масса 1000 семян, г. Кол-во бобов на 1 раст.,шт. Масса 1000 семян, г.

Обработка семян + оп эыскивание растений

Контроль (вода) ^ 2,0 206,5 1,9 208,3

Контроль («Нарцисс») 1,9 207,0 1,9 212,1

Контроль («Винцит, СК») 2,5 217,3 2,0 211,1

Биогумус, 1,5*10"4% 2,1 223,3 2,1 212,4

ЛГПК, 10"5% 2,0 202,1 2,0 209,3

Лектины пшеницы, 10"ь% 2,2 218,3 2,2 210,2

Лектины сои, 10^% - - 2.3 214,0

Биофлавоноиды гречихи, 10"4% 2,1 205,4 - -

Биофлавоноиды гречихи, 10"5% 2,0 215,1 2,2 213,2

НСР05 0,21 2,5 0,33 3,3

Как видно из таблицы 5, масса 1000 семян с одного растения выше в вариантах с лектинами пшеницы (210,2-218,3 г), лектинами сои (214,0 г), биофлавоноидамн гречихи в концентрации 10"5% (213,2-215,1 г.). Увеличение количественных показателей урожая гороха под влиянием фитоиммуномодуляторов происходит за счет усиления иммунитета растений, меньшей поврежденностыо болезнями и вредителями.

Во всех вариантах с фитоиммуномодуляторами увеличивается урожайность гороха за счет большего количества бобов с одного растения, большей массы 1000 семян, меньшего влияния биотических факторов (табл.6).

Таблица 6

Влияние иммуномодуляторов на урожайность гороха сорта «Батрак (2007-2008 гг.)_

Варианты Урожайность, ц/га

2007 г. 2008 г. Средняя

Обработка семян + опрыскивание растений

Контроль (вода) 14,7 15,2 15,1

Контроль («Нарцисс») 14,7 16,1 15,4

Контроль («Винцит, СК») 16,0 16,7 16,4

Биогумус, 1,5* 10_4% 16,7 17,8 17,3

ЛГПК, 10"5% 15,6 16,9 16,3

Лектины пшеницы, 10°% 17,4 16,8 17,1

Лектины сои, 10°% - 18,2 -

Биофлавоноиды, 10"4% 16,7 - -

Биофлавоноиды, 10"5% 16,2 18,9 17,6

НСР05 0,5 1,2 -

Так, обработка щелочной вытяжкой из биогумуса повышает урожай на 12,0% (17,3 ц/га), ЛГП-комплексом на 5,5% (16,3 ц/га), пектинами пшеницы на 11,0% (17,1 ц/га), лектинами сои на 13,0% (18,2 ц/га), биофлавоноидами гречихи на 14,0% (17,6 ц/га). В контрольном варианте урожайность составляет 15,4 ц/га.

На основании проведенных исследований было установлено, что на протяжении всего вегетационного периода растения пшеницы, обработанные щелочной вытяжкой из биогумуса, отличались по высоте и массе растений (на 31,5 %). Произошло достоверное увеличение урожайности пшеницы сорта «Дарья» при использовании вытяжки из биогумуса на 15,4% (21,0 ц/га) (табл.7).

Таблица 7

Влияние биологически активного вещества биогумуса на урожайность пшеницы Дарья (2007-2008 гг.).___

Вариант Урожайность

ц/га % к контролю

Контроль (вода) 18,2 100

Контроль («Винцит, СК») 21,4 117,6

Контроль («Нарцисс») 20,3 111,5

Биогумус, 1,5*10"4% 21,0 115,4

Биогумус 1,5*10"4% + «Винцит, СК» 22,7 124,7

НСРо5 0,7 -

Контрольный биопрепарат «Нарцисс» вызывает прибавку урожая гороха на 11,5% (20,3 ц/га). При использовании «Винцит, СК» урожайность возрастает до 21,4 ц/га, что на 17,6 % больше, чем в контроле. При совместной обработке вытяжкой из биогумуса и препаратом «Винцит, СК», урожайность составляет 22,7 ц/га, что на 24,7% больше контроля.

Эффективное действие химического препарата совместно с иммуномодулятором объясняется тем, что химический протравитель имеет фунгицидное свойство, а биологически активное вещество из биогумуса усиливает иммунитет растения, что в совокупности обеспечивает высокую защиту от биогенных факторов и в конечном результате влияет на урожайность.

Продукционный процесс ценозов.

Ростостимулирующее действие фитоиммуномодуляторов отразилось на общем физиологическом состоянии растений, оказав положительный эффект на фотосинтетическую деятельность посевов гороха и яровой пшеницы.

Одновременно с увеличением площади листовой поверхности происходит рост и фотосинтетического потенциала (ФП), который достигает 1,88 млн. м2-дней/га при применении биофлавоноидов гречихи, в трех контролях показатель составляет 1,23-1,34 млн. м2-дней/га (табл.8).

Таблица 8

Влияние иммуномодуляторов на фотосинтетическую деятельность

ценозов гороха сорта Батрак (2008г.)

Варианты опыта ФП, млн. м -дней/га ЧПФ, г/м2 сутки

Контроль (вода) 1,23 4,52

Контроль («Нарцисс») 1,31 4,89

Контроль («Винцит, СК») 1,34 4,92

Биогумус, 1,5*10"4% 1.54 5,01

ЛГПК, 10"5% 1,76 4,98

Лектины пшеницы, 10'5% 1,71 4,79

Биофлавоноиды, 10"5% 1,88 5,21

Лектины сои, 10"5% 1,76 4,95

Наиболее эффективной работой единицы листовой поверхности гороха, которая характеризуется показателем чистой продуктивности фотосинтеза (ЧПФ), отличались варианты с применением биогумуса и биофлавоноидов гречихи. В них ЧПФ была равна 5,01 и 5,21 г/м2 сутки, соответственно.

Таким образом, наибольшее стимулирующее действие на посевы гороха оказывает применение биофлавоноидов гречихи при предпосевной обработке семян и двукратного опрыскивания, что способствует росту ассимиляционной поверхности листьев, чистой продуктивности фотосинтеза.

При совместном применении иммуномодулятора на основе копролитов компостных червей и препарата «Винцит, СК» на посевах пшеницы «Дарья», обработанных биогумусом происходит увеличение площади листовой поверхности и фотосинтетического потейциала, который достигал 1,70 млн. м2-дней/га по сравнению с контрольным вариантом (1,23-1,34 млн. м2-дней/га).

Высокие показатели чистой продуктивности фотосинтеза также характерны для вариантов с комплексным применением биогумуса и «Винцит, СК» (8,35 г/м2 сутки), что обусловлено эффективной работой ассимиляционной поверхности листьев.

ЭКОНОМИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ

Предварительные расчеты показали, что производство исследуемых препаратов, подготовка растворов, обработка семян, опрыскивание посевов экономически обосновано за счет повышения урожайности с/х культур и исключения химических средств защиты.

В качестве контрольного варианта была взята технология возделывания гороха без обработки средствами защиты против болезней и вредителей и с использованием предпосевной обработки семян с двукратным опрыскиванием растений фитоиммуномодуляторами.

Прибавка урожайности гороха при использовании препаратов составила 5,5-14,0% по сравнению с контролем. Рентабельность производства гороха с использованием препаратов может увеличиться до 34,54% по сравненшо с контролем.

ВЫВОДЫ

1. Усовершенствованы методики выделения липогликопротеидного комплекса из грибов рода Лхсос!1)<1а лектинов из семян пшеницы и сои, биофлавоноидов из гречихи. Выход лектинов из семян сои по разработанной методике больше на 26,9 %, чем из семян пшеницы. Выделение ЛГП-комплекса адаптировано для патогенного гриба АзсосНу^а Рш. Разработан способ выделения биофлавоноидов из соломы гречихи.

2. У гороха среднеустойчивого сорта «Батрак» под влиянием фигоиммуномодулятора на основе лектинов пшеницы в концентрации 10"5% происходит увеличение активности супероксиддисмутазы на 46,5 %, пероксидазы на 453,8 %, каталазы на 64,4%, по сравнению с контролем. При обработке биофлавоноидами гречихи в концентрации 10"5% и лектинами сои активность суппероксиддисмутазы возрастает на 52,3 и 42,4% соответственно. Установлено, что активность ферментов под действием фитоиммуномодуляторов в неустойчивых и среднеустойчивых сортах гороха на порядок выше, чем у устойчивых сортов.

3. Предпосевная обработка семян гороха «Батрак» лектинами пшеницы в концентрации 10"5% с двукратным опрыскиванием уменьшает развитие корневой гнили на 42,9%, аскохитоза на 11,72%, ржавчины на 10%, по сравнению с контролем. При предпосевной обработке биофлавоноидами гречихи в концентрации 10"5% и двукратного опрыскивания количество тли в посевах гороха уменьшается на 9,7%, трипсов на 46,6%, по сравнению с контролем.

4. Обработка семян гороха «Батрак» биофлавоноидами гречихи и двукратного опрыскивания в фазу вегетации приводит к увеличению площади листовой поверхности и фотосинтетического потенциала на 52,8%, чистой продуктивности фотосинтеза на 15,3 %.

5. Предпосевная обработка семян иммуномодуляторами с двукратным опрыскиванием способствует увеличению высоты растений на 1,2-14,1%, зеленой массы на 8,8-25%, урожайности на 5,4-19,5%. Наибольшее увеличение происходит в варианте с обработкой биофлавоноидами гречихи в концентрации 10"5%, высоты растений на 14,1%, зеленой массы на 5%, урожайности на 19,5%.

6. Предпосевная обработка фитоиммуномодулягорами растений гороха и пшеницы (Юл/т) совместно с двукратным опрыскиванием (400л/га) более значительно усиливает устойчивость растений гороха и пшеницы к биотическим факторам, чем предпосевное замачивание семян. Оптимальная концентрация фитоиммуномодуляторов, усиливающая пероксидазозависимый иммунитет повышает устойчивость растений к биотическим факторам и составляет: для биологически активного вещества из биогумуса - 1,5*10"4%, для иммуномодуляторов на основе ЛГП-комплекса, лектинов пшеницы, лектинов сои, биофлавоноидов гречихи -10"5%.

7. Рентабельность производства гороха «Батрак» в вариантах с обработкой лектинами сои увеличивается до 34,54%, биофлавоноидами гречихи в концентрации 10'5% до 27,80%, , вытяжкой из биогумуса в концентрации 1,5*10"4% до 24,50%.

8. Наиболее эффективными препаратами для гороха являются биофлавоноиды гречихи и лектины сои. Наиболее эффективной для пшеницы является совместная обработка биогумусом и химическим препаратом «Винцит,СК».

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

- На основе лектинов пшеницы и сои, активного вещества биогумуса, биофлавоноидов гречихи, ЛГП - комплекса гриба А$сосИу(а Р/.?/ перспективно создание нового класса фитоиммуномодуляторов и стимуляторов роста и развития растений.

- Наиболее перспективными для внедрения в производство гороха являются фитоиммуномодуляторы на основе биофлавоноидов гречихи, полученные из отходов производства (соломы) и лектинов семян сои, применяемых в низких концентрациях (105%)

- Применять препараты следует путем предпосевной обработки семян гороха и двукратного опрыскивания в период бутонизации и цветения. Расход раствора при замачивании семян 10 л/т, а при опрыскивании растений 400 л/га.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1 .Бородин, Д.Б. Испытание новых биопрепаратов на горохе / Д.Б.Бородин // Вклад молодых ученых в реализацию приоритетных направлений развития АПК: по материалам региональной науч.-практ. конф. (19-23 марта, 2007г., Орел).- Орел, 2008.- С.10-11.

2.Бородин, Д.Б. Результаты испытания активного вещества биогумуса на болезнеустойчивость и хозяйственно-ценные признаки гороха / Д.Б.Бородин // Вклад молодых ученых в реализацию приоритетных направлений развития АПК: по материалам региональной науч.-практ. конф. (19-23 марта, 2007г., Орел).- Орел, 2008.- С. 10-11.

3.Павловская, Н.Е. Влияние биологически активных веществ, полученных на основе природных источников, на рост и развитие гороха / Н.Е Павловская, Д.Б.Бородин // Вестник ОрелГАУ.- 2008.-№3.- С.18-20.

4.Бородин, Д.Б. Испытание новых биологически активных веществ на горохе /Д.Б.Бородин, Р.Н.Морозов// Актуальные направления развития сельскохозяйственной науки: по материалам региональной науч.-практ. конф. (19-22 февраля, 2008г., Орел).- Орел, 2008,- С.10-13.

5.Бородин, Д.Б Влияние иммуномодуляторов на фотосинтетический аппарат гороха и пшеницы/Д.Б. Бородин, М.И. Катанов // Роль молодых ученых и специалистов в повышении эффективности растениеводства: по материалам региональной науч.-практ. конф. (23-27 марта, 2009г., 0рел).-0рел,2009.- С.9-11.

6.Бородин, Д.Б. Влияние иммуномодуляторов на антиоксидантную систему гороха / Д.Б. Бородин // Роль молодых ученых и специалистов в повышении эффективности растениеводства: по материалам региональной науч.-практ. конф. (23-27 марта, 2009г., 0рел).-0рел,2009,- С.20-22.

7.Бородин, Д.Б. Влияние новых иммуномодуляторов на рост и развитие гороха / Д.Б. Бородин // Роль молодых ученых и специалистов в повышении эффективности растениеводства: по материалам региональной науч.-практ. конф. (23-27 марта, 2009г., 0рел).-0рел,2009,- С.29-31.

Выражаю искреннюю благодарность заведующему лабораторией иммунитета и защиты растений ГНУ ВНИИЗБК к.с.х. наук Борзенковой Галине Алексеевне, а также коллективу лаборатории за помощь в проведении полевых исследований.

Подписано в печать 28.05.2009 г. Формат 60x90/16. Бумага офсетная. Гарнитура Тайме. Усл. печ. л. 1,3. Заказ 72. Тираж 100 экз.

Отпечатано в издательстве Орел ГАУ, 2009, Орел, Бульвар Победы, 19

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Бородин, Дмитрий Борисович

СОДЕРЖАНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ'.'.:. л. .1.

1 ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ КАК ОСНОВА ЭКОЛОГИЧЕСКИ БЕЗОПАСНОГО ЗЕМЛЕДЕЛИЯ.

1.1 Копролиты компостных червей.

1.2 Лектины. Роль лектинов в метаболизме растений.

1.3 Липогликопротеидный комплекс.

1.4 Биофлавоноиды, их распространение, значение и применение.

1.5 Фитоиммуномодуляторы, как регуляторы роста и развития.

1.6 Вредители и болезни гороха, как фактор снижающий урожайность.

2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1 Методы выделения биологически активных веществ из природных исочников.

2.2 Условия выращивания.

2.3 Методы физиолого-биохимического анализа.

2.4 Полевые эксперименты.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3. ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ФИТОИММУНОМОДУЛЯТОРОВ НА ТЕСТ-СИСТЕМАХ НА ГОРОХЕ И

ПШЕНИЦЕ.

4 ВЛИЯНИЕ ФИТОИММУНОМОДУЛЯТОРОВ НА УСТОЙЧИВОСТЬ К БИОТИЧЕСКИМ ФАКТОРАМ ГОРОХА.

4.1 Влияние фитоиммуномодуляторов на возбудителей болезней гороха.

4.2 Влияние иммуномодуляторов на распространение вредителей на горохе

5 ВЛИЯНИЕ ФИТОИММУНОМОДУЛЯТОРОВ НА ПРОДУКТИВНОСТЬ

ГОРОХА И ПШЕНИЦЫ.

5.1 Влияние фитоиммуномодуляторов на посевные качества гороха.

5.2 Влияние фитоиммуномодуляторов на рост гороха.

5.3 Влияние фитоиммуномодуляторов на урожай гороха.

5.4 Влияние биологически активного вещества биогумуса на болезнеустойчивость и урожай, пшеницы «Дарья».

5.5 Влияние биологически активных веществ на фотосинтетический потенциал и чистую продуктивность фотосинтеза.

6 ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние фитоиммуномодуляторов на устойчивость к биотическим факторам и продуктивность гороха и пшеницы"

Актуальность темы. В настоящее время сельскохозяйственные растения постоянно находятся в условиях экологического стресса, поскольку страдают от болезней и вредителей (в годы эпифитотий потери урожая достигают 80 %). В таком состоянии растения иммунодефицитны. Никакие пестициды не могут заменить иммунную систему, а в ряде случаев способны её подавить. Таким образом, химическое и инфекционное давление на растения часто превышает порог их возможной, адаптации. Неудивительно, что иммунная система, которая защищает растения от болезней и стрессов, в настоящий момент сама нуждается в защите. Поэтому сейчас особенно важна разработка различных средств фитоиммунокоррекции, с тем; чтобы эффективно контролировать иммунный статус растения для преодоления его дефицитности (Озерецковская, 1999).

Одним из наиболее многообещающих способов защиты растений является индуцирование их устойчивости. Этот способ основан не на прямом подавлении патогенов, а на индуцировании естественного потенциала растительной ткани по тому образцу, как это происходит в природе. Это приобретает большую актуальность, особенно при возделывании неустойчивых и среднеустойчивых сортов, индуцирование устойчивости у которых к вредителям и болезням имеет решающее значение с экономической и экологической точек зрения (Ковалёв, Янина, 1999).

Изучение механизмов формирования защитных и ростостимулирующих свойств у гороха и пшеницы под действием новых фитоиммуномодуляторов позволит пролить свет на механизмы возникновения устойчивости, а также . изучить проблему научного обоснования практического использовании новых фитоиммуномодуляторов.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучить физиологические аспекты применения новых иммуномодуляторов и их влияние на продуктивность и устойчивость к биотическим факторам гороха и пшеницы.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

• Выделить биологически активные вещества из биогумуса, грибов и растений;

• Изучить биологическую активность фитоиммуномодуляторов на тест-системах;

• Изучить устойчивость гороха под действием фитоиммуномодуляторов к биотическим факторам.

• Исследовать действие фитоиммуномодуляторов на продукционный процесс посевов гороха и пшеницы.

• Разработать рекомендации по применению фитоиммуномодуляторов на горохе и пшенице;

• Дать экономическое обоснование использования фитоиммуномодуляторов.

Положения выдвигаемые на защиту.

• Природные компоненты клеток: лектины семян пшеницы и сои, биофлавоноиды гречихи, липиды мицелия гриба Азсоску1а Рш, активное вещество биогумуса обладают иммуномодулирующими свойствами и могут служить основой для создания новых средств защиты растений.

• Ферменты антиоксидантной системы клеток: супероксиддисмутаза и пероксидаза являются диагностическим тестом на выявление биологической активности и подбор эффективных концентраций препаратов.

• Созданные нами препараты на основе лектинов, биофлавоноидов, липидов и биогумуса усиливают пероксидазозависимый иммунитет и повышают продуктивность гороха и пшеницы.

Научная новизна. Впервые были получены фитоиммуномодуляторы на основе лектинов пшеницы, лектинов сои, липогликопротеидного комплекса гриба рода А$соску1а Рш, биофлавоноидов гречихи. Исследована антиоксидантная система гороха и пшеницы при обработке фитоиммуномодуляторами. Усовершенствована тест-диагностика иммунизирующих и стимулирующих свойств биологически активных веществ. Подана заявка на изобретение «Способ приготовления стимулятора роста растений» №.2009111734/12(016000).

Практическая ценность работы. Выделены биологически активные вещества из природных источников, обладающие иммунокоректирующим действием на растение, на их основе могут быть созданы новые эффективные экологически безопасные средства защиты растений. Установлена биологическая активность фитоиммуномодуляторов на антиоксидантной системе гороха и пшеницы. Представлены рекомендации по применению иммуномодуляторов на горохе и пшенице.

1 ИММУНОМОДУЛЯ ГОРЫ КАК ОСНОВА ЭКОЛОГИЧЕСКИ БЕЗОПАСНОГО ЗЕМЛЕДЕЛИЯ

Иммунитет растений (фитоиммунитет) - неспецифическая резистентность растений по отношению к патогенам. Фитоиммунитет обеспечивается множеством механизмов: выработкой низкомолекулярных фитонцидов, обладающих антибактериальными и фунгицидными свойствами, рецепторами распознавания специфических белковых последовательностей (англ. pattern recognition receptors); характерных для многих возбудителей; и системой подавления экспрессии генов при помощи РНК (RNA silencing) в1качестве противовирусной защиты.

Растительная; клетка обладает способностью к защите от патогенов. Многие патогены; способны подавлять рост растений и процесс их размножения. Иммунный ответ растений состоит из двух видов реакций. Первая реакция состоит в распознании^ молекул, типичных для микробов, включая непатогенные микробы. Вторая, реакция; состоит: в ответе на патогенные факторы микробов: Исследование иммунных механизмов реакций помогает изучать эволюцию: иммунной системы и выводить сорта сельскохозяйственных культур, более устойчивые к неблагоприятным факторам внешней среды.

Весь защитный механизм растения условно можно разделить на три группы факторов: конституционные, присущие здоровым растениям, активный индуцируемый иммунитет, проявляющийся под воздействием элиситоров (индукторов), и приобретенная устойчивость, создаваемая искусственно. К числу факторов конституционной устойчивости растения относятся лектины — гликопротеидные рецепторы, обеспечивающие специфическое узнавание патогенна и передающие первичный сигнал в клетку, что определяет дальнейшее взаимодействие между растением и микроорганизмом (Алексидзе, 1983). Ряд исследователей относят к этой системе защиты лигнины, присутствующие в клеточной стенке растения. Способность клетки синтезировать дополнительное количество лигнина в патогенезе позволило некоторым исследователям отнести лигнин к системе активной защиты, что указывает на условность деления клеточных реакций на конституционные и индуцированные (Павловская, 2003).

Такие реакции растений как образование фенолов, фитоалексинов, лигнинов, каллозы, а также наличие гидролитических и окислительных ферментов, свободные радикалы, ингибиторы протеиназ, относят к факторам индуцированной устойчивости.

Но эти же факторы часто играют роль в защите от стрессов вообще и являются скорее следствием, чем причиной узнавания. Строго говоря, только фитоалексины являются молекулами активного иммунитета, поскольку они отсутствуют в здоровых тканях растения (Павловская, 2005).

Заключение Диссертация по теме "Физиология и биохимия растений", Бородин, Дмитрий Борисович

ВЫВОДЫ

1. Усовершенствованы методики выделения липогликопротеидного комплекса грибов рода Ascochyta Ргяг, лектинов из семян пшеницы и сои, биофлавоноидов гречихи. Выход лектинов: из семян сои по разработанной методике больше на 26,9 %, чем из семян пшеницы. Выделение ЛТП-комплекса адаптировано для патогенного гриба Азсоску1а Ргяь Разработан способ вьщеления биофлавоноидов, из соломы гречихи.

2. У гороха среднеустойчивого: сорта «Батрак» под влиянием фитоиммуномодулятора на основе лектинов пшеницы в концентрации происходит увеличение активности супероксиддисмутазы на 46,5 %, пероксидазы на 453-8 %, кагал азы на 64,4%, по сравнению с контролем. При обработке биофлавоноидами гречихи: в концентрации 10"5% и лектинами сои активность суппероксиддисмутазы возрастает на>; 52,3; и 42,4% соответственно; Установлено, что активность ферментов под действием фитоиммуномодуляторов в неустойчивых и среднеустойчивых сортах гороха на порядок выше, чем у устойчивых сортов.

3. Предпосевная обработка семян гороха «Батрак» лектинами пшеницы в концентрации 10~5%.< с двукратным опрыскиванием уменьшает развитие корневой гнили на: 42,9%, аскохитоза на 11,72%, ржавчины на 10%, по сравнению с контролем. При предпосевной обработке биофлавоноидами гречихи в концентрации 10"5% и двукратного опрыскивания количество тли в посевах гороха; уменьшается на 9,7%, трипсов на 46,6%, по сравнению с контролем. , 4. Обработка семян гороха: «Батрак» биофлавоноидами гречихи и двукратного опрысьсивания в фазу вегетации приводит к увеличению площади листовой поверхности и; фотосинтетического потенциала на 52,8%, чистой продуктивности фотосинтеза на 15,3 %.

6. Предпосевная обработка фитоиммуномодуляторами растений гороха и пшеницы (Юл/т) совместно с двукратным опрыскиванием (400л/га) более значительно усиливает устойчивость растений гороха и пшеницы к биотическим факторам, чем предпосевное замачивание семян. Оптимальная концентрация фитоиммуномодуляторов, усиливающая пероксидазозависимый иммунитет повышает устойчивость растений к биотическим факторам и составляет: для биологически активного вещества из биогумуса - 1,5*10"4%, для иммуномодуляторов на основе ЛГП-комплекса, лектинов пшеницы, лектинов сои, биофлавоноидов гречихи

7. Рентабельность производства гороха «Батрак» в вариантах с обработкой лектинами сои увеличивается до 34,54%, биофлавоноидами гречихи в концентрации 10"5% до 27,80%, , вытяжкой из биогумуса в концентрации 1,5*10"4% до 24,50%.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

- На основе лектинов пшеницы и сои, активного вещества биогумуса, биофлавоноидов гречихи, ЛТП - комплекса гриба Ascochyta Пег перспективно создание нового класса фитоиммуномодуляторов и стимуляторов роста и развития растений.

- Наиболее перспективными для внедрения в производство являются фитоиммуномодуляторы на основе биофлавоноидов гречихи, полученные из отходов производства (соломы) и лектинов семян сои применяемых в низких концентрациях (10"5%)

- Применять препараты следует путем предпосевной обработки семян и двукратного опрыскивания в период бутонизации и цветения. Расход раствора при замачивании семян 10 л/т, а при опрыскивании растений 400 л/га.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Нами; выделены биологически активные природные компоненты биогумуса, растений, грибов; обладающие иммуномодулирующими свойствами. Установлено, что фитоиммуномодуляторы, подавая сигнал растительной, клетке, ускоряют иммунные реакции, повышают активность антиоксидантной системы (супероксиддисмутаза, пероксидаза, каталаза и др.): Наибольшее увеличение активности ферментов происходит в варианте с обработкой лектинами пшеницы, в концентрации

Активность - СОД увеличивается!, на 16,5 %,. пероксидазы на 453,8 %, катал азы на 64,4%, по сравнению с контролем. Активность ферментов под действием фитоиммуномодуляторов в неустойчивых и среднеустойчивых сортах гороха на порядок выше, чем у устойчивых сортов. Активность, каталазы в побегах гороха увеличивается; а в корнях снижается, что объясняется конкурентным действием пероксидазы, активность которой возрастает.

Снижение концентрации биофлавоноидов гречихи до незначительно уменьшило активность ферментов по сравнению с концентрацией 10"4% , что дает возможность снизить расход препарата.

Лабораторными исследованиями установлено, что в рейтинговой оценке фитоиммуномодуляторов против семенной инфекции гороха «Норд» ведущее место принадлежит препарату, созданному на, основе ЛТП' -комплекса в концентрации 10"5% и иммуномодулятору на основе лектинов пшеницы в концентрации, 10"6%. Зараженность семян грибковой инфекцией в этих вариантах уменьшилась на 30,5 и 35,0 % соответственно. Уменьшение заражения; патогенной микрофлорой семян гороха' происходит за счет усиления, иммунитета, что было показано в лабораторных опытах при изучении антиоксидантной системы растений. '

В полевых условиях наименьшее развитие ■ корневых гнилей наблюдалось в фазу бутонизации при обработке лектинами пшеницы в концентрации при этом развитие болезни сократилось на 147,9%, по сравнению с контролем. Это объясняется тем, что действие иммуномодулятора при обработке семян не пролонгируется на дальнейший этап развития растений и требуется дополнительное воздействие, достигаемое путем двукратного опрыскивания, усиливающее иммунитет.

Установлено, что наименьший процент развития ржавчины (на 49,2%) наблюдался на горохе «Норд» при обработке лектинами пшеницы в концентрации 10"5%.

Предпосевная обработка гороха* устойчивого сорта «Фараон» фитоиммуномодуляторами из лектинов пшеницы и сои сократило численность гороховой, тли на 49,65-57,58 % по сравнению с контролем. Через Ю дней после опрыскивания численность гороховой тли снизилась.на 0,5-33,23 %, а через 20 дней после опрыскивания численность гороховой тли была на 23,12-27,21 % по сравнению, с контролем, в зависимости от источников лектинов.

Наименьшее количество трипсов зафиксировано в вариантах с применением иммуномодуляторов на основе биофлавоноидов гречихи и лектинов сои (на 43,6 % ниже контроля).

Анализ поврежденности семян гороха сорта «Батрак» гороховой плодожоркой и зерновкой выявил эффективность иммуномодулятора на основе биофлавоноидов гречихи. Процент повреждения семян плодожоркой на данных вариантах был наименьшим и составил 17,5-43,5 %, соответственно.

Снижение численности фитофагов на горохе объясняется усилением иммунитета; который сопровождается дополнительным синтезом лигнина в клеточных стенках.

Наибольший прирост зеленой массы гороха «Фараон» отмечен в варианте с применением иммуномодулятора на основе биофлавоноидов гречихи, где этот показатель увеличился на 8,8 по сравнению с контролем.

Одновременно с увеличением площади листовой поверхности под влиянием биофлавоноидов гречихи в концентрации происходит рост фотосинтетического потенциала гороха на 52,8%, по сравнению с контролем.

Предпосевная обработка семян гороха с двукратным опрыскиванием щелочной вытяжкой из биогумуса повышает урожай семян на 12,0 %, ЛГП-комплексом - на 5,5 %, лектинами пшеницы - на 11,0 %, лектинами сои - на 13,0 %, биофлавоноидами гречихи - на 14,0 %, по сравнению с контролем.

При обработке пшеницы «Дарья» иммуномодулятором на основе биогумуса совместно с химическим препаратом «Винцит, СК» увеличивается полевая всхожесть семян гороха на 27,37 %, высота растений на 11,3-20,8 %, зеленая масса растений на 45,6 % и урожайность на 15,4 % , по сравнению с контролем.

Применение фитоиммуномодуляторов на горохе повышает рентабельность производства до 34,54%. В вариантах с обработкой лектинами сои рентабельность увеличивается до 34,54%, биофлавоноидами гречихи в концентрации 10"5% до 27,80%, , вытяжкой из биогумуса в концентрации 1,5*10"4% до 24,50%.

Наиболее перспективными для внедрения в производство гороха являются фитоиммуномодуляторы созданные, на основе лектинов сои и биофлавоноидов гречихи, они наиболее технологичны и экономически выгодны.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата сельскохозяйственных наук, Бородин, Дмитрий Борисович, Орел

1. Авалаев, A.M. Множественная и гормональная регуляция содержания лектина в корнях проростков пшеницы/А.М.Авальбаев, М.В. Безрукова, Ф.М.Шакирова//Физиология растений.-2001.-Т.48,№5,-С.118-122.

2. Азимов, Д.А. Вермикомпостирование позволяет оздоровить почву и повысить урожай / Д.А.Азимова // Земледелие.- 1991.-№7.-С.22-25.

3. Алексидзе, Г.Я. Выделение лектинов и их возможных рецепторов из корнеплода сахарной свеклы / Н.П.Королев, И.Л.Семенов, Э.И. Выскребенцева // Физиология растений. 1983. - Т. 30, вып. 6. -С.1069-1076.

4. Алексидзе Г.Я., Модель организации на мембране тилактоидов цикла Кальвина с участием лектина фотосистемы/ Г .Я. Алексидзе, А.И. Выскребенцева //Физиология растений. 2002. - Т. 49, № 1. - С.148-154.

5. Алешин,В.Н. Лектины: свойства, сфера применения и перспективы исследования/ В.Н.Алешин, В.Т.Лобанов, А.Д.Минакова// Изв.вузов. Пищевая технология.-2005.-№1.С.5-7.

6. Андреева, В А. Фермент пероксидаза: участие в защитном механизме растений / В.А.Андреева.- М.: Наука, 1988. С.128.

7. Антонюк, Л.П. О роли агглютинина зародышей пшеницы в растительно-бактериальном взаимодействии: гипотеза и экспериментальные данные в ее поддержку / Л.П. Антонюк, В.В. Игнатов //Физиология растений. 2001. - Т. 48, № 3. - С.427-433.

8. Бабоша, A.B. Лектины и проблема распознавания фитопатогенов растением-хозяином/ А.В.БабошаII Журнал общей биологии.-2008.-Т. 69, № 5.- С. 379-396.

9. Бараненко, B.B Супероксиддисмутаза в клетках растений/В.В. Бараненко//Цитология.-2006.- Т 48, № 6,- С. 465-474.

10. Баромидзе, В.Г. Выделение индуктора защитных реакций картофеля из возбудителя фитофтороза / В.Г. Баромидзе, Л.И. Чкалова, Л.А. Юргалова, О.Л. Озерецковская //Биохимические методы.-М.: Наука. -1980. -С.55-59.

11. Березовский, В.М. Химия витаминов / В.М. Березовский. М.: Пищепромиздат,- 1959. -С. 599 .

12. Битюцкий, И.А. Влияние червей на трансфомацию органических субстратов и почвенное питание растений / И.А.Битюцкий, Е.И.Лукина, В.Г.Паункевич // Почвоведение. 1998.- №3.- С.309-315.

13. Борисова, H.H. Субмитохондриальное распределение лектиновой активности в осевых органах проростков кормовых бобов разного возраста / H.H. Борисова, Э.И. Выскребенцева //Физиология растений. 1997. - Т.44. - № 3. - С.317-331.

14. Ботуз, Н.И. Физиолого-химическая характеристика и биологическая активность биогумуса, полученного н а основе дождевого червя «старатель» : автореф. дис.канд.с/х.н: 03.00.23./ Ботуз Наталья Ивановна.-0рел,2007.-23с.

15. Букин, В.Н. Витамины / В.Н. Букин. М.: Пищепромиздат, 1940. -С.472

16. Владимиров, Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран/ Ю.А.Владимиров//Биофизика.-1987.-Т.32.-№5.-С.830-844.

17. Гагарина, И.Н. Лектины как компоненты составляющие белковый комплекс фасоли/ И.Н Гагарина, Н.Е.Павловская// Организация и регуляция физиолого-биохимических процессов: международный сб. научн. Работ.-Воронеж:ВГУ, 2004.Вып.6.-С.51-54ю

18. Гагарина, И.Н. Лектины фасоли как маркеры групп крови/ И.Н Гагарина, Н.Е.Павловская, М.П. Мирошникова//Физиологические аспекты продуктивности растений: материалы научн.-метод. Конфер.-Орел, 2004.-Ч. 1 .-С.254-256.

19. Горькова, И.В. Динамика накопления флавоноидов в онтогенезе ^ гречихи и биохимические изменения семян в процессе хранения:дис.канд.с/х.н. 03.00.12./ Горькова Ирина Вячеславовна.-Орел, 2002.С.35-38.

20. Гуринович, О.И. Электрофоретический состав и иммунохимическая характеристика белков семян зерновых и бобовых культур / О.И. Гуринович, С.А. Гоник, В.И. Володин // Научные труды ВНИИ ЗБК, Орел. 1976. - Вып. IV. - С.78-94.

21. Давлетов, Ф.А. Гороховая зерновка и меры борьбы с ней / Ф.А.Давлетов, Д.Ф.Нуриахметов // Зерновое хозяйство.- 2002.- №1.-С.24.

22. Дмитриев, А.П. Сигнальные молекулы растений для активации защитных реакций в ответ на биотический стресс / А.П.Дмитриев // Физиология растений.-2003.- Т.50.-№ З.-С. 465-474.

23. Доспехов, Б. А. Методика полевого опыта / Б.А.Доспехов.-М.: Агропромиздат, 1985.-С.351.

24. Дьякон, Ю.Т. Что общего в иммунитете растений и животных? / Ю^Т.Дьякон, С.Ф.Багирова // Природа.-2001.-№ 11.- С. 1-10.

25. Ежов, Г.И. Руководство к практическим занятиям по сельскохозяйственной микробиологии / Г.И.Ежов.- М.: Высш.шк., 2001.-С.15-20.

26. Ермаков, А.И. Методы биохимического исследования растений / А.И.Ермаков.- М.: Агропромиздат, 1987.- С.41-43.

27. Зауралов, O.A. Влияние продолжительности предпосевной обработки семян регуляторами роста на прорастание и содержание в них фитогормонов/О.А.Зауралов,Т.С.Колмыкова,А.С.Лукатин// Сельскохозяйственная биология.-1997.-№ 1 .-С.80-84.

28. Зотиков, В.И. Сорта полевых культур научно-исследовательского института зернобобовых и крупяных культур. Каталог./В.И.Зотиков, Т.С. Наумкина, Н.В. Грядунова, В.С.Сидоренко//Изд-во ОАО «Типография «Труд», Орел,2007.-С.35.

29. Зотиков. В.И. Перспективная ресурсосберегающая технология производства гороха. / В.И. Зотиков, М.Т. Голопятов, Г.А.Борзенкова//Метод.рек.-М.:ФГНУ «Росинфрмагротех», 2009.-С.25-47.

30. Иваненко, Л.Е. Биохимия витаминов/ Е.Ф. Иваненко. — Киев: Высш. Школа.- 1997.- С.210.

31. Игонин, A.M. Биопереработка навоза с помощью технологии дождевых червей / А.М.Игонин // Международный агропромышленный журнал.-1991 .-№5.-С. 100-104.

32. Карташов, А. В. Роль систем аниоксидантной защиты при адаптации дикорастущих видов растений к солевому стрессу/. А. В. Карташов, Н. Л. Радюкина, Ю. В. Иванов//Физиология растений.-2008.- Т. 55, № 4.-С.516-522.

33. Кириченко, Е.В. Влияние лектина из семян сои на продуктивность сои/ Е.В. Кириченко, Л.В.Титова, С .Я Коць, А.В.Жемойда, С.В.Омельчук,

34. B.Ф. Марьюшкин //Агрохимия. 2004. - № 11. - С.58-62.

35. Кириченко, Е.В. Влияние лектинов бобовых растений разной специфичности на развитие проростков сельскохозяйственных культур/ Е.В. Кириченко, Л.В.Титова, А.В.Жемойда, С.В.Омельчук //Физиология и биохимия культ. Растений. — 2004. — Т.36, № 4-5.1. C.25-28.

36. Кириченко, Е.В. Влияние лектитнов бобовых растений на проявление симбиотических свойств клубеньковыми растениями в бобово-рибобиальном симбиозе / Е.В. Кириченко, С.М. Маличенко //Физиология растений. 2000. - Т. 47, № 2. - С.221-225.

37. Кириченко, Е.В.Специфического экзогенного лектина на развитие растений сои в ранних фазах онтогенеза/ Е.В. Кириченко, Л.В.Титова,

38. A.В.Жемойда, С.В.Омельчук //Онтогенез рослин, бюлопчна фжсащя молекулярного азоту та азотной метаболизм. Терасполь. — 2001. С.78-81.

39. Княгичев, М.И. Биохимия культурных растений/ Т.1.-М.: Сельхозгиз, 1958.- 156 с.

40. Ковалёв, В.М. Методологические принципы и способы применения росторегулирующих препаратов нового поколения в растениеводстве /

41. B.М.Ковалев, М.МЛнина // Аграрная Россия.- 1999.-№1(2).- С.9-12.

42. Колотилова, А.И. Витамины (химия, биохимия и физиологическая роль)/ А.И. Колотилова, Е.П. Глушанков. JL: Изд-во Ленингр. ун-та, 1976.-С.221 .

43. Колупаев, Ю.Е. Активность супероксиддисмутазы и каталазы в колеоптилях пшеницы при действии пероксида водорода и нагрев/ Ю.Е.Колупаев, Ю.В. Карпец// Физиология и биохимия культурных растений.- 2007.-Т.39, № 4.,-СЗ19-325.

44. Комарова, Э.П. Лектины стеблей апексов рудбекии и периллы в процессе перехода к цветению под воздействием фотопериодической индукции / Э.П. Комарова // Прикладная биохимия и микробиология. 1998. — Т.34, № 1. — С.108-114.

45. Конин, С.С. «Альтернативы биогумусу нет»/ С.С.Конин // Знамя труда. -2003.-№43.с. 12-13.

46. Конин, С.С. Биологическое земледелие залог долголетия и здоровья населения / С.С.Конин, Д.А.Алтунин, И.Н.Титов // Материалы 2-й Международной науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв», Владимир, 17-19 марта 2004г.- Владимир, 2004.С.34-35.

47. Конин, С.С. Вермикультура и основные этапы ее развития / С.С.Конин // Хронометр-Владимир.- 2003.- №13.С.23-24.

48. Косенко, Л.В. Воздействие лектина гороха на клубеньковые бактерии гороха при их росте на различном азотном фоне/ Л.В. Косенко, Л.Д.Вабанец, Н.В. Мандровская //Тез. докл. на VI съезде общества физиол. раст. Россия. М.: 4-9 окт. 1999.С25-27

49. Косенко, Л.В. Сортовые различия углеводсвязывающих свойств лектинов из семян Vicia Jabe / Л.В. Косенко //Физиология растений. -2002. Т. 49, № 6. - С.859-864.

50. Косенко, Jl.В. Сравнительная характеристика углевод связывающих свойств лектинов из семян бобовых растений / Л.В. Косенко //Физиология растений. 2002. - Т. 49, № 5. - С.718-724.

51. Котова, В.В. Корневые гнили зернобобовых культур/ В.В. Котова.-Л.гАгропромиздат, 1986.-С.44-49.

52. Кравец, А.Ф. Участие фенолов и пероксидаз в проявлении защитных реакций к возбудителю бурой ржавчины: автореф. дис. канд. биол. наук.- Киев: КГУ, 1979.-20 с.

53. Кудряшов, Б.А. Биологические основы учения о витаминах / Б.А. Кудряшов. М.: Сов. Наука.-1948. - С.240-249.

54. Лепехин, Е.А. Распределение и активность лектинов в субклеточных корней проростков кукурузы / Е.А. Лепехин // Физиология растений. — 1987. Т.34, вып.1. - С.134-160.

55. Луцик, М.Д. Лектины/ М.Д. Луцик, E.H. Панасюк//. Львов: Вища школа. - 1981.-С. 122.

56. Марков, Е.Ю. Лектины растений: предполагаемые функции / Е.Ю.Марков, Э.У. Хавкин //Физиология растений. — 1983. Т.30, вып.5. - С.852-867.

57. Мельник, И.А. Вермикультура и её продукт биогумус / И.А.Мельник, И.П.Карпец // Химизация с/х. 1990.-№10.-С.14-17.

58. Мельник, И.А. Ещё раз о вермикультуре / И.А.Мельник, И.П.Карпец // Химизация с/х.- 1991.-№5.-С.73-75.

59. Мерзлая, Г.Е. Положительное действие биогумуса на дерново-подзолистой почве при выращивании кукурузы / Г.Е.Мерзлая, О.Л.Мишунина, О.Л.Паничкина // Доклады РАСХИ.-1994.-№6.-С19-20.

60. Метлицкий, Л.В. Как растения защищаются от болезней./Л.В.Метлицкий, О.Л. Озерецковская.-МгНаука.-1985.-С. 155157.

61. Метлицкий, Л.В. Фитоалексины и индуцирование устойчивости картофеля к инфекционным болезням / Л.В. Метлицкий, О.Л. Озерецковская, Л.И. Чалова, Н.А.Дорожкин / Результаты научных исследований — в практику сельского хозяйства.-М.: Наука.-1982. -С. 34-46.

62. Мосолов В.В., Участие протеолитических ферментов и их ингибиторов в защите растений/В.В. Мосолов//.- Обзор прикладная биохимия и микробиология, 2001.-Т.37.- №2, -С. 131-140.

63. Мишустин, E.H. Микробиология / E.H. Мишустин, В.Т. Емцев.-М.:Агропромиздат.-1987.-368с.

64. Озерецковская, О.Л Индукция системной устойчивости картофеля к болезням с помощью биогенного элиситора защитных реакций/ О.Л. Озерецковская, Л.И. Чалова, К.А. Караваева// Изв. АН СССР. Сер. Биол.-1986.-№1.-С.24-31.

65. Озерецковская, О.Л. Индуцирование устойчивости растений / О.Л.Озерецковская. //-Аграрная Россия.- 1999.- №1 (2).-С.4-9.

66. Озерецковская, О.Л. При использовании элиситоров для защитысельскохозяйственных растений необходима осторожность /

67. О.Л.Озерецковская, Н.И.Васюкова // Прикладная биохимия и микробиология. -2002. -том 38.-№3. -С. 322-325.

68. Орлов, Д.С. Гуминовые вещества вермикомпостов / Д.С.Орлов, О.Н.Бирюкова// Агрохимия.-1996.-№7.- С.60-67.

69. Павловская, Н.Е. Методические рекомендации по оценке устойчивости генотипов гороха к возбудителям фузариоза и аскохитоза с помощью биохимических тестов / Н.Е.Павловская, О.А.Шалимова, Е.Ф.Азарова.-Орел: ОрелГАУ, 2001.- С.21.

70. Павловская, Н.Е. Физико-химические свойства экстрактов из биогумуса различной степени зрелости / НЕ.Павловская, А.М.Даниленко // Сорбционные и хромотографические процессы.-2005.- №6.-С.68-69.

71. Паду, Э.Х. Свойства пероксидазы и фенилаланинаммиаклиазы при образовании и лигнификации клеточных стенок стебля пшеницы // Физиология растений.-1995.-Т.42.- С.408-415.

72. Пономаренко, С.П. Биотестирование растений / С.П.Пономаренко, Э.Г.Гашников // Аграрная Россия.- 1999.-№1(2).- С.15-16.

73. Плешков, Б.П. Биохимия сельскохозяйственных растений. Изд.З-е. -М.: Колос, 1975.-С.497.

74. Роговин В.В., Муравьёв P.A., Акимов Б.С., Бавыкина И.В. Пероксидасомы растительных клеток/В.В. Роговин, Р.А.Муравьев, Б.С.Акимов//Физиология растений.- 1987.-Т. 34, вып. 6.- С.1181-1185.

75. Рогожин В.В. Пероксидаза как компонент антиоксидантной системы живых организмов/В .В. Рогожин//-СПб.:ГИОРД, 2004.-С.222-230.

76. Савич, И.М. Пероксидазы стрессовые белки растений / И.М.Савич // Успехи современной биологии.-1989.-Т.107, вып.З,- С.406-415.

77. Старостин, С.П. Вредители, болезни и сорняки гороха и меры борьбы с ними / С.П.Старостин, В.В.Котова, И.А.Цветкова // Защита растений.S1988.- №3. С.14-15.

78. Тарчевский, И.А. Патоген индуцируемые белки растений (обзор) / И.А.Тарчевский // Прикладная биохимия и микробиология.- 2001,-Т.37.-№5.- С.517-532.

79. Титов, И.Н. Новые фармацевтические препараты из дождевых червей / И.Н.Титов, С.С.Конин // Материалы 2-й Международной науч,-практ.конф. «Дождевые черви и плодородие почв», Владимир, 17-19 марта 2004г.- Владимир.-2004.-С24-26.

80. Титов, У.В. Распределение лектинов по тканям винограда / О.С. Соколова, А.Д. Володарский // Физиология растений. — Т.39, вып.1. — 1992. — С.40-47.

81. Трач, В.В. Супероксиддисмутаза как компонент антиоксидантной системы растений при абиотических стрессовых воздействиях/ В.В. Трач, В.А.Стороженко// Физиология и биохимия культурных растений.- 2007.-Т.39.-№ 4.-С291-302.

82. Третьяков, H.H. Физиология и биохимия растений / H.H. Третьяков, Е.И. Кошкин, Н.М.Макрушин и др.-М.:Колосс.-2000-С.640.

83. Труфанов, A.B. Биохимия витаминов и антивитаминов / A.B. Труфанов// Ярославль: Колос.-1972. — С.328.

84. Тутельян, В.А. Биологически активные добавки к пище в современной медицине/ В.А. Тутельян //Вопросы питания. — 1995. №3. - С.38-47.

85. Тютявкина, H.A. Природные флавоноиды как пищевые антиоксиданты и биологически активные добавки / H.A. Тютявкина //Вопросы питания. 1996 - №2. - С. 33-35.

86. Халеева, З.Н. Болезни гороха. Распространение вредителей и болезней сельскохозяйственных культур в СССР в 1963 г./З.Н.Халеева, Н.А.Тихонова// Тр. ВИЗР. Вып. 22. JL: Главполиграфпром.- 1964.- С. 238-243.

87. Чалова, Л.И. Изолирование и характеристика индуктора защитных реакций картофеля из цитоплазматического содержимого возбудителя фитофтороза/ Л.И. Чалова, В.Г. Барамидзе, Г.И. Чаленко//Докл.АН СССР.-1977.-Т.235.№5.-С.1215-1218.

88. Черемисинов Н.Я. Борьба с ржавчиной и бактериозами гороха и кормовых бобов./Н.Я. Черемисинов, ПЛ.Хижняк. -М.: Колос.-1964. -С.8.

89. Черников, В.А. Агроэкология / В.А.Черников, А.И.Черкас.-М.:Колос.-2000.-С.382-384

90. Чернова, Н.М. Зоологическая характеристика компостов / Н.М.Чернова.- М.: Наука, 1996.-С.150-153.

91. Шакирова, М.В. Современные представления о предполагаемых функциях лектинов растений/ Ф. М. Шакирова, М. В. Безрукова// Журнал общей биологии.-2007.-Т.68,Стр. 109-125

92. Шакирова, Ф.М. Механизмы регуляции накопления лектина в побегах пшеницы при засолении./ М.В^Безрукова, A.M. Авальбаева, P.A. Фатхутдинова //Физиология растений. — 2003. Т. 50, № 3. - С.341-345.

93. Якименко, О.С. Промышленные гуминовые препараты: перспективы и ограничения использования / О.С.Якименко // Материалы 2-й Международной науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв», Владимир, 17-19 марта 2004г.-Владимир, 2004.-С.34-35.

94. Ямалёева, A.A. Лектины растений и их биологическая роль/ A.A. Ямаляева/. Уфа: БашГУ.- 2001. - С.137-144

95. Albanell, J. Chemical changes during vermicomposting of sheep manure mixeo with cotton industrial' wastes / J.Albanell, J.Plaixats, T.Cabrero // Biology and Fertility of Soils.-1988.-V.6, №3.- P.266-269.

96. Amrhein, N. Biosynthesis of cyanidin in buckwheat hypocotyles. // Phytochem./- 1979. V. 18, № 4. - P. 585-589.

97. Arora, R.K., Baniya B.K., Joshi B.D. Buckwheat Genetic Resources in the Himalayas: Their Diversity, Conservation and Use. // Current Advances in Buckwheat Research. 1995.-P. 39-45.

98. Avadham, P.N. Biochem. Physiol.- 1971. P. 385-387.

99. Bassler, R. Der Einfluss ökologischer und ontogenetischer Faktoren auf die Flavon von Fagopyrum sagitatum Gilib. // Pharmazie. 1957. № 12 (11). -P. 758-772.

100. Blaim K., Badania und Rutingehalt verschidener alt en Blatter bei Fagopyrum Arten. - Raczn. nauk. roln., 1960, Alt. 81.- № 3.- P. 621-629.

101. Boratynska, W. Zawortose rutyny w tetraploidalych rodach griki zwyczajney (Fagopyrum sagittatum Gilib.). // Blum. Inst, rosl.' Leczn. 1960. V. 6, №2,-P. 164-168.

102. Bowles, D.J. Distribution of lectins in membranes of soybean in root, shood and leaftissues at differetnt stades of growth. //Planta. 1997. - V.Î45, № 2. -P. 193.

103. Brewin, N.J., Kardailsky I.V. Legume Lectins and Nodulation by Phizobium. // Trends Plant Sei: 1997. - V.2. - P.92-98.

104. Bushuk, W. And Zillman R. Whear cultivar identificatuon by gliadin electrophoregrams. I. Apparatus,, method and nomenclature Can. J. Plant Sei., 1978,- P.505-515.

105. Casnineirfs, L. The origin of Phaseolus Vulgarus L. in Cuba. Phaseolin patterns and their relationship with morphoagronomical treits. //Plant Genet. Resources Newsletter Rome. 1994. - № 99. - P.25-28.

106. Chang, W.S. et al. Inhibitory effects of flavonoids on xanthine oxidase. //Anticancer Res. 1993. - V. 13, № 6A, P. 2165-2170.

107. Childress, C.C. Oxidative and phoshorylative activités of mitochondria isolate from pea root tissues. //Plant Physiol. 1965. - V.40, № 3. - P.752-756.

108. Das M.L. Isolation and chemical characterization of bound, niacin in cereal grains. // J. Biol. Chem. 1968. -V. 243.-No 1.P. 235-341.

109. Dietrych-Szostak D. Effect of processing on the flavonoid content in buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench) grain. J Agric Food Chem.-1999 Oct;47(10).-P.4384-4387.

110. Erlund, I. Pharmacokinetics of quercetin from quercetin aglycone and rutin in healthy volunteers. //Pharmacokinetics and Disposition Springer-Verlag Volume 56 Issue 8.- 2000.-P. 443-447.

111. Fleckenstein, J. Schwermetallaufhahme aus Mullkompost durch den Regenwurm E.f. / J.Fleckenstein, O.Graff.- Landbauforschung Völkenrode, 32.- 1982.-№.4.- P.202.

112. Formica, V., Regelson W. Review of the biology of quereetin and related bioflavonoids. //Fd. Chem. Toxic. 1995. -V. 33, №12. -P.1061-1080.

113. Frey, P. Watson GJ. Chemical studies on coats. Thiamin niacin, riboflavin and pantothenic acid. // Cereal Chem. 1950. V. 43, № 1. - P. 262-293.

114. Gepts, P., Kmiecik K., Pereirc P., Bliss F.A. Dissemination pathways of common bean (Phaseolus vulgaris, Fabaceal) deduced from Phaseolin electrophoretic variability. 1. The Americas. //Econ. Bot. — 1988. — V. 42, № 1. P.73-85.

115. Gerts, P. Phaseolin-protein variability in wild forms and landraces of the common bian (Phaseolus vulgaris): evidence for multiple centers of domestication. //Econ. Bot. 1986. - V. 40.- № 4. - P.451-468.

116. Hattori, S. Glycosides of flavones and flavonols. In: The chemistry of Flavonoid Compounds. Oxford - London - New York - Paris: Perg., Press.-1962, P. 317-352.

117. Hertog, M.G. Flavonols in wine and tea and prevention of coronasy heart diseas. /Polyphenols 96. Ed. INRA. Pars - 1998. P. 117-131.

118. Hertog, M.G. Intake of potenti ally anticarsinogenic flavonoids and their determinants in adults in the Netherlands. // Nutr.Cances, 1993. v. 20, P. 21-29.

119. Hussain, A. Electrophoretic analysis of field pea cultivars. //Pisum Newsletter Geruva. № 1. - 1998. - V. 20. -P.16-19.

120. Kaemmer, D. Oligonucleotide fingerprinting of tomato DNA. Plant Breed, 1995.-Vol. 114.- № 1.-P. 12-17.

121. Kauss, H., Some properties of carbohydrate bilding protein (lectins) solubilizied from cell wall of Phaseolis aureus. //Planta. 1996. - V.130, №.2.-P. 169-214.

122. Kijum, J.W. Pea lectins and the recognition of Rhizobium leguminosarum. //Pleant Sci Lett. 1982. - 18. - № 1. - P.65-74.

123. Kilpatric, D.C. Tissue and subullular distribution of the lectins from Datura stamonium (thorn apple). //Biochem. J. 1979. - V. 184, № 2. -P.215.

124. Konopska, L. Nitrogen and phosphorus compounds in the aleurone grains of iris pseudoacrus endosperm and Pisum sativum cotyledons. //Acta Soc. Bot. Pol. -1973. V. 42, № 4. - P. 533-540.

125. Kotytnyk, W. Composition of lipids of lima beans and curtain other beans. J. Sci. Tood Agr. 14.- 1963.-P 841-844.

126. Kozik, A. Thiamin-Binding Protein from Buckwheat Seeds: Some Molecular Properties, Ligand-Protein interaction, Bioanalytical Applications. //Current Advances in Buckwheat Research. 1995. - P. 823831.

127. Kraic, J. Biotechnology approaches in maintenance and evaluation of plant genetic resources. Crop science on the verge of the 21st century opportunities and challenges. — Prague, 2001. -P.22-23.

128. Krause, J. "Rutin'aus den Kotyledonen von Fagopyrum esculentum Moench. bestehtaus 2 verbindungen. //Z. Pflanzenphysiol. 1976. - Bd 79, № 3.- S. 281-282.

129. Krause, J. Reznik H. Identefezierung von Phenylpropanderivaten aus den Laubblattern von Fagopyrum esculentum Moench. //Z. Pflanzenphysiol. -1972. Bd 68, № 2. - S. 115-120.

130. Kummer, H. Characterization of a lectinbilding storage protein from pea (Pisum Sativum). //Biol. Chem. Hoppe. Seyler. - 1998. - 369. - № 8. -P.639-646.

131. Lakowski, M. //Annual. Rev. Blockem. 1980. - V. 49. - P.593-626.

132. Liol, L. Electrophoretic variation and geographical distribution of the seed protein phytoremagglytinin in cultivated Fhaseolus vulgaries L. //J. Gened Breen. 1991. - V.45, № 2. -P.97-102.

133. Lis, H. Sharon N. Lectins as molecules and as tools. //Ann. Rev. Blochem. -1986.- V.55. -P.35-42.

134. Makamura, A. Shinizu F., Kono J. Nature of lysolecitin in cereal grains. Complex formation of lysolecitin with starch. //Bull. Agr. Chem. Soc. -1958. V. 22, No l.-S. 127-221.

135. Marshal, H.G. Buckwheat: Description, breeding, production and utilization. //Advances in Cereal Science and Technology. 1983. -V.5. -P. 157-210.

136. Murdock, L. L., Shade R. E. Lectins and proteas inhibitors as plant defenses against insects J. agr. Food Chem. 2002. - Vol. 50, № 22. - P.6605-6611.

137. Tomati, U. 11 vermicompost, dopo il suo inserimento nella tabella ufficiale della legge 748/84 / U.Tomati, E.Galli, A.Grappelli // L,Informatore Agrario.-1987.- V.43, №30.-P.51-54.

138. Tomati, U. Fertilizers from vermiculture as an option for organic wastes recovery / U.Tomati // Agrochemica.-1984.-V.27, №2/3.- P.244-251.

139. Tomati, U. The alternative "earthworm" in the organic wastes recycle / U.Tomati, A.Grappelli, E.Galli // Processing and use of organic sludge and liquid agricultural wastes.- 1986. P.510-514.

140. Tomati, U. The hormone like effect of earthworm cast on plant growih / U.Tomati, A.Grappelli, E.Galli // Biology and Fertility of Soils.-1988. V.5, №4.- P.288-294.

141. Tomati, U. Wurmhumus / U.Tomati // Agrochemica.-1983.-V.26.-№4.-P.126-127.

142. Ventura, M., Mateus V.M., Xaries E.J., Azeredo Moreiro R., Menezes. Aquino A., de Rhera P. Augusto. A trypsin and chymotrypsin inhibitor andreeralution of earlier, resutts / An. Acad, brasie. ciens. 1971.-41.- №1.-P. 233-243.

143. Vittozzi, L. The phytogenesis of protein a-amylase inhibitors from wheat seed and the speculation of polyploid wheats. //Theor. Apll. Genet. 1976. -V. 48, № 3. — P.279-284.

144. Wagner, L. P., Riehm J. P. Arch. Biochem. and Biophys. 1967, V. 121, P. 672-674.

145. Zhi-Sazman, K. Functional mechanics of the plant defensive Griffonia simplicifolic lectin II: resistance to proteolysis in independent of glicocorjugate binding in the insect gut. J. econ. Entomol. 2001. - Vol. 94, №5.-P. 1280-1284.

Информация о работе

Бородин, Дмитрий Борисович
кандидата сельскохозяйственных наук
Орел, 2009
ВАК 03.00.12

Диссертация

Влияние фитоиммуномодуляторов на устойчивость к биотическим факторам и продуктивность гороха и пшеницы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы