Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние антистрессового препарата "аминовит" на морфологию надпочечных желез крыс и морфо-цитохимические показатели крови телят при транспортном стрессе

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Влияние антистрессового препарата "аминовит" на морфологию надпочечных желез крыс и морфо-цитохимические показатели крови телят при транспортном стрессе"



На правах руконнси

ШМИДТ ЮРИИ ДЛВЫД01ШЧ

ШН1ЯШ1Е АНТИСТРЕССОВОГО ПРЕПАРАТА АМИПОПШ НА МОРФОЛОГИЮ НАДПОЧЕЧНЫХ ЖЕЛЕЗ КРЫС II МОРФО-ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗА ГЕЛИ КРОПИ 1ЕЛЯ1 ПРИ ТРАНСПОРТНОМ СТРЕССЕ

03.00.25. - П1СЮЛОПГЯ, щполотя, клею-шая биолог и я

Автореферат диссертации на сомсканне ученой (пенени кандидата биологических, наук

11овосибирск-2003

РаСют винил пена л даборатрнн чзил нснишмш НопоснОпрско! о научи» пссл елояа I ел ).с К01 о лист тута травмаюжи ни и орюнедни и на ка<|<ел|Н! фэрмаколо! ин и оОшеГ| паюлопш 11овосибмрско1 о юсу да) к: г пе< I пои» аграрного университета

Научный руководитель: доктор медицинских наук, ^служенный

деятель науки РФ, иро(|>ессор 'За Й л май Л М

О фи ни ильные оппоненты: доктор биолш ическнх наук, 1'ябчикова I: И

кандидат биоло! ическнх наук, Дубинина 1111

Недущая организация: Новосибирский ■ осуларствениый университет.

Зашита состоится ¿-^А**-*^ 2003 г, на заседании диссертационного

совета Д 208.062.05 Новосибирской государственной медицинской акадаемни (630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирской Iосуларствегнюй медицинской академии.

Автореферат разослан « 2003 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

Л В. Волков

Wf о

//

ОЫЦЛН ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследив л пня. Животные peai нруюг itn стресс-флкт о|н,< мобилизацией утлеводных, минеральных п витаминных ресурсов. В ре тулг. iaic дополшттельпых затрат энергии организмом у животных снижается резистентность и продуктивность, увеличивается заболеваемость н ухудшается качество продукции (Демнерт Ь , Л., 1980, Усттшоп Д Л , 1995; Фомиче в ЮН. Лево-гпин Д.Л., 1999).

Транспортировка животных приводит к значительному повышению иио-коэм в кроен (Косенко Л,Я., 1999), изменяется концентрация в крови ферментов (Земков A.C., Ладян U.U., 1976), белков (Демчук В.Д, 1975), жирных кислот, электролитов, витаминов (Ьлинова Л С , Ковалева З.И , 1974) Но в литературе почти отсутствуют данные о современных цитохимических н шпоэнзн-машческих исследованиях кропи стрессуемых животных, в частности, нет результатов подобных исследований в условиях транспортного стресса у телят.

В нашей стране ведутся большие разработки в области изыскания эффективных средств борьбы^ со стрессами сельскохозяйственных животных (Кашин A.C., 1974,2000, Красота Л.А , 1974, 1999, Устинов ДА., 1976, 2001. Санцев Б., 1979; Радченко ВН., 1979,1982).

Невысокая эффект и bi юсть используемых сеюдня лекарственных веществ для профилактики стресса, вызванного транспортировкой животных, обусловлена недостатком данных о механизме развития стресса, чго затрудняет поиск веществ целенаправленного действия

Цель исследований. Изучить влияние транспортного стресса н антистрессового препарата «амнновш» на надпочечные железы крыс и цитохимические показатели крови телят.

Задачи исследовании:

1. Изучить стресс-прогективное действие и дать морфолотическ)ю оценку препарата «амнновит» в опыте на лабораторных животных;

2. Изучить влияние транспортного стресса на морфолот нческие, цитохимические показатели крови телят;

3. Изучить стресс-протею ивное действие и дать морфолот ическ>ю оценку влияния препарата «амииовит» на организм телят при транспортировке и в период адаптации их в условиях комплекса;

4. Установить оптимальную дозировку применения препарата амииовит.

Научная новтмл работы. Морфолот ическнми методами (свет ootrrnвеская микроскопия, гистохимия, цитохимия и морфометрнческнП анализ) детально охарактеризованы специфические структурные изменения надпочечных желез крыс при осциляторном стрессе, проведены цитохимические исследования крови телят при транспортом стрессе. 11а основании' комплекса морфоло-

3 I РОГ HAUИОН \..';ь»!\Ч i

f БИБЛ110TLK \ ;

ic l(f« pr,v,u i 2t»c ph ;

мггеских исследований дана характеристика влияния апсисIрессогнио прсна-ра1а па лпборятрпых живо г пых и )еляг Усыновлено, чю амшювш вшшиммй крысам, существенно снижает уровень истощения клекж пучковой зоны надпочечников иормализуег уровень секренин клеток момовою слоя Показано, что качественное и количественная перестройка капилярно-пзрен.хнмампных оруктур надпочечников при введении амшювита происходит за счет накопления линотропных факторов, которые нося г ресурсно-а дативный хараюер Выявлено, что применение ирепарага амииовит телятам при транегюртровке н в период адаптации к новым условиям улучшает пиюэизимашческне пока-эа!ели 1ранулоцнюв, снижая порог наступления сгадпн исющепия

Теоретическая п практическая значимое 1ь. Данные, полученные в исследовании морфологии надпочечников лабораторных животных и цитохимических показателей крови телят при транспортном стрессе дают основание для их дальнейшего изучения. Материалы могут быть использованы в преподавании курса нормальной анатомии, гистологии и эмбриологии, натоло! ическоп физиологии, патологической анатомии и фармакологии в высших учебных заведениях.

Выявленные стресс-протективные характеристики препарата позволяют при его использовании снижать вероятность экономическою ущерба н сократить болезни желудочно-кишечного тракта, болезни органов дыхания за счег повышения уровня адаптивно-энергетических ресурсов организма

Положения диссертации выносимые па защиту:

1. Морфологические изменения надпочечников крыс в условиях ратной напряженности оецнляторного стресса имеют различную степень структурной адаптации и высокую вариабельность деструктивных1 декомпепешиюпных проявлений.

2 Структурно-функциональные изменения надпочечников крыс при введении амииовпта характеризуется наличием пластических резервов (глико-1ен, липнды) удовлетворяющих напряженную функцию желез в условиях стресса.

3. Изменение количественного клеточного сос!ава крови теляг в условиях транспортного стресса отражают напряженность в обеспечении постоянства внутренней среды и выявляют первичные факторы стадии не ющепия

4, Применение препарата амииовит телятам при транспортировке, улучшает основные шггоэнзимотические показатели гранул о шпов, обеспечивая высокий ресурс организма в период адаптации к новым условиям

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на 1-П региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы в ветеринарии», 10-12 марта )999г., г. Новосибирск; Ш-й региональной научно-

практической конференции «Лмуальнме вопросы п ветеринарии». 12- f ** января 2001г., г. Новосибирск; Межрегиональной науч -пракгпч конф «Лк1>ниь-ные вопросы ветеринаркой медицины мелких домашних животных» Мовосп бнрск, 2002; Межрегиональной науч -нрактнч конф «Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных» i Ioboch бнрск, 2003

11убликащш результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 3 работы.

Объем к структура диссертации. Диссертация состоит из введения, ofv зоря литерагуры. собственных исследований, обсуждения результатов, вмпо-доп, предложении, списка литературы it приложения Материал диссертант! изложен на Ml странице, иллюстрирован 17 таблицами и 22 рисунками Список литературы включает 190 источника, в том числе 60 - иностранных anto-ров,

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал к методы исследования

Работа выполнена в лабораториях патогистологии Новосибирскою научно-исследовательского ннстигута травматологии н ортопедии и на кафелре фармакологии к обшей патологии Новосибирского государственного аграрного университета.

Фитко Р. с соавторами (1979) установили, что механизмы cipecca у сельскохозяйственных животных едины с механизмами, открытыми Г Селье для экспериментальных животных, в связи с этим нами были проведены предварительные исследования воздействия стрессов па лабораторных животных

JIабораторпыП эксперимент. В опыте использовали крмс самцов линии Вистар массой 250-280 г, подобранных в труппы но пять животных У крыс моделнровалн осцнлляториый стресс качанием па шуттель аппарате (Кашин A.C., 1975).

Первая серия эксперимента. В опыте использовали 4 группы крыс по 1 животных в каждой группе. 1, 2, 3 группы стресс провал и 2, 3, 4 часов соответственно. 4 группа служила ннтаетнмм контролем

Вторая серпя эксперимента (табл.1) Целью данной серии являлось изучение стресс-протективного действия препарата «аминовит» В опыте использовали 5 групп крмс по 5 животных в каждой.

Препарат вводили шприц-катетером - за 30 мин до стрессирования Аминовит готовили на 2,5%-м растворе крахмала. Время стрессирования 3 ч

В каждой серии опыта проводили взвешивание животных до и сразу после стрессирования. Убой лабораторных животных (декапптацню) проводили сразу после окончания стрессирования.

ТяПлнцл I

Схема омы ia

1 pymia Препарат До« Путь введения Крягность «ведения

1-Я ONblllia* Амн попит 10 MI/M Внутрь Однокрашо

2-я опыт им Ампновит 20 мг/кг. Внутрь Однократно

3-я опытная Лмшювнт 30 мг/кг Внутрь Однократно

4-я контроль стресс встэдеЯ- СТВНЯ - - - -

5-я шпшлный кот роль - - - -

Для морфоло! ическнх и гистохимических исследований извлекали над-ночечпикн, проводили их взвешивание и дальнейшую обработку согласно методикам.

II ронзеод ств енны П эксл ерштгг.

Для опыта отбирали теляг в возрасте 30 дней, массой 50-55 ю, черно-и ест рой породы. После шбора и бпрковаиия по принципу аналою» формировали 4 группы животных гго 5 телят в каждой труппе (1абл.2).

1 аблнца 2.

Схема оньпа

Группа Препарат Доза Путь введения Кратность введения

1-я опытная ЛМШЮВ1ГГ 15 мг/кг Внутрь 1 раз в день за 5 дней до транспортировки н в течении 6 дней после

2-я опытная Ампновит 20 мг/кг Внутрь

3-я опытная 2,5% раствор аминазина . 0,5 мг/кг внутримышечно однократно перед транспортировкой

контроль - - - Транспортировка в течении 2,5 часов

Телят транспортировал« в специально оборудованных автомашинах на откормочный комплекс. Время транспортировки 2,5 часа. До транспортировки и сразу после нее проводили взвешивание животных, взяте проб крови для морфологических и шггохи м ических исследований

Меюды исследований надпочечников экспериментальных животных. Материал из жидкости Кярнуа и Цепкера обезвоживали и заливали в парафин по общепримятой методике (Меркулов Г Л., 1969). С помощью рспор-ного микротома модели 1165 (Rotocul Reichert Jung) получали срезы толщиной 5-6 мкм я после депарафнпации окрашивали их гематоксилином и эозином (Меркулов Г.Н., 1969) Дезоксирнбонуклеопротеиды (ДШ1) и рибонуклеопро-1«иды (НИ11) по L. Einarson (1951), по J Brechet (1953), ко R U feigen и(

Rossenbec (1924), iлнко1еи к пенфальные i люкоэомшиалконм п<> AJI Шабадашу (1924}.

Из Maiepttatia, фиксированного формалином, i оговили срезы па замора жнвающем микротоме модели 1205 Reichert Jiuig, и окрашивали их Суданом черным В но Лизону (Kohohckhíí Л.И„ 1976),

Из imacTTiHOK надпочечников, фиксированных о жидком азо1е, it крнLicia re получали срезы толщиной 5-7 мкм, в них но прописям Пирса Э (1962) п Лиллн Р. (1969) выявляли активность основных оксндоредуктаз.

Методы исследования крови геля г. Кровь для исследований брали ni яремной вены. Определяли общепринятые гематологические показатели.

Функциональную активность гранулоцитов крови определяли с пом о щыо цитохимических методик - ПСТ-теста нитросииего тетраэолия.

Для определения содержания дезокс и рн бону кл ео i ipo i е идо в применяли реакцию Фельгена-Розенбека (Folgen, Rösenbeck, 1924), р нбон уклеоп ро те и лов в клетках крови выявляли по Браше (1924) с предвариiелъной фиксацией мазков в абсолютном метиловом спирте в течении 20 минут.

Фосфолиниды в «"ралудощпал выявляли окраской Суданом черным 13 по Лиэопу (Uson, 1934, 1936) с применением буферного раствора.

О неЛтрофилах определяли содержание пеферментиых Kai ионных белков по Ппгаревскому B.Ii. (1978),

Определение активности миелоие|Юксндазы в лейкоцитах проводили с помощью метода Carro (1966).

Морф<ъш1тометрия. 13 криостатных срезах надпочечников (крыс), фиксированных в жидком азоте, изучали активность окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов в пучковой зоне железы Активность оксндоредуктаз оценивали по Семеновой-Тян-Шаньской В В и СайковоЛ Л.А. (1977). В пучковой зоны и подсчитывали количество зерен ди-формазана - продукта гистохимической реакции нитросииего тетразолия с соответствующим ферментом. Активность i ндролиткческих ферментов о цени пали по балльной системе.

Активность гидролитических ферментов оценивали путем иолу количественного анализа no Astaidj, Verga (1957). Для оценкн цитохимических реакций в клетках крови выводили средний цитохимический коэффициент по методу Aslaidi, Verga (1957). Полученный при гистохимических, цитохимических и цитоэнзпматческих исследованиях цифровой материал обработан с применением стандартной компьютерной программы, проведен однофакторныЛ дисперсионный анализ (Тушатов 1*.Д., 1983; Лакни 1 Ф., 1980).

CiaiitcurtccKyio обрабогку данных проводили па комиькмере KJM PL', используя нрофамму биометрической обрабогки «l'UN -1,0» (апторы Ипумкнн И Н и I apt Uli, 1998)

1'е)улыпы исследования

Морфофункционяльнап хярякзернстикя пялиочсчньи желе! крыс при ошилляторном стрессе. Осцнллигорный стресс различной интенсивности приводит к значигельным изменениям массы тела животных и Э1 a варнабсль- 1

ность представлена в таблице 3.

Гистохимические исследования надпочечников крыс свидетеле i пую i о специфичности и фазностн реакции железы на стрессы различной шпенснвно-стн.

После 2-часовой стрессовой на1рузкм в надпочечниках крыс первой группы наблюдали гипертрофию коркового слоя железы, в основном за счет увеличения пучковой зоны, которая в четыре раза превышала клубочкопую и в два раза сетчатую зоны. Границы между ними ueiко различимы Клеши клу-бочковой зоны округлые средней величины Цитоплазма темная, зернистая пли сетчатая. Ядра крупные с глубокой структурой хроматина Количество рибо-нулеонротендов в клубочковой зоне повышено незначшельно в сравнении с ишакшыми животными.

Таблица 3,

Относительные изменения массы тела и надпочечников _ экспериментальных крыс__

Серии эксперимента Группы ж лист пых Дом »ре-парата (MI/KI ) Время стресс-нагруэкн (г) Потери живой массы (г) М+ш Масса надпочечников (мг) М±т

1 - 2 9,3+1,4* 65,7±5,2

1 2 - 3 15,4±2,7*** 70,8±8,7*

3 - 4 18,2+3,3 69,3+4, \П

А - 1НГГ контр - 62,8±б 7

Hpn^witiiite: н лалм " - лшлрппспл нрн Р<0,1

* • ЛПСГЛВГрНЛ 1фН Р<<1,(И( " - ЛК1№К|>1№ при "* -лостчв»р|«1 при Р<0,П01,

Уровень линндов окрашивающихся Суданом черным О пучковой зоны надпочечников, соответствует контролю (табл 4.) В клубочковой зоне наблюдали значительное снижение уровня гликогена в сравнении с шпакгным коп-гролем

Цитоплазма большинства клеток темная, зернистая, хотя встречакпея отдельные клетки со светлой цитоплазмой, лишенной зернистости, но количество их незначительно.

Содержание шнкоена в среднем равнялось 1,5+0,3, ют да как к котро ле уровень тликогепа был выше 2,110,4. Фосфолнннды в пнде мелких капель равномерно распределены по зоне, количество их составило 3,3±0,12, п контрольной I рун не эшг показатель был равен 3,7±0,23.

3-часовая стрессовая нагрузка крыс 2-11 группы характеризовалась глубокими структурными и метаболическими сдвигами в надпочечниках лабораторных животных. Границы между зонами стерш, но всей коре огчеишво ( видны расширенные сипусондные капилляры, заполненные кровью

Гистоло! нческий апалпз пучковой зоны надпочечников крыс, подверг ну-тых 3-часовому стрессу. Показал высокий уровень функциональной вкшвносш 1 железы

Содержание гликогена в среднем по зоне было 1,2±0,13 (!'<0,1), у контрольных животных этот показатель был равен 2,1 ±0,4. Клетки пучковой зоны объединяются лилидными включениями, общий уровень фосфолиппдов в опыт ной группе составил 2,9±0,33 (Р<0,1), контроль 3,7±0,23

Стрессирование крыс 3-й группы в течении 4 часов привело к более выраженным морфофункциональнмм сдвигам в пучковой зоне коры надпочечников.

Пучковая зона надпочечников крыс 3-й фуппы состоит из крупных округлых клеток. Ядра большинства клеток гипохромиые Но всей плошали пучковой зоны наблюдается преобладание светлых клеток над темными Сипусондные кровеносные капилляры расширены и заполнены кровью В надпочечниках происходит усиление П|кжессов метаболизма, чго проявляется в снижении количества гликогена и липидоп

Содержание гликогена в пучковой зоне надпочечников животных 3-й I группы было равно 0,91 ±0,15 (1'<0,05), что значительно ниже показателя в кон-

троле 2,1±0,4 и у 2-й опытной фуппы 1,2±0,3 (Р<0,|), Хараюерпым для данной группы животных было полное отсутствие суданофнльных липндов в отдельных участках пучковой зоны Делипоидизапия свидетельствует о высокой функциональной напряженности надпочечников, в связи с этим происходи! снижение общего количества липидов в пучковой зоне до 2,1 ±0,16 (Р< 0,001), тогда как в контроле этот показатель значительно выше 3,7±0,23.

Гнет031Ш1 молоти надпочечных желез крыс при оецплляторном стрессе. Активность фермента сукциоотдегидрогеназы (СДГ) в 1-Й группе крыс после двухчасового стрессировапия была равна 40,247,1 (Р<0,05), во 2-й группе с 3-часовой стрессовой натрузкой уровень СДГ составил 60,3±8,1(Р<0,05), в 3-й группе после 4 часов стресса происходит увеличение количества фермента до 43±9,2 гранул деформазона. Активность СДГ в нн-тактной группе животных была равна 31,7±б,2.

1 а к I а I де( н дро г е! (еза (Л Д| ) В 1-й I руг те 51,5±8,5(1>"0,1) акт п ною фермеша во 2-й труппе была несколько пмше 59,3±4,3(Р<0,<)1), в 3-Й группе лкгивпость фермента после 4-часового стресса повышалась незначительно в сравнении со-2-й группой и была равна 60,2±7,2, у контрольных живожых количество фермента было равно 29,4±5,3 (Р<0,01) [ранул дпформазапа

Активность гл юта матдегн дрог енезы (1 ДГ) в 1-й 1рупме после 2-часового орессоваиия была равна 38,1±3,9 грапул дпформазапа, этот показатель незначительно отличался от контрольной группы животных, где активность фермента составила 34,1 ±4,8, тогда как во 2-й и 3-Й группах увеличивалось количество фермента до 54,3±6,7(1><0,05); 67,3+5,3 (Р<0,01) гранул дпформазапа соответственно

Альфа-гл1щерофосфатдеп1дрогенеза (а-ГФДГ). В контрольной группе активность фермента составила 41,5±б,7 1ранул дн()юрмазана. В 1-й и 2-й опытных группах наблюдается последовательное увеличение ферментативной активности соответственно до 50,3±7,4 и 59,7±6,2 (Р<0,1> гранул, тогда как в 3-й фунпе с 4-часовой стрессовой нагрузкой незначительное снижение количества фермента до 54,3±3,2 грапул днформазапа

Глкжозо-6-фосфатдегидрогеназа (Г-6-ФДГ) После 2-часовой стрессовой иатрузки активность фермента в 1-й труппе составила 34,7±4,8, это несколько выше контрольной группы, в которой количество фермента было равно 29,б±1,8 гранул диформазана. Во 2-Й н 3-й группах наблюдается резкое повышение уровня ферментативной активности соответственно до 69,3±5,2 (Р<0,001); 73,2±4,3 (Р<У,УУ1) гранул дпформазапа.

М орфофупкционяльнос состояние надночечнпков крыс в условиях осцнлляторпот о стресса С применением препарата «амииоинт», Относительные изменения массы тела экспериментальных животных и изменение массы надпочечных желез представлены в таблице 4.

Таблица 4.

Относительные изменения массы тела и надпочечников __экспериментальных крыс_

Серии эксперимента Группы животных Дом препарата (мг/кг) Время стресс-нагрузки (г) Потери живой массы (г) М±ш Масса надпочечников (мг) М±т

1 10 3 10,7±1,4* 64,8±3,1

2 20 3 б,1±1,1 62,1±3,3***

2 3 30 3 6,51±1,б2** 58,4+2,3

4 3 16,3 ±3,7 69,5±5,5

5 - - 61,7±7,7

В 1-й опытной группе после 3-часовой стрессовой нагрузки отмечали незначительную гипертрофию коркового слоя железы, тогда как во 2-й и 3-й

ipyniiax применяя препарат в лозах 20 mi/ki и 3U mi/ki cootneicnпенно, i »икр iрофию корковот о слоя надпочечников не наблюдали.

IÍ 4-й трутше (контроль стресс воздействия) тнстологическля кпрмтип надпочечников была схожа с таковоИ у животных 2-tl группы 1-й серии эксперимента, за исключением более выраженной типертрофтнт пучковой зоны железы.

В 1-й группе выявляются i hctohoi нческне отличия пучковой зоны коры надиочечинков крыс 2-й и 3-й ipyim, которые выражаются гиперемией сину-соидных капилляров и увеличением количества светлых клеток.

Гистологическая картина пучковой зоны надпочечников крыс 4-й труппы свидетельствует о выраженной стрессовой реакции ортагшзма в целом, реакция железы па стресс в данной группе была сходна со стрессовой реакцией надпочечников крыс 2-й группы 1-И серии эксперимента. Увеличение дозы препарата до 20 мг/кг во 2-й i руине снижает уровень функциональной активности надпочечников при стрессе. Морфологически это проявляется снижением количества светлых клеюк в пучковой зоне, менее выражена гиперемия кровеносных синусов, ядро клеток пучковой зоны в большинстве своем нор-мохромпые, цитоплазма зернистая оксифильная.

В 1-й опытной труппе (доза препарата 10 мт/кг) уровень тликотена составил 1,51±0,21(Р<0,1), во 2-й (доза препарата 20 мг/кг) этот показатель был равен 1,8410,32 (Р<0,1), в 3-й труппе (доза препарата 30 мт/кг) количество гликогена в среднем было равно 1,77±0,4. Содержание тликогека варьирует у контрольных животных, так в шггатшюм контроле средний показатель был равен 2,15±0,21, тогда как в 4-й группе (контроль - стресс воздействия) уровень тликотена составил 1,06±0,12(Р<0,01).

Изменяется содержание лнпидов в клетках пучковой зоны надпочечников крыс онылтых и контрольных групп.

В опытных группах при применении препарата «аминовит» количество фосфолшшдов было равно в 1-й труппе 3,3±0,23, во 2-й - 3,51±0,15; в 3-й -3,6±ОД5.

В интакттюм контроле эют показатель был равен 3,71±0,27, в 4-й трунне (контроль стресс-воздействия) наблюдали резкое снижение количества фосфо-липидов до 2,6±0,3 (Р<0,05).

Гнстоэтпнмолфгня надпочечных желез крыс в условиях осцнлл я горного пресс* с применением препарата «аминовит». Выявленная активность ряда окислительно-восстановтттельных и гидролитических ферментов в пучковой золе надпочечников крыс, получавших препарат «аминовит», позволило установить определенные отличия реакции железы на стресс при различных дозах стресс-гцннективного препарата «амиповнг»

Активность фермента сукцнна где1 и дрот еназы (СД1 ) в 1-й групп« жн-вогных, получавших препарат в дозе 10 мг/кс составила 52,1 ±3,1 I ранул де-формазона. Но 2-й группе (доза пренарзта 20 м>/к!) активность фермета была равна 39,2±4,2 (Р<0,05), в 3-й группе (доза прензрата 20 м;/кг) уровень СД1 равнялся 41,8+3,9 (Р<0,00|) гранул диформазаиа. В 4-й 1 руине (кошроль стресс-воздействия) активность фермента резко возрастала до 61,515,2, тогда как в иитактном контроле уровень СДГ составил 32,315,1 т ранул диформазаиа Лактатдегилрогеназа (ЛДГ). 13 1-й группе активности фермент была равна 50,5±4,1 гранул дпформазапа. Во 2-й группе эюг показатель снижался до 35,010,7 (Р<0,05) гранул дпформазапа Доза препарата 30 мт/кг в 3-й труппе животных ведет к незначительному повышению активности фермета по сравнению со второй группой до 44,3±7,1 гранул дпформазапа

В 4-й группе (контроль стресс-воздействия) активность фермеша повышена, в сравнении с опытными группами, н составила 58,814,3 гранул дпформазапа, в шпактном контроле СД1' была равна 30,02+4,51 трат ту л дпформазапа.

Глютамагдет ндрогеназа (ГДГ). В 1-й группе 47,113,7 гранул дпформазапа, активность фермента во 2-й труппе снижалась до 37,113,2(Р<0,01), в 3-й группе 39,815,2(Р<0,05) гранул диформазаиа. В 4-й группе наблюдали значительное повышение активности фермента 55,613,2 (ранул диформазаиа, в нитратном контроле уровень 1ДГ составил 33,213,2 т ранул диформазаиа.

Лльфа-глнцерофосфатдегидротеназа (и-ГФДГ) В интрактном контроле активность фермента составила 40,5±4,1 гранул диформазаиа. В 1-й опытной труппе этот показатель был равен 5),215,2 , во 2-й 45,6±4,1(Р<0,1) и в 3-й труппе 49,6±5,2 гранул диформазаиа. В 4-й группе (контроль стресс-поздейстоия) активность фермента возрастала до 59,715,1 Iранул диформазаиа Глюкозо-6-фосфатдегидро1 еиаза (Г-6-ФДГ) 13 нитактиом контроле уровень Г-6-ФДГ был равен 28,1+2,2 I ранул диформазаиа В 1-й группе (доза препарата !0 мг/кг) количество фермента возрастало до 58,314,8 гранул диформазаиа. Во 2-й группе (доза препарата 20 мг/кг) этот показатель был равен 39,413,2 (Р<0,001) и в 3-й (доза препарат 30 мг/кг) 54,813,5 (Р<0,05) гранул диформазаиа. В 4-й труппе уровень фермента был выше, в сравнении с опытными группами и составил 69,714,2 гранул дпформазапа.

У данных труни животных происходило заметное уменьшение лннидов, ДНП и РНП. Данное положение свидетельствует о повышение секреции кор-тнкостероидов.

Подводя итоги выше изложенному, следует отмешгь, что применение препарата амнновнт экспериментальным животным снижает обшую стрессовую нагрузку, переводя реакции в более выраженную физиологически адаптивное русло.

Морфологическая lapaKiepitci нкя крови wifli после трямспорш-рчпкн it в период аяяшяцнп. Среди признаков характерных для cipecc реакции сис1емы крови нтресшо, чго шавпымн яаляются изменения количественною состава клеток проявляющихся эозпноненией, нейтрофильным лейкоцитозом и лимфопенией. Паши данные coiласуются с исследованиями mhoihx авторов и подтверждают шгштельную степень подвижности и лабильности клеток крови при стрессе

Наряду с этим, стресс-протективное действие препарата «амнновнт» на организм значительно снижает общую реакцию животных при транспортировке, достоверным критерием пего могут служить морфологические показатели кровн теля г опыт пых Н КОНфОЛЬТЮЙ ГруПН.

Так, в 1-й опытной группе (доза препарата 15 мг/кг) после транспорги-ровкн, наблюдали незначительное снижение количества эритроцитов до 6,!5х!0'г/л, но при этом насыщенность их гемоглобином возрастала до (18 г/л, отмечался умеренный лейкоцитоз в пределах 10,3 х 109/л. Анализ лейкоцитарной формулы свидетельствует о слабо выраженной эозинопении, ней-трофильном лейкоцитозе с повышением количества иалочкоядерных не ¡профи лов. Наблюдали незначительное снижение количества лимфоцитов, содержание моноцитов оставалось на уровне «сходных данных

Животным 2-й группы до транспортировки скармливали препарат в док 20 мг/кг. Но соотношению клеюк крови можно судить о менее выраженной стрессовой реакции в сравнении с 1-й группой животных И 1-Й день после транспортировки наблюдались незначительные сдвиги в гемограмме от исходных данных. Отличалось небольшое увеличение количества эритроцитов до 6,54 х1013/л, при этом насыщенность темотлобина составила 119 i/л Количество лейкоцитов в первый день после транспортировки не превышала 8,8! кЮ'/л. ЛеЙкограмма характеризовалась незначительным снижением количества эозинофилов и лимфопенней.

Наиболее значительные морфологические изменения крови наблюдались у телят в 4-й группе (контроль стресс-воздействия) Гак после транспортнровкп на комплекс у животных наблюдали снижение количества эрщроцнюв Отмечали увеличение общего количества лейкоцитов до 19,8 х I О'/л, чго в 2,5 рата выше исходных данных Анализ лейкоцитарной формулы свндетельст нует о редком снижении количества эозинофилов до 0,09%, увеличение количеств иалочкоядерных 13,6% и сегметпоядерных 39,38% нейтрофилов, общий уровень иейтрофнлов составил 52,98%. На фоке иеИтрофнльного лейкоцитоза наблюдали значительное снижение количества лимфоцитов с 63,4% до 42,6% Количество моноцитов оставалось на уровне исходных данных

M з M 1 V 1

t.* «

i

1 группе

2 группа

Í групп*

4 rpydftfl HHipofib

tf До tpwicnopT DI-Dama ОТ-* 0144дмь ВИ^дсць 021-й день

Рис 1 Дммамнка нэм«иепм* содгряами* фсефолипядоя » гярнутидитак *ро*и до *

Н0СЯ9 tpttffflOpTIipOMM

1 группа 2 группа I групп* 4 групп« нотропь

ff До транспорт □ л*мь 07-Л д*иь D14-11 дат, Я11-Л день 0ÍO-*

Рж t Дннамяи* him«иапи» содержания гликогена а гранулоцнтаж кроаи?«пятдв« ment транспортирован

1 группа S группа $ грулги» 41 pyuria контроль

IHoTpWtlwpr DUflWb QMjwt» РЦ-Ядань Д»->Д<№ OîMftWb

Pwc Э Дитмтга иамеиания ощ ясности СДГ (СЦК) » яроая twiirt до п поем

ipaHcrtoptrtpoMtii

Цш о химические пока )я 1ели кропи I мя ■ после тряпсипршрппкн и п период •дянгацни. Изучение стресс-нротекгнвных свойств препарат амппп-вит при транспортировки телят и динамика изменения содержания пластпче ского магериала представлена в диа1раммах (рис 1-4) Из дшнрлммы (рнс I) видно, <по содержание фосфолиппдов в транулошмах кропи у опытных и контрольной групп подвергались значительной вариабельности весь период наблюдения.

Наиболее значительные изменения уровня <|юсфолинидов отмечали и контрольной группе животных, где сразу после транспортировки и на 7-М день уровень фосфолппидов был значительно ниже, чем в остальных опытных труппах. Во 2-й опытной группе изменение содержания фосфолншшов носило выражено ресурсно-адаптивный харакутер н характеризовало стойкую стадию адаптации на стресс. Изменение содержания гликогена в гарпулошпах представлено в диаграмме (рис.2). Отмечается резкое снижение в 2,2 раза уровня ■лпкогеиа в гариулоцитах у телят 4-й контрольной группы сразу после транспортировки. В наименьшей степени снижение уровня гликогена отмечали во 2-й опытной группе, в то время как в (-Й и 3-й опытных группа1« эгог показатель значительно варьировал. Гаки образом, исходя из выше изложенною установлено, что наибольшие изменения в цитохимических показателях в грану-лоцнтах связаны со значительным уменьшением основных энертическнх материалов (липиды и глнко1ен) у животных в стадии острого (пресса и динамика восстановления зптх показателей имеет высокую вариабельность в зависимости от адаптивного ресурса.

В диаграмме (рис.3) представлена активность сукци пат-дегидроге пазы в гранулоцитах крови. Установлено, что наибольшая активность ферме ига огае-чалось у животных 4-й контрольной группы сразу после транспортировки, чю свидетельствует о резкой активизации обмена и характеризует нас(уилепие 1-й стадии стресса - стадии тревоги. В последующие дни наблюдения у живо тих данной группы отмечалось снижение активности СДГ и это напрямую подтверждает снижение окислителмю-восстаповшельпых реакций и переход в стадию декомпенсации У животных 2-й опытной группы показа!ель активности СДГ значительно не изменялся в течении всего периода наблюдения Стабильный уровень активности фермента свидетельствует о компенсируемом процессе обмена и более физиологичной ресурсно-адаптивной реакции на стресс.

Динамика изменения активности Г-б-Ф в гранулоцитах (рис 4) подтверждает усиление процессов катаболизма и активною расходования пласмие-ского материала клетками в 4-й группе животных в 1-й депь после транспортировки. Во 2-й опытной группе эти показатели значительно не о г дичал и сь 01

исходных имели незначительную вариабельность, характеризуя 1см самым устойчивый уровень обмена

ВЫВОДЫ

1. Структурные изменения адреналопой системы крыс при осиил»лор-пом стрессе свидетельствуют о резком усилении функции железы, проявляющейся в увеличении массы органа, расширении капиллярного русла, уменьшении уровня пластического материала необходимого для осуществлении сие-циализщюваиной функции.

2. Стресснрованне лабораторных жнвошмх три и более часов приводит к значительному угнетению функции железы, что проявляется в уменьшении количества гликогена, липидов, РНП и ДНП. Состояние ядренокортикоцигов характеризуется как терминальная дистрофическая реакция с переходом в отдельных случаях к некробиозу.

3. Морфология и цитохимия крови телят при транспортном стрессе отражает высокую степень приспособительной активности 1ранулошггов в них увеличивается содержание окислительно-восстановительных ферментов, уменьшается уровень липидов, глнко1епа. Увеличение времени стрессовой нагрузки способствует началу развития процессов декомпенсации, проявляющейся в уменьшении цнтоэнзнмотической активности грапулоцнтов.

А Применение препарата аминовит лабораторным животным существенно стабилизирует уровень обменных процессов в надпочечниках, что отражает его выраженное стресс-протектнвное действие. Стабильное содержание основного пластически!о материала и уровень фермеиюв огражакп стойкую адаптивную реакцию на стресс.

5. Применение препарата амшювит телятам при транспортировке улучшает основные морфо-цитоэнзи мшичес кие показатели системы крови, что характеризует адаптивность гранулоцитов и повышает общий порог воздействия факторов повреждения.

6. Изменение морфологии крови телят, которым задавали препарат аминовит, характеризует незначительное изменение клеточкою состяпа, уровень лнмфошнов и эозинофилов соответствовали фнзиоло!ическим нормам

7. Применение препарата аминовит в дозе 20 мг/кг в течении 5 дней до транспортировки и 6 дней после, вызывает стойкий стресс-протектнвпый эффект, стабилизируя основные морфо-цнгоэнзиматические показатели крови тедят.

8. Препарат аминовит в дозе 20 мг/к! создает необходимый сфесс-нротекшвный и ресурсный эффект в период адаптации к новым условиям.

ИРАК 1II ЧЕСКИ £ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендуется применять препарат аминовиг телятам за 5 дней л о транспортировки п п течении 6 дней после, 1 раз в день в доге 20 mi/ki для профилактики транспортом) стресса и повышения устойчивости оршшимп п период адармацнп

2. Полученные сведения о структурно-функциональных итмепепнях lia i почечных желез крыс И адаптивная реакция грянулопнюв крови при ipnuc-нортном стрессе внедрены в учебный процесс в соответсгв)ющих курса\ мк толо! пи и аттзюмнн сельскохозяйственных животных

СПИСОК РАШ1 ОПУБЛИКОВАННЫХ IIO IEME ДНССЕР1АЦПП

1. Жаров Л.В., Шмндг Ю Д Морфологическая оценка препарата «Лмн~ новш» при транспортом стрессе телят// Актуальные вопросы паюлотпп и морфоло!пи с/х животных Сб. науч статей МВА им Скрябина -М, (995 -С.28-30.

2. Шмидт Ю Д. Терапевтическая коррекция метаболических paccrpoiîciB вызываемых транспортным стрессом и гипоксией// Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных: Мат. межре! пональной науч.-ирактич. конф. -11овоснбирск, 2002 - С.50-51

3. Шмидт. Ю.Д. Энзнматическая активность гранулоцитов крови теляг при транспортном стрессе ti в период адаптации к новым условиям// Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных: Мат. межрегиональной иауч.-лрактнч. конф - Новосибирск, 2003. - С.47-48.

Редакцнонно-иэдател ьск ий отдел Ноясибнрского госудврстветюго агряртио умпоерешоа 630039, г Новосибирск, ул Ник» мша 1

Лицензия ЛР №030048 от 02 06 1997 г Сдано в набор 19 02 2003 г. Подписано к печати 18 02 2003 г Формат 60x84 Объем 1 уел печ л Тираж 100 экэ Печать офсетная

Заказ №

РНБ Русский фонд РНБ Русский фонд 2006 4

2006-4 35523

"»•т.,

СП,

>лЧйт,

«г*

Ур1 г

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шмидт, Юрий Давыдович

----Стр.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Концепция стресса и современное представление о развитии общего адаптационного синдрома.

1.2. Морфо-функциональная характеристика адреналовой системы в условиях стрессовых воздействий на организм.

1.3. Реакция системы крови на воздействие стресса.

1.4. Краткая характеристика транспортного стресса в условиях промышленной технологии выращивания и откорма молодняка КРС.

1.5. Концепция профилактики стрессов в условиях' интенсивного ведения животноводства.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материал и общая методика исследования.

2.1.1. Методы исследования надпочечников экспериментальных животных.

2.1.2. Методы исследования крови телят.

2.1.3. Морфо-цитометрия, микрофотографирование и статистическая обработка материала.

2.2. Результаты собственных исследований.

2.2.1. Морфо-функциональная характеристика надпочечных желез крыс при осциляторном стрессе.

2.2.2. Морфо-функциональное состояние надпочечников крыс в условиях осциляторного стресса с применением препарата «аминовит».

2.2.3. Морфологическая характеристика крови телят после транспортировки и в период адаптации.

2.2.4. Цитохимические показатели крови телят после транспортировки и в период адаптации.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние антистрессового препарата "аминовит" на морфологию надпочечных желез крыс и морфо-цитохимические показатели крови телят при транспортном стрессе"

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Современные условия интенсификации сельскохозяйственного производства и рыночные условия ведения животноводства требуют максимальной окупаемости затрат для целей получения продукции, достаточно конкурентоспособной, а значит востребованной. Однако специализация и концентрация животноводства, перевод отрасли на индустриальную основу не только не снизил, но технологически закрепил ряд стрессовых ситуаций, снижающих резистентность животных в процессе выращивания и откорма, при перевозках, перегруппировках, взвешиваниях, ветеринарных обработках (Бузлама B.C., 1976; Ковальчикова М., Ко-вальчик К., 1978; Фомичев Ю.П., Иванова Э.А., 1999; Кашин А.С., 1999; Сопнев Б., 1999).

Животные реагируют на стресс-факторы мобилизацией углеводных, минеральных и витаминных ресурсов. В результате дополнительных затрат энергии организмом у животных снижается резистентность и продуктивность, увеличивается заболеваемость и ухудшается качество продукции (Лемперт Б., Л., 1980; Устинов Д.А., 1995; Фомичев Ю.П., Левонтин Д.Л., 1999).

В настоящее время придается большое значение различным аспектам проблемы стресса у сельскохозяйственных животных (Пяткин Е.М., 1966; Зальнер В.Р., 1970; Steinbac H.G., 1973; Чумаченко В.Е., 1990;Фомичев Ю.П. с соавт., 1999), факторам их вызывающим (Трубка Р.Я., 1973; Бурксер Г.В., 1974; Кашин А.С., 1974, 2000; Голомолзина Е.В., 1980; Algers В., et al„ 1981; Hotges J. et al., 1990; Георгиев В.Г., 1991; Городецкая Г.К., 1991) и механизмом их развития (Фитко Р. с соавт., 1995; Kolb Е., 1996).

По мере концентрации и специализации производства продуктов животноводства перевозки сельскохозяйственных животных приобретают все большие масштабы. Многочисленные данные исследований свидетельствуют о наступлении стресса при транспортировке по изменению состава крови, сдвигу гормональной активности гипофиза и коры надпочечников, а также показателей деятельности других органов и систем. Транспортировка является сильным стресс-фактором, существенно влияющим на морфологический и биохимический состав крови. Количественные изменения крови характеризуются эозинопенией, лимфопенией и нейтрофильным лейкоцитозом (Голо-мазина Е.В., 1980; Георгиев, Конов В.Г., 1985).

Транспортировка животных приводит к значительному повышению уровня глюкозы в крови (Косенко А.Я., 1979), изменяется концентрация в крови ферментов (Земков А.С., Ладян П.Е., 1980), белков (Демчук В.Д., 1985), жирных кислот, электролитов, витаминов (Блинова JI.C., Ковалева З.И., 1990). Но в изученной литературе крайне мало данных о цитохимических и цитоэнзиматических исследованиях крови стрессируемых животных, в частности, нет результатов подобных исследований в условиях транспортного стресса у телят.

В нашей стране ведутся большие разработки в области изыскания эффективных средств борьбы со стрессами сельскохозяйственных животных (Кашин А.С., 1974, 2000; Красота Л.А., 1974; Устинов Д.А., 1976, 2001; Сап-нев Б., 1979, 2000; Радченко В.П., 1979, 2000).

Невысокая эффективность используемых сегодня лекарственных веществ для профилактики стресса, вызванного транспортировкой животных, обусловлена недостатком данных о механизме развития стресса, что затрудняет поиск веществ целенаправленного действия. В формирование стрессовой реакции вовлекаются кровеносная система, гипофиз, надпочечники, пищеварительная, дыхательная и другие системы организма. В то же время они наиболее уязвимы при транспортировке, и, следовательно, поиск фармакологических средств для профилактики транспортного стресса должен производиться с учетом их действия в первую очередь на эти системы.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИИ. Изучить влияние транспортного стресса и антистрессового препарата «аминовит» на надпочечные железы крыс и цитохимические показатели крови телят. ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ:

1. Изучить стресс-протективное действие и гистологически обосновать применение препарата «аминовит» в опыте на лабораторных животных;

2. Изучить влияние транспортного стресса на морфологические, цитохимические показатели крови телят;

3. Изучить стресс-протективное действие и дать цитохимичесое обоснование влияния препарата «аминовит» на организм телят при транспортировке и в период адаптации их в условиях комплекса;

4. Установить оптимальную дозировку применения препарата «аминовит».

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ. Морфологическими методами (свето-оптическая микроскопия, гистохимия, цитохимия и морфометрический анализ) детально охарактеризованы специфические структурные изменения надпочечных желез крыс при осциляторном стрессе, проведены цитохимические исследования крови телят при транспортном стрессе. На основании комплекса морфологических исследований дана характеристика влияния антистрессового препарата на лабораторных животных и телят. Установлено, что «аминовит» вводимый крысам, существенно снижает уровень истощения клеток пучковой зоны надпочечников нормализует уровень секреции клеток мозгового слоя. Показано, что качественное и количественная перестройка капи-лярно-паренхиматозных структур надпочечников при введении «аминовита» происходит за счет накопления липотропных факторов, которые носят ресурсно-адаптивный характер. Выявлено, что применение препарата «аминовит» телятам при транспортировке и в период адаптации к новым условиям стабилизирует цитоэнзиматические показатели гранулоцитов, крови, повы

Шая общую устойчивость организма животных к неблагоприятным факторам среды.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Данные, полученные в исследовании морфологии надпочечников лабораторных животных и цитохимических показателей крови телят при транспортном стрессе дают основание для их дальнейшего изучения. Материалы могут быть использованы в преподавании курса гистологии и эмбриологии, анатомии и фармакологии в высших учебных заведениях.

Выявленные стресс-протективные характеристики препарата «амино-вит» позволяют при его использовании снижать экономический ущерб и профилактировать болезни желудочно-кишечного тракта, болезни органов дыхания, возникающие после транспортировки за счет повышения уровня адаптивно-энергетических ресурсов организма.

МАТЕРИАЛЫ ДИССЕРТАЦИИ ИСПОЛЬЗОВАНЫ:

В производстве для коррекции транспортного стресса и профилактики заболеваний животных в период адаптации;

В учебном процессе при изучении антистессовых препаратов в учебной программе по общей и частной фармакологии, в курсе гистологии и эмбриологии и патологической анатомии.

ПОЛОЖЕНИЯ ДИССЕРТАЦИИ ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

Морфологические изменения надпочечников крыс в условиях разной напряженности осциляторного стресса имеют различную степень структурной адаптации и высокую вариабельность деструктивных декомпенсацион-ных проявлений.

Структурно-функциональные изменения надпочечников крыс при введении «аминовита» характеризуется наличием пластических резервов (гликоген, липиды) удовлетворяющих напряженную функцию желез в условиях стресса.

Изменение количественного клеточного состава крови телят в условиях транспортного стресса отражают напряженность в обеспечении постоянства внутренней среды и выявляют первичные факторы стадии истощения.

Применение препарата «аминовит» телятам при транспортировке, улучшает основные цитоэнзиматические показатели гранулоцитов, обеспечивая резистентность организма в период адаптации к новым условиям.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертационной работы доложены на: 1-й региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы в ветеринарии», 10-12 марта 1999г., г. Новосибирск; III-й региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы в ветеринарии», 12-15 января 2001г., г. Новосибирск; Межрегиональной науч.-практич. конф. «Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных» Новосибирск, 2002; Межрегиональной науч.-практич. конф. «Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных» Новосибирск, 2003.

ПУБЛИКАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ. По материалам диссертации опубликовано 3 работы.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, предложений, списка литературы и приложения. Материал диссертации изложен на 133 страницах, иллюстрирован 19 таблицами и 46 рисунками. Список литературы включает 170 источников, в том числе 57 - иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Шмидт, Юрий Давыдович

выводы

1. Структурные изменения адреналовой системы крыс при осцилятор-ном стрессе свидетельствуют о резком усилении функции железы, проявляющейся в увеличении массы органа, расширении капиллярного русла, уменьшении уровня пластического материала необходимого для осуществления специализированной функции.

2. Стрессирование лабораторных животных 3 и более часов приводит к значительному угнетению функции железы, что проявляется в уменьшении количества гликогена, липидов, РНП и ДНП.

3. Морфология и цитохимия крови телят при транспортном стрессе отражает высокую степень приспособительной активности гранулоци-тов в них увеличивается содержание окислительно-восстановительных ферментов, липидов, гликогена. Увеличение времени стрессовой нагрузки способствует началу развития процессов декомпенсации, проявляющейся в уменьшении цитоэнзимотиче-ской активности гранулоцитов.

4. Применение препарата аминовит лабораторным животным существенно стабилизирует уровень обменных процессов в надпочечниках, что отражает его выраженное стресс-протективное действие. Стабильное содержание основного пластического материала и уровень ферментов отражают стойкую адаптивную реакцию на стресс.

5. Применение препарата аминовит телятам при транспортировке улучшает основные морфо-цитоэнзимотические показатели системы крови, что характеризует адаптивность гранулоцитов и повышает общий порог воздействия факторов повреждения.

6. Изменение морфологии крови телят, которым задавали препарат аминовит, характеризует незначительное изменение клеточного состава, уровень лимфоцитов и эозинофилов соответствовали физиологическим нормам, что позволяет заключить о более стабильных процессах последующих адаптивных реакциях.

7. Оптимальная доза применения препарата аминовит, не вызывающая токсических реакций и стабилизирующая основные морфо-цитоэнзиматические показатели является 20 мг/кг в течении пяти дней до транспортировки.

8. Применение препарата аминовит в дозе 20 мг/кг в течении 5 дней до транспортировки создает необходимый стресс-протективный эффект еще в течении 30 дней в период адаптации к новым условиям.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шмидт, Юрий Давыдович, Новосибирск

1. Алмазов В. А., Афанасьев Б. В., Зарицкий А. Ю., Шишков А. Л. Лейкопении.-Л., 1981.

2. Атанасова Л., Младенов Б.//Совр. мед. 1985. - № 3. - С. 116-119.

3. Байдевлятов А.Б., Николаенко В.П., Ольховик Л.А., Куценко Л.И. Методические рекомендации по профилактике стрессов в птицеводстве. -Харьков, 1979.- 16с.

4. Борисова М.А., Овчаренко Н.И., Спахов А.С. Новые суправитальные способы цитохимического определения активности лактатдегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназы в клетках крови // Лабор. дело. 1975. - N 12. - С. 723-725.

5. Бубнова Н.А, Петров С.В., Иванова Г.П., Панасенко О.Л., Галкина О.В. Роль Ронколейкина* (интерлейкина-2) в лечении перитонита. Современная многопрофильная клиническая больница: проблемы и перспективы. Изд-во СПбГМУ. С.-Пб, 1995, стр.35-36.

6. Павлова и 127-летию больницы Святого Великомученика Георгия: 27. Санкт-Петербург, 1997.

7. Бузлама B.C. Стресс в промышленном свиноводстве// Сельское хозяйство за рубежом. №8. - 1976. - С.47-50.

8. Ю.Бузуева И. И., Шмерлинг М. Д., Антонов А. Р. и др. Морфо-функциональные особенности клубочковой зоны надпочечника крыс с наследственной индуцированной стрессом артериальной гипертензией // Морфология, 1996, Т. 110, №6. С. 93-96.

9. П.Бузуева И. И., Шмерлинг М. Д., Филюшина Е. Е. и др. Структурные особенности коры надпочечника крыс с наследственной индуцированной стрессом артериальной гипертензией в раннем периоде постнательного онтогенеза. // Морфология, 1998, в. 2, С. 84-88.

10. Бурий В.В., Федонюк ЯЛ., Гомон В.О., Левандовська Н.М., Тупол Н.Д. Вплив легкого ступеня загального зневоднення оргашзму на пстоф1зюлопю Щитовидно1 залози // 1-й М!жнародний конгрес по штегративнш антропологи / Мат. конгр.Тернопшь, 1995.- С.81-82.

11. Бурксер Г.В. Стресс сельскохозяйственых животных// Ветеринария. №8. - 1974. - С.92-94.

12. Волжанин А.Н., Субботин Ю.И. Адаптация и компенсация -универсальный биологический механизм приспособления. М.: Медицина, 1987.-С.176.

13. Волков Г.К., Баранников В. Д. Проблема выращивания здорового молодняка// Ветеринария. №11. - 1996.

14. Волощик П., Дмитриева Н. и др. Стресс чувствительность свинок//Свиноводство. №5. - 1979. - С.42-43.

15. Волощик П., Дмитриева Н. и др. Стресс чувствительность свинок//Свиноводство. №5. - 1983. - С.ЗО.

16. Волощик П., Курчашов В. Предотвращение стресса при раннем отъеме поросят// Свиноводство. №2. - 1977. - С.22-23.

17. Гельгорн Э., Луфборроу Дж. Эмоции и эмоциональные расстройства. Нейрофизиологическое исследование. М.: Мир, 1966.

18. Гистология / Под. ред. В.Г.Елисеева. М.: Медицина, 1983. 590 с. Афанасьев Б.В., Алмазов В.А. Родоначальные кроветворные клетки человека: Физиология и патология. JL: Наука, 1985.

19. Голосова Т.В., Гутерман P.J1., Терпсихорова Е.В. и др. Инструкция по контролю стерильности консервированной крови, ее компонентов, препаратов консервированного костного мозга, кровезаменителей и консервирующих растворов от 29.05.1995. Москва, 1995.

20. Горизонтов П.Д. Система крови в механизме гомеостаза// Гомеостаз. М.: Медицина, 1976. С.43-45.

21. Горизонтов П.Д., Зимин Ю.И. Лимфоидная ткань при стресс-реакции// Актуальные проблемы стресса. Кишинев: Штиница, 1976. - С.70-79.

22. Горизонтов П.Д., Протасова П.Н. Детоксикация как один из механизмов Г9меостаза и резистентности// Гомеостаз. 2-е изд. - М.: Медицина, 1981. -С.366-398.

23. Гринев М.В. и др. Интерлейкин-2 в комплексной детоксикационнойьтерапии хирургического сепсиса. Анестезиология и реаниматология, №6: 25-28, 1994.

24. Гриневич Ю.А., Чеботарев В.Ф., Никольский Н.С. и др. Иммунобиология гормонов тимуса. Киев: Здоровье, 1989. - 152 с.

25. Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И.Козинца, В.А.Макаровой. М.: Триада-Х, 1997. 480 с.

26. Казаринов Н. П., Шмерлинг М. Д., Маркель А. Л. и др. Морфологические особенности юкстагломерулярного аппарата почки крыс с наследственной индуцированной стрессом артериальной гипертензией // Бюлл. экспер. биол. мед. 1999, №5, С. 576-579.

27. Качук М. В., Яговдик Н. 3„ Политое В. Ф. // Вестн. дерматол,- 1986.- № 6.-С. 48-52.

28. Кашин А.С., Толкушина А.С. Экологические предпосылки органопатологии телят// Мат. Всерос. науч.-метод. конф. патологоанатомов вет. мед. Омск, 2000. - С.208.

29. Квиткин Ю.Н., Бузлама B.C. и др. Стрессы в промышленном птицеводстве и их профилатика// Сельское хозяйство за рубежом. №10. - 1977. - С.43-47.

30. Квиткин Ю.П., Кривцов И.Л. Стресс и профилактика его у цыплят// Сельскохозяйственная биология. T.XII - С.98-101.

31. Кетлинский С. А., Симбирцев А.С., Воробьева А. А. Эндогенные иммуномодуляторы. Санкт-Петербург, 1992.

32. Киселева И. П. Лапин И. П., Прахье И. В. и др. // Журн. невропатол.-1977.-№8.- С. 1188-1191.

33. Китаев-Смык Л.А. Психология стресса. М.: Наука, 1983. - 368с.

34. Коваленко Я.Р. Действие факторов стресса на иммунобиологические процессы у свиней// Сельскохозяйственная биология. T.IX. - С.584-571.

35. Ковальчикова М., Ковальчик К. Адаптация и стресс при содержании и разведении сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1978. - 272с.

36. Ковешников В.Г., Федонюк Я.И., Сикора В.З., Романюк А.Н. Сравнительный морфологический анализ реакции костей крыс на дегидратацию и ожоговую травму // Архив АГЭ.-1989.- 96, N7.- С.47-53.

37. Лазарева Д. Н., Алехин Е. К. Стимуляторы иммунитета.- М., 1985,- С. 198199.

38. Ланкин В. Стрессовые реакции овец на условия содержания// Животноводство. №5.-1981. - С.30-35.

39. Ласков А., Пушкарева С. Научно-техническая информация. Профилактика транспортного стресса/ Коневодство и конный спорт. №6. -1984.

40. Лейсбон Л.Г. Происхорждение и эволюция эндокринной системы// Эволюционная физиология. 4.2. - Л.: Наука, 1983. - С.3-52.

41. Лещинский Л. А. Трусов В. В., Пименов Л. Т. // Тер. арх,- 1982.-№ 2.-С. 113-118.

42. Лимфоциты. Методы. Под ред. Дж. Клауса. Москва: "Мир", 1990.

43. Луппа X. Основы гистохимии// Пер с нем. М.: Мир, 1980. - С.140.

44. Луппа X. Основы гистохимии// Пер. с нем. М.: Мир, 1980. - С.140.

45. Макрушин П.В. Стресс и продуктивность сельскохозяйственных животных. Саратов, 1979. - 40с.

46. Максимов В. Ф., Коростышевская И. М., Маркель А. Л. и др. Метаболическое повреждение миокарда у нормотензивных и гипертензивных крыс (морфометрический анализ) // Морфология, 1999, Т. 115, №1, С. 19-23.

47. Марчук Г.И. Математические модели в иммунологии. М.: Наука, 1991. -С.17-56.5&.Машковский М. Д. Лекарственные средства.-М., 1984.-Ч. 1.-С. 104-106.

48. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -Новосибирск: Наука, 1989. 343 с.

49. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. М.: Наука, 1981. -С.278.

50. Меерсон Ф.З. О «цене» адаптации// Патологическая физиология и экстремальная терапия. 1986. - Вып.З. - С.9-19.

51. Мельников Ю.Г. профилактика стресса у бычков при промышленном выращивании и откорме// Ветеринария. №4. - 1977. - С.94-96.

52. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. Л.: Медицина, Ленинградское отд-ние, 1969. - С. 169-181.

53. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. Л.: Медицина, Ленинградское отд-ние, 1969. - С. 169-181.

54. Мхитарян В. Г., Ерицян Л. Н. // Журн. экспер. и клин. мед.-1981.-№ 2.- С. 121-125.

55. Никитченко И.Н., Джумков В.А. Метод оценки стрессов у свиней// Животноводство. №5. - 1983. - С.37-38.

56. Новые данные по фармакологии и клиническому применению солей лития / Под ред. Б. И. Любимова,- М., 1984.

57. Панин Л.Е. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1983. - С.231.

58. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства.-М.: Медицина, 1978.- 127 с.

59. Пигаревский В.Е. Цитохимия антибактериальных катионных белков лейкоцитов при фагоцитозе и воспалении // Архив патологии. 1975. - 37, N 9.-С. 3-10.

60. Поляков И.В., Соколова Н.С. Практическое пособие по медицинской статистике. J1., 1975. - 149 с.

61. Ройт А. Основы иммунологии, Москва 1Мир1,1991.

62. Рыжавский Б .Я. Изменения коры надпочечников в процессе старения и некоторые способы воздействия на нее. : Автореф. дис. . д-ра мед. наук. -Новосибирск, 1979.-С.1-15.

63. Рыжавский Б.Я. Сравнительные данные по морфологии надпочечников человека и некоторых лабораторных животных// Сб.: «Вопросы гинекологической и акушерской эндокринологии». Благовещенск, 1973. -C.110-11I.

64. Саркисов Д.С. Очерки по структурным основам гомеостаза. М.: Медицина, 1977. С.348-352.

65. Саркисов Д.С. Соотношение структурных и функциональных изменений в динамике патологического процесса// Сов. мед. №4. - 1982. - С.58-62.

66. Свадовский А.И., Цитокиновая иммунотерапия в комбинированном лечении внутримозговых опухолей головного мозга. Автореферат диссертации на соискание ученой степени д.м.н., Москва, 1998.

67. Селиванов А.В., Ивановский Э.В., Борисович Ю.Ф. Окружающая среда и иммунологическая реактивность организма// Ветеринария. №3. - 1984 -С.33-34.

68. Сидорова В.Ф., Степанов Е.Н. Сравнительная характеристика компенсаторной гипертрофИИ надпочечников у половозрелых и старыхкрыс// Бюл. экспер. биол. 1983 - №6. - С.38-40.

69. Соколов В. Д. Теоретические и практические аспекты стресс фармакологии// Тез. докл. 2-й межвуз. науч.-практ. конф «Новые фармакологические средства в ветеринарии». Л., 1990. - С.44-45.

70. Соколов В.Д. Фармакологическая корреция продуктивности животных// Фармакология и токсчикология новых лекарственных средств и кормовых добавок в ветеринарии. Л., 1990. - С.177-183.

71. Соколов В.Д., Вышвыркин С.В., Андреева Н.Л. и др. Фармакокоррекция транспортного стресса телят в условиях промышленной технологии выращивания: Метод, рекомендации. Л., 1988. С. 10.

72. Способ получения иммуноактивного вещества из вилочковых желез млекопитающих / Лившиц В.А., Зажирей В.Д., Тепелина О.М. и др. Опубл. 03.01.88., Бюл., 1988. - N 4. - С. 9.

73. Техвер Ю.Т. Гистология эндокринных желез домашних житвотных. -Тарту, 1972. С.128-135.

74. Тодоров Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии. -София: Медицина и физкультура, 1961.

75. Федонюк ЯЛ., Боднар Я.Я., Бурий В.В., Левандовська Н.М. Структура щитовидно! залози за умов реадаптацп шсля сублетального зневоднення оргашзму // Актуальш питания морфогенезу / Мат. наук, конф,- Чершвщ. 1996.- С.340-341.

76. Федонюк Я.И. Закономерности биологической перестройки костей скелета при воздействии на организм физических нагрузок // Актуальш проблеми ф1зичного виховання у вуз1 / Тези всеукрашсько'1 наук.-практ. конф.- Донецьк, 1995.- Част.1.- С. 92-93.

77. Федонюк Я.И. Морфофункциональные изменения длинных трубчатых костей у животных, развивавшихся в условиях реадаптации послегипокинезии // Вестник зоологии.- 1988.- N5.- С.63-67.

78. Федонюк Я.И. Морфрфункциональные изменения длинных трубчатых костей у животных, развивавшихся в условиях реадаптации после физических нагрузок // Архив АГЭ.- 1987.- T.92,N 1.- С.38-43.

79. Федонюк Я.И. Реакция косной ткани на последствие некоторых факторов внешней среды // Актуальные вопросы фундаментальной и прикладной медицинской морфологии / Сб. научн. трудов.- Смоленск, Россия, 1994.-С.141-142.

80. Федонюк Я.И., Боднар Я.Я., Мельник П.И. Субмикроскопические изменения в миокарде при клеточной дегидратации // Актуальные вопросы морфологии / Междунар. сборник научн. работ.- Тернополь, 1996.Т.З.- С.737-739.

81. Федонюк Я.И., Гнатюк М.С., Гнатюк JI.A. Адаптационные изменения отделов миокарда экспериментальных животных при физических нагрузках статического характера // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 1989.-N6.- С.745-747.

82. Федонюк Я.И., Сикора В.З. Моделирование дегидратационных нарушений водно-солевого обмена на мелких лабораторных животных // Новости спортивной и медицинской антропологии. М.: Спортинформ, 1991,- N1/5.- С. 75-76.

83. Федонюк Я.И., Сикора В.З., Велещук Я.Т., Кравцив С.И., Реминецкий

84. Б.Я. Морфологические изменения в косной системе при дегидратации организма // Биология опорно-двигательного аппарата / Материалы Школы. Климентово, 22-26 сентября 1992.- Харьков, 1992.с.311-317.

85. Шкурупий В.А. Структурный гомеостаз и возможные механизмы его обеспечения в процессе формирования ответной реакции паренхимы печени на повреждение// Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1984. - Т.97, №4. -С.450-498.

86. Шмерлинг М. Д., Белкин В. Ш., Филюшина Е. Е. и др. Структура скелетных мышц и высокогорная гипоксия. Новосибирск, 1985.

87. Шмерлинг М. Д., Филюшина Е. Е., Бузуева И. И. и др. Скелетная мышца. Структурно-функциональные аспекты адаптации. Новосибирск, 1991.

88. Шмерлинг М. Д., Филюшина Е. Е., Коростышевская И. М. и др. Состояние миокарда у крыс новой гипертензивной линии // Бюлл. экспер. биол. мед., 1996, №9, С. 271-273.

89. Яворковскии Л.Л., Яворковскии Л.И. // Там же 1985- X" 7 - С 84-88

90. Яворковский Л. Л. // Пробл. гематол.- 1982.-№ 11.-С. 50-56.

91. Яворковский Л. Л. // Фармакол. и токси-кол.- 1983.-№ 5.-С. 117-119.

92. Яворковский Л. Л., Гольдштейн И. А., Зи-ле М. Л„ Яворковский Л. И. // Тер. арх,- 1984.- № 6.- С. 84-87.

93. Alar con de Р.А., Oolberg J., Nelson D.A., Stockman l.A.H J Pediat 1983 -Vol 102-P 149-152

94. Alexandrowicz I., Wazewska Czyzewska M., Moszczynski P. et al. // Pol Tyg lek 1979-Vol 34 P 529-5301*15. Amdisen A, Scho u M // Побочные действия лекарственных средств/Под. ред. М. Н Дюкса. Пер. с англ.- М., 1983. С. 41-47.

95. Babior В.М. Oxygendependent microbial killing by phagocytes // N. Engl. J. Med. 1978. - 298, N 12. - P. 659-668; 721-725

96. Baldessarin R.J., Lipmski J.F.//Ann. intern. Med. 1975.- Vol. 83. - P.527-533.

97. Barren A.J., Griscelh C., Buriot D., Faille A.//Lancet, 1977. Vol. 2. -P.1357 -1358.

98. Barrett A.J.//International Society of HaematologyCongress, 18 th Paris, 1978. - Proceedings. Vol 2. - P. 826.

99. Baylis P H Heath DA// Ann intern Med 1978 Vol 88 P607-609

100. Bergman L., Mitron PS(eds): Cytokines in cancer therapy. Contrib. Oncol. Basel, Karger, 46: 1-10,1994.

101. Bertolini F., Battaglia M. et al. Blood.- 1995.- Vol.85.- P.3361-3362.

102. Bray J Turner A R Dusel F // Clinlmmunol Immimopath 1981 Vol 19 P 284 288

103. Brgmann L., Mitron PS(eds): Cytokines in cancer therapy. Contrib. Onkol. Basel, Karger, 46: 1-10,1994.

104. Burdach EG// Mschr Kmderheilk 1985 Bd 133 S 72-79

105. Chan H S L Freedmann M H Saun ders F F II Amer J Med 1981 Vol 70 P 1073-1077

106. Cohen M S Zakhireh В . Metcalf J A Root R К II Blood 1979 Vol 53 - P 913 915

107. Cozzi P.J., Padrid P., Tompkins M.B., Alegre M.L., Takeda J., Leff A.R. Bioactivity of recombinant feline interleukin-2 on human and feline leukocytes. Vet Immunol Immunopathol, 48:1-2, 27-33 ,1995.

108. Dorofteiu M., Orasan R., Marina C., Zibro M. et. al. The phagocytic activity of rats with stereotaxic distractions in the main zones of amygdala // European Journal of Physiology. 1995. № 4. P. 109.

109. Dovgan E.M., Fedonyuk Y.I., Borkovsky V.V., Fedonyuk L.Y. Structural changes in the epiphisial cartilage in hypokinetic animals adapted to phisical loads // Xth Cohference / Abstracts.- Moscow, Rosia, 1994.- p.36-37.

110. Dunham S.P., Argyle D.J., Onions D.E. The isolation and sequence of canine interleukin-2. DNA Seq, 5:3, 177-80, 1995; Knapp D.W., Williams J.S., Andrisani O.M. Cloning of the canine interleukin-2-encoding cDNA. Gene, 159:2, 281-2, 1995.

111. Fedonyuk Y.I. Bone Tissue Response to the Effect of the Some Environmental Factors // XlVth Federative International Congress of Anatomy / Abstracts Book.- Lisbon, Portugal, 1994.- s.215.

112. Fedonyuk Y.I., Sikora V.Z., Reminetskiy B.Y., Kravtsiv S.I., Voloshin

113. V.D., Veleschuk Y.T., Fedonyuk Y.I. Readaptation alterations of the bone tissue in post-dehydration period // IX European Anatomical Congress / Abstracts.-Krakow, Poland, 1992.p.72.

114. Fitzsimons R В Keane S // Europ J Pediat-1981-Vol 137 P 353 354

115. Gabig T.G. Leucocytes abnormalities // Med. Clin. N. Amer. 1980. - 64, N 4. - P. 647-666.

116. Gelfand E Dosch H M Hastings D Shore A II Science 1979 Vol 203- P 365

117. Gluckman E., Rocha V., Chastang С Л Bone Marrow Transplant. 1998. -Vol.22. - Suppl. l.-P. S.68-74.

118. Gregson M W// Canad J med Technol 1979 Vol 41 - P.158-164

119. Г41. Gupta R С , Robinson W A Kurnick J E // Amer J Med 1976-Vol 61 P 2932

120. Khanna C., Anderson P.M., Hasz D.E., Katsanis E., Neville M., Klausner J.S. Interleukin-2 liposome inhalation therapy is safe and effective for dogs with spontaneous pulmonary metastases. Cancer, 79:7, 1409-21, 1997.

121. Lowe N J Ridway H В//Arch Derm 1978 Vol 114-P 1788 1789

122. McCabe E R D Melwm T R, Brien D 0 etal //J Pediat-1980-Vol 97 P 944946

123. Mizrahl E M Hobbs S F Goldsmith D I // Ibid 1979-Vol 94 P 494-495

124. Mizuno S, Fujinaga T, Kurosawa T. Augmentative effects of phytohemagglutinin-P on proliferation and cytotoxicity of interleukin-2-activated canine peripheral blood lymphocytes. Zentralbl Veterinarmed A, 43:5, 289-96, 1996.

125. Murphy D L Godduiin F К Bunney WE// Amer J Psychiat 1971 Vol 127- P 1559-1561

126. Peretianu D, Lotreanu V // Viata med 1983-Vol 30-P 197 201

127. Perez Cruet J Waite / Mallya A Khaiawali AM// Lithium Contraversies and Unresolved Issues Amsterdam 1979 - P 881-894

128. Perez H D Kaplan H В Goldstein I M et al // Clin Immunol Immunopath -1980-Vol 16-P 308-315

129. Raber I., Bloom F.E. Arginin vasopressin release by acetylcholin ornorepinephrin: region-specific and cytokine-specific regulation // Neuroscience. 1996. V. 73. №2. P. 623.

130. Raber I., Koob G.F., Bloom F.E. Interferon-alpha and transforming growth-beta 1 regulate corticotropin-releasing factor from the amigdala:comparison with the hypothalamic response // Neurochem. 1997. V. 30. № 4-5. P. 455-463.

131. Raber J., Bloom F.E. Interleukin-2 induces vasopressin release from the hypothalamus and the amygdala:role of nitric oxide-mediated signaling // Neurobiology. 1994. V. 14. № 10. P. 6187-6195.

132. Reisberg В , Gershon S // Lithium Contro versies and Unresolved Issues -Amsterdam 1979 P 455-456

133. Robert Z lldiko Z // Orvosi Hetil 1983 Vol 124 P 277-279

134. Rossof A H Coltman С A / / Experientia (Basel) 1979-Vol 32 P 238-239

135. Rothstein G, Clarcson D R Larsen W Glosser В III New Engl J Med 1978 -Vol 298-P 178 180

136. Rubinstein P., Rosenfield R.E., Adamson J.W. et al.// Blood. 1993. - Vol. 81.-N.7.-P.1679-1690.

137. Ruhrdel P Teichmann В , Theile H // Dtsch Gesundh Wes 1984 Bd 39 - S 150-154

138. Sedlacek H.-H., Moroy I. Immune reactions: 15-21. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1995.

139. Shenkman L Borkowsky W Hoizman R S Shopsin В II Clin Immunol Immunopath 1978 Vol 10-P 187 192

140. Singer I Rotenberg D / / New Engl J Med 1973 Vol 289 P 254-260

141. Stein R S Beaman С Mohammed Y A et al //Ibid-1977-Vol 297-P 430-431

142. Stein R S Hanson G , Koethe S Hansen R II Ann intern Med-1978-Vol 88- P 809-810

143. Steinherz P G Rosen G Chauimi F et a I // J Pediat 1980 Vol 96 P 923 927

144. Therapeutic applications of Interleukin-2, Atkinns M.B., Mier J.W. (eds). Marsel Dekker, Inc., 1993.

145. Verma D S Spitzer G Zander A R etal // Leikemia Res 1982 Vol 6 P 567576

146. Williams W 0 Gyory A Z // Aust NZ J Med-1976-Vol 6-P 233 242

147. Woody S.N., London W.L., Wilbank G.D. // Pediatrics 1971. - Vol.47. P.94-96