Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Технология получения кератинсодержащей кормовой добавки и оценка ее влияния на качество шкурок норки

ВАК РФ 03.01.06, Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

Автореферат диссертации по теме "Технология получения кератинсодержащей кормовой добавки и оценка ее влияния на качество шкурок норки"

На правах рукописи

БАРАНЦЕВА Ольга Владимировна

Технология получения кератинсодержащей кормовой добавки и оценка ее влияния на качество шкурок норки

03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

4844323

2 1 ЙПГ 2011

Москва-2011

4844323

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ).

Научный руководитель: доктор технических наук, профессор

Сапожникова Алла Ионовна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Мирзаев Микаиль Нурбагандович доктор биологических наук Телишевская Любовь Яковлевна

Ведущая организация: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности»

Защита состоится «Ай » 2011 г. в ±0.ч-на заседа-

нии диссертационного совета Д.220.042.01 при ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина», по адресу: 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Тел. (495) 377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина».

Автореферат разослан «& » ию-рто 2011 года и размещен на сайте http://mgavm.ru.

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор

Грязнева Т.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В процессе получения основной товарной продукции на кожевенных, меховых, шерстеперерабатывающих предприятиях на отдельных этапах производства образуется большое количество побочных продуктов в виде скотоволоса, щетины, очеса шерстяных волокон. Преобладающим структурным и химическим компонентом перечисленных выше побочных продуктов является фибриллярный белок - кератин. Наибольшая ценность данного сырья связана с наличием в них серосодержащих аминокислот цистина и метионина [Карпова В.П., 1977; Сапожникова А.И., 1997; Соболева A.B., 2004; Шамханов Ч.Ю., 2004; Шестаков С.С., 1979].

Несмотря на имеющийся опыт сбора кератинового сырья в настоящее время оно используется не полностью. Это обусловлено несовершенством методов его переработки [Антипова JI.B., 2003].

Важным направлением в современной биологии являются исследования, направленные на расширение возможностей переработки белоксодержащего сырья животного происхождения с целью обеспечения экологичности производств за счет создания безотходных и малоотходных технологий при максимальном вовлечении побочных продуктов переработки в основное производство.

В связи с этим биотехнологические исследования, направленные на использование щадящих методов воздействия на кератинсодержащее сырье химических веществ с применением ферментных препаратов для оптимизации технологий получения кормовых добавок, представляет актуальную задачу.

Применение ферментативного гидролиза кератина приобретает научный и практический интерес в связи с возможностью получения на его основе гидролизатов и различных кормовых добавок с серосодержащими аминокислотами, способных при добавлении в основной рацион пушных зверей повышать качество шкурковой продукции.

Цель и задачи работы. Цель работы заключается в разработке технологии получения кормовой добавки из кератинсодержащих отходов и оценке ее влияния на качество шкурок норки.

При этом необходимо было решить следующие задачи:

1. Разработать технологию изготовления кормовой добавки на основе гидролизата кератина.

2. Определить стабильность средства в процессе хранения.

3. Провести оценку безвредности и ростостимулирующей активности кормовой добавки на лабораторных животных.

4. Определить эффективные дозы кормовой добавки.

5. Изучить влияние кормовой добавки на товарные свойства шкурок норки.

6. Рассчитать экономическую эффективность производства и применения кормовой добавки.

7. Разработать проект нормативно-технической документации по изготовлению, контролю качества и применению кормовой добавки.

Научная новизна. Впервые разработана технология получения из некондиционной овечьей шерсти кератинсодержащей кормовой добавки Керато-пептид.

Установлено, что сочетание щелочного гидролиза сырья с последующим воздействием ферментным препаратом, выделенным из культуры Aspergillus niger обеспечивает получение гидролизата с максимальным содержанием серосодержащих аминокислот (цистин 5,18±0,14 мг/см3, метионин 0,54±0,01 мг/см3).

Впервые экспериментально показано, что кормовая добавка Кератопеп-твд способствует улучшению товарных свойств шкурок норки. Полученные результаты исследований показали достоверное увеличение густоты волос на всех топографических участках для всех опытных групп в сравнении с контрольной.

Установлено, что введение в рацион кормления молодняка норок кормовой добавки Кератопептид способствует увеличению числа бездефектных шкурок и увеличению суммарного зачёта по качеству в опытных группах по сравнению с контрольной до 6,9%.

Практическая значимость работы.

На основании проведенных исследований разработана технология изготовления кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид.

В условиях ООО «Печора Шубина» изготовлены 3 опытно-производственные серии кормовой добавки.

Материалы исследований включены в проект нормативно-технической документации (технологический регламент изготовления, СТО 857531850001-2009 и инструкция по применению).

Личный вклад соискателя. Автору принадлежит непосредственное осуществление исследований по разработке оптимальных параметров и режимов технологии гидролиза шерсти овец, изучения влияния полученных кератинсодержащих кормовых добавок на товарные свойства шкурок норки в условиях ОАО «Племенной зверосовхоз «Салтыковский» Московской области, анализ и обобщение полученных данных, подготовка проекта нормативной документации на кормовую добавку. Ряд исследований были проведены в ГНУ ВИЭВ и в Аккредитованном испытательном лабораторном центре БИОТЕСТ МГУПБ при поддержке ведущего научного сотрудника М.И. Ис-кандарова, ведущего научного сотрудника О.В. Якушевой и Л.А. Зюковой, которым выражаем глубокую благодарность.

Апробация работы. Материалы по разработке кормовой добавки Кера-топептид рассмотрены и одобрены на заседании научно-методической комиссии ФГОУ ВПО МГАВМиБ (Москва, 2009) и научно-производственном совещании ООО «Печора Шубина» (МО, 2010); на международной конференции, посвященной 90-летию ФГОУ ВПО МГАВМиБ «Актуальные проблемы товароведения сырья и продуктов животного происхождения, промышленных и продовольственных товаров, экологии» (Москва, 2009); на Московской международной научно-практической конференции «Биотехнология: экология крупных городов» (Москва, 2010). Экспериментальные образцы кормовой добавки Кератопептид экспонировались на Российской агропромышленной выставке «Золотая осень - 2010» (Москва, 2010).

Публикации. По результатам исследований опубликовано 5 научных статей, в т.ч. 3 - в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 169 страницах машинописного текста, в.т.ч. 36 страниц приложений и включает следующие разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, практическое использова-

ние полученных научных результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы (174 источника, в том числе 30 иностранных). Материалы диссертации иллюстрированы 4 рисунками и 36 таблицами.

Основные положения и результаты, выносимые на защиту.

1. Технология изготовления и применения кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид.

2. Результаты оценки безвредности кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид на лабораторных животных.

3. Влияние кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид на товарные свойства шкурок норки.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в период с 2006 по 2010 гг. на кафедре товароведения и технологии сырья животного происхождения им. С.А. Каспарьянца ФГОУ ВПОМГАВМиБ.

Научно-хозяйственные опыты на убойном молодняке норок были проведены в условиях ОАО «Племенной зверосовхоз «Салтыковский» Московской области.

В качестве подопытных животных использованы 50 беспородных белых мышей массой 18 - 20 г и 5 кроликов породы шиншилла. В качестве объектов исследований по влиянию кератинсодержащей кормовой добавки на товарные свойства шкурок норки было отобрано 204 самца норок стандартного темно-коричневого окраса.

Гидролиз некондиционной овечьей шерсти, приобретенной на предприятии ООО «Печора Шубина» проводили по запатентованной методике (пат. 2092072 - А.И. Сапожникова, С.А. Каспарьянц, Н.В. Месропова, Н.М. Горди-енко) в нашей модификации.

Массовую долю белка в образцах определяли методом Къельдаля (2002), аминокислот — на аминокислотном анализаторе (модель 835 производства «Hitachi»).

Полученную кормовую добавку исследовали на стерильность в соответствии с ГОСТ 28085-89 «Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности».

Токсичность кормовой добавки определяли методом биотестирования параллельно на кроликах (кожная проба) и на беспородных белых мышах согласно ГОСТ Р-5233 7-2005 «Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения общей токсичности».

Для установления срока и режима хранения была изучена стабильность опытных образцов кератинсодержащей добавки Кератопептид в условиях естественного хранения согласно ОСТ 42-2-72.

Для оценки влияния кератинсодержащей кормовой добавки на товарные свойства шкурок норки были проведены производственные опыты на убойном молодняке норок в условиях ОАО «Племенной зверосовхоз «Салтыковский» Московской области.

Товароведную оценку качества шкурок проводили комиссионно с участием специалистов зверосовхоза в соответствии с требованиями ГОСТ 27769-88 «Шкурки норки клеточного разведения невыделанные».

Приготовление гистологических препаратов проводили методом заливки в целлоидин. Окрашивали гистологические препараты гематоксилин - эозином.

Экономический эффект от применения Кератопептида в рационе кормления молодняка норок рассчитывали исходя из себестоимости производства шкурок норки, их реализационных цен и затрат на производство кормовой добавки в ценах 2008-2009 гг.

Результаты исследований обрабатывали методами вариационной статистики. Уровень вероятности брали равным 0,95. Также экспериментальные данные обрабатывали с использованием пакета компьютерной программы (^айвйса 6,0».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Обоснование и биотехнологические исследования по оптимизации получения гидролизата кератина

В настоящее время, известно большое количество технологических приемов получения растворов кератина, которые постоянно совершенствуются. В последнее время наиболее перспективными считаются способы получения гидролизатов с применением специфических ферментов, позволяющие получать белковые гидролизаты с максимально полным набором аминокислот.

Нами были проведены исследования направленные на сочетание воздействия химических компонентов, действующих на дисульфидные связи шерсти с последующим воздействием на кератин протеолитическим ферментом.

На первом этапе целью нашей работы было подобрать оптимальные условия получения растворимого кератина из кератинсодержащего сырья и оптимизировать технологию переработки кератина для приготовления кормовой добавки с серосодержащими аминокислотами.

При этом было проведено сравнительное изучение следующих схем гидролиза:

1. Щелочной гидролиз согласно пат. 2092072 Способ получения кератина (А.И. Сапожникова, С.А. Каспарьянц, Н.В. Месропова, Н.М. Гордиенко).

2. Щелочной гидролиз раствором, содержащим гидроксид натрия и перекись водорода с добавлением сульфита натрия.

3. Кратковременный щелочной гидролиз раствором, содержащим гидроксид натрия, перекись водорода и сульфит натрия с последующим воздействием протеолитическим ферментным препаратом Оллзайм ФД (Allzyme Feather Digest), выделенным из культуры Aspergillus niger.

Согласно первой схеме промытую овечью шерсть обрабатывали раствором, содержащим 4 % муравьиной кислоты и 0,5 % пероксида водорода при комнатной температуре в течение 8 ч, далее промывали водой и обрабатывали раствором, содержащим 3 % гидроксида натрия и 1 % пероксида водорода при комнатной температуре в течение 36 часов.

По результатам аминокислотного анализа установлено сравнительно низкое содержание серосодержащих аминокислот, которое составило цистина 1,13±0,03 мг/см3, метионина 0,28±0,01 мг/см3.

Для повышения растворимости сырья необходим, по-видимому, более полный распад дисульфидных связей, который может быть достигнут путем одновременного воздействия ионов ОН" и HS~b водной среде.

Согласно второй схеме сырье обрабатывали раствором, содержащим 3 % NaOH и 1 % Н202 с добавлением 0,5 % Na2S03. После окончания гидролиза полученный кератинсодержащий продукт нейтрализовали ортофосфорной кислотой до рН 6,7.

Поскольку эффект обработки кератинсодержащего сырья химическими компонентами зависит от концентрации и времени воздействия, представляло интерес исследовать действие временного фактора на растворимость сырья.

Гидромодуль обработки сырья оказывает достаточно большое влияние на разрушение прочных белковых структур и полноту извлечения целевых компонентов. Действие реагентов при предварительной обработке овечьей шерсти оценивали при гидромодулях в диапазоне 1:5-1:15.

Как показали результаты исследований (рис. 1), после воздействия реакционной смеси при гидромодуле 1:7,5 в течение 3 часов при комнатной температуре растворимость шерсти составила 32,6 %.

0гидромодуль 1:5 Пгидромодуль 1:7,5 (2:15) □гидромодуль 1:15

Рис. 1. Растворимость кератинсодержащего сырья

Гидромодуль 1:7,5 обеспечивает достаточно высокую степень растворимости гидролизованного кератинового сырья - его остаточное количество после 12 часов воздействия не превышает 15,1 %. Наибольшая растворимость сырья была отмечена при гидромодуле 1:15, однако обработка сырья при таких условиях значительно снижает массовую долю растворимого белка до 49,0 мг/см3. В гидролизате, полученном по второй схеме, содержание цистина составило 0,61 ±0,02 мг/см3, метионина-0,55±0,02 мг/см3.

Полученные образцы гидролизатов шерсти по схеме 1 и 2 характеризовались значительной растворимостью кератинового сырья 88,1 %; 84,9 % и растворимого белка 69,0 мг/см3, 96,0 мг/см3 соответственно.

50,0%

90,0% 80,0% 70,0%-

По второму варианту удалось получить раствор кератина с более высоким содержанием белка в сравнении с первым, однако интенсификация гидролиза шерсти в результате совместного воздействия гидроксида натрия и сульфита натрия приводит к значительному разрушению серосодержащих аминокислот.

Для решения этого вопроса был применен третий вариант получения гид-ролизата, включающий кратковременный щелочной гидролиз раствором, содержащим гидроксид натрия, пероксид водорода и сульфит натрия с последующим воздействием протеолитическим ферментным препаратом.

В нашей работе был испытан коммерческий ферментный препарат Ол-лзайм ФД (Allzyme Feather Digest) производства Alltech (США), зарегистрированный в РФ (регистрационный номер ПВИ - 2 - 0.2/01161, от 25.12.2002). Ферментный препарат, выделенный из культуры Aspergillus niger с активностью грибной протеазы 12500 HUT/r и липазы 130 LU/r.

Для решения задачи по определению оптимальной концентрации ферментного препарата массовую долю фермента изменяли в диапазоне 0,5 г; 1,0 г; 1,5 г фермента на 1 кг обрабатываемого сырья. Растворимость кератин-содержащего сырья определяли после 3,6 и 9 часов ферментативного воздействия.

Предварительная кратковременная обработка шерсти раствором содержащим 3 % NaOH, 1 % Н2О2 и 0,5 % Na2S03 значительно стимулировала последующий ферментативный гидролиз подготовленного сырья. Ферментативный гидролиз проводили после нейтрализации щелочи ортофосфорной кислотой до рН 6,7. Через шесть часов воздействия раствором, содержащим фермента 1 г на 1 кг исходного сырья при комнатной температуре, в растворимое состояние переходило - 72,5 % сырья, при этом концентрация белка составила 81,9 мг/см3. При добавлении фермента из расчета 0,5 г на 1 кг сырья через 6 часов воздействия при комнатной температуре переходило в растворимое состояние только 65,9 % шерсти. Незначительный рост (всего на 1,9 %) растворимости сырья продолжался до внесения дозы фермента 1,5 г/кг.

Таким образом, на основании анализа полученных результатов проведенной серии опытов было установлено, что наиболее рациональной технологи-

ей гидролиза шерсти овец выбран технологический прием, включающий предварительную кратковременную (3 часа) обработку шерсти раствором, содержащим 3 % ИаОН, 1 % Н2Ог и 0,5 % Ыа2803 при гидромодуле 1:7,5 и дальнейший ферментативный гидролиз в течение шести часов при комнатной температуре. Фермент добавляли из расчета 1 г на 1 кг шерсти.

При аминокислотном анализе образцов гидролизата, полученного по схеме № 3, установлено, что наличие серосодержащих аминокислот составило цистина 5,18±0,14 мг/см3, метионина 0,54±0,01 мг/см3.

Таблица 1. Сравнительная характеристика гидролизатов шерсти, полученных различными методами, (п=3)

Способ полунения Использовано сырья, кг Получено гидролизата, л Содержание белка в гидролизате, мг/ см' Содержание цистина, мг/см3 Нерастворен-ный остаток, кг

I - схема 1,00 9,88 ±0,05 69,20 ±0,90 1,13 ±0,03 0,12 ±0,04

П - схема 1,00 7,36 ±0,03 96,00 ±0,60 0,61 ±0,02 0,14 ±0,03

III - схема 1,00 7,22 ±0,04 81,90 ±0,40 5,18 ±0,14 0,28 ±0,03

Анализ аминокислотного состава образцов (табл.1), полученных различными методами гидролиза показал, что проведение операций по предлагаемой третьей схеме позволяет получить продукт с максимальным содержанием серосодержащих аминокислот по сравнению с исследуемыми способами.

Технология получения кормовой добавки Кератопептид

В условиях ООО «Печора Шубина» согласно разработанному технологическому регламенту нами было изготовлено 3 опытно-производственных серии кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид.

Технологический регламент изготовления опытно-производственных серий кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид включает 6 основных этапов (рис. 2):

1 Подготовка помещения и оборудования, инструментов и посуды;

2 Приготовление гидролизата;

2.1 Подготовка составных компонентов;

2.2 Подготовка овечьей шерсти (очистка от механических загрязнений, промывка);

2.3 Предобработка раствором, содержащим 3 % NaOH, 1 % Н202 и 0,5 % Na2S03 в течение 3 часов;

2.4 Нейтрализация раствора ортофосфорной кислотой (Н3РО4) до рН 6,7;

2.5 Ферментативный гидролиз в течение 6 часов при комнатной температуре ферментным препаратом Оллзайм ФД (Allzyme Feather Digest) из расчета 1 г фермента на 1 кг исходного сырья;

3 Стерилизация при температуре 110 °С в течение 15 минут. На этом этапе фермент инактивируется;

4 Фильтрация через лавсановый фильтр;

5 Фасовка кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид;

6 Контроль кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид по всем показателям качества, предусмотренных СТО 85753185-0001-2009.

Очищенная от

мксаничютп

примесей некондшдонная

Шв|)С» Ш1Ц

Промывка шерсти (HjO:

t=awc;

т =10 мин.)

Обработка

рас тавром (З'/tNaOH, 1V.HsOJ, OiV.NaiSOj): t-20J2«C; t -3 ч.)

Нейтрализация ортофвефорной

КИСЛСЮЙ

№KW

ДорН«,7

Обработка ферментным препарат)»] Ол-тийм ФД>: »-ШД'&т^ч

Рис. 2. Схема технологического процесса изготовления кормовой добавки Кератопептид

Определение стабильности кормовой добавки Кератопептид в процессе хранения

Согласно проекту СТО 85753185-0001-2009 на кормовую добавку Кератопептид критериями оценки качества служили следующие показатели: внешний вид, номинальный объем упаковки, концентрация водородных ионов, массовая доля белка, массовая доля цистина, токсичность и стерильность.

Для установления гарантированного срока годности кормовой добавки Кератопептид и условий хранения проведены исследования стабильности препарата в условиях естественного хранения. Исследование образцов проводили через 6, 12, 18 и 24 месяца после закладки на хранение. Полученные результаты показали, что в процессе всего срока хранения (24 месяца) кера-тинсодержащей кормовой добавки Кератопептид не происходило достоверных изменений массовой доли белка (81,8 - 81,4 мг/см3) и массовой доли цистина (5,17 - 5,08 мг/см3). Значение рН раствора в течение хранения соответствовало нормам СТО - (6,7±0,3).

Полученные результаты позволили включить в инструкцию по применению и СТО срок годности препарата 2 года с даты изготовления.

Бактериологический контроль стерильности кормовой добавки

Кератопептид

Посев проводили на среду Сабуро, МПА, МПБ и среду Китта-Тароцци.

В результате испытания Кератопептида было установлено, что все испытуемые образцы были стерильными - ни в одной из пробирок не было отмечено роста бактериальной и грибной микрофлоры. При микроскопическом анализе посевов микробных клеток не обнаружено. Предлагаемая нами технология обеспечивает получение стерильной кормовой добавки.

Изучение токсичности кормовой добавки Кератопептид

Изучение токсичности кормовой добавки Кератопептид на кроликах.

Изучение дермонекротического воздействия на кожу животных проводили на 5 кроликах породы шиншилла массой 2,0 - 2,2 кг. Для постановки опыта у кроликов на участке кожи размером 6x6 см в области бедра тщательно выстригали волосяной покров, на выстриженный участок кожи кроликов пластиковой лопаткой наносили кормовую добавку. На следующий день прово-

дили повторное нанесение. В качестве контроля использовали оголенный участок кожи размером 6x6 см, на который не наносили препарат. Наблюдение за реакцией продолжали в течение 3 суток, начиная со следующего дня после повторного нанесения Кератопептида. У опытных животных не было отмечено воспалительного процесса на участках с нанесенным препаратом.

Изучение токсичности кормовой добавки Кератопептид на белых мышах. Влияние кормовой добавки Кератопептид на пищеварительную систему теплокровных животных изучали на беспородных белых мышах массой 18-20 г. Для этого были сформированы опытная и контрольная группы по 5 животных в каждой. Мышам опытной группы вводили однократно внутри-желудочно предельно допустимый объем (1,0 см3) кормовой добавки. Наблюдение за клиническим состоянием лабораторных животных вели в течение 3 суток. Влияние кормовой добавки Кератопептид на мышей оценивали по внешнему виду внутренних органов (желудочно-кишечного тракта, печени, селезенки, почек). При проведении испытаний по определению токсичности на белых мышах было установлено, что в течение трех суток эксперимента все животные опытной и контрольной групп оставались клинически здоровыми. При вскрытии мышей опытной группы не выявлено видимых изменений внутренних органов в сравнении с контролем.

По совокупности реакций в обоих параллельных методах можно сделать вывод, что исследуемая кормовая добавка Кератопептид является нетоксичной.

Определение ростостимулирующей активности кормовой добавки Кератопептид на белых мышах

Для исследования ростостимулирующей активности кормовой добавки

были сформированы 4 группы мышей массой 12-14 г, по 10 животных в каждой. Первую группу - контрольную, кормили приготовленным гранулированным кормом из дробленого зерна. Кормовую смесь для животных второй, третьей, четвертой опытных групп готовили с добавлением препарата в пересчете на белок, соответственно, по 0,2 %, 2 %, 20 % от массы корма.

Наблюдение за животными вели в течение месяца. Взвешивание проводили через 2-3 дня. При введении Кератопептида в кормовую смесь в концентрации 0,2 % и 2 % от массы корма наблюдалось статистически достовер-

ное увеличение массы тела мышей через 4 недели от начала постановки опыта на 6 % и 3 % и составило 24,8 г, 24,1 г соответственно, против 23,4 г контрольной группы. У животных IV группы наблюдалось снижение массы тела на 3 %.

Действие кормовой добавки на организм мышей также оценивали при определении биохимических, гематологических показателей крови (табл. 2). Таблица 2. Показатели крови мышей, (п=10)

Показатель крови До применения кормовой добавки (Х±шх) Через 30 дней (Х±шх)

I-контроль-ная П-опытная III — опытная IV-опытная I-кот-рольная II-опытная III — опытная IV-опытная

Гемоглобин, г/л 96Д±2,4 95,8±3,1 97,6±4,1 96,6±2,8 96,8±3,5 97,3±4,4 98,2±3,8 96,3=ь2,6

Эритроциты 1012/л 8,6±0,4 8,1±0,2 9,1 ±0,5 8,9±0,4 8,4±0,5 8,6±0,5 9,2±0,6 8,9±0,3

Лейкоциты, 107л 9,4±0,9 9,7±0,7 10,5±0,9 9,9±0,6 9,6±0,8 10,Ш,8 10,3±0,6 9,8±0,9

Белок, г/л 67,1±2,0 66,9±1,5 68,1±2,3 67,8±1,8 67,3±1,8 67,2±1,3 68,2±2,8 67,9±1,6

Клинический анализ крови не выявил статистически значимых изменений показателей крови мышей при завершении эксперимента.

Изучение влияния кормовой добавки на товарные свойства шкурок

норки

Для выяснения влияния Кератопептида на товарные свойства шкурок норок, а также для определения наиболее эффективной дозировки Кератопептида было проведено два производственных опыта в условиях ОАО «Племенной зверосовхоз «Салтыковский» Московской области. В экспериментах было использовано 204 самца норок.

Производственный опыт на убойном молодняке норок, 2007 г. Опыт был проведен на норках стандартного темно-коричневого окраса, рожденных в период с 30.04.07 г. по 04.05.07 г. Для исследований были отобраны 60 животных (самцов) и сформированы 5 групп, по 12 животных в каждой. Через месяц после формирования групп к основному рациону добавляли кормовые добавки, в соответствии со схемой опыта. Первая группа - контрольная, получавшая обычный рацион кормления, вторая, третья, четвертая, пятая группы - опытные - в рацион, которых вносили в пересчете на белок по 0,2 % и

15

по 1 % от суточной нормы белка препараты, полученные щелочным и комбинированным методами гидролиза. Кормовые добавки вносили в корм пятидневными курсами с десятидневными перерывами четыре цикла (август- сентябрь 2007 г).

Для получения информации о влиянии кератинсодержащих кормовых добавок на товарные свойства шкурок норки комиссионно была проведена сортировка шкурок. Зачёт шкурок по качеству с учетом размера, группы дефектов в II, IV, V опытных группах был выше, чем в контрольной. Разница в суммарном зачете между контрольной и опытными группами составила 3,1 %; 5,0 % и 1,8 % соответственно. Наиболее распространенным дефектом шкурок норки контрольной группы было выявлено поредение волосяного покрова - 40 % против 17-33 %% шкурок опытных групп. Также были проведены исследования, направленные на изучение густоты волосяного покрова, длины и толщины волос различных категорий, по результатам которых выявлено, что наибольшее влияние кератинсодержащие кормовые добавки оказывают на густоту волосяного покрова шкурок норки.

Применение кормовой добавки, полученной комбинированным методом, показало наилучшие результаты. В связи с этим, был проведен производственный опыт на большем поголовье убойного молодняка норок для определения наиболее эффективной дозировки Кератопептида.

Производственный опыт на убойном молодняке норок, 2008 г. В период 01.07.08 г. по 31.01.09 г. на базе ОАО «Племенной зверосовхоз «Салты-ковский» были проведены испытания эффективности применения кормовой добавки Кератопептид на норках стандартного темно-коричневого окраса, рожденных в период с 30.04.08 г. по 01.05.08 г. Для исследований были отобраны 144 животных (самцов) и сформированы 4 группы, по 36 животных в каждой.

Первая группа - контрольная, получавшая обычный рацион кормления, вторая, третья, четвертая группы - опытные - в рацион, которых вносили кормовую добавку в пересчете на белок по 0,2 %, 0,6 % и 1,0 % от суточной нормы белка. Кормовую добавку вносили в корм пятидневными курсами с десятидневными перерывами четыре цикла (август- сентябрь 2008 г).

Проведенная сортировка шкурок норки, полученных от животных контрольной и опытных групп, позволила отнести все шкурки к I сорту.

Разница в суммарном зачёте по качеству между контрольной и II, III и IV опытными группами составила 6,9 %; 2,7 % и 4,8 % соответственно.

В процессе сортировки также было отмечено снижение в опытных группах общего количества шкурок с дефектами на 20 % (для 11-ой группы); на 10% (для Ш-ей и IV-ой групп) в сравнении с группой контроля.

Результаты проведенных исследований по влиянию Кератопептида на густоту волосяного покрова показали достоверное увеличение данного показателя на всех топографических участках для всех опытных групп в сравнении с контрольной (при Р>0,95). Наибольшее увеличение, а именно на 8-14%, количества волос на единицу площади отмечено во П-ой опытной группе в сравнении с аналогичными показателями контрольной.

Гистологические исследования горизонтальных срезов образцов шкурок норки

В связи с тем, что основными показателями густоты волосяного покрова являются количество волос в пучках, количество пучков в группах и плотность расположения групп, на горизонтальных срезах образцов шкурок норки определяли густоту волосяного покрова путем подсчета фолликулов в пучках в поле зрения микроскопа. Подсчет количества групп проводили в 10 полях зрения микроскопа.

а - контрольная группа б — II опытная группа

в — III опытная группа г - IV опытная группа

Рис. 3. Горизонтальный срез образцов шкурки норки

1 - пучки пуховых волос; 2 - остевой волос; 3 - направляющий волос

При гистологическом исследовании горизонтальных срезов образцов шкурок норки было установлено увеличение количества волос (развитых фолликулов) в пучке в образцах опытных групп в сравнении с контрольной группой (рис. 3).

При этом наименьшее количество фолликулов наблюдали в срезе контрольной группы, наибольшее в срезе II опытной группы - 17,4±0,6 и 21,8±0,4 соответственно. В наших исследованиях выявлена достоверная разница количества волос в пучке в образцах опытных групп в сравнении с контрольной группой (при Р>0,95).

Таким образом, на основании экспериментальных данных и данных литературы, можно сделать вывод, что внесение в рацион кормления молодняка норок кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид по предложенной схеме ускоряет процессы созревания большего количества вторичных фолликулов и вызывает возрастание количества волос на единицу площади.

ВЫВОДЫ

1. Разработана технология получения кератинсодержащей кормовой добавки путем кратковременной обработки овечьей шерсти раствором, содержащим 3 % NaOH, 1 % Н202 и 0,5 % Na2S03 при гидромодуле 1:7,5 с дальнейшим введением ферментативного препарата, выделенного из культур Aspergillus niger из расчета 1 г на 1 кг шерсти.

2. Установлено, что комбинированный метод с применением ферментативного гидролиза позволяет получить кормовую добавку с высоким содержанием цистина (5,18±0,14 мг/см3), метионина (0,54±0,01 мг/см3) и массовой долей белка 81,9 мг/см3. Установлено, что кормовая добавка стабильна при хранении в течение 2 лет.

3. В опытах на лабораторных животных подтверждена ростостимули-рующая активность кормовой добавки и отсутствие токсического действия Кератопептида.

4. Кератинсодержащая кормовая добавка улучшает товарные свойства шкурок норки. Полученные результаты исследований показали достоверное увеличение густоты волос на всех топографических участках. Наибольшее увеличение, а именно на 8-14 %, количества волос на единицу площади отмечено во И-ой опытной группе при введении в рацион добавки в концентрации 0,2 % от суточной нормы белка.

5. В производственных опытах отмечено снижение общего количества шкурок с дефектами на 20 % (для И-ой группы); на 10 % (для Ш-ей и 1У-ой групп) в сравнении с группой контроля. При применении кормовой добавки выявлено увеличение суммарного зачёта по качеству шкурок в опытных группах в сравнении с контрольной до 6,9 %.

6. Положительное действие кормовой добавки Кератопептид на качество шкурок норки подтверждено гистологическими исследованиями, свидетельствующими об увеличении количества фолликулов в пучках в образцах опытных групп в сравнении с контрольной.

7. Наибольший дополнительный экономический эффект от реализации шкурок норки достигается при введении Кератопептида в кормосмесь для молодняка норок в дозировке 0,2 % по предложенной схеме позволяет повысить рентабельность производства шкурок норки на 10 %.

8. На основании проведенных лабораторных и хозяйственных опытов, совместно с сотрудниками ООО «Печора Шубина» разработан проект нормативно-технической документации (технологический регламент изготовления, СТО 85753185-0001-2009, инструкция по применению кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид).

ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

Результаты исследований, проведенных в условиях ОАО «Племенной

зверосовхоз «Салтыковский» и подтвержденных актами научно-хозяйственных испытаний, использованы при разработке проекта нормативно-технической документации на производство и применение кератинсодер-жащей кормовой добавки Кератопептид (Технологический регламент, СТО 85753185-0001-2009, Инструкция по применению от 09.06.2009г).

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

Предложенный кератинсодержащий продукт Кератопептид может быть

рекомендован в качестве кормовой добавки для молодняка норок с целью улучшения качества шкурковой продукции.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Баранцева О.В. Оценка некоторых показателей качества кормовой

добавки Кератопептид в лабораторных условиях // Ветеринарная медицина. -2009.-№3.-С. 30-32.

2. Баранцева О.В. Влияние кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид на густоту волосяного покрова молодняка норок // Ветеринарная медицина. - 2010. - № 5 - 6. - С. 52 - 54.

3. Баранцева О.В., Балакирев H.A., Сапожникова А.И. Получение и использование кератинсодержащей кормовой добавки для кормления молодняка норок // Актуальные проблемы товароведения сырья и продуктов животного происхождения, промышленных и продовольственных товаров, экологии: межвед. юбилейный сб. науч. трудов. - М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ. -2009.-С. 198-204.

4. Кис И.В., Баранцева О.В. Биотехнологические аспекты получения бе-локсодержащих препаратов из отходов сырья животного происхождения // Биотехнология: экология крупных городов: Сб. тезисов Московской международной научно-практической конференции. - М.: ЗАО «Экспо-биохим-технологии» РХТУ им. Д.И. Менделеева. - 2010. - С. 208 - 209.

5. Сапожникова А.И., Баранцева О.В. Оптимизация получения кератин-содержащего препарата из овечьей шерсти // Ветеринарная медицина. - 2009. -№1-2.-С. 16-17.

Отпечатано в ООО «Компания Спутник+» ПД № 1-00007 от 25.09.2000 г. Подписано в печать 25.03.2011 Тираж 100 экз. Усл. п.л. 1,0 Печать авторефератов (495)730-47-74,778-45-60

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Баранцева, Ольга Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 11 1.1 Характеристика кератинсодержащего сырья и способы его пере1 работки

1.1.1 Строение и свойства кератина

1.1.2 Способы получения кератина 19 1.2. Биологические особенности норок

1.2.1 Характеристика товарных свойств шкурок норки

1.2.2 Влияние серосодержащих аминокислот на товарные свойства шкурок норки

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и методы исследований

2.2 Результаты исследований

2.2.1 Обоснование и биотехнологические исследования по оптимизации получения гидролизата кератина

2.2.2 Технология получения кормовой добавки Кератопегггид

2.2.3 Определение стабильности кормовой добавки Кератопептид в процессе 59 хранения

2.2.4 Бактериологический контроль стерильности кормовой добавки Кератопептид

2.2.5 Изучение токсичности и ростостимулирующей активности 62 кормовой добавки Кератопептид на лабораторных животных

2.2.5.1 Изучение токсичности кормовой добавки Кератопептид на кроликах

2.2.5.2 Изучение токсичности кормовой добавки Кератопептид на белых мышах

2.2.5.3 Определение ростостимулирующей активности кормовой добавки Кератопептид на белых мышах 64 2.2.6 Изучение влияния кормовой добавки Кератопептид на товарные свойства шкурок норки

2.2.6.1 Производственный опыт на убойном молодняке норок, 2007 г

2.2.6.1.1 Влияние кормовой добавки на размер шкурок норки

2.2.6.1.2 Товароведная характеристика шкурок норки

2.2.6.1.3 Влияние кормовой добавки на длину, толщину волос, гус- . 75 тоту волосяного покрова шкурок норки

2.2.6.2 Производственный опыт на убойном молодняке норок, 81 2008 г. Определение эффективной дозы кормовой добавки.

2.2.6.3 Гистологические исследования горизонтальных срезов об- 94 разцов шкурок норки

3. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДСТВА И ПРИМЕНЕНИЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ КЕРАТОПЕПТИД

3.1 Калькуляция себестоимости производства кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид

3.2 Экономическая эффективность производства и реализации шкурок норки

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 106 ВЫВОДЫ 112 ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 114 РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ , 114 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Технология получения кератинсодержащей кормовой добавки и оценка ее влияния на качество шкурок норки"

Актуальность темы.

В процессе получения- основной товарной- продукции на кожевенных, меховых, шерстеперерабатывающих предприятиях на отдельных этапах производства образуется большое количество побочных продуктов в виде ско-товолоса, щетины, очеса шерстяных волокон. Преобладающим структурным и химическим компонентом перечисленных выше побочных продуктов является фибриллярный белок - кератин.

Анализ многочисленных источников, литературы указывает на широкие потенциальные возможности рационального и эффективного применения, не используемых в настоящее время кератинсодержащих отходов. Исследование химического состава свидетельствует о высоком содержании глутаминовой кислоты, лейцина, серина, пролина и валина в кератинсодержащих материалах. Однако наибольшая ценность данного сырья связана с наличием в-них серосодержащих аминокислот цистина и метионина [52; 111; 119; 136; 139].

Вышеизложенное объясняет определенный интерес предприятий, занимающихся изготовлением продукции биотехнологического, фармацевтического и косметического назначения, к кератинсодержащим продуктам как к новому перспективному источнику белоксодержащего сырья.

Химическая оценка кератинов, позволяет положительно оценить потенциальные возможности этих белковых ресурсов как источников незаменимых аминокислот. Данное обстоятельство служит основой для изыскания путей рационального использования этого сырья в получении продуктов кормового назначения [136].

Учитывая тот факт, что высокая стабильность и нерастворимость кератина обусловлена большим числом поперечных дисульфидных связей между его пептидными цепями рекомендуется осуществлять разрыв поперечных дисульфидных связей кератина за счет окислительно-восстановительных процедур, что в конечном итоге приводит к образованию растворимого продукта, расщепляющегося протеолитическими ферментами [119].

Однако жесткие условия гидролиза с применением больших концентраций щелочи разрушают некоторые серосодержащие аминокислоты.

Предварительная обработка сырья, перекисью водорода способствует окислению4 кератина шерсти, и тем самым ускоряет протекание щелочного гидролиза. При действии на кератин восстановителей сульфитов (гидросульфитов) дисульфидные связи разрываются, что способствует более полному гидролизу [90; 136].

В последнее время наиболее перспективными считаются способы получения гидролизатов с помощью специфических ферментов, позволяющие получать белковые гидролизаты с максимально полным набором аминокислот [67].

Несмотря на имеющийся опыт сбора кератинового сырья в настоящее время оно используется не полностью. Это обусловлено несовершенством методов его переработки [5].

На основании анализа данных литературы, становится очевидным, что важным направлением в современной биологии являются исследования, направленные на расширение возможностей переработки белоксодержащего сырья животного происхождения с целью обеспечения экологичности производств за счет создания безотходных и малоотходных технологий при максимальном вовлечении побочных продуктов переработки в основное производство.

В связи с этим биотехнологические исследования, направленные на. использование щадящих методов воздействия на кератинсодержащее сырье химических веществ с применением ферментных препаратов для оптимизации технологий получения кормовых добавок, представляет актуальную задачу.

Применение ферментативного гидролиза кератина приобретает научный и практический интерес в связи с возможностью получения на его основе гидролизатов и различных кормовых добавок с серосодержащими аминокислотами, способных при добавлении в основной рацион пушных зверей повышать качество шкурковой продукции.

Цель и задачи работы.

Цель работы заключается в разработке технологии получения кормовой добавки из кератинсодержащих отходов-и оценке ее влияния на качество шкурок норки.

При этом необходимо было решить следующие задачи:

1. Разработать технологию изготовления кормовой добавки на основе гидролизата кератина;

2. Определить стабильность средства в процессе хранения;

3. Провести оценку безвредности и ростостимулирующей активности кормовой добавки на лабораторных животных;

4. Определить эффективные дозы кормовой добавки;

5. Изучить влияние кормовой добавки на товарные свойства шкурок норки;

6. Рассчитать экономическую эффективность производства и применения кормовой добавки;

7. Разработать проект нормативно-технической документации по* изготовлению, контролю качества и применению кормовой добавки.

Научная новизна.

Впервые разработана технология получения из некондиционной овечьей шерсти кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид.

Установлено, что сочетание щелочного гидролиза сырья с последующим воздействием ферментным препаратом, выделенным из культуры Aspergillus niger обеспечивает получение гидролизата с максимальным содержанием серосодержащих аминокислот (цистин 5,18±0,14 мг/см, метионин 0,54±0,01 мг/см3).

Впервые экспериментально показано; что кормовая добавка Кератопептид способствует улучшению товарных свойств шкурок норки. Полученные результатышсследований показали достоверное увеличение густоты волос на всех; топографических .участках для- всех опытных групп в сравнении! с: контрольной.

Установлено, что введение в рацион кормления молодняка норок кормо- • вой добавки Кератопептид способствует увеличению числа бездефектных шкурок и увеличению суммарного зачёта по качеству в опытных группах по сравнению с контрольной до 6,9%.

Практическая значимость работы.

На основании проведенных исследований разработана технология; изготовления^ кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид.

В? условиях ООО «Печора Шубина» изготовлены 3 опытно-производственных серии кормовой добавки.

Материалы исследований? включены в проект нормативно-технической документации (технологический; регламент изготовления; СТО 857531850001-2009 и инструкция по применению).

Личный вклад соискателя;

Автору принадлежит непосредственное осуществление исследований по разработке оптимальных параметров и режймов технологий гидролйзатшер-сти овец; изучения, влияния полученных кератинсодержащих кормовых добавок на товарные свойства шкурок норки в условиях ОАО «Племенной; зверосовхоз «Салтыковский» Московской ^ области, анализ и обобщение полученных данных, подготовка проекта нормативной документации на кормовую добавку. Ряд исследований были проведены в ГНУ ВИЭВ и в Аккредитованном испытательном лабораторном; центре БИОТЕСТ МГУПБ при поддержке ведущего научного сотрудника М.И1 Искандарова, ведущего научного сотрудника О.В. Якушевой и Л.А. Зюковой, которым выражаем глубокую благодарность.

Апробация работы.

Материалы по разработке кормовой добавки Кератопептид рассмотрены и одобрены на заседании« научно-методической комиссии ФГОУ ВПО МГАВМиБ (Москва, 2009) и научно-производственном совещании ООО «Печора Шубина» (МО, 2010); на международной'конференции, посвященной 90-летию ФГОУ ВПО МГАВМиБ «Актуальные проблемы товароведения сырья и продуктов животного происхождения, промышленных и продовольственных товаров, экологии» (Москва, 2009); на Московской международной научно-практической конференции «Биотехнология: экология крупных городов» (Москва, 2010). Экспериментальные образцы кормовой добавки Кератопептид экспонировались на Российской агропромышленной выставке «Золотая осень - 2010» (Москва, 2010).

Публикации.

По результатам исследований опубликовано 5 научных статей, в т.ч. 3 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа изложена на 169 страницах машинописного текста, в.т.ч. 36 страниц приложений и включает следующие разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, практическое использование полученных научных результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы (174 источника, в том числе 30 иностранных). Материалы диссертации иллюстрированы 4 рисунками и 36 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)", Баранцева, Ольга Владимировна

выводы

1. Разработана технология получения, кератинеодержащей кормовой добавки» путем кратковременной обработки овечьей шерсти раствором; содержащим 3 % NaOH, 1 % Н2Ог и 0,5 % Na2S03 при гидромодуле 1:7,5 с дальнейшим введением ферментативного препарата, выделенного из культур Aspergillus niger из расчета 1 г на 1 кг шерсти.

2. Установлено, что комбинированный метод с применением ферментативного гидролиза позволяет получить кормовую добавку с высоким содер

Л Л жанием цистина (5,18±0,14 мг/см ), метионина (0,54±0,01 мг/см ) и массовой о долей белка 81,9 мг/см . Установлено, что кормовая добавка стабильна при хранении в течение 2 лет.

3. В опытах на лабораторных животных подтверждена ростостимули-рующая активность кормовой добавки и отсутствие токсического действия Кератопептида.

4. Кератинсодержащая кормовая добавка улучшает товарные свойства шкурок норки. Полученные результаты исследований показали достоверное увеличение густоты волос на всех топографических участках. Наибольшее увеличение, а именно на 8-14 %, количества волос на единицу площади отмечено во П-ой опытной группе при введении в рацион добавки в концентрации 0,2 % от суточной нормы белка.

5. В производственных опытах отмечено снижение общего количества шкурок с дефектами на 20 % (для П-ой группы); на 10 % (для Ш-ей и IV-ой групп) в сравнении с группой контроля. При применении кормовой добавки выявлено увеличение суммарного зачёта по качеству шкурок в опытных группах в сравнении с контрольной до 6,9 %.

6. Положительное действие кормовой добавки Кератопептид на качество шкурок норки подтверждено гистологическими исследованиями, свидетельствующими об увеличении количества фолликулов в пучках в образцах опытных групп в сравнении с контрольной.

7. Наибольший дополнительный экономический эффект от реализации шкурок норки достигается при введении Кератопептида в кормосмесь для молодняка норок в дозировке 0,2 % по предложенной схеме, позволяет повысить рентабельность производства шкурок норки на 10 %.

8. На основании проведенных лабораторных и хозяйственных опытов, совместно с сотрудниками ООО «Печора Шубина» разработан проект нормативно-технической документации (технологический регламент изготовления, СТО 85753185-0001-2009, инструкция по применению кератинсодержащей кормовой добавки Кератопептид).

ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

Результаты исследований, проведенных в условиях ОАО «Племенной зверосовхоз «Салтыковский» и подтвержденных актами научно-хозяйственных испытаний, использованы при разработке проекта нормативно-технической документации на производство и применение кератинсо-держащей кормовой добавки Кератопептид (Технологический регламент, СТО 85753185-0001-2009, Инструкция по применению от 09.06.2009г).

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

Предложенный кератинсодержащий продукт Кератопептид может быть рекомендован в качестве кормовой добавки для молодняка норок с целью улучшения качества шкурковой продукции.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Баранцева, Ольга Владимировна, Москва

1. Абрамов М.Д., Уткин Л.Г., Повелецкий И.Г. Возрастные изменения кожного и волосяного покровов норок // Кролиководство и зверовод ст-во. 1965. -№ 5. — С.10-12.

2. Абрамов М.Д. Норководство. -М.: Колос, 1974". С. 182-191.

3. Антипова Л.В., Жеребцов H.A. Биохимия мяса и мясных продуктов: Учебное пособие. Воронеж: Изд-во ВГУ, 1991. - 184 с.

4. Антипова Л.В., Осминин О.С., Шамханов Ч.Ю. Получение белковой пищевой добавки из вторичных продуктов птицеперерабатывающей промышленности // Хранение и переработка сельхозсырья. 2003. — №2. - С.62 — 64.

5. Антипова Л.В., Пащенко Л.П., Шамханов Ч.Ю. Получение и характеристика пищевого кератинового гидролизата // Хранение и переработка сельхозсырья — 2003. — №7 — С.63 — 66.

6. Антипова JI.B. Шамханов Ч.Ю., Осминин О.С. Кормовые добавки из вторичного сырья // Комбикорма 2003. - №3 - С.58

7. Антипова JI.B. Шамханов Ч.Ю., Осминин О.С. К вопросу получения белковых пищевых добавок // Вестник ВГТА 2002 - №7 — С.81 - 86.

8. Антипова JI.B., Шамханов Ч.Ю. Универсальная технологическая схема получения ферментативных гидролизатов из кератина пера / Пища. Экология. Человек: доклады четвертой международной ^ научно-технической конференции. М: МГУПБ. - 2001. - С.318 - 327.

9. Антипова JI.B., Шамханов Ч.Ю.,. Осминин О.С. Токсикологическая оценка ферментативного белкового гидролизата из кератина пера // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2001. №3. — С.32 — 36.

10. Антипова JI.B., Шамханов Ч.Ю., Осминин О.С. Совершенствование технологии производства керопептида из перо-пухового сырья // Мясная индустрия. 2004. - №3. - С.44 - 47.

11. Антонов В.К. Химия протеолиза. М: Наука. - 1984. - С. 133 — 161.

12. Архипов F.C., Головтеева A.A. Технология кожи. Ленпромиздат, 1988,-224 с.

13. Базарбаева С.М. Применение отходов химической промышленности в отмочно-зольных процессах производства кож // Вестник Башкирского университета. 2008. - Том 13. - № 2. - С. 270 - 272.

14. Балакирев H.A. Кормление норок. М.: Россельхозакадемия, 1997. -С. 7-18.

15. Балакирев H.A. Основы норководства. М.: Высшая школа. - 2001. -С. 238 -242.

16. Балакирев Н.А Отбор пушных зверей по эволюционно несвойственным видам кормов и низкопротеиновому кормлению // Вестник ВО-ГиС, 2007. Том 11. - № 1. - С. 212 - 220.

17. Балакирев Н.А, Юдин В.К. Методические указания проведения научно-хозяйственных опытов по кормлению пушных пушных зверей: М. Изд-во Россельхозакадемии. - 1994. — 31 с.

18. Берестов В.А., Тюрнина Н.В., Тютюнник H.H. Минеральный состав волосяного покрова норок и песцов. Карелия: Петрозаводск. — 1984. -160 с.

19. Беседин А.Н., Ганцов Ш.К. Товароведение пушно-меховых товаров / Учебник для товаровед, фак. торг. вузов. — М.: Экономика. — 1983". — 128 с.

20. Бондаренко С.П. Содержание норок. М.: Изд-во ACT. — 2005. -141 с.

21. Брындина JI.B., Варваров В.В. Переработка кератинсодержащего сырья методом ферментации // Вестник Российской академии с/х наук. -Том 1. 1996. - С.79 - 80.

22. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой. М.: Изд-во Медицина. - 1971. - 272 с.

23. Гаевой, Е.В., Сницарь А.И., Птак И.Р. Технология производства и эффективность скармливания кератиновой муки в рационах животных. — ВНИИ информ. и техн.-эконом. иссл. по с-х. М.: ВНИИТЭИСХ. -1976.-36с.

24. Гауровиц Ф. Перевод Борисова В.В., Верховцевой М.И. Химия и функции белков / под ред. В.О. Шпикетера М: Мир. - 1965. - С.252 -257.

25. Гераскина Г.В. Белки и аминокислоты. Строение, классификация и биологические функции. М: МОПИ им. Н.К. Крупской. - 1991. - 72 с.

26. Горяев М.И., Быкова JI.H., Гринина О.В. Аммиачный гидролиз кератинсодержащего сырья. / Мясная индустрия СССР. — 1978. — № 3. С. 36-37.

27. Грачева И.М., Кривова А.Ю. Технология ферментных препаратов / 3-е изд. перераб. и дополн. М.: Изд-во Элевар. 2000. — 512 с.

28. ГОСТ 27769-88 Шкурки норки клеточного разведения невыделанные. Ввведен 01.01.90. М.: Изд-во стандартов. - 1988. — 15 с.

29. ГОСТ 28085-89 Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности. Введен 31.03.89. — М.: Изд-во Стандартин-форм. 2007. - 8 с.

30. ГОСТ Р 51417-99 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение массовой доли азота и вычисление массовой доли сырого, протеина. Метод Къельдаля. Введен 22.12.99. Ml: Изд-во стандартов, 2002. - 8 с.

31. ГОСТ Р 52337-2005 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения общей токсичности. Введен 30.05.05. — М.: Изд-во Стандартинформ. — 2005. 19 с.

32. Дементьева Т.А., Нугаев A.A., Горбунова Т.И. Ферментные препараты в кормлении зверей / Тез.докл.научн.-практ.конференции по проблемам аграрной науки в условиях перехода производства к рынку. Новосибирск: СибНИИРС. - 1991. - С. 51 - 52.

33. Демчук A.C., Рожанчук Г.М., Сницарь А.И. Эффективность скармливания свиньям кератиновой муки // Мясная индустрия СССР. — 1981. — № 10.-С. 22-25.

34. Драганов И.Ф., Хазин Д.А., Кольчик Ю.А. Использование некоторых отходов переработки отраслей АПК в кормлении с/х животных. — М.: НИИТЭИагропром. -1995.-56 с.

35. Дэвени Т., Гергей Я Аминокислоты, пептиды, белки / Пер. с англ. Маца А.Н. под ред. и с пред. д-ра биол.наук Незлина P.C. М.: Мир. -1976.-364 с.

36. Еремеев H.JL, Николаев И.В., Керученько И.Д. и др. Ферментативный гидролиз кератинсодержащего сырья для получения белковых гидро-лизатов // Прикладная биохимия и микробиология. 2009. - Том 45. — №6.-С. 717-724.

37. Еремеева K.M. Развитие кожного и волосяного покрова у норок // Изв. Тимерязевской с.х. академии. — 1967. №2. — С. 192 — 198.

38. Еремеева K.M. Строение кожного и волосяного покрова у норок // Кролиководство и звероводство. 1963. - №4. - С. 19 - 20.

39. Жеребцов H.A., Попова Т.Н., Артюхов В.Г. Биохимия: учебник. — Воронеж: Изд-во. воронежского« государственного университета. — 2002. -696 с.

40. Ильина Е.Д., Соболев А.Дг Звероводство. М.: Просвещение. — 1990. -231 с.

41. Ильина Е.Д. Звероводство. Учебник. М.: Сельхозиздат. — 1963. - С. 59-64.

42. Ильина Е.Д., Кузнецов Г.А. Основы генетики и селекции пушных зверей: 2-е изд., перераб.и доп. — М.: Колос. 1983. - 280 с.

43. Ионкина A.A. Аминокислотный состав кормов, применяемых в пушном звероводстве / тр. НИИПЗК. Том VIL - 1968. - С. 269 - 275.

44. Карпова В.П., Кракова В.З., Эдельман Г.И. Получение кормового гид-ролизата из кератинового сырья методом ферментативного гидролиза // Мясная индустрия СССР. 1977. - № 12. - С. 39 - 40.

45. Кирилов М:П. БАВ нового поколения // Животноводство России. -2005.-№5.-С. 53-55.

46. Кислухина О.В. Ферменты в производстве пищи и кормов. — М.: Де-Липринт. 2002. - 336 с.

47. Кладовщиков В.Ф., Самков Ю.А. Изучение переваримости питательных веществ корма, баланса азота и энергии у пушных зверей. Методические указания. М.: Агропромиздат. — 1975. — 61 с.

48. Крылова В.Б., Шамханов Ч.Ю., Жеребцов H.A. и др. Способ получения белкового гидролизата из кератисодержащего сырья / авт.св. № 1077081-01.10.1983

49. Кузнецов Б.А. Основы товароведения пушно-мехового сырья. -М.: Заготиздат. 1952. - 508 с.

50. Кузнецов F.A., Ильинский В.М., Кост Т.Н. Зависимость роста норок от условий содержания, кормления и характера подбора / Тр. НИИПЗК. —1963. Том 4. - С.З — 28.

51. Кузнецов Г.А., Дивеева Г.М. Потертость меха на брюшке у норок и связь этого эффекта с процессом линьки / Тр. НИИПЗК. 1968. - Том 7. - С.79 - 88.

52. Кузнецов Г.А., Дивеева Г.М. Появление дефекта «поредение меха на брюшке» у норок в зависимости от некоторых факторов 7 Тр. НИИПЗК. -1969.-Том 8.- С.16-26.

53. Кузнецов Г.А., Цепков Н.М., Евреинов А.Г. Качество волосяного покрова у норок разного размера / Сборник «Биология и патология клеточных пушных зверей».-Киров: ВНИИОЗ. 1977. - С.68 - 69.

54. Куликов В.Н. Применение Бетаина в рационах молодняка норок: Автореферат дис. . к-та с/х наук: 06.02.02; РАСХН ГНУ НИИПЗК им. В.А. Афанасьева. п. Родники Московской обл. - 2006. - 24 с.

55. Лебенгарц З.Я. Пушно-меховое сырье. М.: Изд-во Высшая1 школа.1964.-246 с.

56. Либерман С.Г., Шевкунов К.Ф., Щербаков А.Р. Переработка кератин-содержащего сырья. Обзорная информация,, серия «Мясная промышленность. -М.: ЦНИИТЭИмясомолпром. — 1979. — С. 30.

57. Линейцева Э.Г. Дефекты опушения клеточной и дикой американской норки / Сборник «Пушное звероводство потребительской кооперации». -Киров. -1983. -С. 172-175.

58. Лобзов К.И., Волик В.Г. Рационально использовать отходы переработки-птицы // Мясная индустрия СССР. 1980. - № 4. - С. 23 - 25.

59. Мамаева Г.Б. О структуре волосяного покрова норок // Кролиководство и звероводство. 1968. - №4. - С. 15.

60. Мамаева Г.Б., Худякова Т.Н;, Кстенина Т.А Густота волоса норок разного размера // Кролиководство и звероводство. 1975. - № 2. - С. 10-11.

61. Методы экспериментальной химиотерапии / Под ред. Г.Н. Першина. -М.: Медицина, 1971. С.526 - 527.

62. Милованов JI.B., Перельдик Д.Н. Рациональное кормление зверей в летне-осенний период // Кролиководство и звероводство. 1998. - № 2. - С. 4 - 6.

63. Милованов JI.B. Значение аминокислот в рационе молодняка норок // Кролиководство и звероводство. 1963. - № 9. - С. 18 - 20.

64. Неклюдов А.Д., Иванкин А.Н., Баер H.A. Источники резервного белка для получения пищевых гидролизатов из животного сырья // Хранение и переработка сельхозсырья. — 1998. — №3. С. 24 — 25.

65. Неклюдов А.Д., Иванкин А.Н., Бердутина A.B. Свойства и применение белковых гидролизатов (обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 2000. - Том 36. - №5. - С. 525 - 534.

66. Новицкий А.П. Использование антиоксиданта Эхинолана-Б в рационах норок: Автореферат дис. . к-та-с/х наук: 06.02102; РАСХН ГНУ НИИПЗК им.В.А. Афанасьева. п. Родники МО, 2003. - 25 с.

67. Носова Н.Г. Определение густоты волосяного покрова норок в гистологических срезах / Тр. НИИПЗК. 1983. - Том 36. - С. 52-61.

68. Носова Н.Г. Определение густоты волосяного покрова норок в гистологических срезах / Науч. тр. НИИПЗК. 1974. - Том 13. - С. 139 — 141.

69. Орлов И.М. Химический состав и физико-механические свойства шерсти. М.: MB А. - 1975. - 33 с.

70. ОСТ 42-2-72 Лекарственные средства. Порядок установления сроков годности. Введен 01.07.73. М.,1972. - 6 с.

71. Остапец Н.Г. Влияние кормового белкового концентрата на качество и выход мяса свиней // Мясная индустрия СССР. 1979. - № 1. - С. 41 -43.

72. Остапец Н.Г. Качество кормового белкового концентрата, получаемого из кератинсодержащего сырья // Мясная индустрия СССР. 1981. -№8. — С.ЗЗ -38.

73. Павлов Л.А., Шестакова И.С., Касьянова A.A. Химия и физика высокомолекулярных соединений в производстве искусственной кожи, кожи и меха. М.: Легкая индустрия. - 1976. - С. 361 - 387.

74. Павлова А.З., Каспарьянц С.А., Белозерова Л.И. Микроструктура волос пушных животных. М.: MB А. - 1987. - 44 с.

75. Пат. 2021300 С 08 Н 1/06 Способ получения белкового гидролизата / В.В. Гайдук № 4867587/05; Заявлено 19.09.90. Опубликовано 15.10.94. Бюл. № 11. - 5с.

76. Пат. 2105495 А 23 К 1/10 Способ получения белковой кормовой добавки из отходов шерстяной промышленности / А.И. Яровой, Н.И. Шевцова № 94030552/13; Заявлено 16.08.94. Опубликовано*27.02.98. Бюл. № 11.-13с.

77. Пат. 2390252 А 23 J 1/10. Способ получения белковой добавки из сырья животного происхождения / В.Г. Волик, Д.Ю. Исмаилова, О.Н. Ерохина, В.В. Бреннер и др. № 2008139915/13; Заявлено 09.10.08. Опубликовано 27.05.10. Бюл. № 11. — 6 с.

78. Пат. 2092072 А 23 К 1/10 Способ получения кератина / А.И. Сапож-никова, С.А. Каспаръянц, Н.В. Месропова, Н.М. Гордиенко № 95117245/13; Заявлено 06.10.95. Опубликовано 10.10.97. Бюл. № 28. -7с.

79. Пат. 2007181 А 61 К 37/12, А 61 L 25/00 Способ получения биологического материала для основы мягких и твердых лекарственных форм и косметических изделий / В.И. Хачиянц № 5004523/14; Заявлено 01.10.91. Опубликовано 15.02.94. Бюл. № 28.-10 с.

80. Пат. 2244741 С 12 N 1/10. Способ получения протеолитического препарата для гидролиза структурных белков / Телишевская Л.Я., Овчинников P.C., Панин А.Н. № 2003118988/13; Заявлено 27.06.03; Опубликовано 20.01.05. Бюл. № 2. - 5 с.

81. Пат. 1151236 А 23 1/10. Способ получения кормовой добавки из отходов мехового сырья / Таранич A.B., Анохина В.И., Кононенко Л.В. (СССР). -№ 3671661/28-13; Заявлено 08.12.83; Опубликовано-23.04.85. Бюл. №7.-7 с.

82. Пат. 1161064 А 23 1/10. Способ получения белкового гидролизата из кератинсодержащего сырья (к.р.с.) / Крылова В.Б., Попов В.П. (СССР). — № 3701630/28-13; Заявлено 16.12.83; Опубликовано 15.06.85. Бюл. № 9.-14 с.

83. Переверзева А.Д. Товароведение пушно-мехового сырья. М.: Экономика. - 1982. - С. 36 - 76.

84. Перельдик Н.Ш., Милованов JI.B., Ерин А.Т. Кормление пушных зверей. М.: Агропромиздат. - 1987. - 351 с.

85. Перельдик Н.Ш., Титова М.И., Кузнецова Ю.Д. Влияние рациона с разным содержанием триптофана и серусодержащих аминокислот на состояние, рост и качество меха молодняка норок / Науч.тр. НИИПЗК. -1970.-Том 10.-С. 53-58.

86. Перельдик Н.Ш., Титова М.И., Кузнецова Ю.Д. Потребность растущего молодняка норок в лимитирующих аминокислотах / тр.НИИПЗК. -1968. Том VII. - С. 227 - 246.

87. Подсобляева JI.A., Файвишевский M.JL, Горошко Г.П. Исследование процесса щелочного гидролиза кератинсодержащего сырья // Мясная индустрия СССР. 1981. - № 12. - С. 30 - 32.

88. ЮО.Портнова М., Мулярчук М., Плиско Е. Сухой белковый корм из кера-тинового сырья // Мясная индустрия СССР. 1971. - № 4. - С. 28 -30.

89. Растимешина О.В. Кормовые достоинства свиных субпродуктов для норок: автореферат дисс.канд.с.-х. наук. М.: — 1978. — 21 с.

90. ЮЗ.Рогов И.А., Антипова Л.В., Дунченко Н.И. Химия пищи. Книга 1: Белки: структура, функции, роль в питании. В 2 кн. Кн. 1. — М.: Колос.-2000.' -384с.

91. Ролдугина Н.П., Никитченко В.Е., Яглов В.В. Практикум по цитологии; гистологии и эмбриологии. М.: Изд-во «КолосС». - 20041 -С.7-8.

92. Русских А.П. Возрастная и< сезонная изменчивость волосяного покрова норок (Mustela vision Schreber) / Науч.тр. НИИПЗК. 1960. - Том 6. -С. 112.

93. Рыминская Е.И. К вопросу возникновения и развития дефекта «поре-дение волосяногоь покрова на брюшке» у норок / Сб. НТИ ВНИИ охот.и звероводства. 1975. - Вып. 49/50. - С. 164 - 168.

94. Савченко И.Л., Благодатский В.Н. Способ получения белкового гид-ролизата из сухих белоксодержащих отходов животного происхождения / авт.свидетельство №1214061 СССР. 1986.

95. Самков Ю.А. Особенности белкового и энергетического обмена у норок различных окрасок / Науч.тр. НИИПЗК. 1974. - Том 13. - С. 187 -198.

96. Самков Ю.А. Влияние уровня протеинового питания на густоту волосяного покрова норок / Сборник «Биология и патология клеточных пушных зверей». Киров: ВНИИОЗ. - 1977. - С. 152 - 153.

97. ПЗ.Сапожникова А.И. Разработка и оценка качества продукции на основе фибриллярных белков из отходов сырья животного происхождения: Автореферат дис. . д-ра техн. наук: 05.19.08.; МГАВМиБ. -М., 1999.-50 с.

98. Свиридова Г.Л. Определение густоты волосяного покрова у норок // Кролиководство и звероводство. 1970. - № 6. - С. 32 — 33.

99. Семенова H.A. Получение кормового продукта из шерстяных отходов // Мясная индустрия СССР. 1984. - № 2. - С. 33 - 34.

100. Пб.Смодлев Н.А Функционально-технологические свойства белков животного происхождения // Мясная индустрия. 2000. - № 1. - С. 18 -20.

101. Сницарь А.И., Гаевой Е.В., Петровский В.П. Гидролизный способ переработки кератинсодержащего сырья // Мясная индустрия СССР. -1975.-№ 12.-С. 19-21.

102. Соболев А.Д. Основа вариационной статистики. М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ. - 2003. - 112 с.

103. Соболева A.B. Разработка основ технологии получения таурина из кератинсодержащего сырья: Автореферат дис. . кандидата химических наук: 03.00.23.; Рос. хим.-технол. ун-т им. Д.И. Менделеева. М., 2004. -17 с.

104. Страхов И.П., Шестакова И.С., Куциди Д.А. и др. Химия и технология кожи и меха // Легкая индустрия. — 1979. С. 73 — 75.

105. Судаков В.В. Изменение некоторых свойств шкурок норок в зависимости от возраста зверей / Сборник «Биология и патология клеточных пушных зверей». Киров: ВНИИОЗ. - 1977. - С. 107.

106. Трухачев В.И., Злыднев Н.З., Ткаченко М.А. Аминокислотное питание тонкорунных овец один из факторов, повышения их продуктивности // Овцы, козы, шерстяное дело. - 2001. - № 4. - С. 41 - 44.

107. Телишевская Л.Я. Белковые гидролизаты. Получение, состав, применение / под ред. А.Н.Панина. — М.: Аграрная наука. — 2000. — 295 с.

108. Тинаев H.H. Использование пробиотиков и продуцентов сурусодер-жащих аминокислот в звероводстве для повышения продуктивности норок и песцов / автореферат дисс. канд. биологич.наук; НИИПЗК.- пос.Родники, МО. 2007. - 23 с.

109. Тырсин Ю.А. Влияние режимов кислотного гидролиза кератина на эффективность выделения очищенных аминокислот // Хранение и переработка сельскохозяйственного сырья. — 2000. — № 9. — с. 15 — 18.

110. Уткин Л.Г. Гистогенез кожи и её производных у норок / Науч.тр. НИИПЗК. 1969. - вып.8. - С. 98 - 112.

111. Файвишевский М.Л. Переработка непищевых отходов мясоперерабатывающих предприятий. СПб.: ГИОРД. - 2000. - 256 с.

112. Файвишевский М.Л., Либерман С.Г. Производство животных кормов.- М: Легкая и пищевая промышленность. — 1984. — С. 307.

113. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. М: Мир. -1980.- С. 373-388.

114. Фрейзер Р. Кератины / Сборник «Молекулы и клетки». М: Мир. -1970. - вып. 5. - С. 118 - 133.

115. Хлудеев К. Д. Товароведение пушно-мехового сырья. — М.: Экономика. 1964.-432 с.

116. Царев В.Н. Товароведение пушно-мехового сырья и готовой продукции. — М.: Легкая и пищевая промышленность. 1982. — С. 67 — 80.

117. Цепков Н.М. Строение кожного и волосяного покрова стандартных норок разной конституции / Тр. НИИПЗК. 1970. - Том 9. - С. 50/54'.

118. ЦеревитиновБ.Ф., Беседин А.Н. Товароведение пушно-меховых товаров. М.: Экономика. — 1977. - 150 с.

119. Шамханов Ч.Ю., Антипова JI.B., Осминин О.С. Регулирование функциональных свойств кератиновых белков при их гидролизе ферментными препаратами // Успехи современного естествознания. — 2003. -№3.-С. 81.

120. Шестаков С.С., Муляргук М.В. Комплексное производство природных аминокислот из белкового сырья — М.: ЦНИИТИПтицепром. — 1979.

121. Шорланд Ф.Б. Превращение в пищу шерсти и пера.- В кн.: Источники пищевого белка / под ред. Сойфера В.Н.: пер. с англ. М.: Колос. -1979.-307 с.

122. Щербаков А.А., Либерман С.Г., Файвишевский М.Л1 Физико-химические свойства кормового белкового.гидролизата// Мясная индустрия СССР. 1981.-№ 11. —С. 32 — 35.

123. Щербаков А.А. Из опыта производства кератиновых гидролизатов белковых стимуляторов роста растений и добавок в животном корме / М.: ЦНИИТЭИ мясн. пром. 1970. - Вып. 12. - С. 27 - 28.

124. Язан О.Я. Пример влияния несбалансированного кормления на качество меха стандартных норок. / Охота, пушнина и дичь. Киров: ВНИИОЗ.- 1969.-С. 11- 83.

125. Яцышин А., Щербаков А., Либерман С. Аминокислотный состав кера-тинового гидролизата // Мясная индустрия СССР. 1970. - № 3. - С. 36-37.

126. Alexander P. Structure of wool fibres isolation of an a- and e-protein in wool // Nature. - 1957. - P. 396 - 397.

127. Angelo J.A., Shahani K.M., Kilara A. Effect of different proteases whey proteins. Milchwiss. 1982. - vol. 37. - №4 - P. 212-215.

128. Baker D. Protein- amino acid evaluation of a team processed feather meal // Poultry ScL. - 1981. - vol.60. - № 8. - P. 1865 - 1872.

129. Bendit E.G., Gillespie J.M. The probable role and localization of highly-cine-tyrosine proteins in the structure of keratins // Biopolymers. — 1978. — № 11.-P. 743-745.

130. Bissonette Т., Wilson E. Shortening daylight periods between may 15 and September 12 and the pelt cycles of the mink // Science. 1939. — vol. 89. -№2.-P. 418-419.

131. Chandra A.L. A keratin - decomposing streptomycete // Enzyme and Microbiol. Technol. - 1982. - vol. 4. - № 4. - P. 138 - 160.

132. Dolnick E. Hair growth in the mink // Amer Fur Breeder. — 1961. № 34(11).-P. 19-21.

133. Dowling L.M., Parry D:A., Sparrow L.G. Structural homology between hard d-keratin and'the intermediate filament proteins desmin and vimentin // Biocsi. Repts. 1983. - Vol. 3. - № 1. - P. 73 - 78:

134. Duer M.J., McDougal N., Murray R.C. A solid-state NMR study of the structure and molecular mobility of a-keratin // Physical Chemistry Chemical Physics.-2003.-vol. 5. — № 13. — P. 2894-2899.

135. Fraser R.D., Macrae T.P. Molecular structure and mechanical properties of keratins // Mech. Prop. Biol. Mater. Symp. 1979. - P. 211 - 246.

136. Graen L.C., Rickolo P. Improved recovery of tryptophan follwing acid hidrolysis of protein // Anal.Biochem. 1972. - vol. 47. - P. 348-355.

137. Hammond J. Effects of artificial lighting on the reproductive and pelt cne-les of mink. // Animal Breeding Abstract. 1954. - vol. 22. - № 4. - P. 347.

138. Huggins M.L. Structural changes in the transformation from d-to b-keratin // Colloid and Polym. Sci. 1980. - № - 67. P. - 49-53.

139. Kurat I. Keratin decomposition by dermatophytes. I. Sulfite production as a possible way of substrate denaturation // Microbiol. 1973. — vol. 13. — №6. - P.489-498

140. Mendez E., Lai C.Y. Regeneration of amino acids from thiazolines formed in the Edman degradation //Anal.Biochem. 1975. - vol. 68. - P. 47-53.

141. Morihara K., Oka T., Tsuzuki H. Multiple proteolytic enzymes of strepto-myces fradiae production, isolation and preliminary characterization // Bio-chem. Biophys. Acta. 1967. - vol. 139. - № 2. - P. 382-397.

142. Morihara K., Tsuzuki H. Comparison of the specificities of varios serine proteinases from microorganisms // Arch. Biochem. Biophys. — 1969. — vol. 129. № 2. - P. 620-634.

143. Murayama K., Ricko T., Yoshiko Y., Kiso A. Amino-acid sequence of feather keratin from fowl // Biochem. 1983. - vol. 132. - № 3. - P.501-507.

144. Naghai, J:, Nishikawa T. Alkali Solubilization of Chicken Feather Keratin. // Agricult. Biolog. Chem. 1970. - vol. 34. - № 10. - P. 16-22.

145. Nishiumi T., Nakamura F., Kondo K. Protein and; collagen changes in young mink skin //Scientific. 1989: -vol: 13.-№ l.-P. 19-24.

146. Pat. 4361586 USA Vacuum enzymatic digestion of protein material // Meinke, Wilmon W. No. 06/300653 filed on 09.09.1981. Issued on 30.11.1982.

147. Rouvinen K., Wiemela P., Kiiskinen T. Intence of dietary fat source on growth and fur quality of mink and blue fox-.// Acta Agric. scand. 1989. — vol. 39. -№ 3. - P. 269 -278.

148. Scwel R. Feeding during late grown furring //US Fur rancher. 1974. -vol. 54.-P. 3 -4.168:Steinert P. The extraction and characterization of bovine epidermal a-keratinen // Bioch.J. 1975. - P. 39 - 48.

149. Strlupi C.G., Croechionig H. Progress in the preparation of protein hydro-lysates for the treatment of disease related to aminoacid metabolism disorders // Riv.Sci. Technol. Alimenti Ntr.Uni. 1975. - vol. 5. - №2b. - P.89-90.

150. Tauson A.H. Different feeding intensive level to mink. 3 effects on post-weaning kit growth performance and fur quality characteristics // Swed J.Agric. 1985. -Vol. 15.-№»3-P. 109- 118.

151. Tyopponen J., Waltonen M., Berg H. Low-protein blood parameters and fur quality // Acta Agric. scand. 1986. - vol. 36. - № 4. p; 421 - 428.

152. Udris A. Palstatheten hos mink // Var palsdjur. 1966. - vol. 381 .-№ 9. -P. 221-224:

153. Veselenak J.M., Volz P.A Utilization of keratinophilic material by selected Trichophyton terrestre spaceflight phenotypes // Mycopathologia. 1977. -vol. 60.-№2.-P. 87-91.

154. Yu R.J., Harmon S.R., Grappel S.F. Two cell-bound keratinases of Trichophyton mentagrophytes // J. Invest. Dermatol. 1971. - vol. 56. - № 1. - P. 27-32.