Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Структурные и гистохимические изменения печени при остром перегревании организма в постнатальном онтогенезе

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Автореферат диссертации по теме "Структурные и гистохимические изменения печени при остром перегревании организма в постнатальном онтогенезе"

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР Тюменский медицинский институт

На правах рукописи УДК 616.36:612.57.Ь'5

ИСТОМИНА ОЛЬГА ФРИДРИХОВНА

СТРУКТУРНЫЕ И ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЕЧЕНИ ПРИ ОСТРОМ ПЕРЕГРЕВАНИИ ОРГАНИЗМА В ПОСТНАТАЛЬНШ ОНТОГЕНЕЗЕ

03.00.11 - эмбриология и гистология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ТЮМЕНЬ-1У92

У /■:■.■'•

¡■у •„

исс^ртлциЛ

МИНИСТЕРСТЮ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР Тюменская медицинский институт

На правах рукописи УДК 616.36:612.57.55

ИСТОМИНА ОЛЬГА ФРИДРИХОВНА

СТРУКТУРНЫЕ И ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЕЧЕНИ ПРИ ОСТРОМ ПЕРЕГРЕВАНИИ ОРГАНИЗМА В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ

03.00.11 - эмбриология и гистология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученая степени кандидата биологических наук

ТЮГ"1ЕНЬ—1992

Работа выполнена на кафедре гистологии Тюменского государственного медицинского института.

Научный руководитель- доктор медицинских наук

профессор П.В.Дунаев

Официальные оппоненты- доктор медицинских наук

профессор Г.Д.Губин

на заседании специализированного совета К 084.48.01 п Тюменском медицинском институте по адресу: г.Тюмень, ул.Одесская, 52.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Тюменского медицинского института.

доктор биологических наук профессор А.А.Стадников

Ведущее учреждение-

Институт морфологии человека АМН (Москва)

Учеккя секретарь

специализированного совета

кандидат медицинских наук,доцент

В.П.Кудрямо!

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ Исследование закономерностей реакции нормальных тканей з экстремальные воздействия является важным ь научном и закладном отношении. Особое место в ряду экстремальных акторов занимает высокая внепшяя температура, которая ьоз-гистзуя на организм в естественных условиях или в условиях ооизводства, вызывает острое перегревание организма (Султа-зв Ф.Ф.,1970,1978,1981; Засиленко A.M.,1980; Пекарские Д.Е. соавт. , 1981). В последите годы в онкологии стал причесться метод экспериментальное гипертермии, оказывавший пря-эй цитотоксический эффект на трансформированные клетки Александров А.Я. с соавт.,1980; Kakei М. et al,1989; Meyer ,L. et al, 1989; Dewhirst M.W.,1990; Hahl J. et al,1990l. 3, несмотря на то, что гипертермия вызывает торможение опу-злевого роста, это метод в шг/ягпке используется мало из-за 13 линии между терапевтическими и токсическими темпе prs ту pa ти le Feo G et al, 1990), вызываюа'.ж деструктивные изменения нормальных тканях (Never .T.L. et al, 1988).

Наиболее подвержены действию Высокой температуры органы высоким уровнем метаболических процессов, к которым от-зсится и печень. Установлено, что общее пегчтреванне орга-сзма выливает в печени мосфофунксиональные изменения ! Vcan-п: Л.А. ,1972; Романов R.У.,1974; Ахмедов Р., ■' Каримов , А. , 1УУ1-:; Гурин В. П.,] 986; Chayoth R. , Cassuto J.,1972; iwers w.D. et al,1980i, в основе которых лежит нарушение ■■модинамики органа и развитие циркуляторноя гипоксии 1кртчан 0.3.' с соавт.,1978; Соболевская Т.М.,1982; Бабаева ,X. с соавт.,1984). '

'ЛмеК'Щиеся в литературе сведения о действии вькокой тем-гратуры на печень касаются, как правило, характеристики

структурных -.ту. ф уш :цио: ^ ных ламеиении в органе п о'сц . базу перегревании и не носа г комплексно.го характер. Яранг . чески отсутствуют среде:гля о ьо-?сметной реакции органа . острое температурное .аоеде?;-': г>ие. . Не-изоест'шми оста?/ мор^от^ун;пГ''Л!1альгШО изменения. пелею: п отдаленные сроки 1 ело острого, перегревания, .а такхе .продолжительность., сисс< л источшжи восстанойятолыщх. процессов. Недостаточно ев-.:; . нкя с мо.рфогенетпчесггих потенциях гег.птоцитов в экстрема; них . уело а ял х, ви ; -лшшх .дояспмем. высокое температуры.

Б связи., с вше-/гзподенным целью у'с.^-ледораIгля .являе->*з:«чон/1е -реактивных и плпст;г-1ссм-л;:. сяоястп .гепотоцитоп у ; »О'пшх, находящихся на .различных этапах постнаталы га го р.-лития. . определенно. ^.сточдикон V, сиосоСоь регенерации 'С -за. .но-чернс-сто?. те^ени я ьрсстаноьит:.л<лшк процессов . я .услоц однократного де^стпил на организм кимоноя Енеи21г . темпер» у рц у, .в различные сроки после .перо грешный.

Для дости.кен*ш цели определены '"¡АДА'!;!:.

1. Изучить структурные и гистохимические особенности пзтоцитоп интнктноя ас моля на различны г.иах г'осч натап;, го развития. . , , ...

'¿.Яэучить структ>рпие п г не тохими; 1 <;скиа. сн>/лстпа го ТОЦИТОЬ В ус ПО в "ЛЯХ ОСТРОГО перх.-гр^м ШЛЯ ОрГаНИ'.!'-'а V .ХИН них, находящихся на £пздлчних огисп" леетпатальнсго онто пезо. • ...

о, Яз учить структурные-и гистохимические . (Тз меч ¡один ге тоцитов у ГИЯОТ1ШХ. 2 месяцев и отдалении,' сроки после одн ратного общего перегревания организма. . ; _ . .

4. Изучить -реактивные и яласглчеекке., а таксе, гистоге тические свойства эпителия печени в нормальных и экстрема них условиях с использодагглем .'.к то да культивирования тка по Ф.М.Лазаренко.

5.Выяекть обцебиологическке закономерности реакции тка-я печени на воздействие температурного фактора.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАТНОСТЬ.

Впервые проведено комплексное структурно-функциональное :ледование особенностей гепатоцитов животных в постнаталь-: ...онтогенезе и после однократного общего перегревания ср~ гизма. Впервые выявлен реактивные, пластичесзсие свойства 'истогенетические потенции эпителия печени после пере-:енного острого пер "ревания организма методом культивиро-[ия в организме по Ф.Н.Лазэрэнко. Выявлены источники и собк регенерации гепатоцитов различных зон долек и опрз-.ень: закономерности течения восстановительным процессов ле однократного температурного воздействия. Впервые с по-ью метода корреляционного анализа изучен характер связей иокетрических показателей гепатоцитов в различные сроки тнатального онтогенеза и в экстремальных условиях.

Полученные результаты могут бить использованы для тео-кческок разработки профилактики и лечения больных рэзлич-з возраста, получивших тепловую травму в производственных звиях (работа в горячих цехах, герметических помещениях) зи применении метода гипертермии в клинической практике, i ОаЮВКЫЕ ПОЛОХЕНИЯ, ВЫНОСГОШЕ НА ЗАЩИТУ

1. Комплекс гистох'.тмических показателей: активность , КФ, липазк, содержание гликогена и нейтральных липидов, иске морфометрических показателей: объем гепатоцитов и их 5, количество ядерных клеток и гепатоцитов, разделешпл: >бьему ядра (Kl, KZ, КЗ), характер корреляционных связей 1У ними молено использовать в качестве объективного крите-стругсгурно-функционального состояния печени в нормальных сспериментальных условиях

2. Реактавкие к пластические свойства гепатоцитов з висят от степени дпфференцирозашгости, топографии их в дол: как, возраста животных.

3. ГетероморФность гепатоцитов в пределах доле обусловленная различным уровнем длФФеренцированности и фун ционально71 активности позволяет компенсировать Функции орг на в целом и обеспечивать восстановительные процессы экстремальных условиях.

4. Зтапность морфо-функциональных изменения в пече после острого перегревания осуществляется в определена последовательности: 1) реактивное состояние / 1 сутки /

2) 1 фаза деструктивно-прогрессивных изменения /до 3 суток

3) 2 Фаза деструктивно-прогрессивных изменения /от '7 до суток/; 4)восстановительные процессы /от 30 до 90 суток/.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертации до/ жены на 2 Всесоюзной конференции "Важнейшие теоретические практические проблемы терморегуляции" ( Минск, 1936); на Всесоюзном съезде анатомов, гистологов и эмбриологов (Погг ва,1986); на зональной конференции морфологов "Эпителш соединительная ткань в нормальных, экспериментальных и па-логических условиях" (Тюмень,1988); на 1 Республиканской : умной конференции "Управление морфогенезом тканей и орга: в процессе адаптации" (Иркутск,1989); на 7 республикана конференции "Проблемы гистофизиологии соединитель г."; г тка; (Новосибирск,198У); на Всероссийской конференции хирур "Диагностика и лечение заболеваний печени, поджелудочной лезы, селезенки и двенадцатиперстной кишки"(Тюмень,1990); Всероссийской конференции "Влияние штропогенных факторов морфогенеза структурные пре . газования органов" (Аст хань, 1991}

- 5 .ПУБЛИКАЦИИ. По тема диссертации опубликовано 12 работ. СТРУКТУРА РАБОТЫ. Диссертационная работа ^изложена на страницах машинописного текста, состоит из введения, оба литературы, главы с изложением собственных исследова-обсуждения полученных результатов и выводов. Библиогра-включает 206 отечественных и 104 зарубежных источника, ст диссертационной"работы иллюстрирован 31 таблицей, 13 унками и 51 таблицей микрофотограмм.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Исследования проведены на белых беспородных крысах-сам-х. Структурные и гистохимические особенности гепатоцитов учены у животных в возрасте 2,3,4,5,6 и 12 месяцев (63 жи-гных). Для изучения структурных и гистохимических особенней гепатоцитов в остром опыте после однократного общего нагревания животных '¿,6 и 12 месяцев выдерживали в венти-руемой термокамере в течение 1 часа при Т=45 С (116 живот-к). Морфо-функциональное состояние гепатоцитов после од-{ратного общего перегревания изучены у животных 2 месяцев 1,3,7,15,30,60 и 90 сутки опыта (176 животных). Реактив-пластические и гистогенетические свойства, эпителия пеги в нормальных и экспериментальных условиях изучены мето-1 культивирования по Лазаренко Ф.М. (1959). Рецепиентами и юрами служили животные 2 месяцев. Проведено 2 серии: 1 >ия - культивирование печени интактных животных; 2 серия -¡ьтивирование печени животных, перенесших однократное об; перегревание. Имплантаты экстирпировали на 1,3,6,8,10,15 10 сутки опыта. Всего изучено 56 контрольных и 56 опытных шантатов. Все животные выводились из эксперимента методом гшитации в одно время с "9 до 11 часов с учетом биологиче-

- 6 -

ских ритмов органа (Губин Г.Д.с соавт.,197В).

Полученный материал фиксировали в жидкости Карнуа и 1 нейтральном формалине с последующей заливкой в воск-парафя Обзорные и морфометрические исследования проводили на сери ных срезах толщиной 4-5 мкм, окрашенных гематоксилином-эоз ном и железным гематоксилином по Гейденгайну. Поставлены к чественные гистохимические реакции с соответствующими кон ролями: ЫИК-реакция для определения гликогена; тетразолиев метод по З.Лойда с соавт.(1982) по выявлению сукцинатдеги рогеназы (СДГ); метод одновременного азосочетания с фосфат нафтола АБ-МХ и стабильными солями диазония в модификац З.Лойда и соавт. (1982) для определения кислой фосфатазы (К ТВИН-метод по Гомори для выявления липазы; судан черный В Лизону {Коноский А.И.,1976) для нейтральных липидов.

Весь полученный фактический материал был подвергн морфометрическоя обработке с определением объема клеток и ядер /Автандилов Г.Г. с соавт.,1981/, с последующим выдел нием классов гепатоцитов (Хесин Л.Е.,1967), разделенных объему ядра: К1-клетки с малым объемом ядра 2,0-2,2 К2-клетки с крупными ядрами (1Е 2,3-2,5), КЗ-клетки с гипе трофированными ядрами {2,6-2,8). Определяли долю двунде ных гепатоцитов /2М/ и общий митотический индекс /ОМИ/ 1000 клеток. Статистическую обработку морфометрических да ных проводили по Стьюденту (Автандилов Г.Г.,1989). С цел оценки существующих связей между изученными кариометрическ ми показателями гепатоцитов был проведен двухфакторный ко реляционный анализ по программе, составленной на кафед гистологии ТГМИ (Демин В.Б.,1991). Математическую обработ материала проводили на ЭВМ "1ВМ-АТ".

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Нами установлено, что определенные соотнокения гистохи-[есних и морФсметрических поназателеи гепатоцитов могут тгить объектквнш1 критериями степени их дифференцирован-гги и уровня Функциональное активности, а ташке свиде-ъствовать о дзструктивпых изменениях. Так, накопление гкогена, низкая активность СДГ и КФ, слабая реаюгпя на ли-1Ы свидетельствует о преобладании пластических процессов, | подтверждается и малкми объемами клеток и их ядер. Кри-¡иями активного Функционирования являются малое содержание гкогена в гепатоцитах, он расходуется как энергетический -еркал, в связи с этим высокая активность СДГ, как показа-¡ь интенсивности о:г,1Слительно-восстаковитель'ных процессов; :ркая активность липазы - пог-сазателя интенсивности метабола липидов; понимается активность КФ как показателя ин-¡сивности функционирования и процессов внутриклеточной ре-1ерации. Та}г/ге клетки характеризуются повышением объемных саз а те леи, среди них преобладают клетки с крупными VI ги-угрофирзванными ядрами. О процессах деструкции могут сви-чэльствоватъ ослабление оеакции на гликоген, СДГ и липазу глвизация КФ и накоплеггие лтшдов, а такие уменьшение ко-?ества фугншиониружцих клеток с крупными ядрами.

Аналттз фактического материала по изучению печени у жирных ¿,3,4,5,6 и VI месяцев позволил выявить ряд законо-зннх явлении, касающихся структурных и функциональных !тз-гений гепатоцитов. Так, в пределах долек была установлена героморфность гепатоцитов, обусловленная разной степенью ¡»ферэнцировашюсти и функциональной активности. У животных лес центролобулярные гепатоциты характеризуются как более национально активные и дифференцированные в сравнении с

с перипортальными клетками. Наряду с этим в центральной зо) долек отмечается мозаичность распределения гистохимичесга показателей, обусловленная различным уровнем фушщиональнс активности клеток в единицу времени.

С возрастом гепатоциты_ периферической зоны долек вовле каются в активное функционирование в связи с достижение стадии биологической зрелости и различия между центролоб\ лярнкми и перипортальцыми клетками уменьшаются. У животных месяцев гепатоциты в пределах долек характеризуются высоки уровнем функционирования, а к 12 месяцам происходит снижени функциональной активности центролобулярных гепатоцитов сравнении с перипортальными. Это подтверждается и морфомет рическими показателями. Установлено, что у животных 2 месяц: центролобулярные гепатоциты характеризуются большими объемами клеток, чем перипортальные (рис.1). С возрастом происход! выравнивание этих показателей и к 12 месяцам перипортальньк гепатоциты имеют больаше объемы.

Корреляционный анализ морфометрических показатей гепатоцитов по зонам долек, доля 2Ы гепатоцитов и ОМИ показывает (рис.2), что: 1) гепатоциты К1 являются показателем диффе-ренцировки гепатоцитов в пределах долек и являются источником Физиологической и репаративноя регенерации /отрицательная коррелятивная связь клеток К1 в обеих зонах долек с возрастом и тесная Функциональная связь их с ОМИ/; 2) гепатоциты К2 расцениваются нами как показатель функциональной активности органа /положительная коррелятивная связь с возрастом и между собой/, а способность их к образованию '¿-ядерных клеток определяет запас компенсаторных возможностей органа /отрицательная коррелятивная связь между К2 и 2М/; 3)с возрастом увеличивается количество гепатоцитов К^,

I

Г-"1 '

I I

I—I I »

!....» | |

I I;

I____!

! Г I I

• ¡Г,*и1'(

I I I I ¡г.ов?^ 1 !

' : " /Г

■■:...-.. // : / /

I I Л I II I I I I I I I 1 I I I I I I I I I Г! ■ ! I ! I I 1

2мес Змэс ,4лгес 5ыэс. бмес

.¡.¿мес

¡„центр.зона дольки' и-_—__-;

дэриф.зока доеьки

Рис.Х. Динаыкка объемов гапатбцитов-з соотнатвльном .. - онтогэнезе •, , . •;.■.

■аз.з.;

0М1

" КЗп

'■За.з.;

„¿у. 1

К1п.з.д. '

?ис,2. Корреляционные связи кор±о>/етричес;-^и;- показа--тедей гепатоцитов в постнатальнсм онтогенезе.-• -1-возраст животных; ц.'з. д.-центральная зона далысл; .п.з:д.-периферическая зона дольки'. . —— тесная связь. . • • " 1

-- сильная связь

-- - средняя связь

что отражает процесс компенсации функциональных возможности органа /тесные положительные ксррелятганые связи этих по кг зателеи с "возрастом/.

В постнатальном онтогенезе для каждой зон долек хаоа* терны определенные соотношения трех классов гепатоцитов и 2 клеток. 3, центральной зоне .дольки (рис.ЗА) у животных 2 мес цев преобладают гепатоциты К2, количество которых с воз растом увеличивается, пс&ыыается содержаниеклеток КЗ уменьшается К1, что мы связываем с наступлением биологи ческой зрелости и вступлением их в актизное Функциониоовани В периферической'зоне дольки ! рис. ЗБ) ' у живот^шх 2 месяце больше гепатоцитов К1', обеспечивающих роат и регенерацию ор гана, с возрастом,, .как -»'; з :це¡ггральнои-зоне, : происходи уменьшение их количества при увеличении клеток К2, КЗ и '¿М.

Установлено, что у животных от 2 до 5 .месяцев печен обладает значительным объемом биологических возможностей, животных 6 и 12 месяцев в'связи ■ с вовлечением сольшинсть; гепатоцитов в активное функционирование происходит с: ниже ни биологических возможностей печени, - что отражается и на диапазоне компенсаторных. 'возможностей. Снйжеют-т ОМИ гепатецн тов, начиная с '3 мееяйе'в после ло-чения и отс-утстзие митозо. в печени Б и 12 месяцев укатывает на снижение реактивны: свойств гепатоцитов в онтогенезе.

Однократное ебкее перегревание организма .у животных 2,( и 12 месяцев приводит к нарушению гемодинамики оогана, которое проявляется расширением просвета центральных вен и си-нусоидных капилляров с явлениями- стаза," -наиболее выражеш эти изменения в центральной зоне долек. В остром, опыте в печени всех возрастных групп происходит; однотипное снижение обьеиных показателей клеток по зонам долек в сравнении с

J' -"í !

— i

-V,

I

-.i ""I i

. í i

i ■ i

________ —■ - • — =-¡

Центральная зона дольки a, j

¡

i i i i i i i i i i ! i i i

" 2мес ■ la/e с , 4мес 5мес ьмес 12мес i

!

— in.....—xa.. --R3 — ¡t* i

• ' '_-_' _I

^Пгриф'ернческая зона лальки • Б.. |

i

.л

— i

..I

I

. !

! f

I

!

2мес ií.-ec 4мес 5мес ймес - ¿msc'i

----f-s ■•—■¿к '" • 1 i

ftic.3.' Динамика гепатоцктоэ'1-3 классов и ■ двуядерних • гепатопитоз в посткатальном , онтогенезе! ■ ..

контролем,что мы связываем с развивающейся дегидратацией с ганизма. Сравнивая характер реакции гепатоцитов животных с меченного возраста, выявлен ряд отличий, обусловленных вс растными структурно-функциональными "особенностями органа, животных 2 месяцев обнаружен различный характер ответной г акции гепатоцитов з пределах долек,обусловленный уровнем дифференцированности и функциональной активности'. Наибол чувствительными к действию температурного фактора ока зались гепатоциты центральной зоны долек. Здесь обкаруже интенсивная мобилизация гликогена, снижение активности СДГ липазы, повышение активности КФ и накопление большого кол чества липидов, что характеризует : развитие в клетках эт зоны деструкт>твных изменений. По периферии дольки происхол вовлечении гепатоцитов в активное функционирование для ко пенсации функционального напряжения органа. Это подтвержу ется уменьшением содержания гликогена и повышением здесь а тивности СДГ и КФ. С возрастом у животных 6 и 12 месяцев п вышается чувствительность центролобулярных гепатоцитов к и рвениям гемодинамики, а компенсация функций осуществляет за счет перипортальных, -обладающих большим объемом биолог ческих возможностей, это наиболее ярко выражено, в печени вотных 12 месяцев. - - - -

» '

При анализе коррелятивных связей установлено,что остр перегревание вызывает нарушение связей, присущих интактн печени (рис.4А,Б). В центральной зоне дольки,острое перегр вание организма приводит к возникновению деструктивных изм нении активно функционирующих клеток . К2,и к уменьшению количества, о чем свидетельствует изменение характера корр лятивной связи между клетками К2 и возрастом животных. Геп тоциты К2 по перифеоии дольки в остром опыте приобрети

Рис.4. 1\орреляшюнкые связи морсТюкетрических показателе;; гепатоцитов я остро!/, опыте /А/ й з коктуо^э /5/. 1-возраст ЖИВОТНЫХ - ■ .. ••

■ гэсная связь

--сильная связь

. — — средняя "связь

сильную корреляционную связь с возрастом, это подтверждав активное участие их в функционировании в период действи высокой температуры. В остром опыте в связи с необходимость "компенсировать функциональное напряжение в обеих зонах доле важное значение приобретают гепатоциты КЗ и 2Я. Они держа наибольшее количество тесных функциональных связей с другим показателями и-между собой.» Температурное воздействия вызь вает снижение интенсивности пролиферативных процессов, о "че свидетельствует ослабление связи между ОМИ, Возрастом, живот ного и снижение количества клеток К1 в обеих зонах долек.

Таким образом, с возрастом повышается чувствительное к действию экстремального фактора и происходит снижение ре активных и пластических;:свойств гепатоцитов. Наибольшим 061 мом биологических и компенсаторных возможностей обладав печень животных.2 мес, этот возраст был выбран для изучет структурно-функциональных изменений печени на различных эте пах после температурного воздействия, а также для изучен» гистогенетичэских потенций эпителия: печени и 'чувствител! ности его к условиям трофики методом культивирования тканс в организме по Ф.М. Лазаренко. • , '

Культивируемые ткани печени претерпевают'' ряд закономе! ных превращений: депрессии, де струк тив но - про гре с с из ны х из м; нений, активизации и роста, ■ дифференцировки и атипическо] функционирования и стадию обратного развития' ' новообразова! ных структур (Хлыстова З.С.,1967; мТурав?щина Л.П.,1975; Д: наев П.В. с соавт., 1976). Сравнительный анализ результат; исследования в обеих сериях опытов позволил нам установи особенности течения и .продолжительности стадии жплантацио: ного роста,, обусловленных исходным состоянием печени донор

В опытной серии,, где доноры были подвергнуты одночасо-эму обиему перегреванию, уменьшается период депрессии имп-антированных структур с 3 до .1 суток и процессы деструкции цителиоцитов, носят более выраженный характер. .Большая асть клеток гибнет. Жизнеспособными оказываются.гепатоциты. вторые а период перегревания находились в малоактивном эстоянии. В опытной серии стадия активизации.и роста более зодолжительна по времени и.длится,до 6 суток, в контроле га ограничена 3 сутками. , Деструктивные изменения гепатоци->в донора пролонгируют стадию активизации и к пролиферации называются способны отдельные гепатоциты, обладающие боль-тм объемом биологических потенции. За счет них происходит ¡разование.единичных индифферентных эпителиальных тяжей, шь на.8 сутки культивирования в опытной серии эпителиаль-¡е .пролифераты устанавливают.тесный контакт с сосудистым [ссейном соединительнотканной, стоомы имплантата и напомина-• примитивные печеночные.балки.что рассматривается нами как юязление органотипического роста .гепатоцитов, обусловлент е оаганоспецифической детерминированностью (Туравинина П., 197,5). При культивироварии печени опытных животных 'сутствует стадия функциональной дифференцировки новообра-ванных структур. Это обусловлено, нарушением эпителио-стро-льных взаимоотношений,- . что . к 10 суткам культивирования имулирует процессы обоатного развития.

Эпителий желчеотвод^ших. путей сохраняет свою" жиз-споссоность и в .опытной серии, также как и в контрольной на сутки-культивирования активизируется и пролиферирует.Он кжс проявляет органотипический рост с преобразованием в убчатке структуры, которые сохраняют жизнеспосс-2ность до суток наблюдения. Этот Факт указывает, на больший объем

биологических потенции и болысую резистентность данного эт. телия к гамешгаюУйся'условиям трофики. • ■ • • - ■■ ' ■ •

'' Следовательно, однократное общее перегревание организм животных 2 месяцев после рождения 1 не нарушает гистогенетУ ческих потенций эпителия печени !и его органоспецифическс детерминировагаюсти,' но: наряду с этим действие высокэйтеь пёратуры-вызывает сужение объема биологических потенций"1ге патоцитов1к снижение* их" реактивных'и пластических свойст! Гепатоциты оказались-более чувствительными к условиям троф> •ккг по сравнению'с холангиоцктэмк.

Структурно-функциональные изменения в печени после оI нократного общего перегревания изучены от 1" до 90 суток ош та. Нами выявлено, что в различные сроки после перегревай; в печени осуществляется ряд закономерных превращений. ' 1 стадия -реактивное состояние гепатоцитов - протека« б течение 1 суток после перегревания и обусловлена гембдгак мическики расстройствам, возникающими' 'в остром опыте, центральной зоне долек' обнаружены деструктивные ¿изменен; "епатоцитов: накопление' липидов, повышение активности К< снижение активности СДГ и липазы, остается слабой реакция ] гликоген. Перипортальные гепатокхиты характеризуются высок функциональной активностью, -что обусловлено большим объем« их биологических возможностей и лучшими условиями трофики.'

К З суткам опытов на фоне некоторой нормализации сост яния микрсциркулято рно го 1 ; русла 'определяется : первая фа деструктив но-прогрессивных изменении - гепатоцитоз . -Актив фгякцио ниро в а в шие гепатоциты центра долек к 3 суткам'по вергаются некробиозу. Признаком восстановительных процесс жизнеспособных-гепатоцитов явлйется снижение содержания л пидов и накопление гликогена, повышение. активности СДГ и л

- IT -

зы. Гистохимические показатели гепатоцитов периферических н долек свидетельствует о продолжающемся активном функцио-ровании их, пока в центре долек идут процессы восстановле-я.

Во 2-ю фазу деструктивно-прогрессивных изменения, на 7 "пси после перегревания, приходит вторая волна гемодинами-сиглх расстройств, вызванная по данным Соловьева В.С. (1382) Титова В.А.(1991) накоплением метаболитов в организме под йствием высокой температтлэы. Наиболее чувствительными к м оказались перипортальные гепатоцита, находившиеся в стоянии функционального напряжения на предшествующих стаях. Они характеризуются низким содержанием гликогена и ак-зности СДГ, в них накапливаются липиды и повышается актив-гть КФ. Деструктивные изменения по периферии допек сохра-этся до 30 суток. Компенсация функция органа в этот период ЛЧествляется за счет центролобулярных гепатоцитов, которые 1зались менее чувствительными ко 2-й волне гемодинами-;ких расстройств.

Полное восстановление структурно-функциональных показа-ien печени происходит от 60 до 90 суток. До КО суток еще :раняется расширение синусоидных капилляров. Наряду с этим дольках восстанавливается закономерность распределения :тохимичесних показателей, характерное для печени конт-[ышх животных 4 месяцев. Однако и на данной стадии экспе-:ента не происходит полного восстановления органа, о чем де те ль с тв у ют морфометрические показатели. И лииь стадия суток может считаться стадией полной нормализации органа.

Морфометрические исследования . подтвердили наличие 4 занных стадий (рис.5А,Б). По периферии дольки (рис.5А) до суток наблюдаются процессы активного функционирования,

(

Центральная зона долью!

..I I

\

1

I

!

I

1с

Зс 7с 15с 30с 60с 90с

Периферическая зона дольки

Л

I

со! |

\ V \ •—

♦и; ' у

. 1 .......Д-......

I V ..........

'•••-..............

1 _ _ -___

о' ---. I ■ • ~ "Г .«Т1—--г.-

Зс ' 7с 15с 30с 50с 5С

— к.1 —ка ——-¿к

Рас. 5. Динамика морфэметрмчесхюс показателе]! гепатоцитов в различные срокк после однократного общего перегревания.

>дтверждением чему является высокое содержание гепатоцитов 2. Вторая волна гемодинамических расстройств, вызванная из-лтком метаболитов в организме приводит к деструкции гепато-тгов К2 и снижению их количества. Гепатоциты К1, обладающие >льшим объемом биологических возможностей в течение трех 13 осуществляют пролиферативные процессы, о чем свидетель-гвует увеличение их количества. Компенсация функция с 1 - 3 гадию осуществляется за счет повышения содержания гепа-эцитов и клеток КЗ, а в 4 стадию соотношение всех классов петок достигает контрольных значении. В центральной зоне элек деструктивные изменения носят более выраженный и дли-гльный характер и затрагивают все классы гепатоцитов эис.5Б) и лишь к 4 стадии соотношение всех изученных пассов приходит к норме. Компенсация функций также осущест-пяется за счет увеличения количества 2Ы и КЗ клеток. Этот роцесс в центре долек выражен ярче, чем по периферии.

Анализ корреляционных связей морфометрических показате-еи гепатоцитов на различных этапах после однократного пе-эгревания и в контроле (рис. Ь'А,В) свидетельствует, что. на ротяжении всего эксперимента последовательно возрастает со-ержание активно функционирующих гепатоцитов К2 в обеих зо-ах долек /положительная функциональная связь этих показате-ей со сроком наблюдения и между собой/, з тоже время геца-оцитам К2 по периферии дольки принадлежит основная роль в аботе на уровне долек, так как они связаны тесной положительной функциональной связью со сроком эксперимента. Наряду активным функционированием гепатоцитов К2, происходит компенсация Функционального напряжения за счет повышения содер-ания гепатоцитов КЗ в обеих зонах долек, что подтверждается есной положительной функциональной связью между ними. В

К1ц.з.д.

К2ц.з.д.

0Ш

>КЗц.з.д.

КЗп.з.д.

ОМИ I

КЗп.з.дИ

'КЗа.з.д.

К1п.з.д.

Ж2п. з.д.

Рис.ь. Корреляционные связи морфометраческих показателей гепатоцитов в отдаленные сроки после перегревания - А /1-этаг» эксперимента/; Б- в контроле /1 - возраст животных/ . ■■■ тесная связь

--- сильная связь

---- средняя связь

эксперименте в обеих зонах долек снижается содержание гепа-тоцктов К1 /тесная отрицательная функциональная связь со сроком эксперимента/, это указывает на переход части этих клеток в основную популяцию Функционирующих гепатоцитов Х2 /тесная отрицательная связь между К1 и К2 по периферии и сильная отрицательная связь между К1 и К2 в центре долек/. В течение эксперимента происходит снижение пролиферативной активности, что подтверждается ослаблением связи гепатоцитов К1 в обеих зонах долек с СМИ. Заряду с этим в обеих зонах дольки нарастают процессы гипертрофии, указывая на последовательное замещение процессов пролиферации на внутриклеточную регенерацию /отрицательная корреляционная связь между ОМИ и гепатоцитами КЗ в обеих, зонах долек/,. Наиболее интенсивно этот процесс протекает в центральной зоне долек.

Таким образом, однократное общее перегревание зызывает значительные структурно-функциональные изменения . гепатоцитов, восстановление гистоструктуры органа носит длительный характер, обусловленный условиями гемодинамики, функциональной значимостью органа и объемом компенсаторных возможностей гепатоцитов в пределах долек.

ВЫВОДЫ:

1. Комплекс качественных гистс:г~ тческих реакция на гликоген, ' л;тпидк, СДГ, КФ и липазу, а также морфометрическия показателей гепатоцитов: объем гепатоцитов и их ядер, количество двуядер;-1ых клеток и гепатоцитов, разделенных по объему ядра {К1,К2 и КЗ), характер корреляционных связей между ними можно использовать в качестве объективного" критерия оценки стртлсгурно-Функционального состояния печени в нормальных и экстремальных условиях.

2. В процессе постнатального развития у животных различных возрастных групп существуют четкие структурно-фушши-

- гг -

анальные отличия гепатоцитов б пределах долек. Гепатоциты центральных зон долек являются Еысоксдиоферекцировакными и Функционально активными. По периферии долек сохраняется пул малодифференциоованнкх гепатоцитоь.

3. Гетероморфность гепатоцитов в пределах долек обусловлена уровнем их диоференцпрованностк и функциональной активности. 3 епатоциты печеночных долек обладают широким объемом компенсаторно-приспособительных возможностей, что позволяет компенсировать функции органа в целом и обеспечивать восстановительные процессы в экстремальных условиях, В экстремальных условиях это проявляется увел;тчением количества двуядерных и полиплоидных гепатоцитов. С возрастом животных происходит снижение реактивных свойств гепатоцитов.

4. Методом культивирования тканей и органов в организме по Ф. М. Лазаренко выявлено, что однократное общее перегревание организма снижает реактивные свойства гепатоцитов и вызывает сужение объема биологических возможностей гепзтоци-тоь. Это выражается более интенсивно протекающими процессами деструкции, пролонгированием стадии органотиггпческого роста к отсутствием стадии атипического функционирования. Гепатоциты центральных зон долек оказались более чувствительными к нарушениям условии трофики. Реактивные свойства гепатоцитов периферии долек вшге, чем центролобулярных. Регенераторными возможностями в больней степеют обладают малодифферепциро-ванные гепатоциты периферии' долек.

5. Острое перегревание организма сопровождается значительные морфофункциональными изменениями в печени, степень выраженности которых находится в прямой связи с возрастом организма к определяется уровнем дифференцированности и функциональной активности гепатоцитов.

- -¿з -

6. С ^уктурно-фухпшионалысю гзяекения в печедл после однократного пэрегрерадия cpi-аштзма остаествл.'сотсп п определенной последовательности: Li ре-лхгптгчюе состояние /1 суг-си/; 'J! 1-я Фаза десгрукт*/эдс-прсгроссиянах лзменэ;гли /до 3 ;уток/; 3) 2-я Фаза десто'-гг.гало-псогг-еес:г£лелх /адаптацион-шх/ из ме Heinis /ст Т до 30 суток/ ; 4) еоссталоелтельнг.е ггро-дессы / от 30 до '50 суток/ .

7 . Ф;-г.г. ¡ологичее;с$ л л репасативпая ^генерация фулдсцио-тлрутскглх структур леченл у злщстпых до 3 месяце s поело рожает*, л осукг'-тьл лете я проимущественно п., м'-тготллеслоге деления гепагоцитов за слет популяции :слето->: К1., По мере цсстгаечгля гепятоцктамк бvonoгетческс> еоелсстл /с 3 до IL' чоепцен/ основным способом обновления стаяопптся зггутситсг.э-гочная регенерация, которая проявляется упеллченнем количества до уядерных гепатоцктез и гчпсотроФитх-йп:-пп.о. гспетск КЗ.

И. Репарггтипная регенерация о органе после экстремального температурного везде яггпяя протекает с л pecó пада;глем г ; г :coi: ннутр'лкле точного -"блопленля л аналогична по способам , проявления Ь из ио ло г и»»«» с ко ;: ре го ríe шипи у хлпо-п-шх с 3 до l'¿ месяце р.

'.). З^лнлонные j л кс-ло мерности г.'орФо-ФуьлчЦ'лсналышх ненлл . в печени при однократном перегревании организма я этапность восстановительных процессов в органе могут слу^лттъ обнектишл/мл критериями оценки объели бгологичес::их потенция г е í Ii i то í !ите и на различных этапах постнаталького о итоге нее а и возможности ' восстановительных процессов э различи?.": поз— лестнее период'-

РАБОТЫ, 01Г/НПЯКСВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Некоторые показатели отдаленных последствие одно 5 с-

- 24 -

ратного острого перегревания организма/Мкртчан 0.5,, Руб; В.Ф. , Истомина О.Ф. и др.//Важнейшие теоретические и npairri чесюте проблемы терморегуляции-Мат.2 Всесоюзн. конф. -Мине] 1986.-С.207.

2. Реактивгше изменения тканевых и органных систем П] остром перегревании организма/Мкртчан 0.3., Беспалов O.E. Истомина О.Ф.//Мат.X Всесо как.съезда анатомов, гистологов эмбриологов.-Полтава,1986.-С.242.

3. Реактивность тканей печени в нормальных,экпериме] тальных и патологических условиях/Туравинина Л.П., Истомуп О.Ф., Цирятьева С.Б.// Управление'морфогенезом тканей и о] ганов в процессе адаптации. -Мат. 1 Республ.научн.конф.- 7Л) кутск,1989.-С.103-104. ' '

4. Органоспецифическая перестройка рыхлой волокнист« соединительно?! ткани при экспериментальном моделировании oj ганогенеза и диффереюгировки тканей/Дунаев П.В. , Соловье Г.С. , агарков В.Б.//Пгобпемы гистофизиологии соедин.ткЕ ни-Мат.Республ.конф.-Новосибирск,1989.-С.69-72.

5. Истомина О.Ф., Т;:ранинина Л.П.' Закономерности росч и превращения эпителия печени интактных и перегретых живот них в культурах по Ф.М.Лазаренко//. Компенсат.-приспособ.мг ханизмы внутр.органов и головн.мозга ' в норме, патол. эксперим.-Мат.облает.научи.конф.-Тюмень,]989.-С.15-17.

6. Истомина 0.4'. Реактивность тканей печени в vcnoiüii температурного стресса.// Эпителия и соедин.ткань нош. .эксперим. и патолог.условиях. -Мат.зональн. конф.морфолс гов-Тюмень,1990.-С. 298-299.

7. Истомина О.Ф. , Тутзаьинина Л. П. Энителио-соедпнитель но-тканные отношения печени в онтогенезе в условиях" эксперу

нта// Диагностика и лечение заболевании печени, подже-д.железы, селезенки и двенадцатиперстной кишки.- Мат. Все-с.конф. хирург.-Тюмень, 1990. С. 14(5-148.

8. Истомина О.Ф. , Туравиника Л. П. Реакция гепатоцитов еле температурного стресса//Клеточно-ткннев.механизмы адап-ции к действию повреждают.фагггоров-Сб.научн.тр.-Ог.юк, 1990. 66-69.

9. Истомина О.Ф. , Туравиника Л.П. Перестройка в сосу-стом бассейне имплантата печени при экспериментальном мо-лировании процессов органогенеза и дифференцировки тканей норме и при температурном стрессе// Морфология сосудистой :стемы в носме и патологии.-Сб.науч. трудов Томского д.инст.-Томск.-1990.-Вып. 3.-С.84-85.

10. Структурная и гистохимическая характеристика изме-ний в печени в условиях гипертермии и интоксикации четн-х х л о рис тым углеродом/Соловье в Г.С., Дунаев П. В., Истомина Ф. и др.// Влияние антропоген.факторов на морфогенетич.и ■руктурные преобразования органов.-Мат.Всерос. конф.- Аст-1хань, 1991.-С.144-145.

11. Истомина О.Ф. Структурная и гистохимическая харак-¡ристика возрастных изменений в печени в постнатальном оаз-ггии//Компенсат.-приспособ.механизмы В1гутрен. органов и тошного мозга в нормз, патологии и зкеперт^мэкте. -Мат. научно-зактич.конф.-Тюмень,1991.-С.32-35.

12. Истомина О.Ф. Реакция тканей печени в условиях тем-¡ратурного стресса//Стратегия и пути реализации новых под-)дов подготовки специалистов для'АПК-Мат.X научн.конФ.вузов 'йири и Дальн. Востока.-Тюмень, 1991.-С. 220-221.