Роль полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в предрасположенности к атопическим заболеваниям и гепатотоксичности противотуберкулезной терапии

Макарова, Светлана Ивановна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в предрасположенности к атопическим заболеваниям и гепатотоксичности противотуберкулезной терапии
ВАК РФ 03.02.07, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Роль полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в предрасположенности к атопическим заболеваниям и гепатотоксичности противотуберкулезной терапии"

На правах рукописи

МАКАРОВА СВЕТЛАНА ИВАНОВНА

РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ФЕРМЕНТОВ БИОТРАНСФОРМАЦИИ КСЕНОБИОТИКОВ В ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К АТОПИЧЕСКИМ ЗАБОЛЕВАНИЯМ И ГЕПАТОТОКСИЧНОСТИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЁЗНОЙ ТЕРАПИИ

03.02.07-генетика

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

1 5 С*»

Уфа-2011

4853037

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте молекулярной биологии и биофизики СО РАМН

Научный консультант доктор медицинских наук, профессор

Вавилин Валентин Андреевич

Официальные оппоненты:

член-корр. РАМН, доктор медицинских наук, профессор Воевода Михаил Иванович Учреждение Российской Академии Медицинских Наук НИИ терапии СО РАМН

доктор биологических наук, профессор Белявская Валентина Александровна ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор»

доктор медицинских наук, профессор Викторова Татьяна Викторовна Башкирский государственный медицинский университет

Ведущая организация: Учреждение Российской Академии наук

Институт цитологии и генетики СО РАН

Защита состоится «.(/- / » 2011 г. в «

на заседании Объединенного Диссертационного совета ДМ 002.133.01 при Учреждении Российской Академии наук Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН по адресу: 450054, Уфа, пр. Октября, 71. ИБГ УНЦ РАН

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уфимского научного

центра РАН (Уфа, пр. Октября, 71),

с авторефератом - на сайте ВАК РФ и

на сайте ИБГ УНЦ РАН ibg.anrb.ru/dissov.html

e-mail: molgen@anrb.ru

Автореферат разослан « /¿1> 2011 г.

Ученый секретарь ___ур

диссертационного совета Бикбулатова С.М.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Последние десятилетия характеризуются увеличением заболеваемости атопическими болезнями (A3). Эти заболевания называют ещё экологически обусловленными, так как наблюдается положительная корреляция заболеваемости с увеличением химической нагрузки на среду обитания человека [Авдеенко, 1990; Балаболкин, 1994; Шамов и др. 1997; Brunekreef, 1997; Schaid, Rowland, 199В; Ciccone et al., 1998; Norris et al., 1999; Gavett, Koren, 2001; Burr et al„ 2003; Соломон, 2003]. По своей генетической природе эти заболевания являются полигенными, или многофакторными с аддитивно-полигенным наследованием с пороговым эффектом [Holgate, 1997; Пузырев и др., 1998; Hall, 1999]. Идентификация в различных популяциях специфичных генов и средовых факторов, взаимодействие которых формирует норму реакции человека и его адаптацию к меняющейся среде обитания, приобретает в последние десятилетия всё большую актуальность [Спицын и др., 2006].

Атонический дерматит (АД) является первым по срокам возникновения атоническим заболеванием. Наличие атонического дерматита у ребёнка считается одним из факторов высокого риска развития бронхиальной астмы (БА) [Wahn, 2002]. В настоящее время известен ряд полиморфных генов, определённые варианты и генотипы которых обнаруживают связь с A3 [Фрейдин, 2001; Cookson, 2005; Lee et al., 2006]. В их число входят гены, функции белковых продуктов которых тесно связаны с развитием изучаемой патологии. К ним относят гены факторов антигенного распознавания и гуморального иммунного ответа; гены факторов воспаления, среди которых большую важность имеют гены ферментов метаболизма медиаторов воспаления; гены рецепторов цитокинов и агентов воспаления, гены внутриклеточных сигнальных молекул. Гены ферментов биотрансформации ксенобиотиков (ФБК) также являются кандидатными в формировании предрасположенности к данным патологиям, так как их белковые продукты осуществляют взаимодействие со средой, детоксицируя или токсифицируя чужеродные химические соединения, попадающие в организм, в том числе и лекарственные препараты [Jacqz-Aigrain, Cresteil, 1992; Ingelman-Sundberg, 1995; Mancinelli et al., 2004]. Но они ещё недостаточно исследованы в качестве генетических факторов предрасположенности к этим заболеваниям. Эти гены являются достаточно сложным объектом исследования в силу ряда их специфических особенностей. Это и перекрывающаяся субстратная

специфичность, и индуцибельность, и участие в метаболизме эндогенных соединений. Но именно эти особенности ФБК и позволяют предполагать, что они могут быть генетическими маркёрами на всех этапах развития заболевания от его инициации к исходу и, соответственно, позволят выявить предрасположенность, помочь в ранней диагностике заболевания, зная генотип больного, составить прогноз течения заболевания, выбрать наиболее оптимальную терапию.

Кроме того, в случае A3, диапазон проявления генотипа в фенотипе для генов ФБК может быть очень широким. Показано, что фенотипические эффекты проявления генов могут различаться для разных рас, этнических групп одной расы, у мужчин и женщин, в разных возрастных группах, при воздействии различных внешних факторов. В связи с этим ясно, что каждая конкретная популяция должна быть обследована для того, чтобы выявить ту группу людей, в которой исследуемый полиморфизм играет важную роль в развитии заболевания [Garte, 2001; Ляхович и др., 2006].

Так как гены ФБК участвуют в метаболизме лекарств, то они часто являются ответственными за побочные эффекты лекарственной терапии [Ryan et al., 1985; Huang et al., 2002; Bhaiya et al., 2006; Vuilleumier et al., 2006]. Трудностями медикаментозного лечения такого социально значимого заболевания, как туберкулёз лёгких, являются частые побочные реакции. Изониазид, метаболизируемый в основном N-ацетилтрансферазой 2 (NAT2), со времени начала его использования остаётся одним из наиболее широко используемых препаратов в лечении туберкулёза. ЫАТ2-зависимый метаболизм изониазида в нетоксичный ацетилизониазид и далее в ацетилгидразин и диацетилгидразин служит противовесом для амидазо-зависимого пути, в результате которого образуется токсичный гидразин [Huang, 2002]. Несмотря на длительный период времени, в течение которого известны быстрый и медленный фенотип ацетилирования и полиморфизм гена NAT2 как его основа, попытки сопоставления фенотипа ацетилирования и генотипа NAT2 в целях оптимизации терапии туберкулёза лёгких являются немногочисленными, выполнены на небольших группах здоровых добровольцев и с дозами изониазида в 2-4 раза более низкими, чем используемые в клинической практике лечения туберкулёза в Росиии [Kita et al., 2001; Kinzig-Schippers et al., 2005; Chen et al., 2009]. В то же время больные часто имеют целый ряд сопутствующих хронических заболеваний желудочно-

кишечного тракта, бронхо-лёгочной и эндокринной систем, алкоголизм, наркоманию, а также ВИЧ-инфекцию [Зарецкий, 1997; Колпакова, 2002; Montoro, Rodriguez, 2007].

Решение этих задач является особо важным для России, учитывая широкое распространение атопических заболеваний среди детей, а также высокий уровень побочных эффектов при медикаментозной терапии туберкулёза. В настоящее время информация о роли полиморфизма генов ФБК в предрасположенности к атопическим заболеваниям и развитии побочных эффектов лекарственной терапии туберкулёза является достаточно ограниченной не только в России, но и во всём мире. Учитывая это, целесообразным было проведение настоящего исследования.

Цель работы: Изучение полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков как возможных генетических факторов риска возникновения атопических заболеваний у детей (бронхиальной астмы и атопического дерматита) и некоторых клинических проявлений этих заболеваний, а также гепатотоксичности при лечении туберкулёза лёгких у взрослых.

Задачи исследования:

1. Изучить ассоциацию полиморфных вариантов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков (цитохрома Р4501А1 (CYP1A1), глутатион S-трансфераз Ml (GST Ml), TI (GSTT1) и PI (GSTP1), ариламин N-ацетилтрансферазы 2 (NAT2)) с атоническим дерматитом и бронхиальной астмой.

2. Сравнить величины показателей ассоциации с бронхиальной астмой полиморфных вариантов генов ФБК (CYP1A1, GSTM1, GSTTI, GSTP1, NAT2) и полиморфных вариантов генов интерлейкинов (IL4, IL5), их рецепторов (IL4R, IL5R) и антагониста рецептора (1L1RA).

3. Оценить возможное увеличение показателей ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с бронхиальной астмой у детей с наследственной отягощённостью в семейном анализе и в исследовании «случай - контроль», как проявление феномена антиципации.

4. Изучить межгенные взаимодействия в формировании предрасположенности и особенностей течения атопических заболеваний у детей.

5. Изучить влияние курения на показатели ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК (GSTM1, GSTTI, GSTP1, NAT2) с риском возникновения атопических заболеваний.

6. Изучить влияние комплексных конститутивных признаков (пол и возраст) на ассоциацию полиморфных вариантов генов ФБК с атопическими заболеваниями.

7. Охарактеризовать генетический полиморфизм гена NAT2 у больных туберкулёзом с сопутствующими заболеваниями и оценить связь полиморфных вариантов с развитием побочных реакций на противотуберкулёзные препараты.

8. Сопоставить скорости ацетилирования тестовых препаратов с генотипами NAT2 у больных бронхиальной астмой и туберкулёзом легких.

9.0ценить фармакокинетику изониазида у больных туберкулёзом лёгких и ассоциацию показателей элиминации препарата с развитием побочных реакций на противотуберкулёзные препараты.

10. Оценить информативность фенотипа ацетилирования и генотипа NAT2 в оценке предрасположенности к побочным эффектам лекарственной терапии туберкулёза лёгких.

Научная новизна: Впервые определены частоты встречаемости полиморфных вариантов генов ФБК и интерлейкинов в выборках детей -европеоидов, в основном русских, больных АД и БА и, соответствующей контрольной группы без атопических заболеваний г. Новосибирска. В исследованиях «случай - контроль» показана ассоциация полиморфных локусов генов ФБК и генов интерлейкинов с атопическими заболеваниями. Показано, что в формировании предрасположенности к БА преимущественно задействованы полиморфные варианты генов ФБК, тогда как в развитии клинических форм заболевания большую роль играют полиморфные варианты генов интерлейкинов. Показано, что и для АД, и для БА одни и те же полиморфные варианты генов ФБК являются факторами риска заболевания и изменения клинико-лабораторных показателей атопии, общих для АЗ, таких как повышенный уровень иммуноглобулина Е в сыворотке крови и количество эозинофилов.

Впервые было показано, что такие показатели атопии, как уровень общего IgE в сыворотке крови, процент эозинофилов и диаметр пятна в кожном прик-тесте у детей, больных БА, возрастают с накоплением нулевых аллелей в генотипе GSTM1.

Показано, что величина показателя ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с БА зависит от возраста и модифицируется полом. Установлено, что группами максимальной подверженности атопическому дерматиту являются девочки с гомозиготным генотипом GSTPl(105Ile/Ile), подвергавшиеся воздействию курения в семьях (OR = 6,38**), особенно девочки младше 11 лет

(OR = 26,25***). Гомозиготный генотип NAT2(C481T)(CC) также вносит наибольший вклад в предрасположенность к бронхиальной астме в группе девочек младше 11 лет, как подвергавшихся (OR = 20,0***), так и не подвергавшихся воздействию курения в семьях (OR > 35, 5**).

Показано, что гетерозиготные генотипы по исследованным признакам являются факторами устойчивости к атопическим заболеваниям.

Выявлена значительная вариабельность элиминации изониазида у больных туберкулёзом и процента ацетилирования сульфадимезина у больных бронхиальной астмой с одинаковым генотипом NAT2. Наиболее широкая вариабельность фенотипа ацетилирования показана у пациентов с гетерозиготным генотипом NAT2.

Показано, что медленный фенотип ацетилирования предрасполагает к гепатотоксичности при противотуберкулёзной терапии как в группах с отсутствием, так и в группах с наличием сопутствующих заболеваний.

Научно-практнческая значимость работы: Результаты исследования ассоциаций полиморфных вариантов генов ФБК с многофакторными заболеваниями могут быть использованы в профилактической медицине для формирования групп повышенного риска заболевания.

Знание показателей ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с клиническими особенностями течения БА и АД у детей и последствий противотуберкулёзной терапии у взрослых дают возможность прогнозирования течения заболевания у конкретного больного и оптимизации терапии. Результаты исследования ассоциаций генотипов при воздействии курения могут быть использованы для профилактической работы с родителями.

Результаты проведённого анализа гепатотоксичности противотуберкулезных препаратов у лиц с разным генотипом NAT2 и его фенотипом, определённым по элиминации изониазида, могут быть применены в лечебных противотуберкулёзных учреждениях для выявления среди больных лиц с высоким риском развития гепатотоксических реакций.

Теоретической значимостью данной работы можно считать получение экспериментальных подтверждений важного положения популяционнон генетики о приспособительном значении гетерозиготных генотипов на примере устойчивости гетерозиготных генотипов генов ФБК к атопическим заболеваниям у детей.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Полиморфизм генов ФБК является важной составляющей генетической основы как предрасположенности, так и устойчивости к атопическим заболеваниям.

2. Величина показателей ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с предрасположенностью к БА сравнима с таковой для генов цитокинов, вовлечённых в основной патогенетический механизм.

3. Пассивное курение, пол и возраст существенно влияют на величины показателя ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с предрасположенностью к A3 у детей.

4. Гены ФБК играют роль не только в развитии предрасположенности к A3, но и в формировании некоторых клинических проявлений этих заболеваний.

5. Вариабельность скорости ацетилирования тестовых препаратов у пациентов с гетерозиготными генотипами NAT2 превышает таковую у пациентов с гомозиготными генотипами.

6. Фенотип ацетилирования изониазида и генотип NAT2 могут служить маркёрами возможного развития гепатотоксичности при противотуберкулёзной терапии.

Апробация работы: Основные материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на 7-м Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Москва, 1997), IV, V Национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва, 1997, 1998), 2-м, 3-м и 4-м съездах Российского Биохимического общества (Москва, 1997; Санкт-Петербург, 2002; Новосибирск, 2008), 6-м Европейском съезде международного общества изучения ксенобиотиков (ISSX) (Готеибург, Швеция, 1997), Международных конгрессах «Interasthma 97» (Канары, 1997), «Интерастма» (Москва, 1998), 12-м международном симпозиуме по микросомам и окислению лекарств (Монпелье, Франция, 1998), конгрессе Европейского общества респиратологов (ERS) (Мадрид, Испания, 1999), 13-м международном симпозиуме по микросомам и окислению лекарств (Стреза, Италия, 2000), III съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Екатеринбург, 2000), Всероссийской научной конференции с международным участием «Север -человек: Проблемы сохранения здоровья» (Красноярск, 2001), 1-й Всероссийской конференции с международным участием «Влияние загрязнения окружающей среды на здоровье человека» (Новосибирск, 2002), XVII Всемирном конгрессе по астме (Санкт-Петербург, 2003), 6-й научно-практической конференции врачей «Современные лечебные и диагностические методы в медицинской практике» (Новосибирск, 2005), Международной конференции «Фундаментальные науки для

биотехнологии и медицины» (Новосибирск, 2006), 16-м Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Санкт-Петербург, 2006), 3-й международной конференции «Фундаментальные науки - медицине» (Новосибирск, 2007), 4-ом международном рабочем совещании по ариламин N-ацетилтрансферазе (Александрополис, Греция, 2007), Международном рабочем совещании «Research on Tuberculosis/ State of Art in Russia» (Москва, 2007), 2-й международной конференции «Erlich И Magic Bullets» (Нюрнберг, Германия, 2008), Всероссийской конференции, посвященной 10-летию кафедры генетики БГПУ им. М. Акмуллы, приуроченной к ежегодным Вавилонским чтениям (Уфа, 2009), 2-м съезде клинических фармакологов Сибирского федерального округа (Барнаул, 2009).

Публикации: По материалам диссертации опубликовано 53 работы, в том числе в журналах из Перечня ВАК РФ - 17, из них в журналах из международной базы цитирования - PubMed. - 10.

Структура и объем диссертации: Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, трёх глав собственных результатов, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 356 страницах, иллюстрирована 98 таблицами и 37 рисунками. Список литературы содержит 498 источников, из них 364 зарубежных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Характеристика выборок обследованных людей. Изучение ассоциации полиморфных вариантов исследуемых генов с БА у детей выполнено в рамках программы «Здоровье населения Сибири», проект «Выявление детей с высокой степенью риска хронизации бронхолёгочных заболеваний с помощью оценки полиморфизма генов ферментов биотрансформашш ксенобиотиков» (руководители - академик РАМН В.В. Ляхович, член-корреспондент РАМН С.М. Гавалов). Обследовано 100 детей, больных БА - от 4 до 14 лет, средний возраст 8,2 лет. Дети, подвергавшиеся пассивному курению, составили группу пассивных курильщиков (ПК). Группу детей, не подвергающихся такому воздействию табачного дыма, мы обозначили как НК. Наличие аллергии к 3-м и более типам аллергенов расценивали как поливалентную аллергию. За раннее начало заболевания принимали ею развитие в возрасте не позднее 3 лет. Степень тяжести заболевания оценивали в соответствии с критериями, рекомендованными в Национальной программе «Бронхиальная астма у детей, стратегия лечения и

профилактика». Клиническое наблюдение за больными осуществлялось врачом к.м.н. Рябовой O.A. Контрольную группу (104 ребёнка) составили пациенты травматологического отделения в период проведения контрольных анализов перед выпиской. Основным критерием отбора в контрольную группу было отсутствие любых проявлений сенсибилизации.

Исследование ассоциации иуль-полиморфизма глутатион S-трансферазы М1 с атопической БА в семейном анализе было проведено для 100 детей с БА и 268 членов их семей. Критерием отбора в группу обследования было наличие клиники БА, атопического статуса, выраженной сенсибилизации к бытовым или пыльцевым аллергенам. Постановка диагноза проводилась по классификации БА согласно документу «Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы» (2002). Степень тяжести заболевания оценивалась по клиническим проявлениям, частоте, тяжести и длительности приступов, показателям функции внешнего дыхания, состоянию ребёнка в период ремиссии. Отбор пробандов, больных БА, и их родственников в семейном анализе осуществляла врач-аллерголог к.м.н. Батычко O.A.

Для оценки роли полиморфизма ариламин N-ацетшгтрансферазы 2 в формировании предрасположенности к БА в семейном анализе использовались образцы крови представителей 48 семей г. Томска, любезно предоставленные Институтом Медицинской генетики СО РАМН. Среди обследованных было 74 здоровых и 15 больных взрослых, 15 здоровых и 46 больных детей.

Исследование ассоциации полиморфизма генов ФБК с АД проводилось на выборке 109 детей в возрасте от 1 до 15 лет с диагнозом АД из числа госпитализированных и наблюдаемых в Областном Аллергодерматологическом центре (МУЗ ГДКБ №1 г. Новосибирск). Работу с больными проводила к.м.н. Ляпунова A.A.

Для оценки роли фенотипа и генотипа NAT2 в развитии побочных эффектов противотуберкулёзной терапии под наблюдением находились 178 пациентов. Группа I (75 человек) получала противотуберкулёзную терапию в интермиттирующем режиме - 2 раза в неделю. Группа II (103 человека), получали лекарства ежедневно внутрь.

По наличию и характеру сопутствующих заболеваний пациенты каждой из I и II групп были распределены на 3 подгруппы. Больные с хроническими вирусными гепатитами В, С, В и С составили подгруппы IA и IIA. Больные с рядом хронических латентно-протекающих заболеваний желудочно-кишечного

тракта и желчевыделительной систем составили подгруппы IB и ИВ. Больные, не имевшие сопутствующих заболеваний, составили подгруппы 1С и ИС.

Функциональное состояние печени оценивали при поступлении, планово ежемесячно, а также в период развития реакции на препараты и её регрессии по результатам активности аспартатаминотрансферазы (ACT), аланинамино-трансферазы (AJIT), щелочной фосфатазы (ЩФ), у-глутамилтранспептидазы (ГГТП), а также по содержанию в сыворотке крови общего и конъюгированного билирубина. При госпитализации у больных клинико-лабораторные проявления хронического гепатита отсутствовали. Клиническое наблюдение за больными осуществлял врач к.м.н. Мутайхан Ж.

Для выполнения поставленных задач использовались следующие методы:

1. Количество изониазида и его метаболитов определяли методом градиентной ион-парной обращенно-фазовой хроматографии, в сыворотке больных, собранной до введения препарата и через 40 мин, 3 час.20 мин , 7 час.20 мин и 24 часа после прекращения введения препарата в группе I. В группе II забор крови проводили через 1 час, 2 час, 4 час, 6 час, 8 час, 12 час и через 24 часа после приёма противотуберкулёзных препаратов

2. Количество сульфадимезина и ацетилсульфадимезина определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в образцах мочи пациентов, собранной за 6 часов после приёма препарата (10 мг/кг веса тела).

3. Делеционный полиморфизм генов GSTM1 и GSTT1 (табл. 1), полиморфизмы числа тандемных повторов генов 1L1RN и IL4 (табл. 2) и Ile/Val полиморфизм гена CYP1A1 [Hayashi et al., 1991] определяли аллель-специфичной ПЦР Полиморфизмы генов NAT2, GSTP1, IL4, ILS, IL4R, IL5R определяли ПДРФ анализом после проведения ПЦР и ферментативного гидролиза необходимыми эндонуклеазами рестрикции (табл. 3). Во всех случаях аллель дикого типа обозначали — 1, а мутантный аллель - 0.

4. Фармакокннетические показатели рассчитывали в программе ASK1D [Дорохов, Холодов], с использованием однокамерных моделей с кинетикой первого порядка для внутрисосудистого или внесосудистого способа введения препарата.

5. Оценку соответствия частот генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайберга по критерию %2 Пирсона проводили в программе Hwe-win, разработанной М. Фрейдиным (г. Томск).

Таблица 1

Определение генотипов с помощью аллель-специфичной ПЦР_

Ген Полиморфизм Продукты амплификации

Гомозигота по Гетерозиготный Гомозигота по

аллелю дикого генотип делеции

типа

GSTMJ Делеция гена 230,157 230,157 157

GSTT1 Делеция гена 430, 157 430,157 157

Таблица 2

Определение генотипов с помощью аллель-специфичной ПЦР

Ген Полиморфизм Продукты амплификации

Длина фрагмента Число повторов Алле;

IL1RA (IL1RN) Тандемные повторы длиной в 86 п.н. АТССТСОСОАААОТОАСООАААТАТООА ААТСАСАТСОААСААСАТССАООАСАСТС АСОССТСТАООАСТААСГССОТАОТСТОС 438 2 1

524 3 2

610 4 3

696 5 4

IL4 Повтор фрагмента 70 п н. во втором интроне СААОАТОСССТОТГОСОАСССТ АССАСАОТАААССАСССТЛОАОАТОАТС; стсс,сотсоасаоаатс;аас 325 3 0

495 4 1

Таблица 3

Определение генотипов с помощью метода полиморфизма длин рестрикционных фрагментов по исследованным полиморфизмам

Ген Полиморфизм Эндонук- леаза рестрикции Продукты рестрикции

Гомозигота по дикому аллелю Гетеро-зигота Гомозигота по мутантному аллелю

NAT2 С282Т BstF5I 283,288, 429 283, 288, 429,712 712, 288

NAT2 €481Т Kpnl 433, 114 547,433, 114 547

NAT2 G590A, Argl07Glu Taql 222, 170, 155 392, 222, 170, 155 392, 155

NAT2 G857A, Glv286G!u BamHI 854, 146 1000, 854, i 46 1000

NAT2 A803G, Lys286Arg BstDEl 345,278, 123, 94 345, 278,123, 94,71,23 345,278, 123, 71,23

Продолжение таблицы 3

GSTP1 A313G в 5 экзоне, Не 105 Val BstMAI 176 176,91,85 91,85

IL4 G/C в З'нетрансли-руемой области Vnel 332,269 601,332,269 601

1L4R A400Gв 3 экзоне, IleSOVal в зрелом белке Rsal 273 273, 254, 19 254, 19

1L4R Gln551Arg в 12 экзоне Bsc4I 87 87, 64, 23 64, 23

IL5 С-703Т в 5' нетрансли-руемой области AlwNI 160,18 178, 160, 18 178

6. Частоты аллелей вычисляли непосредственно из распределения генотипов, а частоты делеционных полиморфизмов генов GSTM1 и GSTT1 рассчитывали исходя из предположения, что закон Харди-Вайнберга выполняли для исследованных выборок: непосредственно вычисляли частоту нулевого аллеля (р0), что представляет собой квадратный корень из частоты нулевого. Соответственно частота аллеля «1» равна 1 - ро.

7. Частоты гаплотипов для внутрилокусных полиморфизмов рассчитывали с помощью программы EH (Rockefeller University, США).

8. Об ассоциации разных генотипов с заболеванием судили по величине отношения шансов (odds ratio (OR)) [Pearce, 1993; Флечер и др., 1998]. OR=(A/B)/(C/D), где А - число (процент) людей с данным генотипом в группе «случай» (больных), а С - то же в группе «контроль» (здоровых), В - число людей, не имеющих данного генотипа, среди больных, a D - среди здоровых.

9. Для оценки ассоциации генетических признаков с клиническими проявлениями заболеваний использовали тот же показатель. В этих оценках сравнивали группы пациентов, имеющие определённое клиническое проявление, с группой пациентов, не имеющих этого признака. Достоверность различий определялась по критерию с коррекцией Йейтса. В случае, если одна из групп сравнения имела менее 5 наблюдений, использовали двусторонний критерий Фишера.

10. Межгенные взаимодействия изучали тремя подходами: первый заключался в сопоставлении частот парных сочетаний генотипов в группах больных и здоровых с расчётом OR и второй - с использованием логистической регрессии [Реброва, 2003]; третий - с помощью метода Multifactor Dimensionality Reduction (программа MDR, v. 1.1.0 www.epistasis.org/mdr.html), предложенного для моделирования геномных взаимодействий высокого порядка, которые невозможно оценить с помощью традиционно используемых в генетической эпидемиологии методов [Moore, 2004; Motsinger et al., 2006; Moore et al, 2006]. Метод MDR позволяет оценить вклад каждого из исследуемых генотипов, их взаимодействия, учитывая взаимодействия как снижающие, так и усиливающие влияния отдельных маркёров на возникновение заболевания, и на основе этого можно уменьшить размерность числа рассчитываемых параметров при одновременной оценке большого числа маркёров. Вклад каждого гена и/или их взаимодействия оценивается величиной Н (величиной информации, снятой неопределённости, remove entropy) и выраженной в %, где 100% — генотип однозначно определяет к классу больных или здоровых относится индивид, соответственно 0% - генотип не играет никакой роли в предрасположенности к заболеванию. Программа позволяет оценить и статистические параметры моделей (точность классификации (accuracy), чувствительность, специфичность, точность модели (precision), отношение шансов (odds ratio)).

11. Статистическую обработку других результатов проводили с использованием пакета прикладных статистических программ STATISTICA6.0. Сравнение показателей в разных группах проводили после проверки нормальности распределения этих признаков в тестах Колмогорова-Смирнова, Лиллифорса и Шапиро-Уилка. Если признак отвечал критериям нормального распределения, то достоверность различий между группами сравнения проверяли с помощью t-теста Стьюдента для двух независимых выборок. В тех случаях, когда распределение признака отличалось от нормального, сравнение проводилось с помощью теста Манна-Уитни для двух независимых выборок, а множественные сравнения - с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA). Изменение величины показателя в динамике лечения оценивали с использованием критерия согласованных пар Вилкоксона.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Ассоциация полиморфных вариантов генов ФБК с атопическими заболеваниями

Показаны различия в распределении генотипов и аллелей генов ФБК в выборках детей без признаков атонии (контрольная группа) и группах с АД и БА: достоверные в группах контроля и АД для генотипов (р<0,01) и аллелей (р<0,001) гена GSTT1, генотипов гена GSTP1 с АД (р<0,001), генотипов по однонуклеотидным заменам С481Т (р<0,05) и G590A (р<0,01) гена NAT2; в группах контроля и БА для генотипов и аллелей гена CYP1A1 (р<0,05), для генотипов (р<0,() 1) и аллелей (р<0,001) гена GSTT1, для генотипов гена GSTP1 (р<0,01), для генотипов (р<0,01) и аллелей (р<0,001) по однонуклеотидной замене С481Т гена NAТ2. В гене NAT2 оценены частоты внутрилокусных гаплотипов. Во всех группах гаплотипы 1/1 и 0/0 встречались реже, а гаплотипы 1/0 и 0/1 чаще, чем при случайном распределении, что соответствует литературным данным: гагшотип 0/0 является аллелем NAT2*6E [Human NAT2 alleles (Haplotypes), 2010], который встречается у европеоидов редко [Dandara et al., 2005]. Генотипы и гаплотипы, для которых были выявлены статистически значимые величины отношений шансов АД и БА, представлены в табл. 4.

Таблица 4

Ассоциация генотипов ФБК с АД и БА

Генотип Атопический дерматит Бронхиальная астма

OR (95% CI) OR (95% CI)

CYPIAI(IO) Не определялось 3,44*(0,98- 13,18)

NAT2 (С481Т) (11) 1,67(076 - 3,67) 4,01 ***(1,96-8,28)

NAT2 (С481Т) (10) 0,78 (0,41 -1,49) 0,49*(0,26 - 0,89)

NAT2 (G59QA) (00) 2,37* (0,96-5,94) 1,28(0,47-3,29)

Га плотин NAT2 CC/GG 1,18(0,53-3,58) 1,66*(1,03 - 2,70)

Гаплотип NAT2 ТТ/АА 2,96**( 1,37 -6,48) 0,24* (0,05 - 0,94)

Гаплогип NAT2 TT/GG 0,64* (0,41-1,00) 0,57**(0,37 - 0,88)

GSTT1 (1) 0,26***(0,11-0,60) 0,34**(0,15 — 0,78)

GSTT1 (00) 3,79***(1,67 - 8,75) 2,94** (1,29-6,82)

GSTP1 (10) 0,44** (0,24 - 0,83) 0,55* (0,30- 1,02)

Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** -р<0,001

Анализ ассоциации генотипов ФБК с АЗ показал, что большинство генотипов генов ФБК являются или факторами риска обоих АЗ: ЫЛТ2(С481Т)(1 Г),

NAT2(G590A)(Q0) гаплотип CC/GG гена NAT2, GST 1(00), GSTPl(OO) и GSTP1 (10), или факторами устойчивости к ним: NAT2(C481T)(10), GSTTl(l), GSTPl(lO) и гаплотип TT/GG гена NAT2. Результаты исследований ассоциации генотипов NAT2 с БА, проведенных другими авторами, показывают, что они были ассоциированы либо с предрасположенностью, либо с устойчивостью к БА в выборках разной этнической принадлежности или занимающих разное географическое положение. Так, в выборке детей русской этнической принадлежности Башкортостана, как и в нашей, гомозигота NA Т2 *481 Т/Т (NAT2(C481T) (00) является фактором устойчивости к бронхиальной астме (OR = 0,49) [Фёдорова, 2009], а в польской [Pawlik et al., 2009], индийской [Batra et al., 2006], и турецкой [Tamer, 2006] выборках этот генотип является фактором предрасположенности к БА.

Гомозиготная делеция гена GSTT1 является фактором риска заболевания обоих исследованных АЗ, тогда как делеция GSTM1 являлась фактором риска заболевания БА у детей в семейном анализе (OR = 19,29***) в группе детей с двусторонней наследственной отягощёниостыо по аллергическим заболеваниям, а в группах детей с односторонней (OR = 2,95), без наследственной отягощённости (OR = 2,08) и в исследовании «случай - контроль» (OR = 1,52) показатель ассоциации не достигал статистической достоверности. Анализ 87 статей, опубликованных до 2008 года, посвящённых ассоциации GST с БА, показал, что в большинстве работ делеции GSTM1 и GSTT1 ассоциированы с заболеванием БА, лишь в некоторых работах ассоциаций не выявлено. Генотипы GSTP1 могут быть как факторами предрасположенности, так и факторами устойчивости к БА в выборках разной этнической принадлежности. Гомозигота по мутантному алллелю GSTPl(OO) является фактором риска БА в нашей и в одной из турецких выборок, но является фактором устойчивости в других выборках. Гетерозигота же по этому признаку всегда является фактором устойчивости к БА [Minelli, 2010].

Таким образом, полученные результаты выявили ассоциацию следующих генотипов генов ФБК: NAT2(C48IT)(11), NAT2(G590A)(00) гаплотип CC/GG гена NAT2, GST 1(00), GSTPJ(00) и GSTPl(lO) с предрасположенностью к АЗ, а генотипов: NAT2(C481T)(10), GSTTI(l), GSTPl(lO) и гаплотип TT/GG гена NAT2 с устойчивостью к ним. Различия эффектов гомозиготных вариантов полиморфных генов ФБК в предрасположенности к атопическим заболеваниям в разных этнических группах, вероятно, обусловлены эволюционно сложившимися взаимодействиями генотип-среда, специфичными для каждой человеческой популяции.

Влияние фактора курення на рисковую значимость генотипов ФБК при атопическом дерматите у детей

В клинико-эпидемиологических наблюдениях установлено, что пассивное курение является фактором риска возникновения у детей как АД [Балаболкин, 1991; Schäfer, 2006], так и БА [Гавалов, 1984; Infante-Rivard., 1999]. Взаимодействие комплекса специфичных генов и внешних факторов формируют норму реакции устойчивости человека к среде обитания, а заболевания - результат их взаимодействия уже за пределами нормальной реакции на среду [Бочков, 1997; Алтухов, 2003]. Курение, будучи одним из факторов риска атопических заболеваний, является также одним из немногих факторов окружающей среды, поддающимся учёту со стороны исследователя. Достоверные ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК раздельно для пассивно курящих (ПК) и не подвергавшихся воздействию фактору курения (НК) детей, представлены в таблице 5.

Таблица 5

Ассоциация генотипов ФБК с атопическими заболеваниями детей в зависимости от курения

Генотип HK Г1К

АД БА АД БА

NAT2 (С481Т) (11) 1,40 4,8** 1,88 3,78**

NAT2 (С481Т) (10) 0,59 0,72 1,07 0,39***

NAT2 (С481Т) (00) 1,97 0,29* 0,95 0,81

NAT2 (G590A)(00) 9,00* 2,47 2,94 1,24

GSTMl(OO) 1,49 1,55 0,55 1,62

GSTT1(00) >9,06*0 >8,18*0 3,40** 1,91

GSTTl(l) <0,11*# <0,12*# 0,29** 0,52

GSTPl(ll) 0,81 1,53 3 95*** 1,11

GSTPl(lO) 0,95 0,35* 0 24*** 0,56

Примечание: Примечание: * - р <0,05; ** - р < 0,01; 0 - минимальная величина (Ж, рассчитана из предположения, что следующий индивид в контрольной группе будет иметь указанный генотип; # - максимальная величина (Ж, рассчитанная из предположения, что следующий индивид в выборке больных будет иметь указанный генотип.

Анализ показал, что дети ПК, имеющие генотип GSTPl(U), имеют повышенный риск заболеть АД, по сравнению с НК детьми, а бронхиальной астмой только девочки ПК (OR = 4,5*). Сочетания генотипов ФБК, в которых имеется GSTPl(ll), также имеют большее значение в предрасположенности к АД у детей, подвергавшихся курению, это обусловлено, вероятно, токсификацией компонентов табачного дыма ферментом этого гена. Показано, что аллозим фермента GSTP1, имеющий изолейцин в 105 положении аминокислотной последовательности, более активен в отношении 1-хлор-2,4-динитробензола и алкилирующих агенов, чем валиновый аллозим [Eaton, Bammler, 1999].

Показатели ассоциации генотипа NAT2(G590A)(00) с АД, GSTTl(OO) с АД и с БА существенно выше при отсутствии влияния фактора курения.

Возможно, это связано с участием ферментов этих генов в метаболизме эндогенных субстратов, такое участие показано и для NAT, и для GST. Но это может быть связано и с тем, что курение воздействует также и на какие-то иные механизмы, отличные от участия ФБК, и таким образом, заболевают и носители генотипов, устойчивых к заболеванию в отсутствии воздействия фактора курения. Косвенно об этом свидетельствуют наши же данные о том, что курение влияет и на предрасположенность к астме, связанной с полиморфизмом тандемных повторов антагониста рецептора к интерлейкину 1 (1L1RA).

Половые различия в предрасположенности к атопическим заболеваниям

Результаты, представленные в табл. 6, показывают, что у детей обоих полов одни и те же полиморфные варианты большинства исследованных генов ФБК

являются факторами предрасположенности к БА и АД.

Таблица 6

Ассоциация АЗ с генотипами ФБК в зависимости от пола ребёнка

Атопический дерматит Бронхиальная астма

Генотипы Мальчики Девочки Мальчики Девочки

NAT2 (С481Т) (11) 1,53 1,80 3,48* 4,94*

NAT2 (С481Т) (10) 0,70 0,52 0,4* 0,6

NAT2 (G590A) (10) U9 0,34* 1,02 0,77

GSTTl(l) 0,20** 0,32* 0,26* 0,36

GSTTl(OO) 5,01** 3,Ю* 3,83* 2,79

GSTPl(ll) 1,12 3,95** 0,95 3,97**

GSTPl(lO) 0,63 0,29** 0,77 0,31*

Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001

Но наблюдаются заметные различия между мальчиками и девочками для глутатион-Б-трансфераз. Причём, ассоциация гомозиготной делеции GSTTI с БА более выражена у мальчиков, тогда как гомозиготы по Не аллелю GSTP1 (GSTP1 (И)) - у девочек. Несколько признаков являются значимыми для девочек, но не являются таковыми для мальчиков в предрасположенности к АД: NAT2(G590A)(10), GSTPl(ll), GSTPl(lO).

В работе [Miyagi et al., 2009] показано, что имеются половые различия в развитии антиоксидантной защиты, включая цитозольные глутатион S-трансферазы, у детей разного пола. У девочек уровень активности цитозольных GST был достоверно ниже, чем у мальчиков. Возможно, это объясняет наблюдаемый нами факт. Литературные сведения о возможных половых различиях в функционировании суперсемейства GST, которые бы позволили объяснить наблюдаемые нами ассоциации, недостаточны. Показано, что в коже главной формой глутатион S-трансферазы является GSTP1 и её активность существенно выше у лиц женского пола, чем мужского [Singhal S.S. et al., 1993].

Взаимодействие генов ФБК в предрасположенности к атопическим заболеваниям

Исследованные гены ФБК располагаются на разных хромосомах: NAT2 на 8-ой, CYP1A1 на 15-ой, a GSTTI - на 22-ой, GSTMJ - на 1-ой, GSTP1 на 11-ой хромосомах, но кодируемые ими белки могут функционально сопрягаться в метаболических путях через общие интермедиаты, поэтому следовало оценить взаимодействие исследованных полиморфных вариантов в предрасположенности к A3.

Анализ результатов взаимодействия изученных полиморфных локусов генов ФБК методом MDR показал, что вклад полиморфизмов генов а правильность распознавания генотипов больных АД и здоровых детей уменьшается в следующем раду: делеционный полиморфизм GSTTI (Hqstti ~ 5,24%), локус Ilel05Val гена GSTP1 (HGSTPi= 2,55%), локус G590A гена NAT2 (HG590anat2 = 2,25%), локус С481Т гена NAT2 (HC4sitnat2 = 1,54%) и наименьший вклад вносит делеционный полиморфизм гена GSTM1 (HGstmi = 0,46%). Для БА прослеживается уменьшение вклада полиморфных генов в следующем ряду: локус С481Т гена NAT2 (HC48itnat2 = 5,10%), делеционный полиморфизм GSTTI (HGstti = 3,03%), локус Ilel05Val гена GSTPJ (HGsn>i= 1,77%), локус Ue462Val гена CYP1A1 (HCYpi,m

= 1,01%), делеционный полиморфизм гена (75ТЛ// Н(~ятм1 = 0,81%), локус С590А гена МАТ2 (Нс,590аклт2 = 0,16%) (рие. 1). Эти результаты согласуются с результатами сопоставления показателей ассоциации (отношений шансов) генотипов ФБК с атопическими заболеваниями. Последовательность этих величин находится в соответствии с результатами сопоставления отношений шансов.

Одним из несомненных достоинств метода МОЯ является то, что чем больше полиморфизмов взято в рассмотрение, тем точнее модель оценивает вклад каждого полиморфного локуса и их взаимодействий. Метод МОЯ позволяет также, благодаря анализу взаимодействий между полиморфными локусами, уменьшить размерность (число) необходимых для правильной дискриминации генотипов больных и здоровых индивидов. В данном исследовании удалось вычленить малоинформативные полиморфизмы (СУР1А1, СЯТМ! и А'АТ2С590А - для БА и СБТМ1 - для АД). Однако, выявить комбинацию полиморфных локусов, которая бы была более информативна, чем отдельные локусы не удалось (рис. 1), это объясняется, не только биологическими свойствами продуктов данных генов - у них разная субстратная специфичность - но и особенностями метода МОИ.: он учитывает вклад полиморфизма в целом, не учитывая отдельных его генотипов. Метод сопоставления показателей ассоциации (ОЯ) более чувствителен к вкладу отдельных генотипов конкретных полиморфных локусов.

Сопоставление отношений шансов, полученных при анализе ассоциаций индивидуальных генотипов, с полученными при совместном анализе нескольких полиморфных локусов генов ФБК, показало отсутствие выраженных изменений величин этого показателя. Только если в генотипе индивида сочетаются гомозиготная делеция гена С5ГГ/ и гомозигота по аллелю дикого типа G577'/(^J/5G), ассоциированные с предрасположенностью к обоим АЗ, риск заболевания и АД ((Ж = 10,51***), и БА (ОЯ= 6,08*) значительно возрастает.

ытаьэоь 0.16%

«.77% I

ЫАТ2С481Т

ОБТМ1 0.46%

С5ТР1

2.55%

А\хГА

•0.53% -0.78% -ОХК

им

|-1.09%|

аД4% 0.61% 0.78%

4.43% -0.82%

■01 .---се

И. 48%'

"3.03%

Рисунок 1. Граф взаимодействий полиморфных локусов генов ФБК при атопическом дерматите (А) и бронхиальной астме (Б).

Вероятной метаболической основой этого эффекта может быть неэффективная детоксикация ксенобиотиков, в конъюгации которых с глутатионом участвуют обе эти GST. Например, известна перекрывающаяся активность цитозольных GST в отношении хлорнитробензолов [Hayes, 2005].

Больший вклад полиморфизма GSTP1 в развитие АД, чем БА, возможно также является отражением того, что основной формой GST в коже является GSTP [Jernstorm et al., 1989; Raza et al., 1991].

Лабораторные показатели атопии и некоторые клинические проявления атопических заболеваний у детей с разными полиморфными вариантами

генов ФБК

Для АД и для БА общими характеристиками являются повышенный уровень IgE и количество эозинофилов периферической крови. В исследованиях «случай -контроль» мы использовали как количественные, так и качественные показатели («нормальный» уровень IgE и «повышенный» (>120 Е/мл); «гиперэозинофилия» (>4% для АД и >8% для БА)). В семейном анализе, где была возможность выявить гетерозиготные генотипы GSTM1, использовались количественные показатели.

Повышенный уровень IgE у больных АД ассоциирован со следующими генотипами ФБК: GSTM1(00)+GSTP1(10) (OR = 4,0; р<0,05); GSTT1(00)+NAT2(C481T)(10) (OR = 5,4, р<0,05); GSTP1(10)+NAT2(C481T)(10) (OR = 3,33, р<0,05); GSTM1 (OR = 1,55) (у девочек (OR = 5,60, р<0,05)). Уровень иммуноглобулина Е у больных БА прямо коррелирует с числом нулевых аллелей GSTM1 в генотипе пациентов (семейный анализ) (табл. 7).

Количество эозинофилов в крови больных БА также коррелирует с числом нулевых аллелей гена GSTM1 в генотипе ребёнка (семейный анализ) (табл. 7). У больных АД («случай - контроль») у лиц с гомозиготной делецией гена GSTM1 количество эозинофилов достоверно выше (7,47* ± 5,88), чем во всей группе больных детей (5,39 ± 4,9). Повышенный уровень эозинофилов ассоциирован у больных АЗ с генотипами, в состав которых входят гомозиготные делеции генов GSTM1 и GSTT1: у больных АД: GSTMl(OO) (OR = 3,77, р<0,01), GSTM1(00) + GSTTl(l) (OR = 3,86, p<0,05), GSTM1(00)+NAT2(C481T)(10) (OR = 3,0, p<0,05), у больных БА с генотипами: GSTM1(00)+NAT2(G590A)(10) (OR = 3,39, p<0,05; для HK - 7,81, p<0,01), GSTT1 (00J+NAT2(G590A)(10) (OR = 8,71, p<0,001; для HK- 11,56, p<0,05).

Количественные показатели сенсибилизации у детей с атопической бронхиальной астмой с учётом генотипов ОБТМ1 в группах с различной наследственной отягощённостью по аллергическим заболеваниям (п = 100)

Показатель Генотип 08ТМ1 Все дети п=100 I группа п = 22 II группа п = 58 III группа п = 20

Общий IgE (МЕ/мл) Все генотипы 532,45 ± 204,9 694,3 ±176,0 537,2 ± 165,9 340,5 ± 180,7

08ТМ1 (00) 668,2 ± 158,1*** 767,67 ±97*** 635,7 ± 134,9*** 453,0 ± 100,6

С8ТМ1 (10) 521,54 ±136,3** 622,5 ± 137,9*** 548,1 ± 101,7* 383,33 ± 155,0

С8ТМ1 (1) 408,9 ± 181,3 443,0 ± 103,54 456,9 ± 163,3 282,92 ± 196,1

Кожный прик-тест (мм) Все генотипы 7,81 ±2,84 10,0 ±2,73 7,74 ±2,61 5,6 ± 1,67

08ТМ1 (00) 9,98 ±2,38*** 11,2 ± 1,97*** 9,68 ±2,36*** 7,6 ± 1,52**

вЯТМ! (10) 7,54 ±1,8** 10,0 ±2,83*** 7,75 ± 1,67 5,33 ± 0,58

С8ТМ1 (1) 5,87 ± 1,8 6,4 ± 1,34 6,21 ± 1,95 4,83 ± 1,19

Эозинофилы периферической крови Все генотипы 7,42 ± 3,37 9,36 ± 3,47 7,76 ± 2,9 4,3 ± 2,4

С8ТМ1 (00) 9,43 ±3,11*** 10,67 ±3,2** 9,4 ±2,65*** 5,8 ± 2,2

С8ТМ1 (10) 7,31 ±2,02* 8,0 ± 1,28 8,25 ± 1,28 4,33 ±0,58

йЗТМ! (1) 5,58 ±2,86 6,0 ±2,35 6,32 ± 2,74 3,67 ±2,6

Примечание: Сравнение проводилось с генотипом GSTMl(l) * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001; I - дети из семей с двусторонней наследственной отягощённостью; II - дети, у которых один из родителей страдал A3; III - дети, у родителей которых отсутствовали A3.

Для таких клинических проявлений как тяжесть заболевания, раннее развитие для БА или форма заболевания (младенческая, детская, подростковая) для АД, поливалентная аллергия для БА, генотипы, предрасполагающие к их развитию, были индивидуальными для каждого заболевания. Таким образом, общность генетических признаков, предрасполагающих к обоим АЗ и являющихся прогностическими факторами общих клинических проявлений этих заболеваний, указывает на связь данных генов с механизмами формирования атопии.

Влияние наследственной отягощённости на ассоциацию полиморфных вариантов генов ФБК с бронхиальной астмой

Группа многофакторных заболеваний характеризуется, как правило, более ранним началом и некоторым утяжелением клинических проявлений в нисходящих поколениях семейных случаев (Бочков, 1997; Горбунова, 1999; Акз1ш1ег е1 а1., 1998). Сравнение детей с наследственной отягощённостью по аллергическим заболеваниям и детей без таковой показало, что величины отношения шансов выше для детей с наследственной отягощённостью (табл. 8).

Чтобы судить о причастности полиморфных вариантов генов ФБК к реализации патогенных эффектов окружающей среды, мы проанализировали ассоциацию генотипов с предрасположенностью к БА в обеих группах раздельно для детей ПК и НК (табл. 8).

Показатели ассоциации (СЖ) генотипов генов ФБК с БА различались в группах НК и ПК. У НК ассоциация генотипов ЫАТ2(С481Т)(11), С5ТТ1(00), СБТТЦОО) + ОБТМЦОО) с БА значительно выше, чем у ПК, и выше у детей с наследственной отягощённостью, чем без таковой. Таким образом, можно утверждать, что полиморфизмы генов ФБК участвуют в формировании восприимчивости, обусловленной взаимодействием генов с факторами окружающей среды, когда заболевают дети от здоровых родителей, имеющие варианты генов ФБК, способствующие заболеванию в конкретных условиях окружающей среды. Кроме того, высокие величины (Ж для СБТТЦОО) и МАТ2(С481Т)(11) в условиях отсутствия курения и наследственной отягощённости позволяют предположить, что дефекты ФБК имеют значение для становления иммунной системы и формирования бронхиальной реактивности у детей.

Ассоциация генотипов ФБК с бронхиальной астмой в зависимости от воздействия курения и наследственной отягощённости

Генотип Отношение шансов

С наследственной Без наследственной

отягощённостью отягощённости

НК ПК НК ПК

CYPIAI(IO) 4,00 3,84 4,48 3,04

GSTMl(OO) 0,98 1,75 1,01 0,72

GSTTl(OO) >25,0* 1,59 6,96 2,1

GSTPl(ll) 2,88 1,95 1,16 1,39

GSTPl(lO) 0,40 0,44 0,59 0,71

NAT2(C481T)(11) 5,14* 4,19** 3,75* 3,41*

NAT2(C481T)(10) 0,54 0,37* 0,81 0,41*

NAT2(C481T)(11) + NAT2(G590A)(10 or 00) 1,00 6,20* 2,65 2,95

GSTMl(OO) + GSTTl(OO) 17,4* 2,68 3,35 1,0

IURA (33) 0,42 0,53 0,54 0,29*

ILIRA (13) 2,00 1,47 3,21 3,17*

Примечание: *-р<0,05; **-р<0,01; ***-р<0,001

В семейном анализе с участием жителей г. Новосибирска мы показали, что процент больных с генотипом вЗТМ!(00) возрастает в ряду: дети от здоровых родителей, дети из семей с одним больным родителем, дети из семей с двусторонней отягощённостью (табл. 9).

Таблица 9

Распределение и статистические показатели различий генотипов ББТМ! у детей

с АБА в группах с учётом наследственной отягощённости

Генотипы GSTM1

Группы GSTM1(00) GSTMl(l) *2 Р

п % п %

I 15 68,2 7 31,8 4,72*; 6,2| 0,03*; 0,01t

II 22 37,9 36 62,1 0,60 0,430

III 5 25,0 15 75,0 - -

Примечание: * - различия между I и II, f - между I и III, О - между II и III.

Таким образом, в отличие от результатов исследования «случай-контроль», результаты семейного анализа указывают на важную роль GSTM1 в формировании восприимчивости к атопической БА, которая реализуется, по-видимому, посредством влияния на становление и функцию иммунной системы, что подтверждается положительной корреляцией числа нулевых аллелей GSTM1 и такими показателями, как общий IgE, диаметр прик-теста и количество эозинофилов периферической крови (табл. 7).

Роль генов цитокинов в предрасположенности к БА и в формировании некоторых её клинических проявлений

Изучение этиологии и патогенеза БА привело исследователей к пониманию важной роли в этих процессах интерлейкинов (ИЛ), которые ответственны за начало и поддержание воспаления при БА [Corrigan, 1997; Chung, Barnes, 1999].

Исследования связи полиморфных вариантов генов ИЛ с БА и факторами риска заболевания, проведенные несколькими научными группами, противоречивы и не дают однозначного ответа на вопрос об их патогенетической роли [Borish et al., 1994; Rosenwasser et al., 1995; Walley, Cookson, 1996; Song et al., 1996; Hershey et al., 1997; Dizier et al., 1999; Freidin et al., 2002, 2003].

Мы исследовали полиморфизмы генов IL4, IL5, IL4R, IL5R, IL1RN (табл. 2, 3). Лишь некоторые из исследованных полиморфизмов являются факторами предрасположенности к заболеванию БА у детей: например, IL1RA(13) - фактор предрасположенности к заболеванию (табл. 10), причём его выраженность выше у мальчиков, ПК, а для девочек он вообще не является фактором риска (данные не приведены). То же самое касается и IL1RA(33) - фактора устойчивости к заболеванию (табл. 10).

Таблица 10

Ассоциация некоторых генотипов цитокинов с БА у детей

Ген Генотип Отношение шансов

Все ПК НК

IL IRA 11 1,07 1,7 0,45

VNTR 13 2,28* 2,53* 3,67

33 0,45* 0,27* 0,66

1L4R ii 0,55* 0,56 0,77

(Ile50Val) iv 1,68 1,56 1,43

vv 1,11 1,33 0,74

ILS CC 1,49 2,31* 0,84

(-703 С/Т) CT 0,65 0,46* 0,91

TT 1,11 0,76 1,08

Примечание: * -р<0,05; ** -р<0,01; *** -р<0,001

Полиморфизм тандемных повторов почти не исследовался. Результаты исследований показывают положительную корреляцию концентрации IL1RA в крови с тяжестью БА пациентов, но отсутствие различий в частотах VNTR повторов у больных по сравнению с контролем [Pillay et al., 2000]. В работе Pattaro et al., 2006, показано отсутствие ассоциации SNP этого гена с астмой в германской популяции.

В исследовании выборки больных БА г. Томска [Freidin et al., 2002, 2003] выявлена статистически значимая ассоциация между аллелем -703С гена IL5 и заболеванием. В нашем исследовании этот аллель статистически значимо ассоциирован с заболеванием у ПК детей. Более высокие и достоверные показатели риска заболевания БА демонстрируют полиморфные варианты генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков, а из исследованных генов интерлейкинов лишь ген IL1RA. Было высказано предположение, основанное на результатах позиционного картирования, что ген IL1RA должен быть генетическим фактором риска астмы [Ramadas, 2006]. Наши результаты подтверждают это предположение.

Так как в двух генах (1L4, IL4R) определено по два полиморфных локуса, были оценены частоты внутрилокусных гаплотипов. В обеих изученных выборках полиморфные локусы VNTR и G+717C гена IL4 находились в неравновесии по сцеплению (у_2 > 80, р < 0,001). Наиболее распространённым гаплотипом в обеих выборках был гаплотипы 3 (два 70-нуклеотидных повтора и нуклеотид G в 3' -нетранслируемой области в положении + 717). Сравнительный анализ частот гаплотипов полиморфных вариантов гена IL4 между группами БА и контролем не показал значимых различий (х2 = 26,74; df = 3; р <0,001). Гаплотип 1 (один 70-нуклеотидный повтор и нуклеотид G +717) статистически значимо ассоциирован с устойчивостью к заболеванию БА (OR = 0,05*** 95% CI 0,00 - 0,35).

Полиморфные локусы 150V и Q551R гена IL4R находились в равновесии по сцеплению как в контроле (х2 = 1,056; df = 3; р >0,05) так и в группе больных БА (X2 = 1,336; df = 3; р >0,05).

Анализ информационной значимости полиморфных локусов исследованных генов цитокинов (IL4, ILS, IL4R, ILIRA) методом MDR показал (рис. 2), что их информационный вклад (Н) в распознавание генотипов больных и здоровых детей, ниже, чем у генов ФБК. Вклад наиболее значимого полиморфного локуса С-703

гена IL5 составляет лишь 2,08%, для полиморфного локуса Ile50Val гена 1L4R эта величина составляет 1,73%, для локуса полиморфных тандемных повторов гена антагониста рецептора к интерлейкину 1 (IL1RA=1L1RN) - 1,57%, для локуса G+717C гена IL4 - 1,33%, для локуса тандемных повторов гена IL4 - 0,53% и 0,02% для локуса Gln551Arg гена IL4R. Но взаимодействия выбранных генов интерлейкинов отличаются от взаимодействий генов ФБК: для них более характерными являются синергические взаимодействия. Имеется комбинация генов, информационная значимость которой выше, чем значимость отдельных составляющих этой пары (локус С-703Т гена IL5 и локус тандемных повторов гена IL4 (HiL5+IL4 = 3,76%>). Возможно, биологической основой этого взаимодействия является наличие в промоторах генов (IL4, IL5, IL13 и GM-CSF) общего папиндромного энхансерного элемента (CCAAG) [Codlin et al., 2003].

Рисунок 2. Граф взаимодействий полиморфных локусов генов интерлейкинов в предрасположенности к бронхиальной астме.

Так как интерлейкины играют важную роль в патогенезе астмы, в возникновении атопии, воспалительных процессов в бронхах, то были исследованы ассоциации полиморфизмов этих генов с клиническими признаками астмы (табл. 11).

Ассоциация генотипов цитокииов с неблагоприятными клиническими проявлениями БА

генотип Раннее развитие Тяжёлое течение Поливалентная аллергия Гиперэо-зинофилия

IL4R(I50V) (ii) 0,17* 0,63 0,92 1,19

IL4R(Q55lR)(qq) 0,42 0,39* 1,58 0,72

1L4R(Q551 R)(qr) 2,94* 2,71* 0,76 1,39

IL1 RA (VNTR) (13) + IU(V\'TR)<10) 0,80 2,00 0.0* 0,97

IURA(WTR)(11) + 1L4(VNTR)(H)) 0,0 1,31 16,53** 2,04

IL IRA (VNTR)(33) + 1L4(VNTR)(1 1) 1,85 0,48 0,00** 0,51

1L1RA(VNTR)(33) + lL4(3'-ittrG/C)(gg) 1,48 0,38 0,0* 0,35

IL1RA(VNTR)(11) + lL4(3'-utrG/C)(gc) 0,00 0,70 6,26* 2,17

IL1 RA(VNTR)( 13) + !L4R(Q55lR)(qr) 2,97 5,20* 0,92 5,16*

IL IRA (l/NTR)(33) + 1L5(- 703C/T) (ct) 0,79 0,15* 0,34 0,56

JLIRAO'NTRiai) + IL5(- 703C/T) (cc) 0,44 1,50 6,48** 1,39

1LIRA (VNTR)(33) + lL5R(G-80A)(gg) 4,44* 0,76 0,29 0,44

IL1R4(VNTR)(I1) + IL5R(G-80A)(aa) 0,00 1,82 >9,14* 1,36

[L4(VNTR)(11) + !L4R(i50V)(iv) 3,56* 2,39 1,02 0,93

IL4(VNTR)(11) + ]L5R(G-80A)(gg) 4,40* 1,31 0,77 0,91

1L4(VNTR)(1¡) + lL5R(G-80A)(ga) 0,0* (<0,20) 0,91 0,42 0,31

1L4(VNTR)(10) + H.5R(G-SO A) (aa) 0,0 0,0 >12,20** 1,31

IL4R(15QV)(iv) f- IL4R(Q551R)íqr) 4,59** 1,97 1,65 0,92

lL4R(15QV)(w) +1L4R(Q55IRHqr) 7,78 4,07 1,65 >7,56*

¡l4R(I50V)(íi) + IL5(- 703C/T)(cc) 0,0*(<0,19) 0,43 0,53 2,35

lL4R(150V)(w) + 1L5(- 703C/T)(cc) 4,19* 3,65 0,52 4,35*

]L4R(150V)(iv) + JLSR(G-SOA) fgg) 2,94* 1,74 1,42 0,67

lL4R(Q551R)(qr) + IL5R(G-S0A)(gg) 4,07* 3,10* 1,10 1,15

!L4(3-utrG/C)(gg) + lL5R(G-S0A)(gg) 3,44* 1,31 1,20 0,95

1L4(3'-ntrG/C)(gc) + ÍL5R/G-S0A)(aa) 1,19 0,63 13,31* 2,35

IL4(3 '-utrG/Ofgc) + 1L5R(G-SOA)(ga) 0,96 0,74 0,59 3,80*

1L5(-703C/Ti(ct) + ILS R( G-SOA)(ga) 0,0*(<0,25) 1,46 0,73 0,72

¡L5(- 703C/T) (ct) + IL5R(G-80A)(aa) 0,0 0,63 13,31* 0,74

Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001

Разные клинические проявления БА ассоциированы с разными генотипами исследованных генов (табл. 11). Такие клинические проявления БА как раннее развитие и тяжёлое течение заболевания ассоциированы с одними и теми же генотипами: IL4R(I50V)(\\) являлся фактором устойчивости к БА и является благоприятным прогностическим фактором раннего развития заболевания. IL4R (Q551R){qr) - является неблагоприятным прогностическим фактором как для раннего развития БА, так и для её тяжёлого течения. Эти результаты согласуются с данными, опубликованными для томской [Фрейдин, 2001] и бразильской выборок [de Faria, 2008].

Наиболее заметными являются ген-ген взаимодействия в развитии поливалентной аллергии, ассоциированной с генотипами, в состав которых входит антагонист рецептора интерлейкина I (ILÍRA), причём гомозигота ILIRÂ(JI) является прогностическим признаком наличия поливалентной аллергии (величины OR возрастают при взаимодействии до 16,53**), тогда как у лиц с гомозиготным генотипом 1LIRA(33) такого проявления нет.

Таким образом, гены интерлейкинов и их рецепторов, задействованные в патогенетическом механизме БА, играют более важную роль в проявлении некоторых клинических особенностей течения заболевания, таких как тяжесть течения, раннее развитие заболевания, наличие выраженного воспаления, нежели в предрасположенности к БА.

Роль ацетилирования в развитии гепатотоксинностн противотуберкулёзной терапии

Туберкулёз (ТБ) остаётся одним из наиболее широко распространённых инфекционных заболеваний: ежегодно в мире диагностируется 8,9 миллионов новых случаев заболевания и 1,7 миллионов человек умирают от него [Montoro, Rodriguez, 2007].

Лечение ТБ длительное и требует жёстких схем лечения, так как в последнее время возросло количество штаммов, устойчивых к отдельным противотуберкулёзным препаратам [Dixie et al., 1998; Норкина и др., 2003; Мишин и др., 2004; Martin, Portaels, 2007]. Кроме того, ТБ часто сочетается с хроническими вирусными гепатитами и другими хроническими, часто бессимптомно протекающими, заболеваниями [Шилова, 2001; Убайдуллаев и др., 2004; Харламова, 2005; Rajnoveanu et al., 2005; Туберкулёз. Особенности течения, возможности фармакотерапии, 2009]. Как следствие, медикаментозное лечение туберкулёза часто приводит к развитию побочных реакций, наиболее частыми из

которых являются гепатотоксические. Их частота достигает 47% [Huang, 2007]. Существенную роль в развитии токсических реакций играет метаболизм противотуберкулезных препаратов, в частности, изониазида. Метаболизм изониазида протекает с участием NAT2, амидазы и CYP2E1. NAT2 превращает изониазид в ацетилизониазид. Под действием амидазы возможен гидролиз изониазида и ацегилизониазида до гидразина и анетилгидразина соответственно. Гидразин, рассматриваемый как главный токсический продукт метаболизма изониазида, может ацетилироваться до ацетилгидразина, а затем до диацетилгидразина под действием NAT2. Также возможен обратный путь гидролиза ацетилгидразина до гидразина под действием амидазы. Таким образом, количество гидразина и ацетилгидразина, образовавшегося в процессе метаболизма изониазида, зависит от соотношения активностей NAT2 и амидазы. Генетический полиморфизм NAT2 проявляется в различной скорости ацетилирования изониазида: у медленных ацетиляторов путь гидролиза изониазида амидазой выражен в большей степени по сравнению с быстрыми ацетиляторами [Sarma, et al., 1986], соответственно, большая часть изониазида метаболизируется по пути токсификацни.

В данной работе исследована ассоциация полиморфных вариантов NAT2 и фармакокинетически выявляемых фенотипов быстрых и медленных ацетиляторов изониазида с лабораторными показателями гепатотоксичности: уровнями активности в сыворотке крови аланинамшютрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (ACT), у-глутаминтранспептидазы (ГГТП) и щелочной фосфатазы (ЩФ) [Bleibel, 2007] в условиях ежедневною и интермиттируюшего приёма противотуберкулёзных препаратов (ПТП).

По результатам оценок фармакокинетики изониазида у больных ТБ выявлено 66,7% медленных и 33,3% быстрых ацетиляторов, что совпадает с публикуемыми данными по европеоидам России [Лильин и др., 1984; Макарова, 2000; Голденкова-Павлова, 2006; García-Martín, 2008].

Фенотип медленного ацетилятора в нашем исследовании, так же как и в других работах [Huang et al., 2002; Hiratsuka, et al., 2002], был ассоциирован с риском гепатотоксичности: уже через месяц после начала лечения у медленных ацетиляторов значительно повышался уровень печёночных трансаминаз в сыворотке крови (рис. 3).

Медленные ацетиляторы

Быстрые ацетиляторы

0 12 3 4 Длительность лечения (месяцы)

Рисунок 3. Активность аланинаминотрансферазы в сыворотке крови у больных туберкулёзом лёгких в течение терапии (подгруппа 1А).

Генотипы МАТ2, соответствующие фенотипу медленного ацетилятора, были ассоциированы с увеличением лабораторных показателей гепатотоксичности (табл. 12). Из биохимических показателей более информативной была активность АЛТ. У медленных ацетиляторов раньше повышался уровень АЛТ крови и держался дольше, несмотря на лечебные мероприятия (табл. 12).

Наряду со статусом ацетилирования имело значение наличие сопутствующих заболеваний: повышение активности печёночных трансаминаз в сыворотке крови чаще наблюдалось у больных ТБ с положительными результатами тестов на наличие в сыворотке крови антител к антигенам вирусов гепатитов В и С (группы 1А и ПА) и латентными сопутствующими заболеваниями желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) (группы 1В и ПВ). Большое значение имел также и режим терапии: при ежедневном приёме препаратов повышение уровня печёночных трансаминаз в сыворотке крови пациентов было более выраженным. Но во всех группах у медленных ацетиляторов гепатотоксические реакции возникали чаще, чем у быстрых ацетиляторов. Этот факт может быть важным для целей персонализованной медицины.

Таблица 12

Различия биохимических показателей при поступлении и в динамике лечения у больных в зависимости от генотипа ацетилирования

Показатель Сроки Сравнений (мес) Уровни значимости (р)

Медленные ацетил яторы Быстрые ацетиляторы

Группы IA IB 1С IA IB 1С

АЛТ Через 1м-ц 0,036 0,807 0,106 0,173 0,605 0,753

Через 2 м-ца 0,012 0,221 0,249 0,272 0,896 0,080

Через 3 м-ца 0,068 0,507 0,068 0,091 0,605 0,273

Через 4 м-ца 0,138 0,328 0,043 0,386 0,590 0,499

ACT Через 1 м-ц 0,093 0,859 0,225 0,552 0,013 1,0

Через 2 м-ца 0,063 0,777 0,176 1,0 0,256 0,715

Через 3 м-ца 0,237 0,972 0,285 0,117 0,670 1,0

Через 4 м-ца 0,08 0,534 0,361 0,173 0,470 0,178

ЩФ Через 1 м-ц 0,138 0,248 0,201 0,041 0,678 0,225

Через 2 м-ца 0,074 0,858 0,465 0,086 0,477 0,273

Через 3 м-ца 0,208 0,678 0,465 0,406 0,646 0,285

Через 4 м-ца 1,0 0,735 1,0 0,866 0,859 -

Примечание: р - уровень значимости различий активности ферментов с их значениями при поступлении по критерию Вилкоксона

Ранее предпринимались попытки вычисления уравнений зависимости дозировок изониазида от генотипов NAT2 [Huang, et al., 2002; Kinzig-Schippers et al., 2005]. Однако, выполненные на немногочисленных группах добровольцев (3 -4 человека на генотип) и с использованием в 3 - 4 раза более низких, чем в российской терапевтической практике доз, эти работы не могли ответить на вопрос о соответствии генотипов NAT2 фенотипам ацетилирования.

Сопоставление генотипа NAT2 и фенотипа ацетилирования

С описанием однонуклеотидиых замен С481Т и С282Т в гене NAT2 (Blum М. et al., 1991) возникла возможность соотнесения полиморфных вариантов гена с быстрым или медленным фенотипом ацетилирования. Продолжающееся на протяжении 20 лет выявление все новых полиморфных вариантов гена, описание их в разных этносах и популяциях, с одной стороны, и всё новых факторов.

оказывающих регуляториое влияние на активность фермента, сохраняет актуальность таких исследований до настоящего времени. Однако такие работы, выполненные на достаточно больших выборках (более 100 чел), являются немногочисленными [Голденкова-Павлова и др., 2006], во многом вследствие трудоёмкости фармакокинетических оценок.

Фенотип ацетилирования может варьировать в зависимости от многих факторов. Ацетилирующая способность снижается у больных СПИДом [Lee, et al., 1993; O'Neil et al., 1997; Whyatt, et al., 2001], то же наблюдается и при респираторных вирусных инфекциях [Иванова и др., 1997], под действием ряда антиоксидантов [Lu, 2002, 2005; Su, 2003; Kukongviriyapan, 2006] и лекарств [Walter, 1996; Chung, 2000; Makarova, 2008]. Однако описание этих факторов ещё далеко от завершения, и пока мы имеем уникальные примеры того, что в некоторых популяциях несоответствие между генотипом NAT2 и фенотипом ацетилирования достигает 86% [Straka, 2006]. В целом, имеющиеся данные позволяют говорить о том, что исследования соответствия генотипов NAT2 быстрому или медленному фенотипу ацетилирования необходимы в конкретных популяциях.

При лекарственной терапии необходимо точное знание способности пациента метаболизировать лекарственный препарат, то есть необходимо знание фенотипа пациента. Клиническая практика нуждается в предиктивных тестах, которые дадут возможность врачу индивидуализировать терапию. Таковыми могут быть заранее выполненные генетические тесты с надежно установленными соответствиями между определенным полиморфным вариантом (мутацией) гена и его функциональным проявлением. Для большинства полиморфизмов такая связь в настоящее время не изучена.

Процедура забора крови для оценки фармакокинетических параметров у больных ТБ лёгких достаточно тяжела для пациента, так как требует неоднократного забора крови нз вены в течение 24 часов. У детей, больных БА для оценки фенотипа ацетилирования использовался метод оценки процента ацетилнрованного сульфадимезина в моче, собранной за 6 часов после приёма дозы тестового препарата сульфадимезина. Так как определение фенотипа

является во многих отношениях трудоёмкой процедурой, определение генотипов, ведущих к проявлению фенотипа медленного ацетилятора, является актуальной задачей.

Сравнивая результаты соответствия генотипа NAT2 и фенотипа у детей больных БА и больных туберкулёзом (рис. 4), можно видеть, что более щадящий метод оценки фенотипа менее точно соответствует генотипу, чем менее щадящий. Оба фенотипа: быстрых и медленных ацетиляторов встречаются у лиц со всеми 7 генотипами, хотя вариабельность скорости ацетилирования гомозиготных генотипов ниже, чем гетерозиготных.

Наиболее вариабельным (минимальный и максимальный процент ацетилирования отличался в 13,8 раз) фенотип ацетилирования был у пациентов с генотипом, сочетающим в себе гомозиготу по мутантному аллелю NAT2(C481T)(10) и гомозиготу по аллелю дикого типа NAT2(G590A)(] 1).

Генотипы, в составе которых имеется аллель дикого типа, ассоциированы в основном с фенотипом быстрого ацетилятора, а гомозиготы по мутантным аллелям - с фенотипом медленного ацетилятора. Но оценки даже трёх наиболее распространённых мутаций гена NAT2 недостаточно, чтобы безошибочно определить статус ацетилирования пациента. Тем не менее, для 5 из 8 исследованных генотипов у больных ТБ, несмотря на вариабельность внутри каждого генотипа, удалось точно выявить фенотип, что говорит о возможности использования генетических методов в предварительной оценке фенотипа больного.

Таким образом, определение генотипов, ведущих к проявлению фенотипа медленного ацетилятора, может быть предложено в качестве предварительной оценки (с целью повышения безопасности лечения) возможных нежелательных последствий лекарственной терапии препаратами, в метаболизме которых принимает участие ариламин N-ацетилтрансфераза 2, в частности гепатотоксичности при противотуберкулёзной терапии. Однако для корректировки лечения с целью повышения эффективности терапии лучше использовать фармакокинетические оценки.

Генотипы

0 12 3 4 5«? Клиренс (ml/min/kg) А

i клиренса J /

HÍIMW о 1.88 NAT2(«1CC/5«GG) * *

481CCS90GS®57SA 2,31 NAT2M81C0590GA) P.'-'t

481СТШШК756 « ♦ * 7.27 NATi(481CC.;590AA) +

тсаьжмьш 3.03 NAT2(4$1CT'5MGG) t* *

481CTI5S0GA/857GG « О 3.15 NATK48ÍCT/5Í06A) ...

481CT?5806G¡857GA 152 N AT2{48 í CT '590AA) «

481ТТ ФФ С 2,31 NAT2Í481TT 5WGG) » »*

590АА 1,16

1С 20 36 # 5« «> "0 88 »

Анимода В»ри«-ль»шсть

0» ацотндцишанш

1.Г 4.« 1.39 4.44 1,25 13,8

% Ацетвлированиогв сульфадимезина в моче Б

Рисунок 4. Соответствие генотипов NAT2 фенотипам ацетилирования.

А - клиренс изониазида у больных туберкулёзом; Б - % ацетилированного сульфадимезина в моче больных бронхиальной астмой

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящем исследовании проведено изучение ассоциации полиморфизма генов ФБК (CYP1A1, NAT2, GSTM1. GSTT1 и GSTP1) с БА и АД у детей, некоторых генов интерлейкинов с бронхиальной астмой, NAT2 с частотой побочных реакций на лечение у больных туберкулёзом, а также сопоставление фенотипа и генотипа ацетилирования у больных БА и туберкулёзом. В основе данного исследования лежит гипотеза о том, что фенотип или генотип ФБК может быть фактором предрасположенности или устойчивости к экологически обусловленным, многофакторным заболеваниям и/или побочным эффектам лечения в силу субстратной специфичности данных ферментов. Ранее нами было проведено фенотипирование русских популяций Западной Сибири (Алтай, Новосибирская область) и Республики Саха (Якутия), которое показало, что европеоиды Сибири по распределению фенотипов ацетилирования не отличаются от других европеоидных популяций [Макарова, 2000; Вавилин, 2001]. Это дало нам возможность сравнивать собственные результаты с данными работ зарубежных и отечественных исследователей, выполненных на других популяциях европеоидов.

Полиморфные варианты генов ФБК, экспрессия которых, в отличие от других классов генов, непосредственно регулируется средовыми факторами химической природы, являются наиболее подходящими генетическими маркёрами для многофакторных заболеваний, этиология которых тесно связана с окружающей средой [Ляхович, Цырлов, 1981; Баранов и др., 2000; Патрушев, 2000; Nebert et al, 2003].

Начиная с 1990-х годов, проводились обширные исследования генетических факторов предрасположенности к этим заболеваниям. Существенная часть исследований была посвящена ассоциации полиморфизмов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков (ФБК): CYP1A1, CYP2D6, NAT2, GSTM1, GSTT1, GSTP1 с многофакторными заболеваниями, в первую очередь с онкозаболеваниями.

Опыт десятилетних исследований связи полиморфизма генов ФБК с предрасположенностью к онкологическим заболеваниям показал, что имеет место противоречивость результатов разных авторов. Низкая воспроизводимость этих исследований обусловлена не только сложностью межгенных взаимодействий [Пузырёв, Степанов, 1997: Templeton et al., 2000], генетической гетерогенностью [Johnson et al., 2002; Laitinen, 2007] и выраженным клиническим полиморфизмом

данного класса болезнен [Бочков, 1987; Barnes et al., 1999; Kabesch et al., 2007], но и эволюциошш сложившимися взаимодействиями генотип-среда, специфичными для каждой человеческой популяции [Terwilliger, Ott, 1993; Altshuler et al., 1998].

Гарт [Garte, 2001], анализируя итоги этого периода, сделал вывод о том, что противоречивость результатов во многом обусловлена ошибочной формулировкой задачи исследований: поиском вариантов генов, являющихся фактором риска заболевания во всей популяции, без учета половых, возрастных различий, без учёта влияния места проживания, особенностей диеты и химического окружения. Правильной, на его взгляд, задачей должен быть поиск подгрупп, в которых данные генетические варианты обусловливают высокий риск заболевания. В работах с такой постановкой задачи были получены высокие величины относительного риска: отношение шансов (OR) в пределах 3,4-14,2.

Наши результаты также свидетельствуют о продуктивности такого подхода. Например, при изучении С481Т и G590A полиморфизма гена NAT2 установлено, что генотип, гомозиготный по обоим исследованным локусам, является маркёром устойчивости к АД и БА. Подгруппой, в которой наиболее сильно проявляется защитный эффект- данного генотипа, являются НК девочки: OR = 0,08, р < 0,05 в исследовании АД (в то время как для всей группы больных - 0,43, р <0,05); а в исследовании БА для этой подгруппы OR = 0,09, р < 0,05 (0,54 для всех). Нуль-генотип GSTT1 является маркером предрасположенности к БА у детей: для всей группы OR = 2,69, а для НК - 11,0; р < 0,01.

Для оценки ассоциации полиморфизмов генов ФБК исследования были организованы как по типу «случай - контроль», так и с использованием семейного анализа. Исследования «случай - контроль» позволяют учесть как генетическую составляющую заболевания, так и влияние средовых факторов [Флетчер и др., 1998]. Кроме того существует хорошо разработанная статистика для обработки результатов этих исследований, одобренная ВОЗ. В случае семейных выборок выше возможность выявить полиморфный вариант изучаемого гена или района генома, который переносится в семьях из поколения в поколение вместе с заболеванием [Schaid, Rowland, 1998; Silverman, Palmer, 2000]. Однако для выявления влияния условий окружающей среды на роль генетического признака в заболевании, семейный анализ менее чувствителен [Khoury, James, 1993; Silverman, Palmer, 2000]. Наши результаты в изучении ассоциации полиморфизмов генов ФБК с бронхиальной астмой подтвердили это положение. В случае организации исследования «случай - контроль» были выявлены ассоциации

полиморфизма гена NAT2, тогда как в семейном анализе подобных ассоциаций выявлено не было. Обратная ситуация наблюдалась для GSTM1.

Проведённые в 90-х годах исследования как онкологических, так и ряда других заболеваний, показали, что комбинации генотипов часто обусловливают более высокий риск, чем индивидуальный ген, т. е. имеются межгенные взаимодействия. Полученные нами результаты сопоставления отношения шансов также показывают наличие таких взаимодействий и для атопических заболеваний. Так, индивидуальные генотипы GSTM 1*0/0, GSTT 1*0/0 и GSTPlVall05/Vall()5 ассоциированы с предрасположенностью к АД у детей с OR = 1,02; 2,67 и 3,22 соответственно, а их комбинация - с величиной OR = 9,43, р < 0,05. Анализ межгенных взаимодействий, проведённый методом MDR, не выявил сильных взаимодействий для исследованных генов. Необходимо отметить, что методы сопоставления отношения шансов и MDR взаимно дополняют друг друга: первый способен выявить взаимодействия между отдельными аллельными вариантами разных генов, но при увеличении числа признаков, взятых в рассмотрение, статистическая достоверность оценок снижается за счёт уменьшения размера групп, участвующих в сравнениях. Метод MDR при увеличении числа признаков лучше распознаёт генотипы больных и здоровых детей, но лишь для гена в целом, а не для отдельных его генотипов (гомозиготных и гетерозиготных вариантов). Метод MDR способен определить взаимодействия генов, обусловленных, например, общностью регуляции, как это произошло в случае взаимодействия генов IL5 (локус С-703Т) и IL4 (локус тандемных повторов).

Также было показано, что воздействие химического фактора, в метаболизме которого участвуют продукты исследуемых генов, имеет значение в проявлении эффекта гена (взаимодействие ген-среда). Наиболее заметен этот эффект в области низких доз химического фактора. Многие примеры этого были получены для курения - универсального фактора риска всех распространенных заболеваний. При исследовании влияния пассивного курения нами установлено, что оно повышает риск возникновения АД, ассоциированный с GSTPI(ll) (у НК детей отношение шансов составляет — 0,81 а у детей - ПК- 3,95***) и снижает риск развития АД, ассоциированный с NAT2(G590A)(00) и GSTT1(00) (у НК отношение шансов составляет 9,00* и >9,06*, соответственно, а для ПК - 2,94 и 3,40** соответственно). В условиях курения снижался риск БА, ассоциированный с GSTT1(00) (OR >8,18* у НК и 1,91 - у ПК). Почти все ФБК принимают участие в метаболизме эндогенных субстратов, и снижение рисковой значимости полиморфных вариантов этих генов под воздействием курения обусловлено,

вероятно, сложностью этого фактора. В табачном дыме определено около 4 тыс. компонентов, и вклад гена, продукт которого метаболизирует лишь немногие из них, снижается. Подобные закономерности показаны ранее для онкологических заболеваний [Nyberg et al., 1998; Brockmoller et al., 1998].

АД является первым по срокам возникновения АЗ и считается одним из факторов возникновения БА у детей, поэтому и факторы риска этих заболеваний могут быть общими. Результаты наших исследований показывают, что в ряду контроль - АД - БА увеличивается доля детей с генотипом NAT2(C481T)(ll) и, соответственно, растёт ассоциация этих генотипов с заболеваниями: OR = 2,34* -с АД и 4,01*** - с БА. Но значимость генотипов GSTM](()()), GSTTl(OO), GSTPl(II), GSTPl(lO) и NAT2 (G59QA)(00) выше у лиц с АД, чем с БА. Генотипы с гомозиготными делениями генов GSTM1 и GSTT1 предрасполагают к раннему началу БА. Можно предположить, что ферменты этих генов имеют значение для становления системы биотрансформации в раннем онтогенезе и потому их роль выше в предрасположенности к АД, как первому по срокам возникновения АЗ.

Представляется уместным обратить внимание на то, что экогенетические молекулярно-эпидемиологические исследования предоставляют богатый материал для уточнения механизмов патогенеза заболеваний. Например, нами показана корреляция числа нулевых аллелей гена GSTMI с выраженностью количественных показателей атопии у больных Б А [Макарова и др., 2004], а в работе [Brasch-Andersen et al., 2004] - увеличение показателей ассоциации (OR) генов GSTMI и GSTTI с атопической БА с увеличением числа нулевых аллелей этих генов. Эти данные указывают на влияние ФБК на функционирование иммунной системы. Каким образом реализуется это влияние, пока неизвестно. Исследование его может быть важным в развитии представлений о патогенезе АЗ и перспективно для поиска новых терапевтических мишеней. Мы показали, что полиморфизм генов, связанных с поддержанием уровня иммуноглобулина Е, имеет большее значение для формирования клинических проявлений БА, чем в предрасположенности к ней.

Сопоставляя данные по фенотипу и генотипу ацетилирования, мы показали, что определение двух (для БА) и даже трёх (для ТБ) наиболее распространённых мутаций NAT2 не достаточно для надёжного предсказания фенотипа ацетилирования. Знание же статуса ацетилирования несомненно важно для прогнозирования эффектов лечения, выбора оптимальной схемы лечения. Из полученных результатов следует, что генетические тесты могут быть

использованы в предварительной оценке того, какой фенотип ацетилирования имеют индивиды, имеющие в своём генотипе ту или иную мутацию.

Таким образом, представленный материал и его анализ позволяет сделать следующие выводы.

ВЫВОДЫ

1. Показано, что предрасположенность к атопическим заболеваниям обусловливают полиморфные варианты генов ФБК: аллель CYPJAIVal является фактором риска бронхиальной астмы; генотип 481СС NAT2, гомозигота по нулевому аллелю GSTT1 являются факторами риска развития как бронхиальной астмы, так и атонического дерматита у детей. Замена G590A в гене NAT2 (в гомозиготном состоянии), генотип 313GG гена GSTP1 являются факторами риска атопического дерматита.

2. Выявлено, что ассоциация гомозигы по нулевому аллелю гена GSTMI с бронхиальной астмой, не имевшая статистической достоверности в исследовании «случай - контроль», в семейном анализе возрастает в ряду: дети от здоровых родителей, дет» с односторонней наследственной отягощённостыо, дети с двусторонней наследственной отягощённостыо.

3. Установлено наличие ген-генных взаимодействий для следующих генотипов: аддитивный эффект в усилении риска бронхиальной астмы и атопического дерматита для сочетания гомозиготных делеций генов GSTMI и GSTT1; синергический эффект сочетания гомозиготной делеции гена GSTTI и гомозиготы по аллелю дикого типа GSTP1 и, напротив, аддитившлй защитный эффект для гетерозиготных генотипов по локусам С481Т и G590A гена NAT2.

- девочки младше 11 лет, подвергающиеся воздействию курения в семьях. При атопическом дерматите для делеции гена GSTT1 - мальчики; для GSTP1(313GG)

- девочки, подвергающиеся воздейс твию фактора курения.

5. Показано, что гены ФБК играют роль в формировании следующих клинических проявлений атопических заболеваний: делеция гена GSTMI предрасполагает к более тяжёлому течению атопического дерматита,

гиперэозинофилии, раннему развитию БА, особенно у детей, подвергавшихся курению в семьях. Деления гена GSTTI - к подростковой форме атопического дерматита и более тяжелому течению как АД, так и БА. Гомозигота по мутантному аллелю NAT2(C481T)(TT) - к гиперэозинофилии при БА, особенно у не подвергающихся воздействию курения в семьях.

6. Показано, что полиморфные варианты генов IL ¡RA и IL4R являются генетическими факторами предрасположенности или устойчивости к бронхиальной астме, показатели ассоциации которых с заболеванием по величине сопоставимы с таковыми для полиморфных вариантов генов ФБК. Гетерозиготный генотип IL IRA, несущий аллели с 2 и 4 тандемными повторами (1L1RA(VNTR)(13)) является фактором риска заболевания. Гомозиготный генотип (Ile/Ile) по замене IleSOVal гена IL4R является фактором устойчивости к бронхиальной астме.

7. Показано, что полиморфные варианты генов ILIRA, IL4, IL4R, IL5 и IL5R участвуют в формировании клинических характеристик бронхиальной астмы, и наблюдается аддитивный эффект сочетаний этих генов. Наибольший эффект полиморфизм этих генов оказывает на формирование поливалентной аллергии.

8. Выявлено, что медленные ацетиляторы, идентифицированные как на основании оценок генетического полиморфизма NAT2, так и оценок фармакокинетики изониазида, более подвержены гепатотоксичности в сравнении с быстрым ацетиляторами, особенно при ежедневном приеме препаратов, что проявляется более выраженным увеличением активности трансаминаз в сравнении с интермитгирующим приемом.

9. Показано, что высокая точность соответствия постулированного по генетическим тестам и фармакокинетически установленного фенотипа ацетшшроваиия имеет место для гомозигот по мутантиым аллелям или аллелям дикого типа гена NAT2. Гетерозиготные генотипы характеризуются высокой вариабельностью активности и могут быть как медленными, так и быстрыми ацетиляторами.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи в журналах из перечня ВАК

1. Макарова С.И.. Вавилин В.А., Ляховнч В.В., Гавалов С.М. Аллель NAT2*5 -

фактор устойчивости к заболеванию бронхиальной астмой у детей // Бюлл. экспер. биол. мед. - 2000. - Том. 129. - № 6. - С. 677-679.

2. Гавалов С.М., Рябова O.A., Вавилин В.А., Ляховнч В.В., Макарова С.И.

Ассоциация полиморфизма генов ферментов биотрансформации и детоксикации ксенобиотиков с особенностями бронхиальной астмы у детей // Аллергология. - 2000. - № 3. - С. 14-21.

3. Ляховнч В.В., Вавилин В.А., Макарова С.И.. Гавалов С.М., Рябова O.A.,

Часовникова О.Б, Гуткина Н.И. Роль ферментов биотрансформации ксенобиотиков в предрасположенности к бронхиальной астме и формировании особенностей ее клинического фенотипа // Вестник РАМН. -2000.-№ 12.-С. 36-41.

4. Ляхович В.В., Гавалов С.М., Вавилин В.А., Рябова O.A., Макарова С.И..

Гуткина Н.И., Часовникова О.Б., Суслякова О.В., Лиханов A.B. Полиморфизм генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков и особенности бронхиальной астмы у детей // Пульмонология. - 2002. - №2. - С. 31 -38.

5. Макарова С.И.. Вавилин В.А., Часовникова О.Б., Гавалов С.М, Рябова O.A.,.

Ляхович В.В. Влияние возраста и пола на предрасположенность к бронхиальной астме детей с различными генотипами GSTM1. GSTT1 и NAT2 // Пульмонология. - 2002. - №5. - С. 46-52.

6. Вавилин В.А., Макарова С.И.. Ляхович В.В., Гавалов С.М. Ассоциация

полиморфных генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с предрасположенностью к бронхиальной астме у детей с наследственной отягощенностью и без таковой // Генетика. - 2002. - Т. 38, № 4. - С. 539-545.

7. Макарова С.И. Вавилин В.А., Ляхович, В.В., Гавалов С.М.

Предрасположенность к бронхиальной астме детей с различными генотипами NAT2 изменяется с возрастом и зависит от пола // Бюлл. Экспер. Биол. Мед. -2002. - Прил. 1. - С. 68-70.

8. Вавилин В.А., Макарова С.И.. Ляхович В.В., Гавалов С.М. Оценка связи

генетического полиморфизма ферментов биотрансформации ксенобиотиков с некоторыми проявлениями сенсибилизации у детей с бронхиальной астмой // Бюлл. Экспер. Биол. Мед. - 2002. — Приложение № 1. - С. 74-77.

9. Сафронова О.Г., Вавилин В.А., Ляпунова A.A., Макарова С.И., Ляхович В.В.,

Казначеева Л.Ф., Мананкин H.A., Батычко O.A., Гавалов С.М. Изучение связи полиморфизма глутатион S-трансферазы PI с бронхиальной астмой и атопическнм дерматитом // Бюлл. Экспер. Биол. Мед. - 2003. -Т. 136, № 7. -С. 84-87.

10. Никишина М.В., Макарова С.И.. Акишев А.Г., Вавилин В. А., Дегтярев С.Х.,

Ляхович В.В. Применение эндонуклеаз рестрикции Bst2UI и Асс651 для обнаружения Крп1-полиморфизма гена NAT2 Н Биомед. Хим. - 2004. - Т. 50, №3. - С. 269-272.

11.Никишина М.В., Макарова С.И.. Акишев А.Г., Вавилин В. А., Дегтярев С.Х., Ляхович В.В. Рестрикционный анализ гена N-ацетилтрансферазы (NAT2) у

европеоидов Западной Сибири // Генетика. - 2004. - Т. 40, № 11. - С. 15571561.

12.Макарова С.И.. Сафронова О.Г., Вавилин В. А., Батычко О.А., Гавалов С.М., Ляхович В.В. Показатели атопин у детей с бронхиальной астмой возрастают с накоплением нуль-аллелей глутатион S- трансферазы Ml // Бюл. экспер. биол. мед. - 2004. - Т. 138, № 11. - С. 520-522.

13.Ляхович В.В., Вавилин В.А., Гришанова А.Ю., Макарова С.И.. Коваленко С.П. Фармакогенетика и современная медицина // Вестник РАМН. - 2004. - №. 10. - С. 40-45.

И.Макарова С.И.. Додунова Е.М., Иванова Г.Г., Вавилин В.А., Казначеева Л.Ф., Ляхович В.В. Полиморфизм гена ариламин N-ацетилтрансферазы 2 ассоциирован с риском развития атонического дерматита // Бюл. экспер. биол. мед. - 2005. - Т. 139, № 6. - С. 628-631.

15.Ляхович В.В., Вавилин В.А, Макарова С.И., Гришанова АЛО. Экогенетический аспект полифакторных заболеваний // Информационный вестник ВОГиС. -2006.-Т. 10, Ns 3. -С.514-519.

16.Makarova S.I. Human N-acetyltransferases and drug-induced hepatotoxicity // Curr Drug Metab. - 2008. - Vol. 9, N 6. - P. 538-545.

17.Кудряшов А.В., Макарова С.И.. Никишина М.В., Колпакова Г.А., Мутайхан Ж., Вавилин В.А. Полиморфизм ариламин N-ацетилтрансферазы 2 у больных туберкулезом легких г. Новосибирска // Омский научный вестник. - 2009. -Приложение № 1 к выпуску 84. - С. 57-61.

Статьи в журналах, сборниках, тезисы

18.Ляхович В.В., Гавалов С.М., Вавилин В.А., Макарова С.И.. Гуткина Н.И., Часовникова О.Б., Рябова О.А., Лиханов А.В. Полиморфизм генов ферментов метаболизма ксенобиотиков у детей с бронхиальной астмой (БА) // Intern. J. Immunorehabilitation. - 1997.-N. 7.-P. 138.

19. Вавилин В.А., Макарова С.И., Сафронова О.Г., Ляпунова А.А., Ляхович В.В.,

Батычко О.А., Казначеева Л.Ф., Гавалов С.М. Полиморфизм ферментов биотрансформации ксенобиотиков и предрасположенность к атоническим заболеваниям у детей // Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике. - Новосибирск. - 2003. - С.98- 106.

2().Макарова С.И., Вавилин В.А., Кудряшов А.В. Соответствие генотипа и фенотипа ацетилирования // Клиническая фармакология и терапия. - 2009. -N 6 (доп) Материалы конференции «Достижения клинической фармакологии в России» (Москва). - С. 37-39.

21 .Макарова С.И.. Сафронова О.Г., Вавилин В.А., Филипенко М.Л., Фрейдин М.Б. Роль полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков, генов интерлейкинов и гена антагониста рецептора интерлейкина 1 в предрасположенности к бронхиальной астме у детей // Сб. Инновационные и молекулярно-генетические исследования живых систем. Труды Всероссийской конференции, посвященной 10-летию кафедры генетики БГПУ им. М. Акмуллы, приуроченной к ежегодным Вавиловским чтениям. -Уфа.-2009.- С.57-66.

22. Lyakhovich V.V., Gavalov S.M., Vavilin V.A., Zelenskaya V.V., Gutkina N.I.,

Mitrofanov D.V., Makarova S.I.. Chasovnikova O.B., CYPIAI Ile/Val, GSTM1 "+/-" - polymorphism and sulphadimidine acetylation in children with atopic bronchial asthma // 6th European 1SSX Meeting, Gothenburg, Sweden, June 30 -July 3, 1997.1SSX Proceeding, 1997.-Vol. 11.-P. 96.

23.Lyak'hovich V.V, Gavalov s".M„ Vavilin V.A., Makarova S.I.. Gutkina N.I., Chasovnikova O.B., Ryabova O.A., Likhanov A.V. The significance of polymorphic xenobiotic metabolizing enzymes (XME) in susceptibility to asthma and its Clinical phenotype. Abstracts of 12th International Symposium on Microsomes and Drug Oxidations. Montpellier, 1998, abstract 191.

24.Gavalov S., Lyakhovich V., Vavilin V., Ryabova O., Gutkina N.. Makarova S.. Chasovnikova O., Likhanov A. Association of polymorphic xenobiotic metabolizing enzymes (XME) with susceptibility to asthma and its Clinical phenotype. Abstracts from ERS Annual Congress. Madrid, Spain. Oktober 9-13, 1999. // Eur. Resp. J. - 1999. - Vol. 14, Suppl. 30. - P. 174S.

25.Lyakhovich V., Vavilin V., Makarova S.. Chasovnikova O., Gutkina N., Gavalov S., Ryabova O. Association of CYPIAI, GSTM1, GSTT1 and NAT2 with susceptibility to bronchial asthma in children // 13th international Symposium on Microsomes and Drug Oxidations, Abstracts. Stresa. -2000. - P.l 19.

26.Makarova S.I.. Vavilin V.A., Chasovnikova O.B., Lyakhovich V.V. Influence of sex and age on association of GSTM1, GSTT1 and NAT2 with susceptibility to bronchial asthma in children // Drug Metabolism Reviews. Abstracts from the DMWflSSX 2000 Meeting, 2000. - Vol.32, Supppl.l. - P. 78.

27.Кожанова Л.А., Макарова С.И.. Фёдорова Г.А., Полянская Е.М Применение микроколоночной ВЭЖХ в медицине // Internat. Conference «Basic Science for Biotechnology and Medicine», Novosibirsk, September 3-7. - 2006. - P. 46.

28.Makarova S.I.. Vavilin V.A. Association between the N-acetylalion genetic polymorphism and atopic dermatitis and asthma in children // Abstracts of 4th international Workshop on the Arylamine N-Acetyltransferases, 14-16 September. -2007, Alexandropolis, Greece, Abstract 29.

29. Makarova S.I.. Vavilin V.A., Mutaikhan J., Polyanskaya E.M., Nikishina M.V.,

Kojanova L.A., Kolpakova 'Г.А., Krasnov V.A., Lyakhovich V.V. Hepatotoxicity of antituberculosis therapy in patients with chronical viral hepatitis correlated with acetylation status // Abstracts of 4th International Workshop on the Arylamine N-Acetyltransferases, 14-16 September 2007, Alexandropolis, Greece, Abstract 30.

30.Vavilin V.A., Makarova S.I., Kolpakova T. A., Kozhanova L. A., Krasnov V. A., Lyakhovich V. V. Informativity of genetic and pharmacokinetic testing in prediction of antituberculosis drugs induced hepatotoxicity Abstracts Inemational Workshop "Research on Tuberculosis. State of Art in Russia", Moscow, 18-19 October 2007. - P. 42.

31.Vavilin V.A. Makarova S.I.. Kolpakova T.A., Kudryashov A.V., Mutaikhan J., Nikishina M.V., Kojanova L.A., Polyanskaya L.V., Krasnov V.A., Lyakhovich V.V. The prognostic value of genetic and phenotypic markers of drug metabolism and host and exposure factors for antituberculous drug induced hepatotoxicity // Ehrlich II - 2nd World Conference on Magic Bullets, Nurnberg, October 2-5, 2008

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АБА — атопическая бронхиальная астма GSTM1 -глутатион S-трансфераза iM 1

АД - атопический дерматит GSTT1 - глутатион S-трансфераза Т1

A3 - атонические заболевания GSTP1 - глутатион S-трансфераза Р1

ACT - аспартатаминотрансфераза DILI - лекарственно-индуцированные

AJIT - аланинаминотрансфераза повреждения печени

БА - бронхиальная астма IL1RN = IL1RA - антагонист рецептора

ГГТП - у-глутамннтранспептидаза интерлейкина 1 бета

НК - некурящие (не подвергавшиеся 1L4 - интерлейкин 4

действию курения в семьях) 1L5 - интерлейкин 5

ПК - пассивные курильщики IL4R - рецептор к интерлейкину 4

ПТП - противотуберкулёзные Ке1 - константа элиминации

препараты NAT2 - ариламин N ацетилтрансфераза 2

ТБ - туберкулёз лёгких OR - отношение шансов

ФБК - ферменты бнотрансформации 11/2 — время полувыведения

ксенобиотиков

ЩФ - щелочная фосфатаза

С1 - клиренс

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Макарова, Светлана Ивановна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Заболеваемость многофакторными болезнями и окружающая среда

1.1.1 Характеристика заболеваемости в развитых странах мира на современном этапе

1.1.2 Характеристика окружающей среды

1.2 Влияние ксенобиотиков на организм

1.3 Система биотрансформации ксенобиотиков как механизм адаптации к воздействию токсических веществ

1.3.1 Характеристика и основные свойства цитохромов Р

1.3.2 Характеристика и основные свойства суперсемейства глутатион 8- трансфераз

1.3.3 Характеристика и основные свойства ариламин N -ацетилтрансфераз

1.4 Полиморфизм генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков и предрасположенность к заболеваниям

1.4.1 Возможные механизмы участия ферментов биотрансформации ксенобиотиков в патогенезе атопических заболеваний

1.4.2 Ассоциация генотипов и фенотипов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с атопическими заболеваниями

1.4.3 Полиморфизм ФБК и нежелательные эффекты лекарственной терапии

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в предрасположенности к атопическим заболеваниям и гепатотоксичности противотуберкулезной терапии"

Актуальность проблемы. Последние десятилетия характеризуются увеличением заболеваемости сердечно-сосудистыми, онкологическими, атопическими болезнями. Эти заболевания называют также экологически обусловленными, так как для них наблюдается положительная корреляция с увеличением химической нагрузки на среду обитания человека в связи с развитием промышленных технологий, особенно в крупных городах [Burr M.L., 1987, 2003; Авдеенко Н.В. и др., 1990; Балаболкин ИМ., 1994; Шамов Б .А. и др., 1997; Brunekreef В. et al., 1997; Ciccone G. et al., 1998; Скучалина Л.Н. и др., 2001; Gavett S.H., Koren H.S., 2001; Соломон Д.М., 2003; Stipic-Markovic А., 2003; Schäfer T., 2006; Lovasi G.S.et al., 2008; Hasnain S.M. et al., 2009], По своей генетической природе все эти заболевания являются полигенными, или многофакторными (полифакторными), с аддитивно-полигенным наследованием с пороговым эффектом или без такового [Болезни полигенные: общие представления, 2009].

Проблема изучения генетических механизмов предрасположенности к болезням, наследование которых не подчиняется менделевским правилам, остается одной из наименее разработанных в генетике человека. Важность этой проблемы определяется огромным значением группы многофакторных заболеваний для современной медицины. Она составляет приблизительно 94% от всех болезней человека, в развитии которых наследственные факторы играют ту или иную роль [Патрушев Л.И., 2000; Аксель Е.М., Давыдов М.И., 2002]. Предполагается, что лишь раскрытие генетических механизмов предрасположенности к развитию этих болезней может решить такие кардинальные проблемы современной клинической медицины как классификация форм болезней и их нозологическая принадлежность, высоко индивидуализированная терапия заболеваний, научно обоснованная профилактика и т. д. [Киселёв A.B. др., 2003; Ижевская B.JL, Иванов В.И., 2006; Martin A., Portaels Р., 2007].

Группа многофакторных заболеваний характеризуется, как теперь уже установлено, важными характерными отличиями от менделирующих наследственных болезней. Среди них можно отметить следующие: а) высокая частота распространения в общей популяции независимо от географических, этнических и культурных факторов, хотя в отдельных случаях эти факторы могут обусловить незначительные различия между отдельными популяциями; б) значительная вариабельность возраста проявления основных клинических симптомов; в) более раннее начало и некоторое утяжеление клинических проявлений в нисходящих поколениях семейных случаев; г) существование четких половых различий в популяционной частоте отдельных типичных клинических форм данного заболевания; д) обычно низкий уровень конкордантности по манифестным проявлениям патологического признака в парах монозиготных близнецов [Бочков Н.П., 1984, 1997, 2003; Баранов B.C. и др., 2000; Болезни полигенные: общие представления, 2009].

Изучение многофакторных заболеваний ведётся с использованием двух основных подходов: позиционного и кандидатного картирования [Khoury M.J., James L.M., 1993; Пузырёв В.П., Степанов В.А., 1997]. В первом случае проводится анализ сцепления или ассоциации заболевания с большим набором генетических маркеров с известной хромосомной локализацией. Это позволяет картировать локусы, в которых могут находиться гены, участие в патогенезе заболеваний которых не известно и невозможно постулировать заранее. Методической вершиной позиционного картирования является «полно-геномный» поиск генов, когда проводится анализ сцепления интересующего заболевания с большим набором высокоинформативных генетических маркеров, равномерно распределённых по всему геному. Но этот подход имеет существенные недостатки, самым главным из которых является слишком общий характер, и он ничего не говорит о механизмах, лежащих в основе заболевания.

Другой подход - подход кандидатных генов, основывается на гипотезе о механизмах, посредством которых признак (ген) связан с заболеванием. В этом случае проводят анализ ассоциаций или сцепления заболевания с полиморфными вариантами генов, функция белковых продуктов которых тесно связана с развитием изучаемой патологии. Недостатком данного подхода является необходимость работать с уже известными генами, а также знание механизмов патогенеза болезни достаточное для формирования гипотезы о роли кандидатного гена [Khoury M.J., James L.M., 1993; Флетчер Р. и др., 1998; Schaid D.J., Rowland С., 1998].

Исходя из современных знаний о природе полифакторных заболеваний предполагается, что совокупность генов, отвечающих за формирование предрасположенности (подверженности) к ним, образует сеть связанных между собой элементов, эффекты взаимодействия которых на уровне белковых продуктов определяют биохимическую индивидуальность человека [Колчанов H.A. и др., 2000]. Составление генной сети для каждого многофакторного заболевания, идентификация в ней «центральных» генов и генов-модификаторов, анализ связи полиморфизмов с конкретными заболеваниями является целью данного подхода. В будущем этот подход возможно приведёт к молекулярной медицине, к предиктивной медицине, к индивидуализированному лечению каждого пациента, а в пределе, и к составлению генетического паспорта каждого индивида, на основе которого индивид будет знать вероятности заболевания тем или иным заболеванием, вероятности профессиональных вредностей и даже выбирать место жительства [Кацнельсон Б.А. и др., 1994; Баранов B.C. и др., 2000; Mancinelli L. et al., 2000; Weinshilboum R., 2003; Иващенко Т.Э. и др., 2006].

Гены системы ферментов метаболизма ксенобиотиков (ФБК) являются естественными кандидатами на роль генов, формирующих предрасположенность к данным заболеваниям, так как их белковые продукты осуществляют взаимодействие со средой, детоксицируя или токсифицируя чужеродные химические соединения, попадающие в организм, в том числе и лекарственные препараты [Ingelman-Sundberg М., 2002; Ioannides С., Lewis D.F., 2004; Rodrigues-Lima F., Dupret J.M., 2004; Makarova S.I., 2008]. Но эти гены являются достаточно сложным объектом исследования в силу ряда их специфических особенностей. Это и перекрывающаяся субстратная специфичность кодируемых этими генами ферментов, и индуцибельность, и участие в метаболизме эндогенных соединений. Но именно эти особенности генов ФБК и позволяют предполагать, что они могут быть генетическими маркёрами на всех этапах развития заболевания от его инициации к исходу и, соответственно, позволят выявить предрасположенность, помочь в ранней диагностике заболевания, зная генотип больного, составить прогноз течения заболевания, выбрать наиболее оптимальную терапию [Баранов В.С. и др., 2000; Mancinelli L. et al., 2000; Weiss K.M., Terwilliger J.D., 2000; Weinshilboum R„ 2003; Иващенко Т.Э. и др., 2004].

Эволюционной основой разнообразия этих генетических систем является большая приспособительная ценность сочетаний наследственных факторов в тех или иных условиях среды. Но в разных условиях среды хорошо приспособленными и неблагоприятными будут разные сочетания наследственных факторов. Именно носители неблагоприятных генотипов и составляют группу лиц с наследственной предрасположенностью к болезням. Кроме того, в случае атопических заболеваний, как и при любой другой полифакторной патологии, диапазон выражения генотипа в фенотипе может быть очень широким. Показано, что фенотипические эффекты генов могут различаться для разных рас, этнических групп одной расы, у мужчин и женщин, в разных возрастных группах, при воздействии различных внешних факторов, особенно для генов ФБК. Поэтому, в вычленении влияния полиморфизма конкретного гена на развитие и проявление заболеваний существует много проблем. В разных условиях среды состав полиморфных вариантов генов ФБК, приводящих к заболеванию, может быть иным. Однако, несмотря на очевидную важность внешних факторов, учёт их объективно затруднён применительно к человеку, практически лишь приём лекарств, употребление алкоголя и курение могут быть учтены с достаточно высокой точностью.

Курение - мощный загрязнитель микроокружения индивида. Табачный дым включает более 4000 компонентов [Wooten J.B. et al., 2006], что предопределяет участие многих механизмов в формировании биологического ответа. Среди этих компонентов есть соединения, обладающие прямой токсичностью (аммиак, формальдегид, ангидриды кислот и др.), но гораздо больше таких, которые приобретают токсичность in vivo в реакциях биотрансформации (бензпирен и другие полиароматические углеводороды, N-нитрозамины, гетероциклические углеводороды, ароматические амины, альдегиды, катехолы, хиноны, алкалоиды — предшественники соответствующих нитрозопроизводных — никотин, норникотин, анабазин, анатабин и др.) [Wooten J.B. et al., 2006]. Фактор курения достаточно локален, действуя на самого курильщика и окружающих его людей, что делает его хорошим объектом исследования связи различных генотипов ФБК с заболеваемостью у конкретных индивидов в условиях определённого загрязнения окружающей среды.

Для изучения многофакторных заболеваний не всегда возможно изучение родителей и сибсов для вычисления коэффициентов наследуемости, так как эти заболевания часто характеризуются поздним началом заболевания, и, кроме того, хроническое течение, неполная пенетрантность снижает интерес врачей и пациентов к подобным исследованиям. И на начальных этапах изучения связи тех генов (в нашем случае генов ФБК), которые исследователи считают ответственными за возникновение заболевания, полезными являются подходы клинической эпидемиологии. В настоящее время говорят о новой науке «молекулярной эпидемиологии», которую определяют как «область исследований, сочетающую методологию классической эпидемиологии с лабораторными оценками внутренней дозы, биологически эффективной дозы, биологического эффекта и индивидуальной предрасположенности» [Sram R., Binkova В., 2000]. В рамках этой науки выработаны представления о том, что для каждого генетического признака необходимо выявлять «целевую» группу, то есть ту группу людей, в которой исследуемый признак играет важную роль в развитии заболевания [Garte, 2001; Ляхович В.В. и др., 2006].

Так как гены биотрансформации ксенобиотиков участвуют в метаболизме лекарств, то они часто являются ответственными за побочные эффекты лекарственной терапии [Roy В. et al., 2001; Huang Y.S. et al., 2002; Vuilleumier N. et al., 2006; Bleibel W. et al., 2007]. Трудности, отмеченные для исследования генетических факторов предрасположенности к заболеваниям также относятся и к генетическим маркёрам подверженности побочным эффектам лекарственной терапии. Кроме того, на примере туберкулёза лёгких можно отметить то, что современные больные часто имеют целый ряд сопутствующих хронических заболеваний. У больных туберкулёзом часто встречаются заболевания желудочно-кишечного тракта, бронхо-лёгочной и эндокринной систем, алкоголизм, наркомания, вирусные инфекции [Зарецкий Б.В., 1997; Колпакова Т.А., 2002; Montoro Е., Rodriguez R., 2007]. Медикаментозное лечение туберкулёза часто приводит к развитию побочных реакций, наиболее частыми из которых являются гепатотоксические, частота которых достигает 47% [Huang, 2007].

Существенную роль в развитии токсических реакций играет метаболизм противотуберкулезных препаратов, в частности, изониазида. Метаболизм изониазида протекает с участием N-ацетилтрансферазы 2 (NAT2), амидазы и CYP2E1. NAT2 превращает изониазид в ацетилизониазид. Под действием амидазы возможен гидролиз изониазида и ацетил изониазида до гидразина и ацетилгидразина соответственно. Гидразин, рассматриваемый как главный токсический продукт метаболизма изониазида, может ацетилироваться до ацетилгидразина, а затем до диацетилгидразина под действием NAT2. Также возможен обратный путь гидролиза ацетилгидразина до гидразина под действием амидазы. Полиморфизм NAT2 проявляется в различной скорости ацетилирования изониазида. У медленных ацетиляторов путь гидролиза изониазида выражен в большей степени по сравнению с быстрыми ацетиляторами, соответственно, большая часть изониазида метаболизируется по пути токсификации. Таким образом, количество гидразина и ацетилгидразина, образовавшегося в процессе метаболизма изониазида, зависит от соотношения активностей NAT2 и амидазы. [Huang Y.S. et al., 2002, 2007; Makarova S.I., 2008].

Получены результаты свидетельствующие о том, что медленное ацетилирование изониазида является фактором риска гепатотоксичности [Ohno М. et al., 2000; Huang Y.S. et al., 2002]. Выполнены работы, направленные на изучение возможности индивидуализации фармакотерапии туберкулеза на основе оценок генетического полиморфизма NAT2 [Ohno M.,et al., 2000; Kita et al., 2001; Huang Y.S. et al., 2002, 2007; Kinzig-Schippers et al., 2005; Chen et al., 2009]. Однако результаты цитированных выше работ не могут быть просто перенесены в целях прогнозирования побочных реакций фармакотерапии туберкулеза в определённом контингенте больных. Для этого необходимы подобные оценки именно в этом контингенте, несущем все возможные регионально-специфические особенности основного и сопутствующих заболеваний, генетической структуры популяции и внешних факторов воздействия этого региона.

Таким образом, изучение связи полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с предрасположенностью к атопическим заболеваниям является актуальным для понимания сути этих заболеваний, как результата взаимодействия генома и среды, и для выявления как общих, так и присущих конкретным популяциям генетических факторов предрасположенности и маркёров результатов лекарственной терапии.

Целью данной работы стало изучение полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков как возможных генетических факторов риска возникновения атопических заболеваний у детей (бронхиальной астмы и атопического дерматита) и некоторых клинических проявлений этих заболеваний, а также гепатотоксичности при лечении туберкулёза лёгких у взрослых.

Для достижения объявленной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить ассоциацию полиморфных вариантов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков (цитохрома Р450 1А1 (CYP1A1), глутатион S-трансфераз Ml (GSTM1), Т1 (GSTT1) и PI (GSTP1), ариламин N-ацетилтрансферазы 2 (NAT2)) с атопическим дерматитом и бронхиальной астмой.

2. Сравнить величины показателей ассоциации с бронхиальной астмой полиморфных вариантов генов ФБК (CYP1A1, GSTM1, GSTT1, GSTP1, NAT2) и полиморфных вариантов генов интерлейкинов (IL4, IL5), их рецепторов

IL4R, IL5R) и антагониста рецептора (IL1RA).

4. Изучить межгенные взаимодействия в формировании предрасположенности и особенностей течения атопических заболеваний.

5. Изучить влияние курения на показатели ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК (GSTM1, GSTT1, GSTP1, NAT2) с риском возникновения атопических заболеваний.

9. Оценить фармакокинетику изониазида у больных туберкулёзом лёгких и ассоциацию показателей элиминации препарата с развитием побочных реакций на противотуберкулёзные препараты.

10. Оценить и информативность фенотипа ацетилирования и генотипа КАТ2 в оценке предрасположенности к побочным эффектам лекарственной терапии туберкулёза лёгких.

Научная новизна. В работе впервые изучен полиморфизм генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в выборке европеоидных, в основном, русских детей больных АД и БА и, соответствующей контрольной группы без атопических заболеваний г. Новосибирска. В исследованиях «случай-контроль» показана ассоциация полиморфных сайтов генов ФБК и генов интерлейкинов с атопическими заболеваниями. Показано, что в формировании предрасположенности к БА преимущественно задействованы полиморфные варианты генов ФБК, тогда как в развитии клинических форм заболевания большую роль играют полиморфные варианты генов интерлейкинов. Показано, что и для атопического дерматита и для атопической бронхиальной астмы одни и те же полиморфные варианты генов ФБК являются факторами риска заболевания и высоких значений лабораторных показателей общих для данных атопических заболеваний, таких как уровень иммуноглобулина Е в сыворотке крови и количество эозинофилов.

Впервые было показано, что показатели атопии, такие как уровень общего ^Е в сыворотке крови, процент эозинофилов и диаметр пятна в кожном прик-тесте у детей больных бронхиальной астмой, возрастают с накоплением нулевых аллелей в генотипе С8ТМ1.

Показано, что ассоциация полиморфных вариантов генов ФБК зависит от возраста и модифицируется полом. Установлено, что группами максимальной подверженности атопическому дерматиту являются девочки с гомозиготным генотипом СБТР! (10511е/11е), подвергавшиеся воздействию курения в семьях (013. = 6,38**). Девочки, имеющие этот же генотип, подвергавшиеся воздействию курения в семьях, не достигшие возраста полового созревания, также являются группой максимальной подверженности бронхиальной астме (OR = 26,25***). Гомозиготный генотип NAT2(C481C) также наибольший вклад в предрасположенность к бронхиальной астме вносит в группе девочек младше 11 лет, как подвергавшихся (OR = 20,0***), так и не подвергавшихся воздействию курения в семьях (OR > 35, 5**).

Показано, что гетерозиготные генотипы по исследованным признакам являются устойчивыми к атопическим заболеваниям.

Показано, что медленный фенотип ацетилирования предрасполагает к гепатотоксичности при противотуберкулёзной терапии как в группах без сопутствующих, так и в группах с сопутствующими заболеваниями.

Основные положения, выносимые на защиту

2. Величина показателей ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с предрасположенностью к бронхиальной астме сравнима с таковой для генов цитокинов, вовлечённых в основной патогенетический механизм.

3. Пассивное курение, пол и возраст существенно влияют на величины показателя ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с предрасположенностью к атопическим заболеваниям у детей.

4. Гены ФБК играют роль не только в развитии предрасположенности к атопическим заболеваниям, но и в формировании некоторых клинических проявлений этих заболеваний.

Научно-практическая значимость. Результаты исследования ассоциаций полиморфизмов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с многофакторными заболеваниями могут быть использованы в профилактической медицине для формирования групп повышенного риска заболевания как с учётом генетических факторов, так и внешних факторов.

Результаты выполненной работы имеют значение для дальнейшего изучения механизмов, лежащих в основе обнаруженных взаимосвязей.

Теоретической значимостью данной работы можно считать получение экспериментальных доказательств важного положения популяционной генетики о приспособительном значении гетерозиготных генотипов на примере устойчивости гетерозиготных генотипов генов ФБК к атопическим заболеваниям у детей.

Самостоятельность выполненной работы. Оценка полиморфизма генов с помощью полимеразной цепной реакции и полиморфизма длин рестрикционных фрагментов выполнена как лично автором (NAT2) при астме и атопическом дерматите), так и сотрудниками лаборатории метаболизма лекарств и фармакокинетики к.б.н. Часовниковой О.Б. (GSTM1), к.б.н. Сафроновой О.Г. (GSTT1, GSTP1), к.б.н. Никишиной M.B. (NAT2 при туберкулёзе), сотрудником ИФХБиФМ СО РАН к.б.н. Филиппенко M.JI. (полиморфизм тандемных повторов в генах IL1RA и IL4), сотрудником Института медицинской генетики СО РАМН к.б.н. Фрейдиным М. Б. (ILA, ILS, IL4R). Фармакокинетические оценки концентрации тестовых лекарств выполнены как лично автором, так и при участии д.м.н. Вавилина В.А. и аспиранта Кудряшова A.B. (при туберкулёзе). Клинический этап работы с детьми больными бронхиальной астмой выполнен ассистентом кафедры педиатрии ФУВ НГМА к.м.н. Рябовой O.A. (случай - контроль) и к.м.н. Батычко O.A. (семейный анализ); с детьми больными атопическим дерматитом - к.м.н. Ляпуновой А., а при работе с больными туберкулёзом -к.м.н. Мутайханом Ж.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Макарова, Светлана Ивановна

ВЫВОДЫ

1. Показано, что предрасположенность к атопическим заболеваниям обусловливают полиморфные варианты генов ФБК: аллель CYPlAlVal является фактором риска бронхиальной астмы; генотип 481СС NAT2, гомозигота по нулевому аллелю GSTT1 являются факторами риска развития как бронхиальной астмы, так и атопического дерматита у детей. Замена G590A в гене NAT2 (в гомозиготном состоянии), генотип 313GG гена GSTP1 являются факторами риска атопического дерматита.

2. Выявлено, что ассоциация гомозигы по нулевому аллелю гена GSTM1 с бронхиальной астмой, не имевшая статистической достоверности в исследовании «случай — контроль», в семейном анализе возрастает в ряду: дети от здоровых родителей, дети с односторонней наследственной отягощённостью, дети с двусторонней наследственной отягощённостью.

3. Установлено наличие ген-генных взаимодействий для следующих генотипов: аддитивный эффект в усилении риска бронхиальной астмы и атопического дерматита для сочетания гомозиготных делеций генов GSTM1 и GSTT1; синергический эффект сочетания гомозиготной делеции гена GSTT1 и гомозиготы по аллелю дикого типа GSTP1 и, напротив, аддитивный защитный эффект для геторозиготных генотипов по локусам С481Т и G590A гена NAT2.

4. Эффекты полиморфизма генов ФБК изменяются с возрастом и модифицируются полом и воздействием фактора курения. Поэтому для каждого генетического признака имеется группа максимальной подверженности. При бронхиальной астме для генотипа NAT2(C481T)(CC) это девочки младше 11 лет, не подвергающиеся воздействию курения в семьях; для генотипа GSTP1(313GG) - девочки младше И лет, подвергающиеся воздействию курения в семьях. При атопическом дерматите для делеции гена GSTT1 - мальчики; для GSTP1(313GG) -девочки, подвергающиеся воздействию фактора курения.

5. Показано, что гены ФБК играют роль в формировании следующих клинических проявлений атопических заболеваний: делеция гена GSTM1 предрасполагает к более тяжёлому течению атопического дерматита, гиперэозинофилии, раннему развитию БА, особенно у детей, подвергавшихся курению в семьях. Делеция гена GSTT1 — к подростковой форме атопического дерматита и более тяжелому течению как АД, так и БА. Гомозигота по мутантному аллелю NAT2(C481T)(TT) - к гиперэозинофилии при БА, особенно у не подвергающихся воздействию курения в семьях.

6. Показано, что полиморфные варианты.генов IL1RA и IL4R являются генетическими факторами предрасположенности или устойчивости к бронхиальной астме, показатели ассоциации которых с заболеванием по величине сопоставимы с таковыми для полиморфных вариантов генов ФБК. Гетерозиготный генотип IL1RA, несущий аллели с 2 и 4 тандемными повторами (IL1RA(VNTR)(13)) является фактором риска заболевания. Гомозиготный генотип (Ile/Ile) по замене Ile50Val гена IL4R является фактором устойчивости к бронхиальной астме.

7. Показано, что полиморфные варианты генов IL1RA, IL4, IL4R, IL5 и IL5R участвуют в формировании клинических характеристик бронхиальной астмы, и наблюдается аддитивный эффект сочетаний этих генов. Наибольший эффект полиморфизм этих генов оказывает на формирование поливалентной аллергии.

9. Показано, что высокая точность соответствия постулированного по генетическим тестам и фармакокинетически установленного фенотипа ацетилирования имеет место для гомозигот по мутантным аллелям или аллелям дикого типа гена NAT2. Гетерозиготные генотипы характеризуются высокой вариабельностью активности и могут быть как медленными, так и быстрыми ацетиляторами.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящей работе приведены результаты исследования ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК (CYP1A1, NAT2, GSTM1, GSTT1 и GSTP1) с бронхиальной астмой и атопическим дерматитом у детей; ассоциации полиморфных вариантов генов цитокинов (IL4, IL5, IL4RA, IL1RN) с бронхиальной астмой; генотипа NAT2 и фенотипа ацетилирования с частотой побочных реакций на лечение у больных туберкулёзом, а также сопоставление фенотипа и генотипа ацетилирования у больных БА и туберкулёзом. В основе данного исследования лежит гипотеза о том, что фенотип или генотип ферментов биотрансформации ксенобиотиков может служить маркёром предрасположенности к экологически обусловленным многофакторным заболеваниям и/или побочным эффектам лечения в силу субстратной специфичности данных ферментов. Ранее нами было проведено фенотипирование русских популяций Западной Сибири (Алтай, Новосибирская область) и Республики Саха (Якутия), которое показало, что европеоиды Сибири, в основном русские, по распределению фенотипов ацетилирования не отличаются от других европеоидных популяций [Макарова С.И., 2000; Вавилин В.А., 2001]. Это дало нам возможность сравнивать собственные результаты с данными работ зарубежных и отечественных исследователей, выполненных на других популяциях европеоидов.

Многофакторные заболевания представляют собой самую многочисленную и разнообразную группу болезней, составляющую более 90% от всей патологии человека и характеризующуюся наиболее высокими темпами роста заболеваемости, смертности и инвалидизации человека в современных популяциях [Бочков Н.П., 2003]. Атопические заболевания, такие как атопический дерматит и бронхиальная астма, являются многофакторными и начинаются в детском, часто и в младенческом возрасте. Идентификация в различных популяциях специфичных генов и средовых факторов, взаимодействие которых формируют норму реакции устойчивости человека и его адаптацию к изменяющейся среде обитания, приобретает в последние десятилетия всё большую актуальность [Спицын В.А., 1985, 2006].

Наиболее подходящими генетическими маркёрами для многофакторных заболеваний, этиология которых тесно связанна с окружающей средой, являются полиморфные варианты генов ФБК, экспрессия которых, в отличие от других классов генов, непосредственно регулируется средовыми факторами химической природы [Ляхович В.В., Цырлов И.Б., 1981; Баранов B.C. и др., 2000; Патрушев Л.И., 2000; Nebert D.W. et al., 2003, 2008].

Начиная с 1990-х годов прошлого века в мире проводились обширные исследования генетических факторов предрасположенности к этим заболеваниям. Существенная часть исследований была посвящена ассоциации полиморфизмов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков (ФБК): CYP1A1, CYP2D6, NAT2, GSTM1, GSTT1, GSTP1 с многофакторными заболеваниями, в основном с онкозаболеваниями. Это обусловлено, по нашему мнению, следующими причинами: 1) первые фармакогенетические примеры были получены именно для этой группы, генов (ацетилирование изониазида, 4-гидроксилирование дебризохина и S-мефенитоина); 2) экспериментальные исследования свидетельствовали о возрастании токсичности многих ксенобиотиков в результате метаболизма; 3) накапливающиеся в молекулярно-эпидемиологических исследованиях факты указывали на роль этих ферментов на инициирующих этапах развития заболеваний; 4) высокой частотой многих полиморфизмов этих генов в популяциях.

В исследования полиморфизма генов ФБК при распространённых неонкологических заболеваниях начались позже [Вавилин В.А. и др., 2000, 2002; Гавалов С.М. 2000; Ляхович В.В. и др., 2000; Огородова Л.М., 2001; Roy В. et al., 2001; Hiratsuka M. et al., 2002; Nacak M. et al., 2002; Najim R.A. et al., 2003; Ивчик T.B., 2004; Иващенко Т.Э., 2004; Макарова С.И. и др., 2004; Brasch-Andersen С. et al., 2004; Funk M. et al., 2004; Брагина Е.Ю. и др., 2005;

Иванов В.П. и др. 2005; Batra J. et al., 2006; Фёдорова Ю.Ю., 2009; Minelli С. et al., 2010].

Опыт десятилетних исследований связи полиморфизма генов ФБК с предрасположенностью к онкологическим заболеваниям показал, что имеет место противоречивость результатов разных авторов. Во многих исследованиях величины относительного риска для индивидуальных генов являются низкими, (это, впрочем, не принижало эпидемиологического значения данного объекта исследований, поскольку высокие частоты встречаемости полиморфных вариантов обусловливали значительный атрибутивный риск). Низкая воспроизводимость этих исследований обусловлена не только сложностью межгенных взаимодействий [Пузырёв В.П., Степанов В.А., 1997; Templeton A.R. et al., 2000], генетической гетерогенностью [Johnson J.R. et al., 2002; Laitinen Т., 2007] и выраженным клиническим полиморфизмом данного класса болезней [Бочков Н.П., 1997; Barnes K.S. et al., 1999; Kabesch M. et al., 2007], но и эволюционно сложившимися взаимодействиями генотип-среда специфичными для каждой человеческой популяции [Terwilliger J.D., Ott J., 1993; Altshuler D. etal., 1998].

Гарт [Garte S., 2001], анализируя итоги этого периода, сделал вывод о том, что противоречивость результатов во многом обусловлена ошибочной формулировкой задачи исследований: поиском вариантов генов, являющихся фактором риска заболевания во всей популяции без учета половых, возрастных различий, без учёта влияния места проживания, особенностей диеты и химического окружения. Правильной, на его взгляд задачей должен быть поиск подгрупп, в которых данные генетические варианты обусловливают высокий риск заболевания. В работах с такой постановкой задачи были получены высокие величины относительного риска: отношение шансов (OR) в пределах 3,4-14,2.

Наши результаты исследований связи полиморфных вариантов генов ФБК с предрасположенностью к аллергическим заболеваниям также свидетельствуют о продуктивности такого подхода. Например, при изучении

С481Т и G590A полиморфизма гена NAT2 установлено, что двойная гетерозигота является маркёром устойчивости к атопическому дерматиту (АД) и бронхиальной астме (БА). Подгруппой, в которой наиболее сильно проявляется защитный эффект данного генотипа, являются девочки, не подвергавшиеся воздействию табачного дыма в семьях: OR = 0,08 (р < 0,05) в исследовании АД (в то время как для всей группы больных - 0,43 (р <0,05)); а в исследовании БА для этой подгруппы OR = 0,09 (р < 0,05) (0,54 для всех). Гомозиготная делеция гена GSTT1 является маркером предрасположенности к БА у детей: для всей группы OR = 2,69, а для не подвергавшейся воздействию табачного дыма подгруппы - 11,0 (р < 0,01).

Для оценки ассоциации полиморфизмов генов ФБК исследования были организованы по типу «случай - контроль». Такой тип исследований стал распространённым и важным методом изучения этиологии и клинического течения заболеваний. Его преимущества заключаются прежде всего в том, что исследователи могут выявлять случаи и делать сравнения, независимо от распространённости заболевания. Ещё одно преимущество исследований «случай — контроль» при установлении роли причинных или прогностических факторов состоит в отсутствии необходимости ожидать ответа длительное время, как это бывает при когортных исследованиях [Флетчер Р. и др., 1998]. Сильной стороной исследований «случай -контроль» является также то, что они позволяют учесть как генетическую составляющую взаимосвязи «заболевание - признак», так и влияние средовых факторов. Кроме того, существует хорошо разработанная статистика для обработки результатов этих исследований, одобренная ВОЗ. В случае семейных выборок выше возможность вычленить влияние того или иного генетического признака на развитие заболевания [Schaid D.J., Rowland С., 1998]. Однако для выявления значения признака в определённой среде они могут оказаться менее чувствительными [Khoury M.J., James L.M., 1993]. Наши результаты в изучении ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с бронхиальной астмой могут служить иллюстрацией данного положения. В случае организации исследования «случай — контроль» были выявлены ассоциации полиморфизма гена NAT2, тогда как в семейном анализе подобных ассоциаций выявлено не было.

Проведённые в 90-х годах исследования как онкологических, так и ряда других заболеваний показали, что комбинации генотипов часто обусловливают более высокий риск, чем индивидуальный ген, т. е. имеют место межгенные взаимодействия. Полученные нами результаты также показывают наличие сильных межгенных взаимодействий и для атопических заболеваний. Так, индивидуальные генотипы GSTMl*0/0, GSTTl*0/0 и GSTP1-Vall05/Vall05 ассоциированы с предрасположенностью к АД у детей с OR = 1,02; 2,67 и 3,22 соответственно, а их комбинация - с величиной OR = 9,43 (р < 0,05). Здесь необходимо вспомнить, что уже основатели фармакогенетики А. Motulski и F. Vogel прозорливо указывали на возможную роль нескольких генов в формировании лекарственного ответа.

Также было показано, что воздействие химического фактора, в метаболизме которого участвуют продукты исследуемых генов, имеет важное значение в проявлении эффекта гена (взаимодействие «ген-среда»), причем это может быть наиболее заметно в области низких доз. Многие примеры этого были получены для курения - универсального фактора риска всех распространенных заболеваний. При исследовании влияния пассивного курения нами установлено, что оно повышает риск возникновения атопического дерматита, ассоциированный с GSTP1 (11) (у не подвергавшихся воздействию курения детей отношение шансов составляет - 0,81, а у детей -пассивных курильщиков - 3,95***) и снижает риск развития АД, ассоциированный с TVAT2(G590A)(00) и GSTT1 (00) (у лиц, не подвергавшихся воздействию фактора курения, отношение шансов составляет 9,00* и >9,06*, соответственно, а для пассивных курильщиков - 2,94 и 3,40** соответственно). Для развития астмы также в условиях курения снижается риск, ассоциированный с GSTT1 (00) (OR >8,18* у НК и 1,91 - у ПК).

Почти все ФБК принимают участие в метаболизме эндогенных субстратов, и снижение рисковой значимости полиморфных вариантов этих генов под воздействием курения обусловлено, вероятно, сложностью этого фактора. В табачном дыме определено около 4 тыс. компонентов, и вклад гена, продукт которого метаболизирует лишь немногие из них, снижается. Подобные закономерности показаны для онкологических заболеваний [Brockmoller J. et al., 1993; Nyberg F. et al., 1998; Ляхович BJB. и др., 2006]. Такого рода наблюдения получены не только для человека, но. и других видов. Спектр однонуклеотидных замен меняется в зависимости- от условий существования, видов микроорганизмов и насекомых [Nevo Е., 2001]. По-видимому, высокая частота полиморфизма генов ФБК обуславливает расширение адаптивных возможностей вида.

Таким образом, имеется достаточно примеров связи полиморфизма генов ФБК с распространенными заболеваниями для того, чтобы сделать вывод об их существенном вкладе в эпидемиологию этих заболеваний. Это стимулирует расширение подобных исследований, прежде всего, в направлении более полного охвата признаков, важных для токсикокинетики и токсикодинамики ксенобиотиков в организме.

Атопический дерматит является первым по срокам возникновения аллергическим заболеванием и считается одним из факторов высокого возникновения бронхиальной астмы у детей, поэтому и факторы риска у этих заболеваний могут быть общими. Результаты наших исследований показывают, что в ряду контроль — атопический дерматит — бронхиальная астма растёт процент детей с генотипом М472(С481Т)(11) и соответственно возрастает отношение шансов заболеть для носителей таких генотипов по сравнению с другими: OR = 2,34*- для АД и 4,01***- для БА. Но значимость генотипов GSTM1(00), GSTTK00) GSTP1(11), GSTP1( 10) и iVA72(G590A)(00) выше у лиц с атопическим дерматитом, чем у больных астмой. И именно гомозиготные по делециям генов GSTM1 и GSTT1 генотипы предрасполагают к раннему началу БА. Можно предположить, что эти гены, в отличие от М472(С481Т) имеют большее значения для становления системы биотрансформации в онтогенезе и потому их роль выше в предрасположенности к атопическому дерматиту, как первому заболеванию по времени из атопических болезней.

Представляется уместным обратить внимание на то, что экогенетические молекулярно-эпидемиологические исследования предоставляют богатый материал для выдвижения новых гипотез о механизмах патогенеза заболеваний, но для этого необходимы точные количественные оценки проявлений клинического фенотипа. Например, нами показана корреляция числа нулевых аллелей гена С8ТМ1 с выраженностью, количественных показателей атопии у больных БА [Макарова и др., 2004], а в работе [ВгазсЬ-АгкАегзеп е1 а1., 2004] -увеличение показателей ассоциации ((Ж) генов С8ТМ1 и ОБТП с атопической БА с увеличением числа нулевых аллелей этих генов. Эти данные указывают на влияние ФБК на функционирование иммунной системы. Каким образом реализуется это влияние — пока неизвестно. Эти данные указывают на важную роль в функционировании клеток иммунной системы наряду с цитокиновой сетью и генов ФБК. Молекулярные механизмы, реализующие это участие, неизвестны. Их исследование может быть важным в развитии представлений о патогенезе атопических заболеваний и потенциально для поиска новых терапевтических мишеней. Мы показали, что полиморфизм собственно генов связанных с поддержанием уровня иммуноглобулина Е имеет большее значения для формирования клинических признаков бронхиальной астмы, чем предраспоженности к ней.

Сопоставляя данные по фенотипу и генотипу ацетилирования мы показали, что определение двух, в случае БА, и даже трёх, при туберкулёзе ТБ, наиболее распространённых мутаций НАТ2 не позволяет распознать достаточно надёжно быстрых и медленных ацетиляторов. Знание же фенотипа ацетилирования важно для прогнозирования эффектов лечения, выбора оптимальной схемы лечения. Из полученных результатов следует, что генетические тесты могут быть хорошим подспорьем для предварительной оценки того, какими ацетиляторами могут быть индивиды, имеющие в своём генотипе ту или иную мутацию. Гомозиготные по аллелям дикого типа генотипы ассоциированы в основном с фенотипом быстрого ацетилятора. Гетерозиготные генотипы ассоциированы в основном с фенотипом медленного ацетилятора. Определение замены в 481 положении значительно повышает точность прогноза.

Таким образом, представленный материал и его анализ позволяет сделать следующие выводы.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Макарова, Светлана Ивановна, Новосибирск

1. Авдеев, С. Н. Бронхиальная астма в таблицах и схемах / С. Н. Авдеев. -М.: Атмосфера, 2005. - 48 С.

2. Авдеенко Н. В. Влияние загрязнения воздушной среды на распространенность и течение аллергических болезней у детей / Авдеенко Н. В., Ефимова А. А., Балаболкин И. И., Губернский, Ю. Д., Иродова Е. В. // Педиатрия. 1990. - № 5. - G.10 - 14.

3. Адо А.Д. Общая аллергология. М.: Медицина, 1978. - 428 С.

4. Аксель Е.М., Давыдов М.И. Статистика заболеваемости и смертности от злокачественных новообразований в 2000 году // в сборнике «Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2000». Москва. РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН, 2002, С. 85-106.

5. Аксенович Т.И Статистические методы генетического анализа признаков человека: Учеб. Пособие / Новосиб. гос. ун-т. Новосибирск, 2001. 128 С.

6. Александров Н. Российская промышленность: темпы — есть. Дело за ростом // Металлы и цены. 2008. - №8 / http://metal4u.Ri/articles/bY id/222

7. Аллергические болезни. Диагностика и лечение: Практическое руководство / Рой Паттерсон, Л.К. Гряммер, П.А. Гринбергер: Пер. с англ. М.- 2000. С. 733.

8. Алтухов Ю.П. Генетические процессы в популяциях / М: ИКЦ «Академкнига». 2003. — 431 С.

9. Арнаудова А. 10 вопросов о здравоохранении в странах новых соседях ЕС.-ВОЗ.- 2006.-301 С.

10. Ю.Балаболкин И.И. Аллергические заболевания у детей в районах с промышленным загрязнением // Педиатрия. 1994. - № 5. - С. 59 - 60.

11. Балаболкин И.И. Аллергические заболевания у детей на современном этапе //Consilium Medicum. 1999. - Т. 1, N. 6. - С. 251 - 253.

12. Балаболкин И.И., Ефимова A.A. Влияние экологических факторов на распространение и течение аллергических заболеваний у детей // Иммунология. 1991. - № 4. - С. 34-37.

13. Баранов B.C., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э., Асеев М.В. Геном человека и гены «предрасположенности». (Введение в предиктивную медицину). -СПб.: Интермедика, 2000. 272 С.

14. Болезни полигенные: общие представления // http://medbiol.ru/medbiol/eclin/0003e072.htm (обращение 02.07.2009)

15. Бочков Н.П. Клиническая генетика. -М.: Медицина. 1997.

16. Бочков Н.П. Экологическая генетика человека // Журн. Экологическая генетика. 2003. - Т. 1. - С. 16-21.

17. Бочков Н.П., Захаров А.Ф., Иванов В.И. Медицинская генетика. М.: Медицина, 1984. - 366 С.

18. Брагина Е.Ю. Сравнительный анализ структуры наследственной компоненты подверженности к бронхиальной астме и туберкулёзу по генам метаболизма ксенобиотиков / Автореферат на соискание уч. степени кандидата биол. наук. 2005 - Томск. - 19 С.

19. Брагина Е.Ю. Полиморфизм генов биотрансформации ксенобиотиков GSTT1, GSTM1, CYP2E1 и CYP2C19 у больных атопической бронхиальной астмой / Брагина Е.Ю., Фрейдин М.Б., Тен И.А., JI.M. Огородова // Бюлл. СО РАМН.-2005.-№3 (117). С 121-125.

20. Бронхиальная астма. Глобальная стратегия // Пульмонология. 1996 -Приложение. - 166 С.

21. Бытовая экология / Домашов И.А., Коротенко В.А., Кириленко A.B., Постнова Е.А./ Под общ. Ред. Коротенко В.А. Б.: 2004. - 300 С.

22. Вавилин В.А. Генетический полиморфизм глутатион S-трансферазы М1 и Т1 у детей, больных бронхиальной астмой / Вавилин В.А., Часовникова О.Б., Ляхович В.В., Гавалов С.М., Рябова O.A. // Вопр. мед. химии. 2000. - Т. 46, Вып. 4. - С. 388-397.

23. Вавилин В.А., Макарова С.И., Талалайченко Г.П., Ляхович В.В. Кинетика и динамика пребывания токсических соединений в организме: Учебное пособие / Новосибирск: Новосиб. Гос. Ун-т. 2008. - 148 С.

24. Вельтищев Ю.Е. Экологически детерминированная патология детского возраста // Росс. Вестник перинатологии и педиатрии. 1996. - №2. - С. 512.

25. Вишневский А.Г. Воспроизводство населения и общество: История, современность, взгляд в будущее, М.: Финансы и статистика, 1982, стр. 77.

26. Вознесенская Н.И., Мазитова Л.Н., Намазова Л.С. Атопический дерматит у детей проблемы и решения // Русский медицинский журнал. - 2006. -. Т. 14, №19. - С. 44-49.

27. Гавалов С.М. Дети пассивные курильщики // Эпидемиология неспецифических заболеваний лёгких и организация пульмонологической помощи в СССР. - Л. 1980. - С. 10-11.

28. Гавалов С.М. О пассивном курении и частоте бронхолёгочной патологии / Гавалов С.М., Демченко A.A., Казначеева Л.Ф. Горшкова Н.Ф., Патрикеева Н.М. // Педиатрия. 1984. - № 1. - С. 32-34.

29. Гаджаев А.И. Химия и нефтехимия Турции // Newchemistry.ru 2006.

30. Гичев Ю.П. Загрязнение окружающей среды и здоровье человека. -Новосибирск: изд-во СО РАМН, 2002. 230 С.

31. Горбунова В.Н. Молекулярные основы медицинской генетики. СПб.: Интермедика. 1999. - 212 С.

32. Гуляева Р.Ф., Райе Р.Х. Биологические эффекты токсических соединений. Новосибирск 2003. 204 С.

33. Гущин И.С. Аллерген специфическая иммунотерапия // International J on Immunorehabilitation. - 1997. - № 7. - С. 68-70.

34. Гущин И.С., Преодоление аллергенами тканевого барьера решающая форма предрасположения к аллергии // Патол. Физиол. Эксперим. Терап., 2009.-№ 1. - С.8-13.

35. Десять ведущих причин смерти. Десять ведущих причин смерти в разбивке по категориям дохода (2004 год) // Информационный бюллетень ВОЗ № 310. 2008 http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/m/print. html (посещение 16.02.2009)

36. Джальчинова В.Б., Чистяков Г.М: Эозинофилы и их роль в патогенезе аллергических заболеваний // Российский вестник перинатологии и педиатрии 1999. - № 5. - С.42-45.

37. Дуева Л.А., Коган В.Ю., Суворов C.B. Промышленные аллергены. М: Центр Международных проектов Госкомприроды СССР, 1989. - 203 С.

38. Ефимова A.A., Чуканин H.H., Бржезовский М.М. Влияние экологических факторов на развитие бронхолёгочных заболеваний у детей // Педиатрия. -1994.-№5.-С. 11-15.

39. Жминько П.Г. Нарушение функции системы иммунитета под воздействием пестицидов и некоторые задачи иммунотоксикологии на современном этапе (обзор) // Сельскохозяйственная токсикология. -1998. -http://www.medved.kiev.ua/ arhi vmg/stat98/982 15 .htm

40. Иванов В.П. Состояние и перспективы российской химической и нефтехимической промышленности. Международный химическийсаммит. Москва, 1-2 июля 2004 г. // http://www.chemsummit.ru /old/ru/ doklad/dokladivanov.htm

41. Иванова В.В. Особенности иммунометаболических взаимоотношений у детей, переносящих острые респираторно-вирусные инфекции / Иванова В.В., Буловская JI.H., Железникова Г.Ф., Дробаченко O.A. // Иммунология. 1997. - Т. 6. - С. 45-47.

42. Ивчик Т.В. Роль наследственных факторов в формировании и прогнозировании хронической обструктивной болезни лёгких // Автореферат на соискание уч. степени доктора медицинских наук. С.Петербург. - 2004. - 46 С.

43. Ижевская В.Л., Иванов В.И. ГенЭтика забота о будущем // Экология и жизнь. - 2006. - № 1. / http://www.ecolife.ru/zhurnal/articles/28/226/ (посещение 02.07.2009)

44. Кацнельсон Б. А., Ползик Е. В., Привалова Л. И. О морально-этических аспектах мониторинга индивидуальной восприимчивости к профессиональным заболеваниям // Медицина труда и промышленная экология. 1994. - №. 4. - С. 38-40.

45. Киселёв A.B., Баранов А.Н., Баранов B.C. Генная терапия: Состояние проблемы и перспективы // Молекулярно-биологические технологии вмедицинской практике. Вып. 3. - Новосибирск: Альфа-Виста, 2003. - С. 49-74.

46. Ковалев И.Е. Механизм адаптации к окружающей среде // Природа. -1991.-№2.-С. 65 -74.

47. Колпакова Т.А. Осложнения антибактериальной терапии у больных туберкулезом легких с сопутствующими заболеваниями / Автореферат на соискание уч. степени доктора мед наук Новосибирск. - 2002. — 28 С.

48. Колчанов H.A. Генные сети / Колчанов H.A., Ананько Е.А., Колпаков Ф.А., Подколодная O.A., Игнатьева Е.В., Горячковская Т.Н., Степаненко И:Л. // Мол. Биол. 2000. - Т. 34, № 4. - С. 533-544.

49. Кондюрина Е.Г. Атопический дерматит у детей: современные эпидемиологические тенденции / Кондюрина Е.Г., Филатова Т.А., Ёлкина Т.Н., Зеленская В.В., Лиханов A.B. // Бюлл. СО РАМН. 2004. - № 1, Вып. 111.- С.39-44.

50. Кондюрина Е.Г. Динамика атопического марша у школьников города Новосибирска / Кондюрина Е.Г., Елкина Т.Н., Филатова Т.А., Карцева. Т.В., Лиханов А.В, Зеленская В.В. // Аллергология. 2003. № 4. - С. 3639.

51. Кондюрина Е.Г., Елкина Т.Н., Лиханов A.B., Карцева Т.В. Динамика распространенности бронхиальной астмы у детей в г. Новосибирске // Пульмонология. 2003. - № 6. - С. 51-53.

52. Краткий обзор нового Регламента Европейского Союза по Химическим веществам REACH / http://www.ecovostok.ru/reach/ (посещение 25.02.2011)

53. Леонов В.П., Бобровникова А.Я. Выродимся или вымрем, что наступит раньше? // Биометрика. -2001. -http://www.biometrica.tomsk.ru/ftp/medicine/ vpr.htm

54. Лильин Е.Т., Трубников В.И., Ванюков М.М. Введение в современную фармакогенетику. М.: Медицина. - 1984. - 160 С.

55. Логинова О.О. Генетическое будущее человечества // http:// п-t.ru/tp/mr/gbc.htm (8 февраля 2002 года)

56. Лукьянов В. Безопасность лекарств от контроля к обеспечению качества // Российские аптеки. 2003. - №6 (http://www.rosapteki.ru/arhiv/detail.php? ГО=1221) (посещение 15.03.2009

57. Ляпунова А.А Полиморфизм генов глутфтион S- трансфераз Ml и ТІ у детей с атопическим дерматитом / Автореферат дисс. на соискание уч. степени кандидата медицинских наук, Новосибирск. 2004. - 18 С.

58. Ляхович В.В. Активная защита при окислительном стрессе. Антиоксидант-респонсивный элемент / Ляхович В.В., Вавилин В.А., Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б. // Биохимия. 2006. - Т. 71, вып. 9. - С. 1183-1197.

59. Ляхович В.В. Экогенетический аспект полифакторных заболеваний / Ляхович В.В., Вавилин В.А., Макарова С.И., Гришанова А.Ю. // Вестник ВОГиС. 2006. - Том 10, № 3. с. 514-519.

60. Ляхович В.В., Цырлов И.Б. Индукция ферментов метаболизма ксенобиотиков. Новосибирск: Наука. - 1981. - 242 С.

61. Макарова С.И. Показатели атопии у детей с бронхиальной астмой возрастают с накоплением нуль-аллелей глутатион S-трансферазы М1 / Макарова С.И., Сафронова О.Г., Вавилин В.А., Батычко O.A., Гавалов

62. С.М., Ляхович В.В. // Бюл. эксперим. биол. мед. 2004. - Т. 138, № 11. -С. 520-522.

63. Макарова С.И. Полиморфизм ариламин 1Ч-ацетилтрансферазы и его связь с некоторыми распространёнными заболеваниями / Автореферат на соискание уч. степени кандидата биол. наук. 2000 - Новосибирск. - 19 С.

64. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбук Д. Методы генной инженерии. Молекулярное клонирование: Пер. с англ. М.6 МИР. - 1984. - 480 С.

65. Манчиц Р. Пойдет ли вступление в ВТО на пользу российскому химпрому? Мнения расходятся. Химия и жизнь. Босс. - 2007. - № 6. -http://www.bossmag.ш/view.php?id=3192

66. Медоуз Д. X., Медоуз Д. Л., Рандерс И. За пределами роста / Пер. с англ. М.: Прогресс, «Пангея», 1994. 304 С.

67. Минпромторг России прогнозирует рост производства полиэтилена в 2011 году // http://www.volgahimplast.ru/news/201 ЦттргопШэга-гоззп-рго2пог1ше^го5^рго1гуоё5^а-роНеЬи1епа/ (посещуние 20.022011)

68. Мишин В. Ю. Эффективность лечения туберкулеза легких, вызванного микобактериями с множественной лекарственной устойчивостью / В.Ю. Мишин, В.И. Чуканов, И.А. Васильева // Проблемы туберкулеза. 2002. -№ 12. - С.18-23.

69. Муминов Т. А. Лечение туберкулеза легких в современных условиях / Т.А. Муминов, Г. А Смаилова, И. Г. Цой //. Алматы, - 2002 - 192 С.

70. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика» Второе издание. М.: Издательский дом «Русский врач». - 2006. - 100 С.

71. Никишина М.В. Рестрикционный анализ гена И-ацетилтрансферазы (МАТ2) у европеоидов Западной Сибири / Никишина М.В., Макарова С.И., Акишев А.Г., Вавилин В. А., Дегтярев С.Х., Ляхович В.В. // Генетика. 2004. - Том 40, № 11. - С. 1557-1561.

72. Никонов А.Н. Апгрейд обезьяны. Большая история маленькой сингулярности / ЭНАС, 2004 204 С.

73. Обзорная сводка о состоянии здоровья в Российской Федерации 2005 http://www.euro.who.int/document/e88405r.pdf88.0городова Л.М. Тяжелая бронхиальная астма у детей // Consilium Medicum (приложение). 2001. - С. 25- 33.

74. Осташевский В.А., Наров Ю.Э., Цырлов И.Б. Определение активности бензоа.пиренгидроксилазы у больных раком легкого // Вопросы онкологии. 1987. - Т. 11. - С. 62-65.

75. Павлова М. Демографический переход в Японии: теоретический аспект // Демоскоп Weekly. № 361-362. - 2009.- http://demoscope.ru/weeklv/2009/ 0361/studentQl .php (посещение 13.02.2009)

76. Панов А.Д. Кризис планетарного цикла Универсальной истории и возможная роль программы SETI в посткризисном развитии // http://lnfml.sai.msu.m/SETI/koi/articles/krizis.html. 2003.

77. Патрушев Л.И. Экспрессия генов. М.: Наука, 2000. - 830 С.

78. Папгутин С.Б. Хвори разных народов // Химия и жизнь. 2005. - № 12. -http://elementy.ru/lib/l 64690/164691 ?pagedesign=print

79. Полонников А.В. Полиморфизм генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков и их комплексное влияние на предрасположенность к мультифакториальным заболеваниям / Автореферат дисс. на соиск. учёной степени доктора медицинских наук, Москва. 2006. - 48С.

80. Пузырёв В.П., Степанов В.А. Патологическая анатомия генома человека. -Новосибирск: Наука, 1997. 224 С.

81. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTIC А. М.: МедиаСфера. - 2003. -312 С.

82. Ревич Б.А., Авалиани C.JL, Тихонова Г.И. Экологическая эпидемиология. Учебник для высших учебных заведений / Под ред. Ревича Б.А.- М.: Издательский центр «Академия». 2004. - 384 С.

83. Ревич Б.А., Быков А. Загрязнение воздуха как фактор смертности в городах России // Население и общество. 1999. - № 22. - 4 С.

84. Ревнова М.О., Ладинская Л.М. Диагностика, дифференциальная диагностика и принципы лечения синдрома бронхиальной обструкции у детей раннего возраста // Педиатрия. 1995. - № 5. - С. 97-100.

85. Ревякина В. А. Дермо-респираторный синдром / Ревякина В. А., Казначеева Л. Ф., Молокова А. В., Денисов М. Ю. // Аллергология. 2000. -№ 4. С. 42-44.

86. Ревякина В.А. Коростовцев Д.С. Атопический дерматит: роль цитокинов в механизмах развития. // Аллергология. 2000. - Т. 4. - С. 4244.

87. Самойлова А.Г. Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза Актуальная проблема фтизиатрии / А.Г. Самойлова, А.О. Марьяндышев // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - 2005. - № 7 -С. 3-8.

88. Свердлов Е.Д. Микрокосм генома // Молекулярная биология. 1999. -Т. 33, №6.-С. 917-940.

89. Семенова В.Г. Обратный эпидемиологический переход в РОССИИ // М.: ЦСП. 2005. - 235 С.

90. Скрипкин Ю.К., Шеклакова М.Н., Масюкова С.А. Атопический дерматит. // Русский медицинский журнал 1999. - Т.7, №. 14. - С. 34-37.

91. Скучалина Л.Н., Старосветова E.H., Гавриш Л.Н. Распространённость симптомов бронхиальной астмы, аллергического ринита и аллергодерматозов у детей Северного Казахстана по критериям ISAAC // Аллергология. 2001. - № 1. - С. 10-15.

92. Смоленов И.В., Смирнов H.A. Естественное течение бронхиальной астмы // Consilium Medicum (приложение). 2001. - С. 14-16.

93. Смолкин Ю. С., Чебуркин А. А., Ревякина В. А. Механизмы развития атопического дерматита у детей (обзор литературы) // Росс. Вестник перинатологии и педиатрии. 2000. - № 3. - С. 25-29.

94. Соломон Д.М. Астма и окружающая среда // http://www.ecoaccord.org/ pop/che/chel .doc (Последняя редакция: 10 апреля 2003 г.)

95. Спицын В.А. Биохимический- полиморфизм человека. Антропологические аспекты (монография) / М.: Изд-во МГУ.- 1985. 214 С.

96. Спицын В.А. Полиморфизм в генах человека, ассоциирующихся с биотрансформацией ксенобтотиков / Спицын В.А., Макаров C.B., Пай Г.В., Бычковская Л.С. // Вестник ВОГиС. 2006. - Т. 10, № 1. - С. 97-105.

97. Справочник по иммунотерапии для практического врача / Ред. Симбирцев A.C. Санкт-Петербург: Изд-во «Диалог». - 2002. - 450 С.

98. Туберкулёз. Особенности течения, возможности фармакотерапии. Учебное пособие для врачей / под редакцией проф. А. К. Иванова. СПб., 2009. - 108 С.

99. Убайдуллаев A.M. Применение лимфотропной терапии при комплексном лечении больных туберкулезом легких с сопутствующей патологией / A.M. Убайдуллаев, В.Г. Белоцерковец // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - № 12. - С. 50-52.

100. Уйба В.В., Максимов Г.К., Максимов А.Г. СПИД как социально-значимое заболевание в свете показателей современной теориизаболеваемости // Русский журнал «СПИД, рак и общественное здоровье». -2008.-Т. 12, № 2. С.34.

101. Фёдорова Ю.Ю. Анализ генов предрасположенности к развитию бронхиальной астмы в республике Башкортостан // автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук. -Уфа.-2009.-23 С.

102. Фейгин B.JI. Основы мета-анализа: теория и практика // Международный журнал мед. практики. 1999. - N. 7. // http://www.mediasphera.rU/mimp/99/7/r7-99-l .htm (посещение 12.02.2009).

103. Флетчер Р., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины // Пер. с англ.- М.: Медиа Сфера, 1998. -532 С.

104. Фрейдин М.Б. Генетические основы подверженности к бронхиальной астме // в сб. Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике. 2001. - Издательский дом «Манускрипт». - С. 130-141.

105. Харламова Ю.М. Клинико- биохимическая характеристика больных туберкулезом легких с сопутствующими хроническими гепатитами В и/или С: Автореферат диссертации-, на соискание уч. степени кандидата медицинских наук. Новосибирск. - 2005. - 18 С.

106. Химическая промышленность Индии // http://www.chemweek.ru /issledovaniya/chemical-industry-india.htm ( посещение 9.12.2008).

107. Химический рынок Австрии // http://www.chemweek.ru /issledovaniya/CHEMICALS-MARKET-IN-AUSTRIA.htm (13.12.2008)

108. Хузина А.Х. Анализ генов предрасположенности к аллергическому риниту в республике Башкортостан / Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук. Уфа. - 2008. -23 С.

109. Человеческое развитие: новое измерение социально-экономического прогресса. Учебное пособие под общей редакцией проф. В.П. Колесоваэкономический факультет МГУ), 2-е издание, дополненное и переработанное. М.: Права человека, 2008. - 636 С.

110. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма / А.Г. Чучалин М.: Изд. дом «Русский врач», 2001. - 144 С. - (Прил. к журн. «Врач»),

111. Чучалин А.Г. Распространенность и клинико-аллергологическая характеристика бронхиальной астмы в Восточной Сибири / Чучалин А.Г., Черняк Б.А., Буйнова С.Н. Тяренкова C.B. // Пульмонология. 1999. - № 1.-С. 42-49.

112. Шамов Б. А., Маланичева Т. Г., Закиев Р. 3. Распространённость аллергодерматозов в условиях загрязнения окружающей среды // Вестник дерматологии и венерологи. 1997. - № 1. - С. 17-19.

113. Шилова М. В. Туберкулез в России в конце XX века / М. В Шилова. // Проблемы туберкулеза. 2001. - № 5. - С. 8-13.

114. Шилова М. В. Эффективность лечения больных туберкулезом на современном этапе / М. В. Шилова, Т. С. Хрулева // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2005. - № 3. - С. 3-11.

115. Экологические аспекты медицины / Под ред. Гичева Ю.П. -Новосибирск, 1995. 174 С.

116. Экологические проблемы: что происходит, кто виноват и что делать?: Учебное пособие / Под ред. Проф. В. И. Данилова Даниляна. — М.: Изд-во МНЭПУ, 1997. — 332 С.

117. Экология и здоровье детей / Под ред. Студеникина М.Я., Ефимовой A.A. -М.: Медицина. 1998. - 383 С.

118. Экономический рост сопровождается увеличением выбросов в атмосферу загрязняющих веществ// Демоскоп Weekly. № 173-174. -2004 (http://demoscope.ru/weekly/2004/0173)

119. Экономический рост сопровождается увеличением выбросов в атмосферу загрязняющих веществ// Демоскоп Weekly. № 173-174. -2004 (http://demoscope.ru/weekly/2004/0173)

120. Abdel-Alim S.M. Association of glutathione-S-transferase PI genotypes with susceptibility to bronchial asthma in children / Abdel-Alim S.M., El-Masry M.M., Aziz M., El-Bassiony S.O., Aly A.A. // Arch Med Sci. -2007. -Vol. 3.-P. 200-2007.

121. Afaq F. Aryl hydrocarbon receptor is an ozone sensor in human skin / Afaq F., Zaid M.A., Pelle E., Khan N., Syed D.N., Matsui M.S., Maes D., Mukhtar H. // J Invest Dermatol. 2009. - Vol. 129, N. 10. - P. 2396-2403.

122. Alexandrov K., Rojas M., Rolando C. DNA Damage by Benzo(a)pyrene in Human Cells Is Increased by Cigarette Smoke and Decreased by a Filter Containing Rosemary Extract, Which Lowers Free Radicals // Cancer Res. -2006. Vol. 66, N. 24. - P. 11938-11945.

123. Allan J.M., Wild C.P., Rollinson S. Polymorphism in glutathione S-transferase PI is associated with susceptibility to chemotherapy-induced leukemia. // Proc. Natl. Acad. Sci. 2001. - V. 98. - P. 11592-11597.

124. Altshuler D., Kruglyak L., Lander E. Genetic polymorphisms and disease // N. Engl. J. Med. 1998. Vol. 338, N 22. - P. 1626.

125. Anderson G.G., Cookson W.O. Recent advances in the genetics of allergy and asthma // Mol. Med. Today. 1999. - Vol. 5, N. 6. - P. 264-273.

126. Anitha A., Banerjee M. Arylamine N-acetyltransferase 2 polymorphism in the ethnic populations of South India // Int. J. Mol. Med. 2003. - Vol. 11, N. l.-P. 125-131.

127. Armstrong R.N. Mechanistic imperatives for the evolution of glutathione transferases. // Current Opinion in Chemical Biology. 1998. - V. 2. - P. 618623.

128. Au W.W. Susceptibility of children to environmental toxic substances // Int. J. Hyg. Environ. Health. 2002. - Vol. 205, N 6. - P. 501-503.

129. Awasthi S. Interaction of glutathione S-transferase-pi with ethacrynic acid and its glutathionic conjugate / Awasthi S., Srivastava S.K., Ahmad F., Ahmad H., Ansari G.A. // Biochim Biophys Acta. 1993. -Vol. 1164. - P. 173 -178.

130. Aynacioglu A.S. Protective role of glutathione S-transferase PI (GSTP1) Vall05Val genotype in patients with bronchial asthma / Aynacioglu A.S., Nacak M., Filiz A., Ekinci E., Roots I. // Br J Clin Pharmacol. -2004. Vol. 57. -P. 213-217.

131. Balmes J.R., Fine J.M., Sheppard D. Symptomatic bronchoconstriction after short-term inhalation of sulfur dioxide // Am Rev Respir Dis. 1987. -Vol.136, №5.-P. 1117-1121.

132. Barnes K.S. Gene-environmental and gene-gene interaction studies in the molecular genetic analysis of asthma and atopy // Clin. Exp. Allergy. 1999. -Vol. 29, Suppl (4). - P.47-51.

133. Barnes P.J. Endogenous inhibitory mechanisms in asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 161, N 3 (Pt 2). - S176-S181.

134. Barnes P.J. Cytokine modulators for allergic diseases // Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. 2001. - Vol. 1, N. 6. - P. 555-560.

135. Batra J., Sharma S.K., Ghosh B. Arylamine N-acetyltransferase gene polymorphisms: markers for atopic asthma, serum IgE and blood eosinophil counts // Pharmacogenomics. 2006. -Vol 7, N 5. - P. 673-682.

136. Benson A. M. Elevation of extrahepatic glutathione S-transferase and epoxide hydratase activities by 2(3)-tert-butyl-4-hydroxyanisole / Benson A.M., Cha Y.N., Bueding E., Heine H.S., Talalay P. // Cancer Res. 1979: - Vol. 39, N. 8.-P. 2971-2977.

137. Beskett G. J., Hayes J. D. Glutathione S-transferases: biomedical applications // Adv. Clin. Chem. 1993. - Vol. 30. - P. 281- 380.

138. Biehl J. P. Emergence of drug resistance as related with as related to the dosage and metabolism of isoniazid // Trans. 16th Conf. Chemother. Tuberc. -Washington D.C.: U.S. Veterans Adm. Army Navy. 1957. - P. 108-113.

139. Bleibel W. Drug-induced liver injury: review article / Bleibel W., Kim S., D'Silva K., Lemmer E.R. // Dig. Dis. Sci. 2007. - Vol. 52, N. 10. - P. 24632471.

140. Bowler R. P. Oxidative Stress in the Pathogenesis of Asthma // Current Allergy and Asthma Reports. 2004, Vol. 4. - P. 116-122.

141. Brockmoller J. Genotype and phenotype of glutathione S-transferase class 11 and \|/ in lung cancer patient and controls / Brockmoller J, Kerb R, Drakoulis N, Nitz M, Roots I. // Cancer Res. 1993. - Vol.53. - P. 1004-1011.

142. Brown D.M. The Effects of PM10 Particles and Oxidative Stress on Macrophages and Lung Epithelial cells: Modulating Effects of Calcium Signalling Antagonists / Brown DM, Hutchison L, Donaldson K, Stone V. //

143. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2007. - Vol. 292, N 6. - P. L1444-L14451.

144. Brunekreef B. Air pollution from truck traffic and lung function in children living near motorways / Brunekreef B., Janssen N. A., de Hartog J., Harssema H., Knape M., van Vliet P. // Epidemiology. 1997. - Vol. 8, N 3. - P. 298303.

145. Bulovskaya L.N. Acetylator phenotype in patients with breast cancer / Bulovskaya L.N., Krupkin R.G., Bochina T.A., Shipkova A.A., Pavlova M.V. // Oncology. 1978. - Vol. 35, N. 4. - P. 185-188.

146. Burney P.G., Chinn S., Rona R J. Has the prevalence of asthma increased in children? Evidence from the national study of health growth 1073 86 // Dr. Med. J. - 1990. - Vol. 300. - P. 1306-1310.

147. Burr M.L. Is asthma increasing ? J. Epidemiol. Community Health. 1987. -N31.-P. 80-102.

148. Butcher N.J. Induction of human arylamine N-acetyltransferase type I by androgens in human prostate cancer cells / Butcher N.J., Tetlow N.L., Cheung

149. C., Broadhurst G.M., Minchin R.F. // Cancer Res. 2007. -Vol. 67, N. 1. - P. 85-92.

150. Cakmak S., Dales R.E., Vidal C.B. Air pollution and mortality in Chili Susceptibility among elderly // Environ. Health Perspect. 2007. - Vol. 115, N 4. - P. 524-527.

151. Cao W. N-acetyltransferase 2 activity and folate levels / Cao W., Strnatka

152. D., McQueen C.A., Hunter R.J., Erickson R.P.// Life Sci. 2010/ - Vol. 86, N. 3-4.-P. 103-106.

153. Carpenter C.L., Yu M.C., London S.J. Dietary isothiocyanates, glutathione S-transferase Ml (GSTM1), and lung cancer risk in African Americans and Caucasians from Los Angeles County, California // Nutr Cancer. 2009. - Vol. 61, N. 4. -P.492 - 499.

154. Chekharina Y.A. Activity of N-acetyltransferase in patients with malignant lymphomas / Chekharina Y.A., Bulovskaya L.N., Pavlova M.V., Kurkin R.G. // Neoplasma. 1978. - Vol. 25. - P. 471-475.

155. Cheng K.C. Ketoprofen-inhibited N-acetyltransferase activity and gene expression in human colon tumor cells / Cheng K.C., Li Y.C., Yu C.S., Yu F.S., Lee J.H., Lin M.L., Yang J.S., Chung J.G. // Anticancer Res. 2006. - Vol. 26, N. 2A.-P. 1105-1111.

156. Chung J., Oh S.Y., Shin Y.K. Association of glutathione-S-transferase polymorphisms with atopic dermatitis risk in preschool age children // Clin. Chem. Lab. Med. 2009. - Vol. 47, N. 12. - P. 1475-481.

157. Chung J., Oh S.Y., Shin Y.K. Association of glutathione-S-transferase polymorphisms with atopic dermatitis risk in preschool age children // Clin. Chem. Lab. Med. 2009. - Vol. 47, N. 12. - P. 1475-1481.

158. Codlin S.Characterization of a palindromic enhancer element in the promoters of IL4, IL5, and IL13 cytokine genes /Codlin S., Soh C., Lee T., Lavender P. // J. Allergy Clin. Immunol. 2003. - Vol. 111, N 4. - P. 826-832.

159. Conney A. H., Miller E. C., Miller J. A. Substrate-induced synthesis and other properties of benzpyrene hydroxylase in rat liver // J. Biol. Chem. 1957. - Vol. 228, N. 2. P. - 753-766.

160. Contopoulos-Ioannidis D.G., Kouri I.N., Ioannidis J.P. Genetic predisposition to asthma and atopy // Respiration: 2007. - Vol. 74, N. 1. - P. 8-12.

161. Czajka-Oraniec I., Simpson E.R. Aromatase research and its clinical significance // Endokrynol. Pol. 2010. - Vol. 61, N. 1. - P. 126-134.

162. Daly A. K., Fairbrother K. S., Smart J. Recent advances in understanding the molecular basis of polymorphisms in genes encoding cytochrome P450 enzymes // Toxicol Lett. 1998. - Vol. 102-103, P. 143-147.

163. Dannan G.A., Sleight S.D., Aust S.D. Toxicity and microsomal enzyme induction effects of several polybrominated biphenyls of Firemaster // Fundam. Appl. Toxicol. 1982. -Vol. 2, N. 6. -P. 313-321.

164. De Flora S. Molecular epidemiology of atherosclerosis / De Flora S., Izzotti A., Watsh D., Degan P., Petrilli G.L., Lewtas J. // FASEB Journal. 1997. -Vol. 11.-P. 1021-1031.

165. DeJong J.L. Gene expression of rat and human microsomal glutathione S-transferases / DeJong J.L., Morgenstern R., Jornvall H., Deprierre J.W., Tu C.-P.D. // J. Biol. Chem. 1988. - Vol. 263. - P. 8430-8436.

166. Denison M S., Fisher J. M., Whitlock J.P. Jr. Inducible, receptor-dependent protein-DNA interactions at a dioxin-responsive transcriptional enhancer // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - Vol. 85, N. 8. - P. 2528-2532.

167. Dixie E. The Global Threat of Drug- Resistant Tuberculosis / E.Dixie. Snider, G. Kenneth. Castro // The New England Journal of Medicine. 1998. -Vol. 338. - N 23. - P. 1689-1690.

168. Dye C. Incidence of multidrug-resistant tuberculosis / Dye C., Espinal M.A., Watt C.J., Mbiaga C., Williams B.G. // J Infect Dis. 2002. - Vol. 185, N. 8. -P. 1197-1202.

169. Estrada-Rodgers L., Levy G. N., Weber W. W. Characterization of a hormone response element in the mouse N-acetyltransferase 2 (Nat2) promotor // Gene Expr. 1998. - Vol. 7, N 1. - P. 13-24.

170. Evans D.A.P. Survey of the human-acetylator polymorphysm in spontaneous disorders // J. med. Genet. 1984. - Vol. 21. - P. 243-253.

171. Evans D.A.P. N-acetyltransferase // Pharmacol. Ther. 1989. - Vol. 42. - P. 157-234.

172. Fajardo T. T. A clinical trial of ethionamide and prothionamide for treatment of lepromatous leprosy / Fajardo T.T., Guinto R.S., Cellona R.V., Abalos R.M., Dela Cruz E.C., Gelber R.H. // Am. J. Trop. Med. Hyg. 2006. - Vol. 74, N. 3. -P. 457-461.

173. Fedorova Yu. Yu. Association of Polymorphisms of Xenobiotic Metabolism Genes with Childhood Atopic Diseases in Russian Patients from Bashkortostan

174. Fedorova Yu. Yu., Gra O. A., Karunas A. S., Khuzina A. Kh., Ramazanova N. N.,Yuldasheva A. A., Biktasheva A. R., Etkina E. I., Nasedkina T. V., Goldenkova-Pavlova I. V., Khusnutdinova E. K. //Molecular Biology. 2009. -Vol. 43, N. 6.-P. 961-967.

175. Fleming I. Cytochrome P450 and Vascular Homeostasis // Circulation Res.2001. Vol. 89. - P. 753-762.

176. Frei T., Gassner E. Trends in prevalence of allergic rhinitis and correlation with pollen counts in Switzerland // Int J Biometeorol. 2008. - Vol.52, N 8. -P. 841-847.

177. Freidin M.B. Association of polymorphisms in the human IL4 and IL5 genes with atopic bronchial asthma and severity of the disease / Freidin M.B., Kobyakova O.S., Ogorodova L.M., Puzyrev V.P. // Comp. Funct. Genom. -2003.-Vol. 4.-P. 346-350.

178. Freidin M.B. Polymorphism of the Glutathione S-Transferase Genes (GSTT1, GSTM1) in West Siberian Patients with Atopic Bronchial Asthma / Freidin M.B., Bragina E.Yu., Ogorodova L.M., Puzyrev V.P. // Mol. Biol.2002. Vol. 36, No. 4. - P. 493-496.

179. Freimer N., Sabatti C. The human phenome project // Nat Genet. 2003. -Vol. 34, N. l.-P. 15-21.

180. Friebele E. The attack of asthma // Environ. Health Perspect. 1996. - Vol. 104, N l.-P. 22-25.

181. Funk M. CYP2C9*2 and CYP2C9*3 Alleles Confer a Lower Risk for Myocardial Infarction / Funk M., Endler G., Freitag R:, Wojta J., Huber R., Mannhalter C., Sunder-Plassmann R. // Clinical Chemistry. 2004. - Vol. 50. -P. 2395-2398.

182. Gallagher E. P:, Gardner Jl L. Comparative expression of two alpha class glutathione S-transferases in human adult and prenatal liver tissues // Biochem. Pharmacol. 2002. - Vol. 63, N. 11. - P. 2025-2036.

183. Garcia-Martin E. Interethnic and Intraethnic Variability of NAT2 Single Nucleotide Polymorphisms // Current Drug Metabolism. 2008. - Vol. 9, N. 6. P. 487-497.

184. Garte S. Metabolic susceptibility genes as cancer risk factors: time for a reassessment // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2001. - Vol. 10, N 12. -P. 1233-1240.

185. Gauthier J.C. Contribution of human cytochromes P450 metabolism, as predicted from heterologous expression in yeast / Gauthier J.C., Lecoeur S.,

186. Cosme J., Perret A., Urban P., Beaune P., Pompon D. // Pharmacogenetics. -1996.-Vol. 6.-P. 489-499.

187. Gavett S.H., Koren H.S. The role of particulate matter in exacerbation of atopic asthma // Int. Arch. Allergy Immunol. 2001. - Vol. 124, N 1-3. - P. 109-112

188. Gervasi P.G. Xenobiotic-metabolizing enzymes in human respiratory nasal mucosa / Gervasi P.G., Longo V., Naldi F., Panattoni G., Ursino F. // Biochem. Pharmacol. 1991. - Vol. 41, N 2. - P. 177-184.

189. Gil J.P., Lechner M.C. Increased frequency of wild-type arylamine-N-acetyltransferase allele NAT2*4 homozygotes in Portuguese patients with colorectal cancer // Carcinogenesis. 1998. - Vol. 19, N. 1. - P. 37-41.

190. Glowinski I.B., Radtke H.E., Weber W.W. Genetic variation in N-acetylation of carcinogenic arylamines by human and rabbit liver // Mol. Pharmacol. 1978. - Vol. 14, No 5. - P. 940-949.

191. Gomez-Lechon M. J. Human hepatocytes as a tool for studying toxicity and drug metabolism / Gomez-Lechon M.J., Donato M.T., Castell J.V., Jover R. // Curr Drug Metab. 2003. - Vol. 4, N. 4. - P. 292-312.

192. Grant D. M. Molecular genetics of the N- acetyltransferases // Pharmacogenetics. 1993. - Vol. 3. - P. 45-50.

193. Gronhagen-Riska C., Hellstrom P.E., Froseth B. Predisposing factors in hepatitis induced by isoniazid-rifampin treatment of tuberculosis // Am. Rev. Respir. Dis. 1978. - Vol. 118, N. 3. - P. 461-466.

194. Guengrich F. P. Reactions and significance of cytochrome P-450 enzymes // J. Biol. Chem. 1991. - Vol. 266, N 16. - P. 10019-10022.

195. Haby M. M., Peat J. K., Marks G. B. Asthma in preschool children: prevalence and risk factors // Thorax. -2001. Vol. 56, №8. - P.589 -595.

196. Hall P. Interleukin-4 receptor a gene variants and allergic disease // Respir. Res.-2000.-Vol. 1-P. 6-8.

197. Hasnain S.M. Prevalence of asthma and allergic rhinitis among school children of Karachi, Pakistan, 2007 / Hasnain S.M., Khan M., Saleem A., Waqar M.A. // J. Asthma. 2009. - Vol. 46, N 1. -P. 86-90.

198. Hayes J.D., Flanagan J.U., Jowsey I.R. Glutathione transferases // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2005. - Vol. 45. - P. 51-88.

199. Hayes J.D., Pulford D.J. The glutathione S-transferase supergene family: regulation of GST and the contribution of the isoenzymes to cancer chemoprotection and drug resistance // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 1995. -Vol. 30, N. 6.-P. 445-600.

200. Hein D. W. Acetylator genotype and arylamine-induced carcinogenesis // Biochim. Biophys. Acta. 1988. - Vol. 948. - P. 37-66.

201. Helms PEarly environmental influences in the development of asthma and atopic disease // Monaldi Arch. Chest Dis. 2001. - Vol. 56, N 3. - P. 265-269.

202. Hess D.A., Rieder M.J. The role of reactive drug metabolites in immunemediated adverse drug reactions // Ann. Pharmacother. 1997. - Vol. 31, N 11. -P. 1378-1387.

203. Hickman D. Enzyme kinetic properties of human recombinant arylamine N-acetyltransferase 2 allotypic variants expressed in Escherichia coli / Hickman D., Palamanda J.R., Unadkat J.D., Sim E. // Biochem. Pharmacol. 1995. -Vol. 50, N. 5.-P. 697-703.

204. Hickman D. Expression of arylamine N-acetyltransferase in human intestine / Hickman D., Pope J., Patil S.D., Fakis G., Smelt V., Stanley L.A., Payton M., Unadkat J.D., Sim E. // Gut. 1998. - Vol.42, N 3. -P. 402-409.

205. Hickman D., Sim E. N-acetyltransferase polymorphism. Comparison of phenotype and genotype in humans // Biochem. Pharmacol.- 1991. Vol. 42, N. 5.-P. 1007-1014.

206. Hirvonen A. The GSTM1 null genotype as a potential risk modifier for squamous cell carcinoma of the lung / Hirvonen A., Husgafvel-Pursiainen K., Anttila S., Vainio H. // Carcinogenesis. 1993. - Vol.14. - P. 1479-1481.

207. Hoffman E.C. Cloning of a factor required for activity of the Ah (dioxin) receptor / Hoffman E.C., Reyes H., Chu F.F., Sander F., Conley L.H., Brooks B.A., Hankinson O. // Science. 1991. - Vol. 252, N. 5008. - P.954-958.

208. Holgate S. The epidemic of allergy and asthma // Nature. 1999. - Vol. 402, Suppl. - P. 2-4.

209. Holt P.G. Environmental antigens and atopic disease: underlying mechanisms and prospects for thearapy and prophylaxis // Mol. Med. Today.-1995. Vol.1, № 6. - P. 292-298.

210. Holt P.G., Jones C.A. The development of the immune system during pregnancy and early life // Allergy. 2000. - Vol. 55, N 8. - P. 688-697

211. Home Page of the Human Cytochrome P450 (CYP) Allele Nomenclature Committee // http://www.cypalleles.ki.se/ (последнее обновление 2008)

212. Honda I. Occupational asthma induced by the fungicide tetrachloroisophthalonitrile / Honda I., Kohrogi H., Ando M., Araki S., Ueno Т., Futatsuka M., Ueda A. // Thorax. 1992. - Vol. 47, N 9. - P. 760-761.

213. Honkakoski P., Negishi M. Regulation of cytochrome P450 (CYP) genes by nuclear receptors // Biochem. J. 2000. - Vol. 347. - P. 321- 337.

214. Horvath T. Sulfadimidine kinetics in patients with various chronic liver diseases / Horvath Т., Past Т., Par A., Kadas I., Javor T. // Pol. J. Pharmacol. Pharm. 1988. - Vol. 40. - P. 257-264.

215. Huang Y.S. Genetic polymorphisms of drug-metabolizing enzymes and the susceptibility to antituberculosis drug-induced liver injury // Expert Opin. Drug Metab. Toxicol. 2007. - Vol. 3, N. 1. - P. 1-8.

216. Human NAT2 alleles (Haplotypes) // http://www.louisville.edu/ medschool/phaimacology/NAT.html. (last update novemder 2010)

217. Hume R. The ontogeny of key endoplasmic reticulum proteins in human embryonic and fetal red blood cells /Hume R., Burchell A., Allan B.B., Wolf C.R., Kelly R.W., Hallas A., Burchell B. // Blood. 1996. - Vol. 87, N. 2. - P. 762-770.

218. Huss K., Huss R.W. Genetics of asthma and allergies // Nurs Clin. North Am. 2000. - Vol.35, N 3. - P. 695-705.

219. Infante-Rivard C. Maternal smoking and childhood asthma / Infante-Rivard C., Gautrin D., Malo J.L., Suissa S. // Am J Epidemiol. 1999. - Vol. 150, N. 5.-P. 528-531.

220. Ishii T., Matsuse T., Teramoto S. et al. Glutatione S-transferase PI (GSTP1) polymorphism in patients with chronic obstructive pulmonary disease // Thorax. 1999. - V. 54.-P. 693-696.

221. Ivaschenko T.E., Sideleva O.G., Baranov V.S. Glutathione- S-transferase micro and theta gene polymorphisms as new risk factors of atopic bronchial asthma // J. Mol. Med. 2002. - Vol. 80, N. 1. - P. 39- 43.

222. Jacqz-Aigrain E., Cresteil T. Cytochrome P450-dependent metabolism of dextromethorphan: fetal and adult studies // Dev Pharmacol Ther. 1992. -Vol. 18, N. 3-4.-P. 161-168.

223. Jakulin A., Bratko I. Testing the significance of attribute interactions // Proceedings of the twenty-first international conference on Machine learning, Banff, Canada, 2004.

224. Johnson N. NAT gene polymorphisms and susceptibility to Alzheimer's disease: identification of a novel NAT1 allelic variant / Johnson N., Bell P., Jonovska V., Budge M., Sim E. // BMC Med Genet.- 2004. Vol. 5. - P.6.

225. Jones C. A., Holt P. G. Immunopathology of allergy and asthma in childhood // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 162, N 2(Pt 2). - P. S36-S39.

226. Jorres R., Nowak D., Magnussen H. The effect of ozone exposure on allergen responsiveness in subjects with asthma or rhinitis // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1996. - Vol. 153, N 1. - P. 56-64.

227. Kawaguchi M. Role of interleukin-17F in asthma / Kawaguchi M., Kokubu F., Fujita J., Huang S.K., Hizawa N. // Inflamm Allergy Drug Targets. 2009. -Vol. 5.-P. 383-389.

228. Kawajiri K. Association of CYP1A1 germ line polymorphisms with mutations of the p53 gene in lung cancer /Kawajiri K., Eguchi H., Nakachi K., Sekiya T., Yamamoto M. // Cancer Res. 1996. - Vol. 56, N. 1. - P. 72-76.

229. Kawajiri K. Identification of genetically high risk individuals to lung cancer by DNA polymorphisms of the cytochrome P450IA1 gene / Kawajiri K., Nakachi K., Imai K., Yoshii A., Shinoda N., Watanabe J. // FEBS Lett. 1990. -Vol. 263, N. l.-P. 131-133.

230. Kellerman G. Shaw C.R., Luyten-Kellerman M. Arylhydrocarbon hydroxylase inducibility and bronchogenic carcinoma // N. Eng. J. Med. -1973. Vol. 289. - P. 934-937.

231. Khoury M.J., James L.M. Population and familial relative risks of disease associated with environmental factors in the presence of gene-environment interaction // Am. J. Epidemiol. 1993. - Vol. 137, N. 11. - P. 1241-1250.

232. Kinney P.L. Exposures to multiple air toxics in New York City / Kinney P. L., Chillrud. S. N., Ramstrom S., Ross J., Spengler J. D. // Environ. Health Perspect.-2002. Vol. 110, Suppl 4. - P. 539-546.

233. Klinchid J. Effect of combined genetic polymorphisms on lung cancer risk in northern Thai women / Klinchid J:, Chewaskulyoung B., Saeteng S., Lertprasertsuke N., Kasinrerk W., Cressey R. // Cancer Genet. Cytogenet. -2009. Vol. 195, N. 2. - P. 143-149.

234. Koley A.P.CO Binding kinetics of human cytochrome P4503A4 / Koley A.P., Butters J.T.M., Robinson R.C., Markowitz A., Friedman F. K. // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270. - P. 5014-5018.

235. Koop D.R. Oxidative and reductive metabolism by cytochrome P450 2E1 // FASEB J. 1992. - Vol. 6, No 2. - P. 724-730.

236. Krishna N.S. Age- and gender-related trends in the expression of glutathione S-transferases in human nasal mucosa / Krishna N.S., Getchell T.V., Dhooper

237. N., Awasthi Y.C., Getchell M.L. // Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 1995. - Vol. 104, N10 (Pt 1).-P. 812-822.

238. Kuhn U.D. Phenotyping with sulfasalazine time dependence and relation to NAT2 pharmacogenetics /Kuhn U.D., Anschütz M., Schmücker K., Schug B.S., Hippius M., Blume H.H. // Int. J. Clin. Pharmacol. Ther. - 2010. - Vol. 48, N. l.-P. 1-10.

239. Kuntz E., Kuntz H.-D. Drug-induced liver damage / In Hepatology and Practice. History, Morphology, Biochemistry, Diagnostics, Clinic, Therapy (Original German edition published by Verlag, J.A.B., Heidelberg, Leipzig,1998, 2nd ed., 2006. - P. 541-562.

240. Kurinczuk J.J. The relationship between asthma and smoking during pregnancy / Kurinczuk J.J., Parsons D.E., Dawes V., Burton P.R. // Women Health. 1999. -Vol. 29, N 3. - P. 31-47.

241. Kurz H., Riedler J. An increase in allergic diseases in childhood current hypotheses and possible prevention // Wien Med. Wochenschr. - 2003. - Vol. 153, N. 3-4. P. 50-58.

242. Lacroix C. Pharmacokinetics of pyrazinamide and its metabolites in healthy subjects / Lacroix C., Hoang T.P., Nouveau J., Guyonnaud C., Laine G., Duwoos H., Lafont O. // Eur. J. Clin. Pharmacol. 1989. - Vol. 36, N. 4. - P. 395-400.

243. Laitinen T. Gene Mapping in Asthma-Related Traits // Methods in Molecular Biology. 2007. - Vol. 376. - P. 213-234.

244. Lee B.L. Altered patterns of drug metabolism in patients with acquired immunodeficiency syndrome / Lee B.L., Wong D., Benowitz N.L., Sullam P.M. // Clin. Pharmacol. Ther. 1993. - Vol. 53, N. 5. - P. 529-535.

245. Lee W.M. Drug-induced hepatotoxicity // N. Engl. J. Med. 2003. - Vol. 349, N. 5.-P. 474-485.

246. Leeder J.S. Mechanisms of idiosyncratic hypersensitivity reactions to antiepileptic drugs // Epilepsia. 1998. - Vol. 39, Suppl 7. - P. S8-S16.

247. Leeder J.S., Lu X., Timsit Y., Gaedigk A. Non-monooxygenase cytochromes P450 as potential human autoantigens in anticonvulsant hypersensitivity reactions // Pharmacogenetics. 1998. - Vol. 8, N. 3. - P. 211225.

248. Lewis S.J. Associations between smoking, GST genotypes and N7-methylguanine levels in DNA extracted from bronchial lavage cells /Lewis S.J., Cherry N.M., Niven R.M., Barber P.V., Povey A.C. // Mutat Res. 2004. -Vol. 559, N. 1-2.-P. 11-18.

249. Lombardo L.J., Balmes J.R. Occupational asthma: a review // Environ Health Perspect. 2000. - Vol.108, Suppl 4. - P. 697-704.

250. Lovell M. A., Xie C., Markesbery W. R. Decreased glutathione transferase activity in brain and ventricular fluid in Alzheimer's disease // Neurology. -1998. Vol. 51, N 6. - P. 1562-1566.

251. Lu H.F. Ellagic acid inhibits growth and arylamine N-acetyltransferase activity and gene expression in Staphylococcus aureus / Lu H.F., Tsou M.F., Lin J.G., Ho C.C., Liu J.Y., Chuang J.Y., Chung J.G. // In Vivo. 2005. - Vol. 19, N. l.-P. 195-199.

252. Lück H. MMesalazine pharmacokinetics and NAT2 phenotype / Lück H., Kinzig M., Jetter A., Fuhr U., Sorgel F.// Eur. J. Clin. Pharmacol. 2009. -Vol. 65, N. l.-P. 47-54.

253. Makarova S. I. Human N-acetyltransferases and drug-induced hepatotoxicity // Curr. Drug Metab. 2008. - Vol.9, N 6. - P. 520-531.

254. Mancinelli L., Cronin M., Sadée W. Pharmacogenomics: the promise of personalized medicine // AAPS PharmSci. 2000. Vol. 2, N. 1. - Article 4.

255. Martín-Carbonero L. Incidence of liver injury after beginning antiretroviral therapy with efavirenz or nevirapine / Martín-Carbonero L., Núñez M., González-Lahoz J., Soriano V. // HIV Clin. Trials. 2003. - Vol. 4, N. 2. - P. 115-120.

256. Mattano S. S., Land S., King C., Weber W. W. In: Carcinogenic and Mutagenic Responses to Aromatic Amines and Nitroarenes / Ed. By King C., Schuetzle D., Romano L. N. - Y.: Elserwier. -1988. - P. 155-159.

257. Mattick J.S. The human genome and the future of medicine // Med. J. Aust. 2003. - Vol. 179, N. 4. - P. 212-216.

258. McCabe L. L., McCabe E. R. Genetic screening: carriers and affected individuals // Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. 2004. - Vol. 5. - P. 57-69.

259. McCarver D.G., Hines R.N. The ontogeny of human drug-metabolizing enzymes: phase II conjugation enzymes and regulatory mechanisms // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2002. - Vol. 300, N. 2. - P. 361-366.

260. McConnell R. Asthma in exercising children exposed to ozone: a cohort study / McConnell R., Berhane K., Gilliland F., London S. J., Islam T., Gauderman W. J., Avol E., Margolis H. G„ Peters J.M. // Lancet. 2002. -Vol. 359, N 9304. - P. 386-391.

261. McFayden M.C., Melvin W.T., Murray G.I. Regional distribution of individual forms of cytochrome P450 mRNA in normal adult human brain // Biochem. Pharmacol. 1998. - Vol. 55, N. 6. - P. 825-830.

262. McWilliams J. E. Glutathione S-transferase Ml (GSTM1) deficiency and lung cancer risk / McWilliams J.E., Sanderson B.J., Harris E.L., Richter Boe K.E., Henner W.D. // Cancer Epidemiol. Biomark. Prev. 1995. Vol. 4. - P. 589-594.

263. Mendez A. P. Global surveillance for Antituberculosis-Drug Resistance, 1994-1997. / Ariel Pablos Mendez, Mario Raviglione, Adalbert Laszlo // The New England Journal of Medicine. 1998. - Vol. - 338, N 23. - P. 1641-1649.

264. Miescher S.M., Vogel M. Molecular aspects of allergy // Mol. Aspects Med. 2002. - Vol. 23, N. 6. - P. 413-462.

265. Mitchell K. R., Warshawsky D. Xenobiotic inducible regions of the human arylamine N-acetyltransferase 1 and 2 genes // Toxicol Lett. 2003. - Vol. 139, N. l.-P. 11-23.

266. Miyagi S J. Developmental changes in hepatic antioxidant capacity are age-and sex-dependent / Miyagi S.J., Brown I.W., Chock J.M., Collier A.C. // J. Pharmacol. Sci. 2009. - Vol. 111, N. 4. - P. 440- 445.

267. Mooney L.A. Contribution of genetic and nutritional factors to DNA damage in heavy smokers / Mooney L.A., Bell D.A., Santella R.M., Van Bennekum A.M., Ottman R., Paik M., Blaner W.S., Lucier G.W., Covey L., Young T.L.,

268. Cooper T.B., Glassman A.H., Perera F.P. // Carcinogenesis. 1997. - Vol. 18. -P. 503-509.

269. Moore J.H. Analysis of gene-gene interactions // Curr. Protoc. Hum. Genet. 2004. - Chapter 1, Unit 1.14.

270. Morgenstern R., Depierre J.W., Jornvall H. Microsomal glutathione S-transferase. Primary structure // J. Biol. Chem: 1985. - Vol. 260. - P. 1397613983.

271. Morike K. Identification of N2 as a metabolite of acetylhydrazine in the rat / Morike K., Koch M., Fritz P., Urban W., Eichelbaum M. // Arch. Toxicol. -1996. Vol. 70, N. 5. - P. 300-305.

272. Motsinger A.A. Risk factor interactions and genetic effects associated with post-operative atrial fibrillation / Motsinger A.A., Donahue B.S., Brown N.J., Roden D.M., Ritchie M.D. // Pac. Symp. Biocomput. 2006. - P. 584-595.

273. Mulder G. J. Metabolic activation of industrial chemicals and implications for toxicity // In: Toxicology of industrial compounds /Ed. by Thomas H., Hess R. and Waechter F. Taylor and Fransis. 1995. - P. 37-44.

274. Nacak M. Association between the N-acetylation genetic polymorphism and bronchial asthma /Nacak M., Aynacioglu A.S., Filiz A., Cascorbi I., Erdal M.E., Yilmaz N., Ekinci E., Roots I. // Br. J. Clin. Pharmacol. 2002. - Vol. 54, N. 6.-P. 671-674.

275. Najim R. A., Sharquie K. E., Al-Janabi M.H. Acetylator phenotype in Beh?et's disease // Adv. Exp. Med. Biol. 2003. - Vol. 528. - P. 131-138.

276. Navarro V. J., Senior J. R. Drug-Related Hepatotoxicity. 2006. - N. Engl. J. Med. - Vol. 354. - N. 7. - P. 731-739.

277. Nebert D. W., Jorge-Nebert L., Vesell E. S. Pharmacogenomics and "individualized drug therapy": high expectations and disappointing achievements// Am. J. Pharmacogenomics. 2003. - Vol. 3, N. 6. - P. 361-370.

278. Nebert D. W., Petersen D. D., Fornace A. J. Cellular response to oxidative stress // Biological Oxidation System. 1990. - Vol. 1. - P. 69-83.

279. Nebert D. W., Zhang G., Vesell E. S. From Human Genetics and Genomics to Pharmacogenetics and Pharmacogenomics: Past Lessons, Future Directions // Drug Metab. Rev. 2008. - Vol. 40, N. 2. - P. 187-224.

280. Neis M.M. Expression and induction of cytochrome p450 isoenzymes in human skin equivalents / Neis M.M., Wendel A., Wiederholt T., Marquardt Y., Joussen S., Baron J.M., Merk H.F. // Skin Pharmacol. Physiol. 2010. - Vol. 23, N. l.-P. 29- 39.

281. Nevo E. Evolution of genome-phenome diversity under environmental stress // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - V. 98, N 11. - P. 6233- 6240.

282. Nicolai T. Pollution, environmental factors and childhood respiratory allergic disease// Toxicology. 2002. - Vol. 181-182. - P. 317-321.

283. Nystad W., Magnus P., Gulsvik A. Increasing risk of asthma without other atopic diseases in school children: A. repeated cross-sectional study after 13 years // Eur. J. Epidemiol. 1998. - Vol. 14. - P. 247 - 252.

284. O'Neil W. M. N-acetylation among HIV-positive patients and patients with AIDS: when is fast, fast and slow, slow? / O'Neil W.M., Gilfix B.M., DiGirolamo A., Tsoukas C.M., Wainer I.W, // Clin. Pharmacol. Ther. 1997. -Vol. 62, N. 3.-P. 261-271.

285. Ozawa S. Genetic polymorphism in xenobiotic metabolizing enzymes as a determinant of susceptibility to environmental mutagens and carcinogens in humans // Yakugaku Zassi. 1997. - Vol. 117, N. 10-11. - P. 895 - 909.

286. Pandya RJ. Diesel exhaust and asthma: hypotheses and molecular mechanisms of action. / Pandya R. J., Solomon G., Kinner A., Balmes J. R.// Environ. Health Perspect. 2002. - Vol. 110, Suppl 1. - P. 103-112.

287. Parkinson A. The Basic Science of Poisons / in Casarett and Doull's Toxicology. (Klaassen C.D. Ed., sixth Edition) McGraw-Hill. Medical Publishing Division, New York. - 2001. - P. 133-224.

288. Pattaro C. Association between interleukin-1 receptor antagonist gene and asthma-related traits in a German adult population /Pattaro C., Heinrich J., Werner M., de Marco R., Wjst M. // Allergy. 2006. - Vol. 61, N 2. - P. 239244.

289. Pawlik A, Juzyszyn Z, Gawronska-Szklarz B. N-acetyltransferase 2 (NAT2) polymorphism in patients with atopic asthma // Arch. Med. Res. 2009. - Vol. 40, N. 4.-P. 264-267.

290. Pearce N, Douwes J. The global epidemiology of asthma in children // Int. J. Tuberc. Lung Dis. 2006. -Vol. 10, N. 2. - P. 125-132.

291. Pearce N. What does the odds ratio estimate in a case-control study? // Int. J. Epidemiol. 1993. - Vol. 22, N.6. - P. 1189-1192.

292. Peden D. B. Development of atopy and asthma: candidate environmental influences and important periods of exposure // Environ. Health Perspect.-2000. -Vol. 108, Suppl 3. -P. 475-482.

293. Pelkonen O., Nebert D.W. Metabolism of polycyclic aromatic hydrocarbons: etiologic role in carcinogenesis // Pharmacol. Rev. 1982. - Vol. 34. - P. 189222.

294. Peloquin C.A. Population pharmacokinetic modeling of isoniazid, rifampin, and pyrazinamide / Peloquin C.A., Jaresko G.S., Yong C.L., Keung A.C., Bulpitt A.E., Jelliffe R.W. // Antimicrob. Agents Chemotherapy. 1997. - Vol. 41,N 12.-P. 2670-2679.

295. Postma D.S. Guidelines and shared care for asthma and COPD // Neth J Med. 2003. - Vol. 61, N. 3. - P.63-64.

296. Rahman M., Wright J. T., Douglas J. G. The role of the cytochrome P450-dependent metabolites of arachidonic acid in blood pressure regulation and renal function: a review // Am. J. Hypertens. 1997. - Vol. 10, N 3. - P. 356365.

297. Raijmakers M.T., Steegers E.A., Peters W.H. Glutathione S-transferases and thiol concentrations in embryonic and early fetal tissues // Hum. Reprod. -2001. Vol. 16, N. 11. - P. 2445-2450.

298. Rajnoveanu R. M. Pulmonary tuberculosis in people with gastroduodenal diseases: a retrospective analysis of 100 cases. / R.M. Rajnoveanu, C.M. Pop, M.A. Man et al //. Europ. Resp. J. 2005. - Suppl. 40 - Vol.26. - P. 2692.

299. Reeves P.T., Minchin R.F., Ilett K.F. Induction of sulfamethazine acetylation by hydrocortisone in the rabbit // Drug Metab. Dispos. 1988. -Vol. 16, N. l.-P. 110-115.

300. Reeves P.T., Minchin R.F., Ilett K.F. Induction of sulfamethazine acetylation by hydrocortisone in the rabbit // Drug Metab Dispos. 1988. -Vol. 16, N. l.-P. 110-115.

301. Reeves R. T. Effect of intra-articular glucocorticoids on the disposition of sulphadimidine in chronic osteoarthritis patients / Reeves R.T, Hanranan P., Edelman J., Ilett K.F. // Br. J. Clin. Pharmacol. 1988. - Vol. 26. - P. 563-568.

302. Rennard S. I. Cigarette smoke in research // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -2004.-Vol. 5.-P. 479-480.

303. Reyes H., Reisz-Porszasz S., Hankinson O. Identification of the Ah receptor nuclear translocator protein (Arnt) as a component of the DNA binding form of the Ah receptor // Science. 1992. - Vol. 256, N. 5060. - P. 1193-1195.

304. Richards V. E. Hepatic gene expression and lipid homeostasis in C57BL/6 mice exposed to hydrazine or acetylhydrazine / Richards V.E., Chau B., White M.R., McQueen C.A. // Toxicol. Sci. 2004. - Vol. 82, N. 1. - P. 318-332.

305. Roden D.M., George A.L. The genetic basis of variability in drug responses // Nature Reviews Drug Discovery. 2002. - Vol. l.-P. 37-44.

306. Ronchetti R. The prevalence of atopy in asthmatic children correlates strictly with the prevalence of atopy among nonasthmatic children / Ronchetti R.,

307. Rennerova Z., Barreto M., Villa M.P. // Int. Arch. Allergy Immunol. 2007. -Vol. 142, N. l.-P. 79-85.

308. Ross V.L., Board P.G., Webb G.C. Chromosomal mapping of the human Mu class glutathione S-transferases to lpl3 // Genomics. 1993. - Vol. 18, N. 1. -P. 87-91.

309. Royce St, Wald P., Sheppard D., Balmes J. Occupational asthma in a pesticides manufacturing worker // Chest. 1993. - Vol.103, N 1. - P. 295-296.

310. Saadat M. Combination of CC16, GSTM1, and GSTT1 genetic polymorphisms is associated with asthma / Saadat M., Saadat I., Saboori Z., Emad A. // J. Allergy Clin. Immunol. 2004. - Vol. 113", N 5. - P. 996-998.

311. Sadrieh N., Davis C. D., Snyderwine E. G. N-acetyltransferase expression and metabolic activation of the food-derived heterocyclic amines in the human mammary gland // Cancer Res. 1996. - Vol. 56, N. 12. - P. 2683-2687.

312. Safe S. Polychlorinated biphenyls (PCBs) and polybrominated biphenyls (PBBs): biochemistry, toxicology, and mechanism of action // Crit Rev Toxicol. 1984. - Vol. 13, N. 4. - P. 319-395.

313. Sakai M., Muramatsu M., Nishi S. Suppression of glutathione transferase P expression by glucocorticoid // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. -Vol. 187, N. 2.-P. 976-983.

314. Sanderson J. P., Naisbitt D. J., Park B. K. Role of Bioactivation in Drug-Induced Hypersensitivity Reactions // The AAPS Journal 2006; 8 (1) Article 7 (http://www.aapsj.org). P. E55-E64.

315. Schafer T. Epidemiology of Atopic Eczema // Chapter 3 of Handbook of Atopic Eczema Second Edition / J. Ring, B. Przybilla, T. Ruzicka (Eds.). -Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg. 2006. - P. 21-30.

316. Schaid D.J., Rowland C. Use of« parents, sibs, and unrelated controls for detection of associations between genetic markers and disease // Am. J. Hum. Genet. 1998. Vol. 63, N 5. - P. 1492-14506.

317. Scheuch E. Influence of H2-receptor- and proton pump inhibitors on some functions of the oxydative and conjugative drug metabolism / Scheuch E., Walter R., Hadasova E., Amon II, Siegmund W. // Pharmazie. 1996. Vol. 51, N. 7. - P. 493-497.

318. Schnekenburger M., Peng L., Puga A. HDAC1 bound to the Cyplal promoter blocks histone acetylation. associated with Ah receptor-mediated trans-activation // Biochim. Biophys. Acta. 2007. - Vol. 1769, N. 9-10. - P. 569-578.

319. Schuetz J.D., Beach D.L., Guzelian P.S. Selective expression of cytochrome P450 CYP3A mRNAs in embryonic and adult human liver // Pharmacogenetics. 1994. - Vol. 4, N. 1. - P. 11- 0.

320. Sendo T. Metabolic hydrolysis of isoniazid by subcellular fractions of rat liver / Sendo T., Noda A., Noda H., Hsu K.Y., Yamamoto Y. // J. UOEH. -1984. Vol. 6, N. 3. - P. 249-255.

321. Sengler C. Interactions between genes and environmental factors in asthma and atopy: new developments / Sengler C., Lau S., Wan U., Nickel R. // Respir. Res. 2002. - Vol. 3, N 1. - P. 7.

322. Sharer J. E., Wrighton S. A. Identification of the human hepatic cytochromes P450 involved in the in vitro oxidation of antipyrine // Drug Metab. Dispos. — 1996. Vol. 24. No 4. - P. 487-494.

323. Sheehan D., Meade G., Foley V.M., Dowd C.A. Structure, function and evolution of glutathione transferases: implications for classification of non-mammalian members of an ancient enzyme superfamily. // Biochem. J. 2001. -V. 360.-P. 1-16.

324. Shelby M. D., Zeiger E. Activity of human carcinogens in the Salmonella and rodent bone-marrow cytogenetics tests // Mutation. Res. 1990. - Vol. 34. -P. 257-261.

325. Sipes I.G., Gandolfi A. J. Biotransformation of toxicants // Casarett and Doull's toxicology / Eds. C.B. Klaassen, M.O. Admur, J. Doul. N.-Y.: Macmillian Publishing Company. - 1986. - P. 99-173.

326. Smith D. A., Jones B. C. Speculations on the substrate-structure activity relationship (SSAR) of cytochrome P450 enzymes // Biochem. Pharmacol. -1992. Vol. 44. - P. 2089-2098.

327. Smolen T. N., Brewer J. A., Weber W. W. Testosterone modulation of N-acetylation in mouse kidney // J. Pharmacol. Exper. Ther. 1993. - Vol. 264. -N. 2.-P. 854-858.

328. Sobti R. C. CYP1A1 and CYP2D6 polymorphism and risk of lung cancer in a North Indian population / Sobti R. C., Sharma S., Joshi A., Jindal S. K., Janmeja AM Biomarkers. 2003. - Vol. 8, N. 5. - P. 415-428.

329. Somoskovi A., Parsons L.M., Salfinger M. The molecular basis of resistance to isoniazid, rifampin, and pyrazinamide in Mycobacterium tuberculosis // Respir Res. 2001. Vol. 2, N. 3. - P. 164- 68.

330. Song N. CYP 1A1 polymorphism and risk of lung cancer in relation to tobacco smoking: a case-control study in China / Song N., Tan W., Xing D., Lin D. // Carcinogenesis. 2001. - Vol. 22, No 1. - P. 11-16.

331. Sonnier M., Cresteil T. Delayed ontogenesis of CYP1A2 in the human liver // Eur J Biochem. 1998. - Vol. 251, N. 3. - P. 893-898.

332. Stark K., Guengerich F.P. Characterization of orphan human cytochromes P450 // Drug Metab. Rev. 2007. - Vol. 39, N. 2-3. - P. 627-637.

333. Steinke J.M., Borish L. Th2 cytokines and asthma. Interleukin-4: its role in pathogenesis of asthma, and targeting it for asthma treatment with interleukin-4 receptor antagonists // Respir. Res. 2001. - Vol. 2. - P. 66-70

334. Strand V. Repeated exposure to an ambient level of N02 enhances asthmatic response to a nonsymptomatic allergen dose / Strand V., Svartengren M., Rak S., Barck C., Bylin G. // Eur. Respir. J. 1998. - Vol.12, N 1. - P. 6-12.

335. Stucker I. Relation between inducibility of CYP1A1, GSTM1 and lung cancer in a French population / Stucker I., Jacquet M., de Waziers I., Cenee S., Beaune P., Kremers P., Hemon D. // Pharmacogenetics. 2000. - Vol. 10, N 7. .-P. 617-627.

336. Sturgill M.G., Lambert G.H. Xenobiotic-induced hepatotoxicity: mechanisms of liver injury and methods of monitoring hepatic function // Clin. Chem. -1997. Vol. 43, N. 8, Pt 2. - P. 1512-1526.

337. Svensson C.K. Biotransformation of drugs in human skin // Drug Metab Dispos. 2009. - Vol. 37, N. 2. - P. 247-253.

338. Svensson J.O., Muchtar A., Ericsson O. Ion-pair high-performance liquid chromatographic determination of isoniazid and acetylisoniazid in plasma andurine. Application for acetylator phenotyping // J Chromatogr. 1985. - Vol. 341, N. l.-P. 193-197.

339. Ta'ieb A., Wallach D., Tilles G. The History of Atopic Eczema/Dermatitis // J.Ring, B. Prizybilla, T/ Ruzicka (Eds) Handbook of Atopic Eczema / Second Editions. 2006. - P. 10-20.

340. Tamer L. Relationship between N-acetyl transferase-2 gene polymorphism and risk of bronchial asthma / Tamer L., Calikoglu M., Aras Ate§ N., Yildirim H., Karaka? S., Atik U. //Tuberk Toraks. 2006. - Vol. 54, N 2. - P. 137-143.

341. Tamer L., Calikoglu M., Ates N. A. et al. Glutathione S-transferase gene polymorphisms (GSTT1, GSTM1, GSTP1) as increased risk factors for asthma // Respirology. 2004. - Vol. 9. - P. 493- 498.

342. Tan K.L. Molecular cloning of a cDNA and chromosomal localization of a human theta-class glutathione S-transferase gene (GSTT2) to chromosome 22 / Tan K.L., Webb G.C., Baker R.T., Board P.G. // Genomics. 1995. - Vol. 25, N. 2.-P. 381-387.

343. The global burden of disease: 2004 Update/ WHO Library Cataloguing-in-Publication Data. ISBN 978 92 4 156371 0 (NLM classification: W 74). -World Health Organization. - 2008

344. Teleman M. D. Hepatotoxicity of tuberculosis chemotherapy under general programme conditions in Singapore / Teleman M.D., Chee C.B., Earnest A., Wang Y.T. // Int J Tuberc Lung Dis. 2002. - Vol. 6, N. 8. - P. 699-705.

345. Terwilliger J.D., Ott J. A novel polylocus method for linkage analysis using the lod-score or affected sib-pair method // Genet Epidemiol. 1993. -Vol. 10(6). p. 477-482.

346. Thoren S., Jakobsson P. J. Coordinate up- and down-regulation of glutathione-dependent prostaglandin E synthase and cyclooxygenase-2 in A549 cells. Inhibition by NS-398 and leukotriene C4 // Biochem. 2000. - Vol. 257, N21.-P. 6428-6434.

347. Tong Z., Board P .G., Anders M. W. Glutathione transferase zeta catalyzed biotransformation of dichloroacetic acid and other alpha-haloacids // Chem. Res. Toxicol. - 1998. - Vol. 11, N 11. - P. 1332-1338.

348. Tsuchida S., Sato K. Glutathione transferases and cancer. // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 1992. - V. 27. - P. 337-384.

349. Van Bladeren P.J., Van Ommen B. Metabolism of reactive chemicals // In: Toxicology of industrial compounds / Ed. by Thomas H., Hess R. and Waechter F. London: Taylor and Fransis. 1995. - P. 61-72.

350. Van Pelt F.N.A.M., Carey M.A., Carey J.B. Acute and Chronic Liver Diseases Induced by Drugs or Xenobiotics / in Liver Immunology: Principlesand Practice (Gershwin, M.E.; Vierling, J.M., and Mann, M.P. Eds). 2007. -P. 375-388.

351. Vesell E. S., Penno M. B. A new polymorphism of hepatic drug oxidation in humans: family studies of antipyrine matabolites // Federation Proc. 1984. -Vol. 43.-P. 2342- 347.

352. Wahn U. Der allergischen March // Allergologic. 2002. -Vol. 2. P. 60-73.

353. Wang S.S., Samet J.S. Tobacco smoking and cancer: The promise of molecular epidemiology // Salud Publica Mex. 1997. - Vol. 39, No.4. - P. 331-345.

354. Wang W., Ballatori N. Endogenous glutathione conjugates: occurrence and biological functions // Pharmacol. Rev. 1998. - Vol. 50, N. - 3. - P. 335-356.

355. Watkins P. B. Role of cytochromes P450 in drug metabolism and hepatotoxicity // Seminars in liver disease. 1990. - Vol. 10, No. 4. - P. 235250.

356. Wedi B., Kapp A. Differential Diagnosis of Atopic Eczema / Chapter 10 of Handbook of Atopic Eczema. Second Edition / J. Ring, B. Przybilla, T. Ruzicka (Eds.). Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 2006. - P. 100-107.

357. Weinshilboum R. Inheritance and drug response // N Engl J Med. 2003. -Vol. 348, N. 6.-P. 529-537.

358. Weiss K.M., Terwilliger J.D. How many diseases does it take to map a gene with SNPs? // Nat Genet. 2000. - Vol. 26, N. 2. - P. 151-157.

359. Werely C. J., Donald P. R. Van Helden P. Nat2 polymorphisms and their influence on the pharmacology and toxicity of isoniazid in TB patients // Personalized Medicine. 2007. - Vol. 4, N. 2. - P. 123-131.

360. Westphal G. A. N-acetyltransferase 1 and 2 polymorphisms in para-substituted arylamine-induced contact allergy/ Westphal G.A., Reich K., Schulz T.G., Neumann C., Hallier E., Schnuch A. // Br. J. Dermatol. 2000. - Vol. 142, N. 6.-P. 1121-1127.

361. Winter H.R., Unadkat J.D. Identification of cytochrome P450 and arylamine N-acetyltransferase isoforms involved in sulfadiazine metabolism // Drug Metab Dispos. 2005. - Vol. 33, N. 7. - P. 969-976.

362. Whitlock J.P. Jr. Induction of cytochrome P4501Al. // Annu Rev Pharmacol Toxicol.- 1999.- Vol.39. P. 103-125.

363. Whitlock J.P. Jr, Gelboin H.V. Aryl hydrocarbon (benzo(a)pyrene) hydroxylase induction in rat liver cells in culture // J Biol Chem.- 1974. Vol.249, N. 8. P.2616-2623.

364. Wolkenstein P. Cost evaluation of the medical management of neurofibromatosis 1: a prospective study on 201 patients / Wolkenstein P, Durand-Zaleski I, Moreno JC, Zeller J, Hemery F, Revuz J. // Br. J. Dermatol.2000. Vol. 142, N. 6. - P. 1166-1170.

365. Wooten J.B., Chouchane S., McGrath T.E. Tobacco Smoke Constituents Affecting Oxidative Stress // Cigarette Smoke and Oxidative Stress (Ed. Halliwell B. B., Poulsen H. E.). Springer-Verlag Berlin Heidelberg. 2006. -P. 6-48.

366. Wu H. C. Inhibition by vitamin C of DNA adduct formation and arylamine N-acetyltransferase activity in human bladder tumor cells / Wu H.C., Lu H.F., Hung C.F., Chung J.G. // Urol Res. 2000 - Vol. 28, N. 4. - P. 235-240.

367. Wuthrich B. Epidemiology of allergies in Switzerland // Ther. Umsch.2001. Vol. 58, N 5. - P.253-258.

368. Yamagishi F. Prevention of development of pulmonary tuberculosis in compromised host // Kekkaku, 2001. - Vol. 76. N 2. - P.77-81.

369. Yanbaeva D. G. Systemic Effects of Smoking / Yanbaeva D.G., Dentener M. A., Creutzberg E. C., Wesseling G., Wouters E. F. M. // Chest. 2007. -Vol. 131.-P. 1557-1566.

370. Yang H.Y., Namkung M.J., Juchau M.R. Expression of functional cytochrome P4501A1 in human embryonic hepatic tissues during organogenesis // Biochem Pharmacol. 1995. - Vol. 49, N. 5. - P. 717-726.

371. Yssel H., Lecart S., Pene J. Regulatory T cells and allergic asthma // Microbes. Infect. 2001. - Vol. 11. - P.899-904.

372. Zhong S. Relationship between the GSTM1 genetic polymorphism and susceptibility to bladder, breast and colon cancer / Zhong S., Wyllie A. H., Barnes D., Wolf C. R., Spurr N. K. // Carcinogenesis. 1993. - Vol. 14, N. 9. -P. 1821-1824.

373. Zhou H. H. Induction of polymorphic 4'-hydroxylation of S-mephenytoin by rifampicin / Zhou H.H., Anthony L.B., Wood A.J., Wilkinson G.R.// Br J Clin Pharmacol. 1990. - Vol. 30, N. 3. - P. 471-475.

374. Zielinska E. Arylamine N-acetyltransferase (NAT2) gene mutation in children with allergic diseases /Zielinska E., Nieewiarowski W., Bodarski G., Stanczyk A., Bolanovski W., Rebowski G. // Clin. Pharmacol.Ther. 1997. -Vol. 62, N 6. - P. 635-642.

375. Zielinska E., Nieewiarowski W., Bodarski G. The arylamine N-acetyltransferase (NAT2) polymorphism and the risk of adverse reactions to co-trimoxazole in children // Eur. J. Clin. Pharmacol. 1998. - Vol. 54. - P. 779785.

376. Zimniak P. Naturally occurring human glutathione S-transferase GSTP1-1 isoforms with isoleucine and valine in position 104 differ in enzymic properties / Zimniak P., Nanduri B., Pikula S., Bandorowicz-Pikula J., Singhal S.S.,

377. Srivastava S.K., Awasthi S., Awasthi Y.C. // Eur J Biochem. 1994. - Vol. 224, N. 3.-P. 893-899.

Информация о работе

Макарова, Светлана Ивановна
доктора биологических наук
Новосибирск, 2011
ВАК 03.02.07

Диссертация

Роль полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в предрасположенности к атопическим заболеваниям и гепатотоксичности противотуберкулезной терапии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы